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TWI498086B - Polyphenol composition - Google Patents

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TWI498086B
TWI498086B TW099108570A TW99108570A TWI498086B TW I498086 B TWI498086 B TW I498086B TW 099108570 A TW099108570 A TW 099108570A TW 99108570 A TW99108570 A TW 99108570A TW I498086 B TWI498086 B TW I498086B
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TW
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polyphenol composition
polyphenol
tea extract
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TW099108570A
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Inventor
Susumu Ohishi
Norihiko Satake
Tomoko Konishi
Shinichiro Takashima
Original Assignee
Kao Corp
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Publication date
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Description

多酚組合物
本發明係關於一種自茶獲得之多酚組合物。
近年來，由於消費者之愛好之多樣化、健康意向之高漲，各種各樣之健康食品上市且其需求不斷擴大。例如，眾所周知多酚具有抗氧化能力，抗動脈硬化、抗過敏、血流增強等效果受到期待，因而被認為是健康食品之重要成分。
上述多酚例如可藉由使烏龍茶之水性萃取液與活性碳或吸附樹脂接觸將非聚合物兒茶素類除去，從而以多酚成分而獲得(專利文獻1)。
[先前技術文獻] [專利文獻]
[專利文獻1]國際公開第2005/077384號冊子
本發明提供一種多酚組合物，其係含有來自茶之黃酮醇配糖基(aglycone)及黃酮醇配糖體者，且下述(A)與(B)之質量比[(B)/(A)]為0.01~18：(A)藉由高效液相層析法所測定的水解後之該多酚組合物之固形物成分中所含的黃酮醇配糖基總量；(B)藉由酒石酸鐵法所測定的該多酚組合物之固形物成分中所含之多酚總量。
又，本發明提供一種飲食品，其係含有上述多酚組合物 者。
進而，本發明提供一種製造方法，其係製造上述多酚組合物者，其包含以下步驟：使茶萃取物吸附於合成吸附劑中；使第1有機溶劑水溶液接觸上述合成吸附劑，從而使第1成分溶出；及使疏水性高於上述第1有機溶劑水溶液之第2有機溶劑水溶液接觸溶出上述第1成分後之合成吸附劑，從而使包含多酚組合物之第2成分溶出。
多酚原本刺激味較強，故而當飲食品中含有大量之多酚時，其適口性常會受到較大損害。
本發明者等人對來自茶之多酚組合物進行了各種研究，結果發現當多酚組合物中之黃酮醇配糖基及黃酮醇配糖體之含有比率在特定範圍內時，多酚特有之刺激味會顯著降低。
根據本發明，提供一種儘管含有高濃度之多酚，但多酚特有之刺激味顯著降低的來自茶之多酚組合物。該多酚組合物具有非聚合物兒茶素類或黃酮醇類單獨存在時所品嘗不到的適口性較高之苦味，且即便利用甜味劑或調味劑將苦味緩和，後味亦不會產生不調和感，故而適合作為健康食品等而經常食用。
首先，就本說明書中所使用之用語進行說明。
本說明書中，所謂「多酚」，係指藉由酒石酸鐵法所測 定者，具體而言可例示：黃酮醇類、黃烷-3-醇類、前花青素類及其等之聚合物。黃酮醇類包含檞皮酮、楊梅黃酮、山茶酚等或其等之配糖體，另外，黃烷-3-醇類包含兒茶素類，進而，其聚合物包含茶黃素類、烏龍雙黃烷(oolonghomobisflavan)類等。
所謂「茶(Camellia sinensis)」，係指山茶科(Theaceae)山茶屬(Camellia)之茶(tea plant)，根據加工方法，其可大致分為不醱酵茶、半醱酵茶、醱酵茶。其中，以不醱酵茶為佳。作為不醱酵茶，可例示：由選自山茶(Camellia)屬，例如茶變種(C.var.sinensis)(包括藪北種)、普洱茶變種(C.var.aaaamica)及其等之混合種中之茶所製作的莖茶、梗茶、芽茶、煎茶、粗茶、碾茶、釜炒茶等綠茶。作為半醱酵茶，可例示總稱為烏龍茶之鐵觀音、色種、黃金桂、武夷岩茶等。作為醱酵茶，可例示稱為紅茶之大吉嶺茶(Darjeeling)、烏瓦茶(Uva)、祁門紅茶(Keemun)等。此處，本說明書中之所謂「不醱酵茶、半醱酵茶、醱酵茶、綠茶、烏龍茶、紅茶」，不僅指供給飲用之茶萃取物，亦指用以獲得該茶萃取物之茶原料。
