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JP2002530440A - エンドトキシンレベルが低い生体高分子塩、その生体高分子組成物およびこれを製造する方法 - Google Patents

エンドトキシンレベルが低い生体高分子塩、その生体高分子組成物およびこれを製造する方法

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JP2002530440A
JP2002530440A JP2000582434A JP2000582434A JP2002530440A JP 2002530440 A JP2002530440 A JP 2002530440A JP 2000582434 A JP2000582434 A JP 2000582434A JP 2000582434 A JP2000582434 A JP 2000582434A JP 2002530440 A JP2002530440 A JP 2002530440A
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biopolymer
salt
endotoxin
alginate
aqueous solution
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JP2000582434A
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ウィリアム エス． ボースマン
ジョージ ティ． コールグローヴ
モニカ エイ． モンタナ
ロバート ラクズコウスキー
ジョン ホラハン
Original Assignee
シーピー ケルコ ユー．エス．インク．
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Abstract

(57)【要約】 本発明は、エンドトキシン含有量が約100エンドトキシン単位／グラム未満である生体高分子塩および該生体高分子塩を含む生体高分子組成物に関する。本発明の生体高分子塩および生体高分子組成物は、そのエンドトキシン含有量が低いことから、患者に非経口投与してもよい。本発明はまた、本発明の組成物を調製する方法も目的とする。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】 発明の分野 本発明は、エンドトキシンのレベルが低い生体高分子塩およびその生体高分子
組成物に関する。本発明の生体高分子塩は、非経口的インプラントとして特に有
用である。本発明はまた、エンドトキシン含有量が低い新規生体高分子塩を調製
するために、アルギネートおよびバイオガムのような生体高分子塩を精製する方
法にも関する。
【０００２】 発明の背景 生体内で非経口的に用いられる材料は、免疫応答を誘発することによって発熱
を誘導する物質である発熱物質を本質的に不含でなければならない。発熱物質が
生体に導入されると、ショックまたは死亡さえももたらすほどの重度の反応を引
き起こしうる。重要な発熱物質は、グラム陰性菌の細胞壁の構成成分として存在
するリポ多糖類エンドトキシンである。これらのエンドトキシンは、グラム陰性
菌が溶菌されたときに大量に放出される。グラム陰性細菌の数を多く含む、水と
接触する物質は、リポ多糖類エンドトキシンの有効な量を含むと予想されうる。
これは、経口投与される組成物に関しては問題とならないが、非経口投与される
組成物については許容されない。
【０００３】 リポ多糖類エンドトキシンは生体材料ではなく、オートクレーブのような一般
的な滅菌技術によって不活化することができない。ガンマ線照射および乾熱滅菌
技術はエンドトキシンを破壊するが、これらの技術はまた、組成物中における他
の多くの化合物を破壊または損傷しうる。したがって、多くの滅菌産物は、エン
ドトキシンが特異的に除去または不活化されなければ、エンドトキシンの有効な
レベルを含みうる。
【０００４】 さらに、リポ多糖類はグラム陰性菌に由来するため、当初エンドトキシンを含
まなかった非滅菌物質が、微生物が繁殖したためにエンドトキシンに汚染される
ようになりうる。エンドトキシンを含まない産物はまた、エンドトキシンを含む
表面への接触後に汚染されるようになる可能性がある；これらは主に、水と接触
する表面である。したがって、非経口投与すべき組成物はエンドトキシン不含で
なければならず、また、リポ多糖類エンドトキシンの再生を防止するために滅菌
されねばならない。
【０００５】 アルギン酸およびその塩、ゲランガム、ならびにキサンタンガムのような生体
高分子産物は、例えば、経口的に摂取される持続性放出型薬剤を含む多くの製薬
応用において用いられることが知られている。しかし、これらのこれまでの生体
高分子産物は、非経口投与に適さないエンドトキシンレベルを有していた。非経
口投与のためには、生体高分子塩のエンドトキシンレベルは生体高分子１グラム
当たり約100エンドトキシン単位未満でなければならず、好ましくは生体高分子
塩１グラム当たり50エンドトキシン単位未満である。生体高分子塩が非経口投与
に適するように、十分に低いエンドトキシン含有量を有する生体高分子塩を提供
することが非常に望ましいであろう。
【０００６】 発明の概要 本発明は、非経口的使用に適した生体高分子塩を目的とする。特に、本発明は
、生物学的に産生された水溶性の多糖類を有し、エンドトキシン含有量が約100
エンドトキシン単位未満である、アルギネートまたはバイオガムのような生体高
分子塩に関する。本発明はまた、本発明の生体高分子塩と薬学的に許容される溶
媒とを含む、アルギネートまたはバイオガム組成物をも目的とする。
【０００７】 本発明のもう一つの態様は、非経口的使用に適した生体高分子塩およびその組
成物を調製する方法に関する。特に、１つの方法は以下の段階を含む：（i）生
体高分子塩の水溶液を疎水性物質に接触させて、該物質にエンドトキシンを吸着
させる段階；および（ii）水親和性の有機溶媒と溶液とを混合することによって
、１グラムあたりエンドトキシン含有量が約100エンドトキシン単位未満の生体
高分子塩を溶液から沈殿させる段階。本発明の方法のさらにもう一つの態様にお
いて、沈殿段階は、水混和性の有機溶媒と混和した水溶液からエンドトキシンを
抽出する段階に変更してもよい。これらの方法によって、エンドトキシン含有量
が１グラムあたり100エンドトキシン単位未満である生体高分子塩および生体高
分子の組成物が便利に提供される。これらの方法は、前述のアルギネートおよび
バイオガムのみならず、特にまた、キトサン、キタン（chitan）、カラゲニン、
寒天、ウェランガム、S-657ガム、ラムサン（rhamsan）ガム、カルボキシメチル
セルロース、およびカルボキシメチルセルロースの化学置換体をも含むような水
溶性多糖を構成する、広く多様な生体高分子塩に適用することができる。新規生
体高分子塩およびその組成物は、非経口インプラントとしての利用に非常に適し
ている。それらはまた、例えば、天然の潤滑液を補うために、カテーテルをコー
ティングするために、非経口注射剤を濃縮するために、組織のバルキングを提供
するために、そして細胞被包技術のために用いてもよい。
【０００８】 発明の詳細な説明 エンドトキシンレベルは、典型的にリムラス変形細胞分解産物試験（LAL）法
を用いて測定される。本試験方法には一般的に用いられるいくつかの変法があり
（例えば、ゲルクロットエンドポイント、色素産生LAL、動的-色素発生LAL）、
存在するエンドトキシン量に比例して視覚的または呈色反応を生じる。エンドト
キシンレベルは、エンドトキシン単位（eu）で測定される。
【０００９】 本発明の生体高分子塩および生体高分子組成物のエンドトキシンレベルは、乾
燥状態の生体高分子塩１グラム当たり約100 eu未満である。好ましくは、本発明
