RU2012127364A

RU2012127364A - Химеры фибронектин: фактор роста

Info

Publication number: RU2012127364A
Application number: RU2012127364/10A
Authority: RU
Inventors: Зи АПТОН; ЛОНКХЕЙЗЕН Дерек ВАН
Original assignee: Квинсленд Юниверсити Оф Текнолоджи
Priority date: 2009-11-30
Filing date: 2010-11-30
Publication date: 2014-01-10
Also published as: BR112012013035A2; EP2507261A4; EP2507261A1; KR101930916B1; JP2013511960A; WO2011063477A1; AU2010324554B2; AU2010324554A1; ES2619938T3; BR112012013035A8; EP2507261B1; NZ600454A; CA2781474A1; ZA201203915B; KR20120114277A; CN102725308A; CA2781474C

Abstract

1. Выделенный белковый комплекс в форме синтетического химерного белка, содержащий аминокислотную последовательность:(i) фактора роста или по меньшей мере домена фактора роста, который способен связывать соответствующий рецептор фактора роста; и(ii) одного или нескольких доменов типа III фибронектина (FN), содержащих по меньшей мере один интегринсвязывающий домен FN.2. Выделенный белковый комплекс по п.1, где указанный фактор роста выбран из инсулиноподобного фактора роста-1 (IGF-I), инсулиноподобного фактора роста-II (IGF-II), эпидермального фактора роста (EGF), основного фактора роста фибробластов (bFGF) и фактора роста кератиноцитов (KGF).3. Выделенный белковый комплекс по п.1 или п.2, где этим интегринсвязывающим доменом является α-интегринсвязывающий домен или α-интегринсвязывающий домен.4. Выделенный белковый комплекс по п.1 или п.2, где один или несколько доменов типа-III FN содержат аминокислоты 1266-1536 последовательности FN (SEQ ID NO:1).5. Выделенный белковый комплекс по п.1 или п.2, где один или несколько доменов типа-III FN содержат аминокислоты 1447-1536 последовательности FN (SEQ ID NO:1).6. Выделенный белковый комплекс по п.1 или п.2, где один или несколько доменов типа-III FN содержат аминокислоты 1173-1536 последовательности FN (SEQ ID NO:1).7. Выделенный белковый комплекс по п.1 или 2, который не содержит аминокислотную последовательность IGFBP.8. Выделенный белковый комплекс по п.1 или 2, дополнительно содержащий дополнительный фрагмент FN.9. Выделенный белковый комплекс по п.8, где этот дополнительный фрагмент FN содержит аминокислоты 50-273 последовательности FN (SEQ ID NO:1).10. Выделенный белковый комплекс по п.8, где этот дополнительный фрагмент FN содержит аминокислоты 184-273 �

Claims

1. Выделенный белковый комплекс в форме синтетического химерного белка, содержащий аминокислотную последовательность:

(i) фактора роста или по меньшей мере домена фактора роста, который способен связывать соответствующий рецептор фактора роста; и

(ii) одного или нескольких доменов типа III фибронектина (FN), содержащих по меньшей мере один интегринсвязывающий домен FN.

2. Выделенный белковый комплекс по п.1, где указанный фактор роста выбран из инсулиноподобного фактора роста-1 (IGF-I), инсулиноподобного фактора роста-II (IGF-II), эпидермального фактора роста (EGF), основного фактора роста фибробластов (bFGF) и фактора роста кератиноцитов (KGF).

3. Выделенный белковый комплекс по п.1 или п.2, где этим интегринсвязывающим доменом является α₁-интегринсвязывающий домен или α₄-интегринсвязывающий домен.

4. Выделенный белковый комплекс по п.1 или п.2, где один или несколько доменов типа-III FN содержат аминокислоты 1266-1536 последовательности FN (SEQ ID NO:1).

5. Выделенный белковый комплекс по п.1 или п.2, где один или несколько доменов типа-III FN содержат аминокислоты 1447-1536 последовательности FN (SEQ ID NO:1).

6. Выделенный белковый комплекс по п.1 или п.2, где один или несколько доменов типа-III FN содержат аминокислоты 1173-1536 последовательности FN (SEQ ID NO:1).

7. Выделенный белковый комплекс по п.1 или 2, который не содержит аминокислотную последовательность IGFBP.

8. Выделенный белковый комплекс по п.1 или 2, дополнительно содержащий дополнительный фрагмент FN.

9. Выделенный белковый комплекс по п.8, где этот дополнительный фрагмент FN содержит аминокислоты 50-273 последовательности FN (SEQ ID NO:1).

10. Выделенный белковый комплекс по п.8, где этот дополнительный фрагмент FN содержит аминокислоты 184-273 последовательности FN (SEQ ID NO:1).

11. Выделенный белковый комплекс по п.1 или п.2, дополнительно содержащий по меньшей мере одну линкерную последовательность.

12. Выделенный белковый комплекс по п.11, где эта линкерная последовательность содержит сайт расщепления протеазы.

13. Выделенный белковый комплекс по п.11, где эта линкерная последовательность выбрана из группы, состоящей из:

(i) Gly₄Ser (SEQ ID NO:7);

(ii) Gly₄Ser₃ (SEQ ID NO:8);

(iii) (Gly₄Ser)₃ (SEQ ID NO:9);

(iv) (Gly₄Ser)₄ (SEQ ID NO:10);

(v) Leu Ile Lys Met Lys Pro (SEQ ID NO:11); и

(vi) Gln Pro Gln Gly Leu Ala Lys (SEQ ID NO:12).

14. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая выделенный белковый комплекс по любому из предыдущих пунктов.

15. Генетическая конструкция, содержащая нуклеиновую кислоту по п.14, функционально связанную с одной или несколькими регуляторными нуклеотидными последовательностями в векторе.

16. Генетическая конструкция по п.15, которая является экспрессионной конструкцией, где эта выделенная нуклеиновая кислота функционально связана с промотором.

17. Клетка-хозяин, содержащая генетическую конструкцию по п.15.

18. Фармацевтическая композиция, содержащая выделенный белковый комплекс по любому из пп.1-13 и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент.

19. Хирургический имплантат, каркас или протез, покрытый или иным образом содержащий выделенный белковый комплекс по любому из пунктов 1-13.

20. Перевязочный материал для ран или ожогов, содержащий выделенный белковый комплекс по любому из пп.1-13.

21. Способ усиления миграции и/или пролиферации клеток, предусматривающий стадию использования выделенного белкового комплекса по любому из пп.1-13 для связывания как рецептора фактора роста, так и рецептора-интегрина, экспрессируемых клеткой, для индукции, увеличения или иным образом стимуляции посредством этого миграции и/или пролиферации указанной клетки.

22. Способ по п.21, где этот выделенный белковый комплекс вводят животному для стимуляции миграции и/или пролиферации клеток in situ.

23. Способ по п.21 для профилактического или терапевтического применения для индукции, увеличения или иным образом стимуляции миграции и/или пролиферации эпителиальных клеток для облегчения посредством этого заживления ран in situ.

24. Способ по п.22 или 23, где этим животным является человек.

25. Способ по п.21, где выделенный белковый комплекс вводят в одну или несколько клеток или тканей in vitro.