MX2007013985A

MX2007013985A - Sistemas de fluidos de punto de cuidado y usos de los mismos.

Info

Publication number: MX2007013985A
Application number: MX2007013985A
Authority: MX
Inventors: John Howard; Elizabeth A Holmes; Shaunak Roy; Chengwang Wang; Ian Gibbons; Tim Kemp; Chris Todd; Ron Oral; Shulin Zeng; Jeff Fenton; Shize Daniel Qi
Original assignee: Theranos Inc
Priority date: 2005-05-09
Filing date: 2006-03-24
Publication date: 2008-02-22
Also published as: US20100081144A1; KR20140098856A; MX2021011543A; US9075046B2; NZ590930A; US20060264781A1; US20130115685A1; US8679407B2; NZ599522A; US20100074799A1; JP2012127978A; US20080009766A1; US11630069B2; US20180045649A1; JP2008544214A; US20150099311A1; IL253639B2; NZ620811A; JP2023169427A; JP2019219416A

Abstract

La presente invencion es concerniente con el campo de dispositivos medicos. Especificamente, la presente invencion proporciona dispositivos medicos portatiles que permiten la deteccion en tiempo real de analitos de un fluido biologico. Los metodos y dispositivos son particularmente utiles para proporcionar pruebas en punto de cuidado para una variedad de aplicaciones medicas.

Description

SISTEMAS DE FLUIDOS DE PUNTO DE CUIDADO Y USOS DE LOS MISMOS CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención es concerniente con el campo de servicios médicos. Específicamente, la presente invención proporciona dispositivos médicos portátiles que permiten la detección en tiempo real de analitos de un fluido biológico. Los métodos y dispositivos son particularmente útiles para proporcionar pruebas de punto de cuidado para una variedad de aplicaciones médicas.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN El descubrimiento de un vasto número de biomarcadores de enfermedad y el establecimiento de sistemas microfluidos miniaturizados ha abierto nuevas avenidas para idear métodos y sistemas para la predicción, diagnosis y tratamiento de enfermedades en un establecimiento de punto de cuidado. Las pruebas de punto de cuidado son particularmente deseables debido a que proporciona rápidamente resultados a los prácticos médicos y habilita una consulta más rápida. La diagnosis prematura permite al practicante comenzar el tratamiento más pronto y así evitar el deterioro sin atender de la condición del paciente. Ejemplos de análisis de punto de cuidado incluyen pruebas en cuanto a glucosa, fármacos de abuso, colesterol en el suero, embarazo y ovulación. Sin embargo, estos y otros métodos y sistemas de punto de cuidado disponibles actualmente no proporcionan una solución integrada para la adquisición de muestras, pruebas, análisis y comunicación de resultado a los prácticos médicos o proveedores de la salud cuando se necesita. Así, sigue habiendo una necesidad considerable por un instrumento de medición de multiparámetros portátiles que proporcione recolección de datos conveniente y rápida, transmisión, análisis, también como consulta médica en línea o toma de decisiones. También se necesitan pruebas de punto de cuidado nuevas y mejoradas para investigación y desarrollo de agentes terapéuticos también para monitorear posibles reacciones de fármaco adversas (ADR) , después que un fármaco es traído al mercado. La seguridad y eficacia de un fármaco es determinada por los parámetros farmacocinéticos (lo que el cuerpo hace al fármaco) y parámetros farmacodinámicos (lo que el fármaco hace al cuerpo) del fármaco. Actualmente, los parámetros farmacocinéticos (PK) y farmacodinámicos (PD) de un fármaco son en general determinados al extraer primero muestras de sangre de un paciente enseguida por análisis de laboratorio. Actualmente, los parámetros farmacocinéticos (PK) y farmacodinámicos (PD) de un fármaco son en general determinados al extraer primero muestras de sangre de un paciente seguido por análisis de laboratorio. Tal procedimiento tiene numerosas deficiencias. En primer lugar, se requiere en general que pacientes visite a una clínica para proporcionar muestras clínicas tales como muestras de sangre u orina en múltiples puntos en el tiempo. En segundo lugar, la mayoría de las técnicas analíticas para determinar el analito objetivo y concentraciones de biomarcador que reflejan ya sea los parámetros farmacocinéticos (PK) y farmacodinámicos (PD) requieren que las muestras de sangre sean pre-procesadas antes de que los parámetros puedan ser determinados . Esto da como resultado un retardo en respuesta de datos, variabilidad en distribución fisiológica del fármaco y metabolismo (garantizando una dosificación deficiente) , toma de muestras de dispersas y la carencia de historia de dosificación.

Notablemente, numerosas pruebas clínicas frecuentemente sufren de números insuficientes de pruebas sanguíneas debido al deficiente apego del paciente; los pacientes frecuentemente fallan de regresar al febotomista para proporcionar las muestras de sangre requeridas para la prueba. Similarmente, las técnicas y sistemas actuales para monitorear ADR también son inapropiados . Los ADR son una de las causas principies de morbidez y mortalidad en el cuidado de la salud. El Instituto de Medicina reportó en enero de 200 que 44,000 a 98,000 muertes ocurrieron debido a errores médicos, de las cuales 7,000 muertes fueron debidas a ADR. Otro estudios llevados a cabo en poblaciones de pacientes hospitalizados han indicado una incidencia global más alta de varias ADR. Varias razones contribuyen a la prevalencia de las ADR. En primer lugar, hay más terapias de combinación disponibles a los pacientes. En segundo lugar, hay una tendencia incrementada hacia el uso crónico de fármacos (estatinas tales como Lipitor e inhibidores de Cox- 2 tales como Vioxx) . El uso crónico de fármacos también incrementa la probabilidad de cambios en el estilo de vida del paciente, estatus de salud y uso de otras medicaciones ocurrirá. En mujeres, el uso crónico de fármacos puede dar como resultado consecuencias no anticipadas si la mujer se embaraza. Tales riesgos son de particular preocupación al feto, que es especialmente susceptible a las ADR en las que se incluyen teratogenicidad. Un factor importante adicional en el manejo de los riesgos y beneficios de terapia de fármaco es el apego del paciente. Los pacientes frecuentemente fallan en tomar la dosis programada de fármaco, toman más de la dosis prescrita o fallan de completar un curso de terapia de fármaco (especialmente común en el tratamiento por enfermedades infecciosas) . Estos comportamientos (deliberados o inadvertidos) dan como resultado niveles inapropiados de fármacos en el cuerpo que pueden provocar efectos adversos serios. El paciente es frecuentemente olvidadizo a tales consecuencias y el médico que prescribe es también improbable que se de cuenta del problema antes de que ocurran varias consecuencias. Así, todavía persiste una necesidad apremiante por métodos y aparatos que permiten la transmisión de datos en tiempo real entre el paciente y los prácticos médicos para habilitar la comunicación eficiente y pruebas de punto de cuidado de alto rendimiento en un contexto ambulatorio. Un sistema benéfico detectará ADR y la eficacia y/o toxicidad de un agente terapéutico en tiempo real en una instalación ambulatoria. También puede facilitar que los prácticos médicos determinen las condiciones fisiológicas del paciente en respuesta a agentes terapéuticos durante el curso de pruebas clínicas o tratamientos de seguimiento. La presente invención satisface estas necesidades y proporciona ventajas relacionadas también.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Un aspecto de la presente invención es el diseño de un sistema capaz de proporcionar transmisión de datos en tiempo real entre un paciente y prácticos médicos para facilitar las pruebas de punto de cuidado de alto rendimiento en una instalación ambulatoria. Los sistemas y métodos proporcionados en la presente simplifican los procedimientos laboriosos y caros de procesar y analizar las muestras recolectadas de un sujeto (por ejemplo, un paciente) sin el uso de equipo o instalación de laboratorio. Los sistemas y métodos son particularmente útiles para la detección de un analito de una muestra pequeña de fluido corporal para efectuar la diagnosis, prognosis, tratamiento y desarrollo de terapéuticos. Así, en una modalidad, la presente invención proporciona un sistema para detectar un analito en un fluido corporal de un sujeto. El sistema comprende (a) un dispositivo fluido, el dispositivo fluido comprende una unidad de recolección de muestra y un conjunto de análisis, en donde la unidad de recolección de muestra permite que una muestra de fluido de corporal de menos de 500 ul reaccione con reactivos contenidos dentro del conjunto de análisis para producir una señal detectable indicadora de la presencia del analito recolectado en la muestra de fluido corporal; (b) un conjunto de lector que comprende un conjunto de detección para detectar la señal detectable y (c) un conjunto de comunicación para transmitir la señal detectada a un dispositivo externo. En otra modalidad, la presente invención proporciona un sistema que comprende un dispositivo fluido. El dispositivo fluido comprende los siguientes elementos: (a) una unidad de recolección de muestra y un conjunto de análisis, en donde la unidad de recolección de muestras permite que una muestra de fluido corporal reaccione con reactivos contenidos dentro del conjunto de análisis en base a un protocolo transmitido de un dispositivo externo para producir una señal detectable indicadora de la presencia del analito; (b) un conjunto de lector que comprende un conjunto de detección para detectar la señal detectable y (c) un conjunto de comunicación para transmitir la señal detectada a un dispositivo externo. En un aspecto, el sistema emplea un protocolo transmitido de un dispositivo externo, preferiblemente por medio de un dispositivo inalámbrico tal como un teléfono celular. En otro aspecto, el dispositivo fluido comprende además un identificador para proporcionar la identidad del dispositivo fluido que está adaptado para disparar la transmisión del protocolo. En donde se desea, el protocolo puede variar dependiendo de la identidad del dispositivo fluido que es reconocible por un detector de identificador. La presente invención también proporciona un método para usar los sistemas y otros dispositivos proporcionados en la presente. En una modalidad, la presente invención proporciona un método para detectar un analito en un fluido corporal de un sujeto. El método involucra las etapas de (a) proporcionar el sistema sujeto, (b) permitir que una muestra de fluido corporal reaccione con los reactivos contenidos dentro del conjunto de análisis para producir una señal detectable indicadora de la presencia del analito y (c) detectar la señal detectable. En donde se desee, el método puede comprender además la etapa de cuantificar la cantidad del analito presente en el fluido corporal . El método puede también comprender la etapa de comparar la cantidad del analito presente en el fluido biológico por una cantidad predeterminado del analito. También opcionalmente incluido en el método está tomar una acción médica cuando la cantidad del analito presente en el fluido corporal es estadísticamente diferente de la cantidad predeterminada. La acción médica puede involucrar notificar una farmacia que una prescripción para tal sujeto necesita ser alterada. La presente invención proporciona además un sistema para monitorear más de un parámetro farmacológico útil para determinar la eficacia y/o toxicidad de un agente terapéutico. El sistema comprende comúnmente (a) un dispositivo fluido que comprende un cartucho, el cartucho comprende por lo menos una unidad de recolección de muestras y un conjunto; en donde la unidad de recolección de muestras permite que una muestra de fluido corporal que comprende una pluralidad de analitos indicadores del más de un parámetro farmacológico para reaccionar con reactivos contenidos dentro del conjunto de análisis, la reacción produce señales detectables indicadoras de los valores de más de un parámetro farmacológico de la muestra de fluido corporal; (b) un conjunto de lector que comprende un conjunto de detección para detectar las señales detectables y (c) un conjunto de comunicación para transmitir las señales detectadas a un dispositivo externo. La presente invención también proporciona un método para usar tal sistema, en general, el método involucra las etapas de: (a) someter una muestra de fluido corporal de un sujeto administrado con el agente farmacéutico a un dispositivo de fluido para perfilar el más de un parámetro farmacológico, el dispositivo médico fluido comprende un cartucho, el cartucho comprende por lo menos una unidad de recolección de muestras y un conjunto de análisis que comprende el reactivo de reacción; (b) accionar el dispositivo de fluido y dirigir los reactivos de inmunoanálisis dentro del dispositivo fluido; (c) permitir que la muestra de fluido corporal reaccione con los reactivos de inmunoanálisis para producir señales detectables indicadoras de los valores de más de un parámetro farmacológico de la muestra y (d) detectar la señal detectable generada de la muestra de fluido corporal . Se proporciona además en la presente invención un método para monitorear automáticamente el apego o cumplimiento del paciente con un tratamiento médico que involucra un agente terapéutico. El método involucra (a) proporcionar una muestra de fluido corporal del paciente; (b) permitir que la muestra de fluido corporal reaccione con los reactivos de análisis en un dispositivo fluido para detectar un analito indicador del cumplimiento o no cumplimiento del tratamiento médico; (c) detectar la presencia o ausencia del analito; y (d) notificar al paciente o un práctico médico del apego o no apego (cumplimiento o no cumplimiento) . También se incluye un método empresarial para ayudar a un médico en proporcionar un tratamiento médico individualizado. El método involucra las etapas de (a) recolectar por lo menos un parámetro farmacológico de un individuo que recibe una medicación, la etapa de recolección es efectuada al someter una muestra de fluido corporal a reactivos contenidos en un dispositivo fluido, que es provisto al individuo para producir una señal detectable indicadora del por lo menos un parámetro farmacológico; (b) hacer referencia cruzada con la ayuda de registros médicos de computadora del individuo con por lo menos un parámetro farmacológico del individuo, ayudando mediante esto al técnico en proporcionar tratamiento médico individualizado. La presente proporciona un método empresarial para monitorear una prueba clínica de un agente farmacéutico. El método comprende comúnmente las etapas de (a) recolectar por lo menos un parámetro farmacológico de un sujeto en la prueba clínica en una pluralidad de intervalos de tiempo, la etapa de recolección es efectuada en cada intervalo de tiempo al someter una muestra de fluido corporal del sujeto a reactivos contenidos en un dispositivo de fluido, en donde el dispositivo de fluido es provisto al sujeto para producir señales detectables indicadoras de los valores del por lo menos un parámetro farmacológico en una pluralidad de intervalos de tiempo; (b) comparar los valores detectados con un valor de umbral predeterminado para el parámetro farmacológico; (c) notificar a un clínico y/o patrocinador involucrado en la prueba clínica cuando existe una discrepancia estadísticamente significativa entre los valores detectados y el valor de umbral . En una modalidad separada, la presente invención proporciona además un método para obtener datos farmacológicos útiles para determinar la eficacia y/o toxicidad de un agente terapéutico de un animal de prueba. El método involucra comúnmente las etapas de: (a) proporcionar un dispositivo de fluido que comprende por lo menos una unidad de recolección de muestras, un conjunto de análisis y una pluralidad de canales en comunicación fluida con la unidad de recolección de muestras y/o el conjunto de análisis; (b) permitir que una muestra de fluido biológico de menos de aproximadamente 50 ul reaccione con reactivos contenidos dentro del conjunto de análisis para producir una señal detectable generada de un analito recolectado inicialmente en la muestra que es indicadora de un parámetro farmacológico, y (c) detectar la señal detectable y (d) repetir las etapas de reacción y detección con una segunda muestra de fluido biológico del mismo animal de prueba. En todavía otra modalidad, el método utiliza animales de prueba que no son sometidos a anestesia. La presente invención proporciona un método para mejorar la exactitud de calibración de un sistema fluido, que comprende: (a) proporcionar un sistema para detectar un analito en un fluido corporal de un sujeto que comprende un dispositivo de fluido para proporcionar el fluido corporal, el dispositivo de fluido tiene un conjunto de calibración y un conjunto de lector para detectar la presencia del analito; (b) medir uno o más parámetros de una curva de calibración asociada con el dispositivo de fluido; (c) comparar el uno o más parámetros con los parámetros predeterminados asociados con el dispositivo de fluido; (d) ajustar una salida de señal por la proporción del uno o más parámetros y los parámetros predeterminados. La presente invención también proporciona un método para mejorar la calibración de un sistema fluido. El método involucra las etapas de: (a) medir una primera señal en una muestra original que comprende una cantidad conocida de un analito; (b) medir una segunda señal después de elevar la muestra original con una cantidad conocida del analito; (c) graficar la diferencia entre la primera y segunda señales contra un valor objetivo, en donde el valor objetivo es una señal esperada por la cantidad conocida del analito, y (d) llegar a un mejor ajuste de parámetros al minimizar la suma del cuadrado de las diferencias entre el valor objetivo y valores de analito calculados. Se proporciona además por la presente invención un método para detectar la confiabilidad de un análisis en cuanto a un analito en un fluido corporal con el uso de un dispositivo de fluido, que comprende: (a) proporcionar un sistema, el sistema comprende un dispositivo de fluido, el dispositivo de fluido comprende una unidad de recolección de muestras y un conjunto de análisis, en donde la unidad de recolección de muestras permite que una muestra de fluido corporal reaccione con los reactivos contenidos en el conjunto de análisis, para detectar la presencia de un analito en un fluido corporal de un sujeto y un conjunto de lector para detectar la presencia del analito; (b) detectar con un detector un cambio en parámetros de operación bajo los cuales el sistema opera normalmente. La presente invención proporciona además un método para efectuar un análisis de tendencia en cuanto a la concentración de un analito en un sujeto. El método involucra las etapas de: (a) proporcionar un dispositivo de fluido que comprende por lo menos una unidad de recolección de muestras, un conjunto de inmunoanálisis que contiene reactivos de inmunoanálisis, una pluralidad de canales en comunicación fluida con la unidad de recolección de muestras y/o el conjunto de inmunoanálisis; (b) accionar el dispositivo de fluido y dirigir los reactivos de inmunoanálisis dentro del dispositivo de fluido; (c) permitir que una muestra de fluido corporal de menos de aproximadamente 500 ul reaccione con los reactivos de inmunoanálisis contenidos en el conjunto de inmunoanálisis para producir una señal detectable indicadora de la presencia del analito en la muestra; (d) detectar la señal detectable generada del analito recolectado en la muestra de fluido corporal y (e) repetir las etapas (a) a (d) para un solo paciente en un período de tiempo para detectar concentraciones del analito, efectuando mediante esto el análisis de tendencia.

La presente invención proporciona un aparato para detectar un analito en un fluido biológico de un sujeto, en donde una pluralidad de sitios de reacción que comprenden una barrera óptica. En un aspecto, los reactivos enlazados en por lo menos un sitio de reacción son distribuidos desigualmente, por ejemplo estando localizados alrededor del centro del sitio de reacción. La presente invención también proporciona un método para usar tal aparato. Finalmente, la presente invención proporciona un método para la manufactura de un dispositivo de fluido para detectar un analito en un fluido biológico de un sujeto. El método involucra las etapas de: (a) proporcionar una pluralidad de capas de un dispositivo de fluido; (b) soldar ultrasónicamente las capas conjuntamente, de tal manera que existe una red fluida entre una unidad de recolección de muestras, por lo menos una cámara de reactivos, por lo menos un sitio de reacción y por lo menos una cámara de desperdicio. En la práctica de la presente invención, los reactivos contenidos en los dispositivos pueden comprender reactivos de inmunoanálisis. En un aspecto, los reactivos de inmunoanálisis detectan un microorganismo seleccionado del grupo que consiste de bacterias, virus, hongos y protozoarios. En otro aspecto, los reactivos de inmunoanálisis pueden detectar una glicoproteína de polipéptido, polisacárido, lípido, ácido nucleico y una combinación de los mismos. En otro aspecto, los reactivos de inmunoanálisis detectan un miembro seleccionado del grupo que consiste de fármaco, metabolito de fármaco, biomarcador indicador de una enfermedad, marcador específico del tejido y biomarcador específico por una célula o tipo de célula. En todavía otro aspecto, los reactivos de inmunoanálisis generan señales luminiscentes, preferiblemente señales quimioluminiscentes. Cuando se desee, el presente dispositivo de fluido puede ser , configurado para detectar una pluralidad de analitos. La pluralidad de analitos pueden ser identificados por señales distintas detectables en un intervalo de 3 órdenes de magnitud. La señal detectable puede ser una señal luminiscente, en las que se incluyen pero no limitados a fotoluminiscencia, electroluminiscencia, quimioluminiscencia, fluorescencia, fosforescencia.

INCORPORACIÓN POR REFERENCIA Todas las publicaciones y solicitudes de patente mencionadas en esta especificación son incorporadas por referencia a la misma extensión como si cada publicación o solicitud de patente individual fuera indicada específica e individualmente para ser incorporada por referencia.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS Los nuevos elementos de la invención son resumidos con particularidad en las reivindicaciones adjuntas. Un mejor entendimiento de los elementos y ventajas de la presente invención se obtendrá por referencia a la siguiente descripción detallada que resume modalidades ilustrativas en las cuales se utilizan los principios de la invención y las figuras adjuntas de las cuales: La figura 1 es una modalidad que muestra múltiples componentes del sistema presente; La figura 2 muestra diferentes capas de un dispositivo de fluido ejemplar antes del montaje; Las figuras 3 y 4 ilustran la red de fluido dentro de un dispositivo de fluido ejemplar; La figura 5 muestra una vista superior, lateral e inferior de cámaras de reactivo ejemplares de la presente invención; La figura 6 ilustra una vista lateral ejemplar de una cámara de reactivos en comunicación fluida con un dispositivo de fluido; La figura 7 ilustra cámaras de reactivo ejemplares siendo llenadas con reactivos. Las figuras 8 y 9 ilustran una vista lateral de un dispositivo de fluido ejemplar en combinación con elementos de accionamiento del conjunto de lector. La figura 10 compara un análisis de dos etapas con un análisis de enlace competitivo. La figura 11 muestra un inmunoanálisis de enzima quimioluminiscente de dos etapas ejemplar. La figura 12 muestra la sensibilidad incrementada del inmunoanálisis de enzima de quimioluminiscencia de dos etapas. La figura 13 muestra la habilidad de TOSCA para analizar menos de muestras ideales y mantener sensibilidad deseada. Las figuras 14A-C ilustran canales de fluido ejemplares entre sitios de reacción. Las figuras 15A y 15B ilustran sitios de reacción para reducir la señal de conjugados sin enlazar remanentes en sitios de reacción. La figura 16 muestra un atrapador de burbujas ejemplar o removedor para impedir que las burbujas entren a los sitios de reacción. La figura 17 muestra la mejora de sensibilidad obtenida utilizando TOSCA en comparación con el enlace competitivo. La figura 18 muestra dos analitos, metabolito de prostaciclina y metabolito de tromboxano, que han sido identificados y cuantificados y sus concentraciones son diferentes por más de 3 órdenes de magnitud. La figura 19 muestra un diagrama de flujo ejemplar de un método empresarial para monitorear una prueba clínica de un agente terapéutico. La figura 20 muestra la compartición simultánea de la información detectada con un dispositivo de fluido con varias partes interesadas. La figura 21 muestra datos de respuesta de dosis de análisis típico para un análisis de dos etapas para TxB2. La figura 22 muestra respuestas de dosis calculadas con y sin errores en parámetros de calibración. La figura 23 muestra los errores de concentración calculados producidos por la mala estimación del 1% de los valores de calibración A y B. La figura 24 ilustra la calibración utilizando un procedimiento "diferencial" . La figura 25 muestra la verificación de la calibración utilizando el método de "1 pico de punta" (escala logarítmica) . La figura 26 muestra la verificación de calibración utilizando el m de "1 pico de un punto" (escala lineal) . La figura 27 muestra la dosis-respuesta de análisis calibrado utilizando una muestra de plasma con una concentración de TxB2 muy baja. La figura 28 muestra el uso de recuperación de pico para eliminar errores de calibración del parámetros "C" . La figura 29 ilustra el cálculo de diferencias en concentración entre dos muestras. La figura 30 ilustra un análisis de muestras de plasma.