本說明書中所謂「黃酮醇配糖基」，係包含楊梅黃酮、檞皮酮及山茶酚之混合物之總稱。另外，本說明書中所謂「黃酮醇配糖體」，係指具有楊梅黃酮、檞皮酮及山茶酚作為配糖基骨架之配糖體，亦包含該等配糖體進一步與糖結合所成者。本說明書中之「黃酮醇配糖基總量」，係將包含該等黃酮醇配糖基及黃酮醇配糖體之多酚組合物水 解，並根據水解後之溶液中所含之楊梅黃酮、檞皮酮及山茶酚之合計量而定義。
以下，就本發明之多酚組合物進行說明。
本發明之多酚組合物之特徵在於：其係以特定比率含有下述(A)與(B)。
此處，(A)係藉由高效液相層析法所測定的水解後之該多酚組合物之固形物成分中所含的黃酮醇配糖基總量(以下稱為「(A)黃酮醇配糖基總量」)，(A)黃酮醇配糖基總量以0.7~50質量%為宜，就風味或於水中之溶解性之觀點而言，較佳為1.5~45質量%，更佳為5~40質量%，更佳為7~35質量%，特佳為9~25質量%。
又，(B)係藉由酒石酸鐵法所測定的該多酚組合物之固形物成分中所含之多酚總量(以下稱為「(B)多酚總量」)，(B)多酚之總量以5~95質量%為宜，就風味或於水中之溶解性之觀點而言，較佳為10~90質量%，更佳為15~80質量%，更佳為20~70質量%，特佳為25~40質量%。於此，本說明書中所謂「固形物成分」，係指將多酚組合物於105℃之電恆溫乾燥機中乾燥3小時而將水等揮發性物質除去後之殘餘部分。
其次，上述(A)與(B)之質量比[(B)/(A)]為0.01~18，就降低刺激味之觀點而言，較佳為0.01~16，更佳為0.1~11，更佳為0.3~9，更佳為0.5~7，特佳為1~5。
再者，「(A)黃酮醇配糖基總量」及「(B)多酚總量」係藉由後述之實施例中所記載之方法定量所得者。
又，本發明之多酚組合物可含有芸香苷，就降低刺激味之觀點而言，本發明之多酚組合物較佳為芸香苷含量高於先前之自茶萃取所得之萃取物(例如綠茶萃取物、紅茶萃取物以及烏龍茶萃取物)的芸香苷含量。具體而言，(C)該多酚組合物之固形物成分中之芸香苷含量以0.4~30質量%為宜，就進一步降低刺激味之觀點而言，較佳為0.8~25質量%，更佳為2~20質量%，更佳為4~15質量%，特佳為6~15質量%。此處，所謂「芸香苷」為黃酮醇配糖體之一種，係檞皮酮之3位之氧原子上鍵結β-芸香糖(6-O-α-L-鼠李糖基-D-β-葡萄糖)所成者。
上述質量比[(B)/(A)]以及(C)芸香苷含量在上述範圍內之多酚組合物例如可藉由下述步驟(1)~(3)將茶萃取物加以分離而獲得：(1)使茶萃取物吸附於合成吸附劑中之步驟；(2)使第1有機溶劑水溶液接觸上述合成吸附劑，從而使第1成分溶出之步驟；及(3)使疏水性高於上述第1有機溶劑水溶液之第2有機溶劑水溶液接觸溶出上述第1成分後之合成吸附劑，從而使包含多酚組合物之第2成分溶出之步驟。
作為步驟(1)中所使用之茶萃取物，例如可例示利用熱水或水溶性有機溶劑自茶萃取所得之萃取物。茶萃取物可直接使用，亦可加以乾燥或濃縮後使用。作為茶萃取物之形態，例如可例示：液體、漿體、半固體、固體。作為萃取方法，可採用：攪拌萃取、管柱萃取、滴液萃取等公知 之方法。
又，作為茶萃取物，亦可代替使用上述茶萃取物，而使用將茶萃取物之濃縮物溶解或者稀釋於水或有機溶劑中所得者，亦可併用茶萃取物與其濃縮物。於此，所謂茶萃取物之濃縮物，係指自茶萃取物除去一部分溶劑所得者，例如可利用日本專利特開昭59-219384號公報、日本專利特開平4-20589號公報、日本專利特開平5-260907號公報、日本專利特開平5-306279號公報等中所記載之方法來製備。又，作為茶萃取物之濃縮物，亦可使用市售品，例如可列舉：三井農林(股)之「Polyphenon」、伊藤園(股)之「Teafuran」、太陽化學(股)之「Sunphenon」等綠茶萃取物之濃縮物。
作為茶萃取物，可較好地使用綠茶萃取物。再者，可視需要對茶萃取物進行鞣酸酶處理(例如，日本專利特開2004-321105號公報)，亦可於該鞣酸酶處理後，進而使用選自活性碳、酸性白土以及活性白土中之至少1種進行處理(例如，日本專利特開2007-282568號公報)。
作為合成吸附劑，較佳為包含離子交換能力未達1meq/g，且具有不溶性之三維交聯結構之聚合物者。又，合成吸附劑之粒子形狀可為球形、不均勻形狀等之任一種形狀，但為了滿足良好之分離條件，合成吸附劑之粒子形狀以球形為宜。
