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TWI675828B - 纖維母細胞生長因子受體抑制劑 - Google Patents

纖維母細胞生長因子受體抑制劑 Download PDF

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TWI675828B
TWI675828B TW103136870A TW103136870A TWI675828B TW I675828 B TWI675828 B TW I675828B TW 103136870 A TW103136870 A TW 103136870A TW 103136870 A TW103136870 A TW 103136870A TW I675828 B TWI675828 B TW I675828B
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尼爾 比富爾科
Neil Bifulco, Jr.
路西恩 迪彼得羅
Lucian V. Dipietro
布賴恩 霍道什
Brian L. Hodous
昌德拉塞卡 曼德拉
Chandrasekhar V. Miduturu
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美商藍印藥品公司
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Abstract

本文描述FGFR抑制劑、包含該等化合物之醫藥組合物及使用該等化合物及組合物抑制酪胺酸激酶活性之方法。

Description

纖維母細胞生長因子受體抑制劑 【優先權聲明】
本申請案主張2013年10月25日申請之U.S.S.N.61/895,472、2014年1月15日申請之U.S.S.N.61/927,782及2014年10月23日申請之PCT/2014/061974之優先權，該等專利特此以全文引用方式併入。
纖維母細胞生長因子受體4(FGFR-4)係人體內由FGFR-4基因編碼之蛋白質。此種蛋白質係纖維母細胞生長因子受體家族成員，其中在整個進化過程中各成員間之胺基酸序列高度保守。FGFR家族成員1-4彼此有不同的配體親和力及組織分佈。全長代表性蛋白質之組成為由三個疫球蛋白樣結構域組成之胞外區域、單個疏水性跨膜片段及細胞質酪胺酸激酶結構域。該蛋白質之胞外部分與纖維母細胞生長因子相互作用，引發下游信號級聯，最終影響有絲分裂及分化。FGFR-4基因之基因組組織包括18個外顯子。儘管已觀察到選擇性剪接，但沒有證據表明此種蛋白質C端之一半IgIII結構域在另三種形式(所指為FGFR 1-3)之間不同。
在經FGFR-1抑制劑治療之大鼠中已觀察到異位元礦化，其特徵在於在軟組織中不適當的鈣-磷沈積(Brown,AP等人(2005)，Toxicol.Pathol.，第449-455頁)。此表明，為了避免某些毒性，選擇性抑制FGFR-4而不抑制FGFR之其他同種型(包括FGFR-1)可能係合意的。FGFR-4優先結合纖維母細胞生長因子19(FGF19)且最近已與某些肉瘤、腎細胞癌、乳癌及肝癌之進展相關聯。
圖1係繪示經化合物27治療之組對抗裸小鼠中Hep3B異種移植腫瘤之生長抑制的圖形。
圖2係繪示在研究期期間內荷Hep3B裸小鼠之體重變化(%)的圖形。
本發明描述FGFR-4抑制劑。本發明進一步描述包含FGFR-4抑制劑之醫藥調配物。
在一態樣中，本發明特徵在於式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽：
Figure TWI675828B_D0001
其中彈頭(warhead)係能夠與親核劑形成共價鍵之部分；A係3-8員單環或雙環環烷基、或雜環基；R1、R2及R3中之每一者獨立地係鹵基、氰基、C1-6烷氧基、羥基、側氧基、胺基、醯胺基、磺醯基、磺醯胺基、酯、烷基脲、C1-6烷基、-C(O)O-、-C(O)-C1-6烷基、-C(O)-C1-6烷基胺基、C1-6雜烷基、雜環基或雜環基烷基，其中C1-6烷氧基、胺基、醯胺基、磺醯胺基、酯、烷基脲、C1-6烷基、C1-6雜烷基、雜環基或雜環基烷基中之每一者獨立地經0至5次出現之R4取代；各R4獨立地選自C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵基、羥基、側氧基、胺基、氰基、環烷基及雜環基；m為0-3； n為0-4；且p為0-2。
在另一態樣中，本發明特徵在於式II化合物或其醫藥學上可接受之鹽：
Figure TWI675828B_D0002
其中環A係3-6員環烷基或雜環基；R1獨立地係鹵基、氰基、C1-6烷氧基、羥基、側氧基、胺基、醯胺基、磺醯基、磺醯胺基、酯、烷基脲、C1-6烷基、-C(O)O-、-C(O)-C1-6烷基、-C(O)-C1-6烷基胺基或C1-6雜烷基；R2及R3中之每一者獨立地係鹵基或C1-6烷氧基；m為0-1；n為0-4；且p為0-1。
在一些實施例中，A係環丁基、環戊基、環己基、吡咯啶基、哌啶基、四氫呋喃基或四氫哌喃基。
在一些實施例中，R3係鹵基。
在本文所揭示化合物中，彈頭係與親核劑具有反應性(例如，能夠與親核劑形成共價鍵)之部分。彈頭之實例包括不限於烷基鹵化物、烷基磺酸鹽、雜芳基鹵化物、環氧化物、鹵代乙醯胺、馬來醯亞胺、磺酸酯、α-β不飽和酮、α-β不飽和酯、乙烯基碸、炔丙基醯胺、丙烯醯胺。在一些此等情況中，例如，丙烯醯胺及炔丙基醯胺，彈頭之N為上文所示式中之相鄰N。下文顯示示例性彈頭之結構：
Figure TWI675828B_D0003
其中X係離去基(諸如鹵基)或活化羥基部分(例如，三氟甲磺酸酯)；且Ra、Rb及Rc中之每一者獨立地係H、經取代或未經取代之C1-4烷基、經取代或未經取代之C1-4環烷基、或氰基。
在上文所示式中，彈頭通常連接至抑制劑之N原子。在其他實施例中，彈頭或者可連接至除N以外之原子。示例性彈頭之實例包括不限於，
Figure TWI675828B_D0004
彈頭之其他實例可參見例如WO 2010/028236及WO 2011/034907。
在某些實施例中，本發明FGFR-4抑制劑抑制FGFR-4活性比其抑制FGFR-1活性更有效。例如，本發明FGFR-4抑制劑可抑制FGFR-4活性比其抑制FGFR-1活性更有效至少10倍、至少50倍、至少100倍、至少200倍或至少500倍。
在一態樣中，藉由在相同類型分析中比較由本發明化合物引起之FGFR-1及FGFR-4之抑制來量測選擇性。在一實施例中，用於量測FGFR-1及FGFR-4之抑制之分析係任一本文所述分析。通常，以IC50(抑制50%酶活性之抑制劑濃度)表示抑制且因此由以下公式量測倍數選擇性：(IC50 FGFR-1)/(IC50 FGFR-4)。亦可使用同樣的量測法及計算法來量測高於FGFR-2及FGFR-3之選擇性。
可利用FGFR活性之任何其他分析來測定本發明化合物對 FGFR-1及FGFR-4之相對抑制，只要該等分析利用被熟習此項技術者視為在量測FGFR活性中相同參數者即可。
在另一態樣中，本發明特徵在於包含醫藥學上可接受之載體及本文所揭示化合物之醫藥組合物。
在另一態樣中，本發明特徵在於治療由FGFR-4介導之病況、以FGFR-4過表現為特徵之病況、以FGFR4擴增為特徵之病況、由FGF19介導之病況、以擴增之FGF-19為特徵之病況或以FGF19過表現為特徵之病況之方法，此等方法中之任一種皆包括向個體投予治療有效量之本文所揭示化合物
在另一態樣中，本發明特徵在於藉由向個體投予治療有效量之本文所揭示化合物治療以下任一病況之方法：肝細胞癌、乳癌、卵巢癌、肺癌、肝癌、肉瘤或高脂血症。
本發明包括上文及下文所述實施例之所有可能組合。
下文所揭示化合物可與FGFR4蛋白形成共價鍵；例如，該等化合物可與FGFR4之半胱胺酸殘基(例如，殘基552處之半胱胺酸)形成共價鍵。FGFR 1-3不含此半胱胺酸。因此，該化合物與FGFR4之間形成共價鍵之能力係本文所揭示化合物對FGFR4之選擇性之重要因素。
在以下描述中所述及或在圖式中所說明之組分之構建及佈置之細節並非意欲具有限制性。明確地包括實踐本發明之其他實施例及不同方式。此外，本文所用措辭及術語係出於描述目的，而不應視為限制性。在本文中使用之「包括(including,includes,include)」、「包含」或「具有」、「含有」、「包括(involving)」及其變化形式意欲涵蓋下文所列示之物項及其等效物以及其他物項。
定義
如本文所用之「脂族基團」係指直鏈、支鏈或環狀烴基且包括飽和及不飽和基團，諸如烷基、烯基及炔基。
如本文所用之「烯基」係指含有至少一個雙鍵之脂族基團。
如本文所用之「烷氧基(alkoxyl或alkoxy)」係指連接有氧基團之烷基。代表性烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、第三丁氧基及諸如此類。
「烷基」係指飽和直鏈或支鏈烴之單價基團，諸如1-12個、1-10個或1-6個碳原子之直鏈或支鏈基團，在本文中分別稱為C1-C12烷基、C1-C10烷基及C1-C6烷基。示例性烷基包括但不限於甲基、乙基、丙基、異丙基、2-甲基-1-丙基、2-甲基-2-丙基、2-甲基-1-丁基、3-甲基-1-丁基、2-甲基-3-丁基、2,2-二甲基-1-丙基、2-甲基-1-戊基、3-甲基-1-戊基、4-甲基-1-戊基、2-甲基-2-戊基、3-甲基-2-戊基、4-甲基-2-戊基、2,2-二甲基-1-丁基、3,3-二甲基-1-丁基、2-乙基-1-丁基、丁基、異丁基、第三丁基、戊基、異戊基、新戊基、己基、庚基、辛基等。
「伸烷基」係指烷基之二價基團，例如，-CH2-、-CH2CH2-及CH2CH2CH2-。
「炔基」係指含有2-12個碳原子之直鏈或支鏈烴鏈且特徵在於具有一或多個三鍵。炔基之實例包括但不限於乙炔基、炔丙基及3-己炔基。三鍵碳中之一者可視情況為炔基取代基之連接點。
「伸炔基」係指具有兩個連接點之炔基。例如，「伸乙炔基」表示基團-C≡C-。伸炔基亦可呈未經取代形式或具有一或多個取代基之經取代形式。
如本文所用之「烷硫基」係指連接有硫基團之烴基。在一些實施例中，「烷硫基」部分由-S-烷基、-S-烯基或-S-炔基中之一者表示。代表性烷硫基包括甲硫基、乙硫基及諸如此類。
如本文所用之「醯胺基」係指-C(=O)-N(R1)(R2)或-N(R1)-C(=O)-R2，其中R1及R2中之每一者係H、烷基、環烷基、烷氧基或羥基。
如本文所用之「胺基」係指-NH2、-NH(烷基)或-N(烷基)(烷基)
如本文所用之「擴增」意指在癌細胞中產生可能賦予生長或 存活優勢之基因或染色體片段之額外拷貝。
如本文所用之「芳基烷基」或「芳烷基」係指經芳基(例如，芳族或雜芳族基團)取代之烷基。芳烷基包括一個以上氫原子由芳基替代之基團。「芳基烷基」或「芳烷基」之實例包括苄基、2-苯基乙基、3-苯基丙基、9-茀基、二苯甲基及三苯甲基。
如本文所用之「芳基」係指可包括0至4個雜原子之5-、6-及7-員單環芳族基團，例如，苯基、吡咯基、呋喃基、苯硫基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嗒嗪基及嘧啶基、及諸如此類。在環結構中具有雜原子之彼等芳基亦可稱為「芳基雜環」或「雜芳族基團」。芳族環可在一或多個環位置處經諸如上文所述取代基(例如，鹵素、疊氮基、烷基、芳烷基、烯基、炔基、環烷基、多環基、羥基、烷氧基、胺基、硝基、巰基、亞胺基、醯胺基、磷酸酯基、膦酸酯基、亞膦酸酯基、羰基、羧基、矽基、醚基、烷硫基、磺醯基、磺醯胺基、酮、醛、酯、雜環基、芳族或雜芳族部分、-CF3、-CN或諸如此類)取代。術語「芳基」亦包括具有兩個或更多個環狀環之多環環系統，其中兩個相鄰環共用兩個或更多個碳(該等環係「稠環」)，其中該等環中至少一個為芳族，例如，其他環狀環可為環烷基、環烯基、環炔基、芳基及/或雜環基。各環可含有(例如)5-7個成員。
如本文所用之「碳環環系統」係指單環、雙環或多環烴環系統，其中各環係完全飽和的或含有一或多個不飽和單元，但其中沒有環係芳族的。
如本文所用之「碳環基」係指碳環環系統之單價基團。代表性碳環基包括環烷基(例如，環戊基、環丁基、環戊基、環己基及諸如此類)及環烯基(例如，環戊烯基、環己烯基、環戊二烯基及諸如此類)。
如本文所用之「環烷基」係指具有3個至12個碳之環狀、雙環、三環或多環非芳族烴基。任一可取代之環原子皆可經取代(例如，經一或多個取代基取代)。環烷基可含有稠環或螺環。稠環係共用共用碳原子之環。環烷基部分之實例包括但不限於環丙基、環己基、甲基環己基、金剛烷基及降莰基。
如本文所用之「環烷基烷基」係指-(環烷基)-烷基，其中環烷基及烷基係如本文所揭示。「環烷基烷基」係經由環烷基鍵合至母體分子結構。
如本文所用之「氰基」係指-CN。
如本文所用之「共價抑制劑」意指可與蛋白質形成共價鍵之抑制劑。
如本文所用之「酯基」係指-C(=O)-O(R1)或-O-C(=O)-R1，其中R1係H或烷基。
「FGFR-4」或「FGFR-4蛋白」係指任何形式之FGFR-4蛋白，包括野生型及所有變體形式(包括不限於突變體形式及剪接變體)。
FGFR-4蛋白係FGFR-4基因之產物，且因此FGFR-4蛋白包括由任何形式之FGFR-4基因(包括所有畸變，例如，點突變、插入/缺失、易位融合及局灶性擴增)編碼之任何蛋白質。
「雜芳族環系統」為業內公認且係指單環、雙環或多環環系統，其中至少一個環即為芳族並且包含至少一個雜原子(例如，N、O或S)；且其中沒有其他環為雜環基(如下文所定義)。在某些情況中，為芳族且包含雜原子之環在該環中含有1個、2個、3個或4個環雜原子。
「雜芳基」係指雜芳族環系統之單價基團。代表性雜芳基包括環系統，其中(i)各環包含雜原子且為芳族，例如，咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、吡咯基、呋喃基、苯硫基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嗒嗪基、嘧啶基、吲嗪基、嘌呤基、萘啶基、吡啶并[2,3-d]嘧啶及蝶啶基；(ii)各環為芳族或碳環基，至少一個芳族環包含雜原子且至少一個其他環為烴環或例如，吲哚基、異吲哚基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、二苯并呋喃基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、喹啉基、異喹啉基、噌啉基、呔嗪基、喹唑啉基、喹喏啉基、咔唑基、吖啶基、啡嗪基、啡噻嗪基、啡噁嗪基、吡啶并[2,3-b]-1,4-噁嗪-3-(4H)-酮、5,6,7,8-四氫喹啉基及5,6,7,8-四氫異喹啉基；且(iii)各環為芳族或碳環基且至少一個芳族環與另一芳族環共用橋頭雜原子，例如，4H-喹嗪基。
「雜環系統」係指其中至少一個環係飽和或部分不飽和的 (但不為芳族)且包含至少一個雜原子之單環、雙環及多環環系統。雜環系統可在任何產生穩定結構之雜原子或碳原子處連接至其側基且該等環原子中之任一者皆可視情況經取代。
「雜環基」係指雜環系統之單價基團。代表性雜環基包括環系統，其中(i)每個環為非芳族且至少一個環包含雜原子，例如，四氫呋喃基、四氫哌喃基、四氫噻吩基、吡咯啶基、哌喃基、噻烷基、吡咯啶酮基、哌啶基、吡咯啉基、十氫喹啉基、噁唑啶基、哌嗪基、二氧雜環己基、二氧雜環戊基、二氮雜環庚三烯基、氧雜氮雜環庚三烯基、硫雜氮雜環庚三烯基、嗎啉基及奎寧環基；(ii)至少一個環為非芳族且包含雜原子並且至少一個其他環為芳族碳環，例如，1,2,3,4-四氫喹啉基、1,2,3,4-四氫異喹啉基；且(iii)至少一個環為非芳族且包含雜原子並且至少一個其他環為芳族且包含雜原子，例如，3,4-二氫-1H-哌喃并[4,3-c]吡啶及1,2,3,4-四氫-2,6-萘啶。在一些實施例中，雜環基可包括：
Figure TWI675828B_D0005
如本文所用之「雜環基烷基」係指經雜環基取代之烷基。
如本文所用之「雜芳基烷基」係指經雜芳基取代之烷基。
如本文所用之「羥基(Hydroxy或hydroxyl)」係指-OH。
如本文所用之「抑制劑」係指抑制酶而使(例如)在生物化學分析中可觀察到到酶活性降低之化合物。在某些實施例中，抑制劑具有小於約1μM、小於約500nM、小於約250nM、小於約100nM、小於約50nM或小於約10nM之IC50。FGFR-4抑制劑係指抑制FGFR-4之化合物。
如本文所用之「硝基」係指-NO2。
如本文所用之「親核劑」係指向親電體供給電子對以在反應中形成化學鍵之物質。在一些實施例中，親核劑可為氧親核劑，例如，水或羥基；氮親核劑，例如，胺；或硫親核劑，例如，氫硫基，諸如，例如，半胱胺酸殘基側鏈中之氫硫基。
如本文所用之「過表現」意指樣品中基因產物之產量顯著高於在對照樣品群體(例如正常組織)中所觀察到之產量。
「選擇性」係指化合物抑制靶蛋白(例如，FGFR-4)之活性比其抑制其他蛋白質之活性更有效。在此情況中，同種型FGFR-1、FGFR-2、FGFR-3及FGFR-4全部被視為不同的蛋白質。在一些實施例中，化合物可抑制靶蛋白(例如，FGFR-4)之活性比其抑制非靶蛋白之活性更有效至少1.5倍、至少2倍、至少5倍、至少10倍、至少20倍、至少30倍、至少40倍、至少50倍、至少60倍、至少70倍、至少80倍、至少90倍、至少100倍、至少200倍、至少500倍、或至少1000倍或更多倍。
無論前面是否冠以術語「視情況」，「經取代」在本文中係指主鏈一或多個碳上之氫由取代基替代之部分。應理解「取代」或「經......取代」包括隱含的條件為，該取代係按照經取代原子及取代基之允許化合價，且取代產生穩定化合物，例如，其不自發進行轉變，諸如藉由重排、環化、消除等。如本文所用，預計術語「經取代」包括有機化合物所有可允許之取代基。在一廣泛態樣中，可允許之取代基包括有機化合物之非環狀及環狀、支鏈及無支鏈、碳環及雜環、芳族及非芳族取代基。對於適當有機化合物，可允許之取代基可為一或多個且為相同的或不同的。出於本發明之目的，雜原子諸如氮可具有氫取代基及/或本文所述之有機化合物任何可允許之取代基，其滿足雜原子之化合價。取代基可包括本文所述任何取代基，例如，鹵素、羥基、羰基(諸如羧基、烷氧基羰基、甲醯基或醯基)、硫羰基(諸如硫酯基、硫代乙酸酯基或硫代甲酸酯基)、烷氧基、磷醯基、磷酸酯基、膦酸酯基、亞膦酸酯基、胺基、醯胺基、脒基、亞胺基、氰基、硝基、疊氮基、巰基、烷硫基、硫酸酯基、磺酸酯基、胺磺醯基、磺醯胺基、磺醯基、雜環基、芳烷基或芳族或雜芳族部分。熟習此項技術者應理解，在烴鏈上經取代之部分自身可視需要經取代。例如，經取代烷基之取代基可包括經 取代及未經取代形式之胺基、疊氮基、亞胺基、醯胺基、磷醯基(包括膦酸酯基及亞膦酸酯基)、磺醯基(包括硫酸酯基、磺醯胺基、胺磺醯基及磺酸酯基)及矽基、以及醚、烷硫基、羰基類(包括酮、醛、羧化物及酯)、-CF3、-CN及諸如此類。下文描述示例性經取代烷基。環烷基可進一步經烷基、烯基、烷氧基、烷硫基、胺基烷基、經羰基取代之烷基、-CF3、-CN及諸如此類取代。烯基及炔基可進行類似取代而產生(例如)胺基烯基、胺基炔基、醯胺基烯基、醯胺基炔基、亞胺基烯基、亞胺基炔基、硫烯基、硫炔基、經羰基取代之烯基或炔基。
如本文所用，各表達(例如，烷基、m、n等)之定義在任何結構中出現不止一次時，意欲獨立於其在同一結構中別處之定義。
如本文所用之「磺醯基」係指-SO2-。
如本文所用之「磺醯胺基」係指-S(=O)-N(R1)(R2)或-N(R1)-S(=O)-R2，其中R1及R2中之每一者獨立地為H或烷基。
「彈頭部分」或「彈頭」係指抑制劑中可逆地或不可逆地參與供體(例如，蛋白質)與受質之反應的部分。彈頭可(例如)與蛋白質形成共價鍵，或可生成穩定過渡態，或係可逆或不可逆烷基化劑。例如，彈頭部分可為抑制劑上可參與鍵形成反應之官能基，其中在彈頭之一部分與供體(例如蛋白質之胺基酸殘基)之間形成新的共價鍵。彈頭係親電體且「供體」係親核劑，諸如半胱胺酸殘基側鏈。適宜彈頭之實例包括不限於下文所示基團：
Figure TWI675828B_D0006
其中X係離去基(諸如鹵基)或活化羥基部分(例如，三氟甲磺酸酯)；且Ra、Rb及Rc中之每一者獨立地係H、經取代或未經取代之C1-4烷基、經取代或未經取代之C1-4環烷基、或氰基。
本文所述化合物可在一或多個構成該等化合物之原子處含有非天然比例之原子同位素。例如，該等化合物可用放射性同位素(諸如例如氚(3H)或碳-14(14C))進行放射性標記。本文所揭示化合物之所有同位素變化形式(無論是否具放射性)均意欲涵蓋在本發明之範疇內。例如，氘化化合物或含有13C之化合物意欲涵蓋在本發明之範疇內。
某些化合物可以不同互變異構形式存在，且所有本文所述化合物之所有可能之互變異構形式均意欲涵蓋在本發明之範疇內。
組合物之「鏡像異構過量」或「鏡像異構過量%」可使用下文所示公式計算。在下文所示實例中，組合物含有90%一種鏡像異構物(例如，S-鏡像異構物)及10%另一種鏡像異構物(即，R-鏡像異構物)。
ee=(90-10)/100=80%。
因此，含有90%一種鏡像異構物及10%另一種鏡像異構物之組合物稱為具有80%鏡像異構過量。一些本文所述組合物含有鏡像異構過量為至少50%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或至少99%之化合物1(S-鏡像異構物)。換言之，該等組合物含有相比於R-鏡像異構物鏡像異構過量之S-鏡像異構物。
除非另有說明，否則本文所繪示結構亦意欲包括該結構之所有異構(例如，鏡像異構、非鏡像異構及幾何(或構象))形式；例如，R及S組態(針對每個不對稱中心而言)、Z及E雙鍵異構物以及Z及E構象異構物。因此，本發明化合物之單一立體化學異構物以及鏡像異構、非鏡像異構及幾何(或構象)混合物在本發明之範疇內。除非另有說明，否則本發明化合物之所有互變異構形式均在本發明之範疇內。
本文所述化合物可作為游離鹼或作為鹽使用。代表性鹽包括氫溴酸鹽、鹽酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、乙酸鹽、戊酸鹽、油酸鹽、棕櫚酸鹽、硬脂酸鹽、月桂酸鹽、苯甲酸鹽、乳酸鹽、磷酸鹽、甲苯磺酸鹽、檸檬酸鹽、馬來酸鹽、延胡索酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、萘甲酸鹽、甲磺酸鹽、葡庚糖酸鹽、乳糖酸鹽及月桂基磺酸鹽及諸如此類。(參見，例如，Berge等人(1977)「Pharmaceutical Salts」,J.Pharm.Sci.66：1-19.)
