JPH06504986A

JPH06504986A - Ｉ型糖尿病に係る自己免疫疾患の抑制および予防用製剤

Info

Publication number: JPH06504986A
Application number: JP3517280A
Authority: JP
Inventors: ウェイナー，ハワード　エル; アイゼンバース，ジョージ; ハフラー，デビッド　アレン; ザング，ゼングリ
Original assignee: オートイミューン　インク; ザ　ジョスリン　ダイアビーツ　センター　インク
Priority date: 1990-10-10
Filing date: 1991-10-10
Publication date: 1994-06-09
Anticipated expiration: 2011-10-30
Also published as: KR100239743B1; IL99699A0; JP2548056B2; ES2162615T3; US5643868A; DE69132688T2; BR9106977A; NO319370B1; KR930702022A; EP0552256B1; HUT64235A; US5858968A; CA2093806C; ATE204178T1; AU8767991A; DE69132688D1; AU659419B2; NO931267L; CA2093806A1; EP0552256A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】インシュ１ンの　口　による　イブｌ　の゛　は　の　。

１肌立公肛本発明はタイプ１糖尿病の予防又は治療のための組成物とその方法に関する。

本発明の方法は治療薬の非経口投与を必要としない。さらに詳細には、しかしそれにより限定されないが、本発明は、タイプｌの糖尿病の特徴を有する自己免疫疾患の予防又は治療のための薬剤と方法とに向けられる。

ｌ囲二１！１１＃２病は臨床上の発現に基づいて２つの広いグループにおいてＩＰ＋黴付けされ、即ち、非−インシュリン従属又は成熟開始形、またタイプ２として知られる；そしてインシュリン従属又は着年開始形、またタイプ１として知られている。臨床的にタイプ２０大部分、成熟開始の糖尿病は肥満により、４０才以上で出現する通例の疾患の臨床的病因の徴候を伴う。それに対し、タイプｌ、若年性開始患者は、それらの年齢と高さに関連する体重超過でなく、若年齢で疾患の急激な開始を伴い、しばしば３０才以前であることから、タイプｌ糖尿病はそれぞれの年齢で起こり得る。

糖尿病は、人口の１％近くの人についての代謝の病気であり、それらのｌ／４はタイプｌのイノｌニリン従属の範嘲にある（フォスター、Ｄ、Ｗ、、　肱江江飢 ”　ｅｓ　ｏ　ｌ　ｔｅ　Ｍｅｄ’ｃｉ　、　Ｃｈａｐ、　１１４．Ｄｐ、６６１−６７８．１０ｔｈ　ａｄ、、　ＭｃＧｒａｔ−Ｈｉｌｌ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ）。その疾患は、ついには重篤に達するような連続的なホルモン−誘因の代謝の異常のような徴候の疾患で、目、腎臓、神経と、血管を包含する幾つかの生体／ステムを含めて長期間にわたり病状が悪化して衰弱する。病理学的に、その疾患は基底膜の障害によって特徴付けられ、それは電子顕微鏡により明らかにされる。

タイプＩＭ尿病は、非常に低いか或いは検出不可能な血漿イノ／コリンとともにグルカゴンの上昇によって特徴付けられる。正確な病因が何であるかを注意しないことは、多くのタイプＪの密番はイノ／コリン、ランゲルハンス島細胞の細胞質と、グルタミノ酸脱炭酸酵素に抗体に含まれるそれ自身の膵臓の細胞に対して向けられた環状の抗体を有している。免疫応答は、ベータ細胞（インシュリン生産細胞）に対して特別に向けられタイプｌ糖尿病を生じる。この特殊性は上述した臨床写真により支持され、ベータ細胞からはインシュリンが分泌され、一方のアルファ細胞はグルカゴンが分泌される。

タイプ１糖尿病のための通常の治療用養生法は自然のイン１５リンが欠落している関係より、高血糖の最小値に従って典型的なダイエツトを含んでおり、今度は、その結果上してベータ細胞の損傷となる。ダイエｙトは又、ホルモンの低血糖の効果に反するインシュリンの投与に関しては修正される。どのような治療の形態でも、インシュリンの非経口投与は全てのタイプｌ糖尿病のために必要であり、それ故に゛インシュリン−従属°糖尿病と称される。

通常のインシュリン治療はインシュリンの非経口（たとえば皮下）投与に制限されていた。インシュリンの経口投与が不可能であった理由は、インシュリンのの分子量では十分に完全な形状でその治療に有益となるように消化管を通して供給することができないからである。薬剤の皮下投与に伴う多くの問題のために必要なインシュリンの削除又は減少するためのいずれかの方法が当業者により進行中の調査がある。調査されている方法の中には移植可能なインシュリンのポンプと膵臓の島状細胞の移植がある。

何故ならばタイプｌ糖尿病が通例現われるのはそれ自身の青年期であり、何故ならば厳密に要求されるインシュリンの皮下へのデリバリ−１目己摂生、コンプライアンスは、しばしば重大な問題となる。加えて、非経口投与の作用はそれ自身が年少者にとって大変な外傷を与え得る。臨床者に七って、患者の日常の与えられたいくらかの時間に必要とされるイン／ニリンの雪を正確に調整するのは困難である。さらに、血中グルコースが正常な個人について調整される範囲に非経ロインンコリ／と共に糖尿病患者における血中グルコースのレベルを調整することはいずれも不可能である。

