CN102459345A - 双特异性抗原结合蛋白 - Google Patents
双特异性抗原结合蛋白 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102459345A CN102459345A CN2010800265303A CN201080026530A CN102459345A CN 102459345 A CN102459345 A CN 102459345A CN 2010800265303 A CN2010800265303 A CN 2010800265303A CN 201080026530 A CN201080026530 A CN 201080026530A CN 102459345 A CN102459345 A CN 102459345A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- antibody
- replace
- binding proteins
- dual specific
- fab fragments
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 102000025171 antigen binding proteins Human genes 0.000 title claims abstract description 80
- 108091000831 antigen binding proteins Proteins 0.000 title claims abstract description 80
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 46
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 3
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 claims description 103
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 claims description 89
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 claims description 89
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 35
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 35
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 34
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 30
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 claims description 21
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 19
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 19
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 17
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 14
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 14
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 14
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 13
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 7
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 82
- 102000009524 Vascular Endothelial Growth Factor A Human genes 0.000 description 50
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 41
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 32
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 30
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 28
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 22
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 19
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 18
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 18
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 18
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 18
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 18
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 18
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 18
- 230000008859 change Effects 0.000 description 17
- UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L di(octadecanoyloxy)lead Chemical compound [Pb+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 17
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 16
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 15
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 15
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 13
- 230000006870 function Effects 0.000 description 13
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 13
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 13
- 239000000047 product Substances 0.000 description 13
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 12
- 101100481408 Danio rerio tie2 gene Proteins 0.000 description 11
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 11
- 101100481410 Mus musculus Tek gene Proteins 0.000 description 11
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 11
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 11
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 11
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 10
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 10
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 10
- 101710153593 Albumin A Proteins 0.000 description 9
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 9
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 9
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 9
- 239000012146 running buffer Substances 0.000 description 9
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 8
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 8
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 8
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 8
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 8
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 8
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 8
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 8
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 8
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 8
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 8
- 101100230376 Acetivibrio thermocellus (strain ATCC 27405 / DSM 1237 / JCM 9322 / NBRC 103400 / NCIMB 10682 / NRRL B-4536 / VPI 7372) celI gene Proteins 0.000 description 7
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 7
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 7
- 238000013016 damping Methods 0.000 description 7
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 7
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 7
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 7
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 7
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 6
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 6
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 6
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 6
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 6
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 6
- 230000010474 transient expression Effects 0.000 description 6
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 5
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 5
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 5
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 5
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 5
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 5
- 230000036541 health Effects 0.000 description 5
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 5
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 5
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 5
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 4
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 4
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 238000011481 absorbance measurement Methods 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 4
- -1 azepine aromatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 4
- 238000005336 cracking Methods 0.000 description 4
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 4
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 4
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 4
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 4
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 4
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 4
- 230000008521 reorganization Effects 0.000 description 4
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 4
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 4
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 4
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 4
- 238000003146 transient transfection Methods 0.000 description 4
- 101710145634 Antigen 1 Proteins 0.000 description 3
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 3
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 3
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 3
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 3
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 235000013905 glycine and its sodium salt Nutrition 0.000 description 3
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 3
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 3
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 3
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 3
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 3
- 206010003571 Astrocytoma Diseases 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 description 2
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical group OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 2
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- KGWDUNBJIMUFAP-KVVVOXFISA-N Ethanolamine Oleate Chemical compound NCCO.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O KGWDUNBJIMUFAP-KVVVOXFISA-N 0.000 description 2
- 208000006168 Ewing Sarcoma Diseases 0.000 description 2
- 201000010915 Glioblastoma multiforme Diseases 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 2
- 101000808011 Homo sapiens Vascular endothelial growth factor A Proteins 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 239000007993 MOPS buffer Substances 0.000 description 2
- 208000000172 Medulloblastoma Diseases 0.000 description 2
- FDJKUWYYUZCUJX-AJKRCSPLSA-N N-glycoloyl-beta-neuraminic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@](O)(C(O)=O)C[C@H](O)[C@H]1NC(=O)CO FDJKUWYYUZCUJX-AJKRCSPLSA-N 0.000 description 2
- FDJKUWYYUZCUJX-PGIATKPXSA-N N-glycoloylneuraminic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1OC(O)(C(O)=O)C[C@H](O)[C@H]1NC(=O)CO FDJKUWYYUZCUJX-PGIATKPXSA-N 0.000 description 2
- FDJKUWYYUZCUJX-UHFFFAOYSA-N N-glycolyl-beta-neuraminic acid Natural products OCC(O)C(O)C1OC(O)(C(O)=O)CC(O)C1NC(=O)CO FDJKUWYYUZCUJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012124 Opti-MEM Substances 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000007913 Pituitary Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 201000005746 Pituitary adenoma Diseases 0.000 description 2
- 206010061538 Pituitary tumour benign Diseases 0.000 description 2
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 2
- 239000004268 Sodium erythorbin Substances 0.000 description 2
- 239000012505 Superdex™ Substances 0.000 description 2
- 201000003761 Vaginal carcinoma Diseases 0.000 description 2
- DPDMMXDBJGCCQC-UHFFFAOYSA-N [Na].[Cl] Chemical compound [Na].[Cl] DPDMMXDBJGCCQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 2
- OWMVSZAMULFTJU-UHFFFAOYSA-N bis-tris Chemical compound OCCN(CCO)C(CO)(CO)CO OWMVSZAMULFTJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M caesium chloride Chemical compound [Cl-].[Cs+] AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical group 0.000 description 2
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 2
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 2
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 2
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 2
- 201000003914 endometrial carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 201000001343 fallopian tube carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 2
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 2
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 239000000710 homodimer Substances 0.000 description 2
- 102000058223 human VEGFA Human genes 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 229940065638 intron a Drugs 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 238000001840 matrix-assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 206010027191 meningioma Diseases 0.000 description 2
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000021310 pituitary gland adenoma Diseases 0.000 description 2
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 2
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 2
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 2
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 230000004850 protein–protein interaction Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 2
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 2
- 201000000498 stomach carcinoma Diseases 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 239000012096 transfection reagent Substances 0.000 description 2
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 2
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 2
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 229940038773 trisodium citrate Drugs 0.000 description 2
- 208000012991 uterine carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 2
- MEIRRNXMZYDVDW-MQQKCMAXSA-N (2E,4E)-2,4-hexadien-1-ol Chemical compound C\C=C\C=C\CO MEIRRNXMZYDVDW-MQQKCMAXSA-N 0.000 description 1
- HNSDLXPSAYFUHK-UHFFFAOYSA-N 1,4-bis(2-ethylhexyl) sulfosuccinate Chemical compound CCCCC(CC)COC(=O)CC(S(O)(=O)=O)C(=O)OCC(CC)CCCC HNSDLXPSAYFUHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PXFBZOLANLWPMH-UHFFFAOYSA-N 16-Epiaffinine Natural products C1C(C2=CC=CC=C2N2)=C2C(=O)CC2C(=CC)CN(C)C1C2CO PXFBZOLANLWPMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BHNQPLPANNDEGL-UHFFFAOYSA-N 2-(4-octylphenoxy)ethanol Chemical compound CCCCCCCCC1=CC=C(OCCO)C=C1 BHNQPLPANNDEGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000022 2-aminoethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])N([H])[H] 0.000 description 1
- QFVHZQCOUORWEI-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-anilino-5-sulfonaphthalen-1-yl)diazenyl]-5-hydroxynaphthalene-2,7-disulfonic acid Chemical compound C=12C(O)=CC(S(O)(=O)=O)=CC2=CC(S(O)(=O)=O)=CC=1N=NC(C1=CC=CC(=C11)S(O)(=O)=O)=CC=C1NC1=CC=CC=C1 QFVHZQCOUORWEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-M 4-hydroxybenzoate Chemical compound OC1=CC=C(C([O-])=O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010039627 Aprotinin Proteins 0.000 description 1
- 206010004593 Bile duct cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010006143 Brain stem glioma Diseases 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 208000017897 Carcinoma of esophagus Diseases 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010011831 Cytomegalovirus infection Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-SCSAIBSYSA-N D-methionine Chemical compound CSCC[C@@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 1
- 229930182818 D-methionine Natural products 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010014967 Ependymoma Diseases 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 102000051366 Glycosyltransferases Human genes 0.000 description 1
- 108700023372 Glycosyltransferases Proteins 0.000 description 1
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 101000911390 Homo sapiens Coagulation factor VIII Proteins 0.000 description 1
- 102000009490 IgG Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010073807 IgG Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 1
- 102000013463 Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010065825 Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 description 1
- 206010061252 Intraocular melanoma Diseases 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 208000028018 Lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 208000032271 Malignant tumor of penis Diseases 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 206010027406 Mesothelioma Diseases 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 208000000821 Parathyroid Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 208000002471 Penile Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010034299 Penile cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000015634 Rectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010054184 Small intestine carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000021712 Soft tissue sarcoma Diseases 0.000 description 1
- PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N TCEP Chemical compound OC(=O)CCP(CCC(O)=O)CCC(O)=O PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000033781 Thyroid carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 description 1
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 101710162629 Trypsin inhibitor Proteins 0.000 description 1
- 229940122618 Trypsin inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 201000005969 Uveal melanoma Diseases 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 201000005179 adrenal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000005188 adrenal gland cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000005377 adsorption chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 125000004390 alkyl sulfonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 238000011091 antibody purification Methods 0.000 description 1
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 229960004405 aprotinin Drugs 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 210000000576 arachnoid Anatomy 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N butyl alcohol Substances CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 125000002057 carboxymethyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[*] 0.000 description 1
- 208000022033 carcinoma of urethra Diseases 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 1
- 208000006990 cholangiocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013599 cloning vector Substances 0.000 description 1
- 201000010989 colorectal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 208000030381 cutaneous melanoma Diseases 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 230000024835 cytogamy Effects 0.000 description 1
- 238000013523 data management Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K dihydroxy(stearato)aluminium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[Al](O)O UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 210000000750 endocrine system Anatomy 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 1
