JP6477474B2

JP6477474B2 - 点眼剤

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Publication number: JP6477474B2
Application number: JP2015534115A
Authority: JP
Inventors: 俊輔櫻井; 幸治宮本; 洋平 ▲高▼田; 佳久島村; 真央丸橋; 伸行坂元
Original assignee: NOF Corp
Current assignee: NOF Corp
Priority date: 2013-08-30
Filing date: 2014-08-05
Publication date: 2019-03-06
Anticipated expiration: 2034-08-05
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Description

本発明は、防腐剤成分として点眼剤に配合されるヘキサメチレンビグアニドのソフトコンタクトレンズ及び点眼容器への吸着を抑制する点眼剤に関する。

従来から、テレビ、コンピュータ、携帯端末などの「見る」行為によって目を酷使することによる瞬きの低下や、冷暖房による空気の乾燥による涙液の蒸発によってドライアイ症状を引き起こすことが広く知られている。また、ソフトコンタクトレンズ装用者は、非装用者と比べて、ソフトコンタクトレンズ表面からの涙液の蒸発量が増大するために、ドライアイ症状を引き起こすことも報告されている（非特許文献１）。そして、ドライアイ症状の緩和・治療には、人工涙液と呼ばれる点眼剤により涙液を補充し、治療を行うことが一般的に行われている。このとき、点眼剤の一定の流通期間中の製品品質を確保するために、ほとんど全ての点眼剤に防腐剤が配合されている（非特許文献１）。

点眼剤に配合される防腐剤の代表的なものとして、塩化ベンザルコニウムや塩酸ヘキサメチレンビグアニドなどが挙げられる。その配合量は０．０１Ｗ／Ｖ（重量／容量）％以下と微量であるものの、塩化ベンザルコニウムや塩酸ヘキサメチレンビグアニドなどはソフトコンタクトレンズへ吸着することが知られている（非特許文献２及び３）。また、角膜細胞へ悪影響を及ぼし、さらには、眼障害を引き起こす可能性があるとの報告がある（非特許文献４）。このため、角膜細胞への悪影響を低減させることを目的とした検討が実施されている（特許文献１、２及び３）。

一方で、微量成分である上記防腐剤は、特許文献４及び５が開示しているように、点眼容器等へも吸着することが知られており、そのため、点眼容器中において、活性を持つ防腐剤量が経時的に減少して防腐効力が低下することもあった。
このため、防腐効力が低下した点眼剤であっても、微生物による眼への汚染等が無いように、点眼剤の添付文書には点眼方法と使用期限厳守の記載がなされている。しかし、使用者が、眼表面に点眼容器ノズル先端を接触させて点眼する例が報告されている（非特許文献５）。この場合、眼表面に点眼容器ノズル先端を接触させることで、点眼容器内に微生物が混入し、眼感染症を発症する恐れが少なからずある。

特開２００６−２８２５８６号公報特開平１０−３２４６３４号公報特開平７−１６６１５４号公報特開２０１０−１０６０１５号公報特開２００８−８８１７４号公報

小口芳久監修、坪田一男編集、ＯｃｕｌａｒＳｕｒｆａｃｅの診断と治療、メディカル葵出版、ｐｐ．８３−８７、１９９３ＣｈａｒｌｅｓＨ．Ｐｏｗｅｌｌｅｔａｌ、Ｌｉｐｏｐｈｉｌｉｃｖｅｒｓｕｓｈｙｄｒｏｄｙｎａｍｉｃｍｏｄｅｓｏｆｕｐｔａｋｅａｎｄｒｅｌｅａｓｅｂｙｃｏｎｔａｃｔｌｅｎｓｅｓｏｆａｃｔｉｖｅｅｎｔｉｔｉｅｓｕｓｅｄｉｎｍｕｌｔｉｐｕｒｐｏｓｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ、ＣｏｎｔａｃｔＬｅｎｓ＆ＡｎｔｅｒｉｏｒＥｙｅ、３３、９−１８、２０１０崎元卓、治療用コンタクトレンズへの防腐剤の吸着、日本コンタクトレンズ学会誌、３５、ｐｐ．１７７−１８２、１９９３年大橋裕一編、眼科ＮｅｗＩｎｓｉｇｈｔ２点眼薬−常識と非常識−、メジカルビュー、ｐｐ．３６−４３、１９９４年大橋裕一編、眼科ＮｅｗＩｎｓｉｇｈｔ２点眼薬−常識と非常識−、メジカルビュー、ｐｐ．５６−６５、１９９４年

点眼剤に配合される防腐剤のソフトコンタクトレンズへの吸着を抑制して角膜に対する安全性を向上させ、また、点眼剤自体に微生物が混入しても安全に使用できるよう防腐効力を維持させた点眼剤については、いまだ有効なものが得られていない。
本発明は、防腐剤成分として点眼剤に配合されるヘキサメチレンビグアニドのソフトコンタクトレンズ及び点眼容器への吸着を抑制できる点眼剤を提供することを課題とする。