このように、タイプｌ糖尿病の治療の早期の段階にあっては、インシュリンの注射の時期と必要なインシュリンのレベルが知られていないことにより、患者はしばしば高血糖症又は低血糖症のいずれか一方になる。臨床家の治療の進歩と、さらに重要なことは、密番に日課として適合させることであるが、しかし常にケトアンド−シスまたは低血糖症のリスクがある。

加えて、たとえ多くの患者が組み替え技術によって生産された人のインシュリンで今日治療されたとしても、いくらかの患者は注入されるインタ１りンの抗体を生産する。これは、インシュリンの投薬量を高める必要性に通じ得る。今日、インシュリンを含んだ経口投薬形式で成功したものは提供されていない。

その技術は、インシラリンの非経口投与を包含しないタイプｌ糖尿病の予防及び／又は治療のために長い間探しめられている方法である。インシュリンのデリバリ一方法の代替の各種の試みには欠陥があり或いは実用的なレベルにまで進歩していない。例えば、経口のインシュリン、経皮性のインシュリンのデリバリ−１及び経鼻のインシュリンは臨床的に利用されるには至っていない。経口のインシュリンは血中グルコースのレベルに影響が現われない。何故ならば、それは鼻の粘膜を横切ってインン１りンを獲得することにより鼻のイン７ユリンが受容される哺乳類の中へ脂質を注入することが必要であり、インタ１リン投与のこのルートは制限されている。

タイプ２ｍ尿病の治療のための経口投薬形態は利用されている（例えば、経口スルホニル尿素）。これらの経口投与される薬剤は、インシュリンを含んでいないが、むしろ膵臓のイン９ｘリンの生産を刺激するもので、そしてタイプ２糖尿病の確定状態の治療のためにのみ効果がある。タイプｌ糖果病のように、スルホニル尿素のような経口薬剤は、顕著に小さくなるか又はベータ細胞群が損傷されることにより効果が無い（フォスター、Ｄ、Ｗ、、Ｈａｒｒｏｏｏ　５ＯＣｈａｐ、＋１４．　ｐ、６６８．　１ｏｔｈ　Ｅｄ、、ＭｃＧｒａｗ−旧ＩＩ、Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ）　。

タイプ１ｍ尿病は自己免疫を病因とする疾患であるものとみなされる（エイインバース、　Ｇ、Ｓ　、　、　Ｌｕ　ＩＪＬＩＬＬ　、Ｌ　ＭｊＪＬ　ＬＬＬ：　１３６０−１３６８．１９８６）　ｏ各種動物のモデルは、自己免疫疾病のようにタイプＩｌ！尿病の研究のために利用され得る。

これらにはＢＢ？ウス（Ｎａｋｂｏｏｋｄａ、　Ａ、Ｆ、、　ｅｔ　ａｌ、、吐止虹吐弘Ｌｉｔ：　１９９−２０？。

１９７８）と突発性の糖尿病（Ｐｒｏｃｈａｚｋａ　ｅｔ　ｉｆ、　叙ムｌ刊７３４４８６．１９８７）でのＮ０Ｄ（非肥満Ｗ尿）マウスとを包含する。島細胞、殊にＣＤ４とＣＤ８のＴ細胞はベータ細胞に損傷を与える薬剤の使役性がやはり包含されていて、ＮＯＤマウスにおけるタイプＩＭ尿病の発生率の低減によって証明されている＜Ｕ■２肚虹皿：８２３．１９８７）。

他の治療は、一般的な自己免疫疾患の治療のために開発されている。

ウニイナーらの米国特許出願第４６０８５２号（１９９２年２月２１日提出）は、米国特許出願第０６１＋７３４号（１９８７年６月２４日提出）の一部継続出願であり、自己抗原の経口投与による自己免疫疾患の治療が開示されている。

ウニイナーらの米国特許出願第４５４４８６号（１９８９年１２月２０日提出）には、自己抗原のエアゾール投与、自己免疫疾患に介在するＴ細胞を治療するための効果的な方法にあるような自己抗原と類似物の疾患−抑圧断片が開示されている。

ウニイナーらの米国特許出願第４８７７３２号（１９９０年３月２日提出）には、自己抗原の経口投与で共に用いられるシネルギスト（エンハンサ−）、自己免疫疾患に介在するＴ細胞を治療するための効果的な方法にあるような自己抗原と類似物の疾患−抑圧断片が開示されている。

ウニイナーらの米国特許出願第５５１６３２号（１９９０年６月１０日提出）は規則６２による、米国特許出願第３７９７７８号（１９８９年７月１４日提出、現在は放棄）の一部継続出願であり、高純度なＳ抗原の経口投与によって、哺乳類におけるブドウ膜炎の治療と予防に利用可能であることが開示されている。

ナグラーーアンダーソンら（’　：　７４４３−？４４Ｌ　１９８６）には、マウスのモデルにおけるコラーゲン−誘因関節炎を鎮静するコラーゲンの経口投与が開示されている。

しかし、自己免疫疾患の治療のための上述の開示にはタイプ１糖尿病の治療に使用し得るものがない。何故ならばタイプ１糖尿病を誘因することと、保持することを包含した抗原は同一でないためである。

