KR100553810B1 - A composition containing Plantago asiatica Linne extract for skin external application - Google Patents
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Abstract
본 발명은 질경이 전초 추출물 또는 질경이 종자 추출물을 함유하는 피부 외용제로서, 피부 미세염증 조절 및 피부두께 강화를 통한 주름 개선, 탄력 개선의 효과가 있으며, 우수한 보습효과가 있고 부작용이 없는 효과가 있다.The present invention is an external preparation for skin containing plantain outpost extract or plantain seed extract, which has the effect of improving skin wrinkles and improving wrinkles, improving elasticity, and having excellent moisturizing effect and no side effect.
질경이 추출물, 피부 염증 조절, 피부 두께, 주름 개선, 피부 탄력, 피부 보습Plantain extract, skin inflammation control, skin thickness, wrinkle improvement, skin elasticity, skin moisturizing
Description
도1a 내지 도1c는 무모생쥐에서 표피두께의 변화에 있어서, 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물을 처리한 결과를 나타내는 사진으로서, 도1a는 질경이 전초 추출물 또는 질경이 종자 추출물을 함유하지 않은 조성물로 처리한 대조군을 나타내고, 도1b는 질경이 전초 추출물을 함유한 조성물로 처리한 실험군을, 도1c는 질경이 종자 추출물을 함유한 조성물로 처리한 실험군을 나타낸다. Figures 1a to 1c is a photograph showing the results of treatment of the external preparation composition of the skin in the change of epidermal thickness in hairless mice, Figure 1a is treated with a composition that does not contain the plantain outpost extract or plantain seed extract The control group is shown, and FIG. 1B shows an experimental group treated with a composition containing plantain seed extract, and FIG. 1C shows an experimental group treated with a composition containing plantain seed extract.
도 2a 내지 도 2c는 본 발명에 의한 조성물의 무모생쥐에서의 콜라겐 생합성 효능을 나타내는 사진들로서, 도 2a는 질경이 전초 추출물 또는 질경이 종자 추출물을 함유하지 않은 조성물로 처리한 대조군을 나타내고, 도 2b는 질경이 전초 추출물을 함유한 조성물로 처리한 실험군을, 도 2c는 질경이 종자 추출물을 함유한 조성물로 처리한 실험군을 나타낸다.2a to 2c are photographs showing the collagen biosynthesis efficacy in the hairless mice of the composition according to the present invention, Figure 2a shows a control treated with a composition containing no plantain outpost extract or plantain seed extract, Figure 2b is plantain The experimental group treated with the composition containing the starch extract, Figure 2c shows an experimental group treated with the composition containing the plantain seed extract.
도 3은 본 발명에 의한 조성물의 주름 개선 효과를 나타내는 그래프이다. 3 is a graph showing the wrinkle improvement effect of the composition according to the present invention.
본 발명은 질경이 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다. 보다 상세하게는 질경이과(Plantaginaceae) 식물인 질경이의 전초와 외피를 포함한 씨 및 그 밖의 동속 식물에서 적절한 용매 배합으로 추출하여 얻은 추출물을 함유한 피부 외용제에 관한 것이다. 본 발명은 유연화장수, 영양화장수, 마사지크림, 영양크림, 팩, 젤, 에센스 또는 피부 점착타입 화장료의 제형을 갖는 형태로 제조될 수 있으며, 피부의 두께를 강화하고, 피부의 미세염증을 조절하고 또한 주름 개선, 탄력 개선 및 우수한 보습효과를 제공하는 것이다. The present invention relates to an external preparation composition for skin containing a plantain extract. More specifically, the present invention relates to an external preparation for skin containing an extract obtained by extracting from an appropriate solvent mixture from seeds and other homologous plants including the plant and the outer shell of the plantain, Plantaginaceae. The present invention can be prepared in the form of a flexible cosmetics, nourishing cosmetics, massage creams, nourishing creams, packs, gels, essences or skin adhesive type cosmetics, strengthening the thickness of the skin, to control the micro-inflammatory of the skin It also provides wrinkle improvement, elasticity improvement and excellent moisturizing effect.
인간의 피부는 시간이 지남에 따라 내적으로는 신진대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하고, 면역 세포의 기능과 세포들의 활성이 저하되어 생체에 필요한 면역 단백질 및 생체 구성 단백질들의 생합성이 줄어들게 되며, 외적으로는 오존층 파괴로 인하여 태양 광선 중 지표에 도달하는 자외선의 함량이 증가하게 되고 환경 오염이 더욱 심화됨에 따라, 피부의 두께가 감소하고, 주름이 증가되고, 탄력이 감소될 뿐 아니라, 기미, 주근깨 및 검버섯 또한 증가하는 등 여러 가지 변화를 일으키게 된다. 그러나 현대사회는 젊고 아름다운 외모를 중시하기 때문에, 상기 내적 인자 및 자외선 스트레스 등의 외적 인자에 의해 피부 두께가 감소하고, 주름이 증가되고 탄력이 감소되는 문제를 예방 또는 해결하려고 하는 욕구가 크다. 이에 따라, 다양한 주름 개선제, 탄력 개선제, 미백제 등이 개발되고 있다. As time passes, the skin of humans decreases the secretion of various hormones that regulate metabolism internally, and decreases the function of immune cells and the activity of cells, thereby reducing the biosynthesis of immune proteins and bioconstituent proteins necessary for the living body. Externally, due to the destruction of the ozone layer, the amount of ultraviolet rays reaching the earth's surface in the sun's rays increases and environmental pollution becomes more severe, resulting in a decrease in skin thickness, wrinkles, and elasticity. In addition, freckles and black mushrooms also increase, causing a number of changes. However, since modern society emphasizes a young and beautiful appearance, there is a great desire to prevent or solve the problem of skin thickness being reduced, wrinkles are increased, and elasticity is reduced by external factors such as internal factors and ultraviolet stress. Accordingly, various wrinkle improving agents, elasticity improving agents, whitening agents and the like have been developed.
피부에 있어서, 주름, 탄력 상실, 피부 건조증 등의 증상들은, 피부를 구성하는 물질인 콜라겐, 엘라스틴, 히아루론산, 프로테오글리칸, 글리코스아미노글리칸, 피브로넥틴 및 당단백질의 함유량 및 배열이 변하거나 감소하고, 수분과 결합 할 수 있는 능력이 저하되고, 그 결과 피부를 구성하는 기질물질이 감소하고, 피부의 수분함유능력이 상실되어 나타나게 된다. 또한 피부를 구성하는 대부분의 세포에서는, 염증을 일으킨다고 알려져 있는 전염증성 사이토카인 (proinflammatory cytokine)인 종양괴사인자알파 (TNF α, Tumor necrosis factor α), 인터루킨-1베타 (IL-1β, interleukin-1β), 프로스타글란딘(prostaglandin)을 생성하는 효소인 사이클로옥시게나제-2 (Cox-2, cyclooxygenase)의 생합성이 증가하고, 이들 염증성 인자에 의해 피부조직을 분해하는 효소인 매트릭스 메탈로프로테아제 (MMP, Matrix metalloproteinase) 의 생합성이 증가하는 것으로 알려져 있다. 따라서, 상기와 같은 피부 세포를 증식시키거나 피부를 구성하는 기질물질을 증가시킴으로써 피부를 두껍게 할 수 있는 물질, 피부를 구성하는 기질 물질인 콜라겐을 분해하는 타입 I 콜라게나제(MMP-1)의 생합성을 억제할 수 있는 물질, 사이클로옥시게나제-2의 생합성을 억제할 수 있는 물질, 종양괴사인자의 생합성을 억제할 수 있는 물질, 피부 섬유아세포에서의 트로포엘라스틴 및 피브릴린 생성을 촉진하는 물질 등을 개발한다면, 주름, 탄력 상실, 피부 건조증 등의 피부의 제증상을 완화시킬 수 있다. In skin, symptoms such as wrinkles, loss of elasticity, dry skin, etc., change or decrease the content and arrangement of collagen, elastin, hyaluronic acid, proteoglycans, glycosaminoglycans, fibronectin and glycoproteins, which constitute the skin, The ability to combine with water is reduced, and as a result, the substrate material constituting the skin is reduced, and the skin's water content is lost. In addition, in most of the cells that make up the skin, tumor necrosis factor alpha (TNF α, Tumor necrosis factor α), a proinflammatory cytokine known to cause inflammation, and interleukin-1 beta (IL-1β, interleukin-) 1β) increases the biosynthesis of cyclooxygenase-2, an enzyme that produces prostaglandin, and matrix metalloprotease (MMP, an enzyme that degrades skin tissue by these inflammatory factors). It is known that the biosynthesis of matrix metalloproteinases is increased. Therefore, the type I collagenase (MMP-1) that degrades collagen, which is a substance that can thicken the skin by proliferating the skin cells or increasing the substance that constitutes the skin, and the substance that constitutes the skin Substances capable of inhibiting biosynthesis, substances capable of inhibiting biosynthesis of cyclooxygenase-2, substances capable of inhibiting biosynthesis of tumor necrosis factor, promoting the production of tropoelastin and fibrin in skin fibroblasts Developing a substance can alleviate symptoms of skin, such as wrinkles, loss of elasticity, and dry skin.
