[go: up one dir, main page]
More Web Proxy on the site http://driver.im/

RU2020134412A - Способы и композиции для нацеленной генетической модификации с использованием парных гидовых рнк - Google Patents

Способы и композиции для нацеленной генетической модификации с использованием парных гидовых рнк Download PDF

Info

Publication number
RU2020134412A
RU2020134412A RU2020134412A RU2020134412A RU2020134412A RU 2020134412 A RU2020134412 A RU 2020134412A RU 2020134412 A RU2020134412 A RU 2020134412A RU 2020134412 A RU2020134412 A RU 2020134412A RU 2020134412 A RU2020134412 A RU 2020134412A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
million
cell
guide rna
allele
rna
Prior art date
Application number
RU2020134412A
Other languages
English (en)
Inventor
Эндрю Дж. МЕРФИ
Дэвид ФРЕНДЕВЕЙ
Ка-Ман Венус ЛАЙ
Войтек АУЭРБАХ
Густаво ДРОГУЭТТ
Энтони ГАЛЬЯРДИ
Дэвид М. ВАЛЕНЦУЭЛА
Вера ВОРОНИНА
Линн МАКДОНАЛЬД
Джордж Д. Янкопулос
Original Assignee
Регенерон Фармасьютикалз, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Регенерон Фармасьютикалз, Инк. filed Critical Регенерон Фармасьютикалз, Инк.
Publication of RU2020134412A publication Critical patent/RU2020134412A/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
    • C12N15/102—Mutagenizing nucleic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
    • A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
    • A01K67/0275—Genetically modified vertebrates, e.g. transgenic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/8509—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells for producing genetically modified animals, e.g. transgenic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
    • C12N15/90—Stable introduction of foreign DNA into chromosome
    • C12N15/902—Stable introduction of foreign DNA into chromosome using homologous recombination
    • C12N15/907—Stable introduction of foreign DNA into chromosome using homologous recombination in mammalian cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/16—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1)
    • C12N9/22—Ribonucleases RNAses, DNAses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6813—Hybridisation assays
    • C12Q1/6827—Hybridisation assays for detection of mutation or polymorphism
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2217/00—Genetically modified animals
    • A01K2217/07—Animals genetically altered by homologous recombination
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2227/00—Animals characterised by species
    • A01K2227/10—Mammal
    • A01K2227/105—Murine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/10—Type of nucleic acid
    • C12N2310/20—Type of nucleic acid involving clustered regularly interspaced short palindromic repeats [CRISPRs]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2537/00—Reactions characterised by the reaction format or use of a specific feature
    • C12Q2537/10—Reactions characterised by the reaction format or use of a specific feature the purpose or use of
    • C12Q2537/16—Assays for determining copy number or wherein the copy number is of special importance

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Claims (65)