それ故に、本発明は、タイプｌ糖尿病の特徴を有している哺乳類における自己免疫疾患の治療と予防のための薬剤と方法の提供を目的とする。タイプ１糖尿病の予防はむしろ高血糖症の前治療を含む。

本発明の別な目的は、タイプｌ糖尿病の特徴を有している自己免疫疾患を受けている哺乳類の治療のために使用される組成物と調剤の処方である。

本発明の更なる目的は、タイプＩｌ！尿病の特徴を有している自己免疫疾患の予防又は発現の弱化（すなわち臨床的徴候）の目的で哺乳類に経口投与するための組成物と調剤の処方の提供である。タイプｌ糖尿病の予防は高血糖症の前治療を包含する。

本発明のこれらと池の目的は、以下の記述により当業者にとっては容易に想到されるであろう・及肌優！ム予測し得ずに発見されたインシュリンの経口投与は、タイプ１糖尿病におけるインシュリンの必要性を除去又は減少させるための効果的な治療である。経口のインシュリンはベータ細胞の崩壊の予防又は良化とそれによって現存の非経口インシュリン治療の減少又は除去が可能である。

経口により投与されるインシュリンを収容した調剤の処方は、タイプｌ糖尿病の徴候及び／又はタイプ１糖尿病を有しているように診断された症状を持っ哺乳類に１１製され投与される。加えて、タイプｌ糖尿病の発生の危険がある対象（即ち、遺伝的研究と分析と同様の適当な手段を通してタイプｌ糖尿病が発生する傾向が説明されている）は同様のインシュリンの経口ＩＡ！！剤により治療される。

タイプ１ｍ尿病を治療するための経口又は経腸投与のための調剤の処方は、商品として利用できるインシュリンと、経口摂取のために適当で調剤上受諾できる媒体くキャリヤ）とから調製される。各々の投薬におけるイン／ニリンの量は１ｍｇから１０００ｍ　ｇの間であろう。しかし、合計の投薬量は各個人における治療の度合のために必要な量とされる。一般に、必要とされるインシュリンの合計量は、本発明の実施においては、ケトアシド−シスを背景としたタイプ１糖尿病に伴う個々の病状から保護するような非経口の投与である投薬より多くする。

加えて、エアゾールデリバリ−システムは調剤上適当な牛ヤリャ又は希薄剤とともに上述したようなインシュリンの同様な投薬とともに用意することができる。

これらと池の改善点は以下の記載、図面及び付加されたクレーム中に開示されている。

２面９ＩＩＩＪ１咀図１はＮＯＤマウスにおける糖尿病にブタのインシュリンを経口で投与した効果を示すグラフである。

図２はＮＯＤマウスにおける絆ロイン’／ｓリンの後−投与による血中グルコース濃度での経ロブタインシェリンの効果を示すグラフである。

図３はＮＯＤマウスにおける糖尿病の発現に関して、膵臓抽出物を週毎で与えた経口投与の影響を示すグラフである。

良肌旦１１鼠反咀全ての特許出願、それに関する特許と参考文献は、それら全体の中の関連性によってそれに合併される。

本発明は、自己免疫のモデルからのタイプ１の治療のために存在する方法と、特に糖尿病の予防のための治療とのいずれか一方に必要とされる。何故ならばタイプｌの患者は主として青年期で、もし病気の開始の時に本発明の組成物と方法を用いて治療を開始するならば損害を受けていないベータ細胞の機能の保存のために長期のインシュリン治療はもはや必要とされないと信じられている。加えて、もし本発明の方法が、幾つかのベータ細胞の機能がまだ存在する時に開始されると、非経口イン／ニリン治療を減少させることができる。かくして本発明は長期のイン／ニリン治療を減らし或いはもはや必要なくする手段を提供する。

インシュリン（又はインシュリンの疾壱抑圧断片又はその類似物）の経口及び又はエアゾール投与がタイプｌ糖尿病の治療と予防に効果を及ぼすことについての発見は今日では予測し得なかった。これは既存の（非経口の）インシュリン治療からの基礎的な変更であり、インタ１りンは多くの自己免疫応答を緩和し閉じ込めること及び内分泌学的なく代謝の）効果によらず投与される。イン／ニリンの経口投与は糖尿病のある形態の治療において効果的であることが立証されない。

何故ならタンパク質分解酵素が胃の中に存在し、消化システムがポリペプチドを退化させた後で血流に到達するからである。加えて、インシュリンの鼻内投与は糖尿病のある形態の治療において効果的であることは以前に示されていない。

その作用理論への結合を望むことなく、本発明に従うインシュリンの経口又はエアゾール投与はサプレッサーＴ細胞を引出すことを通してタイプ１糖尿病の免疫学的な病因に影響すると確信される。

次の用語の検討は以下のそれらの帰する書味を持つものとする。

”治療”とは、発展的な疾患のために高い危険を持った患者において使用するための予防的な投与と同様にインシュリン−生産性ベータ細胞も、損傷のない幾らかのレベルを伴う患者の疾患活性の治療の意味とする。