La figura 31 muestra el curso de tiempo de la generación de señales de análisis. La figura 32 muestra el impacto de cambio en el parámetro de calibración "A" en la calibración de análisis. La figura 33 muestra cómo un índice terapéutico de referencia sería calculado. La figura 34 ilustra el cálculo del índice terapéutico . La figura 35 muestra múltiple análisis de regresión del índice terapéutico calculado. La figura 36 es una ilustración de la relación entre la concentración del fármaco, analito y biomarcador medida y el índice terapéutico. La figura 37 es una ilustración de la aplicación de esta invención para minimizar reacciones de fármaco adversas. La figura 38 muestra valores de entrada del paciente ejemplares . La figura 39 muestra el uso de un índice terapéutico para seguir el avance del tratamiento en un paciente de autismo.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Sistema Un aspecto de la presente invención es un sistema para detectar un analito en una muestra de fluido corporal. El sistema es capaz de detectar y/o cuantificar analitos que están asociados con procesos biológicos específicos, condiciones fisiológicas, alteraciones o etapas de alteraciones. El presente sistema comprende un dispositivo de fluido que tiene uno o más de los siguientes componentes: una unidad de recolección de muestras, un conjunto de análisis, un conjunto de lector y un conjunto de comunicación. La unidad de recolección de muestras permite comúnmente que una muestra de fluido corporal recolectada de un sujeto reaccione con reactivos contenidos dentro del conjunto de análisis para generar una señal indicadora de la presencia del analito de interés. El conjunto de lector detecta la señal, que es luego transmitida vía el conjunto de comunicación a un dispositivo externo para procesamiento adicional . Cualesquier fluidos corporales se sospecha que contienen un analito de interés pueden ser usados en conjunción con el sistema o dispositivo presentes. Los fluidos corporales comúnmente empleados incluyen pero no están limitados a sangre, suero, saliva, orina, fluido gástrico y digestivo, lágrimas, deposición, semen, fluido vaginal, fluidos intersticiales derivados de tejido tumoroso y fluido cerebroespinal. En una modalidad preferida, los fluidos corporales son usados directamente para detectar los analitos presentes en el mismo con el dispositivo fluido sujeto sin procesamiento adicional. Sin embargo, en donde se desea, los fluidos corporales pueden ser pre-tratados antes de efectuar el análisis con dispositivos fluidos presentes. La elección de pre-tratamientos dependerá del tipo de fluido corporal usado y/o la naturaleza del analito bajo investigación. Por ejemplo, en donde el analito está presente a bajo nivel en una muestra de fluido corporal, la muestra puede ser concentrada vía cualesquier medios convencionales para enriquecer el analito. Los métodos para concentrar un analito incluyen pero no están limitados a secado, evaporación, centrifugación, sedimentación, precipitación y amplificación. En donde el analito es un ácido nucleico, puede ser extraído utilizando varias enzimas líticas o soluciones químicas de acuerdo con los procedimientos resumidos en Sambrook et al., ("Molecular Cloning: A Laboratory Manual"), o utilizando resinas de enlace de ácido nucleico siguiendo las instrucciones adjuntas proporcionadas por los fabricantes. En donde el analito es una molécula presente sobre o dentro de una célula, la extracción puede ser efectuada utilizando agentes de lisis en los que se incluyen pero no limitados a detergente desnaturalizante tal como SDS o detergente no desnaturalizante tal como thesit, desoxilato de sodio, tritón X-100 y tween-20. El volumen de fluido corporal a ser usado por un dispositivo de fluido de la presente invención es en general menor de aproximadamente 500 microlitros, comúnmente entre alrededor de 1 y 100 microlitros. En donde se desea, una muestra de 1 a 50 microlitros o 1 a 10 microlitros puede ser usada para detectar un analito utilizando el cultivo de fluido presente. Un fluido corporal puede ser extraído de un paciente y traído al dispositivo de fluido en una variedad de maneras, en las que se incluyen pero no limitadas a lanceta, inyección o pipeteado. En una modalidad, una lanceta perfora la piel y extrae la muestra al dispositivo de fluido utilizando por ejemplo gravedad, acción capilar, alteración o fuerza de vacío. La lanceta puede ser parte del dispositivo de fluido o parte de un conjunto de lector o como un compuesto autónomo. En donde se necesita, la lanceta puede ser activada mediante una variedad de mecanismo de activación mecánico, eléctrico, electromecánico o cualquier otro mecanismo de activación conocido o cualquier combinación de tales métodos. En otra modalidad en donde ningún mecanismo activo es requerido, un paciente puede simplemente proporcionar un fluido corporal al dispositivo de fluido, tal como por ejemplo, podría ocurrir con una muestra saliva. El fluido recolectado puede ser colocado en la unidad de recolección de muestra dentro del dispositivo de fluido. En todavía otra modalidad, el dispositivo de fluido comprende por lo menos una microaguja que perfora la piel. La microaguja puede ser usada con un dispositivo de fluido solo o puede perforar la piel después que el dispositivo de fluido es insertado a un conjunto de lector.

En algunas modalidades, una microaguja es de aproximadamente el tamaño de un cabello humano y tiene un microdepósito o cubeta integrado. La microaguja puede penetrar sin dolor la piel y extraer una pequeña muestra de sangre. Más preferiblemente, la microaguja recolecta alrededor de 0.01 a aproximadamente 1 microlitro, preferiblemente alrededor de 0.05 a aproximadamente 0.5 microlitros y más de preferencia de alrededor de 0.1 a alrededor de 0.3 microlitros de sangre capilar. En algunas modalidades, una microaguja puede ser construida de silicio y es de aproximadamente 10 a aproximadamente 200 mieras de diámetro, preferiblemente de alrededor de 50 a alrededor de 150 mieras de diámetro y más preferiblemente alrededor de 100 mieras de diámetro, haciendo su aplicación a la piel virtualmente sin dolor. Para asegurar que un capilar sea realmente golpeado por una aguja, una pluralidad de microagujas pueden ser usadas para la recolección de muestras. Tales microagujas pueden ser del tipo comercializado por Pelikan (Palo Alto, California) y/o Kumetrix (Union City, California) . La patente estadounidense No. 6,503,231 revela microagujas que pueden ser usadas con la presente invención. Los procesos de microfabricación que pueden ser usados en la fabricación de las microagujas reveladas en la presente incluyen sin limitación litografía; técnicas de ataque por ácido tales como ataque por ácido químico húmedo, seco y remoción de capa fotoprotectora; oxidación térmica de silicio; electrodeposición y deposición sin electrodos; procesos de difusión tales como difusión de boro, fósforo, arsénico y antimonio; implantación de ion; deposición de película, tal como evaporación (filamento, haz de electrones, centelleo y sombreado y cobertura por etapas) , bombardeo iónico, deposición de vapor químico (CVD) , epotaxi (fase de vapor, fase líquida y haz molecular) , electrodeposición, serigrafía y laminación. Véase en general Jaeger, Introduction to Microelectronic Fabrication (Addison- esley Publishing Co., Reading Mass. 1988); Runyan, et al., Semiconductor Integrated Circuit Processing Technology (Addison-Wesley Publishing Co. Reading Mass. 1990); Proceedings of the IEEE Micro Electro Mechanical Systems Conference 1987-1998; Rai-Choudhury, ed. , Handbook of Microlithography, Micromachining & Microfabrication (SPIE Optical Engineering Press, Bellingham, Wash. 1997). Alternativamente, las microagujas pueden ser moldeadas en plaquetas de silicio y luego depositadas utilizando técnicas de cote de alambre convencionales con níquel, oro, titanio o varios otros metales biocompatibles. En algunas modalidades, las microagujas pueden ser adaptadas de biopolímeros. En algunas modalidades, las microagujas pueden ser fabricadas y empleadas para los dispositivos reivindicados de acuerdo con los métodos de Mukerjee, et al., Sensors and Actuators A: Physical, Volume 114, Issues 2-3, 1 Sep. 2004, Páginas 267-275.

En modalidades preferidas, una microaguja es usada solo una vez y luego descartada. En algunas modalidades, un accionador mecánico puede insertar y extraer la aguja del paciente, desechar la aguja usada y recargar una nueva microaguja. Las tecnologías mecánicas desarrolladas y manufacturadas en muy altos volúmenes para unidades de disco muy pequeño tienen un conjunto similar de movimiento y requerimientos de bajo costo. En modalidades preferidas, el accionador es un dispositivo MEMS (sistema electromecánico micro-maquinado) fabricado utilizando procesos por lotes semejantes a semiconductor. Tales accionadores incluyen sin limitación dispositivos de aleación de níquel-titanio, neumáticos o dispositivos piezoeléctricos. En algunas modalidades, las microagujas son de alrededor de 1 miera a alrededor de 10 mieras de espesor, preferiblemente de alrededor de 2 mieras a alrededor de 6 mieras de espesor y más preferiblemente de alrededor de 4 mieras de espesor. En algunas modalidades, las microagujas son de alrededor de 10 mieras a alrededor de 100 mieras de altura, preferiblemente de alrededor de 30 mieras a alrededor de 60 mieras de altura y más preferiblemente de alrededor de 40 mieras de altura. La figura 1 ilustra un sistema ejemplar de la presente invención. Como se ilustra, un dispositivo de fluido proporciona un fluido corporal de un paciente y puede ser insertado a un conjunto de lector. El dispositivo de fluido puede tomar una variedad de configuraciones y en algunas modalidades, el dispositivo de fluido puede estar en forma de un cartucho. Un detector identificador (ID) puede detectar un identificador en el dispositivo de fluido. El detector identificador se comunica con un conjunto de comunicación vía un controlador que transmite el identificador a un dispositivo externo. En donde se desea, el dispositivo externo envía un protocolo almacenado en el dispositivo externo al conjunto de comunicación en base al identificador. El protocolo puede ser puesto en operación en el dispositivo de fluido puede comprender instrucciones al controlador del conjunto de lector que efectúe el protocolo en el dispositivo de fluido, en los que se incluyen pero no limitados a un análisis particular a ser ejecutado y un método de detección a ser efectuado. Una vez que el análisis es efectuado en el dispositivo de fluido, una señal indicadora de un analito en el fluido corporal una vez que el análisis es efectuado en el dispositivo de fluido, una señal indicadora de un analito en la muestra de fluido corporal es generada y detectada mediante un conjunto de detección. Luego la señal detectada puede ser comunicada al conjunto de comunicación, en donde puede ser transmitida al dispositivo externo para procesamiento, en los que se incluyen sin limitación, cálculo de la concentración del analito en la muestra. La figura 2 ilustra capas ejemplares de un dispositivo de fluido de acuerdo con la presente invención antes del montaje del dispositivo de fluido que es revelado en más detalle posteriormente en la presente. Las figuras 3 y 4 muestran una vista superior e inferior, respectivamente, de un dispositivo de fluido ejemplar después que el dispositivo ha sido montado. Las diferentes capas son diseñadas y montadas para formar una red de canal de fluido tridimensional . Una unidad 4 de recolección de muestras proporciona una muestra de fluido corporal de un paciente. Como se explicará en detalle adicional posteriormente en la presente, un conjunto de lector del conjunto de lector comprende elementos de accionamiento (no mostrado) que pueden accionar el dispositivo de fluido para iniciar y dirigir el flujo de una muestra de fluido corporal y reactivos de análisis en el dispositivo de fluido. En algunas modalidades, los elementos de accionamiento provocan primero el flujo de la muestra en el dispositivo de fluido 2 desde la unidad 4 de recolección de muestras a los sitios de reacción 6, hacen mover la muestra hacia arriba en el dispositivo de fluido desde el punto G' al punto G y luego a la cámara de desperdicio 8. Luego los elementos de accionamiento inician el flujo de reactivo desde las cámaras de reactivo 10 al punto B' , punto C y punto D' y luego hacia arriba a los puntos B, C y D, respectivamente, luego al punto A, al punto A' y luego a la cámara de desperdicio 8 de la misma manera como la muestra. Una unidad 4 de recolección de muestras en un dispositivo de fluido 2 puede proporcionar una muestra de fluido corporal de un paciente mediante cualquiera de los métodos descritos anteriormente. Si es necesario, la muestra puede ser procesada primero al diluir el fluido corporal de una cámara de dilución o puede ser filtrada al separar el plasma de las células de sangre roja en una cámara de filtración. En algunas modalidades, la unidad de recolección de muestras, cámara de dilución y cámara de filtración pueden ser el mismo componente y en algunas modalidades, pueden ser componentes diferentes o cualquiera de los dos pueden ser el mismo componente y el otro puede ser un componente separado. En algunas modalidades, puede haber más de una unidad de recolección de muestras en el dispositivo de fluido. En algunas modalidades, puede ser deseable detectar la presencia de analitos sobre una superficie celular, dentro de una membrana celular o al interior de una célula. La dificultad de detectar tales analitos es que las células y otros elementos formados están en partículas y los componentes de las células no interactúan fácilmente con la química de análisis tradicionales que están diseñadas para operar sobre analitos en solución. Los analitos de superficie celular reaccionan lenta e ineficientemente con las sondas pegadas a la superficie y los analitos al interior de las células pueden no reaccionar con la sondas enlazadas. Para permitir la detección de tales analitos, en algunas modalidades, el dispositivo de fluido puede incluir un conjunto de lisis para someter a lisis las células presente en la muestra de fluido corporal. El conjunto de lisis puede ser incorporado con la unidad de recolección de muestras, una cámara de dilución y/o cámara de filtración. En algunas modalidades, la unidad de recolección de muestras, cámara de dilución y componente de lisis están dentro del mismo elemento en el dispositivo de fluido. En algunas modalidades, el componente de lisis puede ser incorporado con un reactivo de análisis descrito posteriormente en la presente. En donde se desee, los agentes de lisis pueden ser impregnados y luego secados a esteras porosas, esteras de fibra de vidrio, fundentes alcalinos sinterizados o partículas tales como Porex, papel u otro material similar. Los agentes de lisis pueden ser secados sobre superficies planas. Los agentes de lisis pueden también ser disuelto en diluyentes líquidos u otros reactivos líquidos. En modalidades preferidas, materiales porosos son usados para almacenar los agentes de lisis debido a que pueden almacenar un agente de lisis en forma seca probablemente a ser muy estable. También facilitan la mezcla de la muestra de fluido corporal con el agente de lisis al proporcionar una trayectoria tortuosa para la muestra a medida que se mueve a través del material poroso. En modalidades preferidas, tales materiales porosos tienen una forma de disco con un diámetro mayor que su espesor. En algunas modalidades, los agentes de lisis pueden ser secados sobre materiales porosos utilizando liofilización, evaporación pasiva, exposición a gases que fluyen secos calientes u otros métodos conocidos . Una variedad de agentes de lisis están disponibles en el arte y son apropiados para uso en relación con el dispositivo de fluido presente. Agentes de lisis preferidos son no desnaturalizantes, tales como detergentes no desnaturalizantes. Ejemplos no limitantes de detergentes no desnaturalizantes incluyen thesit, desoxilato de sodio, tritón X-100 y tween-20. Los agentes son preferiblemente no volátiles en modalidades en donde los agentes son impregnados a materiales porosos sólidos. En algunas modalidades, los agentes de lisis son mezclados conjuntamente. Otros materiales pueden ser mezclados con los agentes de lisis para modificar los efectos líticos. Tales materiales ejemplares pueden ser, sin limitación, soluciones reguladoras de pH, sales y proteínas. En modalidades preferidas, los agentes de lisis serán usados en cantidades que están en exceso de la cantidad mínima requerida para someter a lisis las células. En algunas modalidades, los agentes de lisis serán usados que pueden someter a lisis tanto células blancas como rojas. Una de las ventajas de la presente invención es que cualesquier reactivos necesarios para efectuar un análisis en un dispositivo de fluido de acuerdo con la presente invención están preferiblemente a bordo o alojados dentro del dispositivo de fluido antes, durante y después del análisis. De esta manera, la única entrada o salida del dispositivo de fluido es preferiblemente la muestra de fluido corporal inicialmente provista por el dispositivo de fluido. Este diseño también ayuda a crear un dispositivo de fluido fácilmente desechable en donde todos los fluidos o líquidos permanecen en el dispositivo. El diseño a bordo también impide fugas del dispositivo de fluido al conjunto de lector que debe permanecer libre de contaminación del dispositivo de fluido. En una modalidad preferida, hay por lo menos una cámara de reactivos. En algunas modalidades, pueden haber dos, tres, cuatro, cinco, seis o más o cualquier número de cámaras de reactivo como sea necesario para satisfacer los propósitos de la invención. Una cámara de reactivo está preferiblemente en comunicación fluida con por lo menos un sitio de reacción y cuando el dispositivo de fluido es accionado como se describe en la presente, los reactivos contenidos en la cámara de reactivo son liberados a los canales de fluido dentro del dispositivo de fluido. Los reactivos de acuerdo con la presente invención incluyen sin limitación soluciones reguladoras del pH de lavado, sustratos de enzima, soluciones reguladoras del pH de dilución, conjugados, conjugados enzima-marcados, amplificadores de ADN, diluyentes de muestra, soluciones de lavado, reactivos de pre-tratamiento de muestra en las que se incluyen aditivos tales como detergentes, polímeros, agentes quelantes, reactivos de enlace de albúmina, inhibidores de enzima, enzimas, anticoagulantes, agentes aglutinantes de célula roja, anticuerpos u otros materiales necesarios para efectuar un análisis sobre un dispositivo de fluido. Un conjugado de enzima puede ser ya sea un anticuerpo policlonal o anticuerpo monoclonal marcado con una enzima que puede producir una señal detectable después de la acción con un sustrato apropiado. Ejemplos no limitantes de tales enzimas son fosfatasa alcalina y peroxidasa de rábano. En algunas modalidades, los reactivos comprenden reactivos de inmunoanálisis. En algunas modalidades, una cámara de reactivos contiene aproximadamente alrededor de 50 µl a alrededor de 1 ml de fluido. En algunas modalidades, la cámara puede contener alrededor de 100 µl de fluido. El volumen de líquido en una cámara de reactivo puede variar dependiendo del tipo de análisis que es ejecutado o la muestra de fluido corporal provista. En algunas modalidades, los reactivos son almacenados inicialmente secos y licuados después del inicio del análisis es corrido en el dispositivo de fluido. Las figuras 5 y 6 ilustran una modalidad ejemplar de una cámara de reactivos sellada. La figura 5 muestra una vista superior, lateral y de fondo de una cámara de reactivos. Una capa superior 11 contiene una pluralidad de burbujas o sacos 13. Una capa inferior 15 tiene una superficie del fondo que está enlazada a la base 17 del dispositivo de fluido como se muestra en la figura 6. La capa del fondo 15 tiene una pluralidad de canales de fluido 19 dispersados a través de toda la superficie, en donde cada canal recorre la capa de fondo 15. El fluido en la cámara de reactivo está contenida dentro de la cámara mediante el sello estallable a presión 21 entre el canal de fluido 19 y la cámara 13. El sello estallable 21 está diseñado de tal manera que a una presión predeterminada el sello estalla permitiendo que el fluido en la cámara 13 fluya hacia fuera a un canal de fluido 19. La figura 7 muestra un proceso ejemplar de llenado de la cámara de reactivo 13 con por ejemplo reactivos. Las cámaras de reactivo 13 pueden ser llenadas con un fluido utilizando un canal de llenado y un canal de extracción al vacío. El proceso de llenado de los reactivos involucra primero remover todo el aire de la cámara. Esto se hace al extraer un vacío a través del canal de extracción de vacío. Una vez que el vacío es extraído, un sello permanente es colocado entre el canal de llenado y el canal de extracción de vacío. Enseguida, los reactivos requeridos son surtidos a la cámara a través de la cámara de llenado. Luego un sello permanente es colocado entre la cámara y el canal de llenado. Esto asegura que cuando la cámara está comprimida, el fluido puede fluir en solamente una dirección, hacia el sello estallable. Si la compresión imparte una presión más grande que la presión de estallido del sello, el sello estalla y el fluido fluye al canal de fluido. Las figuras 8 y 9 ilustran una modalidad de un dispositivo de fluido en operación con elementos de accionamiento como se describe en la presente. El dispositivo de fluido 2 contiene una cámara de reactivos 10 y una capa de hoja de metal estallable 12 que encierra la cámara de reactivos. Por encima de la hoja metálica estallable 12 se encuentra una porción del circuito de microfluido 14. Una cubierta dura pero elastomérica superior actúa como la capa superior del dispositivo de fluido 2. El conjunto de lector incluye una placa de accionamiento de válvula 18. Anexada de manera segura a la placa 18 se encuentra una aguja sin centro 20 de tal manera que cuando la placa es abatida, el borde agudo de la aguja se pone en contacto con la cubierta elastomérica 16. La cubierta superior podría también ser fabricada de material de silicona flexible que actuaría como un sello impermeable a la humedad. Esta modalidad también proporciona una solución a la evaporación de líquido y fugas de un dispositivo de fluido al aislar cualquier reactivo líquido en el dispositivo de fluido de cualesquier reactivos secos hasta que el análisis es iniciado. En modalidades preferidas, la cámara de reactivos y unidad de recolección de muestras son conectadas fluidamente a los sitios de reacción en donde las sondas enlazadas pueden detectar un analito de interés en la muestra de fluido corporal utilizando el análisis. Luego un sitio de reacción podría proporcionar una señal indicadora de la presencia del analito de interés, que puede luego ser detectado mediante un dispositivo de detección descrito en detalle posteriormente en la presente. En algunas modalidades, los sitios de reacción son planos pero pueden tomar una variedad de configuraciones de superficie alternativa. El sitio de reacción forma preferiblemente un soporte rígido sobre el cual un reactivo puede ser inmovilizado. La superficie del sitio de reacción es también escogida para proporcionar características de absorción de luz apropiadas. Por ejemplo, el sitio de reacción puede ser vidrio funcionalizado, Si, Ge, GeAs, GaP, Si02, SiN4, silicio modificado o cualquiera de una amplia variedad de geles o polímeros tales como (poli) tetrafluoroetileno, (poli) viniliden-difluoruro, poliestireno, policarbonato, polipropileno, o combinaciones de los mismos. Otros materiales apropiados pueden ser usados de acuerdo con la presente invención. Un reactivo inmovilizado en un sitio de reacción puede ser cualquier cosa útil para detectar un analito de interés en una muestra de fluido corporal. Por ejemplo, tales reactivos incluyen sin limitación sondas de ácido nucleico, anticuerpos, receptores de membrana celular, anticuerpos monoclonales y antisuero reactivo con un analito específico.