の生体高分子塩および生体高分子組成物のエンドトキシンレベルは、約50 eu/g
未満で、より好ましくは約20 eu/g未満である。
【００１０】 本発明の生体高分子塩は、生きている生物から滲出した、または抽出された水
溶性の多糖類である。アルギネートはアルギン酸の塩であり、これはD-マンヌロ
ン酸とL-グルクロン酸単位からなるコポリマーである。これらの単位は通常、ポ
リマンヌロン酸のブロック、ポリグルクロン酸のブロック、またはマンヌロン酸
とグルクロン酸単位が交互するブロックとして存在する。マンヌロン酸とグルク
ロン酸の配列および相対量は、主にアルギネートが製造される原料によって決定
される。例えば、市販のアルギネート塩のほとんどは、褐色海藻からの抽出によ
って製造される。マクロシスティス・ピリフェラ（Macrocystis pyrifera）から
生成したアルギネートでは、マンヌロン酸対グルクロン酸の比（M/G比）が約1.5
6：１であるのに対し、ラミナリア・ハイパーボレア（Laminaria hyperborea）
から生成したアルギネートではM/G比が約0.45である。アルギネートの一価塩（
ナトリウム塩またはカリウム塩）は、通常水溶性であるのに対し、二価塩（カル
シウム、バリウム）、多価塩（鉄、アルミニウム等）およびアルギン酸は、水に
不溶性のゲルまたは固体を形成する。アルギネートはISPアルギネート社（サン
ディエゴ、カリフォルニア州）から市販されている。
【００１１】 バイオガムは複雑な有機酸の塩であり、微生物の発酵によって生成される。ゲ
ランガムとは、適当な栄養培地で培養したスフィンゴモナス・エロデア（Sphing
omonas elodea）種の微生物から得られた細胞外多糖類を指す。同様に、キサン
タンガムは、適当な栄養培地でのキサントモナス（Xanthomonas）属の微生物の
発酵によって得られる疎水性多糖類である。ゲランガムおよびキサンタンガムは
有用な増粘剤である。ゲランガムはまた、ゲル化剤としても有用である。バイオ
ガム次第で、一価塩（ナトリウム塩またはカリウム塩）は通常バイオガムを水溶
性にするが、必ずというわけではなく、一方、バイオガム中の二価塩（マグネシ
ウム、カルシウム、バリウム）および多価塩（鉄、アルミニウム等）は、水に不
溶性のゲルまたは固体を形成する可能性があるが、必ずというわけではない。
【００１２】 本発明において用いられる生体高分子はアルギネートまたはバイオガムである
。アルギネートはアルギン酸の塩であるが、バイオガムは複合有機酸の塩であり
、一般的に粘度を増加させる長いポリマー鎖を有する。
【００１３】 最も好ましくは、アルギネートに関して、塩はアルギン酸ナトリウムである。
アルギネートにおいては通常マンヌロン酸とグルクロン酸の比が約0.3：１〜約
２：１である。一般的に、マンヌロン酸含有量が高いアルギネートでは比が１以
上であるが、グルクロン酸含有量が高いアルギネートでは比が１未満である。
【００１４】 本発明の精製アルギネートを調製するために用いられうるアルギネートの好ま
しい原料の例は、ISPアルギネート社（サンジエゴ、カリフォルニア州）から市
販されている「ケルトン」である。ケルトンLVCRは、マクロシスティス・ピリフ
ェラ（Macrocystis pyrifera）の巨大ケルプから得られ、マンヌロン酸対グルク
ロン酸の比が約1.56：１である、マンヌロン酸の含有量が高いアルギネートであ
る。
【００１５】 通常、市販のケルトンLVCRのエンドトキシンレベルは、約30,000 eu/gから約6
0,000 eu/gの範囲である。非経口投与のための薬学的組成物は通常わずか約100
eu/gでなければならない。そのため、ケルトンLVCRを非経口投与に用いる以前に
、エンドトキシンレベルを実質的に低下させなければならない。本発明は、ケル
トンLVCRのようなアルギン酸の既知の塩におけるエンドトキシンレベルを約100
eu/g以下まで低下させる方法を提供する。
【００１６】 本発明の精製バイオガムを調製するために用いてもよいバイオガムの好ましい
原料の２つの例は、微生物スフィンゴモナス・エロデア（Sphingomonas elodea
）由来の「ゲルライト」ゲランガム、または微生物キサントモナス・カンペスト
リス（Xanthanomas campestris）由来の「ケルトロールT」キサンタンガムであ
る。いずれのバイオガムもケルコバイオポリマーズ社（Kelco Biopolymers）（
サンディエゴ、カリフォルニア州）から市販されている。通常、市販のゲルライ
トゲランガムまたはケルトロールTキサンタンガムは、グラム陰性細菌から生成
され、したがってエンドトキシンレベルは1,000,000 eu/g以上であることが判明
した。これらのきわめて高いエンドトキシン負荷を商業的に効率的に生体高分子
から除去することは、特に難しい。アルギネートに関して前述したように、非経
口投与のための薬学的組成物では通常わずか100 eu/gでなければならない。した
がって、バイオガムを非経口投与に用いられる以前に、エンドトキシンレベルを
劇的に低下させなければならない。本発明は、既知のバイオガムにおけるエンド
トキシンレベルを100 eu/g未満に低下させる方法を提供する。
【００１７】 リポ多糖類エンドトキシンの分子構造は、脂質の頭部と多糖類の尾部から成る
。理論に拘束されるわけではないが、ポリマーの脂質部分は発熱反応を誘導する
と考えられ、脂質部分を除去または破壊すれば、誘導反応を消失できると考えら
れる。エンドトキシンの多糖類尾部は、生体高分子と分子構造が類似しているた
め、生体高分子塩からのエンドトキシンの分離は簡単な問題ではない。
【００１８】 文献に開示されている多くの技術が、物質からエンドトキシンを除去するため
に製薬産業において用いられている。しかし、これらの方法の多くはまた、生体
高分子を破壊するか、またはそうでなければ生体高分子と好ましくない相互作用
をすることから、そのような技術は生体高分子組成物の非発熱化には不適当であ
った。
【００１９】 本発明の本方法は、これまで得られなかった精製生体高分子塩を得るために２
つの技術を組みあわせて使用する。特に、これらの技術を組みあわせて用いる場
合、アルギネートおよびバイオガムにおけるエンドトキシンレベルを約100 eu/g
未満まで低下させうることが発見された。
【００２０】 エンドトキシン含有量が１グラムあたり100 エンドトキシン単位未満である生
体高分子塩を含む生体高分子組成物を調製するための本方法は以下の段階を含む
：（i）生体高分子塩の水溶液を疎水性物質に接触させてエンドトキシンを該物
質に吸着させる段階；および（ii）溶液を、水混和性の有機溶媒と混合すること
によって、エンドトキシン含有量が１グラムあたり約100 エンドトキシン単位未
満である生体高分子塩を溶液から沈殿させる段階。
【００２１】 一般的に、開始水溶液のアルギネート濃度またはバイオガム濃度は溶液の重量
の約0.5％〜約５％であると思われる。最も好ましくは、水溶液はアルギネート
と水との混合液、またはバイオガムと水との混合液である。
【００２２】 前述したように、本発明の方法の一つの要素には、エンドトキシンの疎水性物
質への吸着が含まれる。理論に拘束されることを望まないが、エンドトキシン分
子の脂質末端は疎水性物質に引きつけられると考えられている。多糖類ポリマー
である生体高分子塩は、この疎水性の性質を欠損している。したがって、それら
は疎水性物質に付着しないと考えられる。
【００２３】 本発明において用いられる好ましい疎水性物質には、例えばポリスチレン、ポ
リプロピレン、デュポン社（Dupont）の「テフロン」のようなフッ化炭素ポリマ
ー等が含まれる。ポリプロピレンおよびポリスチレンが最も好ましい。
【００２４】 疎水性表面が濾過膜の形で用いられるなら、溶液から細胞または細胞の断片を
物理的に濾過して、それによってエンドトキシン量をさらに低下させることが可
