JP2002506653A - フェキソフェナジンの新規の製造方法 - Google Patents
フェキソフェナジンの新規の製造方法Info
- Publication number
- JP2002506653A JP2002506653A JP2000536876A JP2000536876A JP2002506653A JP 2002506653 A JP2002506653 A JP 2002506653A JP 2000536876 A JP2000536876 A JP 2000536876A JP 2000536876 A JP2000536876 A JP 2000536876A JP 2002506653 A JP2002506653 A JP 2002506653A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- formula
- compound
- fexofenadine
- medium
- terfenadine
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 229960003592 fexofenadine Drugs 0.000 title claims abstract description 43
- RWTNPBWLLIMQHL-UHFFFAOYSA-N fexofenadine Chemical compound C1=CC(C(C)(C(O)=O)C)=CC=C1C(O)CCCN1CCC(C(O)(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)CC1 RWTNPBWLLIMQHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 43
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract description 4
- GUGOEEXESWIERI-UHFFFAOYSA-N Terfenadine Chemical compound C1=CC(C(C)(C)C)=CC=C1C(O)CCCN1CCC(C(O)(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)CC1 GUGOEEXESWIERI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 43
- 229960000351 terfenadine Drugs 0.000 claims abstract description 35
- 241000144128 Lichtheimia corymbifera Species 0.000 claims abstract description 18
- 241000593945 Streptomyces platensis Species 0.000 claims abstract description 7
- XSTXAVWGXDQKEL-UHFFFAOYSA-N Trichloroethylene Chemical compound ClC=C(Cl)Cl XSTXAVWGXDQKEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 42
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 33
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 31
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 27
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 26
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 26
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 11
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 10
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 claims description 9
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 8
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 claims description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 48
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 30
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 26
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 17
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 17
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 10
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 10
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 6
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 6
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 6
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 6
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 6
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 5
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 5
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 5
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 4
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 4
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000035285 Allergic Seasonal Rhinitis Diseases 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RRJFVPUCXDGFJB-UHFFFAOYSA-N Fexofenadine hydrochloride Chemical compound Cl.C1=CC(C(C)(C(O)=O)C)=CC=C1C(O)CCCN1CCC(C(O)(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)CC1 RRJFVPUCXDGFJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 241001459306 Lichtheimia blakesleeana Species 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000036284 Rhinitis seasonal Diseases 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 201000010105 allergic rhinitis Diseases 0.000 description 2
- 230000001387 anti-histamine Effects 0.000 description 2
- 239000000739 antihistaminic agent Substances 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 2
- AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N dimethyl 2-(3-ethyl-3-methylpentyl)propanedioate Chemical compound CCC(C)(CC)CCC(C(=O)OC)C(=O)OC AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 229960000354 fexofenadine hydrochloride Drugs 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 102220201851 rs143406017 Human genes 0.000 description 2
- 208000017022 seasonal allergic rhinitis Diseases 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011121 sodium hydroxide Nutrition 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- XXMFJKNOJSDQBM-UHFFFAOYSA-N 2,2,2-trifluoroacetic acid;hydrate Chemical compound [OH3+].[O-]C(=O)C(F)(F)F XXMFJKNOJSDQBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000235389 Absidia Species 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 241000186984 Kitasatospora aureofaciens Species 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 241000187759 Streptomyces albus Species 0.000 description 1
- 241000187758 Streptomyces ambofaciens Species 0.000 description 1
- 241000186988 Streptomyces antibioticus Species 0.000 description 1
- 241000970256 Streptomyces djakartensis Species 0.000 description 1
- 241000187398 Streptomyces lividans Species 0.000 description 1
- 241000187180 Streptomyces sp. Species 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- CELPHAGZKFMOMR-UHFFFAOYSA-N azanium;dichloromethane;methanol;hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-].OC.ClCCl CELPHAGZKFMOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010364 biochemical engineering Methods 0.000 description 1
- 230000036983 biotransformation Effects 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 125000000118 dimethyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 229960001760 dimethyl sulfoxide Drugs 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 230000036267 drug metabolism Effects 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000004362 fungal culture Methods 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000015497 potassium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011181 potassium carbonates Nutrition 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 235000015424 sodium Nutrition 0.000 description 1
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L sodium carbonate Substances [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000009987 spinning Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Substances OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004072 triols Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
- C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D211/68—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
- C07D211/70—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
- C07F9/553—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07F9/576—Six-membered rings
- C07F9/59—Hydrogenated pyridine rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/10—Nitrogen as only ring hetero atom
- C12P17/12—Nitrogen as only ring hetero atom containing a six-membered hetero ring
