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BR122018015762B1 - composição de stevia solúvel e composição de alimento, bebida, farmacêutica ou cosmética compreendendo a dita composição - Google Patents

composição de stevia solúvel e composição de alimento, bebida, farmacêutica ou cosmética compreendendo a dita composição Download PDF

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BR122018015762B1
BR122018015762B1 BR122018015762-3A BR122018015762A BR122018015762B1 BR 122018015762 B1 BR122018015762 B1 BR 122018015762B1 BR 122018015762 A BR122018015762 A BR 122018015762A BR 122018015762 B1 BR122018015762 B1 BR 122018015762B1
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BR
Brazil
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rebaudioside
composition
stevia
fact
reb
Prior art date
Application number
BR122018015762-3A
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English (en)
Inventor
Avetik Markosyan
Original Assignee
Purecircle Usa Inc
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Publication date
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Abstract

COMPOSIÇÕES DE STEVIA E COMPOSIÇÃO DE ALIMENTO, BEBIDA, FARMACÊUTICA OU COSMÉTICA COMPREENDENDO DITAS COMPOSIÇÕES. Composições stevia são preparadas de glicosídeos de esteviol de Stevia rebaudiana.Bertoni. As composições são capazes de fornecer um perfil de sabor superior.e podem ser usadas como realçadores de adoçante, realçadores de sabor e.adoçantes em comidas, bebidas, cosméticos e farmacêuticos.

Description

[001]Dividido do BR1120130308850, depositado em 11.08.2011.
Antecedentes da invenção Campo da Invenção
[002]A invenção se refere a um processo para produzir um ingrediente alimentício altamente purificado do extrato de da planta Stevia rebaudiana Bertoni e seu uso em várias bebidas e produtos alimentícios.
Descrição da Técnica Relacionada
[003]Alternativas de açúcar estão recebendo atenção crescente devido à consciência de muitas doenças associadas com o consumo de bebidas e alimentos com alto teor de açúcar. Entretanto, muitos adoçantes artificiais tais como dulcina, ciclamato de sódio e sacarina foram proibidos ou restritos em alguns países devido a preocupações com sua segurança. Como um resultado, os adoçantes não calóricos de origem natural estão se tornando cada vez mais populares. A erva doce Stevia rebaudiana Bertoni produz vários glicosídeos de diterpeno que caracterizam propriedades sensoriais e adoçantes de intensidade elevada superiores àquelas de muitos outros adoçantes de potência elevada.
[004]Os glicosídeos doces mencionados acima, têm uma aglicona comum, esteviol, e diferem pelo número e tipo de resíduos de carboidrato nas posições C13 e C19. As folhas de Stevia são capazes de acumular até 10-20% (em base de peso seco) de glicosídeos de esteviol. Os principais glicosídeos encontrados nas folhas de Stevia são rebaudiosídeo A (2-10%), esteviosídeo (2-10%), e rebaudiosídeo C (12%). Outros glicosídeos tais como rebaudiosídeo B, D, E, e F, esteviolbiosídeo e busosídeo são encontrados em níveis muito mais baixos (aproximadamente 00,2%).
[005]Dois principais glicosídeos - esteviosídeo e rebaudiosídeo A (reb A), foram extensivamente estudados e caraterizados em termos de sua adequabilidade como adoçantes de intensidade elevada comerciais. Os estudos de estabilidade em bebidas carbonadas confirmaram sua estabilidade de pH e calor (Chang S.S., Cook, J.M. (1983) Stability studies of stevioside and rebaudiosídeo A in carbonated beverages. J. Agric. Food Chem. 31 : 409-412.)
[006]Glicosídeos de esteviol diferem de cada outro não somente em suas estruturas moleculares, porém, também pelas suas propriedades de sabor. Geralmente esteviosídeo é constatado ser 110-270 vezes mais doce do que sacarose, rebaudiosídeo A entre 150 e 320 vezes mais doce do que sacarose, e rebaudiosídeo C entre 40-60 vezes mais doce do que sacarose. Dulcosídeo A é 30 vezes mais doce do que sacarose. Rebaudiosídeo A tem sabor residual menos adstringente, menos amargo, e menos persistente, desse modo possuindo os atributos sensoriais mais favoráveis nos principais glicosídeos de esteviol (Tanaka 0. (1987) Improvement of taste of natural sweetners. Pure Appl. Chem. 69:675-683; Phillips K.C. (1989) Stevia: steps in developing a new sweetener. In: Grenby T.H. ed. Developments in sweeteners, vol. 3. Elsevier Applied Science, London. 1-43.). A estrutura química de rebaudiosídeo A é mostrada na Figura 1.
