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WO2021209055A1 - 咪唑啉酮衍生物及其在医药上的应用 - Google Patents

咪唑啉酮衍生物及其在医药上的应用 Download PDF

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Publication number
WO2021209055A1
WO2021209055A1 PCT/CN2021/087912 CN2021087912W WO2021209055A1 WO 2021209055 A1 WO2021209055 A1 WO 2021209055A1 CN 2021087912 W CN2021087912 W CN 2021087912W WO 2021209055 A1 WO2021209055 A1 WO 2021209055A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
alkyl
methyl
halogen
amino
dihydro
Prior art date
Application number
PCT/CN2021/087912
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
魏用刚
许学珍
楚洪柱
何吕学
雷飞全
晏婕
何阳
王美微
苏桂转
刘兵
孙毅
Original Assignee
成都百裕制药股份有限公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 成都百裕制药股份有限公司 filed Critical 成都百裕制药股份有限公司
Priority to AU2021256235A priority Critical patent/AU2021256235B2/en
Priority to EP21788513.6A priority patent/EP4137491A4/en
Priority to BR112022020962A priority patent/BR112022020962A2/pt
Priority to JP2022562997A priority patent/JP7498795B2/ja
Priority to KR1020227040376A priority patent/KR20230004697A/ko
Priority to CA3175589A priority patent/CA3175589A1/en
Priority to MX2022013054A priority patent/MX2022013054A/es
Publication of WO2021209055A1 publication Critical patent/WO2021209055A1/zh
Priority to US18/046,879 priority patent/US20230165867A1/en
Priority to ZA2022/11870A priority patent/ZA202211870B/en

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Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A61K31/52—Purines, e.g. adenine
    • A61K31/522—Purines, e.g. adenine having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. hypoxanthine, guanine, acyclovir
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
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    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
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    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
    • C07D473/26—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with an oxygen, sulphur, or nitrogen atom directly attached in position 2 or 6, but not in both
    • C07D473/32—Nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/05—Isotopically modified compounds, e.g. labelled

Definitions

  • the present invention relates to imidazolinone derivatives represented by general formula (I), or their stereoisomers, solvates, prodrugs, metabolites, pharmaceutically acceptable salts or co-crystals, their pharmaceutical compositions and their functions Use of DNA-PK inhibitors.
  • DNA-dependent protein kinase is a DNA-PK enzyme complex composed of Ku70/Ku80 heterodimer and DNA-dependent protein kinase catalytic subunit (DNA-PKcs). The enzyme complex needs to be activated with the participation of DNA to perform its corresponding functions (George et al., 2019). As a serine/threonine protein kinase, DNA-PK belongs to the PIKK (phosphatidylinositol 3-kinase-related kinase) family.
  • PIKK phosphatidylinositol 3-kinase-related kinase
  • DSBs In the normal physiological process, a variety of factors may lead to the occurrence of DSBs in DNA: For example, DSBs often appear as intermediate products in the process of somatic DNA recombination. This physiological process is very important for the formation of the functional immune system of all vertebrates; DNA replication is in progress. When a replication fork encounters damaged bases, it may also cause single-strand or double-strand breaks; DNA may also generate DSBs due to the attack of reactive oxygen species (ROS) during normal metabolism (Cannan & Pederson, 2016).
  • ROS reactive oxygen species
  • DSBs ionizing radiation (IR) and chemotherapeutic agents (such as topoisomerase II inhibitors)
  • IR ionizing radiation
  • chemotherapeutic agents such as topoisomerase II inhibitors
  • NHEJ non-homologous end-joining
  • NHEJ is a dynamic process mediated by DNA-PK that requires the participation of multiple proteins and signaling pathways.
  • the basic process is as follows: (1) Ku70/Ku80 heterodimer recognizes and binds to the ends of double-stranded DNA breaks; (2) Recruitment DNA-PKcs, XRCC4-DNA ligase IV complex and other proteins to both sides of the DNA break double-strand; (3) DNA-PKcs autophosphorylate and activate its own kinase activity; (4) DNA-PKcs as an adhesive to connect Break both ends of the DNA to prevent exonuclease from degrading the DNA; (5) Process the DNA to remove unlinkable ends or other forms of damage at the break; (6) XRCC4-DNA ligase IV complex repair DNA ends (in some cases, DNA polymerase may be required to synthesize new ends before ligation).
  • DNA-PKcs When DNA-PKcs is phosphorylated, it can induce protein conformation to change and regulate the activity of various proteins in the NHEJ process (such as Artemis, Ku70, Ku80, DNA ligase), which is essential for the DNA repair process. Therefore, phosphorylated DNA-PKcs (pDNA-PKcs) is often used as a marker of cellular DSBs.
  • DNA-PK activity is related to the occurrence and development of a variety of tumors: for example, DNA-PKcs in melanoma can promote angiogenesis and tumor metastasis; DNA-PKcs expression in multiple myeloma is significantly up-regulated; radiotherapy The content of Ku protein in tolerant thyroid tumors is significantly increased (Ihara, Ashizawa, Shichijo, & Kudo, 2019). Therefore, it can be considered to combine DNA-PK inhibitors with anti-tumor therapies that cause DNA damage (such as IR, chemotherapeutic agents, etc.) to improve the effect.
  • DNA-PK inhibitors can interfere with the DNA repair function of normal cells to a certain extent.
  • NU7441 can significantly enhance the efficacy of chemotherapeutic drugs that cause DNA damage on breast cancer and non-small cell lung cancer, and can also increase the sensitivity of colorectal cancer to IR and chemotherapy.
  • DNA-PK inhibitors After years of research, several DNA-PK inhibitors have been discovered.
  • the first compound found to have DNA-PK kinase inhibitory activity is a fungal metabolite-Wortmannin, with an IC50 (DNA-PK) of about 15nM.
  • DNA-PK IC50
  • This compound also plays an important role in the acetylation and phosphorylation of p53 protein ( Sarkaria et al., 1998); the quercetin derivative LY294002 reported later also has DNA-PK inhibitory activity (Maira, Stauffer, Schnell, & Garcia-Echeverria, 2009); later based on the structure of LY294002, NU7026, NU7441, etc. were developed A new generation of DNA-PK inhibitors.
  • DNA-PK inhibitors have also been reported, such as OK1035, SU11752, PP121, KU-0060648 and other small molecule compounds, but these compounds also have defects such as low specificity for DNA-PK (George et al., 2019). Therefore, there is still a need to develop DNA-PK inhibitors with high activity, high specificity, and low toxicity to better meet clinical needs.
  • One or more embodiments of the present application provide novel imidazolinone derivatives, or their stereoisomers, solvates, metabolites, pharmaceutically acceptable salts, co-crystals or prodrugs, their pharmaceutical compositions and their Use as a DNA-PK inhibitor.
  • the compounds of one or more embodiments of the present application have high inhibitory activity and high selectivity to DNA-PK, and can be used as chemotherapy and radiotherapy sensitizers to prevent and/or treat cancer, improve curative effects, and reduce toxic and side effects.
  • One or more embodiments of the present application provide a compound of general formula (I), or its stereoisomers, solvates, prodrugs, metabolites, pharmaceutically acceptable salts or co-crystals:
  • A, B, C, and D are each independently C or N, and at least one of A, B, C, and D is N;
  • R 0 is H, C 1-6 alkyl or cyclopropyl, and the C 1-6 alkyl is optionally further substituted with one or more substituents selected from halogen and deuterium;
  • R 1 is Or pyridyl, and R 1 is optionally further substituted with 1 or 2 substituents selected from D, halogen, cyano, hydroxy, C 1-6 alkyl and C 1-6 alkoxy;
  • R 1a is H or C 1-6 alkyl
  • R 1b is a C 1-6 alkyl substituted by H, OH, cyano or hydroxy
  • R 2a and R 2b are each independently H, C 1-6 alkyl or 3 to 5-membered cycloalkyl, wherein said C 1-6 alkyl is optionally further selected from OH, D , Halogen, C 1-6 alkyl and C 1-6 alkoxy substituents;
  • R 2a and R 2b together with the atoms to which they are connected form a 5- to 6-membered heterocyclic group, said 5- to 6-membered heterocyclic group containing 1, 2 or 3 heteroatoms selected from N, O and S, said The 5- to 6-membered heterocyclic group is optionally further substituted with one or more substituents selected from C 1-6 alkyl, OH and halogen;
  • R 3 is halogen or C 1-6 alkyl, and the C 1-6 alkyl is optionally further substituted with 1 to 3 substituents selected from D and halogen;
  • n 0 or 1
  • n 0, 1 or 2;
  • x and y are independently 1, 2 or 3;
  • R 1 is
  • R 1a is H or C 1-6 alkyl
  • R 2a and R 2b are each independently H, C 1-6 alkyl or 3 to 5-membered cycloalkyl, wherein said C 1-6 alkyl is optionally further selected from OH, D Or substituted by halogen substituents;
  • R 2a and R 2b together with the atoms to which they are connected form a 5- to 6-membered heterocyclic group, the 5- to 6-membered heterocyclic group contains 1 to 3 heteroatoms selected from N, O and S, and the heterocyclic ring
  • the group is optionally further substituted with one or more substituents selected from OH and halogen;
  • R 3 is halogen or C 1-6 alkyl, and the C 1-6 alkyl is optionally further substituted with 1 to 3 substituents selected from D and halogen;
  • n 0 or 1
  • n 0, 1 or 2;
  • R 0 is H, C 1-4 alkyl or cyclopropyl, and the C 1-4 alkyl is optionally further substituted with one or more substituents selected from halogen and D;
  • R 2a and R 2b are each independently H, C 1-6 alkyl or 3 to 5-membered cycloalkyl, wherein said C 1-6 alkyl is optionally further selected from OH, D And halogen substituents;
  • R 2a and R 2b together with the atoms to which they are connected form a 5- to 6-membered heterocyclic group, the 5- to 6-membered heterocyclic group contains 1 to 3 heteroatoms selected from N, O and S, and the 5- to 6-membered heterocyclic group
  • the 6-membered heterocyclic group is optionally further substituted with one or more substituents selected from OH and halogen;
  • R 3 is halogen or C 1-6 alkyl, and the C 1-6 alkyl is optionally further substituted with 1 to 3 substituents selected from D and halogen;
  • n 0 or 1
  • n 0, 1 or 2;
  • R 0 is H or methyl
  • R 3 is methyl
  • the compound of the present application is a compound of general formula (II):
  • R 0 is H, C 1-6 alkyl or cyclopropyl, and the C 1-6 alkyl is optionally further substituted with one or more substituents selected from halogen and deuterium;
  • R 1 is Or pyridyl, and R 1 is optionally further substituted with 1 to 2 substituents selected from D, halogen, cyano, hydroxy, C 1-6 alkyl and C 1-6 alkoxy;
  • R 1a is H or C 1-6 alkyl
  • R 1b is a C 1-6 alkyl substituted by H, OH, cyano or hydroxy
  • R 2c is H, cyano, halogen or C 1-6 alkoxy
  • R 2a and R 2b are H, C 1-6 alkyl or 3 to 5-membered cycloalkyl, wherein the C 1-6 alkyl is optionally further selected from OH, D, halogen, Substituents of C 1-6 alkyl and C 1-6 alkoxy;
  • R 2a and R 2b together with the atoms to which they are connected form a 5- to 6-membered heterocyclic group, the 5- to 6-membered heterocyclic group contains 1 to 3 heteroatoms selected from N, O and S, and the 5- to 6-membered heterocyclic group
  • the 6-membered heterocyclic group is optionally further substituted with one or more substituents selected from C 1-6 alkyl, OH and halogen;
  • R 3 is halogen or C 1-6 alkyl, and the C 1-6 alkyl is optionally further substituted with 1 to 3 substituents selected from D and halogen;
  • n 0 or 1
  • n 0, 1 or 2;
  • x and y are independently 1, 2 or 3;
  • the compound of the present application is a compound of general formula (III):
  • R 0 is H, C 1-6 alkyl or cyclopropyl, and the C 1-6 alkyl is optionally further substituted with one or more substituents selected from halogen and deuterium;
  • R 1 is Or pyridyl, and R 1 is optionally further substituted with 1 to 2 substituents selected from D, halogen, cyano, hydroxy, C 1-6 alkyl and C 1-6 alkoxy;
  • R 1b is a C 1-6 alkyl substituted by H, OH, cyano or hydroxy
  • R 2a and R 2b are each independently H, C 1-6 alkyl or 3 to 5-membered cycloalkyl, wherein the C 1-6 alkyl is optionally further selected from D or halogen by one or more Substituent substitution;
  • R 2a and R 2b together with the atoms to which they are connected form a 5- to 6-membered heterocyclic group, the 5- to 6-membered heterocyclic group contains 1 to 3 heteroatoms selected from N, O and S, and the 5- to 6-membered heterocyclic group
  • the 6-membered heterocyclic group is optionally further substituted with one or more substituents selected from C 1-6 alkyl, OH and halogen;
  • R 2c is H, cyano, halogen, or C 1-6 alkoxy, and the C 1-6 alkoxy is optionally substituted with one or more deuterium;
  • R 3 is halogen or C 1-6 alkyl, and the C 1-6 alkyl is optionally further substituted with 1 to 3 substituents selected from D and halogen;
  • n 0 or 1
  • n 0, 1 or 2;
  • x and y are each independently 1, 2, or 3.
  • One or more embodiments of the present application provide a compound of general formula (IV), or its stereoisomers, solvates, prodrugs, metabolites, pharmaceutically acceptable salts or co-crystals:
  • R 0 is H, C 1-6 alkyl or cyclopropyl, and the C 1-6 alkyl is optionally further substituted with one or more substituents selected from halogen and deuterium;
  • R 1 is -(CH) m -4 to 7-membered carbocyclic group, -(CH) m -4 to 7-membered heterocyclic group, -(CH) m -8 to 12-membered bridged ring, -(CH) m- 7 to 12-membered spiro ring, the -(CH) m -4 to 7-membered carbocyclic group, -(CH) m -4 to 7-membered heterocyclic group, -(CH) m -8 to 12-membered bridged ring, or -(CH) m
  • the substituent of the substituted C 1-6 alkyl group is substituted.
  • R 0 is H, C 1-6 alkyl or cyclopropyl, and the C 1-6 alkyl is optionally further selected from halogen and Substituent substitution of deuterium;
  • R 1 is Or pyridyl, and R 1 is optionally further substituted with 1 to 2 substituents selected from D, halogen, cyano, hydroxy, C 1-6 alkyl and C 1-6 alkoxy;
  • R 1a is H or C 1-6 alkyl
  • R 1b is a C 1-6 alkyl substituted by H, OH, cyano or hydroxy
  • n 0 or 1
  • x and y are each independently 1, 2 or 3.
  • R 0 is a C 1-4 alkyl group, and the C 1-4 alkyl group is optionally further substituted with one or more substituents selected from halogen and deuterium;
  • the compound of the application is:
  • composition comprising:
  • One or more embodiments of the present application provide that the compound of the present application or its stereoisomers, solvates, metabolites, pharmaceutically acceptable salts, co-crystals or prodrugs or the pharmaceutical composition of the present application are prepared for Use in medicines for the treatment of cancer.
  • the drug for treating cancer is a DNA-PK inhibitor.
  • One or more embodiments of the present application provide the compound shown in (I'), or its stereoisomers, solvates, prodrugs, metabolites, pharmaceutically acceptable salts or co-crystals:
  • C is selected from a phenyl group or a 6-membered monocyclic heterocyclic group, and the heterocyclic group may contain 1 to 3 heteroatoms selected from N;
  • R 0 is selected from H, C 1-6 alkyl or cyclopropyl, and the alkyl is optionally further substituted with one or more substituents selected from halogen or deuterium;
  • R 1 is selected from
  • R 2a and R 2b are selected from H, C 1-6 alkyl or 3 to 5-membered cycloalkyl, wherein said C 1-6 alkyl is optionally further selected from OH, D, halogen , C 1-6 alkyl or C 1-6 alkoxy substituent substituted;
  • R 2a and R 2b may form a 5- to 6-membered heterocyclic ring with the atoms to which they are connected.
  • the heterocyclic ring may contain 1 to 3 heteroatoms selected from N, O or S.
  • the heterocyclic ring may be further divided by 1 One or more substituents of C 1-6 alkyl, OH or halogen;
  • R 3 is selected from halogen or C 1-6 alkyl, and the alkyl is optionally further substituted with 1 to 3 substituents selected from D or halogen;
  • n is selected from 0, 1 or 2;
  • R 0 is selected from H, C 1-4 alkyl or cyclopropyl, and the alkyl is optionally further substituted with one or more substituents selected from halogen or D;
  • R 1 is selected from
  • the alkyl group or alkoxy group is optionally substituted by one or more selected from halogen or deuterium;
  • R 2a and R 2b are selected from H, C 1-6 alkyl or 3 to 5-membered cycloalkyl, wherein said C 1-6 alkyl is optionally further selected from OH, D or halogen by one or more Is substituted by the substituent;
  • R 2a and R 2b may form a 5- to 6-membered heterocyclic ring with the atoms to which they are connected.
  • the heterocyclic ring may contain 1 to 3 heteroatoms selected from N, O or S.
  • the heterocyclic ring may be further divided by 1 One or more OH or halogen substituents;
  • R 3 is selected from halogen or C 1-6 alkyl, and the alkyl is optionally further substituted with 1 to 3 substituents selected from D or halogen;
  • n is selected from 0 or 1;
  • n is selected from 0, 1 or 2;
  • One or more embodiments of the present application provide a compound represented by the general formula (I"), or all its stereoisomers, solvates, prodrugs, metabolites, pharmaceutically acceptable salts or co-crystals:
  • C is selected from a phenyl group or a 6-membered monocyclic heterocyclic group, and the heterocyclic group may contain 1 to 3 heteroatoms selected from N;
  • R 0 is selected from H or C 1-6 alkyl, and the alkyl is optionally further substituted with one or more substituents selected from halogen or deuterium;
  • R 1 is selected from
  • R 2a and R 2b are selected from H, C 1-6 alkyl or 3 to 5-membered cycloalkyl, wherein the C 1-6 alkyl is optionally further selected from OH, halogen, C Substituted by 1-6 alkyl or C 1-6 alkoxy substituent;
  • R 2a and R 2b may form a 5- to 6-membered heterocyclic ring with the atoms to which they are connected.
  • the heterocyclic ring may contain 1 to 3 heteroatoms selected from N, O or S.
  • the heterocyclic ring may be further divided by 1 One or more C 1-6 alkyl or halogen substitution and substitution;
  • R 3 is selected from halogen or C 1-6 alkyl, and the alkyl is optionally further substituted with 1 to 3 substituents selected from D or halogen;
  • n is selected from 0, 1;
  • n is selected from 1 or 2.
  • R 0 is selected from H or C 1-4 alkyl, and the alkyl is optionally further substituted with one or more substituents selected from halogen or D;
  • R 1 is selected from R 1 is selected from
  • the alkyl group is optionally substituted by one or more selected from halogen or deuterium;
  • R 2a and R 2b are selected from H, C 1-6 alkyl or 3 to 5-membered cycloalkyl, wherein the C 1-6 alkyl is optionally further substituted by one or more selected from OH or halogen Substitution;
  • R 2a and R 2b may form a 6-membered heterocyclic ring with the atoms to which they are connected;
  • R 3 is selected from halogen or C 1-6 alkyl, and the alkyl is optionally further substituted with 1 to 3 substituents selected from D or halogen;
  • n is selected from 0 or 1;
  • n is selected from 1 or 2.
  • the compound of the application is:
  • composition comprising:
  • One or more embodiments of the present application provide the compound of the present application or its stereoisomers, solvates, metabolites, pharmaceutically acceptable salts, co-crystals or prodrugs, or the pharmaceutical composition of the present application for preparing DNA -Use in PK inhibitors.
  • One or more embodiments of the present application provide compounds of the general formula (I), (II), (III), (IV), (I') or (I") of the present application, or the foregoing specific structures or their stereoisomers Body, solvate, metabolite, pharmaceutically acceptable salt, co-crystal or prodrug or composition of the present application, which is used as a drug.
  • One or more embodiments of the present application provide compounds of the general formula (I), (II), (III), (IV), (I') or (I") of the present application, or the foregoing specific structures or their stereoisomers Body, solvate, metabolite, pharmaceutically acceptable salt, co-crystal or prodrug or composition of the present application, which is used as a medicine for treating cancer or a method for preventing and/or treating cancer.
  • One or more embodiments of the present application provide compounds of the general formula (I), (II), (III), (IV), (I') or (I") of the present application, or the foregoing specific structures or their stereoisomers Body, solvate, metabolite, pharmaceutically acceptable salt, co-crystal or prodrug or composition of the present application, which is used as a DNA-PK inhibitor or a method for inhibiting DNA-PK.
  • One or more embodiments of the present application provide compounds of the general formula (I), (II), (III), (IV), (I') or (I") of the present application, or the foregoing specific structures or their stereoisomers Body, solvate, metabolite, pharmaceutically acceptable salt, co-crystal or prodrug or composition of the present application, which is used to treat diseases related to DNA-PK.
  • One or more embodiments of the present application provide a method for inhibiting DNA-PK, which comprises combining the general formula (I), (II), (III), (IV), (I') or (I") of the present application.
  • the compound or the above-mentioned specific structure or its stereoisomers, solvates, metabolites, pharmaceutically acceptable salts, co-crystals or prodrugs or the composition of the present application are contacted with a subject in need thereof.
  • One or more embodiments of the present application provide a method for treating diseases related to DNA-PK, which includes applying the general formula (I), (II), (III), (IV), (I') or The compound of (I") or the above-mentioned specific structure or its stereoisomers, solvates, metabolites, pharmaceutically acceptable salts, co-crystals or prodrugs or the composition of the present application is administered to a subject in need thereof.
  • One or more embodiments of the present application provide a method for treating cancer, which comprises combining a compound of the general formula (I), (II), (III), (IV), (I') or (I") of the present application Or the above-mentioned specific structure or its stereoisomers, solvates, metabolites, pharmaceutically acceptable salts, co-crystals or prodrugs or the composition of the present application are administered to a subject in need thereof.
  • the carbon, hydrogen, oxygen, sulfur, nitrogen or F, Cl, Br, and I involved in the groups and compounds of the present invention include their isotopes, and the carbon involved in the groups and compounds of the present invention , Hydrogen, oxygen, sulfur or nitrogen are optionally further replaced by one or more of their corresponding isotopes, wherein carbon isotopes include 12 C, 13 C and 14 C, and hydrogen isotopes include protium (H), deuterium (D, Also called heavy hydrogen), tritium (T, also called super heavy hydrogen), oxygen isotopes include 16 O, 17 O and 18 O, sulfur isotopes include 32 S, 33 S, 34 S and 36 S, and nitrogen isotopes include 14 N and 15 N, fluorine isotopes include 17 F and 19 F, chlorine isotopes include 35 Cl and 37 Cl, and bromine isotopes include 79 Br and 81 Br.
  • carbon isotopes include 12 C, 13 C and 14 C
  • hydrogen isotopes include
  • Alkyl refers to a linear or branched saturated aliphatic hydrocarbon group of 1 to 20 carbon atoms, preferably 1 to 8 (for example, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8) carbon atoms
  • the alkyl group of is more preferably an alkyl group of 1 to 6 carbon atoms, and still more preferably an alkyl group of 1 to 4 carbon atoms.
  • Non-limiting examples include methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, sec-butyl, neobutyl, tert-butyl, n-pentyl, isopentyl, neopentyl, n-hexyl And its various branched isomers; when the alkyl group is substituted, it may be optionally further substituted with one or more substituents.
  • Alkoxy refers to a group formed by replacing at least one carbon atom in an alkyl group with an oxygen atom.
  • Non-limiting examples include methoxy, ethoxy, n-propoxy, isopropoxy, n-butoxy, sec-butoxy, tert-butoxy, n-pentoxy, n-hexoxy, cyclopropyl Oxy and cyclobutoxy.
  • the definition of the alkyl group is the same as the definition of "alkyl" mentioned above.
  • Alkenyl refers to a straight line containing 1 to 10 (for example, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10) carbon-carbon double bonds consisting of 2 to 20 carbon atoms Chain or branched unsaturated aliphatic hydrocarbon group, preferably 2 to 12 (for example, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12) carbon atoms alkenyl group, more preferably 2 to The alkenyl group of 8 carbon atoms is more preferably the alkenyl group of 2 to 6 carbon atoms.
  • Non-limiting examples include vinyl, propen-2-yl, buten-2-yl, buten-2-yl, penten-2-yl, penten-4-yl, hexen-2-yl, Hexen-3-yl, hepten-2-yl, hepten-3-yl, hepten-4-yl, octen-3-yl, nonen-3-yl, decen-4-yl and undecenyl En-3-yl.
  • the alkenyl group may be further substituted with one or more substituents.
  • Alkynyl refers to those containing 1 to 10 (for example, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, or 10) carbon-carbon triple bonds, consisting of 2 to 20 carbon atoms Straight or branched chain unsaturated aliphatic hydrocarbon group, preferably 2 to 12 (for example, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 or 12) carbon atom alkynyl group, more preferably 2 An alkynyl group having to 8 carbon atoms, and an alkynyl group having 2 to 6 carbon atoms is more preferable.
  • Non-limiting examples include ethynyl, propyn-1-yl, propyn-2-yl, butyn-1-yl, butyn-2-yl, butyn-3-yl, 3,3-dimethyl Butyn-2-yl, pentyn-1-yl, pentyn-2-yl, hexyn-1-yl, 1-heptyn-1-yl, heptyn-3-yl, heptyn-4- Base, octyn-3-yl, nonyn-3-yl, decyn-4-yl, undecyn-3-yl, dodecyn-4-yl.
  • the alkynyl group may be optionally further substituted with one or more substituents.
  • Aryl refers to a substituted or unsubstituted aromatic ring, which can be a 5- to 8-membered (e.g., 5, 6, 7, 8-membered) monocyclic ring, 5 to 12-membered (e.g., 5, 6, 7 , 8, 9, 10, 11, 12 membered) bicyclic or 10 to 15 membered (for example, 10, 11, 12, 13, 14, 15 membered) tricyclic ring system, which can be bridged or spiro ring, non-limiting implementation Examples include phenyl and naphthyl. The aryl group may be further substituted with one or more substituents.
  • Heteroaryl refers to a substituted or unsubstituted aromatic ring, which can be 3 to 8 membered (e.g. 3, 4, 5, 6, 7, 8 membered) monocyclic, 5 to 12 membered (e.g. 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 membered) bicyclic or 10 to 15 membered (e.g. 10, 11, 12, 13, 14, 15 membered) tricyclic ring system, and contains 1 to 6 (e.g. 1, 2, 3, 4, 5, 6) heteroatoms selected from N, O or S, preferably 5 to 8 membered heteroaryl groups, and 1 to 4 (e.g. 1, 2 , 3, 4) N and S can be oxidized into various oxidation states.
  • 3 to 8 membered e.g. 3, 4, 5, 6, 7, 8 membered
  • monocyclic e.g. 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 membered
  • 10 to 15 membered e.g. 10, 11, 12, 13, 14, 15 membered
  • tricyclic ring system contains 1 to
  • Heteroaryl groups can be attached to heteroatoms or carbon atoms. Heteroaryl groups can be bridged or spiro rings. Non-limiting examples include cyclopyridyl, furanyl, thienyl, pyranyl, pyrrolyl, pyrimidinyl, Pyrazinyl, pyridazinyl, imidazolyl, piperidinyl benzimidazolyl, benzopyridyl, pyrrolopyridyl.
  • the heteroaryl group is optionally further substituted with one or more substituents.
  • Carbocyclic group or “carbocyclic ring” refers to a saturated or unsaturated aromatic ring or a non-aromatic ring.
  • aromatic ring When it is an aromatic ring, its definition is the same as the definition of "aryl”above; when it is a non-aromatic ring, it can be 3 to 10 members (for example, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 Yuan), 4 to 12 yuan (e.g. 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 yuan) bicyclic ring or 10 to 15 yuan (e.g.
  • tricyclic ring system which can be bridged or spiro ring
  • non-limiting examples include cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, 1-cyclopentyl-1-enyl, 1-cyclopentyl-2 -Alkenyl, 1-cyclopentyl-3-alkenyl, cyclohexyl, 1-cyclohexyl-2-enyl, 1-cyclohexyl-3-alkenyl, cyclohexenyl, cyclohexadienyl, cyclohexyl Heptyl, cyclooctyl, cyclononyl, cyclodecyl, cycloundecyl, cyclododecyl,
  • the "carbocyclic group” or "carbocyclic ring” is optionally further substituted with one or more substituents.
  • Heterocyclic group or “heterocyclic ring” refers to a saturated or unsaturated aromatic heterocyclic ring or non-aromatic heterocyclic ring. When it is an aromatic heterocyclic ring, its definition is the same as the definition of "heteroaryl” above; when When it is a non-aromatic heterocyclic ring, it can be a 3- to 10-membered (e.g. 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10-membered) monocyclic ring, 4 to 12-membered (e.g. 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 membered) bicyclic or 10 to 15 membered (e.g. 10, 11, 12, 13, 14, 15 membered) tricyclic ring system, and contains 1 to 4 (e.g.
  • heteroatoms selected from N, O or S preferably 3 to 8 membered heterocyclic groups.
  • One to four (for example, 1, 2, 3, 4) N and S optionally substituted in the "heterocyclic group” or “heterocyclic ring” can be oxidized to various oxidation states;
  • heterocyclic group” or “Heterocycle” can be attached to a heteroatom or carbon atom;
  • heterocyclic group” or “heterocycle” can be a bridged ring or a spiro ring.
  • heterocyclic group or “heterocyclic ring” include oxirane, glycidyl, aziridinyl, oxetanyl, azetidinyl, thietanyl , 1,3-dioxolane, 1,4-dioxolane, 1,3-dioxanyl, azepanyl, oxepanyl, thiepanyl, oxygen Azepine, diazepine, thiazepine, pyridinyl, piperidinyl, homopiperidinyl, furyl, thienyl, pyranyl, N-alkylpyrrolyl, pyrimidinyl, pyridine Azinyl, pyridazinyl, piperazinyl, homopiperazinyl, imidazolyl, piperidinyl, morpholinyl, thiomorpholinyl, thiazinyl, 1,3-
  • Cycloalkyl refers to a saturated cyclic hydrocarbon group whose ring can be 3 to 10 membered (e.g. 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 membered) monocyclic, 4 to 12 membered (e.g. 4 , 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 yuan) bicyclic or 10 to 20 yuan (e.g. 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 yuan) more
  • the ring carbon atoms preferably have 3 to 10 carbon atoms, more preferably 3 to 8 carbon atoms.
  • Non-limiting examples of "cycloalkyl” include cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cycloheptyl, cyclooctyl, cyclopropenyl, cyclobutenyl, cyclopentenyl, cyclohexyl Alkenyl, cycloheptenyl, 1,5-cyclooctadienyl, 1,4-cyclohexadienyl and cycloheptatrienyl, etc. When the cycloalkyl group is substituted, it may be further substituted with one or more substituents.
  • Heterocycloalkyl refers to a substituted or unsubstituted saturated non-aromatic ring group, which can be 3 to 8 membered (for example, 3, 4, 5, 6, 7, 8 membered) monocyclic, 4 to 12 membered (E.g. 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12-membered) bicyclic or 10 to 15-membered (e.g. 10, 11, 12, 13, 14, 15-membered) tricyclic ring system, including 1, 2 or 3 heteroatoms selected from N, O or S, preferably 3 to 8 membered heterocyclic group.
  • the 1, 2, or 3 N and S optionally substituted in the "heterocycloalkyl” ring can be oxidized to various oxidation states; the "heterocycloalkyl” can be attached to a heteroatom or a carbon atom; “heterocycle “Alkyl” may be a bridged ring or a spiro ring.
  • heterocycloalkyl include oxirane ethyl, aziridinyl, oxetanyl, azetidinyl, 1,3-dioxolane, 1,4-dioxolane, Oxolane, 1,3-dioxanyl, azepanyl, piperidinyl, piperidinyl, morpholinyl, thiomorpholinyl, 1,3-dithianyl, tetrahydrofuranyl , Tetrahydropyrrolyl, tetrahydroimidazolyl, tetrahydrothiazolyl, tetrahydropyranyl, azabicyclo[3.2.1]octyl, azabicyclo[5.2.0]nonyl, oxa Tricyclic[5.3.1.1]dodecyl, azaadamantyl and oxaspiro[3.3]heptyl.
  • “Pharmaceutically acceptable salt” or “pharmaceutically acceptable salt thereof” means that the compound of the present invention maintains the biological effectiveness and characteristics of the free acid or free base, and that the free acid is combined with a non-toxic inorganic base or An organic base is a salt obtained by reacting the free base with a non-toxic inorganic acid or organic acid.
  • “Pharmaceutical composition” refers to a mixture of one or more compounds of the present invention, their pharmaceutically acceptable salts or prodrugs, and other chemical components, where "other chemical components” refer to pharmaceutically acceptable compounds. Accepted carriers, excipients and/or one or more other therapeutic agents.
  • Carrier refers to a material that does not cause significant irritation to the organism and does not eliminate the biological activity and characteristics of the administered compound.
  • Excipient refers to an inert substance added to a pharmaceutical composition to facilitate the administration of a compound.
  • Non-limiting examples include calcium carbonate, calcium phosphate, sugar, starch, cellulose derivatives (including microcrystalline cellulose), gelatin, vegetable oils, polyethylene glycols, diluents, granulating agents, lubricants, adhesives Agent and disintegrant.
  • a “prodrug” refers to a compound of the present invention that can be converted into a biologically active compound by metabolism in the body.
  • the prodrug of the present invention is prepared by modifying the amino or carboxyl group in the compound of the present invention, and this modification can be removed by conventional operations or in vivo to obtain the parent compound.
  • the prodrug of the present invention is administered to a mammalian individual, the prodrug is split to form free amino or carboxyl groups.
  • Co-crystal refers to the crystal formed by the combination of active pharmaceutical ingredient (API) and co-crystal former (CCF) under the action of hydrogen bonds or other non-covalent bonds.
  • API active pharmaceutical ingredient
  • CCF co-crystal former
  • the pure state of API and CCF are both at room temperature. Solid, and there is a fixed stoichiometric ratio between the components.
  • a eutectic is a multi-component crystal, which includes both a binary eutectic formed between two neutral solids and a multi-element eutectic formed between a neutral solid and a salt or solvate.
  • Stepoisomers refer to isomers produced by the different arrangements of atoms in a molecule in space, including cis-trans isomers, enantiomers and conformational isomers.
  • Optional or “optionally” or “selective” or “selectively” means that the event or condition described later can but does not necessarily occur, and the description includes the situation in which the event or condition occurs and its failures. What happened.
  • heterocyclic group optionally substituted by an alkyl group means that the alkyl group may but does not necessarily exist, and the description includes the case where the heterocyclic group is substituted by an alkyl group and the case where the heterocyclic group is not substituted by an alkyl group.
  • DMSO dimethyl sulfoxide
  • DNA Deoxyribonucleotide
  • IC50 refers to the concentration of the compound when the activity of DNA-PK kinase is inhibited by 50%;
  • MPLC Medium-pressure silica gel column chromatography.
  • the reagents used in this application can all be obtained through commercial channels.
  • 2,4-Dichloropyrimidine-5-carboxylic acid ethyl ester 1A (30.00g, 136.4mmol), tetrahydro-2H-pyran-4-amine hydrochloride (18.66g, 136.4mmol) were dissolved in acetonitrile (600mL ), adding potassium carbonate (46.92g, 340.9mmol) for several times with stirring, and stirring at room temperature for 4h. After the reaction was monitored by TLC, it was filtered. The residue was washed with ethyl acetate (300 mL). The filtrate was concentrated to obtain a crude product.
  • the reaction solution is diluted with dichloromethane and filtered through Celite. After the filtrate is added water and spin-dried a small amount of organic solvent, a large amount of yellow solid precipitates out. After filtration, the solid is slurried with ethanol, and then filtered and spin-dried to obtain the title compound 3- Methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino) Benzoic acid 27b (light yellow solid, 2.15 g, yield 50%).
  • the mixture was heated to 40°C and reacted for 1h, and then methylamine hydrochloride (220mg, 3.3mmol) was added.
  • the reaction system was stirred at 40°C for 3 hours. TLC monitors until the reaction is complete, adds water and an appropriate amount of dichloromethane for extraction three times, combines the organic phases, and drys with anhydrous sodium sulfate.
  • the crude product obtained by filtration and concentration was slurried with methanol.
  • the solid is collected by concentration under reduced pressure.
  • the obtained solid is added to 11mL of dichloromethane/ammonia (10:1) under ice bath.
  • the mixture is stirred at room temperature for 1 hour and then concentrated under reduced pressure to obtain a crude product.
  • the crude product is separated and purified by medium pressure preparation.
  • the title compound 5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2hydro-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7hydro- Purin-2-yl)amino)thiophen-2-carboxamide compound 42 (white solid, 140 mg, yield 46%).
  • 4-Amino-2-trifluoromethylbenzonitrile 48a (1.1 g, 5.9 mmol) was dissolved in DMF (10 mL), and NBS (1.05 g, 5.9 mmol) was added to the reaction mixture at room temperature and stirred for 0.5 hours. TLC monitors to the end of the reaction, the reaction solution is poured into purified water (100mL), a large amount of solid precipitates out, filtered and spin-dried under reduced pressure to obtain the title compound 4-amino-5-bromo-2-(trifluoromethyl)benzonitrile 48b (yellow solid, 1.5 g, yield 96.1%).
  • the seventh step is a first step.
  • the 2-chloro-7-methyl-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one 55b (200mg, 0.74mmol), 5- Amino-4 picoline-2(1H)-one (185mg, 1.48mmol), cesium carbonate (525mg, 1.48mmol) and Brettphos G3Pd (67mg, 0.074mmol) were added to the dry reaction flask, and then 1,4-bis Oxane (20 mL) was replaced with nitrogen three times and reacted at 110°C for 2.5 hours. The reaction was monitored by TLC until the end of the reaction.
  • TLC monitors to the end of the reaction, after filtering, wash the filter cake with an appropriate amount of ethanol, concentrate the filtrate, adjust the pH to about 8 with saturated sodium bicarbonate, and use silica gel column chromatography to separate and purify the dichloromethane: methanol (v/v) 10:1) , The title compound 5-amino-1,4-lutidine-2(1H)-one 56b (dark green solid, 2.5 g, yield 58.55%) was obtained.
  • the 2-chloro-7-methyl-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one 56b (200mg, 0.74mmol), 5- Amino-1,4-dimethyl-3,4-dihydropyridine-2(1H)-one (206mg, 1.48mmol), cesium carbonate (525mg, 1.48mmol) and Brettphos G3Pd (67mg, 0.074mmol) were added to the dry Add 1,4-dioxane (20 mL) to the reaction flask, replace with nitrogen three times, and react at 110°C for 2.5 hours. The reaction was monitored by TLC until the end of the reaction.
  • TLC monitors the completion of the reaction. Add 50 mL of saturated aqueous sodium bicarbonate solution and dichloromethane to the reaction solution, concentrate the organic layer with anhydrous sodium sulfate, and concentrate under reduced pressure to obtain the title compound crude 4-((trans-3-carbamoylcyclobutyl) Amino)-2-(methylthio)pyrimidine-5-carboxylic acid ethyl ester 61b (yellow viscous liquid, 12.5 g, yield 96.5%).
  • the seventh step is a first step.

