[go: up one dir, main page]
More Web Proxy on the site http://driver.im/

JP2021176865A - 増強された活性を有する抗体及びその改変方法 - Google Patents

増強された活性を有する抗体及びその改変方法 Download PDF

Info

Publication number
JP2021176865A
JP2021176865A JP2021114362A JP2021114362A JP2021176865A JP 2021176865 A JP2021176865 A JP 2021176865A JP 2021114362 A JP2021114362 A JP 2021114362A JP 2021114362 A JP2021114362 A JP 2021114362A JP 2021176865 A JP2021176865 A JP 2021176865A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
antibody
amino acid
modification
blood coagulation
seq
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP2021114362A
Other languages
English (en)
Inventor
智之 井川
Tomoyuki Igawa
佑理 寺西
Yuri Teranishi
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Chugai Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Chugai Pharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Chugai Pharmaceutical Co Ltd filed Critical Chugai Pharmaceutical Co Ltd
Publication of JP2021176865A publication Critical patent/JP2021176865A/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/36—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against blood coagulation factors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/526—CH3 domain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/53—Hinge
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/75—Agonist effect on antigen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

【課題】増強された活性を有する抗体、具体的には血液凝固第ＶＩＩＩ因子様活性を有する二重特異性抗体、および該抗体を有効成分として含有する医薬組成物を提供する。
【解決手段】改変された血液凝固第ＩＸ因子および／または活性化血液凝固第ＩＸ因子、ならびに血液凝固第Ｘ因子に対する二重特異性抗体であって、当該抗体の定常領域に少なくとも１つのアミノ酸残基の改変を含み、ｅｍｉｃｉｚｕｍａｂに比べ高い血液凝固第ＶＩＩＩ因子様活性を有する抗体、該抗体を有効成分として含有する医薬組成物を提供する。
【選択図】図３