[007]Os métodos para a extração e purificação de glicosídeos doces da planta Stevia rebaudiana usando solventes orgânicos ou água são descritos em, por exemplo, Números de Patente dos Estados Unidos 4.361.697; 4.082.858; 4.892.938; 5.972.120; 5.962.678; 7.838.044 e 7.862.845.
[008]Entretanto, mesmo em um estado altamente purificado, os glicosídeos de esteviol ainda possuem atributos de paladar indesejável tais como amargor, sabor residual doce, sabor de alcaçuz, etc. Um dos principais obstáculos para a comercialização bem sucedida de adoçantes de stevia são esses atributos de paladar indesejável. Foi mostrado que essas notas de sabor se tornam mais proeminentes quando a concentração de glicosídeos de esteviol aumenta (Prakash I., DuBois G.E., Clos J.F., Wilkens K.L., Fosdick L.E. (2008) Development of rebiana, a natural, non-caloric sweetener. Food Chem. Toxicol., 46, S75-S82.).
[009]Rebaudiosídeo B (CAS No: 58543-17-2), ou reb B, também conhecido como esteviosídeo A4 (Kennelly E.J. (2002) Constituents of Stevia rebaudiana In Stevia: The genus Stevia, Kinghorn A.D. (Ed), Taylor & Francis, London, p.71), é um dos glicosídeos doces encontrados em Stevia rebaudiana. As avaliações sensoriais mostram que reb B foi aproximadamente 300-350 vezes mais doce do que sacarose, ao mesmo tempo em que para reb A este valor foi aproximadamente 350-450 (Crammer, B. and Ikan, R. (1986) Sweet Glycosides from the Stevia plant. Chemistry in Britain 22, 915-916, and 918). A estrutura química de rebaudiosídeo B é mostrada na Figura 2.
[0010]Acredita-se que reb B se forme a partir da hidrólise parcial de rebaudi- osídeo A durante o processo de extração (Kobayashi, M., Horikawa, S., Degrandi, I.H., Ueno, J. and Mitsuhashi, H. (1977) Dulcosides A and B, new diterpene glicosí- deos from Stevia rebaudiana. Phytochemistry 16, 1405-1408). Entretanto, outra pesquisa mostrou que reb B ocorre naturalmente nas folhas de Stevia rebaudiana e é atualmente um dos nove glicosídeos de esteviol reconhecidos por FAO/JECFA (United Nations' Food and Agriculture Organization/Joint Expert Committee on Food Additives) no cálculo de teor de glicosídeos de esteviol total nas preparações de glico- sídeo de esteviol comercial (FAO JECFA (2010) Steviol Glycosides, Compendium of Food Additive Specifications, FAO JECFA Monographs 10, 17-21).
[0011]Somente alguns métodos são descritos na literatura para preparar reb B.
[0012]Kohda e outros, (1976) prepararam reb B por hidrólise de reb A com hesperidinase. Reb B também foi preparado por saponificação alcalina de reb A. A referida saponificação foi conduzida em 10% de hidróxido de potássio-etanol. A so- lução foi acidificada com ácido acético, e extraída com n-butanol. A camada de butanol foi lavada com água e concentrada em baixa temperatura a vácuo. O resíduo foi cristalizado de metanol para produzir reb B. (Kohda, H., Kasai, R., Yamasaki, K., Murakami, K. e Tanaka, 0. (1976) New sweet diterpene glucosides from Stevia re- baudiana. Phytochemistry 15, 981-983). O processo descrito pode ser adequado para preparação em escala de laboratório de reb B, porém, não é adequado para qualquer preparação de reb B comercial ou em grande escala.
[0013]Ahmed e outros, usaram hidrólise alcalina moderada de reb A para preparar reb B. De acordo com o procedimento descrito, reb A foi hidrolisado para reb B por refluxo com 10%> de KOH aquoso a 100°C durante 1 hora. Após a neutralização com ácido acético glacial, a substância precipitada foi recristalizada duas vezes a partir de metanol (Ahmed M.S., Dobberstein R.H., e Farnsworth N.R. (1980) Stevia rebaudiana: I. Use of p-bromophenacyl bromide to enhance ultraviolet detection of water-soluble organic acids (steviolbioside and rebaudiosídeo B) in high- performance liquid chromatographic analysis, J. Chromatogr., 192, 387-393).