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Abstract

本申请涉及咪唑啉酮衍生物及其在医药上的应用，具体而言涉及如通式(I)所示的嘧啶衍生物，或者其立体异构体、溶剂化物、代谢产物、前药、药学上可接受的盐或共晶，包含其的药物组合物以及本申请的化合物或组合物在制备用于治疗癌症的药物中的的用途。

Description

咪唑啉酮衍生物及其在医药上的应用 技术领域
本发明涉及通式(I)所示的咪唑啉酮衍生物，或者其立体异构体、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，其药物组合物以及其作为DNA-PK抑制剂用途。
背景技术
DNA依赖的蛋白激酶(DNA-dependent protein kinase，DNAPK)是由Ku70/Ku80异二聚体和DNA依赖的蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)构成的DNA-PK酶复合物。该酶复合物需要在DNA参与下才能被激活发挥出相应的功能(George et al.,2019)。作为一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，DNA-PK属于PIKK(phosphatidylinositol 3-kinase-related kinase)家族成员，它不仅在修复细胞内DNA双链断裂(double-strand breaks；DSBs)和细胞DNA重组或抗体DNA重排(V(D)J重组)过程中具有重要作用，还参与染色体修饰、转录调节、端粒维持等生理过程。
在正常生理过程中，多种因素可能导致DNA发生DSBs：如体细胞DNA重组过程中DSBs常常作为中间产物出现，这一生理过程对所有脊椎动物的功能性免疫系统的形成十分重要；DNA复制中复制叉遇到受损的碱基，也可能造成单链或双链断裂；DNA也可能因为正常代谢过程中活性氧(reactive oxygen species；ROS)的攻击而产生DSBs(Cannan& Pederson,2016)。此外，还有多种外源性因素也可能导致DSBs，如电离辐射(Ionizing radiation，IR)和化疗试剂(如拓扑异构酶II抑制剂)等(George et al.,2019)。如果DSBs未被修复或者错误地修复，将会产生突变和/或染色体畸变，最终导致细胞死亡。为了应对DSBs带来的危害，真核细胞已进化出多种机制来修复受损的DNA以维持细胞的活力和基因组的稳定性。在真核细胞中，最主要的DNA修复方式是非同源末端连接(non-homologous end-joining，NHEJ)。这种直接将断裂DNA连接起来的方式并不需要有同源DNA片段参与，可以发生在细胞周期的任何阶段。NHEJ是由DNA-PK介导的需要多种蛋白与信号通路共同参与的动态过程，基本过程如下：(1)Ku70/Ku80异二聚体识别并结合至双链DNA断裂末端；(2)募集DNA-PKcs、XRCC4-DNA连接酶IV复合体等蛋白至DNA断裂双链的两侧；(3)DNA-PKcs自身磷酸化，激活自身的激酶活性；(4)DNA-PKcs作为粘合剂连接断裂DNA的两端，防止核酸外切酶对DNA的降解作用；(5)对DNA进行加工以移除断裂处的不可连接末端或其他损伤形式；(6)XRCC4-DNA连接酶IV复合体修复DNA末端(某些情况下，在连接之前可能还需要DNA聚合酶来合成新的末端)。当DNA-PKcs发生磷酸化后，可诱导蛋白构象发生改变，调节NHEJ过程中多种蛋白的活性(如Artemis、Ku70、Ku80、DNA ligase)，这对DNA修复过程至关重要。因此，磷酸化的DNA-PKcs(pDNA-PKcs)常常作为细胞DSBs的标志物。
已有研究表明，DNA-PK活性与多种肿瘤的发生发展有关：如黑色素瘤中的DNA-PKcs可以促进血管再生和肿瘤的转移；多发性骨髓瘤中的DNA-PKcs表达量显著上调；放疗耐受的甲状腺肿瘤中的Ku蛋白的含量明显增加(Ihara,Ashizawa,Shichijo,& Kudo,2019)。因此，可以考虑将DNA-PK抑制剂与引起DNA损伤的抗肿瘤疗法(如IR、化疗试剂等)联用来提高效果。DNA-PK抑制剂的使用在一定程度上会干扰正常细胞的DNA修复功能，然而正常细胞体内还存在多种DNA修复途径作为补充，而肿瘤细胞面临强大的DNA复制压力且缺乏有效的DNA修复方式。通过抑制肿瘤细胞DNA-PK的活性能够提高其他抗肿瘤药物对肿瘤细胞的杀伤效果。如NU7441能显著增强引起DNA损伤的化疗药物对乳腺癌、非小细胞肺癌的效力，也能提高结直肠癌对IR和化疗的敏感性。
经多年研究，目前已经发现了多个DNA-PK抑制剂。最早发现具有DNA-PK激酶 抑制活性的化合物是一种真菌代谢产物——Wortmannin，IC50(DNA-PK)约15nM，该化合物同时在p53蛋白的乙酰化和磷酸化过程中也发挥着重要作用(Sarkaria et al.,1998)；之后报道的槲皮素衍生物LY294002也具有DNA-PK抑制活性(Maira,Stauffer,Schnell,& Garcia-Echeverria,2009)；后来基于LY294002结构又研发了NU7026、NU7441等新一代DNA-PK抑制剂。虽然已经证实了这些化合物对肿瘤细胞有着良好的杀伤效果，但它们存在高毒性、选择性差等问题而无法进入临床开发(Maira et al.,2009)。还曾报道过其他DNA-PK抑制剂，如OK1035、SU11752、PP121、KU-0060648等小分子化合物，但这些化合物同样存在对DNA-PK特异性较低等缺陷(George et al.,2019)。所以，目前仍然需要开发高活性、高特异性、低毒性的DNA-PK抑制剂，以更好满足临床需求。
发明内容
本申请的一个或多个实施方式提供新的咪唑啉酮衍生物，或者其立体异构体、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐、共晶或者前药，其药物组合物以及其作为DNA-PK抑制剂的用途。
本申请的一个或多个实施方式的化合物对DNA-PK具有高抑制活性且高选择性，能够作为化疗和放疗增敏剂预防和/或治疗癌症，改善疗效，同时降低毒副作用。
本申请的一个或多个实施方式提供通式(I)的化合物，或者其立体异构体、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶：
Figure PCTCN2021087912-appb-000001
其中：
Figure PCTCN2021087912-appb-000002
为
Figure PCTCN2021087912-appb-000003
Figure PCTCN2021087912-appb-000004
为单键或者双键；
Figure PCTCN2021087912-appb-000005
中的A、B、C、D各自独立地为C或者N，且A、B、C、D中至少一个为N；
R 0为H、C 1-6烷基或者环丙基，所述C 1-6烷基任选地进一步被1个或者多个选自卤素和氘的取代基取代；
R 1为
Figure PCTCN2021087912-appb-000006
Figure PCTCN2021087912-appb-000007
或者吡啶基，且R 1任选地进一步被1或2个选自D、卤素、氰基、羟基、C 1-6烷基和C 1-6烷氧基的取代基取代；
R 1a为H或者C 1-6烷基；
R 1b为H、OH、氰基或者羟基取代的C 1-6烷基；
R 2为H、氰基、＝O、羧基、-C(＝O)NR 2aR 2b、C 1-6烷氧基、C 1-6烷基、卤素、-S(＝O) 2R 2a或者-C(＝O)OC 1-6烷基；所述C 1-6烷基、-C(＝O)OC 1-6烷基或者C 1-6烷氧基任选地被1个或者多个选自卤素和氘的取代基取代；
R 2a和R 2b各自独立地为H、C 1-6烷基或者3至5元环烷基，其中所述C 1-6烷基任选地进一步被1个或者多个选自OH、D、卤素、C 1-6烷基和C 1-6烷氧基的取代基取代；
或者，R 2a和R 2b与其相连的原子一起形成5至6元杂环基，所述5至6元杂环基含有1、2或3个选自N、O和S的杂原子，所述5至6元杂环基任选地进一步被1个或者多个选自C 1-6烷基、OH和卤素的取代基取代；
R 3为卤素或者C 1-6烷基，所述C 1-6烷基任选地进一步被1至3个选自D和卤素的取代基取代；
m为0或者1；
n为0、1或者2；
x和y各自独立为1、2或者3；
条件是，
当
Figure PCTCN2021087912-appb-000008
R 0、R 2、R 3同时满足以下条件时，R 1不为
Figure PCTCN2021087912-appb-000009
Figure PCTCN2021087912-appb-000010
Figure PCTCN2021087912-appb-000011
为
Figure PCTCN2021087912-appb-000012
n为1，R 0为H或者甲基，R 2为甲氧基或者-S(＝O) 2Me，R 3为甲基。
在本申请的一个或多个实施方式中，R 1为
Figure PCTCN2021087912-appb-000013
Figure PCTCN2021087912-appb-000014
R 1a为H或者C 1-6烷基；
R 2为H、氰基、-C(＝O)NR 2aR 2b、C 1-6烷氧基、卤素、-S(＝O) 2R 2a或者-C(＝O)OC 1-6烷基；所述-C(＝O)OC 1-6烷基或者C 1-6烷氧基任选地被1个或者多个选自卤素和氘的取代基取代；
R 2a和R 2b各自独立地为H、C 1-6烷基或者3至5元环烷基，其中所述C 1-6烷基任选地进一步被1个或者多个选自OH、D或者卤素的取代基取代；
或者，R 2a和R 2b与其相连的原子一起形成5至6元杂环基，所述5至6元杂环基含有1至3个选自N、O和S的杂原子，所述杂环基任选地进一步被1个或者多个选自OH和卤素的取代基取代；
R 3为卤素或者C 1-6烷基，所述C 1-6烷基任选进一步被1至3个选自D和卤素的取代基取代；
m为0或者1；
n为0、1或者2；
条件是，
当
Figure PCTCN2021087912-appb-000015
R 0、R 2、R 3同时满足以下条件时，R 1不为
Figure PCTCN2021087912-appb-000016
Figure PCTCN2021087912-appb-000017
Figure PCTCN2021087912-appb-000018
为
Figure PCTCN2021087912-appb-000019
n为1，R 0为H或者甲基，R 2为甲氧基或者-S(＝O) 2Me，R 3为甲基。
在本申请的一个或多个实施方式中，
Figure PCTCN2021087912-appb-000020
为
Figure PCTCN2021087912-appb-000021
Figure PCTCN2021087912-appb-000022
R 0为H、C 1-4烷基或者环丙基，所述C 1-4烷基任选地进一步被1个或者多个选自卤素和D的取代基取代；
R 1为
Figure PCTCN2021087912-appb-000023
Figure PCTCN2021087912-appb-000024
R 1a为H、C 1-6烷基或者-C(＝O)C 1-6烷基；
R 2为H、氰基、-C(＝O)NR 2aR 2b、C 1-6烷氧基、卤素、-S(＝O) 2R 2a或者-C(＝O)OC 1-6烷基；所述-C(＝O)O烷基或者C 1-6烷氧基任选地被1个或者多个选自卤素和氘的取代基取代；
R 2a和R 2b各自独立地为H、C 1-6烷基或者3至5元环烷基，其中所述C 1-6烷基任选地进一步被1个或者多个选自OH、D和卤素的取代基取代；
或者，R 2a和R 2b与其相连的原子一起形成5至6元杂环基，所述5至6元杂环基含有1至3个选自N、O和S的杂原子，所述5至6元杂环基还任选地进一步被1个或者多个选自OH和卤素的取代基取代；
R 3为卤素或者C 1-6烷基，所述C 1-6烷基任选进一步被1至3个选自D和卤素的取代基取代；
m为0或者1；
n为0、1或者2；
条件是，
当
Figure PCTCN2021087912-appb-000025
R 0、R 2、R 3同时满足以下条件时，R 1不为
Figure PCTCN2021087912-appb-000026
Figure PCTCN2021087912-appb-000027
当
Figure PCTCN2021087912-appb-000028
为
Figure PCTCN2021087912-appb-000029
n为1，R 0为H或者甲基，R 2为甲氧基或者-S(＝O) 2Me，R 3为甲基。
在本申请的一个或多个实施方式中，本申请的化合物为通式(II)的化合物：
Figure PCTCN2021087912-appb-000030
其中：
R 0为H、C 1-6烷基或者环丙基，所述C 1-6烷基任选地进一步被1个或者多个选自卤素和氘的取代基取代；
R 1为
Figure PCTCN2021087912-appb-000031
Figure PCTCN2021087912-appb-000032
或者吡啶基，且R 1任选地进一步被1至2个选自D、卤素、氰基、羟基、C 1-6烷基和C 1-6烷氧基的取代基取代；
R 1a为H或者C 1-6烷基；
R 1b为H、OH、氰基或者羟基取代的C 1-6烷基；
R 2c为H、氰基、卤素或者C 1-6烷氧基；
R 2d为H、氰基、羧基、-C(＝O)NR 2aR 2b、C 1-6烷基、卤素、-S(＝O) 2R 2a或者-C(＝O)OC 1-6烷基；所述C 1-6烷基、-C(＝O)OC 1-6烷基任选地被1个或者多个选自卤素和氘的取代基取代；
R 2a、R 2b为H、C 1-6烷基或者3至5元环烷基，其中所述C 1-6烷基任选地进一步被1个或者多个选自OH、D、卤素、C 1-6烷基和C 1-6烷氧基的取代基取代；
或者，R 2a和R 2b与其相连的原子一起形成5至6元杂环基，所述5至6元杂环基含有1至3个选自N、O和S的杂原子，所述5至6元杂环基任选地进一步被1个或者多个选自C 1-6烷基、OH和卤素的取代基取代；
R 3为卤素或者C 1-6烷基，所述C 1-6烷基任选地进一步被1至3个选自D和卤素的取代基取代；
m为0或者1；
n为0、1或者2；
x和y各自独立为1、2或者3；
条件是，
当
Figure PCTCN2021087912-appb-000033
R 0、R 2、R 3同时满足以下条件时，R 1不为
Figure PCTCN2021087912-appb-000034
Figure PCTCN2021087912-appb-000035
Figure PCTCN2021087912-appb-000036
选自
Figure PCTCN2021087912-appb-000037
n为1，R 0为H或者甲基，R 2为甲氧基或者-S(＝O) 2Me，R 3为甲基。
在本申请的一个或多个实施方式中，本申请的化合物为通式(III)的化合物：
Figure PCTCN2021087912-appb-000038
其中，
R 0为H、C 1-6烷基或者环丙基，所述C 1-6烷基任选地进一步被1个或者多个选自卤素和氘的取代基取代；
R 1为
Figure PCTCN2021087912-appb-000039
Figure PCTCN2021087912-appb-000040
或者吡啶基，且R 1任选地进一步被1至2个选自D、卤素、氰基、羟基、C 1-6烷基和C 1-6烷氧基的取代基取代；
R 1b为H、OH、氰基或者羟基取代的C 1-6烷基；
R 2a和R 2b各自独立地为H、C 1-6烷基或者3至5元环烷基，其中所述C 1-6烷基任选地进一步被1个或者多个选自D或者卤素的取代基取代；
或者，R 2a和R 2b与其相连的原子一起形成5至6元杂环基，所述5至6元杂环基含有1至3个选自N、O和S的杂原子，所述5至6元杂环基任选地进一步被1个或者多个选自C 1-6烷基、OH和卤素的取代基取代；
R 2c为H、氰基、卤素或者C 1-6烷氧基，所述C 1-6烷氧基任选地被1个或者多个氘取代；
R 3为卤素或者C 1-6烷基，所述C 1-6烷基任选地进一步被1至3个选自D和者卤素的取代基取代；
m为0或者1；
n为0、1或者2；
x和y各自独立地为1、2或者3。
本申请的一个或多个实施方式提供通式(IV)的化合物，或者其立体异构体、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶：
Figure PCTCN2021087912-appb-000041
其中：
R 0为H、C 1-6烷基或者环丙基，所述C 1-6烷基任选地进一步被1个或者多个选自卤素和氘的取代基取代；
R 1为-(CH) m-4至7元碳环基、-(CH) m-4至7元杂环基、-(CH) m-8至12元桥环、-(CH) m-7至12元螺环，所述-(CH) m-4至7元碳环基、-(CH) m-4至7元杂环基、-(CH) m-8至12元桥环或者-(CH) m-7至12元螺环任选地进一步被1个或者多个选自羟基、氰基、卤素、＝O、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基和羟基取代的C 1-6烷基的取代基取代。
在本申请的一个或多个实施方式中，R 0为H、C 1-6烷基或者环丙基，所述C 1-6烷基任选地进一步被1个或者多个选自卤素和氘的取代基取代；
R 1为
Figure PCTCN2021087912-appb-000042
Figure PCTCN2021087912-appb-000043
或者吡啶基，且R 1任选地进一步被1至2个选自D、卤素、氰基、羟基、C 1-6烷基和C 1-6烷氧基的取代基取代；
R 1a为H或者C 1-6烷基；
R 1b为H、OH、氰基或者羟基取代的C 1-6烷基；
m为0或者1；
x和y各自独立为1、2或者3。
在本申请的一个或多个实施方式中，R 0为C 1-4烷基，所述C 1-4烷基任选地进一步被1个或者多个选自卤素和氘的取代基取代；
R 1为
Figure PCTCN2021087912-appb-000044
Figure PCTCN2021087912-appb-000045
在本申请的一个或多个实施方式中，本申请的化合物为：
Figure PCTCN2021087912-appb-000046
Figure PCTCN2021087912-appb-000047
Figure PCTCN2021087912-appb-000048
Figure PCTCN2021087912-appb-000049
本申请的一个或多个实施方式提供药物组合物，所述药物组合物包含：
(1)本申请的化合物或其立体异构体、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐、共晶或者前药；
(2)任选的一种或者多种其他活性成分；以及
(3)药学上可接受的载体和/或赋形剂。
本申请的一个或多个实施方式提供本申请的化合物或其立体异构体、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐、共晶或前药或者本申请的药物组合物在制备用于治疗癌症的药物中的用途。
在本申请的一个或多个实施方式中，所述用于治疗癌症的药物为DNA-PK抑制剂。
本申请的一个或多个实施方式提供(I’)所示的化合物，或者其立体异构体、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶：
Figure PCTCN2021087912-appb-000050
其中：
C选自苯基或者6元单环杂环基，所述的杂环基可以含有1至3个选自N的杂原子；
R 0选自H、C 1-6烷基或者环丙基，所述的烷基任选进一步被1个或者多个选自卤素或者氘的取代基取代；
R 1选自
Figure PCTCN2021087912-appb-000051
Figure PCTCN2021087912-appb-000052
R 1a选自H、C 1-6烷基或者-C(＝O)C 1-6烷基；
R 2选自氰基、羧基、-NR 2aR 2b、-C(＝O)NR 2aR 2b、C 1-6烷氧基、C 1-6烷基、卤素、-S(＝O) 2R 2a或者-C(＝O)OC 1-6烷基；所述的烷基或者烷氧基任选被1个或者多个选自卤素或者氘取代；
R 2a、R 2b选自H、C 1-6烷基或者3至5元环烷基，其中所述的C 1-6烷基任选进一步被1个或者多个选自OH、D、卤素、C 1-6烷基或者C 1-6烷氧基的取代基取代；
R 2a和R 2b可与其相连的原子形成5至6元的杂环，所述杂环可以含有1至3个选自N、O或者S的杂原子，所述的杂环还可以进一步被1个或者多个C 1-6烷基、OH或者卤素的取代基取代；
R 3选自卤素或者C 1-6烷基，所述的烷基任选进一步被1至3个选自D或者卤素的取代基取代；
选自0、1；
n选自0、1或者2；
条件是，C选自苯基或者6元单环杂环基，同时R 0选自H时，R 1不能为
Figure PCTCN2021087912-appb-000053
在本申请的一个或多个实施方式中，
Figure PCTCN2021087912-appb-000054
为
Figure PCTCN2021087912-appb-000055
Figure PCTCN2021087912-appb-000056
R 0选自H、C 1-4烷基或者环丙基，所述的烷基任选进一步被1个或者多个选自卤素或者D的取代基取代；
R 1选自
Figure PCTCN2021087912-appb-000057
Figure PCTCN2021087912-appb-000058
R 1a选自H、C 1-6烷基或者-C(＝O)C 1-6烷基；
R 2选自氰基、-C(＝O)NR 2aR 2b、C 1-6烷氧基、卤素、-S(＝O) 2R 2a或者-C(＝O)OC 1-6烷基；所述的烷基或者烷氧基任选被1个或者多个选自卤素或者氘取代；
R 2a、R 2b选自H、C 1-6烷基或者3至5元环烷基，其中所述的C 1-6烷基任选进一步被1个或者多个选自OH、D或者卤素的取代基所取代；
R 2a和R 2b可与其相连的原子形成5至6元的杂环，所述杂环可以含有1至3个选自N、O或者S的杂原子，所述的杂环还可以进一步被1个或者多个OH或者卤素的取代基所取代；
R 3选自卤素或者C 1-6烷基，所述的烷基任选进一步被1至3个选自D或者卤素的取代基所取代；
m选自0或者1；
n选自0、1或者2；
条件是，C选自苯基或者6元单环杂环基，同时R 0选自H时，R 1不能为
Figure PCTCN2021087912-appb-000059
本申请的一个或多个实施方式提供通式(I”)所示的化合物，或者其所有的立体异构体、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶：
Figure PCTCN2021087912-appb-000060
其中：
C选自苯基或者6元单环杂环基，所述的杂环基可以含有1至3个选自N的杂原子；
R 0选自H或者C 1-6烷基，所述的烷基任选进一步被1个或者多个选自卤素或者氘的取代基所取代；
R 1选自
Figure PCTCN2021087912-appb-000061
R 2选自氰基、羧基、-NR 2aR 2b、-C(＝O)NR 2aR 2b、C 1-6烷氧基、C 1-6烷基、卤素、-S(＝O) 2R 2a或者-C(＝O)OC 1-6烷基；所述的烷基任选被1个或者多个选自卤素或者氘取代；
R 2a、R 2b选自H、C 1-6烷基或者3至5元环烷基，其中所述的C 1-6烷基任选进一步被1个或者多个选自OH、卤素、C 1-6烷基或者C 1-6烷氧基的取代基所取代；
R 2a和R 2b可与其相连的原子形成5至6元的杂环，所述杂环可以含有1至3个选自N、O或者S的杂原子，所述的杂环还可以进一步被1个或者多个C 1-6烷基或者卤素的取代及所取代；
R 3选自卤素或者C 1-6烷基，所述的烷基任选进一步被1至3个选自D或者卤素的取代基所取代；
m选自0、1；
n选自1或者2。
在本申请的一个或多个实施方式中，
Figure PCTCN2021087912-appb-000062
选自
Figure PCTCN2021087912-appb-000063
Figure PCTCN2021087912-appb-000064
R 0选自H或者C 1-4烷基，所述的烷基任选进一步被1个或者多个选自卤素或者D的取代基所取代；
R 1选自R 1选自
Figure PCTCN2021087912-appb-000065
Figure PCTCN2021087912-appb-000066
R 2选自氰基、-C(＝O)NR 2aR 2b、C 1-6烷氧基、卤素、-S(＝O) 2R 2a或者-C(＝O)OC 1-6烷基；所述的烷基任选被1个或者多个选自卤素或者氘取代；
R 2a、R 2b选自H、C 1-6烷基或者3至5元环烷基，其中所述的C 1-6烷基任选进一步被1个或者多个选自OH或者卤素的取代基所取代；
R 2a和R 2b可与其相连的原子形成6元的杂环；
R 3选自卤素或者C 1-6烷基，所述的烷基任选进一步被1至3个选自D或者卤素的取代基所取代；
m选自0或者1；
n选自1或者2。
在本申请的一个或多个实施方式中，本申请的化合物为：
Figure PCTCN2021087912-appb-000067
Figure PCTCN2021087912-appb-000068
Figure PCTCN2021087912-appb-000069
本申请的一个或多个实施方式提供药物组合物，所述药物组合物包括：
(1)本申请的化合物或其立体异构体、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐、共晶或者前药；
(2)任选的一种或者多种其他活性成分；以及
(3)药学上可接受的载体和/或赋形剂。
本申请的一个或多个实施方式提供本申请的化合物或其立体异构体、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐、共晶或者前药、或者本申请的药物组合物在制备DNA-PK抑制剂中的用途。
本申请的一个或多个实施方式提供本申请通式(I)、(II)、(III)、(Ⅳ)、(I’)或(I”)的化合物或者上述具体结构或其立体异构体、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐、共晶或者前药或本申请的组合物，其用作药物。
本申请的一个或多个实施方式提供本申请通式(I)、(II)、(III)、(Ⅳ)、(I’)或(I”)的化合物或者上述具体结构或其立体异构体、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐、共晶或者前药或本申请的组合物，其用作治疗癌症的药物或用于预防和/或治疗癌症的方法。
本申请的一个或多个实施方式提供本申请通式(I)、(II)、(III)、(Ⅳ)、(I’)或(I”)的化合物或者上述具体结构或其立体异构体、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐、共晶或者前药或本申请的组合物，其用作DNA-PK抑制剂或用于抑制DNA-PK的方法。
本申请的一个或多个实施方式提供本申请通式(I)、(II)、(III)、(Ⅳ)、(I’)或(I”)的化合物或者上述具体结构或其立体异构体、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐、共晶或者前药或本申请的组合物，其用于治疗与DNA-PK相关的疾病。
本申请的一个或多个实施方式提供了抑制DNA-PK的方法，其包括将本申请通式(I)、(II)、(III)、(Ⅳ)、(I’)或(I”)的化合物或者上述具体结构或其立体异构体、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐、共晶或者前药或本申请的组合物与有此需要的对象接触。
本申请的一个或多个实施方式提供了治疗与DNA-PK相关的疾病的方法，其包括将本申请通式(I)、(II)、(III)、(Ⅳ)、(I’)或(I”)的化合物或者上述具体结构或其立体异构体、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐、共晶或者前药或本申请的组合物施用于有此需要的对象。
本申请的一个或多个实施方式提供了治疗癌症的方法，其包括将本申请通式(I)、(II)、(III)、(Ⅳ)、(I’)或(I”)的化合物或者上述具体结构或其立体异构体、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐、共晶或者前药或本申请的组合物施用于有此需要的对象。
除非有相反的陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。
本发明所述基团和化合物中所涉及的碳、氢、氧、硫、氮或F、Cl、Br、I均包括它们的同位素情况，及本发明所述基团和化合物中所涉及的碳、氢、氧、硫或氮任选进一步被一个或多个它们对应的同位素所替代，其中碳的同位素包括 12C、 13C和 14C，氢的同位素包括氕(H)、氘(D，又叫重氢)、氚(T，又叫超重氢)，氧的同位素包括 16O、 17O和 18O，硫的同位素包括 32S、 33S、 34S和 36S，氮的同位素包括 14N和 15N，氟的同位素包括 17F和 19F，氯的同位素包括 35Cl和 37Cl，溴的同位素包括 79Br和 81Br。
“烷基”是指1至20个碳原子的直链或支链饱和脂肪族烃基，优选为1至8个(例如1、2、3、4、5、6、7、8个)碳原子的烷基，更优选为1至6个碳原子的烷基，进一步优选为1至4个碳原子的烷基。非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、新丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基及其各种支链异构体；当烷基被取代基时，可以任选进一步被1个或者多个取代基所取代。“烷氧基”是指烷基中至少1个碳原子被氧原子取代所形成的基团。非限制性实施例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、正己氧基、环丙氧基和环丁氧基。所述的烷基定义与上文所述的“烷基”定义相同。
“烯基”是指含有1至10个(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10个)碳-碳双键，由2至20个碳原子组成的直链或者支链不饱和脂肪族烃基，优选2至12个(例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12个)碳原子的烯基，更优选2至8个碳原子的烯基，进一步优选2至6个碳原子的烯基。非限制性实施例包括乙烯基、丙烯-2-基、丁烯-2-基、丁烯-2-基、戊烯-2-基、戊烯-4-基、己烯-2-基、己烯-3基、庚烯-2-基、庚烯-3-基、庚烯-4-基、辛烯-3-基、壬烯-3-基、癸烯-4-基和十一烯-3-基。所述的烯基可以任选进一步被1个或者多个取代基所取代。
“炔基”是指含有1至10个(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、或10个)碳-碳叁键，由2至20个碳原子组成的直链或者支链不饱和脂肪族烃基，优选2至12个(例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个)碳原子的炔基，更优选2至8个碳原子的炔基，进一步优选2至6个碳原子的炔基。非限制性实施例包括乙炔基、丙炔-1-基、丙炔-2-基、丁炔-1-基、丁炔-2-基、丁炔-3-基、3,3-二甲基丁炔-2-基、戊炔-1-基、戊炔-2-基、己炔-1-基、1-庚炔-1-基、庚炔-3-基、庚炔-4-基、辛炔-3-基、壬炔-3-基、癸炔-4-基、十一炔-3-基、十二炔-4-基。所述的炔基可以任选进一步被一至多个取代基所取代。
“芳基”是指是指取代的或未取代的芳香环，其可以是5至8元(例如5、6、7、8元)的单环、5至12元(例如5、6、7、8、9、10、11、12元)双环或者10至15元(例如10、11、12、13、14、15元)三环体系，其可以是桥环或者螺环，非限制性实施例包括苯基、萘基。所述的芳基可以任选进一步被1个或者多个取代基所取代。
“杂芳基”是指取代的或未取代的芳香环，其可以是3至8元(例如3、4、5、6、7、8元)的单环、5至12元(例如5、6、7、8、9、10、11、12元)双环或者10至15元(例如10、11、12、13、14、15元)三环体系，且包含1至6个(例如1、2、3、4、5、6个)选自N、O或S的杂原子，优选5至8元杂芳基，杂芳基的环中选择性取代的1至4个(例如1、2、3、4个)N、S可被氧化成各种氧化态。杂芳基可以连接在杂原子或者碳原子上，杂芳基可以是桥环或者螺环，非限制性实施例包括环吡啶基、呋喃基、噻吩基、吡喃基、吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、哌啶基苯并咪唑基、苯并吡啶基、吡咯并吡啶基。杂芳基任选进一步被1个或多个取代基所取代。
“碳环基”或“碳环”是指饱和或者不饱和的芳香环或者非芳香环。当为芳香环时，其定义与上文“芳基”的定义相同；当为非芳香环时，其可以是3至10元(例如3、4、5、6、7、8、9、10元)的单环、4至12元(例如4、5、6、7、8、9、10、11、12元)双环或者10至15元(例如10、11、12、13、14、15元)三环体系，可以是桥环或者螺环，非限制性实施例包括环丙基、环丁基、环戊基、1-环戊基-1-烯基、1-环戊基-2-烯基、 1-环戊基-3-烯基、环己基、1-环己基-2-烯基、1-环己基-3-烯基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环辛基、环壬基、环癸基、环十一烷基、环十二烷基、
Figure PCTCN2021087912-appb-000070
Figure PCTCN2021087912-appb-000071
所述的“碳环基”或“碳环”任选进一步被1个或者多个取代基所取代。
“杂环基”或“杂环”是指饱和或不饱和的芳香性杂环或者非芳香性杂环，当为芳香性杂环时，其定义与上文“杂芳基”定义相同；当为非芳香性杂环时，其可以是3至10元(例如3、4、5、6、7、8、9、10元)的单环、4至12元(例如4、5、6、7、8、9、10、11、12元)双环或者10至15元(例如10、11、12、13、14、15元)三环体系，且包含1至4个(例如1、2、3、4个)选自N、O或S的杂原子，优选3至8元杂环基。“杂环基”或“杂环”的环中选择性取代的1至4个(例如1、2、3、4个)N、S可被氧化成各种氧化态；“杂环基”或“杂环”可以连接在杂原子或者碳原子上；“杂环基”或“杂环”可以为桥环或者螺环。“杂环基”或“杂环”的非限制性实施例包括环氧乙基、环氧丙基、氮杂环丙基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、硫杂环丁基、1,3-二氧戊环基、1,4-二氧戊环基、1,3-二氧六环基、氮杂环庚基、氧杂环庚基、硫杂环庚基、氧氮杂卓基、二氮杂卓基、硫氮杂卓基、吡啶基、哌啶基、高哌啶基、呋喃基、噻吩基、吡喃基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、哌嗪基、高哌嗪基、咪唑基、哌啶基、吗啉基、硫代吗啉基、噻噁烷基、1,3-二噻烷基、二氢呋喃基、二噻戊环基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、四氢吡咯基、四氢咪唑基、四氢噻唑基、四氢吡喃基、苯并咪唑基、苯并吡啶基、吡咯并吡啶基、苯并二氢呋喃基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、二氢吲哚基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二氧杂环己基、1,3-二氧戊基、吡唑啉基、二噻烷基、二噻茂烷基、二氢噻吩基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、1,2,3,4-四氢异喹啉基、3-氮杂双环[3.1.0]己基、3-氮杂双环[4.1.0]庚基、氮杂双环[2.2.2]己基、3H-吲哚基喹嗪基、N-吡啶基尿素、1,1-二氧硫代吗啉基、氮杂二环[3.2.1]辛烷基、氮杂二环[5.2.0]壬烷基、氧杂三环[5.3.1.1]十二烷基、氮杂金刚烷基和氧杂螺[3.3]庚烷基。所述的“杂环基”或“杂环”可以任选进一步被1个或者多个取代基所取代。
“环烷基”是指饱和的环烃基，其环可以为3至10元(例如3、4、5、6、7、8、9、10元)的单环、4至12元(例如4、5、6、7、8、9、10、11、12元)双环或者10至20元(例如10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20元)多环体系，环碳原子优选3至10个碳原子，进一步优选3至8个碳原子。“环烷基”非限制性实施例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基、环己烯基、环庚烯基、1,5-环辛二烯基、1,4-环己二烯基和环庚三烯基等。当环烷基被取代时，可以任选进一步被1个或者多个取代基所取代。
“杂环烷基”是指取代的或未取代的饱和非芳香环基，其可以是3至8元(例如3、4、5、6、7、8元)的单环、4至12元(例如4、5、6、7、8、9、10、11、12元)双环或者10至15元(例如10、11、12、13、14、15元)三环体系，且包含1、2或3个选自N、O或S的杂原子，优选3至8元杂环基。“杂环烷基”的环中选择性取代的1、2或3个N、S可被氧化成各种氧化态；“杂环烷基”可以连接在杂原子或者碳原子上；“杂环烷基”可以为桥环或者螺环。“杂环烷基”非限制性实施例包括环氧乙基、氮杂环丙基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、1,3-二氧戊环基、1,4-二氧戊环基、1,3-二氧六环基、氮杂环庚基、哌啶基、哌叮基、吗啉基、硫代吗啉基、1,3-二噻烷基、四氢呋喃基、四氢吡咯基、四氢咪唑基、四氢噻唑基、四氢吡喃基、氮杂二环[3.2.1]辛烷基、氮杂二环[5.2.0]壬烷基、氧杂三环[5.3.1.1]十二烷基、氮杂金刚烷基和氧杂螺[3.3]庚烷基。
当上文所述的“烷基”、“烷氧基”、“烯基”、“炔基”、“芳基”、“杂芳基”、“碳环基”、 “碳环”、“杂环基”、“杂环”、“环烷基”、“杂环烷基”或者“杂环基”被取代时，可以选进一步被0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或者10个选自F、Cl、Br、I、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、C 1-6烷基氨基、＝O、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、-NR q4R q5、＝NR q6、-C(＝O)OC 1-6烷基、-OC(＝O)C 1-6烷基、-C(＝O)NR q4R q5、C 3-8环烷基、C 3-8杂环烷基、C 6-10芳基、C 5-10杂芳基、-C(＝O)OC 6-10芳基、-OC(＝O)C 6-10芳基、-OC(＝O)C 5-10杂芳基、-C(＝O)OC 5-10杂芳基、-OC(＝O)C 3-8杂环烷基、-C(＝O)OC 3-8杂环烷基、-OC(＝O)C 3-8环烷基、-C(＝O)OC 3-8环烷基、-NHC(＝O)C 3-8杂环烷基、-NHC(＝O)C 6-10芳基、-NHC(＝O)C 5-10杂芳基、-NHC(＝O)C 3-8环烷基、-NHC(＝O)C 3-8杂环烷基、-NHC(＝O)C 2-6烯基或者-NHC(＝O)C 2-6炔基的取代基所取代，且其中所述的取代基C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 3-8环烷基、C 3-8杂环烷基、C 6-10芳基、C 5-10杂芳基、-NHC(＝O)C 6-10芳基、-NHC(＝O)C 5-10杂芳基、-NHC(＝O)C 3-8杂环烷基或者-NHC(＝O)C 3-8环烷基任选进一步被1至3个选自OH、F、Cl、Br、I、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、-NR q4R q5或者＝O的取代基所取代；R q1选自C 1-6烷基、C 1-6烷氧基或者C 6-10芳基；R q2、R q3选自H或者C 1-6烷基；其中，R q4、R q5选自H、C 1-6烷基、-NH(C＝NR q1)NR q2R q3、-S(＝O) 2NR q2R q3、-C(＝O)R q1或者-C(＝O)NR q2R q3，其中所述的C 1- 6烷基任选进一步被1个或者多个选自OH、F、Cl、Br、I、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 6- 10芳基、C 5-10杂芳基、C 3-8环烷基或者C 3-8杂环烷基的取代基所取代；或者R q4与R q5及N原子形成一个3至8元杂环，所述杂环可以含有1个或者多个选自N、O或者S的杂原子。
“药学上可接受的盐”或者“其药学上可接受的盐”是指本发明化合物保持游离酸或者游离碱的生物有效性和特性，且所述的游离酸通过与无毒的无机碱或者有机碱，所述的游离碱通过与无毒的无机酸或者有机酸反应获得的盐。
“药物组合物”是指一种或多种本发明所述化合物、其药学上可接受的盐或前药和其它化学组分形成的混合物，其中，“其它化学组分”是指药学上可接受的载体、赋形剂和/或一种或多种其它治疗剂。
“载体”是指不会对生物体产生明显刺激且不会消除所给予化合物的生物活性和特性的材料。
“赋形剂”是指加入到药物组合物中以促进化合物给药的惰性物质。非限制性实施例包括碳酸钙、磷酸钙、糖、淀粉、纤维素衍生物(包括微晶纤维素)、明胶、植物油、聚乙二醇类、稀释剂、成粒剂、润滑剂、粘合剂和崩解剂。
“前药”是指可经体内代谢转化为具有生物活性的本发明化合物。本发明的前药通过修饰本发明化合物中的氨基或者羧基来制备，该修饰可以通过常规的操作或者在体内被除去，而得到母体化合物。当本发明的前药被施予哺乳动物个体时，前药被割裂形成游离的氨基或者羧基。
“共晶”是指活性药物成分(API)和共晶形成物(CCF)在氢键或其他非共价键的作用下结合而成的晶体，其中API和CCF的纯态在室温下均为固体，并且各组分间存在固定的化学计量比。共晶是一种多组分晶体，既包含两种中性固体之间形成的二元共晶，也包含中性固体与盐或溶剂化物形成的多元共晶。
“立体异构体”是指由分子中原子在空间上排列方式不同所产生的异构体，包括顺反异构体、对映异构体和构象异构体。
“任选”或“任选地”或“选择性的”或“选择性地”是指随后所述的事件或状况可以但未必发生，该描述包括其中发生该事件或状况的情况及其中未发生的情况。例如，“任选地被烷基取代的杂环基”是指该烷基可以但未必存在，该描述包括其中杂环基被烷基取代的情况，及其中杂环基未被烷基取代的情况。
具体实施方式
以下实施例详细说明本发明的技术方案，但本发明的保护范围包括但是不限于此。
DMSO：二甲基亚砜；
DTT：二硫苏糖醇；
ATP：三磷酸腺苷；
DNA：脱氧核糖核苷酸；
IC50：是指DNA-PK激酶的活性受到50％抑制时化合物的浓度；
MPLC：中压硅胶柱色谱。
本申请中使用的试剂均可通过市售途径获得。
实施例
中间体1
2-氯-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(中间体1)
2-chloro-7-methyl-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
Figure PCTCN2021087912-appb-000072
第一步：
2-氯-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(1B)
ethyl 2-chloro-4-((tetrahydro-2H-pyran-4-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(30.00g，136.4mmol)、四氢-2H-吡喃-4-胺盐酸盐(18.66g，136.4mmol)溶解于乙腈(600mL)，搅拌多次加入碳酸钾(46.92g，340.9mmol)，在室温搅拌4h。TLC监测反应完毕后过滤，滤渣用乙酸乙酯(300mL)清洗，将滤液浓缩得粗品，粗品通过柱分离提纯(正己烷：乙酸乙酯(v/v)＝1:1)得标题化合物2-氯-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯1B(白色固体，30.0g，产率77.4％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.62(s,1H),8.32(d,1H),4.30(q,2H),4.21-4.16(m,1H),3.86-3.83(m,2H),3.48-3.42(m,2H),1.88-1.85(m,2H),1.62-1.53(m,2H),1.31(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝286.10[M+1]
第二步：
2-氯-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)嘧啶-5-羧酸(1C)
2-chloro-4-((tetrahydro-2H-pyran-4-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylic acid
将2-氯-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯1B(30g，104.99mmol)溶解于四氢呋喃/水(200mL/200mL)中，加入氢氧化锂(5.03g，209.99mmol)，室温搅拌1h。TLC监测反应完全，浓缩除去四氢呋喃，用6N盐酸调pH为5，有白色固体析出，过滤， 滤饼用石油醚洗两次，搜集固体得到标题化合物2-氯-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)嘧啶-5-羧酸1C(白色固体，15.0g，产率55.44％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.60(s,1H),8.54(d,1H),4.20-4.15(m,1H),3.86-3.83(m,2H),3.48-3.42(m,2H),1.89-1.86(m,2H),1.60-1.50(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝258.10[M+1]
第三步：
2-氯-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(1D)
2-chloro-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)嘧啶-5-羧酸1C(15g，58.21mmol)溶解于二甲基乙酰胺(150mL)，加入三乙胺(7.38mL，58.21mmol)、叠氮磷酸二苯酯(12.06mL，58.21mmol)，随后逐步升温至120℃搅拌反应1.5h。TLC监测反应完毕，将反应液倒入冰水中，过滤搜集固体，水洗3次，真空浓缩干燥得到标题化合物2-氯-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮1D(白色固体，13.0g，产率87.69％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ11.63(s,1H),8.11(s,1H),4.43-4.37(m,1H),3.98-3.94(m,2H),2.59-2.38(m,2H),1.73-1.65(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝255.10[M+1]
第四步：
2-氯-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(中间体1)
2-chloro-7-methyl-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮1D(5g，19.63mmol)溶解于二甲基甲酰胺(50mL)，在0℃下加入硫酸二甲酯(2.48g，19.63mmol)和碳酸铯(9.5g，29.445mmol)，0℃搅拌1h。TLC监测至反应完全，将反应液倒入冰水中，有固体析出，过滤收集固体得到标题化合物2-氯-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮中间体1(白色固体，3.0g，产率56.87％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.36(s,1H),4.50-4.41(m,1H),3.99-3.95(m,2H),3.48-3.42(m,2H),3.34(s,3H),2.47-2.38(m,2H),1.70-1.66(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝268.10[M+1]
中间体2
4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(中间体2)
4-amino-2-fluoro-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000073
将4-氨基-2-氟-5-甲基苄腈2A(300mg，2mmol)、碳酸钾(41.4mg，0.3mmol)溶于1mL二甲亚砜中，冰浴下加入双氧水300μL，随后逐步升温至60℃搅拌2h。TLC监测至反应完全，向反应液中加入5mL水，有白色固体析出，过滤旋干水分，得到标题化合物4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(白色固体，160mg，产率47％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ7.37(d,1H),7.15(s,1H),6.96(s,1H),6.32(d,1H),5.70(s,1H),2.01(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝169.10[M+1]
实施例1
7-甲基-2-((2-甲基-4-(甲基磺酰基)苯基)氨基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(化合物1)
7-methyl-2-((2-methyl-4-(methylsulfonyl)phenyl)amino)-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
Figure PCTCN2021087912-appb-000074
将化合物1a(290mg，1.08mmol)、化合物中间体1(200mg，1.08mmol)、碳酸铯(703mg，2.16mmol)、[(2-二-环己基膦基-3,6-二甲氧基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯基)-2-(2′-氨基-1,1′-联苯基)]甲磺酸钯(II)甲磺酸酯(98mg，0.11mmol)溶解于二氧六环(10mL)，氮气保护并换气，在100℃搅拌4h。TLC监测至反应结束，将反应液倒入冰水中，收集固体经硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝100/1)，得到标题化合物7-甲基-2-((2-甲基-4-(甲基磺酰基)苯基)氨基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮化合物1(白色固体，50mg，产率11.09％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.67(s,1H),8.15(s,1H),8.11(d,1H),7.20(d,1H),7.67(dd,1H),4.47-4.39(m,1H),3.98(dd,2H),3.42(t,2H),3.32(s,3H),3.16(s,3H),2.57-2.49(m,2H),2.37(s,3H),1.67(dd,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝418.10[M+1]
实施例2
3-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物2)
3-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000075
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物3-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物2(白色固体，100mg，产率 19.64％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.48(s,1H),8.10(s,1H),7.82(d,2H),7.71(s,1H),7.66(dd,1H),7.16(s,1H),4.44-4.37(m,1H),3.97(dd,2H),3.41(t,2H),3.33(s,3H),2.57-2.46(m,2H),2.29(s,3H),1.65(dd,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝383.20[M+1]
实施例3
7-甲基-2-((2-甲基-4-(三氟甲基)苯基)氨基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(化合物3)
7-methyl-2-((2-methyl-4-(trifluoromethyl)phenyl)amino)-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
Figure PCTCN2021087912-appb-000076
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物7-甲基-2-((2-甲基-4-(三氟甲基)苯基)氨基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮化合物3(白色固体，50mg，产率21.5％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.62(s,1H),8.12(s,1H),8.00(d,1H),7.53(s,1H),7.47(d,1H),4.47-4.38(m,1H),3.97(dd,2H),3.42(t,2H),3.31(s,3H),2.57-2.40(m,2H),2.35(s,3H),1.69-1.65(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝408.20[M+1]
实施例4
2-((4-氯-2-甲基苯基)氨基)-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(化合物4)
2-((4-chloro-2-methylphenyl)amino)-7-methyl-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
Figure PCTCN2021087912-appb-000077
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物2-((4-氯-2-甲基苯基)氨基)-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮化合物4(白色固体，50mg，产率18.94％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.49(s,1H),8.04(s,1H),7.60(d,1H),7.26(d,1H),7.17(dd,1H),4.43-4.35(m,1H),3.96(dd,2H),3.40(t,2H),3.29(s,3H),2.50-2.44(m,2H),2.23(s,3H),1.64(dd,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝374.10[M+1]
实施例5
3-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苄腈(化合物5)
3-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzonitrile
Figure PCTCN2021087912-appb-000078
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物3-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苄腈化合物5(白色固体，50mg，产率18.13％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.68(s,1H),8.15(s,1H),8.06(d,1H),7.63(s,1H),7.57(dd,1H),4.46-4.38(m,1H),3.97(dd,2H),3.42(t,2H),3.32(s,3H),2.55-2.45(m,2H),2.32(s,3H),1.66(dd,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝365.20[M+1]
实施例6
3-甲基-4-((7-(甲基-d3)-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲腈(化合物6)
3-methyl-4-((7-(methyl-d3)-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzonitrile
Figure PCTCN2021087912-appb-000079
第一步：
2-氯-7-(甲基-d3)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(6a)
2-chloro-7-(methyl-d3)-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮1D(1.0g，3.93mmol)溶解于 二甲基亚砜(20mL)中，室温下加入碳酸铯(2.03g，7.86mmol)，然后在0℃加入氘代碘甲烷(0.45g，3.93mmol)，室温反应2h。TLC监测至反应结束，向反应液中加入5mL水，用乙酸乙酯萃取3次，有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩后有固体析出，过滤旋干通过中压制备得到标题化合物2-氯-7-(甲基-d3)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮6a(白色固体，0.36g，产率34.66％)。
1HNMR(400MHz DMSO)δ8.36(s,1H),4.50-4.41(m,1H),3.99-3.95(m,2H),3.48-3.42(m,2H),2.47-2.38(m,2H),1.70-1.66(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝272.10[M+1]
第二步：
3-甲基-4-((7-(甲基-d3)-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲腈(化合物6)
3-methyl-4-((7-(methyl-d3)-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzonitrile
将4-氨基-3-甲基苄腈5a(200mg，1.51mmol)、2-氯-7-(甲基-d3)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮6a(330mg，1.21mmol)、碳酸铯(980mg，3.02mmol)、[(2-二-环己基膦基-3,6-二甲氧基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯基)-2-(2′-氨基-1,1′-联苯基)]甲磺酸钯(II)甲磺酸酯(140mg，0.15mmol)溶解于二氧六环(10mL)，氮气保护并换气，在100℃搅拌4h。TLC监测反应结束，将反应液倒入冰水中，收集固体，将固体用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝100/1)，得到化合物3-甲基-4-((7-(甲基-d3)-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲腈化合物6(浅灰色固体，99mg，产率17.56％)。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.55(d,1H),7.92(s,1H),7.55(dd,1H),7.46(d,1H),7.09(s,1H),4.60-4.50(m,1H),4.14(dd,2H),3.60-3.48(m,2H),2.83-2.67(m,2H),2.39(s,3H),1.80-1.70(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝368.20[M+1]
实施例7
2-((4-氟-2-甲基苯基)氨基)-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(化合物7)
2-((4-fluoro-2-methylphenyl)amino)-7-methyl-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
Figure PCTCN2021087912-appb-000080
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物2-((4-氟-2-甲基苯基)氨基)-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮化合物7(白色固体，50mg，产率17.51％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.45(s,1H),7.99(s,1H),7.46-7.43(m,1H),7.05(dd,1H),6.98-6.93(m,1H),4.41-4.33(m,1H),3.97-3.93(dd,2H),3.4(t,2H),3.27(s,3H),2.54-2.44(m,2H),2.2(s,3H),1.63(dd,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝358.20[M+1]
实施例8
2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苄腈(化合物8)
2-fluoro-5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzonitrile
Figure PCTCN2021087912-appb-000081
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苄腈化合物8(白色固体，18.1mg，产率10.3％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.79(s,1H),8.25(s,1H),8.22(d,1H),7.66(d,1H),4.48-4.41(m,1H),3.97(dd,2H),3.43(t,2H),3.32(s,3H),2.57-2.50(m,2H),2.32(s,3H),1.68(dd,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝383.10[M+1]
实施例9
2-(6-甲氧基-4-甲基吡啶-3-基)氨基)-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(化合物9)
2-((6-methoxy-4-methylpyridin-3-yl)amino)-7-methyl-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
Figure PCTCN2021087912-appb-000082
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物2-(6-甲氧基-4-甲基吡啶-3-基)氨基)-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮化合物9(白色固体，60mg，产率15.2％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.49(s,1H),8.04(s,1H),7.95(s,1H),6.70(s,1H),4.41-4.33(m,1H),3.95(dd,2H),3.81(s,3H),3.40(t,2H),3.27(s,3H),2.54-2.44(m,2H),2.15(s,3H),1.63(dd,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝371.20[M+1]
实施例10
3-氯-4-((7-甲基-8-氧-9-(四氢-2H-吡喃-4-酰基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-酰基)氨基)苯甲腈(化合物10)
3-chloro-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzonitrile
Figure PCTCN2021087912-appb-000083
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物3-氯-4-((7-甲基-8-氧-9-(四氢-2H-吡喃-4-酰基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-酰基)氨基)苯甲腈化合物10(白色固体，6.4mg，产率7.8％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.61(s,1H),8.44(d,1H),8.23(s,1H),8.05(d,1H),7.77(d,1H),4.47-4.41(m,1H),3.97(dd,2H),3.44(t,2H),1.67(d,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝385.10[M+1]
实施例11
3-甲基-4-[(9-(氧杂-4-基)-8)-氧-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基]苄腈(化合物11)
3-methyl-4-[(9-(oxepan-4-yl)-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino]benzonitrile
Figure PCTCN2021087912-appb-000084
将4-氨基-3-甲基苄腈5a(200mg，1.51mmol)、2-氯-9-(氧杂-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-8-酮1D(380mg，1.51mmol)、碳酸铯(980mg，3.02mmol)、[(2-二-环己基膦基-3,6-二甲氧基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯基)-2-(2′-氨基-1,1′-联苯基)]甲磺酸钯(II)甲磺酸酯(140mg，0.15mmol)溶解于二氧六环(10mL)中，氮气保护并换气，在100℃搅拌4h。TLC监测反应结束，将反应液倒入冰水中，收集固体经硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝100/1)得到标题化合物3-甲基-4-[(9-(氧杂-4-基)-8)-氧-8,9-二氢-7氢-嘌呤-2-基)氨基]苄腈化合物11(白色固体，120mg，产率22.68％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.09(s,1H),8.60(s,1H),8.08(d,1H),7.96(s,1H),7.62(d,1H),7.57(dd,1H),4.42-4.35(m,1H),3.98(dd,2H),3.41(t,2H),2.32(s,3H),1.64(dd,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝351.10[M+1]
实施例12
2-氟-3-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苄腈(化合物12)
2-fluoro-3-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzonitrile
Figure PCTCN2021087912-appb-000085
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物2-氟-3-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苄腈化合物12(浅黄色固体，25mg，产率7％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ9.00(s,1H),8.20-8.17(m,1H),7.91(d,1H),7.63(t,1H),4.47-4.39(m,1H),3.97(dd,2H),3.45-3.38(m,2H),2.55-2.45(m,2H),2.22(d,3H),1.67(dd,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝383.20[M+1]
实施例13
4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-3-(三氟甲基)苄腈(化合物13)
4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-3-(trifluoromethyl)benzonitrile
Figure PCTCN2021087912-appb-000086
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-3-(三氟甲基)苄腈化合物13(浅黄色固体，35mg，产率11％)。
1H NMR(400MHz CDCl 3)δ8.77(d,1H),8.94-8.80(m,4H),4.59-4.53(m,1H),4.14(dd,2H),3.54(t,2H),2.74-2.63(m,2H),1.74(d,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝419.20[M+1]
实施例14
3-乙基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苄腈(化合物14)
3-ethyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzonitrile
Figure PCTCN2021087912-appb-000087
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物3-乙基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苄腈化合物14(浅黄色固体，27mg，产率10％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.71(s,1H),8.13(d,1H),8.00(d,1H),7.61-7.57(m,2H),4.46-4.38(m,1H),3.97(dd,2H),3.45-3.38(m,2H),2.74(q,2H),1.68-1.64(d,2H),1.15(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝379.20[M+1]
实施例15
4-甲基-3-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苄腈(化合物15)
4-methyl-3-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzonitrile
Figure PCTCN2021087912-appb-000088
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物4-甲基-3-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苄腈化合物15(浅黄色固体，27mg，产率10％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.67(s,1H),8.14(d,2H),7.39(d,2H),4.41-4.37(m,1H),3.45-3.38(m,2H),3.31(s,3H),2.51-2.47(m,2H),2.35(s,3H),1.70-1.66(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝365.20[M+1]
实施例16
3-氯-5-氟-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物16)
3-chloro-5-fluoro-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000089
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物3-氯-5-氟-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物16(浅黄色固体，20mg，产率6％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ10.62(s,1H),8.33(t,1H),7.82(t,1H),7.69(dd,1H),4.47-4.39(m,1H),3.96(dd,2H),3.45-3.39(m,1H),3.36(s,3H),2.60-2.53(m,2H),1.64(dd,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝421.20[M+1]
实施例17
4-甲基-5-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)吡啶腈(化合物17)
4-methyl-5-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)picolinonitrile
Figure PCTCN2021087912-appb-000090
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物4-甲基-5-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)吡啶腈化合物17(白色固体，44mg，产率29.3％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ9.12(s,1H),9.05(s,1H),8.17(s,1H),7.87(s,1H),4.46-4.39(m,1H),3.97(dd,2H),3.41(t,2H),3.32(s,3H),2.34(s,3H),1.67(d,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝366.10[M+1]
实施例18
4-甲基-5-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)吡啶酰胺(化合物18)
4-methyl-5-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)picolinamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000091
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物4-甲基-5-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)吡啶酰胺化合物18(白色固体，40mg，产率28.1％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ9.04(s,1H),8.89(s,1H),8.12(s,1H),8.05(s,1H),7.95(s,1H),7.57(s,1H),4.44-4.38(m,1H),3.97(dd,2H),3.44(t,2H),3.31(s,3H),2.36(s,3H),1.67(d,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝384.20[M+1]
实施例19
2-(5-甲氧基-3-甲基吡啶-2-氨基)-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(化合物19)
2-((5-methoxy-3-methylpyridin-2-yl)amino)-7-methyl-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
Figure PCTCN2021087912-appb-000092
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物2-(5-甲氧基-3-甲基吡啶-2-氨基)-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮化合物19(白色固体，12mg，产率9.6％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.73(s,1H),7.96(s,1H),7.90(d,1H),7.28(d,1H),4.38-4.31(m,1H),3.94(dd,2H),3.81(s,3H),3.39(t,2H),3.27(s,3H),2.50-2.42(m,2H),2.15(s,3H),1.61(dd,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝371.20[M+1]
实施例20
5-甲基-6-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基))-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)烟腈(化合物20)
5-methyl-6-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)nicotinonitrile
Figure PCTCN2021087912-appb-000093
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物5-甲基-6-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基))-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)烟腈化合物20(白色固体，85mg，产率20.4％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ9.50(s,1H),8.49(d,1H),8.21(s,1H),7.98(d,1H),4.44-4.36(m,1H),3.96(dd,2H),3.41(t,2H),3.34(s,3H),2.56-2.45(m,2H),2.24(s,3H),1.65(dd,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝366.20[M+1]
实施例21
2-((6-甲氧基-2-甲基吡啶-3-基)氨基)-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(化合物21)
2-((6-methoxy-2-methylpyridin-3-yl)amino)-7-methyl-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
Figure PCTCN2021087912-appb-000094
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物2-((6-甲氧基-2-甲基吡啶-3-基)氨基)-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮化合物21(白色固体，100mg，产率62.17％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.50(s,1H),7.97(s,1H),7.65(d,1H),6.61(d,1H),4.41-4.32(m,1H),3.95(dd,2H),3.81(s,3H),3.39(t,2H),3.27(s,3H),2.51-2.45(m,2H),2.31(s,3H),1.63(dd,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝371.20[M+1]
实施例22
5-甲基-4-[(7-甲基-9-(氧杂-4-基)-8-氧代-8,9-二氢-7氢-嘌呤-2-基)氨基]噻吩-2-羧酸甲酯(化合物22)
5-methyl-4-[(7-methyl-9-(oxepan-4-yl)-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino]thiophene-2-carboxylate
Figure PCTCN2021087912-appb-000095
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物5-甲基-4-[(7-甲基-9-(氧杂-4-基)-8-氧代-8,9-二氢-7氢-嘌呤-2-基)氨基]噻吩-2-羧酸甲酯化合物22(浅黄色固体，50mg，产率11.09％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.90(s,1H),8.08(s,1H),8.05(s,1H),4.40-4.35(m,1H),3.96(dd,2H),3.79(s,3H),3.41(t,2H),3.29(s,3H),2.37(s,3H),1.67-1.64(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝404.10[M+1]
实施例23
7-甲基-2-((4-甲基嘧啶-5-基)氨基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(化合物23)
7-methyl-2-((4-methylpyrimidin-5-yl)amino)-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
Figure PCTCN2021087912-appb-000096
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物7-甲基-2-((4-甲基嘧啶-5-基)氨基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮化合物23(白色固体，50mg，产率21.5％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.92(s,1H),8.90(s,1H),8.73(s,1H),8.0(s,1H),4.44-4.36(m,1H),3.96(dd,2H),3.40(t,2H),3.30(s,3H),2.53-2.46(m,2H),2.45(s,3H),1.65(dd,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝342.20[M+1]
实施例24
2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物24)
2-fluoro-5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000097
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物24(白色固体，9.5mg，产率8.6％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.54(s,1H),8.18(s,1H),7.89(d,1H),7.54(d,1H),7.46(s,1H),7.39(s,1H),4.48-4.40(m,1H),3.98(dd,2H),3.42(t,2H),2.58-2.53(m,2H),2.29(s,3H),1.67(dd,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝401.20[M+1]
实施例25
3-(甲基-d3)-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苄腈(化合物25)
3-(methyl-d3)-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzonitrile
Figure PCTCN2021087912-appb-000098
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物3-(甲基-d3)-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苄腈化合物25(淡黄色固体，40mg，产率29.4％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.68(s,1H),8.16(s,1H),8.07(d,1H),7.63(d,1H),7.59-7.57(m,1H),4.46-4.39(m,1H),3.99-3.97(m,2H),3.42(t,2H),3.32(s,3H),2.57-2.50(m,2H),1.69-1.65(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝368.20[M+1]
实施例26
3-氯-4-((7-甲基-8-氧-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物26)
3-chloro-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000099
第一步：
4-氨基-3-氯苯甲酰胺(26b)
4-amino-3-chlorobenzamide
将4-氨基-3-氯苯腈26a(2g，13mmol)、碳酸钾(271mg，1.9mmol)溶于6mL二甲亚砜中，冰浴下加入双氧水1.78mL，随后逐步升温至60℃搅拌2h。TLC监测至反应结束，向反应液中加入10mL水，有白色固体析出，过滤旋干水分，得到标题化合物4-氨基-3-氯苯甲酰胺26b(白色固体，1.0g，产率48％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ7.75(s,1H),7.57(d,1H),7.03(s,1H),7.60(d,1H),5.87(s,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝171.10[M+1]
第二步：
3-氯-4-((7-甲基-8-氧-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物26)
3-chloro-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物3-氯-4-((7-甲基-8-氧-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物26(白色固体，9.4mg，产率8.3％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.39(s,1H),8.27(d,1H),8.19(s,1H),7.99(d,1H),7.97(s,1H),7.83(dd,1H),7.36(s,1H),4.44-4.34(m,1H),3.98(dd,2H),3.44(t,2H),2.55-2.45(m,5H),1.68(dd,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝403.10[M+1]
实施例27
N,3-二甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物27)
N,3-dimethyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000100
第一步：
3-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酸(27b)
3-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzoic acid
将3-甲基4-氨基苯甲酸27a(2.0g，13.4mmol)、2-氯-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮中间体1(3.0g，11.2mmol)、碳酸铯(7.3g,22.4mmol)和催化剂Brettphos-G3-Pd(CAS：1470372-59-8)[(2-二-环己基膦基-3,6-二甲氧基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯基)-2-(2′-氨基-1,1′-联苯基)]甲磺酸钯(II)甲磺酸酯](1.0g，1.12mmol)加入到50mL烧瓶中，再加入30mL 1,4-二氧六环，反应体系置换氮气三次后，加热回流反应3小时。TLC监测至反应结束，反应液用二氯甲烷稀释后硅藻土过滤，滤液加水旋干少量有机溶剂后，大量黄色固体析出，过滤后固体用乙醇打浆，再过滤旋干，得到标题化合物3-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酸27b(浅黄色固体，2.15g，产率50％)。
LC-MS m/z(ESI)＝384.20[M+1]
第二步：
N,3-二甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物27)
N,3-dimethyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
将3-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酸27b(250mg，0.65mmol)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(187.2mg，0.98mmol)，1-羟基苯并三唑(132.4mg，0.98mmol)，三乙胺(333mg，3.3mmol)溶于2mL二氯甲烷中，加热混合液至40℃反应1h，然后再加入甲胺盐酸盐(220mg，3.3mmol)，反应体系于40℃搅拌3小时。TLC监测至反应完全，加入水和适量二氯甲烷萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥。过滤浓缩得到的粗品用甲醇打浆，过滤后固体旋干，得到标题化合物N,3-二甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物27(白色固体，21mg，产率8.1％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.48(s,1H),8.27(q,1H),8.10(s,1H),7.82(d,1H),7.67(d,1H),7.62(dd,1H),4.45-4.37(m,1H),3.97(dd,2H),3.42(t,2H),3.31(s,3H),2.76(d,3H),2.57-2.46(m,2H),2.30(s,3H),1.66(dd,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝397.20[M+1]
实施例28
N,N,3-三甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物28)
N,N,3-trimethyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000101
采用化合物27的合成方法制备得到标题化合物N,N,3-三甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物28(白色固体，65mg，产率24％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.49(s,1H),8.07(s,1H),7.72(d,1H),7.24(d,1H),7.19(dd,2H),4.40-4.36(m,1H),3.95(dd,2H),3.43-3.37(m,2H),3.30(s,3H),2.96(s,6H),2.55-2.45(m,2H),2.27(s,3H),1.65(dd,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝411.20[M+1]
实施例29
N-乙基-3-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物29)
N-ethyl-3-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000102
采用化合物27的合成方法制备得到标题化合物N-乙基-3-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物29(白色固体，67mg，产率24％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.47(s,1H),8.29(t,1H),8.10(s,1H),7.83(d,1H),7.68(d,1H),7.63(dd,1H),4.45-4.37(m,1H),3.97(dd,2H),3.45-3.38(m,2H),3.33-3.23(m,5H),2.57-2.46(m,2H),2.30(s,3H),1.68-1.64(m,2H),1.11(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝411.20[M+1]
实施例30
N-异丙基-3-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物30)
N-isopropyl-3-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000103
采用化合物27的合成方法制备得到标题化合物N-异丙基-3-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物30(白色固体，67mg，产率23％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.47(s,1H),8.10(s,1H),8.03(d,1H),7.82(d,1H),7.69(d,1H),7.63(dd,1H),4.44-4.38(m,1H),4.11-4.06(m 1H),3.97(dd,2H),3.42(t,2H),3.30(s,3H),2.54-2.46(m,2H),2.30(s,3H),1.66(dd,2H),1.16(d,6H)。
LC-MS m/z(ESI)＝425.20[M+1]
实施例31
N-环丙基-3-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物31)
N-cyclopropyl-3-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000104
采用化合物27的合成方法制备得到标题化合物N-环丙基-3-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物31(白色固体，135mg，产率46％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.46(s,1H),8.30(d,1H),8.10(s,1H),7.81(d,1H),7.68(d,1H),7.62(dd,1H),4.45-4.37(m,1H),3.97(dd,2H),3.42(t,2H),3.31(s,3H),2.86- 2.80(m,1H),2.57-2.46(m,2H),2.30(s,3H),1.67(dd,2H),0.69-0.65(m,2H),0.59-0.55(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝423.20[M+1]
实施例32
N-异丁基-3-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物32)
N-isobutyl-3-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000105
采用化合物27的合成方法制备得到标题化合物N-异丁基-3-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物32(白色固体，21mg，产率8％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.48(s,1H),8.28(t,1H),8.10(s,1H),7.82(d,1H),7.70(d,1H),7.64(dd,1H),4.45-4.37(m,1H),4.97(dd,2H),3.42(q,2H),3.30(s,3H),3.70(dd,2H),2.57-2.47(m,2H),2.30(s,3H),1.87-1.80(m,1H),1.67(dd,2H),0.92-0.86(m,6H)。
LC-MS m/z(ESI)＝439.30[M+1]
实施例33
7-甲基-2-((2-甲基-4-(吗啉-4-羰基)苯基)氨基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(化合物33)
7-methyl-2-((2-methyl-4-(morpholine-4-carbonyl)phenyl)amino)-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