本文所揭示之某些化合物可以非溶劑化形式以及溶劑化形式(包括水合形式)存在。一般而言，溶劑化形式等效於非溶劑化形式且涵蓋於本發明之範疇內。本文所揭示之某些化合物可以多重結晶或非晶形形式存在。一般而言，所有實體形式對於本發明所涵蓋之用途均係等效的且意欲在本發明之範疇內。
醫藥組合物
儘管本文所揭示之合物能夠單獨投予，但該化合物較佳作為醫藥調配物投予，其中該化合物係與一或多種醫藥學上可接受之賦形劑或載體組合。本文所揭示化合物可經調配而以任何便利方式投予以用於人類或獸醫醫療。在某些實施例中，醫藥製劑中所包括之化合物自身可具活性，或可為例如能夠在生理環境中轉化成活性化合物的前藥。在某些實施例中，本文所提供之化合物包括其水合物。
本文所用片語「醫藥學上可接受」係指在合理醫學判斷範圍內適合用於接觸人類及動物之組織而無過度毒性、刺激、過敏反應或其他問題或併發症，與合理之益處/風險比相當之彼等化合物、物質、組合物及/或劑型。
本文所述化合物之醫藥學上可接受之鹽之實例包括自醫藥學上可接受之無機及有機酸及鹼衍生之彼等。適宜酸式鹽之實例包括乙酸鹽、己二酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、甲酸鹽、延胡索酸鹽、羥乙酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、棕櫚酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽及十一烷酸鹽。自適當鹼衍生之鹽包括鹼金屬(例如鈉)鹽、鹼土金屬(例如鎂)鹽、銨鹽及N-(烷基)4 +鹽。本發明亦構思本文所述化合物之任何鹼性含氮基團之四級銨化。可藉由該四級銨化獲得水或油溶性或可分散產物。
醫藥學上可接受之載體之實例包括：(1)糖類，諸如乳糖、葡萄糖及蔗糖；(2)澱粉類，諸如玉米澱粉及馬鈴薯澱粉；(3)纖維素及其衍生物，諸如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素及乙酸纖維素；(4)粉狀黃蓍膠； (5)麥芽；(6)明膠；(7)滑石；(8)賦形劑，諸如可哥脂及栓劑蠟；(9)油類，諸如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油及大豆油；(10)二醇類，諸如丙二醇；(11)多元醇，諸如甘油、山梨醇、甘露醇及聚乙二醇；(12)酯類，諸如油酸乙酯及月桂酸乙酯；(13)瓊脂；(14)緩衝劑，諸如氫氧化鎂及氫氧化鋁；(15)藻酸；(16)無熱原水；(17)等滲鹽水；(18)林格氏溶液(Ringer's solution)；(19)乙醇；(20)磷酸鹽緩衝溶液；(21)環糊精，諸如Captisol®；連接於奈米粒子之靶向配體，諸如AccurinsTM；及(22)用於醫藥調配物中之其他無毒相容物質，諸如基於聚合物之組合物。
醫藥學上可接受之抗氧化劑之實例包括：(1)水溶性抗氧化劑，諸如抗壞血酸、半胱胺酸鹽酸鹽、硫酸氫鈉、偏亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉及諸如此類；(2)油溶性抗氧化劑，諸如抗壞血酸棕櫚酸酯、丁基化羥基苯甲醚(BHA)、丁基化羥甲苯(BHT)、卵磷脂、五倍子酸丙酯、α-生育酚及諸如此類；及(3)金屬螯合劑，諸如檸檬酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、山梨醇、酒石酸、磷酸及諸如此類。
固體劑型(例如，膠囊、錠劑、丸劑、糖衣丸、散劑、顆粒劑及諸如此類)可包括一或多種醫藥學上可接受之載體，諸如檸檬酸鈉或磷酸二鈣，及/或以下中之任一者：(1)填充劑或增量劑，諸如澱粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇及/或矽酸；(2)黏合劑，諸如，例如，羧甲基纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯基吡咯啶酮、蔗糖及/或阿拉伯膠；(3)保濕劑，諸如甘油；(4)崩解劑，諸如瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯澱粉、藻酸、某些矽酸鹽及碳酸鈉；(5)溶液阻滯劑，諸如石蠟；(6)吸收促進劑，諸如四級銨化合物；(7)潤濕劑，諸如，例如，鯨蠟醇及甘油單硬脂酸酯；(8)吸收劑，諸如高嶺土及膨潤土；(9)潤滑劑，例如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、月桂基硫酸鈉及其混合物；及(10)著色劑。
液體劑型可包括醫藥學上可接受之乳液、微乳液、溶液、懸浮液、糖漿及酏劑。除活性成分以外，液體劑型可含有業內常用惰性稀釋劑(諸如，例如，水或其他溶劑)、增溶劑及乳化劑(諸如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、油類(具體而言，棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄欖油、蓖麻油及芝麻油)、甘 油、四氫呋喃甲醇、聚乙二醇及去水山梨醇之脂肪酸酯、以及其混合物)。
除活性化合物以外，懸浮液可含有懸浮劑，如例如乙氧基化異硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇及去水山梨醇酯、微晶纖維素、偏氫氧化鋁、膨潤土、瓊脂及黃蓍膠、以及其混合物。
除活性化合物以外，軟膏劑、糊劑、乳霜及凝膠可含有賦形劑，諸如動物及植物脂肪、油類、蠟、石蠟、澱粉、黃蓍膠、纖維素衍生物、聚乙二醇、聚矽氧、膨潤土、矽酸、滑石及氧化鋅、或其混合物。
除活性化合物以外，散劑及噴霧劑可含有賦形劑，諸如乳糖、滑石、矽酸、氫氧化鋁、矽酸鈣及聚醯胺粉末、或該等物質之混合物。 噴霧劑另外可含有常規推進劑(諸如氯氟烴)及揮發性未經取代之烴(諸如丁烷及丙烷)。
該等調配物可方便地以單位劑型呈遞且可藉由藥劑學領域熟知之任何方法來製備。可與載體材料組合以產生單一劑型之活性成分之量將端視待治療宿主、具體投予模式而變。可與載體材料組合以產生單一劑型之活性成分之量將通常為該化合物產生療效之量。
用於局部或經皮投予之本發明化合物之劑型包括散劑、噴霧劑、軟膏劑、糊劑、乳霜、洗劑、凝膠劑、溶液劑、貼劑及吸入劑。該活性化合物可在無菌條件下與醫藥學上可接受之載體並且與可能需要之任何防腐劑、緩衝劑或推進劑混合。
當本文所揭示化合物作為藥物投予給人類及動物時，其可本身或作為含有(例如)0.1%至99.5%(更佳地，0.5%至90%)之活性成分與醫藥學上可接受之載體之組合之醫藥組合物給予。
該等調配物可局部、經口、經皮、直腸、陰道、腸胃外、鼻內、肺內、眼內、靜脈內、肌內、動脈內、鞘內、囊內、皮內、腹膜內、皮下、表皮下或藉由吸入而投予。
適應症
FGFR-4在肝細胞癌(HCC)進展期間調控增殖、存活及α-胎蛋白分泌；FGFR-4抑制劑因此係用於此未滿足醫療需要之有希望的潛在治療劑(Ho等人，Journal of Hepatology,2009,50：118-27)。HCC每年折磨全世 界超過550,000人且係任何癌症類型中1年存活率最差者之一。
經由FGF19(纖維母細胞生長因子(FGF)家族成員，其由激素組成)參與調控血糖、血脂及能量穩態顯示了FGFR-4與HCC間之聯繫之其他證據。已在FGF19基因轉殖小鼠中觀察到增加之肝細胞增殖及肝腫瘤形成。FGF19活化FGFR-4(其在肝中之主要受體)，且鹹信FGFR-4活化係FGF19能夠增加肝細胞增殖並誘導肝細胞癌形成之機制(Wu等人，J Biol Chem(2010)285(8)：5165-5170)。FGF19亦已被他人識別為HCC中之驅動基因(Sawey等人，Cancer Cell(2011)19：347-358)。因此，咸信本文所揭示化合物(其係FGFR-4之潛在及選擇性抑制劑)可用於治療HCC及其他肝癌。
腫瘤基因組篩查已在人類乳癌細胞系MDA-MB-453中鑒定出活化纖維母細胞生長因子受體4(FGFR-4)Y367C突變。因此，其已表明FGFR-4可能為乳癌中腫瘤生長之驅動物(Roidl等人，Oncogene(2010)29(10)：1543-1552)。因此，咸信本文所揭示化合物(其為FGFR-4之強效選擇性抑制劑)可用於治療FGFR-4調節之乳癌。
FGFR-4上游基因之分子變化(例如，易位)會導致FGFR-4活化/過表現。例如，PAX3-FKHR易位/基因融合會導致FGFR-4過表現。 因此機制所致之FGFR-4過表現與橫紋肌肉瘤(RMS)相關聯(Cao等人，Cancer Res(2010)70(16)：6497-6508)。FGFR-4自身中之突變(例如，激酶結構域突變)會導致蛋白質過活化；此機制已與RMS亞族群相關(Taylor等人，J Clin Invest(2009)119：3395-3407)。因此，咸信本文所揭示化合物(其為FGFR-4之強效選擇性抑制劑)可用於治療FGFR-4調節之RMS及其他肉瘤。
其他疾病與FGFR-4上游基因之變化或與FGFR-4自身中之突變相關聯。例如，FGFR-4之激酶結構域中之突變導致過活化，其與肺腺癌相關(Ding等人，Nature(2008)455(7216)：1069-1075)。FGFR-4之擴增與諸如腎細胞癌之病況相關(TCGA暫行資料)。另外，使FGFR4沉默且抑制配體-受體結合顯著減慢卵巢腫瘤生長，從而表明FGFR4之抑制劑可用於治療卵巢癌。(Zaid等人，Clin.Cancer Res.(2013)809)。
膽汁酸水準之致病性升高與FGF19水準變化相關(Vergnes等人，Cell Metabolism(2013)17,916-28)。因此，FGF19之水準降低在促進 膽汁酸之合成中且因此在高脂血症之治療中可具有益處。
劑量水準
可改變本發明醫藥組合物中活性成分之實際劑量水準以獲得有效達成具體患者之預期治療反應、組成及投予模式且對患者無毒之活性成分的量。
所選劑量水準將取決於多種因素，包括所用本文所揭示具體化合物或其酯、鹽或醯胺之活性、投予途徑、投予時間、所用具體化合物之排泄率、治療持續時間、其他藥物、與所用具體化合物組合使用之化合物及/或物質、患者之年齡、性別、體重、病況、一般健康狀況及所治療患者之既往病史及醫學領域中熟知之類似因素。
此項技術中之普通醫師或獸醫可容易地確定並開予所需醫藥組合物之有效量。例如，醫師或獸醫可以低於所需劑量之水準開始用於醫藥組合物中之本發明化合物之給藥以達成預期療效並逐漸增加劑量直至達成期望效果。
一般而言，本發明化合物之適宜日劑量將為該化合物有效產生療效之最低劑量的量。此有效劑量將通常取決於上文所述因素。通常，用於患者之本發明化合物之劑量將在每天每千克體重約0.0001mg至約100mg。例如，劑量可每天介於10mg與2000mg之間。或者，劑量可介於每天100mg與1000mg之間，或介於每天200mg與600mg之間。若需要，活性化合物之有效日劑量可按一個、兩個、三個、四個、五個、六個或更多個單獨投予之次劑量在全天中以適當間隔投予，視情況以單位劑型投予。
組合及靶向療法
本文所揭示之FGFR-4抑制劑可與其他癌症治療組合投予。例如，該等抑制劑可與手術治療、放射或其他治療劑(諸如抗體)、其他選擇性激酶抑制劑或化學治療劑組合投予。該等抑制劑亦可與RNAi療法或反義療法組合投予。本文所述FGFR-4抑制劑可與一種、兩種或更多種其他治療劑組合。在下文所概述之實例中，應理解，「第二治療劑」亦包括一種以上除FGFR-4抑制劑以外之治療劑。本文所述FGFR-4抑制劑可與一種、兩種或更多種其他治療劑一起投予。
本文所述FGFR-4抑制劑及第二治療劑不必於同一醫藥組合物中投予，且由於不同的物理及化學特性可藉由不同途徑投予。例如，FGFR-4抑制劑可經口投予，而第二治療劑為靜脈內投予。投予模式及投予合理性之確定(若可能，以同一醫藥組合物)完全在熟練臨床醫師之知識範圍內。可根據業內已知所建立方案進行初始投予，且然後熟練臨床醫師可基於所觀察到之效果改變劑量、投予模式及投予時間。
FGFR-4抑制劑及第二治療劑可同時投予(例如，同時，基本上同時或在同一治療方案內)或相繼(即，一個接著另一個，以其間之任意時間間隔)，此取決於增殖性疾病之性質、患者病況及實際選擇之待投予之第二治療劑。
另外，本文所揭示FGFR-4抑制劑可作為抗體-藥物偶聯物之一部分投予，其中FGFR-4抑制劑係偶聯物之「有效載荷」部分。
化合物
下表顯示本文所述化合物之結構。
合成
本發明化合物(包括其鹽及N-氧化物)可使用已知有機合成技術來製備，且可按照多種可能合成途徑中之任一種(諸如下文方案中之彼等)來合成。用於製備本發明化合物之反應可在合適之溶劑中進行，有機合成領域之技術人員可容易地選擇該等溶劑。合適之溶劑可在進行反應之溫度(例如，在溶劑結凍溫度至溶劑沸點溫度範圍內之溫度)下與起始物質(反應物)、中間體或產物實質上不反應。既定反應可在一種溶劑或一種以上溶劑之混合物中進行。技術人員可端視具體反應步驟來選擇適用於具體反應步驟之溶劑。
本發明化合物之製備可涉及不同化學基團之保護及去保護。熟習此項技術者可容易地判定是否需要保護及脫保護以及適當保護基之選擇。保護基之化學性質可參見例如Wuts及Greene，Protective Groups in Organic Synthesis，第4版，John Wiley & Sons：New Jersey,(2006)，其以全文引用方式併入本文中。
可按照業內已知任何合適之方法來監測反應。例如，可藉由光譜手段(諸如核磁共振(NMR)光譜法(例如1H或13C)、紅外(IR)光譜法、分光光度法(例如，UV-可見光)、質譜(MS))或藉由層析方法(諸如高效液相層析(HPLC)或薄層層析(TLC))來監測產物形成。用於化合物表徵之分析儀器及方法： LC-MS：除非另有說明，否則所有液相層析-質譜(LC-MS)資料(所分析樣品之純度及身份)均係利用Agilent 1260型LC系統在22.4攝氏度下獲得，該系統使用Agilent 6120型質譜儀利用ES-API電離並配備有Agilent Poroshel 120(EC-C18，粒徑為2.7μm，尺寸為3.0×50mm)反相管柱。流動相由溶劑含0.1%甲酸之水及含0.1%甲酸之乙腈之混合物組成。利用在4分鐘期間內自95%水性流動相/5%有機流動相至5%水性流動相/95%有機流動相之恆定梯度。流速恆定在1mL/min。
Prep LC-MS：製備型HPLC係在配備有Luna 5u C18(2)100A，經AXIA裝填，250×21.2mm反相管柱之Shimadzu Discovery VP®製備型系統上在22.4攝氏度下進行。流動相由溶劑含0.1%甲酸之水及含 0.1%甲酸之乙腈之混合物組成。利用在25分鐘期間內自95%水性流動相/5%有機流動相至5%水性流動相/95%有機流動相之恆定梯度。流速恆定在20mL/min。在微波爐中進行之反應如此在Biotage Initiator微波單元中進行。
矽膠層析：矽膠層析法係在Teledyne Isco CombiFlash® Rf單元或Biotage® Isolera Four單元上進行。
質子NMR：除非另有說明，所有1H NMR光譜均係利用Varian 400MHz Unity Inova 400MHz NMR儀器(採集時間=3.5秒且有1秒延遲；16次至64次掃描)獲得。表徵時，所有質子均係在DMSO-d6溶劑中按相對於殘留DMSO(2.50ppm)之每百萬份數(ppm)報告。
實例
以下實例意欲為說明性的，且並非意謂以任何方式進行限制。
下文方案意欲結合製備本發明化合物來提供一般指導。熟習此項技術者應理解，可使用有機化學之一般常識對方案中所示製備加以修改或優化來製備本發明各化合物。
合成方案1
Figure TWI675828B_D0033
可在親核芳族取代反應條件下使用鹼諸如二異丙基乙胺(DIPEA)或三乙胺(TEA)在極性溶劑諸如二噁烷中使6-溴-2-氯喹唑啉經1,2-單保護之環烷基二胺取代以提供經二胺取代之喹唑啉。可經由鈀介導之偶合反應(例如，鈴木(Suzuki)、斯蒂爾(Stille)、根岸(Negishi)偶合)使6-溴喹唑啉與硼、錫或鋅之芳基、雜芳基試劑偶合，以提供中間體，隨後對其去保 護以暴露胺。可使用醯胺偶合反應條件使環烷烴上之胺與丙炔酸反應或與丙烯醯氯反應以製備丙烯醯胺.如下文所示，使用合成方案1來製備化合物(2)及(6)。
實例1：N-((1S,1R)-2-((6-(2,6,-二氟-3-甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環戊基)丙炔醯胺(化合物2)之合成
Figure TWI675828B_D0034
步驟1：((1S,2R)-2-((6-溴喹唑啉-2-基)胺基)環戊基)胺甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0035
將((1S,2R)-2-((6-溴喹唑啉-2-基)胺基)環戊基)胺甲酸第三丁酯(25mg,0.06mmol)、(2,6-二氟-3-甲氧基苯基)硼酸(24mg,0.12mmol)、雙(二-第三丁基(4-二甲基胺基苯基)膦)二氯鈀(II)(3mg,0.003mmol)及磷酸鉀(40mg,0.19mmol)於1,4-二噁烷/水(1mL/0.2mL)中之混合物以氮氣脫氣5min且在100℃及微波下攪拌30min。將反應混合物冷卻至室溫，以乙酸乙 酯稀釋，以飽和氯化銨溶液洗滌且以硫酸鈉乾燥。藉由矽膠管柱層析來純化殘餘物以提供((1S,2R)-2-((6-(2,6-二氟-3-甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環戊基)胺甲酸第三丁酯(21mg,37%)。MS(ES+)C26H30N4O5要求值：470，實驗值：471[M+H]+。
步驟3：(1R,2S)-N1-(6-(2,6-二氟-3-甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)環戊烷-1,2-二胺之合成
Figure TWI675828B_D0036
將((1S,2R)-2-((6-(2,6-二氟-3-甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環戊基)胺甲酸第三丁酯(21mg,0.045mmol)及含4M HCl之二噁烷(0.5mL)於二氯甲烷(1mL)中之混合物在室溫下攪拌16h。LC-MS指示起始物質完全耗盡。濃縮反應混合物且未經進一步純化即用於下一步驟。
步驟4：N-((1S,2R)-2-((6-(2,6-二氟-3-甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環戊基)丙炔醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0037
將(1R,2S)-N1-(6-(2,6-二氟-3-甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)環戊烷-1,2-二胺(0.045mmol)、丙炔酸(0.004mL,0.067mmol)、HATU(25mg,0.067mmol)及DIEA(0.023mL,0.135mmol)於二氯甲烷(1mL)中之混合物在室溫下攪拌60分鐘。LC-MS指示起始物質完全耗盡。藉由矽膠層析來純化反應混合物以得到N-((1S,2R)-2-((6-(2,6-二氟-3-甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環戊基)丙炔醯胺(化合物2)(13mg,68%)。MS(ES+)C27H27N5O3要求值：422，實驗值：423[M+H]+。
實例2：N-((1S,2R)-2-((6-(2-氯-3-乙氧基-6-氟苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環戊基)丙炔醯胺(化合物6)之合成
Figure TWI675828B_D0038
步驟1：((1S,2R)-2-((6-溴喹唑啉-2-基)胺基)環戊基)胺甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0039
將6-溴-2-氯喹唑啉(1g,4.14mmol)及((1S,2R)-2-胺基環戊基)胺甲酸第三丁酯(0.826g,4.14mmol)之混合物在100℃下在二噁烷(10mL)中攪拌48h。將反應混合物冷卻至室溫，濃縮且藉由矽膠管柱層析來純化殘餘物以提供((1S,2R)-2-((6-溴喹唑啉-2-基)胺基)環戊基)胺甲酸第三丁酯(1g,59%)。MS(ES+)C18H23BrN4O2要求值：406，實驗值：407[M+H]+。
步驟2：((1S,2R)-2-((6-(2-氯-3-乙氧基-6-氟苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環戊基)胺甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0040
將((1S,2R)-2-((6-溴喹唑啉-2-基)胺基)環戊基)胺甲酸第三丁 酯(50mg,0.12mmol)、(2-氯-3-乙氧基-6-氟苯基)硼酸(40mg,0.18mmol)、雙(二-第三丁基(4-二甲基胺基苯基)膦)二氯鈀(II)(4mg,0.005mmol)及磷酸鉀(78mg,0.37mmol)於1,4-二噁烷/水(1.15mL/0.15mL)中之混合物以氮氣脫氣5min且在100℃及微波下攪拌30min。將反應混合物冷卻至室溫，以乙酸乙酯稀釋，以飽和氯化銨溶液洗滌且以硫酸鈉乾燥。藉由矽膠管柱層析來純化殘餘物以提供((1S,2R)-2-((6-(2-氯-3-乙氧基-6-氟苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環戊基)胺甲酸第三丁酯(51mg,83%)。MS(ES+)C26H30ClFN4O3要求值：500，實驗值：501[M+H]+。
步驟3：(1R,2S)-N1-(6-(2-氯-3-乙氧基-6-氟苯基)喹唑啉-2-基)環戊烷-1,2-二胺之合成
Figure TWI675828B_D0041
將((1S,2R)-2-((6-(2-氯-3-乙氧基-6-氟苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環戊基)胺甲酸第三丁酯(51mg,0.1mmol)及含4M HCl之二噁烷(0.5mL)於二氯甲烷(1mL)中之混合物在室溫下攪拌2h。LC-MS指示起始物質完全耗盡。濃縮反應混合物且未經進一步純化即用於下一步驟。
步驟4：N-((1S,2R)-2-((6-(2-氯-3-乙氧基-6-氟苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環戊基)丙炔醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0042
將(1R,2S)-N1-(6-(2-氯-3-乙氧基-6-氟苯基)喹唑啉-2-基)環戊烷-1,2-二胺(0.1mmol)、丙炔酸(0.007mL,0.12mmol)、HATU(57mg,0.15mmol)及DIEA(0.052mL,0.3mmol)於二氯甲烷(1mL)中之混合物在室溫下 攪拌40分鐘。LC-MS指示起始物質完全耗盡。藉由矽膠層析來純化反應混合物以得到N-((1S,2R)-2-((6-(2-氯-3-乙氧基-6-氟苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環戊基)丙炔醯胺(化合物6)(35mg,76%)。MS(ES+)C24H22ClFN4O2要求值：452，實驗值：453[M+H]+。
合成方案2
Figure TWI675828B_D0043
可在親核芳族取代反應條件下使用鹼諸如二異丙基乙胺(DIPEA)或三乙胺(TEA)在極性溶劑諸如二噁烷中使6-溴-2-氯喹唑啉經1,2-單保護之環烷基二胺取代以提供經二胺取代之喹唑啉。可經由鈀介導之偶合反應(例如，鈴木、斯蒂爾、根岸偶合)使6-溴喹唑啉與硼、錫或鋅之芳基、雜芳基羧酸或酯試劑偶合。然後可使用醯胺偶合反應條件(諸如HATU及二異丙基乙胺)使該羧酸與胺反應以提供中間體，隨後對其去保護以暴露環烷烴上之胺。可使用醯胺偶合反應條件使該胺與丙炔酸反應或使該胺與丙烯醯氯反應來製備丙烯醯胺。如下文所示，使用合成方案2來製備化合物(13)。
(化合物13)
Figure TWI675828B_D0044
步驟1：((1S,2R)-2-((6-溴喹唑啉-2-基)胺基)環戊基)胺甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0045
將6-溴-2-氯喹唑啉(1g,4.14mmol)及((1S,2R)-2-胺基環戊基)胺甲酸第三丁酯(0.826g,4.14mmol)之混合物在100℃下在二噁烷(10mL)中攪拌48h。將反應混合物冷卻至室溫，濃縮且藉由矽膠管柱層析來純化殘餘物以提供((1S,2R)-2-((6-溴喹唑啉-2-基)胺基)環戊基)胺甲酸第三丁酯(1g,59%)。MS(ES+)C18H23BrN4O2要求值：406，實驗值：407[M+H]+。
步驟2：4-(2-(((1R,2S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)環戊基)胺基)喹唑啉-6-基)-3-甲氧基苯甲酸之合成
Figure TWI675828B_D0046
將((1S,2R)-2-((6-溴喹唑啉-2-基)胺基)環戊基)胺甲酸第三丁酯(100mg,0.25mmol)、3-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)苯甲酸(82mg,0.29mmol)、雙(二-第三丁基(4-二甲基胺基苯基)膦)二氯鈀(II)(9mg,0.01mmol)及磷酸鉀(157mg,0.74mmol)於1,4-二噁烷/水(2.5mL/0.25mL)中之混合物以氮氣脫氣5min且在100℃及微波下攪拌30min。將反應混合物冷卻至室溫，以乙酸乙酯稀釋，以飽和氯化銨溶液洗滌且以硫酸鈉乾燥。藉由矽膠管柱層析來純化殘餘物以提供甲基4-(2-(((1R,2S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)環戊基)胺基)喹唑啉-6-基)-3-甲氧基苯甲酸(114mg,96%)。MS(ES+)C26H30N4O5要求值：478，實驗值：479[M+H]+。
步驟3：((1S,2R)-2-((6-(4-(環丙基胺甲醯基)-2-甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環戊基)胺甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0047
將4-(2-(((1R,2S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)環戊基)胺基)喹唑啉-6-基)-3-甲氧基苯甲酸(57mg,0.12mmol)、環丙胺(0.012mL,0.18mmol)、HATU(68mg,0.18mmol)及DIEA(0.052mL,0.30mmol)於二氯甲烷(1.5mL)中之混合物在室溫下攪拌30分鐘。LC-MS指示起始物質完全耗盡。藉由矽膠層析來純化反應混合物以得到((1S,2R)-2-((6-(4-(環丙基胺甲醯基)-2-甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環戊基)胺甲酸第三丁酯(58mg,93%)。MS(ES+)C29H35N5O4要求值：517，實驗值：518[M+H]+。
步驟4：4-(2-(((1R,2S)-2-胺基環戊基)胺基)喹唑啉-6-基)-N-環丙基-3-甲 氧基苯甲醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0048
將((1S,2R)-2-((6-(4-(環丙基胺甲醯基)-2-甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環戊基)胺甲酸第三丁酯(58mg,0.11mmol)及含4M HCl之二噁烷(0.8mL)於二氯甲烷(1.5mL)中之混合物在室溫下攪拌120分鐘。LC-MS指示起始物質完全耗盡。濃縮反應混合物且未經進一步純化即用於下一步驟。
步驟5：N-環丙基-3-甲氧基-4-(2-(((1R,2S)-2-丙炔醯胺基環戊基)胺基)喹唑啉-6-基)苯甲醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0049
將4-(2-(((1R,2S)-2-胺基環戊基)胺基)喹唑啉-6-基)-N-環丙基-3-甲氧基苯甲醯胺(0.11mmol)、丙炔酸(0.010mL,0.17mmol)、HATU(64mg,0.17mmol)及DIEA(0.06mL,0.34mmol)於二氯甲烷(1.5mL)中之混合物在室溫下攪拌45分鐘。LC-MS指示起始物質完全耗盡。藉由矽膠層析來純化反應混合物以得到N-環丙基-3-甲氧基-4-(2-(((1R,2S)-2-丙炔醯胺基環戊基)胺基)喹唑啉-6-基)苯甲醯胺(化合物13)(35mg,69%)。MS(ES+)C27H27N5O3要求值：469，實驗值：470[M+H]+。
合成方案3
Figure TWI675828B_D0050
可在各種親核芳族取代反應條件下使用鹼(諸如二異丙基乙胺(DIPEA)、DBU或NaHCO3)在極性溶劑(諸如二噁烷、CH3CN或NMP)中或經由鈀介導之布赫瓦爾德(Buchwald)偶合反應使2-氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉(描述於WO 2014011900中)經1,2-單保護之環烷基二胺取代以提供經二胺取代之喹唑啉。去除胺上之保護基以暴露環烷烴上之胺。可使用醯胺偶合反應條件使該胺與丙炔酸反應或使該胺與丙烯醯氯反應來製備丙烯醯胺。如下文所示，使用合成方案3來製備化合物(33)、(37)、(35)、(27)及(41)。
(化合物37)
N-((1S,2S)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環己基)丙烯醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0051
步驟1：((1S,2R)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環己基)胺甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0052
將2-氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉(0.1g,0.27mmol)、((1S,2S)-2-胺基環己基)胺甲酸第三丁酯(75mg,0.35mmol)、Cs2CO3(176mg,0.54mmol)、X-Phos(13mg,0.027mmol)及Pd2dba3(12.5mg,0.013mmol)於DMA(1.8mL)中之混合物以N2脫氣5分鐘且在微波反應器中在125℃下加熱30分鐘。將混合物冷卻至室溫，經由矽藻土過濾且以水洗滌，隨後以飽和鹽水溶液洗滌。藉由矽膠管柱層析來純化殘餘物以提供((1S,2R)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環己基)胺甲酸第三丁酯(67mg,45%)。MS(ES+)C27H32Cl2N4O4要求值：546，實驗值：547[M+H]+。
步驟2：(1R,2S)-N1-(6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)環己烷-1,2-二胺之合成
Figure TWI675828B_D0053
將((1S,2R)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環己基)胺甲酸第三丁酯(67mg,0.12mmol)及TFA(0.6mL)於二氯甲烷(0.6mL)中之混合物在室溫下攪拌60分鐘。LC-MS指示起始物質完全耗盡。以飽和NaHCO3稀釋反應混合物且然後以二氯甲烷萃取。藉由Na2SO4乾燥合併之有機層，過濾，濃縮以得到(1R,2S)-N1-(6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)環己烷-1,2-二胺，其未經進一步純化即用於下一步驟。
步驟3：N-((1S,2S)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環己基)丙烯醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0054
在0℃下向(1R,2S)-N1-(6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)環己烷-1,2-二胺(0.12mmol)於二氯甲烷(1.3mL)中之溶液中添加DIEA(0.004mL,0.02mmol)及丙烯醯氯(0.012mL,0.15mmol)且將反應攪拌1h。LC-MS指示起始物質完全耗盡。藉由矽膠層析來純化反應混合物以得到N-((1S,2S)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環己基)丙烯醯胺(化合物37)(35mg,58%)。MS(ES+)C25H26Cl2N4O3要求值：500，實驗值：501。
(化合物33)
N-((1S,2R,3S,5S)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)雙環[3.1.0]己-3-基)丙烯醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0055