[0014]O uso de metanol como meios de recristalização como descrito na literatura exigirá sua remoção subsequente do produto. É notado que o manuseio de substâncias tóxicas tais como metanol requer instalações de fabricação especializadas e, quando aplicadas no processamento de comida, medições de segurança de comida sofisticadas.
[0015]É também notado que nenhum trabalho significante foi conduzido para determinar o potencial de reb B como um ingrediente alimentício ou adoçante. Além disso, reb B é muitas vezes visto como artefato de processo e impureza desnecessária em preparações comerciais de glicosídeos de esteviol. Nenhuma avaliação significante da influência de reb B no perfil de paladar total de preparações de glico- sídeo de esteviol foi conduzida.
[0016]A solubilidade em água de reb B é reportada ser cerca de 0,1% (Kin- ghorn A.D. (2002) Constituents of Stevia rebaudiana In Stevia: The genus Stevia, Kinghorn A.D. (Ed), Taylor & Francis, London, p.8). Em muitos processos alimentí-cios onde ingredientes altamente concentrados são usados, uma forma altamente solúvel de reb B será necessária.
[0017]Considerando os fatos mencionados acima, há uma necessidade de avaliar reb B como um ingrediente alimentício e adoçante e desenvolver um processo simples e eficiente para preparações de reb B de grau alimentício, adequadas para aplicações alimentícias e outras aplicações.
[0018]Na descrição desta invenção nós mostramos que, quando aplicado de uma maneira específica, reb B pode impactar o perfil de paladar e oferecer vantagens significantes para o uso de adoçantes de stevia em várias aplicações.
Sumário da invenção
[0019]A presente invenção tem como objetivo superar as desvantagens dos adoçantes de Stevia existentes. A invenção descreve um processo para produzir um ingrediente alimentício de pureza elevada do extrato da planta de Stevia rebau- diana Bertoni e uso do mesmo em vários produtos alimentícios e bebidas como um modificador de sabor e adoçante.
[0020]A invenção, em parte, pertence a um ingrediente compreendendo gli- cosídeos de esteviol de planta de Stevia rebaudiana Bertoni. Os glicosídeos de es- teviol são selecionados a partir do grupo consistindo em esteviosídeo, rebaudiosídeo A (FIGURA 1), rebaudiosídeo B (FIGURA 2), rebaudiosídeo C, rebaudiosídeo D, re- baudiosídeo E, rebaudiosídeo F, dulcosídeo A, esteviolbiosídeo, rubusosídeo, bem como outros glicosídeos de esteviol encontrados na planta de Stevia rebaudiana Bertoni e misturas dos mesmos.
[0021]A invenção, em parte, pertence a um processo para produzir um ingrediente contendo rebaudiosídeo B, e esteviosídeo, rebaudiosídeo A, rebaudiosí- deo C, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo F, dulcosídeo A, esteviol- biosídeo, rubusosídeo, bem como outros glicosídeos de esteviol encontrados em plantas de Stevia rebaudiana Bertoni e misturas dos mesmos.
[0022]Na invenção, rebaudiosídeo A comercializado por PureCircle Sdn. Bhd. (Malaysia), contendo, rebaudiosídeo A (cerca de 95-100%), esteviosídeo (cerca de 0-1%), rebaudiosídeo C (cerca de 0-1%), rebaudiosídeo F (cerca de 0-1%), re- baudiosídeo B (cerca de 0,1-0,8%), rebaudiosídeo D (cerca de 0-1%), e outros glico- sídeos totalizando o teor de glicosídeos de esteviol total de pelo menos 95%, pode ser usado como um material de partida. Alternativamente os extratos de stevia com relações diferentes de glicosídeos de esteviol podem ser usados como materiais de partida.
[0023]O material de partida é submetido a conversão parcial em reb B usando um biocatalisador capaz de hidrolisar ligações de éster de β-glicosila. As misturas de glicosídeo obtidas podem ser usadas "no estado em que se encontra" bem como por recuperação de reb B da mistura e as utilizando como um ingrediente puro.
[0024]O reb B de baixa solubilidade pode ser submetido a tratamento térmico adicional para aumentar a solubilidade.
[0025]Os produtos obtidos foram aplicados em vários alimentos e bebidas como adoçantes, realçadores de adoçantes e modificadores de sabor, incluindo refrigerantes, sorvetes, biscoitos, pão, sucos de fruta, produtos lácteos, produtos de panificação e produtos de confeitaria.
[0026]Deve ser entendido que tanto a descrição geral anterior quanto a seguinte descrição detalhada são exemplares e explicativas e são pretendidas fornecer outra explicação da invenção como reivindicado.