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 1
- 201000005619 esophageal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000021045 exocrine pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 125000002446 fucosyl group Chemical group C1([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O1)C)* 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 238000003500 gene array Methods 0.000 description 1
- 238000012637 gene transfection Methods 0.000 description 1
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N guanidinium chloride Chemical compound [Cl-].NC(N)=[NH2+] PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000057593 human F8 Human genes 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 1
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000244 kidney pelvis Anatomy 0.000 description 1
- 238000000670 ligand binding assay Methods 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 208000003747 lymphoid leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 208000026037 malignant tumor of neck Diseases 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- JMUPMJGUKXYCMF-IWDIICGPSA-N n-[(2s,3r,4r,5s,6r)-2-[(2s,3s,4s,5s,6r)-2-[[(2r,3r,4s,5s,6s)-6-[(2r,3s,4r,5r,6s)-5-acetamido-6-[(2r,3s,4r,5r)-5-acetamido-1,2,4-trihydroxy-6-oxohexan-3-yl]oxy-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxy-4-[(2r,3s,4s,5s,6r)-3-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-4-h Chemical group O[C@@H]1[C@@H](NC(C)=O)[C@H](O[C@@H]([C@H](O)[C@H](C=O)NC(=O)C)[C@H](O)CO)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)O1 JMUPMJGUKXYCMF-IWDIICGPSA-N 0.000 description 1
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 201000002575 ocular melanoma Diseases 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 201000003913 parathyroid carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000017954 parathyroid gland carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 1
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- LFGREXWGYUGZLY-UHFFFAOYSA-N phosphoryl Chemical group [P]=O LFGREXWGYUGZLY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003566 phosphorylation assay Methods 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 238000012797 qualification Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 229940047431 recombinate Drugs 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 206010038038 rectal cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000001275 rectum cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000007430 reference method Methods 0.000 description 1
- 201000007444 renal pelvis carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 239000012723 sample buffer Substances 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000003375 selectivity assay Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000008261 skin carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000003708 skin melanoma Diseases 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 210000001562 sternum Anatomy 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000013077 thyroid gland carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 238000003151 transfection method Methods 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 description 1
- 210000003606 umbilical vein Anatomy 0.000 description 1
- 201000007433 ureter carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 208000013013 vulvar carcinoma Diseases 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/22—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against growth factors ; against growth regulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
- C07K16/468—Immunoglobulins having two or more different antigen binding sites, e.g. multifunctional antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/35—Valency
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/55—Fab or Fab'
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
- C07K2317/64—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising a combination of variable region and constant region components
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
- C07K2317/66—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising a swap of domains, e.g. CH3-CH2, VH-CL or VL-CH1
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Compositions Of Macromolecular Compounds (AREA)
Abstract
双特异性抗原结合蛋白、其生成方法、含有所述抗体的药物组合物、及其用途。
Description
本发明涉及双特异性抗原结合蛋白、其生成方法、含有所述抗体的药物组合物、及其用途。
发明背景
经工程化改造的蛋白质，诸如能够结合两种或更多种抗原的双或多特异性抗体是本领域中已知的。可以使用细胞融合、化学缀合、或重组DNA技术来生成此类多特异性结合蛋白。
最近已经开发出极其多种重组多特异性抗体形式，例如通过融合例如IgG抗体形式和单链域得到的四价双特异性抗体(参见例如Coloma，M.J.等，Nature Biotech.15(1997)159-163；WO 2001/077342；及Morrison，S.L.，NatureBiotech.25(2007)1233-1234)。
还有，已经开发出能够结合两种或更多种抗原的数种其它不再保留抗体核心结构(IgA、IgD、IgE、IgG或IgM)的新形式，诸如双抗体、三抗体或四抗体、微型抗体、数种单链形式(scFv、双-scFv)(Holliger，P.等，NatureBiotech 23(2005)1126-1136；Fischer，N.和Léger，O.，Pathobiology 74(2007)3-14；Shen，J.等，J.Immunol.Methods 318(2007)65-74；Wu，C.等，NatureBiotech 25(2007)1290-1297)。
所有此类形式使用接头来融合抗体核心(IgA、IgD、IgE、IgG或IgM)与别的结合蛋白(例如scFv)或者融合例如两个Fab片段或scFv(Fischer，N.和Léger，O.，Pathobiology 74(2007)3-14)。虽然接头在工程化改造双特异性抗体方面具有优点是明显的，但是它们还可以引起治疗背景中的问题。实际上，这些外来肽可以引发针对接头自身或蛋白质与接头间的接合的免疫应答。此外，这些肽的柔性性质使它们更易于蛋白水解切割，这潜在地导致较差的抗体稳定性、聚集和升高的免疫原性。另外，可能想要保留效应器功能，诸如例如补体依赖性细胞毒性(CDC)或抗体依赖性细胞的细胞毒性(ADCC)，其是经由Fc部分通过维持与天然存在的抗体的高度相似性来介导的。
如此，理想地，应当旨在开发在一般结构上与天然存在的抗体(如IgA、IgD、IgE、IgG或IgM)非常相似的双特异性抗体，其与人序列具有最小的偏离。
在一种方法中，已经使用四源杂交瘤(quadroma)技术(参见Milstein，C.和Cuello，A.C.，Nature 305(1983)537-540)来生成与天然抗体非常类似的双特异性抗体，所述四源杂交瘤技术基于两种不同的表达具有期望的双特异性抗体特异性的鼠单克隆抗体的杂交瘤细胞系的体细胞融合。由于所得的杂合-杂交瘤(或四源杂交瘤)细胞系内的两种不同抗体重链和轻链的随机配对，生成多达10种不同抗体种类，其中仅一种是期望的功能性双特异性抗体。由于错配副产物的存在和显著降低的生产产量，意味着需要复杂的纯化规程(参见例如Morrison，S.L.，Nature Biotech.25(2007)1233-1234)。一般地，若使用重组表达技术，则仍存在相同的错配副产物问题。
一种避开错配副产物问题的方法(其称为“隆突-入-穴(knob-into-hole)”)旨在通过将突变引入CH3域中来修饰接触界面，从而迫使两种不同抗体重链配对。在一条链上，用具有较短侧链的氨基酸替换体积大的氨基酸以创建“穴”。相反地，将具有较大侧链的氨基酸引入另一种CH3域中，以创建“隆突”。通过共表达这两种重链(和两条相同的轻链，其必须适合于这两种重链)，观察到异二聚体形成(“隆突-穴”)相对于同二聚体形成(“穴-穴”或“隆突-隆突”)的高产量(Ridgway，J.B.，Protein Eng.9(1996)617-621；及WO96/027011)。可以通过使用噬菌体展示法来重建两种CH3域的相互作用表面并引入二硫桥以稳定化异二聚体来进一步提高异二聚体的百分比(MerchantA.M等，Nature Biotech 16(1998)677-681；Atwell，S.等，J.Mol.Biol.270(1997)26-35)。关于隆突-入-穴技术的新方法记载于例如EP 1870459A1。虽然此形式似乎非常有吸引力，但是目前不可获得描述通向临床的进展的数据。此策略的一种重要的约束是两种亲本抗体的轻链必须相同，以阻止错配和无活性分子的形成。如此，此技术不适合于容易地开发自针对第一和第二抗原的两种抗体起始的针对两种抗原的重组双特异性抗体，因为这些抗体的重链和/或相同的轻链必须是优化的。
另一种避开制备双特异性抗体中的错配副产物的问题的方法是通过使用特异性结合第一抗原并且已经将特异性结合第二抗原的两个融合的Fab片段与其重链N端融合的全长抗体来从异二聚体转变成同二聚体，如记载于例如WO2001/077342的。此策略的一个重要的缺点是通过全长抗体的轻链与Fab片段的CH1-VH域错配及通过Fab片段轻链与全长抗体的CH1-VH域的错配形成不想要的无活性副产物。
WO 2006/093794涉及异二聚蛋白结合组合物。WO 99/37791描述了多用途抗体衍生物。Morrison，S.，L.等the J.Immunolog，160(1998)2802-2808指出可变区域交换对IgG功能特性的影响。
发明概述
本发明包含双特异性抗原结合蛋白，其包含：
a)抗体的两条轻链和两条重链，所述抗体特异性结合第一抗原并包含两个Fab片段；
b)特异性结合第二抗原的抗体的两个额外的Fab片段，其中所述额外的Fab片段经由肽连接头在a)的重链或轻链的C或N端融合；且
其中在所述Fab片段中，实施下列修饰：
i)在a)的两个Fab片段中，或者在b)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
和/或
恒定域CL和CH1彼此替换，
ii)在a)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
及
恒定域CL和CH1彼此替换，
且
在b)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
或
恒定域CL和CH1彼此替换，
iii)在a)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
或
恒定域CL和CH1彼此替换，
且
在b)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
及
恒定域CL和CH1彼此替换，
iv)在a)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
且
在b)的两个Fab片段中，
恒定域CL和CH1彼此替换，
或
v)在a)的两个Fab片段中，
恒定域CL和CH1彼此替换，
且
在b)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换。
本发明的又一个实施方案是一种用于制备依照本发明的抗原结合蛋白的方法，包括下列步骤：
a)用包含编码依照本发明的双特异性抗原结合蛋白的核酸分子的载体转化宿主细胞，
b)在容许所述抗体分子合成的条件下培养所述宿主细胞；并
c)自所述培养物回收所述抗体分子。
本发明的又一个实施方案是宿主细胞，其包含包含编码依照本发明的抗原结合蛋白的核酸分子的载体。
本发明的又一个实施方案是药物组合物，其包含依照本发明的抗原结合蛋白和至少一种药学可接受赋形剂。
本发明的又一个实施方案是一种用于治疗需要治疗的患者的方法，其特征在于对所述患者施用治疗有效量的依照本发明的抗原结合蛋白。
依照本发明，可以通过替换a)特异性结合第一抗原的全长抗体的Fab片段中和/或b)两个额外的融合的Fab片段中的某些域来改善想要的双特异性抗原结合蛋白与不想要的副产物相比的比率。这样，可以降低轻链与错误的CH1-VH域的不想要的错配。
发明详述
本发明包含双特异性抗原结合蛋白，其包含：
a)抗体的两条轻链和两条重链，所述抗体特异性结合第一抗原并包含两个Fab片段；
b)特异性结合第二抗原的抗体的两个额外的Fab片段，其中所述额外的Fab片段经由肽连接头与a)的重链的C或N端融合；
且其中在所述Fab片段中，实施下列修饰：
i)在a)的两个Fab片段中，或者在b)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
和/或
恒定域CL和CH1彼此替换，
ii)在a)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
及
恒定域CL和CH1彼此替换，
且
在b)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
或
恒定域CL和CH1彼此替换，
iii)在a)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
或
恒定域CL和CH1彼此替换，
且
在b)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
及
恒定域CL和CH1彼此替换，
iv)在a)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
且
在b)的两个Fab片段中，
恒定域CL和CH1彼此替换，
或
v)在a)的两个Fab片段中，
恒定域CL和CH1彼此替换，
且
在b)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换。
在本发明的一个实施方案中，依照本发明的双特异性抗原结合蛋白的特征在于：
所述额外的Fab片段经由肽连接头与a)的重链的C端，或a)的重链的N端融合。
在本发明的一个实施方案中，依照本发明的双特异性抗原结合蛋白的特征在于：
所述额外的Fab片段经由肽连接头与a)的重链的C端融合。
在本发明的一个实施方案中，依照本发明的双特异性抗原结合蛋白的特征在于：
所述额外的Fab片段经由肽连接头与a)的重链的N端融合。
在本发明的一个实施方案中，依照本发明的双特异性抗原结合蛋白的特征在于：
在所述Fab片段中，实施下列修饰：
i)在a)的两个Fab片段中，或者在b)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
和/或
恒定域CL和CH1彼此替换。
在本发明的一个实施方案中，依照本发明的双特异性抗原结合蛋白的特征在于：
在所述Fab片段中，实施下列修饰：
i)在a)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
和/或
恒定域CL和CH1彼此替换。
在本发明的一个实施方案中，依照本发明的双特异性抗原结合蛋白的特征在于：
在所述Fab片段中，实施下列修饰：
i)在a)的两个Fab片段中，
恒定域CL和CH1彼此替换。
在本发明的一个实施方案中，依照本发明的双特异性抗原结合蛋白的特征在于：
在所述Fab片段中，实施下列修饰：
i)在b)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
和/或
恒定域CL和CH1彼此替换。
在本发明的一个实施方案中，依照本发明的双特异性抗原结合蛋白的特征在于：
在所述Fab片段中，实施下列修饰：
i)在b)的两个Fab片段中，
恒定域CL和CH1彼此替换。
依照本发明，可以通过替换a)特异性结合第一抗原的全长抗体的Fab片段中和/或b)两个额外的融合的Fab片段中的某些域来降低想要的双特异性抗原结合蛋白与不想要的副产物(由于轻链与错误的CH1-VH域的错配所致)相比的比率。在此背景中的错配意指i)a)下的全长抗体的轻链与b)下的Fab片段的CH1-VH域；或ii)b)下的Fab片段的轻链与a)下的全长抗体的CH1-VH域的结合(参见图3)，这导致不想要的无活性或没有完整功能的副产物。
如本文中所使用的，术语“抗体”意指由两条抗体重链和两条抗体轻链组成的全长抗体(参见图1)。全长抗体的重链是以N端至C端方向由抗体重链可变域(VH)、抗体重链恒定域1(CH1)、抗体铰链区(HR)、抗体重链恒定区2(CH2)、和抗体重链恒定域3(CH3)(缩写为VH-CH1-HR-CH2-CH3)；和任选地抗体重链恒定域4(CH4)(在亚类IgE的抗体的情况中)组成的多肽。优选地，全长抗体的重链是以N端至C端方向由VH、CH1、HR、CH2和CH3组成的多肽。全长抗体的轻链是以N端至C端方向由抗体轻链可变域(VL)、和抗体轻链恒定域(CL)组成的多肽，缩写为VL-CL。抗体轻链恒定域(CL)可以是κ(卡帕)或λ(拉姆达)。抗体链经由CL域与CH1域间(即，轻链与重链间)及全长抗体重链的铰链区间的多肽间二硫键连接在一起。典型的全长抗体的例子是天然抗体，如IgG(例如IgG1和IgG2)、IgM、IgA、IgD、和IgE)。依照本发明的抗体可以来自单一物种，例如人，或者它们可以是嵌合的或人源化的抗体。依照本发明的全长抗体包含两个各自通过一对VH和VL形成的抗原结合位点，它们都特异性结合同一(第一)抗原。所述全长抗体的重链或轻链的C端表示所述重链或轻链的C端的最后一个氨基酸。所述抗体包含两个相同的Fab片段，其由重链的VH和CH1域和轻链的VL和CL域组成。(参见图1和图2)。
特异性结合第二抗原的抗体的“额外的Fab片段”(参见图2)指由所述第二抗体的重链的VH和CH1域和轻链的VL和CL域组成的别的Fab片段。额外的Fab片段经由重链部分(CH1或VH域)以其未修饰的形式(参见图3)与特异性结合第一抗原的抗体的重链或轻链的C或N端融合。
如本发明内所使用的，术语“肽连接头”意指具有氨基酸序列的肽，其优选地是合成起源的。使用依照本发明的这些肽连接头来将抗原结合肽与全长和/或经修饰的全长抗体链的C或N端融合以形成依照本发明的双特异性抗原结合蛋白。优选地，c)下的所述肽连接头是具有氨基酸序列的肽，具有至少5个氨基酸的长度，优选地具有5至100，更优选地10至50个氨基酸的长度。在一个实施方案中，所述肽连接头是(GxS)n或(GxS)nGm，其中G＝甘氨酸，S＝丝氨酸，且(x＝3，n＝3、4、5或6，且m＝0、1、2或3)或(x＝4，n＝2、3、4或5且m＝0、1、2或3)，优选地x＝4和n＝2或3，更优选地，其中x＝4，n＝2。在一个实施方案中，所述肽连接头是(G4S)2。
如本文中所使用的，术语“结合位点”或“抗原结合位点”意指依照本发明的抗原结合蛋白中实际上与配体(例如，抗原或其抗原片段)结合并且自抗体分子或其片段(例如Fab片段)衍生的区域。依照本发明的抗原结合位点包含抗体重链可变域(VH)和抗体轻链可变域(VL)。
特异性结合想要的抗原的抗原结合位点(即，VH/VL对)可以a)自针对抗原的已知抗体或者b)自通过使用抗原蛋白或核酸或其片段等通过重新免疫方法或者通过噬菌体展示获得的新抗体或抗体片段衍生。
本发明的抗原结合蛋白的抗原结合位点含有6个互补决定区(CDR)，其以不同程度促成结合位点对抗原的亲和力。存在着3个重链可变域CDR(CDRH1、CDRH2和CDRH3)和3个轻链可变域CDR(CDRL1、CDRL2和CDRL3)。通过与汇编的氨基酸序列数据库比较来确定CDR和框架区(FR)的范围，在所述数据库中已经依照序列间的可变性限定那些区域。
抗体特异性指抗体或抗原结合蛋白对抗原的特定表位的选择性识别。例如，天然抗体是单特异性的。双特异性抗体是具有两种不同抗原结合特异性的抗体。在抗体具有超过一种特异性的情况中，识别的表位可以与单一抗原或者与超过一种抗原有关。
如本文中所使用的，术语“单特异性”抗体或抗原结合蛋白意指具有一个或多个各自结合同一抗原的同一表位的结合位点的抗体或抗原结合蛋白。
如本申请内所使用的，术语“价”意指抗体分子中存在规定数目的结合位点。例如天然抗体或依照本发明的全长抗体具有两个结合位点，并且是二价的。术语“四价”意指抗原结合蛋白中存在四个结合位点。如本文中所使用的，术语“四价、双特异性”意指具有四个抗原结合位点且其中两个结合另一种抗原(或抗原的另一种表位)的依照本发明的抗原结合蛋白。本发明的抗原结合蛋白具有四个结合位点，并且是四价的。
本发明的全长抗体包含一种或多种免疫球蛋白类别的免疫球蛋白恒定区。免疫球蛋白类别包括IgG、IgM、IgA、IgD、和IgE同种型及在IgG和IgA的情况中包括其亚型。在一个优选的实施方案中，本发明的全长抗体具有IgG型抗体的恒定域结构。
如本文中所使用的，术语“单克隆抗体”或“单克隆抗体组合物”指单一氨基酸组成的抗体制备物或抗体或抗原结合蛋白分子。
术语“嵌合抗体”指包含来自一种来源或物种的可变区，即结合区和至少自不同来源或物种衍生的恒定区的一部分的抗体，其通常通过重组DNA技术来制备。包含鼠可变区和人恒定区的嵌合抗体是优选的。本发明涵盖的“嵌合抗体”的其它优选形式是那些其中的恒定区已经自初始抗体的恒定区修饰或改变以生成依照本发明的特性(特别地关于C1q结合/或Fc受体(FcR)结合)的。此类嵌合抗体又称为“类别转换抗体”。嵌合抗体是包含编码免疫球蛋白可变区的DNA区段和编码免疫球蛋白恒定区的DNA区段的表达免疫球蛋白基因的产物。用于生成嵌合抗体的方法牵涉常规的重组DNA和基因转染技术，其是本领域中公知的。参见例如Morrison，S.，L.等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 81(1984)6851-6855；US 5,202,238和US 5,204,244。
术语“人源化抗体”指其中的框架或“互补决定区”(CDR)已经进行过修饰以包含与亲本免疫球蛋白的特异性相比不同特异性的免疫球蛋白CDR的抗体。在一个优选的实施方案中，将鼠CDR嫁接入人抗体的框架区中以制备“人源化抗体”。参见例如Riechmann，L.等，Nature 332(1988)323-327；及Neuberger，M.S.等，Nature 314(1985)268-270。特别优选的CDR对应于那些代表识别上文关于嵌合抗体所记录的抗原的序列的。本发明涵盖的“人源化抗体”的其它形式是那些其中的恒定区已经另外自初始抗体的恒定区进行过修饰或改变以生成依照本发明的特性(特别地关于C1q结合/或Fc受体(FcR)结合)的。
如本文中所使用的，术语“人抗体”意图包括具有自人种系免疫球蛋白序列衍生的可变和恒定区的抗体。人抗体是现有技术中公知的(van Dijk，M.A.和van de Winkel，J.G.，Curr.Opin.Chem.Biol.5(2001)368-374)。还可以在转基因动物(例如小鼠)中生成人抗体，所述转基因动物在免疫后能够在没有内源免疫球蛋白生成的情况中生成人抗体的完整全集或选集。在此类种系突变体小鼠中转移人种系免疫球蛋白基因阵列会导致抗原考验后人抗体的生成(参见例如Jakobovits，A.等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90(1993)2551-2555；Jakobovits，A.等，Nature 362(1993)255-258；Brueggemann，M.等，YearImmunol.7(1993)33-40)。还可以在噬菌体展示文库中生成人抗体(Hoogenboom，H.R.和Winter，G.，J.Mol.Biol.227(1992)381-388；Marks，J.D.等，J.Mol.Biol.222(1991)581-597)。Cole等及Boerner等的技术还可用于制备人单克隆抗体(Cole，S.，P.，C.等，Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy，Alan R.Liss(1985)77-96；及Boerner，P.等，J.Immunol.147(1991)86-95)。如已经关于依照本发明的嵌合的和人源化的抗体所提及的，如本文中所使用的，术语“人抗体”还包含此类如下的抗体，其在恒定区中进行修饰以生成依照本发明的特性(特别地关于C1q结合/或FcR结合)，例如通过“类别转换”，即Fc部分的变化或突变(例如自IgG1至IgG4和/或IgG1/IgG4突变)来实现。
如本文中所使用的，术语“重组人抗体”意图包括通过重组手段制备、表达、创建或分离的所有人抗体，诸如自宿主细胞诸如NS0或CHO细胞或自人免疫球蛋白基因的转基因动物(例如小鼠)分离的抗体或使用转染入宿主细胞中的重组表达载体表达的抗体。此类重组人抗体具有重排形式的可变区和恒定区。依照本发明的重组人抗体已经进行过体内体细胞高突变。如此，重组抗体的VH和VL区的氨基酸序列是如下的序列，其尽管自人种系VH和VL序列衍生和与之相关，但是可以不在体内的人抗体种系全集内天然存在。
如本文中所使用的，“可变域”(轻链可变域(VL)、重链可变域(VH))意指直接牵涉抗体对抗原结合的每对轻链和重链。人轻链和重链可变域具有相同的一般结构，并且每个域包含通过3个“高变区”(或互补决定区，CDR)连接的4个序列广泛保守的框架(FR)区。框架区采用β-片层构象，而CDR可以形成连接β-片层结构的环。每条链中的CDR通过框架区保持其三维结构，并且与来自另一条链的CDR一起形成抗原结合位点。抗体重链和轻链CDR3区在依照本发明的抗体的结合特异性/亲和力中发挥特别重要的作用，并且因此提供本发明的又一个目的。
术语“高变区”或“抗体的抗原结合部分”在本文中使用时指抗体中负责抗原结合的氨基酸残基。高变区包含来自“互补决定区”或“CDR”的氨基酸残基。“框架”或“FR”区是那些与如本文中定义的高变区残基不同的可变域区。因此，抗体的轻链和重链包含N至C端的域FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、和FR4。每条链上的CDR被此类框架氨基酸分开。特别地，重链的CDR3是最有助于抗原结合的区域。依照Kabat等，Sequences ofProteins of Immunological Interest，第5版，Public Health Service，NationalInstitutes of Health，Bethesda，MD(1991)的标准定义来确定CDR和FR区。
如本文中所使用的，术语“结合”或“特异性结合”指在体外测定法中，优选地在使用纯化的野生型抗原的等离振子共振测定法(BIAcore，GE-Healthcare Uppsala，Sweden)中抗体对抗原表位的结合。通过术语ka(来自抗体/抗原复合物的抗体(或抗体或抗原结合蛋白)的结合速率常数)、kD(解离常数)、和KD(kD/ka)来限定结合亲和力。结合或特异性结合意指10-8mol/l或更小，优选地10-9M至10-13mol/l的结合亲和力(KD)。如此，依照本发明的双特异性抗原结合蛋白以10-8mol/l或更小，优选地10-9M至10-13mol/l的结合亲和力(KD)特异性结合其对之特异性的每种抗原。
可以通过BIAcore测定法(GE-Healthcare Uppsala，Sweden)来调查抗体对FcγRIII的结合。通过术语ka(来自抗体/抗原复合物的抗体的结合速率常数)、kD(解离常数)、和KD(kD/ka)来限定结合亲和力。
术语“表位”包括能够与抗体特异性结合的任何多肽决定簇。在某些实施方案中，表位决定簇包括分子的化学活性表面聚组，诸如氨基酸、糖侧链、磷酰基、或磺酰基，并且在某些实施方案中可以具有特定的三维结构特征，和/或特定的电荷特征。表位是抗原中被抗体结合的区域。
在某些实施方案中，在抗体优先识别其在蛋白质和/或大分子的复杂混合物中的靶抗原时，其被说成特异性结合抗原。
在又一个实施方案中，依照本发明的双特异性抗原结合蛋白的特征在于所述全长抗体是人IgG1亚类的，或具有突变L234A和L235A的人IgG1亚类的。
在又一个实施方案中，依照本发明的双特异性抗原结合蛋白的特征在于所述全长抗体是人IgG2亚类的。
在又一个实施方案中，依照本发明的双特异性抗原结合蛋白的特征在于所述全长抗体是人IgG3亚类的。
在又一个实施方案中，依照本发明的双特异性抗原结合蛋白的特征在于所述全长抗体是人IgG4亚类的，或具有额外的突变S228P的人IgG4亚类的。
优选地，依照本发明的双特异性抗原结合蛋白的特征在于所述全长抗体是人IgG1亚类的，具有额外的突变S228P的人IgG4亚类的。
现在已经发现了，依照本发明的双特异性抗原结合蛋白具有改善的特征，诸如生物学或药理学活性、药动学特性或毒性。它们可以例如用于治疗疾病诸如癌症。
如本申请内所使用的，术语“恒定区”意指抗体中与可变区不同的域的总和。恒定区不直接牵涉抗原的结合，但是展现出多种效应器功能。根据其重链恒定区的氨基酸序列，抗体分成类别：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，并且这些中的数种可以进一步分成亚类，诸如IgG1、IgG2、IgG3、和IgG4、IgA1和IgA2。与不同类别的抗体对应的重链恒定区分别称作α、δ、ε、γ、和μ。可以在所有5种抗体类别中都找到的轻链恒定区(CL)称作κ(卡帕)和λ(拉姆达)。
如本申请中所使用的，术语“自人起源衍生的恒定区”意指亚类IgG1、IgG2、IgG3、或IgG4的人抗体的重链恒定区和/或轻链κ或λ恒定区。此类恒定区是现有技术中公知的，并且例如由Kabat，E.A.(参见例如Johnson，G.和Wu，T.T.，Nucleic Acids Res.28(2000)214-218；Kabat，E.A.等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 72(1975)2785-2788)描述。
虽然IgG4亚类的抗体显示降低的Fc受体(FcgRIIIa)结合，但是其它IgG亚类的抗体显示强的结合。然而，Pro238、Asp265、Asp270、Asn297(丧失Fc碳水化合物)、Pro329、Leu234、Leu235、Gly236、Gly237、Ile253、Ser254、Lys288、Thr307、Gln311、Asn434、和His435是在改变时也提供降低的Fc受体结合的残基(Shields，R.L.等，J.Biol.Chem.276(2001)6591-6604；Lund，J.等，FASEB J.9(1995)115-119；Morgan，A.等，Immunology 86(1995)319-324；EP 0 307 434)。
在一个实施方案中，依照本发明的抗原结合蛋白与IgG1抗体相比具有降低的FcR结合，而全长亲本抗体就FcR结合而言是IgG4亚类的或具有S228、L234、L235和/或D265中的突变的IgG1或IgG2亚类的，和/或含有PVA236突变。在一个实施方案中，全长亲本抗体中的突变是S228P、L234A、L235A、L235E和/或PVA236。在另一个实施方案中，全长亲本抗体中的突变在IgG4S228P中及在IgG1L234A和L235A中。
抗体的恒定区直接牵涉ADCC(抗体依赖性细胞介导的细胞毒性)和CDC(补体依赖性细胞毒性)。补体激活(CDC)通过补体因子C1q与大多数IgG抗体亚类的恒定区的结合来启动。通过在所谓的结合位点处限定的蛋白质-蛋白质相互作用引起C1q与抗体的结合。此类恒定区结合位点是现有技术中已知的，并且例如由Lukas，T.J.等，J.Immunol.127(1981)2555-2560；Brunhouse，R.和Cebra，J.，J.，Mol.Immunol.16(1979)907-917；Burton，D.R.等，Nature 288(1980)338-344；Thommesen，J.，E.等，Mol.Immunol.37(2000)995-1004；Idusogie，E.，E.等，J.Immunol.164(2000)4178-4184；Hezareh，M.等，J.Virol.75(2001)12161-12168；Morgan，A.等，Immunology 86(1995)319-324；及EP 0 307 434描述。此类恒定区结合位点例如以氨基酸L234、L235、D270、N297、E318、K320、K322、P331、和P329(依照Kabat的EU索引编号)为特征。
术语“抗体依赖性细胞的细胞毒性(ADCC)”指在存在效应细胞的情况中通过依照本发明的抗原结合蛋白来裂解人靶细胞。优选地，通过在存在效应细胞，诸如新鲜分离的PBMC或来自血沉棕黄层的纯化的效应细胞，如单核细胞或天然杀伤(NK)细胞或永久生长NK细胞系的情况中用依照本发明的抗原结合蛋白来处理抗原表达细胞的制备物来测量ADCC。
术语“补体依赖性细胞毒性(CDC)”意指通过补体因子C1q与大多数IgG抗体亚类的Fc部分的结合启动的过程。通过在所谓的结合位点处限定的蛋白质-蛋白质相互作用引起C1q与抗体的结合。此类Fc部分结合位点是现有技术中已知的(参见上文)。此类Fc部分结合位点例如以氨基酸L234、L235、D270、N297、E318、K320、K322、P331、和P329(依照Kabat的EU索引编号)为特征。亚类IgG1、IgG2、和IgG3的抗体通常显示包括C1q和C3结合的补体激活，而IgG4不激活补体系统，而且不结合C1q和/或C3。
单克隆抗体的细胞介导的效应器功能可以通过工程化改造其寡糖组分来增强，如记载于Umana，P.等，Nature Biotechnol.17(1999)176-180，及US6,602,684的。IgG1型抗体(最常使用的治疗性抗体)是在每个CH2域中具有Asn297处的保守的N连接的糖基化位点的糖蛋白。两个附着于Asn297的复合双触角寡糖掩埋于CH2域间，这形成与多肽主链的广泛接触，并且其存在对于抗体介导效应器功能诸如抗体依赖性细胞的细胞毒性(ADCC)是至关重要的(Lifely，M.，R.等，Glycobiology 5(1995)813-822；Jefferis，R.等，Immunol.Rev.163(1998)59-76；Wright，A.和Morrison，S.，L.，Trends Biotechnol.15(1997)26-32)。Umana，P.等Nature Biotechnol.17(1999)176-180和WO99/54342显示了β(1，4)-N-乙酰葡糖胺转移酶III(“GnTIII”)(即一种催化两分型寡糖形成的糖基转移酶)在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中的过表达显著提高抗体的体外ADCC活性。Asn297碳水化合物的组成改变或其消除还影响与FcγR和C1q的结合(Umana，P.等，Nature Biotechnol.17(1999)176-180；Davies，J.等，Biotechnol.Bioeng.74(2001)288-294；Mimura，Y.等，J.Biol.Chem.276(2001)45539-45547；Radaev，S.等，J.Biol.Chem.276(2001)16478-16483；Shields，R.，L.等，J.Biol.Chem.276(2001)6591-6604；Shields，R.，L.等，J.Biol.Chem.277(2002)26733-26740；Simmons，L.，C.等，J.Immunol.Methods 263(2002)133-147)。
