DE1493083C

DE1493083C -

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Publication number: DE1493083C
Application number: DE19651493083
Authority: DE
Priority date: 1964-08-15
Filing date: 1965-08-14
Publication date: 1973-03-22

Description

Q₇H₃₁CO-N

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in der R₁ und R₂ die vorstehende Bedeutung besitzen, dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise gemäß Patent 1 468 952 Linolsäure in Gegenwart eines wässeräbspaltenden Mittels, vorzugsweise Dicyclohexylcarbodiimid, oder ein funktionelles Derivat der Linolsäure mit einem entsprechenden Amin umsetzt.

3. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß man Linolsäurechlorid in Gegenwart eines basischen Kondensationsmittels mit dem Amin umsetzt.

4. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß man einen niederen Alkylester der Linolsäure direkt bzw. in Gegenwart eines Alkalialkoholats mit dem Amin umsetzt.

Im Hauptpatent 1 468 952 sind Linolsäureamide und ein Verfahren zur Herstellung von Linolsäureamiden der allgemeinen Formel

Q₇H₁₁CON

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in der R₁ den Isopropyl-, Allyl-, Cyclopentyl-, Methylcyclohexyl- oder Methyl- oder 2,4,6-Trimethylphenylrest und R₂ Wasserstoff, R₁ und R₂ je einen Isobutyl-, Phenyl- oder Allylrest oder gemeinsam mit dem Stickstoffatom den Pyrrolidyl- oder Hexamethyleniminrest, R₁ den Phenyl- oder Cyclohexylrest und R₂ den Methylrest und R₁ den Phenyl- oder 3-Methylphenyl- und R₂ den Äthylrest bedeutet, beschrieben, wobei man in an sich bekannter Weise Linolsäure in Gegenwart eines wasserabspaltenden Mittels, vorzugsweise Dicyclohexylcarbodiimid, oder ein funktionelles Derivat der Linolsäure mit einem entsprechenden Amin umsetzt.

Vorzugsweise setzt man in diesem Verfahren Linolsäurechlorid in Gegenwart oder Abwesenheit eines anorganischen oder organischen alkalischen Kondensationsmittels oder Linolsäure in Gegenwart eines dehydrierenden Mittels, wie Dicyclohexylcarbodiimid, mit dem Amin um.

Die vorliegende Erfindung bezweckt eine Verbesserung bzw. weitere Ausbildung des Verfahrens nach dem Hauptpatent.

Ferner betrifft· die Erfindung nach diesem Verfahren hergestellte, neue Linolsäureamide.

Die Arteriosklerose gehört zu den bisher nicht befriedigend gelösten Problemen bei den Erkrankungen Erwachsener. Wenn auch die Ursache der Arteriosklerose trotz der Diskussionen in der Fachwelt bisher nicht aufgeklärt werden konnte, ist es weitgehend anerkannt, daß einer der wesentlichsten histopathologisehen Anhaltspunkte für die Arteriosklerose eine Abscheidung von Lipoiden in den Blutgefäßen ist. Deshalb wurden die Forschungen auf den gestörten Lipoid-Metabilismus gerichtet. Besondere Aufmerksamkeit wurde von Anfang an auf den außergewöhnlich erhöhten Cholesterin-Blutspiegelgerichtet.

Es wurden eine Anzahl experimenteller und klinischer Fakten berichtet, die den Zusammenhang zwischen der Arteriosklerose und dem erhöhten Cholesterin-Blutspiegel aufzeigen. Die Entwicklung von Mitteln zur Verringerung des erhöhten Cholesterin-Blutspiegels ist deshalb für die Vorbeugung oder Verhinderung von Arteriosklerose äußerst wichtig.

Man hat bereits intensiv an der Entwicklung derartiger, den Cholesterinspiegel senkender Mittel gearbeitet und nicht wenige Verbindungen klinisch erprobt, jedoch war keines dieser Mittel befriedigend. Einige wirken ziemlich gut, aber führen unvermeidlich zu schädlichen Nebenwirkungen, die nicht vernachlässigt werden können; die anderen sind hinsichtlich ihrer Wirksamkeit ungenügend, da sie eine Verabreichung in übermäßig großen Dosen erfordern.

Die einzige Gruppe von Verbindungen, die heute für diesen Zweck praktisch verwendet wird, umfaßt ungesättigte Fettsäuren, insbesondere Linolsäure. Der Grund für die Verwendung von Linolsäure ist ihre Unschädlichkeit für den menschlichen Körper. Ihre Wirksamkeit jedoch ist nicht so hoch und außerdem ungewiß und unbestimmt. Deshalb ist die Verabreichung äußerst hoher Dosen notwendig, wenn wenigstens eine gewisse Absenkung des Cholesterin-Spiegels erreicht werden soll.

Die Erfindung hat sich die Aufgabe gestellt, ein Verfahren zur Herstellung von weiteren Mitteln zur Erniedrigung des Cholesterin-Spiegels zu entwickeln, die den bekannten Mitteln hinsichtlich ihrer Wirksamkeit, den erhöhten Cholesterin-Spiegel im Blut zu reduzieren, überlegen sind und keine merkliche Toxizität zeigen.

In genauer Kenntnis der Nachteile der bisher vorgeschlagenen und angewandten Mittel zur Verringerung des Cholesterin-Blutspiegels und mit dem Ziel, hier Abhilfe zu schaffen, wurden eingehende Untersuchungen mit einer Vielzahl von Verbindungen durchgeführt; dabei wurde gefunden, daß bestimmte N-sub-

stituierte Linolsäureamide die an die Mittel gestellten Anforderungen erfüllen.

Nach den biologischen Versuchen übertreffen diese Säureamide die Linolsäure in der Wirksamkeit, den erhöhten Cholesterin-Spiegel im Blut abzusenken. Ferner sind die Säureamide in ihrer Wirksamkeit nicht so ungewiß und unbestimmt wie die Linolsäure. Sie lassen sich mit der Linolsäure in ihrer Unschädlichkeit vergleichen, selbst wenn sie kontinuierlich über längere Zeiträume verabreicht werden, und in ihrer stetigen und konstanten Wirksamkeit während der kontinuierlichen Verabreichung. Derartige spezifische biologische Eigenschaften der erfindungsgemäß hergestellten Säureamide wurden bisher noch nicht beschrieben.

Die nach dem erfindungsgemäßen Verfahren erhaltenen N-substituierten Linolsäureamide haben die allgemeine Formel

20

C₁₇H₃₁CO-N

CH₃(CH₂)₄CH = CH — CH₂

CH = CH — (CH₂)₇ — COOH

fahren der Tieftemperatur-Umkristallisierung, der Destillation, der Harnstoffmethode oder der Salzumkristallisierung gewonnen werden.

Linolsäurehalogenide sind bekannt, und ihre Herstellungsverfahren sind in verschiedenen Literaturstellen beschrieben, unter anderen die Thionylchlorid-Methode und die Phosgen-Methode. Nach diesen Verfahren werden das Säurechlorid, das Säurebromid ,oder das Säurejodid hergestellt; von diesen ist das Säurechlorid für das erfindungsgemäße Verfahren am wichtigsten.

Als funktionelles Derivat der Linolsäure können Verbindungen der folgenden Formel angewandt werden:

C₁₇H₃₁COA

worin A den Methoxy-, Äthoxy-, n-Propoxy-, iso-Propoxy-, n-Butoxy-, iso-Butoxy- oder tert.-Butoxyrest bedeutet.

