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BR112017014343B1 - Método para preparação de uma composição compreendendo quitina e proteínas digeríveis e uso da mesma para nutrição humana ou de animais - Google Patents

Método para preparação de uma composição compreendendo quitina e proteínas digeríveis e uso da mesma para nutrição humana ou de animais Download PDF

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BR112017014343B1
BR112017014343B1 BR112017014343-7A BR112017014343A BR112017014343B1 BR 112017014343 B1 BR112017014343 B1 BR 112017014343B1 BR 112017014343 A BR112017014343 A BR 112017014343A BR 112017014343 B1 BR112017014343 B1 BR 112017014343B1
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Nathalie Berezina
Sophie Laurent
Antoine Hubert
Cecilia Socolsky
Lorena Sanchez
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Abstract

A presente invenção se refere a uma composição contendo pelo menos 67% em peso de proteínas brutas, pelo menos 5% em peso de quitina, as percentagens em peso se referindo ao peso total da composição e 85% em peso de proteína digerível em relação ao peso total da proteína bruta. A invenção também é dirigida a um método para preparar a composição e aos usos da mesma, em particular em nutrição humana e de animais.

Description

[001] A presente invenção refere-se a uma composição compreendendo proteínas e quitina. Refere-se também a um método para a preparação dessa composição e uso da mesma na nutrição de seres humanos ou animais, e mais particularmente em ração de peixe.
[002] Aquicultura é agora um dos setores mais dinâmicos na indústria alimentícia. A alta demanda por peixe resultou em um aumento significativo no preço de ração destinada à criação de peixes.
[003] Um dos produtos mais usados na ração de peixe é farinha de peixe. Na realidade, farinha de peixe é uma das principais fontes de proteínas em rações de aquicultura. É uma farinha que é muito rica em proteínas animais (rica em aminoácidos dos tipos de lisina e metionina) que são de fácil digestão. Uma demanda crescente acompanhada por um fornecimento limitado resultou em um aumento significativo em seu preço, criando um risco para o crescimento sustentável de aquicultura. Desse modo, há uma alta demanda por fontes alternativas de proteínas de alta qualidade e, até onde possível renováveis para rações de aquicultura.
[004] Farinhas de insetos oferecem fontes de proteína de substituição natural e a possibilidade de serem produzidas em massa com uma pegada ecológica mínima. Em particular, certos insetos como Tenebrio molitor, têm o benefício de serem adequados para produção de massa intensiva.
[005] Entretanto, os resultados de testes substituindo várias farinhas de insetos por farinha de peixe provam ser misturados. No caso onde a substituição prova ser possível, em geral não excedem 50%, efeitos prejudiciais ao crescimento do peixe sendo observados além desse teor.
[006] O trabalho dos inventores tornou possível demonstrar que uma composição específica pode ser vantajosamente usada para substituir uma farinha de peixe em ração de aquicultura.
[007] A presente invenção refere-se, portanto, a uma composição compreendendo pelo menos 67% em peso de proteínas brutas, pelo menos 5% em peso de quitina, as percentagens em peso sendo dadas em relação ao peso total da composição e 85% em peso de proteínas digeríeis em relação ao peso total de proteínas brutas.
[008] Será observado que no contexto do presente pedido, e a menos que de outro modo estipulado, as faixas de valores indicadas são entendidas como sendo inclusivas.
[009] A quantificação de “proteínas brutas” é bem conhecida por uma pessoa versada na técnica. Como exemplo, o método Dumas ou o método Kjeldahl pode ser mencionado. Preferivelmente, o método Dumas, correspondendo ao padrão NF EN ISO 16634-1 (2008) é usado.
[010] Do início ao fim do pedido quando nenhuma data é especificada para uma regulação, um padrão ou uma diretiva, refere-se à regulação, padrão ou diretiva em vigor na data do depósito.
[011] Preferivelmente, a composição compreende 68% em peso de proteínas brutas, mais preferivelmente 70% em peso de proteínas brutas, as percentagens em peso sendo dadas em relação ao peso total da composição.
[012] Por “proteínas digeríveis”, quer se dizer as proteínas digeríveis determinadas por digestibilidade de pepsina. A quantificação das proteínas digeríveis será preferivelmente realizada pelo método descrito na Diretiva 72/199/EC.
[013] Preferivelmente, a composição compreende 86%, mais preferivelmente 88% em peso de proteínas digeríveis em relação ao peso total de proteínas brutas.
[014] De acordo com a invenção, por “quitina” quer se dizer qualquer tipo de derivado de quitina, isto é, qualquer tipo de derivado de polissacarídeo compreendendo unidades de N-acetil-glicosamina e unidades de D-glicosamina, em particular os copolímeros de polipeptídio-quitina (às vezes mencionados como “compósito de quitina-polipeptídio”). Esses copolímeros também podem ser combinados com pigmentos, frequentemente do tipo melanina.
[015] Quitina seria o segundo polímero mais sintetizado no mundo vivo após celulose. Na realidade, quitina é sintetizada por inúmeras espécies do mundo vivo: constitui parte do exoesqueleto de crustáceos e insetos e a parede lateral que circunda e protege fungos. Mais particularmente, em insetos, quitina constitui desse modo, 3 a 60% de seu exoesqueleto.
[016] O teor de quitina é determinado por extração do mesmo. Tal método pode ser o método AOAC 991 43 descrito no Exemplo 2, e é um método preferido para essa determinação.
[017] Preferivelmente, a composição compreende entre 5 e 16% em peso de quitina, mais preferivelmente entre 8 e 14% de quitina, as percentagens em peso sendo dadas em relação ao peso total da composição.
[018] As composições da técnica anterior capazes de conter tanto proteínas como quitina são em geral composições obtidas de insetos e/ou crustáceos. Entretanto, os teores elevados de proteína bruta e proteína digerível na composição de acordo com a invenção podem ser obtidos somente por um método de processamento de inseto e/ou crustáceo, compreendendo uma etapa de hidrólise. Uma etapa de hidrólise tem o efeito de reduzir o teor de quitina a um nível da ordem de 5% em peso, como menos de 5% em peso, em relação ao peso total da composição.
[019] Agora, quitina é frequentemente considerada como um tipo de fator anti-nutricional porque é de difícil digestão. Isso explica por que aplicações no setor agro-alimentar, composições à base de insetos têm a quitina retirada, isto é, uma etapa de remover a quitina é realizada. O trabalho dos inventores também tornou possível demonstrar que, contrário às idéias recebidas, quitina não teve impacto sobre o crescimento de peixes alimentados com uma composição de acordo com a invenção, compreendendo um teor significativo de quitina (vide o Exemplo 4 abaixo). Ao contrário, a composição de acordo com a invenção pode vantajosamente substituir não somente parte, mas também toda farinha de peixe em uma ração de aquicultura. Na realidade, a composição de acordo com a invenção torna possível melhorar o crescimento de animais alimentados com essa composição.