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Hydrogenated Pyridines (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】
本発明は、テルフェナジンからAbsidia Corymbifera LCP63-1800又はStreptomyces platensis NRRL 2364を用いたバイオ転化方法によってフェキソフェナジンを製造するための方法を主題とする。
Description
【０００１】 本発明の主題は、フェキソフェナジンの新規の製造方法にある。 フェキソフェナジンは、有意の抗ヒスタミン活性を有し且つ副作用がない薬剤
である｛季節性アレルギー性鼻炎の処置についてのフェキソフェナジン塩酸塩の
効能及び安全性（Efficacy and Safety of Fexofenadine hydrochloride for tr
eatment of seasonal allergic rhinitis）、Bernstein D.I.ら、Ann. Allergy-
Asthma-Immunol.、（1997）79(5)、443〜448｝。
である｛季節性アレルギー性鼻炎の処置についてのフェキソフェナジン塩酸塩の
効能及び安全性（Efficacy and Safety of Fexofenadine hydrochloride for tr
eatment of seasonal allergic rhinitis）、Bernstein D.I.ら、Ann. Allergy-
Asthma-Immunol.、（1997）79(5)、443〜448｝。
【０００２】 この化合物は、それ自体抗ヒスタミン薬であるテルフェナジンの主要代謝産物
である｛D. Mc Tavish、KL Goa及びM. Ferill、『テルフェナジン：その薬理学 的性質及び治療上の有効性の最新の評価（terfenadine: an updated review of
its pharmacological properties and therapeutic efficiency）』、Drug 39、
552〜574（1989）｝。 フェキソフェナジンは従来は化学的ルートで多段階で１０％よりも低い収率で
調製されていた（米国特許第５５７８６１０号及び同第５５８１０１１号の各明
細書）。
である｛D. Mc Tavish、KL Goa及びM. Ferill、『テルフェナジン：その薬理学 的性質及び治療上の有効性の最新の評価（terfenadine: an updated review of
its pharmacological properties and therapeutic efficiency）』、Drug 39、
552〜574（1989）｝。 フェキソフェナジンは従来は化学的ルートで多段階で１０％よりも低い収率で
調製されていた（米国特許第５５７８６１０号及び同第５５８１０１１号の各明
細書）。
【０００３】 従って、本出願人は、フェキソフェナジンのための別の合成ルートを見出すこ
とを提唱する。そして、次の非常に特異的な２つのタイプの微生物：アブシディ
ア・コリンビフェラ（Absidia Corymbifera）属（特にAbsidia Corymbifera LCP
63-1800）又はストレプトミセス（Streptomyces）属｛特にStreptomyces plate
nsis（ストレプトミセス・プラテンシス）NRRL 2364｝：の内の１つを用いるバ イオ転化（生物学的転化）方法に選択が向けられる。 これらの微生物についてのバイオ転化の特異性は予期されなかった。篩分け（
選別）の間に研究された数多くの菌株の中で、これらだけが良好な収率で且つ殆
ど又は全く副生成物なしでフェキソフェナジンを得ることを可能にするものだっ
た。
とを提唱する。そして、次の非常に特異的な２つのタイプの微生物：アブシディ
ア・コリンビフェラ（Absidia Corymbifera）属（特にAbsidia Corymbifera LCP
63-1800）又はストレプトミセス（Streptomyces）属｛特にStreptomyces plate
nsis（ストレプトミセス・プラテンシス）NRRL 2364｝：の内の１つを用いるバ イオ転化（生物学的転化）方法に選択が向けられる。 これらの微生物についてのバイオ転化の特異性は予期されなかった。篩分け（
選別）の間に研究された数多くの菌株の中で、これらだけが良好な収率で且つ殆
ど又は全く副生成物なしでフェキソフェナジンを得ることを可能にするものだっ
た。
【０００４】 本発明の主題は、次式（I）：
【化５】 の化合物の製造方法であって、 アブシディア・コリンビフェラ属の微生物培地又はストレプトミセス属の微生
物培地を用いて５．０〜８．０の範囲のｐＨにおいて次式（II）：
物培地を用いて５．０〜８．０の範囲のｐＨにおいて次式（II）：
【化６】 の化合物のバイオ転化を実施して式（I）の所期の化合物を得て、 必要に応じてこの化合物を単離し、精製し且つ（又は）塩形成させることを特
徴とし、 式（I）又は式（II）の化合物が２つの可能なエナンチオマーの内のいずれか 一方の形にあることもでき、それらの混合物の形にあることもできる、前記製造
方法にある。式中の星印（アスタリスク）は不斉炭素の位置を示す。
徴とし、 式（I）又は式（II）の化合物が２つの可能なエナンチオマーの内のいずれか 一方の形にあることもでき、それらの混合物の形にあることもできる、前記製造
方法にある。式中の星印（アスタリスク）は不斉炭素の位置を示す。
【０００５】 本発明の特定的な主題は、アブシディア・コリンビフェラがAbsidia Corymbif
era LCP 63-1800である前記の製造方法、又はストレプトミセスがStreptomyces
platensis NRRL 2364である前記の製造方法にある。 フェキソフェナジンは式（I）のエナンチオマーのラセミ混合物である。従っ て本発明のより特定的な主題は、式（II）の２種のエナンチオマーのラセミ混合
物に相当するテルフェナジンのバイオ転化を実施して式（I）のエナンチオマー のラセミ混合物に相当するフェキソフェナジンを得る、前記の方法にある。
era LCP 63-1800である前記の製造方法、又はストレプトミセスがStreptomyces
platensis NRRL 2364である前記の製造方法にある。 フェキソフェナジンは式（I）のエナンチオマーのラセミ混合物である。従っ て本発明のより特定的な主題は、式（II）の２種のエナンチオマーのラセミ混合
物に相当するテルフェナジンのバイオ転化を実施して式（I）のエナンチオマー のラセミ混合物に相当するフェキソフェナジンを得る、前記の方法にある。
【０００６】 アブシディア・コリンビフェラ、特にAbsidia Corymbifera LCP 63-1800は、 パリ自然歴史博物館隠花植物研究所（Cryptogamie du Meseum d'Histoire Natur
elle de Paris）から入手できる。 本発明の主題である方法において用いることができるストレプトミセスの中で
は、次のストレプトミセスを挙げることができる： ・Streptomyces albus ・Streptomyces ambofaciens ATCC 15154 ・Streptomyces antibioticus ATCC 31771 ・Streptomyces aureofaciens ATCC 10762 ・Streptomyces djakartensis ・Streptomyces erythraeus ・Streptomyces felleus DSM 40130 ・Streptomyces fradiae W3554 ・Streptomyces griseus NRRL B150 ・Streptomyces JSP-2 (FH2126) ・Streptomyces lividans JT46/pCS2 ・Streptomyces narbonensis FH 2102 ・Streptomyces olivaceus ATCC 3335 ・Streptomyces platensis ATCC 13865 ・Streptomyces platensis NRRL 2364 ・Streptomyces rimosus 2234 ・Streptomyces venezuelae NRRL B-2446。
elle de Paris）から入手できる。 本発明の主題である方法において用いることができるストレプトミセスの中で
は、次のストレプトミセスを挙げることができる： ・Streptomyces albus ・Streptomyces ambofaciens ATCC 15154 ・Streptomyces antibioticus ATCC 31771 ・Streptomyces aureofaciens ATCC 10762 ・Streptomyces djakartensis ・Streptomyces erythraeus ・Streptomyces felleus DSM 40130 ・Streptomyces fradiae W3554 ・Streptomyces griseus NRRL B150 ・Streptomyces JSP-2 (FH2126) ・Streptomyces lividans JT46/pCS2 ・Streptomyces narbonensis FH 2102 ・Streptomyces olivaceus ATCC 3335 ・Streptomyces platensis ATCC 13865 ・Streptomyces platensis NRRL 2364 ・Streptomyces rimosus 2234 ・Streptomyces venezuelae NRRL B-2446。
【０００７】 別の核がない極めて簡単な細菌の細胞は原核生物として分類することができる
ということは、当業者に知られている。これは線状細菌（filamentous bacteria
）であるStreptomycesの場合であり、これは好気性生物であり、グラム陽性であ
る。他方、その他の微生物、例えば糸状真菌（filamentous fungi）及び全く特 定的にはAbsidia Corymbiferaのような微生物は、真核生物と称される。これら の細胞は、特に核及び多数の細胞質小器官が存在することによって原核生物から
区別される。
ということは、当業者に知られている。これは線状細菌（filamentous bacteria
）であるStreptomycesの場合であり、これは好気性生物であり、グラム陽性であ
る。他方、その他の微生物、例えば糸状真菌（filamentous fungi）及び全く特 定的にはAbsidia Corymbiferaのような微生物は、真核生物と称される。これら の細胞は、特に核及び多数の細胞質小器官が存在することによって原核生物から
区別される。
【０００８】 本発明の主題である前記の方法は、数多くの利点を提供する。まず、本方法は
、多数の合成段階を必要とし且つそれぞれの反応段階において必要な単離工程が
伴う化学的ルートを回避する。工業的な利用の場合、このルートは費用がかかり
且つ汚染をもたらすことが認められている。
、多数の合成段階を必要とし且つそれぞれの反応段階において必要な単離工程が
伴う化学的ルートを回避する。工業的な利用の場合、このルートは費用がかかり
且つ汚染をもたらすことが認められている。
【０００９】 本発明の主題である方法の場合、単一の操作が必要なだけであり、随意として
の精製段階は本質的にはバイオ転化の際に生成することがある副生成物、即ちま
だ酸に酸化していないアルコールが下記のホスフェートの形にエステル化された
ものに相当するトリオールホスフェート（式（IIIｂ））を除去することを目的 とするだけである。
の精製段階は本質的にはバイオ転化の際に生成することがある副生成物、即ちま
だ酸に酸化していないアルコールが下記のホスフェートの形にエステル化された
ものに相当するトリオールホスフェート（式（IIIｂ））を除去することを目的 とするだけである。
【００１０】 本方法はまた、工業的用途にも適する。０．５ｇ／リットルの出発物質濃度で
操作することによって、収率は出発物質に対して７０％を超える。
操作することによって、収率は出発物質に対して７０％を超える。
【００１１】 化学的ルートに対して微生物ルートを用いることのその他の利点としては、こ
の技術の非汚染性局面を強調することができ、すべての操作は水性媒体中で行な
われる。
の技術の非汚染性局面を強調することができ、すべての操作は水性媒体中で行な
われる。
【００１２】 精製は、当業者に周知の方法に従って実施される。これは結晶化、クロマトグ
ラフィー又はイオン交換樹脂による精製であることができる。
ラフィー又はイオン交換樹脂による精製であることができる。
【００１３】 塩形成反応は、通常の条件下で実施することができる。例えばこの操作は、エ
タノール性苛性ソーダの存在下で実施することができる。また、炭酸又は酸性炭
酸ナトリウム又はカリウムのようなナトリウム又はカリウム塩を用いることもで
きる。得られる塩は、アルカリ若しくはアルカリ土類金属又は随意に置換された
アンモニウムの塩であることができる。
タノール性苛性ソーダの存在下で実施することができる。また、炭酸又は酸性炭
酸ナトリウム又はカリウムのようなナトリウム又はカリウム塩を用いることもで
きる。得られる塩は、アルカリ若しくはアルカリ土類金属又は随意に置換された
アンモニウムの塩であることができる。
【００１４】 酸化は、糸状真菌の培地を用いた有機分子の微生物的酸化に通常用いられてい
る方法に従って実施される｛Holland HL、Organic synthesis with oxidative e
nzymes. VCH publisher, Inc, New York 1992; Lacroix I.、Biton J. and Azer
ad R.、Microbial biotransformation of synthetic immunomodulating agent H
R325、Bioorg. Med. Chem.（1997）7、1369〜1380; Sebek OK、Fungal transfor
mations as a useful method for the organic synthesis of organic compound
s、Mycologia 75(2)、383〜394、1983; Azerad R.、Microbial models for drug
metabolism、Advances in Biochemical Engineering and Biotechnology、Vol.
63、page 169、1999｝。
る方法に従って実施される｛Holland HL、Organic synthesis with oxidative e
nzymes. VCH publisher, Inc, New York 1992; Lacroix I.、Biton J. and Azer
ad R.、Microbial biotransformation of synthetic immunomodulating agent H
R325、Bioorg. Med. Chem.（1997）7、1369〜1380; Sebek OK、Fungal transfor
mations as a useful method for the organic synthesis of organic compound
s、Mycologia 75(2)、383〜394、1983; Azerad R.、Microbial models for drug
metabolism、Advances in Biochemical Engineering and Biotechnology、Vol.