본 발명은, 피부의 미세 염증 상태를 조절하고, 피부 두께를 조절하여, 탄력 있고 건강한 피부 상태를 유지시키고, 또한 진피에서 콜라겐, 엘라스틴, 글리코스아미노글리칸 등의 생합성을 증가시켜 주름 개선 및 탄력 회복 효과를 나타내는 것을 목적으로 한다. 또한, 피부를 촉촉하게 유지시켜 주름을 예방하고 피부가 건조 해지는 것을 예방 및 개선시키는 것을 목적으로 한다.
The present invention, by controlling the micro-inflammatory state of the skin, by controlling the thickness of the skin, to maintain the elastic and healthy skin condition, and also to increase the biosynthesis of collagen, elastin, glycosaminoglycans, etc. in the dermis to improve wrinkles and elasticity It aims at exhibiting a recovery effect. In addition, it aims to keep the skin moist to prevent wrinkles and to prevent and improve the drying of the skin.
상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에 따른 피부 보습용 외용제 조성물은, 질경이 추출물을 함유하는 것을 특징으로 한다. In order to achieve the above object, the external composition for moisturizing the skin according to the present invention is characterized by containing a plantain extract.
상기한 본 발명에 의한 피부 보습용 외용제 조성물에 있어서, 상기 질경이 추출물은, 플란타고 에이시아티카(Plantago asiatica)의 추출물인 것을 특징으로 한다.In the above external composition for moisturizing the skin according to the present invention, the plantain extract is characterized in that the extract of Plantago asiatica .
상기한 본 발명에 의한 피부 보습용 외용제 조성물에 있어서, 상기 질경이 추출물은, 질경이 종자의 추출물인 것을 특징으로 한다.In the external composition for moisturizing skin according to the present invention, the plantain extract is characterized in that the extract of plantain seed.
상기한 본 발명에 의한 피부 보습용 외용제 조성물에 있어서, 상기 질경이 추출물은, 질경이 전초의 추출물인 것을 특징으로 한다.In the external preparation for moisturizing the skin according to the present invention, the plantain extract is characterized in that the extract of plantain outpost.
상기한 본 발명에 의한 피부 보습용 외용제 조성물에 있어서, 상기 질경이 추출물은, 전체 조성물 중에 0.001 내지 10중량% 함유된 것을 특징으로 한다.In the external composition for moisturizing skin according to the present invention, the plantain extract is characterized in that it is contained 0.001 to 10% by weight in the total composition.
상기한 본 발명에 의한 피부 보습용 외용제 조성물에 있어서, 상기 질경이 추출물은, 전체 조성물 중에 0.01 내지 5중량% 함유된 것을 특징으로 한다.In the external composition for moisturizing the skin according to the present invention, the plantain extract is characterized in that it is contained 0.01 to 5% by weight in the total composition.
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이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail.
본 발명에 있어서, 질경이 추출물은 질경이과 동종에 속하는 질경이의 추출물로써 질경이의 뿌리, 종자, 외피, 씨, 전초 또는 이들의 혼합물임을 특징으로 하며, 그 중에서도 질경이의 종자 또는 전초의 추출물을 이용하는 것이 바람직하다. In the present invention, the plantain extract is an extract of plantain belonging to the same species as plantain, characterized in that the root of the plantain, seed, sheath, seed, starch or mixture thereof, and among them, it is preferable to use the seed or extract of plantain. .
본 발명에 사용된 질경이는 질경이과(Plantaginaceae)에 속하는 다년생 초본으로 어린잎은 식용한다. 한방에서는 뿌리채 뽑아 말려서 차전초(車前草)라 하고, 종자를 차전자(車前子)라는 약재로 사용하고, 한국, 일본, 사할린, 타이완, 중국, 시베리아, 동부 히말라야, 자바, 말레이시아 등지에 분포한다. 질경이 전초의 성분은 오쿠빈(aucubin), 플란타기닌(plantaginin), 호모플란타기닌(homoplantaginin)등의 배당체와 탄닌, 우르솔산(ursolic acid), 피토스테롤글리코시드(phytosterol glycosides)이고, 이들 스테롤류인 베타시토스테롤팔미테이트(β-sitosterol palmitate), 스티그마스테롤팔미테이트(stigmasterol palmitate) 등이 점액성 팽화물질의 주체이다. 차전자(Plantaginis Semen)에는 뮤실라제(mucilage(9%내외))로 플란타산(Plantasan), 플란타고뮤실라제 A(plantago mucilage A(L-arabinose, D- xylose, D-glucuronic acid, D-galacturonic acid))가 함유되어 있고 이리도이드 배당체 (Iridoidal glycoside)인 오쿠빈 (aucubin), 게니피오시딕애씨드 (genipiosidic acid) 가 있고 플라본배당체 (flavone glycoside)로서 플란타고시드 (plantagoside) 기타 아세토시드(acetoside), 시린긴(syringin), 콜린(choline) 및 기타의 지방산 등이 들어 있다. Plantain used in the present invention is a perennial herb belonging to Plantaginaceae, young leaves are edible. In Chinese medicine, the roots are extracted and dried, called Chajeoncho, and the seeds are used as a medicinal herb, and are distributed in Korea, Japan, Sakhalin, Taiwan, China, Siberia, Eastern Himalayas, Java, Malaysia, etc. . The components of plantain outpost are glycosides such as acubin, plantaginin, and homoplantaginin, tannins, ursolic acid, phytosterol glycosides, and these sterols Beta-sitosterol palmitate (β-sitosterol palmitate), stigmasterol palmitate (stigmasterol palmitate) and the like are the main agents of the mucous swelling material. Planttaginis Semen contains mucilase (around 9%), planttasan, plantago mucilage A (L-arabinose, D-xylose, D-glucuronic acid, D). -galacturonic acid), iridoidal glycosides, acubin, genipiosidic acid, and flavone glycosides, plantagoside and other acetosides. (acetoside), syringin, choline and other fatty acids.
질경이는 "플란타기닌"이라는 배당체와 탄닌이 함유되어 있어서 이뇨제, 진해, 거담, 건위, 지사(止瀉), 해열, 소염, 강장제 등으로 쓰이고, 간 기능을 활성화하여 어지럼증, 두통에 효과가 있고, 폐열로 인한 해수에도 효과가 있다. 항균작용도 있어서 급만성 세균성 설사, 신장염, 방광염, 요도염의 치료에도 이용한다. 민간약으로는 종기에 생잎을 불에 쬐어 부드럽게 해서 붙이면 좋고 치통에는 생잎을 소금에 비벼서 아픈 이에 물고 있으면 치통이 멎는다고 한다. Plantain contains glycosides and tannins called "Plantaginine" and are used as diuretics, Jinhae, expectoration, health, branch, fever, anti-inflammatory, tonic, etc. It is also effective for seawater from waste heat. It also has antibacterial action, which is used to treat acute bacterial diarrhea, nephritis, cystitis and urethritis. For folk medicine, boil the fresh leaves on the boil to soften them and attach them to the toothache.