此種合成吸附劑可藉由公知之方法來製造，亦可使用市售品。作為市售之合成吸附劑，例如可例示：Amberlite XAD4、Amberlite XAD16HP、Amberlite XAD1180、Amberlite XAD2000(供應商：美國Rohm & Haas公司)，Diaion HP20、Diaion HP21(三菱化學公司製造)，Sepabeads SP-850、Sepabeads SP-825、Sepabeads SP-700、Sepabeads SP-70(三菱化學公司製造)，VPOC1062(Bayer公司製造)等苯乙烯系；Sepabeads SP205、Sepabeads SP206、Sepabeads SP207(三菱化學公司製造)等於芳香環中導入溴原子而使吸附能力提高之取代苯乙烯系；Diaion HP1MG、Diaion HP2MG(三菱化學公司製造)等甲基丙烯酸系；Amberlite XAD761(Rohm & Haas公司製造)等酚系；Amberlite XAD7HP(Rohm & Haas公司製造)等丙烯酸系；TOYOPEARL、HW-40C(東曹(Tosoh)公司製造)等聚乙烯系；SEPHADEX、LH-20(Pharmacia公司製造)等聚葡萄糖系。
其中，作為合成吸附劑，其母體較佳為苯乙烯系、甲基丙烯酸系、丙烯酸系、聚乙烯系，就分離能力之觀點而言，特佳為苯乙烯系。
作為合成吸附劑之使用量，就分離能力之觀點而言，較佳為選擇茶萃取物中之非聚合物兒茶素類之總質量、與合成吸附劑之總容量之比達到20~60g/L、更佳為25~55g/L、特佳為30~50g/L之量。
步驟(1)中可採用以下方法：於茶萃取物中添加合成吸附劑並攪拌而使之吸附後，進行過濾操作來回收合成吸附劑之批次方法；或者使用填充有合成吸附劑之管柱連續地 進行吸附處理之管柱方法；就生產性之觀點而言，較佳為利用管柱之連續處理方法。
供給至步驟(1)時，就吸附效率之觀點而言，宜將茶萃取物中之非聚合物兒茶素類濃度調整為較佳之0.5~10質量%，特佳為0.8~5質量%。再者，為將茶萃取物中之非聚合物兒茶素類濃度調整至上述範圍內，可視需要對茶萃取物進行濃縮或稀釋等。
作為第1及第2有機溶劑水溶液，可例示：乙醇、甲醇等醇類，丙酮等酮類，乙酸乙酯等酯類等有機溶劑之水溶液。作為第2有機溶劑水溶液，只要為疏水性高於第1有機溶劑水溶液者則並無特別限定，例如可使用有機溶劑濃度高於第1有機溶劑水溶液的水溶液，或者使用含有碳數多於第1有機溶劑之有機溶劑的水溶液。第1及第2有機溶劑水溶液中之有機溶劑濃度可適宜地設定，例如，第1有機溶劑水溶液中之有機溶劑濃度較佳為10~45質量%，特佳為20~40質量%，另外，第2有機溶劑水溶液中之有機溶劑濃度較佳為50~98質量%，特佳為50~95質量%。
作為上述步驟(1)及(2)中之具體操作方法，例如可採用日本專利特開2006-160656號公報、日本專利特開2008-079609號公報等中所記載之方法。
有機溶劑水溶液之通液條件可適宜地設定，第2有機溶劑水溶液之通液條件可與第1有機溶劑水溶液相同亦可不同。作為第1及第2有機溶劑水溶液之通液條件，例如通液速度(SV)較佳為0.5~10[h-1 ]，特佳為0.5~5[h-1 ]，且通液 倍數(BV)相對於合成吸附劑之容量較佳為0.5~10[v/v]，特佳為1~4[v/v]。
於步驟(3)後，藉由濃縮第2成分可獲得疏水性之多酚組合物，濃縮可藉由蒸餾、減壓蒸餾、精餾、薄膜蒸餾、膜濃縮等而進行。又，於濃縮前或濃縮後，可視需要藉由過濾及/或離心分離處理將雜質分離。作為多酚組合物之形態，可例示固體、半固體、液體、漿體等各種形態。
又，本發明中，可於上述多酚成分中調配選自茶萃取物、其濃縮物及其等之純化物、以及其他多酚組合物中之至少1種，以將其調整為所期望之質量比[(B)/(A)]及(C)芸香苷含量。於此，所謂茶萃取物之純化物，係指使用溶劑或管柱自茶萃取物或其濃縮物中除去沈澱物等所得者。作為茶萃取物、其濃縮物及其等之純化物之形態，可例示固體、水溶液、漿體狀等各種形態。再者，於多酚成分中調配之「茶萃取物、其濃縮物及其等之純化物」，可為由與多酚成分同種及不同種之任一種茶所獲得者。另一方面，作為「其他多酚組合物」，例如可例示：於不同之分離條件下獲得之多酚成分、或自不同種之含多酚之植物獲得之多酚成分。
本發明之多酚組合物儘管含有高濃度之多酚，但多酚特有之刺激味降低。又，本發明之多酚組合物具有非聚合物兒茶素類或黃酮醇類單獨存在時品嘗不到之適口性較高的苦味，且即便利用甜味劑或調味劑將苦味緩和，後味亦不會產生不調和感。因此，可將本發明之多酚組合物調配於 飲食品中使用。
本發明之飲食品中的多酚組合物之含量可根據食品之種類或形態而適宜地選擇，通常換算成固形物成分為0.1~10質量%。
作為本發明之飲料，例如可列舉茶飲料、非茶系飲料。作為茶飲料，例如可列舉：綠茶飲料、烏龍茶飲料、紅茶飲料。又，作為非茶系飲料，可例示：清涼飲料(例如，果汁、蔬菜汁、運動飲料、等滲飲料、碳酸飲料)、咖啡飲料、營養飲料劑、美容飲料劑等非酒精飲料；啤酒(beer)、葡萄酒(wine)、清酒、青梅酒、發泡酒、威士忌(whisky)、白蘭地(brandy)、燒酒、蘭姆酒(rum)、琴酒(gin)、香甜酒(liqueur)類等酒精飲料。
本發明之飲料可將多酚組合物直接製成容器裝飲料，或者稀釋後製成容器裝飲料，為改善多酚組合物之水溶解性，可調配有機酸及/或其鹽。