”経口投与”とは、経口投与と経腸投与（胃内への直接インキ１ベージ璽ン）の両方の意味とする。

タイプｌ糖尿病の“危険な個人”とは、ａ）タイプ１糖尿病に関連した血液を有する個人；ｂ）タイプ１糖尿病が明白でない自己抗体−陽性の個人。これらの自己抗原は、島細胞の細胞質の自己抗体、インシュリン抗体とグルタミン酸脱炭酸酵素自己抗体を包含するＨｅ）人の組織適合（ＨＬ　Ａ）タイプＤＲ３又はＤＲ４０ＱＷｌｌを持った個人；ｄ）グルコース耐性試験でのインシーりン分泌第１ステージの損失と同じくグルコース異常性をもつ個人とする。

”哺乳ａ″とは、免疫システムを有しそれによってタイプＥ糖尿病にかかり易い何れかの生物とする。

”疾患活性”とは、島状ベータ細胞の自己免疫破壊の意味とする。

”エアゾール”は、ネプライザと同様の気圧保持システムを用いて創作されるであろう、固体又は液体の粒子に細かく分割するものに関する。該液体又は固体の原料源はインシュリン及び／又はここに定義されたようなインタ１リンと類似物の疾患抑圧断片を含む。

インシュリンの”疾病抑圧断片”とは、何れかのペプチド又は連続したアミノ酸部分を含むポリペプチド又はインシュリンの半量体と治療の能力を保有し又はタイプ１糖尿病の特徴を有している疾もの予防を含む。同様の断片は自己抗原性又は完全な４７７５９２分子の内分泌学的な（代謝の）特性を所有する必要はなインシュリン又は疾患抑圧断片に関係する組成物の″類似物”とは、インシ。

リン又は同様の生物学的な活性を所有する疾患抑圧断片に構造上関係があるものであり、即ち、経口又はエアゾール投与の条件でタイプ１糖尿病を抑圧すること又は疾患徴候の予防の能力である。非限定の実施例によれば、その用語は、インシュリンのアミノ酸配列又は疾患抑圧断片とは異なったアミノ酸配列を有するペプチドを含んでおり、それについてはインシュリンの疾患抑圧断片又はタイプ１糖尿病の予防又は徴候の軽減をまだ保持している間の１又はそれ異常のアミノ酸残基による。これら類似物はインシュリンの内分泌学的な活性を抑圧する必要性が不要となる。

本発明に従えば、実験はＮ０Ｄ（非−肥満糖尿病）マウスにより実行され、自然発生の発展糖尿病の１１から５２週令に、投薬−従属方法によるインタ１リン経口投与で全て投与した糖尿病の低い発生率を持つ。全ての動物において、経ロインシェリンの高い投与量（１ｍｇ）を受容し、治療された動物の１００％は糖尿病の進展が無かった。

非経ロインシュリンでタイプｌ糖尿病の徴候をコントロールすることはかなり容易であるけれども、それは１日１又は２回の注射のように与える従来のインシュリン治療を実施した場合の２４時間を通しての患者の通常の血糖値とは異なるものである。即ち、本発明は、糖尿病の徴候を治療又は予防するためのかなりの量の経ロインン１リン投与形態に有効な、管理されている哺乳類、罹患し又はタイプｌ糖尿病の危険のあるものを具備している哺乳類におけるタイプｌ糖尿病の特徴を有する糖尿病を治療又は予防するための方法を提供する。

本発明の方法で注目すべきことは、血糖を闘節するのに十分なインシュリンが生産されないベータ細胞が損傷した患者における非経ロインシュリン治療の必要性を削除しないであろうことである。しかしながら、本発明の方法と組成物を使用することは、新規に診断されたタイプ１糖尿病の患者又はそれらの危険のある疾患（上記で定義したような）をタイプ１糖尿病に進展することが起こらないであろうし、非経ロインシュリン投与を削除できるであろう。加えて、本発明の方法と組成物は、糖尿病が徐々に進行することにより、幾らがのベータ細胞機能（インシュリンを幾らかのレベルで生産することが可能である）を有しているそれらの個人によって必要とされるインシュリンの量を減少させるであろう。

本発明において用いるインシュリンは、例えばＮ０ＶＯラボラドリース（Ｄａｎｂｕｒｙ、　ＣＴ）　、　Ｎｏｒｄｉｓｋ−（Ｉｓ＾（Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、　Ｍａｌ）とＥｌｉ　Ｌｉ１ｌｙ　ａｎｄ　Ｃｏ、　（Ｉｎｄｌａｎａ垂盾撃奄刀 AＩＮ）のような多数の商業的供給源から得ることができる。ブタ−由来のインシュリン、ヒト半合成インシュリン（Ｎｏｒｄｌｓｋ−ＬＩＳ＾）とクローン組み替えインシュリン（Ｅｌｉ　Ｌｉ１ｌｙ）は本発明の方法を実行するのに使用し得る。

本発明において使用される疾患抑圧断片とインシュリン類似物は周知の固相合成技術を用いて合成することができる（ＭｅｒｒｉＮｅｌｄ、　Ｒ，Ｂ山、−二上：　４１２．１９６２と　：　２１４９．１９６３；組ｔｃｈａ１．　ＡＲ，ｅｔ　ａｌ＋、　Ｊ、　ｍ、Ｃｅｔ　Ｓｏｃ、９Ｌ　７３５７．　１９７６：　Ｔａｇ、Ｊ、ｅｔ　ａｌ、、Ｌ、−Ａ」Ｌ−」２１隻ｄ　＋０５：　６４４２．１９８３）。類似物は、相当するアミノ酸配列の同一証明と上述したペプチド合成技術を用いることによって構成することができる。

