CN102885847B - 油茶饼粕多糖的用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及植物提取物的用途，具体涉及一种油茶饼粕多糖的用途。本发明提供了油茶饼粕多糖在抑制α-葡萄糖苷酶活性方面的应用，本发明还提供了油茶饼粕多糖在制备治疗糖尿病药物中的应用。

Description

油茶饼粕多糖的用途

技术领域

本发明涉及植物提取物的用途，具体涉及油茶饼粕多糖的用途。

背景技术

植物多糖具有许多生物活性功能，包括免疫调节、抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗辐射、抗菌抗病毒、保护肝脏等。植物多糖广泛的生物活性己逐渐被人们利用，其独特活性和来源的天然性在保障人体健康应用中具有很大潜力。因此，如何提高收率是研究植物多糖的首要问题。

目前，我国油茶面积约有4500万亩。全国油茶籽年产量100万吨左右，榨油后的油茶饼粕68.39万吨。

油茶副产品综合开发利用技术目前主要集中在茶皂素的开发与利用方面，其它成分开发利用的报道很少。目前国内生产茶皂素年产1.86万吨，已广泛用于日化，建材，医药等领域。据文献报道，茶皂素在油茶饼粕中的含量为10～15%，而总糖含量则达30～35%，其中相当大比例为多糖。但由于对油茶饼粕多糖的分子结构与功能尚不十分清楚，因此，油茶多糖尚未如茶皂素一样形成规模产业。

传统提取油茶饼粕中多糖的方法有：

王元凤等（食品工业，2008，（6）：29～32）通过对水提法、醇提法提取油茶籽多糖、茶皂素的最佳提取条件进行比较，确定了油茶籽多糖、茶皂素的最佳提取条件以水做提取溶剂，温度75℃，2次浸提，固液比分别为1:9和1:5，每次各1.5小时，油茶籽多糖得率9.09%，质量分数20.07%。

吴雪辉等（食品工业科技，2008，29（9）：197～199）采用微波技术提取茶粕中的多糖，探讨了各因素对多糖提取效果的影响，通过正交实验及极差和线性回归分析，获知原料粒度对油茶饼粕中多糖提取效果影响显著。得出最佳微波提取工艺条件为:微波功率640W，提取时间3min，固液比1∶25，粒度80～100目，提取次数1次。此条件下油茶多糖的提取率为15.15%。

黄宝生（CN200710191396.2）发明了一种从油茶籽饼粕中提取茶多糖的方法。具体做法是将油茶籽粕按10Kg比100-200L水的比例，在水中浸泡，然后加温同时进行搅拌，趁热进行过滤，将过滤后的液体继续加热，使液体浓缩至1/4体积，在浓缩的溶液中加入的酵母，保持在25-32℃温度下，振动发酵，发酵时间0.5-3天后。停止振动，使其沉淀，取上层清液加入清液体积3倍的乙醇进行搅拌，然后放入冰箱内冷冻，将冷冻液加水使其溶解分层沉淀，取上层液体，将上层液体经喷雾干燥得茶多糖。

发明内容

本发明的目的是提供油茶饼粕多糖的用途。

为达到上述目的，本发明的技术方案是：

本发明提供了油茶饼粕多糖在抑制α-葡萄糖苷酶活性方面的应用。本发明还提供了油茶饼粕多糖在制备治疗糖尿病药物中的应用。

所述油茶饼粕多糖是通过现有的油茶饼粕多糖的提取方法所得到的。

所述的油茶饼粕多糖的一种优选制备方法，具体步骤为：

（1）将油茶饼粕粉碎至60目～80目的饼粕粉，然后将饼粕粉加入预先溶解有纤维素酶的水溶液中提取；其中饼粕粉与水溶液质量比例为1：20～40，纤维素酶用量为饼粕粉干重量的0.3%～0.4%，提取温度为45℃-55℃，提取时间3小时-5小时；

（2）将提取液过滤，采用中空纤维超滤膜分离装置将滤液浓缩，调整浓缩后的溶液使得溶液中溶质的质量百分含量为3%～10%，聚酰胺柱吸附8小时～12小时，去离子水洗脱；

（3）收集水洗液浓缩，浓缩液加3～5倍体积的乙醇沉淀12小时～36小时；离心获得醇沉沉淀，干燥得到油茶饼粕多糖。

所述油茶饼粕多糖的分子量为5253—12210。

所述纤维素酶的酶活力>15000u/g。

所述多糖为灰白色多糖。

上述制备方法还可以添加一个步骤：取上述粗油茶饼粕多糖适量，采用DEAE-52柱层析进行分级，分别用0.1mol/L NaCl，0.5mol/L NaCl，0.5mol/LNaOH溶液洗脱，分别收集洗脱液，减压浓缩，流水透析24～36小时，冷冻干燥，获得不同分子量的分级多糖。

下面对本发明做进一步的解释和说明：

α-葡萄糖苷酶抑制实验：

α-葡萄糖苷酶包括位于小肠腔的α-淀粉酶、小肠刷状缘的麦芽糖酶、α-糊精酶和蔗糖酶等。正常人进食后，食物中的碳水化合物如淀粉先经α-淀粉酶作用生成麦芽糖、麦芽三糖、α-糊精等，随后和蔗糖一起通过蔗糖酶等α-糖苷酶水解作用生成葡萄糖、半乳糖和果糖，经肠壁细胞吸收而被机体利用。