질경이에 대한 논문들을 살펴보면, 질경이 종자의 페닐프로파노이드 (phenylpropanoid) 성분이 이뇨효과와 항염효과(특히 간염)가 있다고 알려져 있고, 차전자와 차전자피에는 물을 함유할 수 있는 피토스테롤글리코시드 (phytosterol glyicoside), 뮤실라제 (mucilage)로 대표되는 점액성 성분을 가지고 있어 식품쪽에서는 다이어트와 변비개선의 용도로 사용된다. 또한 보체를 활성화시키는 면역증강작용, 항바이러스작용, 플란타고시드는 알파만노시다제 억제제 (α-mannosidase inhibitor) 로서 면역억제 기능이 있다. 그리고 질경이 잎은 상처재생효과 (wound healing)도 가지고 있으며, 페닐에타노이드 (phenylethanoid)는 생쥐 귀의 부종을 감소시키는 작용도 있다. 질경이에 함유된 우르솔산(Ursolic acid)과 지방산 (Fatty acid)들은 사이클로옥시게나제-2 (COX-2) 억제제로도 작용한다고 알려져 있다. In the literature on plantain, the phenylpropanoid component of plantain seed is known to have diuretic and anti-inflammatory effects (especially hepatitis), and phytosterol glyicoside, which can contain water in the char and chaff, ), Mucilage (mucilage) is represented as a component of the food side is used for diet and constipation improvement. In addition, immune enhancing, antiviral, and plantagosides that activate complement have an immunosuppressive function as an alpha-mannosidase inhibitor. Plantain leaves also have a wound healing effect, and phenylethanoids reduce the swelling of mouse ears. Ursolic acid and fatty acids in plantain are also known to act as cyclooxygenase-2 (COX-2) inhibitors.
질경이와 차전자에 대한 특허들을 살펴보면, "탈모방지 및 모발성장 촉진 조성물 (한국등록특허 0382602)", "변비증상 개선 효과가 있는 차 및 이의 제조 방법(한국등록특허 0344325)", "항균성 식물추출물을 함유하는 치약 조성물 (한국등록특허 0313491)", "화상치료용 고약조성물 (한국등록특허 0167535)" 등이 등록되어 있고, 피부에 대한 특허를 살펴보면, "복합생약추출물을 포함하는 피부 보호용 화장료 조성물 (한국공개특허 2002-0044266)", "기미.주근깨 제거용 한방 팩 재료 (한국공개특허 2000-0049466)", "여드름 예방 및 치료제 (한국공개특허1999-0054326)", "차전자 추출물을 함유하는 피부세정제 조성물 (한국공개특허1998-0067528)" 등이 공개되어 있다. 질경이의 주성분인 오쿠빈(Aucubin) 에 대해서는 "B형 간염바이러스의 복제를 억제하는 약학적 제제 (한국등록특허0218052)" 가 등록되어 있다. 그러나 질경이 및 차전자에 대해 피부두께의 증가나 미세염증의 제어에 의한 피부주름 개선, 탄력개선, 보습의 용도로 밝혀진 바는 전혀 없다. Looking at the patents for plantains and chajeon, "hair loss prevention and hair growth promoting composition (Korea Patent Registration 0382602)", "tea having a constipation symptom improving effect and its manufacturing method (Korea Patent 0344325)", "antibacterial plant extracts Toothpaste composition containing the (Korea Patent Registration 0313491) "," burn treatment composition (Korea Patent Registration 0167535) "and the like, and look at the patent on the skin," cosmetic composition for skin protection comprising a compound herbal extract (Korean Laid-Open Patent 2002-0044266) "," Herbal pack material for removing blemishes and freckles (Korean Laid-open Patent No. 2000-0049466) "," Acne preventive and therapeutic agent (Korean Laid-Open Patent 1999-0054326) "," Contains the tea extract Skin cleaner composition (Korean Patent Publication No. 1998-0067528) and the like are disclosed. About the ucubin (Aucubin) which is the main component of plantain, "pharmaceutical agent that inhibits the replication of hepatitis B virus (Korean Patent No. 0218052)" is registered. However, it has never been found to improve skin wrinkles, improve elasticity, or moisturize the skin by increasing skin thickness or controlling microinflammatory inflammation.
본 발명에서는 질경이 추출물을 사용하여 주름, 탄력, 보습 등의 증상을 전반적으로 효과적으로 개선할 수 있다. 질경이 전초 추출물 또는 질경이 종자 추출물의 사용량은 생체외(in vitro) 실험 및 생체내(in vivo) 실험을 근거로 조성물 총 중량에 대하여 0.001~10중량%, 바람직하게는 0.01~5중량%이다. 추출물 함량이 0.001중량% 미만이면 활성 성분으로서 작용을 기대하기 어려우며, 10중량%를 초과하면 제형 안정성에 문제가 생길 수 있다. 이러한 관점에서 0.01~5중량%이 더욱 바 람직하다.In the present invention, using the plantain extract can effectively improve the overall symptoms such as wrinkles, elasticity, moisturizing. The amount of plantain plantar extract or plantain seed extract is 0.001 to 10% by weight, preferably 0.01 to 5% by weight, based on the total weight of the composition, based on in vitro and in vivo experiments. If the extract content is less than 0.001% by weight, it is difficult to expect to act as an active ingredient, and if the extract content is more than 10% by weight, problems with formulation stability may occur. 0.01 to 5% by weight is more preferable in this respect.
본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은, 주름 및 탄력을 개선시키고, 보습을 목적으로 사용되는 것으로 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들면, 유연화장수, 영양화장수, 마사지크림, 영양크림, 팩, 젤 또는 피부 점착타입 화장료의 제형을 갖는 화장료 조성물일 수 있으며, 또한 로션, 연고, 겔, 크림, 패취 또는 분무제와 같은 경피 투여형 제형일 수 있다. The external preparation composition for skin according to the present invention is used for the purpose of improving wrinkles and elasticity, and is used for the purpose of moisturizing, and is not particularly limited in the formulation. For example, supple cosmetics, nourishing cosmetics, massage cream, nourishing cream, and pack It may be a cosmetic composition having a formulation of a gel or skin adhesive cosmetic, and may also be a transdermal dosage form such as a lotion, ointment, gel, cream, patch or spray.
본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은, 약제학적 조성물일 수 있으며 이 경우에, 질경이 추출물은 그대로 또는 약학적으로 허용 가능한 염의 형태로 의약에 사용할 수 있다. 상기 염으로는 약학적으로 허용되는 것이면 특별히 한정되지 않으며, 예를 들어 염산, 황산, 질산, 인산, 불화수소산, 브롬화수소산, 포름산 아세트산, 타르타르산, 젖산, 시트르산, 푸마르산, 말레산, 숙신산, 메탄술폰산, 벤젠술폰산, 톨루엔술폰산, 나프탈렌술폰산 등을 사용할 수 있다. 산 부가염 이외에도, 수산화나트륨, 수산화칼륨, 트리에틸아민, 3차-부틸아민과 같은 염기 부가염도 사용될 수 있다. The external preparation composition for skin according to the present invention may be a pharmaceutical composition, in which case the plantain extract may be used in medicine as it is or in the form of a pharmaceutically acceptable salt. The salt is not particularly limited as long as it is pharmaceutically acceptable. For example, hydrochloric acid, sulfuric acid, nitric acid, phosphoric acid, hydrofluoric acid, hydrobromic acid, formic acid acetic acid, tartaric acid, lactic acid, citric acid, fumaric acid, maleic acid, succinic acid, methanesulfonic acid , Benzene sulfonic acid, toluene sulfonic acid, naphthalene sulfonic acid and the like can be used. In addition to acid addition salts, base addition salts such as sodium hydroxide, potassium hydroxide, triethylamine, tert-butylamine can also be used.
본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은, 약제학적 제형에 있어서, 질경이 추출물의 함유량은 제형에 따라 광범위하게 변할 수 있으며, 통상적인 방법에 따른다. The external preparation composition for skin according to the present invention, in the pharmaceutical formulation, the content of the plantain extract can vary widely depending on the formulation, according to conventional methods.
본 발명에 의한 피부 외용제 약제학적 조성물은, 유효성분에 악영향을 미치지 않는 한, 필요에 따라 의약에 사용되는 각종 보조제, 예컨대 담체나 기타 첨가제, 예컨대 안정제, 완화제, 유화제 등을 첨가하여 제제화될 수 있다. The external preparation for skin pharmaceutical composition according to the present invention may be formulated by adding various auxiliaries used in medicine, such as a carrier or other additives such as stabilizers, emollients, emulsifiers, etc. as necessary, so long as they do not adversely affect the active ingredient. .