1. Способ in vitro модификации генома в клетке, являющейся гетерозиготной по первому аллелю, включающий в себя:
(I) приведение генома в контакт с:
(a) белком Cas; и
(b) первой гидовой РНК, причем первая гидовая РНК содержит первую тракрРНК и первую РНК CRISPR, при этом первая гидовая РНК гибридизуется с первой не аллель-специфической последовательностью распознавания РНК CRISPR, при этом первый аллель находится на первой гомологичной хромосоме, и последовательность распознавания РНК CRISPR расположена центромерно по отношению к локусу на второй гомологичной хромосоме, соответствующему первому аллелю,
при этом белок Cas и первая гидовая РНК в природе вместе не встречаются, и
при этом белок Cas расщепляет первую последовательность распознавания РНК CRISPR с получением двухцепочечного разрыва, а клетку модифицируют так, чтобы она стала гомозиготной по первому аллелю посредством гомологичной рекомбинации с использованием первого аллеля в качестве донорной последовательности для репарации двухцепочечного разрыва; и
(II) идентификации модифицированной клетки, которая является гомозиготной по первому аллелю.
2. Способ по п. 1, в котором этап (I) включает в себя введение в клетку: (a) белка Cas или нуклеиновой кислоты, кодирующей белок Cas; и (b) первой гидовой РНК или ДНК, кодирующей первую гидовую РНК.
3. Способ по п. 2, в котором этап (I) включает в себя введение в клетку нуклеиновой кислоты, кодирующей белок Cas, и введение в клетку первой гидовой РНК, причем нуклеиновая кислота, кодирующая белок Cas, представляет собой РНК.
4. Способ по п. 2, в котором этап (I) включает в себя введение в клетку нуклеиновой кислоты, кодирующей белок Cas, и ДНК, кодирующей первую гидовую РНК, причем нуклеиновая кислота, кодирующая белок Cas, представляет собой ДНК.
5. Способ по п. 2, в котором белок Cas и первую гидовую РНК вводят в клетку в виде первого комплекса белок-РНК.
6. Способ по п. 4, в котором первая гидовая РНК, первая РНК CRISPR и первая тракрРНК представляют собой отдельные молекулы РНК, и при этом:
(a) ДНК, кодирующая белок Cas, функционально связана с первым промотором в первом экспрессионном конструкте; и/или
(b) ДНК, кодирующая первую РНК CRISPR, функционально связана со вторым промотором во втором экспрессионном конструкте; и/или
(c) ДНК, кодирующая первую тракрРНК, функционально связана с третьим промотором в третьем экспрессионном конструкте;
причем первый, второй и третий промоторы активны в клетке.
7. Способ по п. 6, в котором первый, второй и третий экспрессионные конструкты являются компонентами одной молекулы нуклеиновой кислоты.
8. Способ по п. 4, в котором:
(a) ДНК, кодирующая белок Cas, функционально связана с первым промотором в первом экспрессионном конструкте; и/или
(b) ДНК, кодирующая первую гидовую РНК, функционально связана со вторым промотором во втором экспрессионном конструкте,
причем первый и второй промоторы активны в клетке.
9. Способ по п. 8, в котором первый и второй экспрессионные конструкты являются компонентами одной молекулы нуклеиновой кислоты.
10. Способ по любому предшествующему пункту, в котором потеря гетерозиготности происходит в теломерном направлении от двухцепочечного разрыва.
11. Способ по любому предшествующему пункту, в котором этап (I) дополнительно включает в себя приведение генома в контакт со второй гидовой РНК,
причем вторая гидовая РНК содержит вторую тракрРНК и вторую РНК CRISPR,
при этом вторая гидовая РНК гибридизуется со второй не аллель-специфической последовательностью распознавания РНК CRISPR, центромерной по отношению к локусу на второй гомологичной хромосоме, соответствующему первому аллелю, и
при этом белок Cas расщепляет по меньшей мере одну из первой и второй последовательностей распознавания РНК CRISPR с образованием по меньшей мере одного двухцепочечного разрыва.
12. Способ по п. 11, в котором этап (I) дополнительно включает в себя введение в клетку второй гидовой РНК или ДНК, кодирующей вторую гидовую РНК.
13. Способ по п. 11 или 12, в котором белок Cas расщепляет первую последовательность распознавания РНК CRISPR и вторую последовательность распознавания РНК CRISPR.
14. Способ по любому одному из пп. 11-13, в котором первая и вторая последовательности распознавания РНК CRISPR расположены на второй гомологичной хромосоме, но не на первой гомологичной хромосоме.
15. Способ по любому предшествующему пункту, в котором первая последовательность распознавания РНК CRISPR находится на расстоянии от 100 п. н. до 1 т. п. н., от 1 т. п. н. до 10 т. п. н., от 10 т. п. н. до 100 т. п. н., от 100 т. п. н. до 1 млн. п. н., от 1 млн. п. н. до 10 млн. п. н., от 10 млн. п. н. до 20 млн. п. н., от 20 млн. п. н. до 30 млн. п. н., от 30 млн. п. н. до 40 млн. п. н., от 40 млн. п. н. до 50 млн. п. н., от 50 млн. п. н. до 60 млн. п. н., от 60 млн. п. н. до 70 млн. п. н., от 70 млн. п. н. до 80 млн. п. н., от 80 млн. п. н. до 90 млн. п. н. или от 90 млн. п. н. до 100 млн. п. н. от центромеры.
16. Способ по любому предшествующему пункту, в котором первый аллель находится на расстоянии от 100 п. н. до 1 т. п. н., от 1 т. п. н. до 10 т. п. н., от 10 т. п. н. до 100 т. п. н., от 100 т. п. н. до 1 млн. п. н., от 1 млн. п. н. до 10 млн. п. н., от 10 млн. п. н. до 20 млн. п. н., от 20 млн. п. н. до 30 млн. п. н., от 30 млн. п. н. до 40 млн. п. н., от 40 млн. п. н. до 50 млн. п. н., от 50 млн. п. н. до 60 млн. п. н., от 60 млн. п. н. до 70 млн. п. н., от 70 млн. п. н. до 80 млн. п. н., от 80 млн. п. н. до 90 млн. п. н. или от 90 млн. п. н. до 100 млн. п. н. от первой последовательности распознавания РНК CRISPR.
17. Способ по любому предшествующему пункту, в котором первый аллель находится на расстоянии по меньшей мере 100 п. н., по меньшей мере 1 т. п. н., по меньшей мере 10 т. п. н., по меньшей мере 100 т. п. н., по меньшей мере 1 млн. п. н., по меньшей мере 10 млн. п. н., по меньшей мере 20 млн. п. н., по меньшей мере 30 млн. п. н., по меньшей мере 40 млн. п. н., по меньшей мере 50 млн. п. н., по меньшей мере 60 млн. п. н., по меньшей мере 70 млн. п. н., по меньшей мере 80 млн. п. н., по меньшей мере 90 млн. п. н. или по меньшей мере 100 млн. п. н. от первой последовательности распознавания РНК CRISPR.
18. Способ по любому предшествующему пункту, в котором область второй гомологичной хромосомы, заменяемая при потере гетерозиготности, составляет от 100 п. н. до 1 т. п. н., от 1 т. п. н. до 10 т. п. н., от 10 т. п. н. до 100 т. п. н., от 100 т. п. н. до 1 млн. п. н., от 1 млн. п. н. до 10 млн. п. н., от 10 млн. п. н. до 20 млн. п. н., от 20 млн. п. н. до 30 млн. п. н., от 30 млн. п. н. до 40 млн. п. н., от 40 млн. п. н. до 50 млн. п. н., от 50 млн. п. н. до 60 млн. п. н., от 60 млн. п. н. до 70 млн. п. н., от 70 млн. п. н. до 80 млн. п. н., от 80 млн. п. н. до 90 млн. п. н. или от 90 млн. п. н. до 100 млн. п. н.
19. Способ по любому предшествующему пункту, в котором область второй гомологичной хромосомы, заменяемая при потере гетерозиготности, составляет по меньшей мере 100 п. н., по меньшей мере 1 т. п. н., по меньшей мере 10 т. п. н., по меньшей мере 100 т. п. н., по меньшей мере 1 млн. п. н., по меньшей мере 10 млн. п. н., по меньшей мере 20 млн. п. н., по меньшей мере 30 млн. п. н., по меньшей мере 40 млн. п. н., по меньшей мере 50 млн. п. н., по меньшей мере 60 млн. п. н., по меньшей мере 70 млн. п. н., по меньшей мере 80 млн. п. н., по меньшей мере 90 млн. п. н. или по меньшей мере 100 млн. п. н.
20. Способ по любому предшествующему пункту, в котором:
(a) первый аллель содержит мутацию; или
(b) первый аллель представляет собой аллель дикого типа, а соответствующий локус на второй гомологичной хромосоме содержит мутацию.
21. Способ по п. 20, в котором первый аллель содержит мутацию, причем мутация представляет собой нацеленную модификацию.
22. Способ по любому предшествующему пункту, в котором клетка представляет собой эукариотическую клетку.
23. Способ по п. 22, в котором эукариотическая клетка представляет собой клетку млекопитающего, человеческую клетку, нечеловеческую клетку, клетку грызуна, мышиную клетку, крысиную клетку, плюрипотентную клетку, неплюрипотентную клетку, нечеловеческую плюрипотентную клетку, человеческую плюрипотентную клетку, плюрипотентную клетку грызуна, мышиную плюрипотентную клетку, крысиную плюрипотентную клетку, мышиную эмбриональную стволовую (ЭС) клетку, крысиную ЭС-клетку, ЭС-клетку не относящегося к человеку млекопитающего, стволовую клетку взрослого человека, ограниченную в развитии человеческую клетку-предшественник, человеческую индуцированную плюрипотентную стволовую клетку (ИПС), эмбрион не относящегося к человеку млекопитающего на стадии единственной клетки или мышиный эмбрион на стадии единственной клетки.
24. Способ по п. 23, в котором эукариотическая клетка представляет собой клетку млекопитающего.
25. Способ по п. 23, в котором эукариотическая клетка представляет собой человеческую ИПС-клетку.
26. Способ по п. 23, в котором эукариотическая клетка представляет собой мышиную ЭС-клетку или крысиную ЭС-клетку.
27. Способ по п. 26, в котором эукариотическая клетка представляет собой мышиную ЭС-клетку
28. Способ по любому предшествующему пункту, в котором белок Cas представляет собой Cas9.
29. Способ по любому предшествующему пункту, в котором белок Cas имеет нуклеазную активность в отношении обеих цепей двухцепочечной ДНК.
30. Способ по любому предшествующему пункту, в котором белок Cas представляет собой никазу.
31. Способ по п. 30, в котором белок Cas представляет собой никазу, и при при этом стадия (I) дополнительно включает в себя приведение генома в контакт с:
(c) третьей гидовой РНК, причем третья гидовая РНК содержит третью тракрРНК и третью РНК CRISPR, и при этом третья гидовая РНК гибридизуется с третьей последовательностью распознавания РНК CRISPR в центромерном направлении от локуса на второй гомологичной хромосоме, соответствующего первому аллелю; и
(d) четвертой гидовой РНК, причем четвертая гидовая РНК содержит четвертую тракрРНК и четвертую РНК CRISPR, и при этом четвертая гидовая РНК гибридизуется с четвертой последовательностью распознавания РНК CRISPR в центромерном направлении от локуса на второй гомологичной хромосоме, соответствующего первому аллелю;
причем белок Cas производит одноцепочечный разрыв на первой цепи геномной ДНК в пределах первой и второй последовательностей распознавания РНК CRISPR, и белок Cas производит одноцепочечный разрыв на второй цепи геномной ДНК в пределах третьей и четвертой последовательностей распознавания РНК CRISPR, и
при этом одноцепочечные разрывы в пределах первой и третьей последовательностей распознавания РНК CRISPR являются смещенными одноцепочечными разрывами, создавая первый двухцепочечный разрыв, имеющий ступенчатые концы, и одноцепочечные разрывы в пределах второй и четвертой последовательностей распознавания РНК CRISPR являются смещенными одноцепочечными разрывами, создавая второй двухцепочечный разрыв, имеющий ступенчатые концы.
32. Способ по п. 31, в котором этап (I) дополнительно включает в себя введение в клетку: (c) третьей гидовой РНК, или ДНК, кодирующей третью гидовую РНК; и (d) четвертой гидовой РНК или ДНК, кодирующей четвертую гидовую РНК.
33. Способ по любому предшествующему пункту, в котором первая РНК CRISPR и первая тракрРНК в первой гидовой РНК слиты вместе.
34. Способ по любому из пп. 1-32, в котором первая РНК CRISPR и первая тракрРНК представляют собой отдельные молекулы РНК.
35. Способ по любому предшествующему пункту, в котором клетка модифицирована для снижения негомологичного соединения концов (NHEJ) и/или для повышения генной конверсии или направляемой гомологией репарации (HDR).
36. Способ по п. 35, в котором клетка модифицирована для снижения экспрессии или активности одной или более из следующего: DNA-PK, PARP1 и лигазы IV.
37. Способ по п. 36, в котором снижение экспрессии или активности экспрессии или активности является индуцируемым, обратимым, время-специфическим и/или пространственно-специфическим.
38. Способ по любому предшествующему пункту, в котором идентификация на этапе (II) включает в себя тест на модификацию аллеля.
39. Способ по любому предшествующему пункту, в котором идентификация на этапе (II) включает в себя скрининг на потерю гетерозиготности.
40. Способ по п. 39, в котором скрининг включает в себя проведение ПЦР-теста на полиморфизм структурных вариантов и/или теста на аллельную дискриминацию однонуклеотидных вариантов в теломерном направлении от первой последовательности распознавания РНК CRISPR.
41. Способ по п. 40, в котором скрининг включает в себя проведение множества ПЦР-тестов на полиморфизм структурных вариантов и/или множества тестов на аллельную дискриминацию однонуклеотидных вариантов в разных положениях в теломерном направлении от первой последовательности распознавания РНК CRISPR.
42. Способ по любому предшествующему пункту, в котором клетка гетерозиготна по одному или более дополнительным аллелям, причем первая последовательность распознавания РНК CRISPR является центромерной по отношению к локусам на второй гомологичной хромосоме, соответствующим одному или более дополнительным аллелям, гомологичная рекомбинация модифицирует клетку, в результате чего она становится гомозиготной по одному или более дополнительным аллелям, и этап (II) включает в себя идентификацию модифицированной клетки, которая гомозиготна по одному или более дополнительным аллелям.
43. Способ по любому предшествующему пункту, в котором первый аллель находится на расстоянии по меньшей мере 10 т. п. н. или по меньшей мере 100 т. п. н. от первой последовательности распознавания РНК CRISPR.
RU2020134412A 2014-11-21 2015-11-20 Способы и композиции для нацеленной генетической модификации с использованием парных гидовых рнк RU2020134412A (ru)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201462083005P 2014-11-21 2014-11-21
US62/083,005 2014-11-21
US201562182314P 2015-06-19 2015-06-19
US62/182,314 2015-06-19
US201562211421P 2015-08-28 2015-08-28
US62/211,421 2015-08-28