類似物は、文献（ｓＯ，ｖｏｌ、５−　ｐｇｓ、２０９−２１１）に開示されたような周知のインシュリンのアミノ酸配列を用いて用意することができる。

疾患抑制の類似物と断片とは、この分野において周知のＤＮＡ組み替え技術を用いてやはり得ることができる。

インシュリンの疾患抑制断片とその類似物は、以下の実施例１〜５のそれらと同様に適当なインビボのシステムを用いた規定の実験操作を用いて同一の証明をすることができる。

本発明に従えば、インシュリン又は疾患抑圧断片又はそれらの類似物は、罹患してから又はタイプｌ糖尿病の特徴を有する疾患の危険がある哺乳類に導入され、経口又は経腸で、１日当り上記哺乳類の体ｆ１Ｋｇ当り約２ｍｇと、上記哺乳類の体重Ｋｇ当り約１０ｍｇの間とし、単−投薬形態又は複数投薬形態により投与されるであろう。好ましくはインシュリンの投与量は１日当り上記哺乳類の体重Ｋｇ当り約２．５ｍｇと５．０ｍｇの間とされる。正確な投与するべき量は、重篤さと患者の症状の段階と患者の医学的な状態とに従って変更されるであろう。

本発明はまた、罹患してから又はタイプｌ１１尿病の特徴を持つ疾患の危険がある哺乳類に投与するための経口薬剤の形態と調剤上の処方を指示する。それは本発明が発明の範囲に入れられる治療に従ってタイプｌ糖尿病の病気の徴候が希薄されることを示す何らかの統計学的結果によって理解されるであろう。

本発明による経口の処方の各自には不活性の成分を含め付加することができ、調剤上受諾できる媒体、希釈剤、充填剤、可溶化又は乳化薬剤と当該分野で周知であるような塩類を含んでいる。例えば、錠剤は当該分野で周知の固体媒体を用いた通常の製造法に従って：ｌＩ剤されるであろう。本発明にわいて用いられるカプセルは、ゼラチン又はセルロースから派生したような幾つかの調剤上受諾できる材料から作られるであろう。経口投与製剤の形態のための開放を維持する経口デリバリ−システム及び／又は腸溶コーティングは、１９８７年１１月３日発行の米国特許第４７０４２９５号、１９８５年１２月３日発行の米国特許第４５５６５５２号、１９８２年２月５日発行の米国特許第４３０９４０４号と１９８２年１月５日発行の米国特許第４．３’０９４０６号中に開示されたそれらのものと同様にまた考慮される。

固体媒体（牛ヤリャ）の実施例にはベントナイト、シリカ及び他の既に使用されている媒体が含まれる。本発明の処方において使用されるであろうさらなる非限定な実施例での媒体と希釈剤は、塩類とリン酸緩衝液（ＰＢＳ）と同様の何れかの生理学上の緩衝＃１溶岐と水とが含まれる。

活性成分の含有単位又は必須の有効量よりそれ自身の構成する有効量中で必要のない一方の調剤形態の個人の投薬における含有される成分は投薬単位の複数投与によって達成できるということは認められるてあろう。

本発明の調剤形態の投与の好適な道筋は経口又は経腸である。好ましい経口又は経腸の調剤上の処方又は調剤形式は、例えばインシュリンを約１　ｍ　ｇと約１゜００ｍｇの間で備えたものであろう。

本発明の好適な実施警棒の一方では、本発明の調剤上の処方又は調剤形式は、罹患してから又はタイプ１糖尿病の特徴を持つ疾患の危険がある哺乳類に、エアゾール形態で投与することができる。それは、一部継続米国特許出願第４５４４８６号（１９８９年１２月２０日提出）に開示されているような、ミニリン塩基性タンパク質（ＭＯＰ）と共に実験的アレルギー性脳を髄炎誘起物質（ＥＡＥ）と、コラーゲンと共に関節炎の補助剤での治療に際して見出されたようなタイプｌ糖尿病の治療または予防のためにエアゾール投与を用いることが必要とされるであろうインシュリン、疾患抑制断片又はそれらの類似物の置を、より低くすることが期待される。そのイン７コリン、疾の抑制断片又はそれらの類似物の鳳はエアゾール投薬形式において１日当り哺乳類の体重ｋｇ当り約０．１ｍｇと１０ｍｇの間となるように投与されるであろうし、単−薬剤形態又は種数薬剤形態で投与されるであろう。正確な投与するべき量は、その状態と患者の病状の重さと患者の医学的な状態に従って変更されるであろう。

本発明のエアゾールの調剤上の処方は、例えば任意の成分、調剤上受諾できる媒体、希釈剤、可溶化又は乳化薬剤、そして当該分野で周知のタイプの塩類を含めてよい。そのような物質の実施例には生理的食塩緩衝溶液と同様の通常塩溶液と、水とを包含する。