作為有機酸，只要分子中具有1個以上之羧基，則可為芳香族，亦可為脂肪族，還可為內酯，較佳為羥基羧酸或其內酯。具體而言，可例示：抗壞血酸、異抗壞血酸、檸檬酸、葡萄糖酸、琥珀酸、酒石酸、乳酸、己二酸、反丁烯二酸、蘋果酸等，其中較佳者為抗壞血酸、檸檬酸、葡萄糖酸、酒石酸、乳酸、蘋果酸。再者，作為鹽，可列舉鹼金屬鹽、鹼土金屬鹽、胺基酸鹽，其中較佳者為鹼金屬鹽，特佳者為鈉鹽、鉀鹽。
有機酸及/或其鹽較佳為以本發明之飲料中之有機酸離 子濃度達到1~100mmol/L之方式而調配。就提高溶解性及改善外觀之觀點而言，有機酸離子濃度較佳為2~95mmol/L，更佳為5~90mmol/L，更佳為10~85mmol/L，更佳為15~80mmol/L，進而更佳為18~70mmol/L，特佳為20~60mmol/L。再者，關於有機酸離子濃度，例如於有機酸為n元之多元羧酸之情形時，有機酸離子濃度係指處於第1階段~第n階段解離狀態之羧基陰離子(COO-)之合計濃度。
本發明之飲料中可單獨或併用而調配製備飲食品時使用之通常之添加物，例如：抗氧化劑、苦澀味抑制劑、維生素、香料、各種酯類、無機酸類、無機酸鹽類、無機鹽類、色素類、乳化劑、防腐劑、調味劑、甜味劑、酸味劑、果汁萃取物類、蔬菜萃取物類、花蜜萃取物類、pH值調整劑、品質穩定劑等，除此以外可調配咖啡萃取物等植物萃取物。
本發明之飲料之pH值(25℃)以2~9為宜，就風味及外觀之觀點而言，較佳為2.5~8，更佳為3~7.0，特佳為3.5~6.5。
作為填充本發明之飲料之容器，與普通飲料同樣，可列舉：以聚對苯二甲酸乙二酯為主成分之成形容器(所謂之PET瓶)，金屬罐，與金屬箔或塑膠薄膜複合而成之紙質容器，瓶等普通之包裝容器。
又，容器裝飲料例如可將本發明之飲料填充於金屬罐等容器中，然後於可進行加熱殺菌之情形時，於應適用之法 規(在日本為食品衛生法)所規定之殺菌條件下製造。對於PET瓶、紙質容器等無法進行蒸餾殺菌之容器，可採用預先以與上述同等之殺菌條件、例如使用板式熱交換器等對本發明之飲料進行高溫短時間殺菌後，冷卻至一定之溫度為止，然後填充於容器中等方法。另外，亦可於無菌條件下向所填充之容器中調配填充其他成分。進而，亦可進行以下操作：於酸性條件下加熱殺菌後，於無菌條件下將pH值恢復為中性，或者於中性下加熱殺菌後，於無菌條件下將pH值恢復為酸性等。
作為本發明之食品之形態，只要為容易攝取之形態則無特別限定，例如可例示：糊狀、粉末、液體、凝膠狀、漿體狀，造粒物、顆粒、錠劑、膠囊劑等固形狀物。又，根據食品之形態，亦可藉由減壓濃縮或薄膜濃縮等將本發明之多酚組合物之溶劑除去，還可藉由噴霧乾燥或冷凍乾燥等將本發明之多酚組合物粉體化。
作為本發明之食品，例如可例示：點心類(例如麵包、蛋糕、曲奇、餅乾等烘烤點心，口香糖、巧克力、糖果)、甜品類(例如果凍、酸乳酪、霜淇淋)、利樂包食品、調味劑(例如醬料、濃湯、沙拉醬、蛋黃醬、奶油)。
本發明之食品中可調配製備食品時所使用之通常之食品添加物，例如：礦物質、維生素、胺基酸、甜味劑、酸味劑、香料，果實或蔬菜之乾燥品，果汁、蔬菜汁或其等之粉末乾燥品等。進而，亦可調配賦形劑、潤滑劑、被覆劑等成形助劑。
[實施例] 1.非聚合物兒茶素類及咖啡因之測定
使用過濾器(0.45μm)過濾試樣溶液，然後使用高效液相層析儀(型號：SCL-10AVP，島津製作所製造)安裝十八烷基導入液相層析儀用填充式管柱(L-管柱TM ODS，4.6mmΦ×250mm；財團法人化學物質評價研究機構製造)，於管柱溫度35℃下藉由梯度法進行分析。分析係於如下之條件下進行：流動相A液為含有0.1mol/L乙酸之蒸餾水溶液，B液為含有0.1mol/L乙酸之乙腈溶液，試樣注入量為20μL，UV(ultraviolet，紫外線)檢測器波長為280nm。再者，梯度之條件如下所示。
2.芸香苷之測定
使用過濾器(0.45μm)過濾試樣溶液，然後使用高效液相層析儀(型號：Waters 2695，WATERS製造)安裝管柱(Shimpach VP ODS，150×4.6mmI.D.)，於管柱溫度40℃下藉由梯度法進行分析。分析係於如下條件下進行：流動相A液為含有0.05質量%磷酸之蒸餾水溶液，B液為甲醇溶液，流速為1mL/min，試樣注入量為10μL，UV檢測器波 長為368nm。再者，梯度之條件如下所示。
3.黃酮醇配糖基(楊梅黃酮、檞皮酮及山茶酚)之測定 (1)試樣之水解
於調整為固形物成分濃度為0.2質量%之試樣溶液5mL中，添加巰基乙醇200μL、2N鹽酸500μL。然後，使用乾浴器(dry block bath)(As One股份有限公司製造)，於設定溫度120℃下加熱40分鐘將試樣中之黃酮醇配糖體水解而生成黃酮醇配糖基(楊梅黃酮、檞皮酮、山茶酚)，之後冷卻。
(2)分析
利用高效液相層析法對水解後之試樣溶液中所存在之楊梅黃酮、檞皮酮及山茶酚進行定量。再者，定量係藉由梯度法而進行，其分析方法與上述「芸香苷之測定」相同。
(3)黃酮醇配糖基之總量
求出藉由上述分析而定量之楊梅黃酮量、檞皮酮量以及山茶酚量之總和。
4.多酚之測定 (1)試劑之製備 1)酒石酸鐵試劑之製備
於500mL之量瓶中採集七水硫酸亞鐵0.50g及(+)四水合酒石酸鈉鉀2.50g，使用離子交換水定容。