糖尿病患者因代谢障碍而导致血糖浓度发生异常改变。预防和治疗这类疾病的有效方法之一是限制或延缓多糖在消化道内分解，为此就必须降低α-葡萄糖苷酶活性。α-葡萄糖苷酶抑制剂通过可逆地占据α-葡萄糖苷酶与糖的络合位点，抑制α-葡萄糖苷酶催化多糖降解为单糖，从而延缓肠道碳水化合物的吸收。与其他口服降糖药及胰岛素治疗相比，α-葡萄糖苷酶抑制剂类药物最显著的特征是能有效阻止糖尿病患者的餐后血糖升高，使患者血糖平稳且缓慢地维持在一定水平，改善血糖稳定指数；由于抑制了α-葡糖糖苷酶对肠道碳水化合物的分解速度，避免了餐后可能发生的血糖过高。另外，α-葡萄糖苷酶抑制剂具有调节脂肪生成、抗ＡＩＤＳ病毒感染等作用。因此，α-葡萄糖苷酶抑制剂成为安全高效的抗糖尿病药物。

本实验以蔗糖为底物，它可以在小肠粘膜α-葡萄糖苷酶催化下分解成D-葡萄糖和D-果糖，用葡萄糖氧化法测量葡萄糖含量来分析药物的抑制酶活性能力。应用α-葡萄糖苷酶抑制剂高通量筛选模型从化合物中筛选降血糖新药。同时将化合物与对照药阿卡波糖进行对比，来探讨化合物的市场开发价值和作为抗糖尿病药物的潜力。本研究将所获得的油茶饼粕多糖进行体外活性测试，发现油茶饼粕多糖有抑制α-葡萄糖苷酶活性的作用。

具体实施方式

实施例1：

（1）油茶饼粕多糖的制备：

称取油茶饼粕粉碎至80目粉末500g，加水10000mL，加纤维素酶（酶活力>15000u/g）1750mg，50℃水浴提取3小时后，双层纱布过滤，得淡黄色提取溶液。所得提取液通过中空纤维膜分离装置浓缩至1500ml，使得溶液中溶质的质量百分含量为6%，通过预装500g聚酰胺的层析柱，充分混合均匀，静置吸附12小时，以柱体积4倍的去离子水进行洗脱。收集所获得的洗脱溶液，减压浓缩至较小体积，加入浓缩液体积5倍的95%乙醇，充分搅拌，静置12小时。离心（4500转/min，10min）。取沉淀后真空冷冻干燥，得灰白色多糖9.0g。

（2）油茶饼粕多糖体外抑制α-葡萄糖苷酶活性的测试：

将实施例1所得油茶饼粕多糖进行抑制α-葡萄糖苷酶活性效果，结果见表1。

表1  油茶饼粕多糖对大鼠小肠粘膜α-葡萄糖苷酶抑制作用

实施例2：

取实施例1中所得多糖3g，通过装有DEAE-52的层析柱（柱高18cm，直径3cm，柱体积85cm)，用0.1mol/L NaCl溶液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，流水透析24～36小时，冷冻干燥。获得相对分子量为8693的分级多糖129mg（命名为CP2）。抑制α-葡萄糖苷酶活性效果，结果见表2。

表2  CP2对大鼠小肠粘膜α-葡萄糖苷酶抑制作用

实施例3：

取实施例1中所得多糖3g，通过装有DEAE-52的层析柱（柱高18cm，直径3cm，柱体积85cm)，在用0.1mol/L NaCl溶液洗脱后，继续用0.5mol/L NaCl溶液洗脱层析柱，收集洗脱液，减压浓缩，流水透析24～36小时，冷冻干燥。获得相对分子量为12210的分级多糖124mg（命名为CP4）。抑制α-葡萄糖苷酶活性效果，结果见表3。

表3  CP4对大鼠小肠粘膜α-葡萄糖苷酶抑制作用

实施例4：

取实施例1中所得多糖3g，通过装有DEAE-52的层析柱（柱高18cm，直径3cm，柱体积85cm)，在分别用0.1mol/L NaCl与0.5mol/L NaCl溶液洗脱后，继续用0.5mol/L NaOH溶液洗脱层析柱，收集洗脱液，减压浓缩，流水透析24～36小时，冷冻干燥。获得相对分子量为5253的分级多糖236mg（命名为CP5）。抑制α-葡萄糖苷酶活性效果，结果见表4。

表4  CP5对大鼠小肠粘膜α-葡萄糖苷酶抑制作用

表5  对照药阿卡波糖对大鼠小肠粘膜α-葡萄糖苷酶抑制作用

Claims (2)

1.油茶饼粕多糖在制备治疗糖尿病药物中的用途，其中所述的油茶饼粕多糖的分子量为5253—12210。

2.根据权利要求要求1所述的用途，其特征在于所述的油茶饼粕多糖是通过下述方法制备的：

（1）将油茶饼粕粉碎至60目～80目的饼粕粉，然后将饼粕粉加入预先溶解有纤维素酶的水溶液中提取；其中饼粕粉与水溶液质量比例为1：20～40，纤维素酶用量为饼粕粉干重量的0.3%～0.4%，提取温度为45℃-55℃，提取时间3小时-5小时；

（2）将提取液过滤，采用中空纤维超滤膜分离装置将滤液浓缩，调整浓缩后的溶液使得溶液中溶质的质量百分含量为3%～10%，聚酰胺柱吸附8小时～12小时，去离子水洗脱；

（3）收集水洗液浓缩，浓缩液加3～5倍体积的乙醇沉淀12小时～36小时；离心获得醇沉沉淀，干燥得到油茶饼粕多糖。