SU731900A3

SU731900A3 - Способ получени производных винбластина

Info

Publication number: SU731900A3
Application number: SU742013753A
Authority: SU
Inventors: Джозеф Куллинан Джордж; Джерзон Коерт
Original assignee: Эли Лилли Энд Компани (Фирма)
Priority date: 1973-04-02
Filing date: 1974-04-01
Publication date: 1980-04-30
Also published as: DE2415980C2; IL44415A0; IE39071L; CY1044A; DK141511B; NL181079B; RO73524A; YU39719B; JPS49128000A; BG21612A3; SU652896A3; YU39876B; AR203882A1; AR204004A1; HU171572B; NL181079C; DD113538A5; BE813168A; JPS6033837B2; PH13623A

Description

Изобретение относитс и способу получени не описанных в литератур производных винбластина общей формулы А -CHt-CHj где R - амино-, гидразико,- азидо или метиламиногруппа; R - водород или С - С апкано R - водород или С - С апкилг - оксигруппа; R - этил, обладающих фармакологической актив ностью. Известен способ получени амидов карбоновых кислот, заключающийс в том, что сложный эфир карбоновой кислоты подвергают взаимодействию с аммиаке или аминами 1. Использование известной реакции позвол ет получать не описанные в литературе производные винбластина общей формулы А. Цель изобретени - способ получени новых фармакологически активных производных винбластина общей формулы А. Поставленна цель достигаетс описываемым способом получени производных винбластина общей формулы А, зaключaющимd в тем, что соединение общей формулы А, где R -метоксигруппа, R , R , R и R шлеют вышеуказанные значени , подвергают взаимодействию с соединением общей формулы RH, где R - амино,- гидразино-, азидоили метиламиногруппа, в безводном метаноле или этаноле при 50-100°С. В случае необходимости соединение общей формулы А, где R - гидразиногруппа , нитрозируют-дл получени соеди нени общей формулы А,где R - азидогруппа .

Целевые соединени формулы Л выдел ют и раздел ют известными методами .

Производные винбластина общей формулы А обладают антивирусной и противоопухолевой активностью.

При м.е р 1. Винбластин-С-ЗЫ-метилкарбоксамид и 4-дезацетилвинбластин-С-ЗМ-метилкарбоксамид ,

К раствору 21 г метиламина в 100 мл безводного метанола при -78 С добавл ют примерно 3,5 г винбластина и оставл ют на 8 дней при 50°С, затем удал ют летучие компоненты при выпаривании в вакууме. По данным спектра дерного магнитного резонанса (ЯМР) и инфракрасного спектра остаток представл ет собой смесь 4-дезацетилвинбластин-С-ЗЫ-метилкарбоксамида и 4-дезацетилвинилбластина. Этот остаток раствор ют в. 100 мл пиридина и добавл ют 20 мл уксусного ангидрида, оставл ют на 18 ч, затем выпаривают в вакууме. Полученный остаток хроматографируют на окиси алюмини , примен смесь этилацетат и хлороформа (1:1) дл элюировани . Фракции, содержащие винбластин-С-ЗН-метилкарбоксамид , объедин ют и удал ют растворитель при выпаривании в вакууме.

При описанной выше методике ацетилировани реацетилируют не только С-4-гидроксил, но также ацетилируют С-3-гидроксил. Ацетильную группу у С-3 удал ют обработкой силикагелем в водном метаноле при комнатной температуре в течение времени от 6 ч до нескольких дней и получают продукт , не содержащий С-3-ацётильной группы. В этом случае остаток объединенных хроматографических фракций раствор ют в 50 мл метанола и к раствору добавл ют 20 мл воды и 2 г силикагел . Полученную смесь фильтруют , фильтрат выпаривают досуха в вакууме и остаток хроматографируют на силикагеле. Дл элюировани примен ют смесь бензола, хлороформа и триэтиламина (100:50:7,5) отбираю фракции, содержавшие желательный винбластин-С-ЗЫ-метилкарбоксамид. Удал ют растворитель при выпаривании в вакууме. Остаток раствор ют в водном метаноле и устанавливают рН 2,9 при добавлении 1%-ной кислоты . , После выпаривани полученной смеси в вакууме получают сульфат вин ластин-С-ЗЫ -метилкарбоксамида, который после перекристаллизации из безводного этанола имеет температуру плавлени 272-275 С (с разложением ) .

4-Дезацетилвинбластин-С-ЗЫ-метилкарбоксамид выдел ют из смеси с 4- -дезацетилвинбластином, полученной на стадии амидировани , сл эдующим способов.