Die bei dem erfindungsgemäßen Verfahren anzuwendenden Amine der allgemeinen Formel

worin a) R₁ einen durch Chlor oder Brom monosubstituierten Phenyl-, einen durch Chlor und die Methylgruppe disubstituierten Phenyl-, einen 3-Trifluormethylphenyl-, einen 4-Methoxyphenyl-, einen gegebenenfalls durch eine Hydroxyl- oder Methoxygruppe substituierten Cyclohexyl-, einen 4-Äthoxycyclohexyl-, einen gegebenenfalls in 2,3,4- oder α-Stellung durch eine Methylgruppe oder in 2-Stellung durch eine Hydroxyl- oder Methoxygruppe substituierten Benzylrest oder einen a-Älkyl-(C₂-C₄)-benzylrest, R₂ ein Wasserstpffatpm bzw. b) R₁ und R₂ jeweils einen Benzylrest bedeuten.

Diese Verbindungen lassen sich nach dem erfindungsgemäßen Verfahren herstellen, indem man in an , sich bekannter Weise gemäß Patent 1 468 952 Linolsäure in Gegenwart eines wasserabspaltenden Mittels, vorzugsweise Dicyclohexylcarbodiimid, oder ein funktionelles Derivat der Linolsäure mit einem entsprechenden Amin umsetzt. Die Substituenten R₁ und R₂ des Amins besitzen die bereits oben für die Linolsäureamide angegebene Bedeutung.

Intensive und umfangreiche Untersuchungen der biologischen Aktivitäten ergaben, daß diese Verbindungen die Konzentration von Cholesterin im Blut bei Versuchstieren wie Mäusen, Ratten, Kaninchen, Hunden und Eseln deutlich verringern und daß selbst bei kontinuierlicher Verabreichung über mehrere Monate überhaupt keine Toxizität auftritt.

Die in dem erfindungsgemäßen Verfahren verwendete Linoisäure kann von beliebigem Ursprung sein. Gewöhnlich ist die aus verschiedenen natürlichen fetten ölen, insbesondere aus pflanzlichen ölen, gewonnene Linolsäure, die im wesentlichen aus Octadeca-9,12-diensäure der Formel

60

besteht, das bevorzugte Material für das erfindungsgemäße Verfahren, obwohl auch die anderen isomeren Octadecadiencarbonsäuren anwesend sein können. Verhältnismäßig reine Linolsäure kann beispielsweise aus Saffloröl durch Reinigung nach dem Ver-HN

besitzen Substituenten, die die bereits angegebene Bedeutung haben. Der Substituent R₁ kann im Falle des monosubstituierten Phenylrestes das Chlor- oder Bromatom in o-, m- oder p-Stellung tragen, dasselbe gilt für den durch eine Hydroxyl- oder Methoxygruppe substituierten Cyclohexylrest.

Für die Herstellung der erfindungsgemäßen Linolsäureamide können folgende Verfahren angewandt werden.

Beispielsweise kann man

1. die Linolsäure direkt mit einem Amin der Formel

HN

(worin R₁ und R₂ die obengenannte Bedeutung haben) in Gegenwart oder Abwesenheit von. wasserabspaltenden Mitteln, wie disubstituierten Carbodiimidverbindungen, ρ - Toluolsulfonsäure oder p-Toluolsulfonylchlorid, in einem wäßrigen organischen Lösungsmittel umsetzen (Organic Synthesis, Bd. 20, 1940, S. 66),

2. die Linolsäure in das Säurechlorid umwandeln (Organic Synthesis, Bd. 37, 1957, S. 66) und das Säurechlorid mit wenigstens einer äquimolaren Menge des Amins in Gegenwart eines basischen Kondensationsmittels umsetzen,'

3. den Linolsäureester direkt mit dem Amin in Gegenwart oder in Abwesenheit eines Lösungsmittels und · eines Kondensationsmittels umsetzen (diese Methode, die sogenannte »Aminolyse«, ist am einfachsten (Journal of Organic Chemistry, Bd. 8,1943, S. 473),

4. ein gemischtes Säureanhydrid der Linolsäure der Formel

C₁₇H₃₁CC)

RCO

worin R ein Alkyl- oder Alkoxyradikal ist, mit dem Amin in Gegenwart eines basischen Kon-' densationsmittels reagieren lassen. (Journal of the American Chemical Society, Bd. 71, 1949, S. 2215).

Die unter 1 genannte Verfahrensweise unter Anwendung von Dicyclohexylcarbodiimid ist sehr vorteilhaft, da sich das gewünschte Produkt leicht durch Abfiltrieren und Abtrennen ohne irgendwelche besonderen Präparationen isolieren läßt, wobei der Harnstoff nach entsprechender Aufarbeitung von neuem eingesetzt werden kann. An Stelle von Dicyclohexylcarbodiimid können auch Düsopropylcarbodiimid, Diphenylcarbodiimid und alle anderen Dialkyl-, Dicycloalkyl- oder di-substituierten Phenylcarbodiimide eingesetzt werden. Die Umsetzung erfolgt durch Zusammengeben der getrennt in einem organischen Lösungsmittel gelösten Linolsäure bzw. des di-substituierten Carbodiimids bei Raumtemperatur in einem Molverhältnis von 1:1 und Rühren der Mischung bei Bedarf, wobei das Vermischen unter Kühlen erfolgen kann. .Nach 3- bis- 24stündigem Stehenlassen bei Raumtemperatur wird der entstandene Harnstoff aBfiltriert und das gewünschte Produkt aus dem FiI-trat isoliert.

Die unter 2 beschriebene Arbeitsweise kann ebenfalls in einem Lösungsmittel wie Wasser, organischen Lösungsmitteln oder auch in dem als Ausgangsmaterial verwendeten Amin durchgeführt werden, wobei jede Temperatur bis hinauf zu etwa der Siedetemperatur des benutzten Lösungsmittels, vorteilhafterweise unter Inertgas, wie Stickstoff oder Helium, angewandt wird.

Die unter 3 beschriebene Aminolyse-Methode kann mit Alkalimetallalkoholaten als basische Katalysatoren durchgeführt werden. Die Reaktion kann jedoch auch ohne Verwendung eines Katalysators durchgeführt werden. Als Lösungsmittel kann irgendein inertes organisches Lösungsmittel verwendet werden, z. B. ein Alkohol, ein aromatischer oder ein aliphatischer Kohlenwasserstoff. Bei dieser Arbeitsweise wird das Ausgangsgemisch bei einer Temperatur von Raumtemperatur bis etwa 400⁰C während einer Dauer von 3 Stunden bis zu einem Monat stehengelassen, wobei das gewünschte Produkt in günstiger Ausbeute erhalten wird. Durch Anwendung von Inertgasen, wie Helium oder Stickstoff, läßt sich eine unerwünschte Oxydation und Verfärbung vermeiden. Durch Steigerung der Temperatur über den Siedepunkt des Reaktionsgemisches in einem Autoklav oder durch Entfernung des erzeugten Alkohols aus dem Reaktionssystem während der Reaktion kann die Reaktionszeit noch verkürzt werden. Eine besondere Vereinfachung bietet diese Methode, wenn die Reaktion in Abwesenheit eines Lösungsmittels durchgeführt wird.

B ei s pi el 1

10 g Linolsäure, 5 g o-Methoxycyclohexylamin und 9 g Dicyclohexylcarbodiimid wurden in 20 ml Benzol vermischt und die Mischung über Nacht bei Raumtemperatur stehengelassen. Das überschüssige Dicyclohexylcarbodiimid wurde mit Essigsäure zersetzt und die entstandene Reaktionsmischung filtriert. Das Filtrat wurde nacheinander mit einer 5%igen wäßrigen Salzsäurelösung, einer 5%igen wäßrigen Natriumcarbonatlösung und Wasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und dann konzentiert. Das N - ο - Methoxycyclohexyllinolsäureamid (11 g) wurde durch Destillation bei 190 bis 195° C und 0,1 mm Hg gewonnen, nV^s 1,5090.

