JP2023115297A - 細胞培養容器内の液体培地を安定化させる方法 - Google Patents

Abstract

【課題】３Ｄスフェロイド培養容器内の液体の動きを安定化させる。【解決手段】細胞培養容器は、容器本体、支持支柱、および安定化装置を備える。この容器本体は、底壁と上壁との間に囲まれた細胞培養チャンバを画成する。この支持支柱は、細胞培養チャンバ内にあり、上壁と底壁との間に延在する。この安定化装置は、細胞培養チャンバの幅と長さを覆い、液体培養培地が細胞培養チャンバ内に収容されるときに安定化装置が支持支柱に沿って移動できるように支持支柱にスライド式に係合するような大きさの支柱係合構造を有する。この支持支柱は、液体培養培地の充填操作中に細胞培養チャンバ内の液面の上昇により、安定化装置が上昇するにつれて、支持支柱の長さに沿って安定化装置を誘導する。【選択図】図２

Description

本明細書は、広く、細胞を増殖させるのに使用される細胞培養容器に関し、より詳しくは、細胞培養容器内の液体の動きを制限する安定化装置を備えた細胞培養容器と細胞培養容器内の液体培地を安定化させる方法に関する。

一般に、三次元（３Ｄ）細胞培養は、二次元（２Ｄ）細胞培養よりも、自然組織および臓器の環境をシミュレーションするのによりうまく適することができる。２Ｄ細胞培養において、細胞は、典型的に、剛性であるプラスチック材料から作られた、平らな皿の平面上で増殖する。したがって、細胞はプラスチック材料の平面に付着し、その平らな皿に沿って均一に広がるので、これにより、中で増殖させるべき細胞にとって不自然な環境が作られる。これにより、その中で培養される細胞が、タンパク質への不自然な付着物を形成し得る。

それにひきかえ、３Ｄ細胞培養で増殖された細胞は、三次元環境内で他の堆積細胞に付着することができ、それによって、スフェロイドを形成し、細胞間でより自然な相互作用を生じる。細胞のこの自然な配置は、自然組織のものに似た、柔軟な構成を与える。精度を増加させるように疾患に対する治療法を開発するための実験的研究を行う場合、組織微小環境の精確な適例を提供することが望ましい。細胞は人体内で２Ｄで増殖しないので、開発された薬品が最終的に適用される環境によく似ているので、３Ｄ培養においてこれらの治療法を開発することが望ましい。

３Ｄ細胞培養の使用に対する懸念は、その中に形成されたスフェロイドが、容器を輸送するときに損傷を受ける感受性である。容器内の様々な体積の開放区域および液体の存在のために、容器を輸送すると、一般に、その中に収容された液体が意図せずに動き、これにより容器内に乱流が生じ得る。３Ｄ細胞培養における細胞は、２Ｄ細胞培養で増殖した細胞とは異なり、容器のどの表面にも付着していないので、この乱流は、それらを中で培養しているそれぞれのマイクロキャビティから細胞を出すように影響を及ぼし、それによって、球形度が損なわれ、スフェロイドの大きさが不均一になるかもしれない。

したがって、３Ｄスフェロイド培養容器内の液体の動きを安定化させる必要がある。

１つの実施の形態によれば、細胞培養容器は、底壁と上壁との間に囲まれた細胞培養チャンバを画成する容器本体；細胞培養チャンバ内にあり、上壁と底壁との間に延在する支持支柱；および細胞培養チャンバの幅と長さを覆う安定化装置であって、液体培養培地が細胞培養チャンバ内に収容されるときに安定化装置が支持支柱に沿って移動できるように支持支柱にスライド式に係合するような大きさの支柱係合構造を有する安定化装置を備える。この支持支柱は、液体培養培地の充填操作中に細胞培養チャンバ内の液面の上昇により、安定化装置が上昇するにつれて、支持支柱の長さに沿って安定化装置を誘導する。

別の実施の形態によれば、細胞培養容器は、底壁、上壁、および一対の側壁内に囲まれた細胞培養チャンバを画成する容器本体を備える。その底壁は細胞培養表面を構成し、容器本体は、その培養表面に沿って培地が堆積されるように培地を収容するように作られている。この細胞培養容器は、上壁と底壁との間に延在する細胞培養チャンバ内に位置付けられた支持支柱；およびその細胞培養チャンバ内に配置された一対の外側翼と中央翼を含む安定化装置をさらに備える。この中央翼は、一対の外側翼間に配置されており、その一対の外側翼は、一対の側壁に枢動可能に結合されており、中央翼は、支持支柱にスライド式に係合するような大きさの支柱係合構造を含む。この支持支柱は、中央翼が持ち上げられたときに支持支柱の高さに沿って中央翼を誘導する。

別の実施の形態によれば、細胞培養容器内の液体培地を安定化させる方法は、細胞培養容器の容器本体内の細胞培養チャンバ内に安定化装置を位置付ける工程、および細胞培養チャンバに液体細胞培養培地が充填されるときに、容器本体の上壁と底壁との間で支持支柱に沿って安定化装置が動けるように安定化装置の支柱係合構造を支持支柱と係合させる工程を有してなる。

ここに記載された細胞培養容器の追加の特徴および利点は、以下の詳細な説明に述べられており、一部は、その説明から当業者に容易に明白となるか、または以下の詳細な説明、特許請求の範囲、並びに添付図面を含む、ここに記載された実施の形態を実施することによって、認識されるであろう。

先の一般的な説明および以下の詳細な説明の両方とも、様々な実施の形態を記載しており、請求項の主題の性質および特徴を理解するための概要または骨子を提供する意図があることを理解すべきである。添付図面は、その様々な実施の形態のさらなる理解を与えるために含まれ、本明細書に包含され、その一部を構成する。図面は、ここに記載された様々な実施の形態を示しており、説明と共に、請求項の主題の原理および作動を説明する働きをする。