Остаток, полученный при выпаривании первоначальной (до перекристаллизации ) реакционной смеси досуха в вакууме, хроматографируют на силикагеле , примен дл элюировани смесь бензола, хлороформа и триэтил амина, указанную выше. Фракции, содержащие 4-дезацетилвинбластин-С- -ЗЫ-метилкарбоксамид, как установлено тонкослойной хроматографией, объедин ют , выпаривают в вакууме раство0 ритель и получают N-метилкарбоксамид в виде амдрфного твердого вещества. Сульфат 4-дезацетилвинбластин-С-ЗЫ-метилкарбоксамида получают по методике , описанной дл приготовлени

5 сульфата винбластин-С-ЗЫ-метилкарбоксамида .

По описанной выше методике 2 г 4-дезацетилвинбластина раствор ют в смеси 75 мл безводного метанола

0 и 20 г этиламина. Реакционную смесь нагревают при температуре около в течение примерно 8 дней. Полученный 4-дезацетилвинбластин-С-ЗЫ-этилкарбоксамид отдел ют методом

с хроматографии в тонком слое. Полученное твердое вещество имеет полосу при 1670 см в инфракрасном спектре, характерную дл замещенного карбоксамида .

П р и м е р 2. 4-Дезацетилвинблас0 тин-С-3-карбоксамид.

Примерно 10 г сульфата винбластина превращают обычным способом в свободное основание винбластина. Это основание, полученное в виде остат5 ка после выпаривани эфира, раствор ют примерно в 200 мл безводного метанола . К раствору добавл ют безводный жидкий аммиак (300 мл), реакционную смесь выдерживают при температу0 ре около 100°С в течение 60 ч. Затем выпаривают в вакууме. Полученный остаток хроматографируют и фракции, содержащие 4-дезацетилвинбластин-С-3-кар .боксамид, как показала тонкоg слойна хроматографи , объедин ют, выпаривают в-вакууме растворитель и получают в виде остатка чистое свободное основание 4-дезацетилвинбластин-С-3-карбоксамида . Свободное осQ нование имеет полосу в инфракрасном спектре 1687 , характерную дл амидной группы. Молекул рный вес свободного основани , определенный масс-спектроскопией,равен 753, что совпадает с величиной, вычисленной теоретической дл ,.

600 мг остатка превращают в сульфат в.услови х примера 1. .При выпаривании реакционной смеси досуха получают сульфат 4-дезацетилвинбластин0-С-З-карбоксамида , который после перекристаллизации из смеси этанола и изопропилового спирта плавитс при (с paзлoжeниe,