Description

本発明は、増強された活性を有する抗体、そのような抗体を有効成分として含有する医薬組成物、それらの製造方法及び抗体の活性を高める方法等に関する。より具体的にはACE910よりも高い血液凝固第VIII因子（FVIII）様活性を有する二重特異性抗体に関する。
抗体は血漿中での安定性が高く、副作用も少ないことから医薬品として注目されている。中でもIgG型の抗体医薬は多数上市されており、現在も数多くの抗体医薬が開発されている（非特許文献１、２、３）。
血友病Aは、先天性のFVIIIの機能低下または欠損による出血異常症である。血友病A患者の出血に対しては、FVIII製剤が通常投与される（on-demand投与）。また、近年は、出血イベントを防ぐために、予防的に、FVIII製剤が投与される（非特許文献１、２）（予防投与）。FVIII製剤の血中半減期は、約12〜16時間程度である。それ故、継続的な予防のためには、週に3回、FVIII製剤が、患者に投与される（非特許文献３、４）。また、on-demand投与においては、再出血を防ぐため、FVIII製剤を、必要に応じ、一定間隔で追加投与する。また、FVIII製剤の投与は静脈内に実施される。従って、FVIII製剤と比べて投与の負担が少ない薬剤が、強く求められていた。
時折、FVIIIに対する抗体（インヒビター）が、血友病患者に発生する。インヒビターは、FVIII製剤の効果を打ち消す。インヒビターが発生した患者（インヒビター患者）の出血に対しては、バイパス製剤が投与される。それらの作用機序は、FVIIIの機能、すなわち活性化血液凝固第IX因子（FIXa）による血液凝固第X因子（FX）の活性化を触媒する機能に非依存である。そのため、バイパス製剤が、出血を十分止められないケースがある。従って、インヒビターの存在に左右されず、且つFVIIIの機能を代替する薬剤が、強く求められていた。
これらの課題を解決する手段として、FVIIIの機能を代替する二重特異性抗体及びその使用が報告されている（特許文献１、２、３および４）。FIXaとFXに対する二重特異性抗体は、両因子を近傍に位置付けることによって、FVIII様の活性を発揮し、FVIIIの機能を代替することが可能である（非特許文献５）。該抗体のFVIII様活性はFIXaとFXに対する親和性を最適化することにより向上できることが報告されている（非特許文献６）。また、該抗体のFVIII様活性はIgGのアイソタイプ、ジスルフィド結合パターン、ヒンジ領域のアミノ酸配列、Fc領域の糖鎖の有無によって影響を受けることが知られている（非特許文献７）。該抗体の一つであり、高いFVIII様活性を有するACE910はサル血友病モデルで止血効果を発揮することが報告されている（非特許文献８、９）。しかしながら、これまでにACE910よりも高いFVIII様活性を有する二重特異性抗体は報告されていない。
WO 2005/035754 WO 2005/035756 WO 2006/109592 WO 2012/067176
Blood 58, 1-13 (1981) Nature 312, 330-337(1984) Nature 312, 337-342(1984) Biochim.Biophys.Acta 871, 268-278(1986) Nat Med. 2012 Oct;18(10):1570-4. PLoS One. 2013;8(2):e57479. MAbs. 2015;7(1):120-8. J Thromb Haemost. 2014 Feb;12(2):206-213. Blood. 2014 Nov 13;124(20):3165-71.
本発明は上記のような状況に鑑みてなされたものであり、増強された活性を有する抗体、そのような抗体を有効成分として含有する医薬組成物、それらの製造方法及び抗体の活性を高める方法等を提供することを目的とする。より具体的にはACE910よりも高いFVIII様活性を有する二重特異性抗体を作製するための定常領域部位の変異、および、同変異を有する抗FIXa/FX二重特異性抗体、当該抗体を有効成分として含む医薬組成物、または当該医薬組成物による血友病Aの治療方法を提供することを目的とする。
本発明者らは上記課題を解決すべく、定常領域の様々な部位を改変したACE910変異体を作製したところ、ACE910よりも高いFVIII様活性を有する二重特異性抗体を見出すことに成功した。また、FVIII様活性を高める変異の同定、その変異を用いたFVIII様活性を高める方法を見出すことにも成功した。本発明はこのような知見に基づくものであり、以下〔１〕から〔１５〕に関する。
〔１〕改変された血液凝固第IX因子および／または活性化血液凝固第IX因子、ならびに血液凝固第X因子に対する二重特異性抗体であって、当該抗体の定常領域に少なくとも1つのアミノ酸残基の改変を含み、当該改変前の抗体である配列番号：１に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合し、配列番号：２に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合している二重特異性抗体に比べ高い血液凝固第VIII因子様活性を有する、前記抗体。
〔２〕前記改変はCH3領域及び/又はヒンジ領域における改変である、〔１〕に記載の抗体。
〔３〕CH3領域における改変がEUナンバリング434位における改変である、〔２〕に記載の抗体。
〔４〕EUナンバリング434位における改変はTyr（Y）への改変である、〔３〕に記載の抗体。
〔５〕ヒンジ領域における改変はEUナンバリング216位〜230位をAAACとする改変である、〔２〕に記載の抗体。
〔６〕〔１〕〜〔５〕のいずれかに記載の抗体、および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
〔７〕出血、出血を伴う疾患、もしくは出血に起因する疾患の予防および/または治療に用いられる医薬組成物であって、該疾患が、血液凝固第VIII因子および/または活性化血液凝固第VIII因子の活性の低下ないし欠損によって発症および/または進展する疾患である、〔６〕に記載の組成物。
〔８〕血液凝固第VIII因子および/または活性化血液凝固第VIII因子の活性の低下ないし欠損によって発症および/または進展する疾患が、血友病A、後天性血友病、フォンビルブランド病又は血液凝固第VIII因子および/もしくは活性化血液凝固第VIII因子に対するインヒビターが出現している疾患である、〔７〕に記載の組成物。
〔９〕少なくとも〔１〕〜〔５〕のいずれかに記載の二重特異性抗体を含む、出血、出血を伴う疾患もしくは出血に起因する疾患を予防および/または治療する方法に用いるためのキット。
〔１０〕血液凝固第IX因子および／または活性化血液凝固第IX因子、ならびに血液凝固第X因子に対する二重特異性抗体の血液凝固第VIII因子様活性を増強する方法であって、配列番号：１に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合し、配列番号：２に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合している二重特異性抗体の定常領域の少なくとも1つのアミノ酸残基を改変する、前記方法。
〔１１〕前記改変はCH3領域及び/又はヒンジ領域における少なくとも1つのアミノ酸残基の改変である、〔１０〕に記載の方法。
〔１２〕CH3領域における改変がEUナンバリングによる434位における改変である、〔１１〕に記載の方法。
〔１３〕434位における改変はTyr（Y）への改変である、〔１２〕に記載の方法。
〔１４〕ヒンジ領域における改変はEUナンバリング216位〜230位をAAACとする改変である、〔１１〕に記載の方法。
〔１５〕血液凝固第IX因子および／または活性化血液凝固第IX因子、ならびに血液凝固第X因子に対する二重特異性抗体の製造方法であって、(a) 定常領域の少なくとも1つのアミノ酸残基を改変することで改変前の配列番号：１に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合し、配列番号：２に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合している二重特異性抗体に比べ血液凝固第VIII因子様活性が増強されるように、該アミノ酸残基を含む抗体をコードする核酸を改変し、（ｂ）宿主細胞を該核酸が発現するように培養し、（ｃ）宿主細胞培養物から抗体を回収することを含む方法。
〔１６〕〔１〕〜〔５〕のいずれかに記載の抗体を投与する工程を含む、出血、出血を伴う疾患、または出血に起因する疾患を予防および/または治療する方法。
〔１７〕出血、出血を伴う疾患、または出血に起因する疾患の予防および/または治療において使用するための、〔１〕〜〔５〕のいずれかに記載の抗体。
〔１８〕出血、出血を伴う疾患、または出血に起因する疾患の予防剤および/または治療剤の製造における、〔１〕〜〔５〕のいずれかに記載の抗体の使用。
〔１９〕前記疾患が、血液凝固第VIII因子および/または活性化血液凝固第VIII因子の活性の低下ないし欠損によって発症および/または進展する疾患であり、好ましくは、血友病A、後天性血友病、フォンビルブランド病又は血液凝固第VIII因子および/もしくは活性化血液凝固第VIII因子に対するインヒビターが出現している疾患である、〔１６〕に記載の方法または〔１７〕に記載の使用のための抗体または〔１８〕に記載の使用。
本発明により、ACE910よりも高いFVIII様活性を有する二重特異性抗体が提供された。また、FVIII様活性を高める変異、その変異を用いたFVIII様活性を高める方法が提供された。
ACE910のFVIII様活性に及ぼすヒトIgG1とヒトIgG4アイソタイプの影響を示す図である。 ACE910のFVIII様活性に及ぼす各種二重特異性抗体フォーマットの影響を示す図である。 ACE910とT08のFVIII様活性を示した図である ACE910とT46PのFVIII様活性を示した図である
本発明の一つの実施態様は、改変された定常領域を含む抗体であって、当該定常領域に少なくとも1つのアミノ酸残基の変異を含み、当該改変前の抗体に比べ高い活性を有する抗体に関する。
本発明における「定常領域を含む抗体」とは定常領域を含む抗体であれば特に限定されるものではなく、IgG型であってもよく、二重特異性抗体であってもよい。
本発明の一つの実施態様としての定常領域とは、好ましくは抗体定常領域であり、より好ましくはIgG1、IgG2、IgG3、IgG4型の抗体定常領域であり、さらにより好ましくはヒトIgG1、IgG2、IgG3、IgG4型の抗体定常領域である。また本発明の別の一つの実施態様としての定常領域とは、好ましくは重鎖定常領域であり、より好ましくはIgG1、IgG2、IgG3、IgG4型の重鎖定常領域であり、さらにより好ましくはヒトIgG1、IgG2、IgG3、IgG4型の重鎖定常領域である。ヒトIgG1定常領域、ヒトIgG2定常領域、ヒトIgG3定常領域およびヒトIgG4定常領域のアミノ酸配列は公知である。ヒトIgG1、ヒトIgG2、ヒトIgG3、ヒトIgG4抗体の定常領域としては、遺伝子多型による複数のアロタイプ配列がSequences of proteins of immunological interest, NIH Publication No.91-3242に記載されているが、本発明においてはそのいずれであっても良い。なお本発明のアミノ酸が改変された定常領域は、本発明のアミノ酸変異を含むものである限り、他のアミノ酸変異や修飾を含んでもよい。
Fc領域は、抗体重鎖の定常領域に由来するアミノ酸配列を含む。Fc領域は、EUナンバリングで表されるおよそ216位のアミノ酸における、パパイン切断部位のヒンジ領域のN末端から、当該ヒンジ、CH2およびCH3ドメインを含める抗体の重鎖定常領域の部分である。
「ヒンジ領域」という用語は、野生型抗体重鎖においてCH1ドメインおよびCH2ドメインを連結する、例えばKabatのEU番号方式によれば216位あたりから230位あたりまでの、またはKabatのEU番号方式によれば226位あたりから230位あたりまでの、抗体重鎖ポリペプチド部分を意味する。他のIgGサブクラスのヒンジ領域は、IgG1サブクラス配列のヒンジ領域システイン残基と整列させることによって決定することができる。
本発明におけるポリペプチドとは、通常、１０アミノ酸程度以上の長さを有するペプチド、およびタンパク質を指す。また、通常、生物由来のポリペプチドであるが、特に限定されず、例えば、人工的に設計された配列からなるポリペプチドであってもよい。また、天然ポリペプチド、あるいは合成ポリペプチド、組換えポリペプチド等のいずれであってもよい。さらに、上記のポリペプチドの断片もまた、本発明のポリペプチドに含まれる。
EUナンバリングおよびKabatナンバリング
本発明で使用されている方法によると、抗体のCDRとFRに割り当てられるアミノ酸位置はKabatにしたがって規定される（Sequences of Proteins of Immunological Interest（National Institute of Health, Bethesda, Md., 1987年および1991年）。本明細書において、抗原結合分子が抗体または抗原結合断片である場合、可変領域のアミノ酸はKabatナンバリングにしたがい、定常領域のアミノ酸はKabatのアミノ酸位置に準じたEUナンバリングにしたがって表される。
本発明の一つの実施態様としての「アミノ酸残基の改変」は当該改変前の抗体に比べ活性を高める改変であれば特に限定されず、好ましくはCH3領域又はヒンジ領域における改変である。特に好ましくはEUナンバリング434位における改変であり、より好ましくはEUナンバリング434位をAsn(N)からTyr（Y）にする改変である。また特に好ましくはヒンジ領域における改変であり、より好ましくはEUナンバリング216位〜230位をAAACとする改変である。尚、EUナンバリング216位〜230位の一部を改変することにより、EUナンバリング216位〜230位をAAACとする改変も本発明に含まれる。また、上記変異を含む限り、その他の変異が含まれていてもよい。
本発明の一つの実施態様としての「改変」又は「改変する」とは、元のアミノ酸残基を他のアミノ酸残基へ置換すること、元のアミノ酸残基を欠失させること、新たなアミノ酸残基を付加すること、これらの組み合わせ等を指す。また、「変異」とは元のアミノ酸残基の他のアミノ酸残基への置換、元のアミノ酸残基の欠失、新たなアミノ酸残基の付加、これらの組み合わせ等を指す。尚、本明細書において、「改変」と「変異」は同義で用いられる。
本発明の一つの実施態様としての「活性」とは、例えば抗体の抗原への結合力、抗体が抗原に結合することにより生じる生物学的作用などをいうがこれに限定されない。抗体が血液凝固第IX因子（FIX）および／または活性化血液凝固第IX因子(FIXa)、ならびに血液凝固第X因子（FX）に対する二重特異性抗体である場合、例えば活性とは血液凝固第FVIII因子（FVIII）様活性である。
改変前の抗体に比べ高い活性を有するとは、例えば前記二重特異性抗体のFVIII様活性の場合、改変後の二重特異性抗体のFVIII様活性が改変前の二重特異性抗体のFVIII様活性に比べて高いことをいう。
FVIII
FVIIIは血液凝固に関与する一連の分子の１つであり、トロンビンやFXaにより活性化を受けると補因子活性を呈し、FIXaによるFX活性化反応を促進する。
FVIII様活性