本発明者らは、上記課題を解決するために、鋭意検討した結果、特定構造のヒドロキシプロピルメチルセルロース及び特定構造の共重合体を含有する点眼剤を開発し、本発明を完成するに至った。

すなわち、本発明によれば、（Ａ）ヒドロキシプロピルメチルセルロース全量に対して２８．０〜３０．０質量％のメトキシ基、及び７．０〜１２．０質量％のヒドロキシプロポキシ基を有し、メトキシ基／ヒドロキシプロポキシ基の値が質量比で２．５〜４．０であり、２０℃における２質量％水溶液の粘度が５０〜４０００ｍＰａ・ｓである、前記ヒドロキシプロピルメチルセルロースと、（Ｂ）塩化ナトリウム又は塩化カリウムと、（Ｃ）式（１）に示すヘキサメチレンビグアニド又はその塩と、（Ｄ）式（２）に示す２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン・メタクリル酸ブチル共重合体と、（Ｅ）水と、を含有し、点眼剤全量に対する含有量は、前記（Ａ）が０．１〜０．２Ｗ／Ｖ％、前記（Ｂ）が０．０１〜１．５Ｗ／Ｖ％、前記（Ｃ）が０．００００５〜０．０００１５Ｗ／Ｖ％、及び前記（Ｄ）が０．０５〜０．１５Ｗ／Ｖ％である、点眼剤が提供される。

［式（１）中、ｋは繰り返し単位を示す数字で、３〜４０の整数である。］

（ｍ、ｎは各構成単位のモル比を示すための数字であり、モル比でｍ／ｎ＝７０／３０〜９０／１０である。）

また、本発明の別の観点による発明として、７０〜９０℃の加熱水中に、（Ａ）ヒドロキシプロピルメチルセルロース全量に対して２８．０〜３０．０質量％のメトキシ基、及び７．０〜１２．０質量％のヒドロキシプロポキシ基を有し、メトキシ基／ヒドロキシプロポキシ基の値が質量比で２．５〜４．０であり、２０℃における２質量％水溶液の粘度が５０〜４０００ｍＰａ・ｓである、前記ヒドロキシプロピルメチルセルロースを分散させて分散液を得る工程と、前記分散液を３０〜５０℃に冷却する工程と、当該冷却後、（Ｂ）塩化ナトリウム又は塩化カリウム、（Ｃ）式（１）に示すヘキサメチレンビグアニド又はその塩、及び（Ｄ）式（２）に示す２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン・メタクリル酸ブチル共重合体を、前記冷却後の分散液に配合する工程を有する、点眼剤の製造方法が提供される。

本発明のさらに別の観点による発明として、点眼剤中の防腐剤成分がコンタクトレンズ又は点眼容器に吸着するのを抑制する方法であって、コンタクトレンズ又は点眼容器に接触する点眼剤を、７０〜９０℃の加熱水中に、（Ａ）ヒドロキシプロピルメチルセルロース全量に対して２８．０〜３０．０質量％のメトキシ基、及び７．０〜１２．０質量％のヒドロキシプロポキシ基を有し、メトキシ基／ヒドロキシプロポキシ基の値が質量比で２．５〜４．０であり、２０℃における２質量％水溶液の粘度が５０〜４０００ｍＰａ・ｓである、前記ヒドロキシプロピルメチルセルロースを分散させて分散液を得、前記分散液を３０〜５０℃に冷却し、当該冷却後、（Ｂ）塩化ナトリウム又は塩化カリウム、（Ｃ）防腐剤成分として式（１）に示すヘキサメチレンビグアニド又はその塩、及び（Ｄ）式（２）に示す２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン・メタクリル酸ブチル共重合体を、前記冷却後の分散液に配合することを含む工程で調製することを含む、点眼剤中の防腐剤成分がコンタクトレンズ及び点眼容器に吸着するのを抑制する方法が提供される。

本発明の点眼剤は、上記ヒドロキシプロピルメチルセルロース及び共重合体を含む、特定の配合組成とすることにより、防腐剤成分として点眼剤に配合されるヘキサメチレンビグアニドのソフトコンタクトレンズ及び点眼容器への吸着を抑制することができるので、角膜に対する安全性が向上し、また、点眼剤自体に微生物が混入しても安全に使用可能な防腐効力を維持することができる。
また、本発明の製造方法により、ヘキサメチレンビグアニドのソフトコンタクトレンズ及び点眼容器への吸着を抑制することができ、角膜に対する安全性が向上し、及び点眼剤自体に微生物が混入しても安全に使用可能な防腐効力の維持が可能な点眼剤を製造することができる。

