JP2009536940A - 懸濁性ハイドロゲルとその製造方法 - Google Patents

Abstract

本発明は、微粒子および高分子量のヒドロキシプロピルメチルセルロース（以下ＨＰＭＣ）もしくはメチルセルロース（以下ＭＣ）により構成される透明性及び安定性に優れる懸濁性ハイドロゲルとその製造方法に関する。

Description

本発明は、微粒子および高分子量のヒドロキシプロピルメチルセルロース（以下ＨＰＭＣ）もしくはメチルセルロース（以下ＭＣ）により構成される透明性及び安定性に優れる懸濁性ハイドロゲルとその製造方法に関する。より詳しくは、サブミクロンオーダー又はナノオーダーの有効成分の微粒子懸濁溶液に高分子量のＨＰＭＣまたはＭＣ粉末を溶解することにより得られる懸濁性ハイドロゲル、又は、有効成分を含む微粒子懸濁溶液を調製し、その懸濁溶液中に高分子量のＨＰＭＣまたはＭＣ粉末を混合することにより得られる懸濁性ハイドロゲルと、その製造方法に関する。

薬物が水溶性もしくは投与可能な溶媒に可溶性の場合、薬物を適当な溶媒に溶解して溶液とし、目的とする部位にもしくはそこに達する経路で投与される。一方、薬物が水や他の投与可能な溶媒に難溶性の場合は、薬物を粉砕して微粒子にしたり、薬物の結晶状態を高エネルギー状態にしたりして、水または投与可能な溶媒に対する溶解性を向上させた上で懸濁溶液などにして投与する方法が用いられている。
薬物の薬効を効率よく発揮するためには、目的とする部位に、目的とする濃度で、目的とする時間、薬物を暴露する必要がある。しかし上記のような溶液や懸濁溶液では、目的とする部位での滞留性が低く、目的とする時間と濃度を得ることが困難と考えられる。そこで、局所滞留性向上や徐放性を目的として、しばしばゲル製剤や軟膏などの剤形が用いられている。特に点眼薬においては、瞬きや涙液により薬物が容易に流出されないように、ゲル製剤や軟膏などの剤形が種々検討されてきている（特許文献１〜６）。
これまで知られているゲル化技術としては、プルロニックの水性医薬組成物を熱によってゲル化させる方法や、カルボキシビニルポリマーの水性医薬組成物をｐＨ変化によりゲル化させる方法、ジェランガムやアルギン酸の水性医薬品組成物をイオン性物質の添加によりゲル化させる方法などがある。

微粒子のゲル製剤を調製するにあたっては、まず微粒子懸濁溶液を調製し、これにゲル化剤を加えてゲル化させる方法が簡便であると考えられる。しかしながら、微粒子懸濁溶液にゲル化剤を加えると、微粒子の表面エネルギーのバランスが崩れ、より低いエネルギー状態へ、すなわち凝集する(表面積を減らす)方向へとエネルギーが変化する。また、熱やｐＨ変化、イオン濃度の変化、塩の添加によっても微粒子は凝集し得る。微粒子が凝集すると改善した溶解性は低下することとなってしまう。従って、従来のプルロニック等の熱を利用したゲル化剤や、カルボキシビニルポリマー、ジェランガム等のアニオン性ゲル化剤を用いた場合、微粒子の凝集が問題である。
また、粒子径が１００ｎｍ以下となると、懸濁溶液の透明性は顕著に向上するが、ゲル化剤の添加により凝集が起こると、その懸濁溶液は白濁することもあった。眼科用途のゲル製剤は、前眼部への滞留性の向上の面から有用であるが、白濁したゲル製剤の場合、長時間の霧視を生じ、その使用が制限される。いずれにしても、微粒子懸濁溶液にゲル化剤を加えて簡便にゲル化させて、透明性及び安定性に優れたゲル製剤を得ることは困難であった。
特開２００３−９５９２４号公報 特開平６−１１６１３７号公報 特開２００５−２０６５９８号公報 特表２００１−５１８５１０号公報 特公平６−６７８５３号公報 特許第２７２９８５９号

したがって、微粒子懸濁溶液にゲル化剤を加えても、微粒子の凝集をほとんど起こすことなくゲル化させて、透明性及び安定性に優れたゲル製剤を得るためのゲル化剤、ゲル製剤およびその製造方法の開発が望まれていた。

本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、透明性の高い微粒子懸濁溶液に高分子量のＨＰＭＣまたはＭＣを添加することで、意外にも透明性の高いゲル製剤として懸濁性ハイドロゲルを製造できることを見出し、本発明を完成するに至った。

すなわち、本発明はサブミクロンまたはナノサイズの微粒子懸濁溶液に高分子量のＨＰＭＣまたはＭＣ粉末を溶解もしくは高分子量のＨＰＭＣまたはＭＣ溶液を混合することにより得られる懸濁性ハイドロゲルとその製造方法を提供する。さらに、本製造方法によれば、微粒子懸濁溶液において無菌ろ過法による滅菌が可能であり、無菌原薬を必要とせずに無菌のゲル製剤を製造できることが大きな産業上の利点でもある。