例如在WO 2005/018572、WO 2006/116260、WO 2006/114700、WO2004/065540、WO 2005/011735、WO 2005/027966、WO 1997/028267、US2006/0134709、US 2005/0054048、US 2005/0152894、WO 2003/035835、WO2000/061739中报告了增强单克隆抗体的细胞介导的效应器功能的方法。
在本发明的一个优选的实施方案中，双特异性抗原结合蛋白是在Asn297处用糖链糖基化的(若它包含IgG1、IgG2、IgG3或IgG4亚类，优选地IgG1或IgG3亚类的Fc部分)，其中所述糖链内的岩藻糖量是65％或更低(依照Kabat编号)。在另一个实施方案中，所述糖链内的岩藻糖量是在5％和65％之间，优选地在20％和40％之间。依照本发明的“Asn297”意指位于Fc区中的约第297位的氨基酸天冬酰胺。基于抗体的次要序列变化，Asn297还可以位于第297位上游或下游的一些氨基酸(通常不超过±3个氨基酸)，即在第294位和第300位之间。在一个实施方案中，依照本发明的糖基化抗原结合蛋白IgG亚类是人IgG1亚类的、具有突变L234A和L235A的人IgG1亚类的或IgG3亚类的。在又一个实施方案中，在所述糖链内N-羟乙酰神经氨酸(NGNA)的量是1％或更小和/或N端α-1，3-半乳糖的量是1％或更小。优选地，糖链显示附着于CHO细胞中重组表达的抗体的Asn297的N连接的聚糖的特征。
术语“糖链显示附着于CHO细胞中重组表达的抗体的Asn297的N连接的聚糖的特征”意指依照本发明的全长亲本抗体的Asn297处的糖链与未修饰的CHO细胞中表达的相同抗体的糖链，例如与WO 2006/103100中所报告的那些糖链具有相同的结构和糖残基序列(除岩藻糖残基外)。
如本申请内所使用的，术语“NGNA”意指糖残基N-羟乙酰神经氨酸。
在Asn297处发生人IgG1或IgG3的糖基化，作为核心岩藻糖化双触角复合寡糖糖基化以多至两个Gal残基为末端。Kabat，E.，A.等，Sequences of Proteinsof Immunological Interest，第5版Public Health Service，National Institutes ofHealth，Bethesda，MD.(1991)及Brueggemann，M.等，J.Exp.Med.166(1987)1351-1361；Love，T.，W.等，Methods Enzymol.178(1989)515-527详细报告了IgG1或IgG3亚类的人重链恒定区。根据末端Gal残基的量，这些结构称为G0、G1(α-1，6-或α-1，3-)、或G2聚糖残基(Raju，T.，S.，Bioprocess Int.1(2003)44-53)。抗体Fc部分的CHO型糖基化例如由Routier，F.，H.，Glycoconjugate J.14(1997)201-207描述。在非糖修饰的CHO宿主细胞中重组表达的抗体在Asn297处通常以至少85％的量进行岩藻糖化。全长亲本抗体的经修饰的寡糖可以是杂合的或复合的。优选地，两分型、还原的/非岩藻糖化的寡糖是杂合的。在另一个实施方案中，两分型、还原的/非岩藻糖化的寡糖是复合的。
依照本发明，“岩藻糖的量”意指通过MALDI-TOF质谱术测量的，并以平均值计算的，Asn297处糖链内所述糖相对于附着于Asn297的所有糖结构(例如复合的、杂合的和高甘露糖结构)的总和的量。岩藻糖的相对量是通过MALDI-TOF，含有岩藻糖的结构相对于经N-糖苷酶F处理的样品中鉴定的所有糖结构(例如分别为复合的、杂合的及寡和高甘露糖结构)的百分比。
通过重组手段来生成依照本发明的抗原结合蛋白。如此，本发明的一方面是编码依照本发明的抗原结合蛋白的核酸，而又一方面是包含所述编码依照本发明的抗原结合蛋白的核酸的细胞。用于重组生成的方法是现有技术中普遍已知的，并且包括在原核和真核细胞中的蛋白质表达，随后分离抗原结合蛋白，并且通常纯化至药学可接受纯度。对于在宿主细胞中如前述那样表达抗体，通过标准的方法将编码各经修饰的轻链和重链的核酸插入表达载体中。在合适的原核或真核宿主细胞，如CHO细胞、NS0细胞、SP2/0细胞、HEK293细胞、COS细胞、PER.C6细胞、酵母、或大肠杆菌细胞中实施表达，并且自细胞(上清液或裂解后的细胞)回收抗原结合蛋白。用于重组生成抗体的通用方法是现有技术中公知的，并且例如记载于综述文章Makrides，S.C.，Protein Expr.Purif.17(1999)183-202；Geisse，S.等，Protein Expr.Purif.8(1996)271-282；Kaufman，R.J.，Mol.Biotechnol.16(2000)151-160；Werner，R.G.，Drug Res.48(1998)870-880。
通过常规的免疫球蛋白纯化规程，诸如例如蛋白A-Sepharose、羟磷灰石层析、凝胶电泳、透析、或亲和层析来自培养液适当地分离依照本发明的双特异性抗原结合蛋白。容易使用常规规程将编码单克隆抗体的DNA或RNA分离并测序。杂交瘤细胞可以充当此类DNA和RNA的来源。一旦分离，可以将DNA插入表达载体中，然后将所述表达载体转染入在其它情况中不生成免疫球蛋白蛋白质的宿主细胞诸如HEK 293细胞、CHO细胞、或骨髓瘤细胞中，以获得重组单克隆抗体在宿主细胞中的合成。
通过将合适的核苷酸变化引入抗原结合蛋白DNA中，或者通过核苷酸合成来制备双特异性抗原结合蛋白的氨基酸序列变体(或突变体)。然而，仅可以在非常有限的范围中实施此类修饰，例如如上文所描述的。例如，修饰不改变上文所提及的抗体特征诸如IgG同种型和抗原结合，但是可以改善重组生成的产量、蛋白质稳定性或者便于纯化。
如本申请中所使用的，术语“宿主细胞”意指可以工程化改造以生成依照本发明的抗体的任何种类的细胞系统。在一个实施方案中，使用HEK293细胞和CHO细胞作为宿主细胞。如本文中所使用的，表述“细胞”、“细胞系”、和“细胞培养物”可互换使用，并且所有此类名称包括后代。如此，词语“转化体”和“经转化的细胞”包括原代主题细胞和自其衍生的培养物，而不管传递的次数。还应当理解，由于有意或无意的突变，所有后代在DNA内容上可能不是正好相同的。包括具有如在初始转化细胞中筛选的相同功能或生物学活性的变体后代。
例如，Barnes，L.M.等，Cytotechnology 32(2000)109-123；Barnes，L.M.等，Biotech.Bioeng.73(2001)261-270描述了NS0细胞中的表达。例如，Durocher，Y.等，Nucl.Acids.Res.30(2002)E9描述了瞬时表达。Orlandi，R.等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 86(1989)3833-3837；Carter，P.等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA89(1992)4285-4289；及Norderhaug，L.等，J.Immunol.Methods 204(1997)77-87描述了可变域的克隆。Schlaeger，E.-J.和Christensen，K.，于Cytotechnology 30(1999)71-83及Schlaeger，E.-J.，于J.Immunol.Methods 194(1996)191-199描述了一种优选的瞬时表达系统(HEK 293)。
适合于原核生物的控制序列例如包括启动子，任选地操纵基因序列，和核糖体结合位点。已知真核细胞利用启动子、增强子和多腺苷酸化信号。
在将核酸放置在与另一种核酸序列的功能性关系中时，它是“可操作连接的”。例如，若前序列或分泌前导的DNA以参与多肽分泌的前蛋白表达，则它与多肽的DNA可操作连接；若启动子或增强子影响序列的转录，则它与编码序列可操作连接；或者若核糖体结合位点定位为使得便于翻译，则它与编码序列可操作连接。一般而言，“可操作连接的”意指所连接的DNA序列是连续的，并且在分泌前导的情况中，是连续的且在读码框中。然而，增强子不必是连续的。通过在方便的限制性位点处的连接来实现连接。若不存在此类位点，则依照常规的实践使用合成的寡核苷酸衔接头或接头。
通过标准的技术，包括碱/SDS处理、CsCl分带、柱层析、琼脂糖凝胶电泳、和本领域中公知的其它技术来实施抗体纯化以消除细胞组分或其它污染物，例如其它细胞核酸或蛋白质。参见Ausubel，F.等编Current Protocols inMolecular Biology，Greene Publishing and Wiley Interscience，New York(1987)。不同方法是完善建立的，并且广泛用于蛋白质纯化，诸如用微生物蛋白质的亲和层析(例如，蛋白A或蛋白G亲和层析)、离子交换层析(例如，阳离子交换(羧甲基树脂)、阴离子交换(氨乙基树脂)和混合模式交换)、亲硫性吸附(例如，用β-巯基乙醇和其它SH配体)、疏水性相互作用或芳香族吸附层析(例如，用苯基-Sepharose、亲氮杂芳烃性树脂(aza-arenophilicresin)、或间-氨基苯基硼酸)、金属螯合物亲和层析(例如，用Ni(II)-和Cu(II)-亲和材料)、大小排阻层析、和电泳方法(诸如凝胶电泳、毛细管电泳)(Vijayalakshmi，M.A.，Appl.Biochem.Biotech.75(1998)93-102)。
本发明的一方面是包含依照本发明的抗原结合蛋白的药物组合物。本发明的另一方面是依照本发明的抗原结合蛋白用于制备药物组合物的用途。本发明的又一方面是用于制备包含依照本发明的抗原结合蛋白的药物组合物的方法。在另一方面，本发明提供了含有与药用载体一起配制的依照本发明的抗原结合蛋白的组合物，例如药物组合物。
本发明的另一方面是用于治疗癌症的所述药物组合物。
本发明的另一方面是用于治疗癌症的依照本发明的双特异性抗原结合蛋白。
本发明的另一方面是依照本发明的抗原结合蛋白用于制备供治疗癌症用的药物的用途。
本发明的另一方面是治疗患有癌症的患者的方法，其通过对需要此类治疗的所述患者施用依照本发明的抗原结合蛋白来进行。
如本文中所使用的，“药用载体”包括生理学相容的任何和所有溶剂、分散介质、涂层材料、抗细菌剂和抗真菌剂、等张剂和吸收延迟剂，等等。优选地，载体适合于静脉内、肌肉内、皮下、胃肠外、脊柱或表皮施用(例如通过注射或输注)。
可以通过本领域中已知的多种方法来施用本发明的组合物。如熟练技术人员会领会的，施用的路径和/或模式会随期望的结果而变化。为了通过某些施用路径来施用本发明的化合物，可能有必要用某种材料包被化合物，或者与某种材料共施用化合物以阻止其失活。例如，可以将化合物在合适的载体，例如脂质体或稀释剂中对受试者施用。药学可接受稀释剂包括盐水和水性缓冲溶液。药用载体包括无菌水溶液或分散体和供临场制备无菌可注射溶液或分散体用的无菌粉剂。对药学活性物质使用此类介质和药剂是本领域中已知的。
如本文中所使用的，短语“胃肠外施用”意指通常通过注射进行的与肠和表面施用不同的施用模式，并且包括但不限于静脉内、肌肉内、动脉内、鞘内、囊内、眶内、心内、皮内、腹膜内、经气管、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、脊柱内、硬膜外和胸骨内注射和输注。
如本文中所使用的，术语癌症指增殖性疾病，诸如淋巴瘤、淋巴细胞性白血病、肺癌、非小细胞肺(NSCL)癌、支气管肺泡细胞肺癌(bronchioloalviolarcell lung cancer)、骨癌、胰腺癌、皮肤癌、头颈癌(cancer of the head or neck)、皮肤或眼内黑素瘤、子宫癌、卵巢癌、直肠癌、肛区癌(cancer of the analregion)、胃癌(stomach cancer)、胃癌(gastric cancer)、结肠癌、乳腺癌、子宫癌、输卵管癌(carcinoma of the fallopian tubes)、子宫内膜癌(carcinoma of theendometrium)、宫颈癌(carcinoma of the cervix)、阴道癌(carcinoma of thevagina)、外阴癌(carcinoma of the vulva)、霍奇金氏病(Hodgkin’s Disease)、食管癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、前列腺癌、膀胱癌、肾或输尿管癌、肾细胞癌、肾盂癌(carcinoma ofthe renal pelvis)、间皮瘤、肝细胞癌、胆管癌(biliary cancer)、中枢神经系统(CNS)新生物、脊柱轴肿瘤(spinal axis tumor)、脑干胶质瘤、多形性成胶质细胞瘤(glioblastoma multiforme)、星形细胞瘤(astrocytoma)、施万细胞瘤(schwanomas)、室管膜瘤(ependymona)、髓母细胞瘤(medulloblastoma)、脑脊膜瘤(meningioma)、鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma)、垂体腺瘤(pituitary adenoma)和尤因肉瘤(Ewings sarcoma)，包括任何上述癌症的顽固性型式，或一种或多种上述癌症的组合。
这些组合物还可以含有佐剂诸如防腐剂、湿润剂、乳化剂和分散剂。可以通过无菌规程，见上文，及通过包括各种抗细菌剂和抗真菌剂，例如对羟基苯甲酸酯、三氯叔丁醇、酚、山梨酸等来确保阻止微生物的存在。还可能期望将等张剂，诸如糖、氯化钠等纳入组合物中。另外，可以通过包括延迟吸收的药剂诸如单硬脂酸铝和明胶来引起可注射药物形式的吸收延迟。
不管选择的施用路径，通过本领域技术人员已知的常规方法来将本发明的化合物(其可以以合适的水合形式使用)和/或本发明的药物组合物配制成药学可接受剂量形式。
可以改变活性成分在本发明的药物组合物中的实际剂量水平，从而获得对于实现特定患者的期望的治疗响应、组成、和施用模式有效的，而对患者无毒的活性成分量。选定的剂量水平会取决于多种药动学因素，包括所采用的本发明的特定组合物的活性、施用路径、施用时间、所采用的特定化合物的排泄速率、治疗的持续时间、与所采用的特定组合物组合使用的其它药物、化合物和/或材料、所治疗的患者的年龄、性别、重量、状况、一般健康和先前的医学史等医学领域公知的因素。
组合物必须是无菌的，而且是流体的，其程度使得组合物通过注射器可投递。在水外，载体优选地是等张缓冲盐水溶液。
可以例如通过使用涂层材料诸如卵磷脂、在分散体的情况中通过维持所要求的粒度、及通过使用表面活性剂来维持适当的流动性。在许多情况中，优选在组合物中包含等张剂(例如糖、多元醇诸如甘露醇或山梨醇、和氯化钠)。
如本文中所使用的，表述“细胞”、“细胞系”、和“细胞培养物”可互换使用，并且所有此类名称包括后代。如此，词语“转化体”和“经转化的细胞”包括原代主题细胞和自其衍生的培养物，而不考虑转移的次数。还应当理解，由于有意或无意的突变，所有后代在DNA内容上可能不是正好相同的。包括具有与在初始转化细胞中筛选的相同功能或生物学活性的变体后代。在意图独特的名称的情况中，其从上下文看会是明显的。
如本文中所使用的，术语“转化”指将载体/核酸转移入宿主细胞中的过程。若使用没有难以应付的细胞壁屏障的细胞作为宿主细胞，则例如通过磷酸钙沉淀法来实施转染，如Graham，F.，L.和Van der Eb，A.，J.，Virology 52(1973)456-467所描述的。然而，也可以使用其它用于将DNA导入细胞中的方法，诸如通过核注射或者通过原生质体融合来进行。若使用原核细胞或含有坚固细胞壁构造的细胞，则例如一种转染方法是使用氯化钙进行的钙处理，如Cohen，S.，N.等，PNAS.69(1972)2110-2114所描述的。
如本文中所使用的，“表达”指将核酸转录成mRNA的过程和/或随后将转录的mRNA(又称为转录物)翻译成肽、多肽、或蛋白质的过程。转录物和编码的多肽统称为基因产物。若多核苷酸是自基因组DNA衍生的，则真核细胞中的表达可以包括mRNA的剪接。
“载体”指将插入的核酸分子转移入宿主细胞中和/或在宿主细胞间转移的核酸分子，特别是自我复制的。该术语包括主要在将DNA或RNA插入细胞(例如，染色体整合)方面发挥功能的载体、主要在DNA或RNA复制方面发挥功能的复制载体、和在DNA或RNA的转录和/或翻译方面发挥功能的表达载体。还包括提供超过一种功能的载体，如所描述的。
“表达载体”指在导入合适的宿主细胞中时可以被转录并翻译成多肽的多核苷酸。“表达系统”通常指包含能发挥功能以产生期望的表达产物的表达载体的合适的宿主细胞。
提供以下实施例、序列表和图以帮助理解本发明，其实际范围在所附权利要求书中列出。应当理解，可以在不背离本发明的精神的前提下对所列规程做出修饰。
序列表的描述
SEQ ID NO：1 具有C端融合的经修饰Fab片段<VEGF>VH-CL域的未修饰重链<Ang-2>(CH1-CL交换)
SEQ ID NO：2 经修饰Fab片段<VEGF>VL-CH1域(CH1-CL交换)
SEQ ID NO：3 未修饰轻链<Ang-2>
SEQ ID NO：4 具有N端融合的经修饰Fab片段<VEGF>VH-CL域的未修饰重链<Ang-2>(CH1-CL交换)
SEQ ID NO：5 具有C端融合的未修饰Fab片段<Ang-2>VH-CH1域的经修饰重链<VEGF>(CH1-CL交换)
附图简述
图1 特异性结合第一抗原1的没有CH4域的全长抗体的示意性结构，所述全长抗体具有两对包含典型次序的可变和恒定域的重链和轻链。
图2a和2b 在CH1-VH链C端(图2a)或N端(图2b)具有肽连接头的特异性结合第二抗原2的典型的未修饰的Fab片段的示意性结构。
图3 特异性结合第一抗原1的全长抗体(图3a)和由错配所致的不想要的副产物(图3b，和图3c)的示意性结构，所述全长抗体已经将两个特异性结合第二抗原2的未修饰的Fab片段与其重链N端融合。
图4a、4b和4c 依照本发明的双特异性抗原结合蛋白的示意性结构，其中通过替换a)特异性结合第一抗原1的全长抗体的Fab片段中和/或b)特异性结合第二抗原2的两个额外的融合Fab片段抗体中的某些域来降低错配。图4a显示了双特异性抗原结合蛋白。图4b和4c显示了全长Fab片段和额外的Fab片段内VH/VL和/或CH1/CL域交换的所有组合，其导致具有降低的错配的依照本发明的双特异性抗原结合蛋白。
图5 识别Ang-2和VEGF的依照本发明的双特异性抗原结合蛋白(实施例1)的示意性结构。
图6 识别Ang-2和VEGF的依照本发明的双特异性抗原结合蛋白(实施例2)的示意性结构。
图7 识别Ang-2和VEGF的依照本发明的双特异性抗原结合蛋白(实施例3)的示意性结构。
实施例
材料和通用方法
关于人免疫球蛋白轻链和重链的核苷酸序列的一般信息参见：Kabat，E.A.等，Sequences of Proteins of Immunological Interest，第5版，Public HealthService，National Institutes of Health，Bethesda，MD(1991)。抗体链的氨基酸依照EU编号方式(Edelman，G.M.等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 63(1969)78-85；Kabat，E.A.等，Sequences of Proteins of Immunological Interest，第5版，PublicHealth Service，National Institutes of Health，Bethesda，MD，(1991))编号并提及。
重组DNA技术
使用标准的方法来操作DNA，如记载于Sambrook，J.等，Molecular cloning：A laboratory manual；Cold Spring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor，New York，1989的。依照制造商的指令使用分子生物学试剂。
基因合成
自通过化学合成生成的寡核苷酸制备期望的基因区段。通过寡核苷酸的退火和连接，包括PCR扩增，随后经由指定的限制性位点，例如KpnI/SacI或AscI/PacI克隆入基于pPCRScript(Stratagene)的pGA4克隆载体中来装配基因区段，其侧翼有单一的限制性内切核酸酶切割位点。通过DNA测序来确认亚克隆的基因片段的DNA序列。依照给定的规格在Geneart(Regensburg，Germany)定购基因合成片段。
DNA序列测定
通过在MediGenomix GmbH(Martinsried，Germany)或Sequiserve GmbH(Vaterstetten，Germany)实施的双链测序来测定DNA序列。DNA和蛋白质序列分析及序列数据管理
使用GCG(Genetics Computer Group，Madison，Wisconsin)软件包第10.2版和Infomax的Vector NT1 Advance套件第8.0版来进行序列创建、定位、分析、注释和例示。
表达载体
对于所描述的双特异性四价抗体的表达，应用用于瞬时表达(例如在HEK293EBNA或HEK293-F细胞中)的表达质粒的变体，其基于具有或没有CMV-内含子A启动子的cDNA构造或基于具有CMV启动子的基因组构造。
在抗体表达盒外，载体含有：
-复制起点，其容许此质粒在大肠杆菌中复制，和
-β-内酰胺酶基因，其在大肠杆菌中赋予氨苄青霉素抗性。
抗体基因的转录单元由下列元件构成：
-5’端的独特限制性位点
-来自人巨细胞病毒的立即早期增强子和启动子，
-在cDNA构造的情况中接着有内含子A序列，
-人抗体基因的5’-非翻译区，
-免疫球蛋白重链信号序列，
-人双特异性四价抗体链(野生型或具有域交换)，其作为cDNA或作为具有免疫球蛋白外显子-内含子构造的基因组构造
-具有多腺苷酸化信号序列的3’非翻译区，和
-3’端的独特限制性位点。
通过PCR和/或基因合成来生成如下文所描述的包含所描述的抗体链的融合基因，并用已知重组方法和技术例如使用各载体中的独特限制性位点通过连接相符的核酸区段来装配。通过DNA测序来确认亚克隆的核酸序列。为了瞬时转染，通过来自经转化的大肠杆菌培养物的质粒制备物来制备更大量的质粒(Nucleobond AX，Macherey-Nagel)。
细胞培养技术
使用标准的细胞培养技术，如记载于Current Protocols in Cell Biology(2000)，Bonifacino，J.S.，Dasso，M.，Harford，J.B.，Lippincott-Schwartz，J.和Yamada，K.M.(编)，John Wiley & Sons，Inc的。
通过在贴壁生长的HEK293-EBNA中或在悬浮生长的HEK29-F细胞中瞬时共转染各三种表达质粒来表达双特异性四价抗体，如下文所描述的。HEK293-EBNA系统中的瞬时转染
通过在补充有10％超低IgG FCS(胎牛血清，Gibco)、2mM L-谷氨酰胺(Gibco)、和250μg/ml遗传霉素(Gibco)的DMEM(Dulbecco氏改良Eagle氏培养基，Gibco)中培养的贴壁生长的HEK293-EBNA细胞(表达埃巴病毒核抗原的人胚肾细胞系293；美国典型培养物保藏中心保藏号ATCC#CRL-10852，Lot.959218)中瞬时共转染各三种表达质粒(例如，编码经修饰的重链，及相应的轻链和经修饰的轻链)来表达双特异性四价抗体。对于转染，以FuGENETM试剂(μl)与DNA(μg)的比率为4∶1(范围为3∶1至6∶1)使用FuGENETM6转染试剂(Roche Molecular Biochemicals)。使用(经修饰的和野生型)轻链和经修饰的重链编码质粒的摩尔比率为1∶1∶1(等摩尔)(其范围为1∶1∶2至2∶2∶1)分别自各质粒表达蛋白质。在第3天用加至4mM的L-谷氨酰胺、葡萄糖[Sigma]和NAA[Gibco]饲养细胞。在转染后第5天至第11天通过离心来收获含有双特异性四价抗体的细胞培养物上清液，并于-20℃贮存。关于人免疫球蛋白在例如HEK293细胞中的重组表达的一般信息参见：Meissner，P.等，Biotechnol.Bioeng.75(2001)197-203。
HEK293-F系统中的瞬时转染
或者，使用HEK293-F系统(Invitrogen)依照制造商的指令通过各质粒(例如编码经修饰的重链，及相应的轻链和经修饰的轻链)的瞬时转染来生成双特异性四价抗体。简言之，用如上文所描述的三种表达质粒和293fectin或Fectin(Invitrogen)的混合物转染在无血清FreeStyle 293表达培养基(Invitrogen)中在摇瓶中或在搅动式发酵罐中悬浮生长的HEK293-F细胞(Invitrogen)。对于2L摇瓶(Corning)，以1.0E*6个细胞/mL的密度在600mL中接种HEK293-F细胞，并以120rpm，8％CO2温育。次日，以约1.5E*6个细胞/mL的细胞密度用约42mL A)20mL具有600μg总质粒DNA(1μg/mL)(编码等摩尔比率的经修饰的重链、相应的轻链和相应的经修饰的轻链)的Opti-MEM(Invitrogen)和B)20ml Opti-MEM+1.2mL 293 Fectin或Fectin(2μl/mL)的混合物转染细胞。依照葡萄糖消耗，在发酵过程期间添加葡萄糖溶液。在5-10天后收获含有分泌的抗体的上清液，并自上清液直接纯化抗体，或者将上清液冷冻并贮存。
蛋白质测定
使用依照Pace，C.，N.等，Protein Science 4(1995)2411-1423基于氨基酸序列计算的摩尔消光系数，通过测定280nm的光密度(OD)来测定纯化的双特异性四价抗体和衍生物的蛋白质浓度。
上清液中的抗体浓度测定
通过用蛋白A琼脂糖珠(Roche)的免疫沉淀来评估细胞培养物上清液中的双特异性四价抗体的浓度。将60μL蛋白A琼脂糖珠在TBS-NP40(50mMTris，pH 7.5，150mM NaCl，1％Nonidet-P40)中清洗三次。随后，将1-15mL细胞培养物上清液应用于在TBS-NP40中预平衡的蛋白A琼脂糖珠。于室温温育1小时后，将珠在Ultrafree-MC-过滤柱(Amicon]上用0.5mL TBS-NP40清洗一次，用0.5mL 2x磷酸盐缓冲盐水(2xPBS，Roche)清洗两次，并用0.5mL 100mM柠檬酸钠pH 5，0短暂清洗4次。通过添加35μl
LDS样品缓冲液(Invitrogen)来洗脱结合的抗体。分别将样品的一半与
样品还原剂组合或者保持未还原，并于70℃加热10分钟。因此，将5-30μl应用于4-12％
Bis-Tris SDS-PAGE(Invitrogen)(对于非还原性SDS-PAGE用MOPS缓冲液，而对于还原性SDS-PAGE用含
抗氧化剂运行缓冲液添加剂(Invitrogen)的MES缓冲液)，并用考马斯蓝染色。
通过亲和HPLC层析来定量测量细胞培养物上清液中的双特异性四价抗体的浓度。简言之，在Agilent HPLC 1100系统上，将含有结合蛋白A的抗体和衍生物的细胞培养物上清液应用于200mM KH2PO4、100mM柠檬酸钠，pH7.4中的Applied Biosystems Poros A/20柱，并用200mM NaCl、100mM柠檬酸，pH 2，5自基质洗脱。通过UV吸光度和峰面积级分来量化洗脱的蛋白质。纯化的标准IgG1抗体充当标准品。
或者，通过三明治式-IgG-ELISA来测量细胞培养物上清液中的双特异性四价抗体的浓度。简言之，用100μL/孔0.1μg/mL的生物素化的抗人IgG捕捉分子F(ab’)2<h-Fcγ>BI(Dianova)包被StreptaWell高结合链霉亲合素A-96孔微量滴定板(Roche)，于室温持续1小时或者备选地于4℃过夜，随后用200μL/孔PBS、0.05％Tween(PBST，Sigma)清洗三次。将100μL/孔含有各抗体的细胞培养物上清液在PBS(Sigma)中的稀释系列添加至孔，并在微量滴定板摇动器上于室温温育1-2小时。将孔用200μL/孔PBST清洗三次，并用100μl0.1μg/mL的F(ab‘)2<hFcγ>POD(Dianova)作为检测抗体在微量滴定板摇动器上于室温检测结合的抗体达1-2小时。用200μL/孔PBST将未结合的检测抗体洗掉三次，并通过添加100μL ABTS/孔来检测结合的检测抗体。在Tecan Fluor光谱仪上以405nm的测量波长(参照波长492nm)实施吸光度测定。
蛋白质纯化
参考标准的方案自过滤的细胞培养物上清液纯化蛋白质。简言之，将双特异性四价抗体应用于蛋白A Sepharose柱(GE healthcare)，并用PBS清洗。在pH 2.8实现双特异性四价抗体的洗脱，接着立即中和样品。通过在PBS中或在20mM组氨酸、150mM NaCl pH 6.0中的大小排阻层析(Superdex 200，GEHealthcare)将聚集的蛋白质与单体抗体分离。将单体级分合并，若需要的话，使用例如MILLIPORE Amicon Ultra(30MWCO)离心浓缩器来浓缩，冷冻，并于-20℃或-80℃贮存。为随后的蛋白质分析学和分析表征(例如通过SDS-PAGE、大小排阻层析或质谱术进行)提供样品的一部分。
SDS-PAGE
依照制造商的指令，使用
预制凝胶系统(Invitrogen)。具体地，使用10％或4-12％
Bis-TRIS预制凝胶(pH 6.4)和
MES(还原性凝胶，具有
抗氧化剂运行缓冲液添加剂)或MOPS(非还原性凝胶)运行缓冲液。
分析用大小排阻层析
通过HPLC层析来实施用于测定双特异性四价抗体的聚集和寡聚状态的大小排阻层析。简言之，将蛋白A纯化的抗体应用于Agilent HPLC 1100系统上在300mM NaCl、50mM KH2PO4/K2HPO4，pH 7.5中的Tosoh TSKgelG3000SW柱，或者应用于Dionex HPLC-系统上在2x PBS中的Superdex 200柱(GE Healthcare)。通过UV吸光度和峰面积级分来量化洗脱的蛋白质。BioRad凝胶过滤标准品151-1901充当标准品。
质谱术
经由电喷射离子化质谱术(ESI-MS)来测定并确认双特异性四价抗体的总脱糖基化质量。简言之，将100μg纯化的抗体用50mU在100mMKH2PO4/K2HPO4，pH 7中的N-糖苷酶F(PNGaseF，ProZyme)于37℃以多至2mg/ml的蛋白质浓度脱糖基化12-24小时，随后经由Sephadex G25柱(GEHealthcare)上的HPLC脱盐。脱糖基化并还原后，通过ESI-MS来测定经修饰的重链、轻链和经修饰的轻链各自的质量。简言之，将115μl中的50μg双特异性四价抗体与60μl 1M TCEP和50μl 8M盐酸胍一起温育，随后脱盐。在装备有NanoMate源的Q-Star Elite MS系统上经由ESI-MS来测定总质量和还原的重链和轻链的质量。
VEGF结合ELISA
在ELISA测定法中用全长VEGF165-His蛋白(R&D Systems)来评估双特异性四价抗体的结合特性。出于此目的，用100μl 2μg/mL在PBS中的重组人VEGF165(R&D Systems)包被Falcon聚苯乙烯清洁增强型微量滴定板，于室温持续2小时或于4℃过夜。将孔用300μl PBST(0，2％Tween 20)清洗三次，并用200μl 2％BSA 0，1％Tween 20于室温封闭30分钟，随后用300μl PBST清洗三次。将100μL/孔纯化的双特异性四价抗体在PBS(Sigma)中的系列稀释添加至孔，并在微量滴定板摇动器上于室温温育1小时。将孔用300μl PBST(0，2％Tween 20)清洗三次，并用100μL/孔0.1μg/ml在2％BSA 0，1％Tween 20中的F(ab‘)<hFcgamma>POD(Immuno research)作为检测抗体在微量滴定板摇动器上于室温检测结合的抗体达1小时。将未结合的检测抗体用300μL/孔PBST洗掉三次，并通过添加100μL ABTS/孔来检测结合的检测抗体。以405nm的测量波长(参照波长492nm)在Tecan Fluor光谱仪上实施吸光度测定。
VEGF结合：通过表面等离振子共振(Biacore)于37℃对VEGF结合的动力学表征
为了进一步确证ELISA发现，依照以下方案在Biacore T100仪上使用表面等离振子共振技术来定量分析双特异性四价抗体对VEGF的结合，并使用T100软件包来分析：简言之，经由结合山羊抗人IgG(JIR 109-005-098)在CM5-芯片上捕获双特异性四价抗体。如下使用标准的氨基偶联通过氨基偶联来固定化捕捉抗体：HBS-N缓冲液充当运行缓冲液，以700个RU的配体密度为目标通过EDC/NHS的混合物来完成活化。将捕捉抗体在偶联缓冲液NaAc，pH5.0中稀释，c＝2μg/mL，最后通过注射1M乙醇胺来封闭仍活化的羧基基团。以5μL/分钟的流动和c＝10nM(用运行缓冲液+1mg/mL BSA稀释)完成双特异性四价<VEGF>抗体的捕获；应当达到约30个RU的捕获水平。使用rhVEGF(rhVEGF，R&D-Systems产品目录编号293-VE)作为分析物。于25℃或37℃在作为运行缓冲液的PBS+0.005％(v/v)Tween20中实施VEGF与双特异性四价<VEGF>抗体结合的动力学表征。以300-0.29nM的rhVEGF浓度系列以50μL/分钟的流动及80秒结合时间和1200秒解离时间注射样品。在每次分析物循环后用10mM甘氨酸pH 1.5和60秒接触时间实施游离的捕捉抗体表面的再生。通过使用通常的双重参照方法来计算动力学常数(对照参照：rhVEGF对捕捉分子山羊抗人IgG的结合，测量流动池上的空白，rhVEGF浓度“0”，模式：朗缪尔结合1∶1，(由于捕捉抗体结合，Rmax设置为局部))。
Ang-2结合ELISA
在ELISA测定法中用全长Ang-2-His蛋白(R&D Systems)评估双特异性四价抗体的结合特性。出于此目的，用100μl 1μg/mL在PBS中的重组人Ang-2(R&D Systems，无载体)包被Falcon聚苯乙烯清洁增强型微量滴定板，于室温持续2小时或于4℃过夜。将孔用300μl PBST(0，2％Tween 20)清洗三次，并用200μl 2％BSA 0，1％Tween 20于室温封闭30分钟，随后用300μl PBST清洗三次。将100μL/孔纯化的双特异性四价抗体在PBS(Sigma)中的系列稀释添加至孔，并在微量滴定板摇动器上于室温温育1小时。将孔用300μl PBST(0，2％Tween 20)清洗三次，并用100μL/孔0.1μg/ml在2％BSA 0，1％Tween 20中的F(ab‘)<hk>POD(Biozol产品目录编号206005)作为检测抗体在微量滴定板摇动器上于室温检测结合的抗体达1小时。将未结合的检测抗体用300μL/孔PBST洗掉三次，并通过添加100μL ABTS/孔来检测结合的检测抗体。以405nm的测量波长(参照波长492nm)在Tecan Fluor光谱仪上实施吸光度测定。
Ang-2结合BIACORE
使用BIACORE T100仪(GE Healthcare Biosciences AB，Uppsala，Sweden)通过表面等离振子共振来调查双特异性四价抗体对人Ang-2的结合。简言之，对于亲和力测量，经由胺偶联将山羊<hIgG-Fcγ>多克隆抗体固定化于CM5芯片上以呈现针对人Ang-2的双特异性四价抗体。在HBS缓冲液(HBS-P(10mMHEPES、150mM NaCl、0.005％Tween 20，ph 7.4)，25℃中测量结合。以在溶液中的多个浓度添加纯化的Ang-2-His(R&D Systems或内部纯化的)。通过3分钟的Ang-2注射来测量结合；通过用HBS缓冲液清洗芯片表面达3分钟来测量解离，并使用1∶1朗缪尔结合模式来评估KD值。由于Ang-2制备物的异质性，没能观察到1∶1结合；如此，KD值仅是相对估值。自样品曲线扣除阴性对照数据(例如缓冲液曲线)以校正系统固有基线漂移并用于噪声信号降低。使用Biacore T100评估软件第1.1.1版来分析传感图(sensorgram)并计算亲和力数据。或者，可以经由五His抗体(五His-Ab无BSA，Qiagen No.34660)以2000-1700个RU的捕捉水平捕捉Ang-2，所述五His抗体经由胺偶联(无BSA)固定化于CM5芯片上(参见下文)。
Ang-2-VEGF桥接ELISA
在ELISA测定法中用固定化的全长VEGF165-His蛋白(R&D Systems)和用于检测结合的双特异性抗体的人Ang-2-His蛋白(R&D Systems)来评估双特异性四价抗体的结合特性。仅双特异性四价<VEGF-Ang-2>抗体能够同时结合VEGF和Ang-2，并且如此桥接两种抗原，而单特异性“标准”IgG1抗体不能同时结合VEGF和Ang-2(图7)。
出于此目的，用100μl 2μg/mL在PBS中的重组人VEGF165(R&D Systems)包被Falcon聚苯乙烯清洁增强型微量滴定板，于室温持续2小时或于4℃过夜。将孔用300μl PBST(0，2％Tween 20)清洗三次，并用200μl 2％BSA 0，1％Tween 20于室温封闭30分钟，随后用300μl PBST清洗三次。将100μL/孔纯化的双特异性四价抗体在PBS(Sigma)中的系列稀释添加至孔，并在微量滴定板摇动器上于室温温育1小时。将孔用300μl PBST(0，2％Tween 20)清洗三次，并通过添加100μl 0.5μg/ml在PBS中的人Ang-2-His(R&D Systems)来检测结合的抗体。将孔用300μl PBST(0，2％Tween 20)清洗三次，并用100μl 0.5μg/mL<Ang-2>mIgG1-生物素抗体(BAM0981，R&D Systems)于室温检测结合的Ang-2达1小时。将未结合的检测抗体用300μl PBST(0，2％Tween 20)洗掉三次，并通过添加100μl在封闭缓冲液中以1∶4稀释的1∶2000链霉亲合素-POD缀合物(Roche Diagnostics GmbH，产品目录编号11089153)于室温检测结合的抗体达1小时。将未结合的链霉亲合素-POD缀合物用300μl PBST(0，2％Tween 20)洗掉3-6次，并通过添加100μL ABTS/孔来检测结合的链霉亲合素-POD缀合物。在Tecan Fluor光谱仪上以405nm的测量波长(参照波长492nm)实施吸光度测定。
通过Biacore证明双特异性四价抗体<VEGF-Ang-2>对VEGF-A和Ang-2的同时结合
为了进一步确证来自桥接ELISA的数据，依照以下方案在Biacore T100仪上使用表面等离振子共振技术，建立别的测定法来确认对VEGF和Ang-2的同时结合，并使用T100软件包(T100Control，第2.01版，T100Evaluation，第2.01版，T100Kinetics Summary，第1.01版)来分析：经由五His抗体(五His-Ab无BSA，Qiagen No.34660)在PBS，0.005％(v/v)Tween20运行缓冲液中以2000-1700个RU的捕获水平捕获Ang-2，所述五His抗体经由胺偶联(无BSA)固定化于CM5芯片上。HBS-N缓冲液充当偶联过程中的运行缓冲液，通过EDC/NHS的混合物完成活化。将五His-Ab无B SA捕捉抗体在偶联缓冲液NaAc，pH 4.5中稀释，c＝30μg/mL，最后通过注射1M乙醇胺来封闭仍活化的羧基基团；测试5000和17000个RU的配体密度。以5μL/分钟的流动用运行缓冲液+1mg/mL BSA稀释，具有500nM浓度的Ang-2被五His-Ab捕获。随后，通过与rhVEGF一起温育，并形成三明治式复合物来证明<Ang-2，VEGF>双特异性四价抗体对Ang-2及对VEGF的结合。出于此目的，将双特异性四价<VEGF-Ang-2>抗体以50μL/分钟的流动和100nM的浓度(用运行缓冲液+1mg/mL BSA稀释)结合Ang-2，并通过以50μL/分钟的流动和150nM的VEGF浓度与PBS+0.005％(v/v)Tween20运行缓冲液中的VEGF(rhVEGF，R&D-Systems产品目录编号293-VE)一起温育来检测同时结合。结合时间120秒，解离时间1200秒。每个循环后用2x10mM甘氨酸pH 2.0以50μL/分钟的流动和60秒接触时间来完成再生。使用通常的双重参照(对照参照：双特异性抗体和rhVEGF对捕捉分子五HisAb的结合)来校正传感图。用rhVEGF浓度“0”测量每种抗体的空白。