63、page 169、1999｝。
【００１５】 かくして、最初に予備試験において分析的ルート、特に薄層クロマトグラフィ
ー又はＨＰＬＣによって、最も好ましい発酵条件、例えば栄養培地の選択、好適
な基質の溶剤、基質の濃度、培養のための最適な技術的条件（例えば温度、換気
、ｐＨ及び時間）、並びに基質の添加及び基質と微生物との接触のような発酵条
件を決定する。
ー又はＨＰＬＣによって、最も好ましい発酵条件、例えば栄養培地の選択、好適
な基質の溶剤、基質の濃度、培養のための最適な技術的条件（例えば温度、換気
、ｐＨ及び時間）、並びに基質の添加及び基質と微生物との接触のような発酵条
件を決定する。
【００１６】 第一の局面において、培養は液状栄養培地中で５〜７の初期ｐＨで２０〜３０
℃、好ましくは２６〜２８℃の温度においてAbsidia Corymbifera LCP 63-1800 又はストレプトミセス（Streptomyces）属（特にStreptomyces platensis NRRL
2364）の接種材料（胞子又は菌糸体）から実施される。換気は、培養容器を回転
撹拌する（１５０〜２５０ｒｐｍ）ことによって、又は発酵容器中でブイヨン培
地１リットル当たりに毎分約１リットルの流量で空気を導入することによって、
保証される。
℃、好ましくは２６〜２８℃の温度においてAbsidia Corymbifera LCP 63-1800 又はストレプトミセス（Streptomyces）属（特にStreptomyces platensis NRRL
2364）の接種材料（胞子又は菌糸体）から実施される。換気は、培養容器を回転
撹拌する（１５０〜２５０ｒｐｍ）ことによって、又は発酵容器中でブイヨン培
地１リットル当たりに毎分約１リットルの流量で空気を導入することによって、
保証される。
【００１７】 ２４〜７２時間、好ましくは６０〜６５時間の時間の後に、テルフェナジンを
０．１〜１ｇ／リットル、好ましくは０．４〜０．６ｇ／リットルの濃度でエタ
ノール、アセトン、テトラヒドロフラン、ジメチルホルムアミド又はジメチルス
ルホキシドのような水と混和性の有機溶剤（培地１リットル当たりに５〜２０ミ
リリットル）、好ましくはエタノール（１０ミリリットル／リットル）中の溶液
状で添加する。培養と同じ条件下でインキュベーションを続ける。随意にｐＨを
５．０〜８．０の値に再調節して維持する。基質の転化の後にインキュベーショ
ン上澄み液のＨＰＬＣ分析又は有機溶剤で抽出したサンプルの薄層クロマトグラ
フィーを実施するのが有利である。一般的に４８〜２００時間の後に充分な量の
フェキソフェナジンが生成した。
０．１〜１ｇ／リットル、好ましくは０．４〜０．６ｇ／リットルの濃度でエタ
ノール、アセトン、テトラヒドロフラン、ジメチルホルムアミド又はジメチルス
ルホキシドのような水と混和性の有機溶剤（培地１リットル当たりに５〜２０ミ
リリットル）、好ましくはエタノール（１０ミリリットル／リットル）中の溶液
状で添加する。培養と同じ条件下でインキュベーションを続ける。随意にｐＨを
５．０〜８．０の値に再調節して維持する。基質の転化の後にインキュベーショ
ン上澄み液のＨＰＬＣ分析又は有機溶剤で抽出したサンプルの薄層クロマトグラ
フィーを実施するのが有利である。一般的に４８〜２００時間の後に充分な量の
フェキソフェナジンが生成した。
【００１８】 別の手順は、培地のバイオマスを濾過によって分離し、これを水又は緩衝液で
洗浄して中性ｐＨにし、次いで好適な緩衝液（例えばｐＨ７の０．０５Ｍ燐酸塩
緩衝液）中に再懸濁させ、次いで基質を添加して前記のようにインキュベーショ
ンを続けることから成る。
洗浄して中性ｐＨにし、次いで好適な緩衝液（例えばｐＨ７の０．０５Ｍ燐酸塩
緩衝液）中に再懸濁させ、次いで基質を添加して前記のようにインキュベーショ
ンを続けることから成る。
【００１９】 本方法の生成物の単離及び精製は、周知の態様で実施される。例えば、本方法
の生成物を有機溶剤（好ましくは酢酸エチル）で抽出することができ、また、疎
水性カラム上に吸着させ、次いで有機溶剤によって溶離させ、有機溶剤を蒸発さ
せ、生成物をカラムクロマトグラフィー若しくは結晶化によって分離精製するこ
ともできる。
の生成物を有機溶剤（好ましくは酢酸エチル）で抽出することができ、また、疎
水性カラム上に吸着させ、次いで有機溶剤によって溶離させ、有機溶剤を蒸発さ
せ、生成物をカラムクロマトグラフィー若しくは結晶化によって分離精製するこ
ともできる。
【００２０】 従って、本発明のより一層特定的な主題は、バイオ転化条件が次の通り： ・０．５ｇ／リットル〜１０ｇ／リットル、好ましくは０．５ｇ／リットル〜５
ｇ／リットルのテルフェナジン添加濃度； ・５．０〜８．０の範囲のｐＨ； ・２６℃〜２８℃の範囲の温度； 及び ・ブイヨン培地１リットル当たりに毎分ほぼ１リットルの空気流導入による換気
： である前記の方法にある。
ｇ／リットルのテルフェナジン添加濃度； ・５．０〜８．０の範囲のｐＨ； ・２６℃〜２８℃の範囲の温度； 及び ・ブイヨン培地１リットル当たりに毎分ほぼ１リットルの空気流導入による換気
： である前記の方法にある。
【００２１】 本発明の１つの目標は、副生成物の生成を最小限にするためにインキュベーシ
ョンの間ｐＨを最適な値に調節して随意にそれを維持することである。
ョンの間ｐＨを最適な値に調節して随意にそれを維持することである。
【００２２】 Absidia Corymbifera又はStreptomyces platensisによるテルフェナジン（II ）のフェキソフェナジン（I）への転化は、いくつかの連続的な段階を伴い、次 の図式に従ってトリオール（IIIｃ）並びに２つの望まれない副生成物であるテ ルフェナジンホスフェート（テルフェナジン−Ｐと略記する）（IIIａ）及びト リオールホスフェート（トリオール−Ｐと略記する）（IIIｂ）が中間で生成す る：
【化７】
【化８】
【００２３】 インキュベーション培地中の微生物によってもたらされるテルフェナジン（II
）のトリオール（IIIｃ）への初期酸化は、僅かに酸性の乃至中性のｐＨ（６＜ ｐＨ＜７）によって促進される（第２表）。テルフェナジンホスフェート（III ａ）の生成（不可逆的らしい）は、試験したすべての条件において非常に制限さ
れたままで、１〜２％未満である。他方、トリオールホスフェート（IIIｂ）の 生成は、第３表に示したように特に中性又はアルカリ性ｐＨ（ｐＨ７．０〜８．
０）においてインキュベーションを実施した場合には、培地中に蓄積する酸化生
成物の内の有意の割合を占める（図１も参照されたい）。このｐＨは、インキュ
ベーション培地が自然にそこに向かって変化していくｐＨである。しかしながら
、僅かに酸性のｐＨ（最適にはｐＨ６付近）においては、インキュベーション培
地中に存在する菌を起源とするホスファターゼがトリオールホスフェート（III ｂ）の迅速な加水分解を触媒し（第４表、図１）、それより高いｐＨ（ｐＨ≧７
）においてはトリオールのフェキソフェナジンへの不可逆的酸化が促進される（
第５表、図１）。
）のトリオール（IIIｃ）への初期酸化は、僅かに酸性の乃至中性のｐＨ（６＜ ｐＨ＜７）によって促進される（第２表）。テルフェナジンホスフェート（III ａ）の生成（不可逆的らしい）は、試験したすべての条件において非常に制限さ
れたままで、１〜２％未満である。他方、トリオールホスフェート（IIIｂ）の 生成は、第３表に示したように特に中性又はアルカリ性ｐＨ（ｐＨ７．０〜８．
０）においてインキュベーションを実施した場合には、培地中に蓄積する酸化生
成物の内の有意の割合を占める（図１も参照されたい）。このｐＨは、インキュ
ベーション培地が自然にそこに向かって変化していくｐＨである。しかしながら
、僅かに酸性のｐＨ（最適にはｐＨ６付近）においては、インキュベーション培
地中に存在する菌を起源とするホスファターゼがトリオールホスフェート（III ｂ）の迅速な加水分解を触媒し（第４表、図１）、それより高いｐＨ（ｐＨ≧７
）においてはトリオールのフェキソフェナジンへの不可逆的酸化が促進される（
第５表、図１）。
【００２４】 その結果、殆どすべてのテルフェナジンをフェキソフェナジンに転化させるた
めには、（生成する非常に少量のテルフェナジンホスフェートを考慮しないのな
らば、）いくつかの可能な方策がある。 ・最初にインキュベーションを初期培地中で約６．５のｐＨにおいてｐＨを制御
することなく進行させて（同時にｐＨが８．０〜８．５に向かって変化する）テ
ルフェナジンをトリオールホスフェート（IIIｂ）とフェキソフェナジンとの安 定な変化しない混合物に完全に転化させ（図２）（例２及び３）、次いでｐＨを
３．５〜４の範囲の値に低下させて（IIIｂ）の（IIIｃ）への転化を促進し、ト
リオールホスフェート（IIIｂ）が完全に消失するまでｐＨをゆっくり自然に６ ．０に向けて上昇させ、次いでトリオール（IIIｃ）がフェキソフェナジンに転 化するまでｐＨをほぼ８．０に再調節して維持する（図３）（例４）。 ・同じ態様でインキュベーションを培地中で最初に約６．５のｐＨにおいてｐＨ
を制御することなく進行させ（ｐＨが自然に８．０〜８．５に向かって変化する
）、次いでｐＨを６．０〜６．５の範囲の値に低下させて維持する。このｐＨに
おいてはホスファターゼ−ホスホリラーゼ活性のこのｐＨにおける平衡の結果と
してトリオールホスフェート（IIIｂ）が非常に迅速に加水分解し、他方トリオ ール（IIIｃ）自体は非常に迅速に酸化して殆ど完全にフェキソフェナジンに転 化する（図４）（例５）。
めには、（生成する非常に少量のテルフェナジンホスフェートを考慮しないのな
らば、）いくつかの可能な方策がある。 ・最初にインキュベーションを初期培地中で約６．５のｐＨにおいてｐＨを制御
することなく進行させて（同時にｐＨが８．０〜８．５に向かって変化する）テ
ルフェナジンをトリオールホスフェート（IIIｂ）とフェキソフェナジンとの安 定な変化しない混合物に完全に転化させ（図２）（例２及び３）、次いでｐＨを
３．５〜４の範囲の値に低下させて（IIIｂ）の（IIIｃ）への転化を促進し、ト
リオールホスフェート（IIIｂ）が完全に消失するまでｐＨをゆっくり自然に６ ．０に向けて上昇させ、次いでトリオール（IIIｃ）がフェキソフェナジンに転 化するまでｐＨをほぼ８．０に再調節して維持する（図３）（例４）。 ・同じ態様でインキュベーションを培地中で最初に約６．５のｐＨにおいてｐＨ
を制御することなく進行させ（ｐＨが自然に８．０〜８．５に向かって変化する
）、次いでｐＨを６．０〜６．５の範囲の値に低下させて維持する。このｐＨに
おいてはホスファターゼ−ホスホリラーゼ活性のこのｐＨにおける平衡の結果と
してトリオールホスフェート（IIIｂ）が非常に迅速に加水分解し、他方トリオ ール（IIIｃ）自体は非常に迅速に酸化して殆ど完全にフェキソフェナジンに転 化する（図４）（例５）。