Figure PCTCN2021087912-appb-000106
采用化合物27的合成方法制备得到标题化合物7-甲基-2-((2-甲基-4-(吗啉-4-羰基)苯 基)氨基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮化合物33(白色固体，21mg，产率7.1％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.52(s,1H),8.07(s,1H),7.73(d,1H),7.25(d,1H),7.19(dd,1H),4.42-4.36(m,1H),3.94(dd,2H),3.59-3.40(m,9H),3.29(s,3H),2.27(s,3H),1.67-1.62(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝453.20[M+1]
实施例34
2-((4-(3-羟基吡咯烷-1-羰基)-2-甲基苯基)氨基)-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(化合物34)
2-((4-(3-hydroxypyrrolidine-1-carbonyl)-2-methylphenyl)amino)-7-methyl-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
Figure PCTCN2021087912-appb-000107
采用化合物27的合成方法制备得到标题化合物2-((4-(3-羟基吡咯烷-1-羰基)-2-甲基苯基)氨基)-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮化合物34(白色固体，65mg，产率25％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.49(s,1H),8.08(s,1H),7.75(d,1H),7.29-7.46(m,2H),5.01-4.91(m,1H),4.43-4.22(m,2H),4.03-3.94(m,2H),3.64-3.37(m,5H),3.30(s,3H),2.55-2.49(m,2H),2.28(s,3H),2.05-1.79(m,2H),1.65(d,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝453.20[M+1]
实施例35
3-甲基-N-(甲基-d3)-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物35)
3-methyl-N-(methyl-d3)-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000108
Figure PCTCN2021087912-appb-000109
采用化合物27的合成方法制备得到标题化合物3-甲基-N-(甲基-d3)-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物35(白色固体，65mg，产率22％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.48(s,1H),8.24(s,1H),8.01(s,1H),7.82(d,1H),7.67(d,1H),7.62(dd,1H),4.44-4.38(m,1H),3.97(dd,2H),3.44-3.38(m,2H),3.30(s,3H),2.30(s,3H),1.68-1.64(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝400.20[M+1]
实施例36
2-氟-N,5-二甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2氢-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7氢-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物36)
2-fluoro-N,5-dimethyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000110
第一步：
4-氨基-2-氟-N,5-二甲基苯甲酰胺(36b)
4-amino-2-fluoro-N,5-dimethylbenzamide
将4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酸36a(200mg，1.18mmol)溶于氯化亚砜(10mL)，加热回流1h后浓缩蒸发掉氯化亚砜并加入10mL甲苯带走多余氯化亚砜，将其溶解于二氯甲烷10mL中，并滴加入碳酸钾(820mg，5.9mmol)和甲胺盐酸盐(399mg，5.90mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中，将反应液室温搅拌0.5小时。TLC监测至反应结束，旋干二氯甲烷，经柱层析分离纯化(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝20/1)得标题化合物4-氨基-2-氟-N,,5-二甲基苯甲酰胺36b(浅黄色固体，0.2g，产率92.84％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ7.52(t,1H),7.32(d,1H),6.32(d,1H),5.65(s,2H),2.72(d,3H),2.01(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝183.10[M+1]
第二步：
2-氟-N,5-二甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2氢-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7氢-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物36)
2-fluoro-N,5-dimethyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物2-氟-N,5-二甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2氢-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7氢-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物36(白色固体，17mg，产率14.95％)。
1H NMR(401MHz,DMSO-d 6)δ8.51(s,1H),8.17(s,1H),7.95(s,1H),7.89(d,1H),7.49(d,1H),4.43(t,1H),3.98(d,2H),3.32(s,3H),2.76(d,3H),2.29(s,3H),1.68(d,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝415.20[M+1]
实施例37
2-氟-5-甲基-N-(甲基-d3)-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2氢-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物37)
2-fluoro-5-methyl-N-(methyl-d3)-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000111
第一步：
4-氨基-2-氟-5-甲基-N-(甲基-d3)苯甲酰胺(37a)
4-amino-2-fluoro-5-methyl-N-(methyl-d3)benzamide
将4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酸36a(200mg，1.18mmol)溶于氯化亚砜(10mL)，加热回流1h后浓缩蒸发掉氯化亚砜并加入10mL甲苯带走多余氯化亚砜，将其溶解于二氯甲烷10mL中，并滴加入碳酸钾(820mg，5.9mmol)和氘带甲胺(200mg，5.90mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中，将反应液于室温反应0.5小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液经柱层析分离纯化(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝20/1)得标题化合物4-氨基-2-氟-5-甲基-N-(甲基-d3)苯甲酰胺37a(浅黄色固体，0.2g，产率91.51％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ7.54-7.46(m,1H),7.32(d,1H),6.32(d,1H),5.65(s,2H),2.01(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝186.10[M+1]
第二步：
2-氟-5-甲基-N-(甲基-d3)-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2氢-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物37)
2-fluoro-5-methyl-N-(methyl-d3)-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物2-氟-5-甲基-N-(甲基-d3)-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2氢-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物37(白色固体，15mg，产率13.31％)。
1H NMR(401MHz,DMSO-d 6)δ8.51(s,1H),8.17(s,1H),7.92-7.87(m,2H),7.49(d,1H),4.43(t,1H),3.97(d,2H),3.32(s,3H),2.28(s,3H),1.68(d,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝418.10[M+1]
实施例38
2-((6-(甲氧基-d3)-4-甲基吡啶-3-基)氨基)-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(化合物38)
2-((6-(methoxy-d3)-4-methylpyridin-3-yl)amino)-7-methyl-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
Figure PCTCN2021087912-appb-000112
第一步：
2-(甲氧基-d3)-4-甲基-5-硝基吡啶(38b)
2-(methoxy-d3)-4-methyl-5-nitropyridine
将2-氟-4-甲基-5-硝基吡啶30a(0.5g，3.20mmol)溶于乙腈(10mL)，加入碳酸钾(1.33g，9.60mmol)和氘代甲醇(0.21g，6.4mmol)，反应室温反应2h。TLC监测至反应结束，将反应液过滤，用10mL乙腈洗涤固体，合并滤液浓缩得粗品，经柱层析分离纯化(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝10/1)得标题化合物2-(甲氧基-d3)-4-甲基-5-硝基吡啶38b(白色固体，0.4g，产率73.03％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.91(s,1H),6.96(s,1H),2.55(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝172.10[M+1]
第二步：
6-(甲氧基-d3)-4-甲基吡啶-3-胺(38c)
6-(methoxy-d3)-4-methylpyridin-3-amine
将2-(甲氧基-d3)-4-甲基-5-硝基吡啶38b(100mg，0.58mmol)溶解于乙醇(20mL)中，加入铁粉(163.13mg，2.92mmol)和醋酸(20μL)，将反应液升温至90℃反应1h。TLC监测至反应结束，将反应液过滤，固体用20mL乙醇洗涤后经过柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝100/1)得标题化合物6-(甲氧基-d3)-4-甲基吡啶-3-胺38c(黄色固体，50mg，产率61％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ7.47(s,1H),6.45(s,1H),4.51(s,2H),2.05(d,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝142.10[M+1]
第三步：
2-((6-(甲氧基-d3)-4-甲基吡啶-3-基)氨基)-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(化合物38)
2-((6-(methoxy-d3)-4-methylpyridin-3-yl)amino)-7-methyl-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物2-((6-(甲氧基-d3)-4-甲基吡啶-3-基)氨 基)-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮化合物38(白色固体，30mg，产率22.73％)。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.37(s,1H),7.77(s,1H),6.65(s,1H),4.55-4.45(m,1H),4.10(dd,2H),3.56-3.47(m,2H),3.37(s,3H),2.75-2.68(m,2H),2.27(s,3H),1.68(dd,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝374.20[M+1]
实施例39
4-甲基-N-(甲基-d3)-5-((7-甲基-8-氧-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)吡啶甲酸酰胺(化合物39)
4-methyl-N-(methyl-d3)-5-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)picolinamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000113
第一步：
4-甲基-N-(甲基-d3)-5-硝基萘酰胺(39b)
4-methyl-N-(methyl-d3)-5-nitropicolinamide
将4-甲基-5-硝基吡啶甲酸39a(430mg，2.3mmol)、O-(7-氮杂苯并三氮唑基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(1.04g，2.7mmol)溶解于二氯甲烷(10mL)中，在0℃下搅拌20分钟，加入N,N二异丙基乙胺(11g，8.2mmol)及甲烷-d3-胺(500mg，7.08mmol)，在室温搅拌4h。TLC监测至反应结束，向反应液中加水10mL，分离有机相，用无水硫酸钠干燥并经中压正相制备得到标题化合物4-甲基-N-(甲基-d3)-5-硝基萘酰胺39b(褐色固体，142mg，产率41％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ9.07(s,1H),8.21(s,1H),7.96(s,1H),2.72(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝199.20[M+1]
第二步：
5-氨基-4-甲基-N-(甲基-d3)吡啶啉酰胺(39c)
5-amino-4-methyl-N-(methyl-d3)picolinamide
将4-甲基-N-(甲基-d3)-5-硝基萘酰胺39b(142mg，0.71mmol)溶解于5mL醋酸中，0℃搅拌下将锌粉加入反应液中，逐渐升温至室温搅拌1h。TLC监测至反应完全，反应液过滤并浓缩得到标题化合物5-氨基-4-甲基-N-(甲基-d3)吡啶啉酰胺39c(黄色固体，80mg，产率60％)。
LC-MS m/z(ESI)＝169.20[M+1]
第三步：
4-甲基-N-(甲基-d3)-5-((7-甲基-8-氧-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)吡啶甲酸酰胺(化合物39)
4-methyl-N-(methyl-d3)-5-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)picolinamide
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物4-甲基-N-(甲基-d3)-5-((7-甲基-8-氧-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)吡啶甲酸酰胺化合物39(白色固体，16mg，产率21.1％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.83(s,2H),8.56(s,1H),8.09(s,1H),7.87(s,1H),4.44-4.38(m,1H),3.97(d,2H),3.44-3.34(m,2H),3.31(s,3H),2.33(s,3H),1.67(d,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝401.20[M+1]
实施例40
7-甲基-2-((2-甲基-4-(三氟甲基)苯基)氨基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(化合物40)
7-methyl-2-((2-methyl-4-(trifluoromethyl)phenyl)amino)-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
Figure PCTCN2021087912-appb-000114
将2-((6-甲氧基-2-甲基吡啶-3-基)氨基)-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮化合物21(400mg，1.08mmol)、氯化锂(228.88mg，5.40mmol)、对甲苯磺酸(1.03g，5.40mmol)溶于DMF(10mL)，在120℃搅拌1小时。TLC监测至反应结束，将反应液倒入冰水中，收集固体用硅胶柱色谱分离纯化(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝100/1)得到标题化合物7-甲基-2-((2-甲基-4-(三氟甲基)苯基)氨基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮化合物40(白色固体，200mg，产率51.97％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ11.53(s,1H),8.25(s,1H),7.95(s,1H),7.31(d,1H),6.12(d,1H),4.38-4.31(m,1H),3.97-3.93(m,2H),3.39(t,2H),3.25(s,3H),2.57-2.42(m,2H),2.07(s,3H),1.64-1.60(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝357.20[M+1]
实施例41
5-甲基-4-[(7-甲基-9-(氧杂环丁-4-基)-8-氧代-8,9-二氢-7氢-嘌呤-2-基)氨基]噻吩-2-羧酸(化合物41)
5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)thiophene-2-carboxylic acid
Figure PCTCN2021087912-appb-000115
将5-甲基-4-[(7-甲基-9-(氧杂环丁-4-基)-8-氧代-8,9-二氢-7氢-嘌呤-2-基)氨基]噻吩-2-羧酸甲酯化合物22(0.78g，1.93mmol)溶解于四氢呋喃(10mL)、水(10mL)中，加入氢氧化锂(0.09g，3.86mmol),室温搅拌1小时。TLC监测至反应结束，浓缩除去四氢呋喃，用6N盐酸调pH至5左右，有白色固体析出，过滤，滤饼用石油醚洗两次，搜集固体得到标题化合物5-甲基-4-[(7-甲基-9-(氧杂环丁-4-基)-8-氧代-8,9-二氢-7氢-嘌呤-2-基)氨基]噻吩-2-羧酸化合物41(棕色固体，0.4g，产率53.22％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ12.80(s,1H),8.85(s,1H),8.06(s,1H),7.93(s,1H),4.42-4.34(m,1H),3.96(dd,2H),3.39(t,2H),3.29(s,3H),2.35(s,3H),1.67-1.63(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝390.10[M+1]
实施例42
5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2氢-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7氢-嘌呤-2-基)氨基)噻吩-2-羧酰胺(化合物42)
5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)thiophene-2-carboxamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000116
将5-甲基-4-[(7-甲基-9-(氧杂环丁-4-基)-8-氧代-8,9-二氢-7氢-嘌呤-2-基)氨基]噻吩-2-羧酸化合物41(0.3g，0.77mmol)溶解于无水二氯甲烷(20mL)中，加入催化量的N,N-二甲基甲酰胺，将反应混合物冷却至0℃搅拌5分钟后，将草酰氯(0.1mL，1.16mmol)滴加到反应混合物中，升至室温搅拌反应4小时。TLC监测至反应结束，减压浓缩搜集固体，冰浴下将所得固体加入二氯甲烷/氨水(10:1)11mL中，混合物室温搅拌1h后减压浓缩得粗品，粗品经中压制备分离纯化后得标题化合物5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2氢-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7氢-嘌呤-2-基)氨基)噻吩-2-羧酰胺化合物42(白色固体，140mg，产率46％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.73(s,1H),8.03(s,1H),7.83(s,1H),7.73(s,1H),7.26(s,1H),4.42-4.34(m,1H),3.95(dd,2H),3.40(t,2H),3.29(s,3H),2.29(s,3H),1.65(dd,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝389.20[M+1]
实施例43
5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2氢-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7氢-嘌呤-2-基)氨基)噻吩-2-腈(化合物43)
5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)thiophene-2-carbonitrile
Figure PCTCN2021087912-appb-000117
将5-甲基-4-[(7-甲基-9-(氧杂环丁-4-基)-8-氧代-8,9-二氢-7氢-嘌呤-2-基)氨基]噻吩-2-甲酰胺化合物42(80mg，0.21mmol)溶于二氯甲烷(10mL)，0℃搅拌下加入吡啶(70mg，0.84mmol)和三氟乙酸酐(130mg，0.63mmol)反应0.5小时，TLC监测至反应完全，向反应液中加入甲醇(10mL)淬灭反应，浓缩得到粗品，经中压制备分离纯化(30％水/乙腈)得标题化合物5-甲基-4-[(7-甲基-9-(-4-基)-8-氧代-8,9-二氢-7氢-嘌呤-2-基)氨基]噻吩-2-腈化合物43(浅黄色固体，20mg，产率25.71％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ9.02(s,1H),8.08(s,1H),8.07(s,1H),4.43-4.36(m,1H),3.98(dd,2H),3.44-3.38(m,2H),3.29(s,3H),2.38(s,3H),1.67-1.64(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝371.10[M+1]
实施例44
2-氟-5-(甲基-d3)-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物44)
2-fluoro-5-(methyl-d3)-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000118
第一步：
4-氨基-2-氟-5-(甲基-d3)苯甲酰胺(44b)
4-amino-2-fluoro-5-(methyl-d3)benzamide
将4-氨基-2-氟-5-(甲基-d3)苯甲腈44a(678mg，4.72mmol)溶于DMSO(2mL)中，室 温搅拌下缓慢滴加双氧水(3mL)反应2小时。TLC监测至反应完全，将反应液倒入纯净水(15mL)中，大量固体析出，过滤后减压旋干溶剂，得到标题化合物4-氨基-2-氟-5-(甲基-d3)苯甲酰胺44b(黄色固体，609mg，产率75％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ7.38(d,1H),7.14(s,1H),6.95(s,1H),6.33(d,1H),5.68(s,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝172.10[M+1]
第二步：
2-氟-5-(甲基-d3)-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物44)
2-fluoro-5-(methyl-d3)-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物2-氟-5-(甲基-d3)-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物44(浅黄色固体，120mg，产率27％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.52(s,1H),8.19(d,1H),7.90(d,1H),7.55(d,1H),7.42(d,2H),4.47-4.39(m,1H),4.00-3.96(m,2H),3.44-3.35(m 2H),3.33(s,3H),2.57-2.55(m,2H),1.71-1.67(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝404.20[M+1]
实施例45
2-氰基-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酸酯(化合物45)
2-cyano-5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzoate
Figure PCTCN2021087912-appb-000119
第一步：
5-氨基-2-溴-4-甲基苄腈(45a)
5-amino-2-bromo-4-methylbenzonitrile
将5-氨基-4-甲基苄腈15a(2.5g，18.9mmol)溶于DMF(15mL)中，加入NBS(3.37g，18.9mmol)室温搅拌0.5小时。TLC监测至反应完全，将反应液倒入到纯净水(100mL)中，析出大量固体，过滤后减压旋干，得到标题化合物5-氨基-2-溴-4-甲基苄腈45a(黄色固体，3.5g，产率87.5％)。
LC-MS m/z(ESI)＝210.90[M+1]
第二步：
4-氨基-2-氰基-5-甲基苯甲酸甲酯(45b)
methyl 4-amino-2-cyano-5-methylbenzoate
将5-氨基-2-溴-4-甲基苄腈45a(3.5g，16.6mmol)溶于甲苯(15mL)和甲醇(15mL)中， 再加入4-二甲氨基吡啶(2.0g，16.6mmol)、醋酸钯(186mg，0.83mmol)和4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(961mg，1.66mmol)，氮气置换4次后，再迅速倒入八碳基合二钴(2.84g，8.3mmol)，反应混合液于100℃回流反应4小时。TLC监测至反应结束，将混合液经柱层析分离纯化得到标题化合物4-氨基-2-氰基-5-甲基苯甲酸甲酯45b(黄色固体，500mg，产率15.9％)。
LC-MS m/z(ESI)＝191.10[M+1]
第三步：
2-氰基-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酸酯(化合物45)
2-cyano-5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzoate
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物2-氰基-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酸酯化合物45(浅黄色固体，502mg，产率45％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.92(s,1H),8.55(s,1H),8.25(s,1H),7.94(s,1H),4.45-4.38(m,1H),4.00-3.95(m,2H),3.88(s,3H),3.47-3.42(m,2H),3.33(s,3H),2.67-2.50(m,2H),2.43(s,3H),1.72-1.67(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝423.20[M+1]
实施例46
2-氰基-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酸(化合物46)
2-cyano-5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzoic acid
Figure PCTCN2021087912-appb-000120
将2-氰基-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酸酯化合物45(200mg，0.47mmol)加入到四氢呋喃(2mL)和水(2mL)混合溶液中，再加入一水氢氧化锂(94mg，2.35mmol)于室温搅拌过夜。TLC监测反应完成后，于冰浴下用浓盐酸调节pH值至5左右，减压旋干溶剂后经柱层析分离纯化得到标题化合物2-氰基-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酸化合物46(浅黄色固体，90mg，产率47％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.39(s,1H),8.88(s,1H),8.50(s,1H),8.24(d,1H),7.93(s,1H),4.48-4.40(m,,1H),4.01-3.97(m,2H),3.48-3.35(m,2H),3.34(s,3H),2.57-2.55(m,2H),2.42(s,3H),1.73-1.68(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝409.20[M+1]
实施例47
2-氰基-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物47)
2-cyano-5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000121
将2-氰基-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酸化合物46(75mg，0.183mmol)加入到2mL四氢呋喃中，再加入HATU(104mg，0.275mmol)和三乙胺(28mg，0.275mmol)于室温搅拌0.5h，再缓慢滴加2mL氨的1,4-二氧六环溶液(0.5M in 1,4-dioxane)。TLC监测至反应结束，浓缩反应液经柱层析纯化得到目标化合物2-氰基-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物47(浅黄色固体，42mg，产率56％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.80(s,1H),8.34(s,1H),8.20(s,1H),8.00(s,1H),7.72(s,1H),7.53(s,1H),4.47-4.39(m,1H),4.01-3.96(m,2H),3.49-3.38(m,2H),3.32(s,3H),2.52-2.50(m,2H),2.39(s,3H),1.72-1.67(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝408.20[M+1]
实施例48
5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺(化合物48)
5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-(trifluoromethyl)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000122
第一步：
4-氨基-5-溴-2-(三氟甲基)苄腈(48b)
4-amino-5-bromo-2-(trifluoromethyl)benzonitrile
将4-氨基-2-三氟甲基苄腈48a(1.1g，5.9mmol)溶于DMF(10mL)中，再加入NBS(1.05g，5.9mmol)室温搅拌反应0.5小时。TLC监测至反应结束，将反应液倒入到纯净水(100mL)中，析出大量固体，过滤后减压旋干得到标题化合物4-氨基-5-溴-2-(三氟甲基)苄腈48b(黄色固体，1.5g，产率96.1％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.14(s,1H),7.20(s,1H),6.90(s,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝264.90[M+1]
第二步：
4-氨基-5-甲基-2-(三氟甲基)苄腈(48c)
4-amino-5-methyl-2-(trifluoromethyl)benzonitrile
将4-氨基-5-溴-2-(三氟甲基)苄腈48b(1.5g，5.66mmol)加入到1,4-二氧六环(20mL)和水(4mL)混合溶液中，再加入甲基硼酸(3.4g，56.6mmol)、碳酸钾(2.3g，17mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(417mg，0.57mmol)，氮气置换4次后，回流反应5小时。TLC监测至反应结束，反应混合液经柱层析分离纯化得到标题化合物4-氨基-5-甲基-2-(三氟甲基)苄腈48c(黄色固体，850mg，产率75.2％)。
LC-MS m/z(ESI)＝201.20[M+1]
第三步：
4-氨基-5-甲基-2-(三氟甲基)苯甲酰胺(48d)
4-amino-5-methyl-2-(trifluoromethyl)benzamide
将4-氨基-2-三氟甲基-5-甲基-苯甲腈48c(850mg，4.25mmol)溶于DMSO(2mL)中，再加入碳酸钾(117mg，0.85mmol)，在于室温下缓慢滴加双氧水(3mL)，搅拌反应2小时。TLC监测至反应结束，将反应液倒入到纯净水(15mL)中，大量固体析出，过滤后减压旋干，得到标题化合物4-氨基-5-甲基-2-(三氟甲基)苯甲酰胺48d(黄色固体，312mg，产率33.6％)。
LC-MS m/z(ESI)＝219.20[M+1]
第四步：
5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺(化合物48)
5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-(trifluoromethyl)benzamide
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺化合物48(浅黄色固体，25mg，产率8.0％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.71(s,1H),8.18(s,1H),8.16(s,1H),7.83(s,1H),7.44(s,1H),7.38(s,1H),4.44-4.36(m,1H),3.97-3.93(m,2H),3.50-3.35(m,2H),3.32(s,3H),2.47-2.43(m,2H),2.36(s,3H),1.75-1.59(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝451.20[M+1]
实施例49
2-氟-4-((9-(3-羟基-3-甲基环丁基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物49)
2-fluoro-4-((9-(3-hydroxy-3-methylcyclobutyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000123
第一步：
4-((反-3-羟基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸乙酯(49b)
ethyl 4-((trans-3-hydroxycyclobutyl)amino)-2-(methylthio)pyrimidine-5-carboxylate
将反-3-氨基环丁烷-1-醇盐酸盐49a(15.00g，303.45mmol)溶于乙腈(200mL)中，0℃搅拌下加入碳酸钾(41.92g，303.45mmol)、4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸乙酯(28.24g，121.38mmol)，升温至常温搅拌反应20小时。TLC监测至反应结束，向反应液中加入大量水，析出白色固体，硅藻土过滤后浓缩干燥得到标题化合物4-((反-3-羟基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸乙酯49b(白色固体，30g，产率87.23％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.54(s,1H),8.29(d,1H),5.14(s,1H),4.60-4.55(m,1H),4.32-4.25(m,3H),2.47(s,3H),2.24(t,4H),1.30(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝284.10[M+1]
第二步：
4-((反-3-羟基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸(49c)
4-((trans-3-hydroxycyclobutyl)amino)-2-(methylthio)pyrimidine-5-carboxylate
将4-((反-3-羟基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸乙酯49b(30g，105.88mmol)溶解于甲醇/水(150mL/150mL)中，加入氢氧化钠(6.4g，158.82mmol)，常温搅拌反应12小时。TLC监测至反应结束，浓缩蒸发掉甲醇后加入2N HCl调节pH至4左右，有白色固体析出，过滤，滤饼用水以及石油醚/乙酸乙酯(v/v＝10/1)洗两次得标题化合物4-((反-3-羟基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸49c(白色固体，25g，产率92.49％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.28(s,1H),8.51(s,1H),8.47(d,1H),5.11(s,1H),4.55-4.61(m,1H),4.23-4.33(m,1H),2.47(s,3H),2.20-2.26(m,4H).
LC-MS m/z(ESI)＝256.10[M+1]
第三步：
9-(反-3-羟基环丁基)-2-(甲硫)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(49d)
9-(trans-3-hydroxycyclobutyl)-2-(methylthio)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将4-((反-3-羟基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸49c(25g，97.93mmol)用N,N-二甲基乙酰胺(250mL)溶解，常温搅拌下加入三乙胺(11.89g，117.51mmol)和叠 氮磷酸二苯酯(32.34g，117.51mmol)反应1小时，升温至90℃回流反应5小时。TLC监测至反应结束，反应液中加水，析出大量固体，过滤干燥得到标题化合物9-(反-3-羟基环丁基)-2-(甲硫)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮49d(白色固体，20g，产率80.95％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.30(s,1H),8.10(s,1H),5.18(s,1H),5.07-4.99(m,1H),4.56-4.53(m,1H),3.07-3.00(m,2H),2.51(s,3H),2.27-2.21(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝253.10[M+1]
第四步：
9-(反-3-羟基环丁基)-7-甲基-2-(甲硫基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(49e)
9-(trans-3-hydroxycyclobutyl)-7-methyl-2-(methylthio)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将9-(反-3-羟基环丁基)-2-(甲硫)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮49d(18g，71.35mmol)用N,N-二甲基甲酰胺(300mL)溶解，0℃搅拌下加入硫酸二甲酯(9g，71.35mmol)和碳酸铯(23.25g，71.35mmol)反应1小时。TLC监测至反应结束，把反应液缓慢滴加到冰水中搅拌，加入乙酸乙酯进行萃取，浓缩有机层经甲醇重结晶得到标题化合物9-(反-3-羟基环丁基)-7-甲基-2-(甲硫基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮49e(白色固体，16g，产率84.21％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.29(s,1H),5.18(d,1H),5.09-5.01(m,1H),4.56-4.52(m,1H),3.31(s,3H),3.06-2.97(m,2H),2.51(s,3H),2.27-2.21(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝267.10[M+1]
第五步：
7-甲基-2-(甲硫基)-9-(3-氧代环丁基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(49f)
7-methyl-2-(methylthio)-9-(3-oxocyclobutyl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将9-(反-3-羟基环丁基)-7-甲基-2-(甲硫基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮49e(2.0g，7.51mmol)溶解于二氯甲烷胺(10mL)中，常温搅拌下加入戴森-马丁氧化剂(4.78g，11.26mmol)反应4小时。TLC监测反应完成，随后加入饱和碳酸氢钠和二氯甲烷萃取，浓缩有机层析出固体，过滤结晶得到标题化合物7-甲基-2-(甲硫基)-9-(3-氧代环丁基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮49f(白色固体，1.58g，产率79.6％)。
LC-MS m/z(ESI)＝253.10[M+1]
第六步：
9-(3-羟基-3-甲基环丁基)-7-甲基-2-(甲硫基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(49g)
9-(3-hydroxy-3-methylcyclobutyl)-7-methyl-2-(methylthio)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将7-甲基-2-(甲硫基)-9-(3-氧代环丁基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮49f(1.07g，4.05mmol)溶解于四氢呋喃中(10mL)，在0℃搅拌下缓慢加入3M甲基溴化镁(4.7mL，14.17mmol)反应2.5小时。TLC监测反应完成，向反应液中加入饱和氯化铵水溶液淬灭反应，再加入二氯甲烷萃取，浓缩有机层，经硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝120:1)得到标题化合物9-(3-羟基-3-甲基环丁基)-7-甲基-2-(甲硫基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮49g(白色固体，820mg，产率72.25％)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ8.29(s,1H),5.14(s,1H),4.40-4.32(m,1H),3.31(s,3H),3.02-2.96(m,2H),2.53(s,3H),2.35-2.30(m,2H),1.33(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝281.10[M+1]
第七步：
9-(3-羟基-3-甲基环丁基)-7-甲基-2-(甲基亚磺酰基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(49h)
9-(3-hydroxy-3-methylcyclobutyl)-7-methyl-2-(methylsulfinyl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将9-(3-羟基-3-甲基环丁基)-7-甲基-2-(甲硫基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮49g(710mg， 2.53mmol)溶解于二氯甲烷(5mL)中，常温搅拌下加入间氯过氧苯甲酸(568mg，3.29mmol)反应3h。TLC监测至反应结束，向反应液中加入饱和碳酸氢钠和二氯甲烷萃取，浓缩有机层经硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝20:1)得到标题化合物9-(3-羟基-3-甲基环丁基)-7-甲基-2-(甲基亚磺酰基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮49h(白色固体，200mg，产率26.65％)。
LC-MS m/z(ESI)＝297.10[M+1]
第八步：
2-氟-4-((9-(3-羟基-3-甲基环丁基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物49)
2-fluoro-4-((9-(3-hydroxy-3-methylcyclobutyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
将9-(3-羟基-3-甲基环丁基)-7-甲基-2-(甲基亚磺酰基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮49h(100mg，0.34mmol)、4-氨基-3-甲基-2氟苯甲酰胺中间体2(284mg，1.69mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中，再加入碳酸铯(330mg，1.01mmol)逐步升温至80℃搅拌3小时。TLC监测反应完成，将反应液倒入到30mL纯水中，加入乙酸乙酯萃取，过滤后用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝35/1)得到标题化合物2-氟-4-((9-(3-羟基-3-甲基环丁基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺化合物49-1(白色固体，12mg，产率8.88％)以及化合物49-2(白色固体，20mg，产率14.80％)。
化合物49-1：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ8.60(s,1H),8.21(s,1H),7.87(d,1H),7.55(d,1H),7.46(s,1H),7.42(s,1H),5.13(s,1H),4.41-4.33(m,1H),3.35(s,3H),3.07-2.98(m,2H),2.53(s,3H),2.35-2.30(m,2H),1.36(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝401.20[M+1]
化合物49-2：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ8.59(s,1H),8.20(s,1H),7.87(d,1H),7.55(d,1H),7.46(s,1H),7.42(s,1H),5.14(s,1H),4.39-4.31(m,1H),3.32(s,3H),3.05-2.97(m,2H),2.54(s,3H),2.33-2.29(m,2H),1.35(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝401.20[M+1]
实施例50
2-羟基-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物50)
2-hydroxy-5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000124
Figure PCTCN2021087912-appb-000125
第一步：
4-氨基-2-乙氧基-5-甲基苯甲酰胺(50b)
4-amino-2-ethoxy-5-methylbenzamide
将4-氨基-2-乙氧基-5-甲基苯甲腈50a(1.0g，5.67mmol)溶于乙醇(15mL)和二甲亚砜(1mL)混合溶剂中，再加入1N氢氧化钠溶液(3mL)，室温下缓慢滴加双氧水(3mL)搅拌2小时。TLC监测至反应结束，将反应液倒入到饱和亚硫酸钠溶液(20mL)中，室温搅拌2小时析出大量固体，过滤后减压旋干得到标题化合物4-氨基-2-乙氧基-5-甲基苯甲酰胺50b(黄色固体，510mg，产率48.6％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.53(s,1H),7.34(d,1H),7.07(d,1H),6.28(s,1H),5.47(s,2H),4.04(q,2H),1.99(s,3H),1.37(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝195.20[M+1]
第二步：
4-氨基-2-羟基-5-甲基苯甲酰胺(50c)
4-amino-2-hydroxy-5-methylbenzamide
将4-氨基-2-乙氧基-5-甲基苯甲酰胺50b(510mg，2.63mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，反应液降温至0℃，缓慢滴加三溴化硼溶液(13.1mL，1M in THF)，升温至室温反应16小时。TLC监测至反应结束，加入乙酸乙酯(20mL)和饱和氯化铵溶液(20mL)，搅拌0.5h后，萃取有机相，浓缩后用无水硫酸钠干燥，过滤旋干得到标题化合物4-氨基-2-羟基-5-甲基苯甲酰胺50c(黄色固体，350mg，产率80.1％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.26(s,1H),7.79(s,1H),7.38(s,1H),7.23(s,1H),5.98(s,1H),5.50(s,2H),1.96(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝167.20[M+1]
第三步：
2-羟基-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物50)
2-hydroxy-5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物2-羟基-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物50(白色固体，35mg，产率46.9％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ12.87(s,1H),8.27(s,1H),8.16-8.13(m,2H),7.64(s,1H),7.61(s,1H),7.54(s,1H),4.47-4.39(m,1H),4.00-3.96(m,2H),3.48-3.37(m,2H),3.33(s,3H),2.57-2.48(m,2H),2.22(s,3H),1.70-1.64(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝399.20[M+1]
实施例51
2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酸甲酯(化合物51)
2-fluoro-5-methyl-4-((7-methyl-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzoate
Figure PCTCN2021087912-appb-000126
第一步：
4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酸甲酯(51a)
methyl 4-amino-2-fluoro-5-methylbenzoate
将4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酸36a(1.0g，5.91mmol)溶于甲醇(6mL)中，再滴加4滴浓硫酸，反应液加热至60℃回流反应2h。TLC监测至反应结束，向反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液(20mL)和乙酸乙酯萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤一次后，再用无水硫酸钠干燥，浓缩经柱层析分离纯化(PE:EA(v/v)＝5:1)得到标题化合物4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酸甲酯51a(浅黄色固体，0.8g，产率43.7％)。
LC-MS m/z(ESI)＝184.20[M+1]
第二步：
2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酸甲酯(化合物51)
2-fluoro-5-methyl-4-((7-methyl-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzoate
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酸甲酯化合物51(白色固体，239mg，产率79.8％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.62(s,1H),8.24(s,1H),8.07(d,1H),7.69(d,1H),4.49-4.41(m,1H),4.00-3.96(m,2H),3.81(s,3H),3.49-3.36(m,2H),3.34(s,3H),3.17(s,3H),2.65-2.50(m,2H),1.74-1.65(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝402.20[M+1]
实施例52
2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酸(化合物52)
2-fluoro-5-methyl-4-((7-methyl-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzoic acid
Figure PCTCN2021087912-appb-000127
将2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酸甲酯化合物51(300mg，0.75mmol)溶于四氢呋喃(3mL)中，再加入氢氧化钠溶液(80mg溶于3mL水中)，反应液加热至50℃反应2小时。TLC监测至反应结束，用2N盐酸调节pH至5左右，减压旋除四氢呋喃，大量固体析出，过滤后固体经硅胶柱色谱分离纯化(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝100/1)得到标题化合物2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酸化合物52(白色固体，162mg，产率56.0％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.14(s,1H),8.29(s,1H),7.94(d,1H),7.71(d,1H),4.49-4.41(m,1H),4.00-3.96(m,2H),3.46-3.39(m,2H),3.34(s,3H),2.67-2.43(m,2H),2.33(s,3H),1.76-1.67(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝388.20[M+1]
实施例53
2-乙氧基-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物53)
2-ethoxy-5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000128
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物2-乙氧基-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物53(浅黄色固体，35mg，产率12.1％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.38(s,1H),8.18(s,1H),7.76(s,1H),7.71(s,1H),7.51(d,1H),7.41(d,1H),4.48-4.40(m,1H),4.17(q,2H),3.98-3.95(m,2H),3.47-3.36(m,2H),3.34(s,3H),2.57-2.53(m,2H),2.24(s,3H),1.72-1.63(m,2H),1.41(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝413.20[M+1]
实施例54
N,4-二甲基-5-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基) 吡啶酰胺(化合物54)
N,4-dimethyl-5-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)picolinamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000129
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物N,4-二甲基-5-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)吡啶酰胺化合物54(浅黄色固体，30mg，产率23.2％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ9.84(s,1H),8.93(d,2H),8.26(d,1H),8.13(s,1H),4.44-4.38(m,1H),3.97-3.93(m,2H),3.44-3.38(m,2H),3.34(s,3H),2.83(d,3H),2.43-2.37(m,5H),2.15(s,3H),1.68(dd,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝398.10[M+1]
实施例55
7-甲基-2-((4-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)氨基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(化合物55)
7-methyl-2-((4-methyl-6-oxo-1,6-dihydropyridin-3-yl)amino)-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
Figure PCTCN2021087912-appb-000130
第一步：
5-氨基-4甲基吡啶-2(1H)-酮(55b)
5-amino-4-methyl-3,4-dihydropyridin-2(1H)-one
将4-甲基-5-硝基吡啶-2(1H)-酮55a(5.0g，32.44mmol)和铁粉(9.0g，162.2mmol)加入干燥的反应瓶，用乙醇/水＝10/1(110mL)混匀，然后滴加稀盐酸(7mL，2mol/L)，在85℃反应3小时。TLC监测至反应结束，过滤反应液，用适量乙醇洗涤滤饼，浓缩滤液后用饱和碳酸氢钠调节pH 8左右，经硅胶柱色谱分离纯化(二氯甲烷:甲醇(v/v)＝10:1)得到标题化合物5-氨基-4甲基吡啶-2(1H)-酮55b(墨绿色固体，2.5g，产率62.08％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.63(s,1H),6.75(s,1H),6.11(s,1H),4.06(s,2H),2.02(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝125.10[M+1]
第二步：
7-甲基-2-((4-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)氨基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(化合物55)
7-methyl-2-((4-methyl-6-oxo-1,6-dihydropyridin-3-yl)amino)-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮55b(200mg，0.74mmol)、5-氨基-4甲基吡啶-2(1H)-酮(185mg，1.48mmol)、碳酸铯(525mg，1.48mmol)和Brettphos G3Pd(67mg，0.074mmol)加入干燥的反应瓶，再加入1,4-二氧六环(20mL)，氮气置换三次，在110℃下反应2.5小时。TLC监测至反应结束，将反应液浓缩，使用硅胶柱色谱分离纯化(二氯甲烷:甲醇(v/v)＝20:1)得到标题化合物7-甲基-2-((4-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)氨基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮化合物55(黄色固体，38mg，产率10.02％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ11.29(s,1H),8.19(s,1H),7.96(s,1H),7.25(s,1H),6.21(s,1H),4.40-4.32(m,1H),3.97-3.93(m,2H),3.44-3.36(m,2H),3.26(s,3H),2.47-2.42(m,2H),2.01(s,3H),1.64-1.60(m,2H)
LC-MS m/z(ESI)＝357.20[M+1]
实施例56
2-((1,4-二甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)氨基)-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(化合物56)
2-((1,4-dimethyl-6-oxo-1,6-dihydropyridin-3-yl)amino)-7-methyl-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
Figure PCTCN2021087912-appb-000131
第一步：
1,4-二甲基-5-硝基-3,4-二氢吡啶-2-2(1H)-酮(56a)
1,4-dimethyl-5-nitro-3,4-dihydropyridin-2(1H)-one
将4-甲基-5-硝基吡啶-2(1H)-酮55a(5.0g，32.44mmol)和碳酸钾(9.0g，48.66mmol)加入干燥的反应瓶，用DMF混匀，在0℃下滴加碘甲烷(3mL，64.88mmol)，升至室温反应3小时。TLC监测至反应结束，将反应液过滤，滤液用水和乙酸乙酯萃取，合并有机相，干燥浓缩，得到标题化合物1,4-二甲基-5-硝基-3,4-二氢吡啶-2-2(1H)-酮56a(黄色固体，5.2g，产率95.41％)。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.62(s,1H),6.39(s,1H),3.63(s,3H),2.56-2.53(m,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝169.10[M+1]
第二步：
5-氨基-1,4-二甲基吡啶-2(1H)-酮(56b)
5-amino-1,4-dimethyl-3,4-dihydropyridin-2(1H)-one
将1,4-二甲基-5-硝基吡啶-2(1H)-酮56a(5.2g，30.92mmol)和铁粉(9.0g，154.62mmol)加入干燥的反应瓶，用乙醇/水＝10/1(110mL)混匀，再加入稀盐酸(10mL，2mol/L)，在85℃反应3小时。TLC监测至反应结束，过滤后用适量乙醇洗涤滤饼，浓缩滤液，用饱和碳酸氢钠调节pH至8左右，使用硅胶柱色谱分离纯化二氯甲烷:甲醇(v/v)＝10:1)，得到标题化合物5-氨基-1,4-二甲基吡啶-2(1H)-酮56b(墨绿色固体，2.5g，产率58.55％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.88(s,1H),6.16(s,1H),3.81(s,2H),3.30(s,3H),2.03(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝141.10[M+1]
第三步：
2-((1,4-二甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)氨基)-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(化合物56)
2-((1,4-dimethyl-6-oxo-1,6-dihydropyridin-3-yl)amino)-7-methyl-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮56b(200mg，0.74mmol)、5-氨基-1,4-二甲基-3,4-二氢吡啶-2(1H)-酮(206mg，1.48mmol)、碳酸铯(525mg，1.48mmol)和Brettphos G3Pd(67mg，0.074mmol)加入干燥的反应瓶，再加入1,4-二氧六环(20mL)，氮气置换三次，在110℃下反应2.5小时。TLC监测至反应结束，将反应液浓缩，使用硅胶柱色谱分离纯化(二氯甲烷:甲醇(v/v)＝20:1)，得到标题化合物7-甲基-2-((4-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)氨基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮化合物56(黄色固体，97mg，产率35.36％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.26(s,1H),7.98(s,1H),7.66(s,1H),6.27(s,1H),4.41-4.33(m,1H),3.98-3.94(m,2H),3.42(d,2H),3.38(s,3H),3.27(s,3H),2.54-2.44(m,2H),2.01(s,3H),1.65-1.62(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝371.20[M+1]
实施例57
2-甲氧基-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物57)
2-methoxy-5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000132
Figure PCTCN2021087912-appb-000133
第一步：
4-氨基-2-甲氧基-5-甲基苯甲腈(57a)
4-amino-2-methoxy-5-methylbenzonitrile
将4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲腈2A(1.0g，6.67mmol)溶于甲醇(10mL)和纯净水(2mL)的混合溶液中，再加入氢氧化钾(1.50g，26.68mmol)，反应液回流反应4小时。TLC监测至反应完成后，加入20mL纯净水，减压旋除甲醇，再用乙酸乙酯萃取3次，合并有机相，无水硫酸钠干燥后浓缩经柱层析分离(石油醚:乙酸乙酯(v/v)＝5:1)得到4-氨基-2-甲氧基-5-甲基苯甲腈57a(白色固体，300mg，产率27.8％)。
LC-MS m/z(ESI)＝163.10[M+1]
第二步：
4-氨基-2-甲氧基-5-甲基苯甲酰胺(57b)
4-amino-2-methoxy-5-methylbenzamide
将4-氨基-2-甲氧基-5-甲基苯甲腈57a(300mg，1.85mmol)、碳酸钾(51mg，0.37mmol)溶于DMSO(1mL)中，再于室温缓慢滴加双氧水(2mL)，搅拌反应2小时。TLC监测至反应结束，将反应液倒入到纯净水(10mL)中，大量固体析出，过滤后减压旋干，得到标题化合物4-氨基-2-甲氧基-5-甲基苯甲酰胺57b(黄色固体，256mg，产率76.7％)。
LC-MS m/z(ESI)＝181.10[M+1]
第三步：
2-甲氧基-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物57)
2-methoxy-5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物2-甲氧基-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物57(白色固体，35mg，产率12.1％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.39(s,1H),8.19(s,1H),7.78(s,1H),7.70(s,1H),7.55(s,1H),7.37(s,1H),4.47-4.41(m,1H),3.98-3.94(m,2H),3.91(s,3H),3.44-3.38(m,2H),3.33(s,3H),2.60-2.52(m,2H),2.25(s,3H),1.68(d,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝413.20[M+1]
实施例58
5-甲基-6-((7-甲基-8-氧-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)烟酰胺(化合物58)
5-methyl-6-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)nicotinamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000134
第一步：
6-氨基-5-甲基烟酰胺(58a)
6-amino-5-methylnicotinamide
将6-氨基-5-甲基烟腈20a(300mg，2.2mmol)、碳酸钾(46mg，0.33mmol)溶于1mL二甲亚砜中，冰浴下加入双氧水300μL，随后逐步升温至60℃搅拌2小时。TLC监测至反应结束，将反应液加入5mL水中，有白色固体析出，过滤并将滤饼中的水分旋干，得到标题化合物6-氨基-5-甲基烟酰胺58a(白色固体，200mg，产率58％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.34(s,1H),7.68(s,1H),7.63(s,1H),6.98(s,1H),6.25(s,1H),2.04(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝152.10[M+1]
第二步：
5-甲基-6-((7-甲基-8-氧-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)烟酰胺(化合物58)
5-methyl-6-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)nicotinamide
采用化合物1的合成方法制备得到标题化合物5-甲基-6-((7-甲基-8-氧-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)烟酰胺化合物58(白色固体，17mg，产率13.1％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ9.19(s,1H),8.59(s,1H),8.12(s,1H),8.00(s,1H),7.96(s,1H),7.38(s,1H),4.45-4.35(m,1H),3.94(dd,2H),3.40-3.30(m,2H),3.33(s,3H),2.50(s,2H),2.22(s,3H),1.63(dd,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝384.20[M+1]
实施例59
5-氯-2-氟-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物59)
5-chloro-2-fluoro-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000135
Figure PCTCN2021087912-appb-000136
第一步：
4-氨基-5-氯-2-氟苄腈(59b)
4-amino-5-chloro-2-fluorobenzonitrile
将4-氨基-2-氟苄腈59a(10.0g，73.46mmol)溶解于乙腈(100mL)，冰浴下加入N-氯代丁二酰亚胺(10.79g，80.81mmol)，反应逐步恢复至室温并加热至80℃反应3小时。TLC监测至反应结束，反应液直接倒入400mL水中，加入200mL乙酸乙酯萃取，收集有机层，干燥浓缩得标题化合物4-氨基-5-氯-2-氟苄腈59b(白色固体，6g，产率46.7％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.79-7.77(m,2H),6.78(s,2H),6.66(d,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝171.10[M+1]
第二步：
4-氨基-5-氯-2-氟苯甲酰胺(59c)
4-amino-5-chloro-2-fluorobenzamide
将4-氨基-5-氯-2-氟苄腈59b(500mg，2.93mmol)溶于1M氢氧化钠(14.66mL)和甲醇(1.19mL)中，将液体加热至40℃，随后滴加入30％双氧水(0.3mL)，保持温度继续反应16小时。TLC监测至反应结束，直接将反应液加水(50mL)稀释，加入乙酸乙酯萃取，合并有机相，随后用饱和食盐水清洗有机相，干燥，浓缩后经硅胶柱色谱分离纯化得到标题化合物4-氨基-5-氯-2-氟苯甲酰胺59c(280mg，白色固体，产率50.7％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3-d6)δ7.57(d,2H),7.36(s,1H),7.20(s,1H),6.53(d,2H),6.18(s,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝189.10[M+1]
第三步：
5-氯-2-氟-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物59)
5-chloro-2-fluoro-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
将4-氨基-5-氯-2-氟苯甲酰胺59c(280.74mg，1.49mmol)、2-氯-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮中间体1(200mg，0.74mmol)、碳酸铯(485mg，1.49mmol)、[(2-二-环己基膦基-3,6-二甲氧基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯基)-2-(2′-氨基-1,1′-联苯基)]甲磺酸钯(II)甲磺酸酯(67.4mg，0.07mmol)溶解于二氧六环(10mL)，氮气保护并换气，在100℃搅拌4小时。TLC监测至反应结束，将反应液倒入冰水中，收集固体，将固体用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝100/1)得到化合物5-氯-2-氟-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物59(白色固体，40mg，产率12.77％)。
1H NMR(401MHz,DMSO-d6)δ8.44(s,1H),8.29(d,1H),8.25(s,1H),7.77(d,1H),7.64(s,1H),7.60(s,1H),4.49-4.43(m,1H),4.00-3.97(m,2H),3.48-3.44(m,2H),3.34(s,3H),2.57-2.53(m,2H),1.72-1.68(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝421.10[M+1]
实施例60
2-氟-3,5-二甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨 基)苯甲酰胺(化合物60)
2-fluoro-3,5-dimethyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000137
第一步：
4-氨基-3,5-二氯-2-氟苄腈(60a)
4-amino-3,5-dichloro-2-fluorobenzonitrile
将4-氨基-2-氟苄腈59a(10.0g，73.46mmol)溶解于乙腈(100mL)，冰浴下加入N-氯代丁二酰亚胺(21g，160mmol)，反应逐步恢复至室温并加热至80℃反应3小时。TLC监测至反应结束，反应液直接倒入400mL水中，加入200mL乙酸乙酯萃取，收集有机层，干燥浓缩得标题化合物4-氨基-3,5-二氯-2-氟苄腈60a(白色固体，7g，产率46.5％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.86(d,1H),7.03(s,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝205.10[M+1]
第二步：
4-氨基-2-氟-3,5-二甲基苄腈(60b)
4-amino-2-fluoro-3,5-dimethylbenzonitrile
将4-氨基-3,5-二氯-2-氟苄腈60a(7g，34.14mmol)、甲基硼酸(20.44g，341.44mmol)、磷酸钾(36.24g，170.72mmol)、2-二环己基膦-2',4',6'-三异丙基联苯(4.88g，10.24mmol)、醋酸钯(1.15g，5.12mmol)溶于二氧六环(100mL)，氮气保护并换气，在100℃搅拌4小时。TLC检测至反应结束，将反应液倒入冰水中，收集固体经硅胶柱色谱分离提纯得到标题化合物4-氨基-2-氟-3,5-二甲基苄腈60b(白色固体，粗品，6g，产率107％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3-d6)δ7.14(d,1H),5.94(s,2H),1.99(s,3H),1.94(d,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝165.10[M+1]
第三步：
2-氟-3,5-二甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苄腈(60c)
2-fluoro-3,5-dimethyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzonitrile
将4-氨基-2-氟-3,5-二甲基苄腈60b(1.22g，7.44mmol)、2-氯-7-甲基-9-(四氢-2H-吡 喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮中间体1(2.0g，7.44mmol)、碳酸铯(4.85g，14.89mmol)、[(2-二-环己基膦基-3,6-二甲氧基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯基)-2-(2′-氨基-1,1′-联苯基)]甲磺酸钯(II)甲磺酸酯(674mg，0.74mmol)溶解于二氧六环(20mL)，氮气保护并换气，在100℃搅拌4小时。TLC监测至反应结束，将反应液倒入冰水中，收集固体经硅胶柱色谱分离提纯得到标题化合物2-氟-3,5-二甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苄腈60c(413mg，黄色固体，产率14％)。
1H NMR(401MHz,DMSO-d6)δ9.02(s,1H),8.12(s,1H),7.91(d,1H),4.49-4.39(m,1H),4.00-3.96(m,2H),3.45-3.39(m,2H),2.32(s,3H),2.22(d,3H)，1.71-1.65(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝397.10[M+1]
第四步：
2-氟-3,5-二甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物60)
2-fluoro-3,5-dimethyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
将2-氟-3,5-二甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苄腈60c(413mg，1.04mmol)溶于1M氢氧化钠(5mL)和甲醇(10mL)中，将液体加热至60℃，随后滴加入30％双氧水(0.16mL)，保持温度继续反应4小时。TLC监测至反应结束，直接将反应液加水(50mL)稀释，加入乙酸乙酯萃取，合并有机相，随后用饱和食盐水清洗有机相，干燥，浓缩后经硅胶柱色谱分离纯化得到标题化合物2-氟-3,5-二甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物60(白色固体，40mg，产率9.3％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3-d6)δ8.65(s,1H),7.91(s,1H),7.60(s,1H),7.54(s,1H),7.36(d,1H),4.42-4.34(m,1H),3.98-3.94(m,1H),3.43-3.37(m,2H),3.26(s,3H),2.13(s,3H),2.04(d,3H),1.67-1.63(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝415.10[M+1]
实施例61
4-((9-(反-3-氰基环丁基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物61)
4-((9-(trans-3-cyanocyclobutyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000138
Figure PCTCN2021087912-appb-000139
第一步：
4-((反-3-氨基甲酰基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸乙酯(61b)
ethyl 4-((trans-3-carbamoylcyclobutyl)amino)-2-(methylthio)pyrimidine-5-carboxylate
将原料反-3-((5-(乙氧羰基)-2-(甲硫基)嘧啶-4-基)氨基)环丁烷-1-甲酸61a(13.0g，41.8mmol)加入到二氯甲烷(130mL)中，再加入N,N,N′,N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)六氟磷酸脲(19.1g，50.2mmol)和三乙胺(16.9g，167.2mmol)，室温搅拌10min后，再加入氯化铵(6.7g，125.4mmol)反应搅拌2小时。TLC监测反应完成，反应液加入50mL饱和碳酸氢钠水溶液和二氯甲烷，浓缩有机层用无水硫酸钠，减压浓缩得到标题化合物粗品4-((反-3-氨基甲酰基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸乙酯61b(黄色粘稠液，12.5g，产率96.5％)。
LCMS m/z(ESI)＝311.20[M+1]
第二步：
4-((反-3-氰基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸乙酯(61c)
ethyl 4-((trans-3-cyanocyclobutyl)amino)-2-(methylthio)pyrimidine-5-carboxylate
将4-((顺-3-氨基甲酰基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸乙酯61b(12.5g，4.03mmol)加入到二氯甲烷(130mL)中，再加入吡啶(13.2g，167.2mmol)和三氟醋酸酐(26.3g，125.4mmol)室温搅拌1小时。TLC监测反应完全，向反应液中加入2N盐酸调节pH值至3，用二氯甲烷萃取，无水硫酸钠干燥后减压浓缩得粗品，经柱层析分离纯化(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝5:1)得到标题化合物4-((反-3-氰基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸乙酯61c(白色固体，1.7g，产率10.2％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.65(s,1H),8.46(d,1H),4.70-4.61(m,1H),4.37-4.31(m,2H),2.92-2.81(m,3H),2.52(s,3H),2.46-2.35(m,2H),1.38(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝293.20[M+1]
第三步：
4-((反-3-氰基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸(61d)
4-((trans-3-cyanocyclobutyl)amino)-2-(methylthio)pyrimidine-5-carboxylic acid
将4-((顺-3-氰基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸乙酯61c(1.7g，5.8mmol)溶解于四氢呋喃(10mL)和水(10mL)混合溶液中，加入氢氧化锂(487mg，11.6mmol)，室温搅拌1小时。TLC监测反应完全，旋干四氢呋喃，调pH至4-5，有白色固体析出，过滤，滤饼用石油醚/乙酸乙酯(v/v＝10/1)洗两次，浓缩得到标题化合物4-((反-3-氰基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸61d(白色固体，1.5g，产率97.4％)。
LC-MS m/z(ESI)＝265.10[M+1]
第四步：
反-3-(2-(甲硫基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈(61e)
trans-3-(2-(methylthio)-8-oxo-7,8-dihydro-9H-purin-9-yl)cyclobutane-1-carbonitrile
将4-((反-3-氰基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸61d(1.5g，5.7mmol)溶解于N,N-二甲基酰胺(15mL)，加入三乙胺(576mg，5.7mmol)、叠氮磷酸二苯酯(1.57g，5.7mmol)，随后逐步升温至110℃搅拌1.5小时。TLC监测反应完成，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝5:1～1:10)，得到标题化合物反-3-(2-(甲硫基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈61e(白色固体，1.0g，产率67％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.35(s,1H),8.11(s,1H),4.92-3.92(m,1H),3.37-3.26(m,2H),3.27-3.15(m,1H),2.78-2.67(m,2H),2.58(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝262.10[M+1]
第五步：
反-3-(7-甲基-2-(甲硫基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈(61f)
trans-3-(7-methyl-2-(methylthio)-8-oxo-7,8-dihydro-9H-purin-9-yl)cyclobutane-1-carbonitrile
将反-3-(2-(甲硫基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈61e(500mg，19.1mmol)溶解于二甲基甲酰胺(5mL)，在0℃下加入硫酸二甲酯(2.4g，19.1mmol)和碳酸铯(12.5g，38.2mmol)，0℃搅拌0.5小时。TLC监测反应完成，随后加入50mL水，有固体析出，过滤旋干得到标题化合物反-3-(7-甲基-2-(甲硫基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈61f(白色固体，462mg，产率87.7％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.61(s,1H),4.90-4.02(m,1H),3.34(s,3H),3.37-3.25(m,2H),3.25-3.12(m,1H),2.89(s,3H),2.86-2.75(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝276.10[M+1]
第六步：
反-3-(7-甲基-2-(甲基磺酰基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈(61g)
trans-3-(7-methyl-2-(methylsulfonyl)-8-oxo-7,8-dihydro-9H-purin-9-yl)cyclobutane-1-carbonitrile
将反-3-(7-甲基-2-(甲硫基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈61f(462mg，1.67mmol)溶解于甲醇中(10mL)，再加入纯净水2mL，反应混合液加入过氧单磺酸钾(1.02g，1.67mmol)，反应混合液加热至60℃反应2小时。TLC监测反应完成，减压旋除甲醇，再加入5mL纯水，用二氯甲烷(20ml×3)萃取3次后，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压旋干溶剂得到标题化合物反-3-(7-甲基-2-(甲基磺酰基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈61g(浅黄色固体，181mg，产率35.9％)。
LC-MS m/z(ESI)＝308.10[M+1]
第七步：
4-((9-(反-3-氰基环丁基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物61)
4-((9-(trans-3-cyanocyclobutyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
将反-3-(7-甲基-2-(甲基磺酰基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈61g(181mg，0.59mmol)、4-氨基-3-甲基-2氟苯甲酰胺(538mg,3.20mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺3mL中，氮气保护并换气，再加入叔丁醇钾(143mg，1.28mmol)，室温搅拌4h。TLC监测反应完成，将反应液倒入到30ml纯水中，大量黄色固体析出，过滤后用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝35/1)，得到标题化合物4-((9-(反-3-氰基环丁基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺化合物61(黄色固体，27 mg，产率11.6％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.62(s,1H),8.20(s,1H),7.88(d,1H),7.55(d,1H),7.49(s,1H),7.40(s,1H),5.14-5.01(m,1H),3.64-3.59(m,1H),3.31(s,3H)，3.26-3.21(m,2H),2.78-2.70(m,2H),2.32(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝396.20[M+1]
实施例62
4-((7-乙基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物62)
4-((7-ethyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000140
第一步：
2-氯-7-乙基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(62a)
2-chloro-7-ethyl-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮1D(400mg，1.57mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(8mL)，在0℃下加入碳酸铯(511mg，1.57mmol)和碘乙烷(293mg，1.88mmol)搅拌反应1小时。TLC监测至反应结束，随后加入10mL水，用乙酸乙酯萃取3次，有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩，旋蒸除去有机溶剂，得到标题化合物2-氯-7-乙基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮62a(白色固体，290mg，产率65.32％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.44(s,1H),4.50-4.41(m,1H),3.99-3.95(m,2H),3.89(q,2H),3.45(t,2H),2.46-2.41(m,2H),1.71-1.67(m,2H),1.25(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝283.10[M+1]