ここに示され、記載された１つ以上の実施の形態による、安定化装置を備えた細胞培養容器であって、その中にマイクロキャビティ基板および支持支柱を備えた細胞培養容器の水平断面図 マイクロキャビティ基板と安定化装置との間に棚が位置付けられた図１の細胞培養容器の、図１の線２－２に沿ってとられた垂直断面図 液体培地が充填され、その液体培地の表面に沿って安定化装置が浮遊している図１の細胞培養容器の、図１の線３－３に沿ってとられた垂直断面図 ここに示され、記載された１つ以上の実施の形態による、中に形成された磁石を含む安定化装置を備えた細胞培養容器の水平断面図 ここに示され、記載された１つ以上の実施の形態による、安定化格子を備えた別の細胞培養容器であって、中にマイクロキャビティ基板および支持支柱を備え、その安定化格子がその上に一体成形された少なくとも１つの磁石を含む、細胞培養容器の水平断面図 マイクロキャビティ基板と安定化格子との間に位置付けられた棚を備えた図５の細胞培養容器の、図５の線６－６に沿ってとられた垂直断面図 外部磁石が容器の上に位置付けられ、それによって、安定化格子をその外部磁石に向かって平行移動させる、図５の細胞培養容器の、図５の線７－７に沿ってとられた垂直断面図 安定化格子が外部磁石に近接した上昇位置に保持されている間に液体培地が充填された細胞培養容器の、図５の線７－７に沿ってとられた垂直断面図 第２の外部磁石が容器の上に位置付けられ、それによって安定化格子をその第２の外部磁石から離れるように平行移動させる、液体培地が充填された細胞培養容器の、図５の線７－７に沿ってとられた垂直断面図 ここに示され、記載された１つ以上の実施の形態による、中に形成された磁石を有する安定化格子を備えた別の細胞培養容器であって、薄型本体およびその中の支持支柱を有する細胞培養容器の垂直断面図 外部磁石が容器の上に位置付けられ、それによって、安定化装置をその外部磁石に向かって平行移動させる、図８の細胞培養容器の垂直断面図 安定化装置が外部磁石に近接した上昇位置に保持されている間に液体培地が充填された細胞培養容器の垂直断面図 液体培地がマイクロキャビティ基板上に堆積され、外部磁石が取り除かれ、それによって、安定化装置がマイクロキャビティ基板に向かって戻り、液体培地の表面に沿って浮いている、細胞培養容器の垂直断面図 ここに示され、記載された１つ以上の実施の形態による、別の安定化装置であって、多孔質基板および中に形成された磁石を有し、細胞培養容器は、マイクロキャビティ基板上に堆積された液体培地およびその容器の下に位置付けられた外部磁石を有し、それによって、安定化装置を液体培地の下部であってマイクロキャビティ基板に寄せて低下させる、安定化装置の垂直断面図 ここに示され、記載された１つ以上の実施の形態による、安定化装置を備えた別の細胞培養容器であって、支持支柱および一対の旋回棒を備え、安定化装置はその旋回棒に枢動可能に結合されている、細胞培養容器の水平断面図 安定化装置が旋回棒の周りの低下位置に位置付けられた、図１１の細胞培養容器の、図１１の線１２－１２に沿ってとられた前面断面図 安定化装置が旋回棒の周りの上昇位置に位置付けられた、図１１の細胞培養容器の、図１１の線１２－１２に沿ってとられた前面断面図 安定化装置が旋回棒の周りの低下位置に位置付けられ、液体培地が下部に収容された、図１１の細胞培養容器の、図１１の線１３－１３に沿ってとられた後面断面図

ここで、その例が添付図面に示されている、様々な安定化装置が中に配置された細胞培養容器の様々な実施の形態を詳しく参照する。できるときはいつでも、図面に亘り、同じまたは同様の部分を称するために、同じ参照番号が使用される。ここに用いられているような方向を示す用語－例えば、上、下、右、左、前、後ろ、上部、底部、遠位、および近位－は、描かれた図面に関してのみ用いられ、絶対的な向きを暗示する意図はない。

範囲は、「約」１つの特定の値から、および／または「約」別の特定の値まで、としてここに表現することができる。そのような範囲が表現されている場合、別の実施の形態は、その１つの特定の値から、および／または他方の特定の値までを含む。同様に、値が、「約」という先行詞によって近似として表現されている場合、その特定値は別の実施の形態を形成すると理解されよう。範囲の各々の端点は、他方の端点に関してと、他方の端点に関係なくの両方で有意であることがさらに理解されよう。

特に明記のない限り、ここに述べられたどの方法も、その工程が特定の順序で行われることを必要とする、または任意の装置について、特定の向きが要求されると解釈されることは決して意図されていない。したがって、方法の請求項が、その工程が従うべき順序を実際に列挙していない場合、または装置の請求項が、個々の構成要素に関する順序または向きを実際に列挙していない場合、もしくは請求項または記載に、工程が特定の順序に限定されること、または装置の構成要素に対する特定の順序または向きが列挙されていない場合、どの点に関しても、順序または向きが暗示されることは決して意図されていない。このことは、工程の配列、操作の流れ、構成要素の順序、または構成要素の向き；文法構成または句読法に由来する明白な意味；および明細書に記載された実施の形態の数またはタイプに関する論理事項を含む、解釈に関するどの可能性のある非表現基準にも適用される。

ここに用いられているように、名詞は、内容が明白に他に示していない限り、複数の対象を含む。それゆえ、例えば、成分に対する言及は、内容が明白に他に示していない限り、そのような成分を２つ以上有する態様を含む。

ここで図１および図２を参照すると、細胞培養容器１００の１つの実施の形態が示されている。細胞培養容器１００は、容器本体１０２内に形成された細胞培養チャンバ１０４を画成する容器本体１０２を有する。詳しくは、細胞培養容器１００の容器本体１０２は、上壁１０６、底壁１０８、および上壁１０６と底壁１０８との間に延在する複数の側壁１１０を含む。容器本体１０２は、細胞培養チャンバ１０４中への流体アクセスを提供するように作られた側部入口ポート１１２をさらに備える。以下により詳しく記載されるように、細胞培養容器１００は、側部入口ポート１１２を通じて液体培地を細胞培養チャンバ１０４中に収容するように機能する。細胞培養容器１００は、細胞培養チャンバ１０４内に延在する複数の支持支柱１１４をさらに備える。支持支柱１１４は、支持支柱１１４が、それぞれ、上壁と底壁１０６、１０８に、互いに反対の端部でしっかりと固定されるように、上壁と底壁１０６、１０８の間に延在する。この例において、容器本体１０２は、側壁１１０に沿って延在する細胞培養チャンバ１０４内の３つの支持支柱１１４を備える。細胞培養容器１００の容器本体１０２は、追加のまたはそれより少ない支持支柱１１４を備えてもよいことを理解すべきである。それに加え、支持支柱１１４は、図示されたものに比べて、容器本体１０２に対して様々な位置および向きで延在してもよい。

図２に最もよく見られるように、細胞培養容器１００は、容器本体１０２の底壁１０８に沿って位置付けられた細胞培養表面１１６を備える。細胞培養表面１１６は、その中に少なくとも１つの細胞を収容するような大きさと形状の複数のマイクロキャビティを備えた基板である。したがって、細胞培養表面１１６は、細胞培養チャンバ１０４内で細胞の増殖と成長を促進させるように作られた細胞培養区域である。細胞培養容器１００は、棚１１８が側壁１１０に一体的に取り付けられるように細胞培養チャンバ１０４の内周囲に延在する棚１１８をさらに備える。棚１１８は、細胞培養表面１１６の上に位置付けられ、細胞培養表面１１６と細胞培養チャンバ１０４の残りの部分との間に上方空間を提供する。下記により詳しく記載されるように、棚１１８は、細胞培養チャンバ１０４中に延在し、それによって、細胞培養チャンバ１０４内の特徴構造が細胞培養表面１１６と接触するのを防ぐような大きさと形状である。棚１１８は、この例では細胞培養チャンバ１０４内に備えられているが、ある態様では、棚１１８は完全に省略されてもよいことを理解すべきである。あるいは、細胞培養容器１００は、追加の棚１１８および／または様々な形状または大きさの棚１１８を備えてもよいことを理解すべきである。

細胞培養容器１００は、細胞培養チャンバ１０４内に位置付けられた安定化装置１２０をさらに備える。安定化装置１２０は、基板１２２が、細胞培養チャンバ１０４の対応する幅と長さを覆う幅と長さを有するように、細胞培養チャンバ１０４内に収まるような大きさと形状の基板１２２を含む。言い換えると、安定化装置１２０は、細胞培養表面１１６（すなわち、細胞培養チャンバ１０４内の細胞培養区域）の少なくとも５０パーセントである設置面積を有するような大きさである。さらに、基板１２２は、基板１２２が、低下位置にあるときに、棚１１８と係合するように作られるような、棚１１８にしたがう大きさである。この例では、棚１１８は、基板１２２と細胞培養表面１１６との間で細胞培養チャンバ１０４内に障害物を提供することによって、基板１２２が細胞培養表面１１６と接触するのを防ぐように作られている。