本発明は下記の各種の態様の発明を提供するものである。

［１］微粒子懸濁溶液、および高分子量のヒドロキシプロピルメチルセルロースもしくはメチルセルロースを含む、透明性及び安定性に優れる懸濁性ハイドロゲル。

［２］微粒子懸濁溶液が、微粒子と低分子量のヒドロキシプロピルメチルセルロースからなる懸濁溶液である、上記［１］の懸濁性ハイドロゲル。
［３］微粒子懸濁溶液が、水溶性高分子および界面活性剤から選択される少なくとも１種の化合物、酸水溶液または塩基水溶液、および医薬用化合物含有水溶液を混和して得られる水性懸濁溶液である、上記［１］の懸濁性ハイドロゲル。

［４］酸水溶液または塩基水溶液が酸水溶液であり、医薬用化合物が水溶性レバミピド塩である、上記［３］の懸濁性ハイドロゲル。

［５］水性高分子および界面活性剤から選択される少なくとも一種の化合物が低分子量のヒドロキシプロピルメチルセルロースである［３］または［４］の懸濁性ハイドロゲル。
［６］水性懸濁溶液が酸性である上記［３］から［５］のいずれかの懸濁性ハイドロゲル。

［７］上記［３］から［６］のいずれかに記載の水性懸濁溶液に、塩基を加えてｐＨ３〜７にし、分散および／または透析を行った後、ｐＨを５〜７、微粒子成分の濃度を０．５〜５％（重量／容量）に調整し、適宜濾過滅菌を行う処理を更に加えて調製した、上記［１］から［６］のいずれかの懸濁性ハイドロゲル。

［８］用途が点眼用である上記［１］から［７］のいずれかの透明性に優れた懸濁性ハイドロゲル。

［９］上記［３］から［６］のいずれかに記載の水性懸濁溶液に、塩基を加えてｐＨ３〜７にし、分散および／または透析を行った後、ｐＨを５〜７、微粒子成分の濃度を０．５〜５％（重量／容量）に調整し、得られた微粒子懸濁溶液を高分子量のヒドロキシプロピルメチルセルロースもしくはメチルセルロースと混合することからなる、懸濁性ハイドロゲルの製造方法。
［１０］上記［３］から［６］のいずれかに記載の水性懸濁溶液に、塩基を加えてｐＨ３〜７にし、分散および／または透析を行った後、ｐＨを５〜７、微粒子成分の濃度を０．５〜５％（重量／容量）に調整し、適宜ろ過滅菌処理を行い得られた無菌の微粒子懸濁溶液を、適宜ろ過滅菌処理又は高圧蒸気滅菌処理を行った無菌の高分子量のヒドロキシプロピルメチルセルロース溶液もしくはメチルセルロース溶液と無菌的に混合することからなる、無菌の懸濁性ハイドロゲルの製造方法。
［１１］上記［１］から［８］のいずれかに記載の懸濁性ハイドロゲルを乾燥して得られる、再ゲル化可能なフィルム。

上記のように調製されたゲルは、振とうした際に流動性を示すゾルになり、ある時間放置した時にゲルに戻る「チクソトロピー性」を示す。このことにより、経口剤、口腔内用剤、点眼剤、注腸剤等の投与時、ゲルが流動化することにより、容易に容器から排出される。投与後は再びゲル化することにより、目的とする部位に長時間滞留することが可能である。
本発明の懸濁性ハイドロゲル製剤の形態は、治療目的に応じて適宜選択できる。例えば、経口剤、口腔内用剤、眼科用剤、注腸剤等が挙げられる。
本発明の最も好ましい形態は、難溶性薬剤の眼科用製剤としての、透明性の高い懸濁性ゲル製剤の提供である。特に、本発明のゲルを透明性の高いレバミピド結晶の水性懸濁液に応用した場合、前眼部にレバミピド微粒子を滞留させる事が出来て、かつ、霧視を防止する事が可能な透明性の高い眼科用ゲル製剤を提供する事が可能になった。この製剤は、ドライアイ治療効果を有するレバミピドの前眼部への滞留性の向上、及び、前眼部の水分の維持という点で、ドライアイ治療製剤として極めて有用と考えることが出来る。
このゲル製剤は、０．２μｍのフィルターでろ過滅菌可能な微粒子懸濁溶液とＨＰＭＣまたはＭＣ溶液をそれぞれろ過滅菌後混合し、無菌製剤を調製することも可能であり、製造方法が簡略化され無菌原薬を必要としない点も大きな産業上の利点である。
また、本製剤は自然乾燥や凍結乾燥等により乾燥後、水を添加することで元のゲルへと戻すことも可能である。