第二步：
4-((7-乙基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物62)
4-((7-ethyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
将2-氯-7-乙基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基(-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮62a(150mg，0.53mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(350mg，2.12mmol)、碳酸铯(690mg，2.12mmol)和甲磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2'，4'，6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-氨基-1,1'-联苯基-2-基)钯(II)(72mg，0.08mmol)溶于1，4-二氧六环(5mL)中，氮气保护换气，在110℃搅拌反应4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液经硅胶柱色谱分离纯化(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝20/1)，并经过Pre-HPLC得到标题化合物4-((7-乙基-8-氧代-9-(四氢- 2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺化合物62(白色固体，38mg，产率17.28％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.53(s,1H),8.25(s,1H),7.89(d,1H),7.55(d,1H),7.42(d,2H),4.48-4.40(m,1H),3.98(dd,2H),3.85(q,2H),3.43(t,2H),2.58-2.54(m,2H),2.30(s,3H)1.71-1.68(m,2H),1.25(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝415.20[M+1]
实施例63
2-氟-4-((7-异丙基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物63)
2-fluoro-4-((7-isopropyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000141
第一步：
2-氯-7-异丙基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(46a)
2-chloro-7-isopropyl-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮1D(520mg，2.04mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中，在0℃下加入碳酸铯(665mg，2.04mmol)和2-碘丙烷(416mg，2.45mmol)搅拌反应2小时。TLC监测至反应结束，随后加入20mL水，用乙酸乙酯萃取3次，有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩得到标题化合物2-氯-7-异丙基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮63a(白色固体，465mg，产率76.74％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.52(s,1H),4.65-4.56(m,1H),4.49-4.40(m,1H),3.99-3.95(m,2H),3.44(t,2H),2.46-2.42(m,2H),1.70-1.67(m,2H),1.43(d,6H)。
LC-MS m/z(ESI)＝297.10[M+1]
第二步：
2-氟-4-((7-异丙基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物63)
2-fluoro-4-((7-isopropyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
采用化合物62的合成方法制备得到标题化合物2-氟-4-((7-异丙基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺化合物63(白色固体，58mg，产率20.06％)。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ10.17(s,1H),7.98(d,1H),7.93(s,1H),7.76(d,1H),6.79(d,1H),6.39(s,1H),4.73(t,1H),4.52(t,1H),4.11(dd,2H),3.49(t,2H),2.63-2.55(m,1H),2.40(s,3H),1.75(d,2H),1.51(d,6H)。
LC-MS m/z(ESI)＝429.20[M+1]
实施例64
4-((7-环丙基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物64)
4-((7-cyclopropyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000142
第一步：
2-氯-7-环丙基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(64a)
2-chloro-7-cyclopropyl-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮1D(1g，3.9mmol)、环丙基硼酸(676mg，7.8mmol)、无水醋酸铜(715mg，3.9mmol)、碳酸钾(1.06g，7.8mmol)、1,10-菲啰啉(710mg，3.9mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(12mL)中，敞口反应，加热至70℃搅拌6小时。TLC监测至反应完全，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离纯化(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝3/1)得到标题化合物2-氯-7-环丙基-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮64a(白色固体，690mg，产率56％)。
1H NMR(400MHz CDCI3)δ8.15(s,1H),4.59-4.51(m,1H),4.12(dd,2H),3.55-3.49(m,2H),2.96-2.91(m,1H),2.77-2.67(m,2H),1.77-1.68(m,2H),1.26-1.13(m,2H),1.04-1.00(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝295.20[M+1]
第二步：
4-((7-环丙基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物64)
4-((7-cyclopropyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
采用化合物62的合成方法制备得到标题化合物4-((7-环丙基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺化合物64(白色固体，20mg，产率16.2％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.56(s,1H),8.11(s,1H),7.88(d,1H),7.54(d,1H),27.43(d,2H),5.98-5.87(m,1H),5.24-5.19(m,2H),4.49-4.42(m,3H),3.99(dd,2H),3.43(t,2H),2.59-2.51(m,2H),2.29(s,1H),1.71(dd,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝427.20[M+1]
实施例65
4-((9-(反-3-氰基环丁基)-7-乙基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯 甲酰胺(化合物65)
4-((9-(trans-3-cyanocyclobutyl)-7-ethyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000143
第一步：
反-3-(7-乙基-2-(甲硫基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈(65a)
trans-3-(7-ethyl-2-(methylthio)-8-oxo-7,8-dihydro-9H-purin-9-yl)cyclobutane-1-carbonitrile
将反-3-(2-(甲硫基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈61e(500mg，19.1mmol)溶解于二甲基甲酰胺(5mL)，在0℃下加入碘乙烷(3.0g，19.1mmol)和氢氧化钠(1.53g，38.2mmol)，0℃搅拌0.5小时。TLC监测反应完成，随后加入50mL水，有固体析出，过滤旋干得到标题化合物反-3-(7-乙基-2-(甲硫基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈65a(白色固体，457mg，产率82.5％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.68(s,1H),4.97-4.87(m,1H),3.93(q,2H),3.34(s,3H),3.33-3.23(m,2H),2.91(s,3H),2.74-2.59(m,2H),1.27(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝290.10[M+1]
第二步：
反-3-(7-乙基-2-(甲基磺酰基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈(65b)
trans-3-(7-ethyl-2-(methylsulfonyl)-8-oxo-7,8-dihydro-9H-purin-9-yl)cyclobutane-1-carbonitrile
将反-3-(7-乙基-2-(甲硫基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈65a(457mg，1.58mmol)溶解于甲醇中(10mL)，再加入纯净水2mL，反应混合液加入过氧单磺酸钾(1.00g，1.58mmol)，反应混合液加热至60℃反应2小时。TLC监测反应完成，反应混合液减压旋除甲醇，再加入5mL纯水，用二氯甲烷(20mL×3)萃取3次后，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压旋干溶剂得到反-3-(7-乙基-2-(甲基磺酰基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈65b(浅黄色固体，227mg，产率44.6％)。
LC-MS m/z(ESI)＝322.10[M+1]
第三步：
4-((9-(反-3-氰基环丁基)-7-乙基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物65)
4-((9-(trans-3-cyanocyclobutyl)-7-ethyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
将反-3-(7-乙基-2-(甲基磺酰基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈65b(200 mg，0.62mmol)、4-氨基-3-甲基-2氟苯甲酰胺中间体2(538mg，3.20mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺3mL中，氮气保护并换气，再加入叔丁醇钾(143mg，1.28mmol)，室温搅拌4小时。TLC监测反应完成，将反应液倒入到30mL纯水中，大量黄色固体析出，过滤后用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝35/1)得到标题化合物4-((9-(顺-3-氰基环丁基)-7-乙基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺化合物65(白色固体，15mg，产率5.9％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.64(s,1H),8.27(s,1H),7.86(d 1H),7.56-7.54(m,1H),7.48(s,1H),7.40(s,1H),5.14-5.09(m,1H),3.86-3.82(m,2H),3.64-3.59(m,1H),3.26-3.16(m,2H),2.75-2.68(m,2H),2.29(s,3H),1.22(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝410.20[M+1]
实施例66
2-氟-4-((9-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-甲基-8-氧代8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物66)
2-fluoro-4-((9-(2-isopropyl-4-methylpyridin-3-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000144
第一步：
2-氯-4-((2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(66a)
2-chloro-4-((2-isopropyl-4-methylpyridin-3-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2-异丙基-4-甲基吡啶-3-胺(21.61g，143.92mmol)、2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(26.51g，119.93mmol)，溶于乙腈(400mL)中，0℃搅拌下加入碳酸钾(33.15g,239.86mmol)，随后逐步升温至90℃搅拌72小时。TLC监测至反应结束，向反应液中加入水和乙酸乙酯萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩得到标题化合物2-氯-4-((2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯66a(棕色固体，44.23g，产率91.95％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.83(s,1H),8.77(s,1H),8.39(d,1H),7.20(d,1H),4.39(q,2H),3.10-3.03(m,1H),2.13(s,3H),1.36(t,3H),1.12(d,6H)。
LC-MS m/z(ESI)＝335.10[M+1]
第二步：
2-氯-4-((2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸(66b)
2-chloro-4-((2-isopropyl-4-methylpyridin-3-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylic acid
将2-氯-4-((2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯66a(44.23g，131.42mmol)，用四氢呋喃/水(200mL/200mL)溶解，再加入氢氧化锂(11.03g，262.84mmol)常温搅拌反应3小时。TLC监测至反应结束，旋干四氢呋喃，用2N盐酸调节pH至1-2，析出固体，过滤，并用水洗涤滤饼干燥得到标题化合物2-氯-4-((2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸66b(棕色固体，29.29g，产率72.66％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.23(s,1H),8.72(s,1H),8.38(d,1H),7.20(d,1H),3.11-3.04(m,1H),2.13(s,3H),1.26(d,1H),1.12(d,6H)。
LC-MS m/z(ESI)＝307.10[M+1]
第三步：
2-氯-9-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(66c)
2-chloro-9-(2-isopropyl-4-methylpyridin-3-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-4-((2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸66b(25.00g，81.5mmol)溶解于四氢呋喃中，再将温度降至0℃，加入叠氮磷酸二苯酯(24.6g，89.5mmol)，三乙胺(9.8g，97.75mmol)。室温搅拌1h后逐步升温至120℃反应2小时。TLC监测至反应结束，在反应液加入水和乙酸乙酯萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩经硅胶柱色谱分离(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1/1)纯化得到标题化合物2-氯-9-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮66c(白色固体，18g，产率75％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.06(s,1H),8.59(d,1H),8.33(s,1H),7.35(dd,1H),2.80-2.73(m,1H),2.05(s,3H),1.09(dd,6H)。
LC-MS m/z(ESI)＝304.10[M+1]
第四步：
2-氯-9-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(66d)
2-chloro-9-(2-isopropyl-4-methylpyridin-3-yl)-7-methyl-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮66c(500mg，1.65mmol)，溶解于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)，在0℃下加入碳酸铯(536mg，1.65mmol)和硫酸二甲酯(269mg，2.14mmol)，0℃搅拌1.5小时。TLC监测至反应结束，向反应液中加入水和乙酸乙酯萃取3次，有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩后用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1/1)得到标题化合物2-氯-9-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮66d(白色固体，258mg，产率49.32％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.60(d,1H),8.56(s,1H),7.36(d,1H),3.49(s,3H),2.71-2.78(m,1H),2.04(s,3H),1.10(d,3H),1.06(d,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝318.10[M+1]
第五步：
2-氟-4-((9-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-甲基-8-氧代8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物66)
2-fluoro-4-((9-(2-isopropyl-4-methylpyridin-3-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
将2-氯-9-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮66d(100mg，0.31mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(210mg，1.26mmol)、碳酸铯(410mg，1.26mmol)和甲磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2'，4'，6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-氨基-1,1'-联苯基-2-基)钯(II)(43mg，0.04mmol)溶于1，4-二氧六环(4mL)，氮气保护换 气，在110℃搅拌6h。TLC监测至反应结束，浓缩反应液经硅胶柱色谱分离纯化(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝20/1)，并经过Pre-HPLC得到标题化合物2-氟-4-((9-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-甲基-8-氧代8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺化合物66(白色固体，40mg，产率28.28％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.66(s,1H),8.56(d,1H),8.33(s,1H),7.73(s,0.5H),7.69(s,0.5H),7.48(d,1H),7.44(s,1H),7.38(d,1H),7.34(d,1H),3.45(s,3H),2.85-2.78(m,1H),2.20(s,3H),2.06(s,3H),1.13(s,3H),1.11(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝450.20[M+1]
实施例67
2-氟-4-((9-(3-羟基环戊基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物67)
2-fluoro-4-((9-(3-hydroxycyclopentyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000145
第一步：
(3-羟基环戊基)氨基甲酸叔丁酯(67b)
tert-butyl(3-oxocyclopentyl)carbamate
将(3-氧代环戊基)氨基甲酸叔丁酯67a(10g，50.19mmol)溶解于60mL四氢呋喃中，冰浴下缓慢加入硼氢化钠(2.85g，75.28mmol)搅拌反应3小时。TLC监测至反应结束，缓慢加入饱和NaCl溶液至没有气泡出现，再加入乙酸乙酯萃取，浓缩有机相得到标题化合物(3-羟基环戊基)氨基甲酸叔丁酯67b(黄色油状液体，10.10g，产率99％)。
LC-MS m/z(ESI)＝202.20[M+1]
第二步：
3-氨基环戊烷-1-醇盐酸盐(67c)
3-aminocyclopentan-1-ol hydrochloride
将(3-羟基环戊基)氨基甲酸叔丁酯67b(10.10g，50.18mmol)加入于1,4-二氧六环(20mL)溶液中，常温搅拌至完全溶解，将反应液置于冰浴下，缓慢加入4M的盐酸-1,4二氧六环溶液(8.75g，239.87mmol)继续搅拌2小时。TLC监测至反应结束，过滤并浓缩得到标题化合物3-氨基环戊烷-1-醇盐酸盐67c(黑色油状液体，粗品，6.91g，产率100％)，直接用于下一步实验。
LC-MS m/z(ESI)＝138.10[M+1]
第三步：
2-氯-4-((3-羟基环戊基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(67d)
ethyl 2-chloro-4-((3-hydroxycyclopentyl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将3-氨基环戊烷-1-醇盐酸盐67c(6.91g，50.22mmol)和2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯(13.32g，60.26mmol)加入75mL乙腈中，常温搅拌至溶解后，再缓慢加入碳酸钾(17.35g，125.54mmol)搅拌反应10小时。TLC监测至反应结束，旋干乙腈，加入水和乙酸乙酯萃取，浓缩后残留物经硅胶柱色谱分离纯化(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1/1)得到标题化合物2-氯-4-((3-羟基环戊基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯67d(黄色油状液体，7.78g，产率54％)。
LC-MS m/z(ESI)＝286.10[M+1]
第四步：
2-氯-4-((3-羟基环戊基)氨基)嘧啶-5-羧酸(67e)
2-chloro-4-((3-hydroxycyclopentyl)amino)pyrimidine-5-carboxylic acid
将2-氯-4-((3-羟基环戊基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯67d(7.78g，27.23mmol)溶于50mL四氢呋喃中，再将氢氧化锂(1.3g，54.46mmol)溶于50mL水中，冰浴下将氢氧化锂水溶液缓慢加入THF溶液中搅拌反应2小时。TLC监测至反应结束，旋干四氢呋喃，加入盐酸溶液调节pH至4左右，有固体析出，过滤收集固体，滤液加入乙酸乙酯萃取，将有机相于滤渣混合浓缩得到标题化合物2-氯-4-((3-羟基环戊基)氨基)嘧啶-5-羧酸67e(淡黄色固体，6.78g，产率96％)。
LC-MS m/z(ESI)＝258.10[M+1]
第五步：
2-氯-9-(3-羟基环戊基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(67f)
2-chloro-9-(3-hydroxycyclopentyl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-4-((3-羟基环戊基)氨基)嘧啶-5-羧酸67e(6.0g，23.29mmol)溶解于60mLN,N-二甲基乙酰胺中，冰浴下缓慢加入叠氮磷酸二苯酯(6.41g，23.29mmol)、三乙胺(2.36g，23.29mmol)，升至常温搅拌反应1小时后，置于90℃加热反应5小时。TLC监测至反应结束，将反应液滴入200mL水中，加入乙酸乙酯萃取，收集有机相，浓缩得到标题化合物2-氯-9-(3-羟基环戊基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮67f(黄色油状液体，5.47g，产率92％)。
LC-MS m/z(ESI)＝255.10[M+1]
第六步：
2-氯-9-(3-羟基环戊基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(67h)
2-chloro-9-(3-hydroxycyclopentyl)-7-methyl-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-(3-羟基环戊基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮67f(2.5g，9.82mmol)和碳酸铯(4.16g，12.76mmol)溶于40mLDMF中，冰浴搅拌10min后，缓慢加入硫酸二甲酯(1.24g，9.82mmol)反应1小时。TLC监测至反应完全，向反应液中加入100mL水，和乙酸乙酯萃取，收集有机相浓缩经柱层析色谱分离纯化得到标题化合物2-氯-9-(3-羟基环戊基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮67g(橙色固体，900mg，产率34％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.35(s,1H),4.90(d,1H),4.71-4.62(m,1H),4.16-4.08(m,1H),3.35(s,3H),2.29-2.23(m,1H),2.17-2.10(m,2H),1.92-1.77(m,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝269.10[M+1]
第七步：
2-氟-4-((9-(3-羟基环戊基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苄腈(50h)
2-fluoro-4-((9-(3-hydroxycyclopentyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzonitrile
将2-氯-9-(3-羟基环戊基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮67g(600mg，2.23mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苄腈2A(335mg，2.23mmol)、碳酸铯(2.18g，6.70mmol)、甲磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2'，4'，6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-氨基-1,1'-联苯基-2-基)钯(II)(303mg，0.34mmol)溶解于1,4-二氧六环(10mL)中，氮气保护换气，在110℃搅拌6小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物经硅胶柱色谱分离纯化(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝20/1)得到标题化合物2-氟-4-((9-(3-羟基环戊基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苄腈67h(淡黄色固体，460mg，产率54％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.74(d,1H),8.25(d,1H),8.20-8.15(m,1H),7.66(d,1H),5.05-4.96(m,0.5H),4.83(d,0.5H),4.73-4.64(m,0.5H),4.66(s,0.5H),4.13-4.08(m,1H),3.34(d,3H),2.31(s,3H),2.15-2.09(m,3H),1.96-1.75(m,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝383.20[M+1]
第八步：
2-氟-4-((9-(3-羟基环戊基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物67)
2-fluoro-4-((9-(3-hydroxycyclopentyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
将2-氟-4-((9-(3-羟基环戊基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苄腈67h(400mg，1.05mmol)、碳酸钾(43.4mg，313.81mmol)溶于20mL二甲亚砜中，常温搅拌下缓慢加入双氧水(1.05mL，10.46mmol)反应3小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物经中压制备分离纯化，并经过Pre-HPLC得到标题化合物2-氟-4-((9-(3-羟基环戊基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺化合物67，通过SFC拆分得到化合物67-1(白色固体，70mg，产率17％，dr＝99％)，化合物67-2(白色固体，58mg，产率14％，dr＝99％)。(OZ),流动相:CO 2/异丙醇＝70/30；柱温:35℃；柱压:80bar；流速:1mL/min；检测器信号通道:220nm@4nm；二极管阵列检测器波长:200～400nm。
化合物67-1：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.48(s,1H),8.19(s,1H),7.88(d,1H),7.54(d,1H),7.47(s,1H),7.37(d,1H),4.86(d,1H),4.72-4.63(m,1H),4.14-4.06(m,1H),3.32(s,3H),2.42-2.32(m,1H),2.28(s,3H),2.16-2.10(m,2H),1.93-1.76(m,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝400.20[M+1]
化合物67-2：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.51(s,1H),8.18(s,1H),7.86(d,1H),,7.54(d,1H),7.46(s,1H),7.38(d,1H),5.03-4.94(m,1H),4.64(d,1H),4.35(s,1H),3.32(s,3H),2.38-2.31(m,1H),2.28(s,3H),2.15-2.03(m,3H)1.85-1.80(m,1H),1.62-1.57(m,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝400.20[M+1]
实施例68
4-((9-环己基-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物68)
4-((9-cyclohexyl-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000146
第一步：
2-氯-4-(环己基氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(68a)
ethyl 2-chloro-4-(cyclohexylamino)pyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(5.0g，22.6mmol)、碳酸钾(6.2g，45.2mmol)溶解于乙腈(50mL)，在0℃下加入环己氨(2.2g，22.6mmol)，在室温搅拌20小时。TLC监测反应结束，加水和乙酸乙酯萃取三次，无水硫酸钠干燥并用硅胶柱色谱分离提纯(正己烷/乙酸乙酯(v/v)＝10:1)得到标题化合物2-氯-4-(环己基氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯68a(白色固体，4.1g，产率64％)。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.64(s,1H),8.53-8.23(m,1H),4.35(q,2H),4.25-4.05(m,1H),2.01-1.95(m,2H),1.77-1.72(m,2H),1.64-1.61(m,1H),1.50-1.41(m,3H),1.39(t,3H),1.35-1.18(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝284.10[M+1]
第二步：
2-氯-4-(环己基氨基)嘧啶-5-羧酸(68b)
2-chloro-4-(cyclohexylamino)pyrimidine-5-carboxylic acid
将2-氯-4-(环己基氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯68a(4.1g，14.4mmol)溶解于四氢呋喃/水(20mL/20mL)中，加入氢氧化锂(691mg，28.8mmol)，室温搅拌1小时。TLC监测反应结束，旋干四氢呋喃，调pH至4-5，有白色固体析出，过滤，滤饼用石油醚/乙酸乙酯(v/v＝10/1)洗两次，浓缩得到标题化合物2-氯-4-(环己基氨基)嘧啶-5-羧酸68b(白色固 体，3.0g，产率81％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.77(s,1H),8.76-8.45(m,2H),4.01-3.92(m,1H),2.05-1.79(m,2H),1.79-1.65(m,2H),1.60-1.54(m,1H),1.42-1.19(m,5H)。
LC-MS m/z(ESI)＝256.10[M+1]
第三步：
2-氯-9-环己基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(68c)
2-chloro-9-cyclohexyl-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-4-(环己基氨基)嘧啶-5-羧酸68b(3.0g，11.7mmol)溶解于二甲基乙酰胺(30mL)，加入三乙胺(1.18g，11.7mmol)、叠氮磷酸二苯酯(3.22g，11.7mmol)，随后逐步升温至110℃搅拌1.5小时。TLC监测反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1:10)得到标题化合物2-氯-9-环己基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮68c(白色固体，2.2g，产率74％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.60(s,1H),8.12(s,1H),4.19-4.11(m,1H),1.92-1.57(m,6H),1.52-0.93(m,4H)。
LC-MS m/z(ESI)＝253.10[M+1]
第四步：
2-氯-9-环己基-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(68d)
2-chloro-9-cyclohexyl-7-methyl-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-环己基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮68c(2.2g，8.7mmol)溶解于二甲基甲酰胺(15mL)，在0℃下加入硫酸二甲酯(1.1g，8.7mmol)和碳酸铯(4.25g，13mmol)搅拌反应0.5小时。TLC监测反应结束，向反应液中加入水，有固体析出，过滤得到标题化合物2-氯-9-环己基-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮68d(黄色固体，1.1g，产率48％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.34(s,1H),4.22-4.41(m,1H),3.35(s,3H),2.22-2.12(m,2H),1.91-1.60(m,5H),1.43-1.33(m,2H),1.27-1.14(m,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝267.10[M+1]
第五步：
4-((9-环己基-7-甲基-8-氧代8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物68)
4-((9-cyclohexyl-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
将2-氯-9-环己基-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮68d(200mg，0.79mmol)、4-氨基-3-甲基-2氟苯甲酰胺(292mg，1.74mmol)、碳酸铯(515mg，1.58mmol)、甲磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2'，4'，6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-氨基-1,1'-联苯基-2-基)钯(II)(72mg，0.079mmol)溶解于二氧六环3mL中，氮气保护并换气，在110℃搅拌4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物经硅胶柱色谱分离纯化(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝35/1)得到标题化合物4-((9-环己基-7-甲基-8-氧代8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺化合物68(白色固体，80mg，产率25％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.48(s,1H),8.18(s,1H),8.01(d,1H),7.54(d,1H),7.42(d,2H),4.23-4.14(m,1H),3.32(s,3H),2.30(s,3H),2.29-2.15(m,2H),1.85-1.67(m,5H),1.55-1.07(m,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝399.20[M+1]
实施例69
2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-3-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基) 苯甲酰胺(化合物69)
2-fluoro-5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-3-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000147
第一步：
2-氯-4-((四氢-2H-吡喃-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(69a)
ethyl 2-chloro-4-((tetrahydro-2H-pyran-3-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(5.0g,22.6mmol)、碳酸钾(6.2g,45.2mmol)溶解于乙腈(50mL)，在0℃下加入四氢-2H-吡喃-3-胺(2.3g，22.6mmol)，在室温搅拌20小时。加水和乙酸乙酯萃取三次，无水硫酸钠干燥并用硅胶柱色谱分离提纯(正己烷/乙酸乙酯(v/v)＝10:1)，浓缩得到标题化合物2-氯-4-((四氢-2H-吡喃-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯69a(白色固体，4.1g，产率64％)。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.69(s,1H),8.68(s,1H),4.37(q,2H),4.34-4.24(m,1H),3.89-3.84(m,1H),3.77-3.66(m,2H),3.58-3.54(m,1H),2.01-1.95(m,1H),1.86-1.65(m,2H),1.69-1.63(m,1H),1.40(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝286.10[M+1]
第二步：
2-氯-4-((四氢-2H-吡喃-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸(69b)
2-chloro-4-((tetrahydro-2H-pyran-3-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylic acid
将2-氯-4-((四氢-2H-吡喃-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯69a(4.1g，14.3mmol)溶解于四氢呋喃/水(20mL/20mL)中，加入氢氧化锂(686mg，28.6mmol)，室温搅拌反应1小时。TLC监测至反应结束，旋干四氢呋喃，调pH至4-5，有白色固体析出，过滤，滤饼用石油醚/乙酸乙酯(v/v＝10/1)洗两次，浓缩得到标题化合物2-氯-4-((四氢-2H-吡喃-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸69b(白色固体，3.5g，产率95％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.83(s,1H),8.75(d,1H),8.59(s,1H),4.14-4.07(m,1H),3.76-3.72(m,1H),3.59(t,1H),3.47-3.42(m,2H),1.93-1.86(m,1H),1.79-1.62(m,2H),1.58-1.49(m,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝258.10[M+1]
第三步：
2-氯-9-(四氢-2H-吡喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(69c)
2-chloro-9-(tetrahydro-2H-pyran-3-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-4-((四氢-2H-吡喃-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸69b(3.5g，13.6mmol)溶解于二甲基乙酰胺(30mL)中，再加入三乙胺(1.37g，13.6mmol)和叠氮磷酸二苯酯(3.74g，13.6mmol)随后逐步升温至110℃搅拌1.5小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1:10)得到标题化合物2-氯-9-(四氢-2H-吡喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮69c(白色固体，2.2g，产率63％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.67(s,1H),8.13(s,1H),4.29-4.21(m,1H),3.86-3.77(m,2H),3.37-3.29(m,2H),2.04-1.39(m,4H)。
LC-MS m/z(ESI)＝255.10[M+1]
第四步：
2-氯-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(69d)
2-chloro-7-methyl-9-(tetrahydro-2H-pyran-3-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-(四氢-2H-吡喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮69c(2.2g，8.7mmol)溶解于二甲基甲酰胺(15mL)，在0℃下加入硫酸二甲酯(1.1g，8.7mmol)和碳酸铯(4.25g，13mmol)搅拌反应0.5小时。TLC监测至反应结束，向反应液中加入水，有固体析出，过滤得到标题化合物2-氯-9-环己基-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮69d(黄色固体，1.7g，产率73％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.36(s,1H),4.35-4.23(m,1H),3.91-3.77(m,2H),3.35(s,3H),3.34-3.33(m,2H),2.50-2.44(m,1H),1.98-1.89(m,1H),1.83-1.62(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝269.10[M+1]
第五步：
2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-3-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物69)
2-fluoro-5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-3-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
将2-氯-7-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮69d(200mg，0.75mmol)、4-氨基-3-甲基-2氟苯甲酰胺中间体2(402mg,1.50mmol)、碳酸铯(489mg，1.50mmol)、甲磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2'，4'，6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-氨基-1,1'-联苯基-2-基)钯(II)(68mg，0.075mmol)溶解于二氧六环3mL中，氮气保护并换气，在110℃搅拌4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物经硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝35/1)得到标题化合物2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-3-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物69，通过SFC拆分得到化合物69-1(白色固体，32mg，产率11％，RT＝12.47min)，化合物69-2(白色固体，33mg，产率11％，RT＝14.31min)。(OZ),流动相:CO 2/乙醇＝65/35；柱温:35℃；柱压:80bar；流速:1mL/min；检测器信号通道:215nm@4.8nm；二极管阵列检测器波长:200～400nm。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.54(s,1H),8.20(s,1H),7.97(d,1H),7.56(d,1H),7.43(d,2H),4.36-4.28(m,1H),3.99(t,1H),3.94-3.74(m,2H),3.37(d,1H),3.32(s,3H),2.62-2.52(m,1H),2.30(s,3H),1.93(d,1H),1.86-1.59(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝401.20[M+1]
实施例70
2-氟-4-((9-(顺-4-甲氧基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物70)
2-fluoro-4-((9-(cis-4-methoxycyclohexyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000148
第一步：
2-氯-4-((顺-4-甲氧基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(70a)
ethyl 2-chloro-4-((cis-4-methoxycyclohexyl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯-5-嘧啶甲酸乙酯1A(5.13g，23.22mmol)溶于乙腈(20mL)中，0℃搅拌下加入碳酸钾(6.42g，46.44mmol)，再缓慢滴加顺-4-甲氧基环己烷-1-胺(2.00g，15.48mmol)的乙腈溶液(10mL)升温至常温搅拌反应1小时。TLC监测至反应结束，硅藻土过滤后用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝2:1)纯化得标题化合物2-氯-4-((顺-4-甲氧基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯70a(白色固体，2.00g，产率41.26％)。
LC-MS m/z(ESI)＝314.10[M+1]
第二步：
2-氯-4-((顺-4-甲氧基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸(70b)
2-chloro-4-((cis-4-methoxycyclohexyl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2-氯-4-((顺-4-甲氧基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯70a(2.00g，6.37mmol)溶解于四氢呋喃/水(15mL/15mL)中，加入氢氧化锂一水合物(0.80g，19.12mmol)常温搅拌反应2小时。TLC监测至反应结束，浓缩蒸发掉四氢呋喃后加入2N HCl调节pH至3-4左右，有白色固体析出，过滤，滤饼用水以及石油醚/乙酸乙酯(v/v＝10/1)洗两次得标题化合物2-氯-4-((顺-4-甲氧基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸70b(白色固体，1.67g，产率91.70％)。
LC-MS m/z(ESI)＝286.10[M+1]
第三步：
2-氯-9-(顺-4-甲氧基环己基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(70c)
2-chloro-9-(cis-4-methoxycyclohexyl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-4-((顺-4-甲氧基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸70b(1.57g，5.49mmol)用N,N-二 甲基乙酰胺(16mL)溶解，常温搅拌下加入三乙胺(0.76mL，5.49mmol)和叠氮磷酸二苯酯(1.18mL，5.49mmol)反应2小时，升温至110℃回流反应2.5小时。TLC监测至反应结束，反应液中加水二氯甲烷进行萃取，浓缩有机层得标题化合物2-氯-9-(顺-4-甲氧基环己基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮70c(白色固体，1.70g，粗品，产率109.47％)。
LC-MS m/z(ESI)＝283.00[M+1]
第四步：
2-氯-9-(顺-4-甲氧基环己基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(70d)
2-chloro-9-(cis-4-methoxycyclohexyl)-7-methyl-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-(顺-4-甲氧基环己基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮70c(1.70g，6.01mmol)用N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶解，0℃搅拌下加入硫酸二甲酯(0.57mL，6.01mmol)和碳酸铯(3.92g，12.03mmol)反应2小时。TLC监测至反应结束，把反应液缓慢滴加到冰水中搅拌，析出白色固体，用水和石油醚洗3次过滤得到标题化合物2-氯-9-(顺-4-甲氧基环己基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮70d(白色固体，1.2g，产率67.25％)。
LC-MS m/z(ESI)＝297.10[M+1]
第五步：
2-氟-4-((9-(顺-4-甲氧基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物70)
2-fluoro-4-((9-(cis-4-methoxycyclohexyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
将2-氯-9-(顺-4-甲氧基环己基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮70d(0.25g，0.84mmol)用1,4-二氧六环(8mL)溶解，常温搅拌下加入4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(0.57g，3.37mmol)、碳酸铯(0.41g，1.26mmol)、BrettPhos-G3-Pd(0.08g，0.08mmol)，氮气保护并换气，升温至110℃回流反应4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝30/1)，得标题化合物2-氟-4-((9-(顺-4-甲氧基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺化合物70(白色固体，95mg，产率26.39％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.47(s,1H),8.16(s,1H),7.82(d,1H),7.55(d,1H),7.44(s,1H),7.35(d,1H),4.26-4.18(m,1H),3.42-3.40(m,1H),3.31(s,3H),3.21(s,3H),2.49-2.39(m,2H),2.28(s,3H),2.00(d,2H),1.65-1.37(m,4H)。
LC-MS m/z(ESI)＝429.20[M+1]
实施例71
2-氟-4-((9-(反-4-甲氧基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物71)
2-fluoro-4-((9-(trans-4-methoxycyclohexyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000149
Figure PCTCN2021087912-appb-000150
第一步：
2-氯-4-((反-4-甲氧基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(71a)
ethyl 2-chloro-4-((trans-4-methoxycyclohexyl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯-5-嘧啶甲酸乙酯1A(5.13g，23.22mmol)溶于乙腈(20mL)中，0℃搅拌下加入碳酸钾(6.42g，46.44mmol)，再缓慢滴加反-4-甲氧基环己烷-1-胺(2.00g，15.48mmol)的乙腈溶液(10mL)升温至常温搅拌反应1小时。TLC监测至反应结束，硅藻土过滤后用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝2:1)纯化得标题化合物2-氯-4-((反-4-甲氧基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯71a(白色固体，2.00g，产率41.26％)。
LC-MS m/z(ESI)＝314.10[M+1]
第二步：
2-氯-4-((反-4-甲氧基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸(71b)
2-chloro-4-((trans-4-methoxycyclohexyl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2-氯-4-((1r,4r)-4-甲氧基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯71a(2.00g，6.37mmol)溶解于四氢呋喃/水(15mL/15mL)中，加入氢氧化锂一水合物(0.80g，19.12mmol)，常温搅拌反应2小时。TLC监测至反应结束，浓缩蒸发掉四氢呋喃后加入2N HCl调节pH至3-4左右，有白色固体析出，过滤，滤饼用水以及石油醚/乙酸乙酯(v/v＝10/1)洗两次得标题化合物2-氯-4-((反-4-甲氧基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸71b(白色固体，1.67g，产率91.70％)。
LC-MS m/z(ESI)＝286.10[M+1]
第三步：
2-氯-9-(反-4-甲氧基环己基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(71c)
2-chloro-9-(trans-4-methoxycyclohexyl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-4-((反-4-甲氧基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸71b(1.57g，5.49mmol)用N,N-二甲基乙酰胺(16mL)溶解，常温搅拌下加入三乙胺(0.76mL，5.49mmol)和叠氮磷酸二苯酯(1.18mL,5.49mmol)反应2小时后，升温至110℃回流反应2.5小时。TLC监测至反应结束，反应液中加水二氯甲烷进行萃取，浓缩有机层得标题化合物2-氯-9-(反-4-甲氧基环己基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮71c(白色固体，1.70g，粗品，产率109.47％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.61(s,1H),8.11(s,1H),4.20-4.10(m,1H),3.25(s,3H),3.22-3.14(m,1H),2.30-2.18(m,2H),2.15-2.06(m,2H),1.81-1.73(d,2H),1.31-1.18(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝283.00[M+1]
第四步：
2-氯-9-(反-4-甲氧基环己基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(71d)
2-chloro-9-(trans-4-methoxycyclohexyl)-7-methyl-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-(反-4-甲氧基环己基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮71c(1.70g，6.01mmol)用N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶解，0℃搅拌下加入硫酸二甲酯(0.57mL，6.01mmol)和碳酸铯(3.92g，12.03mmol)反应2小时。TLC监测至反应结束，把反应液缓慢滴加到冰水中搅拌，析出白色固体，用水和石油醚洗3次过滤得到标题化合物2-氯-9-(反-4-甲氧基环己基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮71d(白色固体，1.2g，产率67.25％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.34(s,1H),4.26-4.15(m,1H),3.35(s,3H),3.27(s,3H),3.25-3.16(m,1H),2.31-2.19(m,2H),2.15-2.08(m,2H),1.83-1.75(m,2H),1.34-1.21(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝297.10[M+1]
第五步：
2-氟-4-((9-(反-4-甲氧基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物71)
2-fluoro-4-((9-(trans-4-methoxycyclohexyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
将2-氯-9-(反-4-甲氧基环己基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮71d(0.25g，0.84mmol)用1,4-二氧六环(8mL)溶解，常温搅拌下加入4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(0.57g，3.37mmol)、碳酸铯(0.41g，1.26mmol)、BrettPhos-G3-Pd(0.08g，0.08mmol)，氮气保护并换气，升温至110℃回流反应4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝30/1)得标题化合物2-氟-4-((9-(反-4-甲氧基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺化合物71(白色固体，130mg，产率36.01％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.48(s,1H),8.18(s,1H),7.98(d,1H),7.56(d,1H),7.46(s,1H),7.39(s,1H),4.26-4.16(m,1H),3.34(s,3H),3.28(s,3H),3.25-3.16(m,1H),2.42-2.33(m,2H),2.30(s,3H),2.13(d,2H),1.79(d,2H),1.34-1.19(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝429.20[M+1]
实施例72
2-氟-4-(9-(顺-4-羟基-4-甲基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物72)
2-fluoro-4-((9-(cis-4-hydroxy-4-methylcyclohexyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000151
Figure PCTCN2021087912-appb-000152
第一步：
2-氯-4-((顺-4-羟基-4-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(72a)
2-chloro-4-((cis-4-hydroxy-4-methylcyclohexyl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(5.0g，22.6mmol)、碳酸钾(6.2g，45.2mmol)溶解于乙腈(50mL)，在0℃下加入顺-4-氨基-1-甲基环己-1-醇(2.9g，22.6mmol)，在室温搅拌20小时。加水和乙酸乙酯萃取三次，无水硫酸钠干燥并用硅胶柱色谱分离提纯(正己烷/乙酸乙酯(v/v)＝10:1)，浓缩得到标题化合物2-氯-4-((顺-4-羟基-4-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯72a(白色固体，4.1g，产率58％)。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.65(s,1H),8.37(d,1H),4.35(q,2H),4.09-4.04(m,1H),1.94-1.82(m,2H),1.82-1.45(m,6H),1.38(t,3H),1.28(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝314.10[M+1]
第二步：
2-氯-4-((顺-4-羟基-4-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸(72b)
2-chloro-4-((cis-4-hydroxy-4-methylcyclohexyl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2-氯-4-((顺-4-羟基-4-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯72a(4.1g，13.1mmol)溶解于四氢呋喃/水(20mL/20mL)中，加入氢氧化锂(629mg，26.2mmol)，室温搅拌反应1小时。TLC监测至反应结束，旋干四氢呋喃，调pH至4-5，有白色固体析出，过滤，滤饼用石油醚/乙酸乙酯(v/v＝10/1)洗两次，浓缩得到标题化合物2-氯-4-((顺-4-羟基-4-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸72b(白色固体，3.5g，产率93％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.77(br,1H),8.56(s,1H),8.49(d,1H),3.93-3.83(m,2H),1.78-1.50(m,6H),1.43-1.40(m,2H),1.11(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝286.10[M+1]
第三步：
2-氯-9-(顺-4-羟基-4-甲基环己基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(72c)
2-chloro-9-(cis-4-hydroxy-4-methylcyclohexyl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-4-((顺-4-羟基-4-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸72b(3.5g，12.2mmol)溶解于二甲基乙酰胺(30mL)，加入三乙胺(1.24g，12.2mmol)、叠氮磷酸二苯酯(3.36g，12.2mmol)，随后逐步升温至110℃搅拌1.5小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1:10)得到标题化合物2-氯-9-(顺-4-羟基-4-甲基环己基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮72c(白色固体，1.4g，产率41％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ11.58(s,1H),8.11(d,1H),4.22(s,1H),4.22-4.02(m,1H),2.65-2.56(m,2H),1.83-1.60(m,2H),1.47-1.43(m,4H),1.18(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝283.10[M+1]
第四步：
2-氯-9-(顺-4-羟基-4-甲基环己基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(72d)
2-chloro-9-(cis-4-hydroxy-4-methylcyclohexyl)-7-methyl-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-(顺-4-羟基-4-甲基环己基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮72c(1.4g，4.9mmol)溶解于二甲基甲酰胺(15mL)，在0℃下加入硫酸二甲酯(618mg，4.9mmol)和碳酸铯(3.2g，9.8mmol)搅拌反应0.5小时。TLC监测至反应结束，向反应液中加入水，有固体析出，过滤得到标题化合物2-氯-9-(顺-4-羟基-4-甲基环己基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮72d(黄色固体，502mg，产率34％)。
LC-MS m/z(ESI)＝297.10[M+1]
第五步：
2-氟-4-((9-(顺-4-羟基-4-甲基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物72)
2-fluoro-4-((9-(cis-4-hydroxy-4-methylcyclohexyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
将2-氯-9-(顺-4-羟基-4-甲基环己基)-7-甲基-7,9-二氢-8-嘌呤-8-酮72d(250mg，0.84mmol)、4-氨基-3-甲基-2氟苯甲酰胺中间体2(282mg，1.68mmol)、碳酸铯(446mg，1.68mmol)、甲磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2'，4'，6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-氨基-1,1'-联苯基-2-基)钯(II)(76mg，0.084mmol)溶解于二氧六环4mL中，氮气保护并换气，在110℃搅拌4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝35/1)得到标题化合物2-氟-4-((9-(顺-4-羟基-4-甲基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺化合物72(白色固体，80mg，产率22％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.40(s,1H),8.15(s,1H),7.92(d,1H),7.54(d,1H),7.46(s,1H),7.35(d,1H),4.20-4.06(m,1H),4.02(s,1H),3.31(s,3H),2.78-2.57(m,2H),2.28(s,3H),1.68(d,2H),1.49-1.40(m,4H),1.15(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝429.20[M+1]
实施例73
2-氟-4-((9-(反-4-羟基-4-甲基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物73)
2-fluoro-4-((9-(trans-4-hydroxy-4-methylcyclohexyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000153
Figure PCTCN2021087912-appb-000154
第一步：
2-氯-4-((反-4-羟基-4-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯73a)
2-chloro-4-((trans-4-hydroxy-4-methylcyclohexyl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯-5-嘧啶甲酸乙酯1A(5.00g，30.18mmol)溶于乙腈(30mL)中，0℃搅拌下加入碳酸钾(12.51g，90.55mmol)，再缓慢滴加反-4-氨基-1-甲基环己醇盐酸盐(10.01g，45.27mmol)的乙腈溶液(10mL)升温至常温搅拌反应1小时，TLC监测至反应结束，硅藻土过滤后用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝2:1)纯化得标题化合物2-氯-4-((反-4-羟基-4-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯73a(白色固体，4.70g，产率49.63％)。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.66(s,1H),4.36(q,2H),4.30-4.21(m,1H),2.10-2.00(m,2H),1.74-1.63(m,5H),1.62-1.50(m,3H),1.40(t,3H),1.31(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝314.10[M+1]
第二步：
2-氯-4-((反-4-羟基-4-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸(73b)
2-chloro-4-((trans-4-hydroxy-4-methylcyclohexyl)amino)pyrimidine-5-carboxylic acid
将2-氯-4-((反-4-羟基-4-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯73a(4.70g，14.98mmol)溶解于四氢呋喃/水(40mL/20mL)中，加入氢氧化锂一水合物(1.89g,44.94mmol)，常温搅拌反应2小时，TLC监测至反应结束，浓缩蒸发掉四氢呋喃后加入2N HCl调节pH至3-4左右，有白色固体析出，过滤，滤饼用水以及石油醚/乙酸乙酯(v/v＝10/1)洗两次得标题化合物2-氯-4-((反-4-羟基-4-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸73b(白色固体，4.20g，产率98.15％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.68(d,1H),8.56(s,1H),4.02(s,1H),3.16(s,1H),1.91-1.83(m,2H),1.51-1.45(m,6H),1.15(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝314.10[M+1]
第三步：
2-氯-9-(反-4-羟基-4-甲基环己基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(73c)
2-chloro-9-(trans-4-hydroxy-4-methylcyclohexyl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-4-((反-4-羟基-4-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸73b(4.34g，15.19mmol)用N,N-二甲基乙酰胺(30mL)溶解，常温搅拌下加入三乙胺(2.11mL，15.19mmol)和叠氮磷酸二苯酯(3.27mL，5.19mmol)反应2小时后，升温至110℃回流反应2.5小时。TLC监 测至反应结束，反应液中加水有白色固体析出，过滤，滤饼用水以及石油醚/乙酸乙酯(v/v＝10/1)洗两次得标题化合物2-氯-9-(反-4-羟基-4-甲基环己基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮73c(白色固体，1.82g，产率42.36％)。
LC-MS m/z(ESI)＝283.00[M+1]
第四步：
2-氯-9-(反-4-羟基-4-甲基环己基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(73d)
2-chloro-9-(trans-4-hydroxy-4-methylcyclohexyl)-7-methyl-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-(反-4-羟基-4-甲基环己基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮73c(1.80g，6.37mmol)用N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶解，0℃搅拌下加入硫酸二甲酯(0.60mL，6.37mmol)和碳酸铯(3.11g，9.55mmol)反应2小时。TLC监测至反应结束，把反应液缓慢滴加到冰水中搅拌，析出白色固体，用水和石油醚洗3次过滤得到标题化合物2-氯-9-(反-4-羟基-4-甲基环己基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮73d(白色固体，0.80g，产率42.34％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.35(s,1H),4.48(s,1H),4.23-4.12(m,1H),3.35(s,3H),2.42-2.25(m,2H),1.65(d,4H),1.58-1.47(m,2H),1.26(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝297.10[M+1]
第五步：
2-氟-4-((9-(反-4-羟基-4-甲基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物73)
2-fluoro-4-((9-(trans-4-hydroxy-4-methylcyclohexyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
将2-氯-9-(反-4-羟基-4-甲基环己基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮73d(0.30g，1.01mmol)用1,4-二氧六环(8mL)溶解，常温搅拌下加入4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(0.37g，2.22mmol)、碳酸铯(0.49g，1.52mmol)、BrettPhos-G3-Pd(0.09g，0.10mmol)，氮气保护并换气，升温至110℃回流反应4小时。TLC检测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝30/1)，得标题化合物2-氟-4-((9-(反-4-羟基-4-甲基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺化合物73(浅黄色固体，23mg，产率5.31％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.56(s,1H),8.17(s,1H),7.72(d,1H),7.55(d,1H),7.45(s,1H),7.34(d,1H),4.41(s,1H),4.16(tt,1H),2.36-2.29(m,2H),2.27(s,3H),1.63(d,4H),1.49(td,2H),1.14(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝429.20[M+1]
实施例74
4-((9-(顺-3-氰基环丁基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物74)
4-((9-(cis-3-cyanocyclobutyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000155
Figure PCTCN2021087912-appb-000156
第一步：
4-((顺-3-氨基甲酰基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸乙酯(74b)
ethyl 4-((cis-3-carbamoylcyclobutyl)amino)-2-(methylthio)pyrimidine-5-carboxylate
将原料顺-3-((5-(乙氧羰基)-2-(甲硫基)嘧啶-4-基)氨基)环丁烷-1-甲酸74a(13.0g，41.8mmol)加入到二氯甲烷(130mL)中，再加入N,N,N′,N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)六氟磷酸脲(19.1g，50.2mmol)和三乙胺(16.9g，167.2mmol)，室温搅拌10min后，再加入氯化铵(6.7g，125.4mmol)反应搅拌2h。TLC监测反应完成，反应液加入50mL饱和碳酸氢钠水溶液和二氯甲烷，浓缩有机层用无水硫酸钠，减压浓缩得到标题化合物粗品4-((顺-3-氨基甲酰基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸乙酯74b(黄色粘稠液，17.5g，产率134.6％)。
LC-MS m/z(ESI)＝311.20[M+1]
第二步：
4-((顺-3-氰基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸乙酯(74c)
ethyl 4-((cis-3-cyanocyclobutyl)amino)-2-(methylthio)pyrimidine-5-carboxylate
将4-((顺-3-氨基甲酰基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸乙酯74b(17.5g，5.64mmol)加入到二氯甲烷(130mL)中，再加入吡啶(13.2g，167.2mmol)和三氟醋酸酐(26.3g，125.4mmol)室温搅拌1小时。TLC监测反应完全，向反应液中加入2N盐酸调节pH值至3，用二氯甲烷萃取，无水硫酸钠干燥后减压浓缩得粗品，经柱层析分离纯化(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝5:1)得到标题化合物4-((顺-3-氰基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸乙酯74c(白色固体，3.5g，产率21.2％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.65(s,1H),8.46(d,1H),4.70-4.61(m,1H),4.37-4.31(m,2H),2.94-2.84(m,3H),2.52(s,3H),2.48-2.38(m,2H),1.38(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝293.20[M+1]
第三步：
4-((顺-3-氰基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸(74d)
4-((cis-3-cyanocyclobutyl)amino)-2-(methylthio)pyrimidine-5-carboxylic acid
将4-((顺-3-氰基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸乙酯74c(3.5g，11.9mmol)溶解于四氢呋喃(20mL)和水(20mL)混合溶液中，加入氢氧化锂(691mg，28.8mmol)，室温搅拌1小时。TLC监测反应完全，旋干四氢呋喃，调pH至4-5，有白色固体析出，过滤，滤饼用石油醚/乙酸乙酯(v/v＝10/1)洗两次，浓缩得到标题化合物4-((顺-3-氰基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸74d(白色固体，3.0g，产率94.6％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.30(br,1H)8.58(d,1H),8.53(s,1H),4.66-4.56 (m,1H),3.18-3.09(m,1H),2.74-2.65(m,2H),2.47(s,3H),2.48-2.40(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝265.10[M+1]
第四步：
顺-3-(2-(甲硫基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈(74e)
cis-3-(2-(methylthio)-8-oxo-7,8-dihydro-9H-purin-9-yl)cyclobutane-1-carbonitrile
将4-((顺-3-氰基环丁基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸74d(3.0g，11.3mmol)溶解于N,N-二甲基酰胺(30mL)，加入三乙胺(1.18g，11.7mmol)、叠氮磷酸二苯酯(3.22g，11.7mmol)，随后逐步升温至110℃搅拌1.5小时。TLC监测反应完成，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝5:1～1:10)，得到标题化合物顺-3-(2-(甲硫基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈74e(白色固体，2.7g，产率90.9％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.35(s,1H),8.11(s,1H),4.90-4.02(m,1H),3.37-3.26(m,2H),3.25-3.18(m,1H),2.78-2.66(m,2H),2.58(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝262.10[M+1]
第五步：
顺-3-(7-甲基-2-(甲硫基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈(74f)
cis-3-(7-methyl-2-(methylthio)-8-oxo-7,8-dihydro-9H-purin-9-yl)cyclobutane-1-carbonitrile
将顺-3-(2-(甲硫基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈74e(500mg，19.1mmol)溶解于二甲基甲酰胺(5mL)，在0℃下加入硫酸二甲酯(2.4g，19.1mmol)和碳酸铯(12.5g，38.2mmol)，0℃搅拌0.5小时。TLC监测反应完成，随后加入50mL水，有固体析出，过滤旋干得到标题化合物顺-3-(7-甲基-2-(甲硫基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈74f(白色固体，457mg，产率86.7％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.61(s,1H),4.90-4.02(m,1H),3.34(s,3H),3.30-3.23(m,2H),3.25-3.18(m,1H),2.89(s,3H),2.76-2.71(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝276.10[M+1]
第六步：
顺-3-(7-甲基-2-(甲基磺酰基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈(74g)
cis-3-(7-methyl-2-(methylsulfonyl)-8-oxo-7,8-dihydro-9H-purin-9-yl)cyclobutane-1-carbonitrile
将顺-3-(7-甲基-2-(甲硫基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈74f(457mg，1.66mmol)溶解于甲醇中(10mL)，再加入纯净水2mL，反应混合液加入过氧单磺酸钾(1.02g，1.66mmol)，反应混合液加热至60℃反应2小时。TLC检测反应完成，减压旋除甲醇，再加入5mL纯水，用二氯甲烷(20ml×3)萃取3次后，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压旋干溶剂得到标题化合物顺-3-(7-甲基-2-(甲基磺酰基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈74g(浅黄色固体，197mg，产率38.6％)。
LC-MS m/z(ESI)＝308.10[M+1]
第七步：
4-((9-(顺-3-氰基环丁基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物74)
4-((9-(cis-3-cyanocyclobutyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
将顺-3-(7-甲基-2-(甲基磺酰基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈74g (197mg，0.64mmol)、4-氨基-3-甲基-2氟苯甲酰胺(538mg,3.20mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺3ml中，氮气保护并换气，再加入叔丁醇钾(143mg，1.28mmol)，室温搅拌4小时。TLC监测反应完成，将反应液倒入到30ml纯水中，大量黄色固体析出，过滤后用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝35/1)，得到标题化合物4-((9-(顺-3-氰基环丁基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺化合物74(白色固体，25mg，产率10.0％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.63(s,1H),8.20(s,1H),7.87(d 1H),7.56-7.54(m,1H),7.48(s,1H),7.40(s,1H),5.14-5.09(m,1H),3.64-3.59(m,1H),3.29(s,3H),3.26-3.16(m,2H),2.75-2.68(m,2H),2.30(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝396.20[M+1]
实施例75
(S)-2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢呋喃-3-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物75)
(S)-2-fluoro-5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydrofuran-3-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamiderile
Figure PCTCN2021087912-appb-000157
第一步：
(S)-2-氯-4-((四氢呋喃-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(75a)
ethyl(S)-2-chloro-4-((tetrahydrofuran-3-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(5g，5.35mmol)、碳酸钾(1.4g，22.6mmol)溶解于乙腈(20mL)，在0℃下加入(S)-四氢呋喃-3-胺(660mg，5.35mmol)，在室温搅拌20小时。加水和乙酸乙酯萃取三次，无水硫酸钠干燥并用硅胶柱色谱分离提纯(正己烷/乙酸乙酯(v/v)＝10:1)，浓缩得到标题化合物(S)-2-氯-4-((四氢呋喃-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯75a(白色固体，2.2g，产率36％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.68(s,1H),8.58(d,1H),4.79-4.77(m,1H),4.39-4.33(m,2H),4.04-3.98(m,2H),3.90-3.87(m,1H),3.76-3.73(m,1H),2.43-2.33(m,1H),1.95-1.88(m,1H),1.39(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝272.00[M+1]
第二步：
(S)-2-氯-4-((四氢呋喃-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸(75b)
(S)-2-chloro-4-((tetrahydrofuran-3-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylic acid
将(S)-2-氯-4-((四氢呋喃-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯75a(2.2g，8.1mmol)溶解于四氢呋喃/水(5mL/5mL)中，加入氢氧化锂(681mg，16.2mmol)，室温搅拌反应1小时。TLC监测至反应结束，旋干四氢呋喃，调pH至4-5，有白色固体析出，过滤，滤饼用石油醚/乙酸乙酯(v/v＝10/1)洗两次，浓缩得到标题化合物(S)-2-氯-4-((四氢呋喃-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸75b(白色固体，1.7g，产率89％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ13.83(s,1H),8.65(s,1H),8.63(d,1H),4.61(s,1H),3.89-3.80(m,2H),3.76-3.70(m,1H),3.65-3.63(m,1H),2.50-2.25(m,1H),1.87-1.86(m,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝244.20[M+1]