この例において、基板１２２は、基板１２２が液体培養培地１０よりも低い密度を有するように作られるように、室温で約１．０ｇ／ｃｍ^３以下の密度を有する低密度高分子から形成されている。ある場合には、液体培養培地１０は水を含むことがある。基板１２２は、その中の複数の支持支柱１１４とスライド式に係合するような大きさと形状の、中を通って形成された複数の支柱係合構造１２４をさらに備える。したがって、基板１２２は、細胞培養容器１００内に備えられた支持支柱１１４の数にしたがう数の、スロットとして形成された支柱係合構造１２４を備える。この例において、基板１２２は、細胞培養チャンバ１０４内の細胞培養容器１００の支持支柱１１４の大きさ、形状、および固定位置に対応する、基板１２２に沿った、大きさ、形状、および位置の３つの支柱係合構造１２４を備える。基板１２２が、支柱係合構造１２４と支持支柱１１４との間の係合により容器本体１０２に固定されることにより、基板１２２は、細胞培養チャンバ１０４内で動きが制限される。詳しくは、基板１２２は、支持支柱１１４の長さに沿って細胞培養チャンバ１０４内で摺動可能に平行移動するように機能する。さらに、基板１２２は、基板１２２と細胞培養表面１１６との間に位置付けられた棚１１８の存在によって、細胞培養表面１１６と接触しないように制限されている。

使用に当たって、細胞培養チャンバ１０４が、細胞培養表面１１６の複数のマイクロキャビティ内に細胞を収容するように機能するように、複数の細胞が細胞培養容器１００内に堆積される。複数の細胞が細胞培養表面１１６のマイクロキャビティ基板に沿って収容されるので、細胞の成長は、細胞培養表面１１６を、液体培養培地充填操作中に様々な流体に暴露することによって促進される。詳しくは、液体培養培地１０は、容器本体１０２のキャップ１１１を開け、それによって、側部入口ポート１１２へのアクセスを容易にすることによって、細胞培養チャンバ１０４内に堆積される。図３から分かるように、液体培養培地１０は、側部入口ポート１１２を通じて細胞培養チャンバ１０４中に入れられ、それによって、液体培養培地１０が細胞培養表面１１６に向けて移される。液体培養培地１０が細胞培養チャンバ１０４に入るにつれて、基板１２２は、液体培養培地１０に対して低い基板１２２の密度のために、上壁１０６に向かって上方に移動する。言い換えると、低密度高分子から作られた基板１２２のために、基板１２２は、液体培養培地１０が細胞培養チャンバ１０４内に収容されるにつれて、液体培養培地１０の上に浮くように機能する。基板１２２は、細胞培養容器１００が細胞培養チャンバ１０４内の液体培養培地１０のさらなる収容を停止するまで、基板１２２が支持支柱１１４の長さに沿ってスライド式に平行移動し続けるように、支持支柱１１４によって上壁１０６に向かって誘導される。

この場合、図３から分かるように、基板１２２は、液体培養培地１０の表面の直接上に位置付けられているので、安定化装置１２０は、細胞培養チャンバ１０４内の液体培養培地１０の動きを安定化させる働きをする。詳しくは、その中に液体培養培地１０が貯蔵された細胞培養容器１００のどの動きも、その中の開放体積区域１２の存在のために、通常は、液体培養培地１０を細胞培養チャンバ１０４内で動かすであろう。しかしながら、基板１２２が、液体培養培地１０の上面に寄せて位置付けられているので、安定化装置１２０は、細胞培養チャンバ１０４内の液体培養培地１０の流動性および／または自由運動を妨げるように作られている。さらに、基板１２２を細胞培養チャンバ１０４内で安定化しているのは、支持支柱１１４と支柱係合構造１２４との間の係合である。したがって、この例の安定化装置１２０は、液体培養培地１０の動きを抑制し、細胞培養チャンバ１０４内の開放体積区域１２から液体培養培地１０を隔離することによって、細胞培養表面１１６のマイクロキャビティ内に収容された細胞の状態を維持するように作られている。

それに加え、またはそれに代えて、安定化装置１２０は、図４から分かるように、その中に一体成形された磁石１２６を備えることがある。この例において、磁石１２６は、基板１２２と一体に組み込まれ、所定の分極を含む。磁石１２６は、上壁１０６および／または底壁１０８に隣接した外部磁石の配置に応答して、支持支柱１１４の長さに沿った細胞培養チャンバ１０４内の基板１２２の動きに影響を与えるように機能する。その外部磁石は、外部磁石および磁石１２６が互いに磁気的に引き付けられるように、磁石１２６と反対の分極を含むことがある。別の実施の形態において、外部磁石は、磁石が互いに反発するように磁石１２６と同じ分極を含むことがある。したがって、外部磁石を上壁１０６または底壁１０８に沿って容器本体１０２に隣接して配置することにより、磁石１２６が外部磁石と相互作用し、それによって、基板１２２が、外部磁石が隣接して位置付けされたそれぞれの壁１０６、１０８に向けて動く。

使用に当たって、安定化装置１２０は、先に記載されたように、細胞培養チャンバ１０４内の液体培養培地１０の液体充填操作により、および／または容器本体１０２の上壁１０６に寄せて外部磁石を位置付けることにより、細胞培養チャンバ１０４内で上昇させられる。各場合において、基板１２２は、液体培養培地１０が基板１２２による妨害なく、細胞培養表面１１６の直接上に堆積されるように、細胞培養表面１１６に対して持ち上げられる。液体充填操作の終わりに、基板１２２は、細胞培養表面１１６と安定化装置１２０との間に液体培養培地１０を取り囲み、それによって、細胞培養チャンバ１０４内の液体培養培地１０の動きの自由範囲を制限するように基板１２２が機能するように、液体培養培地１０の上に乗っている。磁石１２６は、底壁１０８に隣接して位置付けられ、それによって、磁石１２６を底壁１０８に向かって引っ張り、それにより、基板１２２を液体培養培地１０に押し付けることがある。この場合、間に液体培養培地１０が位置付けられた状態で安定化装置１２０を細胞培養表面１１６に向けて押し付けることによって、液体培養培地１０はさらに安定化される。

他の態様において、基板１２２は、平らなシート、側部が隆起した平らなシート、中に成形された少なくとも１つの空洞部分などを含んでもよいことを理解すべきである。他の態様において、基板１２２は、基板１２２に沿って配置された複数の開放区域１２８を含み、それによって、基板１２２を通る流体アクセスを提供することがある。この場合、基板１２２は、上述した液体培養培地１０などの液体培地が複数の開放区域１２８を通じて基板１２２を自由に通過できるように複数の開放区域１２８が格子の表面に沿って位置付けられた、黒の格子図形としてモデル化することができる。安定化装置１２０の基板１２２は、上述した特徴構造の様々な組合せを含んでよいことを理解すべきである。

図５および図６は、容器本体２０２内に形成された細胞培養チャンバ２０４を画成する容器本体２０２を有する細胞培養容器２００の別の態様を示している。容器本体２０２は、上壁２０６、底壁２０８、それらの間に延在する複数の側壁２１０および複数の支持支柱２１４を含む。容器本体２０２は、細胞培養表面２１６および棚２１８が位置付けられている細胞培養チャンバ２０４中への流体アクセスを提供するように作られた入口ポート２１２をさらに備える。下記に特に記載のない限り、容器本体２０２、細胞培養チャンバ２０４、壁２０６、２０８、２１０、入口ポート２１２、支持支柱２１４、細胞培養表面２１６および棚２１８は、それぞれ、丁度、先に記載された、容器本体１０２、細胞培養チャンバ１０４、壁１０６、１０８、１１０、側部入口ポート１１２、支持支柱１１４、細胞培養表面１１６および棚１１８のように作られ、機能するであろうことを理解すべきである。それゆえ、多くの点で、細胞培養容器２００は、この中に具体的に言及された違いを除いて、細胞培養容器１００と実質的に同じように機能することを理解すべきである。

