ES2760510T3

ES2760510T3 - Derivado de benzofurano, método de preparación del mismo y uso del mismo en medicina

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Publication number: ES2760510T3
Application number: ES16865671T
Authority: ES
Inventors: Biao Lu; Xiaodong Shen; Mingxun He; Dong Liu; Minsheng Zhang
Original assignee: Jiangsu Hengrui Medicine Co Ltd; Shanghai Hengrui Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Jiangsu Hengrui Medicine Co Ltd; Shanghai Hengrui Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2015-11-19
Filing date: 2016-11-02
Publication date: 2020-05-14
Anticipated expiration: 2036-11-02
Also published as: US10759787B2; KR20180081587A; HUE047785T2; AU2016357900A1; JP2018538257A; WO2017084494A1; DK3378859T3; CA3002436A1; HK1243414A1; HRP20192209T1; RS59763B1; PL3378859T3; EP3378859A1; JP6828229B2; RU2727198C2; US11059811B2; RU2018119173A; BR112018007876A2; LT3378859T; BR112018007876B1

Abstract

Un compuesto de Fórmula (I):**Fórmula** o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, en donde: el anillo A se selecciona entre el grupo que consiste en heterociclilo y cicloalquilo; cada R1 es idéntico o diferente y se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, alquilo, haloalquilo, alcoxi, haloalcoxi, amino, nitro, hidroxi, ciano, cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -OR6, -C(O)R6, -C(O)OR6, - S(O)mR6, -S(O)mNR7R8 y -(CH2)xRa, en donde el alquilo, haloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo está cada uno independiente y opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados entre el grupo que consiste en alquilo, haloalquilo, halógeno, amino, nitro, ciano, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi, hidroxialquilo, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo; Ra se selecciona del grupo que consiste en halógeno, cicloalquilo, heterociclilo y -NR7R8, en donde el cicloalquilo y heterociclilo está cada uno independiente y opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados entre el grupo que consiste en alquilo, haloalquilo, halógeno, amino, nitro, ciano, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi, hidroxialquilo, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo; R2 es hidrógeno o alquilo, en donde el alquilo está opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados entre el grupo que consiste en halógeno, hidroxi, ciano, cicloalquilo y heterociclilo; R3 se selecciona entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, halógeno, ciano, alcoxi y haloalquilo; cada R4 es idéntico o diferente y se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, haloalquilo, hidroxi, amino, alcoxi, haloalcoxi, cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -OR6, -C(O)R6, -C(O)OR6, -S(O)mR6, -S(O)mNR7R8 y -NR7R8; cada R5 es idéntico o diferente y se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, oxo, halógeno, haloalquilo, hidroxi, amino, alcoxi, haloalcoxi, cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -OR6, -C(O)R6, -C(O)OR6, -S(O)mR6, -S(O)mNR7R8 y -NR7R8; R6 se selecciona entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, haloalquilo, alcoxi, hidroxialquilo, hidroxi, amino, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo; R7 y R8 son idénticos o diferentes y se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, alcoxi, hidroxialquilo, hidroxi, amino, alcoxicarbonilo, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo, en donde el alquilo, amino, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo está cada uno independiente y opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados entre el grupo que consiste en alquilo, halógeno, hidroxi, amino, alcoxicarbonilo, nitro, ciano, alcoxi, hidroxialquilo, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo; m es 0, 1 o 2; n es 0, 1, 2 o 3; p es 0, 1, 2, 3, 4 o 5; q es 0, 1 o 2; y x es 0, 1, 2 o 3.

Description

DESCRIPCIÓN

Derivado de benzofurano, método de preparación del mismo y uso del mismo en medicina

Campo de la invención

La presente invención pertenece al campo de la medicina y se refiere a un derivado de benzofurano, a un método de preparación del mismo y a un uso del mismo en la investigación médica. La presente invención desvela el uso del derivado como un inhibidor de EZH2 en la prevención y/o el tratamiento de una enfermedad tal como tumor y cáncer, etc., en particular en la prevención y/o el tratamiento de linfoma no de Hodgkin, linfoma difuso de linfocitos B grandes, linfoma folicular y sarcoma sinovial, etc.