【００２５】 従って、本発明のより特定的な主題は、 ・ほぼ６．５の初期ｐＨを自然に８．０〜８．５に変化させてトリオールホスフ
ェート（IIIｂ）と式（I）の化合物との混合物をもたらし、 次いでこのｐＨを３．５〜４の範囲の値に低下させて式（IIIｂ）の中間体化 合物の式（IIIｃ）の中間体化合物への転化を促進し、 次いで式（IIIｂ）の化合物が完全に消失するまでｐＨを自然にほぼ６．０に 変化させ、 最後に式（IIIｃ）の化合物がフェキソフェナジンに転化するまでｐＨをほぼ ８．０に再調節して維持する、前記方法； ・初期ｐＨがほぼ６．５であり、 このｐＨを自然に８．０〜８．５に変化させ、 次いで６．３〜６．８の範囲の値に低下させて維持する、前記方法； ・精製工程の間に請求項１記載の式（I）の化合物の抽出を酢酸エチル中で実施 する、前記方法： にある。
ェート（IIIｂ）と式（I）の化合物との混合物をもたらし、 次いでこのｐＨを３．５〜４の範囲の値に低下させて式（IIIｂ）の中間体化 合物の式（IIIｃ）の中間体化合物への転化を促進し、 次いで式（IIIｂ）の化合物が完全に消失するまでｐＨを自然にほぼ６．０に 変化させ、 最後に式（IIIｃ）の化合物がフェキソフェナジンに転化するまでｐＨをほぼ ８．０に再調節して維持する、前記方法； ・初期ｐＨがほぼ６．５であり、 このｐＨを自然に８．０〜８．５に変化させ、 次いで６．３〜６．８の範囲の値に低下させて維持する、前記方法； ・精製工程の間に請求項１記載の式（I）の化合物の抽出を酢酸エチル中で実施 する、前記方法： にある。
【００２６】 最後に、本発明の主題はまた、中間体化合物としての、式（IIIｃ）の化合物 にもある。
【００２７】 以下、実施例によって本発明を例示するが、これら実施例は本発明を限定する
ものではない。
ものではない。
【００２８】 様々な培地の調製培地Ａ ：蒸留水９００ミリリットルに対して、コーンスティープリカー、１０ミ
リリットル；ＮａＮＯ3、２ｇ；ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ、０．５ｇ；ＦｅＳＯ4・７
Ｈ2Ｏ、０．０２ｇ；ＫＣｌ、０．５ｇ。燐酸塩緩衝液（蒸留水４０ミリリット ル中にＫ2ＨＰＯ4、２ｇ；ＫＨ2ＰＯ4、１ｇ）及びグルコース（蒸留水６０ミリ
リットル中に３０ｇ）を接種の瞬間に添加。培地Ｂ ：蒸留水９００ミリリットルに対して、大豆ペプトン、５ｇ；酵母抽出物
、５ｇ；ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ、０．５ｇ；ＮａＮＯ3、２ｇ；ＫＣｌ、０．５ｇ ；ＦｅＳＯ4・７Ｈ2Ｏ、０．０２ｇ。燐酸塩緩衝液（蒸留水４０ミリリットル中
にＫ2ＨＰＯ4、２ｇ；ＫＨ2ＰＯ4、１ｇ）及びグルコース（蒸留水６０ミリリッ
トル中に３０ｇ）を接種の瞬間に添加。培地Ｃ ：蒸留水９００ミリリットルに対して、大豆ペプトン、５ｇ；酵母抽出物
、５ｇ；ＮａＣｌ、５ｇ；Ｋ2ＨＰＯ4、５ｇ。グルコース（２００ｇ／リットル
溶液１００ミリリットル）を接種の瞬間に添加。培地Ｄ ：蒸留水９００ミリリットルに対して、コーンスティープリカー、１０ミ
リリットル；大豆ペプトン、５ｇ；ＮａＮＯ3、２ｇ；ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ、０ ．５ｇ；ＦｅＳＯ4・７Ｈ2Ｏ、０．０２ｇ；ＫＣｌ、０．５ｇ。燐酸塩緩衝液（
蒸留水４０ミリリットル中にＫ2ＨＰＯ4、２ｇ；ＫＨ2ＰＯ4、１ｇ）及びグルコ
ース（蒸留水６０ミリリットル中に３０ｇ）を接種の瞬間に添加。培地Ｅ ：培地Ｃを殺菌前に濃ＨＣｌでｐＨ７に調節したもの。
リリットル；ＮａＮＯ3、２ｇ；ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ、０．５ｇ；ＦｅＳＯ4・７
Ｈ2Ｏ、０．０２ｇ；ＫＣｌ、０．５ｇ。燐酸塩緩衝液（蒸留水４０ミリリット ル中にＫ2ＨＰＯ4、２ｇ；ＫＨ2ＰＯ4、１ｇ）及びグルコース（蒸留水６０ミリ
リットル中に３０ｇ）を接種の瞬間に添加。培地Ｂ ：蒸留水９００ミリリットルに対して、大豆ペプトン、５ｇ；酵母抽出物
、５ｇ；ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ、０．５ｇ；ＮａＮＯ3、２ｇ；ＫＣｌ、０．５ｇ ；ＦｅＳＯ4・７Ｈ2Ｏ、０．０２ｇ。燐酸塩緩衝液（蒸留水４０ミリリットル中
にＫ2ＨＰＯ4、２ｇ；ＫＨ2ＰＯ4、１ｇ）及びグルコース（蒸留水６０ミリリッ
トル中に３０ｇ）を接種の瞬間に添加。培地Ｃ ：蒸留水９００ミリリットルに対して、大豆ペプトン、５ｇ；酵母抽出物
、５ｇ；ＮａＣｌ、５ｇ；Ｋ2ＨＰＯ4、５ｇ。グルコース（２００ｇ／リットル
溶液１００ミリリットル）を接種の瞬間に添加。培地Ｄ ：蒸留水９００ミリリットルに対して、コーンスティープリカー、１０ミ
リリットル；大豆ペプトン、５ｇ；ＮａＮＯ3、２ｇ；ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ、０ ．５ｇ；ＦｅＳＯ4・７Ｈ2Ｏ、０．０２ｇ；ＫＣｌ、０．５ｇ。燐酸塩緩衝液（
蒸留水４０ミリリットル中にＫ2ＨＰＯ4、２ｇ；ＫＨ2ＰＯ4、１ｇ）及びグルコ
ース（蒸留水６０ミリリットル中に３０ｇ）を接種の瞬間に添加。培地Ｅ ：培地Ｃを殺菌前に濃ＨＣｌでｐＨ７に調節したもの。
【００２９】例１ ：様々な微生物の研究（篩分け） 篩分け（選別）のために、培地１００ミリリットルを含有させた２５０ミリリ
ットル三角フラスコに、固体培地上で収穫したばかりの胞子の懸濁液を接種し、
回転式インキュベーター中で２７℃において２００ｒｐｍで６６時間成長（培養
）を実施する。 培地中のバイオマスにエタノール中の溶液状のテルフェナジン（１０ミリリッ
トル／リットル）を最終濃度０．２ｇ／リットルで直接添加する。 培養と同じ条件下で７日間インキュベーションを続ける。
ットル三角フラスコに、固体培地上で収穫したばかりの胞子の懸濁液を接種し、
回転式インキュベーター中で２７℃において２００ｒｐｍで６６時間成長（培養
）を実施する。 培地中のバイオマスにエタノール中の溶液状のテルフェナジン（１０ミリリッ
トル／リットル）を最終濃度０．２ｇ／リットルで直接添加する。 培養と同じ条件下で７日間インキュベーションを続ける。
【００３０】 （ａ）分析方法 インキュベーションの間に上澄み液の一定したサンプル（１日１ミリリットル
）を取り出し、遠心分離し、精密濾過し、Nucleosil C18のカラム上でＨＰＬＣ に注入する｛２５０×４ｍｍ、流量１ミリリットル／分；２２０ｎｍ、６０℃に
おいて検出；溶剤はアセトニトリル−水−トリフルオル酢酸（ＴＦＡ）混合物の
、ＣＨ3ＣＮ−水−ＴＦＡ（１００：９００：１）（溶剤Ａ）からＣＨ3ＣＮ−水
−ＴＦＡ（９００：１００：１）（溶剤Ｂ）の勾配のものである｝。 これらの条件下において、 ・テルフェナジン（II）は１４．５６分の保持時間を有し、 ・テルフェナジン−Ｐ（IIIａ）は１１．８分の保持時間を有し、 ・トリオール（IIIｃ）は９．６１分の保持時間を有し、 ・フェキソフェナジンは９．４５分の保持時間を有し、 ・トリオール−Ｐ（IIIｂ）は７．４３分の保持時間を有する。
）を取り出し、遠心分離し、精密濾過し、Nucleosil C18のカラム上でＨＰＬＣ に注入する｛２５０×４ｍｍ、流量１ミリリットル／分；２２０ｎｍ、６０℃に
おいて検出；溶剤はアセトニトリル−水−トリフルオル酢酸（ＴＦＡ）混合物の
、ＣＨ3ＣＮ−水−ＴＦＡ（１００：９００：１）（溶剤Ａ）からＣＨ3ＣＮ−水
−ＴＦＡ（９００：１００：１）（溶剤Ｂ）の勾配のものである｝。 これらの条件下において、 ・テルフェナジン（II）は１４．５６分の保持時間を有し、 ・テルフェナジン−Ｐ（IIIａ）は１１．８分の保持時間を有し、 ・トリオール（IIIｃ）は９．６１分の保持時間を有し、 ・フェキソフェナジンは９．４５分の保持時間を有し、 ・トリオール−Ｐ（IIIｂ）は７．４３分の保持時間を有する。
【００３１】 （ｂ）篩分けの結果 前記の培養条件下での篩分けの実施によって、試験した菌株の中で、下記の表
に示した結果が得られ、そしてAbsidia Corymbifera LCP 63-1800及びStreptomy
ces platensis NRRL 2364の２種の菌株が三角フラスコ中でフェキソフェナジン を良好な収率でしかし無視できない量のトリオールホスフェート及びトリオール
の存在下で製造することを可能にすることがわかった。
に示した結果が得られ、そしてAbsidia Corymbifera LCP 63-1800及びStreptomy
ces platensis NRRL 2364の２種の菌株が三角フラスコ中でフェキソフェナジン を良好な収率でしかし無視できない量のトリオールホスフェート及びトリオール
の存在下で製造することを可能にすることがわかった。
【００３２】第１表 ：様々な微生物によるテルフェナジンの代謝 （０．２ｇ／リットル、９６時間、２７℃）
【表１】 (a)：菌糸体上に吸着されたテルフェナジンはないので、培養上澄み液のみを試 験した。 ± ：５〜１０％（ＨＰＬＣ） ＋ ：１０〜２０％（ＨＰＬＣ） ＋＋＋：７０〜８０％（ＨＰＬＣ）
【００３３】 （ｃ）Absidia Corymbifera LCP 63-1800によって生成したフェキソフェナジン の精製及び完全な特徴付け Absidia Corymbiferaの三角フラスコを用いて（１００ミリリットル−テルフ ェナジン２０ｍｇ）出発し、菌糸体を濾過し、水で洗浄した後に、上澄み液をＮ
ａＣｌで飽和させて酢酸エチルで３回抽出する。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥させ 、次いで減圧下で蒸発させて白っぽい固体状残渣２７ｍｇを得て、これをシリカ
ゲルカラム上で溶剤としてＣＨ2Ｃｌ2−ＭｅＯＨ−ＮＨ4ＯＨ（８２．５：１５ ：２．５）を用いたクロマトグラフィーによって精製する。標準試料のフェキソ
フェナジンと同じ純粋な生成物１２．４ｍｇが回収された。融点１９０〜１９５
℃。
ａＣｌで飽和させて酢酸エチルで３回抽出する。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥させ 、次いで減圧下で蒸発させて白っぽい固体状残渣２７ｍｇを得て、これをシリカ
ゲルカラム上で溶剤としてＣＨ2Ｃｌ2−ＭｅＯＨ−ＮＨ4ＯＨ（８２．５：１５ ：２．５）を用いたクロマトグラフィーによって精製する。標準試料のフェキソ
フェナジンと同じ純粋な生成物１２．４ｍｇが回収された。融点１９０〜１９５
℃。
【００３４】 （ｄ）Absidia Corymbifera LCP 63-1800を用いて得られたフェキソフェナジン の構造研究