[020] Além disso, durante o processo de fabricação de ração, a introdução da composição de acordo com a invenção também tem certas vantagens, reduzindo perdas de vitaminas solúveis em água durante tratamentos de calor opcionais e reduzindo a energia necessária durante uma etapa de extrusão opcional.
[021] Preferivelmente, a composição de acordo com a invenção tem um teor de umidade residual compreendido entre 2 e 15%, preferivelmente entre 5 e 10%, mais preferivelmente entre 6 e 8%. Esse teor de umidade pode, por exemplo, ser determinado de acordo com o método originando da Regulação EC 152/2009 de 2701-2009 (103°C/ 4 h).
[022] Vantajosamente, a composição de acordo com a invenção tem um teor de cinza menor ou igual a 4% em peso em relação ao peso total da composição e ainda mais vantajosamente, menor ou igual a 3,5%.
[023] Cinza constitui o resíduo resultando da combustão da composição de acordo com a invenção.
[024] O método para determinar o teor de cinza é bem conhecido por uma pessoa versada na técnica. Preferivelmente, o teor de cinza foi determinado de acordo com o método disposto por regulação EC 152/2009 de 27-01-2009.
[025] O teor de gordura da composição de acordo com a invenção é preferivelmente compreendido entre 5 e 20% em peso em relação ao peso total da composição, mais preferivelmente 9 e 17%.
[026] Os métodos para determinar o teor de gordura são bem conhecidos por uma pessoa versada na técnica. Como exemplo e no modo preferido, esse teor será determinado de acordo com o método da regulação EC 152/2009.
[027] Como indicado acima, a composição de acordo com a invenção pode ser obtida de insetos.
[028] Por “obtido” de insetos, quer se dizer mais particularmente uma composição obtida unicamente de insetos e opcionalmente água. A composição resulta de um tratamento de calor, mecânico para a exclusão de qualquer tratamento químico (diferente de água) dos insetos.
[029] Mais particularmente, a composição é uma farinha de inseto. Por “farinha de inseto” quer se dizer um pó tendo um tamanho de partícula aceitável para nutrição humana ou animal. Por “tamanho de partícula aceitável para nutrição humana ou animal”, quer se dizer um tamanho de partícula compreendido entre 100 μm e 1.5 mm, preferivelmente compreendido entre 300 μm e 1 mm, mais preferivelmente entre 500 e 800 μm.
[030] Os insetos preferidos para a preparação de tal farinha são, por exemplo, Besouros (Coleóptera), díptera, lepidóptera, isoptera, ortóptera, himenóptera, blatoptera, hemíptera, heteroptera, efemeroptera e mecoptera, preferivelmente, besouros, díptera, ortóptera, lepidóptera ou misturas dos mesmos.
[031] Preferivelmente, os insetos são selecionados do grupo constituído por Tenebrio molitor, Hermetia illucens, Galleria mellonella, Alphitobius diaperinus, Zophobas morio, Blattera fusca, Tribolium castaneum, Rhynchophorus ferrugineus, Musca domestica, Chrysomya megacephala, Locusta migratoria, Schistocerca gregaria, Acheta domesticus, Samia ricini ou misturas dos mesmos, e ainda mais preferivelmente Tenebrio molitor.
[032] Vantajosamente, a composição de acordo com a invenção compreende entre 35 e 65% em peso de proteínas solúveis em relação ao peso total de proteínas brutas, e pelo menos 50% das proteínas solúveis têm um tamanho menor ou igual a 12.400 g/mol.
[033] Por “proteínas solúveis” quer se dizer entre as proteínas brutas, aquelas que são solúveis em uma solução aquosa cujo pH é compreendido entre 6 e 8, vantajosamente entre 7.2 e 7.6.
[034] Preferivelmente, a solução aquosa é uma solução de tampão cujo pH é compreendido entre 6 e 8, vantajosamente entre 7.2 e 7.6. Preferivelmente, a solução de tampão é uma solução de tampão de fosfato de NaCl, cujo pH é igual a 7.4 +/- 0.2.
[035] A digestibilidade de proteínas em seres humanos e animais é muito determinada pelo tamanho das proteínas. Na nutrição de animais, é comum reduzir o tamanho das proteínas para facilitar a digestão pelos animais. Essa redução no tamanho das proteínas é em geral realizada por processos de hidrólise (por exemplo, enzimático), cuja implementação é particularmente cara.
[036] A composição de acordo com a invenção, obtida por um processo não envolvendo hidrólise, compreende uma grande quantidade de proteínas solúveis cujo tamanho é suficientemente reduzido para facilitar digestão por animais. A composição de acordo com a invenção tem também a vantagem de ser capaz de ser preparado em um custo mais baixo.
[037] Vantajosamente, a composição de acordo com a invenção compreende entre 30 e 60% em peso, preferivelmente entre 35 e 55% em peso de proteínas solúveis em relação ao peso total de proteínas brutas.
[038] Preferivelmente, pelo menos 60%, preferivelmente pelo menos 70% das proteínas solúveis têm um tamanho menor ou igual a 12.400 g/mol.
[039] mais particularmente, as proteínas solúveis têm um tamanho compreendido entre 6.500 e 12.400 g/mol.
[040] vantajosamente, menos de 10%, preferivelmente menos de 8%, mais preferivelmente menos de 5%, e ainda mais preferivelmente 6% das proteínas solúveis têm um tamanho maior ou igual a 66.000 g/mol.
[041] Tal distribuição das proteínas solúveis é demonstrada no Exemplo 6.
[042] A invenção também revela um método para a preparação de uma composição de acordo com a invenção.
[043] O método para a preparação de uma composição de acordo com a invenção compreende uma etapa de comprimir insetos.
[044] O objetivo da compressão é retirar o óleo dos insetos e desse modo obter uma massa de compressão tendo um teor de óleo (ou gordura) menor ou igual a 20% em peso em relação ao peso seco de massa de compressão, preferivelmente menor ou igual a 17%.
[045] A etapa de compressão é descrita mais completamente na etapa 2 do método de preparação detalhada a seguir.
[046] Em particular, é possível realizar compressão quente ou fria. Preferivelmente, uma prensa de parafuso único é usada.
[047] Mais particularmente, o método de preparação de acordo com a invenção compreende as seguintes etapas: I) matar os insetos; II) comprimir os insetos para obter uma massa de compressão, e III) triturar a massa de compressão.
[048] Os insetos podem ser mortos por escaldamento ou branqueamento, como descrito mais completamente a seguir na etapa 1 do método detalhado.
[049] Similarmente, a trituração é descrita mais completamente na etapa 4 do método detalhado.
[050] Finalmente, o método de preparação de acordo com a invenção também pode compreender uma etapa de secar a massa de compressão.
[051] A etapa de secagem é vantajosamente realizada após a etapa de compressão e antes da etapa de trituração.
[052] A secagem é descrita mais completamente na etapa 3 do método detalhado.
Método detalhado para a preparação de uma composição de acordo com a invenção . Etapa 1: matar os insetos
[053] Essa etapa de matar 1 pode ser vantajosamente realizada por escaldamento ou por branqueamento. Essa etapa 1 torna possível matar os insetos enquanto reduz a carga microbiana (reduzindo o risco de deterioração e risco à saúde) e por inativar as enzimas internas dos insetos que podem desencadear autólise, e desse modo um escurecimento rápido das mesmas.