HEK293-Tie2细胞系的生成
为了测定<Ang-2，VEGF>双特异性四价抗体干扰Ang-2刺激的Tie2磷酸化及Ang-2对细胞上的Tie2的结合，生成重组HEK293-Tie细胞系。简言之，使用Fugene(Roche Applied Science)作为转染试剂将在CMV启动子和新霉素抗性标志物控制下编码全长人Tie2的基于pcDNA3的质粒(RB22-pcDNA3Topo hTie2)转染入HEK293细胞(ATCC)中，并在DMEM 10％FCS，500μg/mlG418中选择抗性细胞。经由克隆圆筒分离个别的克隆，随后通过FACS来分析Tie2表达。克隆22鉴定为即使在没有G418的情况中也具有高的且稳定的Tie2表达的克隆(HEK293-Tie2克隆22)。随后，使用HEK293-Tie2克隆22来进行细胞测定法：Ang-2诱导的Tie2磷酸化和Ang-2细胞配体结合测定法。
Ang-2诱导的Tie2磷酸化测定法
依照以下测定法原理来测量<Ang-2，VEGF>双特异性四价抗体对Ang-2诱导的Tie2磷酸化的抑制。在没有或存在Ang-2抗体的情况中用Ang-2刺激HEK293-Tie2克隆22达5分钟，并通过三明治式ELISA来量化P-Tie2。简言之，将每孔2x105个HEK293-Tie2克隆22细胞在经聚-D-赖氨酸包被的96孔微量滴定板上在100μl DMEM、10％FCS、500μg/ml遗传霉素中培养过夜。次日，在微量滴定板中制备<Ang-2，VEGF>双特异性四价抗体的滴定行(4倍浓缩的，75μl终体积/孔，一式两份)，并将其与75μl Ang-2(R&D systems#623-AN]稀释(3.2μg/ml作为4倍浓缩溶液)混合。将抗体和Ang-2于室温预温育15分钟。将100μl混合物添加至HEK293-Tie2克隆22细胞(与1mM NaV3O4，Sigma#S6508一起预温育5分钟)，并于37℃温育5分钟。随后，将细胞用每孔200μl冰冷的PBS+1mM NaV3O4来清洗，并通过添加冰上的每孔120μl裂解缓冲液(20mM Tris，pH 8.0、137mM NaCl、1％NP-40、10％甘油、2mM EDTA、1mMNaV3O4、1mM PMSF和10μg/ml抑肽酶(Aprotinin))来裂解。将细胞于4℃在微量滴定板摇动器上裂解30分钟，并在没有先前离心的情况中及在没有总蛋白质测定的情况中将100μl溶胞物直接转移入p-Tie2 ELISA微量滴定板(R&DSystems，R&D#DY990)中。依照制造商的指令来量化P-Tie2量，并使用Excel的XLfit4分析插件程序(剂量响应一位点，205型)来测定抑制的IC50值。IC50值可以在一个实验内比较，但是在实验间可能存在变化。
VEGF诱导的HUVEC增殖测定法
选择VEGF诱导的HUVEC(人脐静脉内皮细胞，Promocell #C-12200)增殖以测量<Ang-2，VEGF>双特异性四价抗体的细胞功能。简言之，将每96孔5000个HUVEC细胞(低传代数目，小于等于5次传代)在经胶原I包被的BD Biocoat胶原I 96孔微量滴定板(BD #354407/35640)中在100μl饥饿培养基(EBM-2内皮基础培养基2、Promocell #C-22211，0.5％FCS、青霉素/链霉素)中温育过夜。将变化浓度的<Ang-2，VEGF>双特异性四价抗体与rhVEGF(30ngl/ml终浓度，BD#354107)混合，并于室温预温育15分钟。随后，将混合物添加至HUVEC细胞，并将它们于37℃，5％CO2一起温育72小时。在分析当天，将平板平衡至室温达30分钟，并使用CellTiter-GloTM发光细胞存活力测定试剂盒依照手册(Promega，#G7571/2/3)来测定细胞存活力/增殖。在光谱仪中测定发光。
实施例1
识别Ang-2和VEGF-A的双特异性和四价抗体的生成、表达、纯化和表征
在第一个实施例中，通过经由(G4S)4-连接头将针对VEGF-A的VH-CL域融合物与识别Ang-2的抗体的重链C端融合(SEQ1或相应的IgG1同种异型)来生成在识别Ang-2和VEGF-A的各抗体链间没有接头的双特异性四价抗体。为了获得双特异性四价抗体，将此重链构建体与编码Ang-2抗体的相应轻链(SEQ3)和识别VEGF-A的VL-CH1域融合物(SEQ2)的质粒共表达。图5中给出了相应抗体的方案。
通过经典的分子生物学技术在通用方法部分中所描述的那样生成双特异性四价抗体，并在HEK293F细胞中瞬时表达，如上文所描述的。随后，通过蛋白A亲和层析和大小排阻层析的组合来自上清液将其纯化。在身份方面(通过质谱术)及在分析特征诸如纯度(通过SDS-PAGE)、单体含量和稳定性方面表征所获得的产物。
这些数据显示了双特异性四价抗体可以以良好的产量生成，而且是稳定的。
随后，通过上文所描述的ELISA和Biacore测定法来研究对Ang-2和VEGF-A的结合及同时结合，并分析功能特性诸如对Tie2磷酸化的抑制和对VEGF诱导的HUVEC增殖的抑制，显示生成的双特异性四价抗体能够结合Ang-2和VEGF-A，并同时阻断它们的活性。
实施例2
识别Ang-2和VEGF-A的双特异性和四价抗体的生成、表达、纯化和表征
在第二个实施例中，通过经由(G4S)4-连接头将针对VEGF-A的VH-CL域融合物与识别Ang-2的抗体的重链N端融合(SEQ4或相应的IgG1同种异型)来生成在识别Ang-2和VEGF-A的各抗体链间没有接头的双特异性四价抗体。为了获得双特异性四价抗体，将此重链构建体与编码Ang-2抗体的相应轻链(SEQ3)和识别VEGF-A的VL-CH1域融合物(SEQ2)的质粒共表达。图6中给出了相应抗体的方案。
通过经典的分子生物学技术在通用方法部分中所描述的那样生成双特异性四价抗体，并在HEK293F细胞中瞬时表达，如上文所描述的。随后，通过蛋白A亲和层析和大小排阻层析的组合来自上清液将其纯化。在身份方面(通过质谱术)及在分析特征诸如纯度(通过SDS-PAGE)、单体含量和稳定性方面表征所获得的产物。
这些数据显示了双特异性四价抗体可以以良好的产量生成，而且是稳定的。
随后，通过上文所描述的ELISA和Biacore测定法来研究对Ang-2和VEGF-A的结合及同时结合，并分析功能特性诸如对Tie2磷酸化的抑制和对VEGF诱导的HUVEC增殖的抑制，显示生成的双特异性四价抗体能够结合Ang-2和VEGF-A，并同时阻断它们的活性。
实施例3
识别Ang-2和VEGF-A的双特异性和四价抗体的生成、表达、纯化和表征
在第三个实施例中，通过经由(G4S)4-连接头将针对Ang-2的VH-CH1Fab域与识别VEGF的CH1-CL交换抗体的重链C端融合(SEQ5或相应的IgG1同种异型)来生成在识别Ang-2和VEGF-A的各抗体链间没有接头的双特异性四价抗体。为了获得双特异性四价抗体，将此重链构建体与编码Ang-2抗体的相应轻链(SEQ3)和识别VEGF-A的VL-CH1域融合物(SEQ2)的质粒共表达。图7中给出了相应抗体的方案。
通过经典的分子生物学技术在通用方法部分中所描述的那样生成双特异性四价抗体，并在HEK293F细胞中瞬时表达，如上文所描述的。随后，通过蛋白A亲和层析和大小排阻层析的组合来自上清液将其纯化。在身份方面(通过质谱术)及在分析特征诸如纯度(通过SDS-PAGE)、单体含量和稳定性方面表征所获得的产物。
这些数据显示了双特异性四价抗体可以以良好的产量生成，而且是稳定的。
随后，通过上文所描述的ELISA和Biacore测定法来研究对Ang-2和VEGF-A的结合及同时结合，并分析功能特性诸如对Tie2磷酸化的抑制和对VEGF诱导的HUVEC增殖的抑制，显示生成的双特异性四价抗体能够结合Ang-2和VEGF-A，并同时阻断它们的活性。
Claims (13)
1.一种双特异性抗原结合蛋白，其包含：
a)抗体的两条轻链和两条重链，所述抗体特异性结合第一抗原并包含两个Fab片段；
b)特异性结合第二抗原的抗体的两个额外的Fab片段，其中所述额外的Fab片段经由肽连接头在a)的重链的C或N端融合；
其中在所述Fab片段中，实施下列修饰：
i)在a)的两个Fab片段中，或者在b)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
和/或
恒定域CL和CH1彼此替换，
ii)在a)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
及
恒定域CL和CH1彼此替换，
且
在b)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
或
恒定域CL和CH1彼此替换，
iii)在a)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
或
恒定域CL和CH1彼此替换，
且
在b)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
及
恒定域CL和CH1彼此替换，
iv)在a)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
且
在b)的两个Fab片段中，
恒定域CL和CH1彼此替换，
或
v)在a)的两个Fab片段中，
恒定域CL和CH1彼此替换，
且
在b)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换。
2.依照权利要求1的双特异性抗原结合蛋白，其中所述额外的Fab片段经由肽连接头与a)的重链的C端，或与a)的重链的N端融合。
3.依照权利要求1或2的双特异性抗原结合蛋白，其特征在于：
在所述Fab片段中，实施下列修饰：
i)在a)的两个Fab片段中，或者在b)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
和/或
恒定域CL和CH1彼此替换。
4.依照权利要求3的双特异性抗原结合蛋白，其特征在于：
在所述Fab片段中，实施下列修饰：
i)在a)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
和/或
恒定域CL和CH1彼此替换。
5.依照权利要求4的双特异性抗原结合蛋白，其特征在于：
在所述Fab片段中，实施下列修饰：
i)在a)的两个Fab片段中，
恒定域CL和CH1彼此替换。
6.依照权利要求3的双特异性抗原结合蛋白，其特征在于：
在所述Fab片段中，实施下列修饰：
i)在b)的两个Fab片段中，
可变域VL和VH彼此替换，
和/或
恒定域CL和CH1彼此替换。
7.依照权利要求6的双特异性抗原结合蛋白，其特征在于：
在所述Fab片段中，实施下列修饰：
i)在b)的两个Fab片段中，
恒定域CL和CH1彼此替换。
8.一种用于制备依照权利要求1至7中任一项的双特异性抗原结合蛋白的方法，包括下列步骤：
a)用包含编码依照权利要求1至7中任一项的双特异性抗原结合蛋白的核酸分子的载体转化宿主细胞，
b)在容许所述抗原结合蛋白分子合成的条件下培养所述宿主细胞；并
c)自所述培养物回收所述抗原结合蛋白分子。
9.包含依照权利要求8的载体的宿主细胞。
10.一种药物组合物，其包含依照权利要求1至7中任一项的双特异性抗原结合蛋白和至少一种药学可接受赋形剂。
11.依照权利要求1至7中任一项的双特异性抗原结合蛋白，其用于治疗癌症。
12.依照权利要求1至7中任一项的双特异性抗原结合蛋白在制造用于治疗癌症的药物中的用途。
13.一种用于治疗需要治疗的患者的方法，其特征在于对所述患者施用治疗有效量的依照权利要求1至7中任一项的双特异性抗原结合蛋白。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP09007857 | 2009-06-16 | ||
| EP09007857.7 | 2009-06-16 | ||
| PCT/EP2010/003559 WO2010145792A1 (en) | 2009-06-16 | 2010-06-14 | Bispecific antigen binding proteins |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102459345A true CN102459345A (zh) | 2012-05-16 |
| CN102459345B CN102459345B (zh) | 2014-10-01 |
Family
ID=41168518
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201080026530.3A Active CN102459345B (zh) | 2009-06-16 | 2010-06-14 | 双特异性抗原结合蛋白 |
Country Status (26)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US9676845B2 (zh) |
| EP (2) | EP2443154B1 (zh) |
| JP (1) | JP5689463B2 (zh) |
| KR (1) | KR101431345B1 (zh) |
| CN (1) | CN102459345B (zh) |
| AR (1) | AR077088A1 (zh) |
| AU (1) | AU2010262129A1 (zh) |
| BR (1) | BRPI1008145B8 (zh) |
| CA (1) | CA2764392C (zh) |
| CL (1) | CL2011003148A1 (zh) |
| CY (1) | CY1115091T1 (zh) |
| DK (1) | DK2443154T3 (zh) |
| ES (1) | ES2449623T3 (zh) |
| HK (1) | HK1170506A1 (zh) |
| HR (1) | HRP20140258T1 (zh) |
| IL (1) | IL216266A0 (zh) |
| MX (1) | MX2011013615A (zh) |
| PE (1) | PE20120549A1 (zh) |
| PL (1) | PL2443154T3 (zh) |
| PT (1) | PT2443154E (zh) |
| RU (1) | RU2573914C2 (zh) |
| SG (1) | SG176886A1 (zh) |
| SI (1) | SI2443154T1 (zh) |
| TW (1) | TW201102087A (zh) |
| WO (1) | WO2010145792A1 (zh) |
| ZA (1) | ZA201108536B (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104582736A (zh) * | 2012-06-21 | 2015-04-29 | 印第安纳大学研究及科技有限公司 | Fc效应子功能改变的肠降血糖素受体配体多肽Fc区融合多肽和缀合物 |
| CN105189557A (zh) * | 2013-03-15 | 2015-12-23 | 默克专利有限公司 | 四价双特异性抗体 |
Families Citing this family (249)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7658924B2 (en) * | 2001-10-11 | 2010-02-09 | Amgen Inc. | Angiopoietin-2 specific binding agents |
| US20090162359A1 (en) | 2007-12-21 | 2009-06-25 | Christian Klein | Bivalent, bispecific antibodies |
| US9266967B2 (en) * | 2007-12-21 | 2016-02-23 | Hoffmann-La Roche, Inc. | Bivalent, bispecific antibodies |
| RU2598248C2 (ru) | 2009-04-02 | 2016-09-20 | Роше Гликарт Аг | Полиспецифичные антитела, включающие антитела полной длины и одноцепочечные фрагменты fab |
| SG175077A1 (en) | 2009-04-07 | 2011-11-28 | Roche Glycart Ag | Trivalent, bispecific antibodies |
| PE20120540A1 (es) | 2009-05-27 | 2012-05-09 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos triespecificos o tetraespecificos |
| US9676845B2 (en) | 2009-06-16 | 2017-06-13 | Hoffmann-La Roche, Inc. | Bispecific antigen binding proteins |
| US8703132B2 (en) * | 2009-06-18 | 2014-04-22 | Hoffmann-La Roche, Inc. | Bispecific, tetravalent antigen binding proteins |
| EP2478013B1 (en) | 2009-09-16 | 2018-10-24 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Coiled coil and/or tether containing protein complexes and uses thereof |
| AR080793A1 (es) | 2010-03-26 | 2012-05-09 | Roche Glycart Ag | Anticuerpos biespecificos |
| WO2011147834A1 (en) | 2010-05-26 | 2011-12-01 | Roche Glycart Ag | Antibodies against cd19 and uses thereof |
| JP2013538338A (ja) | 2010-07-19 | 2013-10-10 | エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト | 抗癌治療への応答可能性の増大した患者を同定する方法 |
| EP2596361A1 (en) | 2010-07-19 | 2013-05-29 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Method to identify a patient with an increased likelihood of responding to an anti-cancer therapy |
| WO2012010582A1 (en) | 2010-07-21 | 2012-01-26 | Roche Glycart Ag | Anti-cxcr5 antibodies and methods of use |
| RU2013106217A (ru) | 2010-08-05 | 2014-09-10 | Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг | Гибридный белок из антитела против мнс и противовирусного цитокина |
| MX340558B (es) | 2010-08-24 | 2016-07-14 | F Hoffmann-La Roche Ag * | Anticuerpos biespecificos que comprenden fragmento fv estabilizado con disulfuro. |
| WO2012085111A1 (en) | 2010-12-23 | 2012-06-28 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Polypeptide-polynucleotide-complex and its use in targeted effector moiety delivery |
| RU2607038C2 (ru) * | 2011-02-28 | 2017-01-10 | Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг | Антигенсвязывающие белки |
| WO2012116927A1 (en) | 2011-02-28 | 2012-09-07 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Monovalent antigen binding proteins |
| EP2710042A2 (en) * | 2011-05-16 | 2014-03-26 | Fabion Pharmaceuticals, Inc. | Multi-specific fab fusion proteins and methods of use |
| KR101629073B1 (ko) | 2011-06-15 | 2016-06-09 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | 항-인간 에리스로포이에틴 수용체 항체 및 이의 사용 방법 |
| BR112013029746B1 (pt) | 2011-06-22 | 2021-02-02 | F. Hoffmann-La Roche Ag | método para a produção recombinante de um complexo, complexo, formulação farmacêutica e uso do complexo |
| WO2013012733A1 (en) * | 2011-07-15 | 2013-01-24 | Biogen Idec Ma Inc. | Heterodimeric fc regions, binding molecules comprising same, and methods relating thereto |
| HUE039703T2 (hu) * | 2011-08-23 | 2019-01-28 | Roche Glycart Ag | Bispecifikus antigénkötõ molekulák |
| JP6159724B2 (ja) | 2011-08-23 | 2017-07-05 | ロシュ グリクアート アーゲー | Ｔ細胞活性化抗原に対して特異的な二重特異性抗体及び腫瘍抗原および使用方法 |
| WO2013026837A1 (en) * | 2011-08-23 | 2013-02-28 | Roche Glycart Ag | Bispecific t cell activating antigen binding molecules |
| ES2659764T3 (es) * | 2011-08-23 | 2018-03-19 | Roche Glycart Ag | Moléculas biespecíficas de unión a antígeno activadoras de linfocitos T |
| BR112014006537A2 (pt) | 2011-09-23 | 2017-11-28 | Roche Glycart Ag | anticorpos biespecíficos, formulação farmacêutica, usos de um anticorpo biespecífico, método de tratamento, ácido nucleico, vetores de expressão, célula hospedeira e método para a produção de um anticorpo biespecífico |
| CA2853917A1 (en) | 2011-12-19 | 2013-06-27 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Method for the detection of free binding partner of a multispecific binder |
| CN104011080B (zh) | 2011-12-22 | 2017-10-20 | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 | 用于真核细胞的全长抗体展示系统及其用途 |
| KR102048556B1 (ko) | 2011-12-22 | 2019-11-26 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | 발현 벡터 구성원 조합, 신규한 제조 세포 생성 방법 및 폴리펩티드의 재조합적 제조를 위한 그의 용도 |
| MX355625B (es) | 2011-12-22 | 2018-04-25 | Hoffmann La Roche | Organizacion de vector de expresion, metodos novedosos de generacion de celulas de produccion y su uso para la produccion recombinante de polipeptidos. |
| CN104105966B (zh) | 2012-02-01 | 2016-10-26 | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 | 用于检测多特异性结合物的结合搭档的方法 |
| RU2693264C2 (ru) | 2012-02-03 | 2019-07-01 | Ф.Хоффман-Ля Рош Аг | Молекулы биспецифических антител и т-клетки, трансфецированные антигеном, и их применение в медицине |
| JP6486686B2 (ja) | 2012-02-10 | 2019-03-20 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 単鎖抗体及び他のヘテロ多量体 |
| CN104125852B9 (zh) | 2012-02-15 | 2017-05-17 | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 | 基于Fc‑受体的亲和色谱 |
| EP2834273B1 (en) | 2012-04-05 | 2018-08-22 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Bispecific antibodies against human tweak and human il17 and uses thereof |
| BR112014032193A2 (pt) | 2012-06-27 | 2017-06-27 | Hoffmann La Roche | métodos de produção de anticorpos biespecíficos e de determinação de combinação, anticorpo biespecífico, formulação e uso de anticorpo biespecífico |
| JP6309002B2 (ja) | 2012-06-27 | 2018-04-11 | エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ | 標的に特異的に結合する少なくとも１つの結合実体を含む抗体Ｆｃ領域結合体を作製するための方法およびその使用 |
| HUE029435T2 (en) | 2012-07-04 | 2017-02-28 | Hoffmann La Roche | Anti-theophylline antibodies and methods of their application |
| KR102090849B1 (ko) | 2012-07-04 | 2020-03-19 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | 공유 결합된 항원-항체 접합체 |
| CN104411725B (zh) | 2012-07-04 | 2018-09-28 | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 | 抗生物素抗体及使用方法 |
| KR20150038046A (ko) | 2012-07-13 | 2015-04-08 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | 다중특이적 결합체의 탐지 방법 |
| WO2014041072A1 (en) | 2012-09-14 | 2014-03-20 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Method for the production and selection of molecules comprising at least two different entities and uses thereof |
| JP6444874B2 (ja) | 2012-10-08 | 2018-12-26 | ロシュ グリクアート アーゲー | ２つのＦａｂフラグメントを含むＦｃ不含抗体および使用方法 |
| CA2884431A1 (en) | 2012-11-08 | 2014-05-15 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Her3 antigen binding proteins binding to the beta-hairpin of her3 |
| ITTO20130012A1 (it) | 2013-01-09 | 2014-07-10 | Metheresis Translational Res S A | Nuovi frammenti anticorpali, relative composizioni ed usi |
| WO2014122143A1 (en) | 2013-02-05 | 2014-08-14 | Engmab Ag | Method for the selection of antibodies against bcma |
| EP2762497A1 (en) * | 2013-02-05 | 2014-08-06 | EngMab AG | Bispecific antibodies against CD3epsilon and BCMA |
| MX2015010350A (es) | 2013-02-26 | 2015-10-29 | Roche Glycart Ag | Moleculas de union a antigeno biespecificas que activan la celula t. |
| MY192312A (en) | 2013-02-26 | 2022-08-17 | Roche Glycart Ag | Bispecific t cell activating antigen binding molecules |
| UA118028C2 (uk) | 2013-04-03 | 2018-11-12 | Рош Глікарт Аг | Біспецифічне антитіло, специфічне щодо fap і dr5, антитіло, специфічне щодо dr5, і спосіб їх застосування |
| BR112015027399A2 (pt) | 2013-04-29 | 2017-08-29 | Hoffmann La Roche | ANTICORPOS ANTI-IGF-1R COM LIGAÇÃO DE FcRn ABOLIDA E SEU USO NO TRATAMENTO DE ENFERMIDADES VASCULARES OCULARES |
| MX2015015060A (es) | 2013-04-29 | 2016-02-25 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos asimetricos modificados que se unen al receptor fc y metodos de uso. |
| MX365787B (es) | 2013-04-29 | 2019-06-14 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos modificados de unión a receptor de fc neonatal (fcrn) humano y uso de los mismos. |
| EP3027649B1 (en) | 2013-08-01 | 2020-04-01 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Tnfa-il-17 bispecific antibodies |
| WO2015025054A1 (en) | 2013-08-22 | 2015-02-26 | Medizinische Universität Wien | Dye-specific antibodies for prestained molecular weight markers and methods producing the same |
| EP3041862B1 (en) * | 2013-09-05 | 2020-05-06 | IGM Biosciences, Inc. | Constant chain modified bispecific, penta- and hexavalent ig-m antibodies |
| EP3048109A4 (en) * | 2013-09-17 | 2017-04-19 | Kaneka Corporation | Novel antibody purification method and antibody obtained therefrom, and novel antibody purification method using cation exchanger and antibody obtained therefrom |
| MX2016003616A (es) | 2013-09-27 | 2016-07-21 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Metodo para producir heteromultimeros de polipeptidos. |
| EP3055329B1 (en) | 2013-10-11 | 2018-06-13 | F. Hoffmann-La Roche AG | Multispecific domain exchanged common variable light chain antibodies |
| MX2016005631A (es) | 2013-11-21 | 2016-07-14 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos anti-alfa-sinucleina y metodos de uso. |
| MX2016008098A (es) | 2013-12-20 | 2017-01-11 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos biespecificos del receptor 2 de factor de crecimiento ipidermico himano (her2) y metodo de uso. |
| PT3083680T (pt) | 2013-12-20 | 2020-03-17 | Hoffmann La Roche | Anticorpos humanizados anti-tau(ps422) e métodos de utilização |
| RU2769133C2 (ru) * | 2013-12-30 | 2022-03-28 | Эпимаб Биотерапьютикс Инк. | Иммуноглобулин с тандемным расположением fab-фрагментов и его применение |
| PL3089996T3 (pl) | 2014-01-03 | 2021-12-13 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Dwuswoiste przeciwciała przeciw haptenowi/przeciw receptorowi występującemu w barierze krew-mózg, ich kompleksy i ich zastosowanie jako przenośniki wahadłowe występujące w barierze krew-mózg |
| BR112016014945A2 (pt) | 2014-01-03 | 2018-01-23 | F. Hoffmann-La Roche Ag | conjugado, formulação farmacêutica e uso |
| EP3089758B1 (en) | 2014-01-03 | 2021-01-27 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Covalently linked helicar-anti-helicar antibody conjugates and uses thereof |
| MX2016008190A (es) | 2014-01-06 | 2016-10-21 | Hoffmann La Roche | Modulos de lanzadera de barrera cerebral sanguinea monovalente. |
| CN110903398B (zh) | 2014-01-15 | 2023-08-15 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 具有修饰的FCRN和保持的蛋白A结合性质的Fc区变体 |