Varios reactivos disponibles comercialmente tales como un huésped de anticuerpos policlonales y monoclonales desarrollados específicamente para analitos específicos pueden ser usados. Aquel de habilidad en el arte apreciará que hay muchas maneras de inmovilizar varios reactivos sobre un soporte en donde la reacción puede tomar lugar. La inmovilización puede ser covalente o no covalente, vía una porción enlazadora o derivándolos a una porción inmovilizada. Estos métodos son bien conocidos en el campo de síntesis en fase sólida y micro-disposiciones (Beier et al., Nucleic Acids Res. 27:1970-1-977 (1999). Porciones de enlace ejemplares no limitantes para anexar ya sea ácidos nucleicos o moléculas proteináceas tales como anticuerpos a un soporte sólido incluyen enlaces de estreptavidina o avidina/biotina, enlaces de carbamato, enlaces de éster, amida, tioléster, tiourea (N) -funcionalizada, maleimida funcionalizada, amino, disulfuro, amida, enlaces de hidrazona entre otros. Además, una porción de sililo puede ser anexada a un ácido nucleico directamente a un sustrato tal como vidrio utilizando métodos conocidos en el arte. En algunas modalidades, pueden haber más de un sitio de reacción que pueden permitir la detección de múltiples analitos de interés de la misma muestra de fluido corporal. En algunas modalidades, hay 2, 3, 4, 5, 6 ó más sitios de reacción o cualquier otro número de sitios de reacción como pueda ser necesario para llevar a cabo el propósito de la invención. En modalidades con múltiples sitios de reacción en un dispositivo de fluido, cada sitio de reacción puede ser inmovilizado con un reactivo diferente de un reactivo en un sitio de reacción diferente. En un dispositivo de fluido con por ejemplo, tres sitios de reacción, pueden haber tres sondas diferentes, cada una enlazada a un sitio de reacción diferente para enlazarse a tres analitos diferentes de interés en la muestra. En algunas modalidades, pueden haber reactivos diferentes enlazados a un solo sitio de reacción si por ejemplo, un CCD con múltiples áreas de detección fueron usadas como el dispositivo de detección, de tal manera que múltiples analitos diferentes podrían ser detectados en un solo sitio de reacción. La capacidad de usar múltiples sitios de reacción además de múltiples sondas diferentes en cada sitio de reacción permite las características de alto rendimiento de la presente invención. La presente invención permite la detección de múltiples analitos en el mismo dispositivo de fluido. Si se ponen en operación análisis con diferentes intensidades luminiscentes en sitios de reacción adyacentes, los fotones (señales que emanan de las reacciones) pueden viajar de un sitio de reacción a un sitio de reacción adyacente, ya que los sitios de reacción pueden ser construidos de materiales que permiten que fotones viajen a través de los canales de fluido que conectan los sitios. Esta diafonía óptica puede comprometer la exactitud de los fotones detectados. Las figuras 14B y 14C ilustran diferentes modalidades de esta invención que pueden eliminar o reducir la cantidad de diafonía óptica. Los canales no lineales 22 no permitirán que los fotones (luz) pasen a través de los mismos. De aquí, modalidades tales como aquellas mostradas en las figuras 14B y 14C no permitirían que señales de un sitio de reacción contaminen una señal producida de un sitio adyacente de la cual un dispositivo de detección puede estar detectando. Adicionalmente, los bordes o paredes de un sitio de reacción pueden ser construidos utilizando materiales ópticamente opacos de tal manera que la luz no escapará de las cavidades. En algunas modalidades, los sitios de reacción son blancos u opacos. En algunas modalidades, los conjugados sin enlazar pueden necesitar ser lavados de un sitio de reacción para impedir que los conjugados sin enlazar activen el sustrato y produzcan una señal inexacta. Puede ser difícil remover conjugados que se sellan a los bordes de los sitios de reacción en tal dispositivo de fluido, y por ejemplo, no hay un exceso de una solución de lavado. Para disminuir la señal contribuida de los conjugados sin enlazar pegados al borde de un sitio de reacción, puede ser ventajoso expandir el borde del sitio de reacción o radio de pared con el fin de distanciar el conjugado pegado del área de detección real deseada, representada por el reactivo enlazado. Las figuras 15A y 15B ilustran este concepto. El sitio de reacción 6 contiene la superficie de reacción 24 y el borde o superficie de pared 26. En la figura 15B, una superficie del borde 26 es mostrada a una distancia mayor del centro del sitio de reacción 6 que es la superficie del borde del diseño del arte previo. Esto permite que los conjugados sin enlazar se adhieran a la superficie del borde y estén distanciados de los conjugados enlazados, que están concentrados más cercanos al centro del sitio de reacción 6. En modalidades preferidas de la invención, el dispositivo de fluido incluye por lo menos una cámara de desperdicio para atrapar o capturar todos los líquidos después que han sido usados en el análisis. En modalidades preferidas, hay más de una cámara de desperdicio, por lo menos una de las cuales va a ser usada con un conjunto de calibración descrito posteriormente en la presente. Las cámaras de desperdicio a bordo también permite que el dispositivo sea fácilmente desechable. La cámara de desperdicio está preferiblemente en comunicación fluida con por lo menos un sitio de reacción. Por lo menos uno de estos canales tendrá comúnmente dimensiones de sección transversal pequeña. En algunas modalidades, las dimensiones son de alrededor de 0.01 mm a aproximadamente 5 mm, preferiblemente de alrededor de 0.03 mm a alrededor de 3 mm y más preferiblemente de alrededor de 0.05 mm a alrededor de 2 mm. Los canales de fluido en el dispositivo de fluido pueden ser creado por ejemplo sin limitación, mediante moldeo por inyección de precisión, ataque por láser o cualquier otra técnica conocida en el arte para llevar a cabo el propósito de la invención. Uno de los problemas comunes encontrados en un sistema de análisis a base de microfluido es la presencia de burbujas de aire o gas. Es extremadamente difícil remover una burbuja una vez que está atrapada dentro de un canal de fluido. Las burbujas presentes en cualquier parte en el circuito de fluido, particularmente en los sitios de reacción pueden comprometer las capacidades de análisis. Una burbuja puede terminar ocupando parte de toda el área de superficie de un sitio de reacción. Consecuentemente, el lector puede terminar leyendo una señal muda o ninguna señal. La figura 16 ilustra una modalidad en donde una burbuja podría ser atrapada en un filtro 28 antes de que llegue a un sitio de reacción 6. Un atrapador de burbujas 28 podría ser colocado entre una unidad de recolección de muestras 4 y el sitio de reacción 6. El atrapador de burbujas puede tener tal geometría de tal manera que las burbujas tienden a migrar hacia los bordes de esta superficie y permanecen pegadas en aquel servicio, mediante esto no entrando a los sitios de reacción. Para asegurar que un conteo de fotones dado producido en un sitio de reacción se correlaciona con una concentración exacta de un analito de interés en una muestra, es preferiblemente ventajoso calibrar el dispositivo de fluido antes de detectar los fotones. La calibración de un dispositivo de fluido en el punto de manufactura por ejemplo puede ser insuficiente para asegurar que una concentración de analito exacta sea determinada debido a que un dispositivo de fluido puede ser embalado antes del uso y puede sufrir cambios en temperatura, por ejemplo, de tal manera que una calibración efectuada en la manufactura no toma efecto en cualesquier cambios subsecuentes a la estructura del dispositivo de fluido o reactivos contenidos en el mismo. En una modalidad preferida de la presente invención, un dispositivo de fluido tiene un conjunto de calibración que imita el conjunto de análisis en componentes y diseño excepto que una muestra no es introducida al conjunto de calibración. Refiriéndose a la figura 3 y 4, un conjunto de calibración ocupa alrededor de la mitad del dispositivo de fluido 2 e incluye cámara de reactivo 32, sitios de reacción 34, una cámara de desperdicio 36 y canales de fluido 38. Similar al conjunto de análisis, el número de cámaras de reactivo y sitios de reacción puede variar dependiendo del análisis que es efectuado en el dispositivo de fluido y el número de analitos que son detectados. En donde se desea, un detector para determinar la confiabilidad de un análisis por un analito en un fluido corporal con el uso del dispositivo de fluido presente puede ser provisto junto con el dispositivo de fluido, el lector y/o dentro del empaque del sistema presente. El detector es capaz de detectar un cambio en los parámetros de operación bajo los cuales el sistema presente opera normalmente. Los parámetros de operación incluyen pero no están limitados a temperatura, humedad y presión, que pueden afectar el desempeño del sistema presente . Un dispositivo de fluido y conjunto de lector puede, después de la manufactura, ser embalado al usuario final, conjuntamente o de manera individual. Ya que un conjunto de lector es usado repetidamente con múltiples dispositivos de fluido, puede ser necesario tener detectores tanto sobre el dispositivo de fluido y el conjunto de lector para detectar tales cambios durante el embalaje, por ejemplo. Durante el embalaje, los cambios de presión o temperatura pueden impactar el desempeño de un número de componentes del sistema presente y como tal un detector localizado ya sea sobre el dispositivo de fluido o conjunto de lector puede relevar estos cambios a por ejemplo, el dispositivo externo, de tal manera que los ajustes pueden ser efectuados durante la calibración o durante el procesamiento de datos en el dispositivo externo. Por ejemplo, si la presión de un dispositivo de fluido cayera a un cierto nivel durante el embalaje, un detector localizado en el dispositivo de fluido podría detectar este cambio y transportar esta información al conjunto de lector cuando es insertado al conjunto de lector por el usuario. Puede haber un dispositivo de detección adicional en el conjunto de lector para efectuar esto o tal dispositivo puede ser incorporado a otro componente del sistema. En algunas modalidades, esta información puede ser transmitida inalámbricamente ya sea al conjunto de lector o el dispositivo externo. Asimismo, un detector en el conjunto de lector puede detectar cambios similares. En algunas modalidades, puede ser deseable tener un detector en el empaque de embalaje también, ya sea en lugar de en los componentes del sistema o además del mismo. La manufactura de los canales de fluido se puede efectuar en general mediante cualquier número de técnicas de microfabricación que son bien conocidas en el arte. Por ejemplo, técnicas litográficas son empleadas opcionalmente en la fabricación, por ejemplo vidrio, cuarzo o sustratos de silicio, utilizando métodos bien conocidos en las industrias de manufactura de semiconductores tales como ataque fotolitográfico, ataque de plasma o ataque químico húmedo. Alternativamente, métodos de micromaquinado tales como perforación por láser, micromolienda y los semejantes son empleados opcionalmente. Similarmente, para sustratos poliméricos, técnicas de manufactura bien conocidas pueden también ser usadas. Estas técnicas incluyen moldeo por inyección o métodos de moldeo por estampado en donde grandes números de sustratos son producidos opcionalmente utilizando por ejemplo estampas de laminación para producir láminas grandes de sustratos de microescala o técnicas de micromoldeo de polímero en donde el sustrato es polimerizado dentro de un molde micromaquinado. En algunas modalidades, por lo menos una de las diferentes capas del dispositivo de fluido puede ser construida de sustratos poliméricos. Ejemplos no limitantes de materiales poliméricos incluyen poliestireno, policarbonato, polipropileno, polidimetilsiloxanos (PDMS) , poliuretano, polivinilcloruro (PVC) y polisulfona. El dispositivo de fluido puede ser manufacturado mediante estampado, pegado térmico, adhesivos o en el caso de ciertos sustratos, por ejemplo, vidrio o sustratos poliméricos semi-rígidos y no rígidos, una adhesión natural entre los dos componentes. En algunas modalidades, el dispositivo de fluido es manufacturado mediante soldadura ultrasónica o acústica. La figura 2 muestra una modalidad de la invención en la cual el dispositivo de fluido consiste de 7 etapas. Los elementos como se muestran son por ejemplo cortados en el sustrato polimérico de tal manera que cuando las capas son colocadas apropiadamente cuando el conjunto formará una red de fluido. En algunas modalidades, más o menos capas pueden ser usadas para construir un dispositivo de fluido para llevar a cabo el propósito de la invención. Un objetivo de la presente invención es impedir que el fluido al interior de un dispositivo de fluido se ponga en contacto con los componentes de un conjunto de lector que pueden necesitar permanecer seco y sin contaminar y también impedir contaminación a un dispositivo de detección dentro del conjunto de lector. Una fuga en el dispositivo de fluido podría dar como resultado que los líquidos, por ejemplo reactivos o desperdicio, escapen del dispositivo de fluido y contaminen en lector. En otras modalidades, un material absorbente de líquidos, tales como materiales poliméricos encontrados en pañales, podrían ser colocados dentro de una porción del canal de fluido o cámara de desperdicio para absorber el líquido de desperdicio. Un ejemplo no limitante de tal polímero es poliacrilato de sodio. Tales polímeros pueden absorber fluidos cientos de veces su peso. De aquí, solamente pequeñas cantidades de tales materiales poliméricos pueden ser requeridas para llevar a cabo el objetivo de absorber fluidos fugados. En algunas modalidades, una cámara de desperdicio es llenada con un material superabsorbente. En algunas modalidades, el líquido fugado puede ser convertido en gel u otra forma sólida o semi-sólida. Otro objetivo del sistema presente es proporcionar un dispositivo de fluido que puede efectuar una variedad de análisis en un dispositivo de fluido, sin consideración del analito que es detectado de una muestra de fluido corporal. Un protocolo dependiente de la identidad del dispositivo de fluido puede ser transferido de un dispositivo externo en donde puede ser almacenado a un conjunto de lector para permitir que el conjunto de lector lleve a cabo el protocolo específico en el dispositivo de fluido. En modalidades preferidas, el dispositivo de fluido tiene un identificador (ID) que es detectado o leído por un detector de identificador descrito en la presente. Luego el identificador puede ser comunicado a un conjunto de comunicación, en donde puede ser transferido o transmitido a un dispositivo externo. En algunas modalidades, el identificador puede ser un identificador de código de barras con una serie de líneas blancas y negras. Puede ser leída por un detector de identificador tal como un lector de código de barras, que son bien conocidos. Otros identificadores podrían ser una serie de valores alfanuméricos, colores, protuberancias elevadas o cualquier otro identificador que podría estar localizado en un dispositivo de fluido y ser detectado o leído por un detector de identificador. En algunas modalidades, el identificador puede comprender un dispositivo de almacenamiento o memoria y puede transmitir información a un detector de identificación. En algunas modalidades, ambas técnicas pueden ser usadas. Una vez que una muestra de fluido corporal es provista a un dispositivo de fluido, es insertada en un conjunto de lector. En algunas modalidades, el dispositivo de fluido es insertado parcialmente de manera manual y luego un interruptor mecánico en el conjunto de lector coloca apropiadamente de manera automática el dispositivo de fluido al interior del conjunto de lector. Cualquier otro mecanismo conocido en el arte para insertar un disco o cartucho a un dispositivo puede ser usado también. En algunas modalidades, solamente se puede requerir inserción manual . En algunas modalidades, el conjunto de lector comprende un detector de identificador para detectar o leer un identificador sobre el dispositivo de fluido, un controlador para controlar automáticamente el conjunto de detección y también componentes mecánicos del conjunto de lector, por ejemplo bombas y/o válvulas para controlar o dirigir el fluido a través del dispositivo de fluido. Un dispositivo de detección para detectar una señal creada por un análisis efectuado en el dispositivo de fluido y un conjunto de comunicación para comunicarse con un dispositivo externo. Un detector de identificador detecta un identificador sobre el dispositivo de fluido que es comunicado a un conjunto de comunicación. En algunas modalidades, el detector de identificador puede ser un dispositivo semejante a escáner de código de barras, que lee un código de barras en un dispositivo de fluido. El detector de identificador puede también ser un LED que emite luz que puede interactuar con un identificador que refleja luz y es medida por el detector de identificador para determinar la identidad de un dispositivo de fluido. En modalidades preferidas, el conjunto de lector aloja un controlador que controla una bomba y una serie de válvulas para controlar y dirigir el flujo de líquido dentro del dispositivo de fluido. En algunas modalidades, el conjunto de lector puede comprender múltiples bombas. La muestra y reactivos son preferiblemente jalados a través de los canales fluidos mediante una fuerza de vacío creado al abrir y cerrar secuencialmente por lo menos una válvula en tanto que se activa una bomba dentro del conjunto de lector. Métodos de uso de por lo menos una válvula y por lo menos una bomba para crear una fuerza de vacío son bien conocidos. En tanto que una fuerza de tracción negativa puede ser usada, una fuerza de empuje positiva puede también ser generada mediante por lo menos una bomba y válvula de acuerdo con la presente invención. En otras modalidades, el movimiento del fluido en el dispositivo de fluido puede ser mediante acción electro-osmótica, capilar, piezoeléctrica o acción de microaccionador . Las figuras 8 y 9 ilustran una secuencia ejemplar para iniciar el flujo de un reactivo dentro del dispositivo de fluido. Una placa de accionamiento 18 en el conjunto de lector comprende una aguja sin centro o alfiler 20 que cuando es abatida flexiona la cubierta superior 16, ya que es preferiblemente fabricada de material elastomérico flexible fuerte. Sin embargo, la hoja metálica que se puede romper fácilmente 12 se rompe entonces debido al esfuerzo inducido por la flexión de la cubierta superior 16. Las válvulas localizadas corriente abajo a la cámara de reactivo perfora áreas diferentes de hoja metálica en el dispositivo de fluido y puede luego trabajar en tándem con una bomba dentro del conjunto de lector para crear una fuerza de vacío para jalar el reactivo fuera de la cámara de reactivo 6 a un canal de fluido y luego dirigir el flujo de reactivo a un sitio de reacción. Por lo menos una válvula es conectada de preferencia de manera fluida a una bomba alojada dentro del conjunto de lector. La aguja o alfiler sin centro 20 es removida del dispositivo de fluido cuando el dispositivo es removido del conjunto de lector. Una de las ventajas de la esta modalidad es que no se requiere una bomba en el chip que por lo menos disminuye el tamaño y costo del dispositivo de fluido y permite que el dispositivo sea desechable . Un conjunto de reacción aloja preferiblemente un conjunto de detección para detectar una señal producida por al menos un análisis en el dispositivo de fluido. La figura 1 ilustra una posición ejemplar de un dispositivo de detección de la presente invención en relación con el dispositivo de fluido que está debajo del dispositivo de fluido. El conjunto de detección puede estar por encima del dispositivo de fluido o en una orientación diferente en relación con el dispositivo de fluido en base por ejemplo al tipo de análisis que es efectuado y el mecanismo de detección que es empleado. En modalidades preferidas, un detector óptico es usado como el dispositivo de detección. Ejemplos no limitantes incluyen un fotodiodo, tubo fotomultiplicador (PMT) , detector de conteo de fotones o dispositivo de carga acoplada (CCD) . En algunas modalidades, se puede usar un diodo de alfiler. En algunas modalidades, un diodo de alfiler puede ser acoplado a un amplificador para crear un dispositivo de detección con una sensibilidad comparable a un PMT. Algunos análisis pueden generar luminiscencia como se describe en la presente. En algunas modalidades se detecta quimioluminiscencia. En algunas modalidades, un conjunto de detección podría incluir una pluralidad de cables de fibra óptica conectados como un haz a un detector de CCD o a una disposición de PMT. El haz de fibras ópticas podría ser construido de fibras discretas o de muchas fibras pequeñas fusionadas conjuntamente para formar un haz sólido. Tales haces sólidos están disponibles comercialmente y son interconectados fácilmente a detectores de CCD. En algunas modalidades, el sistema de detección puede comprender detectores no ópticos o detectores para detectar un parámetro particular de un paciente. Tales detectores pueden incluir temperatura, conductividad, potenciométrico y amperométrico, para compuestos que son oxidados o reducidos, por ejemplo 02, H20 e I2 o compuestos orgánicos oxidables/reducibles . Un conjunto de comunicación es preferiblemente alojado dentro del conjunto de lector y es capaz de transmitir y recibir información inalámbricamente de un dispositivo externo. Tal comunicación inalámbrica puede ser tecnología de bluetooth o RTM. Varios métodos de comunicación pueden ser utilizados, tales como una conexión cableada de marcación con un módem, un enlace directo tal como TI, IDSN o línea de cable. En modalidades preferidas, una conexión inalámbrica es establecida utilizando redes inalámbricas ejemplares tales como celular, satélite o redes de radiolocalización, GPRS o un sistema de transporte de datos local tales como Ethernet o token ring en una red de área local. En algunas modalidades, la información es encriptada antes de que sea transmitida en una red inalámbrica. En algunas modalidades, el conjunto de comunicación puede contener un componente de comunicación infrarrojo inalámbrico para enviar y recibir información. En algunas modalidades, el conjunto de comunicación puede tener un dispositivo de memoria o dispositivo de almacenamiento, por ejemplo RAM localizado, en la cual la información recolectada puede ser almacenada. Un dispositivo de almacenamiento puede ser requerido y la información no puede ser transmitida a un tiempo dado debido por ejemplo a una incapacidad temporal para conectarse inalámbricamente a una red. La información puede estar asociada con el identificador de dispositivo de fluido en el dispositivo de almacenamiento. En algunas modalidades, el conjunto de comunicación puede reintentar enviar la información almacenada después de una cierta cantidad de tiempo. En algunas modalidades, el dispositivo de memoria puede almacenar la información por un período de diez días antes de que sea borrada. En modalidades preferidas, un dispositivo externo se comunica con el conjunto de comunicación dentro del conjunto de lector. Un dispositivo externo se puede comunicar inalámbricamente con un conjunto de lector, pero también se puede comunicar con una tercera parte, en los que se incluyen sin limitación un paciente, personal médico, clínicos, personal de laboratorio u otros en la industria del cuidado de la salud. En algunas modalidades, el dispositivo externo puede ser un sistema de computadora, servidor u otro dispositivo electrónico capaz de almacenar información o procesar información. En algunas modalidades, el dispositivo externo incluye uno o más sistemas de computadora, servidores u otros dispositivos electrónicos capaces de almacenar información o procesar información. En algunas modalidades, un dispositivo externo puede incluir una base de datos de información del paciente, por ejemplo pero no limitado a registros medios o historia del paciente, registros de pruebas clínicas o registros de pruebas preclínicas. En modalidades preferidas, un dispositivo externo almacena protocolos a ser corridos en un dispositivo de fluido que pueden ser transmitidos al conjunto de comunicación de un conjunto de lector cuando ha recibido un identificador que indica cual dispositivo de fluido ha sido insertado en el conjunto de lector. En algunas modalidades, un protocolo puede ser dependiente de un identificador de dispositivo de fluido. En algunas modalidades, el dispositivo externo almacena más de un protocolo para cada dispositivo de fluido, en otras modalidades, la información del paciente en el dispositivo externo incluye más de un protocolo. En modalidades preferidas, el servidor externo almacena algoritmos matemáticos para procesar un conteo de fotones enviado desde un conjunto de comunicación y en algunas modalidades para calcular la concentración de analito en una muestra de fluido corporal. En algunas modalidades, el dispositivo externo puede incluir uno o más servidores como son conocidos en el arte y están disponibles comercialmente. Tales servidores pueden proporcionar equilibrio de carga, manejo de tareas y capacidad de respaldo en caso de fallas de uno o más de los servidores u otros componentes del dispositivo externo, para mejorar la disponibilidad del servidor. También se puede implementar un servidor en una red distribuida de unidades de almacenamiento y de procesador, como son conocidas en el arte, en donde el procesamiento de datos de acuerdo con la presente invención reside en estaciones de trabajo tales como computadoras, eliminado mediante esto la necesidad de un servidor. Un servidor puede incluir una base de datos y procesos de sistema. Una base de datos puede residir en el servidor o puede residir en otro sistema de servidor que es accesible al servidor. Ya que la información en una base de datos puede contener información sensible, un sistema de seguridad puede ser implementado que impide que usuarios no autorizados ganen acceso a la base de datos. Una ventaja de la presente invención es que la información puede ser transmitida desde el dispositivo externo de regreso a no solamente el conjunto de lector, sino a otras partes u otros dispositivos externos, por ejemplo, sin limitación, un PDA o teléfono celular. Tal comunicación puede ser efectuada vía una red inalámbrica como se revela en la presente. En algunas modalidades, una concentración de analito calculada u otra información del paciente puede ser enviada a, por ejemplo, pero no limitado a, personal médico o el paciente.

Método de uso Los aparatos y sistemas presentes proporcionan un medio efectivo para la detección de alto rendimiento y en tiempo real de analitos presentes en un fluido corporal de un sujeto. Los métodos de detección pueden ser usados en una amplia variedad de circunstancias en las que se incluyen identificación y cuantificación de analitos que están asociados con procesos biológicos específicos, condiciones fisiológicas, alteraciones o etapas de alteraciones. Como tal, los presentes aparatos y sistemas tienen un amplio espectro de utilidad en por ejemplo, selección de fármacos, diagnosis de enfermedad, clasificación filogenético, identificación parental e identificación forense. Los presentes métodos y aparatos son también particularmente útiles para avanzar la etapa preclínica y clínica de desarrollo de terapéuticos, mejora de apego del paciente, monitoreo de ADR asociadas con un fármaco prescrito y desarrollo de medicina individualizada. Así, en una modalidad, la presente invención proporciona un método para detectar un analito en un fluido corporal de un sujeto que comprende proporcionar un dispositivo de fluido que comprende por lo menos una unidad de recolección de muestras, un conjunto de inmunoanálisis que contiene reactivos de inmunoanálisis, una pluralidad de canales en comunicación fluida con la unidad de recolección de muestras y/o el conjunto de inmunoanálisis, accionar el dispositivo de fluido y dirigir los reactivos de inmunoanálisis en el dispositivo de fluido; permitir que una muestra de fluido corporal reaccione con los reactivos de inmunoanálisis contenidos en el conjunto de inmunoanálisis para producir una señal detectable indicadora de la presencia del analito en el fluido corporal y detectar la señal detectable generada del analito inicialmente recolectada en la muestra de fluido corporal. Preferiblemente, una muestra de fluido corporal de menos de aproximadamente 1 ml , preferiblemente menor de aproximadamente 500 ul es usada para una o más de estas aplicaciones.