能であるかもしれない。濾過膜はまた、エンドトキシンを疎水性表面に吸着させ
るために極めて大きい表面積を好都合に提供する。
【００２５】 疎水性濾過膜を用いる場合、好ましくは膜の孔径は約1.0ミクロン〜約0.1ミク
ロンであろう。特に好ましい疎水性濾過膜は、孔径が約0.2ミクロンのポリプロ
ピレン膜である。
【００２６】 または、疎水性表面は疎水性樹脂の形であることもできる。疎水性樹脂は大容
量のエンドトキシンの効率的な接触を提供できる。疎水性樹脂は再生して再利用
でき、そしてより大量の生体高分子を接触させるために容易に量を増加できる、
という点において濾過膜よりさらなる利点を提供する。疎水性樹脂はまた、バイ
オガムのような、ポリマー鎖の粘度および／または長さのために疎水性濾過膜を
通じて濾過することが困難である物質により適している。
【００２７】 疎水性濾過膜と同様に、より大きい表面積との接触を提供するために疎水性樹
脂の大きさを変化させることが可能である。本発明の特に好ましい疎水性樹脂ビ
ーズは、直径が0.5 mm未満であり、ポリスチレンジビニルベンゼンから成る。
【００２８】 精製において疎水性樹脂を用いる場合、生体高分子塩に疎水性樹脂を接触させ
る前に、予備段階が必要となる可能性がある。まず、疎水性樹脂に接触させる前
に、リポ多糖類エンドトキシンの溶解度を増加させるために溶液のpHを上昇させ
なければならない。NaOH、KOH、または当業者に既知の他の塩基を加えることに
よって、pHを少なくとも９に上昇させることが好ましい。接触させた後、疎水性
樹脂ビーズを溶液からふるいわけし、下記のような方法の二次精製技術のために
、好ましくはpHを中性に調製し直す。
【００２９】 エンドトキシンリポ多糖類は、活性炭、ポリプロピレン、およびポリスチレン
のような疎水性物質に結合することが知られているが、本接触技術を用いた実験
のみでは、エンドトキシン含有量が100 eu/g未満である生体高分子塩はうまく生
成されなかった。
【００３０】 しかし、疎水性表面に接触させた水溶液と、水に混和性の有機溶媒とを混合す
ることによって、高度に精製された生体高分子塩が得られることが判明した。こ
の第二段階によって、高度に精製された生体高分子塩が溶液から沈殿する。
【００３１】 理論に拘束されるわけではないが、エンドトキシン分子の脂質部分によって、
ヘキサンもしくはメチルt-ブチルエーテルのような疎水性の液体、またはアルコ
ールのような部分的に疎水性の液体に可溶な分子が提供されると考えられる。対
照的に、生体高分子塩は、適当な低い誘電定数を有するアルコールおよびケトン
のような水混和性の疎水性液体中で沈殿すると考えられる。したがって、水溶液
中のエンドトキシンは、生体高分子塩から分離される。
【００３２】 水に混和性の有機沈殿溶媒は、アルコール、ケトン、アルデヒド、およびその
混合液からなる群より選択される。好ましくは、これは低分子量のアルコールで
ある。より好ましくはイソプロピルアルコール、メタノール、エタノールまたは
アセトンである。
【００３３】 水に混和性の有機溶媒は典型的に、疎水性物質で処置した水溶液と、容積比約
１：１〜約６：１で混合する。混合液を、精製生体高分子塩を沈殿させるために
十分な温度および時間で維持する。
【００３４】 沈殿後、生体高分子塩を乾燥させて、溶媒を除去してもよい。乾燥させる好ま
しい技術は、低温乾燥器乾燥である（40〜80℃）。他の適した乾燥技術には、凍
結乾燥および噴霧乾燥が含まれるが、これらに限定しない。生体高分子塩はまた
、許容される溶媒に溶解することができる。特に好ましい溶媒は水である。
【００３５】 本発明のもう一つの態様において、この方法は、沈殿段階を、水に非混和性の
溶媒を用いた液体・液体抽出に置換することによって行ってもよい。一例として
の水に非混和性の溶媒には、ヘキサンまたはメチルt-ブチルエーテルが含まれる
。
【００３６】 本発明の方法は、望ましければさらなる段階を含んでもよい。例えば、アルギ
ネートに関して、開始水溶液を100 ppm NaOClのような酸化物質によって処理し
て、ポリフェノールを分解し、それによってアルギネートから色を除去すること
が好ましい。または、NaOClの代わりに活性炭に水溶液を接触させることができ
る。最も好ましくは、NaOClの後に活性炭を加えてポリフェノールを吸着させて
、保存中にアルギネートを分解しうる如何なる残留NaOClも除去する。さらに、
疎水性物質を接触させる段階および／または沈殿段階は、望ましければ複数回行
ってもよい。濾過膜を用いる場合、様々な孔径を有する膜に水溶液を通過させる
ことが好ましいと考えられる。例えば、10ミクロンの疎水性膜を用いた後に0.2
ミクロンの膜を用いることが好ましい。この順序を用いれば、より小さい孔径の
フィルターの濾過能が改善されやすくなると思われる。同様に、疎水性樹脂を用
いる場合、疎水性樹脂ビーズの大きさおよび量は、利用できる表面積を最大限に
して、望ましい接触レベルを得るために変更または層にすることができる。
【００３７】 精製生体高分子塩は商業規模の製造工程を用いて調製される可能性があるため
、本発明の方法は特に都合がよい。
【００３８】 本発明の生体高分子塩は、患者への非経口投与に適している生体高分子組成物
を調製するために用いてもよい。これは、エンドトキシンレベルが約100 eu/g未
満またはそれに等しい本発明の生体高分子塩を、薬学的に許容される溶媒に溶解
することによって行ってもよい。好ましくは、薬学的に許容される溶媒は注射用
水である。注射用水は、滅菌が保証されており、エンドトキシンを含まず、そし
て微粒子を含まない製薬等級の脱イオン水である。
【００３９】 組成物中の生体高分子塩の濃度は、溶液の総重量に基づき、約0.5重量％〜約
５重量％まで変化してもよい。好ましくは、生体高分子塩の濃度は約２重量％〜
約４重量％のあいだである。
【００４０】 本発明の生体高分子組成物の多くは、上記の生体高分子組成物にゲル化剤を加
えることによって調製されたゲルも含む。これらのゲルは、非経口投与に適して
いる。ゲルは如何なる所望の形状に形成してもよい。例えば、ゲルはビーズ、シ
ート、またはフィラメントの形に形成してもよく、これを患者に投与してもよい
。好ましいゲル化剤は、二価または三価陽イオンを含む。同様に、患者に投与す
る前に、生体高分子ゲルに薬学的活性成分を組み入れることは可能であるかも知
れない。
【００４１】 適したゲルを形成するために生体高分子溶液に加えてもよいゲル化剤の量は、
溶液中の生体高分子の濃度のみならず、用いる特定のゲル化剤によって変化して
もよい。好ましくは、ゲル化剤はゲル化剤が約0.5％〜約10％の範囲の濃度で存
在する水溶液として加える。
【００４２】 以下の実施例は、本発明の特定の好ましい態様を説明するものであり、本発明
を制限することを意味するものではない。
【００４３】 実施例１ 非経口的使用に適したアルギネートの調製 ３重量％のアルギネート溶液３Lを、注射用としてケルトンLVCRと水とを用い
て調製した。このアルギネートのエンドトキシンレベルは、乾燥アルギネート１
グラム当たり約61,500 euであった。アルギネート溶液に接触する全ての装置は2
50℃で少なくとも１時間加熱するか、または0.1 M NaOHによって少なくとも１時
間処理のいずれかによって発熱物質を除去した。アルギネート溶液を200 ppm Na
OClで処理すると、ポリフェノール着色化合物が破壊されて、それによって無色
のアルギネート溶液が得られる。
【００４４】 次に、無色のアルギネート溶液１Lを異なる３枚のフィルター、すなわち孔径1
0 μmのポリプロピレンフィルター、孔径３μmの活性炭含浸フィルター、および
孔径0.2 μmのポリプロピレンフィルターに連続して通過させた。フィルターカ
ートリッジは全て、カリフォルニア州カマリロのマイスナー社が製造した。