Elementaranalyse:

Berechnet ... C 76,67, H 11,58, N 3,58%;
gefunden .... C 76,98, H 11,60, N 3,62%.

Das gleiche Verfahren wie im Beispiel 1 wurde wiederholt, jedoch wurden verschiedene andere Amine und Lösungsmittel verwendet. Die folgende Tabelle zeigt die erhaltenen Ergebnisse sowie die verwendeten Amine und Lösungsmittel an. In der Tabelle bedeutet DCCD Dicyclohexylcarbodiimid, DFCD Diphenylcarbodiimid, DBCD Dibenzylcarbodiimid und DICD Düsopropylcarbodiimid. In der gleichen Tabelle bedeutet b berechnet und g gefunden.

	Amin	OCH₃	Lösungs mittel	Tabelle	A	C b	g	H b	g	N b	g	Dehydrati- sierungs- mittel
Bei spiel		NH₂ —<f~~V- OC₂H₅	Benzol	Kp. ⁰C/mm Hg	"D °C	76,67	76,77	11,58	11,78	3,58	3,79	DCCD
2	CH₃		190 bis 195/0,1	25 1,4848
	NH₂CH -\/	Benzol			76,90	76,82	11,68	11,77	3,45	3,55	DCCD
3	NH		192 bis 195/0,1	24 1,4851
-		Tetra hydrofuran			81,40	80,89	10,77	10,69	3,65	3,94	DCCD
4	CCl₄	200 bis'205/0,05	21,5 1,4901	83,60	83,87	9,87	9,97	3,05	3,23	DFCD
5	208 bis 213/0,03	24 1,5155

Fortsetzung

Bei spiel	Amin	Lösungs mittel	Kp. °C/mm Hg	n_D°C	C b	% g	H b	% g	N b	% g	Dehydrati- sierungs- mittel
6	NH₂CH₂-/^ CH₃	Äthylen- dichlorid	188 bis 193/0,02	27 1,4982	81,40	81,42	10,77	11,05	3,65	3,68	DCCD
	CH₃
7	NH₂CH₂ ^J>	Benzol	204 bis 209/0,06	27 1,5027	81,40	81,57	10,77	10,81	3,65	3,69	DBCD
8	NH₂ — CH₂ —</~\—CH₃	Benzol	203 bis 206/0,06	27 1,4953	81,40	81,62	10,77	10,99	3,65	3,68	DCCD
	' OCH₃									-
9	NH₂ -CH₂ -\^y	Äther	190 bis 203/0,03	27 1,4952	78,14	78,04	10,34	10,23	3,51	3,38	DCCD
	. OH
10	NH₂CH₂ ^Q"	Äther	205 bis 211/0,02	30 1,4860	77,87	77,72	10,2	10,21	3,63	3,76	DCCD
11	NH₂-Q	Äther	200 bis 203/0,03	29 1,4833	73,71	74,51	8,85	8,39	3,44	3,50	DCCD
	I CF₃

Beispiel 12

Eine Mischung von 10 g Linolsäure, 14 g Cyclohexylamin, 0,2 g p-Toluolsulfonsäure und 30 ml Toluol wurde unter Verwendung eines Wasserabscheiders 8 Stunden am Rückfluß erhitzt. Nach Abschluß der Reaktion wurde die Toluollösung mit einer 5%igen wäßrigen Salzsäurelösung, einer 10%igen wäßrigen Natriumcarbonatlösung und mit Wasser gewaschen und dann anschließend getrocknet. Das Toluol wurde entfernt, und das Produkt wurde destilliert. Man erhielt 10 g N-Cyclohexallinolsäureamid. Kp. 180 bis 181°C/0,02 mm Hg, n²f 1,4890.

Elementaranalyse:

Berechnet ... C 79,71, H 11,99, N 3,87%;
gefunden .... C 79,42, H 12,08, N 3,80%.

Beispiel 13

Eine Mischung von 10 g Linolsäure und 5 g a-Methylbenzylamin wurde 6 Stunden in einem Autoklav auf 200° C erhitzt Die Reaktionsmischung wurde bei 203 bis 209°C/0,09mm Hg destilliert, Man erhielt 10 g a-Methylbenzyllinolsäureamid. nf 1,4930.

Analyse:

Gefunden ... C 81,56, H 10,91, N 3,78%;
berechnet ... C 81,40, H 10,77, N 3,65%.

Beispiel 14

Eine Lösung von 15 g Linolsäurechlorid in 20 ml Äther wurde bei 0 bis 5° C tropfenweise zu einer Mischung von 7 g 4-Methoxycyclohexylamin, 4 g Trimethylamin und 50 ml Äther gegeben. Nach Beendigung der Zugabe wurde die' Mischung 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und dann 4 Stunden am Rückfluß erhitzt. Anschließend wurde sie in der gleichen Weise wie im Beispiel 1 behandelt. Man erhielt 16,2 g N-4-Methoxycyclohexyllinolsäureamid (Kp. 188 bis 192°C/0,03 mm Hg, n%⁴ 1,4850).

Elementaranalyse:

Berechnet ... C76,67, H 11,58, N3,38%;
gefunden .... C 76,91, H 11,79, N 3,90%.

In der gleichen Weise wie in den vorhergehenden Beispielen wurden verschiedene Amide hergestellt unter Verwendung verschiedener Amine, Lösungsmittel und Basen, wie in der folgenden Tabelle angegeben ist, die auch die erhaltenen Resultate zeigt. In der Tabelle werden folgende Abkürzungen benutzt:
MIBK = Methylisobutylketon,
THF = Tetrahydrofuran,
TMA = Trimethylamin,
TEA = Triäthylanilin,
DEA = Diäthylanilin,

DMA = Dimethylanilin,
A = das gleiche Amin, das auch als Aus-

gangsamin verwendet wurde.

309 612/139

ίο

Tabelle B

Bei spiel	Amin	CH₃	Lösungs mittel	Base	Gebildetes Amid	Kp. °C/mm Hg	⁰C »D	C b	g	H b	g	N b	g
	OCH₃	NH₂CH₂^)			OCH₃
15		CH₃	Benzol	A	-CONH-<^>	194-200/ 0,04	30 1,5088	76,67	76,75	11,58	11,66	3,58	3,72
	OCH₃	NH₁CH₁^			OCH₃
16	NH₂^Q)		Aceton	X₂CO₃	-C0NH<3> ·	194-198/ 0,03	31 1,5070	76,67	76,81	11,58	11,71	3,58	3,81
17	NH₂ -C^^-OQ,H_S	OCH₃	MIBK	K₂CO₃	-CONH -<>- OC₂H₅	192-195/	30	76 98	77,05	11,68	11,72	3,45	3 72
	OH	NH₂CH₂<Q>			OH	0,05	1,4848
18			Äther	TFA		190-199/ 0,03	30 1,4860	76,34	76,49	11,58	11,68	3,71	3,81
	OH	NH₂CH₂/^) OH			OH
19		nh(ch₂<O)₂	Toluol	Pyridin	-CONH^).	188-197/ 0,04	30. 1,4860	76,34	76,52	11,48	11,70	3,71	3,75
20		NH₂ <^	THF	Pyridin	-conhOoh	190-202/ 0,04	30 1,4863	76,34	76,55	11,48	11,58	3,71	3,79
21	CH₃	CF₃	MIBK	Ca(OH)₂	-CONHCH <ζ~\ CH₃	200-204/ 0,07	30 1,4921	81,40	81,73	10,77	11,01	3,65	3,67
			CH₃
22	Toluol	DEA	-C ONHCH₂ \~/	192-201/ 0,03	30 1,4960	81,40	81,65	10,77	10,98	3,65	3,82
			CH₃
23	THF	NaOH	-CONHCH₂/~S	200-203/ 0,07	27 1,502	81,40	81,64	10,77	10,69	3,65	3,84
24	Aceton	K₂CO₃	- CONHCH₂ \~/ CH₃	203-206/ 0,05	30 1,4945	81,40	81,59	10,77	10,95	3,65	3,79