第三步：
(S)-2-氯-9-(四氢呋喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(75c)
(S)-2-chloro-9-(tetrahydrofuran-3-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将(S)-2-氯-4-((四氢呋喃-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸75b(1.7g，7mmol)溶解于二甲基乙酰胺(10mL)，加入三乙胺(707mg，7mmol)、叠氮磷酸二苯酯(1.9g，7mmol)，随后逐步升温至110℃搅拌1.5小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1:6)得到标题化合物(S)-2-氯-9-(四氢呋喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮75c(白色固体，1.4g，产率87％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.13(s,1H),5.00-4.93(m,1H),4.12-4.06(dd,1H),3.97(t,1H),3.88-3.87(m,2H),3.33(s,3H),2.43-2.37(m,1H),2.25-2.20(m,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝241.20[M+1]
第四步：
(S)-2-氯-7-甲基-9-(四氢呋喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(75d)
(S)-2-chloro-7-methyl-9-(tetrahydrofuran-3-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将(S)-2-氯-9-(四氢呋喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮75c(1.4g，5.8mmol)溶解于二甲基甲酰胺(10mL)中，在0℃下加入硫酸二甲酯(735mg，5.8mmol)和碳酸铯(2.85g，8.7mmol)搅拌反应0.5小时。TLC监测至反应结束，向反应液中加入水，有固体析出，过滤得到标题化合物(S)-2-氯-7-甲基-9-(四氢呋喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮75d(白色固体，1.2g，产率85％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.35(s,1H),5.04-4.97(m,1H),4.13-4.07(dd,1H),3.98(t,1H),3.90-3.84(m,2H),3.35(s,3H),2.44-2.37(m,1H),2.28-2.27(m,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝255.20[M+1]
第五步：
(S)-2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢呋喃-3-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物75)
(S)-2-fluoro-5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydrofuran-3-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamiderile
将(S)-2-氯-7-甲基-9-(四氢呋喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮57d(200mg，0.78mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(264mg，1.57mmol)、碳酸铯(770mg，2.36mmol)、甲磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2'，4'，6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-氨基-1,1'-联苯基-2-基)钯(II)(71.4mg,0.078mmol)溶解于二氧六环3mL中，氮气保护并换气，在110℃搅拌4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提 纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝35/1)得到标题化合物(S)-2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢呋喃-3-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物75(白色固体，58mg,产率19％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.49(s,1H),8.20(s,1H),7.89(d,1H),7.55(d,1H),7.44(d,2H),4.95-5.02(m,1H),4.07-4.13(dd,1H),3.91-3.99(m,2H),3.82-3.85(m,1H),3.32(s,3H),2.44-2.50(m,1H),2.28(S,3H),2.20-2.27(m,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝387.10[M+1]
实施例76
(R)-2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢呋喃-3-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物76)
(R)-2-fluoro-5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydrofuran-3-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamiderile
Figure PCTCN2021087912-appb-000158
第一步：
(R)-2-氯-4-((四氢呋喃-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(76a)
(R)-2-chloro-4-((tetrahydrofuran-3-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(5g，5.35mmol)、碳酸钾(1.4g，22.6mmol)溶解于乙腈(20mL)，在0℃下加入(R)-四氢呋喃-3-胺(660mg，5.35mmol)，在室温搅拌20小时。加水和乙酸乙酯萃取三次，无水硫酸钠干燥并用硅胶柱色谱分离提纯(正己烷/乙酸乙酯(v/v)＝10:1)，浓缩得到标题化合物(R)-2-氯-4-((四氢呋喃-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯76a(白色固体，4.3g，产率65％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.68(s,1H),8.58(d,1H),4.83-4.77(m,1H),4.39-4.33(m,2H),4.02-3.98(m,2H),3.90-3.86(m,1H),3.76-3.73(m,1H),2.43-2.34(m,1H),1.98-1.88(m,1H),1.39(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝272.00[M+1]
第二步：
(R)-2-氯-4-((四氢呋喃-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸(76b)
(R)-2-chloro-4-((tetrahydrofuran-3-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylic acid
将(R)-2-氯-4-((四氢呋喃-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯76a(4.3g，15.8mmol)溶解于 四氢呋喃/水(5mL/5mL)中，加入氢氧化锂(1.3g，31.7mmol)，室温搅拌反应1小时。TLC监测至反应结束，旋干四氢呋喃，调pH至4-5，有白色固体析出，过滤，滤饼用石油醚/乙酸乙酯(v/v＝10/1)洗两次，浓缩得到标题化合物(R)-2-氯-4-((四氢呋喃-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸76b(白色固体，2.9g，产率87％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ13.83(s,1H),8.65(s,1H),8.59(d,1H),4.62-4.60(m,1H),3.89-3.80(m,2H),3.76-3.70(m,1H),3.64-3.56(m,1H),2.33-2.23(m,1H),1.88-1.83(m,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝244.20[M+1]
第三步：
(R)-2-氯-9-(四氢呋喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(76c)
(R)-2-chloro-9-(tetrahydrofuran-3-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将(R)-2-氯-4-((四氢呋喃-3-基)氨基)嘧啶-5-羧酸76b(2.9g，11.9mmol)溶解于二甲基乙酰胺(20mL)，加入三乙胺(1.2g，11.9mmol)、叠氮磷酸二苯酯(3.3g，11.9mmol)，随后逐步升温至110℃搅拌1.5小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1:6)得到标题化合物(R)-2-氯-9-(四氢呋喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮76c(白色固体，2.2g，产率68％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.36(s,1H),5.04-4.96(m,1H),4.13-4.07(dd,1H),3.97(t,1H),3.87-3.84(m,2H),3.33(s,3H),2.40-2.36(m,1H),2.29-2.27(m,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝241.20[M+1]
第四步：
(R)-2-氯-7-甲基-9-(四氢呋喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(76d)
(R)-2-chloro-7-methyl-9-(tetrahydrofuran-3-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将(R)-2-氯-9-(四氢呋喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮76c(2.2g，9.1mmol)溶解于二甲基甲酰胺(10mL)中，在0℃下加入硫酸二甲酯(1.1g，9.1mmol)和碳酸铯(4.5g，13.7mmol)搅拌反应0.5小时。TLC监测至反应结束，向反应液中加入水，有固体析出，过滤得到标题化合物(R)-2-氯-7-甲基-9-(四氢呋喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮76d(白色固体，1.7g，产率82％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.41(s,1H),5.05-4.97(m,1H),4.13-4.08(dd,1H),3.98(t,1H),3.91-3.84(m,2H),3.33(s,3H),2.45-2.27(m,1H),2.26-2.20(m,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝255.20[M+1]
第五步：
(R)-2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢呋喃-3-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物76)
(R)-2-fluoro-5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(tetrahydrofuran-3-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamiderile
将(R)-2-氯-7-甲基-9-(四氢呋喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮76d(200mg，0.78mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(264mg，1.57mmol)、碳酸铯(770mg，2.36mmol)、甲磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2'，4'，6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-氨基-1,1'-联苯基-2-基)钯(II)(71.4mg，0.078mmol)溶解于二氧六环3mL中，氮气保护并换气，在110℃搅拌4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝35/1)得到标题化合物(R)-2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢呋喃-3-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物76(白色固体，31mg，产率14.6％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.51(s,1H),8.20(s,1H),7.89(d,1H),7.54(d,1H), 7.44(d,2H),4.94-5.02(m,1H),4.06-4.12(dd,1H),3.87-3.98(m,2H),3.82-3.85(m,1H),3.32(s,3H),2.43-2.45(m,1H),2.33(s,3H),2.19-2.22(m,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝387.10[M+1]
实施例77
4-((9-(顺-4-氰基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物77)
4-((9-(cis-4-cyanocyclohexyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000159
第一步：
叔丁基(顺-4-氨甲酰环己基)氨基甲酸酯(77b)
tert-butyl(cis-4-carbamoylcyclohexyl)carbamate
顺-4-((叔丁氧羰基)氨基)环己烷-1-羧酸77a(5.0g，20.5mmol)、O-(7-氮杂苯并三氮唑基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(9.4g，24.7mmol)溶解于二氯甲烷(15mL)，在0℃下搅拌20min，加入N,N二异丙基乙胺(10.5g，82mmol)及氯化铵(3.3g，61.5mmol)，在室温搅拌4小时。TLC监测至反应结束，向反应液中加入水10mL，分离有机相，饱和盐水洗一次，用无水硫酸钠干燥并用硅胶拌样，用正相过柱仪过出产物，浓缩得到标题化合物叔丁基(顺-4-氨甲酰环己基)氨基甲酸酯77b(白色固体，3.5g，产率71％)。
LC-MS m/z(ESI)＝243.30[M+1]
第二步：
叔丁基(顺-4-氰基环己基)氨基甲酸酯(77c)
tert-butyl(cis-4-cyanocyclohexyl)carbamate
叔丁基(顺-4-氨甲酰环己基)氨基甲酸酯77b(3.5g，14.4mmol)溶解于70mL吡啶中，冰浴降温，然后将三氯氧磷(7.7mL)滴加进反应液中，冰浴搅拌1小时。TLC监测反应完全，在冰浴下加入水20mL，用乙酸乙酯萃取4次，然后用酸水洗有机相7次，最后用饱和盐水洗两次，无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干得到化合物叔丁基(顺-4-氰基环己基)氨基甲酸酯77c(黄色固体，1.5g,产率36％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ6.90(d,1H),3.27-3.25(m,1H),3.01-2.99(m,1H),1.86-1.81(m,2H),1.71-1.67(m,2H),1.62-1.54(m,2H),1.43-1.40(m,1H),1.37(s,3H),1.34-1.32(m,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝225.30[M+1]
第三步：
顺-4-氨基环己烷-1-碳腈(77d)
cis-4-aminocyclohexane-1-carbonitrile
将叔丁基(反-4-氰基环己基)氨基甲酸酯77c(1.5g，6.7mmol)溶解于盐酸乙酸乙酯溶液中(20mL)，加热至45℃搅拌2小时。TLC监测至反应结束，有白色固体析出，浓缩干燥得到标题化合物顺-4-氨基环己烷-1-碳腈77d(白色固体，1g，产率90％)。
LC-MS m/z(ESI)＝125.30[M+1]
第四步：
2-氯-4-(顺-4-氰基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(77e)
2-chloro-4-(cis-4-cyanocyclohexyl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(1.48g,6.7mmol)、碳酸钾(1.38g，10mmol)溶解于乙腈(10mL)，在0℃下加入顺-4-氨基环己烷-1-碳腈77d(1g，6.7mmol)，在室温搅拌20小时。TLC监测至反应结束，向反应液中加入水和乙酸乙酯萃取三次，饱和盐水洗一次，用无水硫酸钠干燥并用硅胶柱色谱分离(正己烷/乙酸乙酯(v/v)＝10:1)纯化，得到标题化合物2-氯-4-(顺-4-氰基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯77e(白色固体，589mg，产率60％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.63(s,1H),8.38(d,1H),4.35-4.29(m,2H),4.07-3.99(m,1H),3.11-3.09(m,1H),1.92-1.73(m,6H),1,63-1.54(m,2H),1.47(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝310.20[M+1]
第五步：
2-氯-4-((顺-4-氰基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸(77f)
2-chloro-4-((cis-4-cyanocyclohexyl)amino)pyrimidine-5-carboxylic acide
将2-氯-4-((顺-4-氰基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯77e(589mg，1.9mmol)溶解于四氢呋喃/水(4mL/4mL)中，加入氢氧化锂(160mg，3.8mmol)，室温搅拌1小时。TLC监测至反应结束，旋干四氢呋喃，调pH至4-5，有白色固体析出，过滤，滤饼用石油醚/乙酸乙酯(v/v＝10/1)洗两次，浓缩得到标题化合物2-氯-4-((顺-4-氰基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸77f(白色固体，490mg，产率86％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ13.83(s,1H),8.62-8.60(d,2H),4.05-3.98(m,1H),3.10(t,1H),1.94-1.73(m,6H),1.60-1.56(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝282.30[M+1]
第六步：
顺-4-(2-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环己烷-1-碳腈(77g)
cis-4-(2-chloro-8-oxo-7,8-dihydro-9H-purin-9-yl)cyclohexane-1-carbonitrile
将2-氯-4-(顺-4-氰基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸77f(490mg，1.75mmol)溶解于二甲基乙酰胺(10mL)，加入三乙胺(176mg，1.75mmol)、叠氮磷酸二苯酯(481mg，1.75mmol)，随后逐步升温至110℃搅拌反应1.5小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1:10)，得到标题化合物顺-4-(2-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环己烷-1-碳腈77g(白色固体，436mg，产率68％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ11.64(s,1H),8.13(s,1H),4.23-4.16(m,1H),3.22-3.16(m,1H),2.44-2.39(m,2H),2.00(d,2H),1.79-1.72(m,4H)。
LC-MS m/z(ESI)＝278.30[M+1]
第七步：
顺-4-(2-氯-7-甲基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环己烷-1-碳腈(77h)
cis-4-(2-chloro-7-methyl-8-oxo-7,8-dihydro-9H-purin-9-yl)cyclohexane-1-carbonitrile
将顺-4-(2-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环己烷-1-碳腈77g(1.6g，5.77mmol)溶解于二甲基甲酰胺(10mL)，在0℃下加入硫酸二甲酯(728mg，5.77mmol)和碳酸铯(2.8g，8.65mmol)，0℃搅拌30min。TLC监测至反应结束，向反应液中加入水10mL，有固体析出，过滤得到标题化合物顺-4-(2-氯-7-甲基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环己烷-1-碳腈77h(黄色固体，1.25g，产率75％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.35(s,1H),4.28-4.19(m,1H),3.34(s,3H),3.23-3.17(m,1H),2.46-2.39(m,2H),2.00(d,2H),1.80-1.73(m,4H)。
LC-MS m/z(ESI)＝292.30[M+1]
第八步：
4-((9-(顺-4-氰基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物77)
4-((9-(cis-4-cyanocyclohexyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
将顺-4-(2-氯-7-甲基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环己烷-1-腈77h(100mg，0.34mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(52mg，0.34mmol)、碳酸铯(332mg，1.02mmol)、甲磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2'，4'，6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-氨基-1,1'-联苯基-2-基)钯(II)(31mg，0.034mmol)溶解于二氧六环2mL中，氮气保护下换气，在110℃搅拌4小时。TLC监测反应至完全，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝35/1)得到标题化合物4-((9-(顺-4-氰基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺化合物77(白色固体，44mg，产率29.3％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.36(s,1H),8.17(s,1H),7.89(d,1H),7.52(d,1H),7.44(s,1H),7.26(s,1H),4.20-4.26(m,1H),3.32(s,3H),3.19(s,1H),2.44-2.47(m,2H),2.26(s,3H),2.02(d,2H),1.67-1.81(m,4H)。
LC-MS m/z(ESI)＝424.20[M+1]
实施例78
4-((9-(顺-4-氰基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-3-甲基苯甲腈(化合物78)
4-((9-(cis-4-cyanocyclohexyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-3-methylbenzonitrile
Figure PCTCN2021087912-appb-000160
将顺-4-(2-氯-7-甲基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环己烷-1-碳腈77h(200mg，0.68mmol)、4-氨基-3-甲基苯甲腈5a(90.7mg，0.68mmol)、碳酸铯(664mg，2mmol)、甲磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2'，4'，6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-氨基-1,1'-联苯基-2-基)钯(II)(62mg，0.068mmol)溶解于二氧六环3mL中，氮气保护并换气，在110℃搅拌4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝35/1)，得到标题化合物4-((9-(顺-4-氰基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-3-甲基苯甲腈化合物78(白色固体，120mg，产率60％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.48(s,1H),8.22(s,1H),8.20(s,1H),7.48(d,1H),7.61(s,1H),4.24-4.17(m,1H),3.21(s,1H),2.50-2.48(m,2H),2.32(s,3H),2.10-2.01(m,2H),1.79-1.70(m,4H)。
LC-MS m/z(ESI)＝406.20[M+1]
实施例79
4-((9-(反-4-氰基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物79)
4-((9-(trans-4-cyanocyclohexyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000161
Figure PCTCN2021087912-appb-000162
第一步：
叔丁基(反-4-氨甲酰环己基)氨基甲酸酯(79b)
tert-butyl(trans-4-carbamoylcyclohexyl)carbamate
反-4-((叔丁氧羰基)氨基)环己烷-1-羧酸79a(5.0g，20.5mmol)、O-(7-氮杂苯并三氮唑基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(9.4g，24.7mmol)溶解于二氯甲烷(15mL)，在0℃下搅拌20min，加入N,N二异丙基乙胺(10.5g，82mmol)及氯化铵(3.3g，61.5mmol)在室温搅拌反应4小时。TLC监测至反应结束，向反应液中加入水10mL，分离有机相，饱和盐水洗一次，用无水硫酸钠干燥浓缩后经中压制备正相分离纯化得到标题化合物叔丁基(反-4-氨甲酰环己基)氨基甲酸酯79b(白色固体，4.4g，产率83％)。
LC-MS m/z(ESI)＝243.30[M+1]
第二步：
叔丁基(反-4-氰基环己基)氨基甲酸酯(79c)
tert-butyl(trans-4-cyanocyclohexyl)carbamate
叔丁基(反-4-氨甲酰环己基)氨基甲酸酯79b(4.4g，18.0mmol)溶解于70mL吡啶中，冰浴降温，然后将三氯氧磷(7.7mL)滴加进反应液中，冰浴搅拌1小时。TLC监测反应完全，在冰浴下加入水20mL，用乙酸乙酯萃取4次，然后用酸水洗有机相7次，最后用饱和盐水洗两次，无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干得到化合物叔丁基(反-4-氰基环己基)氨基甲酸酯79c(黄色固体，1.2g，产率30％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ6.80(m,1H),3.24-3.22(m,1H),2.63-2.55(m,1H),1.99-1.95(m,2H),1.77-1.73(m,2H),1.56-1.46(m,2H),1.36(s,9H),1.21-1.11(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝225.30[M+1]
第三步：
反-4-氨基环己烷-1-碳腈(79d)
trans-4-aminocyclohexane-1-carbonitrile
将叔丁基(反-4-氰基环己基)氨基甲酸酯79c(1.2g，9.6mmol)溶解于盐酸乙酸乙酯 溶液中(20mL)，加热至45℃搅拌2h。TLC监测至反应结束，有白色固体析出，浓缩干燥得到标题化合物反-4-氨基环己烷-1-碳腈79d(白色固体，660mg，产率60％)。
LC-MS m/z(ESI)＝125.30[M+1]
第四步：
2-氯-4-(反-4-氰基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(79e)
ethyl 2-chloro-4-(trans-4-cyanocyclohexyl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(1.4g，5.35mmol)、碳酸钾(1.4g，10.7mmol)溶解于乙腈(10mL)，在0℃下加入反-4-氨基环己烷-1-碳腈79d(660mg，5.35mmol)在室温搅拌20小时。TLC监测至反应结束，向反应液中加入水和乙酸乙酯萃取三次，饱和盐水洗一次，用无水硫酸钠干燥并用硅胶柱色谱分离(正己烷/乙酸乙酯(v/v)＝10:1)纯化，得到标题化合物2-氯-4-(反-4-氰基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯79e(白色固体，810mg，产率62％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.62(s,1H),8.27(d,1H),4.30(q,2H),4.04-3.96(m,1H),4.04-3.67(m,1H),2.76-2.70(m,1H),2.04-2.00(m,2H),1.96-1.92(m,2H),1.72-1.62(m,2H),1.47-1.37(m,2H),1.30(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝310.20[M+1]
第五步：
2-氯-4-((反-4-氰基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸(79f)
2-chloro-4-((trans-4-cyanocyclohexyl)amino)pyrimidine-5-carboxylic acide
将2-氯-4-((反-4-氰基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯79e(810mg，2.6mmol)溶解于四氢呋喃/水(4mL/4mL)中，加入氢氧化锂(247mg，5.2mmol)室温搅拌1小时。TLC监测至反应结束，旋干四氢呋喃，调pH至4-5，有白色固体析出，过滤，滤饼用石油醚/乙酸乙酯(v/v＝10/1)洗两次，浓缩得到标题化合物2-氯-4-((反-4-氰基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸79f(白色固体，790mg，产率86％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.58(s,1H),8.49(d,1H),4.01-3.87(m,1H),2.76-2.71(m,1H),2.03-1.93(m,4H),1.72-1.63(m,2H),1.44-1.35(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝282.30[M+1]
第六步：
反-4-(2-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环己烷-1-碳腈(79g)
trans-4-(2-chloro-8-oxo-7,8-dihydro-9H-purin-9-yl)cyclohexane-1-carbonitrile
将2-氯-4-(反-4-氰基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸79f(730mg，2.6mmol)溶解于二甲基乙酰胺(10mL)，加入三乙胺(263mg，2.6mmol)、叠氮磷酸二苯酯(715mg，2.6mmol)，随后逐步升温至110℃搅拌1.5小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1:10)得到标题化合物反-4-(2-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环己烷-1-碳腈79g(白色固体，553mg，产率68％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ11.63(s,1H),8.12(s,1H),4.23-4.16(m,1H),2.78-2.72(m,1H),2.25-2.12(m,4H),1.82-1.68(m,4H)。
LC-MS m/z(ESI)＝278.30[M+1]
第七步：
反-4-(2-氯-7-甲基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环己烷-1-碳腈(79h)
trans-4-(2-chloro-7-methyl-8-oxo-7,8-dihydro-9H-purin-9-yl)cyclohexane-1-carbonitrile
将反-4-(2-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环己烷-1-碳腈79g(553mg，2mmol) 溶解于二甲基甲酰胺(5mL)，在0℃下加入硫酸二甲酯(252mg，2mmol)和碳酸铯(977mg，3mmol)，0℃搅拌30min。TLC监测至反应结束，向反应液中加入水10mL，有固体析出，过滤得到标题化合物反-4-(2-氯-7-甲基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环己烷-1-碳腈79h(黄色固体，420mg，产率72％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.34(s,1H),4.28-4.21(m,1H),2.79-2.72(m,1H),2.22-2.13(m,4H),1.82-1.70(m,4H)。
LC-MS m/z(ESI)＝292.30[M+1]
第七步：
4-((9-(反-4-氰基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物79)
4-((9-(trans-4-cyanocyclohexyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
将反-4-(2-氯-7-甲基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环己烷-1-腈79h(100mg，0.34mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(52mg，0.34mmol)、碳酸铯(332mg，1.02mmol)、甲磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2'，4'，6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-氨基-1,1'-联苯基-2-基)钯(II)(31mg，0.034mmol)溶解于二氧六环2mL中，氮气保护并换气，在110℃搅拌4小时。TLC监测反应至完全，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝35/1)得到标题化合物4-((9-(反-4-氰基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺化合物79(白色固体，57mg，产率36.2％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.48(s,1H),8.18(s,1H),7.95(d,1H),7.54(d,1H),7.45(d,1H),4.20-4.29(m,1H),3.31(s,3H),2.60-2.67(m,1H),2.25-2.34(m,5H),2.15(d,2H),1.83(d,2H),1.72-1.76(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝424.20[M+1]
实施例80
4-((9-(反-4-氰基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-3-甲基苯甲腈(化合物80)
4-((9-(trans-4-cyanocyclohexyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-3-methylbenzonitrile
Figure PCTCN2021087912-appb-000163
将反-4-(2-氯-7-甲基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环己烷-1-碳腈79h(200mg，0.68mmol)、4-氨基-3-甲基苯甲腈5a(90.7mg，0.68mmol)、碳酸铯(664mg，2mmol)、甲磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2'，4'，6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-氨基-1,1'-联苯基-2-基)钯(II)(62mg，0.068mmol)溶解于二氧六环3mL中，氮气保护并换气，在110℃搅拌4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝35/1)得到标题化合物4-((9-(反-4-氰基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H- 嘌呤-2-基)氨基)-3-甲基苯甲腈化合物80(白色固体，120mg，产率60％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.60(s,1H),8.16(s,1H),8.12(d,1H),7.68(d,1H),7.62(s,1H),4.26-4.18(m,1H),3.31(s,3H),2.67-2.60(m,1H),2.32(s,3H),2.31-2.27(m,2H),2.24-2.07(m,2H),1.76(dd,2H),1.75-1.64(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝406.20[M+1]
实施例81
2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(哌啶-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物81)
2-fluoro-5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(piperidin-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000164
第一步：
4-((1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸乙酯(81a)
ethyl 4-((1-(tert-butoxycarbonyl)piperidin-4-yl)amino)-2-chloropyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(5g，22.6mmol)、碳酸钾(6.2g，45.2mmol)溶解于乙腈(20mL)，在0℃下加入4-氨基哌啶-1-羧酸叔丁酯(4.5g，22.6mmol)，在室温搅拌20小时。TLC监测至反应完全，加水和乙酸乙酯萃取三次，无水硫酸钠干燥后用硅胶柱色谱分离提纯(正己烷/乙酸乙酯(v/v)＝10:1)浓缩得到标题化合物4-((1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸乙酯81a(白色固体，8.2g，产率95％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.63(s,1H),8.32(d,1H),4.33-4.28(m,2H),4.17-4.14(m,1H),3.85(d,2H),2.94(s,2H),1.88-1.80(m,2H),1.51-1.44(m,2H),1.41(s,9H),1.32-1.29(m,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝385.10[M+1]
第二步：
4-((1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸(81b)
4-((1-(tert-butoxycarbonyl)piperidin-4-yl)amino)-2-chloropyrimidine-5-carboxy-lic acid
将4-((1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸乙酯81a(8.2g，21.3mmol)溶解于四氢呋喃/水(10mL/5mL)中，加入氢氧化锂(1.8g，42.7mmol)室温搅拌1小时。TLC监测至反应完全，浓缩蒸发掉四氢呋喃，调pH至4-5，有白色固体析出，过滤，滤饼用石油醚/乙酸乙酯(v/v＝10/1)洗两次，浓缩得到标题化合物4-((1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸81b(白色固体，7g，产率86％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.59(s,1H),8.54(d,1H),4.20-4.10(m,1H),3.87-3.84(m,2H),2.96(s,3H),1.91-1.73(m,3H),1.41(s,9H)。
LC-MS m/z(ESI)＝357.10[M+1]
第三步：
4-(2-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(81c)
tert-butyl 4-(2-chloro-8-oxo-7,8-dihydro-9H-purin-9-yl)piperidine-1-carboxylate
将4-((1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸81b(7g，19.6mmol)溶解于二甲基乙酰胺(10mL)，加入三乙胺(1.96g,19.6mmol)、叠氮磷酸二苯酯(5.4g,19.6mmol)，随后逐步升温至110℃搅拌1.5小时，TLC监测至反应完全，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1:10)，得到标题化合物4-(2-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯81c(白色固体，6.4g，产率87％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.14(s,1H),4.41-4.33(m,1H),4.06(d,2H),2.88(s,2H),2.30-2.20(m,2H),1.84-1.71(m,2H),1.43(s,9H)。
LC-MS m/z(ESI)＝354.10[M+1]
第四步：
4-(2-氯-7-甲基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(81d)
tert-butyl4-(2-chloro-7-methyl-8-oxo-7,8-dihydro-9H-purin-9-yl)piperidine-1-carboxylate
将4-(2-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯81c(6.4g，18.1mmol)溶解于二甲基甲酰胺(10mL)，在0℃下加入硫酸二甲酯(2.28g，18.1mmol)和碳酸铯(8.5g,27.1mmol)，0℃搅拌0.5小时。TLC监测至反应完全，向反应液中加入水，有固体析出，过滤得到标题化合物4-(2-氯-7-甲基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯81d(白色固体，5.4g，产率79％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.36(s,1H),4.46-4.37(m,1H),4.05(d,2H),3.35(s,3H),2.87(s,2H),2.33-2.19(m,2H),1.74-1.72(m,2H),1.43(s,9H)。
LC-MS m/z(ESI)＝368.10[M+1]
第五步：
4-(2-((4-氨基甲酰基-5-氟-2-甲基苯基)氨基)-7-甲基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(81e)
tert-butyl 4-(2-((4-carbamoyl-5-fluoro-2-methylphenyl)amino)-7-methyl-8-oxo-7,8-dihydro-9H-purin-9-yl)piperidine-1-carboxylate
将4-(2-氯-7-甲基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯81d(200mg，0.54mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(181mg，0.54mmol)、碳酸铯(528mg，1.08mmol)、甲磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2'，4'，6'-三异丙基-1,1'-联苯))2'-氨基-1,1'-联苯基-2-基)钯(II)(50mg，0.054mmol)溶解于二氧六环(3mL)，氮气保护并换气，在100℃搅拌4小时。TLC监测至反应完全，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝60/1)得到标题化合物4-(2-((4-氨基甲酰基-5-氟-2-甲基苯基)氨基)-7-甲基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯81e(白色固体，119mg，产率58％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.52(s,1H),8.18(s,1H),7.85(d,1H),7.53(d,1H),7.31(s,1H),4.40-4.34(m,1H),4.10(dd,2H),3.20(s,3H),2.88-2.74(m,2H),2.37-2.30(m,2H),2.27(s,3H),1.75(d,2H),1.40(s,9H)。
LC-MS m/z(ESI)＝500.20[M+1]
第六步：
2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(哌啶-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物81)
2-fluoro-5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(piperidin-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
将4-(2-((4-氨基甲酰基-5-氟-2-甲基苯基)氨基)-7-甲基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯81e(119mg，0.23mmol)加入到50mL单口瓶中，盐酸乙酸乙酯2M(10mL)加入其中，常温搅拌4小时。TLC监测至反应完全，浓缩反应液，残留物经Pre-HPLC制备分离得到标题化合物2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(哌啶-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物81(白色固体，32mg，产率23％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.48(s,1H),8.17(d,1H),7.94(d,1H),7.54(d,1H),7.45-7.37(m,1H),4.29-4.21(m,1H),3.32(s,3H),3.08-3.05(m,2H),2.57-2.51(m,2H),3.39-3.32(m,2H),2.29(s,3H),1.68-1.64(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝400.20[M+1]
实施例82
2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-9-(1-甲基哌啶-4-基)-8-氧代8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物82)
2-fluoro-5-methyl-4-((7-methyl-9-(1-methylpiperidin-4-yl)-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000165
第一步：
2-氯-7-甲基-9-(哌啶-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(82a)
2-chloro-7-methyl-9-(piperidin-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将4-(2-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯81d(2g，5.4mmol)加入到反应瓶中，常温搅拌下加入2M盐酸-乙酸乙酯溶液(10mL)反应4小时。TLC监测至反应完全，浓缩反应液，得到标题化合物2-氯-7-甲基-9-(哌啶-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮的盐酸盐82a(白色固体，1.4g，产率91％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.39(s,1H),6.42(s,1H),4.59-4.53(m,1H),3.39(s,2H),3.36(s,3H),3.16-3.04(m,2H),2.62-2.50(m,2H),2.07-1.93(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝268.10[M+1]
第二步：
2-氯-7-甲基-9-(1-甲基哌啶-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(82b)
2-chloro-7-methyl-9-(1-methylpiperidin-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-7-甲基-9-(哌啶-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮82a(1.4g，5.4mmol)溶解于甲醇(20mL)，加入4A分子筛(100mg)，然后加入多聚甲醛(783mg，27mmol)，在室温搅拌反应6小时，再加入氰基硼氢化钠(1g，16.2mmol)反应2小时。TLC监测至反应完全，过滤并浓缩得到标题化合物2-氯-7-甲基-9-(1-甲基哌啶-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮82b(白色固体，600mg，产率62％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.35(s,1H),4.21-4.13(m,1H),3.35(s,3H),2.92(d,2H),2.45-2.41(m,2H),2.23(s,3H),2.09-2.03(m,2H),1.70-1.67(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝282.10[M+1]
第三步：
2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-9-(1-甲基哌啶-4-基)-8-氧代8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物82)
2-fluoro-5-methyl-4-((7-methyl-9-(1-methylpiperidin-4-yl)-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
将2-氯-7-甲基-9-(1-甲基哌啶-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮82b(150mg，0.53mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(178mg，1.06mmol)、碳酸铯(518mg，1.59mmol)、甲磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2'，4'，6'-三异丙基-1,1'-联苯))2'-氨基-1,1'-联苯基-2-基)钯(II)(48mg，0.053mmol)溶解于二氧六环(3mL)中，氮气保护并换气，在100℃搅拌4小时。TLC监测至反应完全，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝20/1)，并经过Pre-HPLC制备得到标题化合物2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-9-(1-甲基哌啶-4-基)-8-氧代8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物82(白色固体，20mg，产率18％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.27(s,1H),8.14(s,1H),7.93-7.89(d,1H),7.58-7.55(d,1H),7.22(s,2H),3.34(s,3H),2.95-2.92(d,2H),2.67-2.55(m,2H),2.30(s,3H),2.25(s,3H),2.10-2.04(m,2H),1.91(s,1H),1.72-1.68(d,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝414.20[M+1]
实施例83
4-((9-(4,4-二氟环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物83)
4-((9-(4,4-difluorocyclohexyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000166
Figure PCTCN2021087912-appb-000167
第一步：
2-氯-4-((4,4-二氟环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(83a)
ethyl-2-chloro-4-((4,4-difluorocyclohexyl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(6.5g，29.41mmol)、4,4-二氟环己-1-胺盐酸盐(5.0g，29.41mmol)溶解于乙腈(100mL)，常温搅拌下加入碳酸钾(10.16g，73.52mmol)反应4小时。TLC监测至反应完毕后过滤，滤渣用乙酸乙酯清洗，将滤液浓缩通过硅胶柱色谱分离提纯(正己烷/乙酸乙酯(v/v)＝1:1)得标题化合物2-氯-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯83a(白色固体，8.0g，产率85.10％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.85(s,1H),8.11(d,1H),4.34-4.25(m,2H),4.21-4.10(m,1H),2.11-1.91(m,6H),1.71-1.57(m,2H),1.23(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝320.10[M+l]
第二步：
2-氯-4-((4,4-二氟环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸(83b)
2-chloro-4-((4,4-difluorocyclohexyl)amino)pyrimidine-5-carboxylic acid
将2-氯-4-((4,4-二氟环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯83a(4g，12.47mmol)溶解于四氢呋喃/水(50mL/50mL)中，加入氢氧化锂(597mg，24.94mmol)室温搅拌1小时。TLC监测至反应完全，旋干四氢呋喃，用2N盐酸调pH为5左右，有白色固体析出，过滤，滤饼用石油醚洗两次，搜集固体得到标题化合物2-氯-4-((4,4-二氟环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸83b(白色固体，3.4g，产率91.53％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.79(s,1H),8.60(s,1H),8.55(d,1H),4.22-4.06(m,1H),2.12-1.89(m,6H),1.72-1.56(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝292.00[M+l]
第三步：
2-氯-9-(4,4-二氟环己基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(83c)
2-chloro-9-(4,4-difluorocyclohexyl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)嘧啶-5-羧酸83b(3.34g，11.45mmol)溶解于二甲基乙酰胺(50mL)，加入三乙胺(1.6mL，11.45mmol)、叠氮磷酸二苯酯(1.22mL，11.45mmol)；后逐步升温至120℃搅拌1.5小时。TLC检测反应完毕，将反应液倒入冰水中，过滤搜集固体，水洗3次，真空浓缩干燥得标题化合物2-氯-9-(4,4-二氟环己基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮83c(白色固体，2.2g，产率78.5％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.66(s,1H),8.13(s,1H),4.46-4.36(m,1H),2.17- 1.94(m,6H),1.87-1.80(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝289.10[M+l]
第四步：
2-氯-7-甲基-9-(4,4-二氟环己基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(83d)
2-chloro-9-(4,4-difluorocyclohexyl)-7-methyl-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-(4,4-二氟环己基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮83c(2.62g，9.08mmol)溶解于二甲基甲酰胺(50mL)，在0度下加入硫酸二甲酯(1.14g，9.08mmol)和碳酸铯(4.44g，13.61mmol)，0℃搅拌1小时。TLC监测反应结束，将反应液倒入冰水中，有固体析出，过滤收集固体得到标题化合物2-氯-7-甲基-9-(4,4-二氟环己基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮83d(白色固体，2.2g，产率80％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.37(s,1H),4.55-4.39(m,1H),3.33(s,3H),2.21-2.01(m,6H),1.90-1.79(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝303.10[M+l]
第五步：
4-((9-(4,4-二氟环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物83)
4-((9-(4,4-difluorocyclohexyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
将2-氯-7-甲基-9-(4,4-二氟环己基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮83d(150mg，0.495mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(166.6mg，0.991mmol)、碳酸铯(323mg，0.991mmol)、甲烷磺酸(2-二环己基膦)-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(45mg，0.05mmol)溶解于二氧六环，氮气保护并换气，在100℃搅拌4小时。TLC监测至反应结束，将反应液倒入冰水中，搜集固体，将固体用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝30/1)得到标题化合物4-((9-(4,4-二氟环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺化合物83(白色固体，30mg，产率14％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.49(s,1H),8.20(s,1H),7.84(d,1H),7.54(d,1H),7.46(s,1H),7.38-7.33(m,1H),4.45-4.38(m,1H),3.32(s,3H),2.28(s,3H),2.18-1.94(m,6H),1.87-1.81(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝435.10[M+l]
实施例84
2-氟-4-((9-((3aR，6aS)-5-羟基八氢戊烷-2-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物84)
2-fluoro-4-((9-((3aR,6aS)-5-hydroxyoctahydropentalen-2-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000168
Figure PCTCN2021087912-appb-000169
第一步：
(3aR,6aS)-四氢-1H-螺[戊烯-2,2'-[1,3]二氧戊环]-5(3H)-酮(84b)
(3aR,6aS)-tetrahydro-1H-spiro[pentalene-2,2'-[1,3]dioxolan]-5(3H)-one
将(3as,6as)-四氢戊烯-2,5(1H,3H)-二酮84a(20g，145mmol)、对甲苯磺酸(2.7g，14.5mmol)加入干燥的反应瓶，然后用甲苯(250mL)溶解，在120℃下滴加乙二醇(7.3mL，130mmol)，加毕回流反应3小时。TLC监测至反应结束，浓缩经硅胶柱色谱分离纯化(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝4/1)得到标题化合物(3aR,6aS)-四氢-1H-螺[戊烯-2,2'-[1,3]二氧戊环]-5(3H)-酮84b(浅黄色液体，10.8g，产率40.88％)。
LC-MS m/z(ESI)＝183.10[M+1]
第二步：
(3aR,6aS)-六氢-1H-螺[戊烯-2,2'-[1,3]二氧戊环]-5-胺(84c)
(3aR,6aS)-hexahydro-1H-spiro[pentalene-2,2'-[1,3]dioxolan]-5-amine
将(3aR,6aS)-四氢-1H-螺[戊烯-2,2'-[1,3]二氧戊环]-5(3H)-酮84b(10.8g，59mmol)用甲醇(100mL)溶解，再加入乙酸铵(45g，590mmol)在55℃下反应2小时，然后加入氰基硼氢化钠(5.5g，88.5mmol)继续反应2小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液经硅胶柱色谱分离纯化(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝10/1)得到标题化合物(3aR,6aS)-六氢-1H-螺[戊烯-2,2'-[1,3]二氧戊环]-5-胺84c(粗品，黄色液体，5.5g，产率17.82％)。
LC-MS m/z(ESI)＝184.10[M+1]
第三步：
2-氯-4-(((3aR,6aS)-六氢-1H-螺环[戊烯-2,2'-[1,3]二氧杂环]-5-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(84d)
ethyl 2-chloro-4-(((3aR,6aS)-hexahydro-1H-spiro[pentalene-2,2'-[1,3]dioxolan]-5-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将(3aR，6aS)-六氢-1H-螺[戊烯-2,2'-[1,3]二氧戊环]-5-胺84c(5.5g，30.03mmol)和碳酸钾(12.4g，90.1mmol)，用乙腈(100mL)混匀，在0℃下加入2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(9.9g，45.05mmol)，升至室温反应过夜。TLC监测至反应结束，过滤收集滤液，浓缩后经硅胶柱色谱分离纯化(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝8/1)得到标题化合物2-氯-4-(((3aR,6aS)-六氢-1H-螺环[戊烯-2,2'-[1,3]二氧杂环]-5-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯84d(浅黄色固体，0.74g，产率6.70％)。
LC-MS m/z(ESI)＝368.10[M+1]
第四步：
2-氯-4-(((3aR,6aS)-六氢-1H-螺环[戊烯-2,2'-[1,3]二氧杂环]-5-基)氨基)嘧啶-5-羧酸(84e)
2-chloro-4-(((3aR,6aS)-hexahydro-1H-spiro[pentalene-2,2'-[1,3]dioxolan]-5-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylic acid
将2-氯-4-(((3aR,6aS)-六氢-1H-螺环[戊烯-2,2'-[1,3]二氧杂环]-5-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯84d(0.74g，2.01mmol)用四氢呋喃/水＝1/1(40mL)溶解，再加入氢氧化锂一水合物(0.24g，6.03mmol)室温搅拌1小时。TLC监测至反应结束，旋干四氢呋喃，使用2N盐酸调节pH至3左右，析出白色固体，过滤，收集滤饼并干燥，得到标题化合物2-氯-4-(((3aR,6aS)-六氢-1H-螺环[戊烯-2,2'-[1,3]二氧杂环]-5-基)氨基)嘧啶-5-羧酸84e(白色固体，0.5g，产率73.20％)。
LC-MS m/z(ESI)＝340.10[M+1]
第五步：
2-氯-9-((3aR,6aS)-六氢-1H-螺环[戊烯-2,2'-[1,3]二氧杂环]-5-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(84f)
2-chloro-9-((3aR,6aS)-hexahydro-1H-spiro[pentalene-2,2'-[1,3]dioxolan]-5-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-4-(((3aR,6aS)-六氢-1H-螺环[戊烯-2,2'-[1,3]二氧杂环]-5-基)氨基)嘧啶-5-羧酸84e(0.5g，1.47mmol)和叠氮磷酸二苯酯(0.41g，1.47mmol)加入干燥的反应瓶，用N,N-二甲基乙酰胺(20mL)溶解，在0℃下滴加三乙胺(0.2mL，1.47mmol)，加毕后升至室温反应30min，然后置于120℃下反应2小时。TLC监测至反应结束，将反应液倒入六倍体积的冰水中，析出淡黄色固体，过滤，滤饼用水(60mL)洗涤并干燥，得到目标化合物2-氯-9-((3aR,6aS)-六氢-1H-螺环[戊烯-2,2'-[1,3]二氧杂环]-5-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮84f(淡黄色固体，0.38g，产率76.77％)。
LC-MS m/z(ESI)＝337.10[M+1]
第六步：
2-氯-9-((3aR,6aS)-六氢-1H-螺环[戊烯-2,2'-[1,3]二氧杂环]-5-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(84g)
2-chloro-9-((3aR,6aS)-hexahydro-1H-spiro[pentalene-2,2'-[1,3]dioxolan]-5-yl)-7-methyl-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-((3aR,6aS)-六氢-1H-螺环[戊烯-2,2'-[1,3]二氧杂环]-5-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮84f(0.38g，1.13mmol)、硫酸二甲酯(0.14g，1.13mmol)和碳酸铯(0.55g，1.69mmol)加入干燥的反应瓶，用N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶解，室温反应1小时。TLC监测至反应结束，向反应液中加入水和乙酸乙酯萃取，合并有机相，干燥浓缩得到标题化合物2-氯-9-((3aR,6aS)-六氢-1H-螺环[戊烯-2,2'-[1,3]二氧杂环]-5-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮84g(黄色液体，粗品，0.68g，产率174％)。
LC-MS m/z(ESI)＝351.10[M+1]
第七步：
2-氯-9-((3aR,6aS)-5-羟基八氢戊烯-2-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(84h)
2-chloro-9-((3aR,6aS)-5-hydroxyoctahydropentalen-2-yl)-7-methyl-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-((3aR,6aS)-六氢-1H-螺环[戊烯-2,2'-[1,3]二氧杂环]-5-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮84g(0.39g，1.13mmol，理论值)，用四氢呋喃/甲醇＝10/1(11mL)溶解，加入稀盐酸(3.8mL，3mol/L)室温反应1.5小时后除去四氢呋喃和甲醇，用饱和碳酸氢钠调节pH至8左右，加入乙酸乙酯萃取，合并有机相，干燥浓缩得到黄色固体0.37g，再将黄色固体(0.37g)用四氢呋喃/甲醇＝10/1(11mL)溶解，加入硼氢化钠(0.05g，1.35mmol)，室温反应2小时。TLC监测至反应结束，向反应体系中加入水(0.5mL)淬灭反应，使用硅胶柱色谱分离纯化(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1/2)得到标题化合物2-氯-9-((3aR,6aS)-5-羟基八氢戊烯-2-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮84h(白色固体，0.27g，产率77.38％)。
第八步：
2-氟-4-((9-((3aR,6aS)-5-羟基八氢戊烷-2-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物84)
2-fluoro-4-((9-((3aR,6aS)-5-hydroxyoctahydropentalen-2-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
将2-氯-9-((3aR,6aS)-5-羟基八氢戊烯-2-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮84h(0.19g，0.61mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(0.41g，2.46mmol)、碳酸铯(0.8g，2.46mmol)和Brettphos G3Pd(56mg，0.061mmol)，用1,4-二氧六环(20mL)溶解，氮气置换三次，在110℃下反应4小时。TLC监测至反应结束，使用硅胶柱色谱分离纯化(DCM/MeOH(v/v)＝30/1)得到目标化合物2-氟-4-((9-((3aR，6aS)-5-羟基八氢戊烷-2-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺化合物84(白色固体，0.14g，产率52.10％)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d 6)δ8.49(s,1H),8.17(s,1H),7.82(d,1H),7.54(d,1H),7.48(s,1H),7.37(s,1H),4.74(s,1H),4.61-4.52(m,1H),4.09-3.99(m,1H),3.31(s,3H),2.36-2.30(m,4H),2.07-1.98(m,4H),1.37-1.28(m,3H),1.23(d,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝441.20[M+1]
实施例85
4-((9-(8-氧杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)-7-甲基-8-氧代8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物85)
4-((9-(8-oxabicyclo[3.2.1]octan-3-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000170
Figure PCTCN2021087912-appb-000171
第一步：
8-氧杂双环[3.2.1]辛-3-酮肟(85b)
8-oxabicyclo[3.2.1]octan-3-one oxime
将8-氧杂双环[3.2.1]辛烷-3-酮85a(1.4g，11.1mmol)、盐酸羟胺(925mg，13.3mmol)和碳酸钾(3.1g，22.2mmol)溶解于乙醇/水(10/5mL)混合溶剂中，在80℃下反应2小时。TLC监测至反应结束，旋干乙醇，加水和乙酸乙酯萃取，浓缩有机层得到标题化合物8-氧杂双环[3.2.1]辛-3-酮肟85b(淡黄色固体，粗品，1.56g，产率100％)。
LC-MS m/z(ESI)＝142.10[M+1]
第二步：
8-氧杂双环[3.2.1]辛-3-胺(85c)
8-oxabicyclo[3.2.1]octan-3-amine
将8-氧杂双环[3.2.1]辛-3-酮肟85b(1.5g，10.64mmol)溶解于甲醇(30mL)中，室温下加入六水氯化镍(2.53g，10.64mmol)，在室温下反应0.5小时后，将反应液冷却至-30℃，缓慢添加硼氢化钠(6.0g，159.6mmol)，添加完毕缓慢升至室温反应过夜。TLC监测至反应结束，向反应液中加入水和乙酸乙酯萃取，浓缩有机层得到标题化合物8-氧杂双环[3.2.1]辛-3-胺85c(淡黄色油状物，639mg，产率45％)。
LC-MS m/z(ESI)＝128.10[M+1]
第三步：
4-((8-氧杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸乙酯(85d)
ethyl 4-((8-oxabicyclo[3.2.1]octan-3-yl)amino)-2-chloropyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(1.1g，5.03mmol)、碳酸钾(1.74g，12.58mmol)溶解于乙腈(20mL)，在0℃下加入8-氧杂双环[3.2.1]辛-3-胺85c(639mg，5.03mmol)，在室温下搅拌反应20小时。TLC监测至反应结束，向反应液中加水30mL，有固体析出，过滤并用水洗3次，干燥固体得到标题化合物4-((8-氧杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸乙酯85d(白色固体，1.01g，产率64.3％)。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.91(d,1H),8.64(s,1H),4.38-4.31(m,4H),4.30-4.24(m,1H),2.20-2.08(m,2H),2.02-1.90(m,4H),1.66(d,2H),1.32(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝312.10[M+1]
第四步：
4-((8-氧杂双环[3.2.1]辛-3-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸(85e)
4-((8-oxabicyclo[3.2.1]octan-3-yl)amino)-2-chloropyrimidine-5-carboxylic acid
将4-((8-氧杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸乙酯85d(1.0g，3.21mmol)溶解于四氢呋喃10mL，水5mL中，加入氢氧化锂(308mg，12.83mmol)室温下搅拌1小时。TLC监测至反应结束，旋干四氢呋喃，调pH至4左右，有白色固体析出，过滤，滤饼用石油醚/乙酸乙酯(v/v＝10/1)洗两次，浓缩干燥得到标题化合物4-((8-氧杂双环[3.2.1]辛-3-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸85e(白色固体，808mg，产率87.9％)。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ13.83(s,1H),9.17(d,1H),8.59(s,1H),4.32(s,2H),4.29-4.22(m,1H),2.17-2.07(m,2H),2.00-1.89(m,4H),1.65(d,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝284.20[M+1]
第五步：
9-(8-氧杂双环[3.2.1]辛-3-基)-2-氯-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(85f)
9-(8-oxabicyclo[3.2.1]octan-3-yl)-2-chloro-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将4-((8-氧杂双环[3.2.1]辛-3-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸85e(808mg，2.85mmol)溶解于二甲基乙酰胺(20mL)中，加入三乙胺(288mg，2.85mmol)、叠氮磷酸二苯酯(784mg，2.85mmol)，随后逐步升温至120℃搅拌1.5小时。TLC监测至反应结束，反应液经硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝5:1～1:10)得到标题化合物9-(8-氧杂双环[3.2.1]辛-3-基)-2-氯-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮85f(白色固体，653mg，产率71％)。
1H NMR(600MHz,DMSO)δ11.64(s,1H),8.12(s,1H),4.47-4.44(m,2H),4.42-4.40(m,1H),2.28-2.20(m,2H),2.07-2.01(m,2H),1.96-1.90(m,2H),1.81-1.75(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝281.10[M+1]
第六步：
9-(8-氧杂双环[3.2.1]辛-3-基)-2-氯-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(85g)
9-(8-oxabicyclo[3.2.1]octan-3-yl)-2-chloro-7-methyl-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将9-(8-氧杂双环[3.2.1]辛-3-基)-2-氯-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮85f(653mg，2.33mmol)溶解于二甲基甲酰胺(10mL)中，在0℃下加入硫酸二甲酯(293mg，2.33mmol)和碳酸铯(1.52g，4.65mmol)搅拌反应1小时。TLC监测至反应结束，向反应液中加入30mL水和乙酸乙酯萃取，浓缩有机相得到标题化合物9-(8-氧杂双环[3.2.1]辛-3-基)-2-氯-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮85g(白色固体，533mg，产率81.6％)。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.36 8.34(m,1H),4.51-4.47(m,2H),4.45-4.42(m,1H),3.34(s,3H),2.31-2.22(m,2H),2.07-1.98(m,2H),1.98-1.90(m,2H),1.79(t,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝295.20[M+1]
第七步：
4-((9-(8-氧杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)-7-甲基-8-氧代8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物85)
4-((9-(8-oxabicyclo[3.2.1]octan-3-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
将9-(8-氧杂双环[3.2.1]辛-3-基)-2-氯-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮85g(100mg，0.34mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(57mg，0.34mmol)、碳酸铯(221mg，0.68mmol)、Brettphos Pd G3(31mg，0.034mmol)溶解于二氧六环中，氮气保护并换气，在100℃下搅拌4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝30/1)得到标题化合物4-((9-(8-氧杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)-7-甲基-8-氧代8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺化合物85(白色固体，41mg，产率28.9％)。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.79(s,1H),8.24-8.16(m,1H),7.75(d,1H),7.57(d,1H),7.50(s,1H),7.42(s,1H),4.53-4.37(m,3H),2.27(s,3H),2.24-2.15(m,2H),2.03(t,2H),1.87(s,2H),1.67(d,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝427.20[M+1]
实施例86
2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(2-氧杂螺[3.5]壬基-7-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物86)
2-fluoro-5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(2-oxaspiro[3.5]nonan-7-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000172
第一步：
2-氧杂螺[3.5]壬-7-酮肟(86b)
2-oxaspiro[3.5]nonan-7-one oxime
将2-氧杂螺[3.5]壬基-7-酮86a(1.5g，10.7mmol)、盐酸羟胺(744mg，10.7mmol)和碳酸钾(2.95g，21.4mmol)溶解于乙醇/水(10/5mL)混合溶剂中，在80℃下反应2小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，加水和乙酸乙酯萃取浓缩有机层得到标题化合物2-氧杂螺[3.5]壬-7-酮肟86b(淡黄色固体，1.45g，产率89％)。
LC-MS m/z(ESI)＝156.10[M+1]
第二步：
2-氧杂螺[3.5]壬-7-胺(86c)
2-oxaspiro[3.5]nonan-7-amine
将2-氧杂螺[3.5]壬-7-酮肟86b(1.45g，9.34mmol)溶解于甲醇(30mL)中，室温下加入六水氯化镍(2.22g，9.34mmol)，在室温下反应0.5小时后，将反应液冷却至-30℃，缓慢添加硼氢化钠(5.3g，140.1mmol)，添加完毕缓慢升至室温反应过夜。TLC监测至反应结束，向反应液中加水和乙酸乙酯萃取，浓缩有机层得到标题化合物2-氧杂螺[3.5] 壬-7-胺86c(淡黄色油状物，481mg，产率37.6％)。
LC-MS m/z(ESI)＝142.20[M+1]
第三步：
乙基-4-((2-氧杂螺[3.5]壬-7-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-甲酸乙酯(86d)
ethyl 4-((2-oxaspiro[3.5]nonan-7-yl)amino)-2-chloropyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(753mg，3.41mmol)、碳酸钾(940mg，6.81mmol)溶解于乙腈(20mL)中，在0℃下加入8-氧杂双环[3.2.1]辛-3-胺86c(481mg，3.41mmol)，随后升至室温搅拌反应20小时。TLC监测至反应结束，向反应液中加水30mL，有固体析出，过滤并用水洗3次，浓缩得到标题化合物乙基-4-((2-氧杂螺[3.5]壬-7-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-甲酸乙酯86d(白色固体，640mg，产率57.6％)。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.61(s,1H),8.29(d,1H),4.34-4.29(m,4H),4.24(s,2H),3.98-3.89(m,1H),2.05-1.92(m,2H),1.86-1.75(m,2H),1.65-1.56(m,2H),1.45-1.35(m,2H),1.34-1.27(m,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝326.20[M+1]
第四步：
4-((2-氧杂螺[3.5]壬基-7-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸(86e)
4-((2-oxaspiro[3.5]nonan-7-yl)amino)-2-chloropyrimidine-5-carboxylic acid
将乙基-4-((2-氧杂螺[3.5]壬-7-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-甲酸乙酯86d(640mg，1.96mmol)溶解于四氢呋喃10mL，水5mL中，再加入氢氧化锂(189mg，7.86mmol)，室温下搅拌1小时。TLC监测至反应结束，将四氢呋喃旋干，调pH至4左右，有白色固体析出，过滤，滤饼用石油醚/乙酸乙酯(v/v＝10/1)洗两次，浓缩得到标题化合物4-((2-氧杂螺[3.5]壬基-7-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸86e(白色固体，518mg，产率88.5％)。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ13.74(s,1H),8.57(s,1H),8.48(d,1H),4.32(s,2H),4.24(s,2H),3.97-3.84(m,1H),1.99(d,2H),1.86-1.76(m,2H),1.66-1.54(m,2H),1.42-1.26(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝298.10[M+1]
第五步：
2-氯-9-(2-氧杂螺[3.5]壬-7-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(86f)
2-chloro-9-(2-oxaspiro[3.5]nonan-7-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将4-((2-氧杂螺[3.5]壬基-7-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸86e(518mg，1.74mmol)溶解于二甲基乙酰胺(20mL)中，加入三乙胺(175mg，1.74mmol)、叠氮磷酸二苯酯(479mg，1.74mmol)，随后逐步升温至120℃，搅拌1.5小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝5:1～1:10)，得到标题化合物2-氯-9-(2-氧杂螺[3.5]壬-7-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮86f(白色固体，353mg，产率72.8％)。
1H NMR(600MHz,DMSO)δ11.61(s,1H),8.11(s,1H),4.41(s,2H),4.24(s,2H),4.15-4.08(m,1H),2.24-2.08(m,4H),1.69(d,2H),1.64-1.51(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝295.10[M+1]
第六步：
2-氯-7-甲基-9-(2-氧杂螺[3.5]壬-7-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(86g)
2-chloro-7-methyl-9-(2-oxaspiro[3.5]nonan-7-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-(2-氧杂螺[3.5]壬-7-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮86f(353mg，1.18mmol)溶 解于二甲基甲酰胺(10ml)中，在0℃下加入硫酸二甲酯(150mg，1.18mmol)和碳酸铯(464mg，3.36mmol)搅拌反应1小时。TLC监测至反应结束，加入30mL水，用乙酸乙酯萃取，浓缩有机相得到标题化合物2-氯-7-甲基-9-(2-氧杂螺[3.5]壬-7-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮86g(白色固体，313mg，产率85.5％)。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.34(s,1H),4.41(s,2H),4.25(s,2H),4.22-4.08(m,1H),3.34(s,3H),2.22-2.05(m,4H),1.69(d,2H),1.64-1.50(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝309.20[M+1]
第七步：
2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(2-氧杂螺[3.5]壬基-7-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物86)
2-fluoro-5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(2-oxaspiro[3.5]nonan-7-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
将2-氯-7-甲基-9-(2-氧杂螺[3.5]壬-7-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮86g(60mg，0.194mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(33mg，0.194mmol)、碳酸铯(127mg，0.39mmol)、Brettphos Pd G3(17mg，0.019mmol)溶解于二氧六环中，氮气保护并换气，在100℃下搅拌4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝30/1)得到标题化合物2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(2-氧杂螺[3.5]壬基-7-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物86(白色固体，21mg，产率24.7％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.50(s,1H),8.17(s,1H),7.74(d,1H),7.55(d,1H),7.47(s,1H),7.37(s,1H),4.32(s,2H),4.23(s,2H),4.13(s,1H),3.31(s,3H),2.27(s,3H),2.16(d,4H),1.72-1.64(m,2H),1.53(t,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝441.20[M+1]