4-Дезацетилвинбластин-С-З-карбокс5 амид превращают в винбластин-С-3-;карбоксамид по методике примера 1 следующим образом. 2,8 г свободного основани 4-деэацетилвинбластин-С-3-карбоксамида ацетилируют смесью безводного пиридина и уксусного ангидрида, Реакцион ную смесь выдерживают в течение трех дней при комнатной температуре. Посл удалени летучих компонентов путем выпаривани в вакууме получают остаток, который раствор ют в хлорис том метилене. Раствор промывают водо высушивают и выпаривают досуха, полу чают винбластин-С-3-карб6ксамид.Амид очищают хроматографией на силикагеле примен дл элюировани смесь этилацетата и этанола (1; 1) ,Фракции,соде жащие винбластин-С-3-карбоксамид,как П15казала хроматографи в тонком слое объедин ют, выпаривают растворитель и получают в виде остатка свободное основание винбластин-С-3-карбоксамида . Это основание имеет характерную дл амида полосу в инфракрасном спек ре около 1700 СМ , Молекул рный вес, определенный масс-спектроскопией, равен 795, то есть совпадал с теоретической величиной, вычисленной дл С45Н57 50. Сульфат винбластин-2-3-карбоксамида получают способом, описанным в примере 1, и кристаллизуют из этанола; т.шт. выше 250 С. Примерз. 4-Дезацетилвинбластин-С-3-карбоксигидразид . По методике из примера 1 4-дизаце тилвинбластин нагревают в безводном этаноле с избытком безводного гидразина при температуре около 60®С в течение примерно 18 ч, затем выпаривают в вакууме летучие компоненты. Полученный остаток, состо щий из 4-дезацетилвинбластин-С-3-карбоксигидразида , раствор ют в хлористом метилене. Этот раствор проливают водой , отдел ют и удал ют хлористый метилен при выпаривании в вакууме. Остаток раствор ют в смеси хлороформ и безола (1:1) и хроматографируют на силикагеле. Дл злюировани примен ют смесь бензола, хлороформа и триэтиламина, указанную в примере 1. Начальные хроматографические фрак ции содержат непрореагировавший 4-дезацетилвинбластин . Последующие фракции содержат 4-дезацетил-18-дескар6ометоксивинбластин-С-3-карбоксигидразид . Следующие фракции, содержащие 4-дезацетилвинбластин-С-З-карб оксигидразид, как установлено тонкослойной хроматографией, объедин ют и удал ют из них растворитель при выпаривании в вакууме. Полученное твердое вещество плавитс при 210220°С (с разложением). Полученный таким образом 4-дезацетилвинбластин-С-3-кар6оксигидразид имеет полосу поглощени карбметокси в инфракрасном спектре при 1725-1735 сми полосу в 1690 см , обусловленную гидразидной функцией. Молекул рный вес, определенный масс-спектрографией, равен 768, что соответствовало теоретической величине, вычисленной дл C4jHj N O., . Пример 4. 4-Дезацетилвинбластин-С-3-карбоксазид . Раствор 678 мл 4-дезацетилвинбластин-С-3-карбоксигидризида (пример 3) и 15 мл безводного метанола смешивают с 50 мл 1 н.раствора сол ной кислоты и полученный раствор охлаждают примерно до 0°С. Затем добавл ют примерно 140 мг нитрита натри и реакционную смесь перемешивают 10 мин., поддержива температуру около . При добавлении 140 мг нитрита натри и перемешивании 10 мин при р°С раствор приобретает темную-красновато-коричневую окраску. Затем реакционную смесь подщелачивают избытком холодного 5%-ного водного раствора бикарбоната натри и трижды экстрагируют хлористым метиленом. 4-Дез ацетил вин бласт:ин-С-3-карбоксазид , образовавшийс в этой реакции, ; раствор ют в хлористом метилене. Обычно раствор 4-дезацетилвинбластин-С-3-карбоксазида в хлористом метилене примен ют без дополнительной очистки и аликвотное количество его обрабатывают способом дл идентификации азида. При выпаривании хлористого метилена получают азид в аморфном состо нии. Этот остаток промлвают эфиром н фильтруют полученную суспензию. Остаток в виде порошка ры-. жевато-коричневого цвета имеет следующие физические свойства: ультрафиолетовый спектр Л„дц 269 ммк (6 « 16700) ; плечо около 290 - 309 ммк ( «7100) , максимум поглощени в инфракрасном спектре при 1690 (карбоксигидразид) отсутствует максимум при 1730 см не измен етс . Кроме того, присутствует резко выраженный максимум при 2135 , характерный дл карбоксамидной функции В масс-спектре наблюдаетс Тюлекул рный ион т/е 708, доказывающий потерю 71 единицы массы (Н, CONj) из молекул рного веса, вычисленного дл C sHssN O 799. В таблице пок,азаны результаты нескольких экспериментов, при которых мьвиам с трансплантированными опухол ми ввод т соединени формулы А. РОС означает остеогейную саркому Риджве и ГЛС лимфосаркому Гарднера, СА 755 аденосаркому . Соединени формулы А, довиты дл мышей при дозах больше тех, при КОТ01МЛХ происходит 100%-ное торможение роста трансплантированных опухлой .

Соединени формулы А активны также в отношении других трансплантированных опухолей. Например, при инъекции 0,25 мг/кг в течение 9 дней сульфата винбластин-С-ЗЫ-метилкарбоксамида дл лечени лимфосаркомы Мекка, рост замедл лс на 54%, а при инъекции винбластин-С-3 на 28%.

При исследовании активности в отношени адемокарциомы СА 755 установлено , что сульфат 4-дезацетилвинбластин-С-3-карбоксамида дал 75% замедлени роста опухоли, сульфат -4-дезацетилвинбластин-С-ЗЫ-метилкарбоксамида 61% и сульфат винбластин-С-3-карбоксамида 49% при дозе 0,25 мг/кг в течение 8 дней и 72% при дозе 0,3 мг/кг.

Claims

Формула изобретения 30

1. Способ получения производных винбластина общей формулы А где R д’

- амино-, гидразино-, азидо- » или метиламиногруппа?

- водород или С 4 - Сз алканоил ·

R - водород или С4 - С₃ алкил; R*' - оксигруппа;

R - этил, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, соединение общей формулы А, где R метоксигруппа, R* , R* , R' , и R'*' имеют вышеуказанные значения, подвергают взаимодействию с соединением общей формулы RH, где R - амино-, гидразино- или метиламиногруппа, в безводном метаноле или этаноле при 50-100°С и в .случае необходимости соединение общей формулы А, где R гидразиногруппа, нитрозируют для получения соединения общей формулы А, где R - азидогруппа после чего целевые продукты выделяют.