【化９】 1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ、２５０．１３ＭＨｚ）Δ、ｐｐｍ：１．４９（６Ｈ、
ｓ、２ＣＨ3）、１．５５〜１．８２（８Ｈ、ｍ、Ｈ−９、Ｈ−１０及びＨ−１ ３）、２．７３〜２．８５（４Ｈ、ｍ、Ｈ−１２）、３．３０〜３．３２（２Ｈ
、ｍ、Ｈ−１１）、４．６０（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝５．５７及び５．９７Ｈｚ、Ｈ
−８）、７．１７（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．１７Ｈｚ、Ｈ−５）、７．２９（６Ｈ、
ｄｄ、Ｊ＝７．１７及び７．９７Ｈｚ、Ｈ−１８、Ｈ−１９及びＨ−２０）、７
．３９（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．３７Ｈｚ、Ｈ−６）、７．５３（４Ｈ、ｄ、Ｊ＝７
．５７Ｈｚ、Ｈ−１７及びＨ−２１）。13 Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ、６２．９ＭＨｚ）Δ、ｐｐｍ：２３．７（ＣＨ2、Ｃ
−１０）、２７．１（２ＣＨ2、Ｃ−１３）、３０．２（２ＣＨ3、Ｃ−３）、３
９．０（ＣＨ2、Ｃ−９）、４４．９（ＣＨ、Ｃ−１４）、５０．９（第４級Ｃ 、Ｃ−２）、５５．４（２ＣＨ2、Ｃ−１２）、５９．５（ＣＨ2、Ｃ−１１）、
７５．９（ＣＨ、Ｃ−８）、８１．７（第４級Ｃ、Ｃ−１５）、２３．７（ＣＨ 2 、Ｃ−１０）、１２８．６；１２３．９；１２９．４及び１３１．０（ＣＨ、 Ｃ−５、Ｃ−６、Ｃ−１７、Ｃ−１８、Ｃ−１９、Ｃ−２０及びＣ−２１）、１
４５．２；１４９．２及び１５０．３（第４級Ｃ、Ｃ−４、Ｃ−７及びＣ−１６
）、１８６．３（第４級Ｃ、Ｃ−１）。 ＭＳ（エレクトロスプレー、陰イオン）、ｍ／ｚ：５００（Ｍ−Ｈ+）、４５６ （Ｍ−Ｈ+−ＣＯ2）、３７８（４５６−Ｃ6Ｈ6）。
ｓ、２ＣＨ3）、１．５５〜１．８２（８Ｈ、ｍ、Ｈ−９、Ｈ−１０及びＨ−１ ３）、２．７３〜２．８５（４Ｈ、ｍ、Ｈ−１２）、３．３０〜３．３２（２Ｈ
、ｍ、Ｈ−１１）、４．６０（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝５．５７及び５．９７Ｈｚ、Ｈ
−８）、７．１７（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．１７Ｈｚ、Ｈ−５）、７．２９（６Ｈ、
ｄｄ、Ｊ＝７．１７及び７．９７Ｈｚ、Ｈ−１８、Ｈ−１９及びＨ−２０）、７
．３９（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．３７Ｈｚ、Ｈ−６）、７．５３（４Ｈ、ｄ、Ｊ＝７
．５７Ｈｚ、Ｈ−１７及びＨ−２１）。13 Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ、６２．９ＭＨｚ）Δ、ｐｐｍ：２３．７（ＣＨ2、Ｃ
−１０）、２７．１（２ＣＨ2、Ｃ−１３）、３０．２（２ＣＨ3、Ｃ−３）、３
９．０（ＣＨ2、Ｃ−９）、４４．９（ＣＨ、Ｃ−１４）、５０．９（第４級Ｃ 、Ｃ−２）、５５．４（２ＣＨ2、Ｃ−１２）、５９．５（ＣＨ2、Ｃ−１１）、
７５．９（ＣＨ、Ｃ−８）、８１．７（第４級Ｃ、Ｃ−１５）、２３．７（ＣＨ 2 、Ｃ−１０）、１２８．６；１２３．９；１２９．４及び１３１．０（ＣＨ、 Ｃ−５、Ｃ−６、Ｃ−１７、Ｃ−１８、Ｃ−１９、Ｃ−２０及びＣ−２１）、１
４５．２；１４９．２及び１５０．３（第４級Ｃ、Ｃ−４、Ｃ−７及びＣ−１６
）、１８６．３（第４級Ｃ、Ｃ−１）。 ＭＳ（エレクトロスプレー、陰イオン）、ｍ／ｚ：５００（Ｍ−Ｈ+）、４５６ （Ｍ−Ｈ+−ＣＯ2）、３７８（４５６−Ｃ6Ｈ6）。
【００３５】例２ ：フェキソフェナジンの微生物的調製 培地Ｄ１００ミリリットルを含有させた２５０ミリリットル三角フラスコ１０
個にAbsidia Corymbifera LCP 63-1800を接種する。各三角フラスコにエタノー ル１ミリリットル中のテルフェナジン５０ｍｇを添加する。７日後に、１０個の
三角フラスコをガーゼ上で濾過し（上澄み液は８．０のｐＨを有する）、塩化ナ
トリウムによる飽和を２時間実施し（ｐＨ＝５〜６）、次いで酢酸エチルで３回
抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥させる。減圧下で蒸発させた後に、所期の未精
製化合物４０９ｍｇが得られた（収率７７％、ほぼ９０％の純度の生成物）。 この生成物をシリカゲルカラム（２３０〜４００メッシュ、シリカ４０ｇ、直
径３ｃｍ）上で塩化メチレン／メタノール／水酸化アンモニウム混合物（８２．
５−１５−２．５）を用いて溶離させて精製する。純粋なフェキソフェナジン３
１２ｍｇが回収された（６１．４％）。
個にAbsidia Corymbifera LCP 63-1800を接種する。各三角フラスコにエタノー ル１ミリリットル中のテルフェナジン５０ｍｇを添加する。７日後に、１０個の
三角フラスコをガーゼ上で濾過し（上澄み液は８．０のｐＨを有する）、塩化ナ
トリウムによる飽和を２時間実施し（ｐＨ＝５〜６）、次いで酢酸エチルで３回
抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥させる。減圧下で蒸発させた後に、所期の未精
製化合物４０９ｍｇが得られた（収率７７％、ほぼ９０％の純度の生成物）。 この生成物をシリカゲルカラム（２３０〜４００メッシュ、シリカ４０ｇ、直
径３ｃｍ）上で塩化メチレン／メタノール／水酸化アンモニウム混合物（８２．
５−１５−２．５）を用いて溶離させて精製する。純粋なフェキソフェナジン３
１２ｍｇが回収された（６１．４％）。
【００３６】例３ ：発酵容器（培地Ａ）中におけるフェキソフェナジンの調製 Absidia Corymbiferaの培養を、培地Ａ（ｐＨ６．５）中で、しかし菌糸体２ ×１０6個／リットルを接種された５リットルの容量のBiolafitte発酵容器中で 、２７℃において、約５リットル／分の空気流量で、２７５回転／分の撹拌下（
螺旋状撹拌羽根）で実施する。６６時間の培養の後に得られた直径約１ｍｍの均
質ペレットの形のバイオマスを、培養発酵容器中で直接バイオ転化のために用い
た。エタノール５０ミリリットル中のテルフェナジン１．２５ｇを添加し、同じ
条件下で７日間インキュベーションを続ける。この段階でのｐＨは８．５であり
、インキュベーション培地はフェキソフェナジン３５％及びトリオールホスフェ
ート６５％を含有する。バイオマスを濾過によって液状培地から分離する。濾液
をＮａＣｌで飽和させ、そのｐＨを希ＨＣｌで６．０に調節し、これを酢酸エチ
ルで３回抽出する。例２に記載したような精製の後に、純粋なフェキソフェナジ
ン３５０ｍｇ（２７％）が回収された。水相中のトリオールホスフェート（III ｂ）は、XAD-2のカラム上での吸着及びメタノールによる溶離によって回収する ことができる。
螺旋状撹拌羽根）で実施する。６６時間の培養の後に得られた直径約１ｍｍの均
質ペレットの形のバイオマスを、培養発酵容器中で直接バイオ転化のために用い
た。エタノール５０ミリリットル中のテルフェナジン１．２５ｇを添加し、同じ
条件下で７日間インキュベーションを続ける。この段階でのｐＨは８．５であり
、インキュベーション培地はフェキソフェナジン３５％及びトリオールホスフェ
ート６５％を含有する。バイオマスを濾過によって液状培地から分離する。濾液
をＮａＣｌで飽和させ、そのｐＨを希ＨＣｌで６．０に調節し、これを酢酸エチ
ルで３回抽出する。例２に記載したような精製の後に、純粋なフェキソフェナジ
ン３５０ｍｇ（２７％）が回収された。水相中のトリオールホスフェート（III ｂ）は、XAD-2のカラム上での吸着及びメタノールによる溶離によって回収する ことができる。
【００３７】例３ａ ：発酵容器（培地Ｄ）中におけるフェキソフェナジンの調製 Absidia Corymbiferaの培養を、培地Ｄ（ｐＨ６．５）中で、Biolafitte発酵 容器中で例３におけるのと同じ条件下で実施する。６６時間の培養の後に得られ
たバイオマスを、培養発酵容器中で直接バイオ転化のために用いた。エタノール
２５ミリリットル中のテルフェナジン１ｇを添加し、同じ条件下で４日間インキ
ュベーションを続ける。この段階でのｐＨは８．０であり、インキュベーション
培地はフェキソフェナジン７０％及びトリオールホスフェート３０％を含有し、
これらを例３に記載したように単離して精製する。
たバイオマスを、培養発酵容器中で直接バイオ転化のために用いた。エタノール
２５ミリリットル中のテルフェナジン１ｇを添加し、同じ条件下で４日間インキ
ュベーションを続ける。この段階でのｐＨは８．０であり、インキュベーション
培地はフェキソフェナジン７０％及びトリオールホスフェート３０％を含有し、
これらを例３に記載したように単離して精製する。
【００３８】例４ ：ｐＨを連続的に調節しながら発酵容器中でフェキソフェナジンを調製する
ための方法 Absidia Corymbiferaの培養を、培地Ｄ（ｐＨ６．５）中で、例３に記載した 条件下で実施する。エタノール５０ミリリットル中のテルフェナジン２．５ｇを
添加し、同じ条件下で４日間インキュベーションを続ける。この段階でのｐＨは
８．０であり、インキュベーション培地はフェキソフェナジン４２％、トリオー
ル（IIIｃ）１３％及びトリオールホスフェート（IIIｂ）２５％を含有する。濃
ＨＣｌでｐＨを３．５に調節し、同じ条件下でインキュベーションを続けて培地
のｐＨを６まで自由に変化させる（３日間）。この段階でトリオールホスフェー
ト（IIIｂ）は殆ど完全に消失してトリオールになる。ｐＨを８．０に再調節し 、同じ条件下でさらに２日間インキュベーションを続ける。この場合、培地はフ
ェキソフェナジン８５％及びトリオールホスフェート（IIIｂ）１３％を含有す る。
ための方法 Absidia Corymbiferaの培養を、培地Ｄ（ｐＨ６．５）中で、例３に記載した 条件下で実施する。エタノール５０ミリリットル中のテルフェナジン２．５ｇを
添加し、同じ条件下で４日間インキュベーションを続ける。この段階でのｐＨは
８．０であり、インキュベーション培地はフェキソフェナジン４２％、トリオー
ル（IIIｃ）１３％及びトリオールホスフェート（IIIｂ）２５％を含有する。濃
ＨＣｌでｐＨを３．５に調節し、同じ条件下でインキュベーションを続けて培地
のｐＨを６まで自由に変化させる（３日間）。この段階でトリオールホスフェー
ト（IIIｂ）は殆ど完全に消失してトリオールになる。ｐＨを８．０に再調節し 、同じ条件下でさらに２日間インキュベーションを続ける。この場合、培地はフ
ェキソフェナジン８５％及びトリオールホスフェート（IIIｂ）１３％を含有す る。