本発明のこの一方の実施態様によるインシュリン又は疾患抑圧断片又はそれらの類似物の投与の道筋はエアゾール又は吸入形態である。本発明のインシュリンと関連混合物は乾燥粉末又は水溶液として投与することが可能である。好ましいエアゾールの調剤処方は、例えば、約１ｍｇと約１０００ｍｇの間でインシュリン又は疾患抑圧断片又はそれらの類似物を包含する、調剤上受諾できる緩衝塩溶液を含む。

インシュリン又は疾患抑圧断片又はそれらの類似物の固体微粒子を最終的に分割する影響の乾燥エアゾールは溶解させることがなく又は液体中に懸濁され、本発明の実施において有益である。インシュリンは散布される粉末の形状において、それは平均粒径約１μｍから２μｍの間、好ましくは２から３μｍの間を有する最終的に分割された微粒子に含まれるであろう。最終的に分割された微粒子は噴霧化と当該分野で周知のスクリーンフィルタを用いた技法によりｗ４製されるであろう。その微粒子は、粉末の状態にできるであろう最終的に分割された材料の吸入される予備決定量によって投与されるであろう。

本発明のエアゾールの調剤処方における有効な媒体及び／又は希釈剤に特有の非限定的な実施例には、水と、ｐＨ７，０−８，０のリン酸緩衝塩溶液と同じく調剤上受諾され得るｍ衝塩溶液が含まれる。

本発明の！Ｉ削処方は、例えば、米国特許第４６２４２５１号（１９８６年１１月２５日発行）：同第３７０３１７３号（１９７２年１１月２１日発行）：同第３５６１４４４号（１９７１年２月９日発行）、及び同第４６３５６２７号（１９７１年１月１３日発行）に開示されたそれらと同様のネブライザーのようなエアゾールスプレーの形式において投与されるであろう。そのエアゾール材料は治療するべき対象により吸入される。

エアゾールデリバリ−の他のシステムとして、−電気圧を保つＭＤ　Ｉ　（ｓａｔｅｒｅｄ　ｄｏｅｓ　１ｎｈａｌｅｒ）と、例えば二ニーマンの文献（Ｎｅｗｓａｎ、Ｓ、Ｐ、　ｉｎ　Ａｅｒｏｓｏｌｓ　ａｎｄｔｈｅ　Ｌｕｎｇ、　Ｃ１ａｒｋｅ、　Ｓ、Ｗ、　ａｎｄ　Ｄａｖｉａ、　Ｄ、　ｅｄｓ、　ｐｐ、１９７ −２２４．　Ｂｕｉｔｅｒｖｏｒ狽■刀A　Ｌｏｎｄｏｎ、　Ｅｎｇｌａｎｄ、　１１８４）に開示されているような乾燥粉末吸入が、本発明を実施する際に使用し得る。

そこに記載されたタイプのエアゾールデリバリ−システムは、Ｆｌｓｏｎｓ社（Ｂｅｄｆｏｒｄ、　ＭＡ）　、　Ｓｃｈｅｒｉｎｇ社（Ｋａｎｉｌｗｏｒｔｈ、　ＮＪ）と＾ｍｅｒｉｃａｎ　Ｐｈａｒｍｏｓｅａ１社（Ｖａｌｅ獅■■ ａ、　Ｃ＾）を含めた流通源から利用可能である。

本発明の方法は、特に小児又は青年のタイプ１１１尿病の患者又は疾患の第２の効果（血管の損傷、腎臓の損傷と糖尿性網膜疾患と同じく）における高血糖症の開始の最初の年の全体的な徴候が無い患者に好適に用いられるものである。患者にとって日課としてのインシュリン注射で最も厳しく影響を受けるものとして外傷による影響がある。

以下にある実施例において示す通り、インシュリンを経口投与したＮＯＤマウスのうち結果的に進展糖尿病が生じたものはそれらマウスの総数に対し減少していた。加えて、高い投薬量使用（１ｍｇ）で進展糖尿病を生じたマウスは無い。

加えて、実施例２に示す通り、経口インシュリンの効果は、これら動物における血中グルコースの濃度の軽減のためではなく、そして代謝の効果ではない。加えて、以下の実施例３に示す通り、膵臓抽出物で飼育されたＮＯＤマウスは、たとえ経口・ｆンンエリン受容より範囲が小さくとも、糖尿病に進展した動物の数の減少を導いた。

予備の実験で示されたインシュリンＩｍｇを給餌したＮＯＤマウスは、ＰＢＳ給餌ＮＯＤマウス（データは示さず）よりも、膵臓周囲の免疫システム細胞の炎症（イン／ニリテイスとして知られる状！！！りがほとんど無かった。それ故、ＮＯＤマウスへのインシュリンの経口投与は、膵臓内の免疫システム細胞の炎症に影響することと、ベータ細胞の機能を保持することにより疾患の進展を停止させることが実現される。