以下本発明を詳細に説明する。
本発明の点眼剤は、（Ａ）ヒドロキシプロピルメチルセルロース、（Ｂ）塩化ナトリウム又は塩化カリウム、（Ｃ）式（１）に示すヘキサメチレンビグアニド又はその塩、（Ｄ）式（２）に示す２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン・メタクリル酸ブチル共重合体、及び（Ｅ）水を含有する。以後、上記（Ａ）をＡ成分、（Ｂ）をＢ成分、（Ｃ）をＣ成分、及び（Ｄ）をＤ成分と称することがある。

本発明の点眼剤に用いるＡ成分は、２８．０〜３０．０質量％のメトキシ基、及び７．０〜１２．０質量％のヒドロキシプロポキシ基を有し、メトキシ基／ヒドロキシプロポキシ基の値が質量比で２．５〜４．０であり、かつ２０℃における２質量％水溶液の粘度が５０〜４０００ｍＰａ・ｓのヒドロキシプロピルメチルセルロースである。好ましくは、メトキシ基／ヒドロキシプロポキシ基の値は質量比で３．０〜３．６である。当該質量比が、２．５未満又は４．０を超えると、防腐剤であるヘキサメチレンビグアニドのソフトコンタクトレンズ及び点眼容器への吸着抑制効果が不十分となるおそれがある。
また、上記粘度が５０ｍＰａ・ｓ未満のものは、防腐剤のソフトコンタクトレンズへの吸着抑制効果が不十分となるおそれがあり、４０００ｍＰａ・ｓを超えるものは、点眼剤を製造する際に必要となる無菌ろ過性が悪くなり、点眼剤とすることが困難となるおそれがある。

なお、メトキシ基及びヒドロキシプロポキシ基の含有率は、セルロースへ導入されたメトキシ基及びヒドロキシプロポキシ基の平均質量百分率を示し、日本薬局方や医薬品添加物規格等に記載の定量法により算出することができる。日本薬局方によれば、次の（Ｉ）器具・装置に記載の器具及び装置を用いて、（ＩＩ）操作法に記載の定量法に従って測定試験を実施し、算出することができる。

（Ｉ）器具・装置
分解瓶：５ｍＬの耐圧セラムバイアルで、外径２０ｍｍ、高さ５０ｍｍ、首部の外径２０ｍｍ及び内径１３ｍｍ、セプタムは表面がフッ素樹脂で加工されたブチルゴム製で、アルミニウム製のキャップを用いてセラムバイアルに固定して密栓できるものを使用する。又は同等の構造を持つものを使用する。
加熱器：角型金属アルミニウム製ブロックに直径２０ｍｍ、深さ３２ｍｍの穴をあけたもので分解瓶の保持に適合する構造であり、マグネチックスターラーを用いて分解瓶の内容物をかき混ぜできる構造のものを使用する。又は当該ブロックを振とう器に取り付けて、毎分１００回の往復振とうができるものを使用する。

（ＩＩ）操作法
１）ヒドロキシプロピルメチルセルロース約６５ｍｇを精秤し、分解瓶に入れ、アジピン酸０．０６〜０．１０ｇ、内標準溶液２．０ｍＬ及びヨウ化水素酸２．０ｍＬを加え、直ちに密栓し、その質量を精秤する。
２）次に、分解瓶を角型金属アルミニウム製ブロックにセットし、分解瓶の内容物の温度が１３０±２℃になるようにブロックを加熱しながら、マグネチックスターラー又は振とう器で約１時間撹拌する。マグネチックスターラー又は振とう器の代わりに手で振り混ぜてもよい。この場合は、加熱時間の初めの３０分間、５分ごとに手で振り混ぜる。
３）つづいて、室温に冷却後、分解瓶全体の質量を測定し、減量が配合した内容物質量の０．５０％以下であるか又は内容物の漏れがないとき、混合物の上層を試料溶液とする。
４）別途、アジピン酸０．０６〜０．１０ｇ、内標準溶液２．０ｍＬ及びヨウ化水素酸２．０ｍＬを別の分解瓶にとり、直ちに密栓し、その質量を精秤し、マイクロシリンジを用いセプタムを通じてヨードメタン４５μＬ及びヨウ化イソプロピル１５〜２２μＬを加え、これら各添加成分の添加量（質量）を精秤する。分解瓶をよく振り混ぜた後、内容物の上層を標準溶液とする。
５）以上の様にして調製した、試料溶液及び標準溶液１〜２μＬにつき、次に示す条件でガスクロマトグラフィー測定を行い、内標準物質（内標準溶液中のｎ−オクタン）のピーク面積に対する各物質のピーク面積の比Ｑ_Ta、Ｑ_Tb、Ｑ_Sa、Ｑ_Sbを求める。