【００３９】例５ ：発酵容器中でフェキソフェナジンを調製するための最適化された方法 Absidia Corymbiferaの培養を、培地Ｄ（ｐＨ６．５）中で、例３に記載した 条件下で実施する。エタノール５０ミリリットル中のテルフェナジン２．５ｇを
添加し、同じ条件下で４日間インキュベーションを続ける。この段階でのｐＨは
８．０であり、インキュベーション培地はフェキソフェナジン３５％、トリオー
ル（IIIｃ）１１．５％及びトリオールホスフェート（IIIｂ）３４％を含有する
。希ＨＣｌでｐＨを６．０〜６．５に調節して維持し、同じ条件下でインキュベ
ーションを続ける（３日間）。この場合、培地はフェキソフェナジン８９．５％
及びトリオールホスフェート９．５％を含有する。
添加し、同じ条件下で４日間インキュベーションを続ける。この段階でのｐＨは
８．０であり、インキュベーション培地はフェキソフェナジン３５％、トリオー
ル（IIIｃ）１１．５％及びトリオールホスフェート（IIIｂ）３４％を含有する
。希ＨＣｌでｐＨを６．０〜６．５に調節して維持し、同じ条件下でインキュベ
ーションを続ける（３日間）。この場合、培地はフェキソフェナジン８９．５％
及びトリオールホスフェート９．５％を含有する。
【００４０】例６ ： 培地Ｅ１００ミリリットルを含有させた２５０ミリリットル三角フラスコにSt
reptomyces platensis NRRL 2364を接種して例１に記載したようにして培養する
。この培地及びバイオマス（ｐＨは５．０である）の半分にエタノール０．５ミ
リリットル中に溶解させたテルフェナジン１０ｍｇを添加し、同じ条件下で数日
間インキュベーションを続ける。３日後に、観察された代謝産物はトリオール（
IIIｃ）だけだった（６０％）。７日後にはトリオールの収率が６７％に達した 。
reptomyces platensis NRRL 2364を接種して例１に記載したようにして培養する
。この培地及びバイオマス（ｐＨは５．０である）の半分にエタノール０．５ミ
リリットル中に溶解させたテルフェナジン１０ｍｇを添加し、同じ条件下で数日
間インキュベーションを続ける。３日後に、観察された代謝産物はトリオール（
IIIｃ）だけだった（６０％）。７日後にはトリオールの収率が６７％に達した 。
【００４１】例７ ： 例６の培地及びバイオマスの残りの半分にテルフェナジン（エタノール０．５
ミリリットル中に１０ｍｇ）を添加し、例６におけるのと同じ条件下で３日間イ
ンキュベートし、次いで７．５Ｍ−ＮａＯＨを添加することによってｐＨ８．０
にする。さらに４日間インキュベーションを続け、トリオールホスフェート（II
Iｂ）１６％、フェキソフェナジン（I）３７％及びトリオール（IIIｃ）２６％ が得られた。
ミリリットル中に１０ｍｇ）を添加し、例６におけるのと同じ条件下で３日間イ
ンキュベートし、次いで７．５Ｍ−ＮａＯＨを添加することによってｐＨ８．０
にする。さらに４日間インキュベーションを続け、トリオールホスフェート（II
Iｂ）１６％、フェキソフェナジン（I）３７％及びトリオール（IIIｃ）２６％ が得られた。
【００４２】例８ ：発酵容器中におけるフェキソフェナジンの調製予備培養 無菌培地１００ミリリットルを含有させた５００ミリリットル三角フラスコ中
で最少培地（炭素源はグルコース）中で予備培養を実施する。この三角フラスコ
にStreptomyces platensis NRRL 2364のグリセロール化懸濁液（−８０℃におい
て冷凍貯蔵）４５０マイクロリットルを接種し、軌道運動振盪機（軌道寸法２．
５ｃｍ）中で３４℃で２５０ｒｐｍにおいて７５時間インキュベートする。
で最少培地（炭素源はグルコース）中で予備培養を実施する。この三角フラスコ
にStreptomyces platensis NRRL 2364のグリセロール化懸濁液（−８０℃におい
て冷凍貯蔵）４５０マイクロリットルを接種し、軌道運動振盪機（軌道寸法２．
５ｃｍ）中で３４℃で２５０ｒｐｍにおいて７５時間インキュベートする。
【００４３】発酵／バイオ転化 グルコース１２５ｇ／リットルの最少培地３００ミリリットルを含有する総容
積５００ミリリットルの発酵容器中で、発酵を実施する。この発酵容器に前記の
予備培養物７．５ミリリットルを接種する。培養条件は次の通りである：・温度
は３４℃に調節、 ・一定の撹拌（ｐＯ２の調整なし）、 ・５４リットル／時間での一定の換気（３ｖｖｍ）、 ・２０％ＫＯＨの添加によりｐＨを６．０に調節。 ４８時間の培養の後に、エタノール３ミリリットル中に溶解させたテルフェナ
ジン７５ｍｇを添加する。２１２時間経過するまで培養を続ける。
積５００ミリリットルの発酵容器中で、発酵を実施する。この発酵容器に前記の
予備培養物７．５ミリリットルを接種する。培養条件は次の通りである：・温度
は３４℃に調節、 ・一定の撹拌（ｐＯ２の調整なし）、 ・５４リットル／時間での一定の換気（３ｖｖｍ）、 ・２０％ＫＯＨの添加によりｐＨを６．０に調節。 ４８時間の培養の後に、エタノール３ミリリットル中に溶解させたテルフェナ
ジン７５ｍｇを添加する。２１２時間経過するまで培養を続ける。
【００４４】結果 この試験のために、ブイヨン培地をエタノール中で１／１０に希釈した後にテ
ルフェナジン及びその誘導体を逆相ＨＰＬＣによって分析する。２１２時間で７
１％の反応の進行が得られ（フェキソフェナジン生成）、収支は８２％と見積も
られた。
ルフェナジン及びその誘導体を逆相ＨＰＬＣによって分析する。２１２時間で７
１％の反応の進行が得られ（フェキソフェナジン生成）、収支は８２％と見積も
られた。
【００４５】第２表 ：ｐＨの関数としてのテルフェナジンの酸化の初速度（６６時間後のバイ
オマス、洗浄してテルフェナジン１０６１マイクロモル／リットルの存在下で０
．０５Ｍ燐酸塩緩衝液中に再懸濁）。ＨＰＬＣによって実施した測定は、（トリ
オール＋トリオールホスフェート＋フェキソフェナジン）の合計に対応する。
オマス、洗浄してテルフェナジン１０６１マイクロモル／リットルの存在下で０
．０５Ｍ燐酸塩緩衝液中に再懸濁）。ＨＰＬＣによって実施した測定は、（トリ
オール＋トリオールホスフェート＋フェキソフェナジン）の合計に対応する。
【表２】
【００４６】第３表 ：ｐＨの関数としてのトリオールのホスホリル化の初速度（インキュベー
ションの２時間後）（６６時間後のバイオマス、洗浄してトリオール１８６マイ
クロモル／リットルの存在下で０．０５Ｍ燐酸塩緩衝液中に再懸濁）。インキュ
ベーション上澄み液中の生成したトリオールホスフェートをＨＰＬＣによって測
定した（最初の２時間はフェキソフェナジンの生成は何ら観察されなかった）。
ションの２時間後）（６６時間後のバイオマス、洗浄してトリオール１８６マイ
クロモル／リットルの存在下で０．０５Ｍ燐酸塩緩衝液中に再懸濁）。インキュ
ベーション上澄み液中の生成したトリオールホスフェートをＨＰＬＣによって測
定した（最初の２時間はフェキソフェナジンの生成は何ら観察されなかった）。
【表３】
【００４７】第４表 ：ｐＨの関数としてのトリオールホスフェートの加水分解の初速度（トリ
オールホスフェート２７２マイクロモル／リットルを含有させた１２０時間後の
インキュベーション上澄み液、濃ＨＣｌで様々なｐＨに調節して維持し、２７℃
においてインキュベート）。トリオールホスフェートの消失及びトリオールの発
現の両方についてＨＰＬＣによって加水分解を測定した。この初期速度は、最初
の７．５時間の加水分解について実施したサンプルの平均について計算した。
オールホスフェート２７２マイクロモル／リットルを含有させた１２０時間後の
インキュベーション上澄み液、濃ＨＣｌで様々なｐＨに調節して維持し、２７℃
においてインキュベート）。トリオールホスフェートの消失及びトリオールの発
現の両方についてＨＰＬＣによって加水分解を測定した。この初期速度は、最初
の７．５時間の加水分解について実施したサンプルの平均について計算した。
【表４】
【００４８】第５表 ：ｐＨの関数としての６時間のインキュベーション及び２４時間のインキ
ュベーションの時点で測定したトリオールの酸化（６６時間後のバイオマス、洗
浄してトリオール１８６マイクロモル／リットルの存在下で０．０５Ｍ燐酸塩緩
衝液中に再懸濁）。これらの時点の間にフェキソフェナジンが生成し、トリオー
ルの濃度はあまり変わらなかった。２つの生成物をＨＰＬＣによって測定した。
ュベーションの時点で測定したトリオールの酸化（６６時間後のバイオマス、洗
浄してトリオール１８６マイクロモル／リットルの存在下で０．０５Ｍ燐酸塩緩
衝液中に再懸濁）。これらの時点の間にフェキソフェナジンが生成し、トリオー
ルの濃度はあまり変わらなかった。２つの生成物をＨＰＬＣによって測定した。
【表５】 ＊計算した％＝（生成したフェキソフェナジン／残留トリオール）×１００
【図面の簡単な説明】
【図１】 Absidia blakesleeanaによるテルフェナジンの代謝の４つの一体の反応に対す
るｐＨの影響をまとめたグラフである。縦座標の尺度は、各曲線について同じ程
度（桁）の値になるように乗除することによって再計算した。
るｐＨの影響をまとめたグラフである。縦座標の尺度は、各曲線について同じ程
度（桁）の値になるように乗除することによって再計算した。
【図２】 ｐＨを制御せずに行なった培地Ｄ中でのテルフェナジンのバイオ転化（０．２
ｇ／リットル）における各物質の経時濃度変化を示すグラフである。
ｇ／リットル）における各物質の経時濃度変化を示すグラフである。
【図３】 インキュベーションのｐＨを３．５（９６時間）及び８．０（１６８時間）に
調節しながら１００ミリリットル三角フラスコ内で媒体Ｄ中で行なったテルフェ
ナジンのバイオ転化（０．５ｇ／リットル）における各物質の濃度及びｐＨの経
時変化を示すグラフである。
調節しながら１００ミリリットル三角フラスコ内で媒体Ｄ中で行なったテルフェ
ナジンのバイオ転化（０．５ｇ／リットル）における各物質の濃度及びｐＨの経
時変化を示すグラフである。
【図４】 インキュベーションのｐＨを９６時間後に６．０に変更して維持しながら三角
フラスコ内で行なったAbsidia blakesleeanaによるテルフェナジンのバイオ転化
（０．５ｇ／リットル、２７℃、培地Ｄ）における各物質の濃度及びｐＨの経時
変化を示すグラフである。
フラスコ内で行なったAbsidia blakesleeanaによるテルフェナジンのバイオ転化
（０．５ｇ／リットル、２７℃、培地Ｄ）における各物質の濃度及びｐＨの経時
