JP2018504438A - 併用療法のための医薬組成物 - Google Patents

Abstract

本発明は、ＦＸＲアゴニストおよび少なくとも１つの脂質低下剤（例えば、ＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニストおよび／またはスタチン）の組み合わせを含む医薬組成物に関する。ＦＸＲ介在性疾患または状態、例えば原発性胆汁性肝硬変（ＰＢＣ）、原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）、門脈圧亢進症、胆汁酸下痢、ＮＡＦＬＤ（非アルコール性脂肪肝疾患）、ＮＡＳＨ（非アルコール性誘発性脂肪性肝炎）および他の慢性肝疾患などの処置または予防のための併用も開示される。本発明の組み合わせは、脂質および肝臓酵素レベル上昇に関連する状態の処置または予防に有用である。本発明はまた、医薬の組み合わせを含むパックまたはキットにも関する。

Description

血液中の、コレステロールおよびトリグリセリドなど、循環脂質化合物の濃度上昇には多くの状態が付随する。これらには、ＩＩ型糖尿病、原発性胆汁性肝硬変（ＰＢＣ）、原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）、様々な慢性肝炎状態（ＢおよびＣ型肝炎）、ＮＡＳＨ（非アルコール性脂肪性肝炎）および冠動脈疾患、脳血管動脈性疾患を含む動脈性疾患、末梢性血管疾患、大動脈瘤および頸動脈アテローム性動脈硬化状態が含まれる。過去において、高脂血症状態を付随する血管事象（心不全、塞栓症、心臓発作および脳卒中など）を処置および予防するために、様々な脂質低下技術が使用されてきた。このような処置には、食事の変更および血中を循環する高トリグリセリドおよびコレステロールレベルの調節が含まれてきた。後者は一般に薬理学的に、最近は様々な「スタチン」によって処置されている。脂質レベル上昇に対する状態の処置のために使用される治療剤に含まれるのは、様々なフィブリン酸誘導体である。クロフィブラートを含む一部のより古いフィブリン酸誘導体は、脂質上昇に関連する状態の処置における一時的な処置であったが、より最近、フェノフィブラート、ゲムフィブロジル、シプロフィブラートを含む新規フィブラートおよび、さらにより最近ではピペリジン、４−ヒドロキシピペリジン、ピペリジン−３−エンおよび、ピペラジンを含有するフィブラートが抗脂質治療のグループに加わっている。これらのより新しい分子は、コレステロールおよびトリグリセリドの両方を低下させるための有望な特性を有する。しかし、一部の状況において、フィブリン酸誘導体単独は、多くの患者において存在する重篤なレベルの高脂血症を調節することにおいて不適切である。フィブリン酸誘導体の副作用プロファイルは、併用療法の存在下などでの用量低下によっても改善され得る。

したがって、コレステロールおよびトリグリセリドなどの血中の循環脂質化合物の濃度上昇を含む状態の処置のための治療の改善が必要とされている。

本願は、（ｉ）第１の化合物と、（ｉｉ）少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニストおよび／またはＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニストと、（ｉｉｉ）任意選択により１つ以上の薬学的に許容可能な担体と、を含み、第１の化合物がＦＸＲアゴニストである医薬組成物に関する。

本発明はまた、（ｉ）第１の化合物と、（ｉｉ）少なくとも１つのフィブラートと、任意選択により（ｉｉｉ）１つ以上の薬学的に許容可能な担体と、を含み、第１の化合物がＦＸＲアゴニストである医薬組成物にも関する。

本発明はまた、（ｉ）第１の化合物と、（ｉｉ）少なくとも１つの脂質低下剤と、任意選択により（ｉｉｉ）１つ以上の薬学的に許容可能な担体と、を含み、第１の化合物がＦＸＲアゴニストである医薬組成物にも関する。

本発明はまた、（ｉ）第１の化合物と、（ｉｉ）少なくとも１つのスタチンと、任意選択により（ｉｉｉ）１つ以上の薬学的に許容可能な担体と、を含み、第１の化合物がＦＸＲアゴニストである医薬組成物にも関する。

本発明はまた、（ｉ）第１の化合物と、（ｉｉ）少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニストおよび／またはＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニストと、（ｉｉｉ）少なくとも１つの脂質低下剤と、任意選択により（ｉｖ）１つ以上の薬学的に許容可能な担体と、を含み、第１の化合物がＦＸＲアゴニストである医薬組成物にも関する。

本発明はまた、（ｉ）第１の化合物と、（ｉｉ）少なくとも１つのフィブラートと、（ｉｉｉ）少なくとも１つの脂質低下剤と、任意選択により（ｉｖ）１つ以上の薬学的に許容可能な担体と、を含み、第１の化合物がＦＸＲアゴニストである医薬組成物にも関する。

本発明はまた、（ｉ）第１の化合物と、（ｉｉ）少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニストおよび／またはＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニストと、（ｉｉｉ）少なくとも１つのスタチンと、任意選択により（ｉｖ）１つ以上の薬学的に許容可能な担体と、を含み、第１の化合物がＦＸＲアゴニストである医薬組成物にも関する。

本発明はまた、（ｉ）第１の化合物と、（ｉｉ）少なくとも１つのフィブラートと、（ｉｉｉ）少なくとも１つのスタチンと、任意選択により（ｉｖ）１つ以上の薬学的に許容可能な担体と、を含み、第１の化合物がＦＸＲアゴニストである医薬組成物にも関する。

本発明はまた、本発明の医薬組成物の治療的使用にも関する。

ある実施形態において、第１の化合物は、式Ａの化合物：

または薬学的に許容可能なその塩もしくはアミノ酸抱合体（式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒ_７およびＸは本明細書中で定められるとおりである。）である。

本発明はまた、必要とする対象に治療的有効量の本発明の医薬組成物を投与することを含む、ＦＸＲ介在性疾患もしくは状態または血中の循環脂質化合物の濃度上昇が関与する疾患もしくは状態を処置または予防する、肝臓酵素のレベルを低下させる、または線維症を阻害もしくは食い止めるための方法にも関する。

本発明はまた、ＦＸＲ介在性疾患もしくは状態または血中の循環脂質化合物の濃度上昇が関与する疾患もしくは状態を処置または予防する、肝臓酵素のレベルを低下させる、または線維症を阻害もしくは食い止めるための本発明の医薬組成物の使用にも関する。

本発明はまた、ＦＸＲ介在性疾患もしくは状態または血中の循環脂質化合物の濃度上昇が関与する疾患または状態を処置または予防する、肝臓酵素のレベルを低下させる、または線維症を阻害もしくは食い止めるための薬剤の製造における本発明の医薬組成物の使用にも関する。

本発明の組成物および方法は、血中の、コレステロールおよびトリグリセリドなど、循環脂質化合物の濃度上昇が関与する疾患または障害の処置または予防における満たされていない要求に対処する。

図１Ａは、偽ＢＤＬマウスからのシリウスレッド染色肝臓切片の代表的な顕微鏡写真である。 図１Ｂは、ＢＤＬ−ビヒクル処置マウスからのシリウスレッド染色肝臓切片の代表的な顕微鏡写真である。 図１Ｃは、ＢＤＬ−ＯＣＡ処置マウスからのシリウスレッド染色肝臓切片の代表的な顕微鏡写真である。 図１Ｄは、ＢＤＬ−アトルバスタチン処置マウスからのシリウスレッド染色肝臓切片の代表的な顕微鏡写真である。 図１Ｅは、ＢＤＬ−ＯＣＡ−アトルバスタチン処置マウスからのシリウスレッド染色肝臓切片の代表的な顕微鏡写真である。 図２は、ＯＣＡおよびアトルバスタチン単独で、および併用して処置したＢＤＬマウスにおけるシリウスレッド陽性領域（％）を示す棒グラフである。 図３Ａは、ＡＰＯＥ^＊３Ｌｅｉｄｅｎ．ＣＥＴＰマウスにおける、ＯＣＡ、低用量フェノフィブラート単独で、および併用での処置からの炎症細胞病巣の数を示す棒グラフである。 図３Ｂは、ＡＰＯＥ^＊３Ｌｅｉｄｅｎ．ＣＥＴＰマウスにおける、ＯＣＡ、高用量フェノフィブラート単独で、および併用での処置からの炎症細胞病巣の数を示す棒グラフである。 図４は、レプチン−ｏｂ／ｏｂマウスでの線維症ステージにおけるＯＣＡおよびアトルバスタチン単独で、および併用での効果を示す棒グラフである。 図５Ａは、ＯＣＡおよびアトルバスタチン単独で、および併用で処置したレプチン−ｏｂ／ｏｂマウスにおける血漿トリグリセリドのレベルを示す棒グラフである。 図５Ｂは、ＯＣＡおよびアトルバスタチン単独で、および併用で処置したレプチン−ｏｂ／ｏｂマウスにおけるベースラインからの血漿トリグリセリドレベルの変化を示す棒グラフである。 図６Ａは、ＨＦＣ持続ＡＰＯＥ^＊３Ｌｅｉｄｅｎ．ＣＥＴＰマウスに対するＨＦＣ＋ＯＣＡの基準経路のエンリッチメント解析を示す棒グラフである。 図６Ｂは、ＨＦＣ持続ＡＰＯＥ^＊３Ｌｅｉｄｅｎ．ＣＥＴＰマウスに対するＨＦＣ＋ＯＣＡ＋低用量フェノフィブラートの基準経路のエンリッチメント解析を示す棒グラフである。 図７Ａは、ＡＰＯＥ^＊３Ｌｅｉｄｅｎ．ＣＥＴＰマウスにおける、ＯＣＡ＋低用量フェノフィブラートの併用と単剤療法とを比較する、これらにより制御される新規の差別的に発現される遺伝子の数を示すベン図である。 図７Ｂは、ＡＰＯＥ^＊３Ｌｅｉｄｅｎ．ＣＥＴＰマウスにおける、単剤療法と対照した、ＯＣＡ＋低用量フェノフィブラートの併用により制御される遺伝子の経路エンリッチメントを示す棒グラフである。 図８は、ヒトでのＬＤＬコレステロールにおける、ＯＣＡおよびスタチン併用の効果を示すグラフである。

本願は、第１の化合物と、少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニストおよび／またはＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストと、任意選択により１つ以上の薬学的に許容可能な担体と、を含み、第１の化合物がＦＸＲアゴニストである医薬組成物を対象とする。

ある例において、本医薬組成物は、少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファアゴニストを含む。ある例において、本医薬組成物は、少なくとも１つのＰＰＡＲ−デルタアゴニストを含む。ある例において、本医薬組成物は、少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニストを含む。ある例において、本医薬組成物は、少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストを含む。ある例において、本医薬組成物は、少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファアゴニストおよび少なくとも１つのＰＰＡＲ−デルタアゴニストを含む。ある例において、本医薬組成物は、少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファアゴニストおよび少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニストを含む。ある例において、本医薬組成物は、少なくとも１つのＰＰＡＲ−デルタアゴニストおよび少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストを含む。ある例において、本医薬組成物は、少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、少なくとも１つのＰＰＡＲ−デルタアゴニストおよび少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニストを含む。ある例において、ＰＰＡＲ−アルファアゴニストは、フィブラート、例えば、本明細書中に記載のフィブラートなどを含む。ある例において、ＰＰＡＲ−デルタアゴニストは、｛４−［（｛４−メチル−２−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−１，３−チアゾール−５−イル｝メチル）スルファニル］−２−メチルフェノキシ｝酢酸（ＧＷ５０１５１６、ＧＷ１５１６および「エンデュラボル（Ｅｎｄｕｒａｂｏｌ）」としても知られる。）、｛２−メチル−４−［５−メチル−２−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−２Ｈ−［１，２，３］トリアゾール−４−イルメチルシルファニル（ｓｙｌｆａｎｙｌ）］−フェノキシ｝−酢酸または［４−［［［２−［３−フルオロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル］−４−メチル−５−チアゾリル］メチル］チオ］−２−メチルフェノキシ］−酢酸または薬学的に許容可能なその塩を含む。ある例において、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニストは、２−［２，６ジメチル−４−［３−［４−（メチルチオ）フェニル］−３−オキソ−１（Ｅ）−プロペニル］フェノキシル］−２−メチルプロパン酸（ＧＦＴ５０５としても知られる。）である。ある例において、ＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストは、アレグリタザル（（２Ｓ）−２−メトキシ−３−［４−［２−（５−メチル−２−フェニル−４−オキサゾリル）エトキシ］−７−ベンゾチオフェニル］プロパン酸）、ムラグリタザル（Ｎ−［（４−メトキシフェノキシ）カルボニル］−Ｎ−｛４−［２−（５−メチル−２−フェニル−１，３−オキサゾール−４−イル）エトキシ］ベンジル｝グリシン）、テサグリタザル（（２Ｓ）−２−エトキシ−３−［４−［２−（４−メチルスルホニルオキシフェニル）エトキシ］フェニル］プロパン酸）またはサログリタザル（（２Ｓ）−２−エトキシ−３−［４−（２−｛２−メチル−５−［４−（メチルスルファニル）フェニル］−１Ｈ−ピロール−１−イル｝エトキシ）フェニル］プロパン酸）または薬学的に許容可能なその塩である。ある例において、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニストは、２−［２，６ジメチル−４−［３−［４−（メチルチオ）フェニル］−３−オキソ−１（Ｅ）−プロペニル］フェノキシル］−２−メチルプロパン酸または薬学的に許容可能なその塩である。

本願はまた、第１の化合物、少なくとも１つのフィブラートおよび任意選択により１つ以上の薬学的に許容可能な担体を含み、第１の化合物がＦＸＲアゴニストである医薬組成物も対象とする。ＦＸＲアゴニストは何れかのＦＸＲアゴニストであり得る。フィブラートは何れかのフィブラートであり得る。ある例において、フィブラートは、本明細書中に記載の何れかのフィブラートから選択される。

本願は、第１の化合物と、少なくとも１つの脂質低下剤と、任意選択により１つ以上の薬学的に許容可能な担体と、を含み、第１の化合物がＦＸＲアゴニストである医薬組成物も対象とする。ＦＸＲアゴニストは何れかのＦＸＲアゴニストであり得る。脂質低下剤は何れかの脂質低下剤であり得る。ある例において、脂質低下剤は、本明細書中に記載の何れかの脂質低下剤から選択される。

本願はまた、第１の化合物と、少なくとも１つのスタチンと、任意選択により１つ以上の薬学的に許容可能な担体と、を含み、第１の化合物がＦＸＲアゴニストである医薬組成物も対象とする。ＦＸＲアゴニストは何れかのＦＸＲアゴニストであり得る。スタチンは何れかのスタチンであり得る。ある例において、スタチンは、本明細書中に記載の何れかのスタチンから選択される。

本願はまた、第１の化合物と、少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニストおよび／またはＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストと、少なくとも１つの脂質低下剤と、任意選択により１つ以上の薬学的に許容可能な担体と、を含み、第１の化合物がＦＸＲアゴニストである医薬組成物も対象とする。本願はまた、第１の化合物と、少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファアゴニストと、ＰＰＡＲ−デルタアゴニストおよび／またはＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストと、少なくとも１つのスタチンと、任意選択により１つ以上の薬学的に許容可能な担体と、を含み、第１の化合物がＦＸＲアゴニストである医薬組成物も対象とする。ある例において、ＰＰＡＲ−アルファアゴニストは、フィブラート、例えば本明細書中に記載のフィブラートである。ある例において、ＰＰＡＲ−デルタアゴニストは、｛４−［（｛４−メチル−２−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−１，３−チアゾール−５−イル｝メチル）スルファニル］−２−メチルフェノキシ｝酢酸、｛２−メチル−４−［５−メチル−２−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−２Ｈ−［１，２，３］トリアゾール−４−イルメチルシルファニル（ｓｙｌｆａｎｙｌ）］−フェノキシ｝−酢酸または［４−［［［２−［３−フルオロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル］−４−メチル−５−チアゾリル］メチル］チオ］−２−メチルフェノキシ］−酢酸または薬学的に許容可能なその塩である。ある例において、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニストは、２−［２，６ジメチル−４−［３−［４−（メチルチオ）フェニル］−３−オキソ−１（Ｅ）−プロペニル］フェノキシル］−２−メチルプロパン酸である。ある例において、ＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストは、アレグリタザル、ムラグリタザル、テサグリタザルまたはサログリタザルまたは薬学的に許容可能なその塩である。ある例において、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニストは、２−［２，６ジメチル−４−［３−［４−（メチルチオ）フェニル］−３−オキソ−１（Ｅ）−プロペニル］フェノキシル］−２−メチルプロパン酸または薬学的に許容可能なその塩である。ある例において、脂質低下剤は、本明細書中に記載の何れかの脂質低下剤から選択される。ある例において、スタチンは、本明細書中に記載の何れかのスタチンから選択される。

ある例において、本医薬組成物の第１の化合物は、式Ａの化合物：

または薬学的に許容可能なその塩またはアミノ酸抱合体（式中、
Ｒ_１は、水素または未置換Ｃ_１〜Ｃ_６アルキルであり；
Ｒ_２は、水素またはα−ヒドロキシルであり；
Ｘは、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）_ｍＳＯ_３Ｈ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）_ｎＣＯ_２ＨまたはＯＳＯ_３Ｈであり；
Ｒ_４はヒドロキシルまたは水素であり；
Ｒ_７はヒドロキシルまたは水素であり；
ｍは１、２または３であり；
ｎは１、２または３である。）
である。

さらなる例において、本医薬組成物の第１の化合物は、式ＩおよびＩＡ：

または薬学的に許容可能なその塩またはアミノ酸抱合体（式中、
Ｒ_１Ａは、水素または未置換Ｃ_１〜Ｃ_６アルキルであり；
Ｒ_２は、水素またはα−ヒドロキシルであり；
Ｒ_４はヒドロキシルまたは水素であり；
Ｒ７は、ヒドロキシルまたは水素である。）
から選択される。

ある態様において、第１の化合物は薬学的に許容可能な塩である。ある実施形態において、第１の化合物は、式ＩまたはＩＡのナトリウム塩である。別の実施形態において、第１の化合物は、式ＩまたはＩＡの化合物のアンモニウム塩である。別の実施形態において、第１の化合物は、式ＩまたはＩＡの化合物のトリエチルアンモニウム塩である。

さらに別の例において、本医薬組成物の第１の化合物は、式ＩＩおよびＩＩＡ：

または薬学的に許容可能なその塩またはアミノ酸抱合体（式中、
Ｒ_１Ａは水素または未置換Ｃ_１〜Ｃ_６アルキルであり；
Ｒ_２は、水素またはα−ヒドロキシルであり；
Ｒ_３は、ヒドロキシル、ＮＨ（ＣＨ_２）_ｍＳＯ_３ＨまたはＮＨ（ＣＨ_２）_ｎＣＯ_２Ｈであり；
Ｒ_４はヒドロキシルまたは水素であり；
Ｒ_７はヒドロキシルまたは水素であり；
ｍは１、２または３であり；
ｎは１、２または３である。）
から選択される。

ある例において、本組成物は、式Ａ、Ｉ、ＩＡ、ＩＩまたはＩＩＡの第１の化合物（式中、Ｒ_２は水素である。）を含む。

さらなる例において、本組成物は、式Ａの第１の化合物（式中、Ｒ_１は、未置換Ｃ_１〜Ｃ_６アルキルである。）を含む。ある態様において、本組成物は、式Ａの第１の化合物（式中、Ｒ_１は、未置換Ｃ_１〜Ｃ_３アルキルである。）を含む。ある態様において、本組成物は、式Ａの第１の化合物（Ｒ_１は、メチル、エチルおよびプロピルから選択される。）を含む。ある態様において、本組成物は、式Ａの第１の化合物（式中、Ｒ_１はエチルである。）を含む。

さらなる例において、本組成物は、式Ｉ、ＩＡ、ＩＩまたはＩＩＡの第１の化合物（式中、Ｒ_１Ａは未置換Ｃ_１〜Ｃ_６アルキルである。）を含む。ある態様において、本組成物は、式Ｉ、ＩＡ、ＩＩまたはＩＩＡの第１の化合物（式中、Ｒ_１Ａは未置換Ｃ_１〜Ｃ_３アルキルである。）を含む。ある態様において、本組成物は、式Ｉ、ＩＡ、ＩＩまたはＩＩＡの第１の化合物（式中、Ｒ_１Ａは、メチル、エチルおよびプロピルから選択される。）を含む。ある態様において、本組成物は、式Ｉ、ＩＡ、ＩＩまたはＩＩＡの第１の化合物（式中、Ｒ_１Ａはエチルである。）を含む。

さらなる例において、本組成物は、式Ａの第１の化合物（式中、Ｘは、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）_ｍＳＯ_３ＨおよびＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）_ｎＣＯ_２Ｈから選択される。）を含む。ある態様において、本組成物は、式Ａの第１の化合物（式中、Ｘは、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）ＳＯ_３Ｈ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）ＣＯ_２Ｈ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）_２ＳＯ_３Ｈ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）_２ＣＯ_２Ｈから選択される。）を含む。ある態様において、本組成物は、式Ａの第１の化合物（式中、ＸはＣ（Ｏ）ＯＨである。）を含む。ある態様において、本組成物は、式Ａの第１の化合物（式中、ＸはＯＳＯ_３Ｈである。）を含む。ある態様において、本組成物は、式Ａの第１の化合物（式中、第１の化合物は薬学的に許容可能な塩である。）を含む。薬学的に許容可能な塩は何らかの塩であり得る。ある態様において、本組成物は、式Ａの第１の化合物（式中、ＸはＯＳＯ_３ ⁻Ｎａ^＋である。）を含む。ある態様において、本組成物は、式Ａの第１の化合物（式中、Ｘは、ＯＳＯ_３ ⁻ＮＨＥｔ_３ ^＋である。）を含む。ある態様において、アミノ酸抱合体はグリシン抱合体である。ある態様において、アミノ酸抱合体はタウリン抱合体である。

さらに別の例において、本組成物は、式ＩＩまたはＩＩＡの第１の化合物（式中、Ｒ_３は、ＯＨ、ＮＨ（ＣＨ_２）ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ（ＣＨ_２）ＣＯ_２Ｈ、ＮＨ（ＣＨ_２）_２ＳＯ_３ＨおよびＮＨ（ＣＨ_２）_２ＣＯ_２Ｈから選択される。）を含む。ある態様において、本組成物は、式ＩＩまたはＩＩＡの第１の化合物（式中、Ｒ_３はＯＨである。）を含む。

さらなる例において、本組成物は、式Ａ、ＩまたはＩＩの第１の化合物（式中、Ｒ_４がヒドロキシルであり、Ｒ_７は水素である。）を含む。

さらなる例において、本組成物は、式Ａの第１の化合物（式中、Ｒ_１は、メチル、エチルおよびプロピルから選択され、Ｒ_４はＯＨであり、Ｒ_７はＨであり、Ｒ_２はＨである。）を含む。

さらなる例において、本組成物は、式ＩまたはＩＩの第１の化合物（式中、Ｒ_１Ａは、メチル、エチルおよびプロピルから選択され、Ｒ_４はＯＨであり、Ｒ_７はＨであり、Ｒ_２はＨである。）を含む。

さらなる例において、本組成物は、式ＩＡまたはＩＩＡの第１の化合物（式中、Ｒ_１Ａは、メチル、エチルおよびプロピルから選択され、Ｒ_２はＨである。）を含む。

さらなる例において、本組成物は、

または薬学的に許容可能なその塩またはアミノ酸抱合体から選択される第１の化合物を含む。

またさらなる例において、本組成物は、

から選択される薬学的に許容可能な塩である第１の化合物を含む。

式Ｉ、ＩＡ、ＩＩおよびＩＩＡの化合物は、式Ａの化合物のサブセットである。式Ａの化合物に対する本明細書中に記載の特性は、式Ｉ、ＩＡ、ＩＩおよびＩＩＡの化合物に等しく適用される。本願はまた、医薬組成物、パックまたはキットおよび組み合わせの治療的使用も記載する。