本発明の微粒子懸濁溶液における微粒子成分は有機物、無機物いずれでもよく、好ましくは有機物が使用され、より好ましくは医薬用に用いられる化合物である。具体的には、レバミピド（化学名：２−（４−クロロベンゾイルアミノ）−３−［２（１Ｈ）−キノロン−４−イル］プロピオン酸）およびその塩などが挙げられる。ここで述べるレバミピドの塩は、例えば一般的な塩基である、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、トリエタノールアミン、トロメタノール（トリス［ヒドロキシメチル］アミノメタン）、メグルミン、ジエタノールアミン等と共に形成した塩が挙げられ、好ましくは水可溶性塩であり、例えば水酸化ナトリウムとの塩が挙げられる。レバミピドは上記塩の状態でも遊離酸でも使用可能であり、遊離酸の場合には当量以上の上記塩基と共に用いられる。なお、上記の酸の量は、少なくとも上記の塩基を中和するに必要量用いることが望ましい。

上記の化合物から微粒子への製造方法は、ボールミル、ビーズミル、ジェットミル、ハンマーミル等のようなブレイクダウン法やスプレードライや晶析等のようなビルドアップ法等のいかなるものでもよい。
本発明における微粒子の粒子径は１μｍ以下が使用可能であるが、好ましくは５００ｎｍ以下、より好ましくは２００ｎｍ以下が使用される。

本発明のより好ましい微粒子懸濁溶液は、水溶性高分子および界面活性剤から選択される少なくとも１種の化合物、酸水溶液又は塩基水溶液、および医薬用化合物含有水溶液を混和させることにより製造される。ここで微粒子懸濁溶液がレバミピド結晶の水性懸濁溶液の場合は、水溶性高分子および界面活性剤から選択される少なくとも１種の化合物、酸水溶液、および水溶性レバミピド塩含有水溶液を混和し、レバミピド結晶を晶析させることにより製造される。さらにｐＨを５〜７、レバミピドの濃度を０．５〜５％（重量／容量）に調整することによりレバミピド結晶の眼科用水性懸濁溶液を製造することができる。
上記レバミピド結晶を微粒子形態で晶析させるには、（ｉ）水溶性高分子および界面活性剤から選択される少なくとも１種類の化合物を含有する酸水溶液と、水溶性レバミピド塩含有水溶液とを混和するか、
（ｉｉ）酸水溶液と、水溶性高分子および界面活性剤から選択される少なくとも１種類の化合物を含有する水溶性レバミピド塩含有水溶液とを混和するか、あるいは
（ｉｉｉ）水溶性高分子および界面活性剤から選択される少なくとも１種類の化合物を含有する酸水溶液と、水溶性高分子および界面活性剤から選択される少なくとも１種類の化合物を含有する水溶性レバミピド塩含有水溶液とを混和してもよい。

本発明において用いられる水溶性高分子および界面活性剤は、微粒子成分の表面特性を得るために用いられ、高分子量のＨＰＭＣと相互作用しうるものであればいかなるものでも良く、ポリビニルアルコール、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、メチルセルロース（ＭＣ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール（マクロゴール）、ポリソルベート８０、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシビニルポリマー、水溶性キトサン、コンドロイチン硫酸ナトリウム、アルギン酸ナトリウム、ヒアルロン酸、ポリオキシエチレン［１６０］ポリオキシプロピレン［３０］グリコール、ポリオキシエチレン［１９６］ポリオキシプロピレン［６７］グリコール、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油４０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０、ステアリン酸ポリオキシル４０等が挙げられ、好ましくはＨＰＭＣとＭＣであり、特に好ましくは、低分子量のＨＰＭＣである。低分子量のＨＰＭＣの粘度グレード（２％（重量／容量）水溶液）は、好ましくは５０ｍｍ²／ｓ未満、より好ましくは１５ｍｍ²／ｓ以下、さらに好ましくは６ｍｍ²／ｓ以下である。また、複数の水溶性高分子や界面活性剤を混在させることも可能である。

本発明に係る酸水溶液の酸は、たとえば一般的な酸である、塩酸、硫酸、硝酸、炭酸、リン酸、クエン酸等が使用可能であるが、塩酸が好ましく使用される。また、本発明に係る塩基水溶液の塩基は、例えば前記の一般的な塩基と同じものが例示される。

本発明で使用される高分子量ＨＰＭＣまたはＭＣは溶液状態で微粒子懸濁溶液に混合しても、粉末状態で微粒子懸濁溶液に直接溶解してもよい。

本発明で使用される高分子量のＨＰＭＣにおいて、そのメトキシル含量及びヒドロキシプロポキシル含量は、それぞれ１０〜４０％（重量／重量）及び１〜２０％（重量／重量）が好ましく、より好ましくはそれぞれ１９〜３０％（重量／重量）及び４〜１２％（重量／重量）、さらに好ましくはそれぞれ２７〜３０％（重量／重量）及び４〜１２％（重量／重量）が使用される。そのＨＰＭＣの粘度グレード（２％（重量／容量）水溶液）は、好ましくは１５ｍｍ²／ｓ以上、より好ましくは２５ｍｍ²／ｓ以上、さらに好ましくは５０ｍｍ²／ｓ以上、特に好ましくは１５００ｍｍ²／ｓ以上である。