＜ガスクロマトグラフィー測定条件＞
装置：ＧＣ−２０１４（株式会社島津製作所製）。
検出器：熱伝導度型検出器又は水素炎イオン化検出器。
カラム：内径３〜４ｍｍ、長さ１．８〜３ｍのガラス管に、ガスクロマトグラフィー用メチルシリコーンポリマーを１２５〜１５０μｍのガスクロマトグラフィー用ケイソウ土に１０〜２０％の割合で被覆したものを充てんしたもの。例えば、ＳｉｌｉｃｏｎｅＤＣ２００ｃｈｒｏｍｏｓｏｒｂＷ２０％１００／１２０ＡＷ−ＤＭＣＳ（信和化工株式会社製）。
カラム温度：約１００℃。
内標準溶液：ｎ−オクタンのｏ−キシレン溶液（ｎ−オクタンを３Ｖ／Ｖ％となるように調製する）。
キャリアーガス：熱伝導度型検出器を用いる場合はヘリウム、水素炎イオン化検出器を用いる場合はヘリウムまたは窒素。
キャリアーガス流量：内標準物質の保持時間が約１０分になるように調整する。

以上の測定から求めた、ピーク面積の比Ｑ_Ta、Ｑ_Tb、Ｑ_Sa、Ｑ_Sbから、メトキシ基の量（質量％）及びヒドロキシプロポキシ基の量（質量％）を下記式により算出する。
メトキシ基の量（質量％）＝Ｑ_Ta／Ｑ_Sa×Ｍ_Sa／Ｍ×２１．８６
ヒドロキシプロポキシ基の量（質量％）＝Ｑ_Tb／Ｑ_Sb×Ｍ_Sb／Ｍ×４４．１７
ここで、各記号は以下の値を示す。
Ｑ_Ta：試料溶液のメトキシ基に対応するピーク面積／内標準物質のピーク面積。
Ｑ_Sa：標準溶液のヨードメタンのピーク面積／内標準物質のピーク面積。
Ｑ_Tb：試料溶液のヒドロキシプロポキシ基に対応するピーク面積／内標準物質のピーク面積。
Ｑ_Sb：標準溶液のヨウ化イソプロピルのピーク面積／内標準物質のピーク面積。
Ｍ_Sa：ヨードメタンの採取量（ｍｇ）。
Ｍ_Sb：ヨウ化イソプロピルの採取量（ｍｇ）。
Ｍ：乾燥物に換算したヒドロキシプロピルメチルセルロースの採取量（ｍｇ）。

本発明の点眼剤に用いるＢ成分である塩化ナトリウム、塩化カリウムは、いずれも公知のものを使用することが出来る。より具体的には、日本薬局方適合品であればいずれも使用することが出来る。Ｂ成分は塩化ナトリウム又は塩化カリウムであるが、この両者が含まれてもよい。

本発明の点眼剤に用いるＣ成分は、式（１）に示す化合物で表されるヘキサメチレンビグアニドである。

［式（１）中、ｋは繰り返し単位を示す数字で、３〜４０の整数である。］
また、ヘキサメチレンビグアニドの塩としては、塩酸塩、ホウ酸塩、酢酸塩、グルコン酸塩、スルホン酸塩、酒石酸塩及びクエン酸塩などが挙げられる。市販品としては、例えば、ＣｏｓｍｏｃｉｌＣＱ（登録商標）（アーチ・ケミカルズ社製）、ＢＧ−１（三洋化成工業製）が挙げられる。

使用するヘキサメチレンビグアニド又はその塩の配合量は、点眼剤全量に対して、０．００００５〜０．０００１５Ｗ／Ｖ％である。ヘキサメチレンビグアニド又はその塩の配合量が、０．００００５Ｗ／Ｖ％未満であると、点眼剤としての防腐効果が十分に発揮することができないおそれがあり、０．０００１５Ｗ／Ｖ％を超える量を添加しても、防腐効果の向上を期待することができない。

本発明の点眼剤に用いるＤ成分は、２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン（以後、ＭＰＣと称する）とメタクリル酸ブチルとの共重合体であり、式（２）に示す化合物である。ＭＰＣとメタクリル酸ブチルのモル比は、７０：３０〜９０：１０である。
当該共重合体の重量平均分子量（Ｍｗ）は、１００，０００〜１，０００，０００であることが好ましい。
Ｄ成分は、後述する細胞毒性を低減する効果を有するが、Ｍｗが１００，０００未満であると細胞毒性を低減する効果が弱くなる恐れがあり、１，０００，０００を超えると、点眼剤を製造する際に必要となる無菌ろ過性が悪くなる恐れがある。