[054] Para escaldamento, os insetos, preferivelmente larvas, são desse modo escaldados com água por 2 a 20 min., preferivelmente 5 a 15 min. Preferivelmente, a água está em uma temperatura compreendida entre 95 a 105°C, preferivelmente 100°C.
[055] A quantidade de água introduzida durante o escaldamento é determinada como a seguir: a razão do volume de água em mL para o peso em g de inseto é preferivelmente compreendida entre 0,3 e 10, mais preferivelmente entre 0,5 e 5, ainda mais preferivelmente entre 0,7 e 3, ainda mais preferivelmente da ordem de 1.
[056] Para branqueamento, os insetos, preferivelmente larvas, são branqueados com vapor (leito ou bocais de vapor) em uma temperatura compreendida entre 80 e 130°C, preferivelmente entre 90 e 120°C, mais preferivelmente entre 95 e 105°C, preferivelmente 98°C ou com água em uma temperatura compreendida entre 95 e 105°C, preferivelmente 100°C (por bocais de pulverização) ou em modo misturado (água + vapor) em uma temperatura compreendida entre 80 e 130°C, preferivelmente entre 90 e 120°C, mais preferivelmente entre 95 e 105°C, preferivelmente 98°C. O tempo de permanência na câmara de branqueamento é compreendido entre 1 e 15 minutos, preferivelmente entre 3 e 7 min.
. Etapa (opcional): trituração
[057] Os insetos são removidos do tanque de escaldamento ou câmara de branqueamento, são então peneirados (ou drenados) e colocados em um triturador, como um moinho granulador, tornando possível reduzir os insetos a partículas.
[058] Para facilitar a trituração, uma quantidade de água pode ser adicionada. Essa quantidade de água é similar àquela introduzida durante a etapa 1 de escaldamento: a razão do volume de água em mL para o peso em g de inseto é preferivelmente compreendida entre 0,3 e 10, mais preferivelmente entre 0,5 e 5, ainda mais preferivelmente entre 0,7 e 3, ainda mais preferivelmente da ordem de 1. Também é possível manter a água de escaldamento e/ou a água resultante do branqueamento para realizar essa etapa.
[059] Preferivelmente, no término da trituração, o tamanho das partículas de insetos é menor que 1 cm (tamanho de partícula maior observável usando um microscópio), preferivelmente menor que 0,5 cm. Preferivelmente, o tamanho das partículas é compreendido entre 300 μm e 3 mm, mais preferivelmente entre 500 μm e 1 mm. Não é necessário reduzir excessivamente o tamanho das partículas, por exemplo, a um tamanho menor que 250 μm.
. Etapa 2: Compressão
[060] Os insetos originando da etapa 1 de morte, ou a pasta úmida originado da etapa de trituração opcional são então colocados em uma compressão de acordo com um procedimento que torna possível comprimir e separar um suco compreendendo tanto uma fração de gordura como uma fração de proteína.
[061] Preferivelmente, a etapa de compressão torna possível obter uma massa de compressão compreendendo um teor de óleo menor ou igual a 20% em peso em relação ao peso seco da massa de compressão, preferivelmente, menor ou igual a 17%, mais preferivelmente menor ou igual a 15%.
[062] Similarmente, a etapa de compressão torna possível obter uma massa de compressão tendo um teor de matéria seca compreendido entre 30% e 60%, preferivelmente compreendido entre 40% e 55%, e mais preferivelmente compreendido entre 45% e 55%.
[063] Qualquer sistema de compressão pode ser usado para realizar a etapa de compressão, como, por exemplo, uma prensa de parafuso único ou parafuso duplo (prensa de parafuso duplo do tipo Angel), uma prensa de filtro (prensa de filtro do tipo Choquenet), uma prensa, etc. Esses sistemas são bem conhecidos por uma pessoa versada na técnica que é capaz de determinar as condições de compressão para obter os teores de óleo e/ou água mencionados acima.
[064] Em particular, é possível realizar compressão quente ou fria. Vantajosamente, a compressão será realizada quente, o que torna possível aumentar a retirada de óleo da massa de compressão. Em particular, a compressão quente torna possível obter uma massa de compressão compreendendo um teor de óleo menor ou igual a 17% em peso em relação ao peso seco de massa de compressão, preferivelmente menor ou igual a 15%.
. Etapa 3: secagem
[065] A massa de compressão é então seca pelas tecnologias padrão conhecidas por uma pessoa versada na técnica. A secagem pode ser direta ou indireta (secador de camada fina, “secador com pá”, “secador tubular”, “secador de disco”, etc.) em uma temperatura compreendida entre 60°C e 200°C., por uma duração de 15 min. a 24 horas. Como exemplo, a massa de compressão pode ser disposta e seca em ar ventilado/agitado em uma temperatura compreendida entre 80 e 100°C, preferivelmente a 90°C por uma duração compreendida entre 3 e 7 horas, preferivelmente 5 horas.
[066] O objetivo dessa etapa de secagem é obter uma massa de compressão tendo um teor de umidade compreendido entre 2 e 15%, preferivelmente entre 5 e 10%, ainda mais preferivelmente entre 4 e 8%.
. Etapa 4: trituração final
[067] A massa de compressão seca é então colocada em um triturador, como um moinho de martelos, tornando possível reduzir a massa de compressão em partículas.
[068] Vantajosamente, no término dessa trituração final, o tamanho das partículas de inseto é menor que 0,5 cm (tamanho de partícula maior observável usando um microscópio), preferivelmente da ordem de 1 mm. Mais particularmente, o tamanho de partícula é compreendido entre 300 μm e 1 mm, ainda mais preferivelmente entre 500 e 800 μm.
[069] A sucessão dessas quatro etapas torna possível obter uma composição de acordo com a invenção, compreendendo um alto nível de proteínas brutas e proteínas digeríveis enquanto mantém um teor de quitina da ordem de pelo menos 5% em peso em relação ao peso total da composição.
[070] Como indicado acima, a etapa de compressão pode ser realizada fria ou quente.
[071] Como exemplo de um método para obter uma composição de acordo com a invenção, envolvendo compressão fria:
[072] Larvas, por exemplo, de T. molitor, são introduzidas em um béquer contendo 200 mL de água levada à fervura anteriormente, e mortas por escaldamento em um banho de água a 100°C. Após 5 minutos, o béquer é removido do banho de água, as larvas são drenadas, então misturadas com um volume de água de 200 mL. O líquido desse modo obtido é passado para dentro de uma prensa do tipo parafuso duplo. A massa de compressão desse modo obtida é seca por 24 horas em um forno a 70°C, a seguir triturada até 250 μm.