Como se usa en la presente, el término "sujeto" o "paciente" es usado intercambiablemente en la presente, que se refiere a un vertebrado, preferiblemente un mamífero más preferiblemente un humano. Los mamíferos incluyen, pero no están limitados a, murinos, simios, humanos, animales de granja, animales deportivos y mascotas. En algunas modalidades, una muestra de fluido corporal puede ser provista primero al dispositivo de fluido mediante cualquiera de los métodos descritos en la presente. El dispositivo de fluido puede luego ser insertado al conjunto de lector. Un detector de identificación alojado dentro del conjunto de lector puede detectar un identificador de dispositivo de fluido y comunicar el identificador al conjunto de comunicación, que está preferiblemente alojado dentro del conjunto de lector. Luego el conjunto de comunicación transmite el identificador a un dispositivo externo que transmite un protocolo para ejecutar en el dispositivo de fluido en base al identificador al conjunto de comunicación. Un controlador alojado preferiblemente dentro del conjunto de lector controla elementos de accionamiento que incluyen por lo menos una bomba y una válvula que interactúan con el dispositivo de fluido para controlar y dirigir el movimiento del fluido dentro del dispositivo. En algunas modalidades, la primera etapa del análisis es un ciclo de lavado, en donde todas la superficies dentro del dispositivo de fluido son humectadas utilizando una solución reguladora de pH de lavado. Luego el dispositivo de fluido es calibrado utilizando un conjunto de calibración al hacer correr los mismos reactivos como serán usados en el análisis a través de los sitios de reacción de calibración y luego una señal de luminiscencia de los sitios de reacción es detectada por los medios de detección y la señal es usada en la calibración del dispositivo de fluido. La muestra que contiene el analito es introducida al canal de fluido. La muestra puede ser diluida y separada adicionalmente al plasma u otro componente deseado en un filtro. La muestra separada fluye ahora a través de los sitios de reacción y los analitos presentes en la misma se enlazarán a los reactivos enlazados sobre el mismo. El plasma del fluido de muestra es luego lavado de las cavidades de reacción a una cámara de desperdicio. Dependiendo del análisis que es ejecutado, reactivos apropiados son dirigidos a través de los sitios de reacción para llevar a cabo el análisis. Todas las soluciones reguladoras del pH de lavado y otros reactivos usados en las varias etapas, en las que se incluyen la etapa de calibración, son recolectados en tanques de lavado. La señal producida en los sitios de reacción es luego detectada mediante cualquiera de los métodos descritos en la presente. Una variedad de análisis pueden ser efectuados en un dispositivo de fluido de acuerdo con la presente invención para detectar un analito de interés en una muestra. Una amplia diversidad de marcadores están disponibles en el arte que pueden ser empleados para llevar a cabo los análisis presentes. En algunas modalidades, los marcadores son detectables mediante medios espectroscópicos, fotoquímicos, bioquímicos, inmunoquímicos o medios químicos. Por ejemplo, marcadores de ácido nucleico útiles incluyen 32P, 35S, tintes fluorescentes, reactivos densos de electrones, enzimas, biotina, dioxigenina o haptenos y proteínas para los cuales antisueros o anticuerpos monoclonales están disponibles. Una amplia variedad de marcadores apropiados para marcación de componentes biológicos son conocidos y son reportados extensamente tanto en literatura científica como literatura de patentes y son en general aplicables a la presente invención para la marcación de componentes biológicos. Marcadores apropiados incluyen radionucleótidos, enzimas, sustratos, co- factores, inhibidores, porciones fluorescentes, porciones quimioluminiscentes, marcadores bioluminiscentes, marcadores calorimétricos o partículas magnéticas. Los agentes de marcación incluyen opcionalmente por ejemplo, anticuerpos monoclonales, anticuerpos policlonales, proteínas u otros polímeros tales como matrices de afinidad, carbohidratos o lípidos. La detección procede mediante cualesquiera de una variedad de métodos conocidos, en los que se incluyen marcadores espectrofotométricos o seguimiento óptico de marcadores radioactivos o fluorescentes u otros métodos que dan seguimiento a una molécula en base al tamaño, carga o afinidad. Una porción detectable puede ser de cualquier material que tiene una propiedad física o química detectable. Tales marcadores detectables han sido bien desarrollados en el campo de electroforesis de gel, cromatografía en columna, sustratos sólidos, técnicas espectroscópicas y los semejantes y en general, los marcadores útiles en tales métodos pueden ser aplicados a la presente invención. Así, un marcador incluye sin limitación cualquier composición detectable mediante medios espectroscópicos, fotoquímicos, bioquímicos, inmunoquímicos, eléctricos, ópticos térmicos o químicos. En algunas modalidades, el marcador es acoplado directa o indirectamente a una molécula a ser detectada tal como un producto, sustrato o enzima, de acuerdo con métodos bien conocidos en el arte. Como se indica anteriormente, una amplia variedad de marcadores son usados, la elección del marcador depende de la sensibilidad requerida, facilidad de conjugación del compuesto, requerimientos de estabilidad, instrumentación disponible y provisiones de desecho. Marcadores no radioactivos son frecuentemente anexados mediante medios indirectos. En general, una molécula de ligando es enlazada covalentemente a un polímero. El ligando se enlaza luego a una molécula anti-ligando, que es ya sea detectable inherentemente o enlazada covalentemente a un sistema de señal, tal como una enzima detectable, un compuesto fluorescente o un compuesto quimioluminiscente. Un número de ligandos y anti-ligandos pueden ser usados. En donde un ligando tiene un anti-ligando natural, como por ejemplo biotina, tiroxina y cortisol, puede ser usado en conjunción con anti -ligandos marcados. Alternativamente, cualquier compuesto hapténico o antigénico puede ser usado en combinación con un anticuerpo. En algunas modalidades, el marcador puede también ser conjugado directamente a compuestos que generan señal, por ejemplo, mediante conjugación con una enzima o fluoróforo. Enzimas de interés como marcadores serán principalmente hidrolasas, particularmente fosfatasas, esterasas y glicosidasas y oxidoreductasas, particularmente peroxidasas. Los compuestos fluorescentes incluyen fluoresceína y sus derivados, rodamina y sus derivados, dansilo y umbeliferona. Los compuestos quimioluminiscentes incluyen luciferina y 2,3-dihidroftalazindionas, tales como luminol . Métodos para detectar marcadores son bien conocidos para aquellos de habilidad en el arte. Así, por ejemplo, en donde el marcador es un marcador radioactivo, los medios para detección incluyen un contador de centelleo o película fotográfica como en autoradiografía. En donde el marcador es un marcador fluorescente, puede ser detectado al excitar el fluorocromo con la longitud de onda de luz apropiada y detección de la fluorescencia resultante mediante por ejemplo microscopía, inspección visual, vía película fotográfica, mediante el uso de detectores electrónicos tales como cámaras digitales, dispositivos acoplados de carga (CCD) o fotomultiplicadores y fototubos u otro dispositivo de detección. Similarmente, marcadores enzimáticos son detectados al proporcionar sustratos apropiados para la enzima y detectar el producto de reacción resultante. Finalmente, marcadores colorimétricos simples son frecuentemente detectados simplemente al observar el color asociado con el marcador. Por ejemplo, el oro conjugado frecuentemente aparece color canal, en tanto que varias perlas conjugadas aparecen del color de la perla. En algunas modalidades, la señal detectable puede ser provista mediante fuentes luminiscentes. "Luminiscencia" es el término usado comúnmente para referirse a la emisión de luz de una sustancia por cualquier razón diferente a una elevación en su temperatura. En general, los átomos o moléculas emiten fotones de energía electromagnética (por ejemplo, luz) cuando se mueven desde un "estado excitado" a un estado de energía más baja (usualmente el estado basal) ; este proceso es frecuentemente denominado como "decaimiento radiactivo" . Hay muchas causas de excitación. Si la causa de excitación es un fotón, el proceso de luminiscencia es denominado como "fotoluminiscencia" . Si la causa de excitación es un electrón, el proceso de luminiscencia es denominado como "electroluminiscencia". Más específicamente, la electroluminiscencia resulta de la inyección y remoción directa de electrones para formar un par de electrón- aguj ero y recombinación subsecuente del par de electrón-agujero para emitir un fotón. La luminiscencia que resulta de una reacción química es denominada usualmente como "quimioluminiscencia" . La luminiscencia producida por un organismo viviente es denominado usualmente como "bioluminiscencia" . Si la fotoluminiscencia es el resultado de una transición permitida por espín (por ejemplo, transición simple-singulete, transición triplete-triplete) , el proceso de fotoluminiscencia es denominado como "fluorescencia". Comúnmente, las emisiones fluorescentes no persisten después que la causa de excitación es removida como resultado de estados excitados de corta vida que se pueden relajar rápidamente por medio de tales transiciones permitidas por espín. Si la fotoluminiscencia es el resultado de una transición de espín prohibido (por ejemplo, transición triplete-singulete) , el proceso de fotoluminiscencia es denominado usualmente como "fosforescencia" . Comúnmente, las emisiones de fosforescencia persisten mucho tiempo después de que la causa de excitación es removida como resultado de resultados excitados de larga vida que se pueden relajar solamente por medio de tales transiciones de espín prohibida. Un "marcador luminiscente" puede tener cualquiera de las propiedades descritas anteriormente. Fuentes quimioluminiscentes apropiadas incluyen un compuesto que es excitado electrónicamente por una reacción química y puede luego emitir luz que sirve como la señal detectable o dona energía a un aceptor fluorescente. Un diverso número de familias de compuesto se han encontrado que proporcionan quimioluminiscencia bajo una variedad de condiciones. Una familia de compuestos es 2 , 3 -dihidro- 1, 4-ftalazindiona. Un compuesto usado frecuentemente es luminol , que es un compuesto 5-amino. Otros miembros de la familia incluyen el 5-amino-6, 7 , 8-trimetoxi- y el análogo de dimetilamino [ca] benz . Se puede hacer que estos compuestos emitan luminiscencia de peróxido de hidrógeno alcalino o hipoclorito de calcio y base. Otra familia de compuestos son las 2 , 4, 5-trifenilimidazoles, con lofina como el nombre común para el producto original. Los análogos quimioluminiscentes se incluyen sustituyentes para-dimetilamino y -metoxi. La quimioluminiscencia puede también ser obtenida con oxalatos, usualmente esteres oxalil activos, por ejemplo, p-nitrofenilo y un peróxido tal como peróxido de hidrógeno, bajo condiciones básicas. Otros compuestos quimioluminiscentes útiles que son también conocidos incluyen esteres de N-alquilo y dioxetanos. Alternativamente, se pueden usar luciferinas en conjunto con luciferasa o lucigeninas para proporcionar bioluminiscencia. En algunas modalidades, los inmunoanálisis son efectuados en el dispositivo de fluido. En tanto que los análisis de enlace competitivos que son bien conocidos en el arte pueden ser efectuados en algunas modalidades, en modalidades preferidas se usa un método de dos etapas que elimina la necesidad de mezclar un conjugado y una muestra antes de exponer la muestra a un anotación, que puede ser deseable cuando se usan volúmenes muy pequeños de muestra y conjugado, como en el dispositivo de fluido de la presente invención. Un análisis de dos etapas tiene ventajas adicionales con respecto a los análisis de enlace competitivos cuando se usan con un dispositivo de fluido como se describe en la presente. Combinan la facilidad de uso y alta sensibilidad de un inmunoanálisis de emparedado (enlace competitivo) con la habilidad de analizar moléculas pequeñas. En un análisis de dos etapas ejemplar mostrado en la figura 10, la muestra que contiene analito ( "Ag" ) fluye primero sobre un sitio de reacción que contiene anticuerpos ( "Ab" ) . Los anticuerpos se enlazan al analito presente en la muestra. Después que la muestra pasa sobre la superficie, se hace pasar una solución con analito conjugado a un marcador ( "Ag marcado") a alta concentración sobre la superficie. El conjugado satura cualquiera de los anticuerpos que no han sido todavía enlazados al analito. Antes de que se alcance el equilibrio y cualquier desplazamiento del analito sin marcar pre-enlazado ocurra, la solución de conjugado de alta concentración es lavada. La cantidad de conjugado enlazado a la superficie es luego medida mediante la técnica apropiada y el conjugado detectado es inversamente proporcional a la cantidad de analito presente en la muestra. Una técnica de medición ejemplar para un análisis de dos etapas es un inmunoanálisis de enzima de quimioluminiscencia como se muestra en la figura 11. Como es conocido en el campo, el marcador puede ser un marcador disponible comercialmente tal como dioxitano-fosfato, que no es luminiscente pero se vuelve luminiscente después de la hidrólisis mediante por ejemplo fosfatasa alcalina. Una enzima tal como fosfatasa alcalina también se hace pasar sobre el sustrato para provocar que el marcador emita luminiscencia. En algunas modalidades, la solución de sustrato es complementada con agentes mejoradores tales como, sin limitación, fluoresceína en miscelas mezcladas, polímeros solubles o PVC que crean una señal mucho más brillante que el luminóforo solo. Además, un conjugado de fosfatasa alcalina con un número de rendimiento más alto que aquel usado en el análisis comercial es empleado. Esto permite la generación de señal proceda mucho más rápidamente y se obtiene una señal global más alta. La sensibilidad incrementada del inmunoanálisis de enzima quimioluminiscente de dos etapas (TOSCA) es ilustrada en la figura 12. La figura 12 muestra que para analitos en la concentración picomolar, TOSCA es capaz de proporcionar una señal más robusta (sensibilidad más alta) que un análisis de enlace competitivo. Así, el uso de un análisis de enlace de dos etapas contribuye a capacidades de sensibilidad más alta de la presente invención. Adicionalmente, TOSCA es menos sensible a efectos de matriz que otras metodologías. Esto permite trabajar con muestras que no han sido extensamente pre-procesadas utilizando técnicas de laboratorio estándar tales como por ejemplo, extracción en fase sólida y cromatografía. La habilidad de TOSCA para analizar muestras menos que ideales y mantener la sensibilidad deseada es ilustrada en la figura 13. En comparación con el análisis de enlace competitivo, para todas las proporciones de muestra (y diluciones) , TOSCA tiene mejor sensibilidad que el enlace competitivo. Esto es también ilustrado en la figura 17, en donde la mejora de sensibilidad obtenida utilizando TOSCA es comparada con el análisis de dos etapas . El término "analitos" de acuerdo con la presente invención incluye sin limitación fármacos, profármacos, agentes farmacéuticos, metabolitos de fármaco, biomarcadores tales como proteínas expresadas y marcadores de células, anticuerpos, proteínas de suero, colesterol, polisacáridos, ácidos nucleicos, analitos biológicos, biomarcador, gen, proteína u hormona o cualquier combinación de los mismos. A nivel molecular, los analitos pueden ser una glicoproteína de polipéptido, polisacárido, lípido, ácido nucleico y una combinación de los mismos.

De particular interés son los biomarcadores están asociados con una enfermedad particular o con una etapa de enfermedad específica. Tales analitos incluyen pero no están límites a aquellos asociados con enfermedades autoinmunes, obesidad, hipertensión, diabetes, enfermedades degenerativas neuronales y/o musculares, enfermedades cardiacas, alteraciones endocrinas, cualesquier combinaciones de los mismos. También de interés son los biomarcadores que están presentes en abundancia variada en uno o más de los tejidos corporales en los que se incluyen corazón, hígado, próstata, pulmón, riñon, médula ósea, sangre, piel, vejiga, cerebro, músculos, nervios y tejidos seleccionados que son afectados por varias enfermedades, tales como diferentes tipos de cáncer (maligno o no metastático) , enfermedades autoinmunes, enfermedades inflamatorias o degenerativas. También de interés son los analitos que son indicadores de un microorganismo. Microorganismos ejemplares incluyen pero no están limitados a bacterias, virus, hongos y protozoarios. Los analitos que pueden ser detectados por el método presente también incluyen patógenos transportados por sangre seleccionados de un grupo no limitante que consiste de epidermis de Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Staphylococcus aureus resistente a meticilina (MSRA) , Staphylococcus aureus, Staphylococcus hominis, enterococcus faecalis, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus capitis, Staphylococcus warneri , Kelbsiella pneumoniae, Haemophilus influenzae, Staphylococcus simulans, Streptococcus pneumoniae y Candida albicans. Los analitos que pueden ser detectados por el método presente también abarcan una variedad de enfermedades transmitidas sexualmente seleccionadas de las siguientes: gonorrea (Neisseria gorrhoeae) , sífilis (treponena pallidum) , clamidia (Clamydia tracomitis) , uretritis nongonococal (Ureaplasm eurealyticum) , infección por levadura (Candida albicans) , chancroide (Hemophilus ducreyi) trocomoniasis (Trichomonas vaginalis) , herpes genital (HSV tipo I y II) , HIV I, HIV II y hepatitis A, B, C, G, también como hepatitis provocada por TTV. Analitos adicionales que pueden ser detectados por los métodos presentes abarcan una diversidad de patógenos respiratorios en los que se incluyen pero no limitados a Pseudomonas aeurignosa, Staphylococcus aureus resistente a meticilina (MSRA) , Klebsiella pneumoniae, Haemophilis influenzae, Staphlococcus aureus, Stenotrophomonas maltophilia, Haemophilis parainfluenzae, Escherichia coli, Enterococcus faecalis, Serratia marcescens, Haemophilis parahaemolyticus, Enterococcus cloacae, Candida albicans, Moraxella catarrhalis, Streptococcus pneumoniae, Citrobacter freundii, Enterococcus faecium, Klebsella oxytoca, pseudomonas fluorscens, Neiseria meningitidis, Streptococcus pyrogenes, Pneumocystis carinni, Klebsella pneumoniae Legionella pneumophila, mycoplasma pneumoniae, y Mycobacterium tuberculosis. Enlistados a continuación están marcadores ejemplares adicionales de acuerdo con la presente invención: Theophylline, CRP, CKMB, PSA, Myoglobin, CA125, Progesterone, TxB2 , 6-ceto-PGF-1-alfa y teofilina, estradiol, hormona luteinizante, CRP de alta sensibilidad, triglicéridos, triptasa, colesterol lipoproteína de baja densidad, colesterol lipoproteína de alta densidad, colesterol, IGFR. Marcadores de hígado ejemplares incluyen sin limitación LDH, (LD5) , (ALT) , Arginasa 1 (tipo hígado) , alfa-fetoproteína (AFP) , fosfatasa alcalina, alanina aminotransferasa, lactato deshidrogenasa y bilirrubina. Marcadores de riñon ejemplares incluyen sin limitación receptor de TNFa, Cistatina C, prostaglandina D urinaria tipo lipocalina, sintetasa (LPGDS) , receptor del factor de crecimiento de hepatocito, policistina 2, policistina 1, fibrocistina, uromodulina, alanina, aminopeptidasa, N-acetil-B-D-glucosaminidasa, albúmina y proteína de enlace de retinol (RBP) . Marcadores del corazón ejemplares incluyen sin limitación troponina I (Tnl) , troponina T (TnT) , CK, CKMB, mioglobina, proteína de enlace de ácido graso (FABP) , CRP, D-dímero, proteína S-100, BNP, NT-proBNP, PAPP-A, mieloperoxidasa (MPO) , isoenzima BB de fosforilasa de glicógeno (GPBB) , inhibidor de fibrinólisis activable por trombina (TAFI) , fibrinógeno, albúmina modificada por isquemia (IMA) , cardiotrofina-1 y MLC- I (cadena- I ligera de miosina) . Marcadores de pancreasa ejemplares incluyen sin limitación amilasa, proteína pancreatitis-asociada (PAP-1) y proteínas de regenerateína (REG) . Marcadores de tejido muscular ejemplares incluyen sin limitación miostatina. Marcadores de sangre ejemplares incluyen sin limitación eritropoyetina (EPO) . Marcadores de hueso ejemplares incluyen sin limitación, N-telopéptidos reticulados de colágeno tipo I de hueso (NTx) . Telopéptido de reticulación carboxiterminal de colágeno de hueso, lisil-piridinolina (desoxipiridinolina) , pirídinolina, fosfatasa acida resistente a tartrato, C propéptido tipo I de procolágeno, propéptido tipo I N de procolágeno, osteocalcina (gla-proteína de hueso) , fosfatasa alcalina, catepsina K, COMP (proteína de matriz oligomérica de cartílago) , osteocrina, osteoprotegerina (OPG) RANKL, sRANK, TRAP5 (TRACP 5) , factor 1 específico de osteoblasto (OSF-1, pleyotropina) , moléculas de adhesión celular solubles, sTfR, sCD4, sCD8, sCD44 y factor 2 específico de osteoblasto (OSF-2, periostina) . En algunas modalidades, los marcadores de acuerdo con la presente invención son específicos de enfermedad. Marcadores de cáncer ejemplares incluyen sin limitación PSA (antígeno específico de próstata total) , creatinina, fosfatasa acida prostática, complejos de PSA, gen-1 específico de próstata, CA 12-5, antígeno carcinoembriónico (CEA), alfa feto proteína (AFP) , hCG (gonadotropina coriónica humana) , inhibina, C1824 de ovario CAÁ, CA 27.29, CA 15-3, C1924 de pulmón CAÁ, Her-2, pancreático, CA 19-9, antígeno carcinoembriónico, CAÁ pancreático, enolasa neurona-específica, angiostatina DcR3 (receptor 3 de decoy soluble) , endostatina, Ep-CAM (MK-1) , cadena kappa ligera de inmunoglobulina libre, cadena lambda ligera de inmunoglobulina libre, herstatina, cromogranina A, adrenomedulina, integrina, receptor de factor de crecimiento epidérmico, cinasa de tirosina receptor de factor de crecimiento epidérmico, péptido 20 N-terminal pro-adrenomedulina, factor de crecimiento endotelial vascular, receptor del factor de crecimiento endotelial vascular, receptor de factor de célula de tallo, c-kit/KDR, KDR y midcina. Marcadores de enfermedad infecciosa ejemplares incluyen sin limitación viremia, bacteremia, sepsis, PMN elastasa, complejo de PMN elastasa/al-PI, proteína D surfactante (SP-D) , antígeno HBVc, antígeno HBVs, anti-HBVc, anti-HIV, antígeno de célula supresor T, proporción de antígeno de célula T, antígeno de célula T-auxiliar, anti-HCV, pirógenos, antígenos p24, muramil -dipéptido. Marcadores de diabetes ejemplares incluyen sin limitación C-péptido, hemoglobina Ale, albúmina glicada, productos finales de glicosilación avanzada (AGE), 1,5-anhidroglucitol , polipéptido inhibidor gástrico, glucosa, hemoglobina, ANGPTL3 y 4. Marcadores de inflamación ejemplares incluyen sin limitación factor reumatoide (RF) , anticuerpo antinuclear (ANA) , proteína C-reactiva (CRP) , proteína celular clara (uteroglobina) . Marcadores de alergia ejemplar incluyen sin limitación IgE total e IgE específico. Marcadores de autismo ejemplares incluyen sin limitación ceruloplasmina, metalotioneína, zinc, cobre, B6 , B12, glutationa, fosfatasa alcalina y activación de fosfatasa apo-alcalina. Marcadores de alteraciones de coagulación ejemplares incluyen sin limitación b-tromboglobulina, factor 4 de plaqueta, factor de Von Willebrand. En algunas modalidades, un marcador puede ser específico de terapia. Inhibidores de COX incluyen sin limitación TxB2 (Cox-1) , 6-ceto-PGF-l-alfa (Cox 2) , 11-deshidro-TxB-la (Cox-1) . Otros marcadores de la presente invención incluyen sin limitación leptina, receptor de leptina y procalcitonina, proteína S100 de cerebro, sustancia P, 8-iso-PGF-2a. Marcadores geriátricos ejemplares incluyen sin limitación, enolasa neurona-específica, GFAP y S100B. Marcadores ejemplares de estatus nutricional incluyen sin limitación, prealbúmina, albúmina, proteína de enlace de retinol (RBP) , transferina, proteína estimuladora de acilación (ASP) , adiponectina, proteína Agouti-relacionada (AgRP) , proteína 4 semejante a angiopoyetina (ANGPTL4 , FIAF) , péptido C, AFABP (proteína de enlace de ácido graso de adipocito, FABP4) . Proteína estimuladora de acilación (ASP) , EFABP (proteína de enlace de ácido graso epidérmico, FABP5) , glicentina, glucagón, péptido- 1 semejante a glucagón, péptido-2 semejante a glucagón, grelina, insulina, leptina, receptor de leptina, PYY, RELM, resistina y sTfR (receptor de transferina soluble) . Marcadores ejemplares de metabolismo de lípidos incluyen sin limitación Apo-lipoproteínas (varias), Apo-Al, Apo-B, Apo-C-CII, Apo-D, Apo-E. Marcadores de estatus de coagulación ejemplares incluyen sin limitación factor I: fibrinógeno, factor II: protrombina, factor III: factor de tejido, factor IV: calcio, factor V: proacelerina, factor VI, factor VII: proconvertina, factor VIII; factor anti-hemolítico, factor IX: factor de Christmas, factor X: factor de Stuar-Prower, factor XI: antecedente de tromboplastina de plasma, factor XII: factor de Hageman, factor XIII: factor estabilizante de fibrina, precalicreína, quininogeno de alto peso molecular, proteína C, proteína S, D-dímero, activador de plasminógeno de tejido, plasminógeno, a2-antiplasmina, inhibidor 1 de activador de plasminógeno (PAI1) . Anticuerpos monoclonales ejemplares incluyen aquellos para EGFR, ErbB2 , e IGF1R. Inhibidores de cinasa de tirosina ejemplares incluyen sin limitación Abl, Kit, PDGFR, Src, ErbB2 , ErbB4 , EGFR, EphB, VEGFR1-4, PDGFRb, FLt3, FGFR, PKC, Met, Tie2 , RAF y TrkA. Inhibidores de serina/treolina Ciñas incluyen sin limitación AKT, Aurora A/B/B, CDK, CDK (pan), CDK1-2, VEGFR2 , PDGFRb, CDK4/6, MEK1-2, mTOR, y PKC-beta. Objetivos de GPCR incluyen sin limitación receptores de histamina, receptores de serotonina, receptores de angiotensina, adrenoreceptores, receptores de acetilcolina muscarínicos, receptores GnRH, receptores de dopamina, receptores de prostaglandina y receptores de ADP. En una modalidad separada, la presente invención proporciona un método de monitoreo de más de un parámetro farmacológico útil para determinar la eficacia y/o toxicidad de un agente terapéutico. El método comprende someter una muestra de fluido corporal de un sujeto administrado con el agente terapéutico a un dispositivo de fluido para monitorear más de un parámetro farmacológico, el dispositivo de fluido comprende por lo menos una unidad de recolección de muestra y un conjunto de análisis que comprende reactivos de reacción; accionar el dispositivo de fluido y dirigir los reactivos de inmunoanálisis dentro del dispositivo de fluido; permitir que la muestra de fluido corporal reaccione con los reactivos de inmunoanálisis para producir señales detectables indicadoras de los valores del más de un parámetro farmacológico de la muestra y detectar la señal detectable generada de la muestra de fluido corporal . En donde se desee, el método involucra además repetir las etapas a un intervalo de tiempo indicado por una señal inalámbrica comunicada al sujeto. Para los propósitos de esta invención, un "agente terapéutico" se propone incluir cualesquier sustancias que tienen utilidad y/o potencial terapéutico. Tales sustancias incluyen pero no están limitadas a compuestos de biológicos o químicos tales como moléculas, péptidos, proteínas orgánicas o inorgánicas simples o complejos (por ejemplo anticuerpos) o polinucleótidos (por ejemplo antisentido) . Un vasto arreglo de compuestos pueden ser sintetizados, por ejemplo polímeros, tales como polipéptidos y polinucleótidos y compuestos orgánicos sintéticos basados en varias estructuras de núcleo y estas también están incluidas en el término "agente terapéutico". Además, varias fuentes naturales pueden proporcionar compuestos para selección, tales como extractos de planta o animales y los semejantes. Se debe entender, aunque no siempre se afirma explícitamente que el agente es usado solo o en combinación con otro agente, que tiene la misma o diferente actividad biológica como los agentes identificados por la selección de la invención. Se pretende que los agentes y métodos también sean combinados con otras terapias. Los parámetros farmacodinámicos (PD) de acuerdo con la presente invención incluyen sin limitación parámetros físicos tales como temperatura, pulso cardiaco/pulso, presión sanguínea y velocidad respiratoria y biomarcadores tales como proteínas, células y marcadores celulares. Los biomarcadores podrían ser indicadores de enfermedad o podrían ser el resultado de la acción de un fármaco. Los parámetros farmacocinéticos (PK) de acuerdo con la presente invención incluyen sin limitación concentración de fármaco y concentración de metabolito de fármaco. La identificación y cuantificación de los parámetros de PK en tiempo real de un volumen de muestra es extremadamente deseable para la seguridad apropiada y eficacia de los fármacos. Si las concentraciones del fármaco y metabolito están fuera de un intervalo deseado y/o metabolitos no esperados son generados debido a una reacción inesperada al fármaco, puede ser necesaria acción inmediata para asegurar la seguridad del paciente. Similarmente, si cualquiera de los parámetros farmacodinámicos (PD) cae fuera de intervalo deseado durante un régimen de tratamiento, una acción inmediata puede también que ser tomada.