Breve descrição dos desenhos
[0027]Os desenhos acompanhantes são incluídos para fornecer um entendimento adicional da invenção. Os desenhos ilustram as modalidades da invenção e junto com a descrição servem para explicar os princípios das modalidades da invenção.
[0028]FIGURA 1 mostra a estrutura química de rebaudiosídeo A.
[0029]FIGURA 2 mostra a estrutura química de rebaudiosídeo B
[0030]FIGURA 3 mostra um cromatograma de HPLC de uma composição de stevia compreendendo rebaudiosídeo A e rebaudiosídeo B.
Descrição detalhada da invenção
[0031]Vantagens da presente invenção se tornarão mais evidentes a partir da descrição detalhada dada aqui a seguir. Entretanto, deve ser entendido que a descrição detalhada e exemplos específicos, ao mesmo tempo em que indicando as modalidades preferidas da invenção, são determinados por modo de ilustração somente, uma vez que várias mudanças e modificações no espírito e escopo da invenção se tornarão evidentes para aqueles versados na técnica a partir desta descrição detalhada.
[0032]Rebaudiosídeo A comercializado por PureCircle Sdn. Bhd. (Malaysia), contendo, rebaudiosídeo A (cerca de 95-100%), esteviosídeo (cerca de 0-1%), re- baudiosídeo C (cerca de 0-1%), rebaudiosídeo D (cerca de 0-1%), rebaudiosídeo F (cerca de 0-1%), rebaudiosídeo B (cerca de 0,1-0,8%) e outros glicosídeos totalizando o teor total de glicosídeos de esteviol de pelo menos cerca de 95%, podem ser usados como um material de partida. Alternativamente os extratos de stevia com diferentes relações de glicosídeos de esteviol podem ser usados como materiais de partida.
[0033]A análise de HPLC dos materiais brutos e produtos pode ser realizada em uma cromatografia líquida de Agilent Technologies 1200 Series (USA), equipada com Phenomenex Prodigy ODS3, coluna de 5 μm (4,6X250mm) a 40°C. A fase móvel foi mistura de 32:68 de acetonitrila e 10 mmol/L de tampão de fosfato de sódio (cerca de pH 2,6) em 1 mL/min. Um detector de disposição de díodo ajustado em 210 nm pode ser usado como o detector. Um exemplo de um cromatograma de HPLC desse modo obtido é mostrado na FIGURA 3.
[0034]Como usado aqui, a menos que especificado de outro modo, "reb B" e "composição de reb B" devem ser usados alternadamente para se referir a rebaudio- sídeo B ou rebaudiosídeo B purificado em combinação com qualquer outra entidade química. Preparação de Reb B 1. Conversão Biocatalítica
[0035]Em uma modalidade da invenção, reb A é disperso em água para formar a solução. A concentração de reb A é cerca de 0-50% (peso/volume) preferivelmente cerca de 10-25%. Uma preparação de enzima selecionado a partir do grupo de esterases, lipases, celulases, hemicelulases, hesperidinases e β-glicosidases, ou qualquer enzima capaz de hidrolisar as ligações de éster de β-glicosila, ou células livres ou imobilizadas, ou quaisquer outros biocatalisadores capazes de hidrolisar as ligações de éster de β-glicosila (as preparações de enzima, enzima, células livres ou imobilizadas, e outros biocatalisadores aqui a seguir coletivamente referidos como "biocatalisadores") são adicionados à solução de reb A para formar a mistura de reação. A mistura é incubada em cerca de 10-150°C, preferivelmente cerca de 30100°C, durante um período de cerca de 0,5-48 horas, preferivelmente cerca de 1-24 horas. Como um resultado reb A é hidrolisado para reb B. A produção molar de conversão de reb B é cerca de 5-100%, preferivelmente cerca de 10-90%.