2)磷酸緩衝液之製備
於2000mL之量瓶中採集二水合磷酸氫二鈉20.00g及磷酸二氫鉀2.90g，使用離子交換水定容。將該溶液之pH值調整為7.5~7.6。於pH值超過7.6之情形時，添加二水合磷酸二氫鉀0.9g/100mL水溶液，於pH值未達7.5之情形時，添加磷酸二氫鉀1.2g/100mL水溶液來調整pH值。
(2)裝置及器具
1)分光光度計(U-2010；日立製作所製造)
2)石英製槽(10mm×10mm)
3)25mL、100mL、200mL、500mL、2000mL之量瓶
4)1mL、5mL、10mL、20mL、30mL之全吸管
5)1mL、3mL、5mL之微吸管
(3)分析條件
1)測定波長：540nm
2)溫度：20℃±2℃
(4)操作：
1)製成校準曲線
i)於使用前將沒食子酸乙酯約0.5g乾燥2~3小時。
ii)於200mL之量瓶中採集經乾燥之沒食子酸乙酯0.2g，使用離子交換水定容。(100mg/100mL之標準溶液)
iii)於100mL之量瓶中，使用ii)之標準溶液來製備5 mg/100mL、10mg/100mL、20mg/100mL、30mg/100mL之各標準溶液。
iv)於25mL之量瓶中，採集iii)之標準溶液各5mL，添加酒石酸鐵試劑5mL並利用磷酸緩衝液定容。又，製備未添加標準溶液者作為空白樣品。
v)使用分光光度計測定吸光度，製成校準曲線。
再者，校準曲線係以下述作為標準，當有偏差時進行再調整。
R2：0.9995~1.0000
校準曲線斜度：34.5±0.4
截距：0.3以下
2)試樣測定
i)利用離子交換水將分光光度計置零。
ii)於25mL之量瓶中採集特定量之試樣，加入酒石酸鐵試劑5mL並利用磷酸緩衝液定容後，測定吸光度。再者，吸光度之測定係於發色後40分鐘以內進行。
實施例1 多酚組合物A
用熱水對綠茶葉(大葉種)進行萃取後，進行噴霧乾燥而獲得綠茶萃取物A。『綠茶萃取物A』之非聚合物兒茶素類濃度為30.8質量%，咖啡因濃度為5.5質量%。
繼而，使用離子交換水稀釋『綠茶萃取物A』，使其非聚合物兒茶素類濃度成為1質量%。接著，使『綠茶萃取物A』之稀釋液800g吸附於填充於管柱(內徑50mm×高度180 mm，容積為353.3mL)中之合成吸附劑(SP-70，三菱化學(股)製造)200mL中。然後，使離子交換水300mL、30質量%乙醇水溶液400mL依序於合成吸附劑中通液，從而使非聚合物兒茶素類溶出。繼而，使50質量%乙醇水溶液400mL於合成吸附劑中通液而使多酚組合物溶出。再者，該分離操作均係以使通液速度SV=0.8~1.2[h-1 ]，通液倍數(BV)=2.0[v/v]之方式進行流量調整而實施。繼而，藉由減壓濃縮將所獲得之溶出液中之乙醇蒸餾去除並除去不溶物，然後藉由冷凍乾燥除去水分，獲得『多酚組合物A』。
『多酚組合物A』中，(A)黃酮醇配糖基總量為19.2質量%，(B)多酚總量為33.1質量%，質量比[(B)/(A)]為1.72，(C)芸香苷含量為10.6質量%。再者，『多酚組合物A』使用於後述之本發明品1~5中。
實施例2 多酚組合物B
用熱水對綠茶葉(大葉種)進行萃取後，進行噴霧乾燥而獲得綠茶萃取物B。『綠茶萃取物B』之非聚合物兒茶素類濃度為30.3質量%，咖啡因濃度為5.5質量%。
繼而，使用離子交換水稀釋『綠茶萃取物B』，使其非聚合物兒茶素類濃度成為1質量%。接著，使『綠茶萃取物B』之稀釋液8000g吸附於填充於管柱(內徑89.2mm×高度600mm，容積為3748mL)中之合成吸附劑(SP-70，三菱化學(股)製造)2000mL中。然後，使離子交換水3000mL、25質量%乙醇水溶液9000mL依序於合成吸附劑中通液， 從而使非聚合物兒茶素類溶出。繼而，使92.5質量%乙醇水溶液4000mL於合成吸附劑中通液而使多酚組合物溶出。再者，該分離操作均係以使流速SV=0.5~2.1[h-1 ]，通液倍數(BV)=2.0[v/v]之方式進行流量調整而實施。繼而，藉由減壓濃縮將所獲得之溶出液中之乙醇蒸餾去除後，藉由冷凍乾燥除去水分，獲得『多酚組合物B』。
『多酚組合物B』中，(A)黃酮醇配糖基總量為18.3質量%，(B)多酚總量為34.0質量%，質量比[(B)/(A)]為1.86，(C)芸香苷含量為9.3質量%。再者，『多酚組合物B』使用於後述之本發明品6中。
實施例3 多酚組合物C
使用離子交換水稀釋實施例2中所獲得之『綠茶萃取物B』，使其非聚合物兒茶素類濃度成為1質量%。繼而，使『綠茶萃取物B』之稀釋液2400g吸附於填充於管柱(內徑60.6mm×高度330mm，容積為951mL)中之合成吸附劑(SP-70，三菱化學(股)製造)600mL中。接著，使離子交換水900mL、25質量%乙醇2700mL依序於合成吸附劑中通液，從而使非聚合物兒茶素類溶出。然後，使92.5質量%乙醇水溶液1200mL於合成吸附劑中通液而使多酚組合物溶出。再者，該分離操作均係以使流速SV=0.7~1.8[h-1 ]，通液倍數(BV)=2.0[v/v]之方式進行流量調整而實施。繼而，藉由減壓濃縮將所獲得之溶出液中之乙醇蒸餾去除後，藉由冷凍乾燥除去水分，獲得『多酚組合物C』。