【００４５】 ポリプロピレンフィルターカートリッジをまず、試薬等級のイソプロパノール
に15分間浸すことによって活性化してから、フィルターカートリッジのケースの
中に入れて、それらに注射用水を流した。活性炭含浸フィルターカートリッジに
注射用水を流して、これを湿らせて、使用前に炭末を除去した。
【００４６】 アルギネート溶液をフィルターカートリッジに通過させた後、濾液中のアルギ
ネートをイソプロピルアルコールによって沈殿させた。沈殿は、アルギネート溶
液１容量にイソプロピルアルコール２容量をオスター・ブレンダー・ジャー（Os
ter blender jar）において高速で５秒間混合することによって行った。沈殿の
ために用いられるイソプロパノールは試薬等級であり、エンドトキシンの混入を
防止するために、未開封の容器から使用した。
【００４７】 沈殿したアルギネート繊維を、発熱物質を除去した40メッシュステンレススチ
ールスクリーン上に注いだ。発熱物質を除去したアルミホイルを用いて、アルギ
ネート繊維をスクリーンに対して絞って、過剰量の溶媒をアルギネートから除去
した。得られたアルギネート繊維は60℃の乾燥器で１〜４時間乾燥させて、残っ
ている溶媒を除去した。乾燥した繊維を粉砕して、エンドトキシンレベルを調べ
た。これらの測定結果を表１に示す。
【００４８】 実施例２ 非経口的使用に適したアルギネートの調製 実施例１の無色のアルギネート溶液２Lを濾過して、実施例１に記載のように
沈殿させた。本実施例において用いたフィルターは、実施例１において用いたフ
ィルターと同じものであった。実施例１に記載のように濾過、吸着、乾燥および
粉砕後、アルギネート繊維をエンドトキシンレベルに関して調べた。これらの測
定結果を表１に示す。
【００４９】 実施例３ 非経口的使用に適したアルギネートの調製 実施例１の無色のアルギネート溶液３Lを濾過して、実施例１に記載のように
沈殿させた。本実施例において用いたフィルターは、実施例１および２において
用いたフィルターと同じものであった。実施例１に記載のように濾過、沈殿、乾
燥および粉砕後、アルギネート繊維をエンドトキシンレベルに関して調べた。こ
れらの測定結果を表１に示す。
【００５０】
【表１】 アルギネートにおけるエンドトキシンレベル
【００５１】 表１に示すように、非経口的使用に適したアルギネートは、吸着および沈殿技
術によってエンドトキシンレベルが高いアルギネートから調製してもよい。実施
例３のエンドトキシンレベルが、幾分高いものの、なお薬学的に許容されるレベ
ルであったことは、これらの実施例において用いられた１枚または複数のフィル
ターのエンドトキシン吸着の限界によると考えられる。このことは、アルギネー
ト溶液の２Lのみを同じフィルターに通過させた、以下の実施例において調製し
たアルギネートにおいて認められるエンドトキシンレベルからも支持される。
【００５２】 実施例４ 非経口的使用に適したアルギネートの調製 実施例１において調製した３重量％アルギネート溶液の２L試料を、３μm活性
炭フィルター１枚ではなくて２枚に通過させてから、0.2 μmポリプロピレンフ
ィルターによって濾過したことを除いては、実施例１に記載通りに処理した。実
施例１のように、未使用のフィルターによって濾過、沈殿、乾燥および粉砕した
後、アルギネート繊維をエンドトキシンレベルに関して調べた。これらの測定の
結果を、表２に記載する。
【００５３】 実施例５ 非経口的使用に適したアルギネートの調製 実施例１において調製した３重量％アルギネート溶液の第二の２L試料を、実
施例４に記載のように処理した。実施例１に記載のように、未使用のフィルター
によって濾過、沈殿、乾燥および粉砕後、アルギネート繊維をエンドトキシンレ
ベルに関して調べた。これらの測定結果を表２に示す。
【００５４】 実施例６ 非経口的使用に適したアルギネートの調製 実施例１において調製した３重量％アルギネート溶液の第三の２L試料を、実
施例４に記載のように処理した。実施例１に記載のように、未使用のフィルター
によって濾過、沈殿、乾燥および粉砕後、アルギネート繊維をエンドトキシンレ
ベルに関して調べた。これらの測定結果を表２に示す。
【００５５】 実施例７ 非経口的使用に適したアルギネートの調製 実施例１において調製した３重量％アルギネート溶液の第四の２L試料を、実
施例４に記載のように処理した。実施例１に記載のように、これまで未使用のフ
ィルターによって濾過、沈殿、乾燥および粉砕後、アルギネート繊維をエンドト
キシンレベルに関して調べた。これらの測定結果を表２に示す。
【００５６】
【表２】 アルギネートにおけるエンドトキシンレベル
【００５７】 表２に示すように、本発明の方法は、エンドトキシンが極めて低レベルである
アルギネートを調製するために用いてもよい。これは、フィルターへのエンドト
キシンの過剰負荷の防止によって行ってもよい。表２は、未使用のフィルターを
濾過工程において用いた場合、アルギネートにおけるエンドトキシンレベルは５
eu/g未満に低下する可能性があることを示している。
【００５８】 実施例８ 非経口的使用に適したアルギネートの調製 ３重量％のアルギネート溶液３Lを、注射用としてケルトンLVCRと水とを用い
て調製した。このアルギネートのエンドトキシンレベルは、乾燥アルギネート１
グラム当たり約46,400 euであった。
【００５９】 アルギネート溶液に接触する全ての装置は250℃で少なくとも１時間加熱する
か、または0.1 M NaOHによって少なくとも１時間処理のいずれかによって発熱物
質を除去した。アルギネート溶液を100 ppm NaOClで処理すると、ポリフェノー
ル着色化合物が破壊され、それによって無色のアルギネート溶液が得られる。
【００６０】 次に、溶液を異なる３枚のフィルター、すなわち一連の孔径３μmの活性炭フ
ィルター２枚、および孔径0.2 μmのポリプロピレンフィルターに連続して通過
させた。
【００６１】 アルギネート溶液をフィルターカートリッジの中に通過させた後、濾液中のア
ルギネート溶液の一部300 mlを水に非混和性の溶媒、メチルt-ブチルエーテル（
MTBE）と混和した。抽出は、オスター・ブレンダー・ジャーにおいてアルギネー
ト溶液１容量をMTBE２容量と高速で混合することによって行った。混合を停止す
ると、２層、すなわち底の水性アルギネート層と上層のMTBE層が形成された。次
に２層を注意深く分離した。抽出のために用いたMTBEは試薬等級であり、エンド
トキシンの混入を防止するために未開封の容器から用いた。次に、抽出したアル
ギネート層をエンドトキシンレベルに関して調べた。これらの測定結果を表３に
示す。
【００６２】 実施例９ 非経口的使用に適したアルギネートの調製 実施例８に記載のように調製して、処理、および濾過した３重量％アルギネー
ト溶液の第二の300 ml部分をメタノールによって沈殿させた。沈殿は、オスター
・ブレンダー・ジャーにおいてアルギネート溶液１容量をメタノール２容量と高
速で30秒間混合することによって行った。沈殿のために用いたメタノールは試薬
等級であり、エンドトキシンの混入を防止するために未開封の容器から得た。
【００６３】 沈殿したアルギネート繊維を、発熱物質を除去した40メッシュのステンレスス
チールのスクリーンに注いだ。発熱物質を除去したアルミホイルを用いて、アル
ギネート繊維をスクリーンに対して絞って、過剰量の溶媒をアルギネートから除
去した。得られたアルギネート繊維を60℃の乾燥器で１〜４時間乾燥させて、残
っている溶媒を除去した。乾燥した繊維を粉砕して、エンドトキシンレベルを調
べた。これらの測定結果を表３に示す。
【００６４】 実施例10 非経口的使用に適したアルギネートの調製 実施例８に記載のように調製して、処理し、そして濾過した３重量％アルギネ
ート溶液の第三の300 ml部分を、メタノールの代わりにエタノールを用いたこと
を除いては、実施例９に記載した方法を用いて沈殿させた。これらの測定の結果
を表３に示す。