25	Benzole	DMA	-CONHCH₂ <ζ~\	192-198/ 0,02	30 1,4943	78,14	78,37	10,34	10,63	3,51	3,72
			OCH₃
26	MIBK	Na₂CO₃	-CONHCH₂-/"^ . OH	201-211/ 0,03	32 1,4851	77,87	78,00	10,20	10,44	3,63	3,88
27	Aceton	A	\ ²X=//2	207-213/ - 0,03	31 1,5150	83,60	83,88	9,87	10,05	3,05	3,09
,28	Pyridin	Pyridin	-CONH<f > nr	199-202/ 0,03	32,5 1,4840	73,71	74,51	8,85	8,25	3,44	3,59
			CF₃

	Ester	g	Amin	^y- Nh₂	Tabelle	B'	h'	Kataly sator	C₁₇	Amid H₃₁CO-	OH
Bei spiel	QH₅	10		OH I		f°C	38	—	.-NH	-O	OCH₃
29						140					OQH₅
	CH₃	10		OH			35	—	-NH	*-ς>*
30						140				Γ~- OH OH I
	CH₃	10					36	—	-NH
31	CH₃	10	HO-	-<Q>-NH₂		145	37	—	-NH	O
32	t-Bu	10	CH₃O-	-<^>NH₂		140	3	KOtBu	-NH	O
33	CH₃	10	QH₅O-	OCH₃		140	38	- —	-NH	O
34				<Q>-NH₂		140
	CH₃	10					35	—	-NH	<y	Cl
35						150				Γ OCH₃
	CH₃	10	HN₂-	Γ Cl			40	—	-NH
36				Cl I		140				Γ ' Cl .
				<>						Cl I '
	CH₃	10	HN₂-	<>_C1			40	—	-NH	-Δ
37	CH₃	10	NH₂-	H₃C Cl		140	40	—	-NH	-ο	Br
38			NH₂-		140			H	_}C Cl
	CH₃	10				40	—	-NH	-O
39			. NH₂ -		140				CH₃
	CH₃	10				40	—	-NH
40			NH₂-		140				Cl
	CH₃	10	NH₂-			40	— ■	-NH
41	CH₃	10			140	40	—	■ -NH
42			-O		140				CF₃
			CH₃
			g
I Cl	5
O*
-O	5
I CF₃
5
5
5
5

5

10


10
1Ö

10

10

10
10

	Ester	g	NH₂	Arnin	CH₃	Fortsetzung	g	f°C	h	Kataly sator	Arnid C₁₇H₃₁CO-
Bei spiel	CH₃	10	NH₂CH₂		-ö		5	140	40	—	-NH-
43	CH₃	10	/CH₂ NH	-O		-OCH₃	5	140	40	—	-NHCH₂-
44	CH₃	10	NH₂CH	O	CH₃		5	140	40	—	/CH₂- —N \:h₂-
45	CH₃	10	CH;				5	140	40	—	—NH-CH-
46				1	O						CH₃
			NH₂-CH₂	OCH₃
	CH₃	10				5	140	40	—	-NHCH₂-
47				OH
			NH₂CH₂
	CH₃	10	NH₂CH₂		5	140	40	—	-NHCH₂-
48	CH₃	10			5	140	40	—	-NHCH₂-
49			NH₂CH₂	-CH₃
	CH₃	10			5	140	40	—	-NHCH₂-
50			NH₂CH₂
	CH₃	10			5	140	40	—	-NHCH₂-
51
			O
O O
O



CH₃
CH₃
O
OCH,
OCH₃

OH Γ

Die physikalischen Daten der in Tabelle B' aufgeführten Verbindungen sind wie folgt:

Tabelle B" .

	Kp. °C/mm Hg oder Fp.	°c	C	b	%	g	Elementaranalyse	b	%	g	N %	b	g
Beispiel		"d	79,71	79,68	H	11,99	12,23	3,87	4,01
	199 bis 203/0,03	30 1,4850-	76,34	76,57	11,48	11,73	3,71	4,00
29	188 bis 192/0,01	30 1,4863	76,34	76,02	11,48	12,00	3,71	4,13
30	190 bis 193/0,06 '	30 1,4871	76,34	76,48	11,48	11,54	3,71	4,09
31	191 bis 194/0,05	31 1,4869	76,67	76,78	11,58	12,03	3,58	4,01
32	185 bis 190/0,05 '	30,5 1,4849
33

ΙΙΓΊΙΙ-ΊΙ

(Fortsetzung)

	Kp. °C/mm Hg oder Fp.	⁰C	C%	b	g	Elementaranalyse	%	g	N %	b	g
Beispiel			76,98	76,81	H	11,79	3,45	3,67
	193 bis 196/0,1	30,5			b .
34		1,4847	76,67	76,48	11,68	11,98	3,58	3,89
	200 bis 204/0,08	31
35		1,5081	73,94	74,12	11,58	9,38	3,59	3,59
	185/0,09	30,5
36		1,4990	73,94	74,41	9,24	9,45	3,59	3,88
	185 bis 190/0,03	27
37		1,4980	73,94	74,09	9,24	9,48	3,59	3,77
	185 bis 190/0,04.	23
38		1,5010	74,35	74,78	9,24	9,83	.3,47	3,68
	185 bis 195/0,02	27
39		1,4965	74,35	74,81	9,42	9,33	3,47	3,61
	180 bis 185/0,02	25
40		1,4927	66,36	66,21	9,42	8,32	3,23	3,90
	220/0,03	24 ■ 1,5250 24 1,4859	73,71	74,42		8,46	3,44	3,53
41	200 bis 201/0,04 .	26	77,92	77,81	8,29	10,45	3,64	3,81 ':
'42	Fp. 55 bis 57	■ 1,4900	81,24	81,44	8,85	10,67	3,79	3,89
43	190 bis 192/0,1	25			10,13
44		1,5155	83,60	83,87	10,64	9,97	3,05	3,23
	208 bis 218/0,03	27
45		1,4929	81,40	81,87	9,87	11,00	3,65	3,72
	203 bis 207/0,15	27
46		1,4982	81,40	81,42	10,77	10,50	3,65	3,68
	188 bis 200/0,04	27
47		1,5026	81,40	81,28	10,77	11,28	3,65:	3,60
	204 bis 216/0,07	27
- 48		1,4949	81,40	81,62	10,77	10,51	3,65	3,74
	203 bis 207/0,06	27
49 .		1,4952	78,14	78,04	10,77	10,23	.3,53.	3,38
	190 bis 200/0,03	30
50		1,4860.	77,87	78,72	10,14	10,21	3,63	3,76
	205 bis 211/0,02 .
51		10,20

Beispiel 52

Eine Mischung aus 10 g Äthyllinolat, 10 g Dibenzylamin und einer äthanolischen Lösung von 1,0 g Natrium wurde etwa 2 Stunden auf 70 bis 85° C erwärmt. Dann wurde die gleiche Menge Wasser zugesetzt, und die Mischung wurde mit Äther extrahiert. Der ätherische Teil wurde mit einer 5%igen wäßrigen Salzsäurelösung und dann mit Wasser gewaschen und anschließend über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet. Man erhielt 13 g Ν,Ν-Dibenzyllinolsäureamid, Kp. 203 bis 207°C/0,04 mm Hg, nl° 1,5150.

Elementaranalyse:

Berechnet ... C 83,60, H 9,87, N 3,05%;
gefunden .... C 83,71, H 10,03, N 3,22%.