本発明により解決しようとする問題の１つは、血中の循環脂質化合物、例えばコレステロールおよびトリグリセリドなどの濃度上昇に関連する状態、例えばＰＢＣなどの胆汁うっ滞性肝臓状態の処置または予防のための、ならびに血中の循環脂質化合物（例えば、コレステロール、ＬＤＬおよびトリグリセリド）の減少のための、およびビリルビンおよび／または肝臓酵素、例えばアルカリホスファターゼ（ＡＬＰ、ＡＰまたはＡｌｋ Ｐｈｏｓ）、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）、ガンマ−グルタミルトランスペプチダーゼ（ＧＧＴ）、乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）および５’ヌクレオチダーゼの減少のための、併用療法の同定である。脂質レベルおよび／または肝臓酵素レベル上昇に関する状態のための薬物が利用可能であるものの、これらの薬物は、様々な理由のために多くの患者にとって適切ではないことが多い。例えば、ある種の薬物は、例えば、ウルソデオキシコール酸に対して薬物抵抗性を発症している患者に対して無効である。別の例として、多くのスタチン薬は、筋肉障害、認知低下、神経障害、膵臓および肝機能不全および性機能障害などの有害作用がある。一部の薬物は、単独投与される場合、処置に対して不適切であり得る。例えば、一部の状況において、ある脂質低下剤単独は、多くの患者において存在する重篤なレベルの高脂血症を調節することにおいては不適切である。一部の薬物は、大規模な代謝により不活性または効力がより低い代謝産物となるので、高用量の投与またはより頻繁な投与を必要とし得る。本明細書中に記載の併用療法は、上述の問題を解決し得、例えば相乗作用、薬物が有効性を失うことなく１日の投与回数を減少させること、脂質レベル上昇がＰＢＣにおける治療に対して抵抗性となっている患者において脂質（コレステロールおよびトリグリセリドの両方）を低下させること、効力向上、選択性、組織浸透、半減期および／または代謝安定性の１つ以上の長所を有し得る。

本発明の組成物、パックまたはキット、方法および使用において、第１の化合物は、遊離酸であり得るか、または薬学的に許容可能な塩アミノ酸抱合体（例えばグリシンまたはタウリン抱合体）であり得る。ある態様において、第１の化合物は、何らかのＦＸＲアゴニストである。ある態様において、第１の化合物は式Ａの化合物である。ある態様において、第１の化合物は、式ＩまたはＩＡの化合物である。ある態様において、第１の化合物は式ＩＡの化合物である。ある態様において、第１の化合物は、式ＩＩまたはＩＩＡの化合物である。ある態様において、第１の化合物は式ＩＩＡの化合物である。ある態様において、第１の化合物はオベチコール酸（化合物１）である。ある態様において、第１の化合物は化合物２である。ある態様において、第１の化合物は薬学的に許容可能な塩化合物３である。ある態様において、第１の化合物は薬学的に許容可能な塩化合物４である。

本発明の組成物、パックまたはキット方法および使用において、フィブラートは何れかのフィブラートであり得る。ある態様において、フィブラートは、フェノフィブラート、ベザフィブラート、ベクロブラート、ビニフィブラート、シプロフィブラート、クリノフィブラート、クロフィブラート、クロフィブリン酸、エトフィブラート、ゲムフィブロジル、ニコフィブラート、ピリフィブラート、ロニフィブラート、シンフィブラート、テオフィブラート、トコフィブラート、プラフィブリドおよび薬学的に許容可能なその塩およびエステルおよび欧州特許出願公開第０６０７５３６号明細書で開示されるような、フェノキシ部分がピペリジン、４−ヒドロキシピペリジン、ピペリド−３−エンまたはピペラジンの任意選択により置換される残基で置換される２−フェノキシ−２−メチルプロパン酸の誘導体からなる群から選択される。ある態様において、フィブラートは、ベザフィブラート、シプロフィブラート、クロフィブラート、フェノフィブラート、ゲムフィブロジル、ビニフィブラート、クリノフィブラート、クロフィブリン酸、ニコフィブラート、ピリフィブラート、プラフィブリド、ロニフィブラート、テオフィブラート、トコフィブラートおよび薬学的に許容可能なその塩およびエステルおよび欧州特許出願公開第０６０７５３６号明細書で開示されるような、フェノキシ部分がピペリジン、４−ヒドロキシピペリジン、ピペリド−３−エンまたはピペラジンの任意選択により置換される残基で置換される２−フェノキシ−２−メチルプロパン酸の誘導体からなる群から選択される。物質の後者の基の例は、２−［３−［１−（４−フルオロベンゾイル）ピペリジン−４−イル］フェノキシ−２−メチル−プロパン酸である。例えば、フィブラートは、ベザフィブラート、フェノフィブラート、ゲムフィブロジル、シプロフィブラート、クロフィブラート、クロフィブリン酸または薬学的に許容可能なその塩またはエステルである。例えば、フィブラートはフェノフィブラートまたは、コリン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン、カルシウムおよびトロメタミンから選択される薬学的に許容可能な塩である。例えば、フィブラートは、クロフィブラートまたは薬学的に許容可能なその塩またはエステル、例えばエトフィブラートまたはアルミニウムクロフィブラートである。例えば、フィブラートはベザフィブラートである。例えば、フィブラートは、２−フェノキシ−２−メチルプロパン酸の誘導体、例えば２−［３−［１−（４−フルオロベンゾイル）−ピペリジン−４−イル］フェノキシル−２−メチルプロパン酸などである。

ある実施形態において、第１の化合物は式Ａの化合物の遊離酸であり、少なくとも１つのフィブラートは、ベザフィブラート、フェノフィブラート、ゲムフィブロジル、シプロフィブラート、クロフィブラートおよび薬学的に許容可能なその塩またはエステルから選択される。

ある実施形態において、第１の化合物は、式Ａの化合物の薬学的に許容可能な塩であり、少なくとも１つのフィブラートは、ベザフィブラート、フェノフィブラート、ゲムフィブロジル、シプロフィブラート、クロフィブラートおよび薬学的に許容可能なその塩またはエステルから選択される。

ある実施形態において、第１の化合物は、式Ａの化合物のグリシン抱合体であり、少なくとも１つのフィブラートは、ベザフィブラート、フェノフィブラート、ゲムフィブロジル、シプロフィブラート、クロフィブラートおよび薬学的に許容可能なその塩またはエステルから選択される。

ある実施形態において、第１の化合物は、式Ａの化合物のタウリン抱合体であり、少なくとも１つのフィブラートは、ベザフィブラート、フェノフィブラート、ゲムフィブロジル、シプロフィブラート、クロフィブラートおよび薬学的に許容可能なその塩またはエステルから選択される。

ある実施形態において、第１の化合物は、式Ａの化合物または薬学的に許容可能な塩またはアミノ酸抱合体であり、少なくとも１つのフィブラートは、２−［３−［１−（４−フルオロベンゾイル）−ピペリジン−４−イル］フェノキシル−２−メチルプロパン酸である。

ある実施形態において、第１の化合物は、式Ａの化合物または薬学的に許容可能な塩またはアミノ酸抱合体であり、少なくとも１つのＰＰＡＲ−デルタアゴニストは、｛４−［（｛４−メチル−２−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−１，３−チアゾール−５−イル｝メチル）スルファニル］−２−メチルフェノキシ｝酢酸、｛２−メチル−４−［５−メチル−２−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−２Ｈ−［１，２，３］トリアゾール−４−イルメチルシルファニル］−フェノキシ｝−酢酸または［４−［［［２−［３−フルオロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル］−４−メチル−５−チアゾリル］メチル］チオ］−２−メチルフェノキシ］−酢酸または薬学的に許容可能なその塩である。

ある実施形態において、第１の化合物は、式Ａの化合物または薬学的に許容可能な塩またはアミノ酸抱合体であり、少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニストは、２−［２，６ジメチル−４−［３−［４−（メチルチオ）フェニル］−３−オキソ−１（Ｅ）−プロペニル］フェノキシル］−２−メチルプロパン酸である。ある実施形態において、第１の化合物は、式Ａの化合物または薬学的に許容可能な塩またはアミノ酸抱合体であり、少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストは、アレグリタザル、ムラグリタザル、テサグリタザルまたはサログリタザルまたは薬学的に許容可能なその塩である。ある例において、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニストは、２−［２，６ジメチル−４−［３−［４−（メチルチオ）フェニル］−３−オキソ−１（Ｅ）−プロペニル］フェノキシル］−２−メチルプロパン酸または薬学的に許容可能なその塩である。

本発明の本組成物、パックまたはキット方法および使用において、スタチンは何れかのスタチンであり得る。ある態様において、スタチンは、シンバスタチン、フルバスタチン、プラバスタチン、リバスタチン、メバスタチン、アトルバスタチン、セリバスタチン、ロバスタチン、ピタバスタチンバスタチン、フルインドスタチン、ベロスタチン、ダルバスタチン、ロスバスタチン、ジヒドロコンパクチンおよびコンパクチンからなる群から選択される。

ある実施形態において、第１の化合物は、式Ａの化合物の遊離酸であり、少なくとも１つのスタチンは、シンバスタチン、フルバスタチン、プラバスタチン、リバスタチン、メバスタチン、アトルバスタチン、セリバスタチン、ロバスタチン、ピタバスタチン、フルインドスタチン、ベロスタチン、ダルバスタチン、ロスバスタチン、ジヒドロコンパクチンおよびコンパクチンから選択される。

ある実施形態において、第１の化合物は、式Ａの化合物の薬学的に許容可能な塩であり、少なくとも１つのスタチンは、シンバスタチン、フルバスタチン、プラバスタチン、リバスタチン、メバスタチン、アトルバスタチン、セリバスタチン、ロバスタチン、ピタバスタチンバスタチン、フルインドスタチン、ベロスタチン、ダルバスタチン、ロスバスタチン、ジヒドロコンパクチンおよびコンパクチンから選択される。

ある実施形態において、第１の化合物は式Ａの化合物のグリシン抱合体であり、少なくとも１つのスタチンは、シンバスタチン、フルバスタチン、プラバスタチン、リバスタチン、メバスタチン、アトルバスタチン、セリバスタチン、ロバスタチン、ピタバスタチンバスタチン、フルインドスタチン、ベロスタチン、ダルバスタチン、ロスバスタチン、ジヒドロコンパクチンおよびコンパクチンから選択される。

ある実施形態において、第１の化合物は式Ａの化合物のタウリン抱合体であり、少なくとも１つのスタチンは、シンバスタチン、フルバスタチン、プラバスタチン、リバスタチン、メバスタチン、アトルバスタチン、セリバスタチン、ロバスタチン、ピタバスタチンバスタチン、フルインドスタチン、ベロスタチン、ダルバスタチン、ロスバスタチン、ジヒドロコンパクチンおよびコンパクチンから選択される。

本発明はまた、１つ以上の原子が天然で最も一般的に見いだされる原子量または質量数とは異なる原子量または質量数を有する原子によって置換されるという事実を別にすれば本発明の第１の化合物（例えば式Ａ、Ｉ、ＩＡ、ＩＩまたはＩＩＡの化合物）と同一である構造を有する、同位体標識される第１の化合物または薬学的に許容可能なその塩もしくはアミノ酸抱合体も包含する。第１の化合物または薬学的に許容可能なその塩またはアミノ酸抱合体に組み込まれ得る同位体の例としては、水素、炭素、窒素、フッ素の同位体、例えば^３Ｈ、^１１Ｃ、^１４Ｃおよび^１８Ｆが挙げられる。

上述の同位体および／または他の原子の他の同位体を含有する第１の化合物または薬学的に許容可能なその塩またはアミノ酸抱合体は、本発明の範囲内である。同位体標識される第１の化合物または薬学的に許容可能なその塩またはアミノ酸抱合体、例えば、^３Ｈおよび／または^１４Ｃなどの放射性同位体が組み込まれる第１の化合物は、薬物および／または基質組織分布アッセイにおいて有用である。トリチウム標識、すなわち^３Ｈおよび炭素−１４、すなわち^１４Ｃ同位体は、調製および検出性を容易にするために使用される。さらに重水素、すなわち^２Ｈなどのより重い同位体での置換により、代謝安定性がより向上する、例えばインビボ半減期の延長または投与要件の軽減の結果、ある種の治療面での長所が得られ得、ゆえにある状況において使用され得る。同位体標識される第１の化合物または薬学的に許容可能なその塩またはアミノ酸抱合体は一般に、非同位体標識試薬の代わりに容易に利用可能な同位体標識試薬に置き換えることによって、本発明のスキームおよび／または実施例で開示される手順を遂行することにより調製され得る。ある実施形態において、オベチコール酸または薬学的に許容可能なその塩またはアミノ酸抱合体は同位体標識されていない。

本発明はまた、必要とする対象に治療的有効量の本発明の医薬組成物を投与することを含む、疾患または状態を処置または予防するための方法も提供する。

ある実施形態において、疾患または状態は、ＦＸＲ介在性疾患または状態である。ＦＸＲ介在性疾患または状態の例としては、肝疾患（胆汁うっ滞性および非胆汁うっ滞性肝疾患を含む。）、例えば原発性胆汁性肝硬変（ＰＢＣ）、原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）、胆道閉鎖、門脈圧亢進症、胆汁酸下痢、慢性肝疾患、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、Ｃ型肝炎感染、アルコール性肝疾患、進行性線維症による肝損傷および肝臓線維症など、が挙げられるが限定されない。ＦＸＲ介在性疾患の例としてはまた、高脂血症、高ＬＤＬ−コレステロール、高ＨＤＬ−コレステロール、高トリグリセリドおよび循環器疾患も挙げられる。

ＮＡＦＬＤは、肝臓における脂肪の蓄積（脂肪浸潤と呼ばれる。）を特徴とする医学的状態である。ＮＡＦＬＤは、慢性肝疾患の最も一般的な原因の１つであり、肝細胞における脂質沈着と関連する一連の状態を包含する。これは、脂肪肝（単純脂肪肝）から非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、進行型の線維症および肝硬変にわたる。この疾患は殆ど無症状であり、偶然的な肝臓酵素レベル上昇を通じて発見されることが多い。ＮＡＦＬＤは肥満およびインスリン抵抗性と強く関連し、現在、メタボリックシンドロームの肝臓構成要素と考える者が多い。

非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）は、肝臓において炎症および脂肪蓄積および線維性（瘢痕）組織を生じさせる状態である。血中の肝臓酵素レベルは、非アルコール性脂肪肝（ＮＡＦＬ）で見られる軽度の上昇よりも高く上昇し得る。アルコール中毒の者において同様の状態が起こり得るものの、ＮＡＳＨは、アルコールをあまり飲まないかまたは全く飲まない者で起こる。ＮＡＳＨに罹患しているのは、米国人の２〜５パーセントであり、次の状態：肥満、糖尿病、高脂血症、インスリン抵抗性、ある一定の薬物療法の使用および毒素への曝露の一層多くのうち１つ（ｏｎｅ ｏｆ ｍｏｒｅ）がある者で最も頻繁に見られる。ＮＡＳＨは、世界的にみて、慢性肝疾患の一般的な原因となりつつあり、肝硬変がなくても、肝臓関連死亡率上昇および肝細胞癌と関連付けられている。ＮＡＳＨは罹患者の１５〜２０％で肝硬変に進行し、現在、米国の肝臓移植の主要な適応症の１つである。現在、ＮＡＳＨに対しては承認されている治療はない。

ある実施形態において、本疾患または状態は高脂血症である。ある実施形態において、本疾患または状態は、胆汁うっ滞性肝疾患である。ある実施形態において、本疾患または状態は、ＰＢＣである。別の実施形態において、本疾患または状態は、循環器疾患である。別の実施形態において、循環器疾患は、アテローム性動脈硬化症、高コレステロール血症または高トリグリセリド血症である。

本発明はまた、ＮＡＦＬＤまたはＮＡＳＨを処置するかまたは予防するための方法も提供する。ある実施形態において、本発明は、高脂血症を付随するＮＡＦＬＤまたはＮＡＳＨを処置するかまたは予防するための方法を提供する。ある実施形態において、本発明は、ＮＡＳＨを処置するかまたは予防するための方法を提供する。ある実施形態において、本発明は、高脂血症を付随するＮＡＳＨを処置するかまたは予防するための方法を提供する。

本発明はまた、必要とする対象に治療的有効量の本発明の医薬組成物を投与することを含む、線維症を阻害するかまたは食い止めるための方法も提供する。ある実施形態において、対象は胆汁うっ滞性状態になっていない。別の実施形態において、対象は胆汁うっ滞性状態なっている。

ある実施形態において、対象は、原発性肝癌および胆道癌（肝細胞癌を含む。）、結直腸癌、転移性癌、敗血症、長期の完全経腸栄養法、嚢胞性線維症および肉芽腫性肝疾患からなる群から選択される疾患または状態と関連がある胆汁うっ滞性状態に罹患していない。実施形態において、阻害または食い止めようとする線維症は、ＦＸＲが発現される器官で起こる。

ある実施形態において、胆汁うっ滞性状態は、アルカリホスファターゼ、γ−グルタミルトランスペプチダーゼ（ＧＧＴ）および／または５’ヌクレオチダーゼの血清レベルが異常に上昇しているものとして定義される。別の実施形態において、胆汁うっ滞性状態は、少なくとも１つの臨床症状を伴い存在するものとしてさらに定義される。ある実施形態において、症状はかゆみ（そう痒）である。別の実施形態において、胆汁うっ滞性状態は、原発性胆汁性肝硬変（ＰＢＣ）、原発性硬化性胆管炎（ＰＢＳ）、薬物誘発性胆汁うっ滞、遺伝性胆汁うっ滞、胆道閉鎖および妊娠の肝内胆汁うっ滞からなる群から選択される。

ある実施形態において、線維症は、肝臓線維症、腎臓線維症および腸線維症からなる群から選択される。

ある実施形態において、対象は、Ｂ型肝炎；Ｃ型肝炎；寄生虫肝疾患；移植後細菌、ウイルスおよび真菌感染；アルコール性肝疾患（ＡＬＤ）；非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）；非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）；メトトレキサート、イソニアジド、オキシフェニスタチン、メチルドパ、クロルプロマジン、トルブタミドまたはアミオダロンにより誘発される肝疾患；自己免疫性肝炎；サルコイドーシス；ウィルソン病；ヘモクロマトーシス；ゴーシェ病；ＩＩＩ、ＩＶ、ＶＩ、ＩＸおよびＸ型グリコーゲン貯蔵疾患；α１−アンチトリプシン欠乏；ツェルウェーガー症候群；チロシン血症；フルクトース血症；ガラクトース血症；バッド・キアリ症候群に関連する血管異常、静脈閉塞の疾患または門脈血栓症；および先天性肝臓線維症からなる群から選択される疾患が関連する肝臓線維症を有する。

別の実施形態において、対象は、クローン病、潰瘍性大腸炎、放射線照射後の大腸炎および顕微鏡的大腸炎からなる群から選択される疾患に関連する腸線維症を有する。

別の実施形態において、対象は、糖尿病性ニューロパチー、高血圧性腎硬化症、慢性糸球体腎炎、慢性移植糸球体症、慢性間質性腎炎および多発性嚢胞腎からなる群から選択される疾患に関連する腎臓線維症を有する。

本発明はまた、脂質レベル上昇に関連する状態の全ての形態を処置または予防するための方法も提供する。ある実施形態において、この状態は、高脂血症であり、これは、抵抗性原発性胆汁性肝硬変；関連する肝機能検査上昇および高脂血症がある原発性胆汁性肝硬変、原発性硬化性胆管炎、非アルコール誘発性脂肪性肝炎；およびＢ、Ｃ型またはアルコール性肝炎が関連する慢性肝疾患から選択される状態と関連がある。別の実施形態において、本発明は、遺伝的要素があるかまたはない原発性高脂血症である高脂血症または、冠動脈疾患、脳血管動脈性疾患、末梢性血管疾患、大動脈瘤または頸動脈アテローム性動脈硬化症が関連する高脂血症を処置または予防するための方法を提供する。

ある態様において、本発明は、同様の生化学的異常に対して原発性硬化性胆管炎ならびにＢ、Ｃ型肝炎によりまたはアルコールにより引き起こされる慢性肝炎を処置または予防するための方法を提供する。ある態様において、本発明は、高脂血症が関連する他の動脈性障害を処置または予防するための方法を提供する。ある態様において、本発明は、高トリグリセリド血症を処置または予防するための方法を提供する。

本発明はまた、必要とする対照に治療的有効量の本発明の医薬組成物を投与することを含む、血中などの脂質レベル（すなわち脂質の量）を低下させるための方法も提供する。ある実施形態において、本発明の方法は、対照者（例えば本発明の組成物を投与されない対象）と比較した場合、脂質レベルを少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％または９０％低下させる。ある実施形態において、対象は、健常対象（例えば、本明細書中に記載のものなどの疾患または状態がない個体）と比較した場合、脂質レベルが上昇している。ある実施形態において、本願の方法は、脂質のレベルを正常レベル（例えば、本明細書中に記載のものなどの疾患または状態がない個体における脂質レベルと同等）に低下させる。

ある実施形態において、脂質はコレステロールである。ある実施形態において、本発明の方法は、対照者（例えば本発明の組成物を投与されない対象）と比較した場合、コレステロールレベルを少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％または９０％）低下させる。ある実施形態において、健常対象と比較した場合（例えば本明細書中に記載のものなどの疾患または状態がない個体）、対象はコレステロールレベルが上昇している。ある実施形態において、本発明の方法は、４００ｍｇ／Ｌ、３５０ｍｇ／Ｌ、３００ｍｇ／Ｌ、２５０ｍｇ／Ｌ、２４０ｍｇ／Ｌ、２３０ｍｇ／Ｌ、２２０ｍｇ／Ｌ、２１０ｍｇ／Ｌ、２００ｍｇ／Ｌ、１９０ｍｇ／Ｌ、１８０ｍｇ／Ｌ、１７０ｍｇ／Ｌ、１６０ｍｇ／Ｌまたは１５０ｍｇ／Ｌを下回るまでコレステロールレベルを低下させる。ある実施形態において、本発明の方法は、２００ｍｇ／Ｌ、１９０ｍｇ／Ｌ、１８０ｍｇ／Ｌ、１７０ｍｇ／Ｌ、１６０ｍｇ／Ｌまたは１５０ｍｇ／Ｌを下回るまでコレステロールレベルを低下させる。