[0036]Após a reação, o biocatalisador é inativado por aquecimento ou remoção da mistura de reação. A mistura obtida é neutralizada por um ácido, preferivelmente por ácido sulfúrico ou ácido orto-fosfórico, até que um pH de cerca de 3,0-5,0 seja alcançado, preferivelmente até que um pH de cerca de 3,0-4,0 seja alcançado. Ao acidificar, um precipitado é formado. O precipitado é separado por qualquer método conhecido na técnica tal como filtração ou centrifugação e lavado com água até que a água alcance um pH de cerca de 4,0-5,0. O material cristalino obtido é secado sob vácuo a cerca de 60-105°C para produzir uma mistura de reb A e reb B tendo uma relação de cerca de 5%:95% a cerca de 95%:5% (peso/peso), preferivelmente cerca de 50%:50% a cerca de 90%: 10% (peso/peso). 2. Purificação Pós-Conversão Opcional
[0037]Para obter reb B purificado, em uma modalidade o precipitado separado descrito acima é suspenso em água e a mistura é submetida a agitação contínua durante cerca de 0,5-24 horas, preferivelmente cerca de 1-3 horas, a cerca de 50100°C, preferivelmente cerca de 60-80°C. A relação de precipitado para água (pe- so/volume) é cerca de 1:5 a cerca de 1:20, preferivelmente cerca de 1:10 a cerca de 1:15. Os cristais lavados são separados e secados sob vácuo a cerca de 60-105°C para produzir reb B com cerca de 99% de pureza. 3. Realce da Solubilidade Pós-Conversão Opcional
[0038]O seguinte procedimento pode ser usado para aumentar a solubilidade em água de reb B ou qualquer composição de reb B. As composições obtidas geralmente têm uma solubilidade em água menor do que cerca de 0,2% (pe- so/volume). Para aumentar a solubilidade dessas composições, as composições foram combinadas com a água em relação de cerca de 1:1 (peso/peso) e a mistura obtida foi também submetida a um tratamento térmico gradiente que resultou em uma solução de concentração elevada e estabilidade elevada. O gradiente de cerca de 1°C por minuto foi usado no aquecimento da mistura. A mistura foi aquecida à temperatura de cerca de 110-140°C, preferivelmente cerca de 118-125°C e foi man-tida na temperatura máxima durante cerca de 0-120 min, preferivelmente cerca de 50-70 min. Após o tratamento térmico, a solução foi arrefecida até a temperatura ambiente em gradiente de cerca de 1°C por minuto. A solução foi secada por pulverização por um secador por pulverização de laboratório operando em temperaturas de cerca de 175°C de entrada e cerca de 100°C de saída. Uma forma amorfa da composição foi obtida com mais do que cerca de 20% de solubilidade em água em temperatura ambiente. Uso de Composições Reb B
[0039]As composições de reb B descritas acima podem ser usadas como um realçador de adoçante, um realçador de sabor e/ou um adoçante em vários produtos alimentícios e bebida. Os exemplos não limitantes de produtos alimentícios e de bebida incluem refrigerantes carbonados, bebidas prontas para beber, bebidas energéticas, bebidas isotônicas, bebidas de baixa caloria, bebidas de zero caloria, bebidas para esportistas, chás, sucos de fruta e vegetais, bebidas de suco, bebidas lácteas, bebidas de iogurte, bebidas alcoólicas, bebidas em pó, produtos de panificação, cookies, biscoitos, misturas de cozimento, cereais, produtos de confeitaria, doces, toffees, gomas de mascar, produtos lácteos, leite flavorizado, iogurtes, iogurtes flavorizados, leite fermentado, molho de soja e outros produtos com base em soja, molhos para salada, maionese, vinagre, sobremesas congeladas, produtos de carne, produtos de carne de peixe, alimentos engarrafados e enlatados, adoçantes de mesa, frutas e vegetais.
[0040]Adicionalmente as composições podem ser usadas em cosméticos e preparações de fármaco ou farmacêutico, incluindo, porém não limitado a pasta e dentes, enxaguante bucal, xarope para tosse, pastilhas mastigáveis, losangos, preparações de vitamina, e similares.
[0041]As composições podem ser usadas "no estado em que se encontram" ou em combinação com outros adoçantes, flavorizantes e ingredientes alimentícios.
[0042]Os exemplos não limitantes de adoçantes incluem glicosídeos de es- teviol, esteviosídeo, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo B, rebaudiosídeo C, rebaudio- sídeo D, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo F, dulcosídeo A, esteviolbiosídeo, rubuso- sídeo, bem como outros glicosídeos de esteviol encontrados em planta de Stevia rebaudiana Bertoni e misturas dos mesmos, extrato de stevia, extrato de Luo Han Guo, mogrosídeos, xarope de milho com alto teor de frutose, xarope de milho, açúcar invertido, fructooligossacarídeo, inulina, inulooligossacarídeos, açúcar de acoplamento, maltooligossacarídeos, maltodextinas, sólidos de xarope de milho, glicose, maltose, sacarose, lactose, aspartame, sacarina, sucralose, álcoois de açúcar.
[0043]Exemplos não limitantes de flavorizantes incluem limão, laranja, fruta, banana, uva, pêra, abacaxi, amêndoa amarga, cola, canela, açúcar, algodão doce, sabores baunilha.