[073] Como exemplo de um método para obter uma composição de acordo com a invenção, envolvendo compressão quente:
[074] Larvas, por exemplo, de T. molitor, são introduzidas em uma câmara de branqueamento e branqueadas em vapor por 5 min. a 100°C. As larvas desse modo branqueadas são então introduzidas em uma prensa do “tipo secagem” adequada para produtos carregados de água. A massa de compressão desse modo obtida é seca por 5 horas em um forno a 90°C, a seguir triturada em um moinho de martelos até 1 mm.
[075] Preferivelmente, o método para a preparação de uma composição de acordo com a invenção compreende as seguintes etapas: IV) matar os insetos, V) ) comprimir os insetos para obter uma massa de compressão, VI) ) secar a massa de compressão e Iv) triturar a massa de compressão.
[076] De acordo com uma primeira modalidade do método de acordo com a invenção, a etapa de compressão é precedida por uma etapa de trituração dos insetos.
[077] A invenção se refere desse modo a um método para a preparação de uma composição de acordo com a invenção compreendendo as seguintes etapas: i)Matar os insetos, ii)Comprimir os insetos para obter uma massa de compressão, iii)Secar a massa de compressão, e iv)Triturar a massa de compressão,
[078] Na qual a etapa de compressão é precedida por uma etapa de triturar os insetos.
[079] Uma vantagem da etapa de trituração dos insetos antes da compressão é descrita mais totalmente no exemplo 5.
[080] De acordo com uma segunda modalidade do método de acordo com a invenção, a etapa de compressão dos insetos é realizada quente.
[081] A invenção se refere desse modo a um método para a preparação de uma composição de acordo com a invenção compreendendo as seguintes etapas: i)Matar os insetos, ii)Comprimir os insetos para obter uma massa de compressão, iii)Secar a massa de compressão, e iv)Triturar a massa de compressão,
[082] Na qual a etapa de compressão é realizada quente.
[083] Como indicado acima, a compressão quente torna possível obter uma massa de compressão compreendendo um teor de óleo menor ou igual a 17% em peso em relação ao peso seco da massa de compressão, preferivelmente menor ou igual a 15%.
[084] De acordo com uma terceira modalidade do método de acordo com a invenção, a etapa de trituração da massa de compressão é realizada até um tamanho de partícula compreendido entre 300 μm e 1 mm, preferivelmente entre 500 e 800 μm.
[085] A invenção desse modo se refere a um método para a preparação de uma composição de acordo com a invenção compreendendo as seguintes etapas: i)Matar os insetos, ii)Comprimir os insetos para obter uma massa de compressão, iii)Secar a massa de compressão, e iv)Triturar a massa de compressão,
[086] Na qual a etapa de trituração da massa de compressão é realizada até um tamanho de partícula compreendido entre 300 μm e 1 mm.
[087] Mais particularmente, nessa terceira modalidade do método de acordo com a invenção, a etapa de comprimir os insetos pode ser realizada quente. Alternativamente, a etapa de compressão pode ser precedida por uma etapa de trituração dos insetos.
[088] A invenção finalmente refere-se ao uso de uma composição de acordo com a invenção em nutrição humana ou de animal.
[089] Vantajosamente, a composição de acordo com a invenção pode ser usada em ração para animais domésticos, como cães, gatos, pássaros, peixes, répteis e roedores.
[090] Mais particularmente, a composição de acordo com a invenção pode ser usada em aquicultura (peixes, crustáceos, moluscos, mariscos), ração para aves (galinha, peru, caça como codornas, faisão, abetarda), porcos, ruminantes (gado, ovelhas, cabras, cavalos) e marta.
[091] Finalmente, a composição de acordo com a invenção pode ser vantajosamente usada para substituir uma farinha de proteína.
[092] Por farinha de proteína quer se dizer mais particularmente uma farinha de peixe, leite em pó ou pó de soro de leite, proteína de soja concentrada (“CSP”), farinha de carne, como, por exemplo, farinha de aves.
[093] A substituição pode ser parcial ou total.
[094] Preferivelmente, a composição de acordo com a invenção é usada para substituição parcial ou total de uma farinha de peixe, como uma substituição de 50 ou 100%.
[095] Outras características e vantagens da invenção tornar-se-ão evidentes a partir dos seguintes exemplos, dados como exemplo, com referência a; - a figura 1, que é um diagrama ilustrando as variações em temperaturas da água e nos níveis de oxigênio dissolvido nos tanques onde truta alimentada com doses diferentes da composição de acordo com a invenção foi criada, - a figura 2 que compreende dois diagramas ilustrando o impacto sobre peso corporal final (figura 2A) e a razão de conversão de ração (figura 2B) de truta alimentada com doses diferentes de composição de acordo com a invenção, - a figura 3, que ilustra a distribuição dos lipídeos originando do inseto encontrado no suco e a massa de compressão obtida por um método compreendendo uma etapa de compressão ou uma etapa de trituração a seguir compressão, e
[096] A figura 4, que é um diagrama representando análise de cromatografia de exclusão estérica do tamanho das proteínas da composição de acordo com a invenção.
Exemplo 1: Método para a preparação de uma composição de acordo com a invenção
[097] A composição de acordo com a invenção é preparada a partir de larvas de Tenebrio molitor. Após recebimento das larvas, as mesmas podem ser armazenadas a 4°C por 0 a 15 dias em seus tanques de criação sem maior degradação antes de serem mortas. O peso (idade) das larvas usadas é variável e como resultado sua composição pode variar, como ilustrado na Tabela 1 abaixo:Tabela 1: Composição bioquímica de larvas de Tenebrio molitor de acordo com seu peso.
Figure img0001
. Etapa 1: branqueamento dos insetos
[098] Larvas vivas (+4°C a + 25°C) são transportadas em camadas com uma espessura compreendida entre 2 e 10 cm, em uma correia transportadora perfurada (1 mm) até uma câmara de branqueamento. Os insetos são desse modo branqueados em vapor (leito ou bocais de vapor) a 98°C ou em água a 100°C (bocais de pulverização) ou no modo misturado (água + vapor). O tempo de permanência na câmara de branqueamento é compreendido entre 1 e 15 minutos, de modo ideal 5 min.
[099] A temperatura das larvas após branqueamento é compreendida entre 75°C e 98°C.
. Etapa 2: Compressão
[0100] As larvas após branqueadas são transportadas para a tremonha de alimentação de uma prensa de parafuso único contínua. Enquanto passam para dentro da prensa, as larvas são mantidas em uma temperatura acima de 70°C para aumentar os rendimentos de retirada de óleo. O princípio de retirada de óleo é pressurizar o material no interior de uma gaiola cilíndrica por meio de uma disposição de parafusos e anéis dispostos no eixo central. A gaiola é revestida no interior com barras distribuídas em seções e mantidas separadas por espaços de espessuras diferentes dependendo da área de trabalho. Os interstícios desse modo dispostos permitem o fluxo de uma fração de óleo/gordura enquanto limita a passagem da denominada matéria “seca”, a fração de proteína, que é chamada “massa de compressão”, desse modo sendo envolvida na pressurização.