또한, 본 발명에 따른 질경이 추출물 함유 조성물을 비경구, 경구 등으로 투여할 수 있다. 비경구 루트로는 경피 투여가 바람직하며, 그 중에서도 국소도포가 가장 바람직하다. 제형으로는, 연고, 크림, 주사제, 산제, 과립제, 정제 등을 비롯하여 약제학적 제제에 적합한 어떠한 제형으로도 할 수 있다. In addition, the plantain extract containing composition according to the present invention can be administered parenterally, orally. As a parenteral route, transdermal administration is preferred, and topical application is most preferred. The formulation may be any formulation suitable for pharmaceutical preparations, including ointments, creams, injections, powders, granules, tablets and the like.
본 발명에 의한 약제학적 조성물의 바람직한 투여량은 0.001 내지 1000mg / Kg·day이다. The preferred dosage of the pharmaceutical composition according to the present invention is 0.001 to 1000 mg / Kg · day.
본 발명에 의한 조성물은 단독으로 투여되거나 다른 약제와 동등하게 또는 다른 약제를 보조하기 위해 함께 투여될 수 있다. The compositions according to the invention can be administered alone or in combination with other agents or together to assist other agents.
또한, 각 제형의 외용제 조성물에 있어서, 상기한 필수 성분 이외의 다른 성분들은 기타 외용제의 제형 또는 사용목적 등에 따라 당업자가 적의 선정하여 배합할 수 있다. In addition, in the external preparation composition of each formulation, other components other than the above-mentioned essential components can be suitably selected and blended by those skilled in the art according to the formulation of the external preparation or the purpose of use.
이하, 실시예 및 시험예를 들어 본 발명의 구성 및 작용효과를 보다 구체적으로 설명한다. 그러나, 본 발명이 이들 예로만 한정되는 것은 아니다. Hereinafter, the configuration and effect of the present invention will be described in more detail with reference to Examples and Test Examples. However, the present invention is not limited only to these examples.
실시예Example
[실시예 1] 질경이 전초 추출물의 조제Example 1 Preparation of Plantain Outpost Extract
질경이 전초 500g에 중량(Kg)비 4배량의 70% 에탄올을 가한 후 80 C에서 2시간 가열하여 유효성분을 추출하였다. 이를 하루 동안 상온에서 방치하여 불순물을 침전 시킨 후, 여과지를 이용하여 2회 여과한 여액을 감압 증발기를 사용하여 완전히 증발시켜 농축하였다. After adding 70% ethanol of 4 times the weight (Kg) ratio to 500 g of plantain outpost, and heated at 80 C for 2 hours to extract the active ingredient. This was allowed to stand at room temperature for 1 day to precipitate impurities, and the filtrate was filtered twice using filter paper and concentrated by completely evaporating using a reduced pressure evaporator.
[실시예 2] 질경이 종자 추출물의 조제Example 2 Preparation of Plantain Seed Extract
질경이 종자 500g에 중량(Kg)비 4배량의 70% 에탄올을 가한 후 80 C에서 2시간 가열하여 유효성분을 추출하였다. 이를 하루 동안 상온에서 방치하여 불순물을 침전시킨 후, 여과지를 이용하여 2회 여과한 여액을 감압 증발기를 사용하여 완전히 증발시켜 농축하였다. After adding 70% ethanol of 4 times the weight (Kg) ratio to 500 g of plantain seed, it was heated at 80 C for 2 hours to extract the active ingredient. This was allowed to stand at room temperature for 1 day to precipitate impurities, and the filtrate was filtered twice using a filter paper and concentrated by completely evaporating using a reduced pressure evaporator.
[시험예 1] 피부세포의 증식효과 측정Test Example 1 Measurement of Proliferation Effect of Skin Cells
인간으로부터 직접 채취하거나 혹은 상업적으로 구입한 인간의 피부 각질형성세포에 상기 실시예1 및 실시예2에서 제조된 질경이 추출물을 처리하여, 각질형성세포의 증식 효과를 측정하였다. 즉, 1.0%의 우태아 혈청이 함유된 KGM(Keratinocyte Growth Media)배지가 함유된 96공 평판배양기(96-well microtiter plate)에 사람의 각질형성세포를 5,000세포/well가 되도록 넣고, 세포가 부착한 후 우태아혈청이 없는 KGM배지로 갈아주고 70 80% 정도 자랄 때까지 배양하였다. 그 다음, 하기 표 1의 농도대로 처리, 3일 후 살아있는 세포의 수를 측정하여, 피부세포에 대한 증식효과를 관찰하였다. 이 때 조성물을 처리하지 않은 군을 대조군으로 하였다. 그 결과는 대조군을 100으로 하여 비교치를 표 1에 나타내었다. The proliferative effect of keratinocytes was measured by treating the skin keratinocyte extracts prepared in Examples 1 and 2 directly with human dermal keratinocytes obtained directly from humans or purchased commercially. That is, put human keratinocytes into 5,000 cells / well in a 96-well microtiter plate containing KGM (Keratinocyte Growth Media) containing 1.0% fetal bovine serum and attach cells. Afterwards, the fetal bovine serum-free KGM medium was changed and cultured to 70 80% growth. Then, the treatment was carried out according to the concentration of Table 1, after 3 days to measure the number of living cells, to observe the proliferative effect on the skin cells. At this time, the group not treated with the composition was used as a control. The results are shown in Table 1 comparing the control to 100.
상기 표에 나타난 바와 같이, 질경이 전초 추출물 또는 질경이 종자 추출물은, 피부세포에 독성을 주지 않으면서 각질형성세포를 증식시켜 표피의 두께를 두껍게 한다는 것을 알 수 있었다. 피부 두께가 얇아지면 바로 주름이 형성되는 원인이 된다. 따라서, 피부가 두꺼워지면 주름을 예방 또는 개선시켜줄 수 있는 것이다. As shown in the table, it can be seen that the plantain outpost extract or plantain seed extract proliferates keratinocytes without causing toxicity to skin cells, thereby thickening the thickness of the epidermis. If the skin becomes thinner, it may cause wrinkles to form immediately. Therefore, if the skin is thickened it can prevent or improve the wrinkles.
[시험예 2] 피부세포의 콜라겐 생합성 효능 측정Test Example 2 Measurement of Collagen Biosynthesis Efficacy of Skin Cells
인체 섬유아세포를 104 개의 농도로 48공 평판배양기에 배양한 후, 상기 실시예 1 및 실시예 2에 따른 각 추출물을, 0.1pp, 1ppm, 10ppm 포함한 배지로 교체하였다. 배양 24시간 후 상등액을 수확해서(harvest) ELISA (Takara MK101) 방법을 사용하여 생성된 프로콜라겐의 양을 정량하였다. 그 결과는 대조군을 100으로 하여 비교치를 표 2에 나타내었다.After culturing human fibroblasts in a 48-hole plate incubator at a concentration of 10 4 , each extract according to Examples 1 and 2 was replaced with a medium containing 0.1 ppm, 1 ppm, and 10 ppm. After 24 hours of culture, the supernatant was harvested and the amount of procollagen produced was quantified using the ELISA (Takara MK101) method. The results are shown in Table 2 comparing the control to 100.
상기 표 2로부터, 질경이 전초 추출물 또는 질경이 종자 추출물은 콜라겐 생합성을 농도 의존적으로 증가시킴을 알 수 있다. 상기 조성 중, 특히 질경이 종자 추출물이 콜라겐 생합성에 대한 효과가 매우 우수함을 알 수 있다.From Table 2, it can be seen that the plantain outpost extract or plantain seed extract increases the collagen biosynthesis in a concentration-dependent manner. In the above composition, it can be seen that the plantain seed extract is particularly excellent in collagen biosynthesis.