[0044]Exemplos não limitantes de outros ingredientes alimentícios incluem flavorizantes, acidulantes, orgânicos e aminoácidos, agentes corantes, agentes de volume, amidos modificados, gomas, texturizadores, conservantes, antioxidantes, emulsificantes, estabilizadores, espessantes, agentes de gelificação.
[0045]Os seguintes exemplos ilustram várias modalidades da invenção. Será entendido que a invenção não está limitada aos materiais, proporções, condições, e procedimentos apresentados nos exemplos, que são somente ilustrativos. EXEMPLO 1 - Preparação de composição de stevia
[0046]1g de rebaudiosídeo A produzido por PureCircle Sdn. Bhd. (Malaysia), contendo, 98,1% de rebaudiosídeo A, 0,3% de esteviosídeo, 0,2 de rebaudiosídeo C, 0,2% de rebaudiosídeo F, 0,4% de rebaudiosídeo B e 0,6% de rebaudiosídeo D foi dissolvido em 10 mL de tampão de fosfato a 0,1 M (pH 7,0) e cerca de 1 mg de hesperidinase adquirido de Sigma- Aldrich (USA) foi adicionado. A mistura foi incubada a 37°C durante 24 horas. Em seguida a mistura foi fervida a 100°C durante 15 min e filtrada através da camada de carbono ativado. A temperatura do filtrado foi ajustada para 20°C e o pH foi ajustado para pH 4,0 com ácido orto-fosfórico. A solução foi mantida sob condições de agitação moderada durante 4 horas e um precipitado foi formado. O precipitado foi filtrado e lavado no filtro com 2000 mL de água. Os cristais lavados foram secados sob vácuo para produzir 0,9g de material contendo cerca de 84% de reb A e 16% de reb B. A solubilidade em água (a 25°C) do ma- terial obtido foi cerca de 0,2% (peso/volume). EXEMPLO 2 - Preparação de composição de stevia
[0047]1g de rebaudiosídeo A produzido por PureCircle Sdn. Bhd. (Malaysia), contendo, 98,1% de rebaudiosídeo A, 0,3% de esteviosídeo, 0,2% de rebaudiosídeo C, 0,2% de rebaudiosídeo F, 0,4% de rebaudiosídeo B e 0,6% de rebaudiosídeo D foi dissolvido em 10 mL de tampão de fosfato a 0,1 M (pH 7.0) e cerca de 1 mg de hesperidinase adquirida de Sigma- Aldrich (USA) foi adicionado. A mistura foi incubada a 37°C durante 36 horas. Em seguida a mistura foi fervida a 100°C durante 15 min e filtrada através da camada de carbono ativado. A temperatura do filtrado foi ajustada para 20°C e o pH foi ajustado para pH 4,0 com ácido orto-fosfórico. A solução foi mantida sob condições de agitação moderada durante 4 horas e um precipitado foi formado. O precipitado foi filtrado e lavado no filtro com 2000 mL de água. Os cristais lavados foram secados sob vácuo para produzir cerca de 0,75g de material contendo cerca de 9% de reb A e cerca de 91% de reb B. A solubilidade em água (a 25°C) do material obtido foi cerca de 0,1% (peso/volume). EXEMPLO 3 - Preparação de composição de stevia
[0048]1g de rebaudiosídeo A produzido por PureCircle Sdn. Bhd. (Malaysia), contendo, 98,1% de rebaudiosídeo A, 0,3% de stevioside, 0,2 de rebaudiosídeo C, 0,2% de rebaudiosídeo F, 0,4% de rebaudiosídeo B e 0,6% de rebaudiosídeo D foi dissolvido em 10 mL de tampão de fosfato a 0,1 M (pH 7,0) e cerca de 1 mg de hes- peridinase adquirida de Sigma- Aldrich (USA) foi adicionado. A mistura foi incubada a 37°C durante 48 horas. Em seguida a mistura foi fervida a 100°C durante 15 minutos e filtrada através da camada de carbono ativado. A temperatura do filtrado foi ajustada para 20°C e o pH foi ajustado para pH 4,0 com ácido orto-fosfórico. A solução foi mantida sob condições de agitação moderada durante 4 horas e um precipitado foi formado. O precipitado foi filtrado e lavado no filtro com 2000 mL de água. Os cristais lavados foram secados sob vácuo para produzir cerca de 0,7g de materi al contendo cerca de 99,1% de reb B. A solubilidade em água (a 25°C) do material obtido foi cerca de 0,1% (peso/volume). EXEMPLO 4 - Preparação de composição de stevia