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2017121367A Division RU2734770C2 (ru) 2014-11-21 2015-11-20 Способы и композиции для нацеленной генетической модификации с использованием парных гидовых рнк

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2020134412A true RU2020134412A (ru) 2020-11-11

Family

ID=54771219

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2017121367A RU2734770C2 (ru) 2014-11-21 2015-11-20 Способы и композиции для нацеленной генетической модификации с использованием парных гидовых рнк
RU2020134412A RU2020134412A (ru) 2014-11-21 2015-11-20 Способы и композиции для нацеленной генетической модификации с использованием парных гидовых рнк

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2017121367A RU2734770C2 (ru) 2014-11-21 2015-11-20 Способы и композиции для нацеленной генетической модификации с использованием парных гидовых рнк

Country Status (24)

Country Link
US (4) US10457960B2 (ru)
EP (2) EP3221457B1 (ru)
JP (2) JP6727199B2 (ru)
KR (3) KR102415093B1 (ru)
CN (2) CN113444747A (ru)
AU (2) AU2015349692B2 (ru)
BR (1) BR112017010547A2 (ru)
CA (2) CA2968440A1 (ru)
CY (1) CY1121738T1 (ru)
DK (1) DK3221457T3 (ru)
ES (1) ES2731437T3 (ru)
HR (1) HRP20190949T1 (ru)
HU (1) HUE044907T2 (ru)
IL (3) IL301900A (ru)
LT (1) LT3221457T (ru)
MX (2) MX2017006670A (ru)
NZ (1) NZ731962A (ru)
PL (1) PL3221457T3 (ru)
PT (1) PT3221457T (ru)
RS (1) RS58893B1 (ru)
RU (2) RU2734770C2 (ru)
SG (2) SG10201913829YA (ru)
SI (1) SI3221457T1 (ru)
WO (1) WO2016081923A2 (ru)