| SG11201608054YA (en) | 2014-04-02 | 2016-10-28 | Hoffmann La Roche | Method for detecting multispecific antibody light chain mispairing |
| GB201411320D0 (en) | 2014-06-25 | 2014-08-06 | Ucb Biopharma Sprl | Antibody construct |
| BR112016029935A2 (pt) | 2014-06-26 | 2017-10-31 | Hoffmann La Roche | ?anticorpos anti-brdu, complexo, formulação farmacêutica e uso de anticorpo? |
| AR100978A1 (es) | 2014-06-26 | 2016-11-16 | Hoffmann La Roche | LANZADERAS CEREBRALES DE ANTICUERPO HUMANIZADO ANTI-Tau(pS422) Y USOS DE LAS MISMAS |
| AU2015279321B2 (en) * | 2014-06-27 | 2021-03-04 | Innate Pharma, S.A. | Multispecific antigen binding proteins |
| EP3161002A1 (en) | 2014-06-27 | 2017-05-03 | Innate Pharma | MULTISPECIFIC NKp46 BINDING PROTEINS |
| TW201623329A (zh) | 2014-06-30 | 2016-07-01 | 亞佛瑞司股份有限公司 | 針對骨調素截斷變異體的疫苗及單株抗體暨其用途 |
| NZ728041A (en) | 2014-07-10 | 2023-01-27 | Affiris Ag | Substances and methods for the use in prevention and/or treatment in huntington’s disease |
| EP2982692A1 (en) | 2014-08-04 | 2016-02-10 | EngMab AG | Bispecific antibodies against CD3epsilon and BCMA |
| SI3608337T1 (sl) | 2014-08-04 | 2024-07-31 | F. Hoffmann - La Roche Ag | Biospecifične molekule za aktivacijo celic T in antigensko vezavo |
| US10934362B2 (en) | 2014-09-15 | 2021-03-02 | Amgen Inc. | Bi-specific anti-CGRP receptor/PAC1 receptor antigen binding proteins and uses thereof |
| MA41044A (fr) | 2014-10-08 | 2017-08-15 | Novartis Ag | Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer |
| US11952421B2 (en) | 2014-10-09 | 2024-04-09 | Bristol-Myers Squibb Company | Bispecific antibodies against CD3EPSILON and ROR1 |
| PL3215528T3 (pl) | 2014-11-06 | 2020-01-31 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Warianty regionu Fc ze zmodyfikowanym wiązaniem FcRn i sposoby stosowania |
| BR112017006591A2 (pt) | 2014-11-06 | 2018-01-16 | Hoffmann La Roche | polipeptídeo heterodimérico, formulação farmacêutica e uso de um polipeptídeo heterodimérico |
| EP3023437A1 (en) | 2014-11-20 | 2016-05-25 | EngMab AG | Bispecific antibodies against CD3epsilon and BCMA |
| RS61134B1 (sr) | 2014-11-20 | 2020-12-31 | Hoffmann La Roche | Kombinovana terapija bispecifičnim antigen vezujućim molekulima koji aktiviraju t ćelije za cd3 i folatni receptor 1 (folr1), i antagonistima vezivanja ose pd-1 |
| PT3221357T (pt) | 2014-11-20 | 2020-07-28 | Hoffmann La Roche | Cadeias leves comuns e métodos de utilização |
| JP6686897B2 (ja) * | 2014-11-21 | 2020-04-22 | アステラス製薬株式会社 | 新規二重特異的抗体フォーマット |
| WO2016087514A1 (en) | 2014-12-02 | 2016-06-09 | Cemm - Forschungszentrum Für Molekulare Medizin Gmbh | Anti-mutant calreticulin antibodies and their use in the diagnosis and therapy of myeloid malignancies |
| CN107001482B (zh) | 2014-12-03 | 2021-06-15 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 多特异性抗体 |
| EP3633371A1 (en) | 2014-12-18 | 2020-04-08 | F. Hoffmann-La Roche AG | Assay and method for determining cdc eliciting antibodies |
| US9767555B2 (en) * | 2015-01-05 | 2017-09-19 | Case Western Reserve University | Disease characterization from fused pathology and radiology data |
| EP3313881A1 (en) | 2015-06-23 | 2018-05-02 | Innate Pharma | Multispecific nk engager proteins |
| CN113929779A (zh) | 2015-06-24 | 2022-01-14 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 人源化的抗-Tau(pS422)抗体和使用方法 |
| WO2017009419A1 (en) * | 2015-07-16 | 2017-01-19 | Ares Life Sciences S.A. | Bispecific antibody-like molecules having bivalency vis-à-vis each antigen |
| JP6932700B2 (ja) * | 2015-09-15 | 2021-09-08 | アムジエン・インコーポレーテツド | ４価の二重特異性抗原結合タンパク質及び４価の四重特異性抗原結合タンパク質、ならびにそれらの使用 |
| AR106188A1 (es) | 2015-10-01 | 2017-12-20 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos anti-cd19 humano humanizados y métodos de utilización |
| MX2018003631A (es) | 2015-10-02 | 2018-08-01 | Hoffmann La Roche | Moleculas biespecificas de union a antigeno activadoras de celulas t. |
| MY198560A (en) | 2015-10-02 | 2023-09-05 | Hoffmann La Roche | Bispecific antibodies specific for a costimulatory tnf receptor |
| US20170247454A1 (en) | 2015-10-02 | 2017-08-31 | Hoffmann-La Roche Inc. | Anti-pd1 antibodies and methods of use |
| EP3150636A1 (en) | 2015-10-02 | 2017-04-05 | F. Hoffmann-La Roche AG | Tetravalent multispecific antibodies |
| JP6734919B2 (ja) | 2015-10-02 | 2020-08-05 | エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ | 同時結合を測定するための細胞ベースのｆｒｅｔアッセイ法 |
| BR112018001530A2 (pt) | 2015-10-02 | 2018-11-06 | Hoffmann La Roche | anticorpo biespecífico, polinucleotídeo, vetor, célula hospedeira, métodos para produzir o anticorpo biespecífico e de inibição do crescimento de células tumorais e composição farmacêutica |
| JP7074665B2 (ja) | 2015-10-07 | 2022-05-24 | エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト | 共刺激ｔｎｆ受容体に対する四価の二重特異性抗体発明の分野 |
| CN114920846A (zh) | 2015-10-29 | 2022-08-19 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 抗变体Fc区抗体及使用方法 |
| EP3184547A1 (en) | 2015-10-29 | 2017-06-28 | F. Hoffmann-La Roche AG | Anti-tpbg antibodies and methods of use |
| CA2997406C (en) | 2015-12-09 | 2024-05-28 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Type ii anti-cd20 antibody for reducing formation of anti-drug antibodies or cytokine release |
| US10596257B2 (en) | 2016-01-08 | 2020-03-24 | Hoffmann-La Roche Inc. | Methods of treating CEA-positive cancers using PD-1 axis binding antagonists and anti-CEA/anti-CD3 bispecific antibodies |
| CU24613B1 (es) | 2016-02-06 | 2022-07-08 | Epimab Biotherapeutics Inc | Proteínas de unión a inmunoglobulinas fabs en tandem (fit-ig) biespecíficas que se unen a cmet y egfr |
| CA3017776A1 (en) | 2016-03-15 | 2017-09-21 | Generon (Shanghai) Corporation Ltd. | Multispecific fab fusion proteins and use thereof |
| US11291721B2 (en) | 2016-03-21 | 2022-04-05 | Marengo Therapeutics, Inc. | Multispecific and multifunctional molecules and uses thereof |
| HUE061946T2 (hu) | 2016-03-22 | 2023-09-28 | Hoffmann La Roche | Proteáz-aktivált T-sejt bispecifikus molekulák |
| EP3243836A1 (en) | 2016-05-11 | 2017-11-15 | F. Hoffmann-La Roche AG | C-terminally fused tnf family ligand trimer-containing antigen binding molecules |
| WO2017216054A1 (en) | 2016-06-12 | 2017-12-21 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Dihydropyrimidinyl benzazepine carboxamide compounds |
| CN109563124A (zh) | 2016-06-17 | 2019-04-02 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 多特异性抗体的纯化 |
| AU2017297603A1 (en) | 2016-07-14 | 2019-02-14 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Multiple bi-specific binding domain constructs with different epitope binding to treat cancer |
| WO2018027204A1 (en) | 2016-08-05 | 2018-02-08 | Genentech, Inc. | Multivalent and multiepitopic anitibodies having agonistic activity and methods of use |
| BR112019002579A2 (pt) | 2016-08-16 | 2019-05-21 | Epimab Biotherapeutics, Inc. | anticorpos biespecíficos fab monovalentes, assimétricos e tandem |
| CN116731197A (zh) | 2016-09-19 | 2023-09-12 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 基于补体因子的亲和层析 |
| US10882918B2 (en) | 2016-09-30 | 2021-01-05 | Hoffmann-La Roche Inc. | Bispecific T cell activating antigen binding molecules |
| CN109791149A (zh) | 2016-09-30 | 2019-05-21 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 用于功能分析多特异性分子的基于spr的双重结合测定法 |
| TW201829463A (zh) | 2016-11-18 | 2018-08-16 | 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 | 抗hla-g抗體及其用途 |
| TN2019000164A1 (en) | 2016-11-23 | 2020-10-05 | Bioverativ Therapeutics Inc | Mono- and bispecific antibodies binding to coagulation factor ix and coagulation factor x |
| GB201620119D0 (en) * | 2016-11-29 | 2017-01-11 | Pharmafox Therapeutics Ag | Compounds |
| MX2019006123A (es) | 2016-12-21 | 2019-08-12 | Hoffmann La Roche | Metodo para glicomanipulacion in vitro de anticuerpos. |
| MX2019007411A (es) | 2016-12-21 | 2019-08-29 | Hoffmann La Roche | Reuso de enzimas en glucomanipulacion in vitro de anticuerpos. |
| AU2017384276B9 (en) | 2016-12-21 | 2020-11-26 | F. Hoffmann-La Roche Ag | In vitro glycoengineering of antibodies |
| WO2018127473A1 (en) | 2017-01-03 | 2018-07-12 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Bispecific antigen binding molecules comprising anti-4-1bb clone 20h4.9 |
| US20200291089A1 (en) | 2017-02-16 | 2020-09-17 | Elstar Therapeutics, Inc. | Multifunctional molecules comprising a trimeric ligand and uses thereof |
| SG11201908127WA (en) | 2017-03-10 | 2019-10-30 | Hoffmann La Roche | Method for producing multispecific antibodies |
| JP7205995B2 (ja) | 2017-03-29 | 2023-01-17 | エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト | 共刺激性ｔｎｆ受容体に対する二重特異性抗原結合分子 |
| CR20190426A (es) | 2017-04-03 | 2019-11-01 | Hoffmann La Roche | Inmunoconjugados |
| CR20190430A (es) | 2017-04-03 | 2019-11-01 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos que se unen a steap-1 |
| MA49039A (fr) * | 2017-04-04 | 2020-02-12 | Hoffmann La Roche | Nouvelles molécules bispécifiques de liaison à l'antigène capables de se lier spécifiquement à cd40 et à fap |
| EP3606955B1 (en) | 2017-04-05 | 2024-11-06 | F. Hoffmann-La Roche AG | Bispecific antibodies specifically binding to pd1 and lag3 |
| SI3606954T1 (sl) | 2017-04-05 | 2022-10-28 | F. Hoffmann - La Roche Ag | Protitelesa proti LAG3 |
| EP3630836A1 (en) | 2017-05-31 | 2020-04-08 | Elstar Therapeutics, Inc. | Multispecific molecules that bind to myeloproliferative leukemia (mpl) protein and uses thereof |
| WO2019035938A1 (en) | 2017-08-16 | 2019-02-21 | Elstar Therapeutics, Inc. | MULTISPECIFIC MOLECULES BINDING TO BCMA AND USES THEREOF |
| CA3081801C (en) | 2017-11-29 | 2022-12-20 | F. Hoffman-La Roche Ag | Target interference suppressed anti-drug antibody assay |
| KR102575787B1 (ko) | 2017-12-21 | 2023-09-08 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | Hla-a2/wt1에 결합하는 항체 |
| US11945839B2 (en) | 2017-12-22 | 2024-04-02 | Hoffmann-La Roche Inc. | Depletion of light chain mispaired antibody variants by hydrophobic interaction chromatography |
| CN111479588A (zh) | 2017-12-29 | 2020-07-31 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 用于改善抗vegf抗体的vegf受体阻断选择性的方法 |
| WO2019149715A1 (en) | 2018-01-31 | 2019-08-08 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Stabilized immunoglobulin domains |
| CN111655730A (zh) | 2018-01-31 | 2020-09-11 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 包含与lag3结合的抗原结合位点的双特异性抗体 |
| WO2019157308A1 (en) | 2018-02-08 | 2019-08-15 | Genentech, Inc. | Bispecific antigen-binding molecules and methods of use |
| TWI829667B (zh) | 2018-02-09 | 2024-01-21 | 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 | 結合gprc5d之抗體 |
| WO2019178362A1 (en) | 2018-03-14 | 2019-09-19 | Elstar Therapeutics, Inc. | Multifunctional molecules that bind to calreticulin and uses thereof |
| US20210009711A1 (en) | 2018-03-14 | 2021-01-14 | Elstar Therapeutics, Inc. | Multifunctional molecules and uses thereof |
| CN111936625A (zh) | 2018-03-29 | 2020-11-13 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 调节哺乳动物细胞中的生乳活性 |
| AR114789A1 (es) | 2018-04-18 | 2020-10-14 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos anti-hla-g y uso de los mismos |
| AR115052A1 (es) | 2018-04-18 | 2020-11-25 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos multiespecíficos y utilización de los mismos |
| EP3788079A4 (en) | 2018-05-03 | 2022-12-21 | Shanghai Epimab Biotherapeutics Co., Ltd. | HIGH AFFINITY ANTIBODIES AGAINST PD-1 AND LAG-3 AND B-SPECIFIC BINDING PROTEINS PRODUCED FROM THEM |
| WO2020010250A2 (en) | 2018-07-03 | 2020-01-09 | Elstar Therapeutics, Inc. | Anti-tcr antibody molecules and uses thereof |
| EP3838289A4 (en) | 2018-07-25 | 2022-08-03 | Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. | ANTI-TIGIT ANTIBODIES AND USES THEREOF |
| US20200047085A1 (en) | 2018-08-09 | 2020-02-13 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for assessing binding affinity of an antibody variant to the neonatal fc receptor |
| JP7444886B2 (ja) | 2018-12-11 | 2024-03-06 | キュー３２・バイオ・インコーポレーテッド | 補体関連疾患のための融合タンパク質構築物 |
| TW202428614A (zh) | 2018-12-21 | 2024-07-16 | 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 | 結合cd3之抗體 |
| US11965030B2 (en) | 2018-12-24 | 2024-04-23 | Sanofi | Multispecific binding proteins with mutant fab domains |
| JP2022515473A (ja) | 2018-12-28 | 2022-02-18 | エフ．ホフマン－ラ ロシュ アーゲー | 免疫応答が増幅された患者における治療的使用のためのペプチド－ｍｈｃ－ｉ－抗体融合タンパク質 |
| CN113227789A (zh) | 2018-12-30 | 2021-08-06 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 基于pH梯度SPR的结合测定 |
| CA3130508A1 (en) | 2019-02-21 | 2020-08-27 | Marengo Therapeutics, Inc. | Antibody molecules that bind to nkp30 and uses thereof |
| SG11202109122SA (en) | 2019-02-21 | 2021-09-29 | Marengo Therapeutics Inc | Anti-tcr antibody molecules and uses thereof |
| EP3927744A1 (en) | 2019-02-21 | 2021-12-29 | Marengo Therapeutics, Inc. | Multifunctional molecules that bind to t cell related cancer cells and uses thereof |
| EP3927745A1 (en) | 2019-02-21 | 2021-12-29 | Marengo Therapeutics, Inc. | Multifunctional molecules that bind to t cells and uses thereof to treat autoimmune disorders |
| WO2020172601A1 (en) | 2019-02-21 | 2020-08-27 | Elstar Therapeutics, Inc. | Multifunctional molecules that bind to calreticulin and uses thereof |
| CN109948371B (zh) * | 2019-03-07 | 2021-06-25 | 深圳市智税链科技有限公司 | 为区块链节点发放身份证书的方法及相关装置 |
| JP7412440B2 (ja) | 2019-03-29 | 2024-01-12 | エフ． ホフマン－ラ ロシュ アーゲー | アビド結合多重特異性抗体を作製する方法 |
| JP7249432B2 (ja) | 2019-03-29 | 2023-03-30 | エフ． ホフマン－ラ ロシュ アーゲー | 多価分子の機能分析のための、ｓｐｒをベースとする結合アッセイ |
| US11840575B2 (en) | 2019-05-07 | 2023-12-12 | Gracell Biotechnologies (Shanghai) Co., Ltd. | Engineered immune cells targeting BCMA and their uses thereof |
| EP3969907A1 (en) | 2019-05-13 | 2022-03-23 | F. Hoffmann-La Roche AG | Interference-suppressed pharmacokinetic immunoassay |
| AU2020296247A1 (en) | 2019-06-19 | 2021-12-23 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Method for the generation of a trivalent antibody expressing cell by targeted integration of multiple expression cassettes in a defined organization |
| AU2020294880B2 (en) | 2019-06-19 | 2024-05-02 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Method for the generation of a protein expressing cell by targeted integration using Cre mRNA |
| BR112021025436A2 (pt) | 2019-06-19 | 2022-02-01 | Hoffmann La Roche | Métodos para produzir um anticorpo biespecífico trivalente, biespecífico bivalente, biespecífico multivalente, para produzir uma célula de mamífero recombinante e para produzir um anticorpo trivalente, ácidos desoxirribonucleicos, usos de um ácido desoxirribonucleico, células de mamífero recombinante, composições e uso de mrna de recombinase cre |
| CA3140323A1 (en) | 2019-06-19 | 2020-12-24 | Johannes Auer | Method for the generation of a multivalent, bispecific antibody expressing cell by targeted integration of multiple expression cassettes in a defined organization |
| KR20220010019A (ko) | 2019-06-19 | 2022-01-25 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | 정의된 조직에서 다중 발현 카세트의 표적화된 통합에 의해 2가 이중특이성 항체 발현 세포를 생성하는 방법 |
| EP3990646A1 (en) | 2019-06-26 | 2022-05-04 | F. Hoffmann-La Roche AG | Mammalian cell lines with sirt-1 gene knockout |
| JP7354306B2 (ja) | 2019-06-27 | 2023-10-02 | エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト | 新規ｉｃｏｓ抗体及びそれらを含む腫瘍標的化抗原結合分子 |
| AR119393A1 (es) | 2019-07-15 | 2021-12-15 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos que se unen a nkg2d |
| JP2022543551A (ja) | 2019-07-31 | 2022-10-13 | エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト | Ｇｐｒｃ５ｄに結合する抗体 |
| KR20220028035A (ko) | 2019-07-31 | 2022-03-08 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | Gprc5d에 결합하는 항체 |
| CA3150999A1 (en) | 2019-09-18 | 2021-03-25 | James Thomas Koerber | Anti-klk7 antibodies, anti-klk5 antibodies, multispecific anti-klk5/klk7 antibodies, and methods of use |
| WO2021094508A1 (en) | 2019-11-15 | 2021-05-20 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Prevention of visible particle formation in aqueous protein solutions |
| WO2021122733A1 (en) | 2019-12-18 | 2021-06-24 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Bispecific anti-ccl2 antibodies |
| WO2021122875A1 (en) | 2019-12-18 | 2021-06-24 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Antibodies binding to hla-a2/mage-a4 |
| CR20220334A (es) | 2019-12-23 | 2022-08-26 | Genentech Inc | Anticuerpos específicos de apolipoproteína l1 y métodos de uso |
| WO2021136772A1 (en) | 2020-01-02 | 2021-07-08 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Method for determining the amount of a therapeutic antibody in the brain |
| EP4084821A4 (en) | 2020-01-03 | 2024-04-24 | Marengo Therapeutics, Inc. | CD33-BINDING MULTIFUNCTIONAL MOLECULES AND THEIR USES |
| MX2022008442A (es) | 2020-01-15 | 2022-08-02 | Hoffmann La Roche | Metodos para disminuir impurezas de procesos de manufacturacion de proteinas recombinantes. |
| JP2023514727A (ja) | 2020-02-21 | 2023-04-07 | シルバーバック セラピューティックス インコーポレイテッド | ネクチン－４抗体コンジュゲートおよびその使用 |
| TW202202620A (zh) | 2020-03-26 | 2022-01-16 | 美商建南德克公司 | 經修飾之哺乳動物細胞 |
| AR121706A1 (es) | 2020-04-01 | 2022-06-29 | Hoffmann La Roche | Moléculas de unión a antígeno biespecíficas dirigidas a ox40 y fap |
| EP4139363A4 (en) | 2020-04-24 | 2024-09-04 | Marengo Therapeutics Inc | MULTIFUNCTIONAL MOLECULES BINDING TO T-CELL ASSOCIATED CANCER CELLS AND USES THEREOF |
| WO2021228917A1 (en) | 2020-05-15 | 2021-11-18 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Prevention of visible particle formation in parenteral protein solutions |