例えば、細胞培養容器２００は、細胞培養チャンバ２０４内に位置付けられた安定化装置２２０を備える。安定化装置２２０は、細胞培養チャンバ２０４内に格子を形成する複数の相互接続した格子セグメント２２２、２２３を含む。詳しくは、安定化装置２２０は、細胞培養チャンバ２０４の互い反対の端部間で底壁２０８に平行に延在する少なくとも１つの第１の安定化壁２２２、および細胞培養チャンバ２０４の互いに反対の側壁２１０間で底壁２０８に垂直に延在する少なくとも１つの第２の安定化壁２２３を備える。したがって、第１の安定化壁２２２は、第２の安定化壁２２３と垂直であり、交点２２４で第２の安定化壁２２３と交差し、それによって、安定化装置２２０に支持を与える相互接続した格子セグメント２２２、２２３を形成する。この例において、図５から分かるように、安定化装置２２０は、底壁２０８に平行に延在する１つの第１の安定化壁２２２および底壁２０８に垂直に延在する２つの第２の安定化壁２２３を備え、それによって、各第２の安定化壁２２３と第１の安定化壁２２２との間に２つの交点２２４を形成する。安定化装置２２０は、この例に示されたものより少ないまたは追加の格子壁２２２、２２３および交点２２４を含んでもよいことを理解すべきである。

支持支柱２１４は、支持支柱２１４が安定化装置２２０に当接するように作られるように第２の安定化壁２２３に隣接して延在している。この場合、支持支柱２１４は、細胞培養チャンバ２０４内の安定化装置２２０の動きの範囲を制限するように機能する。詳しくは、細胞培養容器２００は、安定化装置２２０が上壁１０６および底壁２０８に対して横に動くのを支持支柱２１４が制限するように、安定化装置２２０の第２の安定化壁２２３に寄せて位置付けられた４つの支持支柱２１４を備える。言い換えると、支持支柱２１４は、細胞培養チャンバ２０４内の格子壁２２２、２２３の側方移動を妨げ、それによって、支持支柱２１４の長さに沿った格子壁２２２、２２３の上下移動だけを可能にするように作られている。

安定化装置２２０は、複数の格子壁２２２、２２３内に一体に形成された少なくとも１つの磁石２２６をさらに備える。この例において、安定化装置２２０は、第２の安定化壁２２３と第１の安定化壁２２２の交点２２４で第１の安定化壁２２２に沿って位置付けられた２つの磁石２２６を備える。安定化装置２２０は、中に形成されたそれより少ないまたは追加の磁石２２６を備えてもよい、および／または格子壁２２２、２２３に沿った様々な他の位置に磁石２２６をさらに備えてもよいことを理解すべきである。図６に最もよく示されているように、磁石２２６は、第１の安定化壁２２２の上端に沿って安定化装置２２０に沿って位置付けられている。格子壁２２２、２２３は、低下位置にあるときに、格子壁２２２、２２３の底端が棚２１８と係合するように、底端で終端する所定の長さを有する。

磁石２２６は所定の分極を含み、その磁石２２６は、容器本体２０２に隣接して外部磁石２２８を配置することに反応して、細胞培養チャンバ２０４内の複数の格子壁２２２、２２３の動きを促進する。外部磁石２２８は、外部磁石２２８と磁石２２６が磁気的に互いに引き付けるように、磁石２２６と反対の分極を有する。他の実施の形態において、磁石２２６、２２８は、磁石２２６、２２８が互いに反発するように同じ分極を有することがある。したがって、下記により詳しく記載されるように、上壁２０６または底壁２０８に沿って容器本体２０２に隣接して外部磁石２２８を位置付けると、磁石２２６が外部磁石２２８と相互作用し、それによって、複数の格子壁２２２、２２３が、外部磁石２２８が隣接して位置付けられているそれぞれの壁２０６、２０８に向けて動く。

使用に当たって、図７Ａから分かるように、安定化装置２２０は、容器本体２０２の上壁２０６に寄せて外部磁石２２８を位置付けることによって、細胞培養チャンバ２０４内で上昇させられる。この場合、複数の格子壁２２２、２２３は、図７Ｂから分かるように、安定化装置２２０に接触せずに、液体培養培地１０が後で細胞培養表面２１６上に直接堆積されるように、細胞培養表面２１６に対して持ち上げられている。したがって、安定化装置２２０を上壁２０６に向けて上昇させると、複数の格子壁２２２、２２３は、細胞培養表面２１６がその上に液体培養培地１０を収容することを妨害しないであろう。液体充填操作が終わると、安定化装置２２０は底壁２０８に向けて下げられ、それによって、液体培養培地１０の上に複数の格子壁２２２、２２３が乗る。これは、いくつかの過程の内の１つによって行われる。

図７Ｃから分かるように、安定化装置２２０の磁石２２６と同じ分極を有する第２の外部磁石２３０が、上壁２０６に寄せて位置付けられている。したがって、容器本体２０２の上壁２０６に隣接して第２の外部磁石２３０を位置付けると、磁石２２６が第２の外部磁石２３０と相互作用し、それによって、磁石２２６と第２の外部磁石２３０の同じ分極のために、安定化装置２２０が上壁２０６から離れるように反発する。この場合、複数の格子壁２２２、２２３は、液体培養培地１０の上面と接触するまで、底壁２０８に向かって支持支柱２１４の長さに沿ってスライド式に平行移動する。上壁２０６での第２の外部磁石２３０の配置は維持され、それによって、格子壁２２２、２２３が好ましい期間に亘り細胞培養表面２１６と安定化装置２２０との間に液体培養培地１０を取り囲むように機能するように、液体培養培地１０に対する安定化装置２２０による一定の圧縮力が維持されるであろう。安定化装置２２０を液体培養培地１０に対して位置付けることは、細胞培養チャンバ２０４内の液体培養培地１０の動きの自由範囲を制限する働きをする。したがって、この例の安定化装置２２０は、液体培養培地１０の動きを妨げ、液体培養培地１０を細胞培養チャンバ２０４内の開放体積区域１２から隔離することによって、細胞培養表面２１６のマイクロキャビティ内に収容された細胞の状態を維持するように作られている。

他の例において、外部磁石２２８は、上壁２０６から単に取り除かれ、それによって、磁石２２６と外部磁石２２８との間の磁気相互作用を終わらせることがある。この例において、複数の格子壁２２２、２２３は、もはや、上壁２０６に対する上昇位置に制約されておらず、それによって、自然の重力によって低下位置に戻ることができる。今では液体培養培地１０が細胞培養表面２１６上に収容されており、安定化装置２２０は、液体培養培地１０の上面と接触し、それによって、液体培養培地１０に対して格子壁２２２、２２３の平面が提供され、細胞培養チャンバ２０４内のその流動性が最小になる。