Families Citing this family (115)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6596541B2 (en) 2000-10-31 2003-07-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
US20050144655A1 (en) 2000-10-31 2005-06-30 Economides Aris N. Methods of modifying eukaryotic cells
US20100069614A1 (en) 2008-06-27 2010-03-18 Merus B.V. Antibody producing non-human mammals
EP2395017A3 (en) 2003-05-30 2012-12-19 Merus B.V. Design and use of paired variable regions of specific binding molecules
WO2013066438A2 (en) 2011-07-22 2013-05-10 President And Fellows Of Harvard College Evaluation and improvement of nuclease cleavage specificity
EP2841572B1 (en) 2012-04-27 2019-06-19 Duke University Genetic correction of mutated genes
AU2014218931C1 (en) 2013-02-20 2020-05-14 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Genetic modification of rats
RS58255B1 (sr) 2013-04-16 2019-03-29 Regeneron Pharma Ciljana modifikacija genoma pacova
US20150044192A1 (en) 2013-08-09 2015-02-12 President And Fellows Of Harvard College Methods for identifying a target site of a cas9 nuclease
US9359599B2 (en) 2013-08-22 2016-06-07 President And Fellows Of Harvard College Engineered transcription activator-like effector (TALE) domains and uses thereof
US9737604B2 (en) 2013-09-06 2017-08-22 President And Fellows Of Harvard College Use of cationic lipids to deliver CAS9
US9228207B2 (en) 2013-09-06 2016-01-05 President And Fellows Of Harvard College Switchable gRNAs comprising aptamers
US9388430B2 (en) 2013-09-06 2016-07-12 President And Fellows Of Harvard College Cas9-recombinase fusion proteins and uses thereof
KR20230054509A (ko) 2013-11-07 2023-04-24 에디타스 메디신, 인코포레이티드 지배적인 gRNA를 이용하는 CRISPR-관련 방법 및 조성물
CN110951779B (zh) 2013-12-11 2024-04-16 瑞泽恩制药公司 用于靶向修饰基因组的方法和组合物
US11053481B2 (en) 2013-12-12 2021-07-06 President And Fellows Of Harvard College Fusions of Cas9 domains and nucleic acid-editing domains
PT3152312T (pt) 2014-06-06 2020-04-23 Regeneron Pharma Métodos e composições para modificar um locus alvo
MX2016017317A (es) 2014-06-26 2017-08-24 Regeneron Pharma Metodos y composiciones para modificaciones geneticas dirigidas y metodos de uso.
EP3177718B1 (en) 2014-07-30 2022-03-16 President and Fellows of Harvard College Cas9 proteins including ligand-dependent inteins
SG10201913797YA (en) 2014-10-15 2020-03-30 Regeneron Pharma Methods and compositions for generating or maintaining pluripotent cells
WO2016073990A2 (en) 2014-11-07 2016-05-12 Editas Medicine, Inc. Methods for improving crispr/cas-mediated genome-editing
RU2734770C2 (ru) 2014-11-21 2020-10-23 Регенерон Фармасьютикалз, Инк. Способы и композиции для нацеленной генетической модификации с использованием парных гидовых рнк
CA2971213C (en) 2014-12-19 2023-09-26 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for targeted genetic modification through single-step multiple targeting
EP3294896A1 (en) 2015-05-11 2018-03-21 Editas Medicine, Inc. Optimized crispr/cas9 systems and methods for gene editing in stem cells
WO2016196185A1 (en) 2015-05-29 2016-12-08 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Non-human animals having a disruption in a c9orf72 locus
EP3307887A1 (en) 2015-06-09 2018-04-18 Editas Medicine, Inc. Crispr/cas-related methods and compositions for improving transplantation
EP3957731A1 (en) 2015-07-15 2022-02-23 Rutgers, The State University of New Jersey Nuclease-independent targeted gene editing platform and uses thereof
EP3353296B1 (en) 2015-09-24 2020-11-04 Editas Medicine, Inc. Use of exonucleases to improve crispr/cas-mediated genome editing
EP3362571A4 (en) 2015-10-13 2019-07-10 Duke University GENOMIC ENGINEERING WITH TYPE I CRISPRISMS IN EUKARYOTIC CELLS
EP3365356B1 (en) 2015-10-23 2023-06-28 President and Fellows of Harvard College Nucleobase editors and uses thereof
CN108471731A (zh) * 2015-11-06 2018-08-31 杰克逊实验室 大型基因组dna敲入及其用途
JP6979955B2 (ja) 2016-01-13 2021-12-15 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッドRegeneron Pharmaceuticals, Inc. 操作された重鎖可変領域を有する齧歯類
US11666666B2 (en) * 2016-02-11 2023-06-06 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for modifying a mutant dystrophin gene in a cell's genome
WO2017165826A1 (en) 2016-03-25 2017-09-28 Editas Medicine, Inc. Genome editing systems comprising repair-modulating enzyme molecules and methods of their use
EP4047092A1 (en) 2016-04-13 2022-08-24 Editas Medicine, Inc. Cas9 fusion molecules, gene editing systems, and methods of use thereof
CA3022997C (en) * 2016-05-20 2023-07-18 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for breaking immunological tolerance using multiple guide rnas
US20210010022A1 (en) * 2016-05-27 2021-01-14 Cambridge Enterprise Limited Novel nucleic acid construct
WO2017219033A1 (en) * 2016-06-17 2017-12-21 Montana State University Bidirectional targeting for genome editing
WO2017220527A1 (en) * 2016-06-20 2017-12-28 Glycotope Gmbh Means and methods for modifying multiple alleles
DK3476865T5 (da) * 2016-06-28 2024-09-09 Biocytogen Pharmaceuticals Beijing Co Ltd Fremgangsmåde til konstruktion af pd-1-gen-modificeret humaniseret dyremodel og anvendelse deraf
US11124805B2 (en) 2016-07-13 2021-09-21 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods, compositions and kits for increasing genome editing efficiency
WO2017037304A2 (en) * 2016-07-28 2017-03-09 Dsm Ip Assets B.V. An assembly system for a eukaryotic cell
AU2017302657A1 (en) 2016-07-29 2019-02-14 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Mice comprising mutations resulting in expression of c-truncated fibrillin-1
CN110214183A (zh) 2016-08-03 2019-09-06 哈佛大学的校长及成员们 腺苷核碱基编辑器及其用途
US11661590B2 (en) 2016-08-09 2023-05-30 President And Fellows Of Harvard College Programmable CAS9-recombinase fusion proteins and uses thereof
WO2018039438A1 (en) 2016-08-24 2018-03-01 President And Fellows Of Harvard College Incorporation of unnatural amino acids into proteins using base editing
KR102527979B1 (ko) 2016-09-30 2023-04-28 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 C9orf72 유전자좌에서 헥사뉴클레오티드 반복 확장을 갖는 비인간 동물
CA3039928A1 (en) 2016-10-14 2018-04-19 President And Fellows Of Harvard College Aav delivery of nucleobase editors
LT3766343T (lt) 2016-11-04 2022-06-10 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Gyvūnai, išskyrus žmogų, turintys sukonstruotą imunoglobulino lambda lengvosios grandinės lokusą
CN106520831B (zh) * 2016-11-18 2020-05-26 青岛市畜牧兽医研究所 一种哺乳动物基因组修饰方法
WO2018119359A1 (en) 2016-12-23 2018-06-28 President And Fellows Of Harvard College Editing of ccr5 receptor gene to protect against hiv infection
US12065666B2 (en) 2017-01-05 2024-08-20 Rutgers, The State University Of New Jersey Targeted gene editing platform independent of DNA double strand break and uses thereof
EP4095263A1 (en) 2017-01-06 2022-11-30 Editas Medicine, Inc. Methods of assessing nuclease cleavage
US11499149B2 (en) 2017-02-15 2022-11-15 2Seventy Bio, Inc. Donor repair templates multiplex genome editing
US11898179B2 (en) 2017-03-09 2024-02-13 President And Fellows Of Harvard College Suppression of pain by gene editing
CN110914310A (zh) 2017-03-10 2020-03-24 哈佛大学的校长及成员们 胞嘧啶至鸟嘌呤碱基编辑器
IL269458B2 (en) 2017-03-23 2024-02-01 Harvard College Nucleic base editors that include nucleic acid programmable DNA binding proteins
US11499151B2 (en) 2017-04-28 2022-11-15 Editas Medicine, Inc. Methods and systems for analyzing guide RNA molecules
US11560566B2 (en) 2017-05-12 2023-01-24 President And Fellows Of Harvard College Aptazyme-embedded guide RNAs for use with CRISPR-Cas9 in genome editing and transcriptional activation
EP3628008A4 (en) * 2017-05-16 2021-04-28 Generos Biopharma Ltd. COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE TREATMENT OF ALZHEIMER'S DISEASE
CN110997908A (zh) 2017-06-09 2020-04-10 爱迪塔斯医药公司 工程化的cas9核酸酶
EP3644722A1 (en) 2017-06-27 2020-05-06 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Non-human animals comprising a humanized asgr1 locus
US11866726B2 (en) 2017-07-14 2024-01-09 Editas Medicine, Inc. Systems and methods for targeted integration and genome editing and detection thereof using integrated priming sites
US11732274B2 (en) 2017-07-28 2023-08-22 President And Fellows Of Harvard College Methods and compositions for evolving base editors using phage-assisted continuous evolution (PACE)
WO2019028032A1 (en) 2017-07-31 2019-02-07 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. EMBRYONIC STEM CELLS OF TRANSGENIC MOUSE CASES AND MICE AND USES THEREOF
CN111182790A (zh) 2017-07-31 2020-05-19 瑞泽恩制药公司 Crispr报告体非人类动物及其用途
EP3676376A2 (en) 2017-08-30 2020-07-08 President and Fellows of Harvard College High efficiency base editors comprising gam
KR102544051B1 (ko) 2017-09-29 2023-06-16 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 인간화된 ttr 유전자좌를 포함하는 비인간 동물 및 사용 방법
WO2019072241A1 (en) 2017-10-13 2019-04-18 Beijing Biocytogen Co., Ltd NON-HUMAN ANIMAL GENETICALLY MODIFIED WITH PD-1 HUMAN OR CHIMERIC
WO2019079347A1 (en) 2017-10-16 2019-04-25 The Broad Institute, Inc. USES OF BASIC EDITORS ADENOSINE
CN111565566B (zh) 2017-11-10 2022-10-21 瑞泽恩制药公司 包含slc30a8突变的非人动物及使用方法
JP7361031B2 (ja) 2017-11-30 2023-10-13 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド ヒト化ｔｒｋｂ遺伝子座を含む非ヒト動物
SI3720279T1 (sl) 2017-12-05 2022-11-30 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Miši, ki imajo spremenjeno lahko verigo imunoglobulina lambda in njihova uporaba
CA3088788A1 (en) * 2018-01-17 2019-07-25 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Dna-pk inhibitors
JP7391854B2 (ja) 2018-01-17 2023-12-05 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド Ｄｎａ－ｐｋ阻害剤
WO2019148166A1 (en) * 2018-01-29 2019-08-01 Massachusetts Institute Of Technology Methods of enhancing chromosomal homologous recombination
EP3592140A1 (en) 2018-03-19 2020-01-15 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Transcription modulation in animals using crispr/cas systems
US20210071202A1 (en) 2018-03-29 2021-03-11 Jichi Medical University Genome editing method, composition, cell, cell preparation, and method for producing cell preparation
WO2019213183A1 (en) * 2018-04-30 2019-11-07 The Trustees Of The University Of Pennsylvania In utero crispr-mediated therapeutic editing of genes
CN112218945A (zh) * 2018-05-08 2021-01-12 国立大学法人大阪大学 纯合细胞的制作方法
EP3794130A4 (en) 2018-05-16 2022-07-27 Synthego Corporation METHODS AND SYSTEMS FOR DESIGN AND USE OF GUIDE RNA
MX2020013652A (es) 2018-06-14 2022-04-21 Regeneron Pharma Animales no humanos con capacidad de reordenamiento dh-dh en las secuencias codificantes de la cadena pesada de inmunoglobulina.
WO2020047124A1 (en) * 2018-08-28 2020-03-05 Flagship Pioneering, Inc. Methods and compositions for modulating a genome
US11845958B2 (en) * 2018-09-05 2023-12-19 Wisconsin Alumni Research Foundation Genetically modified genes and cells, and methods of using same for silencing virus gene expression
JPWO2020050294A1 (ja) * 2018-09-05 2021-08-30 学校法人慶應義塾 相同組換え効率上昇剤及びその使用
CN112969367B (zh) 2018-09-13 2023-04-07 瑞泽恩制药公司 作为c3肾小球病模型的补体因子h基因敲除大鼠
WO2020067004A1 (ja) * 2018-09-25 2020-04-02 公益財団法人微生物化学研究会 新規ウイルスベクターおよびその製造方法と使用方法
AU2019403015B2 (en) 2018-12-20 2024-01-18 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Nuclease-mediated repeat expansion
WO2020191248A1 (en) 2019-03-19 2020-09-24 The Broad Institute, Inc. Method and compositions for editing nucleotide sequences
CA3133360A1 (en) 2019-04-04 2020-10-08 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Non-human animals comprising a humanized coagulation factor 12 locus
AU2020286382A1 (en) 2019-06-04 2021-11-04 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Non-human animals comprising a humanized TTR locus with a beta-slip mutation and methods of use
CN113874511A (zh) 2019-06-05 2021-12-31 瑞泽恩制药公司 具有从κ基因座表达的有限λ轻链谱系的非人类动物和其用途
JP2022534560A (ja) 2019-06-07 2022-08-02 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド ヒト化アルブミン遺伝子座を含む非ヒト動物
WO2021108363A1 (en) 2019-11-25 2021-06-03 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Crispr/cas-mediated upregulation of humanized ttr allele
WO2021154791A1 (en) 2020-01-28 2021-08-05 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Non-human animals comprising a humanized pnpla3 locus and methods of use
EP4099821A1 (en) 2020-02-07 2022-12-14 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. <smallcaps/>? ? ?klkb1? ? ? ? ?non-human animals comprising a humanizedlocus and methods of use
US20210292754A1 (en) * 2020-03-16 2021-09-23 Pairwise Plants Services, Inc. Natural guide architectures and methods of making and using the same
WO2021195079A1 (en) 2020-03-23 2021-09-30 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Non-human animals comprising a humanized ttr locus comprising a v30m mutation and methods of use
JP6867635B1 (ja) * 2020-04-06 2021-04-28 株式会社Ｌｏｇｏｍｉｘ ゲノム改変方法及びゲノム改変キット
JP2023515710A (ja) * 2020-04-27 2023-04-13 デューク ユニバーシティ ＣＲＩＳＰＲ媒介式エクソン欠失用の最適なｇＲＮＡ対を発見するためのハイスループットスクリーニング法
WO2021226558A1 (en) 2020-05-08 2021-11-11 The Broad Institute, Inc. Methods and compositions for simultaneous editing of both strands of a target double-stranded nucleotide sequence
EP4171215A2 (en) 2020-06-26 2023-05-03 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Non-human animals comprising a humanized ace2 locus
CN112481297A (zh) * 2020-11-02 2021-03-12 深圳先进技术研究院 一种制造染色体结构变异的方法
CN112382339B (zh) * 2020-11-17 2024-08-13 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 一种识别合子型基因激活zga基因的方法及装置
EP4051700A1 (en) 2020-12-23 2022-09-07 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Nucleic acids encoding anchor modified antibodies and uses thereof
US20220389461A1 (en) * 2021-05-26 2022-12-08 Inscripta, Inc. Crispr editing in diploid genomes
CN113832189B (zh) * 2021-09-06 2022-10-21 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 一种用于敲除猪免疫球蛋白重链IGHG区的gRNA及其应用
CN118043456A (zh) * 2021-09-30 2024-05-14 国立大学法人大阪大学 在同源染色体的一方具有特异性的dna缺失的细胞的制造方法
JP2024540086A (ja) 2021-10-28 2024-10-31 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド Ｃ５をノックアウトするためのｃｒｉｓｐｒ／ｃａｓ関連方法及び組成物
WO2023108047A1 (en) 2021-12-08 2023-06-15 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Mutant myocilin disease model and uses thereof
WO2023122506A1 (en) 2021-12-20 2023-06-29 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Non-human animals comprising humanized ace2 and tmprss loci
WO2023150798A1 (en) 2022-02-07 2023-08-10 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for defining optimal treatment timeframes in lysosomal disease
KR20240144138A (ko) 2022-02-11 2024-10-02 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 4r 타우 표적화제를 스크리닝하기 위한 조성물 및 방법
WO2023250511A2 (en) 2022-06-24 2023-12-28 Tune Therapeutics, Inc. Compositions, systems, and methods for reducing low-density lipoprotein through targeted gene repression
US20240224964A9 (en) 2022-09-29 2024-07-11 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Correction of hepatosteatosis in humanized liver animals through restoration of il6/il6r/gp130 signaling in human hepatocytes