En modalidades preferidas, los datos de parámetros físicos son almacenados en o comparados con perfiles almacenados de datos de parámetros físicos en un sistema de bioinformática que puede ser un dispositivo externo que incorpora datos farmacogenómicos y farmacocinético a sus modelos para la determinación de toxicidad y dosificación. No solamente genera estos datos para estudios clínicos años antes de los procesos actuales sino que también permite la eliminación de disparidades actuales entre la eficacia aparente y toxicidad real de fármacos por medio de monitoreo continuo en tiempo real . Durante el proceso de decisión de avanzar/no avanzar en estudios clínicos, estudios de población comparativos a gran escala se pueden llevar a cabo con los datos almacenados en la base de datos. Esta compilación de datos y monitoreo en tiempo real permite que más pacientes entren a estudios clínicos de manera segura más temprano de lo que se permite actualmente. En otra modalidad, biomarcadores descubiertos en estudios de tejido humano pueden ser apuntados por el dispositivo para una exactitud mejorada en la determinación de rutas de fármaco y eficacia en estudios de cáncer. En otra modalidad, la presente invención proporciona un método para detectar por lo menos dos analitos distintos de diferentes concentraciones en un fluido corporal de un sujeto que comprende proporcionar un dispositivo de fluido que comprende una unidad de recolección de muestras, un conjunto de análisis y una pluralidad de canales en comunicación fluida con la unidad de recolección de muestras y/o el conjunto de análisis; permitir que una muestra de fluido corporal reaccione con una pluralidad de reactivos contenidos en el conjunto de análisis para producir señales indicadores de las concentraciones de por lo menos dos analitos y detectar las señales que son indicadoras de la presencia o ausencia de por lo menos dos analitos distintos, en donde las señales son detectables en un intervalo de tres órdenes de magnitud. Actualmente, existe la necesidad de detectar más de un analito, en donde los analitos están presentes en un intervalo de concentración ampliamente variable, por ejemplo, un analito en la concentración de pg/ml y otro está en la concentración de ng/ml . TOSCA descrito en la presente tiene la capacidad de analizar simultáneamente analitos que están presentes en la misma muestra en un amplio intervalo de concentración. La figura 8 muestra una modalidad en donde dos analitos, metabolito de prostaciclina y metabolito de tromboxano, han sido identificados y cuantificados y sus concentraciones son diferentes por más de tres órdenes de magnitud. Otra ventaja de tener la capacidad de detectar concentraciones de diferentes analitos presentes en un intervalo de concentración amplio es la capacidad de relacionar las concentraciones de estos analitos con la seguridad y eficacia de múltiples fármacos administrados a un paciente. Por ejemplo, interacciones fármaco- fármaco inesperadas pueden ser una causa común de reacciones de fármaco adversas. Una técnica de medición concurrente en tiempo real para medir diferentes analitos ayudaría a evitar la consecuencia potencialmente desastrosa de interacciones de fármaco-fármaco adversas. Al tener la habilidad de monitorear la proporción de cambio de una concentración de analito o PD o PK en un período de tiempo en un solo sujeto o efectuar un análisis de tendencia sobre la concentración, PD o PK, ya sea que sean concentraciones de fármaco o sus metabolitos, puede ayudar a evitar situaciones potencialmente peligrosas. Por ejemplo, si la glucosa fuera el analito de interés, la concentración de glucosa en una muestra en un tiempo dado también como la proporción de cambio de la concentración de glucosa en un período de tiempo dado podría ser altamente útil para predecir y evitar, por ejemplo eventos hipoglicémicos. Tal análisis de tendencia tiene implicaciones benéficas amplias en el régimen de dosificación de fármaco. Cuando múltiples fármacos y sus metabolitos están involucrados, la capacidad de marcar una tendencia o tomar medidas proactivas es frecuentemente deseable. Así, la presente invención proporciona un método para efectuar un análisis de tendencia sobre la concentración de un analito en un sujeto. El método comprende (a) proporcionar un dispositivo de fluido que comprende por lo menos una unidad de recolección de muestras, un conjunto de inmunoanálisis que contiene reactivos de inmunoanálisis, una pluralidad de canales en comunicación fluida con la unidad de recolección de muestras y/o el conjunto de inmunoanálisis; (b) accionar el dispositivo de fluido y dirigir los reactivos de inmunoanálisis dentro del dispositivo de fluido; (c) permitir que una muestra del fluido corporal de menos de aproximadamente 500 µl reaccione con los reactivos de inmunoanálisis contenidos en el conjunto de inmunoanálisis para producir una señal detectable indicadora de la presencia del analito en la muestra; (d) detectar la señal detectable generada del analito recolectado en la muestra de fluido corporal, y (e) repetir las etapas (a) a (d) para un solo paciente en un período de tiempo para detectar concentraciones del analito, efectuando mediante esto el análisis de tendencia. En algunas modalidades, un método para detectar un analito en un fluido corporal de un sujeto utilizando un análisis transmitido de un dispositivo externo es proporcionado. El método comprende proporcionar un dispositivo de fluido que comprende por lo menos una unidad de recolección de muestras y un conjunto de inmunoanálisis que contiene reactivos de inmunoanálisis; detectar el dispositivo de fluido y transmitir inalámbricamente un protocolo de inmunoanálisis al dispositivo; permitir que una muestra de fluido corporal Sl reaccione con los reactivos de inmunoanálisis para producir una señal detectable indicadora de la presencia del analito utilizando el protocolo de inmunoanálisis permitido y detectar la señal detectable. La comunicación entre un conjunto de lector y un dispositivo de almacenamiento externo permite que un conjunto de lector de la presente invención descargue un protocolo específico del dispositivo de fluido para ejecutarse en el dispositivo de fluido en base a la identidad del dispositivo de fluido. Esto permite que un conjunto de lector sea usado intercambiablemente con cualquier dispositivo de fluido apropiado descrito en la presente. Además, el dispositivo externo puede almacenar una pluralidad de protocolos asociados con un dispositivo de fluido dado y dependiendo por ejemplo del régimen o plan de tratamiento del sujeto, diferentes protocolos pueden ser comunicados del dispositivo externo a conjunto de lector para ser ejecutado en el dispositivo de fluido para detectar una variedad de analitos. El dispositivo externo puede también almacenar una pluralidad de protocolos asociados no solamente con un dispositivo de fluido, sino también con un sujeto o sujetos particulares, de tal manera que un protocolo puede estar asociado con un sujeto también como con un dispositivo de fluido. En algunas modalidades, la presente invención proporciona un método empresarial para ayudar a un clínico en proporcionar un tratamiento médico individualizado que comprende recolectar por lo menos un parámetro farmacológico de un individuo que recibe una medicación, la etapa de recolección es efectuada al someter una muestra de fluido corporal a reactivos contenidos en un dispositivo de fluido, que es provisto al individuo para producir una señal detectable indicador del por lo menos un parámetro farmacológico y efectuar una referencia cruzada con la ayuda de registros médicos de computadora del individuo con el por lo menos un parámetro farmacológico del individuo, ayudando mediante esto al clínico en proporcionar el tratamiento médico individualizado . La presente invención permite la cuantificación automática de un parámetro farmacológico de un paciente también como comparación automática del parámetro con por ejemplo los registros médicos del paciente que pueden incluir una historia del parámetro monitoreado o registros médicos de otro grupo de sujetos. El acoplamiento del monitoreo del analito en tiempo real con un dispositivo externo que puede almacenar datos también como efectuar cualquier tipo de procesamiento de datos o algoritmo, por ejemplo, proporciona un dispositivo que puede ayudar con el cuidado típico del paciente que puede incluir, por ejemplo, comparar los datos actuales del paciente con datos pasados del paciente. Por consiguiente, la presente invención crea un método empresarial que efectúa efectivamente por lo menos parte del monitoreo de un paciente que es efectuado actualmente por el personal médico. En algunas modalidades, la presente invención proporciona un método empresarial de monitoreo de un estudio clínico de un agente farmacéutico que comprende recolectar por lo menos un parámetro farmacológico de un sujeto en estudio clínico en una pluralidad de intervalos de tiempo, la etapa de recolección es efectuada en cada intervalo de tiempo al someter una muestra del fluido corporal del sujeto a reactivos contenidos en un dispositivo de fluido, en donde el dispositivo de fluido es provisto al sujeto para producir señales detectables indicadoras de los valores del por lo menos un parámetro farmacológico en una pluralidad de intervalos de tiempo; comparar los valores detectados con un valor de umbral predeterminado para el parámetro farmacológico; notificar a un clínico y/o patrocinador involucrado en el estudio clínico cuando existe una discrepancia estadísticamente significativa entre los valores detectados y el valor de umbral . La figura 19 muestra un diagrama de flujo ejemplar de un método empresarial del monitoreo de un estudio clínico de un agente farmacéutico. Como se revela en la presente, un dispositivo de fluido recolecciona parámetros de PK y/o PD relacionados con un paciente de interés. Los datos son transmitidos de manera segura por ejemplo en una red celular o internet e interpretaciones de los datos son derivadas por medio de cálculos en una serie de algoritmos bioestáticos en el dispositivo externo que correlaciona los perfiles farmacodinámicos, farmacocinéticos y farmacogenéticos . Adicionalmente, los datos pueden ser comparados con información almacenada en base de datos. La información almacenada podría ser los propios datos de PK y PD del paciente en un régimen de tratamiento previo, datos relacionados con placebo, datos farmacogenómicos que con de relevancia al paciente particular o datos relacionados con un grupo de pacientes. Si el análisis efectuado en la etapa 2 sugiere que no hay ninguna diferencia significativa entre los datos del paciente y los datos almacenados, tal como se determina al utilizar algoritmos apropiados, entonces se toma "ninguna acción". Sin embargo, si hay una diferencia significativa, entonces la etapa 4 determina el tamaño de la diferencia. Si la diferencia es grande, se toma acción inmediata. Un tipo ejemplar de acción inmediata podría ser proporcionar una alerta de emergencia al proveedor del cuidado de la salud del paciente. Otra clase de acción inmediata podría ser enviar instrucciones al dispositivo de fluido para alterar la dosificación del agente farmacéutico. Si en la etapa 4 la diferencia es pequeña, entonces el algoritmo podría determinar si continuar verificando los parámetros y/o alterar una dosificación del agente farmacéutico. Este método proporciona dosificación automática a por lo menos personal médico o un sujeto de una necesidad posible de tomar acción médica adicional. En donde existe una discrepancia estadísticamente significativa entre los valores detectados y el valor de umbral, una acción adicional puede ser tomada por un práctico médico. Tal acción puede involucrar una acción médica tal como ajustar la dosificación del agente terapéutico; puede también involucrar una decisión empresarial tal como continuar, modificar o terminar el estudio clínico. Una de las ventajas significativas de la red contemplada es ilustrada en la figura 20. Ya que toda la información es encausada seguramente por medio de internet, este permite el compartimiento simultáneo de la información con varias partes interesadas, en tanto que satisface las necesidades clínicas, regulatorias y empresariales apropiadas. Por ejemplo, el diagrama de flujo muestra como se satisface las necesidades clínicas del paciente. La habilidad de la compañía que está patrocinando un estudio de fármaco, por ejemplo un estudio clínico o una vigilancia de Fase IV post -mercado, para monitorear en tiempo real la seguridad y eficacia del desempeño del fármaco proporciona información regulatoria y empresarial extremadamente valiosa. Similarmente, la habilidad de un pagador para monitorear la eficacia y quizás efectividad de costo de un tratamiento es extensamente mejorada por su habilidad para obtener datos en tiempo real. En algunas modalidades, la presente invención proporciona un método para transmitir un parámetro farmacológico de un paciente vía un dispositivo portátil comprende proporcionar un dispositivo de fluido que comprende por lo menos una unidad de recolección de muestras y un conjunto de análisis; permitir que una muestra del fluido corporal reaccione con reactivos contenidos dentro del conjunto de análisis para producir una señal detectable indicadora de la presencia del analito; detectar la señal detectable; transmitir la señal a un dispositivo externo; procesamiento de la señal en el dispositivo externo y transmitir la señal procesada vía un dispositivo portátil. Una ventaja de la presente invención es que los resultados de análisis pueden ser comunicados sustancialmente de manera inmediata a cualesquier terceras partes que se puede beneficiar de obtener los resultados. Por ejemplo, una vez que la concentración del analito es determinada en el dispositivo externo, puede ser transmitida a un paciente o personal médico que puede necesitar tomar acción adicional . La etapa de comunicación a una tercera parte puede ser efectuada inalámbricamente como se describe en la presente o al transmitir los datos a un dispositivo portátil de tercera parte, la tercera parte puede ser notificada de los resultados de análisis virtualmente en cualquier tiempo y en cualquier lugar. Así, en un escenario sensible al tiempo, un paciente puede ser contactado inmediatamente en cualquier parte si se puede requerir acción médica urgente. En algunas modalidades, un método para seleccionar automáticamente un protocolo a ser efectuado en un dispositivo de fluido comprende proporcionar un dispositivo de fluido que comprende un detector de identificador y un identificador,-detectar el identificador con el detector de identificador; transferir el identificador a un dispositivo externo y seleccionar un protocolo a ser efectuado en el dispositivo de fluido de una pluralidad de protocolos en el dispositivo externo asociado con el identificador. Al detectar cada dispositivo de fluido en base a un identificador asociado con el dispositivo de fluido después que es insertado en el conjunto de lector, el sistema de la presente invención permite que protocolos específicos del dispositivo de fluido sean descargados de un dispositivo externo y ejecutados en el dispositivo de fluido. En algunas modalidades, el dispositivo externo puede almacenar una pluralidad de protocolos asociados con el dispositivo de fluido o asociados con un paciente particular o grupo de pacientes. Por ejemplo, cuando el identificador es transmitido al dispositivo externo, elementos de programación en el dispositivo externo pueden obtener el identificador. Una vez obtenido, los elementos de programación en el dispositivo externo tal como una base de datos, pueden usar el identificador para identificar protocolos almacenados en la base de datos asociada con el identificador. Si solamente un protocolo está asociado con el identificador, por ejemplo, la base de datos puede seleccionar el protocolo y elementos de programación en el dispositivo externo pueden luego transmitir el protocolo al conjunto de comunicación en el conjunto de lector. La habilidad de usar protocolos asociados específicamente con un dispositivo de fluido permite que cualquier dispositivo de fluido apropiado sea usado con un solo conjunto de lector y así virtualmente cualquier analito de interés puede ser detectado con un solo conjunto de lector. En algunas modalidades, múltiples protocolos pueden estar asociados con un solo identificador. Por ejemplo, si es benéfico detectar del mismo paciente un analito una vez a la semana y otro analito dos veces a la semana, protocolos en el dispositivo externo asociados con el identificador pueden también cada uno estar asociado con un día de la semana diferente, de tal manera que cuando el identificador es detectado, los elementos de programación en el dispositivo externo pueden seleccionar un protocolo específico que está asociado con el día de la semana. En algunas modalidades, un paciente puede ser provisto con una pluralidad de dispositivos de fluido para uso en la detección de una variedad de analitos. Un sujeto puede por ejemplo usar diferentes dispositivos de fluido en días de la semana diferentes. En algunas modalidades, los elementos de programación en el dispositivo externo asocian el identificador con un protocolo pueden incluir un proceso para comparar el día actual con el día en que el dispositivo de fluido va a ser usado en base a un estudio clínico por ejemplo. Si por ejemplo, los dos días de la semana no son idénticos, el dispositivo externo puede enviar inalámbricamente notificación al sujeto utilizando cualquiera de los métodos descritos en la presente o conocidos en el arte para notificar que un dispositivo de fluido incorrecto está en el conjunto de lector y también del dispositivo de fluido correcto para usar aquel día. Este ejemplo es solamente ilustrativo y puede fácilmente ser extendido por ejemplo a notificar a un sujeto de que un dispositivo de fluido no es usado a la hora correcta del día. En algunas modalidades, la presente invención proporciona un método de manufactura de un dispositivo de fluido para detectar un analito en un fluido biológico de un sujeto comprende proporcionar una pluralidad de capas de un material. El método comprende proporcionar una pluralidad de capas de un dispositivo de fluido y soldar ultrasónicamente las capas conjuntamente de tal manera que existe una red de fluido entre una unidad de recolección de muestras, por lo menos una cámara de reactivos, por lo menos un sitio de reacción y por lo menos una cámara de desperdicio. En donde se desee, el dispositivo de fluido manufacturado mediante este método comprende por lo menos en una de las capas una unidad de recolección de muestras, por lo menos una de las capas comprende un sitio de filtración y por lo menos una de las capas comprende una cámara de reactivos y por lo menos una de las capas comprende un canal de fluido y por lo menos una de las capas comprende un sitio de reacción y por lo menos una de las capas comprende una cámara de desperdicio. En modalidades preferidas, las diferentes capas del dispositivo de fluido son soldadas ultrasónicamente de manera conjunta de acuerdo con métodos conocidos en el arte. Las capas pueden también ser acopladas conjuntamente utilizando otros métodos, en los que se incluyen sin limitación estampado, pegado térmico, adhesivos o en el caso de cierto sustratos, por ejemplo vidrio o sustratos poliméricos semi-rígidos y no rígidos, una adhesión natural entre los dos componentes. En algunas modalidades, la presente invención proporciona un método para obtener datos farmacológicos útiles para determinar la eficacia y/o toxicidad de un agente farmacéutico de un animal de prueba. El método involucra las etapas de: (a) proporcionar un dispositivo de fluido que comprende por lo menos una unidad de recolección de muestras, un conjunto de análisis y una pluralidad de canales en comunicación fluida con la unidad de recolección de muestras y/o el conjunto de análisis; (b) permitir que una muestra de fluido biológico de menos de aproximadamente 50 µl reaccione con los reactivos contenidos en el conjunto de análisis para producir una señal detectable generada de un analito recolectado inicialmente en la muestra que es indicadora de un parámetro farmacológico y (c) detectar la señal detectable y (d) repetir las etapas de reacción y detección con una segunda muestra de fluido biológico del mismo animal de prueba. En una modalidad relacionada, la presente invención proporciona un método que comprende (a) proporcionar un dispositivo de fluido que comprende por lo menos una unidad de recolección de muestras, un conjunto de análisis y una pluralidad de canales en comunicación fluida con la unidad de recolección de muestras y/o el conjunto de análisis; (b) permitir que una muestra de fluido biológico reaccione con reactivos contenidos dentro del conjunto de análisis para producir una señal detectable generada de un analito recolectado inicialmente en la muestra que es indicadora de un parámetro farmacológico y (c) detectar la señal detectable y (d) repetir las etapas de reacción y detección con una segunda muestra de fluido biológico del mismo animal de prueba, en donde el animal no es sometido a anestesia. Cuando se usan animales de laboratorio en pruebas pre-clínicas de un agente farmacéutico, es frecuentemente necesario exterminar el sujeto de prueba para extraer suficiente sangre para efectuar un análisis para detectar un analito de interés. Esto tiene tanto implicaciones financieras como éticas y como tal puede ser ventajoso tener la posibilidad de extraer una cantidad de sangre de un animal de prueba de tal manera que el animal no necesite ser exterminado. Además, esto puede también permitir que el mismo animal de pruebas sea probado con múltiples agentes farmacéuticos en diferentes tiempos, permitiendo así una prueba pre-clínica más efectiva. En promedio, el volumen de sangre total en un rato, por ejemplo, es 6-8 ml de sangre por 100 gramos de peso corporal. Un beneficio de la presente invención es que solo un volumen muy pequeño de sangre es requerida para efectuar pruebas pre-clínicas en ratones u otros animales de laboratorio pequeños. En algunas modalidades, se extraer entre aproximadamente 1 microlitro y aproximadamente 50 microlitros. En modalidades preferidas, entre aproximadamente 1 microlitro y 10 microlitros son extraídos. En modalidades preferidas, aproximadamente 5 microlitros de sangre son extraídos. Una ventaja adicional de mantener el animal de prueba vivo es evidente en un estudio de curso de tiempo pre-clínico. Cuando múltiples ratones, por ejemplo, son usados para monitorear los niveles de un analito en un fluido corporal del sujeto de prueba con el paso del tiempo, la variable agregada de usar múltiples sujetos es introducida a la prueba o estudio. Sin embargo, cuando un solo animal de prueba puede ser usado como su propio control en un curso de tiempo, se puede efectuar un estudio pre-clínico más exacto y benéfico. En algunas modalidades, un método para monitorear automáticamente el apego o cumplimiento del paciente con un tratamiento médico utilizando un dispositivo de fluido comprende permitir que una muestra de fluido corporal reaccione con reactivos de análisis con un dispositivo de fluido para producir una señal detectable indicadora de la presencia de un analito en la muestra; detectar la señal con el dispositivo de fluido; comparar la señal con un perfil conocido asociado con el tratamiento médico para determinar si el paciente es cumpliente o no cumpliente con el tratamiento médico y notificar a un paciente del cumplimiento o no cumplimiento o apego o no apego. El no cumplimiento con un tratamiento médico, que incluye un estudio clínico, puede socavar seriamente la eficacia del tratamiento o prueba. Como tal, en algunas modalidades, el sistema de la presente invención puede ser usado para monitorear el apego o cumplimiento del paciente y notificar al paciente u otro personal médico de tal no apego o cumplimiento. Por ejemplo, un paciente que toma un agente farmacéutico como parte del plan de tratamiento médico puede tomar una muestra de fluido corporal que es analizada como se describe en la presente, pero una concentración de metabolito, por ejemplo detectada por el conjunto de lector puede estar a un nivel elevado en comparación con un perfil conocido que indicará que múltiples dosis del agente farmacéutico han sido tomadas. El paciente o personal médico puede ser notificado de tal no cumplimiento o apego vía cualquiera de los métodos inalámbricos discutidos en la presente, en los que se incluyen sin limitación, notificación vía un dispositivo portátil tal como un PDA o teléfono celular. Tal perfil conocido puede estar localizado o almacenado en un dispositivo externo descrito en la presente. En algunas modalidades, el no cumplimiento o no apego puede incluir tomar una dosis no apropiada de un agente farmacéutico que incluye sin limitación múltiples dosis y ninguna dosis o puede incluir mezclar inapropiadamente agentes farmacéuticos. En modalidades preferidas, un paciente es notificado sustancialmente de manera inmediata después que la señal es comparada con un perfil conocido. Un paciente o sujeto de una prueba clínica puede olvidar tomar una muestra de fluido corporal como se describe en la presente, en algunas modalidades, un método para alertar a un paciente para probar una muestra de fluido corporal utilizando un dispositivo de fluido como se describe en la presente comprende proporcionar un protocolo a ser ejecutado en el dispositivo de fluido, el protocolo está ubicado en un dispositivo externo, asociado con e paciente y que comprende una hora y fecha para probar la muestra de fluido corporal y notificar el paciente de probar el fluido corporal en la misma fecha y hora si la muestra no ha sido probada. En algunas modalidades, un paciente puede ser notificado inalámbricamente como se describe en la presente. Un paciente puede ser provisto con un dispositivo o dispositivos de fluido cuando procura una prescripción de fármacos mediante cualesquier métodos comunes, por ejemplo en una farmacia. Asimismo, un sujeto de prueba clínica. El paciente o información de contacto del sujeto, en los que se incluyen sin limitación teléfono celular, dirección de correo electrónico, dirección de mensajería de texto u otros medios de comunicación inalámbrica puede en aquel tiempo ser introducidos al dispositivo externo y asociado con el paciente o sujeto como se describe en la presente, por ejemplo en una base de datos. Los elementos de programación en el dispositivo externo pueden incluir un guión u otro programa que puede detectar cuando una señal generada de un dispositivo de detección todavía no ha sido enviada al dispositivo externo, por ejemplo en un tiempo dado y luego el dispositivo externo puede enviar una alerta que notifica al paciente que tome una muestra de fluido corporal. En algunas modalidades, la presente invención proporciona un método para determinar la confiabilidad de un análisis por un analito en un fluido corporal con el uso de un dispositivo de fluido. El método comprende las etapas de: (a) proporcionar un sistema, el sistema comprende un dispositivo de fluido, el dispositivo de fluido comprende una unidad de recolección de muestras y un conjunto de análisis, en donde la unidad de recolección de muestras permite que una muestra de fluido corporal reaccione con los reactivos contenidos dentro del conjunto de análisis, para detectar la presencia de un analito en un fluido corporal de un sujeto y un conjunto de lector para detectar la presencia del analito y (b) detectar con un detector un cambio en los parámetros de operación bajo los cuales el sistema opera normalmente. En algunos aspectos, un detector puede estar presenta ya sea en el dispositivo de fluido, el conjunto de lector, ambos o en algunos casos puede ser ventajoso incluir un detector en el empaque en el cual el dispositivo de fluido y/o conjunto de lector con empatados. El detector puede ser, por ejemplo sin limitación detectar cambios de temperatura o presión que pueden proporcionar un cálculo de concentración de analito inexacta. Por ejemplo, si la temperatura de los reactivos almacenados en el dispositivo de fluido cae fuera de un intervalo de temperatura aceptable, esto puede indicar que la detección no será exacta utilizando entonces el algoritmo de calibración y procesamiento existente, por ejemplo. Asimismo, por ejemplo, la presión en la bomba en el conjunto de lector puede caer fuera del intervalo aceptable . En algunas modalidades, un detector de humedad es provisto para detectar la presencia de humedad en el cartucho antes de que el análisis comience. En algunas modalidades, puede ser el tiosianato en la capa del dispositivo de fluido y sal de hierro en otra capa, en donde un tinte es formado cuando estos son mezclados, mediante lo cual el tinte es una indicación visual de la presencia de humedad . En algunos sistemas desechables, particularmente en aquellos en donde la adquisición de muestras es efectuado por el paciente o usuario final, los errores de medición son comunes. Errores significativos debidos por ejemplo al manejo del paciente de la muestra, podrían ser debidos al método de recolección de muestras. Un paciente pueden no recolectar el volumen correcto de la muestra, la recolección puede no ser efectuada a la hora apropiada o la muestra puede no ser manipulada de manera apropiada, comprometiendo así la integridad de la muestra. Puede ser ventajoso cuando se usa un sistema desechable en el cual el paciente controla la recolección y manipulación de muestra inicial utilizar métodos para minimizar las consecuencias de tales errores por ejemplo ya sea al alertar al paciente que repita la prueba o use etapas de calibración para compensar tales errores. Por consiguiente hay una necesidad significativa por métodos que involucrarían la calibración en unidades de análisis portátiles o desechables, particularmente en aquellas unidades en donde los volúmenes de muestra y reactivo no están en los intervalos de microlitro y nanolitro, en tanto que mantener una temperatura controlada es impráctico, en donde la muestra no es "limpia" de tal manera que los errores son provocados por sustancias interferentes, tales como hematócrito, por ejemplo o en donde es difícil mantener las condiciones deseadas tales como temperatura o calidad de reactivo, en los que se incluyen el volumen de muestra apropiado y manipulación por el usuario. Los inmunoanálisis tienen una respuesta característica similar en forma a la isoterma de enlace de Scatchard bien conocida (Enlace/Enlace máximo (B/BO) Concentración de ligando/ (K + Concentración de ligando) en donde B es la cantidad del analito marcado enlazado a una fase sólida cuando el analito está presente, BO es la cantidad enlazada cuando ningún analito está presente y K es la constante de disociación. La forma matemática de tales respuestas de análisis es hiperbólica. Los resultados de los inmunoanálisis de los tipos descritos anteriormente son analizados comúnmente utilizando las funciones conocidas (In-logit) o (log-logit) , en las cuales el marcador de análisis (por ejemplo en un proceso de dos etapas, analito marcado con fosfatasa alcalina) enlazado a una fase sólida cuando el analito está presente en el análisis ("B") es comparado con la cantidad enlazada cuando ningún analito está presente ("BO") para proporcionar la proporción B/BO. Entonces la función "logit" (logit = Lo [ (B/BO) / (1-B/B0) ] ) es graficada contra Log de (Concentración de analito) dando como resultado una línea recta. (también se pone usar logaritmos naturales en lugar de logaritmos de base 10) . La pendiente e intercepción de esta gráfica puede ser usada para derivar ecuaciones simples que permiten el cálculo de (a) señal de análisis como función de la concentración de analito o (b) la concentración de analito como función de la señal de análisis. Señal de análisis como función de la concentración de analito o (b) la concentración de analito como función de la señal de análisis. Un ejemplo de tal análisis es mostrado en la figura 21 utilizando tromboxano como el analito de interés. El mejor ajuste a los datos es dado por la Ecuación 1: Señal = (A-D) / (1+ (concentración analito/C) ?B) +D [Ecuación 1], en donde A es la señal a concentración de analito cero, D es la señal a concentración de analito infinito, C es la concentración de analito alcanzada a un nivel de señal a la mitad entre A y D, y B es un parámetro de forma. La relación entre concentración de analito y señal es dada por: Concentración de analito C* ((( (A-D) / (Señal - D)-l)?(l/B)) [Ecuación 2], en donde A, B, C y D son idénticos a los parámetros usados en la Ecuación 1. Es posible calcular errores que ocurren de la mala calibración utilizando las ecuaciones descritas anteriormente en la presente. (La función de Concentración de analito de la Ecuación 2 es diferenciada con respecto a cada variable potencial A, B, C, D y Señal) . Valores estimativos de la diferencia entre el valor ideal de la variable y el valor real en el sistema son usados como valores ? en el cálculo (? (concentración) = (d (Concentración) /d (Parámetro) ) * ?parámetros) . Los errores en la calibración son reflejados en valores erróneos de A, B, C y D. Cada uno de estos parámetros es influenciado por un factor diferente. Por ejemplo, los efectos de la temperatura sobre la calibración de inmunoanálisis tendrá el impacto más fuerte sobre los parámetros A, C y D de la calibración In-logit, en tanto que probablemente tiene un impacto mínimo sobre el parámetro de forma B. La señal detectada, que a su vez puede ser usada para determinar la concentración de analito, es predispuesta o polarizada por uno o más de las siguientes características del conjunto de lector y dispositivo de fluido: elementos ópticos usados en el instrumento para la medición de señal; control de temperatura; la mayoría de los procesos químicos son alternativamente sensibles a la temperatura, en las que se incluyen reacciones enzimáticas y equilibrio entre antígenos y anticuerpos; temporización de etapa de análisis; calibración en relación con un instrumento "ideal" ; la incapacidad del paciente de recalibrar manualmente el dispositivo de fluido cuando es usado; dimensiones del dispositivo de fluido; volumen del conjunto de análisis y su forma; movimiento del fluido dentro del dispositivo; temporización y uniformidad de movimiento de fluido; eficiencia en mezclado (la mayoría de los métodos de análisis en desechables y emplean microfluidos involucraría algo de mezcla) . Las siguientes variaciones de reactivo pueden también contribuir a una señal detectada polarizada: cantidad de reactivo; disolución de reactivo (si está en forma seca) ; cambios en actividad de reactivos enseguida de la manufactura (inestabilidad) (Esto es particularmente importante para "sistemas distribuidos" en donde la vida útiles desechable es determinada comúnmente por reactivos que pueden por ejemplo perder 20% de su actividad. Si pueden ser usados sin comprometer significativamente el desempeño de análisis, la vida en almacenamiento de muchos desechables caros podría ser extendida varias veces y restricciones severas en cuanto a almacenamiento desechable (refrigeración y los semejantes) pueden ser relajados). Además, cuando la calibración es efectuada en la fábrica, los pequeños errores en la estimación de los parámetros de calibración pueden dar como resultado error en la concentración de analito calculada. Las magnitudes de estos errores de calibración y consecuentemente errores introducidos en las concentraciones de estimación de analito puede ser bastante significativa. La figura 21 muestra los datos de dosis-respuesta para un análisis de dos etapas para tromboxano. La curva superior (Logit. test) en la figura 22 muestra una respuesta de análisis típica (In-logit) . Cuando se ajusta el nivel de la señal más alta (A) y la señal más baja (D) , mostrada como "Señal de desplazamiento cero" y "Señal de desplazamiento 100%", respectivamente, las curvas se desplazan como se ve en la figura 22. Los valores calculados correspondientes de error en la concentración que serían calculados de la Ecuación 2 fueran grandes (>20% a través de todo el intervalo del análisis) como se muestra en la figura 23. En la figura 22, la señal es normalizada al restar el valor de D de la señal y dividir la diferencia por (A-D) : (Señal - D) / (A - D) . Este resultado que es usualmente descrito como B/B0 (la proporción de marcador enlazado a una concentración de analito dada a aquella a nivel de analito cero) . La función In-logit fue modificada al agregar 10% de (A - D) a D o restar 10% de (A - D) de A antes de recalcular las señales normalizadas (correspondiente a dos tipos de error de calibración significativo (desplazamiento del valor de A o D respectivamente) . A niveles de señal intermedios entre A y D, el cambio efectuado fue ajustado por 10% * (Señal original -D) / (A-D) . La figura 23 muestra que cuando modificaciones de solo 1% * (A - D) fueron realizadas y la concentración del analito fue calculada, los errores en la concentración fueron todavía significativos a ciertas partes del intervalo de concentración de analito. En una instalación de laboratorio, los errores en la medición de parámetros bioquímicos de sangre y otros fluidos corporales debido a los errores de calibración son tratados utilizando muchos mecanismos de compensación conocidos. Una de las técnicas más simples es agregar una cantidad conocida de una cantidad en trazas de un analito radiomarcado y construir una curva de calibración en base a aquellas lecturas. Otros métodos incluyen agregar una cantidad conocida de un estándar a la solución de analito que necesita ser analizada. Otros métodos incluyen agregar una cantidad conocida de un estándar a la solución de analito que necesita ser analizada. Sin embargo, tales técnicas son imprácticas en un sistema portátil desechable para análisis, sin la adaptación particular de aquellas técnicas para tratar con volúmenes de muestra pequeños, carecen de cantidades grandes de otras soluciones (tales como soluciones reguladoras del pH) y habilidad de ejercer controles precisos sobre los volúmenes de las muestras y sus diluciones. Convencionalmente, un ejercicio de calibración es efectuado en paralelo con el análisis de la muestra. Sin embargo, esto es impráctico en un sistema de análisis desechable autocontenido diseñado para ser compacto y no caro. Para tratar cualesquier desafíos de calibración que pueden ocurrir en tanto que se analizan analitos utilizando un dispositivo de fluido de la presente invención, en algunas modalidades los parámetros A o en modalidades preferidas A y D de la Ecuación 1 descrita anteriormente son medidos dentro del dispositivo de fluido en lugar de usar los valores del fabricante o un dispositivo externo. El (los) valor (es) es (son) comparado (s) con los valores de parámetro estimados cuando el dispositivo de fluido fue calibrado por el fabricante. Los resultados de señal son luego ajustados utilizando la siguiente ecuación: Señalajustada = Señal * (Acalibración de fábrica/Amedido dentro del análisis ) y 1^ ecuación de calibración original (Ecuación 1) es luego usada para calcular la concentración de analito. Alternativamente, los valores A y D medidos al tiempo de análisis son sustituidos por los valores de A y D obtenidos durante la calibración en la fábrica. Comúnmente, la medición de calibración (A/D) se haría en una muestra de solución reguladora del pH, preferentemente para cada analito (en un dispositivo de análisis de analito múltiple) o un analito solamente, si cada análisis responde similarmente a los varios factores que alteran los parámetros de calibración. En algunas modalidades de esta invención, los parámetros de calibración de la Ecuación 1 son corregidos utilizando calibración diferencial. El siguiente ejemplo utilizando tromboxano B2 como el analito ilustra este procedimiento. Tromboxano B2 (TxB2) (1.25 mg) fue disuelto en una mezcla de dimetiisulfóxido (342 µl) y agua (342 µl) . A esta, 5 µl de una solución de clorhidrato de l-(3-dimetilamino) ropil) -3 -etil -carbodiimida en agua (0.1 g/ml) y 10 µl de una solución de n-hidroxi-succinimida en agua (0.1 g/ml) fueron agregados. Después de 1 hora a temperatura ambiente, el resultante de NHS-éster de TxB2 fue usado en la proporción de TxB2 marcado con fosfatasa alcalina (descrito posteriormente en la presente) sin purificación adicional. Fosfatasa alcalina (intestino bovino, Sigma-Aldrich) fue disuelta en solución salina de pH regulado de fosfato a 1 ml/ml. A 1 ml de esta solución se agregaron 120 µl del NHS-éster de TxB2 y se permite que la mezcla reaccione durante 1 hora a temperatura ambiente. Luego el conjugado de enzima-TxB2 fue purificado durante toda la noche mediante diálisis contra solución salina de pH regulado de tris que contiene MgCl2. Se describe un ejemplo de un inmunoanálisis de enzima de dos etapas en donde el TxB2 es el analito. Las muestras y anti-TxB2 monoclonal de ratón (15 µl de Kit Químico Cayman número de catálogo 10005065, diluido apropiadamente a solución reguladora del pH de Assay Designs) fueron agregados a placas de 384 cavidades a las cuales IgG anti-ratón ha sido inmovilizado ( (Becton Dickenson 356177) ) . La muestra consistía de 30 µl de plasma diluido 1:4 con solución reguladora del pH de análisis (Assay Designs Correlate-CLIA™ kit 910-002) y complementado con concentraciones conocidas de TxB2. Otros tipos de muestra (por ejemplo TxB2 disuelto en solución reguladora del pH de análisis) puede ser sustituido. Las placas fueron cubiertas para impedir la evaporación, incubadas a temperatura ambiente con mezcla moderada (100 rpm) en un agitador orbital durante 12 horas. Luego el contenido de las cavidades fue removido mediante aspiración. Tromboxano marcado con fosfatasa alcalina (25 µl diluido 1:1500 con solución reguladora del pH de análisis) fue agregado e incubado a temperatura ambiente durante 2 minutos . El contenido de las cavidades fue removido mediante aspiración y las cavidades fueron lavadas tres veces con 100 µl de solución reguladora del pH de lavado (del Kit de Assay Designs 910-002) . La enzima enlazada a las cavidades fue luego medida y mediante la adición de 40 µl de solución de sustrato Lumiphos™ 530 que contiene (4-metoxi-4- (3-fosfato-fenil-spiro- [1, 2-dioxetan-3 , 2 ' -adamantano] )) . Se permite que la incubación proceda durante 1 hora con mezclado orbital y el producto luminiscente medido en un espectrómetro de Molecular Devices MD5 (tiempo de integración de 0.5 segundos). La figura 21 muestra los datos de dosis-respuesta de análisis típico para un análisis de dos etapas para TxB2. Utilizando la Ecuación 1, los parámetros A, B, C y D son ajustados a la curva mostrada en la figura 21. Como se describe en la presente, aún cambios pequeñas en los valores de los parámetros A y D tienen un impacto significativo sobre la concentración medida. Así, cualesquier errores en el cálculo de A y D son amplificados y la concentración de analito estimada (TxB2) . Este concepto es ilustrado en las figuras 22 y 23, en donde aún un cambio de 1% en (A - D) dio como resultado errores significativos en la estimación de concentraciones de TxB2 en las muestras. En la figura 22, la señal es normalizada al restar el valor de D y dividir la diferencia por (A - D) viz: (Señal - D) / (A - D) . Esto calcula lo que es descrito comúnmente como B/BO (la proporción de marcador enlazado a una concentración de analito dada a aquella de un nivel de analito cero) . La función (In-logit) fue modificada al agregar 10% de (A - D) a D o restar 10% de (A - D) de A antes de recalcular las señales normalizadas (correspondiente a dos tipos de error de calibración significativo (desplazamiento del valor de A o D respectivamente) . A niveles de señal intermedios entre A y D, el cambio efectuado fue ajustado por 10% (Señal original - D) / (A - D) . La figura 23 muestra los errores calculados en la estimación de las concentraciones de analito para un error de 1% en la estimación de A y D. Como se puede ver para las bajas concentraciones de analito, los errores son pronunciados aún para errores pequeños en los parámetros de calibración A y D. Las figuras 24-27 ilustran una modalidad de esta invención en donde la muestra que contiene una concentración de analito desconocida es proyectada con una concentración conocida del analito para minimizar los errores de calibración. La proyección puede ser obtenida mediante una variedad de métodos, por ejemplo al incorporar analito en cantidades conocidas a la cavidad de análisis durante la manufactura del dispositivo de fluido. Cavidades de proyección separadas podrían también ser acomodadas en el dispositivo de fluido descrito en la presente. La figura 24 muestra calibración utilizando diferencias entre la respuesta de señal entre muestras sin proyectar y muestras proyectadas. La cantidad del analito proyectado es indicada por x2 y la original (concentración endógena en la muestra) es denotada como concentración original o xl (pg/ml) . La diferencia en señal entre la muestra sin proyectar y la muestra proyectada es graficada contra la señal para la concentración original para varias cantidades de cantidad conocida de analito (proyección) introducido a la muestra. Los parámetros (In-logit) (para la curva superior en la figura 24) son mostrados en la Tabla 1.