实施例87
2-氟-4-((9-(6-羟基螺环[3.3]庚烷-2-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物87)
2-fluoro-4-((9-(6-hydroxyspiro[3.3]heptan-2-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000173
Figure PCTCN2021087912-appb-000174
第一步：
6-氨基螺[3.3]庚烷-2-醇盐酸盐(87b)
6-aminospiro[3.3]heptan-2-ol hydrochloride
将叔丁基(6-羟基螺[3.3]庚烷-2-基)氨基甲酸酯87a(2g，8.80mmol)用4M氯化氢-1,4-二氧六环(15mL)溶解，常温搅拌反应2小时。TLC监测至反应结束，浓缩蒸发掉1,4-二氧六环溶液得标题化合物6-氨基螺[3.3]庚烷-2-醇盐酸盐87b(淡黄色固体，粗品，1.44g，产率100％)。
LC-MS m/z(ESI)＝163.10[M+1]
第二步：
2-氯-4-((6-羟基螺[3.3]庚-2-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(87c)
ethyl 2-chloro-4-((3-hydroxy-3-methylcyclohexyl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(2.92g，13.20mmol)、6-氨基螺[3.3]庚烷-2-醇盐酸盐87b(1.44g，8.80mmol)溶解于乙腈(20mL)，搅拌加入碳酸钾(3.65g，26.40mmol)，在室温搅拌4小时。TLC监测至反应结束，浓缩通过柱分离提纯(石油醚:乙酸乙酯(v/v)＝4:1)得标题化合物2-氯-4-((3-羟基-3-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯87c(白色固体g，1.36g，产率49.57％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.59(s,1H),8.43(d,1H),4.91(s,1H),4.44-4.34(m,1H),4.31(q,2H),4.02-3.93(m,1H),2.43-2.35(m,2H),2.34-2.27(m,1H),2.23-2.16(m,1H),2.07-1.99(m,2H),1.90-1.80(m,2H),1.31(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝312.10[M+1]
第三步：
2-氯-4-((6-羟基螺[3.3]庚-2-基)氨基)嘧啶-5-羧酸(87d)
2-chloro-4-((6-hydroxyspiro[3.3]heptan-2-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylic acid
将2-氯-4-((6-羟基螺[3.3]庚-2-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯87c(1.0g，3.21mmol)溶解于四氢呋喃10mL，水10mL中，加入氢氧化锂(269mg，6.42mmol)，室温搅拌1小时。TLC监测至反应完全，浓缩除去四氢呋喃，用2N盐酸调pH为5，有白色固体析出，过滤，滤饼用石油醚洗两次，搜集固体得到标题化合物2-氯-4-((6-羟基螺[3.3]庚-2-基)氨基)嘧啶-5-羧酸87d(760mg，白色固体，产率83.52％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.75(s,1H),8.62(d,1H),8.56(s,1H),4.90(s,1H), 4.42-4.32(m,1H),4.00-3.93(m,1H),2.42-2.35(m,2H),2.33-2.27(m,1H),2.22-2.16(m,1H),2.02-1.97(m,2H),1.88-1.80(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝284.10[M+1]
第四步：
2-氯-9-(6-羟基螺[3.3]庚烷-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(87e)
2-chloro-9-(6-hydroxyspiro[3.3]heptan-2-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-4-((6-羟基螺[3.3]庚-2-基)氨基)嘧啶-5-羧酸87d(760mg，2.68mmol)溶解于二甲基乙酰胺(10mL)，加入三乙胺(0.37mL，2.68mmol)、叠氮磷酸二苯酯(0.57mL，2.68mmol)，随后逐步升温至90℃搅拌2小时。TLC监测至反应完毕，将反应液倒入冰水中，过滤收集固体，水洗3次，真空浓缩干燥得到标题化合物2-氯-9-(6-羟基螺[3.3]庚烷-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮87e(580mg，白色固体，产率77.13％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.60(s,1H),8.10(s,1H),4.96(d,1H),4.70-4.60(m,1H),2.92-2.87(m,2H),2.46-2.43(m,2H),2.32-2.21(m,3H),1.92-1.87(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝281.10[M+1]
第五步：
2-氯-9-(6-羟基螺[3.3]庚烷-2-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(87f)
2-chloro-9-(6-hydroxyspiro[3.3]heptan-2-yl)-7-methyl-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-(6-羟基螺[3.3]庚烷-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮87e(580mg，2.07mmol)溶解于二甲基甲酰胺(5mL)，0℃下加入硫酸二甲酯(260mg，2.07mmol)和碳酸铯(1.3g，4.13mmol)搅拌反应1小时。TLC监测至反应结束，将反应液倒入冰水中，有固体析出，过滤搜集固体得到标题化合物2-氯-9-(6-羟基螺[3.3]庚烷-2-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮87f(380mg，白色固体，产率62.40％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.33(s,1H),4.97(d,1H),4.70-4.66(m,1H),4.05-3.96(m,1H),3.33(s,3H),2.95-2.87(m,2H),2.51-2.43(m,1H),2.31-2.25(m,3H),1.93-1.87(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝295.10[M+1]
第六步：
2-氟-4-((9-(6-羟基螺环[3.3]庚烷-2-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物87)
2-fluoro-4-((9-(6-hydroxyspiro[3.3]heptan-2-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
将2-氯-9-(6-羟基螺[3.3]庚烷-2-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮87f(130mg，0.44mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(222mg，1.32mmol)、碳酸铯(311mg，0.88mmol)、Brettphos Pd G3(40mg，0.044mmol)溶解于二氧六环中，氮气保护并换气，在110℃下搅拌4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝30/1)得到标题化合物2-氟-4-((9-(6-羟基螺环[3.3]庚烷-2-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺化合物87(白色固体，35mg，产率18.62％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.51(s,1H),8.18(s,1H),7.85(d,1H),7.55(d,1H),7.47(s,1H),7.38(s,1H),4.97(d,1H),4.72-4.63(m,1H),4.03-3.94(m,1H),3.29(s,3H),2.99-2.90(m,2H),2.46-2.40(m,1H),2.29(s,3H),2.27-2.13(m,3H),1.92-1.83(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝427.20[M+1]
实施例88
2-氟-4-((9-(3-羟基双环[3.2.1]辛烷-8-基)-7-甲基-8-氧代8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物88)
2-fluoro-4-((9-(3-hydroxybicyclo[3.2.1]octane-8-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000175
第一步：
8-氨基双环[3.2.1]辛-3-酮盐酸盐(88b)
8-aminobicyclo[3.2.1]octan-3-one hydrochloride
将(3-氧代双环[3.2.1]辛-8-基)氨基甲酸叔丁酯88a(1.0g，4.18mmol)溶于4N盐酸二氧六环(40mL)，室温反应1小时。TLC监测反应结束，直接将反应液浓缩至干，得目标化合物8-氨基双环[3.2.1]辛-3-酮盐酸盐88b(白色固体，730mg，产率99.45％)。
1H NMR(401MHz,DMSO-d6)δ8.77(s,2H),3.36(m,2H),2.80-2.77(m,2H),2.16-2.13(m,2H),1.87-1.85(m,2H),1.43-1.42(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝176.20[M+1]
第二步：
2-氯-4-((3-氧双环[3.2.1]辛-8-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(88c)
ethyl 2-chloro-4-((3-oxobicyclo[3.2.1]octan-8-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(1.38g,6.26mmol)、8-氨基双环[3.2.1]辛-3-酮盐酸盐88b(730mg,4.17mmol)，碳酸钾(1.73g，12.52mmol)溶于乙腈(20mL)，反应液在室温反应16小时。TLC监测反应结束，过滤，并用少量乙腈清洗固体，将滤液合并后浓缩，粗品经柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯(v/v)＝1:1)后得目标化合物2-氯-4-((3-氧双环[3.2.1]辛-8-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯88c(白色固体，1.0g，产率74.01％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.86(d,2H),8.68(s,1H),4.36-4.30(q,2H),4.20-4.16(m,1H),2.66-2.65(m,2H),2.56-2.55(m,2H),2.21-2.17(m,2H),1.97-1.93(m,2H),1.53-1.33(m,2H),1.31(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝324.10[M+1]
第三步：
2-氯-4-((3--3-氧双环[3.2.1]辛-8-基)氨基]嘧啶-5-羧酸(88d)
2-chloro-4-((3-oxobicyclo[3.2.1]octan-8-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylic acid
将2-氯-4-((3-氧双环[3.2.1]辛-8-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯88c(1.0g，3.09mmol)溶解于四氢呋喃20mL，水20mL中，加入氢氧化锂(259mg，6.18mmol)，室温搅拌1小时。TLC监测反应完全，浓缩除去四氢呋喃，用2N盐酸调pH为5，有白色固体析出，过滤，滤饼用石油醚洗两次，搜集固体得到标题化合物2-氯-4-((3-3-氧双环[3.2.1]辛-8-基)氨基]嘧啶-5-羧酸88d(白色固体，800mg，产率87.59％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.93(s,1H),9.20(d,2H),8.64(s,1H),4.20-4.16(m,1H),2.66-2.64(m,2H),2.54-2.53(m,2H),2.21-2.16(m,2H),1.96-1.93(m,2H),1.53-1.47(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝296.10[M+1]
第四步：
2-氯-9-(3-氧代双环[3.2.1]辛-8-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(88e)
2-chloro-9-(3-oxobicyclo[3.2.1]octan-8-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-4-((3-3-氧双环[3.2.1]辛-8-基)氨基]嘧啶-5-羧酸88d(800mg，2.71mmol)溶解于二甲基乙酰胺(20mL)，加入三乙胺(0.37mL，2.7mmol)、叠氮磷酸二苯酯(0.58mL，2.7mmol)，随后逐步升温至90℃搅拌反应2小时。TLC监测反应完毕，将反应液倒入冰水中，过滤搜集固体，水洗3次，真空浓缩干燥得标题化合物2-氯-9-(3-氧代双环[3.2.1]辛-8-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮88e(白色固体，630mg，产率94.71％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.66(s,1H),8.13(s,1H),4.01-3.99(m,1H),3.65-3.64(m,2H),2.66-2.61(m,2H),2.12-2.08(m,2H),1.89-1.86(m,2H),1.54-1.49(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝293.00[M+l]
第五步：
2-氯-7-甲基-9-(3-氧代双环[3.2.1]辛-8-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(88f)
2-chloro-7-methyl-9-(3-oxobicyclo[3.2.1]octan-8-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-(3-氧代双环[3.2.1]辛-8-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮88e(630mg，2.15mmol)溶解于二甲基甲酰胺(10mL)，在0℃下加入硫酸二甲酯(0.2mL，2.15mmol)和碳酸铯(1.4g，4.3mmol)搅拌反应1小时。TLC监测反应结束，将反应液倒入冰水中，有固体析出，过滤、搜集固体得到标题化合物2-氯-7-甲基-9-(3-氧代双环[3.2.1]辛-8-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮88f(白色固体，490mg，产率74.22％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.37(s,1H),4.03-4.01(m,1H),3.66-3.65(m,2H),3.36(s,3H),2.65-2.59(m,2H),2.13-2.08(m,2H),1.89-1.87(m,2H),1.55-1.50(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝307.10[M+l]
第六步：
2-氯-9-(3-羟基双环[3.2.1]辛-8-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(88g)
2-chloro-9-(3-hydroxybicyclo[3.2.1]octan-8-yl)-7-methyl-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-7-甲基-9-(3-氧代双环[3.2.1]辛-8-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮88f(490mg，1.6mmol)溶解于四氢呋喃(30mL)和甲醇(30mL)，在0℃下加入硼氢化钠(181mg，4.79mmol)反应2小时。TLC监测反应结束，将反应液倒入冰水中，有固体析出，过滤、搜集固体得到标题化合物2-氯-9-(3-羟基双环[3.2.1]辛-8-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮88g(白色固体，380mg，产率77.04％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.37(s,1H),4.28-4.20(m,1H),3.74-3.66(m,2H),3.45-3.43(m,2H),3.37(s,3H),2.14-2.07(m,1H),1.74-1.50(m,5H),1.28-1.22(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝309.10[M+l]
第七步：
2-氟-4-((9-(3-羟基双环[3.2.1]辛烷-8-基)-7-甲基-8-氧代8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物88)
2-fluoro-4-((9-(3-hydroxybicyclo[3.2.1]octane-8-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
将2-氯-9-(3-羟基双环[3.2.1]辛-8-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮88g(100mg，0.32mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(164mg，0.96mmol)、碳酸铯(228mg，0.64mmol)、Brettphos Pd G3(29mg，0.032mmol)溶解于二氧六环中，氮气保护并换气，在110℃下搅拌4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝30/1)得到标题化合物2-氟-4-((9-(3-羟基双环[3.2.1]辛烷-8-基)-7-甲基-8-氧代8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺化合物88(白色固体，83mg，产率59.20％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.49(d,1H),8.21(s,1H),7.75(d,1H),7.54(d,1H),7.46(s,1H),7.40(s,1H),4.31-4.26(m,1H),3.75-3.71(m,1H),3.62(t,1H),3.52(s,2H),3.34(s,3H),2.28(s,3H),1.72-1.62(m,4H),1.59-1.50(m,2H),1.35(t,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝441.20[M+l]
实施例89
2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(2-氧杂螺[3.3]庚基-6-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物89)
2-fluoro-5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(2-oxaspiro[3.3]heptan-6-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000176
第一步：
4-((2-氧杂螺[3.3]庚-6-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸乙酯(89a)
ethyl 4-((2-oxaspiro[3.3]heptan-6-yl)amino)-2-chloropyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(4.43g，20.05mmol)、2-氧杂螺[3.3]庚-6-胺盐酸盐(2.0g，13.37mmol)、碳酸钾(5.54g，40.10mmol)溶于乙腈(60mL)中，反应液在室温反应16小时。TLC监测反应结束，过滤，并用少量乙腈清洗固体，将滤液合并后浓缩，粗品经柱层析分离(石油醚:乙酸乙酯(v/v)＝1:1)后得目标化合4-((2-氧杂螺[3.3]庚-6-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸乙酯89a(白色固体，3.0g，产率75.38％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.60(s,1H),8.47(d,1H),4.63(s,2H),4.49(s,2H),4.39-4.33(m,1H),4.30-4.27(q,2H),2.66-2.61(m,2H),2.31-2.26(m,2H),1.30(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝298.10[M+1]
第二步：
4-((2-氧杂螺[3.3]庚-6-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸(89b)
4-((2-oxaspiro[3.3]heptan-6-yl)amino)-2-chloropyrimidine-5-carboxylic acid
将4-((2-氧杂螺[3.3]庚-6-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸乙酯89a(3.0g，10.08mmol)溶解于四氢呋喃/水(30mL/30mL)中,加入氢氧化锂(845mg，20.15mmol)，室温搅拌1小时。TLC监测至反应结束，浓缩除去四氢呋喃，用2N盐酸调pH为5，有白色固体析出，过滤，滤饼用石油醚洗两次，搜集固体得到标题化合物4-((2-氧杂螺[3.3]庚-6-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸89b(白色固体，1.8g，产率66.24％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.76(s,1H),8.64(d,1H),8.57(s,1H),4.64(s,2H),4.49(s,2H),4.40-4.30(m,1H),2.67-2.61(m,2H),2.28-2.23(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝270.20[M+1]
第三步：
2-氯-9-(2-氧杂螺[3.3]庚-6-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(89c)
2-chloro-9-(2-oxaspiro[3.3]heptan-6-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将4-((2-氧杂螺[3.3]庚-6-6基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸89b(1.8g，6.67mmol)溶解于二甲基乙酰胺(40mL)，加入三乙胺(0.92mL，6.67mmol)、叠氮磷酸二苯酯(1.4mL，6.67mmol)，随后逐步升温至90℃搅拌反应2小时。TLC监测至反应结束，将反应液倒入冰水中，过滤收集固体，水洗3次真空浓缩干燥得2-氯-9-(2-氧杂螺[3.3]庚-6-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮89c(白色固体，1.3g，产率73.03％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.61(s,1H),8.11(s,1H),4.71-4.63(m,5H),3.02-2.94(m,2H),2.69-2.66(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝267.10[M+1]
第四步：
2-氯-7-甲基-9-(2-氧杂螺[3.3]庚-6-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(89d)
2-chloro-7-methyl-9-(2-oxaspiro[3.3]heptan-6-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-(2-氧杂螺[3.3]庚-6-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮89c(1.3g，4.87mmol)溶解于二甲基甲酰胺(10mL)，在0℃下加入硫酸二甲酯(0.46mL，4.87mmol)和碳酸铯(3.18g，9.75mmol)，搅拌反应1小时。TLC监测至反应结束，将反应液倒入冰水中，有固体析出，过滤、搜集固体得到标题化合物2-氯-7-甲基-9-(2-氧杂螺[3.3]庚-6-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮89d(白色固体，875mg，产率63.94％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.35(s,1H),4.76-4.69(m,1H),4.66-4.63(m,4H),3.33(s,3H),3.01-2.95(m,2H),2.71-2.66(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝281.10[M+1]
第五步：
2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(2-氧杂螺[3.3]庚基-6-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物89)
2-fluoro-5-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-(2-oxaspiro[3.3]heptan-6-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
将2-氯-7-甲基-9-(2-氧杂螺[3.3]庚-6-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮89d(200mg，0.71mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(359mg，2.13mmol)、碳酸铯(502mg，1.42mmol)、Brettphos Pd G3(65mg，0.071mmol)溶解于二氧六环中，氮气保护并换气，在110℃下搅拌4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝30/1)得到标题化合物2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(2-氧杂螺[3.3]庚基-6-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物89(白色固体，58mg，产率19.82％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.49(s,1H),8.19(s,1H),7.80(d,1H),7.56(d,1H),7.47(s,1H),7.41(s,1H),4.67(s,3H),4.52(s,2H),3.30(s,3H),3.08-3.02(m,2H),2.65-2.57(m,2H),2.27(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝413.20[M+1]
实施例90
4-((9-(4-氰基双环[2.2.2]辛烷-1-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物90)
4-((9-(4-cyanobicyclo[2.2.2]octan-1-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000177
第一步：
4-氨基甲酰基双环[2.2.2]辛烷-1-甲酸甲酯(90b)
methyl 4-carbamoylbicyclo[2.2.2]octane-1-carboxylate
将4-(甲氧羰基)双环[2.2.2]辛烷-1-羧酸90a(10.0g，47.12mmol)溶解于无水二氯甲烷(200mL)，冰浴下加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(18.81g，49.47mmol),保持温度反应30min，加入N,N-二异丙基乙胺(24.62mL，141.35mmol),随后缓慢多次加入氯化铵固体(3.78g，70.67mmol)。反应逐步恢复至室温并过夜反应。TLC监测反应结束，反应液直接用0.5N盐酸溶液100mL，分液后有机相依次用水和饱和食盐水各100mL，干燥并浓缩后得到标题化合物4-氨基甲酰基双环[2.2.2]辛烷-1-甲酸甲酯90b(白色固体，21g，粗品)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.94(s,1H),6.73(s,1H),3.57(s,3H),1.72-1.63(m,12H)。
LC-MS m/z(ESI)＝212.10[M+1]
第二步：
4-氰基双环[2.2.2]辛烷-1-羧酸甲酯(90c)
methyl 4-cyanobicyclo[2.2.2]octane-1-carboxylate
将4-氨基甲酰基双环[2.2.2]辛烷-1-甲酸甲酯90b(21g，99.40mmol)溶于二氯甲烷(200mL)，冰浴加入吡啶(16.02mL，198.81mmol)、三氟乙酸酐(21.00mL，149.10mmol)保持温度继续反应1小时。TLC监测反应结束，直接将反应液过滤，滤饼用100mL二氯甲烷清洗，合并有机相，随后用1N盐酸溶液、水、饱和食盐水各100mL萃取，干燥浓缩后经柱层析分离后得目标产物4-氰基双环[2.2.2]辛烷-1-羧酸甲酯90c(白色固体，5.3g，两步产率58.21％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3-d6)δ3.66(s,3H),1.98-1.94(m,6H),1.86-1.82(m,6H)。
LC-MS m/z(ESI)＝194.10[M+1]
第三步：
4-氰基双环[2.2.2]辛烷-1-羧酸(90d)
4-cyanobicyclo[2.2.2]octane-1-carboxylic acid
将4-氰基双环[2.2.2]辛烷-1-羧酸甲酯90c(5.3g，27.43mmol)溶解于四氢呋喃50mL，水50mL中，加入氢氧化锂(1.73g，41.14mmol)，室温搅拌1小时。TLC监测反应完全，浓缩除去四氢呋喃，用2N盐酸调pH为5，有白色固体析出，过滤，滤饼用石油醚洗两次，搜集固体得到标题化合物4-氰基双环[2.2.2]辛烷-1-羧酸90d(白色固体，5.0g，粗品)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.23(s,1H),1.89-1.85(m,6H),1.72-1.68(m,6H)。
LC-MS m/z(ESI)＝180.10[M+1]
第四步：
4-氨基双环[2.2.2]辛烷-1-腈盐酸盐(90e)
4-aminobicyclo[2.2.2]octane-1-carbonitrile hydrochloride
将4-氰基双环[2.2.2]辛烷-1-羧酸90d(5.0g，27.90mmol)溶于甲苯(60mL)中，冰浴加入叠氮磷酸二苯酯(6.01mL，27.90mmol)和三乙胺(3.88mL，27.90mmol),将反应液室温搅拌1小时后升温至90℃继续反应3小时。TLC监测至反应结束，冷却至室温，缓慢倒入100mL 1N盐酸溶液，出现大量固体，过滤收集固体，且用乙酸乙酯(150mL)打浆，真空干燥得标题化合物4-氨基双环[2.2.2]辛烷-1-腈盐酸盐90e(白色固体，7.3g，粗品)。
1H NMR(401MHz,DMSO-d6)δ8.45(s,2H),2.01-1.97(m,6H),1.81-1.76(m,6H)。
LC-MS m/z(ESI)＝187.10[M+1]
第五步：
2-氯-4-((4-氰基双环[2.2.2]辛丹-1-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(90f)
ethyl 2-chloro-4-((4-cyanobicyclo[2.2.2]octan-1-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(8.74g，39.53mmol)、4-氨基双环[2.2.2]辛烷-1-腈盐酸盐90e(7.38g，39.53mmol)、碳酸钾(21.85g，158.13mmol)溶于乙腈(200mL)中，反应液在室温反应16小时。TLC监测反应结束，过滤，并用少量乙腈清洗固体，将滤液合并后浓缩，粗品经硅胶柱色谱分离(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1:1)后得标题化合物2-氯-4-((4-氰基双环[2.2.2]辛丹-1-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯90f(白色固体，4.0g，产率30.23％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.63(s,1H),8.29(s,1H),4.30(q,2H),2.10-2.00(m,12H),1.30(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝335.10[M+1]
第六步：
2-氯-4-((4-氰基双环[2.2.2]辛丹-1-基)氨基)嘧啶-5-羧酸(90g)
2-chloro-4-((4-cyanobicyclo[2.2.2]octan-1-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylic acid
将2-氯-4-((4-氰基双环[2.2.2]辛丹-1-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯90f(4g，11.95mmol)溶解于四氢呋喃50mL，水50mL中，加入氢氧化锂(1.01g，23.90mmol)室温搅拌1小时。TLC监测反应完全，浓缩除去四氢呋喃，用2N盐酸调pH为5，有白色固体析出，过滤，滤饼用石油醚洗两次，搜集固体得到标题化合物2-氯-4-((4-氰基双环[2.2.2]辛丹-1-基)氨基)嘧啶-5-羧酸90g(白色固体，3.6g，产率98.23％)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ13.85(s,1H),8.59(s,1H),8.56(s,1H),2.07-1.98(m,12H)。
LC-MS m/z(ESI)＝307.10[M+l]
第七步：
4-(2-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)双环[2.2.2]辛烷-1-腈(90h)
4-(2-chloro-8-oxo-7,8-dihydro-9H-purin-9-yl)bicyclo[2.2.2]octane-1-carbonitrile
将2-氯-4-((4-氰基双环[2.2.2]辛丹-1-基)氨基)嘧啶-5-羧酸90g(3.8g，12.39mmol)溶解于二甲基乙酰胺(50mL)，加入三乙胺(1.72mL，12.39mmol)、叠氮磷酸二苯酯(2.67mL，12.39mmol),随后逐步升温至120℃搅拌反应1.5小时。TLC监测反应完毕，将反应液倒入冰水中，过滤收集固体并用水洗3次，真空浓缩干燥得标题化合物4-(2-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)双环[2.2.2]辛烷-1-腈90h(白色固体，3.3g，产率87.7％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.61(s,1H),8.09(s,1H),2.48-2.40(m,6H),2.09-2.03(m,6H)。
LC-MS m/z(ESI)＝304.20[M+l]
第八步：
4-(2-氯-7-甲基-8-氧代7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)双环[2.2.2]辛烷-1-腈(90i)
4-(2-chloro-7-methyl-8-oxo-7,8-dihydro-9H-purin-9-yl)bicyclo[2.2.2]octane-1-carbonitrile
将4-(2-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)双环[2.2.2]辛烷-1-腈90h(3.3g，11.43mmol)溶解于二甲基甲酰胺(50mL)，在0度下加入硫酸二甲酯(1.44g，11.43mmol)和碳酸铯(5.59g，17.15mmol)，0℃搅拌1小时。TLC监测反应结束，将反应液倒入冰水中，有固体析出，过滤收集固体得到标题化合物4-(2-氯-7-甲基-8-氧代7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)双环[2.2.2]辛烷-1-腈90i(白色固体，3.1g，产率89.59％)。
1H NMR(401MHz,DMSO-d6)δ8.33(s,1H),3.29(s,3H),2.48-2.41(m,6H),2.10-2.04(m,6H)。
LC-MS m/z(ESI)＝318.20[M+l]
第九步：
4-((9-(4-氰基双环[2.2.2]辛烷-1-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物90)
4-((9-(4-cyanobicyclo[2.2.2]octan-1-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
将4-(2-氯-7-甲基-8-氧代7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)双环[2.2.2]辛烷-1-腈90i(200mg，0.63mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(318mg，1.89mmol)、碳酸铯(444mg，1.26mmol)、Brettphos Pd G3(57mg，0.063mmol)溶解于二氧六环中，氮气保护并换气，在110℃下搅拌4小时。TLC监测反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝30/1)得到标题化合物4-((9-(4-氰基双环[2.2.2]辛烷-1-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺化合物90(白色固体，18mg，产率6.4％)。
1H NMR(401MHz,DMSO-d6)δ10.08(d,1H),8.22-8.17(s,1H),7.88-7.53(d,1H),7.48-7.29(d,1H),6.31-6.29(s,1H),5.82(s,1H),3.26(d,3H),2.34-2.26(m,6H),2.06(d,5H),1.96(dd,4H)。
LC-MS m/z(ESI)＝450.20[M+l]
实施例91
2-氟-4-((9-(3-羟基-3-甲基环己基)-7-甲基-8-氧代8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物91)
2-fluoro-4-((9-(3-hydroxy-3-methylcyclohexyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000178
第一步：
叔丁基(3-羟基-3-甲基环己基)氨基甲酸酯(91b)
tert-butyl(3-hydroxy-3-methylcyclohexyl)carbamate
将叔丁基(3-氧代环己基)氨基甲酸酯91a(5.00g，23.4mmol)溶解于四氢呋喃(80mL)在-78℃下预冷，然后经45min缓慢滴加1.6M甲基锂-乙醚溶液(61.5mL，98.28mmol)，反应液在-78℃下搅拌反应1小时后加入剩余1.6M甲基锂-乙醚溶液(61.5mL，98.28mmol)，再在-78℃搅拌反应1小时。TLC监测至反应结束，加入饱和氯化铵溶液淬灭反应，再加入水和乙酸乙酯萃取，浓缩有机层用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝8:1)纯化得标题化合物叔丁基(3-羟基-3-甲基环己基)氨基甲酸酯91b(白色固体，2.07g，产率38.53％)。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ4.30(s,1H),3.68(s,1H),1.90(d,3H),1.67(q,1H),1.59-1.48(m,2H),1.37(s,9H),1.19-1.12(m,4H),1.06(t,1H),0.90(qd,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝230.20[M+1]
第二步：
3-氨基-1-甲基环己烷-1-醇盐酸盐(91c)
3-amino-1-methylcyclohexan-1-ol hydrochloride
将叔丁基(3-羟基-3-甲基环己基)氨基甲酸酯91b(2.07g，9.03mmol)用4M氯化氢-1,4-二氧六环(10mL)溶解，常温搅拌反应。TLC监测至反应结束，浓缩蒸发掉1,4-二氧六环溶液得标题化合物3-氨基-1-甲基环己烷-1-醇盐酸盐91c(淡黄色固体，粗品，1.49g)。
LC-MS m/z(ESI)＝166.10[M+1]
第三步：
2-氯-4-((3-羟基-3-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(91d)
ethyl 2-chloro-4-((3-hydroxy-3-methylcyclohexyl)amino)pyrimidine-5-carboxyl-ate
将2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(2.99g，13.54mmol)、3-氨基-1-甲基环己烷-1-醇盐酸盐91c(1.49g，9.03mmol)溶解于乙腈(20mL)，搅拌加入碳酸钾(3.74g，27.08mmol)，在室温搅拌4小时。TLC监测至反应结束，浓缩通过柱分离提纯(石油醚：乙酸乙酯(v/v)＝4:1)得标题化合物2-氯-4-((3-羟基-3-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯91d(白色固体，2.23g，产率78.74％)。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.57(s,1H),8.19(d,1H),4.43-4.32(m,1H),4.27(q,2H),2.07-1.95(m,2H),1.83-1.69(m,2H),1.64-1.56(m,2H),1.31(t,4H),1.26(d,1H),1.21(s,3H),1.10-1.05(m,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝314.10[M+1]
第四步：
2-氯-4-((3-羟基-3-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸(91e)
2-chloro-4-((3-hydroxy-3-methylcyclohexyl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2-氯-4-((3-羟基-3-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯91d(2.23g，7.11mmol)溶解于四氢呋喃/水(15mL/15mL)中，加入氢氧化锂(895mg，21.32mmol)，室温搅拌1小时。TLC监测至反应结束，浓缩除去四氢呋喃，用2N盐酸调pH至3-4，有白色固体析出，过滤，滤饼用石油醚洗两次，搜集固体得到标题化合物2-氯-4-((3-羟基-3-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸91e(白色固体，1.6g，产率78.79％)。
LC-MS m/z(ESI)＝286.10[M+1]
第五步：
2-氯-9-(3-羟基-3-甲基环己基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(91f)
2-chloro-9-(3-hydroxy-3-methylcyclohexyl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-4-((3-羟基-3-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸91e(1.38g，4.83mmol)溶解于二甲基乙酰胺(20mL)，加入三乙胺(0.67mL，4.83mmol)、叠氮磷酸二苯酯(1.04mL，4.83mmol)，随后逐步升温至90℃搅拌2小时。TLC监测至反应结束，将反应液倒入冰水中,过滤搜集固体,水洗3次，真空浓缩干燥得到目标化合物2-氯-9-(3-羟基-3-甲基环己基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮91f(白色固体，1.35g，产率98.86％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.60(s,1H),8.10(s,1H),4.62-4.54(m,1H),4.35(s,1H),2.19(t,1H),2.10-1.99(m,1H),1.70-1.53(m,5H),1.30-1.22(m,1H),1.16(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝283.10[M+1]
第六步：
2-氯-9-(3-羟基-3-甲基环己基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(91g)
2-chloro-9-(3-hydroxy-3-methylcyclohexyl)-7-methyl-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-(3-羟基-3-甲基环己基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮91f(1.35g，4.77mmol)溶解于二甲基甲酰胺(10mL)，在0℃下加入硫酸二甲酯(0.45mL，4.77mmol)和碳酸铯(1.56g，4.77mmol)，搅拌反应1小时。TLC监测至反应结束，将反应液倒入冰水中，有固体析出，过滤、搜集固体得到标题化合物2-氯-9-(3-羟基-3-甲基环己基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮91g(白色固体，873mg，产率61.61％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.34(s,1H),4.66-4.58(m,1H),4.37(s,1H),3.35(s,3H),2.20(t,1H),2.11-2.00(m,1H),1.72-1.54(m,5H),1.32-1.24(m,1H),1.17(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝297.10[M+1]
第七步：
2-氟-4-((9-(3-羟基-3-甲基环己基)-7-甲基-8-氧代8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物91)
2-fluoro-4-((9-(3-hydroxy-3-methylcyclohexyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
将2-氯-9-(3-羟基-3-甲基环己基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮91g(200mg，0.67mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(338mg，2.01mmol)、碳酸铯(473mg，1.34mmol)、Brettphos Pd G3(61mg，0.067mmol)溶解于二氧六环中，氮气保护并换气，在110℃下搅拌4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝30/1)得到标题化合物2-氟-4-((9-(3-羟基-3-甲基环己基)-7-甲基-8-氧代8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺化合物91(白色固体，140mg，产率48.80％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.50(s,1H),8.18(s,1H),7.96(d,1H),7.54(d,1H),7.46(s,1H),7.39(d,1H),4.67-4.58(m,1H),4.33(s,1H),3.32(s,3H),2.35(t,1H),2.30(s,3H),2.15-2.01(m,1H),1.80-1.63(m,3H),1.58(d,2H),1.41-1.22(m,1H),1.18(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝429.20[M+1]
实施例92
4-((9-(4-氰基-4-甲基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物92)
4-((9-(4-cyano-4-methylcyclohexyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000179
第一步：
1-甲基-4-氧代环己烷-1-碳腈(92b)
2-1-methyl-4-oxocyclohexane-1-carbonitrile
将1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-碳腈92a(5.00g，29.9mmol)溶于THF(60mL)中，0℃下缓慢滴加双三氟甲烷磺酰亚胺锂(9.87mL，34.38mmol)搅拌反应，1小时后缓慢加入碘甲烷(4.24g，29.9mmol)再搅拌反应1小时。TLC监测至反应结束，用饱和氯化铵溶液以及溴水和乙酸乙酯萃取2次，无水硫酸镁干燥，过滤浓缩有机层得中间体8-甲基-1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-碳腈，再加入THF(60mL)溶解，反应液中加入3M HCl(60mL)，加热至50℃反应5h。TLC监测至反应结束，冷却至室温后用3M NaOH调节pH值至7-8，加入二氯甲烷萃取3次，无水硫酸钠干燥，浓缩有机相得标题化合物，1-甲基-4-氧代环己烷-1-碳腈92b(黄色液体，3.48g，产率84.84％)。
LC-MS m/z(ESI)＝138.10[M+1]
第二步：
4-氨基-1-甲基环己烷-1-碳腈(92c)
4-amino-1-methylcyclohexane-1-carbonitrile
将1-甲基-4-氧代环己烷-1-碳腈92b(3.48g，25.37mmol)溶于无水甲醇(50mL)中，常温搅拌下加入甲酸铵(16.00g，253.70mmol)反应4小时，再加入氰基硼氢化钠(1.88g，30.44mmol)搅拌反应3小时。TLC监测至反应结束，加入2N HCl调节pH值至1-2搅拌反应0.5小时后加入乙酸乙酯萃取2次，再用2N NaOH溶液调节pH值至10左右，二氯甲烷萃取3次，无水硫酸镁干燥，浓缩有机相得标题化合物，4-氨基-1-甲基环己烷-1-碳腈92c(淡黄色液体，2.80g，产率79.85％)。
LC-MS m/z(ESI)＝139.10[M+1]
第三步：
2-氯-4-((4-氰基-4-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(92d)
ethyl 2-chloro-4-((4-cyano-4-methylcyclohexyl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯-5-嘧啶甲酸乙酯1A(6.72g，30.39mmol)溶于乙腈(30mL)中，0℃搅拌下加入碳酸钾(8.40g，60.78mmol)，再缓慢滴加4-氨基-1-甲基环己烷-1-碳腈92c(2.80g，20.26mmol)的乙腈溶液(10mL)搅拌反应1小时。TLC监测至反应结束，硅藻土过滤后用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝20:1)纯化得标题化合物2-氯-4-((4-氰基-4-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯92d(白色固体，2.63g，产率40.22％)。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.68(d,1H),4.38(p,2H),2.23-1.82(m,4H),1.79-1.49(m,6H),1.46-1.36(m,6H)。
LC-MS m/z(ESI)＝323.10[M+1]
第四步：
2-氯-4-((4-氰基-4-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸(92e)
2-chloro-4-((4-cyano-4-methylcyclohexyl)amino)pyrimidine-5-carboxylic acid
将2-氯-4-((4-氰基-4-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯92d(2.63g，8.15mmol)溶解于四氢呋喃/水(20mL/10mL)中，加入氢氧化锂一水合物(1.00g，24.45mmol)，常温搅拌反应2小时。TLC监测至反应结束，浓缩蒸发掉四氢呋喃后加入2N HCl调节pH至3-4左右，有白色固体析出，过滤，滤饼用水以及石油醚/乙酸乙酯(v/v＝10/1)洗两次得标题化合物2-氯-4-((4-氰基-4-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸92e(白色固体，2.20g，产率91.59％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.75(s,1H),8.59(s,1H),8.52(d,1H),3.97(m,1H),2.06-1.92(m,4H),1.63-1.47(m,4H),1.35(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝295.10[M+1]
第五步：
4-(2-氯-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-1-甲基环己烷-1-碳腈(92f)
4-(2-chloro-8-oxo-7,8-dihydro-9H-purin-9-yl)-1-methylcyclohexane-1-carbonitrile
将2-氯-4-((4-氰基-4-甲基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸92e(2.20g，7.46mmol)用N,N-二甲基乙酰胺(15mL)溶解，常温搅拌下加入三乙胺(1.04mL，7.46mmol)和叠氮磷酸二苯酯(1.61mL，7.46mmol)反应2小时后，升温至110℃回流反应2.5小时。TLC监测至反应结束，加入水和乙酸乙酯萃取3次，浓缩有机层硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝80/1)，得到标题化合物4-(2-氯-8-氧代-8,9-二氢-7h-嘌呤-9-基)-1-甲基环己烷-1-碳腈92f(白色固体，0.9g，产率41.35％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.64(s,1H),8.13(s,1H),4.31-4.20(m,1H),2.45-2.33(m,2H),2.01-1.94(m,4H),1.71-1.64(m,2H),1.49(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝292.10[M+1]
第六步：
4-(2-氯-7-甲基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)-1-甲基环己烷-1-碳腈(92g)
4-(2-chloro-7-methyl-8-oxo-7,8-dihydro-9H-purin-9-yl)-1-methylcyclohexane-1-carbonitrile
将4-(2-氯-8-氧代-8,9-二氢-7h-嘌呤-9-基)-1-甲基环己烷-1-碳腈92f(0.90g，3.08mmol)用N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶解，0℃搅拌下加入硫酸二甲酯(0.29mL，3.08mmol)和碳酸铯(1.51g，4.62mmol)反应2小时。TLC监测至反应结束，把反应液缓慢滴加到冰水中搅拌，析出白色固体，用水和石油醚洗3次过滤得到标题化合物4-(2-氯-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7h-嘌呤-9-基)-1-甲基环己烷-1-碳腈92g(白色固体，0.85g，产 率90.26％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.35(s,1H),4.35-4.20(m,1H),3.36(s,3H),2.48-2.31(m,2H),2.06-1.95(m,3H),1.83-1.76(m,1H),1.71-1.57(m,2H),1.48(s,1H),1.36(s,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝306.10[M+1]
第七步：
4-((9-(4-氰基-4-甲基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物92)
4-((9-(4-cyano-4-methylcyclohexyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
将2-氯-9-(3-羟基-3-甲基环己基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮92g(200mg，0.67mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(338mg，2.01mmol)、碳酸铯(473mg，1.34mmol)、Brettphos Pd G3(61mg，0.067mmol)溶解于二氧六环中，氮气保护并换气，在110℃下搅拌4小时。TLC检测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝30/1)得到标题化合物2-氟-4-((9-(3-羟基-3-甲基环己基)-7-甲基-8-氧代8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺化合物92，通过SFC拆分得到化合物92-1(白色固体，12mg，产率4.1％，RT＝3.58min)，化合物92-2(白色固体，22mg，产率7.5％，RT＝4.17min)。(OZ),流动相:CO 2/乙醇＝70/30；柱温:35℃；柱压:80bar；流速:1mL/min；检测器信号通道:215nm@4.8nm；二极管阵列检测器波长:200～400nm。
化合物92-1：
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.60(s,1H),8.18(s,1H),7.65(d,1H),7.57(d,1H),7.47(s,1H),7.38(s,1H),4.27-4.16(m,1H),2.45-2.31(m,5H),2.26(s,3H),1.97-1.89(m,4H),1.69-1.59(m,2H),1.32(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝438.20[M+1]
化合物92-2：
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.32(s,1H),8.19(s,1H),7.91(d,1H),7.53(d,1H),7.44(s,1H),7.27(s,1H),4.28-4.18(m,1H),2.26(s,3H),2.08-2.00(m,2H),1.85-1.77(m,2H),1.60-1.49(m,3H),1.37(s,3H),1.26-1.13(m,4H)。
LC-MS m/z(ESI)＝438.20[M+1]
实施例93
2-氟-4-((9-(反-3-羟基环丁基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物93)
2-fluoro-4-((9-(trans-3-hydroxycyclobutyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000180
Figure PCTCN2021087912-appb-000181
第一步：
2-氯-4-((反-3-羟基环丁基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(93a)
ethyl 2-chloro-4-((trans-3-hydroxycyclobutyl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将反-3-氨基环丁烷-1-醇盐酸盐(3.00g，34.48mmol)溶于乙腈(25mL)中，0℃搅拌下加入碳酸钾(14.30g，103.45mmol)、2,4-二氯-5-嘧啶甲酸乙酯1A(11.43g，51.72mmol)，升温至常温搅拌反应1小时。TLC监测至反应结束，硅藻土过滤后用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝2:1)纯化得标题化合物2-氯-4-(((1r,3r)-3-羟基环丁基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯93a(白色固体，2.9g，产率30.95％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.61(s,1H),8.48(d,1H),5.17-5.11(m,1H),4.61-4.51(m,1H),4.36-4.27(m,3H),2.32-2.20(m,4H),1.32(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝272.00[M+1]
第二步：
4-((反-3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环丁基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸乙酯(93b)
ethyl 4-((trans-3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)cyclobutyl)amino)-2-chloropyri-midine-5-carboxylate
将2-氯-4-((反-3-羟基环丁基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯93a(3.10g，11.41mmol)溶解于二氯甲烷(20mL)中，加入叔丁基二苯基氯硅烷(4.45mL，17.11mmol)、咪唑(1.94g，28.52mmol)，氮气保护并换气，常温搅拌反应2小时。TLC监测至反应结束，硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝10:1)纯化得标题化合物4-(反-3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环丁基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸乙酯93b(无色液体，4.18g，产率64.26％)。
LC-MS m/z(ESI)＝510.20[M+1]
第三步：
4-((反-3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环丁基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸(93c)
4-((trans-3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)cyclobutyl)amino)-2-chloropyrimidine-5-carboxylic acid
将4-((反-3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环丁基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸乙酯93b(4.18g，8.19mmol)溶解于四氢呋喃/水(30mL/15mL)中，加入氢氧化锂一水合物(1.03g，24.58mmol)，常温搅拌反应2小时。TLC监测至反应结束，浓缩蒸发掉四氢呋喃后加入2N HCl调节pH至3-4，加水和乙酸乙酯萃取两次，浓缩有机层用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝20:1)纯化得标题化合物4-((反-3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环丁基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸93c(白色固体，3.87g，产率97.97％)。
LC-MS m/z(ESI)＝482.20[M+1]
第四步：
9-(反-3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环丁基)-2-氯-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(93d)
9-(trans-3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)cyclobutyl)-2-chloro-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将4-((反-3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环丁基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸93c(3.87g，8.03mmol)用N,N-二甲基乙酰胺(38mL)溶解，常温搅拌下加入三乙胺(1.11mL，8.03mmol)和叠氮磷酸二苯酯(1.73mL，8.03mmol)反应2小时后，升温至110℃回流反应2.5小时。TLC监测至反应结束，反应液中加水、乙酸乙酯进行萃取，浓缩有机层用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1:1)纯化得标题化合物9-((1r,3r)-3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环丁基)-2-氯-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮93d(白色固体，1.81g，产率47.06％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.59(s,1H),8.09(s,1H),7.65-7.62(m,2H),7.62-7.60(m,2H),7.47-7.39(m,6H),5.05-4.97(m,1H),4.96-4.89(m,1H),2.98-2.84(m,2H),2.54-2.46(m,2H),1.02(s,9H)。
LC-MS m/z(ESI)＝479.20[M+1]
第五步：
9-(反-3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环丁基)-2-氯-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(93e)
9-(trans-3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)cyclobutyl)-2-chloro-7-methyl-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将9-(反-3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环丁基)-2-氯-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮93d(1.81g，3.78mmol)用N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶解，0℃搅拌下加入硫酸二甲酯(0.36mL，3.78mmol)和碳酸铯(2.47g，7.57mmol)反应2小时。TLC监测至反应结束，把反应液缓慢滴加到冰水中搅拌，加入乙酸乙酯进行萃取，浓缩有机层经硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝3:1)纯化得标题化合物9-(反-3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环丁基)-2-氯-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮93e(白色固体，1.80g，产率96.62％)。
LC-MS m/z(ESI)＝493.20[M+1]
第六步：
4-((9-(反-3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环丁基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(93f)
4-((9-(trans-3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)cyclobutyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
将9-(反-3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环丁基)-2-氯-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮93e(1.00g，2.03mmol)用1,4-二氧六环(20mL)溶解，常温搅拌下加入4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(1.36g，8.11mmol)、碳酸铯(0.99g，3.04mmol)、BrettPhos-G3-Pd(0.18g，0.20mmol)，氮气保护并换气，升温至110℃回流反应4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝80/1)得标题化合物4-((9-(反-3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环丁基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺93f(淡黄色固体，900mg，产率71.03％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.42(s,1H),8.16(s,1H),7.88(d,1H),7.62(dd,4H),7.55(d,1H),7.49-7.40(m,7H),7.24-7.16(m,1H),5.13(p,1H),4.76(tt,1H),3.28(s,3H),3.11-3.02(m,2H),2.47-2.40(m,2H),2.26(s,3H),1.03(s,9H)。
LC-MS m/z(ESI)＝625.30[M+1]
第七步：
2-氟-4-((9-(反-3-羟基环丁基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物93)
2-fluoro-4-((9-(trans-3-hydroxycyclobutyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
将4-((9-(反-3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环丁基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺93f(0.50g，0.80mmol)用4M氯化氢-1,4-二氧六环(10mL)溶解，常温搅拌反应。TLC监测至反应结束，浓缩蒸发掉1,4-二氧六环溶液后加入2N NaOH水溶液调节pH至9-10，有白色固体析出，过滤，滤饼用二氯甲烷/甲醇(v/v＝200:1)洗两次，浓缩得标题化合物2-氟-4-((9-(反-3-羟基环丁基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺化合物93(白色固体，300mg，产率97.02％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.51(s,1H),8.19(s,1H),7.93(d,1H),7.55(d,1H),7.46(s,1H),7.39(s,1H),5.15(d,1H),5.09(q,1H),4.53-4.44(m,1H),3.31(s,3H),3.14-3.05(m,2H),2.30(s,3H),2.27-2.18(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝387.20[M+1]
实施例94
2-氟-4-((9-(顺-3-羟基环丁基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物94)
2-fluoro-4-((9-(cis-3-hydroxycyclobutyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000182
第一步：
2-氯-4-((顺-3-羟基环丁基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(94a)
ethyl 2-chloro-4-((cis-3-hydroxycyclobutyl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将顺-3-氨基环丁烷-1-醇盐酸盐(3.00g，34.48mmol)溶于乙腈(25mL)中，0℃搅拌下加入碳酸钾(14.30g，103.45mmol)、2,4-二氯-5-嘧啶甲酸乙酯1A(11.43g，51.72mmol)，升温至常温搅拌反应1小时，TLC监测至反应结束，硅藻土过滤后用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝2:1)纯化得标题化合物2-氯-4-((顺-3-羟基环丁基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯94a(白色固体，3.3g，产率32.91％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.60(s,1H),8.41(d,1H),4.96(s,1H),4.31(q,2H),4.08-3.97(m,1H),3.94-3.84(m,1H),2.71-2.63(m,2H),1.88-1.80(m,2H),1.33-1.29 (m,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝272.00[M+1]
第二步：
2-氯-4-((顺-3-羟基环丁基)氨基)嘧啶-5-羧酸(94b)
2-chloro-4-((cis-3-hydroxycyclobutyl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2-氯-4-((顺-3-羟基环丁基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯94a(3.30g，12.14mmol)溶解于四氢呋喃/水(30mL/15mL)中，加入氢氧化锂一水合物(1.53g，36.44mmol)常温搅拌反应2小时。TLC监测至反应结束，浓缩蒸发掉四氢呋喃后加入2N HCl调节pH至3-4左右，有白色固体析出，过滤，滤饼用水以及石油醚/乙酸乙酯(v/v＝10/1)洗两次得标题化合物2-氯-4-((顺-3-羟基环丁基)氨基)嘧啶-5-羧酸94b(白色固体，2.44g，产率82.45％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.61(d,1H),8.57(s,1H),4.43-4.20(m,1H),4.07-3.96(m,1H),3.93-3.83(m,1H),2.72-2.63(m,2H),1.87-1.77(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝244.00[M+1]
第三步：
2-氯-9-(顺-3-羟基环丁基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(94c)
2-chloro-9-(cis-3-hydroxycyclobutyl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-4-((顺-3-羟基环丁基)氨基)嘧啶-5-羧酸94b(2.44g，10.01mmol)用N,N-二甲基乙酰胺(20mL)溶解，常温搅拌下加入三乙胺(1.39mL，10.01mmol)和叠氮磷酸二苯酯(2.16mL，10.01mmol)反应2小时后，升温至110℃回流反应2.5小时。TLC监测至反应结束，反应液中加水、二氯甲烷进行萃取，浓缩有机层得标题化合物2-氯-9-(顺-3-羟基环丁基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮94c(白色固体，0.90g，产率37.35％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.59(s,1H),8.12(s,1H),4.31-4.20(m,1H),4.00-3.92(m,1H),3.80-3.54(m,1H),2.83-2.73(m,2H),2.58-2.51(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝241.00[M+1]
第四步：
2-氯-9-(顺-3-羟基环丁基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(94d)
2-chloro-9-(cis-3-hydroxycyclobutyl)-7-methyl-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-(顺-3-羟基环丁基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮94c(0.70g，1.25mmol)用N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶解，0℃搅拌下加入硫酸二甲酯(0.28mL，1.25mmol)和碳酸铯(1.42g，4.36mmol)反应2小时。TLC监测至反应结束，把反应液缓慢滴加到冰水中搅拌，加入乙酸乙酯进行萃取，浓缩有机层经硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1:1)纯化得标题化合物2-氯-9-(顺-3-羟基环丁基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮94d(白色固体，0.32g，产率41.20％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.33(s,1H),5.31(d,1H),4.34-4.23(m,1H),4.02-3.91(m,1H),3.34(s,3H),2.81-2.72(m,2H),2.58-2.51(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝255.00[M+1]
第五步：
2-氟-4-((9-(顺-3-羟基环丁基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物94)
2-fluoro-4-((9-(cis-3-hydroxycyclobutyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
将2-氯-9-(顺-3-羟基环丁基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮94d(0.32g，1.26mmol)用1,4-二氧六环(8mL)溶解，常温搅拌下加入4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(0.53g，3.14mmol)、碳酸铯(0.61g，1.88mmol)、BrettPhos-G3-Pd(0.11g，0.13mmol)，氮 气保护并换气，升温至110℃回流反应4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝40/1)，得标题化合物2-氟-4-((9-(顺-3-羟基环丁基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺化合物94(白色固体，170mg，产率35.01％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.43(s,1H),8.17(s,1H),7.93(d,1H),7.55(d,1H),7.46(s,1H),7.38(s,1H),5.20(d,1H),4.24(tt,1H),4.02-3.90(m,1H),3.31(s,3H),2.79(qd,2H),2.60(qd,2H),2.29(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝387.10[M+1]
实施例95
2-氟-4-((9-(-3-羟基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物95)
2-fluoro-4-((9-(-3-hydroxycyclohexyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000183
第一步：
叔丁基(3-羟基环己基)氨基甲酸酯(95b)
tert-butyl(3-hydroxycyclohexyl)carbamate
将叔丁基(3-氧代环己基)氨基甲酸酯95a(8.20g，38.45mmol)溶于四氢呋喃(40mL)中，0℃搅拌下加入硼氢化钠(4.36g，115.35mmol)反应3小时。TLC监测至反应 结束，向反应液中缓慢加入饱和碳酸钠溶液，常温搅拌3小时，加入乙酸乙酯萃取，浓缩有机层得标题化合物叔丁基(3-羟基环己基)氨基甲酸酯95b(黄色液体，8.00g，产率96.95％)。
LC-MS m/z(ESI)＝116.10[M+1]
第二步：
3-氨基环己烷-1-醇(95c)
3-aminocyclohexan-1-ol hydrochloride
将叔丁基(3-羟基环己基)氨基甲酸酯95b(8.00g，37.16mmol)溶于2M氯化氢-乙酸乙酯(35mL)中，常温搅拌反应4小时。TLC检测至反应结束，浓缩蒸发掉溶剂得标题化合物3-氨基环己烷-1-醇盐酸盐95c(黄色液体，4.00g，产率71.05％)。
LC-MS m/z(ESI)＝116.10[M+1]
第三步：
2-氯-4-((3-羟基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(95d)
ethyl 2-chloro-4-((3-hydroxycyclohexyl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将3-氨基环己烷-1-醇盐酸盐95c(4.00g，26.38mmol)溶于乙腈(30mL)中，0℃搅拌下加入2,4-二氯-5-嘧啶甲酸乙酯1A(8.75g，39.57mmol)、碳酸钾(10.94g，79.14mmol)升温至常温搅拌反应2小时。TLC监测至反应结束，硅藻土过滤后用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝2:1)纯化得标题化合物2-氯-4-((3-羟基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯95d(淡黄色固体，1.40g，产率17.71％)。
LC-MS m/z(ESI)＝300.10[M+1]
第四步：
4-((3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环己基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸乙酯(95e)
ethyl 4-((3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)cyclohexyl)amino)-2-chloropyrimidine-5-carboxylate
将2-氯-4-((3-羟基环己基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯95d(1.10g，3.67mmol)溶解于二氯甲烷(20mL)中，加入叔丁基二苯基氯硅烷(1.43mL，5.50mmol)、咪唑(0.62g，9.17mmol)，氮气保护并换气，常温搅拌反应2小时。TLC监测至反应结束，硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝8:1)纯化得标题化合物4-((3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环己基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸乙酯95e(无色液体，1.90g，产率96.21％)。
LC-MS m/z(ESI)＝538.20[M+1]
第五步：
4-((3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环己基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸(95f)
4-((3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)cyclohexyl)amino)-2-chloropyrimidine-5-carboxylate
将4-((3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环己基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸乙酯95e(1.90g，3.53mmol)溶解于四氢呋喃/水(20mL/20mL)中，加入氢氧化锂一水合物(0.44g，10.59mmol)，常温搅拌反应2小时。TLC监测至反应结束，浓缩蒸发掉四氢呋喃后加入2N HCl调节pH至3-4，加水和乙酸乙酯萃取两次，浓缩有机层得标题化合物4-((3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环己基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸95f(白色固体，1.10g，产率61.08％)。
LC-MS m/z(ESI)＝510.20[M+1]
第六步：
9-(3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)环己基)-2-氯-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(95g)
9-(3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)cyclohexyl)-2-chloro-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将4-((3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环己基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸95f(1.10g，2.16mmol)用N,N-二甲基乙酰胺(23mL)溶解，常温搅拌下加入三乙胺(0.30mL，2.16mmol)和叠氮磷酸二苯酯(0.46mL，2.16mmol)反应2小时后，升温至110℃回流反应2.5小时。TLC监测至反应结束，反应液中加水、乙酸乙酯进行萃取，浓缩有机层用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1:1)纯化得标题化合物9-(3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)环己基)-2-氯-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮95g(白色固体，0.31g，产率28.35％)。
LC-MS m/z(ESI)＝507.20[M+1]
第七步：
9-(3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环己基)-2-氯-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(95h)
9-(3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)cyclohexyl)-2-chloro-7-methyl-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将9-(3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)环己基)-2-氯-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮95g(0.30g，0.59mmol)用N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶解，0℃搅拌下加入硫酸二甲酯(0.06mL，0.59mmol)和碳酸铯(0.39g，1.18mmol)反应1小时。TLC监测至反应结束，把反应液缓慢滴加到冰水中搅拌，加入乙酸乙酯进行萃取，浓缩有机层得标题化合物9-(3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环己基)-2-氯-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮95h(无色液体，0.30g，产率97.31％)。
LC-MS m/z(ESI)＝521.20[M+1]
第八步：
4-((9-(3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(95i)
4-((9-(3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)cyclohexyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
将9-(3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环己基)-2-氯-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮95h(1.00g，1.92mmol)用1,4-二氧六环(15mL)溶解，常温搅拌下加入4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(1.29g，7.68mmol)、碳酸铯(0.94g，2.88mmol)、BrettPhos-G3-Pd(0.17g，0.19mmol)，氮气保护并换气，升温至110℃回流反应4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝100/1)，得标题化合物4-((9-(3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺95i(黄色固体，粗品，707mg，产率56.44％)。
LC-MS m/z(ESI)＝653.40[M+1]
第九步：
2-氟-4-((9-(-3-羟基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物95)
2-fluoro-4-((9-(-3-hydroxycyclohexyl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
将4-((9-(3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺95i(0.65g，0.99mmol)用4M氯化氢-1,4-二氧六环(10mL)溶解，常温搅拌反应。TLC监测至反应结束，浓缩蒸发掉1,4-二氧六环溶液后加入2N NaOH水溶液调节pH至9-10，加入乙酸乙酯萃取，浓缩有机层用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝30/1)，浓缩得标题化合物2-氟-4-((9-(-3-羟基环己基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺化合物95-1(淡黄色固体，100mg，产率24.35％)和化合物95-2(白色固体，47mg，产率11.44％)。
化合物95-1：
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.48(s,1H),8.18(s,1H),7.98(d,1H),7.54(d,1H),7.46(s,1H),7.41-7.35(m,1H),4.79(d,1H),4.22(tt,1H),3.50(tq,1H),3.32(s,3H),2.30(s,3H),2.18(qd,2H),1.95-1.83(m,2H),1.79(dd,1H),1.68(d,1H),1.40-1.26(m,1H),1.24-1.15(m,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝415.20[M+1]
化合物95-2：
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.50(s,1H),8.18(s,1H),7.98(d,1H),7.54(d,1H),7.45(s,1H),7.39(s,1H),4.68(dt,1H),4.63(d,1H),4.15-4.10(m,1H),3.32(s,3H),2.53-2.47(m,1H),2.30(s,3H),2.21(qd,1H),1.74(dt,4H),1.57(d,1H),1.42(t,1H).