Family Cites Families (181)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4516228A (en) 1983-08-25 1985-05-07 Mobil Oil Corporation Acoustic well logging device for detecting compressional and shear waves
US5830729A (en) 1996-04-18 1998-11-03 Institut Pasteur I Sce I-induced gene replacement and gene conversion in embryonic stem cells
WO1999005266A2 (en) 1997-07-26 1999-02-04 Wisconsin Alumni Research Foundation Trans-species nuclear transfer
EP1141360A4 (en) 1998-12-31 2002-11-06 David Gladstone Inst TRANSGENIC RODENTS AND CELL LINES OF RODENTS EXPRESSING HIV CO-RECEPTORS
CA2361191A1 (en) 1999-02-03 2000-08-10 The Children's Medical Center Corporation Gene repair involving the induction of double-stranded dna cleavage at a chromosomal target site
ATE309536T1 (de) 1999-12-06 2005-11-15 Sangamo Biosciences Inc Methoden zur verwendung von randomisierten zinkfingerprotein-bibliotheken zur identifizierung von genfunktionen
DE60133104T2 (de) 2000-05-31 2009-03-12 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc., Emeryville Verfahren und zusammensetzungen zur behandlung von neoplastischen erkrankungen mittels chemotherapie und strahlungssensibilisatoren
US6586251B2 (en) 2000-10-31 2003-07-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
US20050144655A1 (en) 2000-10-31 2005-06-30 Economides Aris N. Methods of modifying eukaryotic cells
US6596541B2 (en) 2000-10-31 2003-07-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
US7105348B2 (en) 2000-10-31 2006-09-12 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
AUPR451401A0 (en) 2001-04-20 2001-05-24 Monash University A method of nuclear transfer
JP4968498B2 (ja) 2002-01-23 2012-07-04 ユニバーシティ オブ ユタ リサーチ ファウンデーション ジンクフィンガーヌクレアーゼを用いる、標的化された染色体変異誘発
US7612250B2 (en) 2002-07-29 2009-11-03 Trustees Of Tufts College Nuclear transfer embryo formation method
US20030175968A1 (en) 2002-10-30 2003-09-18 Golic Kent G. Gene targeting method
JP2006517101A (ja) 2003-01-13 2006-07-20 エス． ラオ、マヘンドラ 治療用産物を送達するための、増殖性の幹細胞および前駆細胞における候補分子の持続的発現
HUE025996T2 (en) 2003-12-01 2016-05-30 Kudos Pharm Ltd Inhibitors of DNA damage repair for the treatment of cancer
SI1802193T1 (sl) 2004-10-19 2014-08-29 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Postopek za generiranje miši, homozigotne za genetsko modifikacijo
FR2879622B1 (fr) 2004-12-17 2008-02-01 Agronomique Inst Nat Rech Procede in vitro de production d'ovocytes ou d'oeufs presentant une modification genomique ciblee
GB0615327D0 (en) 2006-03-30 2006-09-13 Univ Edinburgh Culture medium containing kinase inhibitors and uses thereof
AU2007235496B2 (en) 2006-03-31 2013-11-21 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. Transgenic animals expressing chimeric antibodies for use in preparing human antibodies
CN101117633B (zh) 2006-08-03 2011-07-20 上海交通大学附属儿童医院 一种细胞核移植方法
US7771967B2 (en) 2006-12-22 2010-08-10 The J. David Gladstone Institutes Nucleic acid encoding apolipoprotein E-I3
JP5400034B2 (ja) 2007-04-26 2014-01-29 サンガモ バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド Ｐｐｐ１ｒ１２ｃ座への標的化組込み
WO2008151081A1 (en) 2007-06-01 2008-12-11 Omt, Inc. Compositions and methods for inhibiting endogenous immunoglobulin genes and producing transgenic human idiotype antibodies
EP2313515B1 (en) 2008-08-22 2015-03-04 Sangamo BioSciences, Inc. Methods and compositions for targeted single-stranded cleavage and targeted integration
EP2352369B1 (en) 2008-12-04 2017-04-26 Sangamo BioSciences, Inc. Genome editing in rats using zinc-finger nucleases
AU2010282958B2 (en) 2009-08-11 2015-05-21 Sangamo Therapeutics, Inc. Organisms homozygous for targeted modification
US8518392B2 (en) 2009-08-14 2013-08-27 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Promoter-regulated differentiation-dependent self-deleting cassette
WO2011051390A1 (en) 2009-10-28 2011-05-05 Helmholtz Zentrum München - Deutsches Forschungszentrum für Gesundheit und Umwelt (GmbH) Homologous recombination in the oocyte
DK2494047T3 (en) 2009-10-29 2017-04-10 Regeneron Pharma MULTIFUNCTIONAL ALLELS
WO2011053957A2 (en) 2009-11-02 2011-05-05 Gen9, Inc. Compositions and methods for the regulation of multiple genes of interest in a cell
US9309537B2 (en) 2009-12-01 2016-04-12 National Cancer Center Chimeric rat produced using rat embryonic stem cells in the presence of an ES cell differentiation suppressant
ES2583060T3 (es) 2009-12-21 2016-09-16 Keygene N.V. Técnicas mejoradas para la transfección de protoplastos
UA113493C2 (xx) 2010-01-22 2017-02-10 Спосіб видалення ділянки днк в рослині
JP2013518602A (ja) 2010-02-09 2013-05-23 サンガモ バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド 部分的に一本鎖のドナー分子による標的化ゲノム改変
EP2571512B1 (en) 2010-05-17 2017-08-23 Sangamo BioSciences, Inc. Novel dna-binding proteins and uses thereof
GB201009732D0 (en) 2010-06-10 2010-07-21 Gene Bridges Gmbh Direct cloning
AU2011265306C1 (en) 2010-06-11 2015-01-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Production of fertile XY female animals from XY ES cells
WO2012012667A2 (en) 2010-07-21 2012-01-26 Sangamo Biosciences, Inc. Methods and compositions for modification of a hla locus
WO2012018726A1 (en) 2010-08-02 2012-02-09 Cellectis Sa Method for increasing double-strand break-induced gene targeting
WO2012129198A1 (en) 2011-03-23 2012-09-27 Transposagen Biopharmaceuticals, Inc. Genetically modified rat models for obesity and diabetes
US20140304847A1 (en) 2011-06-07 2014-10-09 Ralf Kühn Recombination efficiency by inhibition of nhej dna repair
PL3424947T3 (pl) 2011-10-28 2021-06-14 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Myszy z genetycznie zmodyfikowanym receptorem komórek t
WO2013141680A1 (en) 2012-03-20 2013-09-26 Vilnius University RNA-DIRECTED DNA CLEAVAGE BY THE Cas9-crRNA COMPLEX
US9637739B2 (en) 2012-03-20 2017-05-02 Vilnius University RNA-directed DNA cleavage by the Cas9-crRNA complex
EP2847335B1 (en) 2012-04-25 2018-06-27 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Nuclease-mediated targeting with large targeting vectors
BR112014027813A2 (pt) 2012-05-07 2017-08-08 Dow Agrosciences Llc métodos e composições para integração de transgenes direcionada mediada por nuclease
RS59199B1 (sr) 2012-05-25 2019-10-31 Univ California Metode i jedinjenja za rnk-upravljanu ciljanu dnk modifikaciju i za rnk- upravljanu modulaciju transkripta
US20150128300A1 (en) 2012-06-12 2015-05-07 Genentech, Inc. Methods and compositions for generating conditional knock-out alleles
CN105188767A (zh) 2012-07-25 2015-12-23 布罗德研究所有限公司 可诱导的dna结合蛋白和基因组干扰工具及其应用
JP5952141B2 (ja) * 2012-08-31 2016-07-13 京セラメディカル株式会社 人工心肺ポンプ用駆動装置
CN104968784B (zh) 2012-10-23 2019-11-05 基因工具股份有限公司 包含向导rna和cas蛋白质编码核酸或cas蛋白质的组合物及其用途
DK3363902T3 (da) 2012-12-06 2020-01-02 Sigma Aldrich Co Llc Crispr-baseret genommodifikation og -regulering
PT2931898E (pt) 2012-12-12 2016-06-16 Harvard College Manipulação e otimização de sistemas, métodos e composições para manipulação de sequências com domínios funcionais
US8697359B1 (en) 2012-12-12 2014-04-15 The Broad Institute, Inc. CRISPR-Cas systems and methods for altering expression of gene products
WO2014093694A1 (en) 2012-12-12 2014-06-19 The Broad Institute, Inc. Crispr-cas nickase systems, methods and compositions for sequence manipulation in eukaryotes
BR122021008308B1 (pt) 2012-12-12 2022-12-27 The Broad Institute, Inc. Sistemas de componente crispr-cas, métodos e composições para manipulação de sequência
IL239317B (en) 2012-12-12 2022-07-01 Broad Inst Inc Providing, engineering and optimizing systems, methods and compositions for sequence manipulation and therapeutic applications
DK3064585T3 (da) 2012-12-12 2020-04-27 Broad Inst Inc Konstruering og optimering af forbedrede systemer, fremgangsmåder og enzymsammensætninger til sekvensmanipulation
CA2895155C (en) 2012-12-17 2021-07-06 President And Fellows Of Harvard College Rna-guided human genome engineering
TR201900252T4 (tr) * 2012-12-27 2019-02-21 Keygene Nv Bir Bitkide Genetik Bağın Ortadan Kaldırılmasına Yönelik Yöntem