| CN115605185A (zh) | 2020-05-19 | 2023-01-13 | 豪夫迈·罗氏有限公司（Ch） | 螯合剂用于防止胃肠外蛋白质溶液中形成可见颗粒的用途 |
| CR20220659A (es) | 2020-06-08 | 2023-08-21 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos anti-hbv y metodos de uso |
| CN115917320A (zh) | 2020-06-16 | 2023-04-04 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 用于确定样品中的抗体的游离抗原的方法 |
| PE20230835A1 (es) | 2020-06-19 | 2023-05-19 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos que se unen a cd3 |
| WO2021255146A1 (en) | 2020-06-19 | 2021-12-23 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Antibodies binding to cd3 and cea |
| CA3185513A1 (en) | 2020-06-19 | 2021-12-23 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Antibodies binding to cd3 and folr1 |
| CN115916825A (zh) | 2020-06-19 | 2023-04-04 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 与cd3和cd19结合的抗体 |
| US20220041672A1 (en) | 2020-06-24 | 2022-02-10 | Genentech, Inc. | Apoptosis resistant cell lines |
| WO2022006327A1 (en) | 2020-07-01 | 2022-01-06 | Silverback Therapeutics, Inc. | Anti-asgr1 antibody conjugates and uses thereof |
| EP4178529A1 (en) | 2020-07-07 | 2023-05-17 | F. Hoffmann-La Roche AG | Alternative surfactants as stabilizers for therapeutic protein formulations |
| WO2022016037A1 (en) | 2020-07-17 | 2022-01-20 | Genentech, Inc. | Anti-notch2 antibodies and methods of use |
| EP4204450A4 (en) | 2020-08-26 | 2024-11-13 | Marengo Therapeutics Inc | MULTIFUNCTIONAL MOLECULES BINDING TO CALRETICULIN AND USES THEREOF |
| CA3190573A1 (en) | 2020-08-26 | 2022-03-03 | Andreas Loew | Methods of detecting trbc1 or trbc2 |
| KR20230074144A (ko) | 2020-08-26 | 2023-05-26 | 마렝고 테라퓨틱스, 인크. | NKp30에 결합하는 항체 분자 및 이의 용도 |
| JP2023539201A (ja) | 2020-08-28 | 2023-09-13 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 宿主細胞タンパク質のＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９マルチプレックスノックアウト |
| AU2021342566A1 (en) | 2020-09-21 | 2023-03-02 | Genentech, Inc. | Purification of multispecific antibodies |
| JP2023542228A (ja) | 2020-09-24 | 2023-10-05 | エフ． ホフマン－ラ ロシュ アーゲー | 遺伝子ノックアウトを有する哺乳動物細胞株 |
| TW202233671A (zh) | 2020-10-20 | 2022-09-01 | 美商建南德克公司 | Ｐｅｇ結合抗ｍｅｒｔｋ抗體及其使用方法 |
| JP2023553157A (ja) | 2020-12-10 | 2023-12-20 | ユーティレックス カンパニー リミテッド | 抗－ｐｄ－１抗体およびその用途 |
| IL303656A (en) | 2020-12-17 | 2023-08-01 | Hoffmann La Roche | ANTI-HLA-G antibodies and their use |
| WO2022136140A1 (en) | 2020-12-22 | 2022-06-30 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Oligonucleotides targeting xbp1 |
| CN117098548A (zh) | 2020-12-23 | 2023-11-21 | 信达生物制药(苏州)有限公司 | 抗b7-h3抗体及其用途 |
| CN114716548B (zh) | 2021-01-05 | 2024-11-05 | (株)爱恩德生物 | 抗-fgfr3抗体及其用途 |
| JP2024509695A (ja) | 2021-02-03 | 2024-03-05 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 多重特異性結合タンパク質分解プラットフォームおよび使用方法 |
| CN116888473A (zh) | 2021-02-18 | 2023-10-13 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 用于解析复杂、多步骤抗体相互作用的方法 |
| JP2024512377A (ja) | 2021-03-12 | 2024-03-19 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 抗ｋｌｋ７抗体、抗ｋｌｋ５抗体、多重特異性抗ｋｌｋ５／ｋｌｋ７抗体、及び使用方法 |
| BR112023020832A2 (pt) | 2021-04-08 | 2023-12-19 | Marengo Therapeutics Inc | Moléculas multifuncionais ligadas a tcr e seus usos |
| JP2024513474A (ja) | 2021-04-09 | 2024-03-25 | エフ． ホフマン－ラ ロシュ アーゲー | 異種ポリペプチドを発現する細胞クローンを選択するための方法 |
| JP2024514222A (ja) | 2021-04-19 | 2024-03-28 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 改変された哺乳動物細胞 |
| JP2024521107A (ja) | 2021-05-21 | 2024-05-28 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 目的の組換え産物を産生するための修飾細胞 |
| CN113278071B (zh) | 2021-05-27 | 2021-12-21 | 江苏荃信生物医药股份有限公司 | 抗人干扰素α受体1单克隆抗体及其应用 |
| KR20240021859A (ko) | 2021-06-18 | 2024-02-19 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | 이중특이적 항-ccl2 항체 |
| EP4371125A1 (en) | 2021-07-13 | 2024-05-22 | Genentech, Inc. | Multi-variate model for predicting cytokine release syndrome |
| KR20240036570A (ko) | 2021-07-22 | 2024-03-20 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | 이종이량체 Fc 도메인 항체 |
| JP2024528217A (ja) | 2021-08-03 | 2024-07-26 | エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト | 二重特異性抗体および使用方法 |
| CN113683694B (zh) | 2021-09-03 | 2022-05-13 | 江苏荃信生物医药股份有限公司 | 一种抗人tslp单克隆抗体及其应用 |
| CN113603775B (zh) | 2021-09-03 | 2022-05-20 | 江苏荃信生物医药股份有限公司 | 抗人白介素-33单克隆抗体及其应用 |
| WO2023094282A1 (en) | 2021-11-25 | 2023-06-01 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Quantification of low amounts of antibody sideproducts |
| AR127887A1 (es) | 2021-12-10 | 2024-03-06 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos que se unen a cd3 y plap |
| EP4416301A1 (en) | 2021-12-21 | 2024-08-21 | F. Hoffmann-La Roche AG | Method for the determination of hydrolytic activity |
| CA3241882A1 (en) | 2021-12-29 | 2023-07-06 | Bristol-Myers Squibb Company | Generation of landing pad cell lines |
| US20230322958A1 (en) | 2022-01-19 | 2023-10-12 | Genentech, Inc. | Anti-Notch2 Antibodies and Conjugates and Methods of Use |
| WO2023202967A1 (en) | 2022-04-19 | 2023-10-26 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Improved production cells |
| WO2023232961A1 (en) | 2022-06-03 | 2023-12-07 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Improved production cells |
| TW202417504A (zh) | 2022-07-22 | 2024-05-01 | 美商建南德克公司 | 抗ｓｔｅａｐ１抗原結合分子及其用途 |
| TW202430211A (zh) | 2022-10-10 | 2024-08-01 | 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 | Ｇｐｒｃ５ｄ ｔｃｂ及ｉｍｉｄ之組合療法 |
| TW202423970A (zh) | 2022-10-10 | 2024-06-16 | 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 | Ｇｐｒｃ５ｄ ｔｃｂ及ｃｄ３８抗體之組合療法 |
| TW202423969A (zh) | 2022-10-10 | 2024-06-16 | 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 | Ｇｐｒｃ５ｄ ｔｃｂ及蛋白酶體抑制劑之組合療法 |
| WO2024079069A1 (en) | 2022-10-12 | 2024-04-18 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Method for classifying cells |
| WO2024110426A1 (en) | 2022-11-23 | 2024-05-30 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Method for increasing recombinant protein expression |
| WO2024129594A1 (en) | 2022-12-12 | 2024-06-20 | Genentech, Inc. | Optimizing polypeptide sialic acid content |
| WO2024156672A1 (en) | 2023-01-25 | 2024-08-02 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Antibodies binding to csf1r and cd3 |
| WO2024184287A1 (en) | 2023-03-06 | 2024-09-12 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Combination therapy of an anti-egfrviii/anti-cd3 antibody and an tumor-targeted 4-1bb agonist |
| WO2024191785A1 (en) | 2023-03-10 | 2024-09-19 | Genentech, Inc. | Fusions with proteases and uses thereof |
| WO2024206788A1 (en) | 2023-03-31 | 2024-10-03 | Genentech, Inc. | Anti-alpha v beta 8 integrin antibodies and methods of use |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1173878A (zh) * | 1995-10-16 | 1998-02-18 | 尤尼利弗公司 | 双功能或双价抗体片段类似物 |
| CN1603345A (zh) * | 2003-09-29 | 2005-04-06 | 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所 | 一种三价双特异性抗体，其制备方法及用途 |
| CN101218251A (zh) * | 2005-02-28 | 2008-07-09 | 森托科尔公司 | 异二聚体蛋白结合组合物 |
Family Cites Families (309)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4150149A (en) | 1976-11-29 | 1979-04-17 | Professional Staff Association Of The Los Angeles County Harbor General Hospital | Method and means for the early detection and diagnosis of certain types of cancers |
| US4361544A (en) | 1980-03-03 | 1982-11-30 | Goldenberg Milton David | Tumor localization and therapy with labeled antibodies specific to intracellular tumor-associated markers |
| US4444744A (en) | 1980-03-03 | 1984-04-24 | Goldenberg Milton David | Tumor localization and therapy with labeled antibodies to cell surface antigens |
| US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
| US4737456A (en) | 1985-05-09 | 1988-04-12 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Reducing interference in ligand-receptor binding assays |
| US6548640B1 (en) | 1986-03-27 | 2003-04-15 | Btg International Limited | Altered antibodies |
| IL85035A0 (en) | 1987-01-08 | 1988-06-30 | Int Genetic Eng | Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same |
| AU600575B2 (en) | 1987-03-18 | 1990-08-16 | Sb2, Inc. | Altered antibodies |
| US5677425A (en) | 1987-09-04 | 1997-10-14 | Celltech Therapeutics Limited | Recombinant antibody |
| US5204244A (en) | 1987-10-27 | 1993-04-20 | Oncogen | Production of chimeric antibodies by homologous recombination |
| US5202238A (en) | 1987-10-27 | 1993-04-13 | Oncogen | Production of chimeric antibodies by homologous recombination |
| KR0184860B1 (ko) | 1988-11-11 | 1999-04-01 | 메디칼 리써어치 카운실 | 단일영역 리간드와 이를 포함하는 수용체 및 이들의 제조방법과 이용(법) |
| WO1993010819A1 (en) | 1991-11-26 | 1993-06-10 | Alkermes, Inc. | Process for the preparation of transferrin receptor specific antibody-neuropharmaceutical or diagnostic agent conjugates |
| US5959177A (en) | 1989-10-27 | 1999-09-28 | The Scripps Research Institute | Transgenic plants expressing assembled secretory antibodies |
| US5571894A (en) | 1991-02-05 | 1996-11-05 | Ciba-Geigy Corporation | Recombinant antibodies specific for a growth factor receptor |
| DE4118120A1 (de) | 1991-06-03 | 1992-12-10 | Behringwerke Ag | Tetravalente bispezifische rezeptoren, ihre herstellung und verwendung |
| US6511663B1 (en) | 1991-06-11 | 2003-01-28 | Celltech R&D Limited | Tri- and tetra-valent monospecific antigen-binding proteins |
| ATE255131T1 (de) | 1991-06-14 | 2003-12-15 | Genentech Inc | Humanisierter heregulin antikörper |
| GB9114948D0 (en) | 1991-07-11 | 1991-08-28 | Pfizer Ltd | Process for preparing sertraline intermediates |
| CA2116774C (en) | 1991-09-19 | 2003-11-11 | Paul J. Carter | Expression in e. coli antibody fragments having at least a cysteine present as a free thiol. use for the production of bifunctional f(ab') 2 antibodies |
| US5587458A (en) | 1991-10-07 | 1996-12-24 | Aronex Pharmaceuticals, Inc. | Anti-erbB-2 antibodies, combinations thereof, and therapeutic and diagnostic uses thereof |
| ATE503496T1 (de) | 1992-02-06 | 2011-04-15 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Biosynthetisches bindeprotein für tumormarker |
| GB9221657D0 (en) | 1992-10-15 | 1992-11-25 | Scotgen Ltd | Recombinant bispecific antibodies |
| DE69233803D1 (de) | 1992-10-28 | 2011-03-31 | Genentech Inc | Verwendung von vaskulären Endothelwachstumsfaktor-Antagonisten |
| US5747654A (en) | 1993-06-14 | 1998-05-05 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Recombinant disulfide-stabilized polypeptide fragments having binding specificity |
| CA2163345A1 (en) | 1993-06-16 | 1994-12-22 | Susan Adrienne Morgan | Antibodies |
| US6476198B1 (en) | 1993-07-13 | 2002-11-05 | The Scripps Research Institute | Multispecific and multivalent antigen-binding polypeptide molecules |
| UA40577C2 (uk) | 1993-08-02 | 2001-08-15 | Мерк Патент Гмбх | Біспецифічна молекула, що використовується для лізису пухлинних клітин, спосіб її одержання, моноклональне антитіло (варіанти), фармацевтичний препарат, фармацевтичний набір (варіанти), спосіб видалення пухлинних клітин |
| WO1995009917A1 (en) | 1993-10-07 | 1995-04-13 | The Regents Of The University Of California | Genetically engineered bispecific tetravalent antibodies |
| US5814464A (en) | 1994-10-07 | 1998-09-29 | Regeneron Pharma | Nucleic acids encoding TIE-2 ligand-2 |
| US5789199A (en) | 1994-11-03 | 1998-08-04 | Genentech, Inc. | Process for bacterial production of polypeptides |
| WO1996026712A2 (en) | 1995-02-28 | 1996-09-06 | Handelman, Joseph, H. | Use of angiogenesis suppressors for inhibiting hair growth |
| US5840523A (en) | 1995-03-01 | 1998-11-24 | Genetech, Inc. | Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides |
| US5731168A (en) | 1995-03-01 | 1998-03-24 | Genentech, Inc. | Method for making heteromultimeric polypeptides |
| GB9504344D0 (en) | 1995-03-03 | 1995-04-19 | Unilever Plc | Antibody fragment production |
| US5869046A (en) | 1995-04-14 | 1999-02-09 | Genentech, Inc. | Altered polypeptides with increased half-life |
| US6267958B1 (en) | 1995-07-27 | 2001-07-31 | Genentech, Inc. | Protein formulation |
| US6750334B1 (en) | 1996-02-02 | 2004-06-15 | Repligen Corporation | CTLA4-immunoglobulin fusion proteins having modified effector functions and uses therefor |
| GB9603256D0 (en) | 1996-02-16 | 1996-04-17 | Wellcome Found | Antibodies |
| EP0894135B1 (en) | 1996-04-04 | 2004-08-11 | Unilever Plc | Multivalent and multispecific antigen-binding protein |
| AU4333397A (en) | 1996-09-05 | 1998-03-26 | Adrenaline Research, Inc. | High power spark plug wire |
| DK1787999T3 (da) | 1997-04-07 | 2010-11-15 | Genentech Inc | Anti-VEGF-antistoffer |
| SI1325932T1 (zh) | 1997-04-07 | 2005-08-31 | Genentech Inc | |
| WO1998048032A2 (en) | 1997-04-21 | 1998-10-29 | Donlar Corporation | POLY-(α-L-ASPARTIC ACID), POLY-(α-L-GLUTAMIC ACID) AND COPOLYMERS OF L-ASP AND L-GLU, METHOD FOR THEIR PRODUCTION AND THEIR USE |
| US20020062010A1 (en) | 1997-05-02 | 2002-05-23 | Genentech, Inc. | Method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components |
| DK0979281T3 (da) | 1997-05-02 | 2005-11-21 | Genentech Inc | Fremgangsmåde til fremstilling af multispecifikke antistoffer med heteromultimere og fælles bestanddele |
| US7951917B1 (en) | 1997-05-02 | 2011-05-31 | Genentech, Inc. | Method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components |
| US6171586B1 (en) | 1997-06-13 | 2001-01-09 | Genentech, Inc. | Antibody formulation |
| JP2002506353A (ja) | 1997-06-24 | 2002-02-26 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | ガラクトシル化糖タンパク質の方法及び組成物 |
| US6040498A (en) | 1998-08-11 | 2000-03-21 | North Caroline State University | Genetically engineered duckweed |
| ATE419009T1 (de) | 1997-10-31 | 2009-01-15 | Genentech Inc | Methoden und zusammensetzungen bestehend aus glykoprotein-glykoformen |
| DE69922159T2 (de) | 1998-01-23 | 2005-12-01 | Vlaams Interuniversitair Instituut Voor Biotechnologie | Mehrzweck-antikörperderivate |
| US6194551B1 (en) | 1998-04-02 | 2001-02-27 | Genentech, Inc. | Polypeptide variants |
| AU3369999A (en) | 1998-04-02 | 1999-10-25 | Genentech Inc. | Antibody variants and fragments thereof |
| AU3657899A (en) | 1998-04-20 | 1999-11-08 | James E. Bailey | Glycosylation engineering of antibodies for improving antibody-dependent cellular cytotoxicity |
| IL138857A0 (en) * | 1998-04-21 | 2001-10-31 | Micromet Ges For Biomedizinisc | Cd19xcd3 specific polypeptides and uses thereof |
| DE19819846B4 (de) | 1998-05-05 | 2016-11-24 | Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts | Multivalente Antikörper-Konstrukte |
| US7138103B2 (en) | 1998-06-22 | 2006-11-21 | Immunomedics, Inc. | Use of bi-specific antibodies for pre-targeting diagnosis and therapy |
| WO1999066951A2 (en) * | 1998-06-22 | 1999-12-29 | Immunomedics, Inc. | Use of bi-specific antibodies for pre-targeting diagnosis and therapy |
| US6312689B1 (en) | 1998-07-23 | 2001-11-06 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Anti-CCR2 antibodies and methods of use therefor |
| US20030035798A1 (en) | 2000-08-16 | 2003-02-20 | Fang Fang | Humanized antibodies |
| WO2000035956A1 (fr) | 1998-12-16 | 2000-06-22 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Anticorps monoclonal anti-vegf humain |
| US6737056B1 (en) | 1999-01-15 | 2004-05-18 | Genentech, Inc. | Polypeptide variants with altered effector function |
| MX353234B (es) | 1999-01-15 | 2018-01-08 | Genentech Inc | Variantes de polipeptidos con función efectora alterada. |
| US6897044B1 (en) | 1999-01-28 | 2005-05-24 | Biogen Idec, Inc. | Production of tetravalent antibodies |
| CN1232039A (zh) | 1999-04-02 | 1999-10-20 | 中国人民解放军海军总医院 | 一种基因工程双特异抗体及其应用 |
| PT1914244E (pt) | 1999-04-09 | 2013-07-26 | Kyowa Hakko Kirin Co Ltd | Processo para regular a actividade de moléculas funcionais sob o ponto de vista imunológico |
| ATE303445T1 (de) | 1999-10-04 | 2005-09-15 | Medicago Inc | Verfahren zur regulation der transkription von fremden genen in gegenwart von stickstoff |
| US7125978B1 (en) | 1999-10-04 | 2006-10-24 | Medicago Inc. | Promoter for regulating expression of foreign genes |
| CA2388245C (en) | 1999-10-19 | 2012-01-10 | Tatsuya Ogawa | The use of serum-free adapted rat cells for producing heterologous polypeptides |
| US7449443B2 (en) | 2000-03-23 | 2008-11-11 | California Institute Of Technology | Method for stabilization of proteins using non-natural amino acids |
| IL151873A0 (en) | 2000-03-24 | 2003-04-10 | Micromet Ag | Multifunctional polypeptides comprising a binding site to an epitope of the nkg2d receptor complex |
| NZ521540A (en) | 2000-04-11 | 2004-09-24 | Genentech Inc | Multivalent antibodies and uses therefor |
| FR2807767B1 (fr) | 2000-04-12 | 2005-01-14 | Lab Francais Du Fractionnement | Anticorps monoclonaux anti-d |
| DE10021678A1 (de) | 2000-05-05 | 2002-04-18 | Stefan Duebel | Antikörperkonstrukte mit variablen Regionen |
| JP2004511430A (ja) | 2000-05-24 | 2004-04-15 | イムクローン システムズ インコーポレイティド | 二重特異性免疫グロブリン様抗原結合蛋白および製造方法 |
| US6586207B2 (en) | 2000-05-26 | 2003-07-01 | California Institute Of Technology | Overexpression of aminoacyl-tRNA synthetases for efficient production of engineered proteins containing amino acid analogues |
| EP1294904A1 (en) | 2000-06-30 | 2003-03-26 | Vlaams Interuniversitair Instituut voor Biotechnologie vzw. | Heterodimeric fusion proteins |
| CA2953239A1 (en) | 2000-10-06 | 2002-04-18 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Antibody composition-producing cell |
| US7064191B2 (en) | 2000-10-06 | 2006-06-20 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Process for purifying antibody |