ある実施形態において、コレステロールはＬＤＬである。ある実施形態において、本発明の方法は、対照者（例えば本発明の組成物を投与されない対象）と比較した場合、ＬＤＬレベルを少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％または９０％低下させる。ある実施形態において、健常対象（例えば、本明細書中に記載のものなどの疾患または状態がない個体）と比較した場合、対象はＬＤＬレベルが上昇している。ある実施形態において、本発明の方法は、３００ｍｇ／Ｌ、２００ｍｇ／Ｌ、１９０ｍｇ／Ｌ、１８０ｍｇ／Ｌ、１７０ｍｇ／Ｌ、１６０ｍｇ／Ｌ、１５０ｍｇ／Ｌ、１４０ｍｇ／Ｌ、１３０ｍｇ／Ｌ、１２０ｍｇ／Ｌ、１１０ｍｇ／Ｌ、１００ｍｇ／Ｌ、９０ｍｇ／Ｌ、８０ｍｇ／Ｌ、７０ｍｇ／Ｌ、６０ｍｇ／Ｌまたは５０ｍｇ／Ｌを下回るまでＬＤＬレベルを低下させる。ある実施形態において、本発明の方法は、１６０ｍｇ／Ｌ、１５０ｍｇ／Ｌ、１４０ｍｇ／Ｌ、１３０ｍｇ／Ｌ、１２０ｍｇ／Ｌ、１１０ｍｇ／Ｌ、１００ｍｇ／Ｌ、９０ｍｇ／Ｌ、８０ｍｇ／Ｌ、７０ｍｇ／Ｌ、６０ｍｇ／Ｌまたは５０ｍｇ／Ｌを下回るまでＬＤＬレベルを低下させる。ある実施形態において、本発明の方法は、１３０ｍｇ／Ｌ、１２０ｍｇ／Ｌ、１１０ｍｇ／Ｌ、１００ｍｇ／Ｌ、９０ｍｇ／Ｌ、８０ｍｇ／Ｌ、７０ｍｇ／Ｌ、６０ｍｇ／Ｌまたは５０ｍｇ／Ｌを下回るまでＬＤＬレベルを低下させる。ある実施形態において、本発明の方法は、１００ｍｇ／Ｌ、９０ｍｇ／Ｌ、８０ｍｇ／Ｌ、７０ｍｇ／Ｌ、６０ｍｇ／Ｌまたは５０ｍｇ／Ｌを下回るまでＬＤＬレベルを低下させる。ある実施形態において、本発明の方法は、７０ｍｇ／Ｌ、６０ｍｇ／Ｌまたは５０ｍｇ／Ｌを下回るまでＬＤＬレベルを低下させる。

ある実施形態において、脂質はトリグリセリドである。ある実施形態において、本発明の方法は、対照者（例えば本発明の組成物を投与されない対象）と比較した場合、トリグリセリドレベルを少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％または９０％低下させる。ある実施形態において、健常対象（例えば、本明細書中に記載のものなどの疾患または状態がない個体）と比較した場合、対象はトリグリセリドレベルが上昇している。ある実施形態において、本発明の方法は、８００ｍｇ／Ｌ、７００ｍｇ／Ｌ、６００ｍｇ／Ｌ、５００ｍｇ／Ｌ、４００ｍｇ／Ｌ、３００ｍｇ／Ｌ、２００ｍｇ／Ｌ、１９０ｍｇ／Ｌ、１８０ｍｇ／Ｌ、１７０ｍｇ／Ｌ、１６０ｍｇ／Ｌ、１５０ｍｇ／Ｌ、１４０ｍｇ／Ｌ、１３０ｍｇ／Ｌ、１２０ｍｇ／Ｌ、１１０ｍｇ／Ｌまたは１００ｍｇ／Ｌを下回るまでトリグリセリドレベルを低下させる。ある実施形態において、本発明の方法は、２００ｍｇ／Ｌ、１９０ｍｇ／Ｌ、１８０ｍｇ／Ｌ、１７０ｍｇ／Ｌ、１６０ｍｇ／Ｌ、１５０ｍｇ／Ｌ、１４０ｍｇ／Ｌ、１３０ｍｇ／Ｌ、１２０ｍｇ／Ｌ、１１０ｍｇ／Ｌまたは１００ｍｇ／Ｌを下回るまでトリグリセリドレベルを低下させる。ある実施形態において、本発明の方法は、１５０ｍｇ／Ｌ、１４０ｍｇ／Ｌ、１３０ｍｇ／Ｌ、１２０ｍｇ／Ｌ、１１０ｍｇ／Ｌまたは１００ｍｇ／Ｌを下回るまでトリグリセリドレベルを低下させる。

本発明はまた、必要とする対照に治療的有効量の本発明の医薬組成物を投与することを含む、ビリルビンおよび／または１つ以上の肝臓酵素の量を減少させるための方法も提供する。

ある実施形態において、本願の方法は、対照者（例えば本発明の組成物を投与されない対象）と比較した場合、ビリルビンの量を少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％または９０％減少させる。ある実施形態において、健常対象（例えば、本明細書中に記載のものなどの疾患または状態がない個体）と比較した場合、対象のビリルビンレベルは上昇している。ある実施形態において、本願の方法は、ビリルビンレベルを正常レベル（例えば本明細書中に記載のものなどの疾患または状態がない個体のビリルビンレベルと同等）に低下させる。さらなる実施形態において、本願の方法は、１０ｍｇ／Ｌ、９ｍｇ／Ｌ、８ｍｇ／Ｌ、７ｍｇ／Ｌ、６ｍｇ／Ｌ、５ｍｇ／Ｌ、４ｍｇ／Ｌ、３ｍｇ／Ｌ、２ｍｇ／Ｌ、１．５ｍｇ／Ｌ、１．２ｍｇ／Ｌまたは１ｍｇ／Ｌを下回るまでビリルビンレベルを低下させる。さらなる実施形態において、本願の方法は、２ｍｇ／Ｌ、１．５ｍｇ／Ｌ、１．２ｍｇ／Ｌまたは１ｍｇ／Ｌを下回るまでビリルビンレベルを低下させる。

ある実施形態において、肝臓酵素は、アルカリホスファターゼ（ＡＬＰ、ＡＰまたはＡｌｋ Ｐｈｏｓ）、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）、ガンマ−グルタミルトランスペプチダーゼ（ＧＧＴ）、乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）および５’ヌクレオチダーゼからなる群から選択される。ある実施形態において、本願の方法は、対照者（例えば本発明の組成物を投与されない対象）と比較した場合、１つ以上の肝臓酵素量を少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％または９０％低下させる。ある実施形態において、対象は、健常対象（例えば、本明細書中に記載のものなどの疾患または状態がない個体）と比較した場合、１つ以上の肝臓酵素のレベルが上昇している。ある実施形態において、本願の方法は、１つ以上の肝臓酵素（例えば、ＡＬＰ、ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＧＧＴ、ＬＤＨおよび５’ヌクレオチダーゼ）のレベルを正常レベル（例えば本明細書中に記載のものなどの疾患または状態がない個体における肝臓酵素レベルと同等）に低下させる。

さらなる実施形態において、本願の方法は、５００ＩＵ／Ｌ（国際単位／リットル）、４００ＩＵ／Ｌ、３００ＩＵ／Ｌ、２００ＩＵ／Ｌ、１８０ＩＵ／Ｌ、１６０ＩＵ／Ｌまたは１５０ＩＵ／Ｌを下回るまでＡＬＰのレベルを低下させる。さらなる実施形態において、本願の方法は、ＡＬＰのレベルを約４０ＩＵ／Ｌ〜約１５０ＩＵ／Ｌに低下させる。

さらなる実施形態において、本願の方法は、２００ＩＵ／Ｌ（国際単位／リットル）、１５０ＩＵ／Ｌ、１００ＩＵ／Ｌ、８０ＩＵ／Ｌ、６０ＩＵ／Ｌまたは５０ＩＵ／Ｌを下回るまでＡＬＴのレベルを低下させる。さらなる実施形態において、本願の方法は、ＡＬＴのレベルを約５ＩＵ／Ｌ〜約５０ＩＵ／Ｌに低下させる。

さらなる実施形態において、本願の方法は、２００ＩＵ／Ｌ（国際単位／リットル）、１５０ＩＵ／Ｌ、１００ＩＵ／Ｌ、８０ＩＵ／Ｌ、６０ＩＵ／Ｌ、５０ＩＵ／Ｌまたは４０ＩＵ／Ｌを下回るまでＡＳＴのレベルを低下させる。さらなる実施形態において、本願の方法は、ＡＳＴのレベルを約１０ＩＵ／Ｌ〜約５０ＩＵ／Ｌに低下させる。

さらなる実施形態において、本願の方法は、２００ＩＵ／Ｌ（国際単位／リットル）、１５０ＩＵ／Ｌ、１００ＩＵ／Ｌ、９０ＩＵ／Ｌ、８０ＩＵ／Ｌ、７０ＩＵ／Ｌまたは６０ＩＵ／Ｌを下回るまでＧＧＴのレベルを低下させる。さらなる実施形態において、本願の方法は、ＧＧＴのレベルを約１５ＩＵ／Ｌ〜約５０ＩＵ／Ｌまたは約５ＩＵ／Ｌ〜約３０ＩＵ／Ｌに低下させる。

さらなる実施形態において、本願の方法は、５００ＩＵ／Ｌ（国際単位／リットル）、４００ＩＵ／Ｌ、３００ＩＵ／Ｌ、２００ＩＵ／Ｌ、１８０ＩＵ／Ｌ、１６０ＩＵ／Ｌ、１５０ＩＵ／Ｌ、１４０ＩＵ／Ｌまたは１３０ＩＵ／Ｌを下回るまでＬＤＨのレベルを低下させる。さらなる実施形態において、本願の方法は、約１２０ＩＵ／Ｌ〜約２２０ＩＵ／ＬにＬＤＨのレベルを低下させる。

さらなる実施形態において、本願の方法は、５０ＩＵ／Ｌ（国際単位／リットル）、４０ＩＵ／Ｌ、３０ＩＵ／Ｌ、２０ＩＵ／Ｌ、１８ＩＵ／Ｌ、１７ＩＵ／Ｌ、１６ＩＵ／Ｌ、１５ＩＵ／Ｌ、１４ＩＵ／Ｌ、１３ＩＵ／Ｌ、１２ＩＵ／Ｌ、１１ＩＵ／Ｌ、１０ＩＵ／Ｌ、９ＩＵ／Ｌ、８ＩＵ／Ｌ、７ＩＵ／Ｌ、６ＩＵ／Ｌまたは５ＩＵ／Ｌを下回るまで５’ヌクレオチダーゼのレベルを低下させる。さらなる実施形態において、本願の方法は、５’ヌクレオチダーゼのレベルを約２ＩＵ／Ｌ〜約１５ＩＵ／Ｌに低下させる。

ある実施形態において、本発明の方法は、少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニストおよび／またはＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニストおよび任意選択により１つ以上の薬学的に許容可能な担体と組み合わせて、必要とする対象に有効量のＦＸＲアゴニストである第１の化合物を投与することを含む。さらなる実施形態において、本方法は、少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニストおよび／またはＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニストと組み合わせて、必要とする対象に有効量の第１の化合物を投与することを含み、ここで第１の化合物は、本明細書中に記載の化合物（例えば式Ａ、Ｉ、ＩＡ、ＩＩもしくはＩＩＡの化合物または化合物１、２、３もしくは４）または薬学的に許容可能なその塩またはアミノ酸抱合体である。

ある実施形態において、本発明の方法は、少なくとも１つのフィブラートおよび任意選択により１つ以上の薬学的に許容可能な担体と組み合わせて、必要とする対象に有効量のＦＸＲアゴニストである第１の化合物を投与することを含む。さらなる実施形態において、本方法は、少なくとも１つのフィブラートと組み合わせて、必要とする対象に有効量の第１の化合物を投与することを含み、ここで第１の化合物は、本明細書中に記載の化合物（例えば式Ａ、Ｉ、ＩＡ、ＩＩもしくはＩＩＡの化合物または化合物１、２、３もしくは４）または薬学的に許容可能なその塩またはアミノ酸抱合体である。

ある実施形態において、本発明の方法は、少なくとも１つのスタチンおよび任意選択により１つ以上の薬学的に許容可能な担体と組み合わせて、必要とする対象に有効量のＦＸＲアゴニストである第１の化合物を投与することを含む。さらなる実施形態において、本方法は、少なくとも１つのスタチンと組み合わせて、必要とする対象に有効量の第１の化合物を投与することを含み、ここで第１の化合物は、本明細書中に記載の化合物（例えば式Ａ、Ｉ、ＩＡ、ＩＩもしくはＩＩＡの化合物または化合物１、２、３もしくは４）または薬学的に許容可能なその塩またはアミノ酸抱合体である。

ある実施形態において、本発明の方法は、少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニストおよび／またはＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニスト、少なくとも１つのスタチンおよび任意選択により１つ以上の薬学的に許容可能な担体と組み合わせて、必要とする対象に有効量のＦＸＲアゴニストである第１の化合物を投与することを含む。さらなる実施形態において、本方法は、少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニストおよび／またはＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニスト、少なくとも１つのスタチンと組み合わせて、必要とする対象に有効量の第１の化合物を投与することを含み、ここで第１の化合物は、本明細書中に記載の化合物（例えば式Ａ、Ｉ、ＩＡ、ＩＩもしくはＩＩＡの化合物または化合物１、２、３もしくは４）または薬学的に許容可能なその塩またはアミノ酸抱合体である。

ある実施形態において、本発明の方法は、少なくとも１つのフィブラート、少なくとも１つのスタチンおよび任意選択により１つ以上の薬学的に許容可能な担体と組み合わせて、必要とする対象に有効量のＦＸＲアゴニストである第１の化合物を投与することを含む。さらなる実施形態において、本方法は、少なくとも１つのフィブラート、少なくとも１つのスタチンと組み合わせて、必要とする対象に有効量の第１の化合物を投与することを含み、第１の化合物は、本明細書中に記載の化合物（例えば式Ａ、Ｉ、ＩＡ、ＩＩもしくはＩＩＡの化合物または化合物１、２、３もしくは４）または薬学的に許容可能なその塩またはアミノ酸抱合体である。

ある実施形態において、本対象は哺乳動物である。ある実施形態において、哺乳動物はヒトである。

ある実施形態において、第１の化合物およびＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニスト、フィブラートまたはスタチンは、２方向の組み合わせで、すなわち、第１の化合物およびＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニスト、フィブラートまたはスタチン以外の治療剤を全く使用せずに投与される。さらなる実施形態において、第１の化合物およびフィブラートは、２方向の組み合わせで、すなわち、第１の化合物およびフィブラート以外の治療剤を全く使用せずに投与される。別の実施形態において、第１の化合物およびスタチンは、２方向の組み合わせで、すなわち、第１の化合物およびスタチン以外の治療剤を全く使用せずに投与される。

別の実施形態において、第１の化合物およびＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラートは、スタチンとの３方向の組み合わせで投与される。さらなる実施形態において、第１の化合物およびフィブラートは、スタチンと３方向の組み合わせで投与される。

ＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラート、および／またはスタチンと一緒に、第１の化合物は、重篤な複合型の高脂血症状態および個々の治療に対する抵抗性および１つ以上の肝臓酵素のレベルを相乗的に低下させるなど、強い相乗効果を達成し得る。ゆえに、調節が非常に困難な高脂血症に対して、第１の化合物、ＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラート、および／またはスタチンの併用は有利である。コンプライアンス、ゆえに有効性を向上させるために設計された薬学的に許容可能な担体とともに単一医薬組成物中（例えば単一カプセル形態中など）で第１の化合物、フィブラートおよび／またはスタチンのこのような組み合わせを提供することは、特に有利であり得る。したがって、本発明は、１つ以上の薬学的に許容可能な担体、希釈剤、アジュバントまたは賦形剤と一緒に、有効量の第１の化合物と、有効量の少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニストまたはＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストと、有効量の少なくとも１つのスタチンと、を含む医薬組成物をさらに提供する。ある実施形態において、本発明は、１つ以上の薬学的に許容可能な担体、希釈剤、アジュバントまたは賦形剤と一緒に有効量の第１の化合物と、有効量の少なくとも１つのフィブラートと、有効量の少なくとも１つのスタチンと、を含む医薬組成物をさらに提供する。

ある実施形態において、第１の化合物およびＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラートは同時に投与される。例えば、第１の化合物およびＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラートは、薬学的に許容可能な担体と一緒に単一医薬組成物中で投与される。別の実施形態において、第１の化合物およびＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラートは連続的に投与される。例えば、第１の化合物は、ＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラートの前に、またはこれらに続いて投与される。

ある実施形態において、第１の化合物およびスタチンは同時に投与される。例えば、第１の化合物およびスタチンは、単一の医薬組成物中で薬学的に許容可能な担体と一緒に投与される。別の実施形態において、第１の化合物およびスタチンは連続的に投与される。例えば、第１の化合物はスタチンの前またはその後に投与される。

ある実施形態において、第１の化合物を第１の時間にわたり第１の用量で投与し、それに続いて第２の時間にわたり第２の用量で第１の化合物を投与する。ある実施形態において、第１の化合物または薬学的に許容可能なその塩またはアミノ酸抱合体を、０．１〜１５００ｍｇ、０．２〜１２００ｍｇ、０．３〜１０００ｍｇ、０．４〜８００ｍｇ、０．５〜６００ｍｇ、０．６〜５００ｍｇ、０．７〜４００ｍｇ、０．８〜３００ｍｇ、１〜２００ｍｇ、１〜１００ｍｇ、１〜５０ｍｇ、１〜３０ｍｇ、４〜２６ｍｇまたは５〜２５ｍｇの１日総量で第１の時間にわたり投与し、それに続いて、０．１〜１５００ｍｇ、０．２〜１２００ｍｇ、０．３〜１０００ｍｇ、０．４〜８００ｍｇ、０．５〜６００ｍｇ、０．６〜５００ｍｇ、０．７〜４００ｍｇ、０．８〜３００ｍｇ、１〜２００ｍｇ、１〜１００ｍｇ、１〜５０ｍｇ、１〜３０ｍｇ、４〜２６ｍｇまたは５〜２５ｍｇの１日総量で第１の化合物を投与する。ある実施形態において、総量を１日１回経口投与する。ある実施形態において、第１の用量は第２の用量とは異なる。さらなる実施形態において、第１の用量は第２の用量より小さい。別の実施形態において、第１の用量は第２の用量より大きい。ある実施形態において、第１の用量は約５ｍｇ（例えば４．８ｍｇ〜５．２ｍｇ）であり、第２の用量は約１０ｍｇ（例えば９．８ｍｇ〜１０．２ｍｇ）である。ある実施形態において、第１の時間は約６カ月である。ある実施形態において、第２の時間は約６カ月である。

ある実施形態において、本医薬組成物は、経口、非経口または局所投与される。別の実施形態において、本医薬組成物は経口投与される。

本発明による組成物は、一般的には、錠剤またはカプセルなどの単一の単位剤形中または同時にまたは１日の間に周期的に投与しようとする２つ以上の単位剤型中で、必要とする対象に投与しようとするそれぞれの所望の１日用量を可能にするために、十分な第１の化合物または薬学的に許容可能なその塩またはアミノ酸抱合体、ＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラートおよび／またはスタチンを含有する。

本発明はまた、ＵＤＣＡと組み合わせて第１の化合物およびＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラートが投与される医薬組成物を提供する。ある態様において、ＵＤＣＡは、３方向の組み合わせで投与する。別の態様において、第１の化合物およびＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラートの２方向の組み合わせは、ＵＤＣＡ単独に対して治療反応が不十分である対象に、ＵＤＣＡの代わりに、疾患または状態の処置または予防のために投与される。

本発明の方法において、活性物質は、１日１回の服用で、または１日あたり２、３、４回もしくはそれ以上の同一であるかまたは異なる分割用量で投与し得、それらを、同時に、または１日の間の異なる時間に投与し得る。通常、同時に、より一般的には単一の複合剤形で活性物質を投与する。

ある態様において、第１の化合物、ＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラートおよび／またはスタチンは、それらが個々の単剤療法で投与される投与量と実質的に同じ投与量で投与される。ある態様において、第１の化合物は、その単剤療法投与量未満（例えば、９０％未満、８０％未満、７０％未満、６０％未満、５０％未満、４０％未満、３０％未満、２０％未満または１０％未満）である投与量で投与される。ある態様において、ＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラートは、その単剤療法投与量未満（例えば、９０％未満、８０％未満、７０％未満、６０％未満、５０％未満、４０％未満、３０％未満、２０％未満または１０％未満）である投与量で投与される。ある態様において、第１の化合物およびＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラートの両方が、その個々の単剤療法投与量未満（例えば、９０％未満、８０％未満、７０％未満、６０％未満、５０％未満、４０％未満、３０％未満、２０％未満または１０％未満）である投与量で投与される。ある態様において、スタチンは、その単剤療法投与量未満（例えば、９０％未満、８０％未満、７０％未満、６０％未満、５０％未満、４０％未満、３０％未満、２０％未満または１０％未満）である投与量で投与される。ある態様において、第１の化合物およびスタチンの両方が、その個々の単剤療法投与量未満（例えば、９０％未満、８０％未満、７０％未満、６０％未満、５０％未満、４０％未満、３０％未満、２０％未満または１０％未満）である投与量で投与される。ある態様において、第１の化合物、ＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラートおよび／またはスタチンは、その個々の単剤療法投与量未満（例えば、９０％未満、８０％未満、７０％未満、６０％未満、５０％未満、４０％未満、３０％未満、２０％未満または１０％未満）である投与量で投与される。

本発明の医薬組成物は、錠剤、カプセル、粉末、ロゼンジ、丸剤、トローチ、エリキシル剤、凍結乾燥粉末、溶液、顆粒剤、懸濁液、エマルジョン、シロップ剤またはチンキ剤など、経口投与に対して何らかの好都合な形態であり得る。徐放、調節放出または遅延放出形態も、例えばコーティングされた粒子、多層錠剤、カプセル内カプセル、カプセル内錠剤または微粒剤の形態で調製され得る。

経口投与用の固形形態は、薬学的に許容可能な結合剤、甘味料、崩壊剤、希釈剤、香味剤、コーティング剤、保存剤、滑沢剤および／または時間遅延剤（ｔｉｍｅ ｄｅｌａｙ ａｇｅｎｔ）を含有し得る。適切な結合剤としては、アカシアゴム、ゼラチン、コーンスターチ、トラガカントゴム、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルエルロース（ｃａｒｂｏｘｙｍｅｔｈｙｌｅｌｌｕｌｏｓｅ）またはポリエチレングリコールが挙げられる。適切な甘味料としては、スクロース、ラクトース、グルコース、アスパルテームまたはサッカリンが挙げられる。適切な崩壊剤としては、コーンスターチ、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、キサンタンゴム、ベントナイト、アルギン酸または寒天が挙げられる。適切な希釈剤としては、ラクトース、ソルビトール、マンニトール、デキストロース、カオリン、セルロース、炭酸カルシウム、ケイ酸カルシウムまたはリン酸二カルシウムが挙げられる。適切な香味剤としては、ペパーミントオイル、ウィンターグリーン油、チェリー、オレンジまたはラズベリー風味剤が挙げられる。適切なコーティング剤としては、ポリマーまたはコポリマーまたはアクリル酸および／またはメタクリル酸および／またはそれらのエステル、ワックス、脂肪アルコール、ゼイン、シェラックまたはグルテンが挙げられる。適切な保存剤としては、安息香酸ナトリウム、ビタミンＥ、アルファ−トコフェロール、アスコルビン酸、メチルパラベン、プロピルパラベンまたは亜硫酸水素ナトリウムが挙げられる。適切な滑沢剤としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、オレイン酸ナトリウム、塩化ナトリウムまたはタルクが挙げられる。適切な時間遅延剤（ｔｉｍｅ ｄｅｌａｙ ａｇｅｎｔ）としては、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルが挙げられる。

経口投与のための液体形態は、上記物質に加えて液体担体を含有し得る。適切な液体担体としては、水、油、例えばオリーブ油、ピーナツ油、ゴマ油、ヒマワリ油、ベニバナ油、ラッカセイ油、ヤシ油、流動パラフィン、エチレングリコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、グリセロール、脂肪アルコール、トリグリセリドまたはそれらの混合物が挙げられる。