本発明のFVIII様活性は、FVIII機能代替活性、FVIIIの機能を代替する活性、FXa産生促進活性、FXa産生を促進する活性と言い換えることもできる。本発明において「FVIII機能代替」、「FVIIIの機能を代替する」とは、FIXaによるFXの活性化を促進する（FIXaによるFXa産生を促進する）ことを意味する。また、より具体的には、本発明において「FVIIIの機能を代替する」とは、FIXおよび/またはFIXaならびにFXを認識し、FIXaによるFXの活性化を促進する（FIXaによるFXa産生を促進する）ことを意味する。FXa産生促進活性は、例えば、FIXa、FX、合成基質S-2222（FXaの合成基質）、リン脂質から成る測定系で評価することができる。このような測定系は、血友病A症例における疾患の重症度および臨床症状と相関性を示す(Rosen S, Andersson M, Blomba¨ck M et al. Clinical applications of a chromogenic substrate method for determination of FVIII activity. Thromb Haemost 1985; 54: 811-23)。
本発明の一つの実施態様において、抗体は特に限定されるものではないが、好ましくはFVIIIの機能を代替する活性を有するFIXおよび/またはFIXa、ならびにFXに対する二重特異性抗体を例示することができる。このような抗体は、例えばWO2005/035756、WO2006/109592、WO2012/067176などに記載の方法に従って取得することができる。本発明の抗体にはこれらの文献に記載の抗体が含まれる。
好ましい二重特異性抗体として、特許文献（WO 2012/067176）に記載の二重特異性抗体であるACE910 (emicizumab)（Q499-z121/J327-z119/L404-k）（配列番号：１に記載のアミノ酸配列からなるH鎖（Q鎖）と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合し、配列番号：２に記載のアミノ酸配列からなるH鎖（J鎖）と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合している二重特異性抗体）を挙げることができる。当該抗体のL鎖は、いわゆる共通L鎖である。尚、本明細書において、ACE910はACE910-Aとも記載される。
本発明の一つの実施態様は、改変されたFIXおよび／またはFIXa、ならびにFXに対する二重特異性抗体であって、当該抗体の定常領域に少なくとも1つのアミノ酸残基の改変を含み、当該改変前の抗体である配列番号：１に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合し、配列番号：２に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合している二重特異性抗体に比べ高いFVIII様活性を有する抗体である。
本発明の特定の一つの実施態様は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合し、配列番号：２に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合している、FIXおよび／またはFIXa、ならびにFXに対する二重特異性抗体であって、EUナンバリング434位がTyr(Y)である抗体である。
また、別の本発明の特定の一つの実施態様は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合し、配列番号：２に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合している、FIXおよび／またはFIXa、ならびにFXに対する二重特異性抗体であって、EUナンバリング216位〜230位がAAACである抗体である。
「抗体」という用語は、最も広い意味で使用され、所望の活性を示す限り、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、二量体、多量体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、抗体誘導体及び抗体修飾物であってもよい（Miller K et al. J Immunol. 2003, 170(9), 4854-61）。抗体は、マウス抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体であってもよく、または他の種由来であっても、人工的に合成したものであってもよい。本明細書中に開示される抗体は、免疫グロブリン分子の任意のタイプ（例えば、IgG、IgE、IgM、IgDおよびIgA）、クラス（例えば、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1およびIgA2）またはサブクラスであり得る。免疫グロブリンは、任意の種（例えば、ヒト、マウスまたはウサギ）由来であり得る。尚、「抗体」、「免疫グロブリン」及び「イムノグロブリン」なる用語は互換性をもって広義な意味で使われる。
「抗体誘導体」とは抗体の一部、好ましくは抗体の可変領域、または少なくとも抗体の抗原結合領域を含む。抗体誘導体には、例えばFab、Fab'、F(ab')2、Fv断片、線状抗体、一本鎖抗体（scFv）、sc(Fv)2、Fab3、ドメイン抗体 （dAb）（国際公開第2004/058821号、国際公開第2003/002609号）、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、ミニボディ及び抗体誘導体から形成される多重特異性抗体が含まれるが、それらに限定されるわけではない。ここで、「Fab」は一本の軽鎖、ならびに一本の重鎖のCH1領域および可変領域から構成される。また、「Fv」は最小の抗体誘導体であり、完全な抗原認識領域と抗原結合領域を含む。また抗体誘導体は例えばIgG抗体のFcとの融合体であってもよい。例えば、米国特許第5641870号明細書、実施例2；Zapata G et al. Protein Eng.1995, 8(10), 1057-1062 ; Olafsen T et al. Protein Eng. Design & Sel. 2004, 17(4):315-323 ; Holliger P et al. Nat. Biotechnol. 2005, 23(9);1126-36；Fischer N et al. Pathobiology. 2007, 74(1):3-14 ; Shen J et al. J Immunol Methods. 2007, 318, 65-74 ; Wu et al. Nat Biotechnol. 2007, 25(11), 1290-7を参照できる。
抗体修飾物としては、例えば、ポリエチレングリコール(PEG)等の各種分子と結合した抗体を挙げることができる。本発明の抗体には、これらの抗体修飾物も包含される。本発明の抗体修飾物においては、結合される物質は限定されない。このような抗体修飾物を得るには、得られた抗体に化学的な修飾を施すことによって得ることができる。これらの方法はこの分野において既に確立されている。
「二重特異性」抗体は、異なるエピトープを認識する可変領域を同一の抗体分子内に有する抗体をいう。二重特異性抗体は2つ以上の異なる抗原を認識する抗体であってもよいし、同一抗原上の異なる2つ以上のエピトープを認識する抗体であってもよい。二重特異性抗体には、wholeの抗体だけでなく抗体誘導体が含まれていてもよい。本発明の抗体には、二重特異性抗体も含まれる。なお、本明細書において、抗FIXa/FX二重特異性抗体は、FIXa及びFXに結合する二重特異性抗体と同義で用いられる。
遺伝子組換え抗体の作成方法
抗体としては、遺伝子組換え技術を用いて産生した組換え型抗体を用いることができる。組換え型抗体は、それをコードするDNAをハイブリドーマ、または抗体を産生する感作リンパ球等の抗体産生細胞からクローニングし、ベクターに組み込んで、これを宿主（宿主細胞）に導入し産生させることにより得ることができる。
抗体は、ヒト抗体、マウス抗体、ラット抗体など、その由来は限定されない。またキメラ抗体やヒト化抗体などの遺伝子改変抗体でもよい。
ヒト抗体の取得方法は既に知られており、例えば、ヒト抗体遺伝子の全てのレパートリーを有するトランスジェニック動物を目的の抗原で免疫することで目的のヒト抗体を取得することができる（国際特許出願公開番号WO 93/12227, WO 92/03918，WO 94/02602, WO 94/25585，WO 96/34096, WO 96/33735参照）。
遺伝子改変抗体は、既知の方法を用いて製造することができる。具体的には、たとえばキメラ抗体は、免疫動物の抗体のH鎖、およびL鎖の可変領域と、ヒト抗体のH鎖およびL鎖の定常領域からなる抗体である。免疫動物由来の抗体の可変領域をコードするDNAを、ヒト抗体の定常領域をコードするDNAと連結し、これを発現ベクターに組み込んで宿主に導入し産生させることによって、キメラ抗体を得ることができる。
ヒト化抗体は、再構成(reshaped)ヒト抗体とも称される改変抗体である。ヒト化抗体は、免疫動物由来の抗体のCDRを、ヒト抗体の相補性決定領域へ移植することによって構築される。その一般的な遺伝子組換え手法も知られている（欧州特許出願公開番号EP 239400、国際特許出願公開番号WO 96/02576、Sato K et al, Cancer Research 1993, 53: 851-856、国際特許出願公開番号WO 99/51743参照）。
二重特異性抗体（ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ抗体）は、二種の異なる抗原に対して特異性を有する抗体である。
二重特異性抗体はIgGタイプのものに限られないが、例えばIgGタイプ二重特異性抗体はIgG抗体を産生するハイブリドーマ二種を融合することによって生じるhybrid hybridoma(quadroma)によって分泌させることが出来る（Milstein C et al. Nature 1983, 305: 537-540）。また目的の二種のIgGを構成するL鎖及びH鎖の遺伝子、合計4種の遺伝子を細胞に導入することによって共発現させることによって分泌させることが出来る。
この際H鎖のCH3領域に適当なアミノ酸置換を施すことによってH鎖についてヘテロな組合せのIgGを優先的に分泌させることも出来る（Ridgway JB et al. Protein Engineering 1996, 9: 617-621、Merchant AM et al. Nature Biotechnology 1998, 16: 677-681、WO2006/106905、Davis JH et al. Protein Eng Des Sel. 2010, 4: 195-202.）。
また、L鎖に関しては、H鎖可変領域に比べてL鎖可変領域の多様性が低いことから、両H鎖に結合能を与え得る共通のL鎖が得られることが期待され、本発明の抗体は、共通のL鎖を有する抗体であってもよい。この共通L鎖と両H鎖遺伝子を細胞に導入することによってIgGを発現させることで効率の良い二重特異性IgGの発現が可能となる。
抗体の製造方法
本発明の抗体は当業者に公知の方法により製造することができる。具体的には、目的とする抗体をコードするDNAを発現ベクターへ組み込む。その際、発現制御領域、例えば、エンハンサー、プロモーターの制御のもとで発現するよう発現ベクターに組み込む。次に、この発現ベクターにより宿主細胞を形質転換し、抗体を発現させる。その際には、適当な宿主と発現ベクターの組み合わせを使用することができる。
抗体を生産する目的においてベクターを使用する場合には、特に、発現ベクターが有用である。発現ベクターとしては、例えば、宿主をJM109、DH5α、HB101、XL1-Blueなどの大腸菌とした場合においては、大腸菌で効率よく発現できるようなプロモーター、例えば、lacZプロモーターなどを持っていることが不可欠である。
また、ベクターには、ポリペプチド分泌のためのシグナル配列が含まれていてもよい。
宿主細胞へのベクターの導入は、例えば塩化カルシウム法、エレクトロポレーション法を用いて行うことができる。
大腸菌発現ベクターの他、本発明の抗体を製造するためのベクターとしては、例えば、哺乳動物由来の発現ベクター（例えば、pcDNA3（Invitrogen社製）や、pEGF-BOS (Nucleic Acids. Res.1990, 18(17),p5322)、pEF、pCDM8）、昆虫細胞由来の発現ベクター（例えば「Bac-to-BAC baculovirus expression system」（GIBCO BRL社製）、pBacPAK8）が挙げられる。
CHO細胞、COS細胞、NIH3T3細胞等の動物細胞での発現を目的とした場合には、細胞内で発現させるために必要なプロモーター、例えばSV40プロモーター（Mulliganら, Nature (1979) 277, 108）などを持っていることが不可欠であり、形質転換細胞を選抜するための遺伝子を有すればさらに好ましい。形質転換細胞を選抜するための遺伝子としては、例えば、薬剤（ネオマイシン、G418など）により判別できるような薬剤耐性遺伝子がある。
さらに、遺伝子を安定的に発現させ、かつ、細胞内での遺伝子のコピー数の増幅を目的とする場合には、核酸合成経路を欠損したCHO細胞にそれを相補するDHFR遺伝子を有するベクター（例えば、pCHOIなど）を導入し、メトトレキセート（MTX）により増幅させる方法が挙げられ、また、遺伝子の一過性の発現を目的とする場合には、SV40 T抗原を発現する遺伝子を染色体上に持つCOS細胞を用いてSV40の複製起点を持つベクター（pcDなど）で形質転換する方法が挙げられる。
これにより得られた本発明の抗体は、宿主細胞内または細胞外（培地など）から単離し、実質的に純粋で均一な抗体として精製することができる。抗体の分離、精製は、通常の抗体の精製で使用されている分離、精製方法を使用すればよく、何ら限定されるものではない。例えば、クロマトグラフィーカラム、フィルター、限外濾過、塩析、溶媒沈殿、溶媒抽出、蒸留、免疫沈降、SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動、等電点電気泳動法、透析、再結晶等を適宜選択、組み合わせれば抗体を分離、精製することができる。
クロマトグラフィーとしては、例えばアフィニティークロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、疎水性クロマトグラフィー、ゲル濾過、逆相クロマトグラフィー、吸着クロマトグラフィー等が挙げられる（Strategies for Protein Purification and Characterization: A Laboratory Course Manual. Ed Daniel R. Marshak et al., Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1996）。これらのクロマトグラフィーは、液相クロマトグラフィー、例えばHPLC、FPLC等の液相クロマトグラフィーを用いて行うことができる。アフィニティークロマトグラフィーに用いるカラムとしては、Protein Aカラム、Protein Gカラムが挙げられる。例えば、Protein Aを用いたカラムとして、Hyper D, POROS, Sepharose FF（GE Amersham Biosciences）等が挙げられる。本発明は、これらの精製方法を用い、高度に精製された抗体も包含する。