Beispiel 53

Eine Mischung von 10 g Methyllinolat, 5 g a-Methylbenzylamin und einer methanolischen Lösung von 1,2 g Natrium wurde unter Entfernung des Methanols, 2 Stunden in einem Vakuum von 100 mm Hg auf 70° C erhitzt. Man erhielt 12 g N-a-Methylbenzyllinolsäureamid, Kp. 200 bis 203°C/0,07 mm Hg, nf 1,4919. .

Elementaranalyse:

Berechnet ... C 81,40, H 10,77, N 3,65%;
gefunden .... C 81,77, H 10,94, N 3,66%.

Beispiel 54

Eine Mischung von 10 g Methyllinolat, 5 g 2-Methoxybenzylamin, 3,7 g Natriummethylat und 100 ml Toluol wurde unter Entfernung des Methanols in etwa 2 Stunden umgesetzt. Man erhielt 10 g N-2-Methoxybenzyllinolsäureamid, Kp. 195 bis 201°C/0,03 mm Hg, ni⁵ 1,4978.

Elementaranalyse:

Berechnet ... C 78,14, H 10,34, N 3,51%;
gefunden .... C 78,03, H 10,20, N 3,79%.

In der gleichen Weise wurden verschiedene Amine

309012/139

hergestellt, die in der folgenden Tabelle zusammengestellt sind:

Tabelle C

Bei spiel	Linolsäure- ester	Verwendetes Amin NH₂-	Gebildetes Amid C₁₇H₃₁CONH-	C b	g	H b	g	N b	g	Kp. °C/mm Hg	32
57	Äthyl Methyl Methyl	CH₃ —CH₂~y~\ *__CHz^2ycH₃* OH —CH₂^~\	CH₃ —CH₂-^~J) -CH₂-^^-CH₃ OH	81,40	81,31	10,77	10,89	3,65	3,91	200 bis 207/0,05 203 bis 206/0,05 205 bis 209/0,03	1,5019 32
81,40	81,22	10,77	10,92	3,65	3,78		1,4940 30 1,4859
77,87	77,69	10,20	10,41	3,63	3,81

. . Wasser gewaschen und anschließend getrocknet. So-

Beispiel dö dann wurde sie unter vermindertem Druck konzen-

Eine Mischung von 10 g Methyllinolat, 10 g Cyclo- triert und anschließend destilliert. Man erhielt. 7 g

hexylamin und eine Lösung von 0,2 g Natrium in N-Cyclohexyl-linolsäureamid, Kp. 190 bis 192° C/

60 ml Methylalkohol ließ man 144 Stunden bei Raum- ₂₅ 0,03 mm Hg, n|⁵1,4865.

temperatur stehen. Dann wurde die Mischung mit _. ,

Wasser versetzt, und die ölige Schicht wurde mit Äther Wementaranalyse:

extrahiert. Die ätherische Lösung wurde mit einer Berechnet ... C 79,71, H 11,99, N 3,87%;

5%igen wäßrigen Salzsäurelösung und dann mit gefunden C 79,94, H 12,08, N 3,90%.

Tabelle D

Bei spiel	Ester	g	NH₂-	Amin	g	Katalysator	Lösungsmittel	Temp. ⁰C	Zeit (Std.)	Gebildetes Amid C₁₇H₃₁CO-	Cl \\
				Cl I
59	CH₃	10	NH₂	ö	10	KOtBu	Benzol	22	100	-NH-	CH₃
			NH₂	CH₃							Ö
60	CH₃	10	NH₂		10	NaOCH₃	Toluol-	22	100	-NH-
61	CH₃	10	NH₂-	O	5	0	Toluol	60	120	-NH-
62	C₂H₅	10	O	5	KOtBu	t-Butanol	30	120	-NH-
63	CH₃	10	<y	10	NaOCH₃	Methanol	30	100	-NH-



	>-'OCH₃
-Cl	^OH
-OCH₃	^OCH₃
-OH
-OCH₃

Die physikalischen Werte der in der Tabelle D aufgeführten Verbindungen sind in der folgenden Tabelle D' aufgeführt:

	Kp. °C/mm Hg oder Fp.	°^c "ß	Tabelle D'	% g	H b	% g	N b	g	Aus beute
Beispiel	188/0,05 190 bis 195/0,03	23 1,4992 23 1,4940	C b	"74,50 74,91	9,24" 9,42	9,81 10,65	3,59. 3,47	•j co 3,48	4,8 4,6
■ 59 60		"73,94 74,35

(Fortsetzung)

Beispiel	Kp. °C/mm Hg oder Fp.	⁰C	C b	% g	H b	% g	N b	% g	Aus beute
61	m. p. 56 bis 58		77,92	77,61	10,13	10,31	3,64	3,49	6,0
62	190 bis 191/0,06	23 1,4880	76,34.	76,51	11,48	11,09	3,71	3,49	6,1
63	190 bis 192/0,05	22 1,4861	76,67	76,09	11,58	11,39	3,58	3,62	4,9

Beispiel 64

Eine Mischung von 10 g Methyllinolat und 5 g Cyclohexylamin wurde 5 Stunden in einem Autoklav auf 210° C erhitzt: Man erhält 12 g N-Cyclohexyllinolsäureamid (Kp. 200 bis 208°C/0,05 mm Hg).

Elementaranalyse:

Berechnet ... C 79,71, H 11,99, N 3,87%;
gefunden .... C 79,90, H 12,03, N 3,84%.

Beispiel 65

Eine Mischung von 10 g konjugiertem Methyllinolat und 5 g Cyclohexylamin wurde 5 Stunden in einem Autoklav auf 200° C erhitzt. Man erhielt 12,1 g N-Cyclohexyllinolsäureamid (Kp. 200 bis 209°C/0,04mmHg).

Elementaranalyse:

Berechnet ... C 79,71, H 11,99, N 3,87%;
gefunden .... C 79,88, H 12,05, N 3,61%.

Die UV- und IR-Äbsorption weist auf das Vorliegen von konjugierten Doppelbindungen hin.

Beispiel 66

Eine Mischung von 10 g Methyllinolat und 5 g o-Methylbenzylamin wurde 7 Stunden unter N₂ in einem Autoklav auf 210°C erhitzt. Man erhielt 11,5 g N-o-Methylbenzyllinolsäureamid (Kp. 192 bis 21O⁰C/ 0,06 mm Hg, nV 1,4982).

Elementaranalyse:

Berechnet ... C 81,40, H 10,77, N 3,65%; gefunden .... C 81,61, H 10,94, N 3,60%. ;

Beispiel 67 ^r

Eine Mischung von 10 g konjugiertem Methyllinolat und 5 g p-Methoxycyclohexylamin wurde 40 Stunden in N₂ auf 150° C erhitzt. Man erhielt 12 g N-p-Methoxycyclohexyllinolsäureamid (Kp. 195 bis203°C/0,05mmHg).

Elementaranalyse:

Berechnet ... C 76,67, H 11,58, N 3,58%; gefunden .... C 76,81, H 11,31, N 3,24%.

In der gleichen Weise wurde die folgende Verbindung hergestellt: *

Beispiel

Amid

Fp.
⁰C C%

H%

N%

trans-N-Cyclohexyllinolsäureamid

51 bis 52 79,71

80,00

11,99

12,27

3,87

3,85

Beispiel 69

Zu einer Lösung von 14 g Linolsäure und 5,5 g Triäthylamin in 100 ml Tetrahydrofuran wurde bei einer Temperatur von —10 bis —5° C unter Rühren 5,9 g Äthylchloracetat zugesetzt. Dann wurde die Reaktionsmischung 20 Minuten bei -5° C weiter gerührt. Anschließend wurden 7,7 g 2-Methyl-6-chloranilin bei —5° C unter Rühren in die Lösung eingegeben. Das Rühren wurde fortgesetzt, während die Temperatur allmählich auf Raumtemperatur erhöht wurde. Dann wurde die Temperatur nach und nach weiter gesteigert, und die Lösung wurde 20 Minuten bet 40° C gerührt. .