步驟1：(1S,2R,3S,5S)-2-(6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基胺基)雙環[3.1.0]己-3-基胺甲酸2-(三甲基矽基)乙酯之合成
Figure TWI675828B_D0056
將(1S,2R,3S,5S)-2-胺基雙環[3.1.0]己-3-基胺甲酸2-(三甲基矽基)乙酯(250mg,0.977mmol)、2-氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉(300mg,0.814mmol)及碳酸氫鈉(205mg,2.442mmol)於N-甲基-2-吡咯啶酮(10mL)中之溶液在100℃下攪拌隔夜。將反應溶液冷卻至室溫，以乙酸乙酯(100mL)稀釋，且以水(八次)及鹽水(50mL)洗滌。經硫酸鈉乾燥有機層，過濾且濃縮以提供粗產物，藉由矽膠管柱層析(乙酸乙酯：石油醚=4：2)將其純化以提供黃色固體狀標題化合物(300mg,52%)。MS(ES+)C28H34Cl2N4O4Si要求值：588,590，實驗值：589,591[M+H]+。
步驟2：(1S,2R,3S,5S)-N2-(6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)雙環[3.1.0]己烷-2,3-二胺之合成
Figure TWI675828B_D0057
在室溫下向(1S,2R,3S,5S)-2-(6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基胺基)雙環[3.1.0]己-3-基胺甲酸2-(三甲基矽基)乙酯(200mg,340mmol)於二噁烷(10mL)中之溶液中添加12M濃HCl(1mL)。將所得混合物攪拌隔夜，然後以水(50mL)淬滅，且以飽和碳酸鈉溶液使溶液之pH達到pH=8-9。以乙酸乙酯(3×50mL)萃取溶液混合物，且以鹽水(50mL)洗滌合併之層，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。藉由薄層層析(Prep-TLC)(二氯甲烷：甲醇=15：1)來純化殘餘物，且然後藉由矽膠管柱層析(二氯甲烷：甲醇=20：1)來進一步純化以提供白色固體狀標題化合物(70mg,46%)。MS(ES+)C22H22Cl2N4O2要求值：444,446，實驗值：445,447[M+H]+。1H-NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ ppm 9.16(s,1H),7.67(s,1H),7.57(d,1H,J=8.0Hz),7.50-7.48(m,1H),7.33(d,1H J=7.6Hz),7.01(s,1H),4.32-4.29(m,1H),3.97(s,6H),3.20-3.12(m,1H),1.90-1.84(m,1H),1.76-1.68(m,1H),1.49-1.42(m,1H),1.30-1.23(m,1H),0.45-0.36(m,2H)。
步驟3：N-((1S,2R,3S,5S)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)雙環[3.1.0]己-3-基)丙烯醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0058
在0℃下向(1S,2R,3S,5S)-N2-(6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)雙環[3.1.0]己烷-2,3-二胺(42mg,0.094mmol)於二氯甲烷(1.9mL)中之溶液中添加DIEA(0.025mL,0.14mmol)及丙烯醯氯(0.009mL,0.11mmol)且將反應攪拌1h。LC-MS指示起始物質完全耗盡。藉由矽膠層析來純化反應混合物以得到淺黃色固體狀N-((1S,2R,3S,5S)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)雙環[3.1.0]己-3-基)丙烯醯胺(化合物33)(36mg,76%)。MS(ES+)C25H24Cl2N4O3要求值：498，實驗值：499
(化合物35)
N-((1S,2R)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環己基)丙烯醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0059
步驟1：((1S,2R)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環己基)胺甲酸第三丁酯之合成：
Figure TWI675828B_D0060
將2-氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉(0.95g,2.6mmol)、((1S,2R)-2-胺基環己基)胺甲酸第三丁酯(1.1g,5.14mmol)及DBU(0.77mL,5.14mmol)於乙腈(9mL)中之混合物以N2脫氣5分鐘且在70℃下加熱16h。將混合物冷卻至室溫，濃縮且藉由矽膠管柱層析來純化殘餘物以提供((1S,2R)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環己基)胺甲酸第三丁酯(1.1g,81%)。MS(ES+)C27H32Cl2N4O4要求值：546，實驗值：547[M+H]+。
步驟2：(1R,2S)-N1-(6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)環己烷-1,2-二胺之合成
Figure TWI675828B_D0061
將((1S,2R)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環己基)胺甲酸第三丁酯(1.14g,2.1mmol)及含4N HCl之二噁烷(5.2mL)於二氯甲烷(10mL)中之混合物在室溫下攪拌30分鐘。LC-MS指示起始物質完全耗盡。濃縮反應混合物以得到(1R,2S)-N1-(6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)環己烷-1,2-二胺(0.94g,100%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。
步驟3：N-((1S,2R)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環己基)丙烯醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0062
在0℃下向(1R,2S)-N1-(6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)環己烷-1,2-二胺(0.94g,2.1mmol)於二氯甲烷(25mL)中之溶液中添加DIEA(0.37mL,2.1mmol)及丙烯醯氯(0.17mL,2.1mmol)且將反應攪拌3h。LC-MS指示起始物質完全耗盡。藉由矽膠層析來純化反應混合物以得到N-((1S,2R)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環己基)丙 烯醯胺(化合物35)(0.8g,76%)。MS(ES+)C25H26Cl2N4O3要求值：500，實驗值：501。
(化合物27)
N-[(3R,4S)-4-{[6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基]胺基}氧雜環戊烷-3-基]丙-2-烯醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0063
步驟1：淺黃色泡沫狀((3R,4S)-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)四氫呋喃-3-基)胺甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0064
將2-氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉(1.02g,2.76mmol)、((3R,4S)-4-胺基四氫呋喃-3-基)胺甲酸第三丁酯(0.85g,4.20mmol)及碳酸氫鈉(0.58g,6.90mmol)之混合物在NMP(5.5mL,0.5M)中在95℃下攪拌12小時。
將反應移離油浴且同時冷卻至室溫，以約90mL水處理且然後進行超音波處理並攪拌20分鐘。藉由過濾分離得到黃橙色，以少量水沖洗數次，且在真空下乾燥近乎1小時以得到3.35g粗物，藉由矽膠層析將其純化以得到1.10g(產率74.5%)淺黃色泡沫狀((3R,4S)-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)四氫呋喃-3-基)胺甲酸第三丁酯。MS(ES+)C25H28Cl2N4O5要求值：534，實驗值：535[M+H]+。
步驟2：(3S,4R)-N3-(6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)四氫呋喃-3,4-二胺之合成
Figure TWI675828B_D0065
將((3R,4S)-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)四氫呋喃-3-基)胺甲酸第三丁酯(1.097g,2.049mmol)於DCM(15mL,0.137M)及TFA(11.7g,102mmol)中之溶液在室溫下攪拌約40分鐘。在減壓下去除過量溶劑。將黃色油狀物溶於DCM(約60mL)中且以1N NaOH水溶液(約30mL)洗滌。然後以鹽水(約15mL)稀釋水層且以新鮮DCM(3×30mL)萃取。經硫酸鈉乾燥合併之有機層，過濾，濃縮，且乾燥以得到極淺黃色泡沫狀(3S,4R)-N3-(6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)四氫呋喃-3,4-二胺(0.879g,99%)。
步驟3：N-[(3R,4S)-4-{[6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基]胺基}氧雜環戊烷-3-基]丙-2-烯醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0066
在0℃下向(3S,4R)-N3-(6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)四氫呋喃-3,4-二胺(0.94g,2.1mmol)於二氯甲烷(25mL)中之溶液中添加DIEA(0.37mL,2.1mmol)及丙烯醯氯(0.17mL,2.1mmol)且將反應攪拌3h。LC-MS指示起始物質完全耗盡。藉由矽膠層析來純化反應混合物以得到N-((1S,2R)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環己基)丙烯醯胺(化合物27)(0.8g,76%)。MS(ES+)C23H22Cl2N4O4要求值：488，實驗值：489
(化合物41)
N-((3S,4S)-3-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-4-基)丙烯醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0067
步驟1：N-((3S,4S)-4-疊氮基四氫-2H-哌喃-3-基)-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-胺之合成
Figure TWI675828B_D0068
將(3S,4S)-4-疊氮基四氫-2H-哌喃-3-胺、HCl(0.200g,1.120mmol)及2-氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉(0.318g,0.861mmol)吸收於NMP(2ml)中且添加碳酸鈉(0.217g,2.58mmol)。加熱至100℃，隔夜。冷卻至環境溫度後，將反應物倒入5ml水中且攪拌30min。濾出固體且以水洗滌。將其在高真空下進一步乾燥以得到N-((3S,4S)-4-疊氮基四氫-2H-哌喃-3-基)-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-胺(0.300g,0.631mmol，產率73.3%)。MS(ES+)C21H20Cl2N6O3要求值：474，實驗值：475[M+H]+。
步驟2：(3S,4S)-N3-(6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)四氫-2H-哌喃-3,4-二胺之合成
Figure TWI675828B_D0069
將N-((3S,4S)-4-疊氮基四氫-2H-哌喃-3-基)-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-胺(0.063g,0.133mmol)吸收於甲醇(7ml)及EtOAc(7.00ml)中，添加Pd-C(0.014g,0.133mmol)且在H2氣球下攪拌1小時。反 應完成，經由矽藻土過濾且去除溶劑。經回收得到黃色固體狀(3S,4S)-N3-(6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)四氫-2H-哌喃-3,4-二胺(0.060g,0.134mmol，產率101%)。產物未經進一步純化便繼續使用。MS(ES+)C21H22Cl2N4O3要求值：448，實驗值：449[M+H]+。
步驟3：N-((3S,4S)-3-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-4-基)丙烯醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0070
將(3S,4S)-N3-(6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)四氫-2H-哌喃-3,4-二胺(0.060g,0.134mmol)吸收於CH2Cl2(2ml)中且冷卻至0℃，隨後緩慢添加DIEA(0.023ml,0.134mmol)且然後添加丙烯醯氯(0.012ml,0.147mmol)。將反應在0℃下攪拌30分鐘。將混合物直接裝載至二氧化矽上且藉由急驟層析法使用0-10% CH2Cl2/MeOH進行純化。經回收得到灰白色固體狀N-((3S,4S)-3-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)四氫-2H-哌喃-4-基)丙烯醯胺(化合物41)(0.041g,0.081mmol，產率61%)。MS(ES+)C24H24Cl2N4O4要求值：502，實驗值：503[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 9.16(s,1H),8.00(d,J=7.6Hz,1H),7.72-7.63(m,1H),7.55-7.45(m,2H),7.04-6.91(m,2H),6.24(dd,J=17.1,10.1Hz,1H),6.05(dd,J=17.1,2.3Hz,1H),5.54(dd,J=10.1,2.3Hz,1H),4.40-4.25(m,2H),3.96(s,6H),3.89-3.77(m,2H),3.64(dd,J=11.7,2.5Hz,1H),3.53(ddd,J=11.9,8.9,3.1Hz,1H),2.03-1.87(m,1H),1.68(d,J=13.0Hz,1H)。
合成方案4
Figure TWI675828B_D0071
可在親核芳族取代反應條件下使用鹼(諸如NaHCO3)在極性溶劑(諸如NMP)中使2-氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉(描述於WO 2014011900中)經1,2-單保護之吡咯啶二胺取代以提供經二胺取代之喹唑啉。在適當條件下去除胺上之保護基以暴露吡咯啶上之胺。可使該胺與丙烯醯氯反應來製備丙烯醯胺。如下文所示，使用合成方案4來製備化合物(57)及(86)。
(化合物57)
N-((3S,4R)-1-乙醯基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)吡咯啶-3-基)丙烯醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0072
步驟1：(3R,4S)-3-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺 基)-4-(((2-(三甲基矽基)乙氧基)羰基)胺基)吡咯啶-1-甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0073
將2-氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉(2.65g,7.17mmol)、(3R,4S)-3-胺基-4-(((2,2,2-三氯乙氧基)羰基)胺基)吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(2.97g,8.6mmol)及碳酸氫鈉(2.41g,28.7mmol)之混合物在NMP(40mL)中在95℃下攪拌16小時。自油浴取走反應物，冷卻至室溫且添加至300mL水中。藉由過濾分離得到黃橙色固體，以少量水沖洗數次，且在真空下乾燥以得到5g粗物，藉由矽膠層析將其純化以得到2.82g(產率58%)(3R,4S)-3-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-4-(((2-(三甲基矽基)乙氧基)羰基)胺基)吡咯啶-1-甲酸第三丁酯。MS(ES+)C31H41Cl2N5O6Si要求值：677，實驗值：678[M+H]+。
步驟2：(3S,4R)-3-胺基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)吡咯啶-1-甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0074
將(3R,4S)-3-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-4-(((2-(三甲基矽基)乙氧基)羰基)胺基)吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(2.77g,4.1mmol)及含1M TBAF之THF(6.1mL,6.1mmol)於THF(27mL)中之混合物在50℃下攪拌4h且然後在室溫下攪拌16h。以含10%甲醇之二氯甲烷(100mL)稀釋反應混合物且以水(50mL)洗滌。然後以新鮮二氯甲烷(3×20mL)萃取水層。以飽和鹽水溶液洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，且乾燥以得到黃色固體狀(3S,4R)-3-胺基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(2.1g,94%)。
步驟3：(3S,4R)-3-丙烯醯胺基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)吡咯啶-1-甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0075
在0℃下向(3S,4R)-3-胺基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)吡咯啶-1-甲酸酯(2.1g,4.1mmol)於二氯甲烷(82mL)中之溶液中添加DIEA(1.07mL,6.1mmol)及丙烯醯氯(0.36mL,4.5mmol)且將反應攪拌30分鐘。LC-MS指示起始物質完全耗盡。藉由矽膠層析來純化反應混合物以得到(3S,4R)-3-丙烯醯胺基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(1.26g,52%)。MS(ES+)C28H31Cl2N5O5要求值：587，實驗值：588。
步驟4：N-((3S,4R)-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)吡咯啶-3-基)丙烯醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0076
將(3S,4R)-3-丙烯醯胺基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(1.26g,2.14mmol)於DCM(8mL)及TFA(3mL,39mmol)中之溶液在室溫下攪拌3h。在減壓下去除過量溶劑。將黃色油狀物溶於DCM(約100mL)中且以飽和碳酸氫鈉水溶液(約50mL)洗滌。然後以新鮮DCM(3×30mL)萃取水層。經硫酸鈉乾燥合併之有機層，過濾，濃縮，且乾燥以得到N-((3S,4R)-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)吡咯啶-3-基)丙烯醯胺(化合物57)，其未經進一步純化即用於下一步驟。
步驟5：N-((3S,4R)-1-乙醯基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)吡咯啶-3-基)丙烯醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0077
在0℃下向N-((3S,4R)-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)吡咯啶-3-基)丙烯醯胺(0.37g,0.76mmol)於二氯甲烷(15mL)中之溶液中添加DIEA(0.16mL,0.92mmol)及乙醯氯(0.054mL,0.76mmol)且將反應攪拌60分鐘。LC-MS指示起始物質完全耗盡。藉由矽膠層析來純化反應混合物以得到N-((3S,4R)-1-乙醯基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)吡咯啶-3-基)丙烯醯胺(0.207g,51%)。MS(ES+)C25H25Cl2N5O4要求值：529，實驗值：530。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 9.17(s,1H),8.17(dd,J=14.3,7.6Hz,1H),7.73-7.67(m,1H),7.61-7.48(m,2H),7.43(t,J=6.8Hz,1H),7.00(d,J=1.4Hz,1H),6.23(dtd,J=18.7,9.2,8.5,1.5Hz,1H),6.04(dt,J=17.1,1.9Hz,1H),5.56(dt,J=10.1,1.9Hz,1H),4.82-4.59(m,2H),3.96(s,6H),3.93-3.77(m,1H),3.72(m,1H),3.59(m,1H),3.55-3.37(m,2H),1.94(dd,J=3.6,1.4Hz,3H)。
(化合物86)
(3S,4R)-3-丙烯醯胺基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-N-乙基吡咯啶-1-甲醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0078
在0℃下向N-((3S,4R)-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)吡咯啶-3-基)丙烯醯胺(0.040g,0.082mmol)於二氯甲烷(1.5mL)中之溶液中添加TEA(0.014mL,0.098mmol)及異氰酸乙酯(0.008mL,0.098mmol)且將反應攪拌45分鐘。LC-MS指示起始物質完全耗盡。藉由矽膠層析來純化反應混合物以得到(3S,4R)-3-丙烯醯胺基-4-((6-(2,6-二氯 -3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-N-乙基吡咯啶-1-甲醯胺(化合物86)(0.035g,76%)。MS(ES+)C26H28Cl2N6O4要求值：558，實驗值：559。
合成方案5
Figure TWI675828B_D0079
可經由鈀介導之布赫瓦爾德偶合反應使2-Cl雜環(描述於WO 2014/011900中)經1,2-單保護之二胺取代以提供經二胺取代之雜環。然後去除胺上之保護基以暴露環烷烴上之胺。可使用醯胺偶合反應條件使該胺與丙炔酸反應以提供炔丙基醯胺，或使該胺與丙烯醯氯反應以提供丙烯醯胺。如下文所示，使用合成方案5來製備化合物(63)。
(化合物63)
N-((1S,2R)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)-8-乙基-7-側氧基-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)胺基)環戊基)丙烯醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0080
步驟1：((1S,2R)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)-8-乙基-7-側氧基 -7,8-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)胺基)環戊基)胺甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0081
將2-氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)-8-乙基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(0.2g,0.48mmol)、((1S,2R)-2-胺基環戊基)胺甲酸第三丁酯(145mg,0.72mmol)、Cs2CO3(393mg,1.21mmol)、X-Phos(23mg,0.048mmol)及Pd2dba3(22mg,0.024mmol)於DMA(3.2mL)中之混合物以N2脫氣5分鐘且在微波反應器中在115℃下加熱60分鐘。將混合物冷卻至室溫，以EtOAc稀釋，經由矽藻土過濾且依次以水(4×)、飽和鹽水溶液洗滌。藉由矽膠管柱層析來純化殘餘物以提供((1S,2R)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)-8-乙基-7-側氧基-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)胺基)環戊基)胺甲酸第三丁酯(60mg,22%)。MS(ES+)C27H33Cl2N5O5要求值：577，實驗值：578[M+H]+。
步驟2：2-(((1R,2S)-2-胺基環戊基)胺基)-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)-8-乙基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮之合成
Figure TWI675828B_D0082
將第三丁基((1S,2R)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)-8-乙基-7-側氧基-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)胺基)環戊基)胺甲酸第三丁酯(60mg,0.105mmol及TFA(0.5mL)於二氯甲烷(2mL)中之混合物在室溫下攪拌90分鐘。LC-MS指示起始物質完全耗盡。以飽和NaHCO3稀釋反應混合物且然後以二氯甲烷萃取。藉由Na2SO4乾燥合併之有機層，過濾，濃縮以得到2-(((1R,2S)-2-胺基環戊基)胺基)-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)-8-乙基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮，其未經進一步純化即用於下一步驟。
步驟3：N-((1S,2R)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)-8-乙基-7-側氧基 -7,8-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)胺基)環戊基)丙烯醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0083
在-20℃下向2-(((1R,2S)-2-胺基環戊基)胺基)-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)-8-乙基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(0.105mmol)於二氯甲烷(2.1mL)中之溶液中添加DIEA(0.018mL,0.105mmol)及丙烯醯氯(0.008mL,0.105mmol)且將反應攪拌1h。LC-MS指示起始物質完全耗盡。藉由矽膠層析來純化反應混合物以得到N-((1S,2R)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)-8-乙基-7-側氧基-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)胺基)環戊基)丙烯醯胺(化合物63)(36mg,65%)。MS(ES+)C25H27Cl2N5O4要求值：531，實驗值：532。
合成方案6
Figure TWI675828B_D0084
可經由各種親核芳族取代反應條件使用鹼(諸如二異丙基乙胺(DIPEA)、DBU或NaHCO3)在極性溶劑(諸如二噁烷、CH3CN或NMP) 中或經由鈀介導之布赫瓦爾德偶合反應使2-C1雜環經1,2-反式-胺基醇取代以提供經取代喹唑啉。使環烷烴上之醇在親核取代反應條件下(諸如光延(Mitusnobu)反應)反應以提供經保護之胺。去除該胺上之保護基(諸如肼之鄰苯二甲醯亞胺保護基)以提供環烷烴上之胺。可使該胺與丙炔酸(使用醯胺偶合條件諸如HATU、DIPEA)反應或與丙烯醯氯反應來製備最終化合物。如下文所示，使用合成方案6來製備化合物(85)及(84)。
(化合物85及84)
(1S,3S,4R)-3-丙烯醯胺基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-N,N-二甲基環戊烷甲醯胺及(1R,3S,4R)-3-丙烯醯胺基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-N,N-二甲基環戊烷-1-甲醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0085
步驟1：外消旋(3R,4R)-3-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)-喹唑啉-2-基)胺基)-4-羥基環戊烷-1-甲酸甲酯之合成
Figure TWI675828B_D0086
將2-氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉(0.576g,1.558mmol)、(3R,4R)-3-胺基-4-羥基環戊烷-1-甲酸甲酯(0.372g,2.337mmol)吸收於乙腈(3ml)中且添加DBU(0.470ml,3.12mmol)。以N2吹掃5分鐘，然後加熱至65℃，隔夜。冷卻至室溫且在減壓下去除溶劑。經由急驟層析(0-100% Hex/EtOAc；12g管柱)來純化殘餘物。經回收得到(1S,3R,4R)-3-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-4-羥基環戊烷甲酸甲酯(0.520g,1.056mmol，產率67.8%)。MS(ES+)C23H23Cl2N3O5要求值：492，實驗值：493[M+H]+。
步驟2：外消旋(3R,4S)-3-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-4-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)環戊烷-1-甲酸甲酯之合成
Figure TWI675828B_D0087