得られた抗体は、均一にまで精製することができる。抗体の分離、精製は通常の蛋白質で使用されている分離、精製方法を使用すればよい。例えばアフィニティークロマトグラフィー等のクロマトグラフィーカラム、フィルター、限外濾過、塩析、透析、SDSポリアクリルアミドゲル電気泳動、等電点電気泳動等を適宜選択、組合せれば、抗体を分離、精製することができる(Antibodies : A Laboratory Manual. Ed Harlow and David Lane, Cold Spring Harbor Laboratory, 1988)が、これらに限定されるものではない。アフィニティークロマトグラフィーに用いるカラムとしては、Protein Aカラム、Protein Gカラムなどが挙げられる。
本発明では、本発明に記載の抗体および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。例えば、本発明の抗体がFVIII様活性を有するFIXおよび／またはFIXa、ならびにFXに対する二重特異性抗体である場合、例えば、出血、出血を伴う疾患、もしくは出血に起因する疾患の予防および／または治療のための医薬品（医薬組成物）もしくは薬剤となることが期待される。
本発明において、出血、出血を伴う疾患、もしくは出血に起因する疾患とは、好ましくはFVIIIおよび／またはFVIIIaの活性の低下ないし欠損によって発症および／または進展する疾患である。このような疾患としては、例えば上記の血友病A、FVIII/FVIIIaに対するインヒビターが出現している疾患、後天性血友病、フォンビルブランド病等を挙げることができるが、これら疾患に特に制限されない。
本発明の別の一つの実施態様は、少なくとも本発明の抗体もしくは組成物を含む、上記疾患の予防および/又は治療する方法に用いるためのキットである。該キットには、その他、注射筒、注射針、薬学的に許容される媒体、アルコール綿布、絆創膏、または使用方法を記載した指示書等をパッケージしておくこともできる。
また本発明の別の一つの実施態様は、本発明の抗体または組成物の、出血、出血を伴う疾患もしくは出血に起因する疾患の予防および/または治療剤の製造における使用に関する。
また本発明の別の一つの実施態様は、本発明の抗体または組成物を投与する工程を含む、出血、出血を伴う疾患もしくは出血に起因する疾患を予防および/または治療する方法に関する。
また本発明の別の一つの実施態様は、出血、出血を伴う疾患もしくは出血に起因する疾患の予防および/または治療において用いるための、本発明の抗体または組成物に関する。
治療または予防目的で使用される本発明の抗体を有効成分として含む医薬組成物は、必要に応じて、それらに対して不活性な適当な薬学的に許容される担体、媒体等と混和して製剤化することができる。例えば、滅菌水や生理食塩水、安定剤、賦形剤、酸化防止剤(アスコルビン酸等)、緩衝剤（リン酸、クエン酸、ヒスチジン、他の有機酸等）、防腐剤、界面活性剤（PEG、Tween等）、キレート剤（EDTA等）、結合剤等を挙げることができる。また、その他の低分子量のポリペプチド、血清アルブミン、ゼラチンや免疫グロブリン等の蛋白質、グリシン、グルタミン、アスパラギン、グルタミン酸、アスパラギン酸、メチオニン、アルギニン及びリシン等のアミノ酸、多糖及び単糖等の糖類や炭水化物、マンニトールやソルビトール等の糖アルコールを含んでいてもよい。注射用の水溶液とする場合には、例えば生理食塩水、ブドウ糖やその他の補助薬を含む等張液、例えば、D-ソルビトール、D-マンノース、D-マンニトール、塩化ナトリウムが挙げられ、適当な溶解補助剤、例えばアルコール（エタノール等）、ポリアルコール（プロピレングリコール、PEG等）、非イオン性界面活性剤（ポリソルベート80、ポリソルベート20、ポロキサマー188、HCO-50）等と併用してもよい。また、製剤中にヒアルロニダーゼ（hyaluronidase）を混合することによって、より大きな液量を皮下投与することも可能である（Expert Opin Drug Deliv. 2007 Jul;4(4):427-40.）。
また、必要に応じ本発明の抗体をマイクロカプセル（ヒドロキシメチルセルロース、ゼラチン、ポリ[メチルメタクリル酸]等のマイクロカプセル）に封入したり、コロイドドラッグデリバリーシステム（リポソーム、アルブミンミクロスフェア、マイクロエマルジョン、ナノ粒子及びナノカプセル等）とすることもできる（"Remington's Pharmaceutical Science 16th edition", Oslo Ed. (1980)等参照）。さらに、薬剤を徐放性の薬剤とする方法も公知であり、本発明の抗体に適用し得る（Langer et al., J.Biomed.Mater.Res. 15: 267-277 (1981); Langer, Chemtech. 12: 98-105 (1982);米国特許第3,773,919号;欧州特許出願公開(EP)第58,481号; Sidman et al., Biopolymers 22: 547-556 (1983);EP第133,988号）。
本発明の医薬組成物の投与量は、剤型の種類、投与方法、患者の年齢や体重、患者の症状、疾患の種類や進行の程度等を考慮して、最終的には医師の判断により適宜決定されるものであるが、例えば前記二重特異性抗体の場合、1投与当たり約0.001〜約1000mg/kgである。好ましくは、約0.01 mg/kg〜約100 mg/kgである。投与間隔は、例えば前記二重特異性抗体の場合、少なくとも1日以上である。好ましくは、1週間、2週間、4週間、1カ月、3カ月、6カ月である。これらの投与量は患者の体重や年齢、投与方法などにより変動するが、当業者であれば適当な投与量を適宜選択することが可能である。投与期間も、患者の治癒経過等に応じて適宜決定することが好ましい。
本発明の医薬組成物は、経口、非経口投与のいずれかによって患者に投与することができる。好ましくは非経口投与である。係る投与方法としては具体的には、注射投与、経鼻投与、経肺投与、経皮投与などが挙げられる。注射投与としては、例えば、静脈内注射、筋肉内注射、腹腔内注射、皮下注射などが挙げられる。
本発明の医薬組成物は顆粒剤、散剤、錠剤、カプセル剤、溶剤、乳剤、あるいは懸濁剤等の経口剤、注射剤等とすることが出来る。
また本発明は、本発明の抗体をコードする遺伝子あるいは核酸を提供する。また、本発明の抗体をコードする遺伝子あるいは核酸を遺伝子治療用ベクターに組込み、遺伝子治療を行うことも考えられる。
本発明の別の一つの実施態様は、定常領域を含む抗体の活性を増強する方法であって、定常領域の少なくとも1つのアミノ酸残基を改変する方法に関する。好ましくはCH3領域又はヒンジ領域の少なくとも1つのアミノ酸残基を改変する方法が好ましい。特に好ましくはEUナンバリング434位を改変する方法であり、より好ましくはEUナンバリング434位のAsn(N)をTyr（Y）に改変する方法である。また特に好ましくはヒンジ領域を改変する方法であり、より好ましくはEUナンバリング216位〜230位をAAAC（配列番号：２８）と改変する方法である。尚、EUナンバリング216位〜230位の一部を改変することで、EUナンバリング216位〜230位がAAACとなるように改変する方法も本発明に含まれる。また、上記改変を含む限り、その他の改変が含まれていてもよい。
本発明の別の一つの実施態様は、FIXおよび／またはFIXa、ならびにFXに対する二重特異性抗体のFVIII様活性を増強する方法であって、配列番号：１に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合し、配列番号：２に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合している二重特異性抗体の定常領域の少なくとも1つのアミノ酸残基を改変する方法である。
本発明の別の特定の一つの実施態様は、FIXおよび／またはFIXa、ならびにFXに対する二重特異性抗体のFVIII様活性を増強する方法であって、配列番号：１に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合し、配列番号：２に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合している二重特異性抗体のEUナンバリング434位のアミノ酸残基をTyr（Y）に改変する方法である。
本発明の別の特定の一つの実施態様は、FIXおよび／またはFIXa、ならびにFXに対する二重特異性抗体のFVIII様活性を増強する方法であって、配列番号：１に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合し、配列番号：２に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合している二重特異性抗体のEUナンバリングEUナンバリング216位〜230位のアミノ酸残基をAAACに改変する方法である。
本発明の別の一つの実施態様は、定常領域を含む抗体の製造方法であって、(a) 定常領域の少なくとも1つのアミノ酸残基を改変することで改変前の抗体に比べ活性が増強されるように、該アミノ酸残基を含む抗体をコードする核酸を改変し、（ｂ）宿主細胞を該核酸が発現するように培養し、（ｃ）宿主細胞培養物から抗体を回収することを含む方法である。
本明細書において用いる場合、「・・・を含む（comprising）」との表現により表される態様は、「本質的に・・・からなる（essentially consisting of）」との表現により表される態様、ならびに「・・・からなる（consisting of）」との表現により表される態様を包含する。
本明細書において明示的に引用される全ての特許および参考文献の内容は全て本明細書に参照として取り込まれる。
本発明は、以下の実施例によってさらに例示されるが、下記の実施例に限定されるものではない。
[実施例１]
抗FIXa/FX二重特異性抗体であるACE910はヒトＩｇＧ４アイソタイプを有する抗体である（J Thromb Haemost. 2014 Feb;12(2):206-213.）。ACE910（以下ACE910-Aとも記載する）は3種類の４本の鎖からなり、それぞれFIXaに対する重鎖をＱ鎖、FXに対する重鎖をＪ鎖、共通軽鎖をＬ鎖とする。ACE910-A（Q、J、L：配列番号１、２、３）（WO 2012/067176）をコントロール抗体として使用した。
Knobs into holes（Nat Biotechnol. 1998 Jul;16(7):677-81.）を用い、ヒトIgG1、2、4型のACE910を作製した。すなわち、ACE910-B-IgG1（Q、J、L：配列番号４、５、３）、ACE910-B-IgG2（Q、J、L：配列番号６、７、３）、および、ACE910-B-IgG4（Q、J、L：配列番号８、９、３）を作製し、ヒトＩｇＧのアイソタイプの及ぼすFVIII様活性への影響を評価した。
ACE910は共通Ｌ鎖（WO2006/109592を参照して作製）とＣＨ３／ＣＨ３界面制御（WO2006/106905を参照して作製）を用いた抗FIXa/FX二重特異性抗体であるが、二重特異性抗体を製造する方法は他にも報告されている（Drug Discov. Today. 2015 Jul;20(7):838-47.、WO2015/046467、WO2011/117329、WO2013/065708）。これらの方法を用いて、ACE910-Aの可変領域配列を有する二重特異性抗体を作製し、二重特異性抗体を製造する方法の及ぼすFVIII様活性への影響を評価した。具体的には、以下、ACE910-B-IgG4（Q、J、L：配列番号８、９、３）、ACE910-D１（重鎖Q、J：配列番号１２、１３）（軽鎖L1、L2：配列番号１４、１５）（WO2011/117329を参照して作製）、ACE910-D2（重鎖Q、J：配列番号１６、１７）（軽鎖L1、L2：配列番号１８、１９）（WO2011/117329を参照して作製）、ＡCE910-E（重鎖Q、J：配列番号２０、２１）（軽鎖L1、L2：配列番号２２、２３）（WO2013/065708を参照して作製）を作製し、FVIII様活性を評価した。
これらの遺伝子全合成等の当業者公知の方法により行い、各種ACE910 variantを作製した。抗体の発現はHEK293FS (Invitrogen)を用い、精製はrecombinant protein A (GE healthcare)を用いて行い、当業者公知の方法により二重特異性抗体を調製した。
精製された二重特異性抗体のFVIII様活性（FXa産生促進活性）は、以下の方法で測定した。反応はすべて室温で行われた。0.1%牛血清アルブミンを含むトリス緩衝生理食塩水（以下、TBSBと称す）で希釈した抗体溶液5μLを、150 ng/mLのHuman Factor IXa beta (Enzyme Research Laboratories) 5μLと混合した後、384穴plate中にて室温で30分インキュベーションした。この混合液中の酵素反応は、24.7μg/mLのHuman Factor X (Enzyme Research Laboratories) 5μLを添加して開始させ、4分後、0.5 M EDTA 5μLを添加して停止させた。発色反応は、発色基質溶液5μLを添加することによって、開始させた。30分間の発色反応後、405 nmの吸光度変化はSpectraMax 340PC384 (Molecular Devices) を用いて測定した。
ACE910-B-IgG1およびACE910-B-IgG4の活性を比較した結果を図１に示した。ヒトIgG1アイソタイプであっても高いFVIII様活性を有することが確認された。これまでの報告では、FVIII様活性を有する抗FIXa/FX二重特異性抗体はヒトIgG4アイソタイプでなければ高い活性を示さなかった（特許文献１，２，３，４および非特許文献７）。本試験の結果から、ヒトIgG1であっても高いFVIII様活性を有する抗FIXa/FX二重特異性抗体が見いだされた。
ACE910-B-IgG4およびACE910-D1、ACE910-D2、ACE910-Eの活性を比較した結果を図２に示した。これらのACE910 variantの活性はACE910-Aとほぼ同等であることが確認され、ACE910の可変領域のFVIII様活性は二重特異性抗体を製造する方法の影響を受けないことが見いだされた。
[実施例２]
ACE910-A（Q、J、L：配列番号１、２、３）と同一の可変領域配列を有するヒトIgG4二重特異性抗体であるACE910-B-IgG4（Q、J、L：配列番号８、９、３）あるいはACE910-C（Q、J、L：配列番号１０、１１、３）（WO2015/046467を参照して作製）に対して、PCRあるいは遺伝子全合成等の当業者公知の方法により、変異を導入し、各種ACE910 variantを作製した。抗体の発現および精製は実施例１の方法に従って実施した。導入した変異は以下の表1（ヒンジ領域以外への変異導入）および表２（ヒンジ領域への変異導入）にまとめた。
Figure 2021176865
Figure 2021176865
表1および表２に示した各種ACE910 variantのうち、親抗体であるACE910-Aと比較してFVIII様活性が上昇したのは、T08（Q、J、L：配列番号２４、２５、３）およびT46P（Q、J、L：配列番号２６、２７、３）であった。その他のACE910 variantはACE910と同等あるいは以下のFVIII様活性であった。ACE910、T08およびT46PのFVIII様活性を図３、図４に示す。