Antecedentes de la invención

La aparición de un tumor es un proceso evolutivo de múltiples factores y múltiples fases, que implica mutación y cambios epigenéticos de múltiples genes tales como oncogén, anti-oncogén y gen de reparación de daños en el ADN. Estrictamente hablando, la epigenética se define como una combinación de mecanismos genéticos capaces de alterar la función genómica además de la alteración directa de la secuencia de ADN. En el presente documento, "epigenética" se refiere ampliamente a elementos de estructura de cromatina que controlan la función genómica, independientemente de si el control es hereditario. La regulación epigenética o basada en la cromatina desempeña un papel importante en la expresión génica en una función fisiológica normal o en la evolución del cáncer.

El grupo de proteínas Polycomb (PcG) es un factor de proteína importante implicado en la regulación negativa de la epigenética génica de cromatina. En mamíferos, el PcG está dividido principalmente en dos tipos con diferentes estructuras y funciones: complejo represor polycomb 2 (PRC2) y complejo represor polycomb 1 (PRC1). La histona metiltransferasa codificada por el gen EZH2 es el componente catalítico del complejo represor polycomb 2 (PRC2) y ejerce la actividad metiltransferasa sobre la lisina 27 (H3K27) de histona H3 para generar H3K27me3 por medio del dominio SET de la subunidad EZH2. Esto da como resultado la represión transcripcional por medio de diversos mecanismos, incluyendo el reclutamiento urgente de ADN metiltransferasas (DNMT) y PRC 1 que ubicuitina H2AK119. La mutación de codón en el codón 641 de EZH2, el punto caliente de mutación más común, es una mutación de ganancia de función que conduce a una trimetilación aumentada de histona H3K27, y desempeña un papel importante en la tumorigénesis de linfoma difuso de linfocitos B grandes de tipo GCB (DLBCL) y linfoma folicular (Fl ). Las mutaciones somáticas recurrentes en el dominio SET de Ezh2 son comunes en pacientes con linfomas difusos de linfocitos B grandes (DLBCL). Además, la sobreexpresión de EZH2 es común en una variedad de tipos de tumor con mal pronóstico, incluyendo el cáncer, linfomas y sarcomas de tejido blando, etc. La expresión de EZH2 en el sarcoma sinovial está asociada con alta trimetilación de H3K27. Los niveles de EZH2 están anormalmente elevados en tejidos cancerosos en comparación con tejidos normales, y EZH2 se expresa más altamente en cánceres avanzados de mal pronóstico. En algunos tipos de cáncer, la sobreexpresión de EZH2 se produce simultáneamente con la amplificación del gen EZH2. Un gran número de estudios experimentales de ARNip/hc muestran que la reducción de la expresión de Ezh2 en líneas de células tumorales puede inhibir la proliferación, migración e invasión desde células tumorales o la angiogénesis, y conducir a apoptosis.

Solicitudes de patente que desvelan inhibidores selectivos de EZH2 incluyen los documentos WO2012005805, WO2012050532, WO2012118812, WO2012142513, WO2012142504, WO2013049770, WO2013039988, WO2013067300, WO2015141616, WO2011140325, etc.

Los inhibidores de EZH2 como fármacos tienen prometedoras perspectivas de aplicación en la industria médica. Sin embargo, sigue existiendo la necesidad de desarrollar nuevos inhibidores de EZH2 para conseguir un mejor efecto terapéutico en tumor o cáncer y satisfacer más adecuadamente la demanda del mercado.

Sumario de la invención

La presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), o a un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, en donde la estructura del compuesto de fórmula (I) es tal como sigue:

en donde:

el anillo A se selecciona entre el grupo que consiste en heterociclilo y cicloalquilo;

cada R¹es idéntico o diferente y se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, alquilo, haloalquilo, alcoxi, haloalcoxi, amino, nitro, hidroxi, ciano, cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -OR⁶, -C(O)R⁶, -C(O)OR⁶, -S(O)^mR⁶, -S(O)^mNR⁷R⁸y -(CH²)^xR^a, en donde el alquilo, haloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo está cada uno independiente y opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados entre el grupo que consiste en alquilo, haloalquilo, halógeno, amino, nitro, ciano, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi, hidroxialquilo, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo;

R^ase selecciona del grupo que consiste en halógeno, cicloalquilo, heterociclilo y -NR⁷R⁸, en donde el cicloalquilo y heterociclilo está cada uno independiente y opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados entre el grupo que consiste en alquilo, haloalquilo, halógeno, amino, nitro, ciano, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi, hidroxialquilo, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo;

R²es hidrógeno o alquilo, en donde el alquilo está opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados entre el grupo que consiste en halógeno, hidroxi, ciano, cicloalquilo y heterociclilo;

R³se selecciona entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, halógeno, ciano, alcoxi y haloalquilo; cada R⁴es idéntico o diferente y se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, haloalquilo, hidroxi, amino, alcoxi, haloalcoxi, cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -OR⁶, -C(O)R⁶, -C(O)OR⁶, -S(O)^mR⁶, -S(O)^mNR⁷R⁸y -NR⁷R⁸;

cada R⁵es idéntico o diferente y se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, oxo, halógeno, haloalquilo, hidroxi, amino, alcoxi, haloalcoxi, cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -OR⁶, -C(O)R⁶, -C(O)OR⁶, -S(O)^mR⁶, -S(O)^mNR⁷R⁸y -NR⁷R⁸;

R⁶se selecciona entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, haloalquilo, alcoxi, hidroxialquilo, hidroxi, amino, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo;

R⁷y R⁸son idénticos o diferentes y se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, alcoxi, hidroxialquilo, hidroxi, amino, alcoxicarbonilo, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo, en donde el alquilo, amino, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo está cada uno independiente y opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados entre el grupo que consiste en alquilo, halógeno, hidroxi, amino, alcoxicarbonilo, nitro, ciano, alcoxi, hidroxialquilo, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo; m es 0, 1 o 2;

n es 0, 1, 2 o 3;

p es 0, 1, 2, 3, 4 o 5;

q es 0, 1 o 2; y

x es 0, 1,2 o 3.

En una realización preferida de la presente invención, en un compuesto de fórmula (I), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, n es 2.

En una realización preferida de la presente invención, en un compuesto de fórmula (I), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, q es 0 o 1.

En una realización preferida de la presente invención, en un compuesto de fórmula (I), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, p es 0 o 1.

En una realización preferida de la presente invención, en un compuesto de fórmula (I), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, cada R¹es idéntico o diferente y se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, alquilo, haloalquilo, ciano, cicloalquilo, heterociclilo y -(CH²)^xR^a, en donde el alquilo y heterociclilo está cada uno independiente y opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados entre el grupo que consiste en alquilo, hidroxialquilo y halógeno; y R^ase selecciona entre el grupo que consiste en halógeno, cicloalquilo, heterociclilo y -NR⁷R⁸, en donde el cicloalquilo y heterociclilo está cada uno independiente y opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados entre el grupo que consiste en hidroxialquilo, alquilo y halógeno; y R⁷, R⁸y x son como se define en la fórmula (I).

En una realización preferida de la presente invención, en un compuesto de fórmula (I), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, cada R¹es idéntico o diferente y se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, haloalquilo, ciano y -(CH²)^xR^a, en donde x es 0, y R^aes halógeno o cicloalquilo.

En una realización preferida de la presente invención, en un compuesto de fórmula (I), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, R²es alquilo opcionalmente sustituido con cicloalquilo.

En una realización preferida de la presente invención, en un compuesto de fórmula (I), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, R³se selecciona entre el grupo que consiste en alquilo, halógeno y haloalquilo.

En una realización preferida de la presente invención, en un compuesto de fórmula (I), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, cada R⁴es idéntico o diferente y se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo y alcoxi.

En una realización preferida de la presente invención, en un compuesto de fórmula (I), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, cada R⁵es idéntico o diferente y se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, oxo, haloalquilo, -C(O)R⁶, -S(O)^mR⁶y -NR⁷R⁸, en donde R⁶a R⁸y m son como se define en la fórmula (I), preferiblemente hidrógeno.

En una realización preferida de la presente invención, un compuesto de fórmula (I), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, es un compuesto de fórmula (II), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos:

en donde:

G se selecciona entre el grupo que consiste en CR^bR^c, C=O, S(O)^m, NR^dy oxígeno;

R^by R^cse selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, alcoxi, halógeno, amino, nitro, hidroxi, ciano, cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -OR⁶, -C(O)R⁶, -C(O)OR⁶, -S(O)^mR⁶y -NR⁷R⁸;

R^dse selecciona entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, haloalquilo, hidroxialquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -C(O)R⁶, -C(O)OR⁶y -S(O)^mR⁶; y R¹a R⁴, R⁶a R⁸, n, m y q son como se define en la fórmula (I).

En una realización preferida de la presente invención, un compuesto de fórmula (II), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, es un compuesto de fórmula (III), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos:

en donde:

E es CH o átomo de N;

F se selecciona entre el grupo que consiste en CR^bR^c, C=O, NR^dy oxígeno;

R^by R^cse selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, alcoxi, halógeno, amino, nitro, hidroxi, ciano, cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -OR6, -C(O)R6, -C(O)OR6, -S(O)^mR6 y -NR7R8; R^dse selecciona entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, haloalquilo, hidroxialquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -C(O)R6, -C(O)OR6 y -S(O)^mR6;

cada R^ees idéntico o diferente y se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, haloalquilo, halógeno, amino, nitro, ciano, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi, hidroxialquilo, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo;

t es 0, 1, 2, 3, 4 o 5;

x es 0, 1, 2 o 3;

y es 0, 1, 2 o 3; y

R1 a R4, R6 a R8, m y n son como se definen en la fórmula (I).

En una realización preferida de la presente invención, un compuesto de fórmula (III), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, es un compuesto de fórmula (IV), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos:

en donde:

cada Re es idéntico o diferente y se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo y halógeno;

t es 0, 1,2, 3, 4 o 5; y

R2 a R4 y n son como se definen en la fórmula (I).

En una realización preferida de la presente invención, un compuesto de fórmula (III), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, es un compuesto de fórmula (V), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos:

en donde:

Re se selecciona entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, haloalquilo, halógeno, amino, nitro, ciano, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi, hidroxialquilo, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo; y

R2 a R4 y n son como se definen en la fórmula (I).

Compuestos típicos de fórmula (I), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, incluyen, pero sin limitación:

continuación

continuación

continuación

continuación

continuación

continuación

continuación

continuación

o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

La presente invención también proporciona un intermedio para preparar el compuesto de fórmula (I), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, es decir, un compuesto de fórmula (VI):

o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos,

en donde:

anillo A, R1 a R3, R5, p y q son como se define en la fórmula (I).

En otro aspecto, la presente invención también se refiere a un proceso para preparar un compuesto de fórmula (I), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, que comprende una etapa de:

condensar un compuesto de fórmula (VI) con un compuesto de fórmula (VII) a temperatura ambiente para obtener el compuesto de fórmula (I);

en donde:

R1 a R5, anillos A, p, q y n son como se definen en (I).

En otro aspecto, la presente invención también se refiere a una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula (I), (II), (III), (IV) o (V), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, y uno o más vehículos, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables. La presente invención también se refiere a un proceso para la preparación de la composición mencionada anteriormente que comprende una etapa de mezclar un compuesto de fórmula (I), (II), (III), (IV) o (V) o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, con uno o más vehículos, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables.

La presente invención se refieren además al uso de un compuesto de fórmula (I), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, o una composición farmacéutica que comprende los mismos, en la preparación de un medicamento para prevenir y/o tratar tumor y cáncer, en donde el cáncer se selecciona entre el grupo que consiste en linfoma, leucemia, cáncer de mama, cáncer de pulmón, cáncer de próstata, cáncer de ovario, cáncer de hígado, melanoma, rabdomiosarcoma, sarcoma sinovial, mesotelioma, cáncer de cuello uterino, cáncer de colon, cáncer rectal, cáncer de estómago, cáncer de páncreas, cáncer cerebral, cáncer de piel, cáncer oral, cáncer de hueso, cáncer de riñón, cáncer de vejiga, tumor de trompas de Falopio, tumor de ovario, tumor peritoneal, glioma, glioblastoma, cáncer de cabeza y cuello, y mieloma; preferiblemente linfoma, leucemia, cáncer de mama, cáncer de pulmón, cáncer de próstata, cáncer de ovario, cáncer de hígado, melanoma, rabdomiosarcoma, sarcoma sinovial y mesotelioma; en donde el cáncer de pulmón se selecciona entre el grupo que consiste en cáncer de pulmón de células pequeñas y cáncer de pulmón de células no pequeñas; en donde la leucemia se selecciona entre el grupo que consiste en leucemia mieloide crónica, leucemia mieloide aguda y leucemia de linaje mixto; en donde el linfoma se selecciona entre linfoma no de Hodgkin, linfoma difuso de linfocitos B grandes y linfoma folicular.

La presente invención se refiere además a un compuesto de fórmula (I), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, o una composición farmacéutica que comprende los mismos para su uso como un medicamento para prevenir y/o tratar tumor y cáncer, en donde el tumor y cáncer son como se han definido anteriormente.

La presente invención se refiere además al uso de un compuesto de fórmula (I), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, o una composición farmacéutica que comprende los mismos, como inhibidor de EZH2 en la preparación de un medicamento para prevenir y/o tratar tumor y cáncer, en donde el tumor y cáncer son como se han definido anteriormente.

La presente invención se refiere además al uso de un compuesto de fórmula (I), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, o una composición farmacéutica que comprende los mismos, en la preparación de un medicamento para inhibir EZH2.

La presente invención se refiere además a un compuesto de fórmula (I), o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, o una composición farmacéutica que comprende los mismos para su uso como medicamento para inhibir EZH2.

Las composiciones farmacéuticas que contienen el principio activo pueden estar en una forma adecuada para su administración oral, por ejemplo, un comprimido, trocisco, pastillas para chupar, una suspensión acuosa u oleosa, polvo o gránulo dispersable, emulsión, cápsula dura o blanda, o jarabe o elixir. Las composiciones orales pueden prepararse de acuerdo con cualquier método conocido en la técnica para la preparación de composiciones farmacéuticas. Tales composiciones pueden contener uno o más agentes seleccionados del grupo que consiste en agentes edulcorantes, agentes aromatizantes, agentes colorantes y conservantes, para proporcionar una formulación farmacéutica agradable y de sabor aceptable. El comprimido contiene el principio activo en mezcla con excipientes farmacéuticamente aceptables no tóxicos adecuados para la fabricación de un comprimido.

Una suspensión acuosa contiene el principio activo en mezcla con excipientes adecuados para la fabricación de una suspensión acuosa. La suspensión acuosa puede contener también uno o más conservantes, tales como etilparabeno o n-propilparabeno, uno o más agentes colorantes, uno o más agentes aromatizantes, y uno o más agentes edulcorantes, tales como sacarosa, sacarina o aspartamo.

Una suspensión de aceite puede formularse suspendiendo el principio activo en un aceite vegetal. La suspensión de aceite puede contener un espesante. Los agentes edulcorantes y aromatizantes pueden añadirse para proporcionar una preparación de sabor aceptable.

El principio activo en mezcla con los agentes dispersantes o humectantes, agente de suspensión o uno o más conservantes, puede prepararse como un polvo o gránulo dispersable adecuado para la preparación de una suspensión acuosa añadiendo agua. Agentes dispersantes o humectantes y agentes de suspensión adecuados se ejemplifican mediante los ya mencionados anteriormente. Excipientes adicionales, tales como agentes edulcorantes, aromatizantes y colorantes, pueden añadirse también. Estas composiciones pueden conservarse añadiendo un antioxidante tal como ácido ascórbico.

La presente composición farmacéutica puede estar también en forma de una emulsión de aceite en agua.

La composición farmacéutica puede estar en forma de solución acuosa inyectable estéril. Los vehículos y disolventes aceptables que pueden emplearse son agua, solución de Ringer y solución de cloruro sódico isotónica. La preparación inyectable estéril puede ser también una microemulsión de aceite en agua inyectable estéril en la que el principio activo se disuelve en la fase oleosa. Por ejemplo, el principio activo puede disolverse en primer lugar en una mezcla de aceite de soja y lecitina, la solución oleosa se introduce entonces en una mezcla de agua y glicerol y se procesa para formar una microemulsión. La solución o microemulsión inyectable puede introducirse en el torrente sanguíneo del individuo mediante inyección en bolo localizada. Como alternativa, puede ser ventajoso administrar la solución o microemulsión de manera que se mantenga una concentración en circulación constante del presente compuesto. Para mantener dicha concentración constante, puede utilizarse un dispositivo de administración intravenosa continua. Un ejemplo de un dispositivo de este tipo es la bomba de inyección intravenosa Deltec CADD-PLUS. TM. 5400.

La composición farmacéutica puede estar en forma de una suspensión acuosa u oleosa inyectable estéril para administración intramuscular y subcutánea. Una suspensión de este tipo puede formularse con dispersantes o agentes humectantes y agentes de suspensión adecuados como se ha descrito anteriormente de acuerdo con técnicas conocidas. La preparación inyectable estéril puede ser también una solución o suspensión inyectable estéril preparada en un diluyente o disolvente no tóxico parenteralmente aceptable. Además, un aceite fijo estéril puede usarse fácilmente como un disolvente o medio de suspensión.

El presente compuesto puede administrarse en forma de supositorio para administración rectal. Estas composiciones farmacéuticas pueden prepararse mezclando fármaco con un excipiente no irritante adecuado que es sólido a temperaturas habituales, pero líquido en el recto, fundiendo de ese modo en el recto para liberar el fármaco. Dichos materiales incluyen manteca de cacao, glicerol gelatina, aceites vegetales hidrogenados, mezclas de polietilenglicoles con diversos pesos moleculares y ésteres de ácido graso de polietilenglicoles.

Es bien conocido por los expertos en la materia que la dosificación de un fármaco depende de una variedad de factores que incluyen, pero sin limitación, los siguientes factores: actividad de un compuesto específico, edad del paciente, peso del paciente, el estado de salud general del paciente, comportamiento del paciente, dieta del paciente, el momento de administración, vía de administración, velocidad de excreción, combinación de fármacos y similares. Además, el mejor tratamiento, tal como modo de tratamiento, la dosis diaria del compuesto de fórmula (I) o el tipo de sal farmacéuticamente aceptable del mismo pueden verificarse mediante regímenes terapéuticos tradicionales.

Descripción detallada de la invención

A menos que se indique otra cosa, los términos usados en la memoria descriptiva y las reivindicaciones tienen los significados descritos más adelante.