將Ph3P(0.213g,0.812mmol)吸收於THF(6ml)中且在N2下冷卻至-78℃。添加DIAD(0.126ml,0.650mmol)，隨後添加鄰苯二甲醯亞胺(0.105g,0.711mmol)，在-78℃下攪拌1小時，隨後在-78℃下添加4ml THF中之(1S,3R,4R)-3-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-4-羥基環戊烷甲酸甲酯(0.100g,0.203mmol)。攪拌隔夜，同時升溫至室溫。在減壓下去除溶劑。經由急驟層析(0-100% Hex/EtOAc；12g管柱)來純化殘餘物。經回收得到(3R,4S)-3-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-4-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)環戊烷-1-甲酸甲酯(0.126g,0.203mmol)。MS(ES+)C31H26Cl2N4O6要求值：621，實驗值：622[M+H]+。
步驟3：外消旋(3S,4R)-3-胺基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環戊烷-1-甲酸甲酯之合成
Figure TWI675828B_D0088
將(1S,3R,4S)-3-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-4-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)環戊烷甲酸甲酯(0.500g,0.805mmol)吸收於EtOH(20ml)中且在室溫下攪拌添加肼單水合物(0.079ml,1.61mmol)且攪拌隔夜。濾除白色沈澱物且在減壓下去除溶劑。以乙醚研磨且濾除固體，然後在減壓下去除溶劑以得到定量產率之(3S,4R)-3-胺基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環戊烷-1-甲酸甲酯(0.395g,0.805mmol)且未經進一步純化便繼續使用。MS(ES+)C23H24Cl2N4O4要求值：491，實驗值：492[M+H]+。
步驟4：外消旋(3S,4R)-3-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環戊烷-1-甲酸甲酯之合成
Figure TWI675828B_D0089
將(3S,4R)-3-胺基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環戊烷-1-甲酸酯(0.550g,1.119mmol)吸收於甲醇(10ml)中，隨後添加Et3N(0.156ml,1.119mmol)及BOC-酸酐(0.286ml,1.231mmol)。在環境溫度下攪拌隔夜。在真空中去除溶劑。將殘餘物吸收於DCM中且以水(2×)洗滌。經硫酸鈉乾燥且在減壓下去除溶劑以得到(3S,4R)-3-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環戊烷-1-甲酸甲酯(0.662g,1.119mmol)粗物且未經進一步純化便繼續使用。MS(ES+)C28H32Cl2N4O6要求值：591，實驗值：592[M+H]+。
步驟5：外消旋(3S,4R)-3-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環戊烷-1-甲酸之合成
Figure TWI675828B_D0090
將(3S,4R)-3-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)-喹唑啉-2-基)胺基)環戊烷-1-甲酸甲酯(0.662g,1.119mmol)吸收於甲醇(10ml)、THF(4ml)中且以10ml 1N NaOH處理。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。在減壓下去除有機溶劑，然後以1N HCl將水層酸化至pH約2。以EtOAc×3萃取水層。合併有機層，經硫酸鈉乾燥，且去除溶劑以得到粗(3S,4R)-3-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環戊烷-1-甲酸(0.580g,1.00mmol，產率91%)，其未經進一步純化便繼續使用。MS(ES+)C27H30Cl2N4O6要求值：577，實驗值：578[M+H]+。
步驟6：((1S,2R,4S)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-4-(二甲基胺甲醯基)環戊基)胺甲酸第三丁酯及((1S,2R,4R)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-4-(二甲基胺甲醯基)環戊基)胺甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0091
將(3S,4R)-3-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)環戊烷-1-甲酸(0.270g,0.468mmol)吸收於DMF(3ml)中，添加HATU(0.267g,0.701mmol)、含2M二甲基胺之THF(0.250ml,0.500mmol)及DIEA(0.245ml,1.403mmol)且在環境溫度下攪拌30分鐘。藉由LCMS監測後反應完成。兩個峰含有正確物質。經由反相層析(5-60%乙腈/水+0.01%甲酸；12g管柱)來純化反應物。峰A：((1S,2R,4R)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-4-(二甲基 胺甲醯基)環戊基)胺甲酸第三丁酯(0.086g,0.142mmol)MS(ES+)C29H35Cl2N5O5要求值：604，實驗值：605[M+H]+，滯留時間3.039。峰B：((1S,2R,4S)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-4-(二甲基胺甲醯基)環戊基)胺甲酸第三丁酯(0.062g,0.103mmol)MS(ES+)C29H35Cl2N5O5要求值：604，實驗值：605[M+H]+，滯留時間2.879。注意：絕對組態係任意指定的。
步驟7a：(1S,3S,4R)-3-胺基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-N,N-二甲基環戊烷-1-甲醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0092
將((1S,2R,4R)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-4-(二甲基胺甲醯基)環戊基)胺甲酸第三丁酯(0.086g,0.142mmol)吸收於DCM(2ml)中且以含4M HCl之二噁烷(3ml)處理且攪拌3小時。去除溶劑以得到粗(1S,3S,4R)-3-胺基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-N,N-二甲基環戊烷-1-甲醯胺，定量產率。MS(ES+)C24H27Cl2N5O3要求值：504，實驗值：505[M+H]+。
步驟8a：(1R,3S,4R)-3-丙烯醯胺基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-N,N-二甲基環戊烷-1-甲醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0093
將(1S,3S,4R)-3-胺基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-N,N-二甲基環戊烷甲醯胺(0.050g,0.099mmol)吸收於CH2Cl2(25ml)中且冷卻至0℃，隨後添加DIEA(0.017ml,0.099mmol)，然後緩慢 添加丙烯醯氯(8.86μl,0.109mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌30分鐘。 完成反應後，將反應混合物直接裝載至二氧化矽上且經由急驟層析(0-10% CH2Cl2/MeOH；12g管柱)純化。經回收得到(1R,3S,4R)-3-丙烯醯胺基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-N,N-二甲基環戊烷甲醯胺(0.043g,0.077mmol，產率78%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 9.10(s,1H),7.93(d,J=8.3Hz,1H),7.64(d,J=1.5Hz,1H),7.47(d,J=3.1Hz,2H),7.13(d,J=8.3Hz,1H),6.99(s,1H),6.08(dd,J=17.1,10.0Hz,1H),5.96(dd,J=17.1,2.4Hz,1H),5.47(dd,J=10.0,2.4Hz,1H),4.65-4.47(m,1H),4.46-4.24(m,1H),3.95(s,6H),3.61(td,J=6.6,3.9Hz,1H),3.04(s,3H),2.86(s,3H),2.23(s,2H),1.82(ddt,J=33.1,14.2,7.2Hz,2H)。MS(ES+)C27H29Cl2N5O4要求值：558，實驗值：559[M+H]+。
步驟7b：(1R,3S,4R)-3-胺基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-N,N-二甲基環戊烷-1-甲醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0094
將((1S,2R,4S)-2-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-4-(二甲基胺甲醯基)環戊基)胺甲酸第三丁酯(0.062g,0.103mmol)吸收於DCM(2ml)中且以含4M HCl之二噁烷(3ml)處理且攪拌3小時。去除溶劑以得到粗(1S,3S,4R)-3-胺基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-N,N-二甲基環戊烷-1-甲醯胺，定量產率。MS(ES+)C24H27Cl2N5O3要求值：504，實驗值：505[M+H]+。
步驟8b：(1S,3S,4R)-3-丙烯醯胺基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-N,N-二甲基環戊烷-1-甲醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0095
將(1R,3S,4R)-3-胺基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-N,N-二甲基環戊烷甲醯胺(0.050g,0.099mmol)吸收於CH2Cl2(25ml)中且冷卻至0℃，隨後添加DIEA(0.017ml,0.099mmol)，然後緩慢添加丙烯醯氯(8.86μl,0.109mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌30分鐘。完成反應後且直接裝載至二氧化矽上且經由急驟層析(0-10% CH2Cl2/MeOH；12g管柱)純化。經回收得到(1S,3S,4R)-3-丙烯醯胺基-4-((6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基)胺基)-N,N-二甲基環戊烷甲醯胺(0.029g,0.052mmol，產率52.4%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 9.12(s,1H),7.86(d,J=8.0Hz,1H),7.65(s,1H),7.50(q,J=8.7Hz,2H),7.17(d,J=7.9Hz,1H),6.99(s,1H),6.18(dd,J=17.0,10.1Hz,1H),6.00(dd,J=17.0,2.3Hz,1H),5.51(dd,J=10.1,2.3Hz,1H),4.55(s,1H),4.44(s,1H),3.95(s,6H),3.28-3.14(m,3H),2.99(s,2H),2.84(s,2H),2.18-1.81(m,3H),1.27-1.15(m,1H)。MS(ES+)C27H29Cl2N5O4要求值：558，實驗值：559[M+H]+。
共用中間體之製備
((3R,4S)-4-胺基四氫呋喃-3-基)胺甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0096
步驟1：((3S,4R)-4-羥基四氫呋喃-3-基)胺甲酸第三丁酯之合成
中間體(3R,4S)-4-胺基四氫呋喃-3-醇係如在WO 01/29013(PCT/US00/28815；第44-45頁；實例1)中製備。將(3R,4S)-4-胺基四氫呋喃-3-醇(10.6g,103mmol)、三乙胺(26g,257mmol)及BOC酸酐(24.7g,113mmol)於甲醇(206mL,0.5M)中之溶液在室溫下攪拌超過45小時。然後在減壓下去除溶劑。以水(約120mL)處理米黃色固體。藉由過濾分離得到白色結晶固體且在真空下乾燥隔夜以得到白色固體狀((3S,4R)-4-羥基四氫呋喃 -3-基)胺甲酸第三丁酯(17.08g,82%)。
步驟2：((3R,4S)-4-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)四氫呋喃-3-基)胺甲酸第三丁酯之合成
將((3S,4R)-4-羥基四氫呋喃-3-基)胺甲酸第三丁酯(15.36g,76mmol)、鄰苯二甲醯亞胺(13.34g,91mmol)及三苯基膦(23.8g,91mmol)之混合物在THF(378mL,0.2M)中在0℃下攪拌10分鐘，然後經20分鐘逐滴添加DIAD(18.34g,91mmol)。將反應在0℃下攪拌約40分鐘。在減壓下去除溶劑，且以少於50mL乙醚處理粗油狀物並進行超音波處理。形成白色沈澱物。藉由過濾分離得到固體，以少量乙醚洗滌，且乾燥以得到10.62g白色固體。將經冷卻之濾液再次過濾以得到額外2.54g白色固體，((3R,4S)-4-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)四氫呋喃-3-基)胺甲酸第三丁酯之總產量為13.16g。
步驟3：((3R,4S)-4-胺基四氫呋喃-3-基)胺甲酸第三丁酯之合成
將((3R,4S)-4-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)四氫呋喃-3-基)胺甲酸第三丁酯(13.08g,39.4mmol)溶於乙醇(98mL,0.4M))中。添加肼單水合物(1.97g,39.4mmol)，且將反應在50℃下攪拌30分鐘且然後在75℃下攪拌2小時。然後將反應冷卻至室溫。藉由過濾去除白色固體。濃縮濾液且乾燥，然後以乙醇(約15mL)處理。藉由過濾去除額外白色固體。然後濃縮濾液且乾燥以得到濃稠透明油狀((3R,4S)-4-胺基四氫呋喃-3-基)胺甲酸第三丁酯(在90%純度下為8.724g；99%)。
(3S,4S)-4-疊氮基四氫-2H-哌喃-3-胺之合成
Figure TWI675828B_D0097
步驟1：(3R,4R)-4-羥基四氫-2H-哌喃-3-基)胺甲酸酯之合成
Figure TWI675828B_D0098
將(3R,4R)-3-(((S)-1-苯基乙基)胺基)四氫-2H-哌喃-4-醇(2.0g,9.04mmol)吸收於甲醇(10ml)中，隨後添加Et3N(1.260ml,9.04mmol)及BOC-酸酐(2.308ml,9.94mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌過夜。在真空中去除溶劑。將殘餘物吸收於DCM(10ml)及己烷(20ml)中且加熱至80℃直至溶劑量減少一半。將反應混合物移離熱源且冷卻至室溫，同時攪拌，添加5ml乙醚且在室溫下攪拌2小時。過濾反應混合物以去除固體，以乙醚洗滌且乾燥。經回收得到白色固體狀((3R,4R)-4-羥基四氫-2H-哌喃-3-基)胺甲酸第三丁酯(1.6g,7.36mmol，產率81%)。1H NMR(400MHZ,D6-DMSO)：δH 6.60(1H,bd),4.77(1H,d),3.72(2H,m),3.39(1H,m),3.26-3.11(2H,m),2.89(1H,t),1.82(1H,m),1.38(10H,m)。
步驟2：甲磺酸(3R,4R)-3-((第三丁氧基羰基)胺基)四氫-2H-哌喃-4-基酯之合成
Figure TWI675828B_D0099
將((3R,4R)-4-羥基四氫-2H-哌喃-3-基)胺甲酸第三丁酯(1.6g,7.36mmol)吸收於CH2Cl2(20ml)中且冷卻至0℃，隨後添加Et3N(1.232ml,8.84mmol)。5分鐘後，逐滴添加DCM(5ml)中之甲磺醯氯(0.631ml,8.10mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌30分鐘且使其升溫至環境溫度，同時攪拌2小時。以水及DCM稀釋反應混合物，且分離各層。合併有機層且以水×2洗滌，經Na2SO4乾燥且在真空中去除溶劑。將乾燥殘餘物在高真空下隔夜。經回收得到白色固體狀(3R,4R)-甲磺酸3-((第三丁氧基羰基)胺基)四氫-2H-哌喃-4-基酯(2.2g,7.45mmol，產率100%)。1H NMR(400MHZ,CDCl3)：δH 5.02(1H,bd),4.75(1H,m),4.01(1H,dd),3.87(1H,m),3.70-3.57(2H,m),3.46(1H,m),3.10(3H,s),2.20(1H,m),1.93(1H,m),1.45(9H,s)。
步驟3：((3S,4S)-4-疊氮基四氫-2H-哌喃-3-基)胺甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0100
將(3R,4R)-甲磺酸3-((第三丁氧基羰基)胺基)四氫-2H-哌喃-4-基酯(2.2g,7.45mmol)、疊氮化鈉(0.968g,14.90mmol)及乙酸鈉(1.222g,14.90mmol)吸收於DMF(15ml)中。將反應混合物在95℃下加熱隔夜。將反應混合物移離熱源且添加20ml水且攪拌，同時冷卻。以EtOAc萃取反應混合物。合併有機層且以水洗滌。乾燥有機物且去除溶劑以得到黃色油狀((3S,4S)-4-疊氮基四氫-2H-哌喃-3-基)胺甲酸第三丁酯(1.8g,7.43mmol，產率100%)。MS(ES+)C10H18N4O3要求值：242，實驗值：265[M+Na]+。
步驟4：(3S,4S)-4-疊氮基四氫-2H-哌喃-3-胺之合成
Figure TWI675828B_D0101
將((3S,4S)-4-疊氮基四氫-2H-哌喃-3-基)胺甲酸第三丁酯(1.5g,6.19mmol)吸收於DCM(5ml)中且添加4N HCl二噁烷(4.64ml,18.57mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。去除溶劑以得到(3S,4S)-4-疊氮基四氫-2H-哌喃-3-胺(1.1g,6.16mmol，產率99%)，為HCl鹽。MS(ES+)C5H10N4O要求值：142，實驗值：143[M+H]+。
(1S,2R,3S,5S)-2-胺基雙環[3.1.0]己-3-基胺甲酸2-(三甲基矽基)乙酯之合成
Figure TWI675828B_D0102
步驟1：(R)-4-苄基-3-戊-4-烯醯基噁唑啶-2-酮之合成
Figure TWI675828B_D0103
在氮氣及-78℃下向(4R)-4-(苯基甲基)-1,3-噁唑啶-2-酮(50g,282mmol)於THF(300mL)中之溶液中逐滴添加含n-BuLi之THF(2.4M,176mL,423mmol)，且將所得混合物在-78℃下攪拌1h。然後逐滴添加4-戊烯醯基氯(49mL,423mmol)。在-78℃下再攪拌1小時後，使反應混合物升溫至室溫且攪拌隔夜。以水稀釋後，以乙酸乙酯(2×400mL)萃取混合物。以鹽水洗滌合併之乙酸乙酯萃取物，經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。藉由矽膠管柱層析(乙酸乙酯：石油醚=1：10)來純化粗殘餘物以提供淺黃色油狀標題化合物(68g,93%)。MS(ES+)C15H17NO3要求值：259，實驗值：260[M+H]+。
步驟2：(R)-3-((2S,3S,E)-2-烯丙基-3-羥基-5-苯基戊-4-烯醯基)-4-苄基噁唑啶-2-酮之合成
Figure TWI675828B_D0104
將(R)-4-苄基-3-戊-4-烯醯基噁唑啶-2-酮(50g,193mmol)、氯化鎂(18.3g,193mmol)、六氟銻酸鈉(V)(14.9g,58mmol)、三乙胺(80mL,579mmol)、(反式)-桂皮醛(30.6g,232mmol)及氯三甲矽烷(37.2mL,290mmol)於乙酸乙酯(500mL)中之混合物在室溫下攪拌17h。以乙酸乙酯稀釋混合物且過濾以去除固體。將濾液濃縮至較小體積，且然後以甲醇(500mL)及少量乙酸乙酯稀釋。以三氟乙酸(3mL)處理後，將所得溶液在室溫下攪拌1h，且然後在減壓下濃縮至乾燥。藉由矽膠管柱層析(乙酸乙酯：石油醚=1：10)來純化殘餘物以提供黃色半固體狀標題化合物(60g,80%)。MS(ES+)C24H25NO4要求值：391，實驗值：374[M+H-H2O]+。
步驟3：(S)-5-苄基-1-((1S,2S)-2-羥基環戊-3-烯羰基)吡咯啶-2-酮之合成
Figure TWI675828B_D0105
將(R)-3-((2S,3S,E)-2-烯丙基-3-羥基-5-苯基戊-4-烯醯基)-4-苄基噁唑啶-2-酮(50g,128mmol)及格拉布斯(Grubbs)第2代觸媒[目錄號/批號](5.4g,6.4mmol)於甲苯(300mL)中之溶液以氮氣脫氣三次，且在室溫下攪拌隔夜。然後將反應混合物在減壓下濃縮至乾燥，且藉由矽膠管柱層析(乙酸乙酯：石油醚=1：4)來純化殘餘物以提供深褐色油狀標題化合物(32g,87%)，其在靜置時固化。MS(ES+)C17H19NO3要求值：285，實驗值：270[M+H-H2O]+。
步驟4：(R)-4-苄基-3-((1S,2S,3S,5S)-2-羥基雙環[3.1.0]己烷-3-羰基)噁唑啶-2-酮之合成
Figure TWI675828B_D0106
將(S)-5-苄基-1-((1S,2S)-2-羥基環戊-3-烯羰基)吡咯啶-2-酮 (25g,87.1mmol)於二氯甲烷(300mL)中之溶液在冰浴中冷卻，且藉由逐滴添加含1M二乙基鋅之己烷(435mL,435mmol)進行處理。在0℃攪拌下20分鐘後，逐滴添加二碘甲烷(69.6mL,871mmol)。將所得渾濁溶液在0℃下再攪拌20分鐘，且然後使其升溫至室溫。在室溫下攪拌6h後，以飽和氯化銨水溶液淬滅反應混合物且以乙酸乙酯萃取。以鹽水洗滌合併之有機萃取物，經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮至乾燥。藉由矽膠管柱層析(乙酸乙酯：石油醚=1：4)來純化粗物質以提供淺褐色黏稠油狀標題化合物(308mg,89%)。MS(ES+)C17H19NO4要求值：301，實驗值：284[M+H-H2O]+。
步驟5：(R)-4-苄基-3-((1S,2S,3S,5S)-2-(第三丁基二甲基矽氧基)-雙環[3.1.0]己烷-3-羰基)噁唑啶-2-酮之合成
Figure TWI675828B_D0107
在0℃及氮氣下向(R)-4-苄基-3-((1S,2S,3S,5S)-2-羥基雙環[3.1.0]己烷-3-羰基)噁唑啶-2-酮(25g,83mmol)及2,6-二甲基吡啶(38.2mL,332mmol)於二氯甲烷(300mL)中之經攪拌溶液中添加三氟甲磺酸第三丁基二甲基矽酯(47.6mL,207.5mmol)。所得混合物將在0℃下攪拌30分鐘且然後在室溫下攪拌1h。以甲醇(25mL)稀釋後，將混合物倒入水中且以乙醚(2×400mL)萃取。以鹽水洗滌合併之乙醚萃取物，經硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮且藉由矽膠管柱層析(乙酸乙酯：石油醚=1：8)純化以提供無色油狀標題化合物(29g,86%)。MS(ES+)C23H33NO4Si要求值：415，實驗值：416[M+H-H2O]+。
步驟6：(1S,2S,3S,5S)-2-(第三丁基二甲基矽氧基)雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸之合成
Figure TWI675828B_D0108
在0℃下向(R)-4-苄基-3-((1S,2S,3S,5S)-2-(第三丁基二甲基矽氧基)雙環[3.1.0]己烷-3-羰基)噁唑啶-2-酮(40g,96.4mmol)於THF(200mL)及水(50mL)中之溶液中逐滴添加30%過氧化氫水溶液(88mL,771mmol)，隨後添加氫氧化鋰單水合物(16g,386mmol)於水(100mL)中之溶液。在0℃下攪拌1h後，反應混合物在室溫下攪拌隔夜。藉由添加飽和硫酸氫鈉水溶液使過量的過氧化氫完全耗盡。然後將混合物以1N NaOH調整至pH=14且以乙醚(400mL)洗滌。然後以1M硫酸氫鉀水溶液將水層酸化至pH=3，且以乙酸乙酯(3×400mL)萃取。以鹽水洗滌合併之有機萃取物，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮以提供無色油狀標題化合物(22g,88%)。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ ppm 4.73-4.70(m,1H),2.35-2.31(m,1H),2.10-2.00(m,2H),1.45-1.42(m,1H),1.34-1.32(m,1H),0.91(s,9H),0.58-0.55(m,1H),0.44-0.40(m,1H),0.11(s,3H),0.07(s,3H)。
步驟7：(1S,2S,3S,5S)-2-(第三丁基二甲基矽氧基)雙環[3.1.0]己-3-基胺甲酸苄酯之合成
Figure TWI675828B_D0109
在室溫下向(1S,2S,3S,5S)-2-(第三丁基二甲基矽氧基)雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(4g,15.625mmol)、三乙胺(22mL,156mmol)及苄醇(17mL,156mmol)於甲苯(50mL)中之溶液中逐滴添加疊氮磷酸二苯酯(33.7mL,156mmol)，且將所得混合物在100℃下攪拌隔夜。將反應溶液冷卻至室溫，以乙酸乙酯(100mL)稀釋，且以水(3×50mL)及鹽水(50mL)洗滌。經硫酸鈉乾燥有機層，過濾且濃縮以提供粗產物，藉由矽膠管柱層析(乙酸乙酯：石油醚=1：8)將其純化以提供白色固體狀標題化合物(3.0g,54%)。MS(ES+)C20H31NO3Si要求值：361，實驗值：362[M+H]+。
步驟8：(1S,2S,3S,5S)-2-羥基雙環[3.1.0]己-3-基胺甲酸苄酯之合成
Figure TWI675828B_D0110
在室溫下向(1S,2S,3S,5S)-2-(第三丁基二甲基矽氧基)雙環[3.1.0]己-3-基胺甲酸苄酯(2.0g,5.540mmol)於THF(20)中之溶液中添加含1M四丁基氟化銨之THF(55mL,55.4mmol)，且將混合物在室溫下攪拌隔夜。以乙酸乙酯(100mL)稀釋反應溶液，且以水(3×50mL)及鹽水(50mL)洗滌。經硫酸鈉乾燥有機層，過濾且濃縮以提供白色固體狀標題化合物(1.2g,92%)。MS(ES+)C14H17NO3要求值：247，實驗值：230[M+H-H2O]+。
步驟9：(1S,2R,3S,5S)-2-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)雙環[3.1.0]己-3-基胺甲酸苄酯之合成
Figure TWI675828B_D0111
將三苯基膦(6.4g,24.292mmol)、鄰苯二甲醯亞胺(6.2g,42.511mmol)及(1S,2S,3S,5S)-2-羥基雙環[3.1.0]己-3-基胺甲酸苄酯(3.0g,12.146mmol)於甲苯(250mL)中之溶液在-78℃及氮氣保護下攪拌30分鐘，隨後逐滴添加偶氮二異丁腈(8.6mL,42.511mmol)。將所得混合物在-78℃下再攪拌1小時且然後在室溫下攪拌隔夜。以10mL甲醇處理反應混合物，且在減壓下去除溶劑。藉由矽膠管柱層析(乙酸乙酯：石油醚=1：2)來純化粗物質以提供淺黃色油狀標題化合物(3.0g,65%)。MS(ES+)C22H20N2O4要求值：376，實驗值：399[M+23]+。
步驟10：2-((1S,2R,3S,5S)-3-胺基雙環[3.1.0]己-2-基)異吲哚啉-1,3-二酮之合成
Figure TWI675828B_D0112
在室溫下向(1S,2R,3S,5S)-2-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)雙環[3.1.0]己-3-基胺甲酸苄酯(4.0g,10.638mmol)於氯仿(30mL)中之溶液中逐滴添加三甲基碘矽烷(14.6mL,106.380mmol)，且將所得混合物在室溫下攪拌1h。以甲醇(5mL)淬滅反應，以乙酸乙酯(150mL)稀釋，且以水(3×50mL)及鹽水(50mL)洗滌。經硫酸鈉乾燥有機層，過濾且濃縮以提供粗化合物，其未經進一步純化即直接用於下一反應。MS(ES+)C14H14N2O2要求值：242，實驗值：243[M+H]+。
步驟11：(1S,2R,3S,5S)-2-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)雙環[3.1.0]己-3-基胺甲酸2-(三甲基矽基)乙酯之合成
Figure TWI675828B_D0113
將2-((1S,2R,3S,5S)-3-胺基雙環[3.1.0]己-2-基)異吲哚啉-1,3-二酮(2.0g,8.264mmol)、碳酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基2-(三甲基矽基)乙酯(3.2g,12.396mmol)及三乙胺(3.4mL,24.792mmol)於二噁烷/水(100mL,v/v=1/1)中之溶液在室溫下攪拌1.5h。然後以乙酸乙酯(100mL)稀釋反應混合物，藉由1M鹽酸(2×50mL)、飽和碳酸氫鈉溶液(2×50mL)及鹽水(50mL)洗滌。在減壓下濃縮有機層，且藉由矽膠管柱層析(乙酸乙酯：石油醚=1：4)來純化殘餘物以提供黃色油狀標題化合物(2.5g,78%)。MS(ES+)C20H26N2O4Si要求值：386，實驗值：410[M+23]+。
步驟12：(1S,2R,3S,5S)-2-胺基雙環[3.1.0]己-3-基胺甲酸2-(三甲基矽基) 乙酯之合成
Figure TWI675828B_D0114
在室溫下向(1S,2R,3S,5S)-2-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)雙環[3.1.0]己-3-基胺甲酸2-(三甲基矽基)乙酯(1.5g,3.886mmol)於乙醇(20mL)中之溶液中添加肼(1.9ml,38.860mmol)，且將所得混合物在75℃下攪拌2h。濃縮反應溶液，且藉由矽膠管柱層析(乙酸乙酯：石油醚=1：4)來純化殘餘物以提供淺黃色半固體狀標題化合物(800mg,80%)。1H-NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ ppm 6.53(d,1H,J=8.0Hz),4.04-4.00(m,2H),3.45-3.38(m,1H),3.00(d,1H,J=5.6Hz),1.76-1.73(m,1H),1.68-1.55(m,1H),1.24-1.16(m,2H),0.90-0.88(m,2H),0.37-0.35(m,1H),0.34-0.22(m,1H),0.02(s,9H)。
順式-3-羥基-1,1-二側氧基六氫-1-噻喃-4-基胺甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0115
步驟1：(S)-2-胺基-4-(甲硫基)丁酸甲酯之合成
Figure TWI675828B_D0116
在氮氣下向經火焰乾燥之燒瓶中添加甲醇(60mL)。將經攪拌溶液冷卻至0℃，然後逐滴添加亞硫醯氯(7.32mL,100.34mmol)。將溶液在0℃下攪拌10min，然後一次性添加甲硫胺酸(10g,33.8mmol)。將反應 在室溫下攪拌隔夜，此後在減壓下去除揮發物以得到淺黃色固體狀標題化合物。
步驟2：(S)-2-(第三丁氧基羰基胺基)-4-(甲硫基)丁酸甲酯之合成
Figure TWI675828B_D0117
在0℃下向(S)-2-胺基-4-(甲硫基)丁酸甲酯於二氯甲烷(300mL)中之溶液中添加三乙胺(35mL)，隨後添加二碳酸二-第三丁酯(26.98g,125mmol)。在室溫下攪拌3h後，以二氯甲烷(200mL)稀釋反應混合物且以水(2*150mL)洗滌。乾燥合併之有機層(硫酸鎂)，過濾且在減壓下濃縮。藉由急驟管柱層析來純化產物(Rf=0.5，乙酸乙酯：石油醚，1：4)以提供透明油狀標題化合物(15g，產率85%)。
步驟3：(S)-2-(第三丁氧基羰基胺基)-4-(甲基磺醯基)丁酸甲酯之合成
Figure TWI675828B_D0118