Tabla 1: Parámetros de calibración original para datos mostrados en la figura 24 Los datos mostrados en la curva superior en la figura 24 fueron usados en un ejercicio de recalibración mediante calibración contra la diferencia en señal para cada nivel de concentración original y cada nivel proyectado con 200 pg/ml de analito. La Ecuación 3 mostrada a continuación fue derivada empíricamente y es útil para calcular la concentración endógena original de analito. Los valores de parámetro de mejor ajuste en la Tabla 2 fueron calculados al minimizar la suma del cuadrado de las diferencias entre los valores de analito objetivo y calculados. Concentración = C * ((A - D) /( (Señal -D) ? (1/B))+ E. [Ecuación 3] .

Tabla 2 : Valores de parámetro calculados para calibración de proyección de 1 punto Esta calibración fue verificada como se muestra en la figura 25 (escala logarítmica) y figura 26 (escala lineal) . Nótese que la ecuación de regresión fue calculada para datos en forma lineal. La forma dio como resultado resultados casi perfectos . Los resultados de una modalidad de esta invención son mostrados en la figura 27, en donde la extensión de la recuperación de la señal proyectada es usada para corregir la concentración del valor de la muestra sin proyectar. Este método tiene la ventaja de que los cambios en el parámetro C en la ecuación (In-logit) debida por ejemplo a inestabilidad de reactivo, son tomados en cuenta. El método involucra las siguientes etapas: calcular xl (concentración endógena) y x2 (concentración de proyección) utilizando la calibración original; calcular la recuperación de la proyección como % de (x2-xl) /proyección [Ecuación 4]; corregir xl por el factor de recuperación: (xl*100/Recuperación de proyección) [Ecuación 5] . Esto fue probado con la curva de calibración mostrada en la figura 24 y los parámetros de calibración originales de la Tabla 1. Como se muestra en la Tabla 3, fue posible utilizar los valores de concentración proyectados de 100-500 pg/ml y valores de C que variaron de 500 a 50, de tal manera que las señales reales correspondientes a los valores de C modificados fueron cambiados muy significativamente de lo que había sido el cado con el valor C original y la recuperación de proyección (calculada con el valor C original que fluctuó de 42-420%, respectivamente, todavía la recuperación de la muestra sin proyectar (una vez corregida por la recuperación de la proyección) fue 100% con respecto a todo el intervalo de calibración. Este efecto es ilustrado gráficamente en la figura 28, en donde el parámetro C es variado entre 50 y 500 (un intervalo de 10 veces) , pero los valores corregidos para la concentración de analito (xl) refleja exactamente la concentración de analito esperada.

Tabla 3 : Efectos de cambios en el parámetro C sobre la proyección y recuperación de analito original a dos niveles de concentración originales : En la Tabla 3, xl es la concentración endógena y x2 es la concentración de proyección; S es el nivel de señal correspondiente a la concentración de analito diseñada; x2 recuperación es la recuperación aparente de x2 y recuperación xl es calculada (usando la Ecuación 5) después de compensar por recuperación x2 (utilizando la Ecuación 4) . El nivel de proyección debe ser escogido cuidadosamente. El nivel óptimo será una solución intermedia entre el intervalo de operación del análisis y el intervalo probable de concentraciones de muestras. Si es demasiado bajo, el cambio en señal provocado por la proyección será demasiado pequeño para ser medido confiablemente. Si es demasiado alto, la respuesta de análisis será demasiado poco profunda para medir de manera confiable la proyección. El nivel de proyección ideal cambiaría la señal medida por mucho más que la desviación estándar en la señal. En el ejemplo anterior, el intervalo de análisis ha sido ajustado para efectuar mediciones para muestras con concentración en el intervalo de aproximadamente 0 a aproximadamente 500 pg/ml y proyecciones de aproximadamente 200 a aproximadamente 1000 pg/ml serían probablemente útiles. En algunas modalidades, las siguientes varias directrices para escoger niveles de proyección pueden ser seguidas: las proyecciones deben cambiar la señal observada a través del intervalo deseado por al menos 10%; las proyecciones deben estar en el mismo intervalo como el rango medio anticipado de las concentraciones de muestra; las proyecciones deben ser menores de aproximadamente 3 veces el valor de C original. Nótese que la parte útil de la dosis-respuesta es de aproximadamente 0.2*C a aproximadamente 5*C. El siguiente ejemplo ilustra la estimación de concentraciones de TxB2 endógeno utilizando recuperación de proyección. Dos muestras de plasma humana filtradas fueron analizadas mediante el análisis de dos etapas. Las alícuotas de las muestras fueron también complementadas (proyectadas) con concentraciones conocidas de TxB2 antes del análisis. Algunas muestras fueron también complementadas con indometacina (0.1 mM) y/o EDTA (5 mM) . Las muestras fueron almacenadas ya sea congeladas instantáneamente luego desheladas o refrigeradas sin congelar antes del análisis. Estos procedimientos generaron un conjunto de muestras con varias concentraciones endógenas originales (almacenamiento y congelación y deshielo tiende a provoca activación de plaquetas y producción de TxB2 ; la indometacina inhibe la producción de TxB2) . Los resultados del experimento anterior son mostrados en la figura 27. La muestra 5A fue conocida por tener una concentración de TxB2 muy bajo (se estima que es <10 pg/ml) . Cuando la dosis-respuesta del análisis en la muestra 5 fue usada para calibrar el análisis, se supone que la concentración es cero. Las respuestas de dosis para las otras muestras 4A, 4N, 5N fueron luego graficadas y se observó que su respuesta correspondía a concentraciones más altas de TxB2 y podría ser ajustada a la respuesta 5N al mover cada una a la izquierda (en la dirección de concentración más baja) por una cantidad correspondiente a remover una cierta concentración de TxB2 fija de cada uno los niveles de proyección conocidos. Todas las muestras tuvieron respuestas que fueron casi idénticas en forma a aquella de la muestra 5N. Cuando las curvas se ajustaron tan estrechamente como sea posible a la curva A5, la concentración de TxB2 removida conceptualmente corresponde a la estimación de la concentración de TxB2 en la muestra. Los datos originales de la figura 27 fueron representados en la figura 29 mediante la aproximación de mejor ajuste (In-logit) . La función de Resolución en Microsoft Excel fue usada para calcular un valor de TxB2 que provocó que la respuesta A5 se aproximara a aquella de la muestra N5. Como se puede ver, esto generó un buen ajuste y el valor calculado (471 pg/ml) es un valor estimativo de la diferencia de concentración entre los niveles de TxB2 en las dos muestras. En otra modalidad de la invención se podría usar un solo punto (todos los puntos se ajustan estrechamente a la curva de calibración, de tal manera que cualquier punto individual podría haber sido usado) en lugar de una proyección de múltiples puntos que fue ilustrada anteriormente en la figura 24-27. El siguiente experimento ilustra este concepto. Dos muestras de plasma fueron proyectadas a muchos niveles de TxB2 y analizadas mediante el método de dos etapas. Los análisis fueron calibrados utilizando calibradores de solución reguladora del pH en lugar de los materiales a base de plasma. Los resultados son presentados en la figura 30. El plasma fue analizado como se describe anteriormente. Los datos en la figura 30 son graficados en una escala logarítmica. La concentración de las muestras sin proyectar fue calculada de la calibración y la concentración de las muestras proyectadas tomadas como "endógeno + proyección" . Los resultados son graficados solamente para las muestras proyectadas. Como se puede ver, hubo una correlación deseable entre los valores calculados y conocidos en el intervalo de aproximadamente 50 aproximadamente 10,000 pg/ml. Cuando la recuperación fue estimada para las proyecciones en el intervalo de alrededor de 40 a alrededor de 2,500 pg/ml, la correlación fue de 99.7%. El método de recuperación de proyección para corregir los parámetros de calibración son útiles para compensar los efectos de temperatura en los inmunoanálisis en sistemas analíticos desechables autocontenidos, también algunas veces denominados como sistemas analíticos portátiles o sistemas de análisis portátiles. Como es bien conocido, las inestabilidades en temperatura durante un análisis introducen errores significativos en la concentración de analito estimada. Los efectos de la temperatura sobre la calibración de inmunoanálisis tienen el impacto más fuerte sobre los parámetros A, C y D de la calibración (In-logit) . Es probable que el parámetro B (forma) sea afectado mínimamente por los cambios de temperatura. Como se muestra anteriormente, el método de recuperación de proyección puede corregir errores introducidos en el parámetro C y de aquí podría ser un procedimiento excelente para corregir los errores inducidos por temperatura en el cálculo de los parámetros de calibración de la ecuación (In-logit) . Similarmente, la normalización de los niveles de señal al nivel de calibrador de analito cero, como se describe anteriormente, puede compensar errores en los parámetros A y D que son otra vez influenciados negativamente por los cambios de temperatura.