LC-MS m/z(ESI)＝415.10[M+1]
实施例96
2-氟-4-((9-(6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物96)
2-fluoro-4-((9-(6-(hydroxymethyl)tetrahydro-2H-pyran-3-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000184
第一步：
叔丁基((3,4-二氢-2H-吡喃-2-基)甲氧基)二苯基硅烷(96b)
tert-butyl((3,4-dihydro-2H-pyran-2-yl)methoxy)diphenylsilane
将(3,4-二氢-2H-吡喃-2-基)甲醇96a(20.0g，175.22mmol)溶解到二氯甲烷(400mL) 中，加入叔丁基二苯基氯硅烷(68.35mL，262.84mmol)、咪唑(29.82g，438.06mmol)，氮气保护并换气，常温搅拌反应过夜，TLC监测至反应结束，用水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩经硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝100:1)纯化得标题化合物叔丁基((3,4-二氢-2H-吡喃-2-基)甲氧基)二苯基硅烷96b(无色液体，42.78g，产率75.00％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ7.71-7.68(m,4H),7.45-7.37(m,6H),6.37-6.35(d,1H),4.68-4.65(m,1H),3.96-3.93(m,1H),3.83-3.77(m,1H),3.71-3.67(m,1H),2.08-2.00(m,1H),1.99-1.92(m,2H),1.74-1.71(m,1H),1.02(s,9H)。
LC-MS m/z(ESI)＝353.20[M+1]
第二步：
6-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-3-醇(96c)
6-(((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)methyl)tetrahydro-2H-pyran-3-ol
将叔丁基((3,4-二氢-2H-吡喃-2-基)甲氧基)二苯基硅烷96b(23.5g，66.7mmol)加入到四氢呋喃(200mL)中，氮气保护下，降温至-78℃后，将硼烷二甲硫醚络合物(100mL，2M，200.00mmol)滴加到反应液中，滴加完毕后，自然升至室温搅拌过夜。向反应体系中缓慢滴加1N氢氧化钠水溶液至无硼烷气体放出后，加入30％双氧水(90mL)至反应液中，反应液在45℃搅拌2小时。向反应体系中加入水和乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩经反相柱层析色谱分离提纯(乙腈/水(v/v)＝5:95)纯化得标题化合物6-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-3-醇96c(无色液体，18.03g，产率73.00％)。
LC-MS m/z(ESI)＝371.20[M+1]
第三步：
2-(6-(((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(96d)
2-(6-(((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)methyl)tetrahydro-2H-pyran-3-yl)isoindoline-1,3-dione
将6-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-3-醇96c(13.0g，35.1mmol)溶于四氢呋喃中(150mL)，常温搅拌下加入邻苯二甲酰亚胺(5.16g，35.1mmol)和三苯基膦(13.8g，52.7mmol)，再缓慢滴加偶氮二甲酸二异丙酯(10.7g，52.7mmol)，升温至70℃回流反应1小时。TLC监测至反应结束，反应液浓缩经硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝100:1)纯化得标题2-(6-(((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮96d(白色固体，9.0g，产率51.34％)。
LC-MS m/z(ESI)＝500.20[M+1]
第四步：
6-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基四氢-2H-吡喃-3-胺(96e)
6-(((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)methyl)tetrahydro-2H-pyran-3-amine
将2-(6-(((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮96d(9.0g，18.0mmol)溶于甲醇(50mL)中，再加入水合联氨(1.8g，36.0mmol)，反应液回流反应2小时。TLC监测至反应完成，加入二氯甲烷(50mL)大量固体析出,过滤后旋干，得到的粘稠液固体再用二氯甲烷洗涤两次后过滤，合并有机相，减压浓缩得标题化合物6-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基四氢-2H-吡喃-3-胺96e(无色液体，6.3g，产率94.10％)。
LC-MS m/z(ESI)＝370.20[M+1]
第五步：
4-((6-(((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸乙酯(96f)
ethyl 4-((6-(((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)methyl)tetrahydro-2H-pyran-3-yl)amino)-2-chloropyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯-5-嘧啶甲酸乙酯1A(6.94g，31.40mmol)溶于乙腈(25mL)中，常温搅拌下加入碳酸钾(8.68g，62.80mmol)，再缓慢滴加6-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基四氢-2H-吡喃-3-胺96e(7.40g，20.93mmol)的乙腈溶液(15mL)搅拌反应2小时。TLC监测至反应结束，硅藻土过滤后经硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝20:1)纯化得标题化合物4-((6-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸乙酯96f(淡黄色固体，5.20g，产率46.86％)。
LC-MS m/z(ESI)＝554.30[M+1]
第六步：
4-((6-(((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸(96g)
4-((6-(((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)methyl)tetrahydro-2H-pyran-3-yl)amino)-2-chloropyrimidine-5-carboxylate
将4-((6-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸乙酯96f(5.20g，9.383mmol)溶解于四氢呋喃/水(30mL/15mL)中，加入氢氧化锂一水合物(1.18g，28.15mmol)，常温搅拌反应3小时后升温至50℃反应2小时。TLC监测至反应结束，浓缩蒸发掉四氢呋喃后加入2N HCl调节pH至3-4，加水和乙酸乙酯萃取两次，浓缩有机层经硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝4:1)纯化得标题化合物4-((6-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸96g(白色固体，2.57g，产率52.06％)。
LC-MS m/z(ESI)＝526.20[M+1]
第七步：
9-(6-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)-2-氯-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(96h)
9-(6-(((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)methyl)tetrahydro-2H-pyran-3-yl)-2-chloro-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将4-((6-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氨基)-2-氯嘧啶-5-羧酸96g(2.57g，4.88mmol)用N,N-二甲基乙酰胺(24mL)溶解，常温搅拌下加入三乙胺(0.68mL，4.88mmol)和叠氮磷酸二苯酯(1.05mL，4.88mmol)反应2小时后，升温至110℃回流反应2.5小时。TLC监测至反应结束，反应液中加水、乙酸乙酯进行萃取，浓缩有机层用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1:1)纯化得标题化合物9-(6-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)-2-氯-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮96h(淡粉色固体，1.60g，产率62.66％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.65(s,1H),8.12(s,1H),7.67-7.62(m,4H),7.46-7.39(m,6H),4.32-4.24(m,1H),4.13-4.06(m,1H),4.00-3.93(m,1H),3.91-3.81(m,2H),3.56(dd,1H),2.53-2.47(m,1H),2.07-1.98(m,1H),1.85-1.72(m,2H),1.01(s,9H。
LC-MS m/z(ESI)＝523.20[M+1]
第八步：
9-(6-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)-2-氯-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(96i)
9-(6-(((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)methyl)tetrahydro-2H-pyran-3-yl)-2-chloro-7-methyl- 7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将9-(6-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)-2-氯-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮96h(1.60g，3.06mmol)用N,N-二甲基甲酰胺(15mL)溶解，常温搅拌下加入硫酸二甲酯(0.29mL，3.06mmol)和碳酸铯(2.00g，6.13mmol)反应1小时。TLC监测至反应结束，加入水和乙酸乙酯进行萃取，浓缩有机层用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝3:2)纯化得标题化合物9-(6-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)-2-氯-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮96i(淡粉色液体，1.6g，产率97.21％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.35(s,1H),7.67-7.62(m,4H),7.49-7.39(m,6H),4.36-4.28(m,1H),4.14-4.07(m,1H),4.00-3.93(m,1H),3.90-3.81(m,2H),3.57(dd,1H),3.35(s,3H),2.55-2.44(m,1H),2.09-1.98(m,1H),1.87-1.73(m,2H),1.01(s,9H)。
LC-MS m/z(ESI)＝537.30[M+1]
第九步：
4-((9-(6-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(96j)
4-((9-(6-(((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)methyl)tetrahydro-2H-pyran-3-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
将9-(6-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)-2-氯-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮96i(1.00g，1.86mmol)用1,4-二氧六环(20mL)溶解，常温搅拌下加入4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(1.25g，7.45mmol)、碳酸铯(0.91g，2.79mmol)、BrettPhos-G3-Pd(0.17g，0.19mmol)，氮气保护并换气，升温至110℃回流反应4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝80/1)，得标题化合物4-((9-(6-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺96j(黄色固体，750mg，产率60.23％)。
LC-MS m/z(ESI)＝669.40[M+1]
第十步：
2-氟-4-((9-(6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物96)
2-fluoro-4-((9-(6-(hydroxymethyl)tetrahydro-2H-pyran-3-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
将4-((9-(6-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺96j(0.50g，0.75mmol)用4M氯化氢-1,4-二氧六环(8mL)溶解，常温搅拌反应。TLC监测至反应结束，浓缩蒸发掉1,4-二氧六环溶液后加入2N NaOH水溶液调节pH至9-10，加入乙酸乙酯萃取，浓缩有机层用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝20/1)，浓缩得标题化合物2-氟-4-((9-(6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺化合物96(白色固体，170mg，产率52.83％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.55(s,1H),8.18(s,1H),7.76(d,1H),7.55(d,1H),7.49(s,1H),7.39(s,1H),4.63-4.58(m,1H),4.30(tt,1H),4.15(t,1H),3.71-3.64(m,2H),3.56-3.45(m,2H),3.32(s,3H),2.65-2.35(m,1H),2.28(s,3H),1.86(d,1H),1.79-1.67(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝431.20[M+1]
实施例97
2-氟-4-((9-(6-(羟甲基)螺环[3.3]庚烷-2-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨 基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物97)
2-fluoro-4-((9-(6-(hydroxymethyl)spiro[3.3]heptan-2-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000185
第一步：
(6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基)甲醇(97b)
(6-aminospiro[3.3]heptan-2-yl)methanol
将6-氨基螺[3.3]庚烷-2-羧酸甲酯97a(2.0g,11.8mmol)溶于四氢呋喃(15mL)中，混合液降温至0℃，缓慢滴加1N的四氢铝锂溶液(23.6mL，1mol/L的四氢呋喃溶液)，滴加完成后，缓慢升温至室温搅拌2小时。TLC监测至反应结束，加入甲醇淬灭反应，减压浓缩蒸发掉溶剂，加入乙腈(50mL)打浆过滤，滤液旋干得到标题化合物(6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基)甲醇97b(白色固体，1.3g，产率77.8％)。
LC-MS m/z(ESI)＝142.10[M+1]
第二步：
2-氯-4-((6-(羟甲基)螺[3.3]庚烷-2-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(97c)
ethyl 2-chloro-4-((6-(hydroxymethyl)spiro[3.3]heptan-2-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(2.03g,9.19mmol)、(6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基)甲醇97b(1.3g,9.19mmol)、碳酸钾(1.27g,9.19mmol)溶于乙腈(25mL)中，室温搅拌反应16小时。TLC监测至反应结束，滤液浓缩经硅胶柱色谱分离提纯(石油醚：乙酸乙酯(v/v)＝1:1)纯化得到标题化合物2-氯-4-((6-(羟甲基)螺[3.3]庚烷-2-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯97c(白色固体，1.56g，产率52.2％)。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.65(s,1H),8.54(d,1H),4.59-4.48(m,1H), 4.35(q,2H),3.59(dd,2H),2.66-2.58(m,1H),2.51-2.38(m,2H),2.27-2.19(m,1H),2.11-2.04(m,2H),2.03-1.91(m,2H),1.91-1.85(m,1H),1.84-1.76(m,1H),1.39(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝326.10[M+1]
第三步：
2-氯-4-((6-(羟甲基)螺[3.3]庚烷-2-基)氨基)嘧啶-5-羧酸(97d)
2-chloro-4-((6-(hydroxymethyl)spiro[3.3]heptan-2-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylic acid
将2-氯-4-((6-(羟甲基)螺[3.3]庚烷-2-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯97c(1.07g,3.28mmol)溶解于四氢呋喃/水(10mL/10mL)中，加入氢氧化锂一水合物(0.41g,9.85mmol)，常温搅拌反应1小时。TLC监测至反应结束，浓缩蒸发掉四氢呋喃后加入2N HCl调节pH至3-4左右，有白色固体析出，过滤，滤饼用水以及石油醚/乙酸乙酯(v/v＝10/1)洗两次得标题化合物2-氯-4-((6-(羟甲基)螺[3.3]庚烷-2-基)氨基)嘧啶-5-羧酸97d(白色固体，918mg，产率93.88％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.69(s,1H),9.67(d,1H),8.35(s,1H),4.42-4.31(m,1H),3.30(s,1H),2.55-2.46(m,3H),2.40-2.31(m,1H),2.28-2.19(m,1H),2.10-2.00(m,2H),2.00-1.91(m,2H),1.83-1.69(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝298.10[M+1]
第四步：
2-氯-9-(6-(羟甲基)螺[3.3]庚烷-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(97e)
2-chloro-9-(6-(hydroxymethyl)spiro[3.3]heptan-2-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-4-((6-(羟甲基)螺[3.3]庚烷-2-基)氨基)嘧啶-5-羧酸97d(0.91g,3.06mmol)用N,N-二甲基乙酰胺(12mL)溶解，常温搅拌下加入三乙胺(0.42mL,3.06mmol)和叠氮磷酸二苯酯(0.66mL,10.01mmol)反应2小时后，升温至110℃回流反应2.5小时。TLC监测至反应结束，反应液中加水和乙酸乙酯进行萃取，浓缩有机层经硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝20:1)纯化得标题化合物2-氯-9-(6-(羟甲基)螺[3.3]庚烷-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮97e(白色固体，516mg，产率57.28％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.60(s,1H),8.11(s,1H),4.68-4.57(m,1H),4.46(t,1H),3.37-3.32(m,2H),2.95-2.81(m,2H),2.42-2.35(m,1H),2.32-2.19(m,2H),2.19-2.12(m,1H),2.06-1.98(m,1H),1.89-1.77(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝295.10[M+1]
第五步：
2-氯-9-(6-(羟甲基)螺[3.3]庚烷-2-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(97f)
2-chloro-9-(6-(hydroxymethyl)spiro[3.3]heptan-2-yl)-7-methyl-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-(6-(羟甲基)螺[3.3]庚烷-2-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮97e(516mg,1.75mmol)用N,N-二甲基甲酰胺(6mL)溶解，0℃搅拌下加入硫酸二甲酯(0.17mL,1.75mmol)和碳酸铯(1.14g,3.50mmol)反应1小时。TLC监测至反应结束，把反应液缓慢滴加到冰水中搅拌，加入乙酸乙酯进行萃取，浓缩有机层得标题化合物2-氯-9-(6-(羟甲基)螺[3.3]庚烷-2-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮97f(白色固体，470mg，产率86.95％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.33(s,1H),4.71-4.60(m,1H),4.10-3.96(m,2H),3.35(s,1H),3.33(s,3H),2.93-2.81(m,2H),2.44-2.36(m,1H),2.32-2.21(m,2H),2.20-2.13(m,1H),2.07-1.99(m,1H),1.89-1.78(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝309.10[M+1]
第六步：
2-氟-4-((9-(6-(羟甲基)螺环[3.3]庚烷-2-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物97)
2-fluoro-4-((9-(6-(hydroxymethyl)spiro[3.3]heptan-2-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
将2-氯-9-(6-(羟甲基)螺[3.3]庚烷-2-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮97f(100mg,0.32mmol)用1,4-二氧六环(5mL)溶解，常温搅拌下加入4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(218mg,1.30mmol)、碳酸铯(158mg,0.49mmol)、BrettPhos-G3-Pd(29mg,0.032mmol)，氮气保护并换气，随后升温至110℃回流反应4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离纯化(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝20:1)得标题化合物2-氟-4-((9-(6-(羟甲基)螺环[3.3]庚烷-2-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺化合物97(白色固体，50mg，产率35.05％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.66(s,1H),8.18(s,1H),7.83(d,1H),7.56(d,1H),7.49(s,1H),7.40(s,1H),4.70-4.60(m,1H),3.32(s,1H),3.30(s,3H),2.96-2.84(m,2H),2.38-2.31(m,1H),2.30-2.23(m,4H),2.23-2.18(m,1H),2.17-2.11(m,1H),1.98-1.91(m,1H),1.88-1.81(m,1H),1.77-1.71(m,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝441.20[M+1]
实施例98
4-[(9-(5-羟基-八氢戊烯-2-基)-7-甲基-8-氧代8,9-二氢-7氢-嘌呤-2-基)氨基]-3-甲基苄腈(化合物98)
4-[(9-(5-hydroxy-octahydropentalen-2-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino]-3-methylbenzonitrile
Figure PCTCN2021087912-appb-000186
第一步：
(5Z)-5-(羟基亚氨基)-八氢戊二烯-2-酮(98b)
(5Z)-5-(hydroxyimino)-octahydropentalen-2-one
将盐酸羟胺(9.05g，130.28mmol)和碳酸钾(18.01，130.28mmol)溶于100mL水中，并将此溶液加入到八氢戊烯-2,5-二酮98a(20g，144.76mmol)的乙醇(200mL)溶液中，将反应液在90℃回流1小时。TLC监测至反应结束，浓缩除去乙醇，随后加入100mL水稀释后用乙酸乙酯萃取，合并有机相后，干燥，过滤浓缩得粗品，经柱分析纯化(二 氯甲烷:甲醇＝100:1)得标题化合物(5Z)-5-(羟基亚氨基)-八氢戊二烯-2-酮98b(白色固体，7g，产率31.57％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.35(s,1H),2.79-2.69(m,2H),2.66-2.54(m,2H),2.42-2.34(m,2H),2.23-2.13(m,2H),2.05-1.99(m,1H),1.96-1.90(m,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝154.10[M+1]
第二步：
5-氨基八氢戊烯-2-醇(98c)
5-amino-octahydropentalen-2-ol
将(5Z)-5-(羟基亚氨基)-八氢戊二烯-2-酮98b(4g，26.11mmol)溶于四氢呋喃(100mL)，加入氯化钴(12.42g，52.22mmol)，将溶液降温至零下30℃，分批次加入硼氢化钠(4.94g，130.55mmol)，全程保持温度在零下25℃至零下30℃反应1小时。TLC监测至反应结束，向反应液中加入饱和食盐水至无气泡产生，恢复至室温继续搅拌0.5h后过滤，将滤液浓缩至干得粗品5-氨基八氢戊烯-2-醇98c(油状固体，1g，产率27.12％)。
LC-MS m/z(ESI)＝142.10[M+1]
第三步：
2-氯-4-[(5-羟基-八氢戊烯-2-基)氨基]嘧啶-5-羧酸乙酯(98d)
ethyl 2-chloro-4-[(5-hydroxy-octahydropentalen-2-yl)amino]pyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(2.0g，9.05mmol)和5-氨基八氢戊烯-2-醇98c(1g，7.08mmol)溶于乙腈(40mL)中，冰浴下加入碳酸钾(2.5g，18.10mmol)，反应液室温反应12小时。TLC监测至反应结束，向反应液中加入50mL水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，干燥浓缩后经柱层析分离(石油醚:酸乙酯＝4:1)得标题化合物2-氯-4-[(5-羟基-八氢戊烯-2-基)氨基]嘧啶-5-羧酸乙酯98d(黄色固体，1g，产率33.92％)。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.63(s,1H),4.48-4.41(m,1H),4.33(q,2H),2.58-2.46(m,2H),2.42-2.36(m,2H),2.11-2.05(m,2H),1.57-1.48(m,4H),1.37(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝326.10[M+1]
第四步：
2-氯-4-[(5-羟基-八氢戊烯-2-基)氨基]嘧啶-5-羧酸(98e)
2-chloro-4-[(5-hydroxy-octahydropentalen-2-yl)amino]pyrimidine-5-carboxylic acid
将2-氯-4-[(5-羟基-八氢戊烯-2-基)氨基]嘧啶-5-羧酸乙酯98d(1g，3.07mmol)溶解于四氢呋喃10mL，水10mL中，加入氢氧化锂(0.15g，6.14mmol)，室温搅拌1小时。TLC监测反应完全，浓缩除去四氢呋喃，用6N盐酸调pH为5，有固体析出，过滤，滤饼用石油醚洗两次，收集固体得到标题化合物2-氯-4-[(5-羟基-八氢戊烯-2-基)氨基]嘧啶-5-羧酸98e(白色固体，0.57g，产率62.36％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.77(s,1H),8.59(d,1H),8.56(s,1H),4.55(s,1H),4.29-4.22(m,1H),4.12-4.10(m,1H),2.41-2.37(m,2H),2.28-2.22(m,2H),1.89-1.83(m,2H),1.53-1.42(m,4H)。
LC-MS m/z(ESI)＝298.10[M+1]
第五步：
2-氯-9-(5-羟基-八氢戊烯-2-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-8-酮(98f)
2-chloro-9-(5-hydroxy-octahydropentalen-2-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-8-one
将2-氯-4-[(5-羟基-八氢戊烯-2-基)氨基]嘧啶-5-羧酸98e(0.57g，1.91mmol)溶于N,N-二甲基乙酰胺(20mL)中，在冰浴下加入偶氮磷酸二苯酯(0.74g，1.91mmol)和三乙胺(0.19g，1.91mmol)，将反应液室温搅拌1小时后升温至90℃继续反应3小时。 TLC监测反应完全，将反应液自然冷却至室温，加入40mL水稀释反应液后用乙酸乙酯萃取，合并有机相，干燥浓缩得标题化合物2-氯-9-(5-羟基-八氢戊烯-2-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-8-酮98f(黄色固体，0.5g，产率54.65％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.11(s,1H),4.67(d,1H),4.58-4.49(m,1H),4.05(m,1H),2.40-2.24(m,4H),2.06-2.01(m,4H),1.39-1.33(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝295.10[M+1]
第六步：
2-氯-9-(5-羟基-八氢戊烯-2-基)-7-甲基-8,9-二氢-7H-嘌呤-8-酮(98g)
2-chloro-9-(5-hydroxy-octahydropentalen-2-yl)-7-methyl-8,9-dihydro-7H-purin-8-one
将2-氯-9-(5-羟基-八氢戊烯-2-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-8-酮98f(0.3g，1.02mmol)溶于二甲基甲酰胺(10mL)中，在0℃下加入碳酸铯(0.66g，2.04mmol)和硫酸二甲酯(0.13g，1.02mmol)室温反应1小时。TLC监测反应完全，加入20mL水，析出固体，过滤干燥得到标题化合物2-氯-9-(5-羟基-八氢戊烯-2-基)-7-甲基-8,9-二氢-7氢-嘌呤-8-酮98g(浅黄色固体，0.14g，产率44.45％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.34(s,1H),4.63(d,1H),4.60-4.52(m,1H),4.10-4.01(m,1H),3.34(s,3H),2.40-2.24(m,4H),2.07-1.99(m,4H),1.40-1.33(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝309.10[M+1]
第七步：
4-[(9-(5-羟基-八氢戊烯-2-基)-7-甲基-8-氧代8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基]-3-甲基苄腈(化合物98)
4-[(9-(5-hydroxy-octahydropentalen-2-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino]-3-methylbenzonitrile
将4-氨基-3-甲基苄腈5a(50mg，0.38mmol)、2-氯-9-(5-羟基-八氢戊烯-2-基)-7-甲基-8,9-二氢-7氢-嘌呤-8-酮98g(117mg，0.38mmol)、碳酸铯(248mg，0.76mmol)、[(2-二-环己基膦基-3,6-二甲氧基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯基)-2-(2′-氨基-1,1′-联苯基)]甲磺酸钯(II)甲磺酸酯(34.45mg，0.04mmol)溶解于二氧六环(5mL)，氮气保护并换气，在100℃搅拌4小时。TLC监测反应结束，将反应液倒入冰水中，搜集固体，将固体用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝100/1)，得到标题化合物4-[(9-(5-羟基-八氢戊烯-2-基)-7-甲基-8-氧代8,9-二氢-7氢-嘌呤-2-基)氨基]-3-甲基苄腈化合物98(白色固体，60mg，产率38.12％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.50(s,1H),8.27(d,1H),8.20(s,1H),7.73(dd,1H),7.62(d,1H),4.82(d,1H),4.63-4.55(m,1H),4.13-4.04(m,1H),3.34(s,3H),2.33-2.29(m,7H),2.09-2.02(m,4H),1.34-1.30(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝405.20[M+1]
实施例99
2-氟-4-((9-((3aS,6aS)-六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物99)
2-fluoro-4-((9-((3aS,6aS)-hexahydro-1H-cyclopenta[c]furan-5-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000187
第一步：
4-(苄氨基)环戊烷-1,2-二羧酸二甲酯(99b)
dimethyl 4-(benzylamino)cyclopentane-1,2-dicarboxylate
将4-氧代环戊烷-1,2-二羧酸二甲酯99a(5g，24.98mmol)溶解于甲醇(50mL)中，加入卞氨(5.4g，49.96mmol)，滴加几滴冰乙酸40℃下反应0.5小时，监测中间体生成后，低温下加入三乙酰基硼氢化钠(15.88g，74.94mmol)继续反应1小时。TLC监测至反应结束，过滤浓缩后，用水和二氯甲烷萃取，无水硫酸钠干燥有机相，减压浓缩后用柱层析纯化得到标题化合物4-(苄氨基)环戊烷-1,2-二羧酸二甲酯99b(白色固体，6.0g，产率82.44％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.24-7.15(m,5H),3.68(s,2H),3.62(s,6H),3.37-3.27(m,2H),3.13-3.06(m,1H),2.20(dd，1H),1.97(t,1H),1.86(dd,1H),1.77-1.70(m,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝292.10[M+1]
第二步：
(4-(苄氨基)环戊烷-1,2-二基)二甲醇(99c)
(4-(benzylamino)cyclopentane-1,2-diyl)dimethanol
将4-(苄氨基)环戊烷-1,2-二羧酸二甲酯99b(2.0g，6.86mmol)溶于四氢呋喃(40mL)中，在0℃下分批加入四氢铝锂(0.63g，17.15mmol)。TLC监测至反应完全，用10％氢氧化钠水溶液淬灭铝锂氢后，过滤后滤液直接浓缩得标题化合物(4-(苄氨基)环戊烷-1,2-二基)二甲醇99c(白色固体，1.1g，产率68.32％)。
LC-MS m/z(ESI)＝236.20[M+1]
第三步：
叔丁基苄基(3,4-双(羟甲基)环戊基)氨基甲酸酯(99d)
tert-butyl benzyl(3,4-bis(hydroxymethyl)cyclopentyl)carbamate
将(4-(苄氨基)环戊烷-1,2-二基)二甲醇99c(8g，34.0mmol)溶于甲醇(50mL)，然后加入三乙胺(3.64g，35.97mmol),再加入二碳酸二叔丁酯(8.16g，37.40mmol)反应1小时。TLC监测至反应结束，浓缩残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝50:1)得到标题化合物叔丁基苄基叔丁基苄基(3,4-双(羟甲基)环戊基)氨基甲酸酯99d(白色固体，7.18g，产率63％)。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ7.32-7.16(m,5H),4.37(s,2H),3.72-3.61(m,1H),3.38-3.32(m,2H),1.90-1.75(m,4H),1.47-1.44(m,3H),1.38(s,9H)。
LC-MS m/z(ESI)＝236.10[M+1]
第四步：
叔丁基苄基(六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-基)氨基甲酸酯(99e)
tert-butyl benzyl(hexahydro-1H-cyclopenta[c]furan-5-yl)carbamate
将叔丁基苄基叔丁基苄基(3,4-双(羟甲基)环戊基)氨基甲酸酯99d(8g，23.85mmol)溶于四氢呋喃(100mL)中，氮气保护下在-20℃滴加正丁基锂(10.7mL，26.75mmol，2.5mol/L),搅拌1小时，再滴加对甲苯磺酰氯(5g，26.23mmol)的四氢呋喃(10mL)溶液，搅拌0.5小时，再次滴加正丁基锂(10.7mL，26.75mmol，2.5mol/L)搅拌10min升温回流反应48小时。TLC监测反应完全，用冰水淬灭反应，乙酸乙酯萃取三次，无水硫酸钠干燥，浓缩后经硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝5:1)得到标题化合物叔丁基苄基(六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-基)氨基甲酸酯99e(白色固体，4.0g，产率52.84％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.32-7.17(m,5H),4.37(s,2H),3.73-3.63(m,2H),3.40-3.34(m,2H),2.06-1.25(m,16H)。
LC-MS m/z(ESI)＝262.10[M+1]
第五步：
N-苄基六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-胺(99f)
N-benzylhexahydro-1H-cyclopenta[c]furan-5-amine
先将叔丁基苄基叔丁基苄基(六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-基)氨基甲酸酯99e(4.0g，12.60mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中，加入二氯甲烷/三氟乙酸(v/v)＝1/1的混合溶剂，室温搅拌1.5小时。TLC监控至反应完全，加入水淬灭反应，水相用碳酸氢钠调pH值至弱碱性，再用二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，浓缩得标题化合物N-苄基六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-胺99f(白色固体，1.1g，产率40.1％)。
LC-MS m/z(ESI)＝218.10[M+1]
第六步：
六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-胺(99g)
hexahydro-1H-cyclopenta[c]furan-5-amine
将N-苄基六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-胺99f(1.2g，5.52mmol)用乙醇(35mL)溶解，然后滴加2滴冰乙酸，加入氢氧化钯(1.2g，8.54mmol)，氢气置换，然后室温搅拌5小时。TLC监控至反应完全，浓缩后经柱层析分离纯化得标题化合物六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-胺99g(白色固体，613mg，产率87.6％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.01-4.06(m,1H),3.72(t,2H),3.13-3.48(m,4H),2.44-2.48(m,1H),1.96-2.17(m,2H),1.97-1.72(m,1H),1.23-1.37(m,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝128.10[M+1]
第七步：
2-氯-4-((六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(99h)
ethyl 2-chloro-4-((hexahydro-1H-cyclopenta[c]furan-5-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(435mg，1.97mmol)、碳酸钾(816.8mg，5.91mmol)溶解于乙腈(20mL)，在0℃下加入六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-胺99g(300mg，2.36mmol)后升至室温搅拌反应20小时。TLC监测至反应完全，加水和乙酸乙酯萃取三次，有机层用饱和食盐水洗一次，用无水硫酸钠干燥，浓缩后残留物用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝10:1)得到标题化合物2-氯-4-((六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯99h(白色固体，413mg，产率67.7％)。
LC-MS m/z(ESI)＝312.10[M+1]
第八步：
2-氯-4-((六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-基)氨基)嘧啶-5-羧酸(99i)
2-chloro-4-((hexahydro-1H-cyclopenta[c]furan-5-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylic acid
将2-氯-4-((六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯99h(680mg，2.18mmol)溶解于四氢呋喃5mL，水5mL中，加入氢氧化锂(104.38mg，4.36mmol)，室温搅拌1小时。TLC监测至反应完全，旋干四氢呋喃，调pH为4左右，有白色固体析出，过滤，滤饼用石油醚/乙酸乙酯(v/v＝10/1)洗两次，浓缩得到标题化合物2-氯-4-((六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-基)氨基)嘧啶-5-羧酸99i(白色固体，520mg，产率67.26％)。
LC-MS m/z(ESI)＝284.10[M+1]
第九步：
2-氯-9-(六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(99j)
2-chloro-9-(hexahydro-1H-cyclopenta[c]furan-5-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-4-((六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-基)氨基)嘧啶-5-羧酸99i(0.5g，1.76mmol)溶于N,N-二甲基乙酰胺(20mL)中，冰浴加入偶氮磷酸二苯酯(0.68g，1.76mmol)和三乙胺(0.18g，1.76mmol)将反应液室温搅拌1小时后升温至90℃继续反应3小时。TLC监测至反应完全，将反应液自然冷却至室温，加入40mL水和乙酸乙酯萃取，合并有机相，干燥浓缩得标题化合物2-氯-9-(六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮99j(黄色固体，0.45g，产率54.65％)。
LC-MS m/z(ESI)＝281.00[M+1]
第十步：
2-氯-9-(六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(99k)
2-chloro-9-(hexahydro-1H-cyclopenta[c]furan-5-yl)-7-methyl-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-(六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮99j(0.45g，0.96mmol)溶于二甲基甲酰胺(10mL)中，在0℃下加入碳酸铯(0.47g，1.44mmol)和硫酸二甲酯(0.11mL，1.15mmol)，室温反应2小时。TLC监测至反应完全，随后加入20mL水，析出固体，过滤，干燥得到标题化合物2-氯-9-(六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮99k(浅黄色固体，0.14g，产率49.48％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.35(s,1H),5.49-5.21(m,1H),3.82-3.77(m,2H),3.37(s,3H),3.35-3.27(m,2H),3.23-3.18(m,2H),2.96-2.84(m,1H),2.15-2.03(m,2H),1.94-1.85(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝295.10[M+1]
第十一步：
2-氟-4-((9-((3aS,6aS)-六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物99)
2-fluoro-4-((9-((3aS,6aS)-hexahydro-1H-cyclopenta[c]furan-5-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
将2-氯-9-((3aS,6aS)-六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮99k(100mg，0.34mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(114mg，0.68mmol)、碳酸铯(221mg，0.68mmol)、甲磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2'，4'，6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-氨基-1,1'-联苯基-2-基)钯(II)(30mg，0.03mmol)溶于1,4-二氧六环(10mL)中，氮气保护换气，在110℃搅拌4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝10/1)得到标题化合物2-氟-4-((9-((3aS,6aS)-六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺化合物99(白色固体，8mg，产率6％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.60(s,1H),8.18(s,1H),7.64(d,1H),7.54(d,1H),7.48(s,1H),7.36(s,1H),3.74(t,1H),3.68(t,1H),3.32(s,3H),3.22-3.13(m,3H),2.81-2.71(m,1H),2.25(s,3H),2.03-1.99(m,2H),1.92-1.84(m,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝427.2[M+1]
实施例100
4-((9-(六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-基]-7-甲基-8-氧代8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-3-甲基苄腈(化合物100)
4-((9-(hexahydro-1H-cyclopenta[c]furan-5-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-3-methylbenzonitrile
Figure PCTCN2021087912-appb-000188
将4-氨基-3-甲基苄腈5a(50mg，0.38mmol)、2-氯-9-(六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮99k(112mg，0.38mmol)、碳酸铯(247.62mg，0.76mmol)、[(2-二-环己基膦基-3,6-二甲氧基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯基)-2-(2′-氨基-1,1′-联苯基)]甲磺酸钯(II)甲磺酸酯(34.45mg，0.04mmol)溶解于二氧六环(10mL)中，氮气保护并换气，在100℃搅拌4小时。TLC监测反应结束，将反应
液倒入冰水中收集固体，将固体用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝100/1)得到标题化合物4-(9-(六氢-1H-环戊[c]呋喃-5-基]-7-甲基-8-氧代--7-甲基-8-氧代氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-3-甲基苄腈化合物100(浅黄色固体，45mg，产率30.09％)。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.43(d,1H),7.93(s,1H),7.53(dd,1H),7.48(d,1H),7.05(s,1H),5.47-5.40(m,1H),3.96(q,2H),3.48(dd,1H),3.43(s,3H),3.37(dd,1H),5.38-5.31(m,1H),2.38(s,3H),2.92-2.21(m,5H)。
LC-MS m/z(ESI)＝391.20[M+1]
实施例101
4-((9-(1,1-二氧杂环四氢-2H-硫代吡兰-4-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-3-甲基苯甲腈(化合物101)
4-((9-(1,1-dioxidotetrahydro-2H-thiopyran-4-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-3-methylbenzonitrile
Figure PCTCN2021087912-appb-000189
第一步：
2-氯-4-((1,1-二氧基四氢-2H-硫代吡喃-4-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(101a)
ethyl-2-chloro-4-((1,1-dioxidotetrahydro-2H-thiopyran-4-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(8g，36mmol)、碳酸钾(9.9g，72mmol)溶解于乙腈(30mL)，在0℃下加入4-氨基四氢-2H-硫代吡喃1,1-二氧化物(6.6g，36mmol)后升至室温搅拌20小时。TLC监测至反应完全，向反应液中加入30mL水，有固体析出，过滤干燥得到标题化合物2-氯-4-((1,1-二氧基四氢-2H-硫代吡喃-4-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯101a(褐色固体，6.3g，产率76％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.64(s,1H),8.33(d,1H),4.34-4.30(m,3H),3.42-3.35(m,1H),3.08(d,1H),2.24-2.06(m,4H),1.31(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝334.20[M+1]
第二步：
2-氯-4-((1,1-二氧基四氢-2H-硫代吡喃-4-基)氨基)嘧啶-5-羧酸(101b)
2-chloro-4-((1,1-dioxidotetrahydro-2H-thiopyran-4-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylic acid
将2-氯-4-((1,1-二氧基四氢-2H-硫代吡喃-4-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯101a(3g，9mmol)溶解于四氢呋喃10mL，水5mL中，加入氢氧化锂(756mg，18mmol)于室温搅拌反应1小时。TLC监测至反应完全，旋干四氢呋喃，调pH至4左右，析出褐色固体，过滤，滤饼用石油醚/乙酸乙酯(v/v＝10/1)洗两次，浓缩干燥得到标题化合物2- 氯-4-((1,1-二氧基四氢-2H-硫代吡喃-4-基)氨基)嘧啶-5-羧酸101b(白色固体，2.3g，产率84％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ13.80(s,1H),8.60(s,1H),8.57(d,1H),4.37-4.29(m,1H),3.50-3.27(m,2H),3.07(d,2H),2.25-2.21(m,2H),2.08-1.98(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝306.20[M+1]
第三步：
2-氯-9-(1,1-二氧四氢-2H-硫吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(101c)
2-chloro-9-(1,1-dioxidotetrahydro-2H-thiopyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-4-((1,1-二氧基四氢-2H-硫代吡喃-4-基)氨基)嘧啶-5-羧酸101b(2.3g，7.5mmol)溶解于二甲基乙酰胺(10mL)中，加入三乙胺(757mg，7.5mmol)、叠氮磷酸二苯酯(2g，7.5mmol)，随后逐步升温至120℃搅拌1.5小时。TLC监测至反应完全，将反应液倒入30mL水中游褐色固体析出，过滤得到标题化合物2-氯-9-(1,1-二氧四氢-2H-硫吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮101c(白色固体，1.7g，产率58％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ11.67(s,1H),8.14(s,1H),4.69-4.61(m,1H),3.55-3.45(m,2H),3.13(d,2H),2.94-2.77(m,2H),2.14-2.02(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝303.20[M+1]
第四步：
2-氯-9-(1,1-二氧四氢-2H-硫吡喃-4-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(101d)
2-chloro-9-(1,1-dioxidotetrahydro-2H-thiopyran-4-yl)-7-methyl-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-(1,1-二氧基四氢-2H-硫代吡兰-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮101c(1.7g，5.6mmol)溶解于二甲基甲酰胺(10mL)中，在0℃下加入硫酸二甲酯(709mg，5.6mmol)和碳酸铯(2.7g，8.4mmol)搅拌反应1小时。TLC监测反应完全，加入10mL水有固体析出，过滤得到标题化合物2-氯-9-(1,1-二氧四氢-2H-硫吡喃-4-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮101d(白色固体，1.3g，产率82％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.33(s,1H),4.26(s,1H),3.33(s,3H),2.99(s,2H),2.11-2.04(m,2H),1.80-1.61(m,2H),1.44(d,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝317.20[M+1]
第五步：
4-((9-(1,1-二氧杂环四氢-2H-硫代吡兰-4-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-3-甲基苯甲腈(化合物101)
4-((9-(1,1-dioxidotetrahydro-2H-thiopyran-4-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-3-methylbenzonitrile
2-氯-9-(1,1-二氧四氢-2H-硫吡喃-4-基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮101d(200mg，0.6mmol)、4-氨基-3-甲基苯甲腈(83.5mg，0.6mmol)、碳酸铯(587mg，1.8mmol)、甲磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-氨基-1,1'-联苯基-2-基)钯(II)(55mg，0.06mmol)溶解于二氧六环(3mL)中，氮气保护并换气，在100℃搅拌4h。TLC监测至反应完全，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝30/1)得到标题化合物4-((9-(1,1-二氧杂环四氢-2H-硫代吡兰-4-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-3-甲基苯甲腈化合物101(白色固体，25mg，产率26％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.57(s,1H),8.32(d,1H),8.23(s,1H),7.62-7.60(m,2H),4.68-4.62(m,1H),3.52-3.45(m,2H),3.18-3.15(m,2H),3.00-2.89(m,2H),2.34(s,3H),2.08(d,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝413.20[M+1]
实施例102
3-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-((四氢呋喃-3-基)甲基)-8,9-二氢-7氢-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物102)
3-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-((tetrahydrofuran-3-yl)methyl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000190
第一步：
2-氯-4-((四氢呋喃-3-基)甲基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(102a)
ethyl 2-chloro-4-(((tetrahydrofuran-3-yl)methyl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(5g，22.6mmol)、碳酸钾(6.2g，44.8mmol)溶解于乙腈(20mL)，在0℃下加入(四氢呋喃-3-基)甲酰胺(2.3g，22.6mmol)后升至室温搅拌20小时。TLC监测至反应结束，向反应液中加水30mL，用乙酸乙酯萃取，饱和盐水洗一次，用无水硫酸钠干燥并经硅胶柱色谱分离纯化(正己烷/乙酸乙酯(v/v)＝10:1)得到标题化合物2-氯-4-((四氢呋喃-3-基)甲基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯102a(白色固体，4.4g，产率85％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.58-8.61(m,2H),4.31(q,2H),3.78-3.73(m,1H),3.69-3.58(m,2H),3.48-3.44(m,3H),2.57-2.53(m,1H),1.98-1.91(m,1H),1.62-1.58(m,1H),1.31(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝286.20[M+1]
第二步：
2-氯-4-((四氢呋喃-3-基)甲基)氨基)嘧啶-5-羧酸(102b)
2-chloro-4-(((tetrahydrofuran-3-yl)methyl)amino)pyrimidine-5-carboxylic acid
2-氯-4-((四氢呋喃-3-基)甲基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯102a(4.4g，15.3mmol)溶解于四氢呋喃10mL，水5mL中，加入氢氧化锂(736mg，30.6mmol)室温搅拌1小时。TLC监测至反应结束，旋干四氢呋喃，调pH为4-5，有白色固体析出，过滤，滤饼用石油醚/乙酸乙酯(v/v＝10/1)洗两次，浓缩得到标题化合物2-氯-4-((四氢呋喃-3-基)甲基)氨基)嘧啶-5-羧酸102b(白色固体，3.4g，产率80％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ13.75(s,1H),8.75(s,1H),8.57(s,1H),3.78-3.73(m,3H),3.47-3.43(m,3H),2.58-2.52(m,1H),1.98-1.89(m,3H),1.63-1.55(m,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝259.20[M+1]
第三步：
2-氯-9-((四氢呋喃-3-基)甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(102c)
2-chloro-9-((tetrahydrofuran-3-yl)methyl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-4-((四氢呋喃-3-基)甲基)氨基)嘧啶-5-羧酸102b(3.4g，13.0mmol)溶解于二甲基乙酰胺(20mL)中，加入三乙胺(1.58g，13mmol)、叠氮磷酸二苯酯(3.6g，13mmol)，随后逐步升温至120℃搅拌1.5小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝5:1～1:10)得到标题化合物2-氯-9-((四氢呋喃-3-基)甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮102c(白色固体，1.46g，产率50％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ11.65(s,1H),8.14(s,1H),3.80-3.74(m,3H),3.66-3.57(m,2H),3.52-3.49(m,1H),2.73-2.69(m,1H),1.98-1.89(m,1H),1.67-1.60(m,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝255.20[M+1]
第四步：
2-氯-7-甲基-9-((四氢呋喃-3-基)甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(102d)
2-chloro-7-methyl-9-((tetrahydrofuran-3-yl)methyl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-氯-9-((四氢呋喃-3-基)甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮102c(1.6g，5.2mmol)溶解于二甲基甲酰胺(10mL)，在0℃下加入硫酸二甲酯(663mg，5.2mmol)和碳酸铯(2.4g，7.7mmol)搅拌反应1小时。TLC监测至反应结束，随后加入10mL水，有固体析出，过滤得到标题化合物2-氯-7-甲基-9-((四氢呋喃-3-基)甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮102d(白色固体，1.2g，产率80％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.35(s,1H),3.81-3.75(m,3H),3.65-3.57(m,2H),3.52-3.49(m,1H),3.37(s,3H),2.73-2.70(m,1H),1.96-1.91(m,1H),1.67-1.61(m,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝268.20[M+1]
第五步：
3-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-((四氢呋喃-3-基)甲基)-8,9-二氢-7氢-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物102)
3-methyl-4-((7-methyl-8-oxo-9-((tetrahydrofuran-3-yl)methyl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
将2-氯-7-甲基-9-((四氢呋喃-3-基)甲基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮102d(300mg，1.12mmol)、4-氨基-3-甲基苯甲酰胺2a(250mg，1.68mmol)、碳酸铯(730mg，2.24mmol)和[(2-二-环己基膦基-3,6-二甲氧基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯基)-2-(2′-氨基-1,1′-联苯基)]甲磺酸钯(II)甲磺酸酯(100mg，0.11mmol)溶解于1,4-二氧六环(10mL)中，氮气保护并换气，在100℃搅拌4小时。TLC监测至反应结束，将反应液倒入冰水中，收集固体，将固体用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝100:1-50:1)得标题化合物3-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-((四氢呋喃-3-基)甲基)-8,9-二氢-7氢-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物102(浅黄色固体，45mg，产率10.37％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ10.21(s,1H),8.50(s,1H),8.10(s,1H),7.83-7.64(m,4H),7.16(s,1H),3.78-3.74(m,3H),3.69-3.59(m,2H),3.55-3.52(m,1H),3.32(s,3H),2.81-2.71(m,1H),2.29(s,3H),1.96-1.88(m,1H),1.69-1.61(m,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝383.20[M+1]。
实施例103
9-环己基-2-((4-甲氧基-2-甲基苯基)氨基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(化合物103)
9-cyclohexyl-2-((4-methoxy-2-methylphenyl)amino)-7-methyl-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
Figure PCTCN2021087912-appb-000191
将2-氯-9-环己基-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮68d(150mg，0.56mmol)、4-甲氧基-2-甲基苯胺(154mg，1.12mmol)、碳酸铯(367mg，1.12mmol)、甲磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-氨基-1,1'-联苯基-2-基)钯(II)(76mg，0.08mmol)溶于1,4二氧六环(50mL)中，氮气保护并换气，在110℃搅拌4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝10/1)，并经过Pre-HPLC得到标题化合物9-环己基-2-((4-甲氧基-2-甲基苯基)氨基)-7-甲基-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮化合物103(白色固体，53mg，产率26％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.26(s,1H),7.94(s,1H),7.30(d,1H),6.78(d,H),6.71(dd,1H),4.134.11(m,1H),3.72(s,3H),3.25(s,3H),2.25-2.18,2H),2.17(s,3H),1.79(d,2H),1.65(t,3H),1.35-1.22(m,2H),1.11(t,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝368.20[M+1]
实施例104
2-氟-4-((9-(3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物104)
2-fluoro-4-((9-(3-fluorotetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000192
Figure PCTCN2021087912-appb-000193
第一步：
3-氟四氢-4H-吡喃-4-酮(104b)
3-fluorotetrahydro-4H-pyran-4-one
将四氢-4H-吡喃-4-酮104a(5g，49.94mmol)、1-氯甲基-4-氟-1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷二(四氟硼酸)盐(21.23g，59.93mmol)溶解于乙腈:水(20:1mL)，升至80℃搅拌反应8小时。TLC监测至反应结束，浓缩蒸发掉乙腈，加入水和乙酸乙酯萃取，浓缩有机层用无水硫酸钠干燥并经硅胶柱色谱分离纯化(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1:1)得到标题化合物3-氟四氢-4H-吡喃-4-酮104b(无色液体，4.4g，产率74.88％)。
LC-MS m/z(ESI)＝119.10[M+1]
第二步：
3-氟四氢-2H-吡喃-4-胺(104c)
3-fluorotetrahydro-2H-pyran-4-amine
将3-氟四氢-4H-吡喃-4-酮104b(1.4g，11.85mmol)溶解于甲醇(10mL)中，常温搅拌下加入甲酸铵(7.47g，118.53mmol)反应0.5小时后再加入氰基硼氢化钠(894mg，14.22mmol)反应5小时。TLC监测至反应结束，向反应液中加入饱和碳酸氢钠淬灭反应，旋干后过滤用甲醇:二氯甲烷(40:1)洗涤三次，浓缩滤液得到标题化合物3-氟四氢-2H-吡喃-4-胺104c(白色固体，粗品，5.3g)。
LC-MS m/z(ESI)＝120.10[M+1]
第三步：
4-((3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸乙酯(104d)
ethyl 4-((3-fluorotetrahydro-2H-pyran-4-yl)amino)-2-(methylthio)pyrimidine-5-carboxylate
将2,4-二氯嘧啶-5-羧酸乙酯1A(3.3g，14.20mmol)、碳酸钾(4.9g，35.50mmol)溶解于乙腈(20mL)，常温搅拌下加入3-氟四氢-2H-吡喃-4-胺104c(1.41g，11.83mmol)后升至30℃反应7小时。TLC监测至反应结束，过滤反应液，用二氯甲烷和乙酸乙酯洗涤滤饼，浓缩有机层经硅胶柱色谱分离纯化(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝10:1)得到标题化合物4-((3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸乙酯104d(白色固体，1.85g，产率49.57％)。
LC-MS m/z(ESI)＝316.10[M+1]
第四步：
4-((3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸(104e)
4-((3-fluorotetrahydro-2H-pyran-4-yl)amino)-2-(methylthio)pyrimidine-5-carboxylate
将4-((3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸乙酯104d(1.85g，5.87mmol)溶解于四氢呋喃10mL，水10mL中，加入氢氧化钠(704mg，17.60mmol)室温搅拌2小时。TLC监测至反应结束，旋干四氢呋喃，调pH为3-4，加入乙酸乙酯萃取，浓缩得到标题化合物4-((3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸104e(白色固体，1.73g，产率104.3％)。
LC-MS m/z(ESI)＝288.10[M+1]
第五步：
9-(3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-2-(甲硫基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(104f)
9-(3-fluorotetrahydro-2H-pyran-4-yl)-2-(methylthio)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将4-((3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸104e(1.73g，6.02mmol)溶解于二甲基乙酰胺(20mL)中，加入三乙胺(835μL，6.02mmol)、叠氮磷酸二苯酯(1.3mL，6.02mmol)常温搅拌反应1h后升温至100℃搅拌反应2小时。TLC监测至反应结束，向反应液中加入水，析出固体，过滤，滤饼用水和石油醚洗脱，旋干得到标题化合物4-((3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸乙酯104f(白色固体，1.27g，产率73.89％)。
LC-MS m/z(ESI)＝285.10[M+1]
第六步：
9-(3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-7-甲基-2-(甲硫基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(104g)
9-(3-fluorotetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7-methyl-2-(methylthio)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将4-((3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸乙酯104f(1.27g，4.45mmol)溶解于二甲基甲酰胺(10mL)，在0℃下加入硫酸二甲酯(433μL，4.45mmol)和碳酸铯(1.84g，13.35mmol)搅拌反应1.5小时。TLC监测至反应结束，随后加入水和乙酸乙酯进行萃取，浓缩有机层得到标题化合物9-(3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-7-甲基-2-(甲硫基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮104g(白色固体，800mg，产率60.27％)。
LC-MS m/z(ESI)＝299.10[M+1]
第七步：
9-(3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-7-甲基-2-(甲磺酰基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(104h)
9-(3-fluorotetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7-methyl-2-(methylsulfonyl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将9-(3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-7-甲基-2-(甲硫基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮104g(800mg，2.68mmol)溶解于二氯甲烷(6mL)中，常温搅拌下加入间氯过氧苯甲酸(1.85g，10.73mmol)反应1小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液经硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝100:1-60:1)得标题化合物9-(3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-7-甲基-2-(甲磺酰基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮104h(白色固体，1.05g，产率119％)。
LC-MS m/z(ESI)＝331.10[M+1]
第八步：
2-氟-4-((9-(3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物104)
2-fluoro-4-((9-(3-fluorotetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7-methyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
将9-(3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-7-甲基-2-(甲磺酰基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮104h(300mg，0.91mmol)、4-氨基-3-甲基苯甲酰胺中间体2(458mg，2.72mmol)、叔丁醇钾(305mg，2.72mmol)溶解于二甲基甲酰胺(10mL)中，常温搅拌反应1小时。TLC监测至反应结束，将反应液中加入水和乙酸乙酯萃取，浓缩有机层经硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/乙酸乙酯(v/v)＝5:1-1:1)得标题化合物2-氟-4-((9-(3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-7-甲基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺化合物104-1(浅黄色固体，130mg，产率34.21％)、化合物104-2(白色固体，85mg，产率22.37％)。
化合物104-1：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.62(s,1H),8.23(s,1H),7.84(d,1H),7.54(d,1H),7.46(s,1H),7.40(s,1H),5.46-5.37(m,0.5H),5.34-5.25(m,0.5H),4.63-4.51(m,1H),4.23-4.16(m,1H),3.97-3.90(m,1H),3.54-3.45(m,1H),3.41-3.34(m,4H),2.60-2.53(m,1H),2.29(s,3H),1.97-1.89(m,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝419.20[M+1]
化合物104-2：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.50(s,1H),8.22(s,1H),7.92(d,1H),7.54(d,1H),7.45(s,1H),7.39(s,1H),4.82(s,0.5H),4.69(s,0.5H),4.67-4.61(m,0.5H),4.59-4.52(m,0.5H),4.09-3.98(m,2H),3.75-3.70(m,0.5H),3.66-3.61(m,0.5H),3.60-3.52(m,1H),3.49-3.37(m,1H),3.35(s,3H),2.29(s,3H),1.81(dd,1H)。
LC-MS m/z(ESI)＝419.20[M+1]
实施例105
4-((7-(乙基-d5)-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物105)
4-((7-(ethyl-d5)-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000194
第一步：
2-(甲硫基)-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯(105b)
ethyl 2-(methylthio)-4-((tetrahydro-2H-pyran-4-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylate
将4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸乙酯105a(500g，2.15mol)、四氢-2H-吡喃-4-胺盐酸盐(300g，2.19mol)溶解于乙腈(3000mL)和水(500mL)中，搅拌多次后加入碳酸钾(600g，4.3mol)在室温搅拌4小时。TLC监测至反应结束，过滤，滤渣用乙酸乙酯(1000mL)清洗，将滤液浓缩得粗品，粗品通过乙酸乙酯和水萃取，浓缩有机相得到标题化合物2-(甲硫基)-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯105b(白色固体，642g，产率99.69％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.56(s,1H),8.17(d,1H),4.31-4.26(m,2H),4.25-4.21(m,2H),3.88-3.84(m,2H),3.48-3.42(m,2H),2.48(s,3H),1.94-1.90(m,2H),1.60-1.51(m,2H),1.32-1.29(m,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝298.10[M+1]
第二步：
2-(甲硫基)-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)嘧啶-5-羧酸(105c)
2-(methylthio)-4-((tetrahydro-2H-pyran-4-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylic acid
将2-(甲硫基)-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)嘧啶-5-羧酸乙酯105b(640g，2.15mol)溶解于四氢呋喃(1000mL)/水(1200mL)/甲醇(200mL)中，加入氢氧化钠(172.16g，4.30mol)，室温搅拌2小时。TLC监测至反应结束，浓缩除去有机溶剂后，用12N盐酸调pH为3-4，有白色固体析出，过滤，滤饼用石油醚洗涤，收集固体得到标题化合物2-(甲硫基)-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)嘧啶-5-羧酸105c(白色固体，640g，粗品，产率110.4％)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ8.52(s,1H),8.36(d,1H),4.22-4.18(m,1H),3.86-3.83(m,2H),3.47-3.41(m,2H),2.46(s,3H),1.94-1.89(m,2H),1.56-1.48(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝270.10[M+1]
第三步：
2-(甲硫基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(105d)
2-(methylthio)-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-(甲硫基)-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)嘧啶-5-羧酸105c(630g，2.34mol)溶解于二甲基乙酰胺(4000mL)中，常温搅拌下加入叠氮磷酸二苯酯(504mL，2.34mol)反应十分钟后加入三乙胺(325mL，2.34mol)继续反应2h，再升温至120℃搅拌反应1.5小时，期间有大量气体产生。TLC监测至反应结束，将反应液直接浓缩除去大部分溶剂，剩余液体倒入6L冰水中，析出大量固体，搅拌0.5小时后，过滤收集固体，水洗3次，真空浓缩干燥得标题化合物2-(甲硫基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮105d(白色固体，880g，粗品)。
1H NMR(400MHz DMSO)δ11.35(s,1H),8.12(s,1H),4.44-4.38(m,1H),4.00-43.97(m,2H),3.45-3.41(m,2H),2.55-2.45(m,5H),1.69-1.65(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝267.10[M+1]
第四步：
7-(乙基-d5)-2-(甲硫基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(105e)
7-(ethyl-d5)-2-(methylthio)-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-(甲基硫)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮105d(2.5g，9.39mmol)溶解于二甲基甲酰胺(20mL)，常温搅拌下加入氘代溴乙烷(700μL，9.39mmol)和氢氧化钠(1.13g，28.16mmol)搅拌反应2.5小时。TLC监测至反应结束，随后加入水和乙酸乙酯进行萃取，浓缩有机层得到标题化合物7-(乙基-d5)-2-(甲硫基)-9-(四氢-2H- 吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮105e(淡黄色固体，1.65g，产率58.71％)。
LC-MS m/z(ESI)＝300.20[M+1]
第七步：
7-(乙基-d5)-2-(甲磺酰基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(105f)
7-(ethyl-d5)-2-(methylsulfonyl)-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将7-(乙基-d5)-2-(甲硫基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮105e(1.6g，5.34mmol)溶解于二氯甲烷(8mL)中，常温搅拌下加入间氯过氧苯甲酸(3.69g，21.38mmol)反应1.5小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液经硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/乙酸乙酯(v/v)＝1:1)得标题化合物7-(乙基-d5)-2-(甲磺酰基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮105f(白色固体，1.4g，产率79.04％)。
LC-MS m/z(ESI)＝332.20[M+1]
第八步：
4-((7-(乙基-d5)-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物105)
4-((7-(ethyl-d5)-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
将7-(乙基-d5)-2-(甲磺酰基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮105f(300mg，0.91mmol)、4-氨基-3-甲基苯甲酰胺中间体2(457mg，2.72mmol)、叔丁醇钾(305mg，2.72mmol)溶解于二甲基甲酰胺(10mL)中，常温搅拌反应1小时。TLC监测至反应结束，将反应液中加入水和乙酸乙酯萃取，浓缩有机层经硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝20:1)得标题化合物4-((7-(乙基-d5)-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺化合物105(白色固体，45mg，产率11.85％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.54(s,1H),8.25(s,1H),7.89(d,1H),7.54(d,1H),7.47(s,1H),7.39(s,1H),4.49-4.38(m,1H),3.98(dd,2H),3.47-3.38(m,2H),2.59-2.51(m,2H),2.29(s,3H),1.73-1.65(m,2H).