將N-(第三丁氧基羰基)-L-甲硫胺酸甲酯(8.76g,33.3mmol)添加至1000mL圓底燒瓶中且溶解於二氯甲烷(150mL)中。將經攪拌溶液冷卻至0℃，隨後在5min時間段內添加30mL二氯甲烷中之3-氯過氧苯甲酸(70%,18.0g,7.32mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌1.5h，此時以二氯甲烷(200mL)及碳酸氫鈉(300mL飽和水溶液)將其稀釋。分離有機層，相繼以碳酸氫鈉(2 * 300mL飽和水溶液)洗滌，乾燥(硫酸鎂)，過濾且在減壓下濃縮。藉由急驟管柱層析(乙酸乙酯：石油醚，6：4)來純化產物以提供黃色固體狀標題化合物(5g，產率51%)。
步驟4：(1,1-二氧代-3-側氧基四氫-2H-噻喃-4-基)胺甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0119
將(S)-2-(第三丁氧基羰基胺基)-4-(甲基磺醯基)丁酸甲酯(2g,6.78mmol)於四氫呋喃(50mL)中之溶液冷卻至-78℃，向其中逐滴添加雙(三甲基矽基)醯胺鉀(1.0M，甲苯溶液，15ml)，且將混合物在-78℃下攪拌2h且在室溫下再攪拌2h。添加氯化銨水溶液(1M)，且攪拌混合物。對反應混合物進行分液。然後以水及鹽水洗滌所得有機層，且經無水硫酸鎂乾燥。 在減壓下蒸餾出溶劑，且藉由過濾來收集所形成固體以獲得標題目標。將先前分離之水層以乙酸乙酯萃取兩次。合併所得有機層，以水及鹽水洗滌，且經無水硫酸鎂乾燥。合併乙酸乙酯萃取物，乾燥且然後在減壓下濃縮以獲得標題目標。藉由急驟管柱層析(乙酸乙酯：石油醚，3：1)來純化合併之產物以提供黃色固體狀標題化合物(55mg，產率22%)。
步驟5：(Z)-(3-(羥基亞胺基)-1,1-二氧代四氫-2H-噻喃-4-基)胺甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0120
將羥胺鹽酸鹽(26mg,0.379mmol)添加至化合物5(50mg,0.189mmol)及碳酸鈉(64mg,0.757mmol)於水(5mL)中之混合物中。在50℃下攪拌4h後，將反應混合物冷卻至室溫且過濾以得到白色固體狀標題化合物(50mg，產率95%)。MS(ES+)C10H18N2O5S要求值：278，實驗值：179[M+H-100]+,223[M+H-56]+。
步驟6：順式-3-羥基-1,1-二側氧基六氫-1-噻喃-4-基胺甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0121
將化合物6(2.5g,7.6mmol)及雷氏鎳(Raney-Nickel)(過量)於甲醇(200mL)及THF(200mL)中之混合物在室溫及氫氣球下攪拌24h。 過濾混合物，且濃縮濾液。藉由急驟管柱層析(甲醇：二氯甲烷，1：2)來純化殘餘物以提供低極性化合物外消旋體(400mg，產率16%)及高極性化合物(600mg，產率25%)。
低極性化合物外消旋體：1H-NMR(500MHz,CDCl3)δ ppm 5.41(s,1H),3.78-3.76(m,1H),3.75-3.49(m,1H),3.27-3.24(m,1H),3.10-3.05(m,3H),2.35-2.11(m,2H),1.77(s,3H),1.45(s,9H)。
高極性化合物外消旋體：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 4.76(s,1H),3.42(d,J=9.3Hz,1H),3.30(d,J=14.1Hz,1H),3.17(td,J=10.7,3.6Hz,1H),3.07(dd,J=6.7,3.1Hz,2H),2.93(t,1H),2.51-2.35(m,1H),2.09-1.92(m,1H),1.50(s,1H),1.46(s,9H)。
步驟7：(3R,4S)-3-胺基-4-(苄氧基羰基胺基)哌啶-1-甲酸第三丁酯及(3S,4R)-3-胺基-4-(苄氧基羰基胺基)哌啶-1-甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0122
步驟8：反式-4-(苄氧基羰基胺基)-3-羥基哌啶-1-甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0123
在0℃下向反式-4-胺基-3-羥基哌啶-1-甲酸第三丁酯(1.05g,4.86mmol)於80mL二氯甲烷中之經攪拌混合物中添加三乙胺(5.89g,5.83mmol)，隨後添加N-(苄氧基羰氧基)琥珀醯亞胺(1.27g,5.10mmol)。將反應在室溫下攪拌16h且然後以100mL二氯甲烷稀釋。以5%檸檬酸溶液(2×100mL)、5%碳酸鉀溶液(2×100mL)及鹽水(200mL)洗滌溶液混合物。經無水硫酸鈉乾燥有機層且過濾，隨後在減壓下濃縮。藉由矽膠管柱層析(乙酸乙酯：石油醚=1：4~1：2)來純化所得油性物質以提供無色油狀標題化合物(1.7g，約100%，粗物)。MS(ES+)C18H26N2O5要求值：350，實驗值：251[M+H-100]+。
步驟9：反式-4-(苄氧基羰基胺基)-3-(甲基磺醯氧基)-哌啶-1-甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0124
在0℃下向反式-4-(苄氧基羰基胺基)-3-羥基哌啶-1-甲酸第三丁酯(5.0g,14.3mmol)及三乙胺(4.5g,43.0mmol)於二氯甲烷(100mL)中之溶液中添加甲磺醯氯(4.9g,43.0mmol)，且將混合物在0℃下攪拌2h。以水(150mL×3)及鹽水洗滌溶液，經無水硫酸鈉乾燥且過濾，隨後在減壓下濃縮以得到黃色油狀標題化合物(6.0g，粗物)。MS(ES+)C19H28N2O7S要求值：428，實驗值：329[M+H-100]+。
步驟10：反式-3-疊氮基-4-(苄氧基羰基胺基)哌啶-1-甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0125
向反式-4-(苄氧基羰基胺基)-3-(甲基磺醯氧基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(6.0g,14mmol)於二甲亞碸(40mL)中之溶液中添加疊氮化鈉(9.11g,140mmol)，且將反應混合物在90℃及N2下攪拌隔夜。將溶液混合物冷卻至約30℃，以乙酸乙酯(約300mL)稀釋，且以水(700mL×3)及鹽水洗滌。經無水硫酸鈉乾燥有機層，過濾且濃縮成黃色油狀標題化合物(3.8g,72%)。MS(ES+)C18H25N5O4要求值：375，實驗值：276[M+H-100]+,373[M+Na]+。
步驟11：(3R,4S)-3-胺基-4-(苄氧基羰基胺基)哌啶-1-甲酸第三丁酯及(3S,4R)-3-胺基-4-(苄氧基羰基胺基)哌啶-1-甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0126
將粗反式-3-疊氮基-4-(苄氧基羰基胺基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(12g，約32mmol)及三苯基膦(41.9g,160mmol)於THF(100mL)及水(5mL)中之混合物在70℃下攪拌2h。將反應混合物冷卻至室溫且以乙酸乙酯(500mL)稀釋。以鹽水(50mL)洗滌有機層且在減壓下直接蒸發。藉由矽膠管柱層析(石油醚/乙酸乙酯=4/1~1：1)來純化殘餘物以提供黃色油狀反式-3-胺基-4-(苄氧基羰基胺基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(5.0g,44%)。MS(ES+)C18H27N3O4要求值：349，實驗值：350[M+H]+。
藉由掌性-HPLC分離得到2g上述外消旋樣品以提供5a(550mg，掌性-HPLC中之峰1)及5b(620mg，掌性-HPLC中之峰2)。
5a：1H-NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ ppm 7.37-7.30(m,5H),7.09-7.07(m,1H),5.02(s,2H),4.00-2.85(m,6H),1.63-1.58(m,1H),1.46-1.39(m,1H),1.38(s,9H)。
5b：1H-NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ ppm 7.38-7.29(m,5H),7.10-7.07(m,1H),5.02(s,2H),4.00-3.62(br,1H),3.61-3.59(m,1H),3.50-3.48(m,1H),3.15-3.10(m,1H),3.10-2.89(m,1H),2.87-2.83(m,1H),1.66-1.60(m,2H),1.40(s,9H)
順式-4-胺基-3-(((2-(三甲基矽基)乙氧基)羰基)胺基)哌啶-1-甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0127
步驟1：反式-4-(苄氧基羰基胺基)-3-羥基哌啶-1-甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0128
在0℃下向反式-4-胺基-3-羥基哌啶-1-甲酸第三丁酯(1.05g,4.86mmol)於80mL二氯甲烷中之經攪拌混合物中添加三乙胺(5.89g,5.83mmol)，隨後添加N-(苄氧基羰氧基)琥珀醯亞胺(1.27g,5.10mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌16h且然後以100mL二氯甲烷稀釋。以5%檸檬酸溶液(2×100mL)、5%碳酸鉀溶液(2×100mL)及鹽水(200mL)洗滌溶液混合物。經無水硫酸鈉乾燥有機層且過濾，隨後在減壓下濃縮。藉由矽膠管柱層析(乙酸乙酯：石油醚=1：4~1：2)來純化所得油性物質以提供無色油狀標題化合物(1.7g，約100%，粗物)。MS(ES+)C18H26N2O5要求值：350，實驗值：251[M+H-100]+。
步驟2：反式-4-(苄氧基羰基胺基)-3-(甲基磺醯氧基)哌啶-1-甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0129
在0℃下向反式-4-(苄氧基羰基胺基)-3-羥基哌啶-1-甲酸第三丁酯(5.0g,14.3mmol)及三乙胺(4.5g,43.0mmol)於二氯甲烷(100mL)中之溶液中添加甲磺醯氯(4.9g,43.0mmol)，且將混合物在0℃下攪拌2h。以水(150mL×3)及鹽水洗滌溶液，經無水硫酸鈉乾燥且過濾，隨後在減壓下濃縮以得到黃色油狀標題化合物(6.0g，粗物)。MS(ES+)C19H28N2O7S要求值：428，實驗值：329[M+H-100]+。
步驟3：順式-3-疊氮基-4-(苄氧基羰基胺基)哌啶-1-甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0130
向反式-4-(苄氧基羰基胺基)-3-(甲基磺醯氧基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(6.0g,14mmol)於二甲亞碸(40mL)中之溶液中添加疊氮化鈉(9.11g,140mmol)，且將反應混合物在90℃及N2下攪拌隔夜。將溶液混合物冷卻至約30℃，以乙酸乙酯(約300mL)稀釋，且以水(700mL×3)及鹽水洗滌。經無水硫酸鈉乾燥有機層，過濾且濃縮成黃色油狀標題化合物(3.8g,72%)。MS(ES+)C18H25N5O4要求值：375，實驗值：276[M+H-100]+,373[M+Na]+。
步驟4：順式-3-胺基-4-(苄氧基羰基胺基)哌啶-1-甲酸第三丁酯及(3S,4R)-3-胺基-4-(苄氧基羰基胺基)哌啶-1-甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0131
將粗順式-3-疊氮基-4-(苄氧基羰基胺基)哌啶-1-甲酸第三丁 酯(12g，約32mmol)及三苯基膦(41.9g,160mmol)於THF(100mL)及水(5mL)中之混合物在70℃下攪拌2h。將反應混合物冷卻至室溫且以乙酸乙酯(500mL)稀釋。以鹽水(50mL)洗滌有機層且在減壓下直接蒸發。藉由矽膠管柱層析(石油醚/乙酸乙酯=4/1~1：1)來純化殘餘物以提供黃色油狀標題化合物(外消旋物，5.0g,44%)。MS(ES+)C18H27N3O4要求值：349，實驗值：350[M+H]+。
步驟5：順式-4-(苄氧基羰基胺基)-3-((2-(三甲基矽基)乙氧基)-羰基胺基)哌啶-1-甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0132
將順式-3-胺基-4-(苄氧基羰基胺基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(3.0g,8.6mmol)、碳酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基2-(三甲基矽基)乙基酯(2.5g,9.5mmol)及三乙胺於二噁烷/水(40mL,v/v=1/1)中之溶液在室溫下攪拌4h。此後，以乙酸乙酯(200mL)稀釋溶液，且藉由1M鹽酸(50mL)、飽和碳酸氫鈉溶液(50mL)及鹽水(50mL)洗滌。經硫酸鈉乾燥有機層，過濾且濃縮。藉由矽膠管柱層析(石油醚/乙酸乙酯=4/1)來純化殘餘物以提供白色固體狀標題化合物(3.5g,83%)。MS(ES+)C24H39N3O6Si要求值：493，實驗值：516[M+23]+。
步驟6：順式-4-胺基-3-((2-(三甲基矽基)乙氧基)-羰基胺基)哌啶-1-甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0133
將順式-4-(苄氧基羰基胺基)-3-((2-(三甲基矽基)乙氧基)羰基胺基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(1.8g,3.6mmol)及10%鈀碳(180mg)於異丙醇(60mL)中之混合物在1atm氫氣氣氛(氫氣球)及室溫下攪拌3h。此後，經 由矽藻土墊過濾混合物。濃縮濾液且藉由矽膠管柱層析(甲醇/二氯甲烷=1/30至1/10)純化以提供黃色油狀標題化合物(800mg,61%)。MS(ES+)C16H33N3O4Si要求值：359，實驗值：360[M+H]+。
外消旋物-4-胺基-3-(第三丁氧基羰基胺基)環己烷甲酸乙酯之合成
Figure TWI675828B_D0134
步驟1：外消旋物-4-碘-6-氧雜-雙環[3.2.1]辛-7-酮之合成
Figure TWI675828B_D0135
在5℃之內部溫度下向環己-3-烯甲酸(外消旋物，42.0g,333mmol)、碘化鉀(72.0g,433mmol)及碳酸氫鈉(36.4g,433mmol)於二氯甲烷(750mL)及水(750mL)中之混合物中添加碘(110.0g,433mmol)，且將反應混合物在室溫下攪拌3h。以1N硫代硫酸鈉水溶液(1500mL)淬滅後，以二氯甲烷(1000mL×2)萃取由此獲得之混合物。以碳酸氫鈉水溶液(1000mL)、水(2000mL)及鹽水(1000mL)洗滌合併之有機層，經無水硫酸鎂乾燥且過濾，隨後濃縮。藉由過濾來收集所沈澱之晶體且以己烷洗滌，隨後乾燥，以藉此得到白色固體狀標題化合物(80.2g,95%)。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ ppm 4.82(t,1H,J=4.8Hz),4.50(t,1H,J=4.4Hz),2.81(s,1H),2.78(s,1H),2.68-2.64(m,2H),2.45-2.37(m,4H),2.14-2.12(m,1H),2.10-2.08(m,1H),1.91-1.82(m,4H)。
步驟2：外消旋物-7-氧雜-雙環[4.1.0]庚烷-3-甲酸乙酯之合成
Figure TWI675828B_D0136
在室溫下向外消旋物-4-碘-6-氧雜-雙環[3.2.1]辛-7-酮(45.0g,180mmol)於乙醇(400mL)中之懸浮液中添加2N碳酸氫鈉水溶液(110mL,220mmol)並同時攪拌，且將由此獲得之混合物攪拌3h。在35℃之溫度及減壓下在浴中濃縮反應混合物。將水(500mL)添加至所得油性物質中，且以乙酸乙酯(500mL)萃取由此獲得之混合物。以水(500mL)洗滌有機層，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且隨後在減壓下濃縮。藉由矽膠管柱層析(乙酸乙酯：石油醚=1：10~1：5)來純化所得油性物質，以藉此得到淺黃色油狀標題化合物(15.9g,52%)。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ ppm 4.12(q,2H,J=7.2Hz),3.16(s,2H),2.28-2.10(m,4H),1.83-1.70(m,1H),1.70-1.52(m,2H),1.25(t,3H,J=7.2Hz)。
步驟3：外消旋物-3-疊氮基-4-羥基環己烷甲酸乙酯之合成
Figure TWI675828B_D0137
將外消旋物-7-氧雜-雙環[4.1.0]庚烷-3-甲酸乙酯(24.0g,140mmol)、氯化銨(13.6g,210mmol)及疊氮化鈉(13.7g,210mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(120mL)中之混合物在76℃下攪拌13h。藉由過濾收集任何不溶物質後，在減壓下濃縮濾液，同時不允許溶劑蒸發至乾燥。將殘餘物與藉由先前過濾而收集之固體物質合併，且將由此獲得之混合物溶於水(500mL)中。以乙酸乙酯(500mL)萃取溶液。以水(500mL×5)及飽和鹽水洗滌萃取物，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮以提供黃色油狀標題化合物(28g，粗物)。MS(ES+)C9H15N3O3要求值：213，實驗值：214[M+H]+,236[M+Na]+。
步驟4：外消旋物-3-(第三丁氧基羰基胺基)-4-羥基環己烷甲酸乙酯之合 成
Figure TWI675828B_D0138
將外消旋物-3-疊氮基-4-羥基環己烷甲酸乙酯(14.0g,66mmol)、二-二碳酸第三丁酯(18.5g,85mmol)及5%鈀碳(濕度50%，2.5g)於乙酸乙酯(300mL)中之混合物在室溫及約1atm氫氣壓力下攪拌隔夜。過濾反應混合物後，濃縮濾液，且藉由矽膠管柱層析(石油醚：乙酸乙酯=4：1-3：1)來純化由此獲得之油性物質。使由此獲得之化合物自己烷重結晶，以藉此得到白色固體狀標題化合物(12.0g,62%)。MS(ES+)C14H25NO5要求值：287，實驗值：188[M+H-100]+。
步驟5：外消旋物-3-(第三丁氧基羰基胺基)-4-(甲基磺醯氧基)環己烷甲酸乙酯之合成
Figure TWI675828B_D0139
在0℃下向外消旋物-3-(第三丁氧基羰基胺基)-4-羥基環己烷甲酸乙酯(12.0g,42mmol)及三乙胺(12.7g,126mmol)於二氯甲烷(150mL)中之溶液中逐滴添加甲磺醯氯(9.5g,84mmol)，且將混合物在0℃下攪拌3h。以水(100mL×3)及鹽水洗滌溶液，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮以提供黃色油狀標題化合物(15g，粗物)。MS(ES+)C15H27NO7S要求值：365，實驗值：266[M+H-100]+。
步驟6：外消旋物-4-疊氮基-3-(第三丁氧基羰基胺基)-環己烷甲酸乙酯之合成
Figure TWI675828B_D0140
向外消旋物-3-(第三丁氧基羰基胺基)-4-(甲基磺醯氧基)環己烷甲酸乙酯(11.0g,30mmol)於二甲亞碸(110mL)中之溶液中添加疊氮化鈉(20g,300mmol)，且將混合物在90℃及N2下攪拌隔夜。將溶液冷卻至約30℃，溶於乙酸乙酯(約500mL)中，以水(500mL×5)及鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠管柱層析(石油醚：乙酸乙酯=4：1~2：1)來純化殘餘物，以藉此得到無色油狀標題化合物(4.1g,44%)。MS(ES+)C14H24N4O4要求值：312，實驗值：213[M+H-100]+。
步驟7：外消旋物-4-胺基-3-(第三丁氧基羰基胺基)-環己烷甲酸乙酯之合成
Figure TWI675828B_D0141
將外消旋物-4-疊氮基-3-(第三丁氧基羰基胺基)環己烷甲酸乙酯(14.0g,66mmol)及5%鈀碳(濕度50%，1.0g)於乙酸乙酯(100mL)中之混合物在室溫及約1atm氫氣壓力下攪拌隔夜。過濾反應混合物後，濃縮濾液。藉由矽膠管柱層析(石油醚：乙酸乙酯=4：1~1：1)來純化由此獲得之油性物質，以藉此得到黃色固體狀標題化合物(2.0g,59%)。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ ppm 4.80(d,1H,J=6.4Hz),4.12(q,1H,J=6.4Hz),3.84(br.s,1H),3.00-2.95(m,1H),2.48-2.42(m,1H),2.19-2.10(m,1H),1.96-1.89(m,1H),1.75-1.69(m,1H),1.59-1.49(m,1H),1.47(s,9H),1.29-1.22(m,4H)。
外消旋物-4-胺基-3-(6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉-2-基胺基)環己烷甲醯胺之合成
Figure TWI675828B_D0142
步驟1：外消旋物-3-胺基-4-羥基環己烷甲酸乙酯之合成
Figure TWI675828B_D0143
將外消旋物-3-疊氮基-4-羥基環己烷甲酸乙酯(8.0g,37.5mmol)及5%鈀碳(濕度50%，2.0g)於乙酸乙酯(250mL)中之懸浮液混合物在氫氣氣氛(約1atm)及室溫下攪拌隔夜。過濾反應混合物後，濃縮濾液，以藉此得到黃色固體狀標題化合物(5.8g,83%)。MS(ES+)C9H17NO3要求值：187，實驗值：188[M+H]+。
步驟2：外消旋物-3-(苄氧基羰基胺基)-4-羥基環己烷甲酸乙酯之合成
Figure TWI675828B_D0144
在0℃下向外消旋物-3-胺基-4-羥基環己烷甲酸乙酯(4.7g,25mmol)於120mL二氯甲烷中之經攪拌混合物中添加三乙胺(3.03g,30mmol)，隨後添加N-(苄氧基羰氧基)琥珀醯亞胺(6.55g,26.3mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌16h且然後以200mL二氯甲烷稀釋。以5%檸檬酸溶液(2×150mL)、5%碳酸鉀溶液(2×150mL)及鹽水(200mL)洗滌溶液。分離 有機層，經無水硫酸鈉乾燥且過濾，隨後在減壓下濃縮。藉由矽膠層析(乙酸乙酯：石油醚=1：4~2：5)來純化所得油性物質，以藉此得到黃色油狀標題化合物(7.0g,87%)。MS(ES+)C17H23NO5要求值：321，實驗值：322[M+H]+。
步驟3：外消旋物-4-疊氮基-3-(苄氧基羰基胺基)-環己烷甲酸乙酯之合成
Figure TWI675828B_D0145
在0℃下向外消旋物-3-(苄氧基羰基胺基)-4-羥基環己烷甲酸乙酯(7.0g,22mmol)及三乙胺(6.7g,66mmol)於二氯甲烷(100mL)中之溶液中逐滴添加甲磺醯氯(5.1g,44mmol)，且將混合物在此溫度下攪拌2h。以水(200mL×3)及鹽水洗滌反應混合物。經無水硫酸鈉乾燥有機層，過濾且濃縮，以藉此得到黃色油狀粗產物(8.0g，粗物)。將上述殘餘物(8.0g,20mmol)及疊氮化鈉(7.8g,120mmol)於二甲亞碸(50mL)中之混合物在100℃下攪拌18h。將反應混合物冷卻至約30℃，溶於水(約300mL)中且以乙酸乙酯(200mL×2)萃取。以鹽水(約200mL)洗滌合併之有機層，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮以得到無色油狀標題化合物(3.5g，兩步總產率為46%)。MS(ES+)C17H22N4O4要求值：346，實驗值：347[M+H]+,369[M+Na]+。
步驟4：外消旋物-3-(第三丁氧基羰基胺基)-4-羥基環己烷甲酸乙酯之合成
Figure TWI675828B_D0146
將外消旋物-4-疊氮基-3-(苄氧基羰基胺基)環己烷甲酸乙酯(3.5g,10mmol)及三苯基膦(10.4g,40mmol)於THF(200mL)及水(10mL)中 之混合物在65℃下攪拌18h。將反應混合物冷卻至室溫，然後以乙酸乙酯(200mL)稀釋，以鹽水(200mL)洗滌且在真空中蒸發。藉由矽膠層析(石油醚/乙酸乙酯=2/1~二氯甲烷/甲醇=10：1)來純化殘餘物以提供黃色油狀標題化合物(2.4g,75%)。MS(ES+)C17H24N2O4要求值：320，實驗值：321[M+H]+。
步驟5：外消旋物-3-(苄氧基羰基胺基)-4-((2-(三甲基矽基)乙氧基)羰基胺基)環己烷甲酸乙酯之合成
Figure TWI675828B_D0147
將外消旋物-3-(第三丁氧基羰基胺基)-4-羥基環己烷甲酸乙酯(1.6g,5.0mmol)、碳酸1,3-二氧雜異吲哚啉-2-基酯2-(三甲基矽基)乙酯(1.42g,5.5mmol)及三乙胺(760mg,7.5mmol)於二噁烷/水(25/25mL)中之溶液在室溫下攪拌3h。以乙酸乙酯(200mL)稀釋反應混合物，且藉由1M鹽酸(100mL)、飽和碳酸氫鈉溶液(100mL)及鹽水(100mL)洗滌。濃縮有機層且藉由矽膠層析(石油醚/乙酸乙酯=4/1)純化以提供白色固體狀標題化合物(2.3g,99%)。MS(ES+)C23H36N2O6Si要求值：464，實驗值：487[M+Na]+。
步驟6：外消旋物-3-胺基-4-((2-(三甲基矽基)乙氧基)羰基胺基)環己烷甲酸乙酯之合成
Figure TWI675828B_D0148
將外消旋物-3-(苄氧基羰基胺基)-4-((2-(三甲基矽基)乙氧基)羰基胺基)環己烷甲酸乙酯(1.7g,3.7mmol)及5%鈀碳(濕度50%，300mg)於異丙醇(35mL)中之混合物在1atm氫氣氣氛及室溫下攪拌18h。經由矽 藻土墊過濾混合物。濃縮濾液且藉由矽膠層析(甲醇/二氯甲烷=1/30至1/10)純化以提供黃色油狀標題化合物(1.0g,89%)。MS(ES+)C15H30N2O4Si要求值：330，實驗值：331[M+H]+。
(4S,5S)-5-胺基-2,2-二甲基-四氫-2H-哌喃-4-基胺甲酸第三丁酯及(4R,5R)-5-胺基-2,2-二甲基-四氫-2H-哌喃-4-基胺甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0149
步驟1：2-甲基戊-4-烯-2-醇之合成
Figure TWI675828B_D0150
在0℃下向烯丙基氯化鎂於無水THF(1.7M,200mL,340mmol)中之溶液中緩慢添加丙酮(13.2g,227mmol)。在0℃下攪拌15min後，將反應混合物在室溫下再攪拌2h。以氯化銨水溶液淬滅反應且以第三丁基甲基醚萃取。以水及鹽水洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。藉由在減壓下(約10-15巴，b.p.50℃)蒸餾來純化殘餘物以 得到無色油狀標題化合物(15g,66%)。
步驟2：4-(烯丙氧基)-4-甲基戊-1-烯之合成
Figure TWI675828B_D0151
在0℃下向氫化鈉(60%,24g,60mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(150mL)中之懸浮液中緩慢添加2-甲基戊-4-烯-2-醇(20.0g,200mmol)。在0℃下1h後，在0~5℃下緩慢添加烯丙基溴(48.0g 400mmol)，且將反應混合物在0℃下再攪拌1h。以氯化銨水溶液淬滅反應且以第三丁基甲基醚萃取。以水及鹽水洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮以得到黃色油狀標題化合物(44g，粗物)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。
步驟3：2,2-二甲基-3,6-二氫-2H-哌喃之合成
Figure TWI675828B_D0152
將格拉布斯II代觸媒(1.20g,1.43mmol)添加至4-(烯丙氧基)-4-甲基戊-1-烯(10.0g,71.4mmol)於二氯甲烷(300mL)中之溶液中。將反應混合物回流隔夜。蒸除溶劑後，將殘餘物在減壓下蒸餾以得到無色油狀標題化合物(4.0g,50%)。
步驟4：4,4-二甲基-3,7-二氧雜-雙環[4.1.0]庚烷之合成
Figure TWI675828B_D0153
向2,2-二甲基-3,6-二氫-2H-哌喃(4.0g,36mmol)於二氯甲烷(20mL)中之溶液中添加3-氯過氧苯甲酸(18.4g,107mmol)，且將混合物在室溫下攪拌隔夜。然後以二氯甲烷稀釋反應混合物，且以飽和亞硫酸鈉水溶液及鹽水洗滌。經硫酸鈉乾燥有機層，過濾且在減壓下濃縮以得到黃色油狀標題化合物(5.0g，粗物)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。
步驟5：(4R,5R)-2,2-二甲基-5-((R)-1-苯基乙基胺基)-四氫-2H-哌喃-4- 醇(6a)及(4S,5S)-2,2-二甲基-5-((R)-1-苯基乙基胺基)-四氫-2H-哌喃-4-醇(6b)之合成
Figure TWI675828B_D0154
將4,4-二甲基-3,7-二氧雜-雙環[4.1.0]庚烷(7.0g,54mmol)及(R)-1-苯基乙胺(9.9g,82mmol)於異丙醇(50mL)中之混合物在80℃下攪拌6天。將反應混合物冷卻至室溫且在減壓下濃縮。藉由矽膠層析(洗提液：石油醚：含有1%氨-甲醇(7M)之二氯甲烷(10：1)至含有1%氨/甲醇(7M)之二氯甲烷來純化殘餘物以提供黃色油狀(4R,5R)-2,2-二甲基-5-((R)-1-苯基乙基胺基)-四氫-2H-哌喃-4-醇(6a)(較大極性之溶離份，1.5g)及(4S,5S)-2,2-二甲基-5-((R)-1-苯基乙基胺基)-四氫-2H-哌喃-4-醇(6b)(較小極性之溶離份，1.7g)。MS(ES+)C15H23NO2要求值：249，實驗值：250[M+H]+。TLC之流動相：乙酸乙酯/二氯甲烷=2/1。
步驟6：(4R,5R)-5-胺基-2,2-二甲基-四氫-2H-哌喃-4-醇之合成
Figure TWI675828B_D0155
將(4R,5R)-2,2-二甲基-5-((R)-1-苯基乙基胺基)-四氫-2H-哌喃-4-醇(600mg,2.40mmol)及10%鈀碳(100mg)於甲醇(50mL)中之混合物在室溫及氫化作用下攪拌隔夜。此後，經由矽藻土墊過濾混合物，且濃縮濾液以獲得黃色油狀標題化合物(550mg，粗物)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。
步驟7：(3R,4R)-4-羥基-6,6-二甲基-四氫-2H-哌喃-3-基胺甲酸2-(三甲基矽基)乙酯之合成
Figure TWI675828B_D0156
在室溫下向(4R,5R)-5-胺基-2,2-二甲基-四氫-2H-哌喃-4-醇(550mg,2.40mmol)及三乙胺(484mg,4.80mmol)於二噁烷(5mL)及水(5mL)中之溶液中添加2,5-二側氧基吡咯啶-1-甲酸2-(三甲基矽基)乙酯(750mg,2.90mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌4h。此後，以乙酸乙酯稀釋溶液且以鹽水洗滌。濃縮有機層，且藉由矽膠管柱以石油醚/乙酸乙酯=4/1至1/1作為洗提液來純化殘餘物以提供灰色固體狀標題化合物(360mg，2步為52%)。
步驟8：(4R,5R)-甲磺酸2,2-二甲基-5-((2-(三甲基矽基)乙氧基)羰基胺基)-四氫-2H-哌喃-4-基酯之合成
Figure TWI675828B_D0157
在0℃下向(3R,4R)-4-羥基-6,6-二甲基-四氫-2H-哌喃-3-基胺甲酸2-(三甲基矽基)乙酯(360mg,1.25mmol)及三乙胺(378mg,3.75mmol)於二氯甲烷(5mL)中之溶液中逐滴添加甲磺醯氯(213mg,1.87mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌4h，且然後以二氯甲烷(100mL)稀釋。以水(50mL)及鹽水(50mL)洗滌有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮以提供黃色油狀標題化合物(550mg，粗物)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。
步驟9：(3S,4S)-4-疊氮基-6,6-二甲基-四氫-2H-哌喃-3-基胺甲酸2-(三甲基矽基)乙酯之合成
Figure TWI675828B_D0158