さらに他の態様において、外部磁石２２８は、細胞培養チャンバ２０４内で安定化装置２２０を降下させるために使用されることがある。この例において、外部磁石２２８は、底壁２０８に隣接して位置付けられ、外部磁石２２８は、磁石２２６と反対の分極を有するので、それによって、磁石２２６が底壁２０８に向かって引き付けられる。したがって、複数の格子壁２２２、２２３は、磁力により降下され、それによって、液体培養培地１０の上面と接触したときに、液体培養培地１０を押す。この例において、液体培養培地１０は、液体培養培地１０が間に位置付けられて、安定化装置２２０の細胞培養表面２１６に向かう圧縮により安定化される。

図８は、細胞培養容器１００と実質的に同じような細胞培養容器３００を示しており、したがって、同様の構成要素を特定するために、同様の参照番号が使用される。しかしながら、細胞培養容器３００は、細胞培養容器３００が、上壁３０６上のキャップ３１１の相対位置のために、細胞培養容器３００の細胞培養チャンバ３０４に液体培養培地１０を完全に充填できる薄型本体３０２を有するという点で、細胞培養容器１００と異なる。詳しくは、本体３０２の側壁３１０は、約０．５センチメートルから約１．０センチメートルの鉛直高さを有することがある；しかしながら、細胞培養容器３００の側壁３１０は、他の寸法を有してもよいことを理解すべきである。細胞培養容器３００の薄型のために、キャップ３１１は、上述した細胞培養容器１００、２００上に備えられるように、本体３０２の側壁３１０に沿うよりもむしろ、本体３０２の上壁３０６に沿って位置付けられている。細胞培養容器３００は、細胞培養チャンバ３０４内に棚を備えていない；しかしながら、他の態様において、細胞培養チャンバ３０４は、細胞培養表面３１６に隣接して位置付けられた棚を備えてもよい。

細胞培養容器３００は、ここに明白に言及された違いを除いて、上述した安定化装置１２０と同じように作られ、機能する安定化装置３２０を備える。安定化装置３２０は、その中に一体成形された磁石３２６を備えた基板３２２を含む。基板３２２は、そこに通して本体３０２の複数の支持支柱３１４をスライド式に収容するような大きさと形状の複数のスロット３２４をさらに備える。細胞培養容器１００に関して先に詳しく同じように記載したように、細胞培養容器３００の支持支柱３１４は、支持支柱３１４の長さに沿って上壁３０６と底壁３０８との間で安定化装置３２０を誘導するように作られている。したがって、支持支柱３１４は、細胞培養チャンバ３０４内の安定化装置３２０の横方向の動きを妨げるように作られている。

細胞培養容器３００の使用中、図９Ａから分かるように、外部磁石３２８が本体３０２の上壁３０６に沿って位置付けられ、それによって、基板３２２の磁石３２６が上壁３０６に向かって相対的に上方に引き付けられる。この例において、磁石３２６および外部磁石３２８は、磁石３２６が外部磁石３２８に磁気的に引き付けられ、それによって、基板３２２が上壁３０６に向かって支持支柱３１４に沿って摺動可能に平行移動するように、反対の磁気分極を有する。基板３２２が細胞培養チャンバ３０４内の上昇位置に配置されているので、ひいては、図９Ｂから分かるように、液体培養培地１０が細胞培養表面３１６上に直接堆積されるように、液体培養培地１０が入口ポート３１２を通じて細胞培養容器３００に入れられる。液体培養培地１０を安定化するために、外部磁石３２８が上壁３０６から取り除かれ、それによって、上壁３０６に向かう磁石３２６の磁力が終わる。したがって、基板３２２は、液体培養培地１０の上面と接触するまで、自然の重力のために、細胞培養チャンバ３０４内を降下する。

図９Ｃは、安定化装置３２０が、細胞培養チャンバ３０４内の液体培養培地１０の流動性を安定化させ、それによって、液体培養培地１０が、過剰な乱流または運動を経験せずに、細胞培養表面３１６上に堆積されることを確実にするように機能するように液体培養培地１０上に位置付けられた基板３２２を示している。したがって、安定化装置３２０は、液体培養培地１０の動きを妨げ、液体培養培地１０を細胞培養チャンバ３０４内の開放体積区域１２から隔離することによって、細胞培養表面３１６のマイクロキャビティ内に収容された細胞の状態を維持するように作られている。言い換えると、液体培養培地１０を細胞培養チャンバ３０４内の開放体積区域１２から隔離することにより、細胞培養容器３００が物理的に輸送されるときに、液体培養培地１０がその中を動く適切な空間を有する能力が最小になる。

他の態様において、図１０から分かるように、安定化装置３２０は、基板３２２が基板３２２の長さに沿って配置された複数の細孔３２５を含むように多孔質構造を有することがある。この例において、基板３２２は、細胞培養チャンバ３０４が細胞培養表面３１６に沿って液体培養培地１０を収容した後、液体培養培地１０を通って平行移動するように作られている。詳しくは、液体培養培地１０を安定化させるために、外部磁石３２８が上壁３０６から取り除かれ、底壁３０８に隣接して再配置され、それによって、基板３２２の磁石３２６を底壁３０８に向かって磁気的に引き付ける。液体培養培地１０の上面に最初に接触した際に、基板３２２は、基板３２２に沿った複数の細孔３２５の存在により、複数の支持支柱３１４の長さに沿って、底壁３０８に向かって摺動自在に平行移動し続ける。言い換えると、基板３２２は、基板３２２が支持支柱３１４に沿って細胞培養表面３１６に向かって平行移動するときに、液体培養培地１０を基板３２２の複数の細孔３２５に通して向け直すことによって、液体培養培地１０を通過することができる。

この例において、図１０から最もよく分かるように、安定化装置３２０は最終的に、液体培養培地１０が基板３２２の上に再配置されるように、細胞培養表面３１６に寄せて、底壁３０８に近接して位置付けられる。基板３２２が、先に記載されたように液体培養培地１０の上面ではなく細胞培養表面３１６に沿って、液体培養培地１０の底面に沿って位置しているので、この例の安定化装置３２０は、マイクロキャビティ基板を液体培養培地１０から実質的に隔離することによって、細胞培養表面３１６のマイクロキャビティ内に収容された細胞の状態を維持するように作られている。したがって、その中のゆとりのある開放体積区域１２のために、細胞培養チャンバ３０４内で動く能力を有する液体培養培地１０にかかわらず、安定化装置３２０は、細胞培養表面３１６を液体培養培地１０から隔て、それによって、細胞培養表面３１６内に収容された細胞を安定化させる。

あるいは、他の例では、外部磁石３２８は、安定化装置３２０が細胞培養表面３１６に寄せて位置付けられるように、細胞培養容器３００に液体培養培地１０を充填する前に、底壁３０８に対して位置付けられることがある。この例において、細胞は、基板３２２の複数の細孔３２５を通じて細胞培養表面３１６のマイクロキャビティ中に堆積させることができる。したがって、この例において、複数の細孔３２５は、その中を通して細胞を収容し、それによって、その上に基板３２２が位置付けられているにもかかわらず、細胞培養表面３１６のマイクロキャビティ基板中への細胞の播種を促進させるような大きさと形状である。この例において、基板３２２は既に低下位置にあり、細胞培養容器３００が細胞培養チャンバ３０４内に液体培養培地１０を収容する前に、細胞培養表面３１６の細胞を確保している。