『多酚組合物C』中，(A)黃酮醇配糖基總量為23.3質量%，(B)多酚總量為34.1質量%，質量比[(B)/(A)]為1.46，(C)芸香苷含量為7.4質量%。再者，『多酚組合物C』使用於後述之本發明品7中。
實施例4 多酚組合物D
將實施例1中所獲得之多酚組合物A 0.08質量份、與市售之綠茶萃取物(EGCg(gallic acid ester，沒食子酸酯)製劑，DSM Nutritional Products公司製造，以下稱為『綠茶萃取物a』)0.12質量份混合，獲得『多酚組合物D』。再者，『綠茶萃取物a』中，(A)黃酮醇配糖基之總量為0.0質量%，(B)多酚之總量為110.5質量%※(※酒石酸鐵法之分析值)。
『多酚組合物D』中，(A)黃酮醇配糖基總量為7.7質量%，(B)多酚總量為79.5質量%，質量比[(B)/(A)]為10.32，(C)芸香苷含量為4.2質量%。再者，『多酚組合物D』使用於後述之本發明品8中。
實施例5 多酚組合物E
將市售之紅茶葉(Nuwara Eliya，Brooke Bond House公司製造)5g添加於沸水500g中，以150rpm攪拌萃取5分鐘。繼而，使用2號濾紙進行抽氣過濾並測定採液量後，進行冰浴冷卻(液溫25℃以下)。然後，藉由冷凍乾燥而除去水分，獲得紅茶萃取物。所獲得之紅茶萃取物於下文中稱為 『紅茶萃取物a』。
將紅茶萃取物a 0.42質量份、與實施例1中所獲得之多酚組合物A 0.025質量份混合而獲得『多酚組合物E』。
『多酚組合物E』中，(A)黃酮醇配糖基總量為1.9質量%，(B)多酚總量為17.7質量%，質量比[(B)/(A)]為9.32，(C)芸香苷含量為1.3質量%。再者，『多酚組合物E』使用於後述之本發明品9中。
實施例6 多酚組合物F
將市售之紅茶葉(AS CTC，Brooke Bond House公司製造)茶葉5g添加於沸水500g中，以150rpm攪拌萃取5分鐘。繼而，使用2號濾紙進行抽氣過濾並測定採液量後，進行冰浴冷卻(液溫25℃以下)。然後，藉由冷凍乾燥而除去水分，獲得紅茶萃取物。將所獲得之紅茶萃取物於下文中稱為『紅茶萃取物b』。
將紅茶萃取物b 0.39質量份、與實施例1中所獲得之多酚組合物A 0.025質量份混合而獲得『多酚組合物F』。
『多酚組合物F』中，(A)黃酮醇配糖基總量為1.4質量%，(B)多酚總量為13.3質量%，質量比[(B)/(A)]為9.5，(C)芸香苷含量為0.9質量%。再者，『多酚組合物F』使用於後述之本發明品10中。
實施例7 多酚組合物G
將市售之烏龍茶葉(Oolong Tea，國太樓公司製造)5g添 加於沸水500g中，以150rpm攪拌萃取5分鐘，使用2號濾紙進行抽氣過濾並測定採液量後，進行冰浴冷卻(液溫25℃以下)。然後，藉由冷凍乾燥而除去水分，獲得烏龍茶萃取物。將所獲得之烏龍茶萃取物於下文中稱為『烏龍茶萃取物a』。
將烏龍茶萃取物a 0.39質量份、與實施例1中所獲得之多酚組合物A 0.025質量份混合而獲得『多酚組合物G』。
『多酚組合物G』中，(A)黃酮醇配糖基總量為1.6質量%，(B)多酚總量為14.7質量%，質量比[(B)/(A)]為9.19，(C)芸香苷含量為0.8質量%。再者，『多酚組合物G』使用於後述之本發明品11中。
實施例8 多酚組合物H
將實施例1中所獲得之多酚組合物A 0.05質量份、與綠茶萃取物a 0.138質量份混合而獲得『多酚組合物H』。
『多酚組合物H』中，(A)黃酮醇配糖基總量為5.1質量%，(B)多酚總量為89.9質量%，質量比[(B)/(A)]為17.63，(C)芸香苷含量為2.8質量%。再者，『多酚組合物H』使用於後述之本發明品12中。
實施例9 多酚組合物I
將實施例1中所獲得之多酚組合物A 0.01質量份、與紅茶萃取物a 0.43質量份混合而獲得『多酚組合物I』。
『多酚組合物I』中，(A)黃酮醇配糖基總量為1.3質量 %，(B)多酚總量為17.2質量%，質量比[(B)/(A)]為13.23，(C)芸香苷含量為0.9質量%。再者，『多酚組合物I』使用於後述之本發明品13中。
實施例10 多酚組合物J
將實施例1中所獲得之多酚組合物A 0.01質量份、與紅茶萃取物b 0.44質量份混合而獲得『多酚組合物J』。
『多酚組合物J』中，(A)黃酮醇量配糖基總量為0.7質量%，(B)多酚總量為12.5質量%，質量比[(B)/(A)]為17.85，(C)芸香苷含量為0.5質量%。再者，『多酚組合物J』使用於後述之本發明品14中。
實施例11 多酚組合物K
將實施例1中所獲得之多酚組合物A 0.01質量份、與烏龍茶萃取物a 0.41質量份混合而獲得『多酚組合物K』。
『多酚組合物K』中，(A)黃酮醇配糖基總量為0.9質量%，(B)多酚總量為14.0質量%，質量比[(B)/(A)]為15.56，(C)芸香苷含量為0.4質量%。再者，『多酚組合物K』使用於後述之本發明品15中。
比較例1