本発明は更なる以下の実用の実施例の開示により具体化するが本発明の範囲はそれらにより限定されない。

！ｕＬＬＬ＝　マ　スこ゛（につい　のブ　ン／二１ン　の１Δ笠果ＮＯＤマウス（非肥満糖尿病マウス）はタコニック・ラボラドリース（ｔａｃｏｎｌｃＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ：　ＧｅｒｓａｎＬｏｗｎ、　ＭＡ）の４週令のものから得た０合計３０匹のこれら動物は実験の開始に際し、以下に述べるグループにそれぞれ入れた。４と１７２週令１、マウスはブタインシュリン（Ｎｏｖｏ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、　Ｄａｎｂｕｒｙ、　ＣＴ）を経口で投与した。各々の動物は９週令まで、週に２度、経口で２つの治療を受けた。

そのマウスは、塩類（コントロール）又はブタインシュリンを１０８２％１００ μｇ又は１ｍｇで給餌した。その動物は１８ゲージの球ポイント針（Ｐｏｐｐｅｒ　ａｎｄＳｕｎ社、Ｎｅｗ　Ｈｙｄｅ　Ｐａｒｋ、　ＮＹ）によって給餌（強制給餌）した。その動物は１０週の始めから給餌を週１度とし合計３３週とした。１２週の始めからその尿はグルコスリア試験テープ（Ｇｌｕｅｏｓｕｒｉａ　ｔｅｓｔ　ｔａｐｅ；Ｅｌｌ　Ｌｌｌｌｙ、　Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｌｇ、　ＩＮ）で１毎に試験した。もしグルコース尿試験で３＋又はそれ以上と試験された動物は、取り出して、グルコース分析機（ベックマン社）を用いて血中グルコースを測定した。もし血中グルコースが２２０又はそれ以上であるなら、その動物は糖尿病として分類し、そして処分した。

図１において示すように、投薬感応方法においてフントロールグループとｌＯμ ｇと１００μｇのグループ中では糖尿病に進展したがＩｍｇのインシュリンを給餌したどの動物も糖尿病に進展するものはなかった。コントロールに対する１ｍｇ給餌のｐ値はｐ＜０．００８であるのに１００μｇ給餌はｐ＜０．０９である。

動物における通常の血中インシュリンのレベルは１２０から１７０ｍｇ／ｄｌである。糖尿病に進展したＰＢＳを与えた動物中の血糖は、５７５．４８５．４５９．５００．３７５．４００．３６２．３９５．４８０ｍｇ／ｄｌであった。

糖尿病に進展したインシュリンをｌＯμｇ給餌した動物の血糖は、３３０．４２０．３１５．４５９．５２０．４８７ｍｇ／ｄｌであった。糖尿病となったインシュリンを１００μｇ給餌した動物の血糖は、２９０．６００．４５０．５００ｍｇ／ｄｌであった。１ｍｇのイン／ニリンを与えた動物もまた血糖を足間的に試験した。尿試験により測定された通り糖尿病に進展した動物はなかったが、しかし確認のために血糖を試験した。インシュリン１ｍｇを給餌した１０匹の供試動物からの血糖は、＋７４．１２８、＋２５．１２５．１４５．１２３．１３６．１５５、！＋５．１３０ｍｇ／ｄｌであった。

２：　のＮ　マ　スこおζ　ン７：Ｌ１ン′の　ルコース何らかの内分泌的（即ち血糖の直接低下）効果とするべきかの決定に従って以下のインシュリンの給餌が行なわれ、７週令のＮＯＤマウス（グループ当りマウス５匹）は、１ｍｇのブタインシュリン又はコントロールとして１ｍｇのミニリン塩基性蛋白質（Ｆｒｅｅｚ、　Ｒｏｇｅｒｓ、　Ａｒより得られた）を給餌した。血中グルコースは次の２４時間の期間を越えて測定した。陽性フントロールのように、動物の分離グループはブタインシュリンの２０μｇとともに皮下注入した。全ての動物は絶食状態に保った。

図２において示すように、皮下インタ１りンを与えた動物は、グルコースのレベルが即座に落下し、おおよそ８０ｍｇ％の減少が４時間を越える期間持続し、次に通常に再発した。経口イン７ユリン又はミニリン塩基性蛋白質を受容した動物では血中グルコースの落下は無かった。蛋白質の負荷に最も多分に関係して血中グルコースが増加するという事実がある。次の２４時間を越えたなら、絶食状態にある動物の全てのグループの血中グルコースが漸次減少した。これはインタ１リン給餌動物とミニリン塩甚性蛋白質給餌動物の両方で見られた。

これらの結果は経口イン／１りンを給餌することによって内分泌的（代謝の）効果が無いことを示している。以下の蛋白質の経口投与での一般的な免疫学的寛容と免疫学的効果の用語において与えられた公表されたデータについて、インシュリンの経口投与がＮＯＤマウスにおける糖尿病の免疫学的な病因に影響を与えることをそれらの結果は強く示唆するものである。

・　の２実施例１と同様の実験を実行し、ＮＯＤマウス（グループ当り１４〜１７）は０．５ｍｌのＰＢＳ中のラット（ｌｅｗｌｉ　ｒａｔｓ）から採取した膵臓ホモジナイズ物を給餌した。図３に示す通り、コントロールに比べ、抽出物給餌動物における糖尿病の進展は減少していた。それにもかかわらず、その結果はインシュリン給餌動物において見られるような劇的かつ完全なものでない。これらの結果は膵臓組繊の給餌の幾つかの効果と上記したインシュリン実験での最も特徴的な効能を示す。