[0101] Os rendimentos de compressão obtidos são compreendidos entre 48 e 55%.Ycake = (masscake / massjuice + masscake)
[0102] A massa de compressão obtida contém 35 a 40% de matéria seca, 67 a 75% de proteínas e 13 a 17% de gorduras, as percentagens em peso sendo dadas em relação ao peso seco da massa de compressão.
. Etapa 3: Secagem
[0103] A massa de compressão é então disposta em uma bandeja em uma camada fina (aproximadamente 2 cm) e é seca em ar ventilado/agitado a 90°C por 5 horas para obter uma massa de compressão tendo um teor de matéria seca maior que 92%.
[0104] Essa etapa torna possível proteger contra qualquer contaminação tendo ocorrido desde a morte.
[0105] A atividade de água (Aw) após secagem é 0.35. Os resultados microbiológicos mostram uma ausência de Salmonella spp (Método: IRIS Salmonella BKR 23/07-10/11) e valores de Enterobacteria menores que 10 CFU/g (método: NF ISO 2128-2, dezembro de 2004, 30°C e 37°C).
. Etapa 4: Trituração
[0106] A massa de compressão seca, compreendendo principalmente proteínas, é finalmente triturada usando um moinho de martelos contínuo (6 partes móveis reversíveis - espessura de 8 mm). O triturador é alimentado por uma tremonha com uma aba de controle de taxa de fluxo (180 kg/h). A grelha perfurada usada para controlar a granulometria de saída tem 0,8 mm. A velocidade de rotação do motor é 3.000 rpm (motorização elétrica, potência absorvida 4 Kw (5.5 cv)).
Exemplo 2; Caracterização da composição de acordo com a invenção
[0107] A composição preparada no Exemplo 1 foi caracterizada.
1. Análises 1.1 Determinação do teor de umidade
[0108] O teor de umidade é determinado de acordo com o método originando a partir da Regulação EC 152/2009 de 27-01-2009 (103°C / 4 h).
1.2 Determinação da quantidade de proteínas brutas
[0109] As proteínas brutas são determinadas de acordo com o método chamado Dumas, e correspondendo ao padrão NF EM ISO 16634-1 (2008).
1.3 Determinação da quantidade de quitina
[0110] As fibras dietéticas na farinha de insetos são compostas essencialmente de quitina, a última foi portanto ensaiada de acordo com o método AOAC 991.43. Os valores desse modo obtidos são ligeiramente superestimados como resultado.
1.4 Determinação da quantidade de gordura
[0111] A gordura foi determinada de acordo com o método de Regulação EC 152/2009.
1.5 Determinação da quantidade de cinza
[0112] A cinza bruta foi determinada de acordo com o método de acordo com Regulação EC 152/2009 de 27-01-2009.
1.6 Determinação da quantidade de fósforo
[0113] O fósforo é ensaiado por ICP “plasma acoplado induzido” com calibragem interna.
1.7 Determinação de energia
[0114] O valor de energia é obtido com os coeficientes de Regulação de EU 1169/201.
1.8 Determinação das quantidades de aminoácidos e ácidos graxos
[0115] Essa determinação foi realizada por cromatografia de gás após hidrólise e derivação dos aminoácidos e ácidos graxos respectivamente.
1.9 Determinação de digestibilidade de pepsina.
[0116] A digestibilidade de pepsina é medida pelo método descrito em Diretiva 72/199/EC.
2. Resultados
[0117] A composição de acordo com a invenção é detalhada na Tabela 2
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Tabela 2: Composição
[0118] Além disso, uma digestibilidade de pepsina de 90+/-2% é obtida.
EXEMPLO 3: método alternativo para a preparação de uma composição de acordo com a invenção
[0119] 200 g de larvas T. molitor são introduzidas em um béquer, colocado em um banho de água a 100°C e contendo 200 mL de água levada até a fervura antecipadamente. Após 5 minutos, o béquer é removido do banho de água, as larvas são drenadas, a seguir misturadas com um volume de água de 200 mL. O líquido desse modo obtido é passado para dentro de uma prensa do tipo de parafuso duplo. A massa de compressão desse modo obtida é seca por 24 horas em um forno a 70°C, a seguir triturada até 250 μm. Uma composição de acordo com a invenção é desse modo obtida.
EXEMPLO 4: introdução da composição de acordo com a invenção em ração de peixe
[0120] No presente exemplo, o efeito de incluir uma composição de acordo com a invenção em ração em crescimento, ingestão de ração, conversão de ração, composição de corpo e digestibilidade aparente dos nutrientes na truta arco-íris foi estudado.
1. Material e métodos 1.1 Composição de acordo com a invenção
[0121] A composição utilizada nesse exemplo é aquela obtida de acordo com o Exemplo 1 e descrita mais completamente no Exemplo 2.
1.2 Dietas experimentais
[0122] Uma dieta baseada em farinha de peixe (CTRL) foi formulada com ingredientes convenientes para atender as necessidades nutricionais conhecidas de truta arco-íris juvenil. Essa dieta CTRL é composta de 25% de farinha de peixe, 8% de outras fontes de proteína de origem marinha (farinha de lula e farinha de krill), enquanto as fontes de proteína restantes foram um concentrado de proteína de soja, glúten de trigo e glúten de milho. Com base nessa formulação, quatro dietas de teste (Y5, Y7.5, Y15 e Y25) foram formuladas, nas quais a farinha de peixe foi substituída com a composição de acordo com a invenção em teores respectivos de 20, 30, 60 e 100%. (Vide a tabela 3 abaixo).
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1 farinha de peixe peruana LT70: 71% proteínas brutas (CP), 11% gorduras brutas (CF), EXALMAR, Peru; 2 farinha de Krill: 61% CP, 19% CF, Aker BioMarine Antarctic AS, Noruega;3 Super Prime without viscera: 82% CP, 3.5% CF, Sopropêche, França; 4 Soycomil P: 62% CP, 0.7% CF, ADM, Holanda; 5 VITEN: 84.7% CP, 1.3% CF, ROQUETTE, França; 6 farinha de glúten de milho: 61% CP, 6% CF, COPAM, Portugal; 7 PREMIX Lda, Portugal. Vitaminas (IU ou mg/kg diete): DL- acetato de alfa tocoferol, 100 mg; bissulfito de sódio menadiona, 25 mg; acetato de retinila, 20,000 IU; DL-colecalciferol, 2000 IU; tiamina, 30 mg; riboflavina, 30 mg; piridoxina, 20 mg; cianocobalamina, 0.1 mg; ácido nicotínico, 200 mg; ácido fólico, 15 mg; ácido ascórbico, 1000 mg; inositol, 500 mg; biotina, 3 mg; pantotenato de cálcio, 100 mg; cloreto de colina, 1000 mg, betaína, 500 mg. Minerais (g ou mg/kg): carbonato de cobalto, 0.65 mg; sulfato de cobre, 9 mg; sulfato férrico, 6 mg; iodeto de potássio, 0.5 mg; óxido de manganês, 9.6 mg; selenita de sódio, 0.01 mg; sulfato de zinco, 7.5 mg; cloreto de sódio, 400 mg; carbonato de cálcio, 1.86 g; excipiente trigo; 8 o óxido de ítrio foi incorporado somente em uma fração da ração usada para a medição de digestibilidade.Tabela 3: Formulação e composição das dietas experimentais.