Ｄ成分は、例えば、次のように製造することができる。すなわち、ＭＰＣとメタクリル酸ブチルとを、脱気条件下、ラジカル重合開始剤の存在下、あるいは窒素ガス、アルゴンガス、ヘリウムガス、二酸化炭素ガスなどの不活性ガス置換または雰囲気中、水、メタノール、エタノールなどの溶媒中で加熱あるいは光を照射することにより重合させ、製造することができる。

本発明の点眼剤は、配合される防腐剤であるヘキサメチレンビグアニドのソフトコンタクトレンズへの吸着を抑制する効果が高く、角膜に対する安全性を高めるものである。ソフトコンタクトレンズは、グループＩ〜ＩＶ、及びシリコーンハイドロゲルレンズの５つに分類されるが、本発明の点眼剤は、特に、シリコーンハイドロゲルレンズへのヘキサメチレンビグアニドの吸着を顕著に抑制することができる。

つづいて、本発明の点眼剤の製造方法について説明する。
本発明の点眼剤は、７０〜９０℃に加熱した熱水中にＡ成分を分散させた後、これを３０〜５０℃まで冷却して得られる溶液に、Ｂ成分、Ｃ成分及びＤ成分を添加し、混和することにより製造する。Ｂ〜Ｄ成分は、この順に混和して製造することが好ましい。ここで、Ｂ〜Ｄ成分混和前のＡ成分含有冷却溶液は、波長５００ｎｍにおける光線透過率が９０〜１００％であることが好ましく、より好ましくは９５〜１００％、さらに好ましくは９８〜１００％である。上記製造方法によれば、通常、光線透過率は該範囲内となる。光線透過率が９０％未満の場合は、Ａ成分が十分に溶解できていない恐れがあるため、Ａ成分含有冷却溶液を再調製することが望ましい。
製造における加熱、冷却は溶液全体を均一に加熱、冷却することができれば良く、いずれも公知の器具、装置を用いることができる。また、分散においても分散質を分散媒中に均一に分散することができれば良く、公知の器具、装置を用いることができる。
Ａ成分を水中に均一に分散させるために、７０〜９０℃に加熱することが好ましく、また、均一に分散した後、Ａ成分を均一に溶解させるために、３０〜５０℃へ冷却することが好ましい。

なお、光線透過率（Ｔ）は、単色光が溶液を通過するときにおける、透過光の強さＩの入射光の強さＩ₀に対する比率である透過度（ｔ）を百分率で表したものであり、下式で表される。
ｔ＝Ｉ／Ｉ₀
Ｔ＝Ｉ／Ｉ₀×１００＝１００ｔ
なお、光線透過率を測定する際に用いる光としては、波長が５００ｎｍの単色光を用いる。
光線透過率Ｔは、０〜１００％の数値で表され、０％であるとき単色光を全く透過せず、１００％であるとき単色光を全て透過することを意味する。
光線透過率は、例えば、紫外可視分光光度計Ｖ−５５０(日本分光株式会社製)などを使用して測定することができる。

Ａ成分の冷却溶液を調製した後、Ｂ成分、Ｃ成分及びＤ成分をこの順に添加することが好ましいが、Ｂ，Ｃ及びＤの添加順がこの順であればよく、例えば、Ｂ添加の前、ＢとＣの間、あるいはＣとＤの間に、Ａ〜Ｄ成分以外の成分を添加してもよい。

本発明の点眼剤は、Ａ〜Ｄ成分以外として次に示す成分を含有することができる。
まず、眼の乾きを抑え、涙液を補助する目的として水溶性高分子を添加することができる。水溶性高分子としては、眼に刺激を与えるおそれが無いものであれば特に限定されない。例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、ポリエチレングリコール、ヒアルロン酸とその塩、コンドロイチン硫酸とその塩、アルギン酸とその塩、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、メチルセルロース、ＭＰＣのホモポリマー、Ｃ成分以外のＭＰＣを用いた共重合体などを挙げることができる。

また、本発明の効果を損なわない範囲において、次に示す成分を配合することができる。すなわち、界面活性剤、多価アルコール、清涼化剤、金属封鎖剤、無機塩、有機酸の塩、酸、塩基、等張化剤、酸化防止剤、及びビグアニド系以外の防腐剤を添加することができる。

界面活性剤としては、例えば、高級脂肪酸又はその塩、アルキル硫酸又はその塩、アルキルスルホン酸又はその塩、ポリオキシエチレンアルキル硫酸又はその塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、糖エステル、糖エーテル、糖アミド、イミダゾリン、ベタインなどが挙げられる。多価アルコールとしては、プロピレングリコール、グリセリン、ブドウ糖、マンニトール、ソルビトール、キシリトール、トレハロースなどが挙げられる。清涼化剤としては、メントール、カンフルなどが挙げられる。金属封鎖剤としては、エチレンジアミン四酢酸、クエン酸、エチドロン酸などが挙げられる。無機塩としては、ホウ砂、炭酸水素ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、無水リン酸二水素ナトリウムなどが挙げられる。有機酸の塩としては、クエン酸ナトリウムなどが挙げられる。酸としては、ホウ酸、リン酸、硫酸、酢酸、塩酸などが挙げられる。塩基としては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、トロメタモール、モノエタノールアミンなどが挙げられる。なお、これらの成分を２種以上添加してもよい。