【００６５】 実施例11 非経口的使用に適したアルギネートの調製 実施例８に記載のように調製して、処理し、そして濾過した３重量％アルギネ
ート溶液の第四の300 ml部分を、メタノールの代わりにイソプロパノールを用い
たことを除いては、実施例９に記載した方法を用いて沈殿させた。これらの測定
の結果を表３に示す。
【００６６】 実施例12 非経口的使用に適したアルギネートの調製 実施例８に記載のように調製して、処理し、そして濾過した３重量％アルギネ
ート溶液の第五の300 ml部分を、メタノールの代わりにアセトンを用いたことを
除いては、実施例９に記載した方法を用いて沈殿させた。これらの測定の結果を
表３に示す。
【００６７】
【表３】 アルギネートにおけるエンドトキシンレベル
【００６８】 表３に示すように、非経口的使用に適したアルギネートは、水に混和性または
水非混和性の溶媒のいずれかを用いて、上記の方法によって調製してもよい。
【００６９】 実施例13 非経口的使用に適したゲランガムの調製 ゲルライトゲランガム20 gと、多価陽イオンを封鎖して流動性を改善するクエ
ン酸ナトリウム0.5 gとの溶液を注射用水986 gに溶解した。このゲランガム溶液
のエンドトキシンレベルは乾燥非精製ゲランガム１グラム当たり1,000,000 eu以
上であった。
【００７０】 ガム溶液に接触する全ての装置は250℃で少なくとも１時間加熱するか、また
は0.1 M NaOHによって少なくとも１時間処理のいずれかによって発熱物質を除去
した。特に、樹脂ビーズは、予めエンドトキシンを除去して、0.1 M NaOH溶液に
一晩浸して、注射用水ですすぎ、イソプロパノールに15分浸し、注射用水で再度
すすぐことによって活性化した。
【００７１】 この溶液に、NaOH４gを加えてpHを少なくとも９に上昇させて、エンドトキシ
ンの溶解度を増加させた。次に、HP-20ポリスチレンジビニルベンゼン樹脂ビー
ズ100 gをゲラン溶液に加えて、一晩混合した。樹脂ビーズは全てスペルコ・ダ
イアニオン社（Supelco−Dianion）が製造した。
【００７２】 次に樹脂ビーズをスクリーンによってふるいにかけて溶液から除去した。次に
、0.1 M HClを用いて溶液のpHを７に再調整した。イソプロパノール２容量を加
えた後、オスターブレンダーで高速で混合することによって、ゲルライトゲラン
ガムを溶液から沈殿させた。沈殿した繊維を溶液からふるいによって回収し、50
℃で一晩乾燥させた後、エンドトキシンレベルに関して調べた。これらの測定結
果を表４に示す。
【００７３】 実施例14 非経口的使用に適したキサンタンガムの調製 ケルトロールTキサンタンガム14 gの溶液を注射用水２Lに溶解した。このキサ
ンタンガム溶液のエンドトキシンレベルは乾燥未精製キサンタンガム１グラム当
たり1,000,000 eu/g以上であった。
【００７４】 ガム溶液に接触する全ての装置は250℃で少なくとも１時間加熱するか、また
は0.1 M NaOHによって少なくとも１時間処理のいずれかによって発熱物質を除去
した。特に、樹脂ビーズは、予めエンドトキシンを除去して、0.1 M NaOH溶液に
一晩浸して、注射用水ですすぎ、メタノールに１時間浸して、注射用水で再度す
すぐことによって活性化した。
【００７５】 この溶液に、NaOH 8gを加えてpHを少なくとも９に上昇させて、エンドトキシ
ンの溶解度を増加させた。次に、HP-20ポリスチレンジビニルベンゼン樹脂ビー
ズ384 gをキサンタン溶液に加えて、一晩混合した。
【００７６】 樹脂ビーズをスクリーンによってふるいにかけて溶液から除去し、次に溶液の
pHを再度７に調整した。イソプロパノール２容量を加えた後、オスター・ブレン
ダーで高速で混合することによって、ケルトロールTキサンタンガムを溶液から
沈殿させた。沈殿した繊維を溶液からふるいによって回収して、60℃で１〜４時
間乾燥させ、エンドトキシンレベルに関して調べた。これらの測定結果を表４に
示す。
【００７７】
【表４】 バイオガムにおけるエンドトキシンレベル
【００７８】 表４に示すように、本発明の方法は、バイオガムからのエンドトキシンの高負
荷濃度を除去するために用いてもよい。これは、疎水性樹脂との接触による吸着
、および様々な溶媒による沈殿技術によって行ってもよい。
【００７９】 本発明のその他の変更および改変は、当業者には明らかであると思われる。本
発明は、当技術分野で述べられていることを除き制限されない。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｌ 29/00 Ａ６１Ｌ 29/00 Ｔ Ｃ０８Ｂ 37/04 Ｃ０８Ｂ 37/04 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ， ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ， ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，Ｃ Ｒ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ， ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，Ｌ Ｃ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ， ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，Ｓ Ｌ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者 コールグローヴ ジョージ ティ． アメリカ合衆国 カリフォルニア州 サン ディエゴ アエロ ドライヴ 8225 ザ ナトラ スウィート―ケルコ カンパニ ー (72)発明者 モンタナ モニカ エイ． アメリカ合衆国 カリフォルニア州 サン ディエゴ アエロ ドライヴ 8225 ザ ナトラ スウィート―ケルコ カンパニ ー (72)発明者 ラクズコウスキー ロバート アメリカ合衆国 カリフォルニア州 サン ディエゴ アエロ ドライヴ 8225 ザ ナトラ スウィート―ケルコ カンパニ ー (72)発明者 ホラハン ジョン アメリカ合衆国 ミズーリ州 セント ル イス ノース リンドバーグ ブールバー ド 800 モンサント カンパニー Ｆターム(参考） 4C076 AA09 BB11 BB32 EE30 EE36 FF16 FF35 4C081 AB11 AB36 AC08 BA15 CD04 DA02 DA12 4C090 AA09 AA10 BA36 BA72 BA91 BA92 BA93 BC06 BC19 BC23 BD42 CA13 CA15 DA03 DA22 DA24

Claims (69)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 エンドトキシン含有量が約100エンドトキシン単位／グラム
    未満である生体高分子塩を含む、非経口的使用に適した生体高分子塩。
  2. 【請求項２】 上記のエンドトキシン含有量が約50エンドトキシン単位／グ
    ラム未満である、請求項１記載の生体高分子塩。
  3. 【請求項３】 上記生体高分子塩がアルギネートである、請求項１記載の生
    体高分子塩。
  4. 【請求項４】 上記生体高分子塩がアルギン酸ナトリウムである、請求項３
    記載の生体高分子塩。
  5. 【請求項５】 上記アルギネートがマクロシスティス・ピリフェラ（Macroc
    ystis pyrifera）巨大ケルプの産物である、請求項３記載の生体高分子塩。
  6. 【請求項６】 上記アルギネートがラミナリア・ハイパーボレア（Laminari
    a hyperborea）ケルプの産物である、請求項３記載の生体高分子塩。
