JP2012509059A5 - - Google Patents

Claims (14)

1. ｉ）Δ５エロンガーゼ活性を有する脂肪酸エロンガーゼ、
   ｉｉ）Δ８デサチュラーゼおよび／またはΔ６デサチュラーゼ、
   ｉｉｉ）Δ９エロンガーゼおよび／またはΔ６エロンガーゼ、
   ｉｖ）Δ５デサチュラーゼ、ならびに
   ｖ）場合によって、Δ４デサチュラーゼおよび／またはω３デサチュラーゼ
   をコードする外因性ポリヌクレオチドを含む組換え細胞であって、
   各ポリヌクレオチドが、前記細胞中における前記ポリヌクレオチドの発現を誘導できる１つまたは複数のプロモーターに作動可能に連結し、かつ前記細胞中において前記Δ５エロンガーゼが前記外因性ポリヌクレオチドから発現される場合、前記エロンガーゼが、少なくとも６０％の効率でＤＰＡを産生する、ＥＰＡに対する活性を有する、組換え細胞。
2. 植物細胞である、請求項１に記載の組換え細胞。
3. ｉ）前記細胞が、野生型細胞と比較した場合、オレイン酸をエイコセン酸（Ｃ２０：１）に変換する低下した能力を有し、および／または前記オレイン酸の５％未満が前記細胞中においてエイコセン酸に変換される、
   ｉｉ）前記細胞が、前記外因性ポリヌクレオチドを欠く対応する細胞と比較して、ＧＬＡからＳＤＡおよび／またはＡＲＡからＥＰＡの増加した変換率を含む、
   ｉｉｉ）前記細胞中における脂肪酸中におけるＤＨＡの量が、前記細胞中における全脂肪酸の少なくとも３％である、
   ｉｖ）ＬＡからＡＲＡおよび／またはＡＬＡからＥＰＡの変換の効率が、少なくとも８０％である、および
   ｖ）ＡＬＡからＥＰＡ、ＤＰＡまたはＤＨＡの変換の効率が、少なくとも１７．３％である
   の内の１つまたは複数の特徴を有する、請求項１または２に記載の細胞。
4. 前記細胞中における前記脂肪酸中におけるＡＲＡ、ＥＰＡ、ＤＰＡおよびＤＨＡの総計が、前記細胞中における全脂肪酸の少なくとも１５％を含み、前記細胞中における全脂肪酸の少なくとも３％がＤＨＡであり、かつＣ２０：１のレベルが１％未満である、請求項１から３のいずれか一項に記載の細胞。
5. ｉ）Δ１７デサチュラーゼ、
   ｉｉ）Δ１５デサチュラーゼ、および／または
   ｉｉｉ）Δ１２デサチュラーゼ
   をコードする外因性ポリヌクレオチドをさらに含み、
   各ポリヌクレオチドが、前記細胞中における前記ポリヌクレオチドの発現を誘導できる１つまたは複数のプロモーターに作動可能に連結する、請求項１から４のいずれか一項に記載の細胞。
6. 前記デサチュラーゼの内の１種もしくは複数種または全てが、対応するアシル−ＰＣ基質よりも大きなアシル−ＣｏＡ基質に対する活性を有する、請求項１から５のいずれか一項に記載の細胞。
7. １種または複数種の長鎖多価不飽和脂肪酸（ＬＣ−ＰＵＦＡ）を合成できる細胞を得る方法であって、
   ａ） ｉ）Δ５エロンガーゼ活性を有する脂肪酸エロンガーゼ、
   ｉｉ）Δ８デサチュラーゼおよび／またはΔ６デサチュラーゼ、
   ｉｉｉ）Δ９エロンガーゼおよび／またはΔ６エロンガーゼ、
   ｉｖ）Δ５デサチュラーゼ、ならびに
   ｖ）場合によって、Δ４デサチュラーゼおよび／またはω３デサチュラーゼ、
   をコードする外因性ポリヌクレオチドを細胞、好ましくは前記ＬＣ−ＰＵＦＡを合成することができない細胞中に導入するステップであり、
   各ポリヌクレオチドが、前記細胞中における前記ポリヌクレオチドの発現を誘導できるプロモーターに作動可能に連結する、ステップ、
   ｂ）前記細胞中において前記外因性ポリヌクレオチドを発現させるステップ、
   ｃ）前記細胞の脂肪酸組成を分析するステップ、ならびに
   ｄ）細胞を選択するステップであり、前記Δ５エロンガーゼが、少なくとも６０％の効率でＤＰＡを産生する、ＥＰＡに対する活性を有する、ステップ
   を含む方法。
8. 請求項１から６のいずれか一項に記載の細胞を含むトランスジェニック非ヒト生物。
9. トランスジェニック植物である、請求項８に記載の生物。
10. 請求項１から６のいずれか一項に記載の細胞を含むか、または請求項９のトランスジェニック植物から得られる種子。
11. 不飽和脂肪酸を含有する油の製造方法であって、請求項１から６のいずれか一項に記載の細胞、請求項８もしくは９に記載のトランスジェニック非ヒト生物、および／または請求項１０に記載の種子から油を抽出するステップを含む方法。
12. 前記種子が油料種子である、請求項１１記載の方法。
13. 請求項１から６のいずれか一項に記載の細胞、請求項８もしくは９に記載のトランスジェニック非ヒト生物、請求項１０に記載の種子、および／または請求項１１もしくは請求項１２の方法を用いて得られる油を含む飼料、化粧品または化学物質。
14. 請求項１から６のいずれか一項に記載の細胞、請求項８もしくは９に記載のトランスジェニック非ヒト生物、請求項１０に記載の種子、および／または請求項１１もしくは請求項１２の方法を用いて得られる油を含む、ＰＵＦＡから利益を受ける状態を治療または予防するための医薬品。