La calibración interna y/o medios de recuperación de proyección de la calibración tienen ventajas significativas con respecto a los métodos de calibración en fábrica convencionales. Una ventaja obvia es que dos cantidades de información relacionada con el análisis son usadas para calcular el resultado de análisis en lugar de uno, lo que mejora la confiabilidad del análisis. Una segunda ventaja es que este procedimiento compensa a una gran extensión, la inestabilidad de reactivos. Otra ventaja es que varios instrumentos, ambientes de análisis y variables de procedimiento son factorizados en los resultados de análisis. Otros cambios sin controlar en la respuesta de sistema, además del cambio de temperatura, pueden también impactar negativamente los parámetros A y D calculados. Por ejemplo, la figura 31 muestra el curso de tiempo de la generación de señal durante un análisis. Para corregir estos errores, una modalidad de la invención reivindicada es comparar las señales de análisis B en un dispositivo de fluido con la señal BO para eliminar errores debido a variación en el valor absoluto de las señales de análisis debido a los cambios sin controlar en la respuesta de sistema. Este concepto fue verificado por el siguiente experimento. Un inmunoanálisis competitivo por TxB2 fue establecido utilizando el protocolo descrito en la literatura de Productos de Assay Designs por su equipo de correlación-CLEIA correspondiente (catálogo 910-002) . Un conjugado de fosfatasa alcalina fue preparado como se describe anteriormente y fue diluido 1:112,000 y sustituido por el conjunto del equipo. Los parámetros A y D son los parámetros de calibración usados en el ajuste (log-logit) a la respuesta de análisis. Valores de mejor ajuste fueron obtenidos en cada punto en el tiempo. Nótese que a tiempo cero los parámetros A y B no son medidos, pero todos los valores de señal serían (se sabe que son) cero. La proporción D/A fue multiplicada por le6 para ser presentable en la misma escala. Los valores de A y D cuando son graficados contra el tiempo varían significativamente, particularmente el valor A (analito cero) . Como se ve de la línea recta con pendiente prácticamente cero, el D/A escalado permanece constante en el espacio de tiempo. Los datos experimentales anteriores fueron luego analizados al normalizar la señal de análisis (B) a la señal a concentración de analito 0 (B0) . Utilizando esta señal normalizada (B/BO) , mejores ajustes (log-logit) fueron obtenidos por cada punto en el tiempo y promediados. Las concentraciones de analito fueron calculadas utilizando estos parámetros de calibración para cada tiempo. La figura 32 muestra las concentraciones derivadas que fueron graficadas contra el parámetro A derivado de cada punto en el tiempo individual. Cada línea corresponde a niveles de analito diferentes (pg/ml) que fluctúan de alrededor de 39 a alrededor de 10,000 pg/ml. Como se puede ver de la figura 32, aunque los valores de señal cambiaron por aproximadamente 2 veces durante el curso del experimento, la concentración de analito derivada fue esencialmente constante sobre la concentración de analito que abarca un intervalo de alrededor de 39 a alrededor de 10,000 pg/ml. La variación de concentración calculada fue calculada y se encontró que promedia solamente 2.7% sobre el intervalo de calibración de 39-625 pg/ml (que abarca la mayor parte del intervalo) . Una proyección de calibración puede ser habilitada al agregar analito al anticuerpo (u otro agente de captura en fase sólida) durante la manufactura y luego secado, agregando subsecuentemente analito a la cavidad apropiada durante la manufactura (luego secado) o adición de analito a una porción de solución reguladora de pH de análisis que es luego enrutada a la cavidad apropiada. Los métodos 1 y 2 tienen el riesgo de que el analito proyectado podría ser lavado de la cavidad como muestra o a medida que la muestra o solución reguladora del pH entra. Esto puede ser manejado en una de varias maneras tales como depender de la estrechez de la interacción antígeno: anticuerpo por el breve tiempo en que la cavidad es sometida al flujo de muestra o solución reguladora del pH (que sale de la cavidad) o manejo cuidadoso de flujo de líquido y colocar la cavidad de proyección como aquella más distante al líquido entrante (última cavidad en llenarse tiene el mínimo flujo pasante) . Los errores en la medición de concentraciones de analito podrían también ser debidos a variabilidad en la base de pre-análisis. La causa primaria de este tipo de errores es debido a la recolección del paciente de un volumen incorrecto de muestra o en donde la integridad de muestra ha sido comprometida. Los errores al volumen de toma de muestras incorrectos pueden ser corregidos mediante una variedad de medios. Un método es medir el volumen de la muestra durante una etapa de pre-procesamiento. Si el volumen medido es significativamente diferente del volumen esperado. Se podría instruir al paciente que proporcione una nueva muestra. Esto podría ser efectuado por ejemplo mediante la comunicación inalámbrica con el dispositivo externo como se describe en la presente. Alternativamente, los métodos analíticos o algoritmos sobre el dispositivo externo podría ser recaíibrados para compensar el cambio en el volumen de muestra. La recalibración podría ser utilizando cualquiera de las técnicas de calibración estándar o las modificaciones al proceso de calibración, que se han descrito en la presente. La siguiente es una descripción de una modalidad de un método para determinar la exactitud del volumen de la muestra proporcionada a la unidad de recolección de muestras de un dispositivo de fluido descrito en la presente. La unidad de recolección de muestras puede ser forrada con elementos conductores separados espacialmente a separaciones conocidas -similares a las graduaciones en un cilindro o recipiente de medición. La ubicación de cada conductor puede corresponder a un volumen de muestra específico. A medida que el fluido entra en contacto con el conductor, la conductividad medida de aquel conductor sería incrementada marcadamente. Al identificar el conductor colocado más alto que ha sufrido el cambio en conductividad, el volumen de la muestra en la unidad de recolección de muestras puede ser calculado. Alternativamente, si el volumen de muestra tiene que encontrar un mínimo, un elemento conductor podría ser colocado al nivel apropiado en la cavidad. Cuando el caset es introducido al portátil (o el portador de muestras es introducido en el sistema analítico) , mediante esto el paciente ha indicado que ha consumado el proceso de toma de muestras y si la conductividad del detector sigue estando a nivel de referencia, se podría concluir fácilmente que el paciente no ha proporcionado el volumen de muestra requerido. Se podría dar a paciente la retroalimentación apropiada tal como volver a colocar la muestra o reabastecerla. Alternativamente, el servidor o computadora de extremo posterior en las oficinas centrales de red podrían ser informados de la cuestión y se podrían tomar medidas correctivas apropiadas. Una alternativa a la detección eléctrica por el volumen correcto podría ser utilizando medios de detección ópticos conocidos.

La integridad de muestra podría ser afectada por muchos factores, algunos intrínsecos al paciente y algunos que son extrínsecos. Las siguientes son algunas de las fuentes de error e integridad de muestra: (i) mezcla de fluido intersticial con sangre; (ii) variabilidad en la concentración de hematócrito; (iii) hemolisis y (iv) activación de plaquetas coagulación de muestra. Ocasionalmente, el fluido intersticial se podría fugar de una herida de punción de dedo y se podría mezclar con sangre. Alternativamente, si el paciente tiene líquido en sus manos debido al lavado antes de obtener una muestra de sangre, tal líquido podría también mezclarse con el plasma de la sangre. Ambos fluidos mencionados anteriormente, fluido intersticial y líquido de lavado, no contiene células rojas y se mezclarían con el plasma de la sangre. Cuando la cantidad de fluido intersticial es grande de tal manera que el hematócrito efectivo es muy bajo, la concentración medida del estándar externo (fluoresceína) sería bajo. Esta señal podría ser usada para concluir que la muestra es inapropiada para el análisis y que podría conducir a resultados incorrectos. Cuando la sangre está contaminada por agua (que tiene baja conductividad) sería posible detectar esto al medir la conductividad de la parte fluida de la muestra (el plasma de la sangre tiene una conductividad alta característica no sujeta a variación de día a día o de individuo a individuo) . Si la conductividad medida de la muestra es más baja que la conductividad del plasma, es probable que la muestra haya sido contaminada. Los errores podrían también ser debidos a la operación incorrecta del instrumento y medios para detectar y compensar estos errores son descritos posteriormente en la presente. Una fuente de error podría ser aquella que el desechable no está acomodado apropiadamente en el sistema portátil. Teniendo un detector que detecta y reporta el acoplamiento apropiado del desechable en el portátil sería medio de evitar este problema. Otra fuente de errores es el sistema de fluido, en donde puede haber una cuestión en donde la muestra es aplicada en la misma cavidad y el volumen de la muestra aplicada. Esto podría otra vez ser tratado mediante el uso de detectores apropiados que detectan la aplicación de una muestra y reportan la conveniencia del volumen que es aplicado. Otros problemas relacionados con fluidos podrían ser canales bloqueados, reactivos insuficientes, burbujas, etc., todos los cuales podrían otra vez ser detectados y reportados mediante el uso de detectores apropiados. En algunas modalidades, cualquiera de los errores descritos en la presente pueden ser medidos utilizándose detectores localizados ya sea en el dispositivo de fluido o el conjunto de lector. En algunas modalidades, mensajes de error podrían ser mostrados en una pantalla de LCD en el conjunto de lector utilizando el poder de procesamiento del microchip en el sistema portátil. Alternativa, una señal de los detectores podría ser comunicada al dispositivo externo que puede luego relevar un mensaje de error ya sea al conjunto de lector o un tercer dispositivo tal como un PDA o teléfono celular. Tal acción podría ser un mensaje comunicado al paciente en forma de una señal de audio, video o mensaje de texto simple que el paciente podría recibir. En algunas modalidades, el servidor externo puede transmitir los parámetros de calibración corregidos al conjunto de lector para compensar cualquiera de los errores descritos en la presente. En todavía otra modalidad, después que el identificador es detectado por un detector de identificador como se describe en la presente para determinar por ejemplo un protocolo, si una señal transmitida por un detector no coincide con el valor esperado para la señal de detector, entonces el dispositivo externo puede transmitir una alerta pre-programada en base a cada código de barras cartucho y señal detectada ya sea por ejemplo a una pantalla de LCD en el conjunto de lector o a un dispositivo portátil para tomar una acción designada. Ejemplos no limitantes de alertas de error, los problemas que indican y la acción requerida a ser tomada son, por ejemplo: Después que el detector de identificador detecta el identificador para determinar un protocolo y cualesquier señales detectadas son detectadas y ya sea la notificación del paciente está completa o el parámetro de calibración están actualizados, la calibración del dispositivo de fluido puede ocurrir, seguido por el análisis apropiado. A pesar de las acciones correctivas descritas en la presente, los valores de concentraciones de analito generador podrían todavía ser erróneos. Por ejemplo, la concentración de analito real podría estar fuera del intervalo esperado y así los parámetros de calibración usados pueden ser incorrectos. Los valores que son improbables, imposibles o inconsistentes con datos previos para un paciente particular podrían ser marcados y sometidos a una revisión de elementos de programación. Los valores con exactitud de sospecha pueden ser comunicados al tomador de decisiones apropiado, tales como el médico del paciente. El concepto de índice terapéutico de referencia (TI) y cómo es calculado es ilustrado en la figura 33 y 34. Un TI es calculado de un análisis retrospectivo de muchos parámetros medidos, en los que se incluyen las concentraciones de sangre de fármaco de interés, sus metabolitos, otros analitos y biomarcadores en la sangre que cambian concentraciones debido a los fármacos que el paciente está consumiendo, parámetros fisiológicos (tales como presión sanguínea, ritmo respiratorio, temperatura corporal, ritmo cardiaco, etc.) y parámetros clínicos que indican avance de enfermedad (tales como angina, accidente cerebrovascular, infarto, etc.). Comúnmente, muchas mediciones seriales serían realizadas para muchos pacientes tratados y controles correspondientes (sin medicación o tratado con placebo) . El parámetro clínico sería un "parámetro de resultado" (OP) . Los otros parámetros medidos pueden ser "parámetros de entrada" (IP) . Para el análisis retrospectivo y cálculo de TI, los datos de muchos sujetos y sus parámetros de salida y entrada respectivos, en los que se incluyen detalles relevantes del sujeto tales como altura, peso, raza, sexo, historia familiar, etc., serían poblados en una base de datos. Cada parámetro de resultado candidato (accidente cerebrovascular, infarto, angina, muerte, etc.) será sometido a múltiple análisis de regresión contra parámetros de entrada. El múltiple análisis de regresión múltiple es efectuado en cada OP candidato contra todos los IP disponibles. Columnas de base de datos son construidas al utilizar cada IP, cada IPA2 y todos los términos cruzados (IPi*IPj). El análisis es luego efectuado utilizando la ecuación: OPi = (a*UPl+b*IP2+...n*IPn)+(aa*IPl 2+bb*IP2?2+...nn*IPn^2) + (aaa*IPl*IP2+bbb*IPl*IP3+... +nnn*Ipn-l*IPn) , en donde a...n, aa...nn, aaa... nnn son constantes arbitrarias. El análisis de regresión múltiple establece el mejor ajuste a la ecuación e indica cuales IP son candidatos fuertes para inclusión. IP débilmente correlacionados son abandonados y el análisis es repetido hasta que cada OP candidato tiene una relación óptima a los IP restantes. El índice terapéutico tendrá entonces la forma: TI=a*IP+cc*Ip3?2+nnn*IP3*IP5+... (Ecuación 6) La figura ilustra el cálculo de un TI y el uso del concepto de TI para determinar eficacia terapéutica (el índice terapéutico es también indicado por el índice de eficacia) . El ejemplo ilustrado en la figura 34 muestra el curso de tiempo de la terapia de fármaco exitosa de un estado de enfermedad (tal como aterosclerosis) que es indicada por tres analitos bioquímicos representados por los parámetros A, B y C. La enfermedad es tratada (con por ejemplo una estatina) empezando en el día cero. Los parámetros A, B y C son medidos diariamente utilizando un sistema ambulatorio como se describe en la presente. Al inicio, en relación con "niveles ideales", el parámetro A (por ejemplo LDL-colesterol) es elevado, el parámetro B (por ejemplo HDL-colesterol) es bajo y el parámetro C (por ejemplo, alanina aminotransferasa, un indicador de daño al hígado) es normal. Todos los parámetros (A, B, C) son presentados normalizados a su nivel ideal respectivo. A medida que la terapia procede, el fármaco provoca que los niveles de A y B se aproximen a valores normales pero a velocidades diferentes. El analito C permanece normal indicando que el fármaco no está provocando daños al hígado. El riesgo relativo de un resultado por el paciente es representado por un TI inicialmente desconocido. Como se describe anteriormente, TI es un subrogado al parámetro de resultado que refleja las funciones fisiológicas del paciente (presión sanguínea, etc.) u otros factores pre-identificados en un registro de paciente y pueden ser indicadores de mejora en la condición del paciente. Se asume además que el parámetro TI es influenciado por los parámetros A y B. En ciertos casos, al comienzo del estudio esta relación permanece para ser determinada. Los datos del sistema de monitoreo (entrada del dispositivo) y la entrada del paciente son analizados mediante regresión múltiple de TI y valores medidos A, B y C como se describe anteriormente. En el ejemplo mostrado, estos datos son analizados utilizando análisis de regresión múltiple, que ajusta el parámetro TI como función de los parámetros A, B, C y sus cuadrados y los términos cruzados de par en par (A*B, etc.) . Como se muestra en la figura 35, para los valores simulados mostrados en la figura 34, un ajuste excelente fue obtenido (RA2 = 0.99) cuando todos los parámetros fueron incluidos. Es evidente de la inspección del ajuste que la mayoría de los parámetros pueden ser eliminados dejando solamente A y A*B. Cuando esto se hace el ajuste es todavía muy bueno (RA2 = 0.95) . La función derivada de regresión múltiple no es idéntica a la función base que generó los primeros datos TI candidatos, pero funciona bien para calcular un valor estimativo de TI a partir de (comúnmente menos) parámetros medidos, antes de la validación clínica si es necesario. Los niveles de umbral apropiados de TI o el TI óptimo es denominado como TIref (o "valor de umbral de acción") . Luego la revisión de expertos puede determinar el índice terapéutico óptimo para aquel paciente o clase de paciente particular. Si el TI excede el TIref preestablecido, se puede tomar acción apropiada. Una acción apropiada podría ser alertar al médico que detenga la medicación o los semejantes. Como se puede entender, el TIref apropiado para un paciente sería decidido en base al juicio del proveedor de cuidado de la salud para aquel paciente individual. La forma del TI es derivada como un ejercicio de tiempo utilizando análisis de expertos del conjunto de datos derivados de estudios clínicos y/o información clínica existente. Una vez que el TIref es identificado, entonces el uso de este parámetro es ilustrado en la figura 36. Métodos de medición de concentraciones de fármaco, analito y biomarcador y para llevar a cabo una comunicación bidireccional con una base de datos utilizando un dispositivo de fluido y conjunto de lector son descritos en detalle en la presente. El curso de tiempo de varios parámetros medidos y calculados son mostrados en la figura 36. La curva indicada como Dosis CBX ilustra el curso de tiempo de un fármaco que es tomado en una base regular. Los valores graficados son normalizados a lo que se consideraría "niveles ideales" para aquella medición. Por ejemplo, si la concentración de sangre ideal esperada de CBX es 100 ng/ml y si la concentración medida en la sangre es 100 ng/ml, el valor del parámetro es 1.0 (sin desplazamiento) para CBX. Similarmente, las concentraciones de CXB, un metabolito de CBX, biomarcadores Tx-M y PGI-M, que varían en respuesta a las concentraciones del fármaco y el estado de enfermedad, son también normalizados a sus valores ideales y graficados. Todas las concentraciones de fármaco, analito y biomarcador podrían ser medidos utilizando un sistema como se describe en la presente. Como se explica anteriormente, el TIref para este paciente particular es graficado en la figura 36 como una línea plana. Utilizando los valores de parámetro (a...n, aa...nn, aaa... nnn) de la Ecuación 6 y los parámetros de entrada medidos (IP) , el TI actual para el paciente es calculado. Si el TI calculado excede el valor de TIref, entonces una alerta puede ser generada. La alerta podría ser apuntada al proveedor de cuidado de salud del paciente, que a su vez toma la acción apropiada. Una acción apropiada podría ser observar al paciente estrechamente por otras indicaciones clínicas y/o alterar la concentración y fármacos que el paciente está tomando. Las figuras 36 y 37 ilustran el concepto en cuanto a cómo cuando el TI calculado excede el TIref, una acción proactiva podría desviar un ADR. En la figura 36, el TI de paciente excede TIref aproximadamente el día 15. El paciente es monitoreado estrechamente y a medida que los valores de TI continúan incrementándose después del día 30, el médico interviene y reduce la dosificación. Esta acción inicia la disminución del TI para el paciente y finalmente lo retrata a un nivel aceptable alrededor del día 60. Uno o más individuos o entidades que están involucrados en el cuidado del paciente (enfermeras, médicos, farmacólogos, etc.) pueden ser alertados cuando el TI calculado excede el TIre_- de tal manera que pudieran tomar la acción apropiada. Adicionalmente, se pueden discernir tendencias y se puede tomar acción apropiada antes de que un TI llegue a un valor particular. En algunas modalidades, muchos analitos diferentes pueden ser medidos y construidos como parámetros de entrada, IP, en tanto que calcula el TI. Tales analitos que pueden ser usados son descritos en la presente. Adicionalmente, pueden ser expandidos o modificados dependiendo del área de enfermedad también. La lista apropiada de parámetros concernientes con ciertas enfermedades y tratamientos de fármaco, por ejemplo cáncer y enfermedades infecciosas y pacientes en NSAID son revelados en la presente. En otro aspecto de esta invención, el TI es calculado usando información derivada de la muestra biológica del paciente e información del paciente que no está relacionada con el fármaco, la entrada del dispositivo. Por ejemplo, en una instalación ambulatoria, la información concerniente con la concentración del fármaco, metabolito y otros marcadores biológicos puede ser detectada en la sangre como se describe en la presente. El paciente puede también introducir muchos parámetros personales no relacionados con el fármaco. Esta "entrada del paciente" se puede relacionar con la información personal del paciente, por ejemplo altura, peso, género, estatus de ejercicio diario, ingestión de alimento, etc. La entrada del paciente podría también ser provista por el proveedor del cuidado de la salud del paciente. Un ejemplo de un parámetro de entrada del paciente y los medios de entrada es mostrado en la figura 38. En algunas modalidades, la entrada del dispositivo y entrada de paciente son usados para calcular el TI . Un TI de referencia para el paciente ya es conocido utilizando análisis retrospectivo de los datos contenidos en la base de datos. Al formular el TI utilizando análisis de regresión múltiple, se usan los parámetros tales como aquellos mostrados en la Ecuación 6. Los mismos parámetros son luego usados con la entrada del dispositivo y entrada del paciente para calcular el TI. Comparando el TI con el TIref, es posible determinar la eficacia de la terapia. Si el TI caen dentro de un intervalo predeterminado de TIref, entonces se considera que el tratamiento es eficaz. Los valores debajo de aquel intervalo indican que el tratamiento no es efectivo y los valores más altos que el intervalo son considerados indeseables y podrían conducir a eventos adversos. Otro ejemplo ilustra la implementación de esta invención para estudiar la eficacia de terapia en enfermedades en donde es difícil hacer mediciones frecuentes y la eficacia del tratamiento es difícil de cuantificar. Un ejemplo es determinar la eficacia de la terapia de fármaco en niños con autismo. La toma de muestras frecuente y análisis de laboratorio concomitante es impráctica para niños. Las anormalidades en concentraciones en la sangre de ciertos metales están implicados en el autismo. De aquí, enseguida de la concentración en la sangre de ciertos metales, por ejemplo zinc, en niños autísticos podría proporcionar luz en la eficacia de una intervención. Sin embargo, se ha reportado que las concentraciones disminuidas de por ejemplo Zn debido a un tratamiento no implica que la terapia está funcionando. Es un indicador, pero no un subrogado definitivo para determinar la eficacia terapéutica. El cálculo de un TI y comparado con un nivel de referencia indicaría mejor la eficacia. Esto es ilustrado en la figura 39 al simular la concentración de varios marcadores pertinentes y su cambio debido a una intervención de fármaco en un niño autístico. El programa puede involucrar monitorear sujetos y hacer coincidir individuos de control con respecto al tiempo en cuanto a metales tóxicos, marcadores subrogados para metales (metalotioneína, etc.) y otros marcadores bioquímicos. Los sujetos son aquellos propensos a, o afligidos con autismo; los controles son gente con situación correspondiente. No es determinante que haya un control que coincida con la situación. El escenario supone que durante el estudio ocurre un "evento" significativo. Los eventos podrían ser movimiento a un medio ambiente más o menos riesgoso o inicio de terapia. Los sujetos podrían ser monitoreados frecuentemente en cuanto a varios parámetros (entrada de dispositivo) utilizando el sistema ambulatorio descrito en la presente. Análisis de laboratorio adicionales que no son determinables en el sistema ambulatorio podrían ser efectuados a una frecuencia más baja utilizando análisis de laboratorio. Datos adicionales tale como información del paciente, medio ambiente local, uso de fármacos, dietas, etc., serían registrados (entrada de paciente) . De particular interés a este escenario es la información tal como exposición a plomo, mercurio, etc. El curso de tiempo mostrado en la figura 39 contempla un evento (inicio de terapia) a 33 días. El sujeto que está exhibiendo niveles anormales de CP y MT, gradualmente se revierte a niveles normales de marcadores. El TI captura el riesgo o nivel de seguridad del sujeto en base a toda la información. El estudio definirá las entradas mejoras para determinar TI . Como se describe anteriormente, TI puede ser usado para determinar la eficacia de tratamiento de fármaco. Un procedimiento similar es también apropiado para determinar la eficacia de fármacos durante pruebas clínicas. Adicionalmente, este procedimiento podría ser usado benéficamente para identificar sub-grupos de pacientes que responden bien o suficientemente a un régimen de tratamiento dado. La habilidad de segregar respondedores de no respondedores es una herramienta extremadamente valiosa. El concepto de usar TI puede ser usado no solamente durante un régimen terapéutico, sino para efectuar pruebas de diagnóstico para determinar, por ejemplo si un paciente está en necesidad o no de una biopsia después de un examen completo de marcadores específicos de próstata. Tabla 4; Analitos Ejemplares