本発明で使用される高分子量のＭＣにおいて、そのメトキシル含量は好ましくは２０〜４０％（重量／重量）、より好ましくは２７〜３２％（重量／重量）が望まれる。そのＭＣの粘度グレード(２％（重量／容量）水溶液)は、好ましくは１５ｍｍ²／ｓ以上、より好ましくは２５ｍｍ²／ｓ以上、さらに好ましくは１００ｍｍ²／ｓ以上、特に好ましくは１５００ｍｍ²／ｓ以上である。

最終的に調製された懸濁性ハイドロゲル中の高分子量のＨＰＭＣまたはＭＣの添加濃度は、好ましくは０．００１〜１０％（重量／容量）、より好ましくは０．０１〜５％（重量／容量）、さらに好ましくは０．０５〜３％（重量／容量）である。

微粒子成分の濃度と高分子量のＨＰＭＣまたはＭＣ濃度の比は、好ましくは５０：１〜１：５０、より好ましくは２０：１〜１：１である。

「水性懸濁溶液に、塩基を加えてｐＨ３〜７にし、分散および／または透析を行った後、ｐＨを５〜７、微粒子成分の濃度を０．５〜５％に調整し、適宜濾過滅菌を行う処理」において、ここで使用される塩基は、例えば前記の一般的な塩基と同じものが例示される。
撹拌・分散装置としては、ディスパーザーやホモミキサー、ホモジナイザー等など、一般的に医薬製剤の調製に使用される撹拌・分散装置が挙げられるが、液中で凝集している粒子を効率的に分散させることができる撹拌・分散装置が好ましい。ロボミックス（特殊機化工業（株））やクレアミックス等の回転式ホモジナイザーの他、湿式ジェットミルや高圧ホモジナイザー等が好ましい例として挙げられる。特に、スクリーンとローターが各々逆方向に高速で回転することにより、強烈な液−液剪断力を有するＷモーション型クレアミックス（エム・テクニック（株））を使用することで、上記のように調製したレバミピド結晶の水性懸濁溶液の透明性が顕著に向上する。なかでもヒドロキシプロピルメチルセルロースを水溶性高分子の添加剤としてレバミピド結晶と混合した水性懸濁溶液では驚くほど透明性の高い懸濁溶液が得られる。
透析装置としては、ペリコン（日本ミリポア（株））やプロスタック（日本ミリポア（株））、ザルトコン（ザルトリウス（株））等一般的に医薬製剤の調製に使用される透析装置が挙げられる。透析を行うに際して、レバミピド結晶の水性懸濁溶液のｐＨが低いと凝集のため透析膜の通過性が悪く、ｐＨが高いとレバミピドが溶解し含量損出が生じるため、その懸濁溶液のｐＨは３〜７、好ましくはｐＨ４〜７、より好ましくはｐＨ５〜７で行うことが望ましい。
ヒドロキシプロピルメチルセルロースを水溶性高分子の添加剤としてレバミピド結晶と混合した水性懸濁溶液の場合には、透析装置により脱塩することで、驚くほど高い透明性の懸濁溶液が得られ、そして高温で保存しても性状に変化のない安定な懸濁溶液にすることが可能となった。

上記の透析工程と分散・撹拌工程は、それぞれ単独で、あるいは両工程を組み合わせ、透析工程を行った後、分散・撹拌工程を行うことも可能であるし、分散・撹拌工程を行った後、透析工程を行うことも可能である。
透析工程により、懸濁溶液が濃縮されることから、レバミピドの場合、濃縮後に精製水で希釈し、レバミピド濃度が０．１〜１０％（重量／容量）、好ましくは０．５〜５％（重量／容量）の任意の濃度のレバミピド結晶の懸濁溶液を調製できる。

本発明の「再ゲル化可能なフィルム」において、「再ゲル化」とは、本発明のゲルを乾燥して形成したフィルムに水を加えたとき、該フィルムが乾燥前のゲルと類似の粘性プロファイルを示すゲルに再形成することをいう。ここで用いる乾燥とは特に制限はないが、自然乾燥や熱乾燥等を用いることができる。また、「フィルム」とは、本発明のゲルを上記の乾燥によってゲル中の水分を取り除いて得られる薄膜状の乾燥物をいう。本発明のフィルムは、特にこれに限ったものではないが、透明なフィルムであり、水分を加えたときに、乾燥前のゲルと類似の粘性プロファイルを示すゲルを再形成する特徴を有する。

以下に本発明を、実施例によりさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例のみに限定されるものではない。