[시험예 3] 자외선에 의한 타입 I 콜라게나제(MMP-1)의 생합성 억제 효능 측정Test Example 3 Measurement of the Biosynthesis Inhibitory Effect of Type I Collagenase (MMP-1) by Ultraviolet Rays
인체 섬유아세포를 104 개의 농도로 48공 평판배양기에 배양하고, 24시간 후에 자외선A 를 15J/cm2 로 조사한 후, 상기 실시예 1 및 실시예 2에 따른 추출물을 0.1pp, 1ppm, 10ppm 포함한 배지로 교체하였다. 배양 2일째 상등액을 수확해서 (harvest) ELISA (AP biotech RPN2610) 방법을 사용하여 생성된 타입 I 콜라게나제의 양을 정량하였다. 그 결과는 자외선 대조군을 100으로 하여 비교치를 표 3에 나타내었다.Human fibroblasts cultured in 10-4 concentration in the incubator 48, Plate and, after irradiating the ultraviolet A after 24 hours to 15J / cm 2, the first and second embodiments to extract the 0.1pp, 1ppm, including 10ppm according Replaced with medium. Supernatants were harvested on day 2 of culture (harvest) to quantify the amount of type I collagenase produced using the ELISA (AP biotech RPN2610) method. The results are shown in Table 3 comparing the UV control group to 100.
상기 표 3으로부터, 질경이 전초 추출물 또는 질경이 종자 추출물은 자외선 에 의한 타입 I 콜라게나제의 생합성을 농도 의존적으로 감소시킴을 알 수 있다. 그 중에서 특히 질경이 종자 추출물이 타입 I 콜라게나제 생합성 억제에 대한 효과가 매우 우수하여 효과적으로 피부기질의 분해를 막아줄 수 있음을 알 수 있다.From Table 3, it can be seen that the plantain outpost extract or plantain seed extract reduces the biosynthesis of type I collagenase by UV concentration in a concentration-dependent manner. In particular, it can be seen that the plantain seed extract is very effective in inhibiting the type I collagenase biosynthesis can effectively prevent the degradation of the skin substrate.
[시험예 4] 자외선에 의한 사이클로옥시게나제-2의 생합성 억제 효능 측정Test Example 4 Determination of Biosynthesis Inhibition Effect of Cyclooxygenase-2 by Ultraviolet Rays
인체 섬유아세포를 105 개의 농도로 12공 평판배양기에 배양하고, 자외선A를 15J/cm2로 조사한 후, 상기 실시예 1 및 실시예 2에 따른 추출물을 0.1pp, 1ppm, 10ppm 포함한 배지로 교체하였다. 배양 2일째 세포를 수확해서 (harvest) 웨스턴블롯 (Westren blot) 방법을 사용하여 생성된 사이클로옥시게나제-2 (cyclooxygenase-2, COX-2)의 양을 정량하였다. 그 결과는 자외선 대조군을 100으로 하여 덴시토미터(densitometer)로 측정한 비교치를 표 4에 나타내었다.After the human fibroblasts cultured in 10 five concentrations in 12-plate culture medium, and irradiated with a UV-A 15J / cm 2, to replace the extract according to Example 1 and Example 2 in medium containing 0.1pp, 1ppm, 10ppm It was. Cells were harvested on the second day of culture (harvest) and the amount of cyclooxygenase-2 (COX-2) produced using the Western blot method was quantified. The results are shown in Table 4, a comparison value measured with a densitometer with a UV control of 100.
상기 표 4로부터, 질경이 전초 추출물 또는 질경이 종자 추출물은 자외선에 의한 사이클로옥시게나제-2의 생합성을 농도 의존적으로 감소시켜 COX-2의 산물인 프로스타글란딘 E2 (PGE2)에 의한 피부발적, 동통, 분해를 방지할 수 있음을 알 수 있다. From Table 4, the plantain outpost extract or plantain seed extract reduces the concentration of the cyclooxygenase-2 biosynthesis by ultraviolet light to reduce skin redness, pain, and degradation by prostaglandin E2 (PGE2), a product of COX-2. It can be seen that it can prevent.
[시험예 5] 자외선에 의한 종양괴사인자알파의 생합성 억제 효능 측정Test Example 5 Measurement of the Inhibitory Effect of Biosynthesis on Tumor Necrosis Factor Alpha by Ultraviolet Rays
인체 각질형성세포를 105 개의 농도로 12공 평판배양기에 배양하고, 자외선B를 30mJ/cm2로 조사한 후, 상기 실시예 1 및 실시예 2의 추출물을 0.1pp, 1ppm, 10ppm 포함한 배지로 교체하였다. 배양 6-24시간 후 세포를 수확해서 (harvest) ELISA (Pharmingen 555212) 방법을 사용하여 생성된 종양괴사인자알파(TNF α)의 양을 정량하였다. 그 결과는 자외선 대조군을 100으로 하여 비교치를 표 5에 나타내었다.Human keratinocytes were cultured in a 12-hole plate incubator at a concentration of 10 5 , UVB was irradiated at 30mJ / cm 2 , and the extracts of Examples 1 and 2 were replaced with a medium containing 0.1pp, 1ppm, and 10ppm. It was. Cells were harvested after 6-24 hours of culture (harvest) to quantify the amount of tumor necrosis factor alpha (TNF α) produced using the ELISA (Pharmingen 555212) method. The results are shown in Table 5 comparing the UV control group to 100.
상기 표 5로부터, 질경이 전초 추출물 또는 질경이 종자 추출물은 자외선에 의한 종양괴사인자알파의 생합성을 농도 의존적으로 감소시키므로, 자외선으로 인해 발생할 수 있는 피부 염증, 피부 기질물질의 감소, 탄력 저하, 주름 형성 등을 효과적으로 예방 또는 개선할 수 있음을 알 수 있다. From Table 5, the plantain outpost extract or plantain seed extract reduces the biosynthesis of tumor necrosis factor alpha due to the concentration, depending on the concentration, skin inflammation that can occur due to ultraviolet rays, reduction of skin matrix material, decrease in elasticity, wrinkle formation, etc. It can be seen that can be effectively prevented or improved.
[시험예 6] 미세염증인자에 의한 타입 I 콜라게나제(MMP-1)의 생합성 억제 효능 측정Test Example 6 Determination of Biosynthesis Inhibitory Effect of Type I Collagenase (MMP-1) by Microinflammatory Factors
인체 섬유아세포를 104 개의 농도로 48공 평판배양기에 배양하고, 24시간 후 종양괴사인자알파 (TNF α, Tumor necrosis factor α)를 20ng/ml 되게 하고, 상기 실시예 1 및 실시예 2에 따른 추출물을 0.1pp, 1ppm, 10ppm 포함한 배지로 교체하였다. 배양 2일째 상등액을 수확해서 (harvest) ELISA (AP biotech RPN2610) 방법을 사용하여 생성된 타입 I 콜라게나제의 양을 정량하였다. 그 결과는 TNF α 대조군을 100으로 하여 비교치를 표 6에 나타내었다.Human fibroblasts were cultured in a 48-hole plate incubator at a concentration of 10 4 , and after 24 hours, tumor necrosis factor alpha (TNF α, Tumor necrosis factor α) was 20ng / ml, according to Examples 1 and 2 above. Extracts were replaced with medium containing 0.1ppm, 1ppm, 10ppm. Supernatants were harvested on day 2 of culture (harvest) to quantify the amount of type I collagenase produced using the ELISA (AP biotech RPN2610) method. The results are shown in Table 6 comparing the TNF α control group to 100.
상기 표 6으로부터, 질경이 전초 추출물 또는 질경이 종자 추출물이 미세염증인자인 TNF α에 의한 타입 I 콜라게나제의 생합성을 농도 의존적으로 감소시킴을 알 수 있다. 특히 질경이 종자 추출물이 타입 I 콜라게나제 생합성 억제에 대한 효과가 매우 우수하여 효과적으로 피부기질의 분해를 막아줄 수 있음을 알 수 있다.From Table 6, it can be seen that the plantain outpost extract or plantain seed extract reduces the concentration of biosynthesis of type I collagenase by TNF α which is a microinflammatory factor. In particular, it can be seen that the plantain seed extract is very effective in inhibiting the type I collagenase biosynthesis can effectively prevent the degradation of the skin substrate.