  7. 【請求項７】 上記生体高分子塩がゲランガムである、請求項１記載の生体
    高分子塩。
  8. 【請求項８】 上記ゲランガムがスフィンゴモナス・エロデア（Sphingomon
    as elodea）に由来する、請求項７記載の生体高分子塩。
  9. 【請求項９】 上記生体高分子塩がキサンタンガムである、請求項１記載の
    生体高分子塩。
  10. 【請求項１０】 上記キサンタンガムがキサントモナス・カンペストリス（
    Xanthamonas campestris）に由来する、請求項９記載の生体高分子塩。
  11. 【請求項１１】 エンドトキシン含有量が約100エンドトキシン単位／グラ
    ム未満である生体高分子塩と、薬学的に許容される溶媒とを含む、非経口的使用
    に適した生体高分子組成物。
  12. 【請求項１２】 上記生体高分子塩がアルギネートである、請求項11記載の
    生体高分子組成物。
  13. 【請求項１３】 上記生体高分子塩がバイオガムである、請求項11記載の生
    体高分子組成物。
  14. 【請求項１４】 上記エンドトキシン含有量が約50エンドトキシン単位／グ
    ラム未満である、請求項11、12および13のいずれか一項記載の生体高分子組成物
    。
  15. 【請求項１５】 上記生体高分子塩が組成物の重量で約0.5％〜５％の量で
    存在する、請求項14記載の生体高分子組成物。
  16. 【請求項１６】 上記の薬学的に許容される溶媒が水である、請求項15記載
    の生体高分子組成物。
  17. 【請求項１７】 上記アルギネートがアルギン酸ナトリウムである、請求項
    12記載の生体高分子組成物。
  18. 【請求項１８】 上記バイオガムがゲランガムである、請求項13記載の生体
    高分子組成物。
  19. 【請求項１９】 上記バイオガムがキサンタンガムである、請求項13記載の
    生体高分子組成物。
  20. 【請求項２０】 上記生体高分子のゲルを形成するために有効な量のゲル化
    剤をさらに含む、請求項11、12および13のいずれか一項記載の生体高分子組成物
    。
  21. 【請求項２１】 上記ゲルがビーズ、シート、またはフィラメントの形であ
    る、請求項20記載の生体高分子組成物。
  22. 【請求項２２】 上記ゲル化剤が二価または多価陽イオンからなる群より選
    択される、請求項20記載の生体高分子組成物。
  23. 【請求項２３】 上記ゲル化剤がカルシウム陽イオンである、請求項22記載
    の生体高分子組成物。
  24. 【請求項２４】 以下の段階を含む、エンドトキシン含有量が約100エンド
    トキシン単位／グラム未満である、生体高分子塩を調製する方法： （i）生体高分子塩の水溶液を疎水性物質に接触させて、エンドトキシンを上
    記物質に吸着させる段階；および （ii）水に混和性の有機溶媒と上記溶液とを混和することによって、エンドト
    キシン含有量が約100エンドトキシン単位／グラム未満である上記生体高分子塩
    を、上記溶液から沈殿させる段階。
  25. 【請求項２５】 上記の接触段階が、疎水性物質のフィルターまたは疎水性
    物質を含む充填カラムに、上記水溶液を通過させる段階を含む、請求項24記載の
    方法。
  26. 【請求項２６】 上記疎水性物質が疎水性樹脂である、請求項24記載の方法
    。
  27. 【請求項２７】 上記水溶液を上記疎水性樹脂に接触させる前に上記水溶液
    のpHレベルを上昇させる段階をさらに含む、請求項26記載の方法。
  28. 【請求項２８】 上記pHレベルが少なくとも９である、請求項27記載の方法
    。
  29. 【請求項２９】 上記疎水性物質がポリプロピレン、ポリスチレン、または
    フッ化炭素ポリマーからなる群より選択される、請求項24記載の方法。
  30. 【請求項３０】 上記疎水性物質がポリプロピレンである、請求項29記載の
    方法。
  31. 【請求項３１】 上記疎水性物質の平均孔径が約１μm〜約0.1 μmである、
    請求項25記載の方法。
  32. 【請求項３２】 上記平均孔径が約0.2 μmである、請求項30記載の方法。
  33. 【請求項３３】 上記疎水性樹脂の直径が５mm未満である、請求項26記載の
    方法。
  34. 【請求項３４】 上記の水に混和性の有機溶媒が、アルコール、ケトン、ア
    ルデヒドおよびその混合物からなる群より選択される、請求項24記載の方法。
  35. 【請求項３５】 上記の水に混和性の有機溶媒がアルコールである、請求項
    34記載の方法。
  36. 【請求項３６】 上記アルコールが、イソプロピルアルコール、メタノール
    およびエタノールからなる群より選択される、請求項35記載の方法。
  37. 【請求項３７】 上記ケトンがアセトンである、請求項34記載の方法。
  38. 【請求項３８】 上記有機溶媒対水溶液の容積比が約１：１〜約６：１であ
    る、請求項34記載の方法。
  39. 【請求項３９】 上記の沈殿段階の前に、上記水溶液を活性炭に通過させる
    段階をさらに含む、請求項24記載の方法。
  40. 【請求項４０】 上記水溶液における生体高分子塩の濃度が溶液の重量で約
    0.5〜約５％である、請求項24記載の方法。
  41. 【請求項４１】 上記生体高分子塩がアルギネートである、請求項24および
    25のいずれか一項記載の方法。
  42. 【請求項４２】 上記生体高分子塩がバイオガムである、請求項24および26
    のいずれか一項記載の方法。
  43. 【請求項４３】 上記の沈殿物を乾燥させる段階をさらに含む、請求項24記
    載の方法。
  44. 【請求項４４】 上記の乾燥段階が低温（40〜80℃）での乾燥器乾燥を含む
    、請求項43記載の方法。
  45. 【請求項４５】 請求項43記載の生体高分子塩を形成して、上記沈殿物を非
    経口投与に許容される溶媒に溶解する段階を含む、生体高分子組成物を調製する
    方法。
  46. 【請求項４６】 非経口投与に許容される溶媒が水である、請求項45記載の
    方法。
  47. 【請求項４７】 以下の段階を含む、エンドトキシン含有量が約100エンド
    トキシン単位／グラム未満である、生体高分子塩を調製する方法： （i）生体高分子塩の水溶液を疎水性物質に接触させて、上記物質にエンドト
    キシンを吸着させる段階；および （ii）段階（i）で処理した水溶液から、水に非混和性の有機溶媒によってエ
    ンドトキシンを抽出して、エンドトキシン含有量が約100エンドトキシン単位／
    グラム未満である生体高分子塩を形成する段階。
  48. 【請求項４８】 上記の接触段階が、疎水性物質のフィルター、または疎水
    性物質を含む充填カラムに、上記の水溶液を通過させる段階を含む、請求項47記
    載の方法。
  49. 【請求項４９】 上記の疎水性物質が疎水性樹脂である、請求項47記載の方
    法。
  50. 【請求項５０】 上記水溶液を上記疎水性樹脂に接触させる前に、上記水溶
    液のpHレベルを上昇させる段階をさらに含む、請求項49記載の方法。
  51. 【請求項５１】 上記pHレベルが少なくとも９である、請求項50記載の方法
    。
  52. 【請求項５２】 上記疎水性物質がポリプロピレン、ポリスチレン、または
    フッ化炭素ポリマーからなる群より選択される、請求項47記載の方法。
  53. 【請求項５３】 上記疎水性物質がポリプロピレンである、請求項52記載の
    方法。
  54. 【請求項５４】 上記疎水性物質の平均孔径が約１μm〜約0.1 μmである、
    請求項48記載の方法。