実施例１
１０Ｎ塩酸 ３６６ｍＬ（４３２ｇ，３．６６ｍｏｌ）と、７．６７％（重量／容量）ＨＰＭＣ（グレード：ＴＣ−５ＥＷ（２％（重量／容量）水溶液粘度：３ｍｍ²／ｓ））水溶液 ７．８Ｌを混合して、塩酸−ＨＰＭＣ（ＴＣ−５ＥＷ）溶液を調製した。水酸化ナトリウム １３２ｇ（３．３ｍｏｌ）に精製水を加えて調製した水酸化ナトリウム水溶液 ２１Ｌに、レバミピド ６００ｇ（１．６２ｍｏｌ）を加え、加温溶解し、水酸化ナトリウム−レバミピド溶液を調製した。
約１０℃に冷却した塩酸−ＨＰＭＣ（ＴＣ−５ＥＷ）溶液は、分散機（クレアミックスシングルモーション、エム・テクニック社）が組み込まれた３５０ｍＬの容器中をインライン方式で循環させた。クレアミックスシングルモーションのローターを約１００００ｒｐｍで回転させながら、４０〜５０℃に維持した水酸化ナトリウム−レバミピド溶液を３５０ｍＬの容器中に徐々に注入し、レバミピド結晶を析出させた。晶析終了後のｐＨは約１．５であった。結晶が析出した溶液に、５Ｎ水酸化ナトリウム溶液を添加し、ｐＨを約５．９０に調整した。
このようにして得られたレバミピド水性懸濁溶液を１Ｌ取り、クレアミックスＷモーション（エム・テクニック社）を用いて、ローターを約１８，０００ｒｐｍ回転、スクリーンを約１６，０００ｒｐｍ回転で２０分間、分散を行った後、この溶液を透析装置（ミリポア，ペリコン２）で濃縮脱塩を行った。
濃縮脱塩を行ったサンプルを精製水で希釈し、２％（重量／容量）レバミピド水性懸濁溶液を調製した。
調製したレバミピド水性懸濁溶液の粒子径を動的光散乱法（ZetasizerNano-ZS、Malvern）で測定したところ、約１００ｎｍであった。
上記の懸濁溶液とは別に０．１％（重量／容量）、０．４％（重量／容量）、１．０％（重量／容量）ＨＰＭＣ（グレード；６０ＳＨ４０００（２％（重量／容量）水溶液粘度４０００ｍｍ²／ｓ））水溶液を調製した。
レバミピド水性懸濁溶液とＨＰＭＣ水溶液をそれぞれ０．２μｍフィルター（Φ４７ｍｍ、ポリエチレンスルホン、ＰＡＬＬ社）を用いてろ過滅菌した。ろ過後のレバミピド水性懸濁溶液と３種のＨＰＭＣ水溶液それぞれを１：１で混合した。混合後、ＨＰＭＣ（６０ＳＨ４０００）最終含量０．０５％（重量／容量）、０．２％（重量／容量）、０．５％（重量／容量）（レバミピド最終含量１％（重量／容量））の粘度の異なる３種のゲルを得た。

実施例２
上記実施例１に準じ、水溶性高分子としてＨＰＭＣ（グレード；ＴＣ−５ＥＷ（２％（重量／容量）水溶液粘度：３ｍｍ²／ｓ））を用い、２％（重量／容量）レバミピド水性懸濁溶液を調製した。調製したレバミピド水性懸濁溶液の粒子径を動的光散乱法（ZetasizerNano-ZS、Malvern）で測定したところ、約１００ｎｍであった。
上記の懸濁溶液とは別に０．１％（重量／容量）、０．４％（重量／容量）、１．０％（重量／容量）ＨＰＭＣ（グレード；６０ＳＨ１００００（２％（重量／容量）水溶液粘度１００００ｍｍ²／ｓ））水溶液を調製した。
レバミピド水性懸濁溶液と３種のＨＰＭＣ水溶液それぞれを１：１で混合した。混合後、ＨＰＭＣ（６０ＳＨ１００００）最終含量０．０５％（重量／容量）、０．２％（重量／容量）、０．５％（重量／容量）（レバミピド最終含量１％）の粘度の異なる３種のゲルを得た。

実施例３
上記実施例１に準じ、水溶性高分子としてＨＰＭＣ（グレード；ＴＣ−５ＥＷ（２％（重量／容量）水溶液粘度：３ｍｍ²／ｓ））を用い、２％（重量／容量）レバミピド水性懸濁溶液を調製した。調製したレバミピド水性懸濁溶液の粒子径を動的光散乱法（ZetasizerNano-ZS、Malvern）で測定したところ、約１００ｎｍであった。
上記の懸濁溶液とは別に０．１％（重量／容量）、０．４％（重量／容量）、１．０％（重量／容量）ＨＰＭＣ（グレード；６０ＳＨ５０（２％（重量／容量）水溶液粘度５０ｍｍ²／ｓ））水溶液を調製した。
レバミピド水性懸濁溶液とＨＰＭＣ水溶液をそれぞれ０．２μｍフィルター（Φ４７ｍｍ、ポリエチレンスルホン、ＰＡＬＬ社）を用いてろ過滅菌した。ろ過後のレバミピド水性懸濁溶液と３種のＨＰＭＣ水溶液それぞれを１：１で混合した。混合後、ＨＰＭＣ（６０ＳＨ５０）最終含量０．０５％（重量／容量）、０．２％（重量／容量）、０．５％（重量／容量）（レバミピド最終含量１％（重量／容量））の粘度の異なる３種のゲルを得た。