[0123] Os níveis de farinha de lula e krill foram mantidos constantes entre todas as dietas para assegurar uma palatabilidade alta. Ajustes menores foram feitos na formulação das dietas testadas para manter as condições isonitrogenosas (proteína bruta, 48,5% DM), condições isolipídicas (22,7% DM) e condições isoenergéticas (energia bruta, 23.2 MJ/kg DM). Os níveis de suplementação com metionina e fosfato de monocálcio nas dietas testadas foram ajustados para corresponder àqueles encontrados na ração de CTRL.
[0124] As dietas foram produzidas por extrusão (tamanhos de grânulo: 1,2 e 2,0 mm) usando uma extrusora de parafuso duplo CLEXTRAL BC45 em uma escala piloto com um diâmetro de parafuso de 55,5 mm e uma faixa de temperatura de 119 a 123°C. Durante a extrusão, todos os três lotes de rações extrudadas foram secas em uma secadora de leito fluidificado em vibração (modelo DR100, TGC Extrusion, França). Após resfriar os grânulos, os óleos foram adicionados por revestimento a vácuo (modelo PG-10VCLAB, Dinnisen, Holanda). Durante todo o teste, as rações experimentais foram armazenadas em temperatura ambiente, porém em um lugar bem ventilado, frio. As amostras representativas de cada dieta foram tomadas para análise (Tabelas 4-5).
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Os teores são indicados em percentagens em peso em relação ao peso total de grânulos antes de secagem.Tabela 4: Perfil de aminoácido das dietas experimentais.
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Os teores são indicados em percentagens em peso em relação ao peso total de grânulos antes de secagem.Tabela 5: Síntese do perfil de ácido graxo das dietas experimentais.
[0125] 1.3 Teste de desempenho de crescimento
[0126] Grupos triplicatas de 35 trutas arco-íris (Oncorhynchus mykiss), com um peso corporal inicial (IBS) de 5,1 ± 0,1 g foram alimentados com uma das cinco dietas experimentais por 90 dias. Os peixes cresceram em tanques de fibra de vidro circulares (volume: 250 L) abastecidos com um fluxo contínuo de água doce em temperaturas compreendidas entre 14,1 ± 0,3°C e níveis de oxigênio dissolvido acima de 7,4 mg/L (vide a figura 1). Os peixes foram submetidos a condições de verão com alterações de fotoperíodo naturais (maio-julho). Os peixes foram alimentados com a mão até saciedade aparente, três vezes por dia (9h00, 14h00 e 18h00) durante a semana e duas vezes por dia nos finais de semana (10h00 e 16h00), tomando o maior cuidado para evitar desperdício da ração. A ração distribuída foi quantificada por toda a extensão do estudo. Peixes anestesiados foram pesados individuais no início e no final do estudo e o grupo foi pesado no dia 28 e no dia 60. No início, 15 peixes do mesmo estoque inicial foram amostrados e armazenados a -20°C para análise subsequente da composição de peso corporal. Após 90 dias de alimentação experimental, 6 peixes de cada tanque foram amostrados para a mesma finalidade.
1.4 Medição de digestibilidade aparente
[0127] Ao término do teste de crescimento e após todas as amostragens associadas, 12 peixes (peso corporal: 45 g) de cada tanque réplica foram usados para determinar a digestibilidade aparente da matéria seca, proteínas, lipídeos, energia e fósforo, pelo método indireto com dietas idênticas contendo óxido de ítrio (200 mg/kg) como marcador inerte. Os peixes foram armazenados em tanques cilindros-cônicos (volume: 60 L; taxa de fluxo de água: 3,7 L/min.; níveis de oxigênio dissolvido maiores que 6,4 mg/L), em uma temperatura de água constante de 14°C. os peixes foram adaptados às condições de criação e às dietas experimentais durante 10 dias. A seguir, os peixes foram alimentados com a mão uma vez por dia (10h00) até um leve excesso. Após limpeza profunda dos tanques de criação para remover todos os resíduos de ração, a matéria fecal foi coletada diariamente pelos 8 dias seguintes usando o sistema de filtração de água de saída contínua (sistema Choubert-INRA). Após a coleta diária, a matéria fecal foi congelada a -20°C. A matéria fecal misturada originando de cada grupo de peixes foi liofilizada antes da análise. Cada dieta foi testada em triplicata.
[0128] Os coeficientes de digestibilidade aparente (ADC) dos nutrientes e da energia de ração nas dietas experimentais foram calculados de acordo com a formula:
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1.5 Métodos analíticos
[0129] Os ingredientes de teste, as dietas e a matéria fecal liofilizada foram triturados antes da análise. As amostras de corpo inteiro foram picadas, misturadas e uma amostra representativa foi liofilizada e homogeneizada com um moinho de laboratório antes da análise. A análise da composição química do ingrediente, dietas, matéria fecal e peixe inteiro foi realizada usando os seguintes procedimentos: matéria seca após secagem a 105°C por 24 h; cinza por combustão a 550°C por 12 h; proteína bruta (N x 6.25) por uma técnica de combustão instantânea seguido por separação por cromatografia de gás e detecção de condutividade térmica (LECO FP428); a gordura por extração com diclorometano (Soxhlet); o total de fósforo de acordo com o método ISO/DIS 6491 usando reagente vanadomolíbdico; a energia bruta é um calorímetro de bomba adiabática. O óxido de ítrio nas rações e fezes foi determinado pelo método ICP-AES.
[0130] Para análises de total de aminoácidos, os ingredientes de teste e as dietas de teste foram hidrolisados (6 M de HCL a 116°C por 22 h em frascos de vidro enxaguados com nitrogênio), a seguir derivados com um reagente de flúor de AccQ (6-aminoquinolila-N-hidroxi succinidila) de acordo com o método AccQ-Tag (Waters, EUA). As análises foram realizadas por cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC) em um sistema de análise de aminoácido de fase inversa, usando norvalina como padrão interno. O triptofano não foi determinado visto que é parcialmente destruído por hidrólise de ácido. Os picos resultantes foram analisados com software EMPOWER (Waters, EUA). Para a análise dos ácidos graxos, os lipídeos foram extraídos de acordo com o método de Folch e outros (1957) e subsequentemente a composição de ácido graxo dos filés foi determinada por análise dos ésteres de metila por cromatografia de gás, de acordo com procedimento de Lepage e Roy (1986).
1.6 Critério para avaliar crescimento e uso dos nutrientes
[0131] IBW (g): peso corporal inicial.
[0132] FBW (g): peso corporal final.
[0133] Taxa de crescimento específico, SGR (% / dia): (Ln FBW - Ln IBW) x 100/dias.
