RU2012119801A

RU2012119801A - Способ получения (r)-1-арил-2-тетразолилэтилового эфира карбаминовой кислоты

Info

Publication number: RU2012119801A
Application number: RU2012119801/04A
Authority: RU
Inventors: Санг Чул ЛИМ; Моо Ионг УХМ; Дае Вон ЛИ; Хои Хо КИМ; Донг Хо Ли; Хиун Сеок ЛИ
Original assignee: ЭсКей БАЙОФАРМАСЬЮТИКАЛЗ КО., ЛТД.
Priority date: 2009-10-15
Filing date: 2010-10-15
Publication date: 2013-11-20
Also published as: AU2010307466B2; MY162997A; PL2488505T3; HK1172625A1; CL2012000959A1; MX2012004055A; KR20120087124A; US20150252398A1; CA2776743C; US20110111467A1; CN102574821A; ZA201202629B; HUE025816T2; RU2539983C2; EP2488505A2; CN102574821B; JP2013507911A; BR112012008858B1; WO2011046380A2; ES2536488T3

Abstract

1. Способ получения арил-2-тетразолилэтилового эфира карбаминовой кислоты, представленного химической формулой 1, включающийэнантиоселективное ферментативное восстановление арилкетона, представленного химической формулой 2, до спиртового производного (R)-конфигурации, представленного химической формулой 3; икарбаминирование указанного спиртаХимическая формула 1Химическая формула 2Химическая формула 3гдеRи Rнезависимо выбраны из группы, включающей водород, галоген, перфторалкил, алкил, содержащий от 1 до 8 атомов углерода, тиоалкоксигруппу, содержащую от 1 до 8 атомов углерода, и алкоксигруппу, содержащую от 1 до 8 атомов углерода;один из Аи Апредставляет собой СН, а другой представляет собой N.2. Способ по п.1, где указанное энантиоселективное ферментативное восстановление проводится в реакционной смеси, включающей указанное соединение формулы 1, оксидоредуктазу, имеющую по меньшей мере 60% гомологию с аминокислотными последовательностями SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 или SEQ ID NO: 4, NADH или NADPH в качестве кофактора, который окисляется в процессе восстановления и постоянно регенерируется, косубстрат, включающий вторичный спирт, представленный формулой RRCHOH, где Rпредставляет собой углерод и х представляет собой целое число от 1 до 10, Rпредставляет собой водород и у представляет собой целое число, равное удвоенному значению х плюс два, и подходящий буфер.3. Способ по п.2, где оксидоредуктаза инкодирована, соответственно, последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7 или SEQ ID NO: 8, или последовательностью нуклеиновой кислоты, которая гибридизуется до SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7 или SEQ ID NO: 8.4. Способ по п.3, где оксидореду

Claims

1. Способ получения арил-2-тетразолилэтилового эфира карбаминовой кислоты, представленного химической формулой 1, включающий

энантиоселективное ферментативное восстановление арилкетона, представленного химической формулой 2, до спиртового производного (R)-конфигурации, представленного химической формулой 3; и

карбаминирование указанного спирта

Химическая формула 1

Химическая формула 2

Химическая формула 3

где

R₁ и R₂ независимо выбраны из группы, включающей водород, галоген, перфторалкил, алкил, содержащий от 1 до 8 атомов углерода, тиоалкоксигруппу, содержащую от 1 до 8 атомов углерода, и алкоксигруппу, содержащую от 1 до 8 атомов углерода;

один из А₁ и А₂ представляет собой СН, а другой представляет собой N.

2. Способ по п.1, где указанное энантиоселективное ферментативное восстановление проводится в реакционной смеси, включающей указанное соединение формулы 1, оксидоредуктазу, имеющую по меньшей мере 60% гомологию с аминокислотными последовательностями SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 или SEQ ID NO: 4, NADH или NADPH в качестве кофактора, который окисляется в процессе восстановления и постоянно регенерируется, косубстрат, включающий вторичный спирт, представленный формулой R_xR_yCHOH, где R_x представляет собой углерод и х представляет собой целое число от 1 до 10, R_y представляет собой водород и у представляет собой целое число, равное удвоенному значению х плюс два, и подходящий буфер.

3. Способ по п.2, где оксидоредуктаза инкодирована, соответственно, последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7 или SEQ ID NO: 8, или последовательностью нуклеиновой кислоты, которая гибридизуется до SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7 или SEQ ID NO: 8.

4. Способ по п.3, где оксидоредуктаза может быть выделена из Candida magnolia, Candida vaccinii или Oryctolagus cuniculus.

5. Способ по п.2, где оксидоредуктаза присутствует в реакционной смеси в полностью очищенном состоянии, частично очищенном состоянии или в клетках микроорганизмов, которые ее экспрессируют.

6. Способ по п.5, где оксидоредуктаза присутствует в клетках микроорганизмов, которые ее экспрессируют, и где указанные клетки представляют собой клетки в нативном состоянии, клетки с нарушенной проницаемостью мембраны или клетки в лизированном состоянии.