実施例４
１０Ｎ塩酸３６６ｍＬ（４３２ｇ，３．６６ｍｏｌ）と、７．６７％（重量／容量）ＨＰＭＣ（グレード：ＴＣ−５ＥＷ（２％（重量／容量）水溶液粘度：３ｍｍ²／ｓ））水溶液 ７．８Ｌを混和して、塩酸−ＨＰＭＣ（ＴＣ−５ＥＷ）溶液を調製した。水酸化ナトリウム １３２ｇ（３．３ｍｏｌ）に精製水を加えて調製した水酸化ナトリウム水溶液 ２１Ｌに、レバミピド ６００ｇ（１．６２ｍｏｌ）を加えて、加温溶解し、水酸化ナトリウム−レバミピド溶液を調製した。
約１０℃に冷却した塩酸−ＨＰＭＣ（ＴＣ−５ＥＷ）溶液は、分散機（クレアミックスシングルモーション、エム・テクニック社）が組み込まれた３５０ｍＬの容器中をインライン方式で循環させた。クレアミックスシングルモーションのローターを約１００００ｒｐｍで回転させながら、４０〜５０℃に維持した水酸化ナトリウム−レバミピド溶液を３５０ｍＬの容器中に徐々に注入し、レバミピド結晶を析出させた。晶析終了後のｐＨは約１．５であった。結晶が析出した溶液に、５Ｎ水酸化ナトリウム溶液を添加し、ｐＨを５．９０に調整した。
このようにして得られたレバミピド水性懸濁溶液を１Ｌ取り、クレアミックスＷモーション（エム・テクニック社）を用いて、ローターを約１８，０００ｒｐｍ回転、スクリーンを約１６，０００ｒｐｍ回転で２０分間、分散を行った後、この溶液を透析装置（ミリポア，ペリコン２）で濃縮脱塩を行った。
濃縮脱塩を行ったサンプルを精製水で希釈し、４％（重量／容量）レバミピド水性懸濁溶液を調製した。
調製したレバミピド水性懸濁溶液の粒子径を動的光散乱法（ZetasizerNano-ZS、Malvern）で測定したところ、約１００ｎｍであった。
上記の懸濁溶液とは別に０．１％（重量／容量）、０．４％（重量／容量）、１．０％（重量／容量） ＨＰＭＣ（グレード；６０ＳＨ４０００（２％（重量／容量）水溶液粘度４０００ｍｍ²／ｓ））水溶液を調製した。
レバミピド水性懸濁溶液とＨＰＭＣ水溶液をそれぞれ０．２μｍフィルター（Φ４７ｍｍ、ポリエチレンスルホン、ＰＡＬＬ社）を用いてろ過滅菌した。ろ過後のレバミピド水性懸濁溶液と３種のＨＰＭＣ水溶液それぞれを１：１で混合した。混合後、ＨＰＭＣ（６０ＳＨ４０００）最終含量０．０５％（重量／容量）、０．２％（重量／容量）、０．５％（重量／容量）（レバミピド最終含量２％（重量／容量））の粘度の異なる３種のゲルを得た。

実施例５
上記実施例４に準じ、水溶性高分子としてＨＰＭＣ（グレード；ＴＣ−５ＥＷ（２％（重量／容量）水溶液粘度：３ｍｍ²／ｓ））を用い、４％（重量／容量）レバミピド水性懸濁溶液を調製した。調製したレバミピド水性懸濁溶液の粒子径を動的光散乱法（ZetasizerNano-ZS、Malvern）で測定したところ、約１００ｎｍであった。
上記の懸濁溶液とは別に０．１％（重量／容量）、０．４％（重量／容量）、１．０％（重量／容量）ＨＰＭＣ（グレード；６０ＳＨ５０（２％（重量／容量）水溶液粘度：５０ｍｍ²／ｓ））水溶液を調製した。
レバミピド水性懸濁溶液とＨＰＭＣ水溶液をそれぞれ０．２μｍフィルター（Φ４７ｍｍ、ポリエチレンスルホン、ＰＡＬＬ社）を用いてろ過滅菌した。ろ過後のレバミピド水性懸濁溶液と３種のＨＰＭＣ水溶液それぞれを１：１で混合した。混合後、ＨＰＭＣ（６０ＳＨ５０）最終含量０．０５％（重量／容量）、０．２％（重量／容量）、０．５％（重量／容量）（レバミピド最終含量２％（重量／容量））の粘度の異なる３種のゲルを得た。

実施例６
上記実施例１に準じ、水溶性高分子としてＨＰＭＣ（グレード；ＴＣ−５ＥＷ（２％（重量／容量）水溶液粘度：３ｍｍ²／ｓ））を用い、２％（重量／容量）レバミピド水性懸濁溶液を調製した。調製したレバミピド水性懸濁溶液の粒子径を動的光散乱法（ZetasizerNano-ZS、Malvern）で測定したところ、約１００ｎｍであった。
上記の懸濁溶液とは別に０．１％（重量／容量）、０．４％（重量／容量）、１．０％（重量／容量）ＨＰＭＣ（グレード；６０ＳＨ４０００（２％（重量／容量）水溶液粘度：４０００ｍｍ²／ｓ））水溶液を調製し、それぞれにグリセリン４．７％（重量／容量）を溶解した。
レバミピド水性懸濁溶液とＨＰＭＣ水溶液をそれぞれ０．２μｍフィルター（Φ４７ｍｍ、ポリエチレンスルホン、ＰＡＬＬ社）を用いてろ過滅菌した。ろ過後のレバミピド水性懸濁溶液と３種のＨＰＭＣ水溶液それぞれを１：１で混合した。混合後、ＨＰＭＣ（６０ＳＨ４０００）最終含量０．０５％（重量／容量）、０．２％（重量／容量）、０．５％（重量／容量）（レバミピド最終含量１％（重量／容量））の粘度の異なる３種のゲルを得た。