変化を示すグラフである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） (Ｃ１２Ｐ 17/12 (Ｃ１２Ｐ 17/12 Ｃ１２Ｒ 1:585） Ｃ１２Ｒ 1:585） (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，Ｅ Ａ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＵ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＥＥ，ＧＤ，ＧＥ，ＨＲ， ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，Ｌ Ｃ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＸ ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ， ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ Ｆターム(参考） 4B064 AE49 BA06 BH04 BH05 BH07 CA04 CA05 CB11 CC03 CC07 DA01 4C054 AA02 CC07 DD01 EE01 FF24 4H050 AA01 AB20
Claims (9)
- 【請求項１】 次式（I）： 【化１】 の化合物の製造方法であって、 アブシディア・コリンビフェラ（Absidia Corymbifera）属の微生物培地又は ストレプトミセス（Streptomyces）属の微生物培地を用いて５．０〜８．０の範
囲のｐＨにおいて次式（II）： 【化２】 の化合物のバイオ転化を実施して式（I）の所期の化合物を得て、 必要に応じてこの化合物を単離し、精製し且つ（又は）塩形成させることを特
徴とし、 式（I）又は式（II）の化合物が２つの可能なエナンチオマーの内のいずれか 一方の形にあることもでき、それらの混合物の形にあることもできる、前記製造
方法。 - 【請求項２】 アブシディア・コリンビフェラがAbsidia Corymbifera LCP
63-1800である、請求項１記載の方法。 - 【請求項３】 ストレプトミセスがStreptomyces platensis（ストレプトミ
セス・プラテンシス） NRRL 2364である、請求項１記載の方法。 - 【請求項４】 式（II）のエナンチオマーのラセミ混合物に相当するテルフ
ェナジンのバイオ転化を実施して式（I）のエナンチオマーのラセミ混合物に相 当するフェキソフェナジンを得る、請求項１、２又は３記載の方法。 - 【請求項５】 バイオ転化条件が ・ほぼ０．５〜１０ｇ／リットルのテルフェナジン添加濃度、 ・５．０〜８．０の範囲のｐＨ、 ・２６℃〜２８℃の範囲の温度、 ・ブイヨン培地１リットル当たりに毎分ほぼ１リットルの空気流導入による換気
である、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。 - 【請求項６】 初期ｐＨがほぼ６．５であり、 このｐＨを自然に８．０〜８．５の範囲に変化させて次式（IIIｂ）： 【化３】 のトリオールホスフェートと式（I）の化合物との混合物をもたらし、 次いでこのｐＨを３．５〜４の範囲の値に低下させて式（IIIｂ）の中間体化 合物の次式（IIIｃ）： 【化４】 の中間体化合物への転化を促進し、 次いで式（IIIｂ）の化合物が完全に消失するまでｐＨを自然にほぼ６．０に 変化させ、 最後に式（IIIｃ）の化合物がフェキソフェナジンに転化するまでｐＨをほぼ ８．０に再調節して維持する、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
- 【請求項７】 初期ｐＨがほぼ６．５であり、 このｐＨを自然に８．０〜８．５に変化させ、 次いで６．３〜６．８の範囲の値に低下させて維持する、請求項１〜５のいず
れかに記載の方法。 - 【請求項８】 精製工程の間に請求項１記載の式（I）の化合物の抽出を酢 酸エチル中で実施する、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
- 【請求項９】 中間体化合物としての、請求項６記載の式（IIIｃ）の化合 物。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR98/03349 | 1998-03-19 | ||
| FR9803349A FR2776302B1 (fr) | 1998-03-19 | 1998-03-19 | Nouveau procede de preparation de la fexofenadine |
| PCT/FR1999/000625 WO1999047693A1 (fr) | 1998-03-19 | 1999-03-18 | Nouveau procede de preparation de la fexofenadine |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2002506653A true JP2002506653A (ja) | 2002-03-05 |
| JP4291511B2 JP4291511B2 (ja) | 2009-07-08 |
Family
ID=9524214
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2000536876A Expired - Lifetime JP4291511B2 (ja) | 1998-03-19 | 1999-03-18 | フェキソフェナジンの新規の製造方法 |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US6558931B1 (ja) |
| EP (1) | EP1062358B1 (ja) |
| JP (1) | JP4291511B2 (ja) |
| AR (1) | AR014738A1 (ja) |
| AT (1) | ATE242333T1 (ja) |
| AU (1) | AU2842799A (ja) |
| DE (1) | DE69908569T2 (ja) |
| DK (1) | DK1062358T3 (ja) |
| DZ (1) | DZ2746A1 (ja) |
| ES (1) | ES2196783T3 (ja) |
| FR (1) | FR2776302B1 (ja) |
| MA (1) | MA26615A1 (ja) |
| PT (1) | PT1062358E (ja) |
| TN (1) | TNSN99042A1 (ja) |
| WO (1) | WO1999047693A1 (ja) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2776302B1 (fr) * | 1998-03-19 | 2002-04-12 | Hoechst Marion Roussel Inc | Nouveau procede de preparation de la fexofenadine |
| GB0013368D0 (en) * | 2000-05-31 | 2000-07-26 | Pfizer Ltd | Enzymatic oxidations |
| US6610518B2 (en) | 2000-05-31 | 2003-08-26 | Pfizer Inc. | Enzymatic oxidations |
| US6613906B1 (en) * | 2000-06-06 | 2003-09-02 | Geneva Pharmaceuticals, Inc. | Crystal modification |
| GB0018691D0 (en) * | 2000-07-28 | 2000-09-20 | Rolabo Sl | Process |
| US6613907B2 (en) | 2000-11-08 | 2003-09-02 | Amr Technology, Inc. | Process for the production of piperidine derivatives with microorganisms |
| BRPI0308445A2 (pt) * | 2002-03-08 | 2016-08-02 | M S Ind Swift Ltd | complexos de rápida dissolução, diretamente compressíveis, sem sabor e formulações farmacêuticas dos mesmos |
| US20090076080A1 (en) * | 2007-09-19 | 2009-03-19 | Protia, Llc | Deuterium-enriched fexofenadine |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1995000480A1 (en) * | 1993-06-25 | 1995-01-05 | Merrell Pharmaceuticals Inc. | Novel intermediates for the preparation of antihistaminic 4-diphenylmethyl/diphenylmethoxy piperidine derivatives |
| US6147216A (en) * | 1993-06-25 | 2000-11-14 | Merrell Pharmaceuticals Inc. | Intermediates useful for the preparation of antihistaminic piperidine derivatives |
| PT864653E (pt) * | 1997-03-11 | 2004-08-31 | Aventis Pharma Inc | Processo para preparacao de acido 4-(4-(4-(hidroxidifenil)-1-piperidinil)-1-hidroxibutil)-alfa,alfa-dimetilfenilacetico e derivados fosforilados |
| FR2776302B1 (fr) * | 1998-03-19 | 2002-04-12 | Hoechst Marion Roussel Inc | Nouveau procede de preparation de la fexofenadine |
-
1998
- 1998-03-19 FR FR9803349A patent/FR2776302B1/fr not_active Expired - Lifetime
-
1999
- 1999-03-17 DZ DZ990047A patent/DZ2746A1/xx active
- 1999-03-17 AR ARP990101165A patent/AR014738A1/es unknown