7. Способ по п.6, где клетки микроорганизмов представляют собой трансформированные клетки Escherichia coli.

8. Способ по п.2, где регенерация оксисленного кофактора является результатом окисления указанного косубстрата.

9. Способ по п.2, где указанный косубстрат представляет собой вторичный спирт, выбранный из группы, включающей 2-пропанол, 2-бутанол, 2-пентанол, 4-метил-2-пентанол, 2-гептанол и 2-октанол.

10. Способ по п.2, где указанная оксидоредуктаза оказывает влияние как на восстановление арилкетона формулы 2, так и на окисление косубстрата.

11. Способ по п.1, где стадия карбаминирования проводится посредством взаимодействия спиртового производного (R)-конфигурации химической формулы 3 с неорганическим цианатом и органической кислотой.

12. Способ по п.1, где стадия карбаминирования проводится посредством гидролиза продукта, полученного в результате взаимодействия спиртового производного (R)-конфигурации химической формулы 3 с изоцианатным соединением, выбранным из группы, включающей хлорсульфонилизоцианат, трихлорацетилизоцианат и триметилсилилизоцианат.

13. Способ по п.1, где стадия карбамирования проводится посредством введения аммиака в продукт, полученный в результате взаимодействия спиртового производного (R)-конфигурации химической формулы 3 с карбонильным соединением, включая 1,1-карбодиимидазол, карбамоилгалогенид, дисукцинилкарбонат, фосген, трифосген или хлорформиат.

14. Способ по п.1, дополнительно включающий стадию кристаллизации после по меньшей мере одной стадии энантиоселективного ферментативного восстановления и стадии карбамирования.

15. Способ по п.14, где стадия кристаллизации включает

добавление к продукту реакции солюбилизирующего агента, выбранного из ацетона, ацетонитрила, тетрагидрофурана, этилацетата, дихлорметана, хлороформа, 1,4-диоксана, низшего спирта, содержащего от 1 до 4 атомов углерода, и их смеси;

добавление осаждающего вещества, выбранного из группы, включающей воду, низший спирт, содержащий от 1 до 4 атомов углерода, диэтиловый эфир, пентан, гексан, циклогексан, гептан и их смесь.

16. Способ по п.1, дополнительно включающий стадию получения арилкетона химической формулы 2 взаимодействием согласно реакции замещения арилкетона, представленного ниже химической формулой 4, с тетразолом, представленным химической формулой 5:

Химическая формула 4

Химическая формула 5

где R₁ и R₂ принимают значения, определенные в пункте 1; и

Х представляет собой удаляемую группу, выбранную из галогенида и сульфоната.

17. Способ по п.16, дополнительно включающий стадию кристаллизации, которая включает

добавление солюбилизирующего агента, выбранного из ацетона, ацетонитрила, тетрагидрофурана, этилацетата, дихлорметана, хлороформа, 1,4-диоксана, низшего спирта, содержащего от 1 до 4 атомов углерода, и их смеси, к продукту, полученному реакцией замещения; и

добавление осаждающего вещества, выбранного из воды, низшего спирта, содержащего от 1 до 4 атомов углерода, диэтилового эфира, пентана, гексана, циклогексана, гептанов и их смеси.

18. Способ получения спиртового производного, представленного химической формулой 3, энантиоселективным ферментативным восстановлением арилкетона, представленного химической формулой 2:

Химическая формула 2

Химическая формула 3

где

R₁ и R₂ независимо выбраны из группы, включающей водород, галоген, перфторалкил, алкил, содержащий от 1 до 8 атомов углерода, тиоалкоксигруппу, содержащую от 1 до 8 атомов углерода, и алкоксигруппу, включающую от 1 до 8 атомов углерода;

один из А₁ и А₂ представляет собой СН, а другой представляет собой N; и

указанное восстановление проводится в реакционной смеси, содержащей указанное соединение химической формулы 2, оксидоредуктазу, имеющую по меньшей мере 60% гомологию с аминокислотными последовательностями SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 или SEQ ID NO: 4, NADH или NADPH в качестве кофактора, который окисляется в процессе восстановления и постоянно регенерируется, косубстрат, содержащий вторичный спирт, представленный формулой R_xR_yCHOH, где R_x представляет собой углерод и х представляет собой целое число от 1 до 10, R_y представляет собой водород и у представляет собой целое число, равное удвоенному значению х плюс два, и подходящий буфер.

19. Способ по п.18, где оксидоредуктаза кодируется, соответственно, последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7 или SEQ ID NO: 8 или последовательности нуклеиновой кислоты, которая гибридизуется до SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7 или SEQ ID NO: 8, соответственно.

20. Способ по п.18, где оксидоредуктаза может быть выделена из Candida magnolia, Candida vaccinii или Oryctolagus cuniculus.