Claims

REIVINDICACIONES 1. Un sistema para detectar un analito en un fluido corporal de un sujeto, caracterizado porque comprende: (a) un dispositivo de fluido, el dispositivo de fluido comprende una unidad de recolección de muestra y un conjunto de análisis, en donde la unidad de recolección de muestras permite que una muestra de fluido corporal reaccione con reactivos contenidos dentro del conjunto de análisis en base a un protocolo transmitido de un dispositivo externo para producir una señal detectable indicadora de la presencia del analito; (b) un conjunto de lector que comprende un conjunto de detección para detectar la señal detectable; y (c) un conjunto de comunicación para transmitir la señal detectada al dispositivo externo.
2. El sistema de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el protocolo es transmitido inalámbricamente de un dispositivo externo.
3. El sistema de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el dispositivo de fluido comprende además un identificador para proporcionar la identidad del dispositivo de fluido que está adaptado para disparar la transmisión del protocolo.
4. El sistema de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el protocolo varía dependiendo de la identidad del dispositivo de fluido que es reconocible por un detector de identificador.
5. El sistema de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la muestra de fluido corporal es de menos de aproximadamente 500 ul .
6. Un sistema para detectar un analito en un fluido corporal de un sujeto, caracterizado porque comprende: (a) un dispositivo de fluido, el dispositivo de fluido comprende una unidad de recolección de muestras y un conjunto de análisis, en donde la unidad de recolección de muestras permite que una muestra de fluido corporal de menos de 500 ul reaccione con reactivos contenidos dentro del conjunto de análisis para producir una señal detectable indicadora de la presencia del analito recolectado en la muestra de fluido corporal ; (b) un conjunto de lector que comprende un conjunto de detección para detectar la señal detectable; y (c) un conjunto de comunicación para transmitir la señal detectada a un dispositivo externo.
7. El sistema de conformidad con la reivindicación 1 ó 6, caracterizado porque los reactivos comprenden reactivos de inmunoanálisis .
8. El sistema de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque los reactivos de inmunoanálisis detectan un microorganismo seleccionado del grupo que consiste de bacterias, virus, hongos y protozoarios.
9. El sistema de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque los reactivos de inmunoanálisis detectan una glicoproteína de polipéptido, polisacárido, lípido, ácido nucleico y una combinación de los mismos.
10. El sistema de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque los reactivos de inmunoanálisis detectan un miembro seleccionado de grupo que consiste de un fármaco, metabolito de fármaco, biomarcador indicador de una enfermedad, marcador específico de tejido y biomarcador específico para una célula o tipo de célula.
11. El sistema de conformidad con la reivindicación 1 ó 6, caracterizado porque el dispositivo de fluido detecta una pluralidad de analitos y el dispositivo de fluido comprende reactivos de inmunoanálisis para la pluralidad de analitos.
12. El sistema de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque la pluralidad de analitos son identificados mediante señales distintas detectables en un intervalo de 3 órdenes de magnitud.
13. El sistema de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque la señal detectable es una señal luminiscente .
14. El sistema de conformidad con la reivindicación 1 ó 6, caracterizado porque el dispositivo de fluido comprende además una microaguja para obtener la muestra de fluido corporal .
15. Un método para detectar un analito en un fluido corporal de un sujeto, caracterizado porque comprende: (a) proporcionar el sistema de conformidad con la reivindicación 1 ó 6; (b) permitir que una muestra de fluido corporal reaccione con los reactivos contenidos en el conjunto de análisis para producir una señal detectable indicadora de la presencia del analito; y (c) detectar la señal detectable.
16. El método de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado porque comprende además la etapa de cuantificar la cantidad del analito presente en el fluido corporal .
17. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque comprende además la etapa de comparar la cantidad del analito presente en el fluido biológico con una cantidad predeterminada del analito.
18. El método de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado porque comprende además la etapa de tomar una acción médica cuando la cantidad de analito presente en el fluido corporal es estadísticamente diferente de la cantidad predeterminada .
19. El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque la acción médica comprende notificar a una farmacia que una prescripción para tal sujeto necesita ser alterada.
20. El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado porque la notificación es transmitida electrónicamente.
21. El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado porque la notificación es transmitida inalámbricamente .
22. El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque la acción médica comprende alterar la dosificación del sujeto de un agente terapéutico.
23. Un método para detectar un analito en un fluido corporal de un sujeto, caracterizado porque comprende: (a) proporcionar un dispositivo de fluido que comprende por lo menos una unidad de recolección de muestras, un conjunto de inmunoanálisis que contiene reactivos de inmunoanálisis, una pluralidad de canales en comunicación fluida con la unidad de recolección de muestras y/o el conjunto de inmunoanálisis; (b) accionar el dispositivo de fluido y dirigir los reactivos de inmunoanálisis en el dispositivo de fluido; (c) permitir que una muestra de fluido corporal de menos de aproximadamente 500 ul reaccione con los reactivos de inmunoanálisis contenidos en el conjunto de inmunoanálisis para producir una señal detectable indicadora de la presencia del analito en la muestra; y (d) detectar la señal detectable generada del analito recolectado en la muestra de fluido corporal.
24. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque la dirección es efectuada mediante un mecanismo seleccionado del grupo que consiste de acción capilar, succión de vacío, tracción y una combinación de los mismos .
25. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque el dispositivo de fluido detecta una pluralidad de analitos y el dispositivo de fluido comprende reactivos de inmunoanálisis para la pluralidad de analitos.
26. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque la muestra de fluido corporal y los reactivos de inmunoanálisis permanecen en el dispositivo de fluido después de la etapa de detección. .
27. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque el inmunoanálisis es indicador de un parámetro farmacocinético.
28. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque el inmunoanálisis es indicador de un parámetro farmacodinámico.
29. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque el dispositivo de fluido comunica datos concernientes con la señal vía un transmisor inalámbrico.
30. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque un dispositivo inalámbrico transfiere un protocolo de inmunoanálisis para ser ejecutado en el dispositivo de fluido.
31. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque el protocolo de inmunoanálisis varia dependiendo de la identidad del dispositivo de fluido.
32. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque el dispositivo de fluido es identificado y una fecha de expiración del dispositivo de fluido es registrada.
33. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque el inmunoanálisis es un análisis por un marcador de enfermedad, un metabolito de fármaco y un agente de enfermedad.
34. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque la señal detectable es una señal quimioluminiscente .
35. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque los reactivos de inmunoanálisis comprenden una fosfatasa alcalina o una peroxidasa de rábano.
36. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque un CCD es usado para la detección de la señal detectable.
37. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque el dispositivo de fluido comprende además por lo menos una unidad de desecho de desperdicios.
38. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque un diodo de alfiler conectado a un amplificador es usado para detectar la señal detectable.
39. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque el conjunto de inmunoanálisis comprende una pluralidad de inmunoanálisis.
40. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque el dispositivo de fluido comprende además una microaguja para obtener la muestra de fluido corporal .
41. Un sistema para monitorear más de un parámetro farmacológico útil para determinar la eficacia y/o toxicidad de un agente terapéutico, caracterizado porque comprende: (a) un dispositivo de fluido que comprende un cartucho, el cartucho comprende por lo menos una unidad de recolección de muestras y un conjunto; en donde la unidad de recolección de muestras permite que una muestra de fluido corporal que comprende una pluralidad de analitos indicadores del uno o más parámetros farmacológicos reaccione con reactivos contenidos en el conjunto de análisis, la reacción produce señales detectables indicadora de los valores de más de un parámetro farmacológico de la muestra de fluido corporal; (b) un conjunto de lector que comprende un conjunto de lector que comprende un conjunto de detección para detectar las señales detectables; y (c) un conjunto de comunicación para transmitir las señales detectadas a un dispositivo externo.
42. El sistema de conformidad con la reivindicación 41, caracterizado porque el dispositivo de fluido genera las señales detectables en base a un protocolo transmitido de un dispositivo externo.
43. El sistema de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado porque el protocolo es transmitido inalámbricamente .
44. El sistema de conformidad con la reivindicación 41, caracterizado porque el dispositivo de fluido comprende además un identificador para proporcionar la identidad del dispositivo de fluido que está adaptado para disparar la transmisión del protocolo.
45. El sistema de conformidad con la reivindicación 41, caracterizado porque el protocolo varía dependiendo de la identidad del dispositivo de fluido que es reconocible por un detector de identificador.
46. El sistema de conformidad con la reivindicación 41, caracterizado porque la muestra de fluido corporal es menor de aproximadamente 500 ul .
47. El sistema de conformidad con la reivindicación 41, caracterizado porque la muestra de fluido corporal es menor de aproximadamente 50 ul .
48. El sistema de conformidad con la reivindicación 41, caracterizado porque los reactivos comprenden reactivos de inmunoanálisis .
49. El sistema de conformidad con la reivindicación 48, caracterizado porque los reactivos de inmunoanálisis detectan una glicoproteína de polipéptido, polisacárido, lípido, ácido nucleico y combinación de los mismos.
50. El sistema de conformidad con la reivindicación 48, caracterizado porque los reactivos de inmunoanálisis detectan un miembro seleccionado del grupo que consiste de un fármaco, metabolito de fármaco, biomarcadores indicadores de una enfermedad, marcador específico de tejido y biomarcador específico para una célula o tipo de célula.
51. El sistema de conformidad con la reivindicación 41, caracterizado porque la pluralidad de analitos son identificados mediante señales distintas detectables en un intervalo de 3 órdenes de magnitud.
52. El sistema de conformidad con la reivindicación 41, caracterizado porque la señal detectable es una señal luminiscente .
53. El sistema de conformidad con la reivindicación 41, caracterizado porque la señal detectable es una señal quimioluminiscente .
54. El sistema de conformidad con la reivindicación 41, caracterizado porque el dispositivo de fluido comprende además una microaguja para obtener la muestra de fluido corporal .
55. El sistema de conformidad con la reivindicación 41, caracterizado porque el parámetro farmacológico es un parámetro farmacocinético.
56. El sistema de conformidad con la reivindicación 41, caracterizado porque el parámetro farmacológico es un parámetro farmacodinámico.
57. El sistema de conformidad con la reivindicación 41, caracterizado porque por lo menos uno de la pluralidad de analitos es un biomarcador indicador de un parámetro farmacodinámico .
58. El sistema de conformidad con la reivindicación 41, caracterizado porque por lo menos uno de la pluralidad de analitos es el agente terapéutico o un metabolito del agente terapéutico que es indicador de un parámetro farmacocinético.
59. El sistema de conformidad con la reivindicación 41, caracterizado porque el dispositivo de fluido comunica datos concernientes con la señal vía un transmisor inalámbrico.
60. El sistema de conformidad con la reivindicación 59, caracterizado porque el transmisor inalámbrico comprende un teléfono celular.
61. Un método para monitorear más de un parámetro farmacológico útil para determinar la eficacia y/o toxicidad de un agente terapéutico, caracterizado porque comprende: (a) someter a una muestra de fluido corporal de un sujeto administrado con el agente farmacéutico a un dispositivo de fluido para perfilar el más de un parámetro farmacológico, el dispositivo médico de fluido está caracterizado porque comprende : un cartucho, el cartucho comprende por lo menos una unidad de recolección de muestras y un conjunto de análisis que comprende reactivos de reacción; (b) accionar el dispositivo de fluido y dirigir los reactivos de inmunoanálisis dentro del dispositivo de fluido; (c) permitir que la muestra de fluido corporal reaccione con reactivos de inmunoanálisis para producir señales detectables indicadora de los valores del más de un parámetro farmacológico de la muestra; (d) detectar la señal detectable generada a partir de la muestra de fluido corporal .
62. El método de conformidad con la reivindicación 61, caracterizado porque comprende además la etapa de repetir las etapas (a) - (d) a un intervalo de tiempo indicado por una señal inalámbrica comunicada al sujeto.
63. El método de conformidad con la reivindicación 61, caracterizado porque el más de un parámetro farmacológico comprende tanto un indicador farmacocinético como un indicador farmacodinámico útil para determinar la eficacia y/o toxicidad del agente terapéutico.
64. El método de conformidad con la reivindicación 61, caracterizado porque el parámetro farmacológico es un indicador farmacocinético.
65. El método de conformidad con la reivindicación 61, caracterizado porque el parámetro farmacológico es un indicador farmacodinámico.
66. El método de conformidad con la reivindicación 61, caracterizado porque el parámetro farmacológico es reflejado por la concentración del agente terapéutico.
67. El método de conformidad con la reivindicación 61, caracterizado porque el parámetro farmacológico es reflejado por la concentración de un metabolito del agente terapéutico.
68. El método de conformidad con la reivindicación 61, caracterizado porque el parámetro farmacológico es reflejado por un biomarcador afectado directa o indirectamente por el agente terapéutico.
69. El método de conformidad con la reivindicación 61, caracterizado porque el parámetro farmacológico es reflejado por un biomarcador que indica una reacción adversa al agente terapéutico.
70. Un método para monitorear automáticamente el cumplimiento o apego del paciente con un tratamiento médico que involucra un agente terapéutico, caracterizado porque comprende : (a) proporcionar una muestra de fluido corporal del paciente; (b) permitir que la muestra de fluido corporal reaccione con los reactivos de análisis en un dispositivo de fluido para detectar un analito indicador del apego o no apego (cumplimiento o no cumplimiento) del tratamiento médico ; (c) detectar la presencia o ausencia del analito; (d) notificar al paciente a un práctico médico del cumplimiento o apego o no cumplimiento o no apego.
71. El método de conformidad con la reivindicación 70, caracterizado porque el dispositivo de fluido comprende una unidad de recolección de muestras y un conjunto de análisis, en donde la unidad de recolección de muestras permite que la muestra de fluido corporal reaccione con reactivos contenidos dentro del conjunto de análisis en base a un protocolo transmitido de un dispositivo externo para producir una señal detectable indicadora de la presencia del analito; un conjunto de lector que comprende un conjunto de detección para detectar la señal detectable y un conjunto de comunicación para transmitir la señal detectada a un dispositivo externo.
72. El método de conformidad con la reivindicación 71, caracterizado porque comprende además la etapa de comparar automáticamente la señal con un perfil conocido asociado con el tratamiento médico para determinar si el paciente es cumpliente o no cumpliente con el tratamiento médico.
73. El método de conformidad con la reivindicación 70, caracterizado porque por la notificación es transmitida electrónicamente .
74. El método de conformidad con la reivindicación 70, caracterizado porque la notificación es transmitida inalámbricamente .
75. El método de conformidad con la reivindicación 70, caracterizado porque la notificación es transmitida vía un dispositivo portátil.
76. El método de conformidad con la reivindicación 70, caracterizado porque la muestra de fluido corporal es menor de aproximadamente 500 ul .
77. El método de conformidad con la reivindicación 70, caracterizado porque los reactivos comprenden reactivos de inmunoanálisis .
78. El método de conformidad con la reivindicación 71, caracterizado porque la señal detectable es una señal luminiscente .
79. El método de conformidad con la reivindicación 71, caracterizado porque la señal detectable es una señal quimioluminiscente .
80. Un método para alertar a un paciente para probar una muestra de fluido corporal utilizando un dispositivo de fluido, caracterizado porque comprende: (a) proporcionar un protocolo localizado en un dispositivo externo a ser ejecutado en el dispositivo de fluido, el protocolo está asociado con el paciente y comprende una hora y/o fecha para probar la muestra de fluido corporal; y (b) notificar al paciente para probar el fluido corporal a la hora y/o fecha si la muestra todavía no ha sido probada .
81. El método de conformidad con la reivindicación 80, caracterizado porque el dispositivo de fluido comprende una unidad de recolección de muestras y un conjunto de análisis, en donde la unidad de recolección de muestras permite que la muestra de fluido corporal reaccione con reactivos contenidos dentro del conjunto de análisis en base a un protocolo transmitido de un dispositivo externo para producir una señal detectable indicadora de la presencia del analito; un conjunto de lector que comprende un conjunto de detección para detectar la señal detectable y un conjunto de comunicación para transmitir la señal detectada a un dispositivo externo.
82. El método de conformidad con la reivindicación 81, caracterizado porque la notificación es transmitida electrónicamente .
83. El método de conformidad con la reivindicación 80, caracterizado porque la notificación es transmitida inalámbricamente .
84. El método de conformidad con la reivindicación 80, caracterizado porque la notificación es transmitida vía un dispositivo portátil .
85. El método de conformidad con la reivindicación 80, caracterizado porque la muestra de fluido corporal es menor de aproximadamente 500 ul .
86. El método de conformidad con la reivindicación 80, caracterizado porque los reactivos comprenden reactivos de inmunoanálisis .
87. El método de conformidad con la reivindicación 81, caracterizado porque la señal detectable es una señal luminiscente .
88. Un método empresarial para ayudar a un clínico en proporcionar tratamiento médico individualizado, caracterizado porque comprende : (a) recolectar por lo menos un parámetro farmacológico de un individuo que recibe una medicación, la etapa de recolección es efectuada al someter una muestra de fluido corporal a reactivos contenidos en un dispositivo de fluido, que es provisto al individuo para producir una señal detectable indicadora del por lo menos un parámetro farmacológico; (b) efectuar una referencia cruzada con la ayuda de registros médicos de computadora del individuo con por lo menos un parámetro farmacológico del individuo, ayudando mediante esto al químico a proporcionar tratamiento médico individualizado .
89. El método empresarial de conformidad con la reivindicación 88, caracterizado porque el parámetro farmacológico es un parámetro farmacocinético.
90. El método empresarial de conformidad con la reivindicación 88, caracterizado porque el parámetro farmacológico es un parámetro farmacodinámico .
91. El método empresarial de conformidad con la reivindicación 88, caracterizado porque los reactivos comprenden reactivos de inmunoanálisis.
92. Un método empresarial para monitorear una prueba clínica de un agente terapéutico, caracterizado porque comprende : (a) recolectar por lo menos un parámetro farmacológico del sujeto en la prueba clínica en una pluralidad de intervalos de tiempo, la etapa de recolección es efectuada en cada intervalo de tiempo al someter una muestra de fluido corporal del sujeto a reactivos contenidos en un dispositivo de fluido, en donde el dispositivo de fluido es provisto al sujeto para producir señales detectables indicadora de los valores del por lo menos un parámetro farmacológico a una pluralidad de intervalos de tiempo; (b) comparar los valores detectados con un valor de umbral predeterminado para el parámetro farmacológico; (c) notificar al clínico y/o patrocinador involucrado en la prueba clínica cuando existe una discrepancia estadísticamente significativa entre los valores detectados y el valor de umbral .
93. El método empresarial de conformidad con la reivindicación 92, caracterizado porque comprende además tomar una acción médica en base a la discrepancia estadísticamente significativa .
94. El método empresarial de conformidad con la reivindicación 93, caracterizado porque la acción médica involucra ajustar la dosificación del agente terapéutico.
95. El método empresarial de conformidad con la reivindicación 92, caracterizado porque comprende además tomar una decisión empresarial que involucra continuar, modificar o terminar la prueba clínica.
96. El método empresarial de conformidad con la reivindicación 92, caracterizado porque el dispositivo de fluido comprende una unidad de recolección de muestras y un conjunto de análisis, en donde la unidad de recolección de muestras permite que la muestra de fluido corporal reaccione con reactivos contenidos dentro del conjunto de análisis en base a un protocolo transmitido desde un dispositivo externo para producir la señal detectable; un conjunto de lector que comprende un conjunto de detección para detectar la señal detectable y un conjunto de comunicación para transmitir la señal detectada a un dispositivo externo.
97. El método empresarial de conformidad con la reivindicación 92, caracterizado porque los reactivos comprenden reactivos de inmunoanálisis.
98. Un método para obtener datos farmacológicos útiles para determinar la eficacia y/o toxicidad de un agente terapéutico de un animal de prueba, caracterizado porque comprende : (a) proporcionar un dispositivo de fluido que comprende por lo menos una unidad de recolección de muestras, un conjunto de análisis y una pluralidad de canales en comunicación fluida con la unidad de recolección de muestras y/o el conjunto de análisis; (b) permitir que una muestra de fluido biológico de menos de aproximadamente 50 ul reaccione con reactivos contenidos dentro del conjunto de análisis para producir una señal detectable generada de un analito recolectado inicialmente en la muestra que es indicador de un parámetro farmacológico, y (c) detectar la señal detectable; y (d) repetir las etapas de reacción y detección con una segunda muestra de fluido biológico del mismo animal de prueba .
99. Un método para obtener datos farmacológicos útiles para determinar la eficacia y/o toxicidad de un agente terapéutico de un animal de prueba, caracterizado porque comprende : (a) proporcionar un dispositivo de fluido que comprende por lo menos una unidad de recolección de muestras, un conjunto de análisis y una pluralidad de canales en comunicación fluida con la unidad de recolección de muestras y/o el conjunto de análisis; (b) permitir que una muestra de fluido biológico reaccione con reactivos contenidos dentro del conjunto de análisis para producir una señal detectable generada de un analito recolectado inicialmente en la muestra que es indicador de un parámetro farmacológico; y (c) detectar la señal detectable; y (d) repetir las etapas de reacción y detección con una segunda muestra de fluido biológico del mismo animales de prueba, en donde el animal no es sometido a anestesia.
100. El método de conformidad con la reivindicación 98 ó 99, caracterizado porque el dispositivo de fluido comprende una unidad de recolección de muestras y un conjunto de análisis, en donde la unidad de recolección de muestras permite que una muestra de fluido corporal reaccione con reactivos contenidos dentro del conjunto de análisis en base a un protocolo transmitido desde un dispositivo externo para producir una señal detectable indicadora de la presencia del analito; un conjunto de lector que comprende un conjunto de detección para detectar la señal detectable y un conjunto de comunicación para transmitir la señal detectada a un dispositivo externo.
101. El método de conformidad con la reivindicación 100, caracterizado porque el dispositivo de fluido permite que los reactivos contenidos dentro del conjunto de análisis en base a un protocolo transmitido de un dispositivo externo.
102. El método de conformidad con la reivindicación 100, caracterizado porque el protocolo es transmitido inalámbricamente desde un dispositivo externo.
103. El método de conformidad con la reivindicación 100, caracterizado porque el dispositivo de fluido comprende además un identificador para proporcionar la identidad del dispositivo de fluido que está adaptado para disparar la transmisión del protocolo.
104. El método de conformidad con la reivindicación 100, caracterizado porque el protocolo varía dependiendo de la identidad del dispositivo de fluido que es reconocible por un detector de identificador.
105. El método de conformidad con la reivindicación 100, caracterizado porque los reactivos comprenden reactivos de inmunoanálisis .
106. El método de conformidad con la reivindicación 105, caracterizado porque los reactivos de inmunoanálisis detectan una glicoproteína de polipéptido, polisacárido, lípido, ácido nucleico y una combinación de los mismos.
107. El método de conformidad con la reivindicación 105, caracterizado porque los reactivos de inmunoanálisis detectan un miembro seleccionado del grupo que consiste de un fármaco, metabolito de fármaco, biomarcador indicador de una enfermedad, marcador específico de tejido y biomarcador específico por una célula o tipo de célula.
108. El método de conformidad con la reivindicación 105, caracterizado porque el biomarcador es un miembro mostrado en la Tabla 4.
109. El método de conformidad con la reivindicación 100, caracterizado porque el dispositivo de fluido detecta una pluralidad de analitos y el dispositivo de fluido comprende reactivos de inmunoanálisis para la pluralidad de analitos.
110. El método de conformidad con la reivindicación 100, caracterizado porque la pluralidad de analitos son identificados por señales distintas detectables en un intervalo de 3 órdenes de magnitud.
111. El método de conformidad con la reivindicación 100, caracterizado porque la señal detectable es una señal luminiscente.
112. El método de conformidad con la reivindicación 100, caracterizado porque el dispositivo de fluido comprende además una microaguja para obtener la muestra de fluido corporal .
113. El método de conformidad con la reivindicación 100, caracterizado porque la muestra de fluido biológico es menor de aproximadamente 10 microlitros.
114. El método de conformidad con la reivindicación 100, caracterizado porque la muestra de fluido biológico es menor de aproximadamente 5 microlitros.
115. El método de conformidad con la reivindicación 100, caracterizado porque la muestra de fluido biológico es de entre aproximadamente 5 microlitros y aproximadamente 10 microlitros .
116. El método de conformidad con la reivindicación 100, caracterizado porque los datos farmacológicos comprenden parámetros farmacocinéticos y/o farmacodinámicos .
117. Un método para mejorar la exactitud de calibración de un sistema de fluido, caracterizado porque comprende : (a) proporcionar un sistema para detectar un analito en un fluido corporal de un sujeto que comprende un dispositivo de fluido para proporcionar el fluido corporal, el dispositivo de fluido tiene un conjunto de calibración y un conjunto de lector para detectar la presencia del analito; (b) medir uno o más parámetros de una curva de calibración asociada con el dispositivo de fluido; (c) comparar el uno o más parámetros con parámetros predeterminados asociados con el dispositivo de fluido; (d) ajustar la salida de señal por la proporción del uno o más parámetros y los parámetros predeterminados.
118. Un método para mejorar la calibración de un sistema de fluido, caracterizado porque comprende: (a) medir una primera señal en una muestra original que comprende una cantidad conocida de un analito; (b) medir una segunda señal después de proyectar la muestra original con una cantidad conocida del analito; (c) graficar la diferencia entre la primera señal y segunda señales contra un valor objetivo, en donde el valor objetivo es una señal esperada para la cantidad conocida del analito; y (d) llegar a un mejor ajuste de parámetro al minimizar la suma del cuadrado de la diferencia entre el valor objetivo y los valores de analito calculados.
119. Un método para determinar la confiabilidad de un análisis por un analito en un fluido corporal con el uso de un dispositivo de fluido, caracterizado porque comprende: (a) proporcionar un sistema, el sistema comprende un dispositivo de fluido, el dispositivo de fluido comprende una unidad de recolección de muestras y un conjunto de análisis, en donde la unidad de recolección de muestras permite que una muestra de fluido corporal reaccione con reactivos contenidos dentro del conjunto de análisis, para detectar la presencia de un analito en un fluido corporal de un sujeto y un conjunto de lector para detectar la presencia del analito; (b) detectar con un detectar un cambio en los parámetros de operación bajo los cuales el sistema opera normalmente.
120. Un aparato para detectar un analito en un fluido biológico de un sujeto, caracterizado porque comprende: (a) una unidad de recolección de muestras para introducir un fluido biológico en comunicación fluida con una pluralidad de sitios de reacción; (b) una pluralidad de cámaras de reactivo que portan una pluralidad de reactivos en comunicación fluida con los sitios de reacción, en donde la pluralidad de sitios de reacción comprenden una pluralidad de reactivos enlazados al mismo para detectar el analito; y (c) un sistema de canales de fluido para permitir el fluido biológico y la pluralidad de reactivos fluyan en el aparato, en donde por lo menos un canal localizado entre la pluralidad de sitios de reacción comprende una barrera óptica para reducir la cantidad de diafonía óptica entre pluralidad de sitios de reacción durante la detección del analito.
121. Un aparato para detectar un analito en un fluido biológico de un sujeto, caracterizado porque comprende: (a) una unidad de recolección de muestras para introducir un fluido biológico en comunicación fluida con una pluralidad de sitios de reacción, en donde la pluralidad de sitios de reacción comprenden una pluralidad de reactivos enlazados para detectar el analito; (b) una pluralidad de cámaras de reactivo que portan una pluralidad de reactivos en comunicación fluida con los sitios de reacción; y (c) un sistema de canales de fluido para permitir que el fluido biológico y la pluralidad de reactivos fluyan en el aparato, en donde los reactivos enlazados en por lo menos un sitio de reacción están distribuidos desigualmente.
122. Un método para manufacturar un dispositivo de fluido para detectar un analito en un fluido biológico de un sujeto, caracterizado porque comprende: (a) proporcionar una pluralidad de capas de un dispositivo de fluido; (b) soldar ultrasónicamente las capas conjuntamente, de tal manera que existe una red de fluido entre una unidad de recolección de muestras, por lo menos una cámara de reactivos, por lo menos un sitio de reacción y por lo menos una cámara de desperdicio.