[0049]75g de material preparado de acordo com EXEMPLO 2 foi suspenso em 1000 mL de água. A temperatura da mistura foi aumentada para 70°C. A suspensão foi mantida sob condições de agitação moderada durante 4 horas. Os cristais foram filtrados e secados sob vácuo para produzir cerca de 65 g de material contendo cerca de 99,0% de reb B. A solubilidade em água (a 25°C) de material obtido foi cerca de 0,1% (peso/volume). EXEMPLO 5 - Preparação de composição de stevia solúvel
[0050]50 g de material preparado de acordo com EXEMPLO 1 foi misturado com 50g de água e incubado no banho de óleo com temperatura regulada. A temperatura foi aumentada em 1°C por minuto até 121°C. A mistura foi mantida a 121°C durante 1 hora e em seguida a temperatura foi diminuída para temperatura ambiente (25°C) em 1°C por minuto. A solução foi secada utilizando secador por pulverização de laboratório YC-015 (Shanghai Pilotech Instrument & Equipment Co. Ltd., China) operando a temperaturas de 175°C de entrada e 100°C de saída. Cerca de 47g de um pó amorfo foi obtido com cerca de 25% (peso/volume) de solubilidade em água (a 25°C). EXEMPLO 6 - Preparação de composição de stevia solúvel
[0051]42 g de reb A produzido por PureCircle Sdn. Bhd. (Malaysia) com pureza de 99,2% (base seca) e 8 g de reb B preparado de acordo com EXEMPLO 4 foram misturados com 50g de água e incubados em banho de óleo de temperatura regulada. A temperatura foi aumentada em 1°C por minuto até 121°C. A mistura foi mantida a 121°C durante 1 hora e, em seguida, a temperatura foi diminuída para temperatura ambiente (25°C) a 1°C por minuto. A solução foi secada usando secador por pulverização de laboratório YC-015 (Shanghai Pilotech Instrument & Equi pment Co. Ltd., China) operando a temperaturas de 175°C de entrada e 100°C de saída. Cerca de 48g de um pó amorfo foi obtido com cerca de 1,5% (peso/volume) de solubilidade em água (a 25°C). EXEMPLO 7 - Bebida de suco de laranja de baixa caloria
[0052]Concentrado de laranja (35%), ácido cítrico (0,35%), ácido ascórbico (0,05%), cor vermelho laranja (0,01%o), sabor laranja (0,20%), e 0,05% de composição de stevia, foram misturados e dissolvidos completamente em água (até 100%) e pasteurizado. A composição de stevia foi selecionada de um extrato de stevia comercial (contendo esteviosídeo a 26%, rebaudiosídeo A a 55%, e 16% de outros gli- cosídeos), um rebaudiosídeo comercial A (contendo 98,2% de reb A) ou material obtido de acordo com EXEMPLO 5.
[0053]As avaliações sensoriais das amostras estão resumidas na Tabela 1. Os dados mostram que os melhores resultados podem ser obtidos utilizando-se a composição obtida de acordo com EXEMPLO 5. Particularmente as bebidas preparadas com a referida composição exibiram uma sensação bucal e perfil de sabor redondo e completo. Tabela 1 Avaliação das amostras de bebida de suco de laranja
Figure img0001
[0054]O mesmo método pode ser usado para preparar sucos e bebidas de suco de outras frutas, tais como maçãs, limões, damascos, cerejas, abacaxis, mangas, etc. EXEMPLO 8 - Bebida carbonada de zero caloria
[0055]As bebidas carbonadas de acordo com as fórmulas apresentadas na Tabela 2 foram preparadas. Tabela 2 Fórmulas de Bebida Carbonada
Figure img0002
[0056]As propriedades sensoriais foram avaliadas por 20 especialistas. Os resultados estão resumidos na Tabela 3. Tabela 3 Avaliação de amostras de bebida carbonada de zero caloria
Figure img0003
Figure img0004
[0057]Os resultados acima mostram que as bebidas preparadas usando a composição obtida de acordo com EXEMPLO 5 possuíram as melhores características organolépticas. EXEMPLO 9 - Biscoitos Dietéticos
[0058]Farinha (50,0%), margarina (30,0%), frutose (10,0%), maltitol (8,0%), leite integral (1,0%), sal (0,2%), fermento em pó (0,15%), vanilina (0,1%) e diferentes composições de stevia (0,03%) foram bem amassados na máquina de mistura de pão. A massa obtida foi moldada e assada no forno a 200°C durante 15 minutos. As composições de stevia foram selecionadas de um extrato de stevia comercial (contendo esteviosídeo a 26%, rebaudiosídeo A a 55%, e 16% de outros glicosídeos), um rebaudiosídeo comercial A (contendo 98,2% de reb A) e material obtido de acordo com EXEMPLO 5.