[시험예 7] 미세염증인자에 의한 사이클로옥시게나제-2의 생합성 억제 효능 측정Test Example 7 Measurement of Inhibitory Effect of Biosynthesis of Cyclooxygenase-2 by Microinflammatory Factors
인체 섬유아세포를 105 개의 농도로 12공 평판배양기에 배양하고, 24시간 후 종양괴사인자알파 (TNF α, Tumor necrosis factor α) 20ng/ml 되게 하고, 실시예 1 및 실시예 2를 0.1pp, 1ppm, 10ppm 포함한 배지로 교체하였다. 배양 2일째 세포를 수확해서 (harvest) 웨스턴블랏(Westren blot) 방법을 사용하여 생성된 사이클로옥시게나제-2 (cyclooxygenase-2, COX-2)의 양을 정량하였다. 그 결과는 대조군을 100으로 하여 덴시토미터(densitometer)로 측정한 비교치를 표 7에 나타내었다.Human fibroblasts were cultured in a 12-hole plate incubator at a concentration of 10 5 , and after 24 hours, the tumor necrosis factor alpha (TNF α, Tumor necrosis factor α) was 20ng / ml, and Example 1 and Example 2 were 0.1pp, 1ppm, 10ppm containing medium was replaced. Cells were harvested on day 2 of culture (harvest) and the amount of cyclooxygenase-2 (COX-2) produced using the Western blot method was quantified. The result is shown in Table 7 the comparison value measured with a densitometer (control group as 100).
상기 표 7로부터, 질경이 전초 추출물 또는 질경이 종자 추출물이 미세염증인자에 의한 사이클로옥시게나제-2의 생합성을 농도 의존적으로 감소시켜 COX-2의 산물인 프로스타글란딘 E2 (PGE2)에 의한 피부발적, 동통, 분해를 방지할 수 있음을 알 수 있다. From Table 7, the plantain starch extract or plantain seed extract reduces the biosynthesis of cyclooxygenase-2 by microinflammatory factors in a concentration-dependent manner, resulting in skin redness, pain, and pain caused by prostaglandin E2 (PGE2), a product of COX-2. It can be seen that decomposition can be prevented.
[시험예 8] 미세염증인자에 의한 콜라겐 분해 억제 효능 측정Test Example 8 Measurement of Collagen Degradation Inhibition Effect by Micro-inflammatory Factor
인체 섬유아세포를 104개의 농도로 48공 평판배양기에 배양하고, 24시간 후 종양괴사인자알파 (TNF α, Tumor necrosis factor α)를 20ng/ml 되게 가한 후 상기 실시예 1 또는 실시예 2의 추출물을 0.1pp, 1ppm, 10ppm 포함한 배지로 교체하였다. 배양 2일째 세포를 수확해서(harvest) ELISA (Takara MK101) 방법을 사용하여 분해되지 않고 남아있는 프로콜라겐의 양을 정량하였다. 그 결과는 대조군을 100으로 하여 측정한 비교치를 표 8에 나타내었다.Human fibroblasts were incubated in a 48-hole plate incubator at a concentration of 10 4 , and after 24 hours, tumor necrosis factor alpha (TNF α, Tumor necrosis factor α) was added to 20 ng / ml, and the extract of Example 1 or 2 was used. Was replaced with a medium containing 0.1ppm, 1ppm, 10ppm. Cells were harvested on day 2 of culture (harvest) and the amount of procollagen remaining undigested was quantified using the ELISA (Takara MK101) method. The results are shown in Table 8 comparing the measured value with the control group 100.
상기 표 8로부터, 질경이 전초 추출물 및 질경이 종자 추출물이 TNF α에 의한 콜라겐의 분해를 효과적으로 제어할 수 있고 농도 의존적으로 제어함을 알 수 있다. From Table 8, it can be seen that the plantain outpost extract and plantain seed extract can effectively control the decomposition of collagen by TNF α and control in a concentration-dependent manner.
[시험예 9] 무모생쥐에서 표피두께의 변화 측정Test Example 9 Measurement of Epidermal Thickness in Hairless Mice
본 발명의 조성물에 의한 피부 두께의 변화를 확인하기 위하여, 본 발명에 의한 조성물(실시예3, 실시예4)을 하기 표 9와 같이 제조하고, 무모 생쥐의 등부위에 실시예 3 및 4와 비교예를 일주일 동안 도포한 후 생검하여 피부 표피의 두께를 H&E 염색을 실시하여 측정하였다. In order to confirm the change of the skin thickness by the composition of the present invention, the composition according to the present invention (Examples 3 and 4) was prepared as shown in Table 9, and compared with Examples 3 and 4 on the back of the hairless mice. Examples were applied for a week and then biopsied to determine the thickness of the skin epidermis by H & E staining.
그 결과는 도 1a 내지 도 1c에 나타내었다. 도1a는 질경이 전초 추출물 또는 질경이 종자 추출물을 함유하지 않은 조성물로 처리한 대조군을 나타내고, 도1b는 질경이 전초 추출물을 함유한 조성물로 처리한 실험군을, 도1c는 질경이 종자 추출물을 함유한 조성물로 처리한 실험군을 나타낸다. 도 1a 내지 도1c에서 보이는 것처럼, 질경이 전초 추출물 또는 질경이 종자 추출물을 도포하였 경우 비교예에 비해 2-3배 이상 표피가 두꺼워지고, 진피도 현저히 두꺼워지고 밀도가 높아지는 것을 관찰할 수 있는데, 이는 피부의 잔주름을 감소시키고, 탄력을 강화시켜 줄 수 있다는 것을 입증하는 것이다. The results are shown in Figures 1a to 1c. Figure 1a shows a control group treated with a composition containing no plantain starch extract or plantain seed extract, Figure 1b is an experimental group treated with a composition containing plantain starch extract, Figure 1c is treated with a composition containing plantain seed extract One experimental group is shown. As shown in Figures 1a to 1c, when the plantain starch extract or plantain seed extract is applied to the epidermis thickening 2-3 times more than the comparative example, it can be observed that the dermis is significantly thicker and higher density, which is the skin It is to prove that it can reduce the fine wrinkles and strengthen the elasticity.
[시험예 10] 무모생쥐에서 콜라겐생합성효능과 주름 개선 효과(표피두께의 변화 측정)Test Example 10 Collagen Biosynthesis and Wrinkle Improvement Effect in Hairless Mice (Measurement of Epidermal Thickness)
본 발명의 조성물에 의한 피부 콜라겐 합성 효과를 확인하기 위하여 무모 생쥐의 등부위에 표9에서와 같이 실시예 3,4와 비교예를 일주일 동안 도포한 후 생검하여 피부 콜라겐 합성정도를 Van Gieson 염색을 실시하여 측정하였다. 그 결과는 도 2a 내지 도 2c에 나타내었다. In order to confirm the effect of skin collagen synthesis by the composition of the present invention, as shown in Table 9, Examples 3 and 4 and Comparative Example were applied to the back of the hairless mice for one week, and then biopsied to perform Van Gieson staining. It was measured by. The results are shown in Figures 2a to 2c.
도 2a는 질경이 전초 추출물 또는 질경이 종자 추출물을 함유하지 않은 조성물로 처리한 대조군을 나타내고, 도 2b는 질경이 전초 추출물을 함유한 조성물로 처리한 실험군을, 도 2c는 질경이 종자 추출물을 함유한 조성물로 처리한 실험군을 나타낸다.Figure 2a shows a control group treated with a composition containing no plantain starch extract or plantain seed extract, Figure 2b is an experimental group treated with a composition containing plantain starch extract, Figure 2c is treated with a composition containing a plantain seed extract One experimental group is shown.
도 2a 내지 도 2c에서 보이는 것처럼, 질경이 전초 추출물 또는 질경이 종자 추출물을 함유한 조성물을 도포하였을 경우, 비교예에 비해 진피콜라겐의 생합성량이 늘어나고 밀도도 높아지는 것을 관찰할 수 있었다. As shown in Figures 2a to 2c, it was observed that when the composition containing plantain starch extract or plantain seed extract is applied, the biosynthesis amount of dermal collagen increases and the density is higher than that of the comparative example.