経口投与のための懸濁液は、分散剤および／または懸濁剤をさらに含み得る。適切な懸濁剤としては、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、アルギン酸ナトリウムまたはセチルアルコールが挙げられる。適切な分散剤としては、レシチン、脂肪酸のポリオキシエチレンエステル、例えばステアリン酸、ポリオキシエチレンソルビトールモノ−またはジ−オレエート、−ステアレートまたは−ラウレート、ポリオキシエチレンソルビタンモノ−またはジ−オレエート、−ステアレートまたは−ラウレートなどが挙げられる。

経口投与のためのエマルジョンは１つ以上の乳化剤をさらに含み得る。適切な乳化剤としては、上記のものなどの分散剤または天然ゴム、例えばアラビアゴムまたはトラガカントゴムなどが挙げられる。

本発明の医薬組成物は、選択された賦形剤、担体、アジュバントおよび／または希釈剤と一緒に、第１の化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくはアミノ酸抱合体および少なくとも１つの脂質低下剤、例えばフィブラートおよび任意選択によりスタチンを、ブレンド、粉砕、ホモジェナイズ、懸濁、溶解、乳化、分散および／または混合することによって、調製し得る。錠剤またはカプセルの形態のあるタイプの本発明の医薬組成物は、（ａ）何らかの所望の賦形剤、担体、アジュバントおよび／または希釈剤と一緒に、第１の化合物または薬学的に許容可能なその塩もしくはアミノ酸抱合体から選択される活性物質のうち少なくとも１つと、少なくとも１つの脂質低下剤と、を含む第１の錠剤を調製し、（ｂ）第２の錠剤またはカプセルを調製することによって調製され得、ここで第２の錠剤またはカプセルは残りの活性物質および第１の錠剤を含む。カプセル形態の別のタイプの本発明の医薬組成物は、（ａ）何らかの所望の賦形剤、担体、アジュバントおよび／または希釈剤と一緒に、第１の化合物または薬学的に許容可能なその塩またはアミノ酸抱合体から選択される活性物質のうち少なくとも１つと、脂質低下剤と、を含む第１のカプセルを調製し、（ｂ）残りの活性物質および第１のカプセルを含む第２のカプセルを調製することによって調製され得る。錠剤の形態のさらなるタイプの本発明の医薬組成物は、（ａ）何らかの所望の賦形剤、担体、アジュバントおよび／または希釈剤と一緒に、第１の化合物または薬学的に許容可能なその塩またはアミノ酸抱合体から選択される活性物質のうち少なくとも１つと、少なくとも１つの脂質低下剤と、を含むカプセルを調製し、（ｂ）残りの活性物質およびカプセルを含む錠剤を調製することによって調製し得る。

実施形態において、ＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラートおよび／またはスタチンは、速効性の錠剤として、または持続放出型の錠剤としての何れかで使用される。これは、持続放出型の錠剤中で提供される場合に特に有効である。様々な脂質低下剤の持続放出型の錠剤は市販されている。これは錠剤が持続放出方式である持続性作用に対して好ましい。

別の実施形態において、本発明の医薬組成物は、第１の化合物または薬学的に許容可能なその塩もしくはアミノ酸抱合体を含有するカプセル内にＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラートおよび／またはスタチンを含有するカプセルを含む。一般的には、この形態において、ＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラートおよび／またはスタチンが速効型で与えられる。その事象において、本組成物を１日３回投与することが一般的である。別の投与方式は、１日２回、上述のように持続放出または非持続放出型の何れかで、ＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラートおよび／またはスタチンを含有する組成物を提供することであり、この場合、投与される組成物の１日の量は患者に所望の１日投与量を提供するために十分な量の活性物質を含有する。

ある実施形態において、本発明の医薬組成物は、０．１〜１５００ｍｇ、０．２〜１２００ｍｇ、０．３〜１０００ｍｇ、０．４〜８００ｍｇ、０．５〜６００ｍｇ、０．６〜５００ｍｇ、０．７〜４００ｍｇ、０．８〜３００ｍｇ、１〜２００ｍｇ、１〜１００ｍｇ、１〜５０ｍｇ、１〜３０ｍｇ、４〜２６ｍｇまたは５〜２５ｍｇの１日総量で第１の化合物または薬学的に許容可能なその塩またはアミノ酸抱合体を含む剤形である。ある実施形態において、総量は１日１回経口投与される。

ある実施形態において、本発明の医薬組成物は、１０〜１０００ｍｇ、２０〜８００ｍｇ、５０〜５００ｍｇ、８０〜４００ｍｇまたは１００〜３００ｍｇ、より一般的には約２００ｍｇの１日総量でＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラートおよび／またはスタチンを含む剤形である。ある実施形態において、総量は１日１回経口投与される。ある実施形態において、本発明の医薬組成物は、５〜１０００ｍｇ、１０〜８００ｍｇ、２０〜５００ｍｇ、３０〜４００ｍｇまたは４０〜２００ｍｇの量でスタチンを含む剤形である。

実施形態において、本発明の組成物は、１０〜１０００ｍｇ、２０〜８００ｍｇ、５０〜５００ｍｇ、８０〜４００ｍｇまたは１００〜３００ｍｇ、より一般的には約２００ｍｇの量のＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラートおよび／またはスタチンを含む剤形であり、０．１〜１５００ｍｇ、０．２〜１２００ｍｇ、０．３〜１０００ｍｇ、０．４〜８００ｍｇ、０．５〜６００ｍｇ、０．６〜５００ｍｇ、０．７〜４００ｍｇ、０．８〜３００ｍｇ、１〜２００ｍｇ、１〜１００ｍｇ、１〜５０ｍｇ、１〜３０ｍｇ、４〜２６ｍｇまたは５〜２５ｍｇの量の第１の化合物を含有するカプセル内に含有される。ある実施形態において、ＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラートおよび／またはスタチンは持続放出型である。

実施形態において、本発明の組成物は、０．１〜１５００ｍｇ、０．２〜１２００ｍｇ、０．３〜１０００ｍｇ、０．４〜８００ｍｇ、０．５〜６００ｍｇ、０．６〜５００ｍｇ、０．７〜４００ｍｇ、０．８〜３００ｍｇ、１〜２００ｍｇ、１〜１００ｍｇ、１〜５０ｍｇ、１〜３０ｍｇ、４〜２６ｍｇまたは５〜２５ｍｇの量で第１の化合物を含有するカプセル内に含有される、１０〜１０００ｍｇ、２０〜８００ｍｇ、５０〜５００ｍｇ、８０〜４００ｍｇまたは１００〜３００ｍｇ、より一般的には約２００ｍｇの量のベザフィブラートの持続放出型の錠剤を含む剤形である。このようにして、この剤形が投与される患者は、カプセルが破れて開き、第１の化合物を放出する時に遠位の洞（ｄｉｓｔａｌ ａｎｔｒｕｍ）に送達される、ベザフィブラートの持続放出型の錠剤を受容する。

本発明の医薬組成物は、患者により一生使用され得、生存を延長させ、肝臓移植を遅らせる。高脂血症および肝臓酵素の低下によって関連する血管疾患の発症が確実に減少する。第１の化合物および脂質低下剤、例えばフィブラートおよび／またはスタチンなど、の両者とも、長期副作用プロファイルが非常に少なく（ベザフィブラートの場合は一部例外）、したがってこの組み合わせは、高脂血症を伴う原発性胆汁性肝硬変（ＰＢＣ）および抵抗性原発性胆汁性肝硬変（ＰＢＣ）に対する最適治療であると思われる。本発明により提供される投薬が単純化されるので、本発明の併用療法は、患者の体重および臨床反応に依存して用量を上げて使用され得る。

第１の化合物または薬学的に許容可能なその塩またはアミノ酸抱合体、ＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラートおよび／またはスタチンを含む本発明の組成物は、単一カプセル内の３種類の活性物質として提供され得る。このような組成物のある形態において、スタチンを内部カプセル中で第１の化合物と混合し得、外部カプセル内に含有されるＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラートにより内部カプセルを取り囲む。カプセル内の位置は逆転させ得る。すなわち、スタチンおよび第１の化合物の混合物が外部カプセル内に含有され得、ＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストまたはフィブラートが内部カプセル内に含有され得る。この配置は、投与しようとするスタチンの量が比較的大きい場合に特に所望されよう。３種類の活性物質の組み合わせの投与のための他の組み合わせが可能である。

本明細書中で開示される第１の化合物は、下記スキーム１で示されるような、６段階合成とそれに続く、高純度化合物１（オベチコール酸またはＯＣＡ）を生成させるための１回の精製段階によるなど、従来法（例えば米国特許出願公開第２００９／００６２５２６号明細書、米国特許第７，１３８，３９０号明細書および国際公開第２００６／１２２９７７号パンフレットに記載のもの）により調製され得る。

上記工程は国際公開第２０１３／１９２０９７号パンフレットに記載されており、その内容はそれらの全体において参照により本明細書中に組み込まれる。本工程は、６段階合成と、それに続く１段階の精製段階である。段階１は、メチルエステル化合物を生成させるための、７−ケトリトコール酸（ＫＬＣＡ）のＣ−２４カルボン酸のエステル化である。段階２は、化合物ｃを生成させるための、化合物１からのシリルエノールエーテル形成である。段階３は、化合物ｄを生成させるための、シリルエノールエーテル化合物ｃおよびアセトアルデヒドのアルドール縮合反応である。段階４は、化合物ｅを生成させるための、化合物ｄのけん化である。段階５は、化合物ｆを生成させるための、化合物ｅの水素付加である。段階６は、結晶性化合物１を生成させるための、化合物ｆの７−ケト基の選択的還元である。段階７は、非晶質化合物１（オベチコール酸フォーム１またはＯＣＡフォーム１）への結晶性化合物の変換である。

あるいは、本明細書中で開示される第１の化合物は、従来の方法（例えば米国特許第７，９３２，２４４号明細書に記載のもの）によって、またはスキーム２で示されるような（および国際公開第２０１４／０６６８１９号パンフレットで開示される）工程を介して調製し得る。本明細書中で開示される化合物２、３または４を調製するためにスキーム２を使用し得る。

段階１は、式ＩＩＩの化合物を得るための、式ＩＩの化合物のエステル化である。段階２は、式ＩＩＩの化合物から式ＩＶの化合物を形成させるための反応である。段階３は、式Ｖの化合物を得るための、式ＩＶの化合物のＣ３位置でのヒドロキシ基の保護である。段階４は、式ＶＩの化合物を与えるための、式Ｖの化合物の酸化的切断である。段階５は、式ＶＩＩの化合物を得るための、式ＶＩの化合物の還元である。段階６は、式Ｉ−Ｎａの塩を与えるための、式ＶＩＩの化合物のスルホン化である。式Ｉ−Ｎａの塩は、その遊離塩基形態（すなわち式Ｉの化合物）または他の塩の形態（例えば式Ｉ−（Ｅｔ）_３ＮＨの塩）に変換し得る。

定義
便宜上、本願、実施例および付属の特許請求の範囲で使用されるある一定の用語をここでまとめる。

本明細書中で使用される場合、「フィブラート」という用語は、本明細書中に記載の方法において有用な、フィブリン酸誘導体および２−フェノキシ−２−メチルプロパン酸の薬学的に活性のある誘導体の何れかを意味する。フィブラートの例としては、フェノフィブラート、ベザフィブラート、ベクロブラート、ビニフィブラート、シプロフィブラート、クリノフィブラート、クロフィブラート、クロフィブリン酸、エトフィブラート、ゲムフィブロジル、ニコフィブラート、ピリフィブラート、ロニフィブラート、シンフィブラート、テオフィブラート、トコフィブラート、プラフィブリドなどが挙げられるが限定されない。フィブラートの例は、それぞれの開示全体が参照により本明細書中に組み込まれる、米国特許第３，７８１，３２８号明細書、同第３，９４８，９７３号明細書、同第３，８６９，４７７号明細書、同第３，７１６，５８３号明細書、同第３，２６２，５８０号明細書、同第３，７２３，４４６号明細書、同第４，０５８，５５２号明細書、同第３，６７４，８３６号明細書、同第３，３６９，０２５号明細書、同第３，９８４，４１３号明細書、同第３，９７１，７９８号明細書、同第６，３８４，０６２号明細書、同第７，１１９，１９８号明細書および同第７，２５９，１８６号明細書；米国特許出願公開第２００９０１３１３９５号明細書；国際公開第２００８／０３９８２９号パンフレット；ベルギー特許第８８４７２２号明細書；英国特許第８６０３０３号明細書；および欧州特許出願公開第０６０７５３６号明細書にも記載されている。

ＮＲ１Ｃ１（核内受容体サブファミリー１、グループＣ、メンバー１）としても知られるペルオキシソーム増殖剤活性化受容体アルファ（ＰＰＡＲ−アルファ）は、核内受容体タンパク質である。ＰＰＡＲ−アルファアゴニストはＰＰＡＲ−アルファに結合し、これを活性化する。ＰＰＡＲ−アルファアゴニストの例としては、フィブラート、例えば本明細書中に記載のフィブラートなどが挙げられるが限定されない。

ＮＲ１Ｃ２（核内受容体サブファミリー１、群Ｃ、メンバー２）としても知られるペルオキシソーム増殖剤活性化受容体デルタ（ＰＰＡＲ−デルタ）は、核内受容体タンパク質である。ＰＰＡＲ−デルタアゴニストはＰＰＡＲ−デルタに結合し、これを活性化する。ＰＰＡＲ−デルタアゴニストの例としては、｛４−［（｛４−メチル−２−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−１，３−チアゾール−５−イル｝メチル）スルファニル］−２−メチルフェノキシ｝酢酸（当技術分野でＧＷ５０１５１６、ＧＷ１５１６およびエンデュラボル（Ｅｎｄｕｒａｂｏｌ）としても知られる。）、｛２−メチル−４−［５−メチル−２−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−２Ｈ−［１，２，３］トリアゾール−４−イルメチルシルファニル（ｓｙｌｆａｎｙｌ）］−フェノキシ｝−酢酸および［４−［［［２−［３−フルオロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル］−４−メチル−５−チアゾリル］メチル］チオ］−２−メチルフェノキシ］−酢酸が挙げられるが限定されない。

ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタまたはＰＰＡＲ−アルファおよびガンマ二重アゴニストは、ＰＰＡＲ−アルファおよびＰＰＡＲ−デルタの両方またはＰＰＡＲ−アルファおよびＰＰＡＲ−ガンマの両方に結合し、これらを活性化する。ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニストの例としては、２−［２，６ジメチル−４−［３−［４−（メチルチオ）フェニル］−３−オキソ−１（Ｅ）−プロペニル］フェノキシル］−２−メチルプロパン酸（ＧＦＴ５０５としても知られる。）が挙げられるが限定されない。ＰＰＡＲアルファおよびガンマ二重アゴニストの例としては、アレグリタザル（（２Ｓ）−２−メトキシ−３−［４−［２−（５−メチル−２−フェニル−４−オキサゾリル）エトキシ］−７−ベンゾチオフェニル］プロパン酸、ＣＡＳ Ｎｏ．４７５４７９−３４−６）、ムラグリタザル（Ｎ−［（４−メトキシフェノキシ）カルボニル］−Ｎ−｛４−［２−（５−メチル−２−フェニル−１，３−オキサゾール−４−イル）エトキシ］ベンジル｝グリシン、ＣＡＳ Ｎｏ．３３１７４１−９４−７）、テサグリタザル（（２Ｓ）−２−エトキシ−３−［４−［２−（４−メチルスルホニルオキシフェニル）エトキシ］フェニル］プロパン酸、ＣＡＳ Ｎｏ．２５１５６５−８５−２）およびサログリタザル（（２Ｓ）−２−エトキシ−３−［４−（２−｛２−メチル−５−［４−（メチルスルファニル）フェニル］−１Ｈ−ピロール−１−イル｝エトキシ）フェニル］プロパン酸、ＣＡＳ Ｎｏ．４９５３９９−０９−２）が挙げられるが限定されない。

本明細書中で使用される場合、「ＦＸＲアゴニスト」という用語は、ＦＸＲを活性化する何らかの化合物を指す。ある態様において、ＦＸＲアゴニストは、国際公開第２０００／０３７０７７号パンフレットに記載のアッセイ方法において適切な正の対照であるＣＤＣＡと比較して、ＦＸＲの少なくとも５０％活性化を達成する。別の態様において、ＦＸＲアゴニストは、シンチレーション近接アッセイまたは国際公開第２０００／０３７０７７号パンフレットに記載のようなＨＴＲＦアッセイでＦＸＲの１００％活性化を達成する。ＦＸＲアゴニストの例としては、米国特許第７，１３８，３９０号明細書；同第７，９３２，２４４号明細書；米国特許出願公開第２０１２０２８３２３４号明細書；同第２０１２０２３２１１６号明細書；同第２０１２００５３１６３号明細書；同第２０１１０１０５４７５号明細書；同第２０１００２１０６６０号明細書；同第２０１００１８４８０９号明細書；同第２０１００１７２８７０号明細書；同第２０１００１５２１６６号明細書；同第２０１０００６９３６７号明細書；同第２０１０００６３０１８号明細書；同第２０１０００２２４９８号明細書；同第２００９０２７０４６０号明細書；同第２００９０２１５７４８；同第２００９０１６３４７４号明細書；同第２００９００９３５２４号明細書；同第２００８０３００２３５号明細書；同第２００８０２９９１１８号明細書；同第２００８０１８２８３２号明細書；同第２００８００３９４３５号明細書；同第２００７０１４２３４０号明細書；同第２００６００６９０７０号明細書；同第２００５００８００６４号明細書；同第２００４０１７６４２６号明細書；同第２００３０１３０２９６号明細書；同第２００３０１０９４６７号明細書；同第２００３０００３５２０号明細書；同第２００２０１３２２２３号明細書；および同第２００２０１２０１３７号明細書に記載のものが挙げられるが限定されない。

本明細書中で使用される場合、「オベチコール酸」または「ＯＣＡ」という用語は、次の化学構造を有する化合物を指す。

オベチコール酸は、オベチコール酸フォーム１、ＩＮＴ−７４７、３α，７α−ジヒドロキシ−６α−エチル−５β−コラン−２４−オン酸、６α−エチル−ケノデオキシコール酸、６−エチル−ＣＤＣＡ、６ＥＣＤＣＡ、コラン−２４−オン酸、６−エチル−３，７−ジヒドロキシ−（３α，５β、６α，７α）とも呼ばれ、米国特許出願公開第２００９／００６２５２６Ａ１号明細書、米国特許第７，１３８，３９０号明細書および国際公開第２００６／１２２９７７号パンフレットに記載の方法によって調製され得る。オベチコール酸についてのＣＡＳ登録番号は４５９７８９−９９−２である。

本明細書中で使用される場合、「結晶性オベチコール酸」という用語は、次の化学構造を有する化合物の何らかの結晶形態を指す。

結晶性オベチコール酸は、化合物が３次元空間で特異的な結晶パッキング配置に結晶化されているか、または化合物が外面平面（ｅｘｔｅｒｎａｌ ｆａｃｅ ｐｌａｎｅ）を有することを意味する。オベチコール酸（または薬学的に許容可能なその塩）の結晶形態は、異なる結晶パッキング配置に結晶化され得、これらは全てオベチコール酸の同じ基本的な組成を有する。異なる結晶形態は通常、異なるＸ線回折パターン、赤外線スペクトル、融点、密度硬度（ｄｅｎｓｉｔｙ ｈａｒｄｎｅｓｓ）、結晶形、光学的および電気的特性、安定性および溶解度を有する。再結晶化溶媒、結晶化の速度、保存温度および他の因子によって、ある１つの結晶形態が優位になり得る。オベチコール酸の結晶は、様々な条件、例えば様々な溶媒、温度などの下での結晶化によって調製し得る。ＯＣＡの結晶形態の例は米国特許第９，２３８，６７３号明細書に記載されている。

「第１の化合物」という用語は、式Ａ、Ｉ、ＩＡ、ＩＩもしくはＩＩＡの化合物または化合物１、２、３もしくは４または薬学的に許容可能なその塩もしくはアミノ酸抱合体を意味する。本発明との関連でこの用語が使用される場合は常に、遊離塩基、同位体標識される化合物、結晶性化合物または対応する薬学的に許容可能なその塩もしくはアミノ酸抱合体を指していることを理解すべきであるが、ただしこのようなものはこの状況下で可能であり、および／または適切であるものとする。

本明細書中で使用される場合、「アミノ酸抱合体」という用語は、何らかの適切なアミノ酸との本発明の第１の化合物（例えば式Ａの化合物）の抱合体を指す。例えば式Ａの化合物のこのような適切なアミノ酸抱合体は、胆汁または腸液中での完全性が向上するというさらなる長所を有する。適切なアミノ酸としては、グリシンおよびタウリンが挙げられるが限定されない。したがって、本発明は、本発明の第１の化合物（例えば化合物１）のグリシンおよびタウリン抱合体を包含する。

「スタチン」という用語は「３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−補酵素」、「レダクターゼ阻害剤」および「ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤」という用語と同義である。これらの用語は、本明細書中で交換可能に使用される。同義語が示唆するように、スタチンは、３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−補酵素Ａレダクターゼの阻害剤であり、それ自体、血液血漿コレステロールのレベルを低下させることにおいて有効であり、したがって、心血管系疾患を処置または予防するためのものである。スタチンおよび薬学的に許容可能なその塩は、哺乳動物において、および特にヒトにおいて、低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）レベルを低下させる際に特に有用である。構造的に、スタチンまたはその誘導体は、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼの活性部位と相互作用するジヒドロキシ酸の形態でもあり得る４−ヒドロキシ−６−オキソ−２Ｈ−ピラン系および、アトルバスタチンまたはフルバスタチンでのように、特に、多置換ヘキサヒドロナフタレン系として存在するが、また多置換複素環式芳香族系で置換され得る脂溶性部分を共通して有する。本明細書中での使用に適切なスタチンとしては、シンバスタチン、フルバスタチン、プラバスタチン、リバスタチン、メバスタチン、アトルバスタチン、セリバスタチン、ロバスタチン、ピタバスタチン、フルインドスタチン、ベロスタチン、ダルバスタチン、ロスバスタチン、ジヒドロコンパクチンおよびコンパクチンまたは薬学的に許容可能なその塩が挙げられるが限定されない。

「脂質低下剤」という用語は、循環中の（例えば血中の）脂質（例えば、コレステロール、ＬＤＬおよびトリグリセリド）の濃度を低下させることが可能である何らかの物質を指す。脂質低下剤としては、（ｉ）胆汁酸金属イオン封鎖剤、例えばレジンなど（例えば、コレスチラミン、コレスチポール、コレセベラム）、（ｉｉ）（例えば小腸から循環系への）コレステロールの取り込みを防ぐコレステロール吸収阻害剤、例えばエゼチミブ（すなわち（３Ｒ，４Ｓ）−１−（４−フルオロフェニル）−３−［（３Ｓ）−３−（４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシプロピル］−４−（４−ヒドロキシフェニル）アゼチジン−２−オン）および（３Ｒ，４Ｓ）−１，４−ビス（４−メトキシフェニル）−３−（３−フェニルプロピル）−２−アゼチジノン、（ｉｉｉ）遊離脂肪酸誘導体を含むオメガ−３脂肪酸エチルエステル（例えば、オマコール（Ｏｍａｃｏｒ）（登録商標）、ロバザ（Ｌｏｖａｚａ）（登録商標）、バスセパ（Ｖａｓｃｅｐａ）（商標）、エパデール、エパノバ（Ｅｐａｎｏｖａ）（商標））または海洋生物オメガ−３ポリ不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）、（ｉｖ）ＰＣＳＫ９阻害剤、（ｖ）ニコチン酸、（ｖｉ）フィトステロール（例えば植物ステロールおよびスタノール）、例えばβ−シトステロール、カンペステロール、スチグマステロール、ブラシカステロール、エルゴステロール、β−シトスタノール、カンペスタノール、スチグマスタノール、シクロアルテノールおよびルペオール、（ｖｉｉ）ＣＥＴＰ（コレステリルエステル輸送タンパク質）の阻害剤、例えばアナセトラピブ、エバセトラピブ、トルセトラピブおよびダルセトラピブなど、（ｖｉｉｉ）スクアレンシンターゼ阻害剤、（ｉｘ）脂質の合成、分解、吸収および代謝に影響を及ぼすアンチセンスオリゴヌクレオチド（例えばアポリポタンパク質ＢまたはＰＣＳＫ９をコードするｍＲＮＡに結合するアンチセンスオリゴヌクレオチド）（例えば、ミポメルセン（Ｋｙｎａｍｒｏ））、（ｘ）アポタンパク質Ｂ阻害剤、（ｘｉ）ミクロソームトリグリセリド輸送タンパク質の阻害剤（例えば、ロミタピド（Ｊｕｘｔａｐｉｄ））および（ｘｉｉ）他の化合物、例えばコレセベラム、アバシミブおよびインプリタピドが挙げられるが限定されない。