WO2014127287A1 (en) 2013-02-14 2014-08-21 Massachusetts Institute Of Technology Method for in vivo tergated mutagenesis
AU2014218931C1 (en) 2013-02-20 2020-05-14 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Genetic modification of rats
AU2014218621B2 (en) 2013-02-25 2019-11-07 Sangamo Therapeutics, Inc. Methods and compositions for enhancing nuclease-mediated gene disruption
WO2014131833A1 (en) 2013-02-27 2014-09-04 Helmholtz Zentrum München Deutsches Forschungszentrum Für Gesundheit Und Umwelt (Gmbh) Gene editing in the oocyte by cas9 nucleases
US10612043B2 (en) * 2013-03-09 2020-04-07 Agilent Technologies, Inc. Methods of in vivo engineering of large sequences using multiple CRISPR/cas selections of recombineering events
JP2016519652A (ja) 2013-03-14 2016-07-07 カリブー・バイオサイエンシーズ・インコーポレイテッド 核酸ターゲティング核酸の組成物および方法
WO2015139008A1 (en) 2014-03-14 2015-09-17 Cibus Us Llc Methods and compositions for increasing efficiency of targeted gene modification using oligonucleotide-mediated gene repair
US20140273230A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Sigma-Aldrich Co., Llc Crispr-based genome modification and regulation
US9234213B2 (en) 2013-03-15 2016-01-12 System Biosciences, Llc Compositions and methods directed to CRISPR/Cas genomic engineering systems
WO2014204578A1 (en) 2013-06-21 2014-12-24 The General Hospital Corporation Using rna-guided foki nucleases (rfns) to increase specificity for rna-guided genome editing
US9937207B2 (en) 2013-03-21 2018-04-10 Sangamo Therapeutics, Inc. Targeted disruption of T cell receptor genes using talens
EP2981617B1 (en) 2013-04-04 2023-07-05 President and Fellows of Harvard College Therapeutic uses of genome editing with crispr/cas systems
US20160186208A1 (en) 2013-04-16 2016-06-30 Whitehead Institute For Biomedical Research Methods of Mutating, Modifying or Modulating Nucleic Acid in a Cell or Nonhuman Mammal
US20160040155A1 (en) 2013-04-16 2016-02-11 University Of Washington Through Its Center For Commercialization Activating an alternative pathway for homology-directed repair to stimulate targeted gene correction and genome engineering
RS58255B1 (sr) * 2013-04-16 2019-03-29 Regeneron Pharma Ciljana modifikacija genoma pacova
EP2796558A1 (en) 2013-04-23 2014-10-29 Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universität Bonn Improved gene targeting and nucleic acid carrier molecule, in particular for use in plants
AU2014262867B2 (en) 2013-05-10 2019-12-05 Sangamo Therapeutics, Inc. Delivery methods and compositions for nuclease-mediated genome engineering
AU2014273082B2 (en) 2013-05-29 2018-11-08 Cellectis A method for producing precise DNA cleavage using Cas9 nickase activity
US20140359795A1 (en) 2013-05-31 2014-12-04 Recombinetics, Inc. Genetic techniques for making animals with sortable sperm
US9982277B2 (en) 2013-06-11 2018-05-29 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for target DNA modification
BR112015031611A2 (pt) 2013-06-17 2017-12-12 Massachusetts Inst Technology aplicação, manipulação e otimização de sistemas, métodos e composições para direcionamento e modelação de doenças e distúrbios de células pós-mitóticas
EP4245853A3 (en) 2013-06-17 2023-10-18 The Broad Institute, Inc. Optimized crispr-cas double nickase systems, methods and compositions for sequence manipulation
EP3674411A1 (en) 2013-06-17 2020-07-01 The Broad Institute, Inc. Delivery, engineering and optimization of tandem guide systems, methods and compositions for sequence manipulation
EP3825406A1 (en) 2013-06-17 2021-05-26 The Broad Institute Inc. Delivery and use of the crispr-cas systems, vectors and compositions for hepatic targeting and therapy
EP3011035B1 (en) 2013-06-17 2020-05-13 The Broad Institute, Inc. Assay for quantitative evaluation of target site cleavage by one or more crispr-cas guide sequences
CN114015726A (zh) 2013-06-17 2022-02-08 布罗德研究所有限公司 用病毒组分靶向障碍和疾病的crispr-cas系统和组合物的递送、用途和治疗应用
CN105555948A (zh) 2013-06-19 2016-05-04 西格马-奥尔德里奇有限责任公司 靶向整合
WO2015006498A2 (en) 2013-07-09 2015-01-15 President And Fellows Of Harvard College Therapeutic uses of genome editing with crispr/cas systems
CN105392885B (zh) 2013-07-19 2020-11-03 赖瑞克斯生物科技公司 用于产生双等位基因敲除的方法和组合物
US11060083B2 (en) 2013-07-19 2021-07-13 Larix Bioscience Llc Methods and compositions for producing double allele knock outs
DK3024521T3 (en) 2013-07-24 2019-02-04 Medic Activ Vertriebs Gmbh Replacement cartridge
US10563225B2 (en) 2013-07-26 2020-02-18 President And Fellows Of Harvard College Genome engineering
CA2922046A1 (en) * 2013-08-22 2015-02-26 E.I. Du Pont De Nemours And Company A soybean u6 polymerase iii promoter and methods of use
US9925248B2 (en) 2013-08-29 2018-03-27 Temple University Of The Commonwealth System Of Higher Education Methods and compositions for RNA-guided treatment of HIV infection
EP2877571B1 (en) 2013-09-18 2018-05-30 Kymab Limited Methods, cells and organisms
WO2015048690A1 (en) 2013-09-27 2015-04-02 The Regents Of The University Of California Optimized small guide rnas and methods of use
WO2015048577A2 (en) 2013-09-27 2015-04-02 Editas Medicine, Inc. Crispr-related methods and compositions
WO2015052231A2 (en) 2013-10-08 2015-04-16 Technical University Of Denmark Multiplex editing system
CA2926094C (en) 2013-10-17 2024-04-02 Sangamo Biosciences, Inc. Delivery methods and compositions for nuclease-mediated genome engineering
CN105683375B (zh) 2013-11-06 2021-02-02 国立大学法人广岛大学 用于插入核酸的载体
KR20230054509A (ko) 2013-11-07 2023-04-24 에디타스 메디신, 인코포레이티드 지배적인 gRNA를 이용하는 CRISPR-관련 방법 및 조성물
US10787684B2 (en) 2013-11-19 2020-09-29 President And Fellows Of Harvard College Large gene excision and insertion
US10450586B2 (en) 2013-11-28 2019-10-22 Horizon Discovery Limited Somatic haploid human cell line
CN110951779B (zh) 2013-12-11 2024-04-16 瑞泽恩制药公司 用于靶向修饰基因组的方法和组合物
CN106061510B (zh) 2013-12-12 2020-02-14 布罗德研究所有限公司 用于基因组编辑的crispr-cas系统和组合物的递送、用途和治疗应用
KR20160097327A (ko) 2013-12-12 2016-08-17 더 브로드 인스티튜트, 인코퍼레이티드 유전자 산물, 구조 정보 및 유도성 모듈형 ｃａｓ 효소의 발현의 변경을 위한 ｃｒｉｓｐｒ-ｃａｓ 시스템 및 방법
AU2014362245A1 (en) 2013-12-12 2016-06-16 Massachusetts Institute Of Technology Compositions and methods of use of CRISPR-Cas systems in nucleotide repeat disorders
BR112016013213A2 (pt) 2013-12-12 2017-12-05 Massachusetts Inst Technology administração, uso e aplicações terapêuticas dos sistemas crispr-cas e composições para visar distúrbios e doenças usando componentes de administração de partículas
WO2015089473A1 (en) 2013-12-12 2015-06-18 The Broad Institute Inc. Engineering of systems, methods and optimized guide compositions with new architectures for sequence manipulation
JP2017527256A (ja) 2013-12-12 2017-09-21 ザ・ブロード・インスティテュート・インコーポレイテッド ＨＢＶ及びウイルス性疾患及び障害のためのＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓ系及び組成物の送達、使用及び治療適用
CN106029886B (zh) 2013-12-19 2021-02-05 阿迈瑞斯公司 基因组整合的方法
CN106133141B (zh) 2014-01-08 2021-08-20 哈佛学院董事及会员团体 Rna引导的基因驱动
WO2015112790A2 (en) 2014-01-24 2015-07-30 Children's Medical Center Corporation High-throughput mouse model for optimizing antibody affinities
US10233456B2 (en) 2014-01-30 2019-03-19 The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas Method, vectors, cells, seeds and kits for stacking genes into a single genomic site
WO2015117041A1 (en) 2014-01-30 2015-08-06 Nair Ramesh B Gene modification-mediated methods and compositions for generating dominant traits in eukaryotic systems
WO2015134812A1 (en) 2014-03-05 2015-09-11 Editas Medicine, Inc. Crispr/cas-related methods and compositions for treating usher syndrome and retinitis pigmentosa
WO2015138510A1 (en) 2014-03-10 2015-09-17 Editas Medicine., Inc. Crispr/cas-related methods and compositions for treating leber's congenital amaurosis 10 (lca10)
DK3116533T3 (da) 2014-03-12 2020-08-24 Prec Biosciences Inc Deletion af dystrophingenexon under anvendelse af genmanipulerede nukleaser
AU2015236033B2 (en) 2014-03-26 2018-06-07 University Of Maryland, College Park Targeted genome editing in zygotes of domestic large animals
GB201406968D0 (en) 2014-04-17 2014-06-04 Green Biologics Ltd Deletion mutants