Claims (15)

  1. 改変された血液凝固第IX因子および／または活性化血液凝固第IX因子、ならびに血液凝固第X因子に対する二重特異性抗体であって、当該抗体の定常領域に少なくとも1つのアミノ酸残基の改変を含み、当該改変前の抗体である配列番号：１に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合し、配列番号：２に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合している二重特異性抗体に比べ高い血液凝固第VIII因子様活性を有する、前記抗体。
  2. 前記改変はCH3領域及び/又はヒンジ領域における改変である、請求項１に記載の抗体。
  3. CH3領域における改変がEUナンバリング434位における改変である、請求項２に記載の抗体。
  4. EUナンバリング434位における改変はTyr（Y）への改変である、請求項３に記載の抗体。
  5. ヒンジ領域における改変はEUナンバリング216位〜230位をAAACとする改変である、請求項２に記載の抗体。
  6. 請求項１〜５のいずれかに記載の抗体、および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
  7. 出血、出血を伴う疾患、もしくは出血に起因する疾患の予防および/または治療に用いられる医薬組成物であって、該疾患が、血液凝固第VIII因子および/または活性化血液凝固第VIII因子の活性の低下ないし欠損によって発症および/または進展する疾患である、請求項６に記載の組成物。
  8. 血液凝固第VIII因子および/または活性化血液凝固第VIII因子の活性の低下ないし欠損によって発症および/または進展する疾患が、血友病A、後天性血友病、フォンビルブランド病又は血液凝固第VIII因子および/もしくは活性化血液凝固第VIII因子に対するインヒビターが出現している疾患である、請求項7に記載の組成物。
  9. 少なくとも請求項１〜５のいずれかに記載の二重特異性抗体を含む、出血、出血を伴う疾患もしくは出血に起因する疾患を予防および/または治療する方法に用いるためのキット。
  10. 血液凝固第IX因子および／または活性化血液凝固第IX因子、ならびに血液凝固第X因子に対する二重特異性抗体の血液凝固第VIII因子様活性を増強する方法であって、配列番号：１に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合し、配列番号：２に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合している二重特異性抗体の定常領域の少なくとも1つのアミノ酸残基を改変する、前記方法。
  11. 前記改変はCH3領域及び/又はヒンジ領域における少なくとも1つのアミノ酸残基の改変である、請求項１０に記載の方法。
  12. CH3領域における改変がEUナンバリングによる434位における改変である、請求項１１に記載の方法。
  13. 434位における改変はTyr（Y）への改変である、請求項１２に記載の方法。
  14. ヒンジ領域における改変はEUナンバリング216位〜230位をAAACとする改変である、請求項１１に記載の方法。
  15. 血液凝固第IX因子および／または活性化血液凝固第IX因子、ならびに血液凝固第X因子に対する二重特異性抗体の製造方法であって、(a) 定常領域の少なくとも1つのアミノ酸残基を改変することで改変前の配列番号：１に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合し、配列番号：２に記載のアミノ酸配列からなるH鎖と配列番号：３に記載のアミノ酸配列からなるL鎖が会合している二重特異性抗体に比べ血液凝固第VIII因子様活性が増強されるように、該アミノ酸残基を含む抗体をコードする核酸を改変し、（ｂ）宿主細胞を該核酸が発現するように培養し、（ｃ）宿主細胞培養物から抗体を回収することを含む方法。
JP2021114362A 2015-12-25 2021-07-09 増強された活性を有する抗体及びその改変方法 Pending JP2021176865A (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2015253324 2015-12-25
JP2015253324 2015-12-25
JP2017558248A JP6954842B2 (ja) 2015-12-25 2016-12-22 増強された活性を有する抗体及びその改変方法