「処置すること」は、例えば和らげ、軽減し、調節し、または排除し、その結果、状態、疾患、障害などが改善する、何らかの効果を含む。疾患状態を「処置すること」または疾患状態の「処置」は、疾患状態を阻害する、すなわち疾患状態の発症もしくはその臨床症状を抑止すること、または疾患状態を緩和する、すなわち疾患状態またはその臨床症状の一時的または永久的な退行を引き起こすことを含む。

疾患状態を「防ぐこと」は、疾患状態に曝露され得るかまたは以前に曝露されているが、疾患状態の症状をまだ経験していないかまたは呈していない対象において疾患状態の臨床症状が発症しないようにすることを含む。

「阻害する」または「阻害」という用語は、本明細書中で使用される場合、疾患または状態の発症または進行における何らかの検出可能な有益な効果を指す。このような有益な効果は、疾患または状態の少なくとも１つの症状または徴候の開始の遅延または予防、症状または徴候の軽減または逆転および症状または徴候のさらなる悪化の遅延または予防を含み得る。

「疾患状態」は何らかの疾患、障害、状態、症状または兆候を意味する。

「有効量」または「治療的有効量」という用語は、本明細書中で使用される場合、単独または併用での適切な用量投与時に急性または慢性的な治療効果を生み出す第１の化合物（例えばＦＸＲ−活性化リガンド）またはフィブラートまたは脂質低下剤またはスタチンの量を指す。ある実施形態において、有効量または治療的有効量の第１の化合物（例えばＦＸＲ活性リガンド）は、少なくとも１つのフィブラートと組み合わせて適切な用量投与時に急性または慢性治療効果を生じさせる。この効果は、疾患／状態の、症状、徴候および根底にある病理（例えば肝臓、腎臓または腸の線維症）および何らかの検出可能な程度までの関連合併症の、予防、是正、阻害または逆転を含む。「有効量」または「治療的有効量」は、第１の化合物、フィブラート、脂質低下剤、スタチン、疾患およびその重症度および処置しようとする対象の年齢、体重などに依存して変動する。

治療的有効量の第１の化合物は、ヒトまたは非ヒト動物への投与のために、１つ以上のフィブラートおよび任意選択により１つ以上の薬学的に許容可能な担体と一緒に処方され得る。したがって、本発明の医薬組成物は、有効量の第１の化合物およびフィブラートを提供するために、例えば経口、非経口または局所経路を介して投与され得る。代替的な実施形態において、本発明の組成物は、例えばステントなど、医療機器をコーティングするかまたは含浸させるために使用し得る。

「薬学的効果」は、本明細書中で使用される場合、意図される治療目的を達成する対象において生成される効果を包含する。ある実施形態において、薬理学的効果は、処置されている対象の主な兆候が予防され、緩和され、または軽減されることを意味する。例えば薬理学的効果は、処置される対象において主要な兆候の予防、緩和または軽減を生じさせるものである。別の実施形態において、薬理学的効果は、処置されている対象の主な兆候の障害または症状が、予防、緩和または軽減されることを意味する。例えば、薬理学的効果は、処置される対象における障害または症状の予防、緩和または軽減を生じさせるものである。

別段の断りがない限り、非対称炭素原子（例えば全てのエナンチオマーおよびジアステレオマー）から生じる異性体が本発明の範囲内に含まれることを理解されたい。このような異性体は、古典的な分離技術によって、および構造化学的に調節された合成によって、実質的に純粋な形態で得られ得る。

「医薬組成物」は、対象への投与に適切な形態での第１の化合物およびフィブラートなどの脂質低下剤などの治療剤を含有する処方物である。ある実施形態において、本医薬組成物はバルクまたは単位剤形である。投与を容易にすることおよび投与量の均一性のために投与単位形態で組成物を処方することは有利であり得る。投与単位形態は、本明細書中で使用される場合、処置しようとする対象のための、単位投与量として適切である物理的に個別の単位を指し；各単位は、必要とされる医薬担体を伴って所望の治療効果を生じさせるために計算された予め定められた量の活性物質を含有する。本発明の投与単位形態に対する仕様は、活性物質の特有の特徴および達成しようとする特定の治療効果および個体の処置のためのこのような活性物質を調合する技術分野に固有の制限によって決定され、これらに直接依存する。

「単位剤形」という用語は、各単位が、本明細書中に記載のような適切な医薬賦形剤を伴って所望の治療効果を生じさせるために計算された予め決定された量の活性物質を含有する、ヒトおよび他の哺乳動物に対する単位投与量として適切な物理学的に個別の単位を指す。

単位剤形は、例えばカプセル、ＩＶバッグ，錠剤、エアロゾル吸入器における単一ポンプまたはバイアルを含む様々な形態の何れかである。組成物の単位用量中の第１の化合物または薬学的に許容可能なその塩またはアミノ酸抱合体の量は有効量であり、関与する特定の処置および／または処置に対して使用される脂質低下剤に従い変動する。当業者にとって当然のことながら、患者の年齢および状態に依存して投与量に対して通例の変更を行うことが必要な場合がある。投与量は投与経路にも依存する。経口、肺、直腸、非経口、経皮、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内、吸入性、頬側、舌下、胸膜内、くも膜下腔内、鼻腔内などを含め、様々な経路が企図される。本発明の化合物の局所または経皮投与のための剤形としては、粉末、スプレー、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、溶液、パッチおよび吸入薬が挙げられる。ある実施形態において、第１の化合物および／または脂質低下剤は、薬学的に許容可能な担体と、および必要とされる何らかの保存剤、緩衝液または噴霧剤と、無菌条件下で混合される。

「フラッシュ用量（ｆｌａｓｈ ｄｏｓｅ）」という用語は、急速に分散する剤形である処方物を指す。

「速効性」という用語は、比較的短時間、一般に約６０分間以下での剤形からの治療剤（第１の化合物または脂質低下剤など）の放出として定義される。「調節放出」という用語は、遅延放出、持続性放出およびパルス放出を含むように定義される。「パルス放出」という用語は、剤形からの薬物の一連の放出として定義される。「持続放出」または「持続性放出」という用語は、長時間にわたる剤形からの治療剤の連続放出として定義される。

「対象」は、哺乳動物、例えばヒト、コンパニオン動物（例えばイヌ、ネコ、トリなど）、家畜（例えばウシ、ヒツジ、ブタ、ウマ、家禽など）および実験動物（例えば、ラット、マウス、モルモット、トリなど）を含む。ある実施形態において、対象はヒトである。ある態様において、対象は女性である。ある態様において、対象は男性である。

本明細書中で使用される場合、「薬学的に許容可能な」という句は、合理的なリスクベネフィット比と釣り合った、過剰な毒性、刺激、アレルギー性反応または他の問題もしくは合併症がない、ヒトおよび動物の組織との接触での使用に適切な、健全な医学的判断の範囲内にある、化合物、材料、組成物、担体および／または剤形を指す。

「薬学的に許容可能な担体または賦形剤」は、一般に安全で、無毒性であり、生物学的にも他の面でも不快ではない医薬組成物を調製することにおいて有用である担体または賦形剤を意味し、獣医学的使用ならびにヒトの医薬的使用に対して受容可能である賦形剤を含む。「薬学的に許容可能な賦形剤」は、本願および特許請求の範囲で使用される場合、１つのまたは複数のこのような賦形剤の両方を含む。

製剤化なく第１の化合物を直接投与することが可能である一方で、薬学的に許容可能な賦形剤を含む製剤処方の形態で第１の化合物を投与し得る。この処方物は、経口、頬側、直腸、鼻腔内、経皮、皮下、静脈内、筋肉内および鼻腔内を含む様々な経路によって投与し得る。

ある実施形態において、第１の化合物は経皮投与され得る。経皮投与するために、経皮送達装置（「パッチ」）が必要とされる。このような経皮パッチは、量を調節して本発明の化合物の連続または非連続注入を提供するために使用され得る。医薬物質の送達のための経皮パッチの構築および使用は、当技術分野で周知である。例えば米国特許第５，０２３，２５２号明細書を参照。このようなパッチは、医薬物質の連続、拍動性またはオンデマンド送達のために構築され得る。

ある実施形態において、本発明の医薬組成物は、頬側および／または舌下または鼻腔投与に適している。この実施形態は、胃の合併症、例えば胃の系によるおよび／または肝臓を通じた初回通過代謝などを回避するように、第１の化合物の投与を提供する。この投与経路は吸着時間も短縮し得、治療的利点をより急速に開始させる。

第１の化合物は、広い投与量範囲にわたり投与され得る。例えば１日あたりの投与量は、通常、約０．０００１〜約３０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲内に入る。成人の処置において、単回投与または分割投与で約０．１〜約１５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲が使用され得る。ある実施形態において、本処方物は、約０．１ｍｇ〜約１５００ｍｇの第１の化合物を含む。別の実施形態において、本処方物は、約１ｍｇ〜約１００ｍｇの第１の化合物を含む。別の実施形態において、本処方物は、約１ｍｇ〜約５０ｍｇの第１の化合物を含む。別の実施形態において、本処方物は、約１ｍｇ〜約３０ｍｇの第１の化合物を含む。別の実施形態において、本処方物は、約４ｍｇ〜約２６ｍｇの第１の化合物を含む。別の実施形態において、本処方物は、約５ｍｇ〜約２５ｍｇの第１の化合物を含む。しかし、実際に投与される第１の化合物の量は、処置しようとする状態、選択した投与経路、投与される第１の化合物の形態、投与される脂質低下剤、個々の患者の年齢、体重および反応、および患者の症状の重症度を含む関連する状況に照らして、医師により決定されることが理解されよう。したがって、上記の投与量範囲は、本発明の範囲を何ら限定するものではない。一部の例において、上述の範囲の下限を下回る投与量レベルが適正であり得るだけにとどまらず、一方で他のケースにおいて、有害な副作用を全く引き起こさずにさらに高い用量が使用され得るが、ただし、このようなより高い用量は、１日を通じた投与のために、何回かのより低い用量に最初に分割されるものとする。

「線維症」は、組織または器官における過剰な線維性結合組織、例えば瘢痕組織の発生を含む状態を指す。このような瘢痕組織の発生は、損傷、外傷、化学毒性などによる器官の感染、炎症または疾患に反応して起こり得る。線維症は、肝臓、腎臓、腸、肺、心臓などを含む様々な異なる組織および器官において発生し得る。

本明細書中で使用される場合、「胆汁うっ滞性状態」は、肝臓からの胆汁排出に障害があるかまたはそれが阻止される何らかの疾患または状態を指し、これは肝臓または胆管の何れかで起こり得る。肝内胆汁うっ滞および肝外胆汁うっ滞は、２つのタイプの胆汁うっ滞状態である。（肝臓の内部で起こる）肝内胆汁うっ滞は、原発性胆汁性肝硬変、原発性硬化性胆管炎、敗血症（全身性の感染）、急性アルコール性肝炎、薬物毒性、完全静脈栄養法（静脈内に供給されている。）、悪性腫瘍、嚢胞性線維症、胆道閉鎖および妊娠で最もよく見られる。（肝臓の外側で起こる）肝外胆汁うっ滞は、胆管腫瘍、狭窄、嚢胞、憩室、総胆管での結石形成、膵炎、膵臓腫瘍または仮性嚢胞および近くの器官における腫瘤または腫瘍による圧迫により引き起こされ得る。

胆汁うっ滞性状態の臨床症状および兆候は、かゆみ（そう痒）、疲労、皮膚または眼の黄疸、ある一定の食物の消化不能、吐き気、嘔吐、白色便、暗色尿および右上腹部痛を含む。胆汁うっ滞性状態がある患者は、患者の血清中のアルカリホスファターゼ、γ−グルタミルトランスペプチダーゼ（ＧＧＴ）、５’ヌクレオチダーゼ、ビリルビン、胆汁酸およびコレステロールのレベルの測定を含め、一連の標準臨床検査に基づき、臨床的に診断され、追跡され得る。一般に、診断マーカーアルカリホスファターゼ、ＧＧＴおよび５’ヌクレオチダーゼの３つ全ての血清レベルが異常に高いとみなされる場合、患者は、胆汁うっ滞状態を有するものとして診断される。これらのマーカーの正常血清レベルは、試験プロトコールに依存して、検査室間および手順間で幾分変動し得る。したがって、医師は、具体的な検査室および検査手順に基づいて、各マーカーに対して異常に高い血液レベルが何であるかを決定可能である。例えば、胆汁うっ滞状態になっている患者は一般に、血中で約１２５ＩＵ／Ｌアルカリホスファターゼより高い、約６５ＩＵ／Ｌ ＧＧＴより高い、約１７ＮＩＬ５’’ヌクレオチダーゼより高い。血清マーカーのレベルは可変性であるので、胆汁うっ滞状態は、かゆみ（そう痒）などの上記の症状の少なくとも１つに加えて、これらの３種類のマーカーの異常レベルに基づいて診断され得る。

ＰＢＳと略称されることが多い「原発性胆汁性肝硬変」という用語は、この疾患において小葉内の管（へリング管）が早期に影響を受ける、ゆっくりと進行する肝臓の小胆管の破壊を特徴とする肝臓の自己免疫疾患である。これらの管が損傷を受けるとき、肝臓において胆汁が蓄積し（胆汁うっ滞）、徐々に組織に損傷を与える。これは、瘢痕化、線維症および肝硬変につながり得る。原発性胆汁性肝硬変は、小葉内胆管破壊を特徴とする。原発性胆汁性肝硬変の組織病理学的知見には、上皮内リンパ球および管周囲の類上皮性肉芽腫を特徴とする胆管の炎症が含まれる。ＰＢＣには４つのステージがある。
ステージ１−門脈ステージ：大きさが正常な三つ組み；門脈炎症、僅かな胆管損傷。このステージで肉芽腫が検出されることが多い。
ステージ２−門脈周囲ステージ：三つ組みが拡大；門脈周囲の線維症および／または炎症。一般的にはこのステージは、小胆管の増殖の知見を特徴とする。
ステージ３−隔壁ステージ：活動性および／または受動性線維性隔壁。
ステージ４−胆道肝硬変：小結節が存在；ガーランド（ｇａｒｌａｎｄ）

「原発性硬化性胆管炎」（ＰＳＣ）という用語は、肝内（肝臓の内部）および肝外（肝臓の外部）レベルの両方で炎症および続く胆管の閉塞を引き起こす胆管の疾患である。炎症は、腸への胆汁の流れを妨害し、これが最終的には肝硬変、肝不全および肝臓癌につながり得る。

「非アルコール性脂肪性肝炎」（ＮＡＳＨ）という用語は、肝臓での脂肪の蓄積により引き起こされる肝臓炎症である。一部の者において、脂肪の蓄積は、肝臓の炎症を引き起こす。炎症のために、働くはずのところ肝臓は働かない。ＮＡＳＨは、悪化し得、肝臓の瘢痕化を引き起こし、肝硬変につながる。ＮＡＳＨは、長期の大量飲酒により引き起こされるある種の肝疾患と同様である。しかし、ＮＡＳＨはアルコール中毒ではない者において起こる。

「器官」という用語は、細胞および組織からなり、生物においていくつかの特異的な機能を発揮する（心臓、肺、腎臓、肝臓、などにおけるような）分化した構造を指す。この用語は、機能を発揮するかまたは活性に協力する身体部位（例えば、眼および視覚器官を構築する関連構造）も包含する。「器官」という用語は、さらに、完全な構造（例えば肝臓の小葉または一部分）になることが潜在的に可能である分化した細胞および組織のあらゆる部分的構造を包含する。

本明細書中で引用される全ての刊行物および特許文書は、このような刊行物または文書のそれぞれが具体的におよび個々に参照により本明細書中に組み込まれることが示されるかのように、参照により本明細書中に組み込まれる。刊行物および特許文書の引用は、何れも関連先行技術であることを承認するものではなく、その内容および日付に関して承認を構成しない。本発明をここで書面により記載してきたが、当業者は、様々な実施形態において本発明が実施され得ること、および本明細書中で提供される記載および例が例示目的のためであり、続く特許請求の範囲の制限ではないことを認識する。

本願において、文脈から明確な指示がない限り、単数形は複数も含む。別段の定めがない限り、本明細書中で使用される全ての技術および科学用語は、本発明が属する技術分野の通常の技術者により一般に理解されるものと同じ意味を有する。矛盾する場合、本願が優先される。本明細書中で使用される全てのパーセンテージおよび比率は、別段の指示がない限り、重量による。

実施例１：胆管結紮（ＢＤＬ）モデル
この実験は、マウスの総胆管結紮により誘発される線維症におけるＯＣＡおよびアトルバスタチン単独および併用の効果を評価するために行った。

動物、収容および食餌
Ｊａｐａｎ ＳＬＣから雄Ｃ５７ＢＬ／６マウス（６週齢）を入手した。温度（２３±２°Ｃ）、湿度（４５±１０％）、照明（１２時間人工的明暗サイクル；８：００〜２０：００に照明。）および換気（換気速度：４０回／時間超）が制御された条件下で、特定の病原体不含の施設にてこの動物を維持した。施設の雑菌混入を防ぐために実験室で高圧（２０±４Ｐａ）を維持した。最大６匹／ケージでＫＮ−６００（夏目製作所、日本）に動物を収容した。寝床に滅菌Ｐａｐｅｒ−Ｃｌｅａｎ（Ｊａｐａｎ ＳＬＣ）を使用し、週に１回交換した。手術日前に３週間、滅菌固形高脂肪飼料（ＨＦＤ）および水を自由摂取で与えた。

処置群
群１：偽手術
偽手術マウス（ｎ＝８）に、ＢＤＬ手術後第０日〜第６日に１日１回、５ｍＬ／ｋｇの体積でビヒクル（０．５％ＣＭＣ）を経口投与した。
群２：ＢＤＬ−ビヒクル
ＢＤＬ手術マウス（ｎ＝１２）に、ＢＤＬ手術後第０日〜第６日に１日１回、５ｍＬ／ｋｇの体積でビヒクル（０．５％ＣＭＣ）を経口投与した。
群３：ＢＤＬ−ＯＣＡ
ＢＤＬ手術マウス（ｎ＝１２）に、ＢＤＬ手術後第０日〜第６日に１日１回、５ｍｇ／ｋｇの用量でＯＣＡを加えたビヒクルを経口投与した。
群４：ＢＤＬ−アトルバスタチン
ＢＤＬ手術マウス（ｎ＝１２）に、ＢＤＬ手術後第０日〜第６日に１日１回、１０ｍｇ／ｋｇの用量でアトルバスタチンを加えたビヒクルを経口投与した。
群５：ＯＣＡ−ＢＤＬ−アトルバスタチン
ＢＤＬ手術マウス（ｎ＝１２）に、ＢＤＬ手術後第０日〜第６日に１日１回、５ｍｇ／ｋｇの用量でＯＣＡおよび１０ｍｇ／ｋｇの用量でアトルバスタチンを加えたビヒクルを経口投与した。

胆管結紮手術
第０日に胆管結紮手術を行った。ペントバルビタール麻酔下での総胆管の結紮によって、マウスにおいて、徐々に肝臓の線維症につながる胆汁うっ滞を確立した。手術前日のマウスの体重に基づいて、マウスを２つの手術コホートに分けた。剃毛した後、腹腔を開き、５〜０手術用絹糸で２回総胆管を結紮し、結紮糸の間で総胆管を切り離した。腹膜および皮膚を縫合術で閉じた。麻酔からの回復のためにマウスを清潔なケージ（安静ケージ）に移した。偽手術マウスの手術は、他の群と同様であるが、胆管を結紮せずにを行った。

動物監視および屠殺
生存能、臨床兆候および挙動を毎日監視した。処置期間中、体重を毎日記録した。処置期間中、ケージごとに、餌消費を週２回測定した。第６日に、エーテル麻酔（和光純薬工業）下で直接的な心臓穿刺を通じた全採血によって動物を屠殺した。

組織学的分析
コラーゲン沈着を可視化するために、ピクロ−シリウスレッド溶液（Ｗａｌｄｅｃｋ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して、ブアン固定した左側肝臓切片を染色した。線維症領域の定量分析のために、１００倍の拡大率でデジタルカメラ（ＤＦＣ２９５；Ｌｅｉｃａ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて中心静脈周囲でシリウスレッド染色切片の明視野画像を捕捉し、ＩｍａｇｅＪソフトウェア（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，ＵＳＡ）を使用して、５カ所の視野／切片における陽性領域を測定した。Ｐｒｉｓｍ Ｓｏｆｔｗａｒｅ ６（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．ＵＳＡ）を用いて統計学的解析を行った。

結果
線維症領域のパーセンテージを推定するために、シリウスレッド染色によって、（通常の方法に従い）肝臓切片において組織病理学的分析を行った。シリウスレッド染色肝臓切片の代表的な顕微鏡写真を図１Ａ〜１Ｅで示す。ＢＤＬ−ビヒクル群は、ＢＤＬ−偽手術群と比較して、シリウスレッド−陽性領域の顕著な増加を示した。表１および図２で示されるように、ＢＤＬ−ＯＣＡ＋アトルバスタチン群は、ＢＤＬ−ビヒクル群と比較して、シリウスレッド−陽性領域の顕著な減少を示した。

表１での結果は、ＯＣＡおよびアトルバスタチンの併用により線維症が顕著に減少したことを示す。

実施例２：ＡＰＯＥ^＊３Ｌｅｉｄｅｎ．ＣＥＴＰマウスにおける食餌誘発性ＮＡＳＨ
この実験は、ＡＰＯＥ^＊３Ｌｅｉｄｅｎ．ＣＥＴＰトランスジェニックマウスでの、食餌誘発性ＮＡＳＨおよび肝臓線維症の発症におけるＯＣＡおよびフェノフィブラートの単独または併用の効果を評価するために行った。肝臓遺伝子発現プロファイリングおよび続く経路分析は、この併用が、単剤療法処置の何れかにより制御されない新規遺伝子を制御するか否か、および／または単剤療法によっても影響を受ける遺伝子をより強く制御するか否かを判定するために行った。

動物、収容および食餌
雄ＡＰＯＥ^＊３Ｌｅｉｄｅｎ．ＣＥＴＰトランスジェニックマウス（９〜２１週齢）を入手して、ケージあたり２〜５匹のマウスを収容した。２４％ラードおよび１％（ｗ／ｗ）コレステロールを含有する高脂肪飼料をマウスに与えた。導入期間は高脂肪飼料で１５週間であった。第１６週に、４時間の絶食後、週齢、体重、血漿コレステロールおよびトリグリセリドに基づき、マウスを釣り合わせた。