以下、本発明について実施例及び比較例により、本発明及びその効果を具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例によって限定されるものではない。

１．点眼剤のｐＨ
各実施例及び比較例の点眼剤のｐＨは、第１６改正日本薬局方一般試験法２．５４ｐＨ測定法に従い測定した。

２．点眼剤の浸透圧
各実施例及び比較例の点眼剤の浸透圧は、第１６改正日本薬局方一般試験法２．４７浸透圧測定法（オスモル濃度測定法）に従い行った。具体的には、氷点測定法によるオズモメーター（ＦｉｓｋｅＭｏｄｅｌ２１０マイクロサンプル・オズモメーター）を用いて測定した。

３．点眼剤の光線透過率
各実施例及び比較例の点眼剤の光線透過率は、第１６改正日本薬局方一般試験法２．２４紫外可視吸光度測定法に従い測定した。

使用したＡ成分であるヒドロキシプロピルメチルセルロースの詳細を表１に示す。

実施例１−１
精製水８０ｇに（Ａ）ヒドロキシプロピルメチルセルロース（１）（メトローズ（登録商標）６０ＳＨ−５０（メトキシ基２９．１％、ヒドロキシプロポキシ基８．２％、メトキシ基／ヒドロキシプロポキシ基の比が３．５、２０℃における２％水溶液の粘度が５０ｍＰａ・ｓ））０．１ｇ、（Ｂ）塩化ナトリウム０．６３ｇ、塩化カリウム０．１ｇ、ホウ酸０．４ｇ、水酸化ナトリウム０．００７６ｇ、（Ｃ）ＣｏｓｍｏｃｉｌＣＱ（登録商標）０．０００４ｇ（２０％水溶液であるため、ヘキサメチレンビグアニドとしては０．００００８ｇを含む（重量平均分子量は２８０６であり、換算することにより、式（１）における繰り返し単位であるｋは平均１４）。）、（Ｄ）２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン・メタクリル酸ブチル共重合体（８０：２０）０．１ｇを順次加え、攪拌した。この後、これに全量１００ｍＬとなるように精製水を加えた。この後、ろ過滅菌を行い、無菌の点眼剤とした。この点眼剤の浸透圧は２９０ｍＯｓｍ／ｋｇ、ｐＨは７．４、外観は無色透明であった。詳細を表２に示す。

実施例１−２〜１−１０
表２に示す種類及び量の成分を使用した以外は、実施例１−１と同様の手順に従って製造し、無菌の点眼剤とした。各実施例の外観、ｐＨ及び浸透圧を表２に示す。

比較例１〜７
表３に示す種類及び量の成分を使用した以外は、実施例１−１と同様の手順に従って製造し、無菌の点眼剤とした。このときの外観、ｐＨ及び浸透圧を表３に示す。

＜Ｖ７９細胞を用いたソフトコンタクトレンズ抽出物細胞毒性試験＞
ＩＳＯ１１９８１に準拠し、ソフトコンタクトレンズを各実施例又は比較例の点眼剤と生理食塩液とで繰返し浸漬し、各実施例又は比較例の点眼剤の配合成分をソフトコンタクトレンズへ吸着させた。
この後、ＩＳＯ１０９９３−５及び薬食機発０３０１第２０号「医療機器の製造販売承認申請等に必要な生物学的安全性評価の考え方について」の方法に準拠し、ソフトコンタクトレンズへ吸着した物質を抽出して取り出し、チャイニーズハムスター肺由来線維芽細胞（Ｖ７９、ＪＣＲＢ０６０３）を用いた細胞毒性試験（コロニー形成法）を行った。

該細胞毒性試験に使用したソフトコンタクトレンズは、２ウィークアキュビュー（登録商標）（コンタクトレンズ分類：グループＩＶ）及びアキュビューオアシス（登録商標）（コンタクトレンズ分類：シリコーンハイドロゲルレンズ）（共にジョンソンエンドジョンソン株式会社製）である。