  55. 【請求項５５】 上記平均孔径が約0.2 μmである、請求項54記載の方法。
  56. 【請求項５６】 上記疎水性樹脂の直径が５mm未満である、請求項49記載の
    方法。
  57. 【請求項５７】 上記の水に非混和性の有機溶媒が、炭化水素、エーテル、
    クロロホルムおよびその混合物からなる群より選択される、請求項47記載の方法
    。
  58. 【請求項５８】 上記の水に非混和性の溶媒が炭化水素である、請求項57記
    載の方法。
  59. 【請求項５９】 上記の炭化水素がヘキサンである、請求項58記載の方法。
  60. 【請求項６０】 上記の炭化水素がメチルt-ブチルエーテルである、請求項
    58記載の方法。
  61. 【請求項６１】 上記の水に非混和性の有機溶媒対上記の水溶液の容積比が
    約0.5：１〜約５：１である、請求項57記載の方法。
  62. 【請求項６２】 上記の抽出段階の前に、上記の水溶液を活性炭に通過させ
    る段階をさらに含む、請求項47記載の方法。
  63. 【請求項６３】 上記水溶液中の生体高分子塩の濃度が溶液の重量の約0.5
    〜約５％である、請求項47記載の方法。
  64. 【請求項６４】 上記の生体高分子組成物を乾燥させる段階をさらに含む、
    請求項47記載の方法。
  65. 【請求項６５】 上記の乾燥段階が低温（40〜80℃）での乾燥器乾燥を含む
    、請求項64記載の方法。
  66. 【請求項６６】 請求項64記載の生体高分子塩を形成して、上記生体高分子
    組成物を非経口投与に許容される溶媒に溶解する段階を含む、生体高分子組成物
    を調製する方法。
  67. 【請求項６７】 上記の非経口投与に許容される溶媒が水である、請求項66
    記載の方法。
  68. 【請求項６８】 上記生体高分子塩がアルギネートである、請求項47および
    48のいずれか一項記載の方法。
  69. 【請求項６９】 上記生体高分子塩がバイオガムである、請求項47および49
    のいずれか一項記載の方法。
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Cited By (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2006321890A (ja) * 2005-05-18 2006-11-30 Kuraray Medical Inc 化学物質の精製方法
JP2007075425A (ja) * 2005-09-15 2007-03-29 Mochida Pharmaceut Co Ltd アルギン酸を含む創傷被覆材
WO2008102855A1 (ja) 2007-02-21 2008-08-28 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. 軟骨疾患治療用組成物
WO2009054181A1 (ja) 2007-10-24 2009-04-30 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. 関節疾患治療用組成物
JP2011510150A (ja) * 2008-01-23 2011-03-31 ジーエイチ・ケア・インク・ディービーエイ・アルトユーセル アルギン酸塩の超高純度精製方法
US8367637B2 (en) 2008-08-19 2013-02-05 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. Composition for treating arthritic disorder
WO2013027854A1 (ja) 2011-08-23 2013-02-28 持田製薬株式会社 軟骨再生用組成物
KR20150108919A (ko) * 2013-01-25 2015-09-30 마리노바 피티와이 엘티디 처리 방법
JPWO2016114355A1 (ja) * 2015-01-15 2017-04-27 国立大学法人 東京大学 癒着防止用組成物
WO2017159700A1 (ja) 2016-03-14 2017-09-21 公益財団法人田附興風会 神経再生誘導材
WO2017163603A1 (ja) 2016-03-23 2017-09-28 国立大学法人北海道大学 椎間板治療用組成物
WO2018012605A1 (ja) 2016-07-13 2018-01-18 持田製薬株式会社 癒着防止用組成物
WO2018159768A1 (ja) 2017-03-02 2018-09-07 持田製薬株式会社 線維軟骨組織損傷治療用組成物
WO2018164128A1 (ja) 2017-03-07 2018-09-13 持田製薬株式会社 アルギン酸液剤
WO2019138583A1 (ja) 2018-01-15 2019-07-18 持田製薬株式会社 癒着防止用組成物
WO2019168058A1 (ja) 2018-02-28 2019-09-06 持田製薬株式会社 新規光架橋性アルギン酸誘導体
WO2019189330A1 (ja) 2018-03-28 2019-10-03 持田製薬株式会社 新規反応性アルギン酸誘導体
WO2019240219A1 (ja) 2018-06-14 2019-12-19 持田製薬株式会社 新規な架橋アルギン酸
WO2020262642A1 (ja) 2019-06-28 2020-12-30 持田製薬株式会社 化学架橋アルギン酸を用いた移植用デバイス
WO2021060336A1 (ja) 2019-09-25 2021-04-01 持田製薬株式会社 新規な架橋アルギン酸構造体
WO2021125255A1 (ja) 2019-12-18 2021-06-24 持田製薬株式会社 新規な架橋アルギン酸
WO2021145325A1 (ja) 2020-01-14 2021-07-22 持田製薬株式会社 アルギン酸塩を使用した対象の処置のための組合せ及び方法
WO2022025229A1 (ja) 2020-07-31 2022-02-03 持田製薬株式会社 癒着防止用組成物
WO2022137345A1 (ja) 2020-12-22 2022-06-30 持田製薬株式会社 化学架橋アルギン酸を用いた移植用デバイス

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7125967B2 (en) * 2003-10-08 2006-10-24 Adjuvant Pharmaceuticals, Llc Water-soluble chitosan having low endotoxin concentration and methods for making and using the same
EP1799232B1 (en) * 2004-10-12 2015-10-07 FMC Biopolymer AS Self-gelling alginate systems and uses thereof
WO2009154440A1 (en) * 2008-06-19 2009-12-23 Bender Analytical Holding B.V. Method for removing impurities from biopolymer material
CN101570582B (zh) * 2009-05-26 2011-07-20 中山大学附属第一医院 一种具有水溶性和生物降解性的电活性聚合物及其制备方法和应用
CN106414707A (zh) * 2014-01-23 2017-02-15 日产化学工业株式会社 培养基组合物的制造方法
NL2016441B1 (en) * 2016-03-16 2017-10-05 Univ Delft Tech Alginate extraction method.