治療群
群１：ＨＦＣ参照群処置開始
マウス（ｎ＝１５）に、第０〜１４週の実行中に高脂肪飼料を与えた。
群２：ＨＦＣ対照群
マウス（ｎ＝１５）に、第０〜２４週に高脂肪飼料を与えた。
群３：ＨＦＣ＋ＯＣＡ
マウス（ｎ＝１５）に、第１６〜２４週に１日１回、１０ｍｇ／ｋｇの用量でＯＣＡを加えた高脂肪飼料を与えた。
群４：ＨＦＣ＋低用量フェノフィブラート
マウス（ｎ＝１５）に、第１６〜２４週に１日１回、１０ｍｇ／ｋｇの用量でフェノフィブラートを加えた高脂肪飼料を与えた。
群５：ＨＦＣ＋高用量フェノフィブラート
マウス（ｎ＝１５）に、第１６〜２４週に１日１回、４０ｍｇ／ｋｇの用量でフェノフィブラートを加えた高脂肪飼料を与えた。
群６：ＨＦＣ＋ＯＣＡ＋低用量フェノフィブラート
マウス（ｎ＝１５）に、第１６〜２４週に、１０ｍｇ／ｋｇの用量でＯＣＡを加えた高脂肪飼料を１日１回、および１０ｍｇ／ｋｇの用量のフェノフィブラートを１日１回、与えた。
群７：ＨＦＣ＋ＯＣＡ＋高用量フェノフィブラート
マウス（ｎ＝１５）に、第１６〜２４週に、１０ｍｇ／ｋｇの用量でＯＣＡを加えた高脂肪飼料を１日１回および、４０ｍｇ／ｋｇの用量のフェノフィブラートを１日１回、与えた。
群８：固形飼料対照群
マウス（ｎ＝８）に第０〜２４週に固形飼料を与えた。

試験計画
１４週間にわたり、マウスに高脂肪固形飼料（ＨＦＣ）を与えた。ＨＦＣ食で１５週間後、週齢、体重、４時間絶食後の血漿コレステロールおよびトリグリセリドに基づき、ＨＦＣマウスを７つの群に釣り合わせた。ＯＣＡおよびフェノフィブラートの単独または併用で、第１５週から開始してマウスを処置し、非空腹状態で第２５週に屠殺した。屠殺の１週間前に、Ｄ_２Ｏのボーラスのｉ．ｐ．注射および続く飲用水への４％Ｄ_２Ｏの添加によって、マウスをＤ_２Ｏで標識した。心臓穿刺によって血漿（ＥＤＴＡ）を得て、−７０℃で保存した。肝臓の重量を測定し、４片の肝臓に分離し：１片（中葉）を１０％ホルマリン中で固定し（ＮＡＳＨおよび線維症組織学用）、３片（シニスターローブ（ｓｉｎｉｓｔｅｒ ｌｏｂｅ））を液体Ｎ_２中で瞬間凍結し、−７０℃で個々に保存した。

肝臓炎症スコア
炎症はＮＡＳＨの重要な特性である。炎症は、Ｌｉａｎｇ ｅｔ ａｌ．，ＰｌｏｓＯｎｅ ２０１４ Ｄｅｃ，９（１２）による手順に従いカテゴリーに分け、炎症細胞凝集体の数を定量的に分析することによってスコア化した。特に炎症のレベルは、１００ｘ拡大率（視野サイズ３．１ｍｍ２；５つの異なる視野の平均）を使用して視野あたりの炎症病巣の数を数えることによって評価した。

結果：ＡＰＯＥ^＊３−Ｌｅｉｄｅｎ．ＣＥＴＰマウスの炎症におけるＯＣＡ＋／−フェノフィブラートの効果の要約
ＮＡＳＨ飼料でのＡＰＯＥ^＊３−Ｌｅｉｄｅｎ．ＣＥＴＰマウスの炎症において、単独での、およびフェノフィブラート（１０および４０ｍｇ／ｋｇ）と併用した、ＯＣＡ１０ｍｇ／ｋｇの効果を調べた。低用量での薬物投与の１０週間後、ＯＣＡ（１０ｍｇ／ｋｇ）もフェノフィブラート（１０ｍｇ／ｋｇ）も、炎症細胞病巣の数を減少させなかった（図３Ａおよび３Ｂおよび表２）。一方、併用は、ビヒクル対照ならびに各単剤療法治療群と比較して、炎症を顕著に軽減させた。より高用量のフェノフィブラート（４０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）も、ビヒクル対照と比較して炎症を顕著に軽減させた。ＯＣＡとの併用時、それだけで高用量のフェノフィブラートが最大に近い効果を示したので、さらなる抗炎症効果は明らかではなかった。まとめると、ＯＣＡ＋低用量フェノフィブラートの併用での炎症の顕著な軽減（−６３％）が認められた。さらに、高用量のフェノフィブラートでの顕著な軽減（−７４％）およびＯＣＡとの併用での同等の軽減（−７９％）が認められた。表２および図３Ａおよび３Ｂを参照。

表２の結果から、ＯＣＡおよび高用量のフェノフィブラートの併用の効果が推進され、高用量のフェノフィブラートにより上限に到達することが示唆される。

ＲＮＡ単離および配列決定
以前に詳述されているように（Ｖｅｒｓｃｈｕｒｅｎら、２０１４）核酸抽出を行った。簡潔に述べると、ガラスビーズおよびＲＮＡｚｏｌ（Ｃａｍｐｒｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｖｅｅｎｅｎｄａａｌ，Ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）を使用して、個々の肝臓試料から全ＲＮＡを抽出した。Ｆｒａｇｍｅｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ（Ａｄｖａｎｃｅｄ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，ＵＳＡ）およびＲＮＡ６０００ Ｎａｎｏ Ｌａｂ−ｏｎ−ａ−ＣｈｉｐキットおよびＢｉｏａｎａｌｙｚｅｒ ２１００（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ａｍｓｔｅｌｖｅｅｎ，Ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）を使用して、ＲＮＡ濃度および量を決定した。全ての試料が質的な要件を満たし、これらをＲＮＡ配列決定手順で使用した。

試料を処理するために、ＮＥＢＮｅｘｔ Ｕｌｔｒａ Ｄｉｒｅｃｔｉｏｎａｌ ＲＮＡ Ｌｉｂｒａｒｙ Ｐｒｅｐ Ｋｉｔ ｆｏｒ Ｉｌｌｕｍｉｎａを使用した。試料調製は、プロトコール「ＮＥＢＮｅｘｔ Ｕｌｔｒａ Ｄｉｒｅｃｔｉｏｎａｌ ＲＮＡ Ｌｉｂｒａｒｙ Ｐｒｅｐ Ｋｉｔ ｆｏｒ Ｉｌｌｕｍｉｎａ」（ＮＥＢ＃Ｅ７４２０Ｓ／Ｌ）に従い行った。簡潔に述べると、オリゴ−ｄＴ磁気ビーズを使用して、ｍＲＮＡを全ＲＮＡから単離した。ｍＲＮＡの断片化後、ｃＤＮＡ合成を行った。配列決定アダプターのライゲーションおよび得られる生成物のＰＣＲ増幅のためにこれを使用した。Ｆｒａｇｍｅｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ（Ａｄｖａｎｃｅｄ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，ＵＳＡ）を使用して、試料調製後の量および収率を測定した。得られた生成物のサイズは予想サイズ分布と一致していた（３００〜５００ｂｐの間の広いピーク）。

製造者のプロトコールに従い、Ｉｌｌｕｍｉｎａ ＮｅｘｔＳｅｑ ２５００を用いたクラスター形成およびＤＮＡ配列決定を行った。試料あたりおよそ１５００万個のリードおよびリードあたり７５ｂｐを得るシングルエンドのリード配列決定プロトコールを使用して、データを生成させた。生データを生成させるために、Ｉｌｌｕｍｉｎａデータ分析パイプラインＲＴＡ ｖ２．４．１１を用いて、画像分析、塩基呼び出しおよび品質チェックを行った（^＊．ｆａｓｔｑ−ｆｉｌｅｓ）。

バローズ−ホイラー変換に基づいて短いリードアライナを使用して、参照配列ムス・ムスカルス（Ｍｕｓ ｍｕｓｃｕｌｕｓ）ＧＲＣｍ３８．ｐ３に対してリードをマッピングした。２％の初期設定ミスマッチ率（１５０塩基のリード中に３個のミスマッチ）を使用した。アライメントファイル（^＊．ｂａｍ−ｆｉｌｅｓ）中のマッピングされたリード位置に基づき、リードが転写物上にマッピングされた頻度を決定した。カウントをカウントファイルに保存し、これを下流ｍＲＮＡ−ｓｅｑ差次的発現分析に対するインプットとした。リードカウントをＲプラットフォーム内のＤＥＳｅｑパッケージ、統計学パッケージに読み込ませた。異なる試料に対してＲＮＡ−ｓｅｑデータを正規化し、ＲＮＡ−ｓｅｑデータに対する２つの条件の間で差次的に発現される遺伝子を見出し、各遺伝子の平均と分散との間の関係を推定するために、ＤＥＳｅｑを特別に開発した（Ａｎｄｅｒｓら、２０１３）。さらに、スケール因子が統計学的検定に容易に含まれるようにする。Ｐ＜０．０１の有意差に対する閾値を使用して、差次的に発現された遺伝子を同定し、Ｉｎｇｅｎｕｉｔｙ Ｐａｔｈｗａｙ Ａｎａｌｙｓｉｓ（ＩＰＡ）一式（２０１６にアクセス）を通じた経路分析に対するインプットとして遺伝子を使用した。

ＩＰＡソフトウェア（Ｋｒａｍｅｒら、２０１４）を使用して上流制御因子分析を行った。この分析は、観察された差次的遺伝子発現に基づいて、転写因子の活性化状態を判定する。この結果、ＩＰＡ知識基盤において、各転写因子に対して重複Ｐ−値および活性化ｚ−スコアが得られる。重複Ｐ−値は、転写因子の既知の標的遺伝子と実験で測定される差次的発現遺伝子との間の重複の有意性を示す。活性化ｚ−スコアは、特定の転写因子の活性化（陽性ｚ−スコア）または阻害（陰性ｚ−スコア）を示す。活性化ｚ−スコア＜−２または＞２は、経路または過程の有意な阻害または活性化を示す。

オミクスの結果
根底にある機序および経路への知見を得るために、処置マウスからの肝臓ｍＲＮＡ試料において、次世代配列決定を行った。根底にある機序および経路への知見を得るために、２つの分析を行った。

第１に、基準の経路分析のエンリッチメント解析から、ＯＣＡが一部の炎症過程を制御したことが明らかになった（図６Ａ）。この図は、−ｌｏｇ ｐ−値の関数として各経路をプロットする（参考までに、ｐ＜０．０５に対する変換値は１．３、ｐ＜０．０００１は４、ｐ＜０．０００００５については５．３であるなど）。ＯＣＡ単剤療法での制御経路は、ＴおよびＢ細胞兆候、白血球血管外漏出シグナル伝達、ナチュラルキラー細胞シグナル伝達などと関連した。低用量のフェノフィブラートは、これらの経路に対して効果がなかった。ＯＣＡを低用量のフェノフィブラートと組み合わせた場合、同じ経路の一部が強く制御された（Ｔヘルパー細胞、白血球血管外漏出シグナル伝達、パターン認識受容体、マクロファージにおけるＦＣ受容体介在性食作用およびファゴソーム形成におけるｉＣＯＳ−ｉＣＯＳＬシグナル伝達の場合）。さらに、何れかの薬剤単独により顕著に制御されなかった他の経路（例えば、コレステロール生合成ＩおよびＩＩ、脂肪酸ｂ酸化）は、併用によって制御された（図６Ｂ）。組織学的データと同じように、高用量のフェノフィブラートは、これらの経路においてロバストな効果があったが、ＯＣＡ同時投与によって促進されなかった。

白血球血管外漏出シグナル伝達に関与する経路の周辺でより詳細な分析を行った。白血球の血管外漏出は、ＮＡＳＨ（および他の疾患）における病理生理学的過程に対して必須である。これらの過程は、免疫監視のためのＴリンパ球の遊走、急性および慢性炎症反応中の活性化リンパ球および顆粒球の動員および造血前駆細胞のホーミングおよび動員を含む。実験からの高脂肪飼料でマウスを維持することの影響から、遺伝子を顕著に上方制御し、下方制御したこれらの過程が説明される。表３は、標準的な固形飼料で維持したマウスと比較した、高脂肪飼料で維持したマウスでの白血球血管外漏出シグナル伝達における高脂肪飼料の影響を記載し、高脂肪飼料に対する併用療法の影響も記載する。

接着分子間の一過性の弱い相互作用が介在する内皮細胞にわたる白血球のローリングを含むいくつかの個別の段階で、内皮を横切る白血球の遊出および血管外漏出が起こる。続いて、緩く付着した白血球は内皮の近接近に存在するので、内皮の先端面上で提示される走化性サイトカインにより活性化される。次に、活性化白血球が拡散し、内皮形成ドッキング構造に固く付着し、最終的には内皮細胞の間の細胞間の間隙を通じて下層の組織に遊走する。

ＯＣＡの投与は、白血球内（ＷＡＰ、Ｒａｃ２、ＲＡＳＧＲＰ１、Ｖａｖ、ＰＫＣ、ＰＩ３Ｋ、ＥＲＭ、ＩＴＧＡＬおよびＰＳＧＬ−１）ならびに内皮細胞内（ＶＣＡＭ１、ＰＩ３Ｋ、ＥＲＭ、ＮＯＸ、ＣＹＢＡ、ＰＫＣ、ＮＣＦ１および２）の炎症カスケードのこの過程に関与する多くの遺伝子を下方制御する。これらの経路内の遺伝子制御は、低用量のフェノフィブラート単独の投与後に明白ではなかった。

これらの経路を制御することにおいて無効であったフェノフィブラートの用量とＯＣＡを組み合わせた場合、ここで複数のさらなる遺伝子が制御され、これは相乗効果を指す。白血球内で、これらのさらなる遺伝子には、ＣＤ４３、ＰＳＧＬ−１、ＣＸＣＲ４、ＩＴＧＡＭ、ＩＴＧＢ２、Ｒａｐ１、ＩＴＧＡ４が含まれた。内皮細胞内で、これらのさらなる遺伝子には、ＩＣＡＭ１、ＲｈｏＧＡＰ、ＶＡＳＰ、ＮＣＦ４、ＩＴＧＡＭ、ＩＴＧＢ２、ＩＴＧＡ４およびＩＣＡＭ−１が含まれた。

上記のように、高用量のフェノフィブラートは、ＯＣＡ同時投与で促進されなかったこの経路において多くの効果があった。全ての続く分析は、低用量単剤療法および併用療法（ＯＣＡ１０ｍｇ／ｋｇ＋／−フェノフィブラート１０ｍｇ／ｋｇ）に焦点を置いた。

第２の分析において、低用量併用と各個々の単剤療法との間で差次的に制御される遺伝子を比較した。これは、ビヒクル群に対する比較に焦点を置いた第１の遺伝子発現分析（上記）とは異なり；以下の分析は、各単剤療法を併用療法と比較する。ベン図（図７Ａ）は、ＯＣＡが１０９個の特有に制御される遺伝子を有し、フェノフィブラートが、９２個の特有に制御される遺伝子および、６個の共通で制御される遺伝子を有することを示す。併用療法は、ＯＣＡとの場合は５１７個の重複遺伝子を制御し、フェノフィブラートとの場合は７５個を制御し、５個の遺伝子が全てに共通であった。注目すべきことに、併用療法は全部で９１２個の特有の遺伝子を制御した。続く経路エンリッチメントは、併用療法の遺伝子が関与する生物学的過程を強調する（図７Ｂ）。

続く経路分析は両者とも、白血球血管外漏出（例えば、上記のとおりであるが、この時間比較は併用療法と各単剤療法との間のものである。に対して行った。白血球血管外漏出に対して、併用と各単剤療法との比較から、併用処置マウスにおいて組織学的に記される観察される抗炎症性変化の促進と一致する多くの特有に制御される遺伝子があったことが明らかになった（表４）。

ＮＡＳＨにおける炎症から線維症への進行および肝臓線維症／ＨＳＣ経路が併用療法において顕著に制御されるものとして現れたという所見を考慮して、発明者らは、ＨＳＣにおける経路も試験した。単剤療法と比較した場合、フェノフィブラート単独と対比して併用療法においてより多くの遺伝子が制御され、ＯＣＡと対比して併用療法において制御される遺伝子がより少ないことは明らかである。言い換えると、これらの線維化経路に関して、両剤の間で明らかに相互作用があるが、併用療法のＯＣＡ部分はこれらの効果をより強く推進し得る。

解釈および関連性
線維症および炎症を防ぐことにおけるＦＸＲ活性化の重要性は、進行性加齢性損傷および炎症を伴い（Ｙａｎｇ ２００７）炎症遺伝子の発現上昇を呈する（Ｋｉｍ ２００７）ＦＸＲノックアウトマウスからの肝臓において明らかとなる。これらの報告と一致して、ＯＣＡは、ＨｅｐＧ２細胞およびマウス初代肝細胞において抗炎症特性を発揮した。ＯＣＡで予め処置し、次いで炎症誘発性刺激に曝露したＨｅｐＧ２細胞は、ＴＮＦ−α ｍＲＮＡレベル、シクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）誘導およびＴＮＦ−α−刺激型誘発性一酸化窒素シンターゼ（ｉＮＯＳ）発現の５０％〜６０％の低下を示した。同様に、ＯＣＡ処置した初代肝細胞は、炎症誘発性刺激に反応して、ｉＮＯＳおよび単球化学誘引物質タンパク質−１（ＭＣＰ−１）遺伝子発現（４０％〜５０％）の誘導鈍化を示した（Ｗａｎｇ ２００８）。細胞遊走の機序におけるＯＣＡの効果は直接試験していないが、ＯＣＡは、ＩＬ−１βにより誘導されるｉＮＯＳまたはＣＯＸ−２産生を阻害し、薬理学的に誘導されるラット大動脈平滑筋細胞遊走を消失させた（Ｌｉ ２００７）。炎症性腸疾患の２種類の動物モデル（ＤＳＳおよびトリニトロベンゼンスルホン酸）の腸組織（Ｇａｄａｌｅｔａ ２０１１）およびＩ型糖尿病のラットモデルの腎臓（Ｗａｎｇ ２０１０）において、ＯＣＡによる炎症性浸潤物の同様の阻害が明らかになった。したがって、ＯＣＡによる抗炎症効果の促進の所見から、フェノフィブラートとＯＣＡの併用での遺伝子発現の変化が、多くの疾患状態において炎症および炎症細胞遊走の阻害を促進し得ることが示唆される。

実施例３：レプチン欠損ｏｂ／ｏｂマウスにおける食餌誘発性ＮＡＳＨ
この実験は、雄レプチン欠損ｏｂ／ｏｂ−ＮＡＳＨマウスにおける線維症ステージ（生検前と生検後）に対する、ＯＣＡおよびアトルバスタチン単独および併用での８週間の処置の効果を評価するために行った。

動物、収容および食餌
ＪａｎＶｉｅｒ，Ｆｒａｎｃｅから雄Ｌｅｐ^ｏｂ／Ｌｅｐ^ｏｂマウス（５週齢）を購入した。順化および食餌誘発期中、温度制御状態（２２±１℃；５０±１０％相対湿度）で１２：１２の明暗サイクル下（３ＡＭ〜３ＰＭに照明）で特別注文のキャビネットにおいて１ケージあたり５匹ずつ、マウスを群で収容した。食餌誘発および試験期間を通じて、特別注文ＮＡＳＨ飼料（Ｓ８１８９，Ｓｓｎｉｆｆ，Ｇｅｒｍａｎｙ）（４０％脂肪、４０％炭水化物（２０％フルクトース）および２％コレステロール）または通常のげっ歯類固形飼料（ｏｂ／ｏｂ−ＣＨＯＷ）（Ａｌｔｒｏｍｉｎ １３２４，Ｂｒｏｇａａｒｄｅｎ，Ｄｅｎｍａｒｋ）および水道水をマウスに自由摂取させた。介入前に全部で１８週間、その飼料でこれらの動物を維持し、試験期間を通じてその飼料のままにした。術後回復期中および試験期間を通じて動物を１匹ずつ収容した。

処置群
群１：Ｌｅｐ^ｏｂ／Ｌｅｐ^ｏｂ−ＮＡＳＨビヒクル
マウス（ｎ＝１０）に、第０週〜第８週に１日１回、５ｍＬ／ｋｇの体積でビヒクル（０．５％ＣＭＣ）を経口投与した。
群２：Ｌｅｐ^ｏｂ／Ｌｅｐ^ｏｂ−ＮＡＳＨ ＯＣＡ
マウス（ｎ＝１０）に、第０週〜第８週に１日１回、３０ｍｇ／ｋｇの用量でＯＣＡを加えたビヒクルを経口投与した。
群３：Ｌｅｐ^ｏｂ／Ｌｅｐ^ｏｂ−ＮＡＳＨ
マウス（ｎ＝１１）に、第０週〜第８週に１日１回、１０ｍｇ／ｋｇの用量でアトルバスタチンを加えたビヒクルを経口投与した。
群４：Ｌｅｐ^ｏｂ／Ｌｅｐ^ｏｂ−ＮＡＳＨ ＯＣＡ＋アトルバスタチン
マウス（ｎ＝９）に、１日１回、３０ｍｇ／ｋｇの用量のＯＣＡおよび３０ｍｇ／ｋｇの用量のアトルバスタチンとの組み合わせを加えたビヒクルを経口投与した。

試験への割り当て、層別無作為化およびベースライン監視
食餌誘発の１５週間後（試験開始３週間前）、線維症および脂肪肝の肝臓進行の評価のために、および肝臓線維症ステージ評価のために、肝臓生検を得た。第−１週に、肝臓線維症ステージ、脂肪肝スコアおよび体重に従い、処置群への層別無作為化を行った。

生検前手順
手術日に、１００％酸素中イソフルラン（２〜３％）でマウスに麻酔をかけた。正中線で腹部を小さく切開し、肝臓の左側の葉を露出させた。肝臓組織の円錐型の楔（約１００ｍｇ）をこの葉の末端部分から切除し、重量を測定し、組織学用に４％パラホルムアルデヒド（ＰＦＡ）中で固定した。双極凝固（ＥＲＢＥ ＶＩＯ １００電気手術器）を用いて肝臓の切断面を直ちに電気的に凝固させた。肝臓を腹腔に戻し、腹部を縫合し、ステープラーで皮膚を閉じた。手術日に、水分補給のためにマウスに温めた塩水（０．５ｍＬ）を与えた。術後回復のために、手術日および術後第１および２日に、カルプロフェン（５ｍｇ／ｍＬ〜０．０１ｍＬ／１０ｇ）およびエンロフロキサジン（ｅｎｒｏｆｌｏｘａｚｉｎ）（５ｍｇ／ｍＬ〜１ｍＬ／ｋｇ）を皮下投与した。