在室溫下向(4R,5R)-甲磺酸2,2-二甲基-5-((2-(三甲基矽基)乙氧基)羰基胺基)-四氫-2H-哌喃-4-基酯(550mg,1.25mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(10mL)中之溶液中添加疊氮化鈉(812mg,12.5mmol)及乙酸鈉(1.05 mg,12.5mmol)。將所得混合物在95℃下攪拌2天。此後，將混合物冷卻至室溫且以乙酸乙酯(100mL)稀釋。以水(100mL×8)及鹽水(50mL)洗滌有機相，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮以提供黃色油狀標題化合物(510mg，粗物)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。
步驟10：(3S,4S)-4-胺基-6,6-二甲基-四氫-2H-哌喃-3-基胺甲酸2-(三甲基矽基)乙酯之合成
Figure TWI675828B_D0159
將(3S,4S)-4-疊氮基-6,6-二甲基-四氫-2H-哌喃-3-基胺甲酸2-(三甲基矽基)乙酯(510mg,1.25mmol)、10%鈀碳(50mg)於甲醇(10mL)中之混合物在室溫及1atm氫氣氣氛(氫氣球)下攪拌隔夜。此後，經由矽藻土墊過濾混合物。濃縮濾液以得到褐色油狀標題化合物(450mg，粗物)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。
步驟11：化合物12a之合成
Figure TWI675828B_D0160
在室溫下向(3S,4S)-4-胺基-6,6-二甲基-四氫-2H-哌喃-3-基胺甲酸2-(三甲基矽基)乙酯(450mg,1.25mmol)及三乙胺(379mg,3.75mmol)於二氯甲烷(10mL)中之溶液中添加二碳酸二-第三丁酯(410mg,1.88mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌2h。此後，濃縮溶液，且藉由矽膠層析使用石油醚/乙酸乙酯=4/1作為洗提液來純化殘餘物以提供黃色固體狀標題化合物(160mg，4步為33%)。
步驟12：(4S,5S)-5-胺基-2,2-二甲基-四氫-2H-哌喃-4-基胺甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0161
在室溫下向化合物12a(160mg,0.41mmol)於四氫呋喃(2mL)中之溶液中添加含四丁基氟化銨之四氫呋喃(1M,1.23mL,1.23mmol)。將反應混合物在50℃下攪拌2h。此後，濃縮溶液，且藉由矽膠層析以乙酸乙酯作為洗提液來純化殘餘物以提供黃色油狀標題化合物(110mg，粗物)。
Figure TWI675828B_D0162
步驟1：(4S,5S)-5-胺基-2,2-二甲基-四氫-2H-哌喃-4-醇之合成
Figure TWI675828B_D0163
將(4S,5S)-2,2-二甲基-5-((R)-1-苯基乙基胺基)-四氫-2H-哌喃-4-醇(1.0g,4.0mmol)及10%鈀碳(200mg)於甲醇(20mL)中之懸浮液混合物在室溫及1atm氫氣氣氛(氫氣球)下攪拌隔夜。此後，經由矽藻土墊過濾混合物，且濃縮濾液以獲得黃色油狀標題化合物(1.1g，粗物)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。
步驟2：(3S,4S)-4-羥基-6,6-二甲基-四氫-2H-哌喃-3-基胺甲酸2-(三甲基矽基)乙酯之合成
Figure TWI675828B_D0164
在室溫下向(4S,5S)-5-胺基-2,2-二甲基-四氫-2H-哌喃-4-醇(1.1g,4.0mmol)及三乙胺(1.1mL,8.0mmol)於二噁烷(5mL)與水(5mL)之混合溶劑中之溶液中添加2,5-二側氧基吡咯啶-1-甲酸2-(三甲基矽基)乙酯(1.2g,4.8mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌4h。此後，以乙酸乙酯稀釋溶液且以鹽水洗滌。分離有機層且濃縮。藉由矽膠層析使用石油醚/乙酸乙酯=4/1至1/1作為洗提液來純化所得殘餘物以提供黃色油狀標題化合物(1.0g，2步為86%)。
步驟3：(4S,5S)-甲磺酸2,2-二甲基-5-((2-(三甲基矽基)乙氧基)羰基胺基)-四氫-2H-哌喃-4-基酯之合成
Figure TWI675828B_D0165
在0℃下向(3S,4S)-4-羥基-6,6-二甲基-四氫-2H-哌喃-3-基胺甲酸2-(三甲基矽基)乙酯(1.0g,3.5mmol)及三乙胺(1.4mL,10mmol)於二氯甲烷(10mL)中之溶液中逐滴添加甲磺醯氯(600mg,5.20mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌4h且然後以二氯甲烷(100mL)稀釋。以水(50mL)及鹽水(50mL)洗滌有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮以提供黃色油狀標題化合物(1.6g，粗物)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。
步驟4：(3R,4R)-4-疊氮基-6,6-二甲基-四氫-2H-哌喃-3-基胺甲酸2-(三甲基矽基)乙酯之合成
Figure TWI675828B_D0166
在室溫下向(4S,5S)-甲磺酸2,2-二甲基-5-((2-(三甲基矽基)乙氧基)羰基胺基)-四氫-2H-哌喃-4-基酯(1.6g,3.5mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(10mL)中之溶液中添加疊氮化鈉(2.3g,35mmol)及乙酸鈉(2.8g,35 mmol)。將所得混合物在95℃下攪拌2天。此後，將混合物冷卻至室溫且以乙酸乙酯(100mL)稀釋。藉由水(100mL×8)及鹽水(50mL)洗滌有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮以提供黃色油狀標題化合物(1.3g，粗物)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。
步驟5：(3R,4R)-4-胺基-6,6-二甲基-四氫-2H-哌喃-3-基胺甲酸2-(三甲基矽基)乙酯之合成
Figure TWI675828B_D0167
將(3R,4R)-4-疊氮基-6,6-二甲基-四氫-2H-哌喃-3-基胺甲酸2-(三甲基矽基)乙酯(1.3g,3.5mmol)及10%鈀碳(200mg)於甲醇(10mL)中之混合物在室溫及1atm氫氣氣氛(氫氣球)下攪拌隔夜。此後，經由矽藻土墊過濾混合物。濃縮濾液以得到黃色油狀標題化合物(1.2g，粗物)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。
步驟6：化合物12b之合成
Figure TWI675828B_D0168
在室溫下向(3R,4R)-4-胺基-6,6-二甲基-四氫-2H-哌喃-3-基胺甲酸2-(三甲基矽基)乙酯(1.2g,3.5mmol)及三乙胺(1.4mL,10.5mmol)於二氯甲烷(10mL)中之溶液中添加二碳酸二-第三丁酯(1.1g,5.2mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌2h。此後，直接濃縮混合物且藉由矽膠層析使用石油醚/乙酸乙酯=4/1作為洗提液進行純化以提供灰色固體狀標題化合物(440mg，4步為32%)。
步驟7：(4R,5R)-5-胺基-2,2-二甲基-四氫-2H-哌喃-4-基胺甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0169
在室溫下向化合物12b(440mg,1.13mmol)於四氫呋喃(2mL)中之溶液中添加含四丁基氟化銨之四氫呋喃(1M,3.4mL,3.4mmol)。將反應混合物在50℃下攪拌2h。此後，將溶液冷卻至室溫，濃縮且藉由矽膠層析使用乙酸乙酯作為洗提液進行純化以提供黃色油狀標題化合物(80mg,29%)。
(2S,4S,5S)-5-胺基-2-甲基四氫-2H-哌喃-4-基胺甲酸第三丁酯之合成
Figure TWI675828B_D0170
步驟1：(S)-4-(烯丙氧基)戊-1-烯2之合成
Figure TWI675828B_D0171
在0℃下向氫化鈉(21g,34mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(100mL)中之懸浮液中逐滴添加(S)-戊-4-烯-2-醇(10g,116mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌1h。此後，在0℃下將烯丙基溴(14.0g,116.2mmol)逐滴添加 至混合物中。將所得混合物在0℃下再攪拌3h。然後藉由飽和氯化銨溶液(500mL)淬滅混合物。以第三丁基甲基醚(200mL * 3)萃取水層。以水(100mL * 3)及鹽水(100mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮以提供(S)-4-(烯丙氧基)戊-1-烯(約20ml第三丁基甲基醚溶液)，其未經進一步純化即用於下一步驟。
步驟2：(S)-2-甲基-3,6-二氫-2H-哌喃3之合成
Figure TWI675828B_D0172
將(S)-4-(烯丙氧基)戊-1-烯2(約20mL溶液，116mmol)(第2代格拉布斯觸媒)(1.8g)於二氯甲烷(500mL)中之混合物在40℃下攪拌隔夜。此後，將溶液冷卻至室溫，且藉由真空蒸餾獲得標題化合物(約3.5g，2步為31%)。
步驟3：(4S)-4-甲基-3,7-二氧雜雙環[4.1.0]庚烷4之合成
Figure TWI675828B_D0173
在0℃下向(S)-2-甲基-3,6-二氫-2H-哌喃3(約1g，10mmol)於二氯甲烷(20mL)中之溶液中添加3-氯過氧苯甲酸(1.8g,20mmol)。將所得混合物在室溫下攪拌隔夜。此後，藉由飽和亞硫酸鈉溶液(15mL)、碳酸鈉(15mL)及鹽水(15mL)洗滌混合物。經硫酸鈉乾燥有機層且濃縮以獲得標題化合物(約3mL二氯甲烷溶液)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。
步驟4：(3R,4S,6S)-6-甲基-4-((S)-1-苯基乙基胺基)四氫-2H-哌喃-3-醇5之合成
Figure TWI675828B_D0174
將(4S)-4-甲基-3,7-二氧雜雙環[4.1.0]庚烷4(約3mL二氯甲 烷溶液，10mmol)及(R)-1-苯基乙胺(2.4g,20mmol)於異丙醇(20mL)中之混合物在85℃下攪拌1週。此後，將溶液冷卻至室溫且藉由Prep-HPLC純化以獲得黃色固體狀標題化合物5(較大極性，120mg，2步為10%)及白色固體狀副產物5’(較小極性，400mg，2步為32%)。MS(ES+)C14H21NO2要求值：235，實驗值：236[M+H]+。
步驟5：(3R,4S,6S)-4-胺基-6-甲基四氫-2H-哌喃-3-醇6b之合成
Figure TWI675828B_D0175
將(3S,4R)-第三丁基-(2S,4S,5R)-5-羥基-2-甲基四氫-2H-哌喃-4-基胺甲酸第三丁酯5(200mg,0.85mmol)及10%鈀碳(50mg)於異丙醇(10mL)中之混合物在室溫及氫化作用下攪拌隔夜。此後，經由矽藻土墊過濾混合物。濃縮以獲得黃色油狀標題化合物6(150mg，粗物)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。
步驟6：(2S,4S,5R)-5-羥基-2-甲基四氫-2H-哌喃-4-基胺甲酸第三丁酯7之合成
Figure TWI675828B_D0176
在0℃下向(3R,4S,6S)-4-胺基-6-甲基四氫-2H-哌喃-3-醇6(150mg,1.1mmol)及三乙胺(333mg,3.3mmol)於二氯甲烷(80mL)中之溶液中逐滴添加二碳酸二-第三丁酯(475mg,2.2mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌4h。此後，濃縮溶液且藉由矽膠管柱以甲醇/二氯甲烷=1/30至1/15作為洗提液進行純化以提供黃色油狀標題化合物7(130mg，2步為51%)。
步驟7：(2S,4S,5S)-5-疊氮基-2-甲基四氫-2H-哌喃-4-基胺甲酸第三丁酯8之合成
Figure TWI675828B_D0177
在0℃下向(2S,4S,5R)-5-羥基-2-甲基四氫-2H-哌喃-4-基胺甲酸第三丁酯7(130mg,0.6mmol)及三乙胺(202mg,2.0mmol)於二氯甲烷(10mL)中之溶液中逐滴添加甲磺醯氯(194mg,1.7mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌4h且然後以二氯甲烷(100mL)稀釋。以水(50mL)及鹽水(50mL)洗滌有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮以提供黃色油狀標題化合物8(190mg，粗物)(4.0g,98%)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。
步驟8：(2S,4S,5S)-5-疊氮基-2-甲基四氫-2H-哌喃-4-基胺甲酸第三丁酯9之合成
Figure TWI675828B_D0178
在室溫下向(2S,4S,5S)-5-疊氮基-2-甲基四氫-2H-哌喃-4-基胺甲酸第三丁酯8(190mg,0.6mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(10mL)中之溶液中添加疊氮化鈉(375mg,5.6mmol)及乙酸鈉(459mg,5.6mmol)。將所得混合物在95℃下攪拌2天。此後，以乙酸乙酯(100mL)稀釋混合物，藉由水(50mL)及鹽水(50mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮以提供黃色油狀標題化合物(180mg，粗物)(4.0g,98%)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。
步驟9：(2S,4S,5S)-5-胺基-2-甲基四氫-2H-哌喃-4-基胺甲酸第三丁酯10之合成
Figure TWI675828B_D0179
將(2S,4S,5S)-5-疊氮基-2-甲基四氫-2H-哌喃-4-基胺甲酸第三丁酯9b(1.8g,3.6mmol)及10%鈀碳(50mg)於異丙醇(10mL)中之混合物在室溫及氫化作用下攪拌隔夜。此後，經由矽藻土墊過濾混合物。濃縮以獲得黃色油狀標題化合物10(150mg，粗物)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。
2,8-二氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉之合成
Figure TWI675828B_D0180
步驟1：2-胺基-5-溴-3-氯苯甲酸之合成
Figure TWI675828B_D0181
向2-胺基-3-氟苯甲酸(10.0g,58.5mmol)於二氯甲烷(150mL)中之溶液中添加N-溴琥珀醯亞胺(10.4g,58.5mmol)，且將混合物在室溫下攪拌2h。LCMS顯示反應完成。過濾固體且以二氯甲烷(100mL×3)洗滌以得到白色固體狀標題化合物(13.0g,89%)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。MS(ES+)C7H5BrClNO2要求值：249,251，實驗值：250,252[M+H]+。
步驟2：(2-胺基-5-溴-3-氯苯基)甲醇之合成：
Figure TWI675828B_D0182
在冰/水浴中向2-胺基-5-溴-3-氯苯甲酸(13.0g,52.0mmol)於THF(200mL)中之溶液中添加含硼氫化物之THF(300mL,1N)，且將反應混合物在室溫下攪拌隔夜。LCMS監測反應完成。以甲醇(100mL)淬滅混 合物且濃縮至50mL體積。以碳酸氫鈉水溶液(400mL)稀釋殘餘物且以乙酸乙酯(200mL×3)萃取。分離有機層，合併，藉由鹽水(100mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮以提供標題產物(10.0g,82%)。MS(ES+)C7H7BrClNO要求值：234,236，實驗值：236,238[M+H]+。
步驟3：2-胺基-5-溴-3-氯苯甲醛之合成：
Figure TWI675828B_D0183
將(2-胺基-5-溴-3-氯苯基)甲醇(10.0g,42.5mmol)及氧化錳(21.9g,255mmol)於二氯甲烷(400mL)中之混合物在室溫下攪拌隔夜。LCMS及TLC二者均顯示反應完成。濾除固體，且濃縮濾液以得到淺黃色固體狀標題化合物(9.0g,91%)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。
步驟4：6-溴-8-氯喹唑啉-2-醇之合成：
Figure TWI675828B_D0184
將2-胺基-5-溴-3-氯苯甲醛(9.0g,38.6mmol)及尿素(34.7g,579mmol)之混合物加熱至180℃且攪拌2h。LCMS顯示反應完成。將反應混合物冷卻至室溫，且以水(1L)稀釋所得沈澱物且攪拌2h。濾出所得沈澱物，且藉由與甲苯共蒸發三次來完全去除所截留之水分。獲得黃色固體狀標題化合物(9.0g,90%)。MS(ES+)C8H4BrClN2O要求值：257,259，實驗值：258,260[M+H]+。
步驟5：6-溴-2,8-二氯喹唑啉之合成：
Figure TWI675828B_D0185
將6-溴-8-氯喹唑啉-2-醇(9.0g,35mmol)於磷醯氯(100mL)中之溶液回流5h。LCMS顯示反應完成。在減壓下去除大部分磷醯氯，且 將殘餘物添加至攪拌中之冰水(500mL)中。經由過濾收集所得沈澱物且然後在THF中回流。濾除固體，且濃縮濾液以得到黃色固體標題化合物(7.0g,78%)。MS(ES+)C8H4BrClN2要求值：275,277，實驗值：276,278[M+H]+。
步驟6：2,8-二氯-6-(3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉之合成：
Figure TWI675828B_D0186
將6-溴-2,8-二氯喹唑啉(4.0g,14.5mmol)、3,5-二甲氧基苯基硼酸(4.23g,16.0mmol)、碳酸銫(9.42g,29.0mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(220mg,0.70mmol)於THF(200mL)及水(10mL)中之混合物以氮氣脫氣三次，且在80℃下攪拌5h。TLC及LCMS二者均顯示反應完成。將反應混合物冷卻至室溫，直接濃縮且藉由矽膠層析(石油醚：二氯甲烷=2：1~1：1)純化以獲得黃色固體狀標題化合物(2.0g,41%)。MS(ES+)C16H12Cl2N2O2要求值：334,336，實驗值：335,337[M+H]+。
步驟7：2,8-二氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉之合成
Figure TWI675828B_D0187
在0℃下向2,8-二氯-6-(3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉(2.0g,6.0mmol)於無水THF(40mL)中之溶液中逐滴添加磺醯氯(1.59g,1.75mmol)，且將混合物在0℃下攪拌30min。TLC及LCMS二者均顯示反應完成。以水(1mL)淬滅反應，且經由過濾收集沈澱物以得到黃色固體狀標題化合物(1.3g,54%)。MS(ES+)C16H10Cl4N2O2要求值：402,404，實驗值：403,405[M+H]+；1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ ppm 9.36(s,1H),7.94(s,1H),7.79(s,1H),6.69(s,1H),4.01(s,6H)。
2,7-二氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉之合成
Figure TWI675828B_D0188
步驟1：2-胺基-5-溴-4-氯苯甲酸之合成
Figure TWI675828B_D0189
在-78℃下向2-胺基-4-氯苯甲酸(10.0g,58.5mmol)於甲醇(150mL)中之溶液中添加溴(15.7mL)，且將反應混合物在-78℃下攪拌2h。以冰水(100mL)及硫代硫酸鈉水溶液淬滅反應混合物，且以乙酸乙酯(150mL×3)萃取。分離有機層，合併，以水(100mL)及鹽水(100mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮以提供標題化合物(9g,62%)。1H-NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ ppm 7.91(s,1H),7.03(s,H)。
步驟2：(2-胺基-5-溴-4-氯苯基)甲醇之合成
Figure TWI675828B_D0190
在室溫下向2-胺基-5-溴-4-氯苯甲酸(9.0g,36.0mmol)於THF(150mL)中之溶液中添加含硼氫化物之THF(144mL,1M)，且將反應混合物攪拌隔夜。LCMS監測反應完成。以甲醇(50mL)淬滅反應混合物，且濃縮至50mL體積。以水(100mL)稀釋殘餘物且以乙酸乙酯(150mL×3)萃取。分離有機層，合併，以水(100mL)及鹽水(100mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮以提供標題化合物(粗物，6g,71%)。
步驟3：2-胺基-5-溴-4-氯苯甲醛之合成
Figure TWI675828B_D0191
將(2-胺基-5-溴-4-氯苯基)甲醇(6g,25.5mmol)及氧化錳(IV)(15.5g,0.178mol)於二氯甲烷(100mL)中之混合物在室溫下攪拌隔夜。LCMS監測反應完成。濾除固體，且濃縮濾液以得到淺黃色固體狀標題化合物(5g,81%)。MS(ES+)C7H5BrClNO要求值：233,235，實驗值：234,236[M+H]+。
步驟4：6-溴-7-氯喹唑啉-2-醇之合成
Figure TWI675828B_D0192
將2-胺基-5-溴-4-氯苯甲醛(5g,21.46mmol)及尿素(18g,300.0mmol)之混合物在180℃下攪拌5h。LCMS監測反應完成。將混合物冷卻至室溫，以水(100mL×3)洗滌且過濾。乾燥濾餅以得到黃色固體狀標題化合物(6g(粗物，100%)。MS(ES+)C8H4BrClN2O要求值：258,260，實驗值：259,261[M+H]+。
步驟5：6-溴-2,7-二氯喹唑啉之合成
Figure TWI675828B_D0193
將6-溴-7-氯喹唑啉-2-醇(6.0g,23mmol)於磷醯氯(50mL)中之溶液回流5h。LCMS監測反應完成。將反應冷卻至室溫，且在減壓下去除大部分磷醯氯。將殘餘物逐滴添加至冰水(500mL)中，且藉由過濾來收集所得沈澱物以得到黃色固體狀標題化合物(3g,48%)。
步驟6：2,7-二氯-6-(3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉之合成
Figure TWI675828B_D0194
將6-溴-2,7-二氯喹唑啉(3g,10.8mmol)、3,5-二甲氧基苯基硼酸(2.2g,11.9mmol)、碳酸銫(1.06g,32.4mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(702mg,1.08mmol)於THF(50mL)及水(10mL)中之混合物以氮氣脫氣三次，且將反應混合物在85℃下攪拌3h。LCMS監測反應完成。將反應混合物冷卻至室溫且直接濃縮。藉由矽膠層析(石油醚：乙酸乙酯=10：1~4：1)來純化殘餘物以得到淺黃色固體狀標題化合物(2.0g，產率：55%)。MS(ES+)要求值：334,336,C16H12Cl2N2O2，實驗值：335,337[M+H]+。
步驟7：2,7-二氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉之合成
Figure TWI675828B_D0195
在-10℃下向2,7-二氯-6-(3,5-二甲氧基苯基)喹唑啉(2.0g,6.0mmol)於THF(30mL)中之溶液中添加磺醯氯(1.77g,13.2mmol)，且將混合物在-10℃下攪拌1h。LCMS監測反應完成。以水(1mL)淬滅溶液且在減壓下濃縮。藉由矽膠層析(石油醚：乙酸乙酯=10：1~4：1)將殘餘物純化成白色固體狀標題化合物(1.2g,50%)。MS(ES+)C16H10Cl4N2O2要求值：402,404，實驗值：403,405[M+H]+；1H-NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ ppm 9.66(s,1H),8.36(s,1H),8.28(s,1H),7.09(s,1H),4.01(s,6H)。
步驟8：2-氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶之合成
Figure TWI675828B_D0196
步驟9：6-溴吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-醇之合成
Figure TWI675828B_D0197
將2-胺基-5-溴菸鹼醛(2.0g,10.0mmol)及尿素(9.0g,150.0mmol)之混合物在180℃下加熱且劇烈攪拌2h。LCMS顯示反應完成。將反應混合物冷卻至室溫。收集所得沈澱物，以水(3×100mL)洗滌且與甲苯共蒸發三次以完全去除所截留之水分。獲得黃色固體狀標題化合物(2.1g,93%)。MS(ES+)C8H5BrN2O要求值：225,227，實驗值：226,228[M+H]+。
步驟10：6-溴-2-氯吡啶并[2,3-d]嘧啶之合成
Figure TWI675828B_D0198
在室溫下向6-溴吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-醇(1.1g,4.9mmol)於30mL三氯氧磷中之經攪拌混合物中添加二異丙基乙胺(1.6g,12.2mmol)，且然後將反應混合物在120℃下攪拌12h。LCMS顯示反應完成。在減壓下去除大多數三氯氧磷。以乙酸乙酯(200mL)稀釋殘餘物且在0℃下添加至飽和碳酸氫鈉溶液(300mL)中。以乙酸乙酯(200mL×3)萃取混合物。經無水硫酸鈉乾燥合併之有機層，過濾且濃縮以提供黃色固體狀標題化合物(800 mg,67%)。MS(ES+)C7H3BrClN3要求值：243,245，實驗值：244,246[M+H]+。
步驟11：2-氯-6-(3,5-二甲氧基苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶之合成：
Figure TWI675828B_D0199
將6-溴-2-氯吡啶并[2,3-d]嘧啶(800mg,3.3mmol)、3,5-二甲氧基苯基硼酸(655mg,3.6mmol)、雙(三-第三丁基膦)鈀(83mg,0.16mmol)及碳酸銫(1.06g,3.3mmol)於THF(30mL)及水(6mL)中之混合物以氮氣脫氣三次且然後在85℃下加熱0.5h。將混合物冷卻至室溫且在減壓下濃縮。藉由矽膠管柱層析(二氯甲烷/乙酸乙酯=3/1)來純化殘餘物以獲得黃色固體狀標題產物(460mg,47%)。MS(ES+)C15H12ClN3O2要求值：301,302，實驗值：302,304[M+H]+。
步驟12：2-氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶之合成
Figure TWI675828B_D0200
在0℃下向2-氯-6-(3,5-二甲氧基苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶(300mg,1.0mmol)於THF(30mL)中之溶液中逐滴添加磺醯氯(337mg,2.5mmol)，且將混合物在0℃下攪拌20min。LCMS顯示反應完成。以水(50mL)淬滅反應且以乙酸乙酯(100mL×3)萃取。以鹽水(100mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠層析(二氯甲烷/乙酸乙酯=5/1)來純化殘餘物以獲得黃褐色固體狀標題產物(240mg,65%)。MS(ES+)C15H10Cl3N3O2要求值：369，實驗值：370,372[M+H]+；1H-NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ ppm 9.78(s,1H),9.22(d,1H,J=2.4Hz),8.75(d,1H,J=2.4Hz),7.11(s,1H),4.01(s,6H)。
2-氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)-7-氟喹唑啉之合成
Figure TWI675828B_D0201
步驟1：5-溴-4-氟-2-硝基苯甲醛之合成
Figure TWI675828B_D0202
在0℃下向濃硝酸(6.8mL,101.0mmol)於濃硫酸(60mL)中之經攪拌溶液中緩慢添加3-溴-4-氟苯甲醛(10g,49.5mmol)。完成添加後，去除冰浴，且使反應升溫至室溫且攪拌3h。將混合物倒入冰水中且以乙酸乙酯(200mL)萃取。濃縮有機層以得到黃色固體狀標題化合物(粗物，12g,100%)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。
步驟2：6-氟-3',5'-二甲氧基-4-硝基聯苯-3-甲醛之合成
Figure TWI675828B_D0203
將5-溴-4-氟-2-硝基苯甲醛(10.0g,40.0mmol)、3,5-二甲氧基苯基硼酸(7.3g,40.0mmol)、雙(三苯基膦基)氯化鈀(II)(1.4g,2.0mmol)及碳酸銫(32.6g,100.0mmol)於二噁烷/水(550mL,v/v=10/1)中之混合物以氮氣脫氣三次且在90℃下加熱3h。將混合物冷卻至室溫，濃縮，以乙酸乙酯(1000mL)稀釋，且藉由水(500mL)及鹽水(500mL)洗滌。乾燥有機層，濃縮，且 藉由矽膠管柱層析(石油醚/乙酸乙酯=8/1至5/1)來純化殘餘物以提供黃色固體狀標題化合物(9g,61%)。MS(ES+)C15H12FNO5要求值：305，實驗值：306[M+H]+。
步驟3：2-(6-氟-3',5'-二甲氧基-4-硝基聯苯-3-基)-1,3-二氧雜環戊烷之合成
Figure TWI675828B_D0204
將6-氟-3',5'-二甲氧基-4-硝基聯苯-3-甲醛(1.7g,5.6mmol)及4-甲苯磺酸(95.8mg,0.6mmol)於1,2-乙二醇(4.3mL)及甲苯(60mL)中之混合物在130℃下加熱3h。此後，將反應混合物冷卻至室溫，以乙酸乙酯(100mL)稀釋，且藉由水(100mL * 3)及鹽水(100mL)洗滌。經硫酸鈉乾燥合併之有機層，過濾且濃縮。藉由矽膠管柱層析(石油醚/乙酸乙酯=8/1至5/1)來純化殘餘物以提供黃色固體狀標題化合物(1.8g,89%)。MS(ES+)C17H16FNO6要求值：349，實驗值：350[M+H]+。
步驟4：5-(1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-2-氟-3',5'-二甲氧基聯苯-4-胺之合成
Figure TWI675828B_D0205
將2-(6-氟-3',5'-二甲氧基-4-硝基聯苯-3-基)-1,3-二氧雜環戊烷(1.8g,5.2mmol)、硼氫化鈉(587.9mg,15.5mmol)及10%鈀碳(0.2g)於乙醇/水(33mL,v/v=10/1)中之混合物在90℃下加熱1h。此後，以乙酸乙酯(150mL)稀釋混合物，且藉由水(50mL)及鹽水(50mL)洗滌。經鈉乾燥合併之有機層，過濾且濃縮。藉由矽膠管柱層析(石油醚/乙酸乙酯=5/1至4/1)來純化殘餘物以提供黃色固體狀標題化合物(1.4g,88%)。MS(ES+) C17H18FNO4要求值：319，實驗值：320[M+H]+。
步驟5：6-(3,5-二甲氧基苯基)-7-氟喹唑啉-2-醇之合成
Figure TWI675828B_D0206
在0℃下向5-(1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-2-氟-3',5'-二甲氧基聯苯-4-胺(1.9g,6.0mmol)及三乙胺(3.0mL,21.4mmol)於THF(20mL)中之溶液中添加三光氣(0.6g,2.0mmol)，且在0℃下攪拌0.5h。此後，添加含氨之甲醇(3mL,21mmol,7mol/L)。將反應在0℃下攪拌30分鐘且迅速升溫至環境溫度。在室溫下再攪拌30分鐘後，以含4mol/L HCl之二噁烷(8.2mL)將反應混合物酸化至pH 2且然後在室溫下攪拌1h。然後濃縮所得溶液且藉由矽膠管柱層析(二氯甲烷/甲醇=50/1至10/1)純化以提供黃色固體狀標題化合物(2.0g,99%)。MS(ES+)C16H13FN2O3要求值：300，實驗值：301[M+H]+。
步驟6：2-氯-6-(3,5-二甲氧基苯基)-7-氟喹唑啉之合成
Figure TWI675828B_D0207