実施例７
上記実施例１に準じ、水溶性高分子としてＨＰＭＣ（グレード；ＴＣ−５ＥＷ（２％（重量／容量）水溶液粘度：３ｍｍ²／ｓ））を用い、２％（重量／容量）レバミピド水性懸濁溶液を調製した。調製したレバミピド水性懸濁溶液の粒子径を動的光散乱法（ZetasizerNano-ZS、Malvern）で測定したところ、約１００ｎｍであった。
上記の懸濁溶液とは別に１．０％（重量／容量）ＭＣ（グレード；ＳＭ４００（２％（重量／容量）水溶液粘度：４００ｍｍ²／ｓ））水溶液を調製した。
レバミピド水性懸濁溶液とＭＣ水溶液をそれぞれ０．２μｍフィルター（Φ４７ｍｍ、ポリエチレンスルホン、ＰＡＬＬ社）を用いてろ過滅菌した。ろ過後のレバミピド水性懸濁溶液とのＭＣ水溶液それぞれを１：１で混合した。混合後、ＭＣ最終含量０．５％（重量／容量）（レバミピド最終含量１％（重量／容量））のゲルを得た。

実施例８
上記実施例１に準じ、水溶性高分子としてＨＰＭＣ（グレード；ＴＣ−５ＥＷ（２％（重量／容量）水溶液粘度：３ｍｍ²／ｓ））を用い、２％（重量／容量）レバミピド水性懸濁溶液を調製した。調製したレバミピド水性懸濁溶液の粒子径を動的光散乱法（ZetasizerNano-ZS、Malvern）で測定したところ、約１００ｎｍであった。
上記の懸濁溶液とは別に０．４％（重量／容量）ＭＣ（グレード；ＳＭ１５００（２％（重量／容量）水溶液粘度：１５００ｍｍ²／ｓ））水溶液を調製した。
レバミピド水性懸濁溶液とＭＣ溶液をそれぞれ０．２μｍフィルター（Φ４７ｍｍ、ポリエチレンスルホン、ＰＡＬＬ社）を用いてろ過滅菌した。ろ過後のレバミピド水性懸濁溶液とのＭＣ水溶液それぞれを１：１で混合した。混合後、ＭＣ最終含量０．２％（レバミピド最終含量１％）ゲルを得た。

実施例９
実施例１で得られた０．２％（重量／容量） ＨＰＭＣ（６０ＳＨ４０００）含有ゲルと０．５％（重量／容量） ＨＰＭＣ（６０ＳＨ４０００）含有ゲルを凍結乾燥することにより、懸濁性ハイドロゲルの凍結乾燥品を得た。

実施例１０
実施例１で得られた０．２％（重量／容量） ＨＰＭＣ（６０ＳＨ４０００）含有ゲルと０．５％（重量／容量） ＨＰＭＣ（６０ＳＨ４０００）含有ゲルをビニールシート状で自然乾燥することにより、懸濁性ハイドロゲルの乾燥品を得た。この乾燥品は透明性の極めて高いフィルム状であった。

比較例１
実施例１で得られた２％（重量／容量）レバミピド水性懸濁溶液と精製水を１：１で混合し、１％（重量／容量）レバミピド水性懸濁溶液を得た。

試験例１
上記実施例９と上記実施例１０の乾燥品に水を加えたところ、再びゲル化した。

試験例２
上記実施例１で得られた０．２％（重量／容量） ＨＰＭＣ（６０ＳＨ４０００）含有ゲルと０．５％（重量／容量）ＨＰＭＣ（６０ＳＨ４０００）含有ゲル、上記実施例１０の自然乾燥フィルム製剤（０．２％（重量／容量） ＨＰＭＣ（６０ＳＨ４０００）含有）、比較例１の１％（重量／容量）レバミピド水性懸濁溶液について、日本薬局方溶出試験第２法（パドル法）を用いて、試験液ｐＨ６リン酸１水素ナトリウム・クエン酸緩衝液９００ｍＬ、パドル回転数５０ｒｐｍで溶出試験を行った。被験物質はゲルの場合、カプセルに充填後、試験容器内に投入した。自然乾燥フィルム製剤及び１％（重量／容量）レバミピド水性懸濁溶液は、そのまま試験容器内に投入した。
得られた溶出挙動は水性懸濁溶液に対してゲル製剤及び自然乾燥後のフィルム製剤は徐放性を示した（図１）。