WO2015163733A1 (en) 2014-04-24 2015-10-29 Institute For Basic Science A method of selecting a nuclease target sequence for gene knockout based on microhomology
GB201407852D0 (en) 2014-05-02 2014-06-18 Iontas Ltd Preparation of libraries od protein variants expressed in eukaryotic cells and use for selecting binding molecules
EP3142706A1 (en) 2014-05-16 2017-03-22 Vrije Universiteit Brussel Genetic correction of myotonic dystrophy type 1
SG11201610028TA (en) 2014-05-30 2016-12-29 Univ Leland Stanford Junior Compositions and methods of delivering treatments for latent viral infections
PT3152312T (pt) 2014-06-06 2020-04-23 Regeneron Pharma Métodos e composições para modificar um locus alvo
SG10202002486QA (en) 2014-06-16 2020-04-29 Univ Johns Hopkins Compositions and methods for the expression of crispr guide rnas using the h1 promoter
MX2016017317A (es) 2014-06-26 2017-08-24 Regeneron Pharma Metodos y composiciones para modificaciones geneticas dirigidas y metodos de uso.
EP3169773B1 (en) 2014-07-15 2023-07-12 Juno Therapeutics, Inc. Engineered cells for adoptive cell therapy
WO2016011428A1 (en) 2014-07-17 2016-01-21 University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education Methods of treating cells containing fusion genes
US9944933B2 (en) 2014-07-17 2018-04-17 Georgia Tech Research Corporation Aptamer-guided gene targeting
EP3186376B1 (en) 2014-08-27 2019-03-20 Caribou Biosciences, Inc. Methods for increasing cas9-mediated engineering efficiency
EP3188763B1 (en) 2014-09-02 2020-05-13 The Regents of The University of California Methods and compositions for rna-directed target dna modification
WO2016049024A2 (en) 2014-09-24 2016-03-31 The Broad Institute Inc. Delivery, use and therapeutic applications of the crispr-cas systems and compositions for modeling competition of multiple cancer mutations in vivo
WO2016049163A2 (en) 2014-09-24 2016-03-31 The Broad Institute Inc. Use and production of chd8+/- transgenic animals with behavioral phenotypes characteristic of autism spectrum disorder
WO2016049258A2 (en) 2014-09-25 2016-03-31 The Broad Institute Inc. Functional screening with optimized functional crispr-cas systems
AU2015323973A1 (en) 2014-09-29 2017-04-20 The Jackson Laboratory High efficiency, high throughput generation of genetically modified mammals by electroporation
US11021718B2 (en) 2014-10-01 2021-06-01 The General Hospital Corporation Methods for increasing efficiency of nuclease-induced homology-directed repair
US20180250424A1 (en) 2014-10-10 2018-09-06 Editas Medicine, Inc. Compositions and methods for promoting homology directed repair
WO2016061073A1 (en) 2014-10-14 2016-04-21 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Composition and method for in vivo engineering of chromosomal rearrangements
SG10201913797YA (en) 2014-10-15 2020-03-30 Regeneron Pharma Methods and compositions for generating or maintaining pluripotent cells
BR112017007923B1 (pt) 2014-10-17 2023-12-12 The Penn State Research Foundation Método para produzir manipulação genética mediada por reações multiplex com rna em uma célula receptora, construção de ácido nucleico,cassete de expressão, vetor, célula receptora e célula geneticamente modificada
US20170306306A1 (en) 2014-10-24 2017-10-26 Life Technologies Corporation Compositions and Methods for Enhancing Homologous Recombination
US20180141992A1 (en) 2014-11-06 2018-05-24 President And Fellows Of Harvard College Cells lacking b2m surface expression and methods for allogeneic administration of such cells
WO2016073990A2 (en) 2014-11-07 2016-05-12 Editas Medicine, Inc. Methods for improving crispr/cas-mediated genome-editing
RU2734770C2 (ru) 2014-11-21 2020-10-23 Регенерон Фармасьютикалз, Инк. Способы и композиции для нацеленной генетической модификации с использованием парных гидовых рнк
JP2017535296A (ja) 2014-11-27 2017-11-30 ダンツィガー イノベイションズ リミテッドＤａｎｚｉｇｅｒ Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎｓ Ｌｔｄ． ゲノム編集のための核酸構築物
US20170266320A1 (en) 2014-12-01 2017-09-21 President And Fellows Of Harvard College RNA-Guided Systems for In Vivo Gene Editing
WO2016094880A1 (en) 2014-12-12 2016-06-16 The Broad Institute Inc. Delivery, use and therapeutic applications of crispr systems and compositions for genome editing as to hematopoietic stem cells (hscs)
WO2016094872A1 (en) 2014-12-12 2016-06-16 The Broad Institute Inc. Dead guides for crispr transcription factors
WO2016094874A1 (en) 2014-12-12 2016-06-16 The Broad Institute Inc. Escorted and functionalized guides for crispr-cas systems
WO2016097751A1 (en) 2014-12-18 2016-06-23 The University Of Bath Method of cas9 mediated genome engineering
CA2971213C (en) 2014-12-19 2023-09-26 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for targeted genetic modification through single-step multiple targeting
EP3239298A4 (en) 2014-12-26 2018-06-13 Riken Gene knockout method
US20180155708A1 (en) 2015-01-08 2018-06-07 President And Fellows Of Harvard College Split Cas9 Proteins
WO2016112351A1 (en) 2015-01-09 2016-07-14 Bio-Rad Laboratories, Inc. Detection of genome editing
WO2016115326A1 (en) 2015-01-15 2016-07-21 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods for modulating genome editing
WO2016130697A1 (en) 2015-02-11 2016-08-18 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Methods and kits for generating vectors that co-express multiple target molecules
WO2016135559A2 (en) 2015-02-23 2016-09-01 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of human genetic diseases including hemoglobinopathies
GB2535532B (en) 2015-02-23 2021-05-12 Knorr Bremse Systeme Fuer Nutzfahrzeuge Gmbh Brake valve arrangement
BR112017017812A2 (pt) 2015-02-23 2018-04-10 Crispr Therapeutics Ag materiais e métodos para tratamento de hemoglobinopatias
EP3265560B1 (en) 2015-03-02 2021-12-08 Sinai Health System Homologous recombination factors
GB201504223D0 (en) 2015-03-12 2015-04-29 Genome Res Ltd Biallelic genetic modification
WO2016154579A2 (en) 2015-03-26 2016-09-29 Editas Medicine, Inc. Crispr/cas-mediated gene conversion
IL302341A (en) 2015-03-27 2023-06-01 Harvard College Modified T cells and methods for their preparation and use
EP3277816B1 (en) 2015-04-01 2020-06-17 Editas Medicine, Inc. Crispr/cas-related methods and compositions for treating duchenne muscular dystrophy and becker muscular dystrophy
US10155938B2 (en) 2015-04-14 2018-12-18 City Of Hope Coexpression of CAS9 and TREX2 for targeted mutagenesis
WO2016168890A1 (en) 2015-04-22 2016-10-27 Genea Ip Holdings Pty Ltd Generation of muscle-lineage cells from stem cells
WO2016174056A1 (en) 2015-04-27 2016-11-03 Genethon Compositions and methods for the treatment of nucleotide repeat expansion disorders
WO2016176690A2 (en) 2015-04-30 2016-11-03 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Gene therapy for autosomal dominant diseases
EP3298134B8 (en) 2015-05-16 2023-06-21 Genzyme Corporation Gene editing of deep intronic mutations
US9790490B2 (en) 2015-06-18 2017-10-17 The Broad Institute Inc. CRISPR enzymes and systems
IL297017A (en) 2015-10-08 2022-12-01 Harvard College Multiplexed genome editing
AU2016341044B2 (en) 2015-10-20 2023-03-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Restoring function to a non-functional gene product via guided Cas systems and methods of use
CN108471731A (zh) 2015-11-06 2018-08-31 杰克逊实验室 大型基因组dna敲入及其用途
WO2017165826A1 (en) 2016-03-25 2017-09-28 Editas Medicine, Inc. Genome editing systems comprising repair-modulating enzyme molecules and methods of their use
WO2017173004A1 (en) 2016-03-30 2017-10-05 Mikuni Takayasu A method for in vivo precise genome editing
WO2017180859A1 (en) 2016-04-13 2017-10-19 University Of Massachusetts Repairing compound heterozygous recessive mutations by allele exchange
CA3022997C (en) 2016-05-20 2023-07-18 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for breaking immunological tolerance using multiple guide rnas
WO2019148166A1 (en) 2018-01-29 2019-08-01 Massachusetts Institute Of Technology Methods of enhancing chromosomal homologous recombination