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2017558248A Division JP6954842B2 (ja) 2015-12-25 2016-12-22 増強された活性を有する抗体及びその改変方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JP2021176865A true JP2021176865A (ja) 2021-11-11

Family

ID=59089513

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2017558248A Active JP6954842B2 (ja) 2015-12-25 2016-12-22 増強された活性を有する抗体及びその改変方法
JP2021114362A Pending JP2021176865A (ja) 2015-12-25 2021-07-09 増強された活性を有する抗体及びその改変方法

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2017558248A Active JP6954842B2 (ja) 2015-12-25 2016-12-22 増強された活性を有する抗体及びその改変方法

Country Status (4)

Country Link
US (2) US20200270363A1 (ja)
EP (1) EP3395835B1 (ja)
JP (2) JP6954842B2 (ja)
WO (1) WO2017110980A1 (ja)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI609698B (zh) 2010-01-20 2018-01-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd 穩定化的含抗體溶液製劑
HUE038305T2 (hu) 2010-11-17 2018-10-29 Chugai Pharmaceutical Co Ltd A VIII vérkoagulációs faktor mûködésére alternatív funkciójú multispecifikus antigén-kötõ molekula
WO2017110980A1 (ja) 2015-12-25 2017-06-29 中外製薬株式会社 増強された活性を有する抗体及びその改変方法
GB201709970D0 (en) 2017-06-22 2017-08-09 Kymab Ltd Bispecific antigen-binding molecules
MA50667A (fr) 2017-09-29 2020-08-05 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Molécule multispécifique de liaison à l'antigène ayant une activité de substitution de la fonction de cofacteur du facteur viii de coagulation sanguine (fviii), et formulation pharmaceutique contenant ladite molécule en tant que principe actif
EP3705496A4 (en) * 2017-11-01 2021-12-08 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha ANTIBODY VARIANT AND ISOFORM WITH REDUCED BIOLOGICAL ACTIVITY
FR3082427B1 (fr) * 2018-06-14 2020-09-25 Lab Francais Du Fractionnement Combinaison de facteur vii et d'un anticorps bispecifique anti-facteurs ix et x
ES2901683T3 (es) 2018-12-21 2022-03-23 Kymab Ltd Anticuerpo biespecífico FIXAXFX con cadena ligera común

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012067176A1 (ja) * 2010-11-17 2012-05-24 中外製薬株式会社 血液凝固第viii因子の機能を代替する機能を有する多重特異性抗原結合分子