| US6946292B2 (en) | 2000-10-06 | 2005-09-20 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity |
| AU2002210918B2 (en) | 2000-10-20 | 2006-03-16 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Degraded agonist antibody |
| RU2295537C2 (ru) | 2000-10-20 | 2007-03-20 | Тугаи Сейяку Кабусики Кайся | Модифицированное агонистическое антитело |
| AU2002327164A1 (en) | 2001-01-29 | 2002-12-09 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Engineered tetravalent antibodies and methods of use |
| US20030099974A1 (en) | 2001-07-18 | 2003-05-29 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Novel genes, compositions, kits and methods for identification, assessment, prevention, and therapy of breast cancer |
| CA2455365C (en) | 2001-08-03 | 2014-07-29 | Glycart Biotechnology Ag | Antibody glycosylation variants having increased antibody-dependent cellular cytotoxicity |
| AU2002359244A1 (en) | 2001-09-05 | 2003-04-28 | The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of | Imaging the activity of extracellular proteases in cells using mutant anthrax toxin protective antigens that are cleaved by specific extracellular proteases |
| ES2276735T3 (es) | 2001-09-14 | 2007-07-01 | Affimed Therapeutics Ag | Anticuerpos fv multimericos de cadena sencilla en tandem. |
| US7521053B2 (en) | 2001-10-11 | 2009-04-21 | Amgen Inc. | Angiopoietin-2 specific binding agents |
| US7658924B2 (en) | 2001-10-11 | 2010-02-09 | Amgen Inc. | Angiopoietin-2 specific binding agents |
| US7138370B2 (en) | 2001-10-11 | 2006-11-21 | Amgen Inc. | Specific binding agents of human angiopoietin-2 |
| CA2463931A1 (en) | 2001-10-16 | 2003-04-24 | The Government Of The United States Of America, Represented By The Secre Tary, Department Of Health And Human Services | Broadly cross-reactive neutralizing antibodies against human immunodeficiency virus selected by env-cd4-co-receptor complexes |
| US7053202B2 (en) | 2001-10-19 | 2006-05-30 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Immunoglobulin DNA cassette molecules, monobody constructs, methods of production, and methods of use therefor |
| US20030157108A1 (en) | 2001-10-25 | 2003-08-21 | Genentech, Inc. | Glycoprotein compositions |
| US20040093621A1 (en) | 2001-12-25 | 2004-05-13 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd | Antibody composition which specifically binds to CD20 |
| EP1490677A4 (en) | 2002-02-27 | 2006-01-18 | California Inst Of Techn | COMPUTER METHOD FOR DESIGNING ENZYMES FOR THE INCORPORATION OF AMINO ACID ANALOGUES INTO PROTEINS |
| CA2478011C (en) | 2002-03-01 | 2013-05-21 | Immunomedics, Inc. | Bispecific antibody point mutations for enhancing rate of clearance |
| US8188231B2 (en) | 2002-09-27 | 2012-05-29 | Xencor, Inc. | Optimized FC variants |
| US7317091B2 (en) | 2002-03-01 | 2008-01-08 | Xencor, Inc. | Optimized Fc variants |
| US7332585B2 (en) | 2002-04-05 | 2008-02-19 | The Regents Of The California University | Bispecific single chain Fv antibody molecules and methods of use thereof |
| WO2003084569A1 (fr) | 2002-04-09 | 2003-10-16 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Medicament contenant une composition anticorps |
| AU2003236022A1 (en) | 2002-04-09 | 2003-10-20 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Cells with modified genome |
| WO2003085118A1 (fr) | 2002-04-09 | 2003-10-16 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Procede de production de composition anticorps |
| AU2003236020B2 (en) | 2002-04-09 | 2009-03-19 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Cell with depression or deletion of the activity of protein participating in GDP-fucose transport |
| JPWO2003085119A1 (ja) | 2002-04-09 | 2005-08-11 | 協和醗酵工業株式会社 | 抗体組成物のＦｃγ受容体ＩＩＩａに対する結合活性を高める方法 |
| EP1502603A4 (en) | 2002-04-09 | 2006-12-13 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | AN ANTIBODY COMPOSITION CONTAINING MEDICAMENT FOR PATIENTS WITH Fc gamma RIIIa POLYMORPHISM |
| WO2003093318A1 (en) | 2002-04-29 | 2003-11-13 | Genpat77 Pharmacogenetics Ag | Novel antibody binding tcr and tirc7 and its use in therapy and diagnosis |
| US7081443B2 (en) | 2002-05-21 | 2006-07-25 | Korea Advanced Institutes Of Science And Technology (Kaist) | Chimeric comp-ang1 molecule |
| SE0201863D0 (en) | 2002-06-18 | 2002-06-18 | Cepep Ab | Cell penetrating peptides |
| EP2366718A3 (en) | 2002-06-28 | 2012-05-02 | Domantis Limited | Ligand |
| US7140727B2 (en) | 2002-07-10 | 2006-11-28 | Isl Technologies, Llc | Eyeglass frame assembly |
| JP5179702B2 (ja) | 2002-10-10 | 2013-04-10 | メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 受容体Ｅｒｂ−Ｂ１に対する医薬組成物 |
| US7361740B2 (en) | 2002-10-15 | 2008-04-22 | Pdl Biopharma, Inc. | Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis |
| RU2326127C2 (ru) | 2002-12-16 | 2008-06-10 | Джинентех, Инк. | Варианты иммуноглобулинов и их применение |
| US7534427B2 (en) | 2002-12-31 | 2009-05-19 | Immunomedics, Inc. | Immunotherapy of B cell malignancies and autoimmune diseases using unconjugated antibodies and conjugated antibodies and antibody combinations and fusion proteins |
| ES2897506T3 (es) | 2003-01-09 | 2022-03-01 | Macrogenics Inc | Identificación y modificación de anticuerpos con regiones Fc variantes y métodos de utilización de los mismos |
| CN101567209B (zh) | 2003-01-13 | 2012-11-28 | 迪斯尼实业公司 | 快速播放dvd |
| US8367374B2 (en) | 2003-01-22 | 2013-02-05 | Roche Glycart Ag | Fusion constructs and use of same to produce antibodies with increased Fc receptor binding affinity and effector function |
| BRPI0407446A (pt) | 2003-02-13 | 2006-01-31 | Pharmacia Corp | Anticorpos para c-met para o tratamento de cânceres |
| US7871607B2 (en) | 2003-03-05 | 2011-01-18 | Halozyme, Inc. | Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminoglycanases |
| US20060104968A1 (en) | 2003-03-05 | 2006-05-18 | Halozyme, Inc. | Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminogly ycanases |
| TWI353991B (en) | 2003-05-06 | 2011-12-11 | Syntonix Pharmaceuticals Inc | Immunoglobulin chimeric monomer-dimer hybrids |
| EP2395016A3 (en) | 2003-05-30 | 2012-12-19 | Merus B.V. | Design and use of paired variable regions of specific binding molecules |
| JP2007525466A (ja) | 2003-05-30 | 2007-09-06 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | 抗ｖｅｇｆ抗体での治療 |
| US20050163782A1 (en) | 2003-06-27 | 2005-07-28 | Biogen Idec Ma Inc. | Modified binding molecules comprising connecting peptides |
| AU2004255216B2 (en) | 2003-07-01 | 2010-08-19 | Immunomedics, Inc. | Multivalent carriers of bi-specific antibodies |
| US7579157B2 (en) | 2003-07-10 | 2009-08-25 | Hoffmann-La Roche Inc. | Antibody selection method against IGF-IR |
| US20050054048A1 (en) | 2003-07-29 | 2005-03-10 | Luigi Grasso | Antibodies and methods for generating genetically altered antibodies with enhanced effector function |
| US20050106667A1 (en) | 2003-08-01 | 2005-05-19 | Genentech, Inc | Binding polypeptides with restricted diversity sequences |
| WO2005044853A2 (en) | 2003-11-01 | 2005-05-19 | Genentech, Inc. | Anti-vegf antibodies |
| EP2502935B1 (en) | 2003-08-22 | 2017-03-29 | Biogen MA Inc. | Improved antibodies having altered effector function and methods for making the same |
| WO2005027966A2 (en) | 2003-09-05 | 2005-03-31 | Genentech, Inc. | Antibodies with altered effector functions |
| US20050064509A1 (en) | 2003-09-23 | 2005-03-24 | The Regents Of The University Of California | Use of templated self assembly to create novel multifunctional species |
| JPWO2005035586A1 (ja) | 2003-10-08 | 2007-11-22 | 協和醗酵工業株式会社 | 融合蛋白質組成物 |
| ES2831379T3 (es) | 2003-10-09 | 2021-06-08 | Ambrx Inc | Derivados poliméricos para la modificación selectiva de proteínas |
| WO2005035778A1 (ja) | 2003-10-09 | 2005-04-21 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | α1,6-フコシルトランスフェラーゼの機能を抑制するRNAを用いた抗体組成物の製造法 |
| BR122020013239B1 (pt) | 2003-11-05 | 2022-05-10 | Roche Glycart Ag | Anticorpo anti-cd20 humano tipo ii humanizado, seus usos, bem como composição farmacêutica |
| WO2005051976A2 (en) | 2003-11-20 | 2005-06-09 | Ansata Therapeutics, Inc. | Protein and peptide ligation processes and one-step purification processes |
| EP2974742A1 (en) | 2003-11-21 | 2016-01-20 | UCB Biopharma SPRL | Method for the treatment of multiple sclerosis by inhibiting il-17 activity |
| JPWO2005053742A1 (ja) | 2003-12-04 | 2007-06-28 | 協和醗酵工業株式会社 | 抗体組成物を含有する医薬 |
| MXPA06006985A (es) | 2003-12-19 | 2006-08-31 | Genentech Inc | Fragmentos de anticuerpo monovalente utiles como terapueticos. |
| SG135176A1 (en) | 2004-02-02 | 2007-09-28 | Ambrx Inc | Modified human four helical bundle polypeptides and their uses |
| EP1725585A2 (en) | 2004-03-10 | 2006-11-29 | Lonza Ltd | Method for producing antibodies |
| WO2005092925A2 (en) | 2004-03-24 | 2005-10-06 | Xencor, Inc. | Immunoglobulin variants outside the fc region |
| DK1737891T3 (da) | 2004-04-13 | 2013-03-25 | Hoffmann La Roche | Anti-p-selectin-antistoffer |
| JP2008512352A (ja) | 2004-07-17 | 2008-04-24 | イムクローン システムズ インコーポレイティド | 新規な四価の二重特異性抗体 |
| WO2006031370A2 (en) | 2004-08-19 | 2006-03-23 | Genentech, Inc. | Polypeptide variants with altered effector function |
| TWI309240B (en) | 2004-09-17 | 2009-05-01 | Hoffmann La Roche | Anti-ox40l antibodies |
| SI1791565T1 (sl) | 2004-09-23 | 2016-08-31 | Genentech, Inc. | Cisteinsko konstruirana protitelesa in konjugati |
| CA2484405C (en) | 2004-10-12 | 2011-03-22 | Armatec Survivability Corp. | Disc brake system |
| JO3000B1 (ar) | 2004-10-20 | 2016-09-05 | Genentech Inc | مركبات أجسام مضادة . |
| CA2587766A1 (en) | 2004-11-10 | 2007-03-01 | Macrogenics, Inc. | Engineering fc antibody regions to confer effector function |
| PL1838733T3 (pl) | 2004-12-21 | 2012-02-29 | Medimmune Ltd | Przeciwciała skierowane przeciwko angiopoetynie-2 i ich zastosowania |
| EP1871805B1 (en) | 2005-02-07 | 2019-09-25 | Roche Glycart AG | Antigen binding molecules that bind egfr, vectors encoding same, and uses thereof |
| US20090246206A1 (en) | 2005-02-23 | 2009-10-01 | Merrimack Pharmaceuticals, Inc. | Bispecific binding agents for modulating biological activity |
| JP5057967B2 (ja) | 2005-03-31 | 2012-10-24 | 中外製薬株式会社 | ｓｃ（Ｆｖ）２構造異性体 |
| AU2006232287B2 (en) | 2005-03-31 | 2011-10-06 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods for producing polypeptides by regulating polypeptide association |
| TW200720289A (en) | 2005-04-01 | 2007-06-01 | Hoffmann La Roche | Antibodies against CCR5 and uses thereof |
| US9963510B2 (en) | 2005-04-15 | 2018-05-08 | Macrogenics, Inc. | Covalent diabodies and uses thereof |
| CA2605024C (en) | 2005-04-15 | 2018-05-22 | Macrogenics, Inc. | Covalent diabodies and uses thereof |
| AU2006239851B2 (en) | 2005-04-26 | 2011-06-16 | Medimmune, Llc | Modulation of antibody effector function by hinge domain engineering |
| EP1877441A2 (en) | 2005-04-26 | 2008-01-16 | Bioren, Inc. | Method of producing human igg antibodies with enhanced effector functions |
| US9241994B2 (en) | 2005-06-10 | 2016-01-26 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Pharmaceutical compositions containing sc(Fv)2 |
| AU2006256030B2 (en) | 2005-06-10 | 2012-06-21 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Pharmaceutical compositions containing sc(Fv)2 |
| US8008453B2 (en) | 2005-08-12 | 2011-08-30 | Amgen Inc. | Modified Fc molecules |
| TWI323734B (en) | 2005-08-19 | 2010-04-21 | Abbott Lab | Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof |
| US7612181B2 (en) | 2005-08-19 | 2009-11-03 | Abbott Laboratories | Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof |
| AU2006290433B2 (en) | 2005-08-26 | 2012-06-07 | Roche Glycart Ag | Modified antigen binding molecules with altered cell signaling activity |
| US7412827B2 (en) | 2005-09-30 | 2008-08-19 | Caterpillar Inc. | Multi-pump control system and method |
| US8142781B2 (en) | 2005-10-07 | 2012-03-27 | Armagen Technologies, Inc. | Fusion proteins for blood-brain barrier delivery |
| WO2007044887A2 (en) | 2005-10-11 | 2007-04-19 | Transtarget, Inc. | Method for producing a population of homogenous tetravalent bispecific antibodies |
| US7666622B2 (en) | 2005-10-19 | 2010-02-23 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Monomeric self-associating fusion polypeptides and therapeutic uses thereof |
| TW200732350A (en) | 2005-10-21 | 2007-09-01 | Amgen Inc | Methods for generating monovalent IgG |
| BRPI0619853A2 (pt) | 2005-12-15 | 2016-08-23 | Astrazeneca Ab | combinação, composição farmacêutica, e, métodos de antagonização da atividade biológica, de tratamento de angiogênese relacionada à doença em um mamífero e de tratamento de câncer em um mamífero |
| FR2894959B1 (fr) | 2005-12-15 | 2008-02-29 | Galderma Res & Dev | Derives biphenyliques agonistes selectifs du recepteur rar-gamma |
| GB0601513D0 (en) | 2006-01-25 | 2006-03-08 | Univ Erasmus Medical Ct | Binding molecules 3 |
| AR059066A1 (es) | 2006-01-27 | 2008-03-12 | Amgen Inc | Combinaciones del inhibidor de la angiopoyetina -2 (ang2) y el inhibidor del factor de crecimiento endotelial vascular (vegf) |
| BRPI0707824A2 (pt) | 2006-02-15 | 2011-05-10 | Imclone Systems Inc | proteÍna de ligaÇço a antÍgeno, e, mÉtodos de neutralizaÇço da ativaÇço de um receptor de tirosina quinase, de inibiÇço de angiogÊnese, de reduÇço de crescimento de tumor e de produÇço de uma proteÍna de ligaÇço a antÍgeno |
| GEP20135917B (en) | 2006-03-17 | 2013-09-10 | Biogen Idec Inc | Stabilized polypeptide compositions |
| EP1996236A2 (en) | 2006-03-22 | 2008-12-03 | National Institute of Immunology | Novel bioconjugates as therapeutic agent and synthesis thereof |
| AR060070A1 (es) | 2006-03-24 | 2008-05-21 | Merck Patent Gmbh | Dominios proteicos heterodimericos obtenidos por ingenieria |
| US20070274985A1 (en) * | 2006-05-26 | 2007-11-29 | Stefan Dubel | Antibody |
| WO2007149010A1 (fr) | 2006-06-06 | 2007-12-27 | Oleg Iliich Epshtein | Préparation médicamenteuse destinée au traitement peroral de l'excès pondéral, du diabète sucré et de maladies accompagnées d'une perturbation de la tolérance du glucose |
| CA2655205A1 (en) | 2006-06-12 | 2007-12-21 | Receptor Biologix Inc. | Pan-cell surface receptor- specific therapeutics |
| EP2035456A1 (en) | 2006-06-22 | 2009-03-18 | Novo Nordisk A/S | Production of bispecific antibodies |
| WO2008005828A2 (en) | 2006-06-30 | 2008-01-10 | Novo Nordisk A/S | PHARMACEUTICALLY ACCEPTABLE COMPOSITIONS COMPRISING ANTIBODY MOLECULES SPECIFIC TO LAMININ-5 α3 CHAIN DOMAINS G1G2 AND USE THEREOF |
| AR062223A1 (es) | 2006-08-09 | 2008-10-22 | Glycart Biotechnology Ag | Moleculas de adhesion al antigeno que se adhieren a egfr, vectores que los codifican, y sus usos de estas |
| US8497246B2 (en) | 2006-08-18 | 2013-07-30 | Armagen Technologies, Inc. | Methods for diagnosing and treating CNS disorders by trans-blood-brain barrier delivery of protein compositions |
| EP2059533B1 (en) | 2006-08-30 | 2012-11-14 | Genentech, Inc. | Multispecific antibodies |
| CN101205255A (zh) | 2006-12-14 | 2008-06-25 | 上海中信国健药业有限公司 | 抗cd20四价抗体、其制备方法和应用 |
| KR20140031996A (ko) | 2006-12-19 | 2014-03-13 | 제넨테크, 인크. | 조기 종양의 치료 및 아주반트 및 네오아주반트 요법을 위한 ｖｅｇｆ－특이적 길항제 |
| US20080226635A1 (en) | 2006-12-22 | 2008-09-18 | Hans Koll | Antibodies against insulin-like growth factor I receptor and uses thereof |
| BRPI0808055A2 (pt) | 2007-02-16 | 2013-07-30 | Merrimack Pharmaceuticals Inc | anticorpo monoclonal isolado ou porÇço do mesmo que se liga ao antÍgeno, composiÇço, Ácido nucleico isolado, vetor de expressço, cÉlula hospedeira, hibridoma, kit, uso de um anticorpo monoclonal isolado ou porÇço do mesmo que se liga ao antÍgeno, mÉtodo para diagnosticar um cÂncer associado com erbb3 em um paciente, e, anticorpo |
| US10259860B2 (en) | 2007-02-27 | 2019-04-16 | Aprogen Inc. | Fusion proteins binding to VEGF and angiopoietin |
| EP2626371A1 (en) | 2007-07-31 | 2013-08-14 | MedImmune, LLC | Multispecific epitope binding proteins and uses thereof |
| JP5485152B2 (ja) | 2007-08-15 | 2014-05-07 | バイエル・インテレクチュアル・プロパティ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング | 単一特異性および多特異性抗体ならびに使用方法 |
| JP5702603B2 (ja) | 2007-08-15 | 2015-04-15 | アイエスピー インヴェストメンツ インコーポレイテッドＩｓｐ Ｉｎｖｅｓｔｍｅｎｔｓ Ｉｎｃ． | 重合可能な官能基を含むポリビニルアミドポリマー |
| DE102007038753A1 (de) | 2007-08-16 | 2009-02-19 | Giesecke & Devrient Gmbh | Vorrichtung und Verfahren für die Kalibrierung eines Sensorsystems |
| CN101842116A (zh) | 2007-08-28 | 2010-09-22 | 比奥根艾迪克Ma公司 | 结合igf-1r多个表位的组合物 |
| EP2050764A1 (en) | 2007-10-15 | 2009-04-22 | sanofi-aventis | Novel polyvalent bispecific antibody format and uses thereof |
| US8242247B2 (en) * | 2007-12-21 | 2012-08-14 | Hoffmann-La Roche Inc. | Bivalent, bispecific antibodies |
| US9266967B2 (en) | 2007-12-21 | 2016-02-23 | Hoffmann-La Roche, Inc. | Bivalent, bispecific antibodies |
| US8227577B2 (en) | 2007-12-21 | 2012-07-24 | Hoffman-La Roche Inc. | Bivalent, bispecific antibodies |
| US20090162359A1 (en) | 2007-12-21 | 2009-06-25 | Christian Klein | Bivalent, bispecific antibodies |
| ES2563027T3 (es) | 2008-01-07 | 2016-03-10 | Amgen Inc. | Método para fabricación de moléculas heterodímeras Fc de anticuerpos utilizando efectos de conducción electrostática |
| JP2009181819A (ja) | 2008-01-31 | 2009-08-13 | Hitachi High-Technologies Corp | 荷電粒子線装置 |
| JP4438875B2 (ja) | 2008-02-27 | 2010-03-24 | 三菱自動車工業株式会社 | 車両の貯蔵燃料量推定装置 |
| CN102099377A (zh) | 2008-04-11 | 2011-06-15 | 新兴产品开发西雅图有限公司 | Cd37免疫治疗剂及其与双功能化学治疗剂的联合 |
| US10407513B2 (en) | 2008-09-26 | 2019-09-10 | Ucb Biopharma Sprl | Biological products |
| EP2342231A1 (en) | 2008-09-26 | 2011-07-13 | Roche Glycart AG | Bispecific anti-egfr/anti-igf-1r antibodies |