脂肪肝および線維症の肝臓レベルの評価のための予備スクリーニング
組織学的評価のための肝臓生検標品：４％ＰＦＡ中で一晩保存後、自動化されたＭｉｌｅｓ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｔｉｓｓｕｅ−ＴＥＫ ＶＩＰ Ｔｉｓｓｕｅ Ｐｒｏｃｅｓｓｏｒにて、肝臓生検をパラフィン中で一晩浸透させ、続いてパラフィンブロック中に包埋した。５匹の異なる動物からの生検を１つのブロック上に包埋した。次いでブロックの形を整え、Ｍｉｃｒｏｍ ＨＭ３４０Ｅ Ｍｉｃｒｏｔｏｍｅ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）上で２個の３μｍ切片になるように切った（シリウスレッド用に１個およびＨ＆Ｅ染色用に１個）。２個のブロックを１枚のスライド上に置き、１枚のスライドあたり全部で１０検体の生検が１０匹の異なる動物に相当するようにした。切片を一晩乾燥させた。 Ｋｌｅｉｎｅｒら（２００５）（以下参照）により概説されるように、処置群への層別化および無作為化のための線維症ステージの評価を行った。

ベースラインおよび最終血漿バイオマーカー
ベースライン時および処置の第８週に、朝（午前７〜８時）、トリグリセリドの非空腹（摂食）血漿レベルを測定するために血液試料を得た。覚醒状態で（切れ込みを入れることにより）尾静脈から血液試料を回収した。血液採取約１８時間前に最後の薬物用量を投与した。血液採取後にマウスに再び餌を与えた。

屠殺および剖検
非空腹状態で第８週に動物を屠殺した。屠殺約１８時間前に最後の薬物用量を投与し、屠殺前には動物に薬物投与を行わない。ＣＯ_２／Ｏ_２によって、麻酔（イソフルラン）中に動物を誘導し、腹腔を開き、最後の血漿の回収のために心臓の血液を得た。剖検時、肝臓全体を摘出し、重量を測定した。左側の葉からの生検を切り取り、組織学および生化学的分析用に４％ＰＦＡ中で固定した。中葉を小片に細切し、生化学的分析（ＴＧ）のために液体窒素中で瞬間凍結した。続いて、後の任意選択の組織学用に残存肝臓組織を４％ＰＦＡ中で固定した。

肝臓組織処理
試験前生検：試験開始のおよそ３週間前に、肝臓組織の円錐型の楔（約１００ｍｇ）をこの左側葉の末端部分から切除し、重量を測定し、すぐに４％ＰＦＡ中に入れた。

最後の肝臓組織：処置の８週間後、肝臓全体を摘出し、重量を測定し、左側の葉から肝臓生検を切り取り、すぐに４％ＰＦＡ（約１５０〜２００ｍｇ）中に入れる。ＴＧ（約１００ｍｇ）に対して、およびＴＣ（約５０ｍｇ）に対して、中葉の小片をクライオチューブ（ＲＮＡｓｅｑ）（約１００ｍｇ）およびＦａｓｔＰｒｅｐチューブ中で瞬間凍結する。

組織学のための固定、包埋および切片：４％ＰＦＡ中で一晩固定した後、自動化されたＭｉｌｅｓ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｔｉｓｓｕｅ−ＴＥＫ ＶＩＰ Ｔｉｓｓｕｅ Ｐｒｏｃｅｓｓｏｒにて、肝臓生検をパラフィン中で一晩浸透させ、続いてパラフィンブロック中に包埋した。５匹の異なる動物からの生検を１つのブロック中に包埋した。ブロックの形を整え、Ｍｉｃｒｏｍ ＨＭ３４０Ｅ Ｍｉｃｒｏｔｏｍｅ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）上で１ブロックあたり２枚の３μｍ切片を作製した。２個の異なるブロックからの１枚の切片を１枚の対象スライド（ｏｂｊｅｃｔ ｓｌｉｄｅ）上に置き、上記で概説されるようにスライド１枚あたり全部で生検が１０検体となるようにした。

線維症ステージ
Ｋｌｅｉｎｅｒおよび共同研究者（Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｃｏｒｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ，Ｋｌｅｉｎｅｒ ｅｔ ａｌ，Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ４１；２００５）で概説される臨床基準の使用による線維症ステージの評価のために、左側の葉からの肝臓生検前および生検後組織を回収し、これを以下の表５で再現した。図４は、線維症スコア化におけるＯＣＡおよびアトルバスタチン単独および併用の効果を記載する。ＯＣＡおよびアトルバスタチンの併用は、ビヒクルから有意ではないものの（ｐ値＝０．０９）、線維症スコアを低下させる傾向を示す。

血漿トリグリセリド
トリグリセリドレベル：リチウム−ヘパリンチューブに１００μＬの血液を回収した。血漿を分離し、試料を分析まで−８０℃で保存した。製造者の説明書に従い、市販のキット（Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ，Ｇｅｒｍａｎｙ）とともに自動分析装置Ｃｏｂａｓ Ｃ−１１１を使用して、１点測定（ｓｉｎｇｌｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｓ）でトリグリセリドレベルを測定した。図５Ａおよび５Ｂで示されるように、ＯＣＡおよびアトルバスタチンの併用によって、統計学的に有意にトリグリセリドレベルを低下させた。

実施例４：肝細胞のサンドイッチ培養
この実験は、ヒト肝細胞においてコラーゲン合成を変化させる能力を調べるため、ＰＰＡＲアゴニストまたはスタチンと併用したＯＣＡの効果を評価するために行う。

試薬および溶液
適切な細胞培養培地は、ウェイマウスＭＢ−７５２／１、ハムＦ１２、ＲＰＭＩ１６４０、ダルベッコ改変イーグル培地、ウィリアムス培地Ｅ、リーボビッツＬ１５および改変チー（Ｃｈｅｅ）培地を含む。ＩＶ型コラゲナーゼ、Ｉ型コラーゲン、パーコール、培地および追加物質を培地に添加し（例えば、血清、抗生物質、アミノ酸、ＤＥＸなどのホルモン、インスリンおよび成長因子）、灌流緩衝液および他の溶液は市販されていたか、または市販の材料から調製した。サンドイッチ肝細胞培養において、他のタイプのコラーゲン（ＩＩ〜ＩＶ型）、ラミニン、フィブロネクチンおよびヘパリン硫酸プロテオグリカンを使用し得る。しかし、ＩおよびＩＶ型コラーゲンがフィブロネクチンおよびラミニンよりも優れていたことが示されている。

肝細胞の単離
肝細胞を単離するために、２段階インサイチューコラゲナーゼ灌流法を利用する。簡潔に述べると、雌ルイスラットから肝細胞を単離する。動物に麻酔をかける。インサイチューで門脈を通じて灌流緩衝液で最初に肝臓を灌流する。肝臓に入れる前に灌流液を平衡化する。続いて、肝臓に対して灌流緩衝液中でコラゲナーゼを灌流させる。次いで、肝臓を解体し、氷冷灌流緩衝液に移す。肝臓カプセルを引き裂き、得られた細胞懸濁液をろ過する。遠心により細胞ペレットを回収し、再懸濁する。パーコールを懸濁液に添加し、パーコール密度遠心技術を使用して肝細胞を単離する。混合物を遠心し、細胞ペレットを培地で２回洗浄する。トリパンブルー排除によって肝細胞生存能を判定する。あるいは、新鮮単離肝細胞の代わりに凍結保存肝細胞を使用し得る。

肝細胞のサンドイッチ培養
コラーゲン被覆組織培養プレート上で単離肝細胞を培養し、血清、ペニシリン、ストレプトマイシン、上皮増殖因子、インスリン、グルカゴンおよびヒドロコルチゾンを加えた培地中で維持する。Ｉ型コラーゲン溶液および培地を混合することによってコラーゲンゲル化溶液を調製する。ゲル化溶液で組織培養プレートをコーティングし、ゲル形成を促進するために３７℃で温置する。適正な密度で肝細胞を播種し、３７℃で維持する。２４時間ごとに培地を交換する。

サンドイッチ系の場合、１日培養後、細胞上にさらなるコラーゲンゲル溶液を分配する。培地を慎重に除去し、コラーゲンゲルの第２の層をプレート全体に均一に広げるようにする。培地交換前に、培養プレートを３７℃で温置してゲル化させて第２のゲル層を付着させる。培地を毎日交換する。さらなる分析のために、培地試料を−２０℃で保存する。

ゲル化コラーゲンの層の間で培養した肝細胞は、三次元立方体状形態およびインビボで観察されたものと同様の細胞骨格タンパク質の分布を維持する。

毛細胆管ネットワーク形成の最適化
タウロコール酸蓄積および胆道排出を最適化するために、サンドイッチ肝細胞培養において、特定の培地、例えばウィリアムス培地Ｅおよびダルベッコ改変イーグル培地を使用し得る。

試験物品
試験しようとするＦＸＲアゴニストは、「ＯＣＡ」および６−エチルケノデオキシコール酸（６−ＥＣＤＣＡ）としても知られるオベチコール酸である。

試験しようとするＰＰＡＲ−アルファアゴニストには、クロフィブラート、ゲムフィブロジル、シプロフィブラート、ベザフィブラートおよびフェノフィブラート）のうち１つ以上が含まれる。

二重ＰＰＡＲ−アルファ／デルタアゴニストは、２−［２，６ジメチル−４−［３−［４−（メチルチオ）フェニル］−３−オキソ−１（Ｅ）−プロペニル］フェノキシル］−２−メチルプロパン酸である。

試験しようとするＰＰＡＲδ（デルタ）アゴニストはＧＷ５０１５１６である。

試験しようとするスタチン（ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤）には、アトルバスタチン（リピトール）、ロスバスタチン（クレストール）およびシンバスタチン（ゾコール）が含まれる。

実施例５：脂質プロファイルにおける試験物品の個々の投与の効果の評価
５種類の試験物品、ＦＸＲアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、二重ＰＰＡＲ−アルファ／デルタアゴニスト（またはあるいはＰＰＡＲ−アルファアゴニストおよびＰＰＡＲ−デルタアゴニストを一緒に）およびスタチンの潜在力を評価して、ヒト肝細胞においてコレステロール合成および脂質プロファイルを変化させる能力を決定する。３つの異なる濃度の試験物品への７２時間の曝露後、サンドイッチ培養したヒト肝細胞（ＳＣＨＨ）において変化を評価する。投与溶液は培地中で毎日新鮮なものを調製し、ＳＣＨＨの投与は３日間毎日行う。実験は、Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ Ｃｅｒｔｉｆｉｅｄ（商標）Ｈｕｍａｎ Ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ（Ｎ＝１）の１つの（１）ロットを用いて２４ウェル方式で行う。３つ組データを提供するために、３つの（３）ウェルで各試験条件を行う（平均±標準偏差として表す。）。対照として溶媒対照処置プレートを使用し、ベースライン機能について評価する。試験期間の終わりに、内部標準を個々のウェルに添加し、続いて網羅的な脂質プロファイリングのために抽出試薬を添加する。試料を室温で１時間振盪し、遠心する。上清を窒素下で蒸発乾固させ、再懸濁し、分析する。

超高性能液体クロマトグラフィー（ＵＰＬＣ）および高分解能ＭＳを使用して網羅的な脂質プロファイリングを行う。広範囲の脂質極性および化学組成をカバーするために、ＥＳＩ＋およびＥＳＩ−モードでＵＰＬＣ−ＭＳ（Ｓｙｎａｐｔ Ｇ２ Ｉｏｎ−Ｍｏｂｉｌｉｔｙ ＱＴｏＦ）計測手段上にて、メチル−ｔ−ブチル試料抽出物を分析する。最初に、コレステロールの複数のエステルを含む脂質の大きなアレイ（５０００〜８０００）における化合物の効果を評価するためにＵＰＬＣを適用する。総コレステロールを測定するために、比色分析を行う。存在量に基づいて、殆どがグリセロリン脂質であるが、クラスのより多数を評価する。個々の脂質における潜在的な効果を同定するために、プロファイルを評価する。アッセイ保持時間、精密質量および断片化を使用して標準物質に対して特異的な脂質の同定を行い得る。結果に依存して、実施例６および７における評価のために特定の脂質または脂質クラスを同定し得る。２つのさらなるＴｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ Ｃｅｒｔｉｆｉｅｄ（商標）Ｈｕｍａｎ Ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓのロット（Ｎ＝２）で確認試験を繰り返す。

実施例６：脂質プロファイルにおける試験物品の二重併用の効果の評価
ＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニスト（または代替的には、ＰＰＡＲアルファアゴニストおよびＰＰＡＲデルタアゴニストとＦＸＲアゴニスト）のそれぞれとの、および／またはスタチンとのＦＸＲアゴニストの併用に対して、ヒト肝細胞においてコレステロール合成および脂質プロファイルを変化させるためのそれらの能力を評価する。評価する具体的な組み合わせは次のとおりである：
・ＦＸＲアゴニストとＰＰＡＲ−アルファアゴニスト
・ＦＸＲアゴニストとＰＰＡＲ−デルタアゴニスト
・ＦＸＲアゴニストとＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニストおよび／またはＦＸＲアゴニストとＰＰＡＲ−アルファアゴニストおよびＰＰＡＲ−デルタアゴニスト
・ＦＸＲアゴニストとスタチン

３つの異なる濃度の試験物品への曝露７２時間後にサンドイッチ培養ヒト肝細胞（ＳＣＨＨ）において変化を評価する。培地中で毎日新鮮な投与溶液を調製し、ＳＣＨＨの投薬は３日間にわたり毎日行う。Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ Ｃｅｒｔｉｆｉｅｄ（商標）Ｈｕｍａｎ Ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ（Ｎ＝１）の１つの（１）ロットを使用して、２４ウェル方式で実験を行う。３つ組データを提供するために、３つの（３）ウェルで各試験条件を行う（平均±標準偏差として表す。）。試料を調製し、実施例５で詳述するように、網羅的な脂質プロファイリングについて分析する。脂質プロファイルおよびコレステロール合成の変化を実施例２の個々の投与からの効果と比較する。

実施例７：脂質プロファイルにおける試験物品の三重併用の効果の評価
ＦＸＲアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニスト、ＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニスト（またはＰＰＡＲ−デルタアゴニストと組み合わせたＰＰＡＲ−アルファアゴニスト）および／またはスタチンの三重併用に対して、ヒト肝細胞においてコレステロール合成および脂質プロファイルを変化させるためのそれらの能力を評価する。３つの異なる濃度での試験物品への７２時間の曝露後にサンドイッチ培養ヒト肝細胞（ＳＣＨＨ）において変化を評価する。培地中で毎日新鮮な投与溶液を調製し、ＳＣＨＨの投薬は３日間にわたり毎日行う。Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ Ｃｅｒｔｉｆｉｅｄ（商標）Ｈｕｍａｎ Ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ（Ｎ＝１）の１つの（１）ロットを使用して、２４ウェル方式で実験を行う。３つ組データを提供するために、３つの（３）ウェルで各試験条件を行う（平均±標準偏差として表す。）。試料を調製し、実施例２で詳述するように、網羅的な脂質プロファイリングについて分析する。脂質プロファイルおよびコレステロール合成の変化を実施例２の併用投与からの効果と比較する。評価する具体的な組み合わせは次のとおりである：
・ＦＸＲアゴニストとＰＰＡＲ−アルファアゴニストおよびスタチン
・ＦＸＲアゴニストとＰＰＡＲ−デルタアゴニストおよびスタチン
・ＦＸＲアゴニストとＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニスト（または、代替的に、ＰＰＡＲ−アルファアゴニストおよびＰＰＡＲ−デルタアゴニスト）およびスタチン

試料を調製し、実施例４で詳述するように網羅的脂質プロファイリングについて分析する。脂質プロファイルおよびコレステロール合成の変化を実施例４および５で投与された組み合わせからの効果と比較する。

実施例８：動物実験
動物
２２℃で１２：１２時間の明暗サイクルで標準的なケージに動物を個々に収容する。雄Ｃ５７ＢＬ／６マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｂａｒ Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ）に対して脂肪に富む飼料（４０％ｋｃａｌ、Ｐｒｉｍｅｘ部分的硬化植物油ショートニング）、フルクトース（２２ｗｔ％）およびコレステロール（２ｗｔ％）（Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｉｅｔｓ，Ｎｅｗ Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ，ＮＪ、ｃａｔ．ｎｏ．Ｄ０９１００３０１）を自由に摂取できるようにする。対照飼料としてフルクトースまたはコレステロール不含の低脂肪飼料（１０％ｋｃａｌ；以後ＬＦＤと呼ぶ。）を使用する（Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｉｅｔｓ，ｃａｔ．ｎｏ．Ｄ０９１００３０４）。この有効なＬＦＤの使用によって、実験食を与える動物と比較するための、「正常」肝臓表現型を維持する対照マウス群が確立される。

処置群
対照ＨＦＤ：
対照ＬＦＤ：
ＨＦＤ＋ＦＸＲアゴニスト：
ＨＦＤ＋ＰＰＡＲα（すなわちフェノフィブラート、ゲムフィブロジル、ベゾフィブラートまたはシプロフィブラート）：
ＨＦＤ＋ＰＰＡＲδ（すなわちＧＷ５０１５１６）：
ＨＦＤ＋ＰＰＡＲα＋ＰＰＡＲδ：
ＨＦＤ＋二重ＰＰＡＲα／δ（すなわちＧＦＴ５０５）：
ＨＦＤ＋スタチン（すなわち、アトルバスタチン、シンバスタチン、ロスバスタチン）
ＨＦＤ＋ＦＸＲアゴニスト＋ＰＰＡＲα：
ＨＦＤ＋ＦＸＲアゴニスト＋ＰＰＡＲδ：
ＨＦＤ＋ＦＸＲアゴニスト＋ＰＰＡＲα＋ＰＰＡＲδ：
ＨＦＤ＋ＦＸＲアゴニスト＋二重ＰＰＡＲα／δ：
ＨＦＤ＋ＦＸＲアゴニスト＋スタチン：

組織学およびデジタル画像分析
屠殺時に、肝臓の右中葉および／または左側葉を切除し（各葉の≧５０％を回収）、１０％中性緩衝ホルマリン中で固定する（室温で少なくとも７日間）。組織端部および中央の両方の代表的な同様の大きさの切片を選択するために、肝臓組織を慎重に切除する。肝臓組織をパラフィン包埋し、切片にし（５μｍ）、載せる。形態学的分析のためにヘマトキシリンおよびエオシン染色を使用し、肝臓線維症の評価のためにマッソントリクロムおよびシリウスレッド染色を使用する。本試験に対しては病理学者が盲検で組織病理学的分析を行う。Ｋｌｅｉｎｅｒおよび共同研究者により概説される基準の使用によってＮＡＦＬＤおよびＮＡＳＨをスコア化する。線維症の定量的評価については、ｘ２０拡大率のＳｃａｎＳｃｏｐｅ ＣＳ全スライドスキャニングシステム（Ａｐｅｒｉｏ，Ｖｉｓｔａ，ＣＡ）の使用によってシリウスレッド染色切片全体をスキャンする。画像を抽出し、Ｉｍａｇｅ−Ｐｒｏ Ａｎａｌｙｚｅｒソフトウェア（ＭｅｄｉａＣｙｂｅｒｎｅｔｉｃｓ ｖ．６．２，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ）を用いてカラーキューブ（ｃｏｌｏｒ ｃｕｂｅ）に基づく方法によって組織全体からのシリウスレッド染色コラーゲンプロファイルを測定する。各動物からの３〜４個の代表的切片（さらなる切片が評価される総合的な肝臓線維症評価実験を除く。）から総コラーゲン染色（総面積の％として報告）を評価する。全ての組織学的分析を盲検で行う。

肝臓生検
１００％酸素中のイソフルラン（２〜３％）でマウスに麻酔をかける。正中線の約０．５ｃｍ左に腹部を小さく切開し、肝臓の左側の葉を露出させる。肝臓組織の楔（約５０ｍｇ）をこの葉の末端部分から切除し、すぐにバイアルに入れ、液体窒素中で瞬間凍結する。楔型の吸収性ゼラチンスポンジ（ＧｅｌＦｏａｍ，Ｐｆｉｚｅｒ，ＮＹ）を肝臓の切り口に挿入する。止血が達成されて（一般的には１分以内）ゼラチンスポンジが生検部位によく付着したら、肝臓を腹腔に戻し、腹壁を縫合し、皮膚をステープルで留める。術後痛をコントロールするために、手術時にマウスにブプレノルフィン（０．０５ｍｇ／ｋｇ、皮下）の注射を１回行う。偽手術マウスに対して、肝臓において切除を行わないことを除き、同一の手順を行う。

血漿および血清分析
Ｏｌｙｍｐｕｓ ＡＵ４００ｅ Ｂｉｏａｎａｌｙｚｅｒ（Ｏｌｙｍｐｕｓ Ａｍｅｒｉｃａ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ，Ｃｅｎｔｅｒ Ｖａｌｌｅｙ，ＰＡ）を使用することによって、血漿グルコース、トリグリセリド、総コレステロール、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）およびアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）レベルを測定する。ＡＬＴおよびＡＳＴの測定のために、血漿試料をＰＢＳで１：１０希釈する。市販の電気化学発光キット（Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）を用いて、製造者の説明書に従い、総血漿アディポネクチンおよび空腹時血清インスリンを測定する。

総肝臓脂質およびコラーゲン含量の定量
Ｆｏｌｃｈら出典のプロトコールを使用して、肝臓から総肝臓脂質を抽出する。１０ｍＬの２：１クロロホルム−メタノール溶液中で凍結肝臓組織（約０．３ｇ）をホモジェナイズ処理する。脂肪不含ろ紙を用いてホモジェネートをろ過し、予め重量を測定した１５ｍＬガラスバイアルに漏斗で入れる。さらなる５ｍＬの２：１クロロホルム−メタノールを添加し、続いて２．５ｍＬの０．９％ＮａＣｌを添加する。１０℃で５分間、１，８００ｇでの遠心によって脂質を分離し、水層を廃棄し、脂質ペレットが乾燥するまでチューブに対して窒素をフラッシュする。脂質ペレットを含有するチューブの重量を再測定し、総肝臓の１ｇあたりの抽出総脂質を計算する。コラーゲンの酸加水分解によるヒドロキシプロリン残基の比色決定によって肝臓中の総コラーゲン含量を測定する（Ｑｕｉｃｋｚｙｍｅ，Ｌｅｉｄｅｎ，Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）。

タンパク質ブロットによる抽出可能なコラーゲン−１α１タンパク質の決定
肝臓の左側の葉から組織コア（５０〜１００ｍｇ）を回収し、液体窒素中で瞬間凍結し、処理まで−８０℃で保存する。プロテアーゼ阻害剤を含有する溶解緩衝液中で組織をホモジェナイズ処理する。ＢＣＡタンパク質アッセイキット（Ｐｉｅｒｃｅ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ）を用いて透明化上清のタンパク質濃度を測定する。還元４〜１２％Ｎｕｐａｇｅゲル（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）上で肝臓組織溶解液（約５０μｇ）を分離し、ニトロセルロース膜に移す。５０ｋＤａと６０ｋＤａマーカーとの間で膜を切り、５％ブロットでブロッキングする。上半分を抗コラーゲン−１％１（１：１，０００；ｃａｔ．ｎｏ．ＮＢＰ１−３００５４；Ｎｏｖｕｓ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ，Ｌｉｔｔｌｅｔｏｎ，ＣＯ）で探索し、コラーゲン−１％１タンパク質のＣＯＯＨ−末端テロペプチド部分を検出する。正規化のために、下半分を抗グリセルアルデヒド３−ホスフェートデヒドロゲナーゼ（ＧＡＰＤＨ，１：７，５００；ｃａｔ．ｎｏ．３６８３；Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｄａｎｖｅｒｓ，ＭＡ）で探索する。ホースラディッシュペルオキシダーゼ抗ウサギ抗体との温置後、タンパク質発現を高感度化学発光（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ）で検出し、ＦｌｕｏｒＣｈｅｍ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓａｎｔａ Ｃｌａｒａ，ＣＡ）で濃度測定を行う。コラーゲン−１α１の濃度測定分析は、グリコシル化型または部分的に処理されたコラーゲン−１α１タンパク質に対応する、１４０ｋＤａ成熟タンパク質ならびに僅かに大きいバンドの両方を含む。