將6-(3,5-二甲氧基苯基)-7-氟喹唑啉-2-醇(2.0g,6.7mmol)於POCl3(30mL)中之溶液在135℃下加熱2h。此後，將反應溶液冷卻至室溫且在0℃下逐滴添加至飽和碳酸氫鈉溶液(800mL)中。以乙酸乙酯(200mL * 3)萃取混合物。經無水硫酸鈉乾燥合併之有機層，過濾且濃縮以提供淺黃色固體狀標題化合物(1.1g,52%)。MS(ES+)C16H12ClFN2O2要求值：318，實驗值：319[M+H]+。
步驟7：2-氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)-7-氟喹唑啉之合成
Figure TWI675828B_D0208
在0℃下向2-氯-6-(3,5-二甲氧基苯基)-7-氟喹唑啉(1.2g,3.8mmol)於乙腈/四氫呋喃(200mL,v/v=1/1)中之溶液中添加磺醯氯(1.7mL,18.9mmol)。將所得溶液在0℃下攪拌0.5h。此後，濃縮溶液且以乙酸乙酯(500mL)稀釋。藉由飽和碳酸氫鈉溶液(200mL)及鹽水(200mL)洗滌有機相，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮以提供黃色固體狀標題化合物(946mg,65%)。MS(ES+)C16H10Cl3FN2O2要求值：386，實驗值：387[M+H]+；1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ ppm 9.29(s,1H),7.87(d,1H,J=7.2Hz),7.73(d,1H,J=10.0Hz),6.71(s,1H),4.00(s,6H)。
步驟8：2-氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)-8-氟喹唑啉之合成
Figure TWI675828B_D0209
步驟9：2-胺基-5-溴-3-氟苯甲酸之合成
Figure TWI675828B_D0210
向2-胺基-3-氟苯甲酸(10.85g,70mmol)於二氯甲烷(175mL) 中之溶液中添加N-溴琥珀醯亞胺(12.46g,70mmol)，且將混合物在室溫下攪拌2h。LCMS顯示反應完成。濾出沈澱物且以二氯甲烷(100mL*3)洗滌以得到灰色固體狀標題化合物(12.7g,78%)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。MS(ES+)C7H5BrFNO2要求值：233,235，實驗值：232,234[M-H]-。
步驟10：(2-胺基-5-溴-3-氟苯基)甲醇之合成
Figure TWI675828B_D0211
在0℃下向2-胺基-5-溴-3-氟苯甲酸(14.5g,62.2mmol)於THF(150mL)中之溶液中添加含硼氫化物之THF(1M,310mL)，且將反應混合物在室溫下攪拌隔夜。LCMS顯示反應完成。以甲醇(150mL)淬滅反應，在真空中濃縮，以碳酸氫鈉水溶液(400mL)稀釋且以乙酸乙酯(200mL*3)萃取。分離出有機層，合併，以水(200mL)及鹽水(200mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮以提供標題化合物(13.0g，粗物)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。MS(ES+)C7H7BrFNO要求值：219,221，實驗值：220,222[M+H]+。
步驟11：2-胺基-5-溴-3-氟苯甲醛之合成
Figure TWI675828B_D0212
將(2-胺基-5-溴-3-氟苯基)甲醇(13g,59.4mmol)及氧化錳(31g,356.4mmol)於二氯甲烷(400mL)中之混合物在室溫下攪拌隔夜。TLC顯示起始物質完全耗盡。濾除固體，且濃縮濾液以得到淺黃色固體狀標題化合物(11g,85%)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。
步驟12：6-溴-8-氟喹唑啉-2-醇之合成
Figure TWI675828B_D0213
將2-胺基-5-溴-3-氟苯甲醛(2.17g,10mmol)及尿素(9g,150mmol)之經攪拌混合物在180℃下加熱2h。LCMS顯示反應完成。將反應混合物冷卻至室溫，且濾出所得沈澱物且以水(500mL *3)洗滌。藉由與甲苯共蒸發三次來完全去除所截留之水分。獲得黃色固體狀標題化合物(2g,83%)。MS(ES+)C8H4BrFN2O要求值：242,244，實驗值：243,245[M+H]+。
步驟13：6-溴-2-氯喹唑啉之合成
Figure TWI675828B_D0214
將6-溴喹唑啉-2-醇(9.72g,40mmol)於磷醯氯(100mL)中之溶液回流5h。LCMS顯示反應完成。將反應冷卻至室溫，且在減壓下去除大部分磷醯氯．將殘餘物逐滴添加至冰水(500mL)中，且藉由過濾來收集所得沈澱物以得到黃色固體狀標題化合物(9g,87%)。MS(ES+)C8H3BrClFN2要求值：260,262，實驗值：261,263[M+H]+。
步驟14：2-氯-6-(3,5-二甲氧基苯基)-8-氟喹唑啉之合成
Figure TWI675828B_D0215
將6-溴-2-氯-8-氟喹唑啉(4.0g,15.4mmol)、3,5-二甲氧基苯基硼酸(4.47g,16.9mmol)、碳酸銫(10.0g,30.8mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(236mg,0.77mmol)於THF(200mL)及水(10mL)中之混合物以氮氣脫氣三次，且在80℃下攪拌3h。TLC及LCMS二者均顯示反應完成。將反應混合物冷卻至室溫且直接濃縮。藉由矽膠層析(石油醚：二氯甲烷=2：1至1：1)來純化 殘餘物以提供黃色固體狀標題化合物(2.5g,51%)。MS(ES+)C16H12ClFN2O2要求值：318/320，實驗值：319/321[M+H]+。
步驟15：2-氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)-8-氟喹唑啉之合成
Figure TWI675828B_D0216
在0℃下向2-氯-6-(3,5-二甲氧基苯基)-8-氟喹唑啉(1.5g,4.7mmol)於無水THF(40mL)中之溶液中逐滴添加磺醯氯(1.59g,1.75mmol)，且將混合物攪拌1h。TLC及LCMS二者均顯示反應完成。以水(1mL)淬滅反應，且在減壓下去除溶劑。以乙腈洗滌殘餘物且乾燥以得到白色固體狀標題化合物(700mg,38%)。(MS(ES+)C16H10Cl3FN2O2要求值：386,388，實驗值：387,389[M+H]+；1H-NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ ppm 9.74(d,1H J=1.0Hz),8.03-7.99(m,2H),7.08(s,1H),4.00(s,6H)。
2-氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)-5-氟喹唑啉之合成
Figure TWI675828B_D0217
步驟1：6-胺基-3-溴-2-氟苯甲酸之合成
Figure TWI675828B_D0218
在-78℃下向2-胺基-6-氟苯甲酸(12.0g,77.35mmol)於甲醇(150mL)中之溶液中添加溴(15.7mL)，且將混合物在-78℃下攪拌2h。以冰水(100mL)及硫代硫酸鈉水溶液淬滅反應混合物，且以乙酸乙酯(150mL×3)萃取。分離有機層，合併，以水(100mL)及鹽水(100mL)洗滌，經硫酸鈉乾 燥，過濾且濃縮以提供標題粗產物(9.0g,50%)。MS(ES+)C7H5BrFNO2要求值：232，實驗值：233,235[M+H]+。
步驟2：(6-胺基-3-溴-2-氟苯基)甲醇之合成
Figure TWI675828B_D0219
在0℃下向6-胺基-3-溴-2-氟苯甲酸(9.0g,38.46mmol)於THF(150mL)中之溶液中添加BH3-THF(1M,193mL)，且將混合物在室溫下攪拌隔夜。LCMS顯示反應完成。以甲醇(50mL)緩慢淬滅反應，且在減壓下去除溶劑。以200mL乙酸乙酯稀釋殘餘物，以水(200mL)及鹽水(200mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮以提供標題產物(8.3g,98%)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。MS(ES+)C7H7BrFNO要求值：219，實驗值：220,222[M+H]+。
步驟3：6-胺基-3-溴-2-氟苯甲醛之合成
Figure TWI675828B_D0220
將(6-胺基-3-溴-2-氟苯基)甲醇(8.3g,37.72mmol)及氧化錳(IV)(19.68g,226.32mmol)於二氯甲烷(400mL)中之懸浮液混合物在室溫下攪拌隔夜。LCMS顯示反應完成。濾除固體，且濃縮濾液以得到淺黃色固體狀標題產物(6.0g,73%)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。MS(ES+)C7H5BrFNO要求值：217，實驗值：218,220[M+H]+。
步驟4：6-溴-5-氟喹唑啉-2-醇之合成
Figure TWI675828B_D0221
將6-胺基-3-溴-2-氟苯甲醛(3.0g,13.76mmol)及尿素(12.40g,206.40mmol)之混合物加熱至180℃且攪拌2h。LCMS顯示反應完成。將 反應混合物冷卻至室溫。收集所得沈澱物，以水(3×100mL)洗滌且與甲苯共蒸發三次以完全去除所截留之水分。獲得黃色固體狀標題化合物(3.3g,99%)。MS(ES+)C8H4BrFN2O要求值：242，實驗值：243,245[M+H]+。
步驟5：6-溴-2-氯-5-氟喹唑啉之合成
Figure TWI675828B_D0222
將6-溴-5-氟喹唑啉-2-醇(3.0g,12.34mmol)於三氯氧磷(10mL)中之溶液在135℃下回流5h。LCMS顯示反應完成。在減壓下去除大部分三氯氧磷，且將殘餘物逐滴添加至冰水(200mL)中。經由過濾收集所得沈澱物，為黃色固體(3.1g,96%)。MS(ES+)C8H3BrClFN2要求值：260，實驗值：261,263[M+H]+。
步驟6：2-氯-6-(3,5-二甲氧基苯基)-5-氟喹唑啉之合成
Figure TWI675828B_D0223
以6-溴-2-氯-5-氟喹唑啉(1.5g,5.74mmol)、3,5-二甲氧基苯基硼酸(1.15g,6.31mmol)、碳酸鈰(1.87g,5.74mmol)及雙(三-第三丁基膦)鈀(148mg,0.29mmol)於THF(30mL)及水(3mL)中之混合物氮氣脫氣三次且在80℃下攪拌隔夜。TLC及LCMS二者均顯示反應完成。將混合物冷卻至室溫且以乙酸乙酯(3×200mL)萃取。以水及鹽水洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠層析(石油醚：乙酸乙酯=8：1)來純化殘餘物以獲得白色固體狀標題產物(1.3g,70%)。MS(ES+)C16H12ClFN2O2要求值：318，實驗值：319,321[M+H]+。
步驟7：2-氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)-5-氟喹唑啉之合成
Figure TWI675828B_D0224
在-20℃下向2-氯-6-(3,5-二甲氧基苯基)-5-氟喹唑啉(1.25g,3.92mmol)於無水乙腈/THF(20mL/10mL)中之溶液中逐滴添加磺醯氯(1.32g,9.80mmol)，且將混合物攪拌1h。TLC及LCMS二者均顯示反應完成。以水(1mL)淬滅反應，且在減壓下去除溶劑。以乙腈洗滌沈澱物且乾燥以得到白色固體狀標題產物(886.5mg,56%)。MS(ES+)C16H10Cl3FN2O2要求值：386，實驗值：387,389[M+H]+；1H-NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ ppm 9.82(s,1H),8.05-7.96(m,2H),7.11(s,1H),4.01(s,6H)。
2-氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)-7-甲氧基喹唑啉之合成
Figure TWI675828B_D0225
步驟1：(2-胺基-4-甲氧基苯基)甲醇之合成
Figure TWI675828B_D0226
在0℃下向2-胺基-4-甲氧基苯甲酸(15.0g,89.8mmol)於THF(300mL)中之溶液中添加含硼氫化物之THF(450mL,450mmol)，且將反應混合物在室溫下攪拌隔夜。LCMS顯示反應完成。以水(150mL)淬滅反 應且以乙酸乙酯(500mL×3)萃取。分離有機層，合併，以水(200mL)及鹽水(200mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮以提供標題化合物。MS(ES+)C8H11NO2要求值：153，實驗值：154[M+H]+。
步驟2：2-胺基-4-甲氧基苯甲醛之合成
Figure TWI675828B_D0227
將(2-胺基-4-甲氧基苯基)甲醇(20g,131.0mmol)及氧化錳(68g,786.0mmol)於二氯甲烷(300mL)中之混合物在室溫下攪拌過夜。LCMS顯示反應完成。濾除固體，且濃縮濾液。藉由矽膠層析(石油醚：乙酸乙酯=6：1)來純化殘餘物以得到黃色固體狀標題化合物(7g,35%)。MS(ES+)C8H9NO2要求值：151，實驗值：152[M+H]+。
步驟3：2-胺基-5-溴-4-甲氧基苯甲醛之合成
Figure TWI675828B_D0228
向2-胺基-4-甲氧基苯甲醛(6g,39.7mmol)於二氯甲烷(100mL)中之經攪拌溶液中添加N-溴琥珀醯亞胺(7g,39.7mmol)。LCMS監測反應直至起始物質完全耗盡。以二氯甲烷及水稀釋反應混合物。經硫酸鈉乾燥所分離有機層，過濾且濃縮以得到黃色固體狀標題化合物(5g,56%)。MS(ES+)C8H8BrNO2要求值：229,231，實驗值：230,232[M+H]+。
步驟4：6-溴-7-甲氧基喹唑啉-2-醇之合成
Figure TWI675828B_D0229
將2-胺基-5-溴-4-甲氧基苯甲醛(3g,13.1mmol)及尿素(12g, 196.5mmol)之混合物在180℃下攪拌2h。LCMS顯示反應完成。將反應混合物冷卻至室溫且以水(3×100mL)洗滌。收集沈澱物且乾燥以得到黃色固體狀標題化合物(3g，粗物)。MS(ES+)C8H7BrN2O2要求值：254,256，實驗值：255,257[M+H]+。
步驟5：6-溴-2-氯-7-甲氧基喹唑啉之合成
Figure TWI675828B_D0230
在130℃下對6-溴-7-甲氧基喹唑啉-2-醇(3.0g,11.8mmol)於三氯氧磷(30mL)中之溶液中回流5h。LCMS顯示反應完成。將反應冷卻至室溫，且蒸除大部分三氯氧磷。將殘餘物逐滴添加至冰水(100mL)中，且經由過濾收集所得沈澱物以得到黃色固體狀標題化合物(2.4g,75%)。MS(ES+)C9H6BrClN2O要求值：272,274，實驗值：273,275[M+H]+。
步驟6：2-氯-6-(3,5-二甲氧基苯基)-7-甲氧基喹唑啉之合成
Figure TWI675828B_D0231
將6-溴-2-氯-7-甲氧基喹唑啉(2.4g,8.82mmol)、3,5-二甲氧基苯基硼酸(1.6g,8.82mmol)、碳酸鈰(8.6g,26.46mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(1.4g,2.1mmol)於THF(10mL)、二噁烷(10mL)及水(2mL)中之混合物以氮氣脫氣三次且在85℃下攪拌3h。LCMS監測反應完成。將混合物冷卻至室溫且以二氯甲烷(3×50mL)萃取。分離有機層，合併，以水及鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠層析(石油醚：乙酸乙酯=1：4)來純化殘餘物以得到白色固體狀標題化合物(1.1g,38%)。MS(ES+)C17H15ClN2O3要求值：330,332，實驗值：331,333[M+H]+。
步驟7：2-氯-6-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)-7-甲氧基喹唑啉之合成
Figure TWI675828B_D0232
向2-氯-6-(3,5-二甲氧基苯基)-7-甲氧基喹唑啉(200mg,0.61mmol)於乙腈(5mL)中之溶液中添加磺醯氯(205mg,1.52mmol)，且將混合物在-20℃下攪拌1h。以水(1mL)淬滅反應且在減壓下濃縮。藉由乙腈洗滌沈澱物且乾燥以得到白色固體狀標題化合物(120mg,50%)。MS(ES+)C17H13Cl3N2O3要求值：398，實驗值：399,401[M+H]+；1H-NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ ppm 9.43(s,1H),8.02(s,1H),7.55(s,1H),7.03(s,1H),3.98(s,6H),3.93(s,3H)。
某些化合物之NMR及LC-MS資料顯示於下表中。
生物化學活性評估
為了評估化合物對抗目標相關激酶之活性，利用Caliper LifeSciences電泳遷移率變動技術平臺。將經螢光標記之受質肽在給藥水準之化合物、一組濃度之激酶及ATP存在下培育，以使反映比例之肽磷酸化。 在反應結束時，使磷酸化肽(產物)與未磷酸化肽(受質)之混合物在所施加電位差下通過Caliper LabChip® EZ Reader II之微流體系統。產物肽上磷酸基團之存在提供了產物肽與受質肽之間质量及電荷的差，從而使樣品中之受質彙集物與產物彙集物分離。當彙集物經過儀器內之LEDS時，此等彙集物經檢測且被解析為單獨的峰。因此，此等峰間之比率反映在彼等條件下在彼槽中之彼濃度下化學物質之活性。
在Km下之FGFR-1野生型分析：在384孔板之每個孔中，在一系列給藥濃度之化合物(DMSO最終濃度為1%)存在或不存在下將0.1ng/ul野生型FGFR-1(Carna Biosciences,Inc.)在總計12.5ul含1uM CSKtide(5-FAM-KKKKEEIYFFFG-NH2)及400uM ATP之緩衝液(100mM HEPES pH 7.5,0.015% Brij 35,10mM MgCl2,1mM DTT)中在25C下培育90分鐘。藉由添加70ul停止緩衝液(100mM HEPES pH 7.5、0.015% Brij 35、35mM EDTA及0.2% Coating Reagent 3(Caliper Lifesciences))來停止反應。在Caliper EZReader 2(方案設定：-1.9psi，上游電壓-700，下游電壓-3000，採樣後吸入時間(post sample sip)35s)上對板進行讀數。
在Km下之FGFR-4野生型分析：在384孔板之每個孔中，在一系列給藥濃度之化合物(DMSO最終濃度為1%)存在或不存在下將0.5ng/ul野生型FGFR-4(Carna Biosciences,Inc.)在總計12.5ul含1uM CSKtide(5-FAM-KKKKEEIYFFFG-NH2)及400uM ATP之緩衝液(100mM HEPES pH 7.5,0.015% Brij 35,10mM MgCl2,1mM DTT)中在25C下培育90分鐘。藉由添加70ul停止緩衝液(100mM HEPES pH 7.5、0.015% Brij 35、35 mM EDTA及0.2% Coating Reagent 3(Caliper Lifesciences))來停止反應。然後在Caliper LabChip® EZ Reader II(方案設定：-1.9psi，上游電壓-700，下游電壓-3000，採樣後吸入時間35s)上對板進行讀數。
下表概述化合物1-之LC/MS資料及生物化學資料。在上表中，對於FGFR1及FGFR4：「A」意謂IC50小於10nM；「B」意謂IC50大於或等於10且小於100nM；「C」意謂IC50大於或等於100且小於1000nM；「D」意謂IC50大於1000nM。
活體內模型之功效
在Hep3B肝癌細胞皮下異種移植模型中利用不同劑量研究了化合物27對腫瘤生長抑制之影響。
使用6至8週齡之雌性裸小鼠(小家鼠(Mus Musculus))。腫瘤細胞培養及接種：以補充有10% FBS(Gibco,Australia)之EMEM培養基(Invitrogen,USA)培養Hep3B細胞。在90%匯合時收穫細胞，且活力不低於90%。在研究開始時向小鼠右側腹內皮下(s.c.)植入200μL含10×106個Hep3B細胞之50% Matrigel。
動物分組及給藥排程：細胞植入後十天，當腫瘤達到284 mm3之平均體積時，基於腫瘤體積挑選36只小鼠且隨機分配成5個治療組(n=9)。隨機化當天記為第0天且自此開始治療。
腫瘤體積及體重量測：使用卡尺以二維尺寸每週兩次量測腫瘤大小，且使用下式以mm3表示體積：V=0.5a×b2，其中a及b分別為腫瘤之長徑及短徑。每週量測體重至少兩次。
荷Hep3B裸小鼠之腫瘤體積：圖1係繪示經化合物27治療之組對抗裸小鼠中Hep3B異種移植腫瘤之生長抑制的線形圖。與媒劑組相比，在30mg/kg PO BID及100mg/kg PO BID功效組中觀察到腫瘤體積統計上顯著減小。增加化合物27之劑量增強腫瘤抑制效力。在經化合物27治療(100mg/kg PO BID)之組中腫瘤消退。
荷Hep3B裸小鼠之體重變化(%)：圖2係繪示在整個研究期期間體重變化(%)之線形圖。除經化合物27治療(100mg/kg PO BID)之組中之小鼠以外的所有小鼠均顯示明顯的體重損失。因腫瘤之負擔，截至第10天，媒劑組中之小鼠之體重降低約15%。此結果表明，化合物27在當前劑量及給藥排程下在裸小鼠中耐受良好，且化合物27可藉由抑制腫瘤生長而減輕體重損失。
在整個研究期期間，以化合物27治療之小鼠與媒劑組相比展示腫瘤體積顯著減小。化合物27之劑量自10mg/kg增加至100mg/kg增強了腫瘤抑制效力。經化合物27治療(100mg/kg PO BID)之組中之小鼠之腫瘤消退且幾乎消失。除經化合物27治療(100mg/kg PO BID)之組中之小鼠以外的所有小鼠均有體重損失。因腫瘤之負擔，截至第10天，媒劑組中之小鼠之體重降低約15%。此等結果表明，化合物27在當前劑量及該給藥排程下在裸小鼠中耐受良好，且化合物27可藉由抑制腫瘤生長而減輕體重損失。
參考文獻之併入
本文所提及之所有出版物及專利特此以全文引用方式併入，如同每個個別的出版物或專利被具體地且單獨地表明以引用方式併入。
等效物
熟習此項技術者僅使用常規實驗便可識別或能夠確定本文 所述本發明之特定實施例之許多等效物。該等等效物意欲為下列申請專利範圍所涵蓋。

Claims (15)

  1. 一種式II化合物或其醫藥學上可接受之鹽，
    Figure TWI675828B_C0001
    其中：環A係四氫呋喃基或四氫吡喃基；R1係鹵基、氰基、C1-6烷氧基、羥基、側氧基、胺基、醯胺基、或C1-6烷基；每一R2獨立地係鹵基或C1-6烷氧基；R3係鹵基；m為0-1；n為0-4；且p為0-1。
  2. 如申請專利範圍第1項所述之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中：環A是四氫呋喃基。
  3. 如申請專利範圍第1項所述之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中：環A是四氫吡喃基。
  4. 如申請專利範圍第1項所述之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中化合物中
    Figure TWI675828B_C0002
    代表的部分是
    Figure TWI675828B_C0003
  5. 一種化合物，係選自：
    Figure TWI675828B_C0004
    Figure TWI675828B_C0005
    及其藥學上可接受的鹽。
  6. 一種化合物，其係為：
    Figure TWI675828B_C0006
    或其藥學上可接受之鹽。
  7. 一種化合物，其係為：
    Figure TWI675828B_C0007
    或其藥學上可接受之鹽。
  8. 一種醫藥組合物，其包含醫藥學上可接受之載體及至少一種如申請專利範圍第1項至第7項中任一項所述之化合物及其藥學上可接受的鹽。
  9. 一種如申請專利範圍第1項至第7項中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽在製備用於治療由FGFR 4介導的病症藥物的用途。
  10. 一種如申請專利範圍第1項至第10項中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽在製備用於治療以FGFR4過表現為特徵的病症藥物的用途。
  11. 一種如申請專利範圍第1項至第7項中任一項昕述之化合物或其藥學上可接受的鹽在製備用於治療以擴增之FGF-19為特徵的病症藥物的用途。
  12. 一種如申請專利範圍第1項至第7項中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽在製備用於治療以FGF-19過表現為特徵的病症藥物的用途。
  13. 一種如申請專利範圍第1項至第7項中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽在製備用於治療肝癌、乳癌、肺癌、卵巢癌或肉瘤組成之群的藥物的用途。
  14. 一種如申請專利範圍第1項至第7項中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽在製備用於治療肝細胞癌藥物的用途。
  15. 一種如申請專利範圍第1項至第7項中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽在製備用於高脂血症藥物的用途。
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Families Citing this family (102)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AR077468A1 (es) 2009-07-09 2011-08-31 Array Biopharma Inc Compuestos de pirazolo (1,5 -a) pirimidina sustituidos como inhibidores de trk- quinasa
US8754114B2 (en) 2010-12-22 2014-06-17 Incyte Corporation Substituted imidazopyridazines and benzimidazoles as inhibitors of FGFR3
LT3495367T (lt) 2012-06-13 2021-02-25 Incyte Holdings Corporation Pakeistieji tricikliniai junginiai, kaip fgfr inhibitoriai
BR112015000653A2 (pt) * 2012-07-11 2019-11-05 Blueprint Medicines Corp compostos inibidores do receptor de fator de crescimento de fibroblasto, sua composição farmacêutica e seus usos
US9388185B2 (en) 2012-08-10 2016-07-12 Incyte Holdings Corporation Substituted pyrrolo[2,3-b]pyrazines as FGFR inhibitors
TWI647220B (zh) 2013-03-15 2019-01-11 美商西建卡爾有限責任公司 雜芳基化合物及其用途
WO2014160521A1 (en) 2013-03-15 2014-10-02 Blueprint Medicines Corporation Piperazine derivatives and their use as kit modulators
MY181020A (en) 2013-03-15 2020-12-16 Sanofi Sa Heteroaryl compounds and uses thereof
SI2986610T1 (en) 2013-04-19 2018-04-30 Incyte Holdings Corporation Bicyclic heterocycles as inhibitors of FGFR
SG11201602937UA (en) 2013-10-17 2016-05-30 Blueprint Medicines Corp Compositions useful for treating disorders related to kit
SG11201602069WA (en) 2013-10-18 2016-04-28 Eisai R&D Man Co Ltd Pyrimidine fgfr4 inhibitors
US9266883B2 (en) 2013-10-25 2016-02-23 Novartis Ag Ring-fused bicyclic pyridyl derivatives as FGFR4 inhibitors
EP3060560A1 (en) 2013-10-25 2016-08-31 Blueprint Medicines Corporation Inhibitors of the fibroblast growth factor receptor
US9695165B2 (en) 2014-01-15 2017-07-04 Blueprint Medicines Corporation Inhibitors of the fibroblast growth factor receptor
MA38393B1 (fr) 2014-03-13 2018-11-30 Sanofi Sa Composés hétéroaryle et utilisations associées
CN105294682B (zh) 2014-07-26 2017-07-07 广东东阳光药业有限公司 Cdk类小分子抑制剂的化合物及其用途
US20180185341A1 (en) 2014-10-03 2018-07-05 Novartis Ag Use of ring-fused bicyclic pyridyl derivatives as fgfr4 inhibitors
US10851105B2 (en) 2014-10-22 2020-12-01 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR4 inhibitors
WO2016127074A1 (en) 2015-02-06 2016-08-11 Blueprint Medicines Corporation 2-(pyridin-3-yl)-pyrimidine derivatives as ret inhibitors
SG10201913036RA (en) 2015-02-20 2020-02-27 Incyte Corp Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
WO2016134294A1 (en) 2015-02-20 2016-08-25 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr4 inhibitors
MA41551A (fr) 2015-02-20 2017-12-26 Incyte Corp Hétérocycles bicycliques utilisés en tant qu'inhibiteurs de fgfr4
US9802917B2 (en) 2015-03-25 2017-10-31 Novartis Ag Particles of N-(5-cyano-4-((2-methoxyethyl)amino)pyridin-2-yl)-7-formyl-6-((4-methyl-2-oxopiperazin-1-yl)methyl)-3,4-dihydro-1,8-naphthyridine-1(2H)-carboxamide
JP6431622B2 (ja) 2015-04-14 2018-11-28 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 結晶性ｆｇｆｒ４阻害剤化合物およびその使用
MX2018000577A (es) 2015-07-16 2018-09-05 Array Biopharma Inc Compuestos de pirazolo[1,5-a]piridina sustituidos como inhibidores de la ret quinasa.