Also Published As

Publication number Publication date
SG10201913829YA (en) 2020-03-30
AU2021290301A1 (en) 2022-01-27
KR102415093B1 (ko) 2022-07-04
JP7101211B2 (ja) 2022-07-14
HUE044907T2 (hu) 2019-11-28
US20160145646A1 (en) 2016-05-26
IL283585B2 (en) 2023-09-01
CA2968440A1 (en) 2016-05-26
SI3221457T1 (sl) 2019-08-30
KR102683423B1 (ko) 2024-07-10
BR112017010547A2 (pt) 2018-02-27
LT3221457T (lt) 2019-06-10
EP3221457B1 (en) 2019-03-20
RU2734770C2 (ru) 2020-10-23
NZ731962A (en) 2022-07-01
US20230332185A1 (en) 2023-10-19
JP6727199B2 (ja) 2020-07-22
US10457960B2 (en) 2019-10-29
US11697828B2 (en) 2023-07-11
KR102531016B1 (ko) 2023-05-10
IL301900A (en) 2023-06-01
IL283585B1 (en) 2023-05-01
ES2731437T3 (es) 2019-11-15
IL252181A0 (en) 2017-07-31
IL283585A (en) 2021-07-29
SG11201703747RA (en) 2017-06-29
AU2015349692B2 (en) 2021-10-28
HRP20190949T1 (hr) 2019-07-26
PT3221457T (pt) 2019-06-27
PL3221457T3 (pl) 2019-09-30
RS58893B1 (sr) 2019-08-30
WO2016081923A2 (en) 2016-05-26
WO2016081923A3 (en) 2016-07-07
DK3221457T3 (da) 2019-06-03
AU2021290301B2 (en) 2024-02-29
US20200002730A1 (en) 2020-01-02
KR20170102234A (ko) 2017-09-08
JP2020191880A (ja) 2020-12-03
AU2015349692A1 (en) 2017-06-08
KR20230070319A (ko) 2023-05-22
MX2022000378A (es) 2022-02-10
RU2017121367A (ru) 2018-12-21
KR20220093013A (ko) 2022-07-04
MX2017006670A (es) 2018-03-01
CN113444747A (zh) 2021-09-28
RU2017121367A3 (ru) 2019-11-05
IL252181B (en) 2021-06-30
CN107208078B (zh) 2021-07-16
CA3176380A1 (en) 2016-05-26
JP2017535271A (ja) 2017-11-30
CN107208078A (zh) 2017-09-26
US20200002731A1 (en) 2020-01-02
EP3521437A1 (en) 2019-08-07
CY1121738T1 (el) 2020-07-31
EP3221457A2 (en) 2017-09-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2020134412A (ru) Способы и композиции для нацеленной генетической модификации с использованием парных гидовых рнк
Qin et al. Efficient CRISPR/Cas9-mediated genome editing in mice by zygote electroporation of nuclease
Wang et al. Delivery of Cas9 protein into mouse zygotes through a series of electroporation dramatically increases the efficiency of model creation
Zhang et al. Recombinase‐mediated cassette exchange (RMCE) for monoclonal antibody expression in the commercially relevant CHOK1SV cell line
Yao et al. Tild-CRISPR allows for efficient and precise gene knockin in mouse and human cells
Flowers et al. Highly efficient targeted mutagenesis in axolotl using Cas9 RNA-guided nuclease
Carvalho et al. Mechanisms underlying structural variant formation in genomic disorders
Gratz et al. CRISPR‐Cas9 genome editing in Drosophila
Raveux et al. Optimization of the production of knock-in alleles by CRISPR/Cas9 microinjection into the mouse zygote
US20200172935A1 (en) Modified cpf1 mrna, modified guide rna, and uses thereof
JP2017535271A5 (ru)
EA201991441A1 (ru) ТЕРМОСТАБИЛЬНЫЕ НУКЛЕАЗЫ Cas9
RU2016126989A (ru) Способы и композиции для направленной модификации генома
KR20190019931A (ko) 다중 가이드 RNAs를 이용한 면역학적 내성 파괴 방법
RU2016133286A (ru) Способы мутагенеза
He et al. Efficient ligase 3-dependent microhomology-mediated end joining repair of DNA double-strand breaks in zebrafish embryos
JP2016512960A5 (ru)
EP2690177B1 (en) Protein with recombinase activity for site-specific DNA-recombination
JP6958917B2 (ja) 遺伝子ノックイン細胞の作製方法
Hoshijima et al. Precise genome editing by homologous recombination
Yin et al. Multiplex conditional mutagenesis in zebrafish using the CRISPR/Cas system
Lim Mitochondrial genome editing: strategies, challenges, and applications
Forejt et al. Meiotic recognition of evolutionarily diverged homologs: Chromosomal hybrid sterility revisited
Skarnes et al. Controlling homology-directed repair outcomes in human stem cells with dCas9
Raghavan et al. High-throughput screening and CRISPR-Cas9 modeling of causal lipid-associated expression quantitative trait locus variants