図１１は、細胞培養容器１００と実質的に同じような細胞培養容器４００の別の実施の形態を示しており、したがって、同様に構成要素を特定するために、同様の参照番号が使用される。しかしながら、細胞培養容器４００は、細胞培養容器４００が、本体４０２の側壁４１０に沿って延在する少なくとも２つの旋回棒を備えるという点で、細胞培養容器１００と異なる。詳しくは、旋回棒４０９は底壁４０８に対して平行に延在し、各旋回棒４０９は、複数の支持支柱４１４の一対の支持支柱４１４の間に位置付けられている。この例において、本体４０２は６つの支持支柱４１４を備え、第１の対の支持支柱４１４は第１の側壁４１０に沿って位置付けられ、第２の対の支持支柱４１４は、反対にある第２の側壁４１０に沿って位置付けられている。図１１からさらに分かるように、第３の対の支持支柱４１４は、本体４０２の後壁４０７に沿って位置付けられている。後壁４０７は、入口ポート４１２の反対側に位置付けられ、その一対の側壁４１０の間に延在する細胞培養チャンバ４０４の遠位端を画成する。

細胞培養容器４００は、細胞培養チャンバ４０４内に安定化装置４２０を備える。安定化装置４２０は、格子を集団で形成する複数の格子壁４２２、４２３（すなわち、翼）を含む。詳しくは、安定化装置４２０は、第１の安定化壁４２２が第２の安定化壁４２３に対して垂直となるように、底壁４０８に対して平行に延在する少なくとも１つの第１の安定化壁４２２（すなわち、中央翼）および底壁４０８に対して垂直に延在する少なくとも１つの第２の安定化壁４２３（すなわち、外側翼）を含む。この例において、安定化装置４２０は、１つの第１の安定化壁４２２および２つの第２の安定化壁４２３を備える。安定化装置４２０の第１の安定化壁４２２は、後壁４０７に沿って位置付けられた一対の支持支柱４１４にスライド式に結合されている。下記により詳しく記載されるように、第１の安定化壁４２２は、支持支柱４１４の長さに沿って細胞培養チャンバ４０４内で平行移動するように作られている。

各第２の安定化壁４２３は、図１１から分かるように、交点４２４で第１の安定化壁４２２に枢動可能に結合されており、よって、第２の安定化壁４２３が第１の安定化壁４２２に対して旋回するように作られている。第１の安定化壁４２２は、一対の第２の安定化壁４２３の間に位置付けられている。第２の安定化壁４２３はさらに、側壁４１０で本体４０２に枢動可能に結合されている。詳しくは、側壁４１０の各々は、第２の安定化壁４２３が旋回棒４０９に結合し、細胞培養チャンバ４０４内で旋回棒４０９の周りに旋回するように作られるように、その上に延在する旋回棒４０９を備えている。安定化装置４２０は、図示されたものよりも、少ないまたは追加の格子壁４２２、４２３および交点４２４を備えてもよいことを理解すべきである。

細胞培養容器４００の使用中、安定化装置４２０は、図１２Ａから分かるように、第１の安定化壁４２２が本体４０２の底壁４０８に隣接して位置付けられるように、最初に低下位置にある。この例において、第２の安定化壁４２３は、第１の安定化壁４２２の下方への方向付けを容易にするために、旋回棒４０９に対して下向きに旋回されている。安定化装置４２０は、把持可能な器具の使用により本体４０２で上昇させられる。詳しくは、その器具は、安定化装置４２０のコネクタ４２６中に挿入され、それによって、安定化装置４２０を細胞培養チャンバ４０４に対して旋回させる。この例において、コネクタ４２６は、細胞培養容器４００のキャップ４１１が一旦開けられたら、コネクタ４２６がユーザに容易に到達できるように、ポート４１２に隣接して第１の安定化壁４２２に沿って位置付けられている。コネクタ４２６が入口ポート４１２を通じて露出されているので、ユーザは、その器具をコネクタ４２６に挿入し、その後、第１の安定化壁４２２を上壁４０６に向けて上昇させることによって、安定化装置４２０を手動で操作する。図１２Ｂから分かるように、第１の安定化壁４２２を上壁４０６に向けて上昇させると、第２の安定化壁４２３が交点４２４で旋回棒４０９および第１の安定化壁４２２の両方に対して旋回する。その器具は、ストリペット、ピペット、または他の様々な適切な器具を含んでもよいことを理解すべきである。

安定化装置４２０が底壁４０８から遠い上昇位置にあるときに、液体培養培地１０が細胞培養チャンバ４０４に入れられ、安定化装置４２０からの干渉を受けずに、細胞培養表面４１６上に堆積される。細胞培養容器４００がその中に十分な液体培養培地１０を一旦収容したら、安定化装置４２０が底壁４０８に向けて降下され、それによって、液体培養培地１０が複数の格子壁４２２、４２３に対して押し付けられる。詳しくは、図１３から分かるように、第１の安定化壁４２２は、その器具をコネクタ４２６に再び挿入することによって、後壁４０７に沿って一対の支持支柱４１４の間で摺動可能に平行移動される。安定化装置４２０の第１の安定化壁４２２が後壁４０７に沿って支持支柱４１４の間に収容されているので、安定化装置４２０は支持支柱４１４の長さに沿った平行移動に限定され、それによって、安定化装置４２０の側方運動が効果的に制限される。したがって、第２の安定化壁４２３が旋回棒４０９の周りに旋回できる動きの範囲が制限される。

この例において、複数の格子壁４２２、４２３は、安定化装置４２０が細胞培養チャンバ４０４内の液体培養培地１０の流動性を安定化させ、それによって、細胞培養容器４００が動かされたときに過剰な乱流または運動を経験せずに液体培養培地１０が細胞培養表面４１６上に堆積されることを確実にするように機能する。したがって、安定化装置４２０は、液体培養培地１０の運動を妨げ、液体培養培地１０を細胞培養チャンバ４０４内の開放体積区域１２から隔離することによって、細胞培養表面４１６のマイクロキャビティ内に収容された細胞の状態を維持するように作られている。言い換えると、液体培養培地１０を細胞培養チャンバ４０４の開放体積区域１２から隔離することによって、細胞培養容器４００が物理的に輸送されているときに、液体培養培地１０がその中を動く適切な空間を有する能力が最小になる。

上述した細胞培養容器は、その容器のそれぞれの細胞培養チャンバ内に位置付けられた様々な安定化装置を備える。ここに記載された安定化装置は、その容器の細胞培養表面に沿った液体培地の収容および細胞培養表面に対する液体培地の安定化の両方を促進するために、細胞培養チャンバ内で再配置するおよび／または動かすことができる。ここに記載された安定化装置は、容器内に収容された液体培地および／または他の流体の自由運動および／または流動性を妨げるための構造的支持特徴構造を備え、その構造的支持特徴構造は、先に詳しく記載されたような磁気浮上および／または他の様々な方法による手動作動が可能である。先に基づいて、ここに記載された安定化装置は、細胞培養容器を物理的に操作するおよび／または輸送するときに、その容器内に収容された液体培地を安定化させ、それによって、容器内の液体培地の運動の量を最小にし、容器の細胞培養表面に沿って培養されている細胞に対する乱流の可能性を減少させるために使用してもよいことを理解すべきである。

請求項の主題の精神および範囲から逸脱せずに、ここに記載された実施の形態に、様々な改変および変更を行えることが当業者に明白であろう。それゆえ、本明細書が、ここに記載された様々な実施の形態の改変および変更を、そのような改変および変更が付随の特許請求の範囲およびその等価物の範囲内に入るという条件で、包含することが意図されている。