Family Cites Families (114)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
US4208479A (en) 1977-07-14 1980-06-17 Syva Company Label modified immunoassays
IE52535B1 (en) 1981-02-16 1987-12-09 Ici Plc Continuous release pharmaceutical compositions
US4474893A (en) 1981-07-01 1984-10-02 The University of Texas System Cancer Center Recombinant monoclonal antibodies
US4444878A (en) 1981-12-21 1984-04-24 Boston Biomedical Research Institute, Inc. Bispecific antibody determinants
HUT35524A (en) 1983-08-02 1985-07-29 Hoechst Ag Process for preparing pharmaceutical compositions containing regulatory /regulative/ peptides providing for the retarded release of the active substance
GB8607679D0 (en) 1986-03-27 1986-04-30 Winter G P Recombinant dna product
US6010902A (en) 1988-04-04 2000-01-04 Bristol-Meyers Squibb Company Antibody heteroconjugates and bispecific antibodies for use in regulation of lymphocyte activity
IL89491A0 (en) 1988-11-17 1989-09-10 Hybritech Inc Bifunctional chimeric antibodies
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
DE3920358A1 (de) 1989-06-22 1991-01-17 Behringwerke Ag Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung
ATE177321T1 (de) 1989-12-11 1999-03-15 Immunomedics Inc Verfahren zum aufspüren von diagnostischen oder therapeutischen mitteln durch antikörper
TW212184B (ja) 1990-04-02 1993-09-01 Takeda Pharm Industry Co Ltd
JPH05184383A (ja) 1990-06-19 1993-07-27 Dainabotsuto Kk 二重特異性抗体
JPH05199894A (ja) 1990-08-20 1993-08-10 Takeda Chem Ind Ltd 二重特異性抗体および抗体含有薬剤
EP0546073B1 (en) 1990-08-29 1997-09-10 GenPharm International, Inc. production and use of transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
JPH05304992A (ja) 1991-06-20 1993-11-19 Takeda Chem Ind Ltd ハイブリッド・モノクローナル抗体および抗体含有薬剤
JPH06104071A (ja) 1991-08-30 1994-04-15 Jasco Corp 発熱体セラミックス溶接加工方法
WO1993011161A1 (en) 1991-11-25 1993-06-10 Enzon, Inc. Multivalent antigen-binding proteins
JPH07503132A (ja) 1991-12-17 1995-04-06 ジェンファーム　インターナショナル，インコーポレイティド 異種抗体を産生することができるトランスジェニック非ヒト動物
US5667988A (en) 1992-01-27 1997-09-16 The Scripps Research Institute Methods for producing antibody libraries using universal or randomized immunoglobulin light chains
JPH05203652A (ja) 1992-01-28 1993-08-10 Fuji Photo Film Co Ltd 抗体酵素免疫分析法
JPH05213775A (ja) 1992-02-05 1993-08-24 Otsuka Pharmaceut Co Ltd Ｂｆａ抗体
US6749853B1 (en) 1992-03-05 2004-06-15 Board Of Regents, The University Of Texas System Combined methods and compositions for coagulation and tumor treatment
US6129914A (en) 1992-03-27 2000-10-10 Protein Design Labs, Inc. Bispecific antibody effective to treat B-cell lymphoma and cell line
US5744446A (en) 1992-04-07 1998-04-28 Emory University Hybrid human/animal factor VIII
AU675661B2 (en) 1992-07-24 1997-02-13 Abgenix, Inc. Generation of xenogeneic antibodies
US5837242A (en) 1992-12-04 1998-11-17 Medical Research Council Multivalent and multispecific binding proteins, their manufacture and use
AU6819494A (en) 1993-04-26 1994-11-21 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
CA2143126A1 (en) 1993-07-01 1995-01-12 Shamay Tang Process for the preparation of factor x depleted plasma
ES2153483T3 (es) 1994-07-11 2001-03-01 Univ Texas Metodos y composiciones para la coagulacion especifica en los vasos tumorales.
US5994524A (en) 1994-07-13 1999-11-30 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Polynucleotides which encode reshaped IL-8-specific antibodies and methods to produce the same
EP1241264A1 (en) 1994-12-02 2002-09-18 Chiron Corporation Monoclonal antibodies to colon cancer antigen
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
US5641870A (en) 1995-04-20 1997-06-24 Genentech, Inc. Low pH hydrophobic interaction chromatography for antibody purification
EP0822830B1 (en) 1995-04-27 2008-04-02 Amgen Fremont Inc. Human anti-IL-8 antibodies, derived from immunized xenomice
EP0823941A4 (en) 1995-04-28 2001-09-19 Abgenix Inc HUMAN ANTIBODIES DERIVED FROM IMMUNIZED XENO MOUSES
MA24512A1 (fr) 1996-01-17 1998-12-31 Univ Vermont And State Agrienl Procede pour la preparation d'agents anticoagulants utiles dans le traitement de la thrombose
JP3032287U (ja) 1996-06-10 1996-12-17 幸喜 高橋 人 形
JPH10165184A (ja) 1996-12-16 1998-06-23 Tosoh Corp 抗体、遺伝子及びキメラ抗体の製法
US20020062010A1 (en) 1997-05-02 2002-05-23 Genentech, Inc. Method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components
US20030207346A1 (en) 1997-05-02 2003-11-06 William R. Arathoon Method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components
AU751659B2 (en) 1997-05-02 2002-08-22 Genentech Inc. A method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components
DE19725586C2 (de) 1997-06-17 1999-06-24 Gsf Forschungszentrum Umwelt Verfahren zur Herstellung von Zellpräparaten zur Immunisierung mittels heterologer intakter bispezifischer und/oder trispezifischer Antikörper
US6207805B1 (en) 1997-07-18 2001-03-27 University Of Iowa Research Foundation Prostate cell surface antigen-specific antibodies
US6342220B1 (en) 1997-08-25 2002-01-29 Genentech, Inc. Agonist antibodies
KR20010042435A (ko) 1998-04-03 2001-05-25 나가야마 오사무 인간조직인자(티에프)에 대한 인간형화항체 및인간형화항체의 제조방법
WO2004009618A2 (en) 2002-07-18 2004-01-29 Crucell Holland B.V. Recombinant production of mixtures of antibodies
AT411997B (de) 1999-09-14 2004-08-26 Baxter Ag Faktor ix/faktor ixa aktivierende antikörper und antikörper-derivate
JP2004511430A (ja) 2000-05-24 2004-04-15 イムクローン　システムズ　インコーポレイティド 二重特異性免疫グロブリン様抗原結合蛋白および製造方法
AU2001271066A1 (en) 2000-07-17 2002-01-30 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method for screening ligand having biological activity
PT1324776E (pt) 2000-10-12 2009-12-23 Genentech Inc Formulações de proteína concentradas de viscosidade reduzida
AU1091802A (en) 2000-10-20 2002-04-29 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Degraded agonist antibody
DK1399484T3 (da) 2001-06-28 2010-11-08 Domantis Ltd Dobbelt-specifik ligand og anvendelse af denne
EP1443961B1 (en) 2001-10-25 2009-05-06 Genentech, Inc. Glycoprotein compositions
DE10156482A1 (de) 2001-11-12 2003-05-28 Gundram Jung Bispezifisches Antikörper-Molekül
US8030461B2 (en) 2002-04-15 2011-10-04 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Methods for constructing scDb libraries
JP4518941B2 (ja) 2002-04-26 2010-08-04 中外製薬株式会社 アゴニスト抗体のスクリーニング方法
AU2003303543A1 (en) 2002-12-26 2004-07-29 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Agonist antibody against heteroreceptor
AU2003290330A1 (en) 2002-12-27 2004-07-22 Domantis Limited Dual specific single domain antibodies specific for a ligand and for the receptor of the ligand
EP1605058B1 (en) 2003-01-21 2009-05-13 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method of screening light chain of antibody light chains
EP1598074B1 (en) 2003-02-28 2019-01-02 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Stabilized protein-containing formulations
GB2400851B (en) 2003-04-25 2004-12-15 Bioinvent Int Ab Identifying binding of a polypeptide to a polypeptide target
JP4794301B2 (ja) 2003-06-11 2011-10-19 中外製薬株式会社 抗体の製造方法
US7297336B2 (en) 2003-09-12 2007-11-20 Baxter International Inc. Factor IXa specific antibodies displaying factor VIIIa like activity
AU2003271174A1 (en) 2003-10-10 2005-04-27 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Double specific antibodies substituting for functional protein
JP5490734B2 (ja) * 2003-10-10 2014-05-14 中外製薬株式会社 機能蛋白質を代替する二種特異性抗体
US20080075712A1 (en) 2003-10-14 2008-03-27 Kunihiro Hattori Double Specific Antibodies Substituting For Functional Proteins
US20050266425A1 (en) 2003-12-31 2005-12-01 Vaccinex, Inc. Methods for producing and identifying multispecific antibodies
US20060067930A1 (en) * 2004-08-19 2006-03-30 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
US8802820B2 (en) * 2004-11-12 2014-08-12 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
EP3050963B1 (en) 2005-03-31 2019-09-18 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Process for production of polypeptide by regulation of assembly
DK2824183T3 (da) 2005-04-08 2020-09-28 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Fremgangsmåde til fremstilling af bispecifikke antistoffer
KR20080108147A (ko) 2006-03-31 2008-12-11 백스터 인터내셔널 인코포레이티드 페질화된 인자 ｖｉｉｉ
WO2007114325A1 (ja) 2006-03-31 2007-10-11 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha 二重特異性抗体を精製するための抗体改変方法
ES2568436T3 (es) * 2006-03-31 2016-04-29 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Procedimiento para controlar la farmacocinética en sangre de anticuerpos
EP2035456A1 (en) 2006-06-22 2009-03-18 Novo Nordisk A/S Production of bispecific antibodies
SI2202245T1 (sl) 2007-09-26 2016-10-28 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Postopek modificiranja izoelektrične točke protitelesa preko aminokislinske substitucije v CDR
PE20091174A1 (es) 2007-12-27 2009-08-03 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Formulacion liquida con contenido de alta concentracion de anticuerpo
SI2235064T1 (sl) 2008-01-07 2016-04-29 Amgen Inc. Metoda za izdelavo heterodimernih molekul - protitelesa fc z uporabo elektrostatičnih usmerjevalnih učinkov
US9067986B2 (en) 2009-04-27 2015-06-30 Oncomed Pharmaceuticals, Inc. Method for making heteromultimeric molecules
EP2522724B1 (en) 2009-12-25 2020-02-05 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Polypeptide modification method for purifying polypeptide multimers
TWI609698B (zh) 2010-01-20 2018-01-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd 穩定化的含抗體溶液製劑
TWI426920B (zh) 2010-03-26 2014-02-21 Hoffmann La Roche 雙專一性、雙價抗－ｖｅｇｆ／抗－ａｎｇ－２抗體
EA201791693A1 (ru) 2011-03-25 2018-05-31 Гленмарк Фармасьютикалс С.А. Гетеродимерные иммуноглобулины
GB201112429D0 (en) * 2011-07-19 2011-08-31 Glaxo Group Ltd Antigen-binding proteins with increased FcRn binding
KR102398736B1 (ko) 2011-10-31 2022-05-16 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 중쇄와 경쇄의 회합이 제어된 항원 결합 분자
AR088941A1 (es) 2011-11-23 2014-07-16 Bayer Ip Gmbh Anticuerpos anti-fgfr2 y sus usos
SI2794905T1 (sl) 2011-12-20 2020-08-31 Medimmune, Llc Modificirani polipeptidi za ogrodja bispecifičnega protitelesa
GB201203071D0 (en) 2012-02-22 2012-04-04 Ucb Pharma Sa Biological products
NZ626955A (en) 2012-03-08 2016-01-29 Hoffmann La Roche Abeta antibody formulation
UY35148A (es) 2012-11-21 2014-05-30 Amgen Inc Immunoglobulinas heterodiméricas
US10077298B2 (en) 2012-11-28 2018-09-18 Zymeworks Inc. Engineered immunoglobulin heavy chain-light chain pairs and uses thereof
JP6534615B2 (ja) 2013-09-27 2019-06-26 中外製薬株式会社 ポリペプチド異種多量体の製造方法
NZ711451A (en) * 2014-03-07 2016-05-27 Alexion Pharma Inc Anti-c5 antibodies having improved pharmacokinetics
UA117289C2 (uk) 2014-04-02 2018-07-10 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Мультиспецифічне антитіло
CN106413750B (zh) * 2014-05-16 2022-04-29 免疫医疗有限责任公司 具有增强的治疗和诊断特性的带有改变的新生儿Fc受体结合的分子
BR112016027888A2 (pt) 2014-05-28 2017-10-24 Zymeworks Inc construto de polipeptídeo de ligação ao antígeno isolado, polinucleotídeo isolado ou um conjunto de polinucleotídeos isolados, vetor ou conjunto de vetores, célula isolada, composição farmacêutica, uso do construto, método para tratar um sujeito com uma doença ou distúrbio, método para obter um construto, método para preparar um construto, meio de armazenamento legível por computador, método para produzir um construto de polipeptídeo de ligação com antígeno bi-específico e método para preparar um construto de polipeptídeo de ligação com antígeno isolado
TWI831106B (zh) 2014-06-20 2024-02-01 日商中外製藥股份有限公司 用於因第viii凝血因子及/或活化的第viii凝血因子的活性降低或欠缺而發病及/或進展的疾病之預防及/或治療之醫藥組成物
RU2016151645A (ru) 2014-07-01 2018-08-03 Пфайзер Инк. Биспецифические гетеродимерные диантитела и их применение
WO2016164708A1 (en) 2015-04-10 2016-10-13 Adimab, Llc Methods for purifying heterodimeric multispecific antibodies from parental homodimeric antibody species
EP3283099B1 (en) 2015-04-17 2022-03-02 F. Hoffmann-La Roche AG Combination therapy with coagulation factors and multispecific antibodies
JP2018123055A (ja) 2015-04-24 2018-08-09 公立大学法人奈良県立医科大学 血液凝固第ｖｉｉｉ因子（ｆｖｉｉｉ）の機能を代替する多重特異性抗原結合分子を含有する、血液凝固第ｘｉ因子（ｆｘｉ）異常症の予防および／または治療に用いられる医薬組成物
WO2017110980A1 (ja) 2015-12-25 2017-06-29 中外製薬株式会社 増強された活性を有する抗体及びその改変方法
TWI797073B (zh) 2016-01-25 2023-04-01 德商安美基研究（慕尼黑）公司 包含雙特異性抗體建構物之醫藥組合物
WO2017188356A1 (ja) 2016-04-28 2017-11-02 中外製薬株式会社 抗体含有製剤
CA3025162A1 (en) 2016-05-26 2017-11-30 Qilu Puget Sound Biotherapeutics Corporation Mixtures of antibodies
CA3031082C (en) 2016-07-19 2023-08-22 Ibentrus, Inc. Bispecific proteins and methods for preparing same
MX2018015721A (es) 2016-07-29 2019-05-27 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpos biespecificos que exhiben actividad de funcion de cofactor fviii alternativa mejorada.
RU2766233C2 (ru) 2016-09-06 2022-02-10 Чугаи Сейяку Кабусики Кайся Способы применения биспецифического антитела, которое распознает фактор свертывания ix и/или активированный фактор свертывания ix и фактор свертывания x и/или активированный фактор свертывания x
TW201836636A (zh) 2017-03-31 2018-10-16 公立大學法人奈良縣立醫科大學 含有替代凝血因子ｖｉｉｉ功能之多特異性抗原結合分子之用於預防和／或治療凝血因子ｉｘ異常症的醫藥組合物
MA50667A (fr) 2017-09-29 2020-08-05 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Molécule multispécifique de liaison à l'antigène ayant une activité de substitution de la fonction de cofacteur du facteur viii de coagulation sanguine (fviii), et formulation pharmaceutique contenant ladite molécule en tant que principe actif
EP3705496A4 (en) 2017-11-01 2021-12-08 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha ANTIBODY VARIANT AND ISOFORM WITH REDUCED BIOLOGICAL ACTIVITY
EP4130732A4 (en) 2020-04-02 2024-06-19 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha METHOD FOR ANALYZING IMPURITIES MOLECULES IN A COMPOSITION CONTAINING MULTI-SPECIFIC ANTIGEN BINDING MOLECULES