使用市售之綠茶萃取物(Polyphenon 70A，三井農林公司製造，以下稱為『綠茶萃取物b』)。
綠茶萃取物b中，(A)黃酮醇配糖基總量為1.1質量%，(B)多酚總量為99.0質量%，質量比[(B)/(A)]為90.00，(C) 芸香苷含量為0.1質量%。再者，『綠茶萃取物b』使用於後述之比較品1中。
比較例2
使用紅茶萃取物a。
紅茶萃取物a中，(A)黃酮醇配糖基總量為0.9質量%，(B)多酚總量為16.8質量%，質量比[(B)/(A)]為18.67，(C)芸香苷含量為0.7質量%。再者，『紅茶萃取物a』使用於後述之比較品2中。
比較例3
使用紅茶萃取物b。
紅茶萃取物b中，(A)黃酮醇配糖基總量為0.3質量%，(B)多酚總量為12.0質量%，質量比[(B)/(A)]為40.00，(C)芸香苷含量為0.2質量%。再者，『紅茶萃取物b』使用於後述之比較品3中。
比較例4
使用烏龍茶萃取物a。
烏龍茶萃取物a中，(A)黃酮醇配糖基總量為0.5質量%，(B)多酚總量為13.5質量%，質量比[(B)/(A)]為27.00，(C)芸香苷含量為0.1質量%。再者，『烏龍茶萃取物a』使用於後述之比較品4中。
比較例5
藉由管柱法，使用0.15質量%之碳酸氫鈉水溶液(95℃)對600g之烏龍茶葉進行萃取，獲得萃取物約6000g。將液溫保持為60~65℃，使之於400g之粒狀活性碳(Kuraray公 司製造，GW-H32/60)中通液，選擇性地除去非聚合兒茶素類及咖啡因。於減壓下濃縮該通過液體，製備Brix(布裏糖度)為10以上之茶萃取物約900g，獲得『烏龍茶萃取物b』。
『烏龍茶萃取物b』中，(A)黃酮醇配糖基總量為0.84質量%，(B)多酚總量為19.4質量%，質量比[(B)/(A)]為23.1，(C)芸香苷含量為0.18質量%。再者，『烏龍茶萃取物b』使用於後述之比較品5中。
比較例6 綠茶萃取物c之製造
將綠茶萃取液之濃縮物(Polyphenon HG，三井農林(股)製造)200g於25℃下分散於250r/min攪拌條件下的40質量%乙醇水溶液800g中，投入酸性白土(Mizuka Ace #600，水澤化學公司製造)80g後，繼續攪拌約10分鐘。繼而，使用2號濾紙進行過濾後，於濾液中添加活性碳8g，然後再次使用2號濾紙進行過濾。繼而，使用0.2μm之薄膜過濾器進行再過濾。接著，於40℃、減壓下自濾液蒸餾去除乙醇，使用離子交換水調整非聚合物兒茶素類濃度，從而獲得「綠茶萃取物c」。
「綠茶萃取物c」中，(A)黃酮醇配糖基總量為1.5質量%，(B)多酚總量為47.7質量%，質量比[(B)/(A)]為32.49，(C)芸香苷含量為0.96質量%。再者，『綠茶萃取物c』使用於後述之比較品6中。
風味之評價
將表1及2所示之各成分稱量各調配量並裝入於樣品瓶中，於其中投入離子交換水使各成分分散。然後，於60℃之水浴進行溶解後，於室溫(25℃)下靜置2小時，藉此製備飲料。將各飲料之溫度調整達到室溫時，以下述基準進行官能試驗。其結果示於表1及2中。
(評價基準)
5：非常好(具有適口性較高之苦味，刺激味少)
4：良好(感覺到刺激味，但並不令人在意)
3：較佳(刺激味稍令人在意)
2：欠佳(刺激味較強)
1：不佳(刺激味強)
由表1及2可確認，(A)黃酮醇配糖基總量與(B)多酚總量之質量比[(B)/(A)]為0.01~18之多酚組合物與先前之茶萃取物相比，多酚特有之刺激味顯著降低，風味良好、口感較佳。
烘焙點心之評價
使用實施例1之多酚組合物A來製作烘焙點心。
稱量材料α(脫脂乳粉25質量份、無鹽奶油25質量份、白砂糖29質量份、人造奶油45質量份)，裝入於混合機[Hobart公司製造，N50 MIXER(5夸脫混合機)]中，使用攪拌器低速攪拌30秒後，進而以中速進行攪拌，製備比重為0.9之麵團。
繼而，於材料α中，一面以低速攪拌30秒，一面打一個 雞蛋分成三份加入。第一次添加雞蛋後，以低速攪拌30秒。於第二次添加時，將溶解有食鹽之雞蛋水與多酚組合物A同時直接投入於混合機中，以低速攪拌30秒。上述結束後，刮落混合機之壁上所附著之油，然後加入最後之雞蛋，低速攪拌30秒後，進而以中速攪拌2分鐘，直至變成均勻之乳狀為止。
繼而，加入低筋麵粉，以低速攪拌45秒。稱量攪拌所獲得之原料20g，填入於長72mm×寬22mm×高14mm的長方形之烘焙模中，擺放於鋪墊有剝離紙之薄板上，用牙籤在填塞於模具中之麵團表面開6個孔。於每一塊薄板上，按4個/4個/4個擺放3列，共計擺放12個烘焙模。接著，於上述薄板下方另外重疊2塊薄板，於表面覆蓋鋁箔。烘焙係於烘箱中、160℃下進行。覆蓋鋁箔後烘焙20分鐘，然後取下鋁箔後烘焙18分鐘，藉此製備烘焙點心。烘焙後，置於網上於室溫下冷卻20分鐘後，裝入附有夾鏈之聚乙烯袋中，於20℃之恆溫室中放置一夜。食感評價之結果，可不意識到食感上之問題地食用。
試驗例1 食用後之血糖值上升抑制效果
將雄性小鼠C57BL/6J(7週齡)預飼養6日，於試驗開始之前斷食16小時，然後分成4組(實施例1組、比較例6組、比較例5組、對照組(水)，各組n=5)，採集血液。
