CN102836194B - 一种鼠曲草总黄酮的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种鼠曲草总黄酮的提取方法，属药材加工领域。它是将干燥的鼠曲草粉碎过筛，以水为提取剂，采用纤维素酶提取，过滤，减压浓缩和冷冻干燥，得鼠曲草总黄酮产品。本发明操作简便、快捷、廉价、无毒，是一种绿色生产方法。
Description
技术领域
本发明涉及一种从鼠曲草中提取总黄酮的方法，具体是一种利用纤维素酶提取鼠曲草总黄酮的方法，属于药材加工领域。
背景技术
鼠曲草(Gnaphlium affine D.Don)又名佛耳草、清明菜，系菊科鼠曲草属植物，具有降血脂、降血糖、降血压、抗衰老、消炎抑菌、增强免疫力等多种功效。清明节前后，民间广泛利用鼠曲草嫩尖叶加工饵料，故有“清明菜”之称。有研究表明，鼠曲草中含较多的黄酮类化合物。但是，目前国内外对鼠曲草黄酮类化合物的研究还相当缺乏，而黄酮类化合物对治疗冠心病、老年性痴呆、脑血栓、神经系统疾病和消除自由基、抑菌、抗癌等方面有显著效果，无副作用，并以此开发出多种药品和保健食品。因此，如何高效地和安全地对鼠曲草黄酮类化合物进行提取，也越来越受到国内外学者的重视。
常用的总黄酮提取方法有水煎煮法，热回流提取，超声波辅助提取，微波辅助提取等。但是水煎煮法提取时间很长，一般4～6小时；热回流提取，超声波辅助提取和微波辅助提取总黄酮则需要使用有机溶剂；而酶法提取作为一种优良的提取方法，具有操作简便快捷、提取时间短、转移率高以及无溶剂污染等特点，目前己广泛应用在生物活性物质的提取方面，如山楂叶总黄酮，银杏叶总黄酮，芹菜黄酮等，而应用于鼠曲草总黄酮提取方面至今未见报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种鼠曲草总黄酮的提取方法，即一种利用纤维素酶提取鼠曲草总黄酮的方法。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：将干燥的鼠曲草粉碎过40目筛，水为提取剂，纤维素酶用量是鼠曲草原料质量的0.3％～0.5％，提取剂水的体积与鼠曲草原料质量之比10ml/g～14ml/g，pH值4.0～5.0，酶解温度40℃～50℃，酶解时间50min～70min，得提取液，经检验总黄酮转移率大于90％；将提取液在真空度0.08MPa～0.10MPa和温度5℃～35℃条件下采用中速滤纸过滤，得过滤液；将过滤液在真空度0.08MPa～0.10MPa和温度50℃～60℃条件下浓缩至初始体积的30％为止，得浓缩液；将浓缩液在冷冻干燥机真空度小于20Pa、冷阱温度-45℃～-60℃条件下干燥殆尽，得鼠曲草总黄酮产品，经检验纯度大于3.5％。
由于采用了以上技术方案，本发明具有以下优点：
1、本发明利用纤维素酶提取鼠曲草总黄酮，其主要优点是以水为提取剂，采用纤维素酶提取，与乙醇回流提取、超声波辅助乙醇提取或微波辅助乙醇提取相比，提取时不使用乙醇等有机溶剂，因此本发明操作简便、快捷、廉价、无毒；
2、用本发明方法提取鼠曲草总黄酮，其总黄酮转移率大于90％，鼠曲草总黄酮产品纯度大于3.5％，且重现性好。
具体实施方式
实施例1
干燥的鼠曲草粉碎过40目筛，纤维素酶用量是鼠曲草原料质量的0.40％，提取剂水的体积与鼠曲草原料质量之比12ml/g，pH值4.5，酶解温度45℃和酶解时间60min，此时总黄酮转移率为95.38％；将提取液在真空度0.09MPa和温度25℃条件下采用中速滤纸过滤，得过滤液；将过滤液在真空度0.10MPa和温度60℃条件下浓缩至初始体积的30％为止，得浓缩液；将浓缩液在冷冻干燥机真空度小于20Pa、冷阱温度-50℃条件下干燥殆尽，得鼠曲草总黄酮产品，此产品纯度为3.99％。
实施例2
干燥的鼠曲草粉碎过40目筛，纤维素酶用量是鼠曲草原料质量的0.46％，提取剂水的体积与鼠曲草原料质量之比12ml/g，pH值4.5，酶解温度47℃和酶解时间60min，此时总黄酮转移率为96.92％；将提取液在真空度0.09MPa和温度25℃条件下采用中速滤纸过滤，得过滤液；将过滤液在真空度0.10MPa和温度60℃条件下浓缩至初始体积的30％为止，得浓缩液；将浓缩液在冷冻干燥机真空度小于20Pa、冷阱温度-50℃条件下干燥殆尽，得鼠曲草总黄酮产品，此产品纯度为3.86％。
实施例3
干燥的鼠曲草粉碎过40目筛，纤维素酶用量是鼠曲草原料质量的0.50％，提取剂水的体积与鼠曲草原料质量之比14ml/g，pH值4.8，酶解温度44℃和酶解时间50min，此时总黄酮转移率为91.54％；将提取液在真空度0.09MPa和温度25℃条件下采用中速滤纸过滤，得过滤液；将过滤液在真空度0.10MPa和温度60℃条件下浓缩至初始体积的30％为止，得浓缩液；将浓缩液在冷冻干燥机真空度小于20Pa、冷阱温度-50℃条件下干燥殆尽，得鼠曲草总黄酮产品，此产品纯度为3.78％。
Claims (1)
1.一种鼠曲草总黄酮的提取方法，其特征是以鼠曲草为原料，将干燥的鼠曲草粉碎过40目筛，以水为提取剂，采用纤维素酶提取，纤维素酶用量是鼠曲草原料质量的0.3％～0.5％，提取剂水的体积与鼠曲草原料质量之比10ml／g～14ml／g，pH值4.0～5.0，酶解温度40℃～50℃，酶解时间50min～70min，得提取液；再经过滤，减压浓缩和冷冻干燥，获得鼠曲草总黄酮产品；
所述提取液中总黄酮转移率大于90％；
所述过滤的方法是将提取液在真空度0.08MPa～0.10MPa和温度5℃～35℃条件下采用中速滤纸过滤，得过滤液；
所述减压浓缩的方法是将过滤液在真空度0.08MPa～0.10MPa和温度50℃～60℃条件下浓缩至初始体积的30％为止，得浓缩液；
所述冷冻干燥的方法是将浓缩液在冷冻干燥机真空度小于20Pa、冷阱温度-45℃～-60℃条件下干燥殆尽，得鼠曲草总黄酮产品；
所述鼠曲草总黄酮产品的总黄酮产品纯度大于3.5％。
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