Nach dem Abkühlen der Lösung wurde das Tetrahydrofuran unter vermindertem Druck abdestilliert.

Der Rückstand wurde in Äther aufgenommen, nacheinander mit kalter verdünnter Salzsäure, mit einer kalten wäßrigen Lösung von Natriumcarbonat und mit Wasser gewaschen und dann über wasserfreiem Natriumcarbonat getrocknet. Nach Abdestillieren des Äthers und Destillieren des Rückstandes unter vermindertem Druck erhielt man 12,9 g. (Ausbeute 64%) 2-Chlor-6-methylphenyllinolsäureamid (Kp. 210 bis 215°C/0,02 mm Hg, ni? 1,5147).

Elementaranalyse (C₂₅H₃₈ONCl): , Berechnet ... C 74,35, H 9,42, N 3,47, Cl 8,80%; gefunden .... C 74,57, H 9,61, N 3,42, Cl 8,67%.

In der gleichen Weise wurden die.folgenden Verbindungenhergestellt.

21

Tabelle E

22

Beispiel

Amide C₁₇H₃₁CONH-

Kp. °C/mm Hg

⁰C	c%	b	g	H%	b	g	N	b
"D	74,35	74,51	9,42	9,67	3,47
31
1,4910	66,36	66,71	8,29	8,42	3,23
26
1,5249	74,35	74,67	9,42	9,68	3,47
25

CH,

184 bis 190/0,03

200 bis 208/0,03

180 bis 185

²⁵

Analyse:

Beispiel 73

N-(a-Äthylbenzyl)-linolamid '^J Berechnet ... C81,55, H 10,90, N 3,52%; Ein Gemisch von 10 g Linolsäure und 7 g α-Äthyl- gefunden .... C 81,45, H 11,00, N 3,50%.

benzylamin wurde 6 Stunden auf 150⁰C erhitzt. Es Die Wirksamkeit der erfindungsgemäß erhaltenen

wurden 13,4 g N-(a-Äthylbenzyl)-linolsäureamid vom Linolsäureamidverbindungen ist aus der nachstehen-

Kp. 180 bis 190°C/0,04mm Hg erhalten, nl° 1,5024. 30 den Tabelle ersichtlich.

	Tabelle F	>	Cholesterin-' 1% verabreicht	K 78
Verbindung		>	74 bis
Keine (Kontrolle)			47
Linolsäure		>	71
C₁₇H₃₁CONH ^ζ~	I Cl	52
C₁₇H₃₁CONH —<^		20
C₁₇H₃₁CONHCH₂ —/^	VcH₃
C₁₇H₃₁CONH —/~
	>■■.	46
C₁₇H₃₁CONH -\	\ Cl
C₁₇H₃₁CONH -^f		50
Cl
C₁₇H₃₁CONH ~/~		Jlutspiegel-Werte 0,2% verabreicht
/ H₃C		)0 101 bis 104
	55
	101
	77
	58

	67
	61

	63

Fortsetzung

Verbindung	Cholesterin-! 1% verabreicht	Slutspiegel-Werte 0,2% verabreicht
C₁₇H₃₁CONH ^(~\	79	94
I OH
Q₇H₃₁CONH-<^^ OH	64	82
OCH₃
Q₇H₃₁CONH —<^_y>	60	90
Q₇H₃₁CONH -<^~^ OC₂H₅	52 (0,4%)	80
Q₇H₃₁CONH —<^>	56 (0,8%)	-75
I OCH₃
Q₇H₃₁CONH—/~Λ	72	85
. I CF₃
Q₇H₃₁CONH —^<\~~V~ ?^r	79	86
Q₇H₃₁CONfCH₂ —/~~V)	67
Q₇H₃₁CONH ~^~\		67
Cl
Q₇H₃₁CONH —^~V- Cl		46
CH₃
Cl
Q₇H₃₁CONH -\~y	35	44
CH₃
Q₇H₃₁CONH -^"V- CH₃	42
Cl
Q₇H₃₁CONH — CH ~^\~y	39	78
CH₃ t
Q₇H₃₁CONH-CH₂ —/"V-CH₃	55

Fortsetzung

Verbindung	Cholesterin-j 1% verabreicht	Jlutspiegel-Werte 0,2% verabreicht
Q₇H₃₁CONH-CH₂-	56

Q₇H₃₁CONH-CH₂-		64

Q₇H₃₁CONH-CH₂-		70

trans-Q₇H₃₁CONH —	60
konj. Q₇H₃₁CONH —	69
konj. Q₇H₃₁CONH —	39	80
Q₇H₃₁CONH-CH₂-		71

Q₇H₃₁CO-NH-CH-	39
CH₃
Q₇H₃₁CO-NH-CH-	40
C₂H₅
C₁₇H₃₁CO-NH-CH-	39
ISO-C₃H₇
Q₇H₃₁CO-NH-C	41
:h—

o ■■■
Ί CH₃
Q
Γ CH₃
O
I , OCH₃
O
O
ο .
Q
I OH
O

O

O

O

Die Wirksamkeit wurde an Mäusen geprüft, die auf eine spezielle, mit Cholesterin und Gallensäuren angereicherte Diät gesetzt wurden. Der Cholesterin-Blutspiegel der Mäuse war auf das 3- bis 4fache des normalen Wertes erhöht worden. Die Linolsäureamidverbindung wurde in Mengen von 1 oder 0,2% gut in die Spezialdiät eingemischt und 8 bis 12 Tage kontinuierlich per oral verabreicht. Dann wurde der Cholesteringesamtwert im Blutserum der Tiere quantitativ bestimmt. Aus den Werten wurden die Cholesterin-Blutspiegel-Indizes berechnet, indem der Wert, der bei den Tieren der Kontrollgruppe, denen also kein Mittel gegeben worden war, gleich 100 gesetzt wurde.

Eine andere deutliche Wirksamkeit der erfindungsgemäß hergestellten N-substituierten Linolsäureamidverbindungen besteht darin, die Ablagerung von Cholesterin und Fett in der Leber zu verhindern, die bei Tieren eintritt, welche auf eine Cholesterindiät gesetzt sind. Es scheint, daß die Linolsäureamidverbiiidungen die gesunkene Lipid-Stoffwechselfunktion der Leber erhöhen. Diese Wirksamkeit ist auch deswegen günstig, weil der Lipid-Stoffwechsel hauptsächlich auf der Funktion der Leber beruht. Bei Linolsäure wird eine derartige Wirksamkeit niemals beobachtet.

Die extrem geringen Toxizitäten der erfindungsgemäß hergestellten N-substituierten Linolsäureamidverbindungen gehen aus den folgenden Werten her-

vor, in der die akute Toxizität einer erfindungsgemäß hergestellten Verbindung für Mäuse zusammengefaßt ist.

. Tabelle G

Mittel	CH₃	/ \	LD₅₀-We per oral	rte (g/kg) intra- peritoneal
	\ CH₃
Q₇H₃₁CONHCH	O	>50	1,0
	A
C₁₇H₃₁CONH —'	Y	>50	9,0
	I CH₃
C₁₇H₃₁CONH —I		>50	10,5

Linolsäure ...·....	>50	<10
	■'

Wie aus den vorstehenden Werten hervorgeht, wurden keine Mortalfälle und keine deutlichen toxischen Symptome beobachtet, selbst in sehr hohen Dosen (per oral) wie 0,5 g pro 10 g, d. h. 50 g/kg Körpergewicht. Auch bei täglicher Verabreichung von N-Cyclohexyllinolsäureamid in Konzentrationen von 1, 0,5 oder 0,2% in 3wöchiger Diät an Mäuse wurden keine ausgeprägten toxischen Symptome und keine Mortalfälle beobachtet. Der Appetit war normal, und die Verdauungsfunktion blieb unverändert. Die inneren Organe zeigten bei der Sektion keine merkliche Veränderung. Das gleiche Ergebnis erbrachten Versuche mit N-2-Methylphenyllinolsäureamid an Ratten.