以下に、具体的な試験方法を示す。
１）コンタクトレンズケースに各実施例又は比較例の点眼剤を１ｍＬ、及びソフトコンタクトレンズを入れ、３５℃、６５％ＲＨで１時間以上浸漬した後、ソフトコンタクトレンズを取り出した。
２）別にコンタクトレンズケースを用意し、これにＩＳＯ生理食塩液を１ｍＬ入れ、１）で取り出したソフトコンタクトレンズを１時間以内浸漬した。この操作を１回として１４回繰返した。
３）この後、２）のコンタクトレンズケースからソフトコンタクトレンズを取り出し、これを牛胎児血清を１０ｖｏｌ％添加したＥａｇｌｅのＭｉｎｉｍｕｍＥｓｓｅｎｔｉａｌＭｅｄｉｕｍ（ＭＥＭ１０培地）に浸漬し、３７℃、５．０％ＣＯ₂インキュベーターで２４時間保管して、ソフトコンタクトレンズに吸着した物質を抽出した。
４）この抽出した培地を用いてＶ７９細胞を２４時間培養した後、メタノールを用いてＶ７９細胞を固定化し、ギムザ染色して、Ｖ７９細胞のコロニー数を計測して、コロニー形成率を算出した。
５）新鮮な培地のみでＶ７９細胞を培養した群をコントロール群とし、コントロール群に対するソフトコンタクトレンズ抽出液処理群のコロニー形成率が３０％を超えて低下した場合、つまり、コロニー形成率７０％以下となったとき、細胞毒性作用有りと評価した。

Ｖ７９細胞を用いたソフトコンタクトレンズ抽出物細胞毒性試験結果を、表４及び表５に示す。表４から明らかなように、実施例１−１〜１−１０の点眼剤は、細胞毒性作用が低い評価となった。一方、表５から明らかなように、比較例１〜７の点眼剤については、コロニー形成率が７０％以下となり、細胞毒性作用有りとの評価結果となった。
また、実施例１−３〜１−１０についてはシリコーンハイドロゲルレンズであるアキュビューオアシス（登録商標）において、コロニー形成率が高く、より細胞毒性作用が低いことが示された。さらに、実施例１−１及び実施例１−２については、細胞毒性作用をほぼ示さず、高い安全性を有することが示された。

実施例２−１
精製水８０ｇを８０℃に加温し、これに（Ａ）ヒドロキシプロピルメチルセルロース（１）０．１ｇを少しずつ投入してマグネチックスターラーで３０分間激しく攪拌し、分散体を得た。この分散体の８０℃での波長５００ｎｍにおける光線透過率は５３．０％であった。これを５０℃まで冷却し、均一に溶解している溶液とした。この溶液の５０℃での波長５００ｎｍにおける光線透過率は９９．４％であった。この後、（Ｂ）塩化ナトリウム０．６３ｇ、塩化カリウム０．１ｇ、ホウ酸０．４ｇ、水酸化ナトリウム０．００７６ｇ、（Ｃ）ＣｏｓｍｏｃｉｌＣＱ（登録商標）０．０００４ｇ（２０％水溶液であるため、ヘキサメチレンビグアニドとしては０．００００８ｇを含む）、（Ｄ）２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン・メタクリル酸ブチル共重合体（８０：２０）０．１ｇを順次加え、攪拌した。この溶液を５０℃のまま、１時間攪拌混合した。この後、これに全量１００ｍＬとなるように精製水を加えた。この溶液の３０℃での波長５００ｎｍにおける光線透過率は１００．０％であった。この後、ろ過滅菌を行い、無菌の点眼剤とした。この点眼剤の浸透圧は２９０ｍＯｓｍ／ｋｇ、ｐＨは７．４、外観は無色透明であった。詳細を表６に示す。

実施例２−２
精製水８０ｇを８０℃に加温し、これに（Ａ）ヒドロキシプロピルメチルセルロース（２）（メトローズ（登録商標）６０ＳＨ−４０００（メトキシ基２９．０％、ヒドロキシプロポキシ基９．３％、メトキシ基／ヒドロキシプロポキシ基の比が３．１、２０℃における２％水溶液の粘度が４０００ｍＰａ・ｓ））０．２ｇを少しずつ投入してマグネチックスターラーで３０分間激しく攪拌し、分散体を得た。この分散体の８０℃での波長５００ｎｍにおける光線透過率は１．２％であった。これを５０℃まで冷却し、均一に溶解している溶液とした。この溶液の５０℃での波長５００ｎｍにおける光線透過率は９８．３％であった。この後、（Ｂ）塩化ナトリウム０．７４ｇ、塩化カリウム０．１３ｇ、水酸化ナトリウム０．００５８ｇ、エデト酸ナトリウム水和物０．０５ｇ、（Ｃ）ＣｏｓｍｏｃｉｌＣＱ（登録商標）０．０００４ｇ（２０％水溶液であるため、ヘキサメチレンビグアニドとしては０．００００８ｇを含む）、（Ｄ）２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン・メタクリル酸ブチル共重合体（８０：２０）０．１ｇを順次加え、攪拌した。この溶液を５０℃のまま、１時間攪拌混合した。この後、これに全量１００ｍＬとなるように精製水を加えた。この溶液の３０℃での波長５００ｎｍにおける光線透過率は９８．４％であった。この後、ろ過滅菌を行い、無菌の点眼剤とした。この点眼剤の浸透圧は２７８ｍＯｓｍ／ｋｇ、ｐＨは７．２、外観は無色透明であった。結果を表６に示す。