對於實施例1組，將實施例1中所獲得之製劑溶解於20質量%乙醇水溶液中，將所得溶液以0.57mg/g體重而經口投 予給實施例1組。又，對於比較例6組，將比較例6中所獲得之製劑溶解於20質量%乙醇水溶液中，將所得溶液以0.39mg/g體重而經口投予給比較例6組。另外，對於比較例5組，將比較例5中所獲得之製劑溶解於20質量%乙醇水溶液中，將所得溶液以1.00mg/g體重經口投予給比較例5組。另一方面，對於對照組，經口投予20質量%乙醇。繼而，對剛投予各試樣後之小鼠，以達到40mg/g體重之方式經口投予表3所示之組成之脂肪乳劑。
投予乳劑後分別經過10分鐘、30分鐘、60分鐘、120分鐘後，自各小鼠採集血液，藉由Glucose CII-Test Wako(和光純藥公司製造)分析血糖值。將食用後血糖值之推移示於圖1。a、b、c表示圖形間存在有意義的差。
由圖1可確認以下事項。即可確認，藉由投予脂肪乳劑，對照組之食用後之血糖值上升，相對於此，比較例5組與對照組為同等之值，實施例1組、比較例6組之食用後之血糖值上升均得到抑制，且實施例1組與比較例6組相比，食用後之血糖值上升得到顯著抑制。
試驗例2 α-澱粉酶活性抑制效果
α-澱粉酶活性之測定係藉由下述方法而進行。
酶：50U/mL之來自豬胰臟之澱粉酶(溶解於緩衝液中)
基質：20mg之天青澱粉(Starch Azure)(於80μL之緩衝液中)
緩衝液：40mM磷酸緩衝液(含有20mM之氯化鈉)(pH值為7.0)
抑制劑：實施例1中所獲得之製劑(被試驗試樣)或者比較例5及6中所獲得之製劑(對照試樣)(溶解於20% EtOH中)
順序：
(1)將20mg/80μL之基質與10μL抑制劑等量混合，於37℃下預培養5分鐘
(2)加入酶溶液10μL，於37℃下反應15分鐘
(3)添加100mM磷酸緩衝液(pH值為4.3)900μL
(4)將反應液離心分離，於波長595nm下測定上清液
測定結果示於圖2。由圖2可確認，與比較例6組及比較例5組相比，實施例1組可較強地抑制α-澱粉酶活性。
試驗例3 脂肪酶活性抑制效果
脂肪酶活性之測定係藉由下述方法而進行。
酶：50U/mL之來自豬胰臟之脂肪酶(溶解於緩衝液中之Sigma II型)
基質：0.1M 4-甲基傘形酮基油酸酯(4-Methylumbelliferyl oleate)(溶解於DMSO(dimethyl sulfoxide，二價亞碸)中)
緩衝液：包含150mM氯化鈉、1.36mM氯化鈣之13mM Tris-HCl(Tris(hydroxymethyl)aminomethane hydrochloride，三羥甲基胺基甲烷鹽酸鹽)(pH值為8.0)
抑制劑：實施例1中所獲得之製劑或比較例5及6中所獲得之製劑(溶解於20% EtOH中)
順序：
(1)於25℃下，向微量滴定盤中添加緩衝液60μL、基質20μL並混合
(2)添加抑制劑10μL
(3)添加酶10μL
(4)於25℃下培養30分鐘
(5)添加反應終止液(檸檬酸緩衝液，pH值為4.2)100μL
(6)於激發波長355nm下測定波長460nm之螢光
螢光測定之結果示於圖3。由圖3可確認，與比較例6組及比較例5組相比，實施例1組可較強地抑制脂肪酶活性。
根據該等試驗例可確認，本發明之多酚組合物具有優異的食用後之血糖值上升抑制作用、α-澱粉酶活性抑制作用以及脂肪酶活性抑制作用，因此其可有效地用作用於抑制來自進餐之脂肪吸收、抑制血液中之中性脂肪上升、防止肥胖等的醫藥之有效成分。
圖1係顯示試驗例1中之食用後之血糖值之推移圖； 圖2係顯示試驗例2中之α-澱粉酶活性抑制作用之圖；及圖3係顯示試驗例3中之脂肪酶活性抑制作用之圖。

Claims (7)

  1. 一種多酚組合物，其係含有來自茶(Camellia sinensis)之黃酮醇配糖基(aglycone)及黃酮醇配糖體者，且下述(A)與(B)之質量比[(B)/(A)]為1~11：(A)藉由高效液相層析法所測定的水解後之該多酚組合物之固形物成分中所含的黃酮醇配糖基總量；(B)藉由酒石酸鐵法所測定的該多酚組合物之固形物成分中所含之多酚總量。
  2. 如請求項1之多酚組合物，其中上述(A)黃酮醇配糖基總量為0.7~50質量%。
  3. 如請求項1之多酚組合物，其中上述(B)多酚總量為5~95質量%。
  4. 如請求項1之多酚組合物，其中該多酚組合物含有芸香苷，且(C)該多酚組合物之固形物成分中所含之芸香苷的含量為0.4~30質量%。
  5. 如請求項1至4中任一項之多酚組合物，其中上述茶為綠茶。
  6. 一種飲食品，其係含有請求項1至5中任一項之多酚組合物。
  7. 一種製造方法，其係製造請求項1至5中任一項之多酚組合物者，其包含以下步驟：使茶萃取物吸附於合成吸附劑中；使第1有機溶劑水溶液接觸上述合成吸附劑，從而使第1成分溶出；及 使疏水性高於上述第1有機溶劑水溶液之第2有機溶劑水溶液接觸溶出上述第1成分後之合成吸附劑，從而使包含多酚組合物之第2成分溶出。
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