Die cholesterinspiegelsenkenden Mittel, die nach dem erfindungsgemäßen Verfahren erhalten werden, können per oral verabreicht werden, üblicherweise gibt man 0,1 bis 20 g pro Tag, vorzugsweise 0,5 bis 5 g pro Tag, und die Verabreichung kann 1 bis 5 Monate fortgesetzt werden, gewöhnlich etwa 3 Monate. Die cholesterinsenkenden Mittel können in jeder geeigneten Form gegeben werden, die tür die orale Verabreichung üblich ist. So können sie in Kapseln eingeschlossen oder in flüssiger Form, als Tabletten oder in Pulverform gegeben werden. Bei der Zubereitung der Mittel in diesen verschiedenen Formen kann ein geeigneter fester Träger mit der aktiven Verbindung vermischt oder getränkt werden, oder die aktive Verbindung kann in einem flüssigen Träger wie Speiseöl, vorzugsweise einem Linolsäure enthaltenden öl, aufgenommen werden. Es ist auch möglich, eine Mischung von zwei oder mehr der erfindungsgemäßen erhaltenen N-substituierten Linolsäureamide zu verwenden, und ferner können diese Verbindungen auch im Gemisch mit Linolsäure verwendet werden.

Vergleichsversuche

A. Untersuchung der cholesterinsenkenden Wirkung der erfindungsgemäßen Linolsäureamide bei der Verabreichung dieser Verbindungen an Ratten

Zur Durchführung der Versuche wurden männliche Wistar-Ratten mit einem Gewicht zwischen 100 und 120 g verwendet. Sie erhielten täglich halbsynthetisches Futter, das 1 Gewichtsprozent Cholesterin enthielt. Nach 2 Wochen wurde der Cholesterinspiegel in aus den Versuchstieren entnommenen Blutproben, entsprechend dem Verfahren von R. G. Herrmann, Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine, Bd. 94, 1957, S. 503, ermittelt.
Die untersuchten Tiere wurden in zwei Gruppen aufgeteilt, und während der folgenden 8 Wochen wurde den Tieren das obengenannte Cholesterinfutter und außerdem verschiedene der erfindungsgemäßen Verbindungen in den in der folgenden Tabelle H angegebenen Mengen verabreicht. Nach Beendigung der Versuchsdauer wurde der Cholesterinspiegel im Serum und der Cholesteringehalt in der Leber und der Lipidgehalt in der Leber ermittelt. Die dabei erhaltenen Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle H zusammengestellt.

Tabelle H

Cholesterinsenkende Wirkung verschiedener Dosen von Linolsäureamiden bei oraler Verabreichung an Ratten

innerhalb 8 Wochen

Untersuchte Verbindung	' Dosis der untersuchten Verbindung	Anzahl der Tiere	Choleste im Serur	rinspiegel η (mg %)	Cholesterin gehalt in der Leber	Lipidgehalt in der Leber
	Cholesterin		vor der	nach der	(mg/100 g	(g/100 g
	futter (%)		Behandlung	Behandlung	Leber)
Kontrollversuch		10	359	357	4035	10 24
C₁₇H₃₁CONH — CH -Y~\	0,2	11	368	184	740	4,79
	0,1	10	360 ,	. 206	110Ö ·	5,19
CH₃	. 0,05	11	357	331	1597	6,05
Ci₇H₁₁COOH	02	11	360	364	4237	1200
Kontrollversuch λ .		12	344	'362	3329	11,77

Fortsetzung

Untersuchte Verbindung	Dosis der untersuchten Verbindung in dem	Anzahl der Tiere	Choleste im Serur	rinspiegel η (rag %)	Cholesterin gehalt in der Leber	Lipidgehalt in der Leber (g/100 g Leber)
	Cholesterin- futter (%)		vor der Behandlung	nach der Behandlung	(mg/100 g Leber)	7,81 8,35 9,12
C₁₇H₃₁CONHCH₂ —^~^ OCH₃	0,2 0,1 0,05	11 11 11	345 345 350	OO Ul U) VO VO O	601 798 1200 ■	10,69 13,33 "
C₁₇Ho₁COOH	0,2 0,1	8 8	349 355	306 362	3800 4200	10,24
		10	362	360	4022	4,11 5,65 8,72
Kontrollversuch	0,2 0,1 0,05	OO OO VO	360 355 355	141 158 172	729 800 1100
C₁₇H₃₁CONH —<(~\~ OC₂H₅						5,13 6,06 8,01
Cl f	0,02 0,1 . 0,05	10 10 10	351 360 360 .	105 112 131	600 711 829	6,08
C₁₇H₃₁CONH ^(~^> CH₃	0,2	10	351	331	4129	12,06
C₁₇Ho₁COOH	0,1	10	351	352	4400

B. Untersuchung der cholesterinsenkenden Wirkung der erfindungsgemäßen Verbindungen bei der Verabreichung dieser Verbindungen an Hähnchen

Zur Durchführung der Versuche wurden 7 Tage alte Hyland-Hähnchen verwendet. Sie wurden 7 Tage lang mit handelsüblichem Futter gefüttert, das 1 Gewichtsprozent Cholesterin und verschiedene der erfindungsgemäßen Verbindungen in den in der folgenden Tabelle I angegebenen Mengen enthielt.

Nach Beendigung der Versuchsdauer wurden die

Hähnchen getötet, und nach dem Verfahren von R. G. H e r r m a η η, Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine, Bd. 94, 1957, S. 503, wurden der Cholesterinspiegel im Serum und in der Leber und der Lipidgehalt in der Leber ermittelt. Die dabei erhaltenen Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle I zusammengestellt.

Tabelle I

Cholesterinsenkende Wirkung verschiedener Dosen von Linolsäureamiden bei 7tägiger oraler Verabreichung

an Hähnchen

Untersuchte Verbindung

Dosis der
untersuchten
Verbindung

in dem
Cholesterin-

futter (%)

Anzahl

Cholesterinspiegel
im Serum

Cholesteringehalt
in der Leber

Lipidgehalt in der Leber

Kontrollversuch

C₁₇H^CO — NH- CH

/3-Sitosterin.

0,2
1,0

5,0

100

(4826 ± 42,8)
mg%

78,3
54,9

41,0 ^:

100

(1,88 ± 0,15)
g/100 g Leber

71,9
45,9

22,0

100

(6,41 ± 0,24) g/100 g Leber

90,2 84,3

65,9

Der Cholesterinspiegel im Serum, der Cholesteringehalt in der Leber und der Lipidgehalt in der Leber beziehen sich auf den Vergleichswert 100.

C. Untersuchung der antiatherogenen und anticholesterinämischen Wirkung der erfindungsgemäßen Verbindungen bei der Verabreichung dieser Verbindungen

an Kaninchen

Männliche weiße Kaninchen mit einem Gewicht von 2 bis 3 kg wurden in Einzelkäfige gebracht und mit 50 g käuflichem Kaninchenfutter und 20 g Cholesterinfutter, das zu 60 Gewichtsprozent aus dem im Handel erhältlichen Futter, zu 8 Gewichtsprozent aus Cholesterin und zu 32 Gewichtsprozent aus hydriertem Kokosnußöl bestand, 1 Woche lang täglich gefüttert. Die Versuchstiere wurden in zwei Gruppen aufgeteilt und erhielten während der folgenden 9 Wochen zusätzlich zu dem Cholesterinfutter verschiedene der erfindungsgemäßen Verbindungen in den in der folgenden Tabelle I angegebenen Mengen.