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012067176A1 (ja) * 2010-11-17 2012-05-24 中外製薬株式会社 血液凝固第viii因子の機能を代替する機能を有する多重特異性抗原結合分子

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
MABS, vol. vol. 7, issue. 1, JPN6017010455, 18 December 2014 (2014-12-18), pages 120 - 128, ISSN: 0005010807 *

Also Published As

Publication number Publication date
EP3395835B1 (en) 2021-02-03
WO2017110980A1 (ja) 2017-06-29
EP3395835A4 (en) 2019-09-11
EP3395835A1 (en) 2018-10-31
US12168697B2 (en) 2024-12-17
US20200270363A1 (en) 2020-08-27
JPWO2017110980A1 (ja) 2018-10-18
JP6954842B2 (ja) 2021-10-27
US20220119551A1 (en) 2022-04-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6954842B2 (ja) 増強された活性を有する抗体及びその改変方法
JP7465309B2 (ja) アフリベルセプト製剤及びその使用
KR102687774B1 (ko) 혈액 응고 제viii 인자의 기능을 대체하는 다중 특이성 항원 결합 분자를 함유하는, 혈액 응고 제ix 인자 이상증의 예방 및/또는 치료에 이용되는 의약 조성물
US20200392235A1 (en) Novel il-15 prodrugs and methods of use thereof
DK2705057T3 (en) THERAPEUTIC immunoglobulins FOR DOGS AND METHODS OF USE THEREOF
KR101962483B1 (ko) 혈액응고 제viii 인자의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자
WO2016171202A1 (ja) 血液凝固第ｖｉｉｉ因子（ｆｖｉｉｉ）の機能を代替する多重特異性抗原結合分子を含有する、血液凝固第ｘｉ因子（ｆｘｉ）異常症の予防および／または治療に用いられる医薬組成物
JP7189142B2 (ja) 抗ヒトアネキシンａ１抗体
ES2758480T3 (es) Proteína de unión a RGMa y uso de la misma
WO2019088143A1 (ja) 生物活性が低下した抗体バリアントおよびアイソフォーム
RU2702553C2 (ru) Новое антитело против tie-2 человека
KR20230029622A (ko) April 및 baff 억제 면역조절 단백질 및 사용 방법
KR20190133198A (ko) 면역원성의 감소를 위한 방법 및 조성물
CN111356471A (zh) 包含赖氨酸盐作为张力调节剂的阿柏西普制剂及其用途
CN112930358A (zh) 抗TNFα/抗IL-17A天然抗体结构样异源二聚体形式双特异抗体及其制备
RU2829156C2 (ru) Композиция, содержащая анти-pd-1/her2 биспецифическое антитело, способ ее получения и ее использование
JP2024537163A (ja) 肥満細胞関連障害の治療
JP2024519212A (ja) Ｂ７ｈ４およびｃｄ３に結合する二重特異性抗体を含む薬学的組成物
JP2022543422A (ja) 抗ｐｄ－１／ｈｅｒ２二重特異性抗体を含む製剤及びその調製方法と使用
EA043164B1 (ru) Способы и композиции для снижения иммуногенности

Legal Events

Date Code Title Description
A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20210805

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20210805

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20220921

A02 Decision of refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02

Effective date: 20230313