| US8268314B2 (en) | 2008-10-08 | 2012-09-18 | Hoffmann-La Roche Inc. | Bispecific anti-VEGF/anti-ANG-2 antibodies |
| ES2828721T3 (es) | 2008-10-14 | 2021-05-27 | Genentech Inc | Variantes de inmunoglobulina y usos de las mismas |
| RU2011127198A (ru) | 2008-12-04 | 2013-01-10 | Эбботт Лэборетриз | Иммуноглобулины с двойными вариабельными доменами и их применение |
| CN102365296A (zh) | 2009-01-26 | 2012-02-29 | 根马布股份公司 | 用于生成抗体混合物的方法 |
| US8940501B2 (en) | 2009-01-30 | 2015-01-27 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Methods for ligation and uses thereof |
| TWI461211B (zh) | 2009-03-20 | 2014-11-21 | Genentech Inc | 抗－ｈｅｒ抗體 |
| RU2598248C2 (ru) * | 2009-04-02 | 2016-09-20 | Роше Гликарт Аг | Полиспецифичные антитела, включающие антитела полной длины и одноцепочечные фрагменты fab |
| WO2010112194A1 (en) | 2009-04-02 | 2010-10-07 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Antigen-binding polypeptides and multispecific antibodies comprising them |
| PE20120550A1 (es) | 2009-04-07 | 2012-05-21 | Roche Glycart Ag | ANTICUERPOS BIESPECIFICOS ANTI-ErbB-3/ANTI-C-MET |
| AU2010233993A1 (en) | 2009-04-07 | 2011-09-08 | Roche Glycart Ag | Bispecific anti-ErbB-1/anti-c-Met antibodies |
| SG175077A1 (en) | 2009-04-07 | 2011-11-28 | Roche Glycart Ag | Trivalent, bispecific antibodies |
| CN102459346B (zh) | 2009-04-27 | 2016-10-26 | 昂考梅德药品有限公司 | 制造异源多聚体分子的方法 |
| PE20120540A1 (es) * | 2009-05-27 | 2012-05-09 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos triespecificos o tetraespecificos |
| US9676845B2 (en) | 2009-06-16 | 2017-06-13 | Hoffmann-La Roche, Inc. | Bispecific antigen binding proteins |
| US8703132B2 (en) | 2009-06-18 | 2014-04-22 | Hoffmann-La Roche, Inc. | Bispecific, tetravalent antigen binding proteins |
| EP2451479B1 (en) | 2009-07-06 | 2015-04-01 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Bi-specific digoxigenin binding antibodies |
| WO2011028952A1 (en) | 2009-09-02 | 2011-03-10 | Xencor, Inc. | Compositions and methods for simultaneous bivalent and monovalent co-engagement of antigens |
| EP2478013B1 (en) | 2009-09-16 | 2018-10-24 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Coiled coil and/or tether containing protein complexes and uses thereof |
| US9481730B2 (en) | 2009-09-29 | 2016-11-01 | Roche Glycart Ag | DR5—FAP bispecific death receptor agonistic antibodies |
| KR20120125611A (ko) | 2009-12-29 | 2012-11-16 | 이머전트 프로덕트 디벨롭먼트 시애틀, 엘엘씨 | 이종이량체 결합 단백질 및 이의 용도 |
| US20120021409A1 (en) | 2010-02-08 | 2012-01-26 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Common Light Chain Mouse |
| CA2789154C (en) | 2010-02-08 | 2024-06-11 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Common light chain mouse |
| US20130045492A1 (en) | 2010-02-08 | 2013-02-21 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods For Making Fully Human Bispecific Antibodies Using A Common Light Chain |
| EP2554669B1 (en) | 2010-03-26 | 2018-09-19 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Novel antibody having modification site introduced therein, and antibody fragment |
| AR080794A1 (es) | 2010-03-26 | 2012-05-09 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos bivalentes biespecificos anti- vegf/ anti-ang-2 |
| US9527926B2 (en) | 2010-05-14 | 2016-12-27 | Rinat Neuroscience Corp. | Heterodimeric proteins and methods for producing and purifying them |
| US9834615B2 (en) | 2010-08-16 | 2017-12-05 | Novimmune Sa | Methods for the generation of multispecific and multivalent antibodies |
| EP2609112B1 (en) | 2010-08-24 | 2017-11-22 | Roche Glycart AG | Activatable bispecific antibodies |
| MX340558B (es) | 2010-08-24 | 2016-07-14 | F Hoffmann-La Roche Ag * | Anticuerpos biespecificos que comprenden fragmento fv estabilizado con disulfuro. |
| RS59589B1 (sr) | 2010-11-05 | 2019-12-31 | Zymeworks Inc | Dizajniranje stabilnog heterodimernog antitela sa mutacijama u fc domenu |
| EP3434767A1 (en) | 2010-11-30 | 2019-01-30 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Cytotoxicity-inducing therapeutic agent |
| NZ724348A (en) | 2010-11-30 | 2019-12-20 | Genentech Inc | Low affinity blood brain barrier receptor antibodies and uses therefor |
| WO2012116927A1 (en) | 2011-02-28 | 2012-09-07 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Monovalent antigen binding proteins |
| RU2607038C2 (ru) | 2011-02-28 | 2017-01-10 | Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг | Антигенсвязывающие белки |
| CN108285488B (zh) | 2011-03-25 | 2023-01-24 | 伊克诺斯科学公司 | 异二聚体免疫球蛋白 |
| CA2828662A1 (en) | 2011-04-20 | 2012-10-26 | Roche Glycart Ag | Method and constructs for the ph dependent passage of the blood-brain-barrier |
| KR20120120826A (ko) * | 2011-04-25 | 2012-11-02 | 삼성전기주식회사 | 질화물 반도체 소자 및 그 제조방법 |
| US10081684B2 (en) | 2011-06-28 | 2018-09-25 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Using sortases to install click chemistry handles for protein ligation |
| KR102049122B1 (ko) | 2011-06-30 | 2019-11-26 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 헤테로이량화 폴리펩티드 |
| WO2013012733A1 (en) | 2011-07-15 | 2013-01-24 | Biogen Idec Ma Inc. | Heterodimeric fc regions, binding molecules comprising same, and methods relating thereto |
| MX2014001799A (es) | 2011-08-23 | 2014-03-31 | Roche Glycart Ag | Anticuerpos sin fc qie comprenden dos fragmentos fab y metodos de uso. |
| JP6159724B2 (ja) | 2011-08-23 | 2017-07-05 | ロシュ グリクアート アーゲー | Ｔ細胞活性化抗原に対して特異的な二重特異性抗体及び腫瘍抗原および使用方法 |
| HUE039703T2 (hu) | 2011-08-23 | 2019-01-28 | Roche Glycart Ag | Bispecifikus antigénkötõ molekulák |
| RU2014109038A (ru) | 2011-08-23 | 2015-09-27 | Рош Гликарт Аг | Антитела к хондроитинсульфат протеогликану меланомы |
| ES2659764T3 (es) | 2011-08-23 | 2018-03-19 | Roche Glycart Ag | Moléculas biespecíficas de unión a antígeno activadoras de linfocitos T |
| WO2013065708A1 (ja) | 2011-10-31 | 2013-05-10 | 中外製薬株式会社 | 重鎖と軽鎖の会合が制御された抗原結合分子 |
| BR112014015018A2 (pt) | 2011-12-19 | 2020-10-27 | Synimmune Gmbh | moléculas de anticorpo biespecífico e seu método de produção, bem como composição farmacêutica e molécula de ácido nucleico |
| AU2012355415B2 (en) | 2011-12-20 | 2017-07-06 | Medimmune, Llc | Modified polypeptides for bispecific antibody scaffolds |
| MX354049B (es) | 2011-12-21 | 2018-02-09 | Hoffmann La Roche | Método rápido para la clonación y expresión de segmentos génicos de regiones variables de anticuerpos cognados. |
| EP2834273B1 (en) | 2012-04-05 | 2018-08-22 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Bispecific antibodies against human tweak and human il17 and uses thereof |
| RS59260B1 (sr) | 2012-04-20 | 2019-10-31 | Merus Nv | Postupci i sredstva za proizvodnju heterodimernih ig-sličnih molekula |
| WO2013174873A1 (en) | 2012-05-24 | 2013-11-28 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Multispecific antibodies |
| JP6309002B2 (ja) | 2012-06-27 | 2018-04-11 | エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ | 標的に特異的に結合する少なくとも１つの結合実体を含む抗体Ｆｃ領域結合体を作製するための方法およびその使用 |
| JP6445429B2 (ja) | 2012-06-27 | 2018-12-26 | エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ | 少なくとも２つの異なる標的化実体を含むテーラーメイドで選択的かつ多重特異性治療用分子を選択および作製するための方法およびその使用 |
| CA2878843A1 (en) | 2012-07-13 | 2014-01-16 | Zymeworks Inc. | Bispecific asymmetric heterodimers comprising anti-cd3 constructs |
| WO2014041072A1 (en) | 2012-09-14 | 2014-03-20 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Method for the production and selection of molecules comprising at least two different entities and uses thereof |
| KR20150076172A (ko) | 2012-09-25 | 2015-07-06 | 그렌마크 파머수티칼스 에스. 아. | 이질-이합체 면역글로불린의 정제 |
| JP6444874B2 (ja) | 2012-10-08 | 2018-12-26 | ロシュ グリクアート アーゲー | ２つのＦａｂフラグメントを含むＦｃ不含抗体および使用方法 |
| UY35148A (es) | 2012-11-21 | 2014-05-30 | Amgen Inc | Immunoglobulinas heterodiméricas |
| KR102264570B1 (ko) | 2012-11-28 | 2021-06-14 | 자임워크스 인코포레이티드 | 가공된 면역글로불린 중쇄-경쇄 쌍 및 이들의 용도 |
| DK2940135T5 (da) | 2012-12-27 | 2021-09-20 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Heterodimeriseret polypeptid |
| US9605084B2 (en) | 2013-03-15 | 2017-03-28 | Xencor, Inc. | Heterodimeric proteins |
| AU2014227638A1 (en) | 2013-03-15 | 2015-09-17 | Merck Patent Gmbh | Tetravalent bispecific antibodies |
| UA118028C2 (uk) | 2013-04-03 | 2018-11-12 | Рош Глікарт Аг | Біспецифічне антитіло, специфічне щодо fap і dr5, антитіло, специфічне щодо dr5, і спосіб їх застосування |
| EP3041862B1 (en) | 2013-09-05 | 2020-05-06 | IGM Biosciences, Inc. | Constant chain modified bispecific, penta- and hexavalent ig-m antibodies |
| EP3055329B1 (en) | 2013-10-11 | 2018-06-13 | F. Hoffmann-La Roche AG | Multispecific domain exchanged common variable light chain antibodies |
| MX2016008098A (es) | 2013-12-20 | 2017-01-11 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos biespecificos del receptor 2 de factor de crecimiento ipidermico himano (her2) y metodo de uso. |
| MX2016008190A (es) | 2014-01-06 | 2016-10-21 | Hoffmann La Roche | Modulos de lanzadera de barrera cerebral sanguinea monovalente. |
| RU2698969C2 (ru) | 2014-01-15 | 2019-09-02 | Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг | Варианты fc-области с улучшенной способностью связываться с белком а |
| CN110903398B (zh) | 2014-01-15 | 2023-08-15 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 具有修饰的FCRN和保持的蛋白A结合性质的Fc区变体 |
| EP3094649A1 (en) | 2014-01-15 | 2016-11-23 | F. Hoffmann-La Roche AG | Fc-region variants with modified fcrn-binding properties |
| UA117289C2 (uk) | 2014-04-02 | 2018-07-10 | Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг | Мультиспецифічне антитіло |
| CN106573986A (zh) | 2014-07-29 | 2017-04-19 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 多特异性抗体 |
| SI3608337T1 (sl) | 2014-08-04 | 2024-07-31 | F. Hoffmann - La Roche Ag | Biospecifične molekule za aktivacijo celic T in antigensko vezavo |
| EP2982692A1 (en) | 2014-08-04 | 2016-02-10 | EngMab AG | Bispecific antibodies against CD3epsilon and BCMA |
| AU2015330087A1 (en) | 2014-10-08 | 2017-04-06 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Combination therapy of bispecific antibodies specific for FAP and DR5 and chemotherapeutic agents |
| US11952421B2 (en) | 2014-10-09 | 2024-04-09 | Bristol-Myers Squibb Company | Bispecific antibodies against CD3EPSILON and ROR1 |
| MA40972B1 (fr) | 2014-11-20 | 2020-11-30 | Hoffmann La Roche | Molécules bispécifiques de liaison à l'antigène activant les lymphocytes t ciblant folr1 et cd3 |
| PT3221357T (pt) | 2014-11-20 | 2020-07-28 | Hoffmann La Roche | Cadeias leves comuns e métodos de utilização |
| CN107001482B (zh) | 2014-12-03 | 2021-06-15 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 多特异性抗体 |
| JP7239320B2 (ja) | 2015-10-02 | 2023-03-14 | エフ． ホフマン－ラ ロシュ アーゲー | 多重特異性抗体 |
| WO2017055385A1 (en) | 2015-10-02 | 2017-04-06 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Anti-cd3xgd2 bispecific t cell activating antigen binding molecules |
| BR112018001530A2 (pt) | 2015-10-02 | 2018-11-06 | Hoffmann La Roche | anticorpo biespecífico, polinucleotídeo, vetor, célula hospedeira, métodos para produzir o anticorpo biespecífico e de inibição do crescimento de células tumorais e composição farmacêutica |
| MX2018003631A (es) | 2015-10-02 | 2018-08-01 | Hoffmann La Roche | Moleculas biespecificas de union a antigeno activadoras de celulas t. |
| WO2017055392A1 (en) | 2015-10-02 | 2017-04-06 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Anti-cd3xcd44v6 bispecific t cell activating antigen binding molecules |
| MY198560A (en) | 2015-10-02 | 2023-09-05 | Hoffmann La Roche | Bispecific antibodies specific for a costimulatory tnf receptor |
| WO2017055391A1 (en) | 2015-10-02 | 2017-04-06 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Bispecific t cell activating antigen binding molecules binding mesothelin and cd3 |
| WO2017055318A1 (en) | 2015-10-02 | 2017-04-06 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Cd33xcd3 bispecific t cell activating antigen binding molecules |
| EP3150636A1 (en) | 2015-10-02 | 2017-04-05 | F. Hoffmann-La Roche AG | Tetravalent multispecific antibodies |
| EP3356407B1 (en) | 2015-10-02 | 2021-11-03 | F. Hoffmann-La Roche AG | Bispecific anti-cd19xcd3 t cell activating antigen binding molecules |
| WO2017055393A1 (en) | 2015-10-02 | 2017-04-06 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Anti-cd3xtim-3 bispecific t cell activating antigen binding molecules |
| US20170096495A1 (en) | 2015-10-02 | 2017-04-06 | Hoffmann-La Roche Inc. | Bispecific t cell activating antigen binding molecules |
| JP7074665B2 (ja) | 2015-10-07 | 2022-05-24 | エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト | 共刺激ｔｎｆ受容体に対する四価の二重特異性抗体発明の分野 |
| BR112020008031A2 (pt) | 2017-11-01 | 2020-10-27 | F. Hoffmann-La Roche Ag | anticorpo multiespecíficos, método para a preparação do anticorpo multiespecífico, conjunto de ácidos nucleicos, vetor de expressão, célula hospedeira e composição farmacêutica |
| TW202428614A (zh) | 2018-12-21 | 2024-07-16 | 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 | 結合cd3之抗體 |
| BR112021020843A2 (pt) | 2019-04-25 | 2022-02-01 | Hoffmann La Roche | Conjunto de polipeptídeos precursores heterodiméricos, polipeptídeos heterodiméricos, métodos para gerar um polipeptídeo heterodimérico e para identificar um polipeptídeo heterodimérico multiespecífico, polipeptídeo heterodimérico multiespecífico, primeiro e segundo polipeptídeo precursor heterodimérico |
| WO2021122875A1 (en) | 2019-12-18 | 2021-06-24 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Antibodies binding to hla-a2/mage-a4 |
| CN115916825A (zh) | 2020-06-19 | 2023-04-04 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 与cd3和cd19结合的抗体 |
| PE20230835A1 (es) | 2020-06-19 | 2023-05-19 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos que se unen a cd3 |
-
2010
- 2010-05-17 US US12/780,971 patent/US9676845B2/en active Active
- 2010-06-14 AR ARP100102095A patent/AR077088A1/es unknown
- 2010-06-14 CN CN201080026530.3A patent/CN102459345B/zh active Active
- 2010-06-14 ES ES10725615.8T patent/ES2449623T3/es active Active
- 2010-06-14 PE PE2011002095A patent/PE20120549A1/es not_active Application Discontinuation
- 2010-06-14 JP JP2012515381A patent/JP5689463B2/ja active Active
- 2010-06-14 AU AU2010262129A patent/AU2010262129A1/en not_active Abandoned
- 2010-06-14 SG SG2011093317A patent/SG176886A1/en unknown
- 2010-06-14 CA CA2764392A patent/CA2764392C/en active Active
- 2010-06-14 RU RU2012100865/10A patent/RU2573914C2/ru active
- 2010-06-14 PL PL10725615T patent/PL2443154T3/pl unknown
- 2010-06-14 MX MX2011013615A patent/MX2011013615A/es active IP Right Grant
- 2010-06-14 WO PCT/EP2010/003559 patent/WO2010145792A1/en active Application Filing
- 2010-06-14 EP EP10725615.8A patent/EP2443154B1/en active Active
- 2010-06-14 PT PT107256158T patent/PT2443154E/pt unknown
- 2010-06-14 EP EP13197845.4A patent/EP2712872A1/en not_active Withdrawn
- 2010-06-14 SI SI201030525T patent/SI2443154T1/sl unknown
- 2010-06-14 KR KR1020127001029A patent/KR101431345B1/ko active IP Right Grant
- 2010-06-14 DK DK10725615.8T patent/DK2443154T3/da active
- 2010-06-14 BR BRPI1008145A patent/BRPI1008145B8/pt active IP Right Grant
- 2010-06-15 TW TW099119544A patent/TW201102087A/zh unknown
-
2011
- 2011-11-10 IL IL216266A patent/IL216266A0/en unknown
- 2011-11-21 ZA ZA2011/08536A patent/ZA201108536B/en unknown
- 2011-12-14 CL CL2011003148A patent/CL2011003148A1/es unknown
-
2012
- 2012-11-08 HK HK12111271.3A patent/HK1170506A1/zh unknown
-
2014
- 2014-03-06 CY CY20141100178T patent/CY1115091T1/el unknown
- 2014-03-18 HR HRP20140258AT patent/HRP20140258T1/hr unknown
-
2017
- 2017-04-24 US US15/495,641 patent/US10640555B2/en active Active
-
2020
- 2020-04-08 US US16/843,763 patent/US11673945B2/en active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1173878A (zh) * | 1995-10-16 | 1998-02-18 | 尤尼利弗公司 | 双功能或双价抗体片段类似物 |
| CN1603345A (zh) * | 2003-09-29 | 2005-04-06 | 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所 | 一种三价双特异性抗体，其制备方法及用途 |
| CN101218251A (zh) * | 2005-02-28 | 2008-07-09 | 森托科尔公司 | 异二聚体蛋白结合组合物 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| MILLER K.等: "Design, construction, and in vitro analyses of multivalent antibodies", 《JOURNAL OF IMMUNOLOGY》 * |
| MORRISON S.L.等: "Two Heads Are Better Than One", 《NATURE》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104582736A (zh) * | 2012-06-21 | 2015-04-29 | 印第安纳大学研究及科技有限公司 | Fc效应子功能改变的肠降血糖素受体配体多肽Fc区融合多肽和缀合物 |
| CN105189557A (zh) * | 2013-03-15 | 2015-12-23 | 默克专利有限公司 | 四价双特异性抗体 |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102459345B (zh) | 双特异性抗原结合蛋白 | |
| CN102803295B (zh) | 双特异性、四价抗原结合蛋白 | |
| CN102448985B (zh) | 三或四特异性抗体 | |
| US20200062826A1 (en) | Trivalent, bispecific antibodies | |
| CN103068846B9 (zh) | 包含二硫键稳定性Fv片段的双特异性抗体 | |
| CN102946902B (zh) | 双特异性抗体 | |
| EP2414391B1 (en) | Multispecific antibodies comprising full length antibodies and single chain fab fragments | |
| CN103502271B (zh) | 抗原结合蛋白 | |
| US20100254988A1 (en) | Bispecific Anti ErbB2 / Anti cMet Antibodies | |
| US20140135482A1 (en) | Bispecific Anti ErbB3 / Anti cMet Antibodies | |
| US20120149879A1 (en) | Bispecific anti-egfr/anti-igf-1r antibodies | |
| CN104379604A (zh) | 多特异性抗体 | |
| CN103403025A (zh) | 单价抗原结合蛋白 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: HK Ref legal event code: DE Ref document number: 1170506 Country of ref document: HK |
|
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: HK Ref legal event code: GR Ref document number: 1170506 Country of ref document: HK |