実施例２−１及び実施例２−２の点眼剤についての、Ｖ７９細胞を用いたソフトコンタクトレンズ抽出物細胞毒性試験結果を、表７に示す。表７から明らかなように、実施例２−１及び実施例２−２の点眼剤については、細胞毒性作用をほぼ示さず、高い安全性を有することが示された。

＜点眼剤の保存安定性試験＞
実施例１−１〜１−１０、実施例２−１及び実施例２−２で調製した点眼剤をポリエチレンテレフタレート製１５ｍＬ点眼容器へと充てんし、ＩＣＨガイドラインに準じて４０℃、７５％ＲＨの保管庫内に本発明の製剤を６箇月間保管した。これは室温での３年保管相当となる。充てんしたものにつき、ヘキサメチレンビグアニドの定量を試験開始時及び６箇月目に実施した。保存安定性試験の試験判定は、試験開始時の対表示量を活性値１００％として、６箇月後の活性値が、試験開始時の対表示量に対して９０〜１１０％の範囲内であるとき適合とした。保存安定性試験結果を、表８及び表９に示す。

実施例１−１〜１−１０については、６箇月目におけるヘキサメチレンビグアニドの活性値が９０〜９４％となり適合であった。また、実施例２−１及び実施例２−２は、６箇月目における活性値がいずれも９９％であり（適合）、ヘキサメチレンビグアニドの減少がほとんど認められず、非常に良好な保存安定性を示した。

Claims

（Ａ）ヒドロキシプロピルメチルセルロース全量に対して２８．０〜３０．０質量％のメトキシ基、及び７．０〜１２．０質量％のヒドロキシプロポキシ基を有し、メトキシ基／ヒドロキシプロポキシ基の値が質量比で２．５〜４．０であり、２０℃における２質量％水溶液の粘度が５０〜４０００ｍＰａ・ｓである、前記ヒドロキシプロピルメチルセルロースと、
（Ｂ）塩化ナトリウム又は塩化カリウムと、
（Ｃ）式（１）に示すヘキサメチレンビグアニド又はその塩と、
（Ｄ）式（２）に示す２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン・メタクリル酸ブチル共重合体と、
（Ｅ）水と、を含有し、
点眼剤全量に対する含有量は、前記（Ａ）が０．１〜０．２Ｗ／Ｖ％、前記（Ｂ）が０．０１〜１．５Ｗ／Ｖ％、前記（Ｃ）が０．００００５〜０．０００１５Ｗ／Ｖ％、及び前記（Ｄ）が０．０５〜０．１５Ｗ／Ｖ％である、
点眼剤。

［式（１）中、ｋは繰り返し単位を示す数字で、３〜４０の整数である。］

（ｍ、ｎは各構成単位のモル比を示すための数字であり、モル比でｍ／ｎ＝７０／３０〜９０／１０である。）
７０〜９０℃の加熱水中に、（Ａ）ヒドロキシプロピルメチルセルロース全量に対して２８．０〜３０．０質量％のメトキシ基、及び７．０〜１２．０質量％のヒドロキシプロポキシ基を有し、メトキシ基／ヒドロキシプロポキシ基の値が質量比で２．５〜４．０であり、２０℃における２質量％水溶液の粘度が５０〜４０００ｍＰａ・ｓである、前記ヒドロキシプロピルメチルセルロースを分散させて分散液を得る工程と、
前記分散液を３０〜５０℃に冷却する工程と、
当該冷却後、（Ｂ）塩化ナトリウム又は塩化カリウム、（Ｃ）式（１）に示すヘキサメチレンビグアニド又はその塩、及び（Ｄ）式（２）に示す２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン・メタクリル酸ブチル共重合体を、前記冷却後の分散液に配合する工程を有し、
点眼剤全量に対する含有量を、前記（Ａ）が０．１〜０．２Ｗ／Ｖ％、前記（Ｂ）が０．０１〜１．５Ｗ／Ｖ％、前記（Ｃ）が０．００００５〜０．０００１５Ｗ／Ｖ％、及び前記（Ｄ）が０．０５〜０．１５Ｗ／Ｖ％となるように配合する、
点眼剤の製造方法。

［式（１）中、ｋは繰り返し単位を示す数字で、３〜４０の整数である。］

（ｍ、ｎは各構成単位のモル比を示すための数字であり、モル比でｍ／ｎ＝７０／３０〜９０／１０である。）