以下、本発明の好ましい実施形態を項分け記載する。

実施形態１
細胞培養容器において、
底壁と上壁との間に囲まれた細胞培養チャンバを画成する容器本体、
前記細胞培養チャンバ内にあり、前記上壁と前記底壁との間に延在する支持支柱、および
前記細胞培養チャンバの幅と長さを覆う安定化装置であって、液体培養培地が該細胞培養チャンバ内に収容されるときに該安定化装置が前記支持支柱に沿って移動できるように該支持支柱にスライド式に係合するような大きさの支柱係合構造を有する安定化装置、
を備え、
前記支持支柱は、液体培養培地の充填操作中に前記細胞培養チャンバ内の液面の上昇により、前記安定化装置が上昇するにつれて、前記支持支柱の長さに沿って該安定化装置を誘導する、細胞培養容器。

実施形態２
細胞培養表面が、前記底壁に沿って位置しており、細胞培養区域を画成し、前記安定化装置が、該細胞培養区域の少なくとも５０パーセントである設置面積を該細胞培養表面上に有する、実施形態１に記載の細胞培養容器。

実施形態３
前記安定化装置が、該安定化装置が前記細胞培養チャンバ内に収容された液体培養培地の表面で浮くように、室温で約１．０ｇ／ｃｍ^３以下の密度を有する材料から作られている、実施形態２に記載の細胞培養容器。

実施形態４
前記安定化装置が、高分子から作られた基板の形態にある、実施形態３に記載の細胞培養容器。

実施形態５
前記安定化装置が、該安定化装置と一体となるようにその中に配置された磁石を含む、実施形態１に記載の細胞培養容器。

実施形態６
前記上壁または前記底壁に寄せて位置付けられた外部磁石をさらに備え、該外部磁石が、前記安定化装置内に配置された磁石の分極と同じまたは反対の分極を有し、それによって、該安定化装置内に配置された磁石と相互作用する、実施形態５に記載の細胞培養容器。

実施形態７
前記容器本体が、前記細胞培養チャンバ中に延在する棚、および該細胞培養チャンバ内に位置付けられた細胞培養表面を備え、該棚が、前記安定化装置に係合し、該安定化装置の前記細胞培養表面に向かう動きを妨げるように、前記細胞培養チャンバの上に位置している、実施形態１に記載の細胞培養容器。

実施形態８
前記細胞培養表面が、その中に細胞を収容するような大きさの、収容するように作られた複数のマイクロキャビティを画成するマイクロキャビティ基板を含む、実施形態７に記載の細胞培養容器。

実施形態９
前記安定化装置が、該安定化装置内に一体成形された空洞部分を備える、実施形態１に記載の細胞培養容器。

実施形態１０
前記安定化装置が、複数の相互接続した格子セグメント、格子の互いに反対の端部間に延在する第１の安定化壁、および該格子の互いに反対の側部間に延在する第２の安定化壁を含み、該第１の安定化壁が該第２の安定化壁に対して垂直である、実施形態１に記載の細胞培養容器。

実施形態１１
前記格子が、前記第１と第２の安定化壁の少なくとも一方により支持された少なくとも１つの磁石を含む、実施形態１０に記載の細胞培養容器。

実施形態１２
前記上壁または前記底壁に寄せて位置付けられた外部磁石をさらに備え、該外部磁石が、前記格子内に配置された磁石の分極と同じまたは反対の分極を有し、それによって、該格子内に配置された磁石と相互作用する、実施形態１１に記載の細胞培養容器。

実施形態１３
前記格子が、前記第１と第２の安定化壁が前記底壁に対して旋回するように、前記容器本体に枢動可能に結合されている、実施形態１０に記載の細胞培養容器。

実施形態１４
前記格子が、該格子を前記細胞培養チャンバに対して手動で旋回するようにピペットまたはストリペットを受け入れるコネクタを備えた、実施形態１３に記載の細胞培養容器。

実施形態１５
前記安定化装置が、その中に形成された複数の細孔を含む多孔質基板を含む、実施形態１に記載の細胞培養容器。

実施形態１６
前記多孔質基板が、その中に一体成形された磁石を備え、前記細胞培養容器が、前記上壁または前記底壁に寄せて位置付けられる外部磁石を含み、該外部磁石が、前記多孔質基板内に配置された磁石の分極と同じまたは反対の分極を有し、それによって、該多孔質基板内に配置された磁石と相互作用する、実施形態１５に記載の細胞培養容器。

実施形態１７
細胞培養容器において、
底壁、上壁、および一対の側壁内に囲まれた細胞培養チャンバを画成する容器本体であって、該底壁は細胞培養表面を構成し、該培養表面に沿って培地が堆積されるように該培地を収容するように作られている容器本体、
前記上壁と前記底壁との間に延在する前記細胞培養チャンバ内に位置付けられた支持支柱、および
前記細胞培養チャンバ内に配置された一対の外側翼と中央翼を含む安定化装置であって、該中央翼は、該一対の外側翼間に配置されており、該一対の外側翼は、前記一対の側壁に枢動可能に結合されており、該中央翼は、前記支持支柱にスライド式に係合するような大きさの支柱係合構造を含む、安定化装置、
を備え、
前記支持支柱は、前記中央翼が持ち上げられたときに該支持支柱の高さに沿って該中央翼を誘導する、細胞培養容器。

実施形態１８
前記中央翼が、前記細胞培養チャンバに対して該中央翼を手動で持ち上げるようにピペットまたはストリペットを受け入れるように作られている、実施形態１７に記載の細胞培養容器。

実施形態１９
前記容器本体が、前記細胞培養チャンバ内に液体培地を収容するように作られており、前記安定化装置が、該液体培地の動きを妨げるように作られている、実施形態１７に記載の細胞培養容器。

実施形態２０
細胞培養容器内の液体培地を安定化させる方法において、
前記細胞培養容器の容器本体内の細胞培養チャンバ内に安定化装置を位置付ける工程、および
前記安定化装置の支柱係合構造を支持支柱と、前記細胞培養チャンバに液体細胞培養培地が充填されるときに、前記容器本体の上壁と底壁との間で該支持支柱に沿って安定化装置が動けるように係合させる工程、
を有してなる方法。

実施形態２１
細胞培養表面が、前記底壁に沿って位置しており、細胞培養区域を画成し、前記安定化装置が、該細胞培養区域の少なくとも５０パーセントである設置面積を該細胞培養表面上に有する、実施形態２０に記載の方法。

実施形態２２
前記安定化装置が、該安定化装置が前記細胞培養チャンバ内に収容された液体培養培地の表面で浮くように、室温で約１．０ｇ／ｃｍ^３以下の密度を有する材料から作られている、実施形態２１に記載の方法。

実施形態２３
前記安定化装置が、高分子から作られた基板の形態にある、実施形態２２に記載の方法。

実施形態２４
細胞培養容器において、
底壁と上壁との間に囲まれた細胞培養チャンバを画成する容器本体、
前記細胞培養チャンバ内にあり、前記上壁と前記底壁との間に延在する支持支柱、および
前記細胞培養チャンバの幅と長さを覆う安定化装置であって、液体培養培地が該細胞培養チャンバ内に収容されるときに該安定化装置が前記支持支柱に沿って移動できるように該支持支柱にスライド式に係合するような大きさの支柱係合構造を有する安定化装置、
を備え、
前記支持支柱は、液体培養培地の充填操作中に前記細胞培養チャンバ内の液面の上昇により、前記安定化装置が上昇するにつれて、前記支持支柱の長さに沿って該安定化装置を誘導する、細胞培養容器。

実施形態２５
細胞培養表面が、前記底壁に沿って位置しており、細胞培養区域を画成し、前記安定化装置が、該細胞培養区域の少なくとも５０パーセントである設置面積を該細胞培養表面上に有する、実施形態２４に記載の細胞培養容器。