LC-MS m/z(ESI)＝420.20[M+1]
实施例106
4-((7-(2,2-二氟乙基)-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物106)
4-((7-(2,2-difluoroethyl)-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000195
Figure PCTCN2021087912-appb-000196
第一步：
7-(2,2-二氟乙基)-2-(甲硫基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(106a)
7-(2,2-difluoroethyl)-2-(methylthio)-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-(甲基硫)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮105d(1g，2.53mmol)溶解于二甲基甲酰胺(5mL)，常温搅拌下加入烯丙基碘(397μL，4.51mmol)、碳酸钾(1.56g，11.26mmol)反应1小时后升温至65℃搅拌反应2.5h。TLC监测至反应结束，随后向反应液中加入水，有固体析出，过滤，用水和石油醚洗涤，浓缩旋干得到标题化合物7-(2,2-二氟乙基)-2-(甲硫基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮106a(白色固体，800mg，产率64.49％)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ8.36(s,1H),6.52-6.22(m,1H),4.50-4.43(m,1H),4.38-4.30(m,2H),3.98(dd,2H),3.49-3.42(m,2H),2.53(s,3H),2.50-2.45(m,2H),1.79-1.60(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝331.10[M+1]
第二步：
7-(2,2-二氟乙基)-2-(甲基亚磺酰基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(106b)
7-(2,2-difluoroethyl)-2-(methylsulfinyl)-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将7-(2,2-二氟乙基)-2-(甲硫基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮106a(800mg，2.42mmol)溶解于二氯甲烷(6mL)中，常温搅拌下加入间氯过氧苯甲酸(543mg，3.15mmol)反应3小时。TLC监测至反应结束，向反应液中加入饱和碳酸氢钠和二氯甲烷萃取，浓缩有机层得到标题化合物7-(2,2-二氟乙基)-2-(甲基亚磺酰基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮106b(白色固体，740mg，产率88.23％)。
LC-MS m/z(ESI)＝347.10[M+1]
第三步：
4-((7-(2,2-二氟乙基)-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺
4-((7-(2,2-difluoroethyl)-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
将7-(2,2-二氟乙基)-2-(甲基亚磺酰基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮106b(200mg，0.58mmol)、4-氨基-3-甲基苯甲酰胺中间体2(388mg，2.31mmol)、碳酸铯(564mg，1.73mmol)溶解于二甲基甲酰胺(5mL)中，升至80℃反应3小时。TLC监测至反应结束，向反应液中加入水和二氯甲烷萃取，浓缩有机层经硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝30:1)并经重结晶后得标题化合物4-((7-(2,2-二氟乙基)-8-氧代-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺化合物108(白色固体，65mg，产率24.99％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.64(s,1H),8.21(s,1H),7.84(d,1H),7.54(d,1H),7.47(s,1H),7.41(s,1H),6.54-6.22(m,1H),4.51-4.41(m,1H),4.37-4.25(m,2H),3.98(dd,2H),3.46-3.38(m,2H),2.58-2.50(m,2H),2.29(s,3H),1.75-1.67(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝451.20[M+1]
实施例107
(S)-4-((7-乙基-8-氧代-9-(四氢呋喃-3-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物107)
(S)-4-((7-ethyl-8-oxo-9-(tetrahydrofuran-3-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000197
第一步：
(S)-2-氯-7-乙基-9-(四氢呋喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(107a)
(S)-2-chloro-7-ethyl-9-(tetrahydrofuran-3-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将(S)-2-氯-9-(四氢呋喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮76c(2g，8.31mmol)溶解于二甲基甲酰胺(20mL)中，在0℃下加入碳酸铯(2.71g，8.31mmol)和碘乙烷(1.56g，9.97mmol)搅拌反应1小时。TLC监测至反应结束，随后将反应液到入60mL水中，析出大量固体，过滤干燥得到标题化合物(S)-2-氯-7-乙基-9-(四氢呋喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮107a(白色固体，1.1g，产率49.26％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.43(s,1H),5.04-4.97(m,1H),4.15-4.06(m,1H),3.98(t,1H),3.91-3.84(m,4H),2.44-2.37(m,1H),2.30-2.19(m,1H),1.26(s,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝269.10[M+1]
第二步：
(S)-4-((7-乙基-8-氧代-9-(四氢呋喃-3-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物107)
(S)-4-((7-ethyl-8-oxo-9-(tetrahydrofuran-3-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
将(S)-2-氯-7-乙基-9-(四氢呋喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮107a(500mg，1.86mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(1.25g，7.44mmol)、碳酸铯(2.43g，7.44mmol)和甲磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-氨基-1,1'-联苯基-2-基)钯(II)(253mg，0.28mmol)溶于1,4-二氧六环(10mL)中，氮气保护换气，在110℃搅拌4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝20/1)并制备得到标题化合物(S)-2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢呋喃-3-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物107(白色固体，120mg， 产率16.11％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.56(s,1H),8.27(s,1H),7.88(d,1H),7.54(d,1H),7.47(s,1H),7.41(s,1H),5.01-4.94(m,1H),4.09(q,1H),3.96(t,3H),3.92-3.82(m,4H),2.76-2.66(m,1H),2.33-2.23(m,1H),2.28(s,3H),1.24(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝401.20[M+1]
实施例108
(R)-4-((7-乙基-8-氧代-9-(四氢呋喃-3-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物108)
(R)-4-((7-ethyl-8-oxo-9-(tetrahydrofuran-3-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000198
第一步：
(R)-2-氯-7-乙基-9-(四氢呋喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(108a)
(R)-2-chloro-7-ethyl-9-(tetrahydrofuran-3-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将(R)-2-氯-9-(四氢呋喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮75c(1.4g，5.82mmol)溶解于二甲基甲酰胺(20mL)中，在0℃下加入碳酸铯(1.90g，5.82mmol)和碘乙烷(998mg，6.40mmol)搅拌反应1小时。TLC监测至反应结束，随后将反应液到入60mL水中，析出大量固体，过滤干燥得到标题化合物(R)-2-氯-7-乙基-9-(四氢呋喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮108a(白色固体，1.08g，产率69.09％)。
LC-MS m/z(ESI)＝269.10[M+1]
第二步：
(R)-4-((7-乙基-8-氧代-9-(四氢呋喃-3-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物108)
(R)-4-((7-ethyl-8-oxo-9-(tetrahydrofuran-3-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
将(R)-2-氯-7-乙基-9-(四氢呋喃-3-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮108a(300mg，1.12mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(939mg，5.58mmol)、碳酸铯(1.09g，3.35mmol)和甲磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-氨基-1,1'-联苯基-2-基)钯(II)(202mg，0.22mmol)溶于1,4-二氧六环(10mL)中，氮气保护换气，在110℃搅拌4小时。TLC监测至反应结束，浓缩反应液，残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝20/1)并制备得到标题化合物(R)-2-氟-5-甲基-4-((7-甲基-8-氧代-9-(四氢呋喃-3-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物108(白色固体，100mg，产率22.37％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.53(s,1H),8.28(s,1H),7.87(d,1H),7.55(d,1H),7.47(s,1H),7.41(s,1H),5.03-4.97(m,1H),4.11-4.05(m,1H),3.96(t,3H),3.94-3.85(m,4H),2.77-2.70(m,1H),2.36-2.23(m,1H),2.28(s,3H),1.26(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝401.20[M+1]
实施例109
2-氟-4-((7-(氟甲基)-8-氧-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物109)
2-fluoro-4-((7-(fluoromethyl)-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000199
第一步：
7-(2-氟乙基)-2-(甲硫基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(109a)
7-(2-fluoroethyl)-2-(methylthio)-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-(甲硫基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮105d(1.0g，3.75mmol)、1-氟-2-碘乙烷(0.71g，4.1mmol)和碳酸钾(1.5g，11.2mmol)加入干燥的反应瓶，然后加入DMF(10mL)，室温搅拌反应2.5小时。TLC监测反应完全，向反应液加入水和二氯甲烷萃取，合并有机相，干燥浓缩，得到标题化合物7-(2-氟乙基)-2-(甲硫基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮109a(白色固体，1.0g，产率85.47％)。
LC-MS m/z(ESI)＝313.10[M+1]
第二步：
7-(2-氟乙基)-2-(甲基亚磺酰基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(109b)
7-(2-fluoroethyl)-2-(methylsulfinyl)-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将7-(2-氟乙基)-2-(甲硫基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮109a(0.9g，2.88mmol)加入干燥的反应瓶，用DCM(10mL)溶解，室温下分三批加入间氯过氧苯甲酸(0.5g，3.17mmol)，加完后继续反应3小时。TLC监测反应完全，向反应液加入水和二氯甲烷萃取，合并有机相，干燥浓缩得到标题化合物7-(2-氟乙基)-2-(甲基亚磺酰基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮109b(白色固体，0.8g，产率85.11％)。
LC-MS m/z(ESI)＝329.10[M+1]
第三步：
2-氟-4-((7-(氟甲基)-8-氧-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲 基苯甲酰胺(化合物109)
2-fluoro-4-((7-(fluoromethyl)-8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-5-methylbenzamide
将7-(2-氟乙基)-2-(甲基亚磺酰基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮109b(200mg，0.61mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(410mg，2.44mmol)和碳酸铯(590mg，1.83mmol)加入干燥的反应管，然后加入DMF(3mL)，在80℃下反应2.5小时。向反应液加入水和二氯甲烷萃取，合并有机相，干燥浓缩，使用硅胶柱色谱分离纯化(DCM/MeOH(v/v)＝20:1)，得到标题化合物2-氟-4-((7-(氟甲基)-8-氧-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺化合物109(白色固体，21mg，产率7.98％)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ8.60(s,1H),8.21(s,1H),7.87(d,1H),7.55(d,1H),7.48(s,1H),7.42(s,1H),4.75-4.66(m,2H),4.48-4.43(m,1H),4.19-4.13(m,2H),4.00-3.97(m,2H),3.43(t,2H),2.59-2.53(m,2H),2.29(s,3H),1.74-1.68(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝433.20[M+1]
实施例110
2-氟-5-甲基-4-((8-氧-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物110)
2-fluoro-5-methyl-4-((8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7-(2,2,2-trifluoroethyl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000200
第一步：
2-(甲硫基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(110a)
2-(methylthio)-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7-(2,2,2-trifluoroethyl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将2-(甲硫基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮105d(1.0g，3.75mmol)、2-碘-1,1,1-三氟乙烷(444mg，4.5mmol)和碳酸铯(3.67g，11.26mmol)加入干燥的反应瓶，然后加入DMF(10mL)，室温搅拌反应2.5小时。TLC监测反应完全，向反应液加入水和乙酸乙酯萃取，合并有机相，干燥浓缩，得到标题化合物7-(2-氟乙基)-2-(甲硫基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮110a(淡黄色固体，1.18g，产率90.22％)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ8.43(s,1H),4.83(q,2H),4.52-4.43(m,1H),3.98(dd,2H),3.51-3.42(m,2H),2.53(s,3H),2.50-2.44(m,2H),1.76-1.68(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝349.10[M+1]
第二步：
2-(甲基亚磺酰基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮(110b)
2-(methylsulfinyl)-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7-(2,2,2-trifluoroethyl)-7,9-dihydro-8H-purin-8-one
将7-(2-氟乙基)-2-(甲硫基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮110a(1.17g，3.36mmol)加入干燥的反应瓶，用DCM(10mL)溶解，室温下加入间氯过氧苯甲酸(754mg，4.37mmol)搅拌反应1.5小时。TLC监测反应完全，向反应液加入饱和碳酸氢钠和二氯甲烷萃取，合并有机相，干燥浓缩得到标题化合物2-(甲基亚磺酰基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮110b(白色固体，1g，产率81.72％)。
LC-MS m/z(ESI)＝365.10[M+1]
第三步：
2-氟-5-甲基-4-((8-氧-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺(化合物110)
2-fluoro-5-methyl-4-((8-oxo-9-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-7-(2,2,2-trifluoroethyl)-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)benzamide
将2-(甲基亚磺酰基)-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-7,9-二氢-8H-嘌呤-8-酮110b(200mg，0.55mmol)、4-氨基-2-氟-5-甲基苯甲酰胺中间体2(369mg，2.20mmol)和碳酸铯(537mg，1.65mmol)加入干燥的反应管，然后加入DMF(3mL)，在40℃下反应5小时。向反应液加入水和二氯甲烷萃取，合并有机相，干燥浓缩，使用硅胶柱色谱分离纯化(DCM/MeOH(v/v)＝20:1)，得到标题化合物2-氟-5-甲基-4-((8-氧-9-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)苯甲酰胺化合物110(白色固体，45mg，产率17.5％)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ8.54(s,1H),8.26(s,1H),7.87(d,1H),7.55(d,1H),7.47(s,1H),7.42(s,1H),4.85-4.69(m,2H),4.53-4.42(m,1H),3.98(dd,2H),3.46-3.40(m,2H),2.52-2.45(m,2H),2.29(s,3H),1.76-1.68(m,2H)。
LC-MS m/z(ESI)＝469.20[M+1]
实施例111
4-((9-(顺-3-氰基环丁基)-7-乙基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物111)
4-((9-(cis-3-cyanocyclobutyl)-7-ethyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
Figure PCTCN2021087912-appb-000201
Figure PCTCN2021087912-appb-000202
第一步：
顺-3-(7-乙基-2-(甲硫基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈(111a)
cis-3-(7-ethyl-2-(methylthio)-8-oxo-7,8-dihydro-9H-purin-9-yl)cyclobutane-1-carbonitrile
将顺-3-(2-(甲硫基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈74e(500mg，19.1mmol)溶解于二甲基甲酰胺(5mL)，在0℃下加入碘乙烷(3.0g，19.1mmol)和氢氧化钠(1.53g，38.2mmol)，0℃搅拌0.5小时。TLC监测反应完成，随后加入50mL水，有固体析出，过滤旋干得到标题化合物顺-3-(7-乙基-2-(甲硫基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈111a(白色固体，487mg，产率87.9％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.68(s,1H),4.97-4.87(m,1H),3.93(q,2H),3.34(s,3H),3.33-3.23(m,2H),2.91(s,3H),2.77-2.69(m,2H),1.27(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝290.10[M+1]
第二步：
顺-3-(7-乙基-2-(甲基磺酰基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈(111b)
cis-3-(7-ethyl-2-(methylsulfonyl)-8-oxo-7,8-dihydro-9H-purin-9-yl)cyclobutane-1-carbonitrile
将顺-3-(7-乙基-2-(甲硫基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈111a(487mg，1.66mmol)溶解于甲醇中(10mL)，再加入纯净水2mL，反应混合液加入过氧单磺酸钾(1.02g，1.66mmol)，反应混合液加热至60℃反应2小时。TLC监测反应完成，反应混合液减压旋除甲醇，再加入5mL纯水，用二氯甲烷(20mL×3)萃取3次后，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压旋干溶剂得到顺-3-(7-乙基-2-(甲基磺酰基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈111b(浅黄色固体，397mg，产率74.3％)。
LC-MS m/z(ESI)＝322.10[M+1]
第三步：
4-((9-(顺-3-氰基环丁基)-7-乙基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺(化合物111)
4-((9-(cis-3-cyanocyclobutyl)-7-ethyl-8-oxo-8,9-dihydro-7H-purin-2-yl)amino)-2-fluoro-5-methylbenzamide
将顺-3-(7-乙基-2-(甲基磺酰基)-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)环丁烷-1-腈111b(200mg，0.62mmol)、4-氨基-3-甲基-2氟苯甲酰胺中间体2(538mg，3.20mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺3mL中，氮气保护并换气，再加入叔丁醇钾(143mg，1.28mmol)，室温搅拌4小时。TLC监测反应完成，将反应液倒入到30mL纯水中，大量黄色固体析出，过滤后用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝35/1)得到标题化合物4-((9-(顺-3-氰基环丁基)-7-乙基-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-2-基)氨基)-2-氟-5-甲基苯甲酰胺化合物111(白色固体，25mg，产率10.0％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.63(s,1H),8.28(s,1H),7.88(d 1H),7.58-7.56(m,1H),7.50(s,1H),7.41(s,1H),5.14-5.09(m,1H),3.87-3.82(m,2H),3.64-3.59(m,1H),3.26-3.16(m,2H),2.75-2.68(m,2H),2.32(s,3H),1.22(t,3H)。
LC-MS m/z(ESI)＝410.20[M+1]
生物学试验
1、DNA-PK激酶抑制测试
通过DNA-PK kinase assay kit(购买自Promega公司，货号：V4107，批号：0000366495)检测化合物对DNA-PK激酶的抑制活性。利用化学发光对结果进行定量，具体实验方案如下：
i.按照试剂盒说明书构建不同浓度ADP-荧光标准曲线；
ii.于384孔白色板中制备5μL反应体系，每孔中分别加入1μL化合物(分别设定浓度梯度1μM、200nM、40nM、8nM、1.6nM、0.32nM、0.064nM、0.013nM)、20units DNA-PK激酶、0.2μg/μL底物、10μg/μL DNA、50μM ATP、1％DMSO；
iii.混匀，离心(1000rpm，30s)，37℃孵育60min；
iv.加入5μL ADP‐Glo TM Reagent终止反应，混匀，离心(1000rpm，30s)，室温孵育40min；
v.加入10μL Kinase Detection Reagent，震荡混匀，离心(1000rpm，30s)，室温孵育30min；
vi.利用酶标仪(Thermo fisher，Varioskan LUX)测定荧光值。利用GraphPad Prism 8进行IC 50的计算，结果见表1。
表1 本申请化合物对于DNA-PK激酶的抑制活性
化合物编号 IC50(nM)
1 10.10
2 0.08
3 18.58
4 8.30
5 0.78
6 0.78
7 5.47
8 11.70
9 0.47
11 25.03
15 5.28
17 28.66
18 2.10
21 53.00
22 1.36
24 0.56
25 3.44
26 7.60
27 4.36
29 3.90
30 66.60
31 31.00
36 17.95
37 11.88
38 0.47
39 5.70
40 39.2
41 13.42
42 2.05
43 9.80
44 1.10
45 13.53
46 0.99
47 3.69
48 1.96
50 12.72
51 34.09
53 0.32
54 8.07
55 14.76
56 14.33
57 3.98
59 12.12
60 29.74
62 4.17
63 50.47
64 3.34
67 2.96
68 0.01
69 1.25
70 4.14
71 2.17
72 0.05
73 1.34
75 5.69
76 1.96
77 4.67
78 0.038
79 1.86
80 11.15
81 47.12
82 24.5
83 0.43
84 0.24
85 1.10
86 0.44
88 2.85
89 3.83
90 10.82
91 2.44
92 0.02
93 0.75
94 7.20
95 0.60
96 3.89
97 0.68
98 4.01
99 2.13
100 2.20
101 9.60
105 5.54
106 6.75
107 10.11
109 5.54
103(对照例) 100.40
结果表明，本申请的化合物对DNA-PK激酶具有良好的抑制效果。
2、肝微粒体代谢稳定性
1.1试验材料
肝微粒体(购自瑞德肝脏疾病研究(上海)有限公司，货号：人肝微粒体(NJT)、NADPH(购自Roche，货号：40939)、UDPGA、本发明化合物(测试物)。
1.2实验步骤
(1)配制混合睾酮(0.5μM)和7-羟基香豆素(0.5μM)工作溶液。
(2)配制混合NADPH(1mM)和UDPGA(1mM)溶液，并在使用前于水浴振荡器内37℃预温。
(3)将肝微粒体解冻并用缓冲液稀释。
(4)在孵育板内每孔加入配制好的测试物(0.5μM)、肝微粒体溶液(0.5mg/mL)。
(5)试验分成3组并进行加样。试验组：测试物在辅酶NADPH和UDPGA存在的条件下与肝微粒体孵育0min，30min，60min，120min；阳性对照组：睾酮(0.5μM)和7-羟基香豆素(0.5μM)在辅酶NADPH和UDPGA存在的条件下与微粒体孵育0和120min；阴性对照组：测试物在无任何辅酶的条件下与微粒体孵育0和120min。
(6)所有样本均在37℃孵育，在每一个终止时间(0、15、30、45、60min、120min)加入预冷的甲醇以终止反应并记录时间。
(7)所有样本混匀后4000rpm离心10min后取上清液，用LC-MS/MS检测样品中的测试物母体剩余量。数据分析：
T 1/2＝0.693/k，Clint＝(0.693/T 1/2)×(1/(microsomal protein)×Scaling Factors)，注：k为化合物剩余量的对数与时间作图的斜率。结果如表2所示。
表2 本申请的化合物人肝微粒体稳定性
化合物 T 1/2(min)
化合物2 >120
化合物5 >120
化合物8 >120
化合物9 >120
化合物18 >120
化合物24 >120
化合物25 >120
化合物26 >120
化合物27 >120
化合物29 >120
化合物38 >120
化合物39 >120
化合物42 >120
化合物44 >120
化合物48 >120
化合物53 >120
化合物54 >120
化合物57 >120
化合物69 >120
化合物72 >120
化合物73 >120
化合物75 >120
化合物76 >120
化合物77 >120
化合物79 >120
化合物80 >120
化合物81 >120
化合物82 >120
化合物83 >120
化合物85 >120
化合物92-1 >120
化合物92-2 >120
化合物93 >120
结果表明，本申请的化合物具有良好的人肝微粒体稳定性。
3、药代动力学测定
3.1试验材料
ICR小鼠(购自北京维通利华实验动物技术有限公司)
3.2实验步骤
(1)准备健康雄性ICR小鼠(18-22g)，每个化合物用18只，分成2组(iv和po组)，每组9只，每个时间点选取3只进行采血。
(2)禁食过夜(自由饮水)后，以5％DMSO、95％的30％HP-β-CD(v：v)为溶剂对本发明化合物进行溶解(或形成混悬液)。分别经尾静脉(iv，1mg/kg)、灌胃(po，10mg/kg)给药。
(3)iv组分别于给药后5min、15min、0.5h、1h、2h、4h、8h、12h、24h由颌下静脉采血0.1mL，由EDTA-K2抗凝，4℃离心5min分离血浆，于-20℃保存待测。
(4)po组分别于给药前及给药后15min、0.5h、1h、2h、4h、6h、8h、12h、24h由颌下静脉采血0.1mL，处理方法同静脉组。
(5)采用LC/MS/MS法测定血浆的本发明化合物的浓度。
(6)使用AB公司的Analyst 1.6进行结果计算和拟合，结果如表3所示。
表3 本申请的化合物药代动力学结果
Figure PCTCN2021087912-appb-000203
结果表明，本申请的化合物具有良好的药代动力学特性。
4、TTK激酶活性测定
4.1试验材料
TTK激酶(购自Invitrogen，货号PV3792)；
4.2实验步骤
(1)准备1×buffer：用ddH 2O将5×buffer稀释为1×buffer，并加入0.05mM DTT。
(2)本发明化合物：初始浓度1000nM，1：3稀释，10个梯度。
(3)使用Echo 550移液工作站将稀释后的本发明化合物加入384孔板(购自Greiner，货号784075)；1000g离心1min。
(3)利用1×buffer配置2×TTK酶液，随后每孔加入2.5μL 2×酶液；1000g离心30s；室温放置10min。
(4)利用1×buffer配置2×MBP底物/ATP混合物，随后每孔加入2.5μL 2×MBP底物/ATP混合物；1000g离心30s；室温放置1h。
(5)每孔加入5μL ADP-Glo，室温放置40min。
(6)每孔加入10μL检测试剂，室温放置40min。
(7)Envision 2104酶标仪进行结果读取，并利用GraphPad Prism 8进行曲线拟合和IC 50计算，结果如表4所示。
表4 本申请的化合物TTK激酶抑制活性
化合物编号 IC 50(nM)
化合物2 275.2
化合物5 1722
化合物9 10000
化合物18 386.6
化合物24 4219
化合物27 427.9
结果表明，本申请的化合物对TTK激酶无显著抑制效果，对DNA-PK激酶具有高度选择性。
本发明说明书对具体实施方案进行了详细描述，本领域技术人员应认识到，上述实施方案是示例性的，不能理解为对本发明的限制，对于本领域技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，通过对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰获得技术方案也落在本发明的权利要求书的保护范围内。

Claims (18)

  1. 通式(I)的化合物，或者其立体异构体、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶：
    Figure PCTCN2021087912-appb-100001
    其中：
    Figure PCTCN2021087912-appb-100002
    为
    Figure PCTCN2021087912-appb-100003
    或者
    Figure PCTCN2021087912-appb-100004
    Figure PCTCN2021087912-appb-100005
    为单键或者双键；
    Figure PCTCN2021087912-appb-100006
    中的A、B、C、D各自独立地为C或者N，且A、B、C、D中至少一个为N；
    R 0为H、C 1-6烷基或者环丙基，所述C 1-6烷基任选地进一步被1个或者多个选自卤素和氘的取代基取代；
    R 1为
    Figure PCTCN2021087912-appb-100007
    Figure PCTCN2021087912-appb-100008
    或者吡啶基，且R 1任选地进一步被1或2个选自D、卤素、氰基、羟基、C 1-6烷基和C 1-6烷氧基的取代基取代；
    R 1a为H或者C 1-6烷基；
    R 1b为H、OH、氰基或者羟基取代的C 1-6烷基；
    R 2为H、氰基、＝O、羧基、-C(＝O)NR 2aR 2b、C 1-6烷氧基、C 1-6烷基、卤素、-S(＝O) 2R 2a或者-C(＝O)OC 1-6烷基；所述C 1-6烷基、-C(＝O)OC 1-6烷基或者C 1-6烷氧基任选地被1个或者多个选自卤素和氘的取代基取代；
    R 2a和R 2b各自独立地为H、C 1-6烷基或者3至5元环烷基，其中所述C 1-6烷基任选地进一步被1个或者多个选自OH、D、卤素、C 1-6烷基和C 1-6烷氧基的取代基取代；
    或者，R 2a和R 2b与其相连的原子一起形成5至6元杂环基，所述5至6元杂环基含有1、2或3个选自N、O和S的杂原子，所述5至6元杂环基任选地进一步被1个或者多个选自C 1-6烷基、OH和卤素的取代基取代；
    R 3为卤素或者C 1-6烷基，所述C 1-6烷基任选地进一步被1至3个选自D和卤素的取代基取代；
    m为0或者1；
    n为0、1或者2；
    x和y各自独立为1、2或者3；
    条件是，
    当
    Figure PCTCN2021087912-appb-100009
    R 0、R 2、R 3同时满足以下条件时，R 1不为
    Figure PCTCN2021087912-appb-100010
    或者
    Figure PCTCN2021087912-appb-100011
    Figure PCTCN2021087912-appb-100012
    为
    Figure PCTCN2021087912-appb-100013
    n为1，R 0为H或者甲基，R 2为甲氧基或者-S(＝O) 2Me，R 3为甲基。
  2. 根据权利要求1所述的化合物，或者其立体异构体、溶剂化物、代谢产物、前药、药学上可接受的盐或共晶，其中：
    R 1为
    Figure PCTCN2021087912-appb-100014
    Figure PCTCN2021087912-appb-100015
    Figure PCTCN2021087912-appb-100016
    或者
    Figure PCTCN2021087912-appb-100017
    R 1a为H或者C 1-6烷基；
    R 2为H、氰基、-C(＝O)NR 2aR 2b、C 1-6烷氧基、卤素、-S(＝O) 2R 2a或者-C(＝O)OC 1-6烷基；所述-C(＝O)OC 1-6烷基或者C 1-6烷氧基任选地被1个或者多个选自卤素和氘的取代基取代；
    R 2a和R 2b各自独立地为H、C 1-6烷基或者3至5元环烷基，其中所述C 1-6烷基任选地进一步被1个或者多个选自OH、D或者卤素的取代基取代；
    或者，R 2a和R 2b与其相连的原子一起形成5至6元杂环基，所述5至6元杂环基含有1至3个选自N、O和S的杂原子，所述杂环基任选地进一步被1个或者多个选自OH和卤素的取代基取代；
    R 3为卤素或者C 1-6烷基，所述C 1-6烷基任选进一步被1至3个选自D和卤素的取代基取代；
    m为0或者1；
    n为0、1或者2；
    条件是，
    当
    Figure PCTCN2021087912-appb-100018
    R 0、R 2、R 3同时满足以下条件时，R 1不为
    Figure PCTCN2021087912-appb-100019
    或者
    Figure PCTCN2021087912-appb-100020
    Figure PCTCN2021087912-appb-100021
    为
    Figure PCTCN2021087912-appb-100022
    n为1，R 0为H或者甲基，R 2为甲氧基或者-S(＝O) 2Me，R 3为甲基。
  3. 根据权利要求1所述的化合物，或者其立体异构体、溶剂化物、代谢产物、前药、药学上可接受的盐或共晶，其中：
    Figure PCTCN2021087912-appb-100023
    为
    Figure PCTCN2021087912-appb-100024
    或者
    Figure PCTCN2021087912-appb-100025
    R 0为H、C 1-4烷基或者环丙基，所述C 1-4烷基任选地进一步被1个或者多个选自卤素和D的取代基取代；
    R 1为
    Figure PCTCN2021087912-appb-100026
    Figure PCTCN2021087912-appb-100027
    或者
    Figure PCTCN2021087912-appb-100028
    R 1a为H、C 1-6烷基或者-C(＝O)C 1-6烷基；
    R 2为H、氰基、-C(＝O)NR 2aR 2b、C 1-6烷氧基、卤素、-S(＝O) 2R 2a或者-C(＝O)OC 1-6烷基；所述-C(＝O)O烷基或者C 1-6烷氧基任选地被1个或者多个选自卤素和氘的取代基取代；
    R 2a和R 2b各自独立地为H、C 1-6烷基或者3至5元环烷基，其中所述C 1-6烷基任选地进一步被1个或者多个选自OH、D和卤素的取代基取代；
    或者，R 2a和R 2b与其相连的原子一起形成5至6元杂环基，所述5至6元杂环基含有1至3个选自N、O和S的杂原子，所述5至6元杂环基还任选地进一步被1个或者多个选自OH和卤素的取代基取代；
    R 3为卤素或者C 1-6烷基，所述C 1-6烷基任选进一步被1至3个选自D和卤素的取代基取代；
    m为0或者1；
    n为0、1或者2；
    条件是，
    当
    Figure PCTCN2021087912-appb-100029
    R 0、R 2、R 3同时满足以下条件时，R 1不为
    Figure PCTCN2021087912-appb-100030
    或者
    Figure PCTCN2021087912-appb-100031
    当
    Figure PCTCN2021087912-appb-100032
    为
    Figure PCTCN2021087912-appb-100033
    n为1，R 0为H或者甲基，R 2为甲氧基或者-S(＝O) 2Me，R 3为甲基。
  4. 根据权利要求1所述的化合物，或者其立体异构体、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，其中该化合物为通式(II)的化合物：
    Figure PCTCN2021087912-appb-100034
    其中：
    R 0为H、C 1-6烷基或者环丙基，所述C 1-6烷基任选地进一步被1个或者多个选自卤素和氘的取代基取代；
    R 1为
    Figure PCTCN2021087912-appb-100035
    Figure PCTCN2021087912-appb-100036
    或者吡啶基，且R 1任选地进一步被1至2个选自D、卤素、氰基、羟基、C 1-6烷基和C 1-6烷氧基的取代基取代；
    R 1a为H或者C 1-6烷基；
    R 1b为H、OH、氰基或者羟基取代的C 1-6烷基；
    R 2c为H、氰基、卤素或者C 1-6烷氧基；
    R 2d为H、氰基、羧基、-C(＝O)NR 2aR 2b、C 1-6烷基、卤素、-S(＝O) 2R 2a或者-C(＝O)OC 1-6烷基；所述C 1-6烷基、-C(＝O)OC 1-6烷基任选地被1个或者多个选自卤素和氘的取代基取代；
    R 2a、R 2b为H、C 1-6烷基或者3至5元环烷基，其中所述C 1-6烷基任选地进一步被1个或者多个选自OH、D、卤素、C 1-6烷基和C 1-6烷氧基的取代基取代；
    或者，R 2a和R 2b与其相连的原子一起形成5至6元杂环基，所述5至6元杂环基含有1至3个选自N、O和S的杂原子，所述5至6元杂环基任选地进一步被1个或者多个选自C 1-6烷基、OH和卤素的取代基取代；
    R 3为卤素或者C 1-6烷基，所述C 1-6烷基任选地进一步被1至3个选自D和卤素的取代基取代；
    m为0或者1；
    n为0、1或者2；
    x和y各自独立为1、2或者3；
    条件是，
    当
    Figure PCTCN2021087912-appb-100037
    R 0、R 2、R 3同时满足以下条件时，R 1不为
    Figure PCTCN2021087912-appb-100038
    或者
    Figure PCTCN2021087912-appb-100039
    Figure PCTCN2021087912-appb-100040
    选自
    Figure PCTCN2021087912-appb-100041
    n为1，R 0为H或者甲基，R 2为甲氧基或者-S(＝O) 2Me，R 3为甲基。
  5. 根据权利要求4所述的化合物，或者其立体异构体、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，其中所述化合物为通式(III)的化合物：
    Figure PCTCN2021087912-appb-100042
    其中，
    R 0为H、C 1-6烷基或者环丙基，所述C 1-6烷基任选地进一步被1个或者多个选自卤素和氘的取代基取代；
    R 1为
    Figure PCTCN2021087912-appb-100043
    Figure PCTCN2021087912-appb-100044
    或者吡啶基，且R 1任选地进一步被1至2个选自D、卤素、氰基、羟基、C 1-6烷基和C 1-6烷氧基的取代基取代；
    R 1b为H、OH、氰基或者羟基取代的C 1-6烷基；
    R 2a和R 2b各自独立地为H、C 1-6烷基或者3至5元环烷基，其中所述C 1-6烷基任选地进一步被1个或者多个选自D或者卤素的取代基取代；
    或者，R 2a和R 2b与其相连的原子一起形成5至6元杂环基，所述5至6元杂环基含有1至3个选自N、O和S的杂原子，所述5至6元杂环基任选地进一步被1个或者多个选自C 1-6烷基、OH和卤素的取代基取代；
    R 2c为H、氰基、卤素或者C 1-6烷氧基，所述C 1-6烷氧基任选地被1个或者多个氘取代；
    R 3为卤素或者C 1-6烷基，所述C 1-6烷基任选地进一步被1至3个选自D和者卤素的取代基取代；
    m为0或者1；
    n为0、1或者2；
    x和y各自独立地为1、2或者3。
  6. 通式(IV)的化合物，或者其立体异构体、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶：
    Figure PCTCN2021087912-appb-100045
    其中：
    R 0为H、C 1-6烷基或者环丙基，所述C 1-6烷基任选地进一步被1个或者多个选自卤素和氘的取代基取代；
    R 1为-(CH) m-4至7元碳环基、-(CH) m-4至7元杂环基、-(CH) m-8至12元桥环、-(CH) m-7至12元螺环，所述-(CH) m-4至7元碳环基、-(CH) m-4至7元杂环基、-(CH) m-8至12元桥环或者-(CH) m-7至12元螺环任选地进一步被1个或者多个选自羟基、氰基、卤素、＝O、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基和羟基取代的C 1-6烷基的取代基取代。
  7. 根据权利要求6所述的化合物，或者其立体异构体、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，其中：
    R 0为H、C 1-6烷基或者环丙基，所述C 1-6烷基任选地进一步被1个或者多个选自卤素和氘的取代基取代；
    R 1为
    Figure PCTCN2021087912-appb-100046
    Figure PCTCN2021087912-appb-100047
    或者吡啶基，且R 1任选地进一步被1至2个选自D、卤素、氰基、羟基、C 1-6烷基和C 1-6烷氧基的取代基取代；
    R 1a为H或者C 1-6烷基；
    R 1b为H、OH、氰基或者羟基取代的C 1-6烷基；
    m为0或者1；
    x和y各自独立为1、2或者3。
  8. 根据权利要求7所述的化合物，或者其立体异构体、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶：
    R 0为C 1-4烷基，所述C 1-4烷基任选地进一步被1个或者多个选自卤素和氘的取代基取代；
    R 1为
    Figure PCTCN2021087912-appb-100048
    Figure PCTCN2021087912-appb-100049
    Figure PCTCN2021087912-appb-100050
    或者
    Figure PCTCN2021087912-appb-100051
  9. 根据权利要求1-8中任一项所述的化合物，或者其立体异构体、溶剂化物、代谢产物、前药、药学上可接受的盐或共晶，其中所述化合物为：
    Figure PCTCN2021087912-appb-100052
    Figure PCTCN2021087912-appb-100053
    Figure PCTCN2021087912-appb-100054
    Figure PCTCN2021087912-appb-100055
    Figure PCTCN2021087912-appb-100056
    或者
    Figure PCTCN2021087912-appb-100057
  10. 药物组合物，所述药物组合物包含：
    (1)权利要求1至9中任一项所述的化合物或其立体异构体、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐、共晶或者前药；
    (2)任选的一种或者多种其他活性成分；以及
    (3)药学上可接受的载体和/或赋形剂。
  11. 权利要求1-9任一项所述的化合物或其立体异构体、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐、共晶或前药或者权利要求10所述的药物组合物在制备用于治疗癌症的药物中的用途；优选地，所述用于治疗癌症的药物为DNA-PK抑制剂。
  12. 通式(I’)所示的化合物，或者其立体异构体、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶：
    Figure PCTCN2021087912-appb-100058
    其中：
    C选自苯基或者6元单环杂环基，所述的杂环基可以含有1至3个选自N的杂原子；
    R 0选自H、C 1-6烷基或者环丙基，所述的烷基任选进一步被1个或者多个选自卤素或者氘的取代基取代；
    R 1选自
    Figure PCTCN2021087912-appb-100059
    Figure PCTCN2021087912-appb-100060
    或者
    Figure PCTCN2021087912-appb-100061
    R 1a选自H、C 1-6烷基或者-C(＝O)C 1-6烷基；
    R 2选自氰基、羧基、-NR 2aR 2b、-C(＝O)NR 2aR 2b、C 1-6烷氧基、C 1-6烷基、卤素、-S(＝O) 2R 2a或者-C(＝O)OC 1-6烷基；所述的烷基或者烷氧基任选被1个或者多个选自卤素或者氘取代；
    R 2a、R 2b选自H、C 1-6烷基或者3至5元环烷基，其中所述的C 1-6烷基任选进一步被1个或者多个选自OH、D、卤素、C 1-6烷基或者C 1-6烷氧基的取代基取代；
    R 2a和R 2b可与其相连的原子形成5至6元的杂环，所述杂环可以含有1至3个选自N、O或者S的杂原子，所述的杂环还可以进一步被1个或者多个C 1-6烷基、OH或者卤素的取代基取代；
    R 3选自卤素或者C 1-6烷基，所述的烷基任选进一步被1至3个选自D或者卤素的取代基取代；
    选自0、1；
    n选自0、1或者2；
    条件是，C选自苯基或者6元单环杂环基，同时R 0选自H时，R 1不能为
    Figure PCTCN2021087912-appb-100062
    或者
    Figure PCTCN2021087912-appb-100063
  13. 根据权利要求12所述的化合物，或者其立体异构体、溶剂化物、代谢产物、前药、药学上可接受的盐或共晶，其中
    Figure PCTCN2021087912-appb-100064
    为
    Figure PCTCN2021087912-appb-100065
    或者
    Figure PCTCN2021087912-appb-100066
    R 0选自H、C 1-4烷基或者环丙基，所述的烷基任选进一步被1个或者多个选自卤素或者D的取代基取代；
    R 1选自
    Figure PCTCN2021087912-appb-100067
    Figure PCTCN2021087912-appb-100068
    或者
    Figure PCTCN2021087912-appb-100069
    R 1a选自H、C 1-6烷基或者-C(＝O)C 1-6烷基；
    R 2选自氰基、-C(＝O)NR 2aR 2b、C 1-6烷氧基、卤素、-S(＝O) 2R 2a或者-C(＝O)OC 1-6烷基；所述的烷基或者烷氧基任选被1个或者多个选自卤素或者氘取代；
    R 2a、R 2b选自H、C 1-6烷基或者3至5元环烷基，其中所述的C 1-6烷基任选进一步被1个或者多个选自OH、D或者卤素的取代基所取代；
    R 2a和R 2b可与其相连的原子形成5至6元的杂环，所述杂环可以含有1至3个选自N、O或者S的杂原子，所述的杂环还可以进一步被1个或者多个OH或者卤素的取代基所取代；
    R 3选自卤素或者C 1-6烷基，所述的烷基任选进一步被1至3个选自D或者卤素的取代基所取代；
    m选自0或者1；
    n选自0、1或者2；
    条件是，C选自苯基或者6元单环杂环基，同时R 0选自H时，R 1不能为
    Figure PCTCN2021087912-appb-100070
    或者
    Figure PCTCN2021087912-appb-100071
  14. 通式(I”)所示的化合物，或者其所有的立体异构体、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶：
    Figure PCTCN2021087912-appb-100072
    其中：
    C选自苯基或者6元单环杂环基，所述的杂环基可以含有1至3个选自N的杂原子；
    R 0选自H或者C 1-6烷基，所述的烷基任选进一步被1个或者多个选自卤素或者氘的取代基所取代；
    R 1选自
    Figure PCTCN2021087912-appb-100073
    或者
    Figure PCTCN2021087912-appb-100074
    R 2选自氰基、羧基、-NR 2aR 2b、-C(＝O)NR 2aR 2b、C 1-6烷氧基、C 1-6烷基、卤素、-S(＝O) 2R 2a或者-C(＝O)OC 1-6烷基；所述的烷基任选被1个或者多个选自卤素或者氘取代；
    R 2a、R 2b选自H、C 1-6烷基或者3至5元环烷基，其中所述的C 1-6烷基任选进一步被1个或者多个选自OH、卤素、C 1-6烷基或者C 1-6烷氧基的取代基所取代；
    R 2a和R 2b可与其相连的原子形成5至6元的杂环，所述杂环可以含有1至3个选自N、O或者S的杂原子，所述的杂环还可以进一步被1个或者多个C 1-6烷基或者卤 素的取代及所取代；
    R 3选自卤素或者C 1-6烷基，所述的烷基任选进一步被1至3个选自D或者卤素的取代基所取代；
    m选自0、1；
    n选自1或者2。
  15. 根据权利要求14所述的化合物，或者其立体异构体、溶剂化物、代谢产物、前药、药学上可接受的盐或共晶，其中：
    Figure PCTCN2021087912-appb-100075
    选自
    Figure PCTCN2021087912-appb-100076
    或者
    Figure PCTCN2021087912-appb-100077
    R 0选自H或者C 1-4烷基，所述的烷基任选进一步被1个或者多个选自卤素或者D的取代基所取代；
    R 1选自R 1选自
    Figure PCTCN2021087912-appb-100078
    或者
    Figure PCTCN2021087912-appb-100079
    R 2选自氰基、-C(＝O)NR 2aR 2b、C 1-6烷氧基、卤素、-S(＝O) 2R 2a或者-C(＝O)OC 1-6烷基；所述的烷基任选被1个或者多个选自卤素或者氘取代；
    R 2a、R 2b选自H、C 1-6烷基或者3至5元环烷基，其中所述的C 1-6烷基任选进一步被1个或者多个选自OH或者卤素的取代基所取代；
    R 2a和R 2b可与其相连的原子形成6元的杂环；
    R 3选自卤素或者C 1-6烷基，所述的烷基任选进一步被1至3个选自D或者卤素的取代基所取代；
    m选自0或者1；
    n选自1或者2。
  16. 根据权利要求14或15所述的化合物，或者其立体异构体、溶剂化物、代谢产物、前药、药学上可接受的盐或共晶，其中该化合物选自：
    Figure PCTCN2021087912-appb-100080
    Figure PCTCN2021087912-appb-100081
    Figure PCTCN2021087912-appb-100082
  17. 药物组合物，所述药物组合物包括：
    (1)权利要求14至16中任一项所述的化合物或其立体异构体、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐、共晶或者前药；
    (2)任选的一种或者多种其他活性成分；以及
    (3)药学上可接受的载体和/或赋形剂。
  18. 权利要求14-16中任一项所述的化合物或其立体异构体、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐、共晶或者前药、或者权利要求17所述的药物组合物在制备DNA-PK抑制剂中的用途。
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