또한, 생체에서 주름생성의 개선효과를 확인하기 위하여 무모 생쥐 60마리를 항온 항습실에서 키운 후, 각 군당 20마리씩 3군으로 나누었다. 상기 실시예 3, 4 및 비교예의 조성물을 각각 8주 동안 매일 100㎕씩 등 부위에 도포한 후 실리콘을 이용하여 등 부위의 레플리카(replica)를 뜬 후 화상분석기(visiometer; SV600, Courage+Khazaka electronic GmbH, Germany)를 이용하여 주름의 깊이, 면적을 측 정, 주름 개선 정도를 평가하였고 그 결과는 도 3에 나타내었다. In addition, in order to confirm the effect of improving wrinkle formation in vivo 60 hairless mice were raised in a constant temperature and humidity room, and divided into three groups of 20 animals in each group. Each of the compositions of Examples 3, 4 and Comparative Examples was applied to the back region daily for 8 weeks, followed by a replica of the back region using silicone, followed by an image analyzer (SVI600; Courage + Khazaka electronic). GmbH, Germany) was used to evaluate the depth, area of wrinkles, the degree of wrinkle improvement and the results are shown in FIG.
도 3에서, 비교예의 경우 세로로 깊게 나타나는 주름이, 실시예 3 및 4에서는 아주 우수하게 개선되어지는 것을 확인할 수 있었다. In Figure 3, it can be seen that the wrinkles appearing vertically deep in the comparative example is very excellent in Examples 3 and 4.
[시험예 11] 사람에서의 주름개선효과Test Example 11 Wrinkle Improvement Effect in Humans
상기 표 9의 비교예와 실시예 3 및 4에 대하여 주름개선효과를 확인하기 위하여 다음과 같이 평가하였다. 30대 여성 60명을 각각 비교예 및 실시예 3군, 4군으로 20명씩 3조로 나누어 매일 1회 8주간 도포하게 한 후, 실리콘을 이용하여 레플리카를 떠서 주름의 상태를 visiometer (SV600, Courage+Khazaka electronic GmbH, Germany) 로 측정하여 화상분석하였다. 그 결과는 하기 표에 나타내었다. 하기 표의 값은, 도포 8주 후의 각각의 parameter 값에서 도포 전 parameter 값을 뺀 것의 평균을 나타내었다.The comparative examples and Examples 3 and 4 of Table 9 were evaluated as follows to confirm the wrinkle improvement effect. Sixty women in their thirties were divided into three groups of 20 people each of Comparative Example, Example 3, and Group 4, and applied once a day for 8 weeks, and then, using a silicone, the replica was scooped up and the visiometer (SV600, Courage + Khazaka electronic GmbH, Germany) and image analysis. The results are shown in the table below. The values in the table below represent the average of each parameter value after 8 weeks of application minus the parameter value before application.
R1 : 주름 등고선의 최고치와 최저치의 차이값R1: difference between the highest and lowest of the wrinkle contour
R2 : 주름 등고선을 임의로 5칸씩 나눈 후 그 중 R1값 들의 평균R2: Divide the wrinkle contours by 5 spaces, and then average the R1 values
R3 : 5개씩 나눈 R1값 중 최고 치R3: Maximum value of R1 divided by 5
R4 : 주름 등고선의 베이스라인(baseline)에서 각 각의 꼭대기와 계곡의 값 을 뺀 평균값R4: The mean value of the baseline of the wrinkle contour, minus the top and valley values of each angle
R5 : 주름 등고선의 베이스라인(baseline)에서 각 각의 주름 윤곽을 뺀 값의 차이 값R5: Difference value of the baseline of the wrinkle contour line minus each wrinkle outline
상기 표 10에서와 같이, 실시예 3 및 4의 외용제 조성물은 피부 주름 개선 효과가 아주 우수함을 알 수 있었다. As shown in Table 10, the external preparation composition of Examples 3 and 4 was found to have a very good skin wrinkle improvement effect.
[시험예 12] 사람 피부 섬유아세포에서의 트로포엘라스틴 및 피브릴린 생성 측정Test Example 12 Measurement of Tropoelastin and Fibrillin Production in Human Skin Fibroblasts
질경이 전초 추출물 또는 질경이 종자 추출물이 사람 피부에서 탄력에 중요한 역할을 하는 트로포엘라스틴과 피브릴린의 생성을 증가시키는지를 다음과 같은 방법으로 측정하였다.Whether planar outpost extract or plantain seed extract increased the production of tropoelastin and fibrin, which play an important role in elasticity in human skin, was measured by the following method.
사람 피부에서 분리한 섬유아세포를 24웰형 세포배양 플레이트의 각 웰에 5x104개를 넣고 24시간 동안 부착시켰다. 부착시킨 세포에 시험물질을 아래 표 11의 농도대로 처리한 후, 2일이 지난 다음, 배지를 수확(harvest)했다. 수확한 배지 중의 트로포엘라스틴 및 피브릴린을 정량하는 방법은 효소면역분석법(ELISA)을 사용하였다. 대조군을 100으로 보고 이에 대한 상대적인 비율로 나타내었다.Fibroblasts isolated from human skin were placed in each well of a 24-well cell culture plate and attached 5 × 10 4 for 24 hours. After attaching the test material to the concentrations in Table 11 below, after 2 days, the medium was harvested. Enzyme immunoassay (ELISA) was used to quantify tropoelastin and fibrin in the harvested medium. The control group was reported as 100 and expressed as a relative ratio.
상기 표에 나타난 바와 같이, 각 시험물질의 농도에 의존적으로, 대조군에 비해 질경이 전초 추출물 또는 질경이 종자 추출물을 처리한 경우 트로포엘라스틴 및 피브릴린이 많이 합성된 것을 알 수 있었다. As shown in the table, depending on the concentration of each test substance, it was found that the tropoelastin and fibrillin were synthesized much when treated with plantain starch extract or plantain seed extract compared to the control group.
[시험예 13] 인체에서 피부 탄력 개선 측정 Test Example 13 Measurement of Skin Elasticity Improvement in Human Body
상기 표 9와 같이 제조한 화장수의 피부 탄력 개선 효과를 측정하였다. 온도 24-26℃, 습도 75% 조건에서 30세 이상의 건강한 여성 30명을 3개조로 나누고, 각 조에 상기 표 9의 비교예와 실시예 3 및 실시예 4의 화장수를 매일 2회씩 12주간 안면에 도포한 후 피부탄력측정기 (Cutometer SEM 575, C+K Electronic Co., Germany)를 이용하여 피부탄력을 측정하였다. 그 결과는 표 12에 나타내었다. 표 12의 결과치는 Cutometer SEM 575의 △R8(R8(왼쪽)-R8(오른쪽)) 값으로 기재하였는데, R8값은 피부 점탄성(viscoelasticity) 의 성질을 나타낸다. 이와 별도로 시험을 종료한 시점에 시험 대상자들로 하여금 설문지를 작성하게 하여 기기적인 평가와 동시에 주관적인 효능 평가도 실시하였다. 그 결과는 하기 표 13에 나타내었다.The skin elasticity improving effect of the lotion prepared as shown in Table 9 was measured. Thirty healthy women aged 30 years or older at a temperature of 24-26 ° C. and a humidity of 75% were divided into three sets, and each set of facial lotions of Comparative Example and Example 3 and Example 4 of Table 9 was applied twice a day for 12 weeks. After application, skin elasticity was measured using a skin elasticity measuring instrument (Cutometer SEM 575, C + K Electronic Co., Germany). The results are shown in Table 12. The results in Table 12 are described as ΔR8 (R8 (left) -R8 (right)) values of Cutometer SEM 575, where R8 values represent the nature of skin viscoelasticity. Separately, at the end of the test, the subjects were asked to fill out a questionnaire, which was evaluated mechanically and subjectively. The results are shown in Table 13 below.
상기 표 12에 나타난 바와 같이, 질경이 전초 추출물 또는 질경이 종자 추출물이 함유된 실시예 3 및 4의 조성물을 도포한 군에서는 비교예를 도포한 군에 비해서 피부탄력성이 더 증가되었다. As shown in Table 12, in the group coated with the compositions of Examples 3 and 4 containing the plantain outpost extract or plantain seed extract was increased skin elasticity compared to the group applied to the comparative example.
한편, 설문조사를 통해서도 본 발명에 의한 조성물인 실시예 3 및 실시예 4를 도포한 경우 피부탄력성이 개선됨을 확인할 수 있었다[표13].On the other hand, it was confirmed through the survey that the skin elasticity is improved when applying Examples 3 and 4 of the composition according to the present invention [Table 13].