MX2018001032A (es) 2015-07-24 2018-11-09 Blueprint Medicines Corp Compuestos utiles para el tratamiento de trastornos relacionados con kit y pdgfr.
EP3341374A1 (en) 2015-08-26 2018-07-04 Blueprint Medicines Corporation Compounds and compositions useful for treating disorders related to ntrk
KR20180102544A (ko) 2015-10-26 2018-09-17 더 리전츠 오브 더 유니버시티 오브 콜로라도, 어 바디 코퍼레이트 Trk 억제제-내성 암에서의 점 돌연변이 및 이의 관련 방법
HUE064659T2 (hu) 2015-11-02 2024-04-28 Blueprint Medicines Corp RET inhibitorai
AR106756A1 (es) 2015-11-19 2018-02-14 Blueprint Medicines Corp Compuestos y composiciones útiles para el tratamiento de trastornos relacionados con ntrk
WO2017161269A1 (en) 2016-03-17 2017-09-21 Blueprint Medicines Corporation Inhibitors of ret receptor tyrosine kinases
CA3019671C (en) 2016-04-04 2024-02-20 Loxo Oncology, Inc. Liquid formulations of (s)-n-(5-((r)-2-(2,5-difluorophenyl)-pyrrolidin-1-yl)-pyrazolo[1,5-a]pyrimidin-3-yl)-3-hydroxypyrrolidine-1-carboxamide
SG11201808676RA (en) 2016-04-04 2018-11-29 Loxo Oncology Inc Methods of treating pediatric cancers
US10045991B2 (en) 2016-04-04 2018-08-14 Loxo Oncology, Inc. Methods of treating pediatric cancers
WO2017181117A1 (en) 2016-04-15 2017-10-19 Blueprint Medicines Corporation Inhibitors of activin receptor-like kinase
EP3454898B1 (en) 2016-05-10 2021-11-10 Eisai R&D Management Co., Ltd. Drug combinations for reducing cell viability and/or cell proliferation
DK3458456T3 (da) 2016-05-18 2020-12-14 Array Biopharma Inc Fremstilling af (s)-n-(5-((r)-2-(2,5-difluorphenyl)pyrrolidin-1-yl)pyrazol[1,5-a]pyrimidin-3-yl)-3-hydroxypyrrolidin-1-carboxamid
WO2018017983A1 (en) 2016-07-22 2018-01-25 Blueprint Medicines Corporation Compounds useful for treating disorders related to ret
US10035789B2 (en) 2016-07-27 2018-07-31 Blueprint Medicines Corporation Compounds useful for treating disorders related to RET
WO2018040885A1 (zh) * 2016-09-01 2018-03-08 南京药捷安康生物科技有限公司 成纤维细胞生长因子受体抑制剂及其用途
US20190192522A1 (en) 2016-09-08 2019-06-27 Blueprint Medicines Corporation Inhibitors of the fibroblast growth factor receptor 4 in combination with cyclin-dependent kinase inhibitors
TWI704148B (zh) 2016-10-10 2020-09-11 美商亞雷生物製藥股份有限公司 作為ｒｅｔ激酶抑制劑之經取代吡唑并[1,5-a]吡啶化合物
JOP20190077A1 (ar) 2016-10-10 2019-04-09 Array Biopharma Inc مركبات بيرازولو [1، 5-a]بيريدين بها استبدال كمثبطات كيناز ret
JOP20190092A1 (ar) 2016-10-26 2019-04-25 Array Biopharma Inc عملية لتحضير مركبات بيرازولو[1، 5-a]بيريميدين وأملاح منها
CN106986809B (zh) * 2016-12-02 2020-03-24 广东省微生物研究所（广东省微生物分析检测中心） 一种5-溴-6-氯-3-吲哚辛酯的合成方法
EP3524603B1 (en) * 2016-12-19 2022-06-08 Abbisko Therapeutics Co., Ltd. Fgfr4 inhibitor, preparation method therefor and pharmaceutical use thereof
CN108264511B (zh) * 2017-01-03 2021-04-13 浙江海正药业股份有限公司 杂环类衍生物及其制备方法和其在医药上的用途
WO2018136663A1 (en) 2017-01-18 2018-07-26 Array Biopharma, Inc. Ret inhibitors
ES2948194T3 (es) 2017-01-18 2023-09-01 Array Biopharma Inc Compuestos de pirazolo[1,5-a]pirazina sustituida como inhibidores de la cinasa RET
CN108503593B (zh) * 2017-02-28 2021-04-27 暨南大学 2-氨基嘧啶类化合物及其应用
WO2018160076A1 (en) * 2017-03-03 2018-09-07 Auckland Uniservices Limited Fgfr kinase inhibitors and pharmaceutical uses
JOP20190213A1 (ar) 2017-03-16 2019-09-16 Array Biopharma Inc مركبات حلقية ضخمة كمثبطات لكيناز ros1
WO2018183712A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Blueprint Medicines Corporation Pyrrolo[1,2-b]pyridazine compounds and compositions useful for treating disorders related to kit and pdgfr
CN108689878B (zh) * 2017-04-10 2023-05-09 浙江九洲药业股份有限公司 光学活性二氨基衍生物的制备方法
AR111960A1 (es) 2017-05-26 2019-09-04 Incyte Corp Formas cristalinas de un inhibidor de fgfr y procesos para su preparación
CN110997637B (zh) * 2017-09-05 2022-09-27 保仕健生物科技(上海)有限公司 芳香类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
TWI791053B (zh) 2017-10-10 2023-02-01 美商亞雷生物製藥股份有限公司 6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈之結晶形式及其醫藥組合物
TW202410896A (zh) 2017-10-10 2024-03-16 美商絡速藥業公司 6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈之調配物
WO2019079649A1 (en) 2017-10-18 2019-04-25 Blueprint Medicines Corporation SUBSTITUTED PYRROLOPYRIDINES AS INHIBITORS OF ACTIVIN RECEPTOR-RELATED KINASE
IL274274B2 (en) 2017-11-01 2023-11-01 Guangdong Zhongsheng Pharmaceutical Co Ltd Salt form and crystal form of compound as FGFR4 inhibitor and method of their preparation
CN109745325B (zh) * 2017-11-08 2022-02-15 上海翰森生物医药科技有限公司 Fgfr4抑制剂、其制备方法和用途
EP3740491A1 (en) 2018-01-18 2020-11-25 Array Biopharma, Inc. Substituted pyrrolo[2,3-d]pyrimidines compounds as ret kinase inhibitors
EP3740490A1 (en) 2018-01-18 2020-11-25 Array Biopharma, Inc. Substituted pyrazolo[3,4-d]pyrimidine compounds as ret kinase inhibitors
CN111615514B (zh) 2018-01-18 2022-10-11 奥瑞生物药品公司 作为ret激酶抑制剂的取代的吡唑并[4,3-c]吡啶化合物
EP4353317A3 (en) 2018-04-03 2024-05-08 Blueprint Medicines Corporation Ret inhibitor for use in treating cancer having a ret alteration
WO2019213544A2 (en) 2018-05-04 2019-11-07 Incyte Corporation Solid forms of an fgfr inhibitor and processes for preparing the same
EP3788046A1 (en) 2018-05-04 2021-03-10 Incyte Corporation Salts of an fgfr inhibitor
CN111868058B (zh) * 2018-05-25 2023-06-13 上海和誉生物医药科技有限公司 一种fgfr抑制剂、其制备方法和在药学上的应用
CA3224949A1 (en) 2018-07-31 2020-02-06 Loxo Oncology, Inc. Spray-dried dispersions, formulations, and polymorphs of (s)-5-amino-3-(4-((5-fluoro-2-methoxybenzamido)methyl)phenyl)-1-(1,1,1-trifluoropropan-2-yl)-1h-pyrazole-4-carboxamide
US11964988B2 (en) 2018-09-10 2024-04-23 Array Biopharma Inc. Fused heterocyclic compounds as RET kinase inhibitors
KR20210066839A (ko) 2018-09-27 2021-06-07 베타 파머수티컬 컴퍼니 리미티드 Fgfr4 저해제 및 그것의 용도
CN110950867A (zh) * 2018-09-27 2020-04-03 首药控股(北京)有限公司 一种fgfr4激酶抑制剂及其制备方法和用途
CN111138459B (zh) * 2018-11-06 2022-10-18 南京圣和药业股份有限公司 Fgfr4抑制剂的光学异构体及其应用
WO2020119606A1 (en) * 2018-12-10 2020-06-18 Guangdong Newopp Biopharmaceuticals Co., Ltd. Heterocyclic compounds as inhibitors of fibroblast growth factor receptor
JP2022515198A (ja) 2018-12-19 2022-02-17 アレイ バイオファーマ インコーポレイテッド ＦＧＦＲチロシンキナーゼの阻害剤としての置換ピラゾロ［１，５－ａ］ピリジン化合物
US20220041579A1 (en) 2018-12-19 2022-02-10 Array Biopharma Inc. Substituted quinoxaline compounds as inhibitors of fgfr tyrosine kinases
WO2020177067A1 (en) 2019-03-05 2020-09-10 Bioardis Llc Aromatic derivatives, preparation methods, and medical uses thereof
US11628162B2 (en) 2019-03-08 2023-04-18 Incyte Corporation Methods of treating cancer with an FGFR inhibitor
PT3856341T (pt) 2019-04-12 2023-12-12 Blueprint Medicines Corp Formas cristalinas de (s)-1-(4-fluorofenil)-1-(2-(4-(6-(1- metil-1h-pirazol-4-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4- il)piperazinil)pirimidin-5-il)etan-1-amina e métodos de preparação
US11591329B2 (en) 2019-07-09 2023-02-28 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR inhibitors
WO2021023192A1 (zh) * 2019-08-08 2021-02-11 漳州片仔癀药业股份有限公司 吡嗪-2(1h)-酮类化合物的a晶型和b晶型及其制备方法
WO2021023193A1 (zh) * 2019-08-08 2021-02-11 漳州片仔癀药业股份有限公司 吡嗪-2(1h)-酮类化合物的制备方法
US12122767B2 (en) 2019-10-01 2024-10-22 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR inhibitors
JP2022552324A (ja) 2019-10-14 2022-12-15 インサイト・コーポレイション Ｆｇｆｒ阻害剤としての二環式複素環
WO2021076728A1 (en) 2019-10-16 2021-04-22 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
CN112759593A (zh) 2019-11-01 2021-05-07 北京伯汇生物技术有限公司 桥环并醛基吡啶衍生物及其应用
WO2021088846A1 (en) * 2019-11-04 2021-05-14 Cstone Pharmaceuticals (Suzhou) Co., Ltd. Fgfr4/pd-1 combination treatments
CN115151539A (zh) 2019-12-04 2022-10-04 因赛特公司 Fgfr抑制剂的衍生物
US11897891B2 (en) 2019-12-04 2024-02-13 Incyte Corporation Tricyclic heterocycles as FGFR inhibitors
EP4069369A4 (en) 2019-12-06 2024-02-14 Schrödinger, Inc. CYCLIC COMPOUNDS AND METHODS OF USE THEREOF
CN113087696A (zh) * 2019-12-23 2021-07-09 江苏开元药业有限公司 喹啉类化合物及其应用
BR112022012684A2 (pt) 2019-12-27 2023-03-07 Schroedinger Inc Compostos cíclicos e métodos de uso dos mesmos
US12012409B2 (en) 2020-01-15 2024-06-18 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR inhibitors
EP4130004A4 (en) * 2020-03-27 2024-04-10 Betta Pharmaceuticals Co., Ltd SALT AND CRYSTALLINE FORMS OF FGFR4 INHIBITOR AND THEIR USES
EP4211140A1 (en) 2020-09-10 2023-07-19 Schrödinger, Inc. Heterocyclic pericondensed cdc7 kinase inhibitors for the treatment of cancer
US20230365589A1 (en) 2020-09-18 2023-11-16 Sumitomo Pharma Co., Ltd. Novel amine derivatives
KR20230083296A (ko) 2020-10-05 2023-06-09 치오메 바이오사이언스 가부시키가이샤 암 치료용 의약
US20240148732A1 (en) 2021-01-26 2024-05-09 Schrödinger, Inc. Tricyclic compounds useful in the treatment of cancer, autoimmune and inflammatory disorders
WO2022194160A1 (zh) * 2021-03-16 2022-09-22 上海启晟合研医药科技有限公司 非索替尼固体形式及其制备方法
TW202300150A (zh) 2021-03-18 2023-01-01 美商薛定諤公司 環狀化合物及其使用方法
CA3215903A1 (en) 2021-04-12 2022-10-20 Incyte Corporation Combination therapy comprising an fgfr inhibitor and a nectin-4 targeting agent
CA3220274A1 (en) 2021-06-09 2022-12-15 Incyte Corporation Tricyclic heterocycles as fgfr inhibitors

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1836174B1 (en) * 2004-10-01 2013-02-27 Amgen Inc. Aryl nitrogen-containing bicyclic compounds and their use as kinase inhibitors

Family Cites Families (64)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE190978T1 (de) 1994-11-14 2000-04-15 Warner Lambert Co 6-aryl-pyrido(2,3-d)pyrimidine und -naphthyridine zur hemmung der durch protein-tyrosin-kinase hervorgerufenen zellvermehrung
IL117923A (en) 1995-05-03 2000-06-01 Warner Lambert Co Anti-cancer pharmaceutical compositions containing polysubstituted pyrido¬2,3-d¾pyrimidine derivatives and certain such novel compounds
GB9708917D0 (en) 1997-05-01 1997-06-25 Pfizer Ltd Compounds useful in therapy
GEP20033093B (en) 1998-05-26 2003-10-27 Warner Lambert Co Bicyclic Pyrimidines and Bicyclic 3,4-Dihydropyrimidines as Inhibitors of Cellular Proliferation, Compositions Containing Them and Methods for Treating Cell Proliferative Disorders
WO2001029042A1 (en) 1999-10-21 2001-04-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Heteroalkylamino-substituted bicyclic nitrogen heterocycles as inhibitors of p38 protein kinase
US6403799B1 (en) 1999-10-21 2002-06-11 Agouron Pharmaceuticals, Inc. Methods for the preparation of intermediates in the synthesis of HIV-protease inhibitors
BR0015718A (pt) 1999-11-22 2002-07-23 Warner Lambert Co Quinazolinas e seu uso para inibição de enzimas de cinase dependente de ciclina
AU2001245401A1 (en) 2000-03-01 2001-09-12 Sumitomo Pharmaceuticals Company, Limited Hydrazones and analogs as cholesterol lowering agents
WO2002012238A2 (en) 2000-08-04 2002-02-14 Warner-Lambert Company 2-(4-PYRIDYL)AMINO-6-DIALKOXYPHENYL-PYRIDO[2,3-d]PYRIMIDIN-7-ONES
US6653313B2 (en) 2000-08-10 2003-11-25 Warner-Lambert Company Llc 1,4-dihydropyridine compounds as bradykinin antagonists
WO2002076985A1 (en) 2001-03-23 2002-10-03 Smithkline Beecham Corporation Compounds useful as kinase inhibitors for the treatment of hyperproliferative diseases
KR20060111716A (ko) 2002-01-22 2006-10-27 워너-램버트 캄파니 엘엘씨 2-(피리딘-2-일아미노)-피리도[2,3-ｄ]피리미딘-7-온
US20050009849A1 (en) * 2003-01-03 2005-01-13 Veach Darren R. Pyridopyrimidine kinase inhibitors
US20050124562A1 (en) 2003-09-23 2005-06-09 Joseph Guiles Bis-quinazoline compounds for the treatment of bacterial infections
ES2367267T3 (es) 2005-01-28 2011-10-31 Actelion Pharmaceuticals Ltd. Ciclopropil-(2,3-dimetilbencil)amida del ácido 7-(4-(2-(2,6-dicloro-4-metilfenoxi)etoxi)fenil)-3,9-diazabiciclo(3.3.1)non-6-eno-6-carboxílico como inhibidor de renina para el tratamiento de la hipertensión.
EP1878727A4 (en) 2005-04-28 2013-11-13 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd 2-AMINOQUINAZOLINE DERIVATIVES
CA2672172C (en) 2006-12-22 2016-05-03 Astex Therapeutics Limited Bicyclic heterocyclic compounds as fgfr inhibitors
EA200900819A1 (ru) 2006-12-22 2010-02-26 Новартис Аг Хиназолины для ингибирования pdk1
GB2467670B (en) 2007-10-04 2012-08-01 Intellikine Inc Chemical entities and therapeutic uses thereof
JP2011526299A (ja) 2008-06-27 2011-10-06 アビラ セラピューティクス， インコーポレイテッド ヘテロアリール化合物およびそれらの使用
US20110212091A1 (en) 2008-09-03 2011-09-01 Licentia Ltd. Materials and methods for inhibiting cancer cell invasion
CN102405284B (zh) * 2008-09-05 2016-01-20 新基阿维罗米克斯研究公司 设计不可逆抑制剂的算法
SG172415A1 (en) 2008-12-29 2011-07-28 Fovea Pharmaceuticals Sa Substituted quinazoline compounds
CN102574836B (zh) 2009-08-07 2014-04-16 中外制药株式会社 氨基吡唑衍生物
NZ598705A (en) 2009-09-16 2014-06-27 Celgene Avilomics Res Inc Protein kinase conjugates and inhibitors
UY33227A (es) 2010-02-19 2011-09-30 Novartis Ag Compuestos de pirrolopirimidina como inhibidores de la cdk4/6
GB201007286D0 (en) 2010-04-30 2010-06-16 Astex Therapeutics Ltd New compounds
NZ705820A (en) 2011-04-21 2015-11-27 Ionis Pharmaceuticals Inc Modulation of hepatitis b virus (hbv) expression
HUE048834T2 (hu) 2011-05-17 2020-08-28 Univ California Kináz inhibitorok
FR2985257B1 (fr) 2011-12-28 2014-02-14 Sanofi Sa Composes dimeres agonistes des recepteurs des fgfs (fgfrs), leur procede de preparation et leur application en therapeutique
BR112014017749B1 (pt) 2012-01-19 2021-08-03 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. Composto alquinilbenzeno 3,5-dissubstituído e sal do mesmo
WO2013118817A1 (ja) * 2012-02-07 2013-08-15 大鵬薬品工業株式会社 キノリルピロロピリミジン化合物又はその塩
GB201209609D0 (en) 2012-05-30 2012-07-11 Astex Therapeutics Ltd New compounds
BR112015000653A2 (pt) 2012-07-11 2019-11-05 Blueprint Medicines Corp compostos inibidores do receptor de fator de crescimento de fibroblasto, sua composição farmacêutica e seus usos
US9388185B2 (en) 2012-08-10 2016-07-12 Incyte Holdings Corporation Substituted pyrrolo[2,3-b]pyrazines as FGFR inhibitors
WO2014044846A1 (en) 2012-09-24 2014-03-27 Evotec (Uk) Ltd. 3-(aryl- or heteroaryl-amino)-7-(3,5-dimethoxyphenyl)isoquinoline derivatives as fgfr inhibitors useful for the treatment of proliferative disorders or dysplasia
TWI629266B (zh) 2012-12-28 2018-07-11 藍印藥品公司 纖維母細胞生長因子受體之抑制劑
PL2958916T3 (pl) 2013-02-21 2019-01-31 Pfizer Inc. Stałe postacie selektywnego inhibitora CDK4/6
WO2014160521A1 (en) 2013-03-15 2014-10-02 Blueprint Medicines Corporation Piperazine derivatives and their use as kit modulators
TWI647220B (zh) 2013-03-15 2019-01-11 美商西建卡爾有限責任公司 雜芳基化合物及其用途
SG11201602937UA (en) 2013-10-17 2016-05-30 Blueprint Medicines Corp Compositions useful for treating disorders related to kit
US9334263B2 (en) 2013-10-17 2016-05-10 Blueprint Medicines Corporation Compositions useful for treating disorders related to kit
SG11201602069WA (en) 2013-10-18 2016-04-28 Eisai R&D Man Co Ltd Pyrimidine fgfr4 inhibitors
US9266883B2 (en) 2013-10-25 2016-02-23 Novartis Ag Ring-fused bicyclic pyridyl derivatives as FGFR4 inhibitors
EP3060560A1 (en) 2013-10-25 2016-08-31 Blueprint Medicines Corporation Inhibitors of the fibroblast growth factor receptor
US9695165B2 (en) 2014-01-15 2017-07-04 Blueprint Medicines Corporation Inhibitors of the fibroblast growth factor receptor
US9715813B1 (en) 2014-03-02 2017-07-25 Durex International Corp Visibility electronic controller and current-based status monitor
MA38393B1 (fr) 2014-03-13 2018-11-30 Sanofi Sa Composés hétéroaryle et utilisations associées
US9688680B2 (en) 2014-08-04 2017-06-27 Blueprint Medicines Corporation Compositions useful for treating disorders related to kit
WO2016064960A1 (en) 2014-10-22 2016-04-28 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr4 inhibitors
WO2016127074A1 (en) 2015-02-06 2016-08-11 Blueprint Medicines Corporation 2-(pyridin-3-yl)-pyrimidine derivatives as ret inhibitors
MA41551A (fr) 2015-02-20 2017-12-26 Incyte Corp Hétérocycles bicycliques utilisés en tant qu'inhibiteurs de fgfr4
WO2016134294A1 (en) 2015-02-20 2016-08-25 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr4 inhibitors
SG10201913036RA (en) 2015-02-20 2020-02-27 Incyte Corp Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
MX2018001032A (es) 2015-07-24 2018-11-09 Blueprint Medicines Corp Compuestos utiles para el tratamiento de trastornos relacionados con kit y pdgfr.
EP3341374A1 (en) 2015-08-26 2018-07-04 Blueprint Medicines Corporation Compounds and compositions useful for treating disorders related to ntrk
EP3365335B1 (en) 2015-10-23 2024-02-14 Array Biopharma, Inc. 2-aryl- and 2-heteroaryl-substituted 2-pyridazin-3(2h)-one compounds as inhibitors of fgfr tyrosine kinases
HUE064659T2 (hu) 2015-11-02 2024-04-28 Blueprint Medicines Corp RET inhibitorai
AR106756A1 (es) 2015-11-19 2018-02-14 Blueprint Medicines Corp Compuestos y composiciones útiles para el tratamiento de trastornos relacionados con ntrk
WO2017161269A1 (en) 2016-03-17 2017-09-21 Blueprint Medicines Corporation Inhibitors of ret receptor tyrosine kinases
WO2017181117A1 (en) 2016-04-15 2017-10-19 Blueprint Medicines Corporation Inhibitors of activin receptor-like kinase
WO2018017983A1 (en) 2016-07-22 2018-01-25 Blueprint Medicines Corporation Compounds useful for treating disorders related to ret
US10035789B2 (en) 2016-07-27 2018-07-31 Blueprint Medicines Corporation Compounds useful for treating disorders related to RET
US20190192522A1 (en) 2016-09-08 2019-06-27 Blueprint Medicines Corporation Inhibitors of the fibroblast growth factor receptor 4 in combination with cyclin-dependent kinase inhibitors

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1836174B1 (en) * 2004-10-01 2013-02-27 Amgen Inc. Aryl nitrogen-containing bicyclic compounds and their use as kinase inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
CN105658642A (zh) 2016-06-08
MX2016005297A (es) 2016-08-12
RS63405B1 (sr) 2022-08-31
WO2015061572A1 (en) 2015-04-30
AU2014339972A1 (en) 2016-04-07
TW201602084A (zh) 2016-01-16
KR102405452B1 (ko) 2022-06-03
HRP20220840T1 (hr) 2022-10-14
US20150119405A1 (en) 2015-04-30
EP3060560A1 (en) 2016-08-31
PH12016500739A1 (en) 2016-05-30
ES2924111T3 (es) 2022-10-04
NZ718076A (en) 2021-09-24
IL244738B (en) 2022-06-01
RU2016120012A (ru) 2017-12-01
RU2704112C2 (ru) 2019-10-24
SI3395814T1 (sl) 2022-10-28
DK3395814T3 (da) 2022-07-04
AU2014339972A9 (en) 2019-02-14
WO2015061572A8 (en) 2015-07-02
US10875837B2 (en) 2020-12-29
AU2014339972B2 (en) 2019-01-24
PL3395814T3 (pl) 2022-08-22
BR112016008849B1 (pt) 2022-08-23
CN105658642B (zh) 2019-05-03
HUE059037T2 (hu) 2022-10-28
US20200109127A1 (en) 2020-04-09
CA2928042C (en) 2022-05-10
JP2019019131A (ja) 2019-02-07
PT3395814T (pt) 2022-07-27
IL244738A0 (en) 2016-05-31
CA2928042A1 (en) 2015-04-30
UY35798A (es) 2015-05-29
ZA201601971B (en) 2019-06-26
LT3395814T (lt) 2022-07-25
CN110028491B (zh) 2022-02-11
HK1221460A1 (zh) 2017-06-02
EP3395814B1 (en) 2022-04-06
US10221154B2 (en) 2019-03-05
US9434700B2 (en) 2016-09-06
BR112016008849A2 (zh) 2017-08-01
JP2016534059A (ja) 2016-11-04
RU2016120012A3 (zh) 2018-07-09
US20170174652A1 (en) 2017-06-22
JP6458023B2 (ja) 2019-01-23
KR20160070118A (ko) 2016-06-17
US20210347756A1 (en) 2021-11-11
BR112016008849B8 (pt) 2022-09-06
CN110028491A (zh) 2019-07-19
AU2014339972B9 (en) 2019-05-30
EP3395814A1 (en) 2018-10-31

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