Nach Beendigung der Versuchsdauer wurde den Tieren unter einer Äthernarkose Blut aus dem Herzen entnommen, dann wurden die Tiere getötet. Der Cholesteringehalt im Serum und in der Leber und der Lipidgehalt in der Leber wurden nach dem Verfahren von R. G. Herrmann, Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine, Bd. 94, 1957, S. 503, bestimmt. Das Herz und die Aorta wurden vorsichtig herausgeschnitten, der Länge nach geöffnet und in 10%igem Formalin fixiert und anschließend mit Sudan IV angefärbt. Diese Proben wurden nach einer Skala mit den Werten von 0 bis 4 beurteilt (vgl. D. K r i t c h e ν s k y et al, - Journal of Atherosclerosis Research, Bd. 1, 1961, S. 211).

Die bei diesen Versuchen erhaltenen Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle K zusammengestellt.

Tabelle K

Antiatherogene und anticholesterinämische Wirkung verschiedener Dosen von Linolsäureamiden bei 9wöchiger

oraler Verabreichung an Kaninchen

Untersuchte Verbindung

Dosis in mg pro Tier pro Tag Anzahl
der Tiere

Cholesterinspiegel

im Serum

(mg%) Cholesteringehalt

in der Leber
(g/100 g Leber)

, Atherosklerosegrad

(Skala von 0 bis 4)

Lipidgehalt

in der Leber

(g/100 g Leber)

Kontrollversuch

C₁₇H₃₁CONHCH-^
CH₃

jS-Sitosterirt

Kontrollversuch .

400 200 100.

800

C₁₇H₃₁CONHCH₂

C₁₇H₃₁CONH

/3-Sitosterin...

0C,H

2**5

400 400

400 800

6 6 6

5 6

5 6 1650

80
285
480

1220
2240

1210
920

1065
1570

1,76

0,32
0,73
0,64

2,45
1,77

1,05
1,32

Q,89
2,12

1,28

0,04 0,72 1,07

1,98 1,26

0,84

Ul

0,90 1,88

6,03

4,29 4,68 4,60

7,87 6,41

5,51 5,18

4,90 6,99

D. Klinische Untersuchung von N-(a-Methylbenzyl)-linolsäureamid

6o

Mit N-(a-Methylbenzyl)-linolsäureamid, nachfolgend als AC-223 bezeichnet, wurden klinische Versuche durchgeführt, um die cholesterinsenkende Wirkung dieser Verbindung bei ihrer Verabreichung an Patienten zu zeigen. Dabei wurden folgende Ergebnisse erhalten: .

Neun Patienten mit Hypercholesterinämie wurden einige Wochen lang täglich 2,25 g AC-223 verabreicht, und die Wirkung dieses Arzneimittels auf den Cholesteringehalt im Serum wurde ermittelt.

Von den untersuchten neun Patienten hatten drei eine Hypertension, weitere drei litten unter Diabetes mellitus und der Rest hatte Arteriosklerose, einen Myocarininfarkt bzw. ein Myxodema. Das AC-223 lag in Form von Kapseln vor, die jeweils 250 mg

309612/139

enthielten. Bei jeder Mahlzeit nahmen die Patienten drei solcher Kapseln ein. Vor Beginn der Behandlung wurde der Cholesterinspiegel im Serum zweimal mit mindestens einem lwöchigen Intervall bestimmt, und der Mittelwert wurde als anfänglicher Vergleichswert betrachtet.

Die Blutproben wurden immer von nüchternen Patienten entnommen, die Behandlung für die Hauptkrankheiten wurde während der Verabreichung von AC-223 konstant gehalten. Bezüglich der Nahrung bestand keine spezielle Indikation. Die Diabetes-Patienten wurden ständig kontrolliert, ohne jedoch im Krankenhaus zu sein.

Wie aus der folgenden Tabelle L hervorgeht, betrug der Mittelwert für das Cholesterin im Serum bei den neun Patienten vor der Behandlung 282,2 mg/dl. 2 Wochen nach Beginn der Verabreichung von AC-223 hatte sich der Mittelwert an Cholesterin in dem Serum auf 249,0 mg/dl verringert, und die prozentuale Abnahme betrug 11,7%. 4 Wochen nach der Behandlung betrug der Mittelwert 224,6 mg/dl, und die prozentuale Abnahme betrug 20,4%. Nach 4wöchiger Verabreichung wurde nicht ein Fall festgestellt, der keine Senkung des Cholesterinspiegels im Serum aufwies.

Bei fünf Patienten wurde gleichzeitig das Triglycerid im Serum bestimmt. Es wurde jedoch keine meßbare Wirkung auf den Gehalt an Triglycerid im Serum bei Verabreichung von AC-223 festgestellt.

Bei vier Patienten mit Hypertension wurde bei Verabreichung von AC-223 keine Senkung des Blutdruckes erzielt. Bei normalem Blutdruck bei anderen Patienten wurde ebepfalls keine Änderung festgestellt. In allen Fällen konnten überhaupt keine ungünstigen Nebenwirkungen festgestellt werden.

Tabelle L
Untersuchung der Wirkung von N-(a-Methylbenzyl)-linolsäureamid auf den Cholesterinspiegel im Serum

A !tot-	Geschlecht	Hauptkrankheit	vor	Cholesteringehalt im	der Behandlung	Durch	2 Wochen	Serum	4 Wochen	Abnahme
Alter des Pa			2 Wochen	unmittelbar	schnitt .	danach		danach	in%
tienten			davor	davor	mg/dl	mg/dl	nach der Behandlung	mg/dl
	9	Arteriosklerose	mg/dl	mg/dl	305	311	Abnahme	252	(-17,4)
41			310	300	342 ·	271	in %	239	•(-30,1)
	9"	Diabetes mellitus	348	336	275	198		180	(-34,5)
54	C?	Hypertension	290	259	294	254	( + 2,0)
59	9	Diabetes mellitus		294	293	281	(-20,8)	258	(-11,9)
39	9	Myxodema		293	232	226	(-28,0)	208	(-10,3)
51	C?	Hypertension	246	218	248	238	(-13,6)	224	(-9,7)
40	<?	Myocardininfarkt	252	244	282	240	(-4,1)	226	(-19,9)
56	9	Hypertension	280	284	269	222	(-2,6)	210	(-21,9)
40	C?	Diabetes mellitus	266	272	282,2	249,0	(-4,0)	224,6	(-20,4)
45 ·		Durchschnitt				(-14,9)
			(-17,5)
	(-11,7)

Claims

Patentansprüche:
1. Linolsäureamide der allgemeinen Formel

Q₇H₃₁CO-N

IO

worin a) R₁ einen durch Chlor oder Brom monosubstituierten Phenyl-, einen durch Chlor und die Methylgruppe disubstituierten Phenyl-, einen 3-Trifluormethylphenyl-, einen 4-Methoxyphenyl-, einen gegebenenfalls durch eine Hydroxyl- oder Methoxygruppe substituierten Cyclohexyl-, einen 4-Äthoxycyclohexyl-, einen gegebenenfalls in 2,3,4- oder lung durch eine Hydroxyl- oder Methoxygrüppe α-Stellung durch eine Methylgruppe oder in 2-Stelsubstituierten Benzylrest oder einen a-Alkyl-(C₂-C₄)-benzylrest, R₂ ein Wasserstoffatom bzw. b) R₁ und R₂ jeweils einen Benzylrest bedeuten.
2. Verfahren zur Herstellung von Linolsäureamiden der allgemeinen Formel .