[시험예 14] 사람 피부 섬유아세포의 글리코스아미노글리칸 생성 측정Test Example 14 Measurement of Glycosaminoglycan Production in Human Skin Fibroblasts
사람 피부 중 진피에서 콜라겐, 엘라스틴 이외의 나머지 부분을 채워주고, 피부를 지지하고, 진피에서 수분을 잡아주는 역할을 하는 글리코스아미노글리칸(GAG)을 정량하였다. 먼저 사람 섬유아세포를 페놀레드가 함유되지 않은 배지와 챠콜(charcoal) 처리한 5% 우태아혈청을 사용하여 24웰형 세포 배양 플레이트에 5 X 104 개를 넣고 배양하였다. 18시간 후 하기 표 14의 농도대로 시험물질을 처리하고, 다시 18시간 후에 상등액 중에 분비된 GAG의 양을 측정하였다. 분석에는 영국의 Biocolor사에서 제작한 Blyscan Glycosaminoglycan assay kit을 사용하였다. GAG 측정 원리는 sulfated GAG 와 proteoglycan에 (+) charge를 띤 1,9-dimethyl methylene blue 가 binding하여 침전이 생기고 이 침전을 녹여내어 정량하는 것이다. 하기 표의 결과치는, 대조군을 100으로 보고 이에 대한 상대적인 비율로 나타내었다. Glycosaminoglycans (GAGs), which serve to fill the rest of the skin other than collagen and elastin, support the skin, and hold moisture in the dermis, were quantified. First, human fibroblasts were cultured by placing 5 × 10 4 cells in a 24-well cell culture plate using 5% fetal bovine serum treated with phenol red-containing medium and charcoal (charcoal). After 18 hours, the test material was treated to the concentration shown in Table 14, and after 18 hours, the amount of GAG secreted in the supernatant was measured. For analysis, Blyscan Glycosaminoglycan assay kit manufactured by Biocolor, UK was used. The principle of GAG measurement is the binding of 1,9-dimethyl methylene blue with positive charge to sulfated GAG and proteoglycan to precipitate and to dissolve and quantify the precipitate. The results in the table below are reported as the control group 100 and expressed as a relative ratio.
상기 표에 나타난 바와 같이, 질경이 전초 추출물과 질경이 종자 추출물을 처리한 경우 대조군에 비해 글리코스아미노글리칸 많이 합성되었음을 알 수 있었다. As shown in the table, it was found that the glycosaminoglycans were synthesized more than the control group when the plantain outpost and the plantain seed extract were treated.
[시험예 15] 인체에서 피부 보습력 증가 측정 Test Example 15 Measurement of Skin Moisturizing Increase in Human Body
상기 표 9와 제조한 화장수의 피부 보습력 개선 효과를 측정하였다. 피부건조증을 나타내는 50-60대의 성인 남,녀 30명을 3개조로 나누어, 각 조에 상기 표 9의 비교예와 실시예3 및 실시예 4의 화장수를 매일 2회씩 4주간 안면에 도포하였다. 도포 개시 전과, 도포 후 1주, 2주, 4주 경과한 시점, 그리고 도포를 중지한 2주 경과(총 6주 경과)후에 항온, 항습 조건( 24℃, 상대습도 40%)에서 코니오미터로 피부수분량을 측정하였다. 그 결과는 하기 표에 나타내었다. 하기 표의 결과는 시험 개시 직전에 측정한 코니오미터 값을 기준으로 하여 일정기간 처치한 후의 측정값의 증가분을 백분율로 표시한 것이다. 코니오미터는 표피의 전기전도도 값을 측정하여 피부에 존재하는 수분량을 측정하는 피부수분측정기이다. 이와 별도로 시험을 종료한 시점에 시험 대상자들로 하여금 설문지를 작성하게 하여 기기적인 평가와 동시에 주관적인 효능 평가도 실시하였다.Table 9 and the skin moisturizing effect of the prepared lotion was measured. Thirty adult men and women in their 50s and 60s showing skin dryness were divided into three groups, and the skin lotion of Comparative Example of Table 9, and Examples 3 and 4 was applied to the face twice daily for 4 weeks. Coniometer at constant temperature and humidity conditions (24 ° C, 40% relative humidity) before start of application, after 1 week, 2 weeks, 4 weeks after application, and after 2 weeks (total 6 weeks) after application was stopped. Skin moisture content was measured by. The results are shown in the table below. The results in the table below show the percentage increase in measured values after treatment for a period of time based on the Koniometer values measured immediately prior to the start of the test. The Koniometer is a skin moisture meter that measures the amount of moisture present on the skin by measuring the conductivity of the epidermis. Separately, at the end of the test, the subjects were asked to fill out a questionnaire, which was evaluated mechanically and subjectively.
상기 표에 나타난 바와 같이, 질경이 전초 추출물 또는 질경이 종자 추출물이 함유된 실시예 3 및 실시예 4의 물질을 도포한 군에서는 비교예를 도포한 군에 비해서 피부수분량이 더 증가되었으며, 또한, 시험물질의 도포를 중지한 2주 후에 피부수분을 측정한 6주 경과 후의 수치가 1주~2주 경과후의 수치와 유사하게 나타나, 시험물질을 도포하지 않아도 어느 정도는 질경이 전초 추출물 또는 질경이 종자 추출물에 의해 피부수분이 지속적으로 유지됨을 알 수 있었다. As shown in the above table, in the group coated with the material of Examples 3 and 4 containing plantain starch extract or plantain seed extract, the skin moisture content was increased more than the comparative application group, and the test substance After 2 weeks of discontinuation of application of the skin, the value after 6 weeks of skin moisture measurement was similar to that after 1 to 2 weeks. Skin moisture was found to be maintained continuously.
이와 동시에 피부 건조증 개선효과에 관한 설문조사를 통해서도 질경이 전초 추출물 또는 질경이 종자 추출물을 함유한 실시예 3 및 실시예 4를 도포한 경우 피부건조증이 개선됨을 확인할 수 있었다[표 16].At the same time, through a questionnaire on the improvement of skin dryness, it was confirmed that the application of Examples 3 and 4 containing plantain outpost extract or plantain seed extract improved skin dryness [Table 16].
이하, 상기의 시험예의 결과를 근거로 하여, 질경이 전초 추출물 및 질경이 종자 추출물 중 1종 이상을 함유함으로써, 피부 주름 및 탄력을 개선하고, 피부에 보습을 주는 여러 가지 제형의 화장료의 조성을 제시한다. 그러나 본 발명의 조성물이 하기의 예에만 한정되는 것은 아니다. Hereinafter, on the basis of the results of the above test example, by containing at least one of the plantain outpost extract and plantain seed extract, to improve the skin wrinkles and elasticity, to provide a composition of the cosmetics of various formulations to moisturize the skin. However, the composition of the present invention is not limited only to the following examples.
[제형예 1] 유연화장수(스킨로션)Formulation Example 1 Flexible Cosmetic (Skin Lotion)
[제형예 2] 영양화장수(밀크로션)Formulation Example 2 Nutritious Longevity (Milk Lotion)
[제형예3] 영양크림Formulation Example 3 Nutrition Cream
[제형예4] 마사지크림Formulation Example 4 Massage Cream
[제형예5] 팩Formulation Example 5 Pack
이상에서 설명한 바와 같이 질경이 전초 추출물 및 질경이 종자 추출물 중 1종 이상을 함유함으로써, 피부의 미세 염증 상태를 조절하고, 피부 두께를 조절하여, 탄력 있고 건강한 피부 상태를 유지시키고, 또한 진피에서 콜라겐, 엘라스틴, 글리코스아미노글리칸 등의 생합성을 증가시켜 주름 개선 및 탄력 회복 효과를 나타낼 수 있다. 또한, 피부를 촉촉하게 유지시켜 주름을 예방하고 피부가 건조해지는 것을 예방 및 개선시킬 수 있다.
As described above, by containing at least one of the plantain outpost extract and plantain seed extract, it controls the micro-inflammatory state of the skin, adjusts the skin thickness, maintains the elastic and healthy skin condition, and also collagen, elastin in the dermis Increasing the biosynthesis of glycosaminoglycans, such as wrinkles and elasticity recovery can be exhibited. In addition, the skin can be kept moist to prevent wrinkles and prevent and improve skin dryness.
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