肝臓遺伝子発現の変化
６ｍｍ組織くり抜きツール（ｃｏｒｉｎｇ ｔｏｏｌ）を用いて、または生検方法によって肝臓の左側の葉からの組織試料を回収し、液体窒素中で瞬間凍結し、処理するまで−８０℃で保存する。ＴＲＩ試薬（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して肝臓試料（約５０〜１５０ｍｇ）からの全ＲＮＡを抽出し、次いでＱｉａｇｅｎ ＲＮｅａｓｙ Ｐｌｕｓ Ｍｉｎｉキット（Ｑｉａｇｅｎ，Ｖａｌｅｎｃｉａ，ＣＡ）でさらに精製する。Ｂｉｏａｎａｌｙｚｅｒ ２１００（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｓａｎｔａ Ｃｌａｒａ，ＣＡ）上でＡｇｉｌｅｎｔ ６０００ナノキットを使用することによってＲＮＡの完全性を判定する。Ｈｉｇｈ Ｃａｐａｃｉｔｙ ｃＤＮＡ Ｒｅｖｅｒｓｅ Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ Ｋｉｔ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用することによってｃＤＮＡを調製する。ＡＢＩ Ｐｒｉｓｍ ７９００ＨＴ機器（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ，ＣＡ）上でＴａｑＭａｎ遺伝子発現アッセイオンデマンドおよびＵｎｉｖｅｒｓａｌ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）によって、遺伝子発現の変化を確認する。正規化のためにペプチジルプロリルイソメラーゼＡ（Ｐｐｉａ）およびＧａｐｄｈを使用して、相対的な閾値サイクル（ＣＴ）法によって、遺伝子発現の変化を計算する。遺伝子アレイについては、ＡＢＩ Ｐｍｒｉｓ ７９００ＨＴ Ｆａｓｔ Ｒｅａｌ−Ｔｉｍｅ ＰＣＲ Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用することによって、ｃＤＮＡ試料をＭｏｕｓｅ Ｆｉｂｒｏｓｉｓ ＲＴ２ Ｐｒｏｆｉｌｅｒ ＰＣＲ Ａｒｒａｙｓ（ＰＡＭＭ−１２０Ｃ、ＲＴ２ ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ／ＲＯＸ ｑＰＣＲ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ；ＳＡＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）上で試験する。ＤａｔａＡｓｓｉｓｔ ｖ３．０ソフトウェア（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ／Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して、比較ＣＴ法によって、アレイ上での遺伝子発現の変化を計算する。Ｍｏｕｓｅ Ｆｉｂｒｏｓｉｓ ＲＴ２ Ｐｒｏｆｉｌｅｒ ＰＣＲ Ａｒｒａｙ中に含まれる５個のハウスキーピング遺伝子の中で、ヒポキサンチンホスホリボシルトランスフェラーゼ１（Ｈｐｒｔ）およびＧａｐｄｈは、ＤａｔａＡｓｓｉｓｔ ｖ３．０ソフトウェアにより計算される安定性スコアによれば、最も安定な発現を有する。選択された内因性対照遺伝子の平均は、各遺伝子の相対的発現を計算するための正規化因子として使用する。線維症アレイを用いることにより得られた結果を確認するために、アレイにより上方制御されるか、下方制御されるか、または不変であると判定される遺伝子の選択のためにＴａｑＭａｎ遺伝子発現アッセイを行う。

実施例９：臨床試験
７２週間にわたる経口投与オベチコール酸（１日２５ｍｇ）またはプラセボでの処置を評価するために、非肝硬変、非アルコール性脂肪性肝炎の患者において、多施設二重盲検比較の、平行群間無作為化臨床試験を行った。臨床施設および糖尿病状態により層別化された、コンピュータで作成した中央一括管理される手順を使用して、患者を１：１で無作為に割り当てた。主要転帰の目安は、ベースラインから処置終了まで線維症の悪化がない、非アルコール性脂肪性肝疾患活性スコアの少なくとも２点の低下として定義される、中央一括でスコア化された肝臓組織学における改善であった。２４週間でのアラニンアミノトランスフェラーゼの変化を測定した：アラニンアミノトランスフェラーゼの相対的変化−２４％、９５％ＣＩ−４５〜−３。

試験計画および参加者
次の試験対象患者基準：スクリーニング時点で１８歳以上、無作為化前９０日以内の、得られた肝臓生検に基づく明確なまたは境界非アルコール性脂肪性肝炎の組織学的エビデンスおよび組織学的非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）活性スコア４以上で、スコア（脂肪肝スコア０〜３、肥大０〜２および小葉炎症０〜３）の各構成要素においてスコアが１以上、に従い、患者を試験に登録する。登録施設において、登録の目的のための生検のグレードおよびステージ決定を行った。除外基準には、肝硬変、肝疾患の他の原因、大量アルコール摂取（女性の場合＞２０ｇ／日または男性の場合＞３０ｇ／日）または他の交絡条件が含まれる（下記参照）。

無作為化および遮蔽化
適正基準を満たす患者を経口オベチコール酸、２５ｍｇ１日１回、またはプラセボに無作為に割り当てた（１：１）。コード番号が貼られた同一容器中の同一錠剤としてオベチコール酸およびプラセボを与えた。患者、研究者、臨床現場スタッフおよび病理学者に対して処置の割り当てが分からないようにする。

手順
無作為化後、患者は、第２、４および１２週、および次いで第７２週の処置完了まで１２週間ごと、および次いで２４週間後に、治験来院のために再訪した。通例の生化学的試験および脂質、グルコースおよびインスリンの空腹時濃度の評価のために、これらの来院時に血液試料を得た。最初の評価時に体重、身長および腹囲および臀部周囲を測定し、中間の時間（ｉｎｔｅｒｉｍ ｔｉｍｅｓ）を指定した。全患者が、健康な食習慣、体重減少、運動および、適応があれば、高血圧、高コレステロール血症および糖尿病の管理に関する標準的な助言を受けた。

ＮＡＦＬＤ活性スコアの各構成要素の合意スコアリングのために群として、ベースラインおよび処置終了肝臓生検を中央一括評価し、線維症ステージを判定し、非アルコール性脂肪性肝炎、境界非アルコール性脂肪性肝炎の診断または非アルコール性脂肪性肝炎でないことについての診断を与えた。

試験対象患者基準および除外基準
次の除外基準の何れかに合致する患者は、登録資格がないものとみなした：１）スクリーニング前１年以内の３か月連続を超える、現在または過去の著しいアルコール摂取（著しいアルコール摂取は、平均で、女性では２０ｇ／日超、男性では３０ｇ／日超として定義した。）；２）施設の研究者の判断に基づき、アルコール摂取を確実に定量不能；３）無作為化前１年の２週間超にわたるＮＡＦＬＤと歴史上関連がある薬物の使用；４）以前のまたは計画的な肥満手術または手順；５）登録前６０日以内の８０．３ｍｍｏｌ／ｍｏｌ以上のＨｂＡｌｃとして定義される糖尿病のコントロール不良；６）肝臓生検における肝硬変の存在、７）血小板数＜１００ｘ１０９／Ｌ；８）次の異常の何れかの存在により定義されるような肝代償不全の臨床エビデンス：血清アルブミンが３２ｇ／Ｌ未満、ＩＮＲが１．３超、直接ビリルビンが２２．２μｍｏｌ／Ｌ超または食道静脈瘤、腹水もしくは肝性脳症の病歴；９）他の形態の慢性肝疾患のエビデンス：Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）の存在により定義されるようなＢ型肝炎、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）ＲＮＡまたは陽性Ｃ型肝炎抗体（抗ＨＣＶ）の存在により定義されるようなＣ型肝炎、適合する肝臓組織学により定義されるような進行中の自己免疫肝疾患のエビデンス、少なくとも２つの基準（主にアルカリホスファターゼ上昇に基づく胆汁うっ滞の生化学的エビデンス、抗ミトコンドリア抗体［ＡＭＡ］の存在および非化膿性破壊性胆管炎および小葉内胆管破壊の組織学的エビデンス）の存在により定義されるような原発性胆汁性肝硬変、原発性硬化性胆管炎、正常限界を下回るセルロプラスミンおよび適合する肝臓組織学により定義されるようなウィルソン病、肝臓組織学における診断特性により定義されるようなアルファ−１−アンチトリプシン（Ａ１ＡＴ）欠乏（正常未満のアルファ−１アンチトリプシンレベルにより確認、施設の研究者の裁量で排除）、肝臓生検上での３＋または４＋可染鉄の存在により定義されるようなヘモクロマトーシスまたは鉄過負荷の病歴、典型的な曝露および病歴に基づいて定義されるような薬物誘発性肝疾患、既知の胆管閉塞、肝臓癌の疑いもしくは証明またはＮＡＳＨ以外の何らかの他のタイプの肝疾患；１０）３００Ｕ／Ｌ超の血清アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）；１１）１７６．８μｍｏｌ／Ｌ以上の血清クレアチニン；１２）肝臓生検を安全に得ることが不可能；１３）胆道分流の病歴；１４）ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染に対して陽性であることが分かっている；１５）平均余命が５年未満と思われる活動性で重篤な医学的疾患；１６）スクリーニングの前年の、吸入または注射薬物を含む活性物質乱用；１７）妊娠、妊娠の計画、妊娠の可能性および試験中の有効なバースコントロールの使用を望まないことまたは授乳；１８）無作為化前３０日中でのＩＮＤ試験への参加；１９）施設の研究者の意見での、コンプライアンスを妨げるか、または試験完了を妨害する、何らかの他の状態；または２０）インフォームドコンセントを与えられないこと。

統計学的解析
マンテル・ヘンツェル検定を使用して主要転帰および二成分二次転帰（ｂｉｎａｒｙ ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ｏｕｔｃｏｍｅｓ）を解析し；処置群に対するベースラインから７２週間まで、および転帰のベースライン値までの連続転帰におけるＡＮＣＯＶＡモデル関連変化を使用して連続的二次転帰を分析した。ＳＡＳ（ＳＡＳ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ２０１１，Ｂａｓｅ ＳＡＳ ９．３ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ Ｇｕｉｄｅ）およびＳｔａｔａ（ＳｔａｔａＣｏｒｐ ２０１３，Ｓｔａｔａ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ Ｓｏｆｔｗａｒｅ：ｒｅｌｅａｓｅ １３）を使用して、統計学的解析を行った。

転帰
主要評価項目は、ベースラインから処置終了まで線維症の悪化がない、少なくとも２点のＮＡＦＬＤ活性スコアの低下として定義されるような中央一括でスコア化された肝臓組織学の改善であった。線維症の悪化は、ステージにおける何らかの数値の上昇として定義した。二次的な組織学的転帰には、非アルコール性脂肪性肝炎の解消、ＮＡＦＬＤ活性スコアの変化および、肝細胞膨張、脂肪肝、小葉および門脈の炎症および線維症に対する個々のスコアの変化が含まれる。線維症の改善は、ステージにおける何らかの数値的な低下として定義した。線維症ステージ１ａ、１ｂおよび１ｃは、分析目的で、ステージ１とした。他の二次転帰としては、血清アミノトランスフェラーゼおよびγ−グルタミルトランスペプチダーゼ濃度、インスリン抵抗性の評価の空腹時ホメオスタシスモデル（ＨＯＭＡ−ＩＲ）、身体測定値（体重、ボディーマスインデックス、ウエストとヒップの比率、胴回り）および健康関連のクオリティー・オブ・ライフスコアの、ベースラインから７２週間の変化が挙げられる。

実施例１０：データ解析
低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）レベルに対するスタチンの効果を評価するために、実施例９で得られたデータのサブ解析を行った。これらの二次解析の目的は、より重篤なＮＡＳＨの患者のサブグループにおける、プラセボに対するＯＣＡの効果を決定すること、および血清ＬＤＬコレステロールに対するスタチン同時使用の効果を評価することであった。次のように３つの群において対象データを評価した：
・群Ａ（ｎ＝６４、スタチンなし）には、ベースライン（第０日）でスタチンがなく、第７２週まで（第７２週を含む。）一連の試験を通じてスタチンを開始しない、オベチコール酸（ＯＣＡ）処置群の対象が含まれた。
・群Ｂ（ｎ＝４７、ベースラインスタチン）には、ベースラインでスタチンがあり、試験中、第７２週まで（第７２週を含む。）スタチンを継続したＯＣＡ処置群の対象が含まれた。
・群Ｃ（ｎ＝２３、新規スタチン）には、ベースラインでスタチンがなかったが、ベースライン後から第７２週まで（第７２週を含む。）の時間にスタチン処置を開始したＯＣＡ処置群の対象が含まれた。

群Ａ、ＢおよびＣにおけるＯＣＡ処置対象に対して次の計算を行った。
・ベースラインおよび第７２週に以下で列挙する平均および中央値の特徴を評価する。
〇臨床検査値：ＬＤＬ−Ｃ、高密度リポタンパク質コレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）、アラニンおよびアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、ガンマグルタミルトランスフェラーゼ
〇年齢
〇性別：％男性、％女性
〇％糖尿病
〇組織学：脂肪肝、膨張、炎症、線維症
・上記特徴のベースラインから第７２週の平均および中央値％変化を評価する。

結果
ベースラインでスタチンありの患者においてＯＣＡ処置中にＬＤＬコレステロールが上昇したが、レベルは、スタチンなしのプラセボ処置患者の値を超えなかった。ＯＣＡ処置中のスタチン開始によって、ＬＤＬがプレＯＣＡベースラインを下回るレベルに逆転された。図８で示されるように、ＯＣＡ関連ＬＤＬ上昇は、ＯＣＡ処置中のスタチン療法開始により逆転されると思われた。

Claims (34)

1. ＦＸＲアゴニストと、少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−デルタアゴニストおよび／またはＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニストと、任意選択により１つ以上の薬学的に許容可能な担体と、を含む医薬組成物。
2. 請求項１に記載の医薬組成物であって、前記少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファアゴニストがフィブラートである、医薬組成物。
3. 請求項２に記載の医薬組成物であって、前記フィブラートが、ベザフィブラート、シプロフィブラート、クロフィブラート、フェノフィブラート、ゲムフィブロジル、ビニフィブラート、クリノフィブラート、クロフィブリン酸、ニコフィブラート、ピリフィブラート、プラフィブリド、ロニフィブラート、テオフィブラートおよびトコフィブラートまたは薬学的に許容可能なその塩もしくはエステル、およびフェノキシ部分が任意選択により置換さるピペペリジン、４−ヒドロキシピペリジン、ピペリド−３−エンまたはピペラジンで置換される２−フェノキシ−２−メチルプロパン酸の誘導体から選択される、医薬組成物。
4. 請求項３に記載の医薬組成物であって、前記フィブラートが、ベザフィブラート、フェノフィブラートおよびクロフィブラートまたは薬学的に許容可能なその塩もしくはエステルから選択される、医薬組成物。
5. 請求項４に記載の医薬組成物であって、前記フィブラートがフェノフィブラートである、医薬組成物。
6. 請求項３に記載の医薬組成物であって、前記フィブラートが、２−［３−［１−（４−フルオロベンゾイル）−ピペリジン−４−イル］フェノキシル−２−メチルプロパン酸である、医薬組成物。
7. 請求項１に記載の医薬組成物であって、前記少なくとも１つのＰＰＡＲ−デルタアゴニストが、｛４−［（｛４−メチル−２−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−１，３−チアゾール−５−イル｝メチル）スルファニル］−２−メチルフェノキシ｝酢酸、｛２−メチル−４−［５−メチル−２−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−２Ｈ−［１，２，３］トリアゾール−４−イルメチルシルファニル］−フェノキシ｝−酢酸または［４−［［［２−［３−フルオロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル］−４−メチル−５−チアゾリル］メチル］チオ］−２−メチルフェノキシ］−酢酸または薬学的に許容可能なその塩である、医薬組成物。
8. 請求項１に記載の医薬組成物であって、前記少なくとも１つのＰＰＡＲ−アルファおよびデルタ二重アゴニストが、２−［２，６ジメチル−４−［３−［４−（メチルチオ）フェニル］−３−オキソ−１（Ｅ）−プロペニル］フェノキシル］−２−メチルプロパン酸、（２Ｓ）−２−メトキシ−３−［４−［２−（５−メチル−２−フェニル−４−オキサゾリル）エトキシ］−７−ベンゾチオフェニル］プロパン酸、Ｎ−［（４−メトキシフェノキシ）カルボニル］−Ｎ−｛４−［２−（５−メチル−２−フェニル−１，３−オキサゾール−４−イル）エトキシ］ベンジル｝グリシン、（２Ｓ）−２−エトキシ−３−［４−［２−（４−メチルスルホニルオキシフェニル）エトキシ］フェニル］プロパン酸または（２Ｓ）−２−エトキシ−３−［４−（２−｛２−メチル−５−［４−（メチルスルファニル）フェニル］−１Ｈ−ピロール−１−イル｝エトキシ）フェニル］プロパン酸または薬学的に許容可能なその塩である、医薬組成物。
9. スタチンをさらに含む、請求項１に記載の医薬組成物。
10. 請求項９に記載の医薬組成物であって、前記スタチンが、シンバスタチン、フルバスタチン、プラバスタチン、リバスタチン、メバスタチン、アトルバスタチン、セリバスタチン、ロバスタチン、ピタバスタチン、フルインドスタチン、ベロスタチン、ダルバスタチン、ロスバスタチン、ジヒドロコンパクチンおよびコンパクチンから選択される、医薬組成物。
11. ＦＸＲアゴニストと、少なくとも１つのスタチンと、任意選択により１つ以上の薬学的に許容可能な担体と、を含む医薬組成物。
12. 請求項１、９または１１に記載の医薬組成物であって、前記ＦＸＲアゴニストが、式Ａの化合物：
    
    または薬学的に許容可能なその塩もしくはアミノ酸抱合体（式中、
    Ｒ_１は水素または未置換Ｃ_１〜Ｃ_６アルキルであり；
    Ｒ_２は水素またはα−ヒドロキシルであり；
    Ｘは、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）_ｍＳＯ_３Ｈ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）_ｎＣＯ_２ＨまたはＯＳＯ_３Ｈであり；
    Ｒ_４はヒドロキシルまたは水素であり；
    Ｒ_７はヒドロキシルまたは水素であり；
    ｍは、１、２または３であり；
    ｎは、１、２または３である。）
    である、医薬組成物。
13. 請求項１２に記載の医薬組成物であって、Ｒ_１が未置換Ｃ_１〜Ｃ_６アルキルである、医薬組成物。
14. 請求項１３に記載の医薬組成物であって、Ｒ_１がメチル、エチルまたはプロピルである、医薬組成物。
15. 請求項１４に記載の医薬組成物であって、Ｒ_１がエチルである、医薬組成物。
16. 請求項１２に記載の医薬組成物であって、Ｘが、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）ＳＯ_３Ｈ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）ＣＯ_２Ｈ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）_２ＳＯ_３ＨおよびＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）_２ＣＯ_２Ｈから選択される、医薬組成物。
17. 請求項１６に記載の医薬組成物であって、ＸがＣ（Ｏ）ＯＨである、医薬組成物。
18. 請求項１２に記載の医薬組成物であって、ＸがＯＳＯ_３Ｈである、医薬組成物。
19. 請求項１２に記載の医薬組成物であって、Ｒ_４がヒドロキシルであり、Ｒ_７が水素である、医薬組成物。
20. 請求項１２に記載の医薬組成物であって、前記ＦＸＲアゴニストが式ＩまたはＩＡの化合物：
    
    または薬学的に許容可能なその塩もしくはアミノ酸抱合体（式中、
    Ｒ_１Ａは水素または未置換Ｃ_１〜Ｃ_６アルキルであり；
    Ｒ_２は水素またはα−ヒドロキシルであり；
    Ｒ_４はヒドロキシルまたは水素であり；
    Ｒ_７はヒドロキシルまたは水素である。）
    である、医薬組成物。
21. 請求項２０に記載の医薬組成物であって、Ｒ_１Ａが未置換Ｃ_１〜Ｃ_６アルキルである、医薬組成物。
22. 請求項２１に記載の医薬組成物であって、Ｒ_１Ａがメチル、エチルまたはプロピルである、医薬組成物。
23. 請求項２２に記載の医薬組成物であって、Ｒ_１Ａがエチルである、医薬組成物。
24. 請求項１２に記載の医薬組成物であって、前記ＦＸＲアゴニストが、式ＩＩまたはＩＩＡの化合物：
    
    または薬学的に許容可能なその塩もしくはアミノ酸抱合体（式中、
    Ｒ_１Ａは水素または未置換Ｃ_１〜Ｃ_６アルキルであり；
    Ｒ_２は水素またはα−ヒドロキシルであり；
    Ｒ_３はヒドロキシル、ＮＨ（ＣＨ_２）_ｍＳＯ_３ＨまたはＮＨ（ＣＨ_２）_ｎＣＯ_２Ｈであり；
    Ｒ_４はヒドロキシルまたは水素であり；
    Ｒ_７はヒドロキシルまたは水素であり；
    ｍは１、２または３であり；
    ｎは１、２または３である。）
    である、医薬組成物。
25. 請求項２４に記載の医薬組成物であって、Ｒ_１Ａが未置換Ｃ_１〜Ｃ_６アルキルである、医薬組成物。
26. 請求項２５に記載の医薬組成物であって、Ｒ_１Ａがメチル、エチルまたはプロピルである、医薬組成物。
27. 請求項２６に記載の医薬組成物であって、Ｒ_１Ａがエチルである、医薬組成物。
28. 請求項１２に記載の医薬組成物であって、前記ＦＸＲアゴニストが、
    
    または薬学的に許容可能なその塩もしくはアミノ酸抱合体である、医薬組成物。
29. 請求項１２に記載の医薬組成物であって、前記ＦＸＲアゴニストが、
    
    である、医薬組成物。
30. 必要とする対象に請求項１、９または１１に記載の医薬組成物を投与することを含む、ＦＸＲ介在性疾患もしくは状態または脂質レベル上昇に関連する状態を処置または予防する方法。
31. 請求項３０に記載の方法であって、前記疾患または状態が、原発性胆汁性肝硬変（ＰＢＣ）、原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）、門脈圧亢進症、胆汁酸下痢、慢性肝疾患、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、Ｃ型肝炎感染、アルコール性肝疾患、進行性線維症による肝損傷、肝臓線維症、循環器疾患および高脂血症から選択される、方法。
32. 請求項３０に記載の方法であって、前記状態が、抵抗性原発性胆汁性肝硬変；付随する肝臓機能検査上昇および高脂血症がある原発性胆汁性肝硬変；原発性硬化性胆管炎；非アルコール性誘発性脂肪性肝炎；Ｂ、Ｃ型肝炎またはアルコールに関連する慢性肝疾患；高脂血症が遺伝的構成要素を伴うかまたは伴わない原発性高脂血症である、高脂血症；および冠動脈疾患、脳血管動脈性疾患、末梢性血管疾患、大動脈瘤または頸動脈アテローム性動脈硬化症が関連する高脂血症から選択される、方法。
33. 必要とする対象に請求項１、９または１１に記載の医薬組成物を投与することを含む、線維症を阻害するかまたは食い止める方法。
34. 請求項３３に記載の方法であって、前記線維症が、肝臓線維症、腎臓線維症および腸線維症から選択される、方法。