試験例３
上記実施例１で得られた０．２％（重量／容量）ＨＰＭＣ（６０ＳＨ４０００）含有ゲルと０．５％（重量／容量）ＨＰＭＣ（６０ＳＨ４０００）含有ゲルについて、回転粘度計を用い、様々な剪断力をかけ、その粘度の時間的な粘度変化を観察した（図２〜図４）。どちらのゲルも剪断力が強いほど粘度は低下し、剪断力をかける時間につれて粘度の低下が見られた。これはゲルのチクソトロピー性に由来する。

試験例４
上記実施例１から５で得られたゲルについて、粘度を回転粘度計にて、回転数１００ｒｐｍにて測定した結果、ゲルの粘度は添加する高分子量のＨＰＭＣのグレードによって、またその濃度によって変動した（表１）。ＨＰＭＣのこれらのファクターを変化させることにより粘度の調製が可能であることが分かった。微粒子の濃度によってもその粘度は異なった。

本発明の方法によれば、簡便な方法により透明性及び安定性に優れる懸濁性ハイドロゲルを製造できるので、各種製剤、特に点眼剤の分野においてその効果が期待される。特に、本発明を透明性の高いレバミピド結晶の水性懸濁液に応用した場合、前眼部にレバミピド微粒子を滞留させる事が出来て、かつ、霧視を防止する事が可能な透明性の高い眼科用ゲル製剤を提供する事が可能になった。この製剤は、ドライアイ治療効果を有するレバミピドの前眼部への滞留性の向上、及び、前眼部の水分の維持という点で、ドライアイ治療製剤として有用性が期待される。
また、本発明の方法によれば、ろ過滅菌可能な微粒子懸濁溶液とＨＰＭＣまたはＭＣ溶液をそれぞれろ過滅菌後混合し、無菌製剤を調製することも可能であり、無菌原薬を必要としない簡略化されたゲル製剤の製造方法も可能となりうる。

ゲル製剤及びフィルム製剤の溶出挙動の比較例との比較。 ゲル（０．２％ＨＰＭＣ）に剪断応力をかけた時間と粘度の関係（回転粘度計回転数；０．２〜２．５ｒｐｍ）。 ゲル（０．５％ＨＰＭＣ）に剪断応力をかけた時間と粘度の関係（回転粘度計回転数；０．２〜１．０ｒｐｍ） それぞれのゲルのチクソトロピー性評価（剪断応力（回転数）と粘度の関係、１３２０秒時）

Claims (11)

1. 微粒子懸濁溶液、および高分子量のヒドロキシプロピルメチルセルロースもしくはメチルセルロースを含む、懸濁性ハイドロゲル。
2. 微粒子懸濁溶液が、微粒子と低分子量のヒドロキシプロピルメチルセルロースからなる懸濁溶液である、請求項１の懸濁性ハイドロゲル。
3. 微粒子懸濁溶液が、水溶性高分子および界面活性剤から選択される少なくとも１種の化合物、酸水溶液または塩基水溶液、および医薬用化合物含有水溶液を混和して得られる水性懸濁溶液である、請求項１の懸濁性ハイドロゲル。
4. 酸水溶液または塩基水溶液が酸水溶液であり、医薬用化合物が水溶性レバミピド塩である、請求項３の懸濁性ハイドロゲル。
5. 水性高分子および界面活性剤から選択される少なくとも一種の化合物が低分子量のヒドロキシプロピルメチルセルロースである請求項３または４の懸濁性ハイドロゲル
6. 水性懸濁溶液が酸性である請求項３から５のいずれかの懸濁性ハイドロゲル。
7. 請求項３から６のいずれかに記載の水性懸濁溶液に、塩基を加えてｐＨ３〜７にし、分散および／または透析を行った後、ｐＨを５〜７、微粒子成分の濃度を０．５〜５％（重量／容量）に調整し、適宜濾過滅菌を行う処理を更に加えて調製した、請求項１から６のいずれかの懸濁性ハイドロゲル。
8. 用途が点眼用である請求項１から７のいずれかの懸濁性ハイドロゲル。
9. 請求項３から６のいずれかに記載の水性懸濁溶液に、塩基を加えてｐＨ３〜７にし、分散および／または透析を行った後、ｐＨを５〜７、微粒子成分の濃度を０．５〜５％（重量／容量）に調整し、得られた微粒子懸濁溶液を高分子量のヒドロキシプロピルメチルセルロースもしくはメチルセルロースと混合することからなる、懸濁性ハイドロゲルの製造方法。
10. 請求項３から６のいずれかに記載の水性懸濁溶液に、塩基を加えてｐＨ３〜７にし、分散および／または透析を行った後、ｐＨを５〜７、微粒子成分の濃度を０．５〜５％（重量／容量）に調整し、適宜ろ過滅菌処理を行い得られた無菌の微粒子懸濁溶液を、適宜ろ過滅菌処理又は高圧蒸気滅菌処理を行った無菌の高分子量のヒドロキシプロピルメチルセルロース溶液もしくはメチルセルロース溶液と無菌的に混合することからなる、無菌の懸濁性ハイドロゲルの製造方法。
11. 請求項１から８のいずれかに記載の懸濁性ハイドロゲルを乾燥して得られる、再ゲル化可能なフィルム。

Images