４：ＮＯＤマ　スによる　のインシュリンエアゾール　のインシュリン（実施例１と２におけるように０からＩｍｇ）はネプライザによゥでエアゾール状智とした以外は上に開示された実施例１と２と同様にＮＯＤマウスに投与した。

エアゾール化したインタ１リンは治療したマウス中のタイプ１糖尿病の病状（即ち高血糖症）を明確に予防するのに効果的であろうことが期待される。

°　マ　スに　１　の　の　のインタ１リン（実施例１と２中のように０から１ｍｇ）は経口かつエアゾール″ 形態で高血糖症に罹患したＮＯＤマウスに投与されるであろう。その治療は１２〜２０週令により、その血清グルコースのレベルが糖尿病の開始以前の動物の確実な比率中の高血糖症の濃度である。

インシ一リンの経口とエアゾール投与の両方は、血中グルツース濃度を通常値近くまで減少させ、そしてベータ細胞の機能を維持することを導くであろう。

８　°　ｇ　ρ　８％非糖尿病マウス −９−一　皮下イアｉ／１ツン　（２０ＢＧ＞−−ｔｈ−経ロインシヱリン（１１Ｇ）−末一経口ＭＢＰ　（１１Ｇ）図２国際調査報告フロントページの続きアメリカ合衆国　マサチューセッツ０２１４６　プルツクリン　サマーセット　ロアメリカ合衆国　マサチューセッツ０２１８１　ウェルズリ−サミット　ロードニア２）発明者　バフラ−、デビット　アレンアメリカ合衆国　マサチューセッツ０２１６５　ウェスト　ニュートン　フォーレスト　アベニュ　１１０（７２）発明者　ザング、イングリアメリカ合衆国　マサチューセッツ０２１４８　マルデン　エイヴオン　ストリート　１３０

Claims

【特許請求の範囲】

１．治療の必要な哺乳類における膵臓ベータ細胞の自己免疫損傷を鎮静するための方法であって、インシュリン、インシュリンの自己免疫感応抑圧断片とそれらの類似物よりなる群から選ばれた有効な量の薬剤を経口又は経腸で投与することを特徴とする前記の方法。
２．前記薬剤が、タブレット、カプセルとカブレットよりなる群から選択きれた固体投薬形式を含む経口投薬形式で投与されることを特徴とする請求の範囲第１項記載の方法。
３．前記薬剤が、水性懸濁物又はインシュリンの溶液を含む経口投薬形式で投与されることを特徴とする請求の範囲第１項記載の方法。
４．経口投薬形態が、調剤上受諾できる媒体又は希釈剤を含むことを特徴とする請求の範囲第２項記載の方法。
５．治療の必要な哺乳類における膵臓ベータ細胞の自己免疫損傷を鎮静するための方法であって、インシュリン、インシュリンの自己免疫感応抑圧断片とそれらの類似物よりなる群から選ばれた有効な量の薬剤をエアゾール形式での吸入により前記哺乳類に投与することを特徴とする前記の方法。
６．哺乳類に対するタイブ１糖尿病とそれの動物モデルとを含む群から選択された糖尿病の予防の方法であって、インシュリン、インシュリンの自己免疫感応抑圧断片とそれらの類似物よりなる群から選ばれた予防上有効な量の薬剤を、経口又は経腸または吸入により、同様の治療を要する哺乳類に投与することを特徴とする前記の方法。
７．膵臓ベータ細胞の自己免疫の崩壊が進行中の罹患動物に投与するための調剤処方であって、インシュリン、インシュリンの自己免疫感応抑圧断片とそれらの類似物よりなる群から選ばれた前記崩壊の予防に有効な量の薬剤を含むエアゾール投薬形式を備えたことを特徴とする前記処方。
８．調剤上受諾できる媒体又は希釈剤を含むことを特徴とする請求の範囲第７項記載の調剤処方。
９．タイブ１糖尿病とそれの動物対応とを含む群から選択されるが少なくとも一部の膵臓ベータ細胞の機能を保持している糖尿病に罹患している動物を治療するための方法であって、インシュリン、インシュリンの自己免疫感応抑圧断片とそれらの類似物よりなる群から選ばれた有効な量の薬剤を含んだ投薬形式で前記動物に経口又は経腸または吸入により投与することを特徴とする前記の方法。
１０．タイブ１糖尿病とそれの動物対応とを含む群から選択されるが少なくとも一部の膵臓ベータ細胞の機能を保持している糖尿病に罹患している動物に投与するための調剤処方であって、インシュリン、インシュリンの自己免疫感応抑圧断片とそれらの類似物よりなる群から選ばれた有効な量の薬剤を含んだエアゾール投薬形式を備えていることを特徴とする前記の処方。
１１．調剤上受諾できる媒体又は希釈剤を含むことを特徴とする請求の範囲第１０項記載の調剤処方。
１２．治療を要する動物におけるタイブ１糖尿病の開始を予防するための方法であって、インシュリン、インシュリンの自己免疫感応抑圧断片とそれらの類似物よりなる群から選ばれたタイブ１糖尿病の開始を予防する有効な量の薬剤を前記哺乳類に高血糖症の発生以前に経口で投与する工程を備えたことを特徴とする前記の方法。