- 1999-03-17 MA MA25501A patent/MA26615A1/fr unknown
- 1999-03-18 AU AU28427/99A patent/AU2842799A/en not_active Abandoned
- 1999-03-18 DE DE69908569T patent/DE69908569T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-03-18 WO PCT/FR1999/000625 patent/WO1999047693A1/fr active IP Right Grant
- 1999-03-18 PT PT99909036T patent/PT1062358E/pt unknown
- 1999-03-18 TN TNTNSN99042A patent/TNSN99042A1/fr unknown
- 1999-03-18 JP JP2000536876A patent/JP4291511B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1999-03-18 ES ES99909036T patent/ES2196783T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-03-18 AT AT99909036T patent/ATE242333T1/de active
- 1999-03-18 US US09/646,517 patent/US6558931B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-03-18 EP EP99909036A patent/EP1062358B1/fr not_active Expired - Lifetime
- 1999-03-18 DK DK99909036T patent/DK1062358T3/da active
-
2003
- 2003-03-20 US US10/392,699 patent/US7241601B2/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP4291511B2 (ja) | 2009-07-08 |
| US6558931B1 (en) | 2003-05-06 |
| DZ2746A1 (fr) | 2003-09-08 |
| EP1062358A1 (fr) | 2000-12-27 |
| PT1062358E (pt) | 2003-10-31 |
| US7241601B2 (en) | 2007-07-10 |
| FR2776302A1 (fr) | 1999-09-24 |
| AU2842799A (en) | 1999-10-11 |
| US20060019358A1 (en) | 2006-01-26 |
| MA26615A1 (fr) | 2004-12-20 |
| ES2196783T3 (es) | 2003-12-16 |
| DK1062358T3 (da) | 2003-09-29 |
| AR014738A1 (es) | 2001-03-28 |
| EP1062358B1 (fr) | 2003-06-04 |
| TNSN99042A1 (fr) | 2005-11-10 |
| WO1999047693A1 (fr) | 1999-09-23 |
| DE69908569T2 (de) | 2004-05-13 |
| ATE242333T1 (de) | 2003-06-15 |
| DE69908569D1 (de) | 2003-07-10 |
| FR2776302B1 (fr) | 2002-04-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4576961A (en) | Antibiotic heterocyclic oxygen compounds and use | |
| JPH10287662A (ja) | Ｆｏ−５６３７ａ物質及びｂ物質並びにそれらの製造法 | |
| JP2002506653A (ja) | フェキソフェナジンの新規の製造方法 | |
| JP2002535977A5 (ja) | ||
| KR20010112258A (ko) | 슈도몬산 복합물을 함유하는 배양 브로쓰로부터 슈도몬산ａ를 분리하는 방법 | |
| HU211052B (en) | Method for preparing 2-aryl-propionic acids in stereo-specific form, pharmaceutical compositions containing them and microorganisms for preparation | |
| WO1998005655A1 (fr) | Procede de production de composes a base de cyclodepsipeptide et nouveau cyclodepsipeptide | |
| FR2479809A1 (fr) | Composes inhibiteurs de la biosynthese du cholesterol, leur procede de preparation et leur application therapeutique | |
| EP1534732B1 (en) | 5 androsten-3-ol steroid intermediates and processes for their preparation | |
| CA2065433C (en) | Synthesis of aryl alkanediols having high optical purity | |
| HU201355B (en) | Process for microbiological hydroxylation of quinine, quinidine and their dihydro derivatives | |
| EP0068680B1 (en) | Antibiotics | |
| US3801459A (en) | Stereospecific microbiological hydrolysis process | |
| DE3638759A1 (de) | Stereospezifische ketoreduktion von bicyclooctandion-carbonsaeureestern durch mikroorganismen | |
| JP2000072760A (ja) | 新規シストチアゾール類縁体 | |
| KR100186706B1 (ko) | 프라바스타틴 나트륨의 제조방법 | |
| JP3217301B2 (ja) | 光学活性グリシド酸エステル及び光学活性グリセリン酸エステルの製造方法 | |
| US20070066579A1 (en) | 5-androsten-3beta-ol steroid intermediates and processs for their preparation | |
| ITMI942094A1 (it) | Procedimento microbiologico per la preparazione di 3-oxo-4-azasteroidi -17beta-carbossi sostituiti e uso dei prodotti come inibitori dell'enzima 5alfa-riduttasi | |
| JPH07242636A (ja) | Ｆｏ−３２１６物質及びその製造法 | |
| JPS63188393A (ja) | 光学活性の２−ヒドロキシ酪酸誘導体の製造方法 | |
| US20060100185A1 (en) | 5-Androsten-3beta-ol steroid intermediates and processes for their preparation | |
| JPH0366297B2 (ja) | ||
| JPS5945360B2 (ja) | 生理活性物質ｍｌ−２３６ｂの製造法 | |
| JPS62270527A (ja) | ４１８１−２物質及びその誘導体を有効成分とする抗腫瘍剤 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20060307 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20080723 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20081010 |
|
| RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20081010 |
|
| RD13 | Notification of appointment of power of sub attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7433 Effective date: 20081010 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20081010 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20081216 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20090227 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20090331 |
|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20090403 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120410 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120410 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130410 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130410 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140410 Year of fee payment: 5 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |