CN104322483A - 一种猪抗病毒长效精液稀释液配方及制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种猪抗病毒长效精液稀释液配方及制备方法，属于猪精液稀释技术领域；该猪精液稀释液的组分为：α-D-吡喃葡萄糖粉、果糖、二水合柠檬酸三钠盐、乙二胺四乙酸二钠、碳酸氢钠、聚乙烯醇、三羧甲基氨基甲烷、肌醇、维生素C、精氨酸、板蓝根注射液、5%头孢噻呋钠注射液、5%利巴韦林注射液，其制备方法是将各组分溶解于蒸馏水中，混合均匀，灭菌即得猪精液稀释液；该配方中含有丰富的营养物质，有抗病毒中西药成分及抗菌成分，可保障精子正常代谢，在保存温度的下限一定长的时间后，能起到营养和防精子休克作用，可避免人工受精过程中外界细菌病毒的侵袭。

Description

一种猪抗病毒长效精液稀释液配方及制备方法

 

技术领域

   本发明涉及一种稀释液，具体涉及一种猪抗病毒长效精液稀释液配方及制备方法，属于猪精液稀释技术领域。

背景技术

随着科学技术的发展，人们的生活水平不断提高，对畜产品的需求也越来越高，需求量也越来越大，传统的受精养殖方法已经不能满足人们的需求，传统的猪自然交配已经满足不了人们日益增长的需求。猪的人工受精液逐渐得到快速的发展。在养猪生产和育种工作中，人工受精在畜牧业生产中正成为一种非常重要的生产途径。猪人工受精与自然交配相比具有以下优势：

1.采用人工受精可以降低生产成本，并节省人力物力。一般如果采用自然交配，25～30头生产母猪就要配置1头公猪。而人工受精体系的1头公猪则可以对应300～500头母猪。在同期发情的生产体系中，更加可以减少公猪饲养的头数。

2.用人工受精有利于进行品种改良。如果采用人工受精，优秀的公猪可以得到最大限度的使用，从而提高良种利用率。

3.人工受精可以克服公母猪之间的体型差异，不用考虑因为公母猪体况不同所造成的交配困难，如太重的公猪与小母猪交配。

4.人工受精便于疾病进行净化，减少生殖道疾病的传播。虽然部分病毒仍然可以通过精液传播，如口蹄疫、非洲猪瘟、猪水泡病、猪伪狂犬病、猪细小病毒病、猪蓝耳病。但人工受精可以在配种前，对精液进行检测；并在引入新的品种或品系时，可以避免疾病的传播。        

5.人工受精可以降低引种风险，并促进联合育种工作的开展。此外，还有研究认为人工受精与自然交配的产仔率和产仔数相当或更高。

但是，人工受精也存在无法回避的缺点：采用人工受精技术需要一定的生产技术水平和管理水平，如果技术不过关，可能会出现子宫炎增多、受胎率低和产仔数少等问题；另外，因为人工受精体系中1头公猪可以影响较多母猪，使得疾病传播的控制更为重要，人为因素对于配种效果起了更大的影响。

国内外的研究人员很早就开始了猪人工受精的研究，俄罗斯的Ivanow在20世纪初就开始将人工受精应用于猪。20世纪30年代后，猪人工受精得到了更广泛的研究。1948年，日本的伊藤、丹羽等首先报道利用新鲜猪精液的实际应用技术。1971年，多位科学家同时报道了猪的冷冻精液技术。1974年，中东部育种联合会（East Central Breeders Association）成立美国第一个猪人工受精的商业化公猪站并提供冷冻精液。中国的猪人工受精技术始于20世纪50年代。20世纪60-70年代，中国开始普及猪人工受精，当时主要使用多次输精管和自制稀释液。20世纪80年代，一些企业开始引入工业化生产的稀释粉和一次性输精管。1998年9月，广东省广州种猪精液中心成立，这是中国首家商业化的公猪站。

随着我国养猪业的不断发展和种猪联合育种工作的需要，猪人工受精技术的迅速普及，不同规模的猪人工受精站已成为我国养猪行业的重要组成部分。猪人工受精站是充分利用优秀种公猪，发挥其种猪优势，达到真正意义上的资源共享。猪人工受精主要是指公猪精液体外保存，是猪人工受精技术的重要环节，而精液稀释是精液保存时的必要步骤，所以稀释剂的好坏是影响猪精液保存时间的主要因素，而公猪精液的保存时间、保存效果是人工受精应用成败的关键因素。因此，开发出使用方便、保存精液时间长且效果好、成本低的猪精液稀释产品，对人工受精技术而言有重要意义。

市场上常见的精液稀释剂为粉末状的产品，组成成分包括有营养剂、稀释剂、缓冲剂、pH调节剂和抗生素等，主要成分有：葡萄糖、柠檬酸三钠、氨基乙酸、青霉素和链霉素等，使用方法为现用现配，稀释倍数视精子密度而定，一般是做1－3倍稀释。但由于受到环境因素、稀释液与精液混合时的温度等影响，稀释前后活率差异比较大，稀释后的精液对光线、高温、水、化学药品、异味、烟雾及振荡非常敏感，而且必须用去离子水或蒸馏水来配稀释液，自来水可能含有化学物质、矿物质和细菌，会对精子造成损害。如果稀释液当天没有用完，必须密封好后储存在5-8℃冰箱里面，第二天方能使用。

中国发明“即开即用型猪精液稀释液”，申请号200510007376.6；中国发明“一种猪精液常温保存的稀释液及其制备方法”，申请号201310207757.3，该种稀释液需现用现配，应用效果不一，成本过高。中国发明“一种猪精液稀释粉及其制备方法”，申请号200910012673.8；中国发明“猪精液稀释和常温保存用粉及其制备方法和应用”，申请号200910038350.6；中国专利“冷水速溶型猪精液稀释粉配方及制作工艺和使用方法”，申请号201110076201.6；中国专利“一种长效猪精液稀释粉及其制备方法”，申请号201210238501.4；这些稀释剂都是粉状的，稀释过程易受外界因素干扰，稀释前后活率差异比较大，对猪的受孕有比较大的影响。而且使用前必须用蒸馏水稀释，使用较不方便。

发明内容

本发明的目的是提供一种猪抗病毒长效精液稀释液配方，本发明成本低廉，保存时间长，而且能阻断通过精液传播的病毒性疾病：如口蹄疫、非洲猪瘟、猪水泡病、猪伪狂犬病、猪细小病毒病、猪蓝耳病等。

为实现上述发明的目的，本发明采取的技术方案如下：

一种猪抗病毒长效精液稀释液配方，包括如下重量份的组分：

α-D-吡喃葡萄糖粉10~30克、果糖5~15克，二水合柠檬酸三钠盐10~20克、乙二胺四乙酸二钠2~3g、碳酸氢钠2~3克、聚乙烯醇0.5~2克、三羧甲基氨基甲烷4~6克、肌醇0.05~0.15克、维生素C0.05~0.15克、精氨酸0.05~0.15克、板蓝根注射液0.01~0.02ml、5%利巴韦林注射液0.01~0.02ml、5%头孢噻呋钠注射液0.01~0.02ml，用蒸馏水定容到1000ml。

一种猪抗病毒长效精液稀释液配方，最优重量份的组分为：

α-D-吡喃葡萄糖 15克，果糖 10克，二水合柠檬酸三钠盐 15克，乙二胺四乙酸二钠 2.5克，碳酸氢钠2.5克，聚乙烯醇1克，三羧甲基氨基甲烷5克，肌醇 0.1克，维生素C 0.1克，精氨酸 0.1克，板蓝根注射液 0.015ml，5%头孢噻呋钠注射液 0.015ml，5%利巴韦林注射液0.015ml，用蒸馏水定容到1000ml。

以上原料采用分析纯级别，板蓝根注射液、5%利巴韦林注射液、5%头孢噻呋钠注射液采用市售正规厂家生产的产品即可。

本发明的另一个目的，是提供一种猪抗病毒长效精液稀释液的制备方法，包括如下步骤：

（1）分别称取α-D-吡喃葡萄糖粉、果糖，二水合柠檬酸三钠盐、乙二胺四乙酸二钠、碳酸氢钠、三羧甲基氨基甲烷、肌醇、维生素C、精氨酸溶于600ml蒸馏水中；

（2）在加热电磁搅拌器上将聚乙烯乙醇溶解于150ml 30~50℃的蒸馏水中，搅拌20~40分钟；

（3）将步骤（1）和（2）所得溶液溶液混合均匀；

（4）在混合液中加入的板蓝根注射液、5%利巴韦林注射液和5%头孢噻呋钠注射液，然后加蒸馏水定容至1000ml；

（5）将定溶后的溶液置于110~120℃流通蒸汽，灭菌15~25分钟，即得到猪长效抗病毒精液稀释液。所有步骤均在净化车间进行，净化车间的洁净度要求为30万级。

各组分的药物功效及药理如下：

    α-D-吡喃葡萄糖、果糖：供应精子的营养物质；

    二水合柠檬酸三钠盐：缓冲剂，调节渗透压；

    乙二胺四乙酸二钠：络合金属离子，稳定剂；

    碳酸氢钠：调节pH值；

    聚乙烯醇：一种极安全的高分子有机物，常用的安全性成膜剂，精子保护剂；

    三羧甲基氨基甲烷：能调节稀释液的PH值，保持精子的运动性，不丧失受精能力，又对精子有保护作用；

    维生素C：降低精液液化时间，改善精子活动度，抗氧化功能；

    肌醇、精氨酸：保护精子，提供营养物质；

    板蓝根：抗病毒中药，阻断精液传播的病毒微生物；

    利巴韦林：是广谱强效的抗病毒药物，广泛应用于病毒性疾病的防治，阻断精液传播的病毒微生物和预防人工受精过程中的微生物污染；

    头孢噻呋钠：广谱抗菌剂，杀灭精液中的细菌和人工受精中的外在污染。

本发明的有益效果是：

使用精液稀释液的益处是：可以扩大精液容量，经稀释后一次的精液可受精15-50头母猪；可以提供精子营养，减少精子内源物质消耗；可以使精子休眠，延长存活时间和受精能力；还可以抑制精液中有害微生物活动和增殖；也便于精子保存和运输。

采用本发明制作的猪精液稀释液具有以下特性：

1、精子活力强：含有从植物中提取的抗氧化活性成分，能有效保持精子活力，提高母猪的受胎率，精液17℃恒温保存5-7天；

2、抗菌和抗病毒：含有抗菌和抗病毒成分，能有效防止细菌和病毒污染，阻断病源微生物通过人工受精感染的风险，提高繁殖母猪健康率；

3、操作简单易行：稀释液经预温后直接用于精液稀释，省去蒸馏水制作、原料配制、高温灭菌等诸多人工操作步骤。能够提高经济效益，推动我国养猪业的进一步发展。

具体实施方式

下面通过实例对本发明做进一步详细说明，这些实例仅用来说明本发明，并不限制本发明的范围；

实施例所用原料采用分析纯级别，板蓝根注射液、5%利巴韦林注射液、5%头孢噻呋钠注射液采用市售正规厂家生产的产品；所有步骤均在净化车间进行，净化车间的洁净度要求为30万级。

实施例1 

一种猪抗病毒长效精液稀释液配方，各组分的重量份为：

α-D-吡喃葡萄糖 15克，果糖 10克，二水合柠檬酸三钠盐 15克，乙二胺四乙酸二钠 2.5克，碳酸氢钠2.5克，聚乙烯醇1克，三羧甲基氨基甲烷5克，肌醇 0.1克，维生素C 0.1克，精氨酸 0.1克，板蓝根注射液 0.015ml，5%头孢噻呋钠注射液 0.015ml，5%利巴韦林注射液0.015ml。

其制作工艺，包括如下步骤：

（1）按比例分别称取α-D-吡喃葡萄糖粉、果糖，二水合柠檬酸三钠盐、乙二胺四乙酸二钠、碳酸氢钠、三羧甲基氨基甲烷、肌醇、维生素C、精氨酸溶于600ml蒸馏水中；

（2）在加热电磁搅拌器上将聚乙烯乙醇溶解于150ml 的30℃的蒸馏水中，搅拌40分钟；与步骤（1）的溶液混合均匀；

（3）在混合液中加入一定比例的板蓝根注射液、利巴韦林注射液和头孢噻呋钠注射液，然后加蒸馏水定容至1000ml；

（4）将定溶后的溶液置于110℃流通蒸汽，灭菌25分钟，即得到猪长效抗病毒精液稀释液。

实施例2 

一种猪抗病毒长效精液稀释液配方，包括如下重量份的组分：

α-D-吡喃葡萄糖粉10克、果糖15克，二水合柠檬酸三钠盐10克、乙二胺四乙酸二钠3g、碳酸氢钠2克、聚乙烯醇2克、三羧甲基氨基甲烷4克、肌醇0.15克、维生素C0.05克、精氨酸0.15克、板蓝根注射液0.01ml、5%利巴韦林注射液0.02ml、5%头孢噻呋钠注射液0.01ml。

其制作工艺，包括如下步骤：

（1）按比例分别称取α-D-吡喃葡萄糖粉、果糖，二水合柠檬酸三钠盐、乙二胺四乙酸二钠、碳酸氢钠、三羧甲基氨基甲烷、肌醇、维生素C、精氨酸溶于600ml蒸馏水中；

（2）在加热电磁搅拌器上将聚乙烯乙醇溶解于150ml 的40℃的蒸馏水中，搅拌30分钟；与步骤（1）的溶液混合均匀；

（3）在混合液中加入一定比例的板蓝根注射液、利巴韦林注射液和头孢噻呋钠注射液，然后加蒸馏水定容至1000ml；

（4）将定溶后的溶液置于115℃流通蒸汽，灭菌20分钟，即得到猪长效抗病毒精液稀释液。

实施例3 

一种猪抗病毒长效精液稀释液配方，包括如下重量份的组分：

α-D-吡喃葡萄糖粉30克、果糖5克，二水合柠檬酸三钠盐20克、乙二胺四乙酸二钠2g、碳酸氢钠3克、聚乙烯醇0.5克、三羧甲基氨基甲烷6克、肌醇0.05克、维生素C0.15克、精氨酸0.05克、板蓝根注射液0.02ml、5%利巴韦林注射液0.01ml、5%头孢噻呋钠注射液0.02ml。

其制作工艺，包括如下步骤：

（1）按比例分别称取α-D-吡喃葡萄糖粉、果糖，二水合柠檬酸三钠盐、乙二胺四乙酸二钠、碳酸氢钠、三羧甲基氨基甲烷、肌醇、维生素C、精氨酸溶于600ml蒸馏水中；

（2）在加热电磁搅拌器上将聚乙烯乙醇溶解于150ml 的50℃的蒸馏水中，搅拌20分钟；

与步骤（1）的溶液混合均匀；

（3）在混合液中加入一定比例的板蓝根注射液、利巴韦林注射液和头孢噻呋钠注射液，然后加蒸馏水定容至1000ml；

（4）将定溶后的溶液置于120℃流通蒸汽，灭菌15分钟，即得到猪长效抗病毒精液稀释液。

用本发明保存猪精液的试验结果如下：

试验一：

   本稀释液对精子保存活力时间的影响试验

取猪精液按1:1的比例稀释后再按照1:5的要求稀释，并于17℃恒温冰箱保存，每隔24小时观察一次精子活力（150倍显微镜下观察），记录活力变化情况，结果见表（一）：

                                                          表 一

由表一可以看出，保存168小时（7天）后精子活力仍在0.7以上，表明该稀释液对猪精液保存的效果很好。

试验二：本稀释液稀释精液配种后对猪受胎率、产仔数影响：

    把试验分为3组，每组猪精液用不同的稀释液稀释，每组猪精液稀释后，分别在第6、12、24、36、48h进行人工受精配种，输精量为30ml/次，输精次数2次/头，每次配种母猪30头/组，观察不同稀释液的配种受胎率和产仔数，见表（二）、（三）：

表 二

 表 三

配种方式	配种数（头）	受胎数（头）	受胎率（％）	总产仔数	窝均产仔数 （头）	断奶健康窝仔猪数（头）
							本发明稀释液	30	28	93.3	342	12.2	11.11
对照稀释液	30	24	80.0	218	9.1	8.85
							自然交配	30	25	83.3	232	9.3	8.93

由表（三）可以看出，本稀释液稀释的精液配种后对猪的受胎率、产仔数、断奶健康窝仔猪数明显高于对照稀释粉和自然交配组。

Claims (7)

1.一种猪抗病毒长效精液稀释液配方，其特征在于：包括如下重量份的组分：

α-D-吡喃葡萄糖粉10~30克、果糖5~15克，二水合柠檬酸三钠盐10~20克、乙二胺四乙酸二钠2~3g、碳酸氢钠2~3克、聚乙烯醇0.5~2克、三羧甲基氨基甲烷4~6克、肌醇0.05~0.15克、维生素C 0.05~0.15克、精氨酸0.05~0.15克、板蓝根注射液0.01~0.02ml、5%利巴韦林注射液0.01~0.02ml、5%头孢噻呋钠注射液0.01~0.02ml，用蒸馏水定容到1000ml。

2.一种猪抗病毒长效精液稀释液配方，其特征在于：包括如下重量份的组分：

α-D-吡喃葡萄糖 15克，果糖 10克，二水合柠檬酸三钠盐 15克，乙二胺四乙酸二钠 2.5克，碳酸氢钠2.5克，聚乙烯醇1克，三羧甲基氨基甲烷5克，肌醇 0.1克，维生素C 0.1克，精氨酸 0.1克，板蓝根注射液 0.015ml，5%头孢噻呋钠注射液 0.015ml，5%利巴韦林注射液0.015ml，用蒸馏水定容到1000ml。

3.根据权利要求1或2所述的一种猪抗病毒长效精液稀释液配方，其特征在于：所述原料采用分析纯级别，板蓝根注射液、5%利巴韦林注射液、5%头孢噻呋钠注射液采用市售正规厂家生产的产品。

4.根据权利要求1或2所述的一种猪抗病毒长效精液稀释液配方，其特征在于：上述原料用蒸馏水溶解定容至1000ml。

5.一种猪抗病毒长效精液稀释液的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）分别称取α-D-吡喃葡萄糖粉、果糖，二水合柠檬酸三钠盐、乙二胺四乙酸二钠、碳酸氢钠、三羧甲基氨基甲烷、肌醇、维生素C、精氨酸溶于600ml蒸馏水中；

（2）在加热电磁搅拌器上将聚乙烯乙醇溶解于150ml 30~50℃的蒸馏水中，搅拌20~40分钟；

（3）将步骤（1）和（2）所得溶液溶液混合均匀；

（4）在混合液中加入的板蓝根注射液、5%利巴韦林注射液和5%头孢噻呋钠注射液，然后加蒸馏水定容至1000ml；

（5）将定溶后的溶液置于110~120℃流通蒸汽，灭菌15~25分钟，即得到猪长效抗病毒精液稀释液。

6.根据权利要求5所述的一种猪抗病毒长效精液稀释液的制备方法，其特征在于：所有步骤均在净化车间进行，净化车间的洁净度要求为30万级。

7.根据权利要求1或所述的一种猪抗病毒长效精液稀释液配方，其特征在于：所述的猪精液稀释液，是透明液体状产品。