[0059]As propriedades sensoriais foram avaliadas por 20 especialistas. Os melhores resultados foram obtidos em amostras contendo a composição obtida de acordo com EXEMPLO 5. Os especialistas notaram uma sensação na boca e perfil de sabor completo e redondo. EXEMPLO 10 - Iogurte
[0060]Diferentes composições de stevia (0,03%) e sacarose (4%) foram dissolvidas em leite com baixo teor de gordura. As composições de stevia foram selecionadas de um extrato de stevia comercial (contendo esteviosídeo a 26%, rebaudi- osídeo A a 55%, e 16% de outros glicosídeos), um rebaudiosídeo A comercial (contendo 98,2% de reb A) e o material obtido de acordo com EXEMPLO 5. Após pasteurização a 82°C durante 20 minutos, o leite foi resfriado a 37°C. Uma cultura inicial (3%) foi adicionada e a mistura foi incubada a 37°C durante 6 horas em seguida a 5°C durante 12 horas.
[0061]As propriedades sensoriais foram avaliadas por 20 especialistas. Os melhores resultados foram obtidos em amostras contendo a composição obtida de acordo com EXEMPLO 5. Os especialistas notaram uma sensação na boca e perfil de sabor redondo e completo.
[0062]Deve ser entendido que as seguintes descrições e modalidades específicas mostradas aqui são meramente ilustrativas do melhor modo da invenção e dos princípios do mesmo, e que as modificações e adições podem ser facilmente feitas por aqueles versados na técnica sem afastar-se do espírito e escopo da invenção, que é, portanto, entendida ser limitada somente pelo escopo das reivindicações anexas.

Claims (8)

1. Composição de stevia solúvel CARACTERIZADA pelo fato de que compreende uma mistura de rebaudiosídeo A e rebaudiosídeo B tratada por gradiente térmico, em que a razão de rebaudiosídeo A e rebaudiosídeo B na mistura é de cerca de 50%:50% a cerca de 90%:10% (peso/peso), em que a mistura de rebaudiosí- deo A e rebaudiosídeo B tratada por gradiente térmico é fornecida em uma forma de pó amorfo, e em que a composição tem uma solubilidade superior a cerca de 20% em água à temperatura ambiente.
2. Composição, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que adicionalmente compreende um agente adoçante adicional selecionado do grupo que consiste em: extrato de stevia, glicosídeos de esteviol, esteviosídeo, rebaudiosídeo C, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo F, dulcosídeo A, esteviolbiosídeo, rubusosídeo, outros glicosídeos de esteviol encontrados em plantas de Stevia rebaudiana Bertoni, e misturas dos mesmos, extrato de Luo Han Guo, mogrosídeos, xarope de milho com alto teor de frutose, xarope de milho, açúcar invertido, fructooligossacarídeos, inulina, inulooligossacarídeos, açúcar de acoplamento, maltooligossacarídeos, maltodextinas, sólidos de xarope de milho, glicose, maltose, sacarose, lactose, aspartame, sacarina, sucralose, álcoois de açúcar e uma combinação dos mesmos.
3. Composição, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que adicionalmente compreende um agente flavorizante selecionado do grupo que consiste em: limão, laranja, frutas, banana, uva, pêra, abacaxi, manga, amêndoa amarga, cola, canela, açúcar, algodão doce, baunilha e uma combinação dos mesmos.
4. Composição, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que adicionalmente compreende um ingrediente alimentício selecionado do grupo que consiste em: acidulantes, ácidos orgânicos e aminoácidos, agentes coran- tes, agentes de volume, amidos modificados, gomas, texturizadores, conservantes, antioxidantes, emulsificantes, estabilizantes, espessantes, agentes de gelificação e uma combinação dos mesmos.
5. Composição, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que a razão de rebaudiosídeo A e rebaudiosídeo B é cerca de 84%:16%.
6. Composição, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que a composição tem uma solubilidade de cerca de 25% em água a 25 °C.
7. Composição, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que a composição é completamente solúvel em água acidificada.
8. Composição de alimento, bebida, farmacêutica ou cosmética, CARACTERIZADA pelo fato de que compreende a composição de stevia, como definida na reivindicação 1.
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