実施形態２６
前記安定化装置が、該安定化装置が前記細胞培養チャンバ内に収容された液体培養培地の表面で浮くように、室温で約１．０ｇ／ｃｍ^３以下の密度を有する材料から作られている、実施形態２５に記載の細胞培養容器。

実施形態２７
前記安定化装置が、高分子から作られた基板の形態にある、実施形態２６に記載の細胞培養容器。

実施形態２８
前記安定化装置が、該安定化装置と一体となるようにその中に配置された磁石を含む、実施形態２４に記載の細胞培養容器。

実施形態２９
前記上壁または前記底壁に寄せて位置付けられた外部磁石をさらに備え、該外部磁石が、前記安定化装置内に配置された磁石の分極と同じまたは反対の分極を有し、それによって、該安定化装置内に配置された磁石と相互作用する、実施形態２８に記載の細胞培養容器。

実施形態３０
前記容器本体が、前記細胞培養チャンバ中に延在する棚、および該細胞培養チャンバ内に位置付けられた細胞培養表面を備え、該棚が、前記安定化装置に係合し、該安定化装置の前記細胞培養表面に向かう動きを妨げるように、前記細胞培養チャンバの上に位置している、実施形態２４に記載の細胞培養容器。

実施形態３１
前記細胞培養表面が、その中に細胞を収容するような大きさの、収容するように作られた複数のマイクロキャビティを画成するマイクロキャビティ基板を含む、実施形態３０に記載の細胞培養容器。

実施形態３２
前記安定化装置が、該安定化装置内に一体成形された空洞部分を備える、実施形態２４に記載の細胞培養容器。

実施形態３３
前記安定化装置が、複数の相互接続した格子セグメント、格子の互いに反対の端部間に延在する第１の安定化壁、および該格子の互いに反対の側部間に延在する第２の安定化壁を含み、該第１の安定化壁が該第２の安定化壁に対して垂直である、実施形態２４に記載の細胞培養容器。

実施形態３４
前記格子が、前記第１と第２の安定化壁の少なくとも一方により支持された少なくとも１つの磁石を含む、実施形態３３に記載の細胞培養容器。

実施形態３５
前記上壁または前記底壁に寄せて位置付けられた外部磁石をさらに備え、該外部磁石が、前記格子内に配置された磁石の分極と同じまたは反対の分極を有し、それによって、該格子内に配置された磁石と相互作用する、実施形態３４に記載の細胞培養容器。

実施形態３６
前記格子が、前記第１と第２の安定化壁が前記底壁に対して旋回するように、前記容器本体に枢動可能に結合されている、実施形態３３に記載の細胞培養容器。

実施形態３７
前記格子が、該格子を前記細胞培養チャンバに対して手動で旋回するようにピペットまたはストリペットを受け入れるコネクタを備えた、実施形態３６に記載の細胞培養容器。

実施形態３８
前記安定化装置が、その中に形成された複数の細孔を含む多孔質基板を含む、実施形態２４に記載の細胞培養容器。

実施形態３９
前記多孔質基板が、その中に一体成形された磁石を備え、前記細胞培養容器が、前記上壁または前記底壁に寄せて位置付けられる外部磁石を含み、該外部磁石が、前記多孔質基板内に配置された磁石の分極と同じまたは反対の分極を有し、それによって、該多孔質基板内に配置された磁石と相互作用する、実施形態３８に記載の細胞培養容器。

実施形態４０
細胞培養容器において、
底壁、上壁、および一対の側壁内に囲まれた細胞培養チャンバを画成する容器本体であって、該底壁は細胞培養表面を構成し、該培養表面に沿って培地が堆積されるように該培地を収容するように作られている容器本体、
前記上壁と前記底壁との間に延在する前記細胞培養チャンバ内に位置付けられた支持支柱、および
前記細胞培養チャンバ内に配置された一対の外側翼と中央翼を含む安定化装置であって、該中央翼は、該一対の外側翼間に配置されており、該一対の外側翼は、前記一対の側壁に枢動可能に結合されており、該中央翼は、前記支持支柱にスライド式に係合するような大きさの支柱係合構造を含む、安定化装置、
を備え、
前記支持支柱は、前記中央翼が持ち上げられたときに該支持支柱の高さに沿って該中央翼を誘導する、細胞培養容器。

実施形態４１
前記中央翼が、前記細胞培養チャンバに対して該中央翼を手動で持ち上げるようにピペットまたはストリペットを受け入れるように作られている、実施形態４０に記載の細胞培養容器。

実施形態４２
前記容器本体が、前記細胞培養チャンバ内に液体培地を収容するように作られており、前記安定化装置が、該液体培地の動きを妨げるように作られている、実施形態４０に記載の細胞培養容器。

実施形態４３
細胞培養容器内の液体培地を安定化させる方法において、
前記細胞培養容器の容器本体内の細胞培養チャンバ内に安定化装置を位置付ける工程、および
前記安定化装置の支柱係合構造を支持支柱と、前記細胞培養チャンバに液体細胞培養培地が充填されるときに、前記容器本体の上壁と底壁との間で該支持支柱に沿って安定化装置が動けるように係合させる工程、
を有してなる方法。

実施形態４４
細胞培養表面が、前記底壁に沿って位置しており、細胞培養区域を画成し、前記安定化装置が、該細胞培養区域の少なくとも５０パーセントである設置面積を該細胞培養表面上に有する、実施形態４３に記載の方法。

実施形態４５
前記安定化装置が、該安定化装置が前記細胞培養チャンバ内に収容された液体培養培地の表面で浮くように、室温で約１．０ｇ／ｃｍ^３以下の密度を有する材料から作られている、実施形態４４に記載の方法。

実施形態４６
前記安定化装置が、高分子から作られた基板の形態にある、実施形態４５に記載の方法。

１０ 液体培養培地
１００、２００、３００、４００ 細胞培養容器
１０２、２０２、３０２、４０２ 容器本体
１０４、２０４、３０４、４０４ 細胞培養チャンバ
１０６、２０６、３０６、４０６ 上壁
１０８、２０８、３０８、４０８ 底壁
１１０、２１０、３１０、４１０ 側壁
１１１、２１１、３１１、４１１ キャップ
１１２、２１２、３１２、４１２ 入口ポート
１１４、２１４、３１４、４１４ 支持支柱
１１６、２１６、３１６、４１６ 細胞培養表面
１１８、２１８ 棚
１２０、２２０、３２０、４２０ 安定化装置
１２２、３２２ 基板
１２４ 支柱係合構造
１２６、２２６、３２６ 磁石
１２８ 開放区域
２２２、２２３ 相互接続した格子セグメント、安定化壁、格子壁
２２４ 交点
２２８、３２８ 外部磁石
３２５ 細孔
４０７ 後壁
４０９ 旋回棒
４２２ 第１の安定化壁、中央翼
４２３ 第２の安定化壁、外側翼
４２６ コネクタ

Claims (1)

1. 細胞培養容器内の液体培地を安定化させる方法において、
   前記細胞培養容器の容器本体内の細胞培養チャンバ内に安定化装置を位置付ける工程、および
   前記安定化装置の支柱係合構造を支持支柱と、前記細胞培養チャンバに液体細胞培養培地が充填されるときに、前記容器本体の上壁と底壁との間で該支持支柱に沿って安定化装置が動けるように係合させて、液体培養培地の動きを抑制することによって、細胞培養表面のマイクロキャビティ内に収容された細胞の状態を維持する工程、
   を有してなる方法。

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