EP3810407A4 (en) * 2018-06-04 2022-03-23 Ramot at Tel-Aviv University Ltd. SUPPORT MEDIUM FOR 3D PRINTING OF BIOMATERIALS
CN110804108B (zh) * 2019-11-19 2021-11-23 青岛明月藻酸盐组织工程材料有限公司 一种体内植入用水溶性海藻酸盐的制备方法

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA968286A (en) 1968-03-28 1975-05-27 Nobuhiko Komatsu Process for manufacture of polysaccharides with antitumor action
US5589591A (en) * 1986-07-03 1996-12-31 Advanced Magnetics, Inc. Endotoxin-free polysaccharides
AU3065192A (en) * 1991-12-20 1993-07-28 Howmedica Inc. Ultra-pure polysaccharide materials for medical use
US5429821A (en) 1992-05-29 1995-07-04 The Regents Of The University Of California Non-fibrogenic high mannuronate alginate coated transplants, processes for their manufacture, and methods for their use
WO1995005803A1 (en) * 1993-08-20 1995-03-02 Alcon Laboratories, Inc. Topical ophthalmic pharmaceutical vehicles
JPH08269102A (ja) * 1995-03-30 1996-10-15 Shiseido Co Ltd エンドトキシンフリーのβ１，３−グルカン及びその製造法並びに医療用ゲル素材

Cited By (45)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2006321890A (ja) * 2005-05-18 2006-11-30 Kuraray Medical Inc 化学物質の精製方法
JP2007075425A (ja) * 2005-09-15 2007-03-29 Mochida Pharmaceut Co Ltd アルギン酸を含む創傷被覆材
US9216201B2 (en) 2007-02-21 2015-12-22 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. Method for regenerating hyaline cartilage
EP3189859A1 (en) 2007-02-21 2017-07-12 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. Composition for treatment of cartilage disease
JPWO2008102855A1 (ja) * 2007-02-21 2010-05-27 持田製薬株式会社 軟骨疾患治療用組成物
WO2008102855A1 (ja) 2007-02-21 2008-08-28 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. 軟骨疾患治療用組成物
US8372394B2 (en) 2007-02-21 2013-02-12 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. Compositions and methods for treating cartilage disease
JP4740369B2 (ja) * 2007-02-21 2011-08-03 持田製薬株式会社 軟骨疾患治療用組成物
JP2011224378A (ja) * 2007-02-21 2011-11-10 Mochida Pharmaceut Co Ltd 軟骨疾患治療用組成物
WO2009054181A1 (ja) 2007-10-24 2009-04-30 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. 関節疾患治療用組成物
JP5491866B2 (ja) * 2007-10-24 2014-05-14 持田製薬株式会社 関節疾患治療用組成物
JPWO2009054181A1 (ja) * 2007-10-24 2011-03-03 持田製薬株式会社 関節疾患治療用組成物
KR101615267B1 (ko) * 2008-01-23 2016-04-25 지에이치 케어 아이엔씨. 디/비/에이 알트유셀 아이엔씨. 알지네이트의 초 정제를 위한 방법
JP2011510150A (ja) * 2008-01-23 2011-03-31 ジーエイチ・ケア・インク・ディービーエイ・アルトユーセル アルギン酸塩の超高純度精製方法
US8367637B2 (en) 2008-08-19 2013-02-05 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. Composition for treating arthritic disorder
WO2013027854A1 (ja) 2011-08-23 2013-02-28 持田製薬株式会社 軟骨再生用組成物
KR20150108919A (ko) * 2013-01-25 2015-09-30 마리노바 피티와이 엘티디 처리 방법
KR102223725B1 (ko) * 2013-01-25 2021-03-08 마리노바 피티와이 엘티디 처리 방법
JP2016505083A (ja) * 2013-01-25 2016-02-18 マリノヴァ プロプライエタリー リミテッド 処理方法
JPWO2016114355A1 (ja) * 2015-01-15 2017-04-27 国立大学法人 東京大学 癒着防止用組成物
WO2017159700A1 (ja) 2016-03-14 2017-09-21 公益財団法人田附興風会 神経再生誘導材
EP4374886A1 (en) 2016-03-23 2024-05-29 National University Corporation Hokkaido University Composition for treating intervertebral disc
WO2017163603A1 (ja) 2016-03-23 2017-09-28 国立大学法人北海道大学 椎間板治療用組成物
US11464597B2 (en) 2016-07-13 2022-10-11 The University Of Tokyo Adhesion-preventing composition
JPWO2018012605A1 (ja) * 2016-07-13 2019-04-25 持田製薬株式会社 癒着防止用組成物
US11890145B2 (en) 2016-07-13 2024-02-06 The University Of Tokyo Adhesion-preventing composition
JP7330327B2 (ja) 2016-07-13 2023-08-21 持田製薬株式会社 癒着防止用組成物
WO2018012605A1 (ja) 2016-07-13 2018-01-18 持田製薬株式会社 癒着防止用組成物
JP2022090089A (ja) * 2016-07-13 2022-06-16 持田製薬株式会社 癒着防止用組成物
JP7065769B2 (ja) 2016-07-13 2022-05-12 持田製薬株式会社 癒着防止用組成物
WO2018159768A1 (ja) 2017-03-02 2018-09-07 持田製薬株式会社 線維軟骨組織損傷治療用組成物
EP4295838A2 (en) 2017-03-07 2023-12-27 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. Alginate liquid formulation
WO2018164128A1 (ja) 2017-03-07 2018-09-13 持田製薬株式会社 アルギン酸液剤
US11969437B2 (en) 2017-03-07 2024-04-30 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. Alginate liquid preparation
EP3741400A4 (en) * 2018-01-15 2021-08-25 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. NON-ADHESIVE COMPOSITION
WO2019138583A1 (ja) 2018-01-15 2019-07-18 持田製薬株式会社 癒着防止用組成物
WO2019168058A1 (ja) 2018-02-28 2019-09-06 持田製薬株式会社 新規光架橋性アルギン酸誘導体
WO2019189330A1 (ja) 2018-03-28 2019-10-03 持田製薬株式会社 新規反応性アルギン酸誘導体
WO2019240219A1 (ja) 2018-06-14 2019-12-19 持田製薬株式会社 新規な架橋アルギン酸
WO2020262642A1 (ja) 2019-06-28 2020-12-30 持田製薬株式会社 化学架橋アルギン酸を用いた移植用デバイス
WO2021060336A1 (ja) 2019-09-25 2021-04-01 持田製薬株式会社 新規な架橋アルギン酸構造体
WO2021125255A1 (ja) 2019-12-18 2021-06-24 持田製薬株式会社 新規な架橋アルギン酸
WO2021145325A1 (ja) 2020-01-14 2021-07-22 持田製薬株式会社 アルギン酸塩を使用した対象の処置のための組合せ及び方法
WO2022025229A1 (ja) 2020-07-31 2022-02-03 持田製薬株式会社 癒着防止用組成物
WO2022137345A1 (ja) 2020-12-22 2022-06-30 持田製薬株式会社 化学架橋アルギン酸を用いた移植用デバイス

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Publication number Publication date
US6451772B1 (en) 2002-09-17
CA2352830A1 (en) 2000-05-25
AU1726400A (en) 2000-06-05
EP1135418A1 (en) 2001-09-26
WO2000029449A1 (en) 2000-05-25

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