[0134] Razão de conversão de razão, FCR: ração de alimentação bruta / ganho de peso
[0135] Ingestão de alimentação voluntária, VFI (% BW/dia): (ração de alimentação bruta / (IBW-FBW) / 2 / dias) x 100
[0136] Razão de eficiência de proteína PER: ganho de peso úmido / ingestão de proteína bruta
[0137] Retenção (% de ingestão): 100 x (FBW x teor final de nutrientes na carcaça - IBW x teor inicial de nutrientes na carcaça) / ingestão de nutrientes.
1.7 Análise estatística.
[0138] Os dados são apresentados pela média de três repetições ± o desvio padrão. Os dados foram submetidos à análise de variância de um fator. Antes de ANOVA, os valores expressos em % foram submetidos a uma transformação de raiz quadrada de arco seno. A significância estatística foi testada em um nível de probabilidade de 0.05. Todos os testes estatísticos foram realizados usando software IBM SPSS V21.
2. Resultados 2.1 Desempenho de crescimento
[0139] Os dados sobre os desempenhos de crescimento, conversão de ração e eficiente de proteína da truta arco-íris alimentada com as dietas experimentais por 28, 60 e 90 dias são reportados nas Tabelas 6 - 8 e figura 2. Nenhuma morte ocorreu durante o teste.
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Os valores são as médias ± o desvio padrão (n=3).Os valores em uma linha com expoentes diferentes diferem significativamente (P <0.05).Tabela 6: Desempenhos de crescimento no dia 28.
[0140] Após 28 dias de alimentação experimental (Tabela 6), os peixes mais que triplicaram seu peso corporal inicial. A ingestão de ração foi elevada (3,22 - 3,31% BWM/dia) e não foi afetada (P> 0.05) pelas doses crescentes de composição de acordo com a invenção incorporada. Essa observação sugere que a composição de acordo com a invenção não teve efeito negativo sobre a palatabilidade, e mesmo isso poderia compensar pela eliminação total de farinha de peixe sem comprometer a ingestão de ração. A taxa de crescimento variou de 4,19 a 4,50% / dia. Em comparação com o tratamento CTRL, enquanto as dietas Y5 e Y7.5 não afetaram o FBW e o SGR, as dietas Y15 e Y25 levaram a um aumento significativo (P<0.05) em FBW e SGR. Os valores da razão de conversão de ração variam entre 0.81 e 0.87. em comparação com o CTRL, a inclusão de composição de acordo com a invenção em 5 e 7,5% (dietas de Y5 e Y7,5%) não afetou o FCR. Entretanto, os altos níveis de inclusão de composição de acordo com a invenção (dietas Y15 e Y25) levaram a uma redução significativa em FCR (P < 0.05). A razão de eficiência de proteína (PER) variou entre 2,55 e 2,72. Os peixes alimentados com uma dieta Y25 mostraram um aumento significativo em PER, em comparação com aqueles alimentados com o CTRL, dietas Y5 e Y7.5.
Figure img0012
Os valores são as médias ± o desvio padrão (n=3).Os valores em uma linha com expoentes diferentes diferem significativamente (P <0.05). Tabela 7: Desempenhos de crescimento no dia 60.
[0141] Após 60 dias de alimentação experimental (Tabela 6), os peixes sendo submetidos ao tratamento mais eficaz mostraram um aumento de 8 vezes o peso corporal inicial. A taxa de crescimento variou de 3,00 a 3,57% /dia. Em comparação com o tratamento CTRL, todas as dietas com a composição de acordo com a invenção mostraram um aumento significativo (P < 0.05) em SGR. Os valores FCR variaram entre 0.85 e 1.10 e em comparação com o CTRL, a inclusão da composição de acordo com a invenção em todas as doses testadas levou a uma redução significativa em FCR (P < 0.05). A razão de eficiência de proteína (PER) variou entre 2.01 e 2.56. O valor PER mais baixo foi encontrado nos peixes alimentados com uma dieta CTRL, enquanto um aperfeiçoamento em PER foi estreitamente associada a doses crescentes da composição de acordo com a invenção.
Figure img0013
Os valores são as médias ± o desvio padrão (n=3).Os valores em uma linha com expoentes diferentes diferem significativamente (P <0.05).Tabela 8: Desempenhos de crescimento no dia 90.
[0142] Ao término do teste, 90 dias de alimentação experimental (Tabela 8), os peixes sendo submetidos ao tratamento mais eficaz mostraram um aumento de 11 vezes o peso corporal inicial. Em comparação com os peixes CTRL, aqueles alimentados com as dietas ricas em insetos mostraram um aumento significativo no peso corporal total (P <0.05). Esse aumento era relacionado à dose, com um aumento moderado para a dieta Y5, intermediário para Y7.5 e Y15, e mais elevado para Y25. A taxa de crescimento específico (SGR) variou entre 2,39 e 2,67% / dia, com um valor mínimo encontrado nos peixes alimentados com uma dieta CTRL, enquanto aqueles alimentados com rações contendo a composição de acordo com a invenção mostraram valores SGR significativamente mais elevados (p < 0.05). Independentemente do nível de incorporação, a composição de acordo com a invenção levou a uma redução significativa em FCR (P < 0.05). Em comparação com o tratamento CTRL, todas as dietas compreendendo farinhas de insetos levaram a um aumento significativo nos valores PER (P > 0.05).
2.2 Composição do corpo inteiro
[0143] Os dados na composição do corpo inteiro da truta ao término do teste são apresentados na Tabela 9. Os tratamentos de alimentação não tiveram efeito (P > 0.05) sobre os níveis de umidade, proteína, lipídeo, cinza, fósforo e energia do peixe inteiro.
Figure img0014
As percentagens são percentagens em peso em relação ao peso total do peixe. Os valores são as médias ± o desvio padrão (n=3).Peixe inicial: umidade 75.0%; proteína 14.1%; gorduras 8.7%; cinza 2.2%; fósforo 0.4%, energia 6.7 kJ / g.Tabela 9: Composição do corpo inteiro da truta alimentada com os vários tratamentos de ração.
2.3 Retenção de nutrientes
[0144] Os valores de retenção de nutrientes e energia (expressos em percentagem de ingestão) são apresentados na Tabela 10. Em comparação com o tratamento CTRL, os peixes alimentados com dietas ricas na composição de acordo com a invenção mostraram um aumento significativo em retenção de energia e proteína (P < 0.05). Similarmente, as dietas Y7.5, Y15 e Y25 mostraram uma retenção P significativamente mais alta que o CTRL (P < 0.05).
Figure img0015
Figure img0016
Os valores são as médias ± o desvio padrão (n=3).Os valores em uma linha com expoentes diferentes diferem significativamente (P <0.05).Tabela 10: Retenção de energia e nutrientes na truta alimentada com as várias dietas.
2.4 Digestibilidade aparente
[0145] A composição da matéria fecal coletada a partir da truta alimentada com os vários tratamentos de ração é apresentada na Tabela 11.
Figure img0017
* Percentagem em peso em relação ao peso total da matéria fecal seca. Os valores são as médias ± o desvio padrão (n=3).Tabela 11: Composição da matéria fecal da truta alimentada com as várias dietas.
[0146] Os coeficientes de digestibilidade aparente (ADC %) para os nutrientes e energia diferentes são apresentados na Tabela 12. O aumento nas doses de composição de acordo com a invenção incorporadas não teve aumento significativo (P > 0.05) sobre a digestibilidade aparente da matéria seca, proteínas, gordura, fósforo e energia.
Figure img0018
Os valores são as médias ± o desvio padrão (n=3).Tabela 12: Digestibilidade aparente dos nutrientes e energia na truta.
3. Conclusão
[0147] Ao término de 90 dias de alimentação experimental, o desempenho geral de crescimento pode ser considerado como muito satisfatório e em uma faixa mais alta para a truta arco-íris jovem, com valores SGR pela duração total do teste variando entre 2,4 e 2,7% / dia. Nos tratamentos mais eficazes, os peixes mostraram um aumento de 11 vezes seu peso corporal inicial. A taxa de conversão de ração entre os tratamentos variou entre 0,79 e 0,93, o que sugere uma boa adequação nutricional das rações e boas práticas de alimentação.
[0148] Os dados experimentais gerados nesse exemplo tornam possível afirmar que:
[0149] . A incorporação de doses crescentes de composição de acordo com a invenção (5, 7,5, 15 e 25%) com uma redução concomitante em farinha de peixe foi progressivamente ligada a um aumento significativo no peso corporal dos peixes.
[0150] . Todos os dados contendo a composição de acordo com a invenção mostraram um aperfeiçoamento significativo em SGR, FCR e PER.
[0151] . As doses crescentes de composição de acordo com a invenção incorporada não tiveram efeito sobre a composição do corpo inteiro da truta.
[0152] . As doses crescentes de composição de acordo com a invenção incorporada não tiveram efeito sobre a digestibilidade aparente da matéria seca, proteínas, lipídeos, fósforo e energia nas dietas experimentais diferentes.
[0153] . As proteínas, a retenção de energia e fósforo foram intensificadas em truta alimentada com rações compreendendo a composição de acordo com a invenção.
[0154] Em geral, a composição de acordo com a invenção utilizada nesse exemplo pode substituir eficazmente 100% da farinha de peixe na dieta de truta arco-íris juvenil com efeitos positivos sobre FCR e desempenho geral de crescimento.
EXEMPLO 5: Métodos com ou sem trituração antes da compressão Método com compressão apenas
[0155] 200 g de larvas de T. molitor são introduzidos em um béquer, colocados em um banho de água a 100°C e contendo 200 mL de água levada até a fervura antecipadamente. Após 5 minutos, o béquer é removido a partir do banho de água, as larvas são drenadas, a seguir passadas em uma prensa do tipo parafuso duplo. Uma massa de compressão é desse modo obtida.
Método com trituração seguido por compressão
[0156] 200 g de larvas T. molitor são introduzidos em um béquer, colocados em um banho de água a 100°C e contendo 200 mL de água levada até a fervura antecipadamente. Após 5 minutos, o béquer é removido a partir do banho de água, as larvas são drenadas, a seguir misturadas com um volume de água de 200 mL. O líquido desse modo obtido é passado em uma prensa do tipo parafuso duplo. Uma massa de compressão é desse modo obtida.
Medição do teor de lipídeo
[0157] 2 g de amostra são colocados em um béquer ao qual 0,2 g de Na2SO4 e 15 mL de CHCl3/MeOH (2/1 v/v) são adicionados. A mistura é colocada sob agitação magnética por 20 minutos, a seguir a solução é filtrada, o resíduo é novamente colocado no béquer com 10 mL de CHCl3/MeOH (2/1 v/v). A mistura é colocada sob agitação magnética por 15 minutos, a seguir a solução é filtrada, as fases de solvente são combinadas e evaporadas até peso constante. O teor de lipídeo é determinado como uma percentagem em peso após extração-evaporação em relação ao peso inicial da amostra (2 g).
Conclusão
[0158] A significância de trituração à montante de compressão foi estudada (figura 3). É desse modo claramente evidente que a distribuição dos lipídeos entre a massa de compressão e o suco de compressão é muito mais eficaz, 12,9 versus 87,1 ao contrário de 42,7 versus 57,3, quando a trituração foi realizada antecipadamente.
Exemplo 6: análise do tamanho das proteínas solúveis da composição de acordo com a invenção
[0159] Uma amostra de 100 mg da composição preparada no Exemplo 1 foi colocada em 10 mL de tampão de fosfato NaCl (pH 7.4, 0.137 mM). A amostra foi agitada por 1 minuto (vórtice), a seguir centrifugada a 900 g por 1 min. Após centrifugação, a amostra foi filtrada através de uma membrana de 0.45 μm. A análise do tamanho das proteínas solúveis foi realizada usando um sistema de cromatografia de exclusão estérica com uma coluna Nucleogel GFC-300. Um tampão de fosfato de NaCl (pH 7.4, 0.137 mM) foi usado como eluente. A taxa de fluxo foi 1.0 mL/min. A detecção foi realizada com um detector UV a 280 nm.
[0160] Os resultados da análise são apresentados na Figura 4 e resumidos na Tabela 13 abaixo.
Figure img0019
Tabela 13: distribuição dos tamanhos das proteínas solúveis contidas na composição preparada no Exemplo 1.
[0161] Os resultados mostram que aproximadamente 74,4% das proteínas solúveis presentes na composição de acordo com a invenção têm uma massa molar menor que 12.400 g/mol (ou Da, Daltons).

Claims (6)

1. Método para a preparação de uma composição compreendendo pelo menos 67% em peso de proteínas brutas, pelo menos 5% em peso de quitina, as percentagens em peso sendo dadas em relação ao peso total da composição, e 85% em peso de proteínas digeríveis em relação ao peso total de proteínas brutas CARACTERIZADO pelo fato de que compreende as seguintes etapas: i) matar insetos, ii) comprimir os insetos para obter uma massa de compressão, e iii) triturar a massa de compressão, o método compreendendo também uma etapa de secagem da massa de compressão.
2. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende as seguintes etapas: i) matar os insetos, ii) comprimir os insetos para obter uma massa de compressão, iii) secar a massa de compressão, e iv) triturar a massa de compressão, em que a etapa de compressão é precedida por uma etapa de trituração dos insetos.
3. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende as seguintes etapas: i) matar os insetos, ii) comprimir os insetos para obter uma massa de compressão, iii) secar a massa de compressão, e iv) triturar a massa de compressão, em que a etapa de compressão é realizada quente.
4. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende as seguintes etapas: i) matar os insetos, ii) comprimir os insetos para obter uma massa de compressão, iii) secar a massa de compressão, e iv) triturar a massa de compressão,em que a etapa de trituração da massa de compressão é realizada até um tamanho de partícula compreendido entre 300 μm e 1 mm.
5. Uso da composição obtida pelo método, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 4, CARACTERIZADO pelo fato de que é para nutrição humana ou de animais.
6. Uso, de acordo com a reivindicação 5, CARACTERIZADO pelo fato de que a composição é usada para substituir farinha de proteína.
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