"Alquilo" se refiere a un grupo hidrocarburo alifático saturado incluyendo grupos de cadena lineal y de cadena ramificada C¹a C²⁰, preferiblemente un alquilo que tiene de 1 a 12 átomos de carbono, y más preferiblemente un alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono. Los ejemplos no limitantes incluyen metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, nbutilo, isobutilo, ferc-butilo, sec-butilo, n-pentilo, 1,1-dimetilpropilo, 1,2-dimetilpropilo, 2,2-dimetilpropilo, 1-etilpropilo, 2-metilbutilo, 3-metilbutMo, n-hexilo, 1 -etil-2-metMpropilo, 1,1,2-trimetilpropMo, 1,1-dimetilbutMo, 1,2-dimetilbutilo, 2,2-dimetilbutilo, 1,3-dimetilbutilo, 2-etilbutilo, 2-metilpentilo, 3-metilpentilo, 4-metilpentilo, 2,3-dimetilbutilo, n-heptilo, 2-metilhexilo, 3-metilhexilo, 4-metilhexilo, 5-metilhexilo, 2,3-dimetilpentilo, 2,4-dimetilpentilo, 2,2-dimetilpentilo, 3,3-dimetilpentilo, 2-etilpentilo, 3-etilpentilo, n-octilo, 2,3-dimetilhexilo, 2,4-dimetilhexilo, 2,5-dimetilhexilo, 2,2-dimetilhexilo, 3,3-dimetilhexilo, 4,4-dimetilhexilo, 2-etilhexilo, 3-etilhexilo, 4-etilhexilo, 2-metil-2-etilpentilo, 2-metil-3-etilpentilo, nnonilo, 2-metil-2-etilhexilo, 2-metil-3-etilhexilo, 2,2-dietilpentilo, n-decilo, 3,3-dietilhexilo, 2,2-dietilhexilo, e isómeros ramificados de los mismos. Más preferiblemente, un grupo alquilo es un alquilo inferior que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, y los ejemplos no limitantes incluyen metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, ferc-butilo, secbutilo, n-pentilo, 1,1-dimetilpropilo, 1,2-dimetilpropilo, 2,2-dimetilpropilo, 1 -etilpropilo, 2-metilbutilo, 3-metilbutilo, nhexilo, 1 -etil-2-metilpropilo, 1,1,2-trimetilpropilo, 1,1-dimetilbutilo, 1,2-dimetilbutilo, 2,2-dimetilbutilo, 1,3-dimetilbutilo, 2-etilbutilo, 2-metilpentilo, 3-metilpentilo, 4-metilpentilo, 2,3-dimetilbutilo, y similares. El grupo alquilo puede estar sustituido o sin sustituir. Cuando están sustituidos, el grupo o grupos de sustituyentes pueden estar sustituidos en cualquier punto de conexión disponible. El grupo o grupos de sustituyentes son preferiblemente uno o más grupos seleccionados independientemente entre el grupo que consiste en alquilo, alquenilo, alquinilo, alcoxi, alquiltio, alquilamino, halógeno, tiol, hidroxi, nitro, ciano, cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, cicloalcoxi, heterociclicalcoxi, cicloalquiltio, alquiltio heterocíclico, oxo, carboxi y alcoxicarbonilo.

"Alquileno" se refiere a un alquilo del cual un átomo de hidrógeno está sustituido adicionalmente, por ejemplo, "metileno" se refiere a -CH2-, "etileno" se refiere a -(CH2)2-, "propileno" se refiere a -(CH2)3-, "butileno" se refiere a -(CH2)4- y similares.

"Alquenilo" se refiere a un alquilo como se ha definido anteriormente que tiene al menos dos átomos de carbono y al menos un doble enlace carbono-carbono, por ejemplo, etenilo, 1-propenilo, 2-propenilo, 1-, 2- o 3-butenilo y similares. El grupo alquenilo puede estar sustituido o sin sustituir. Cuando están sustituidos, el grupo o grupos de sustituyentes son preferiblemente uno o más grupos seleccionados independientemente entre el grupo que consiste en alquilo, alquenilo, alquinilo, alcoxi, alquiltio, alquilamino, halógeno, tiol, hidroxi, nitro, ciano, cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, cicloalcoxi, alcoxi heterocíclico, cicloalquiltio y alquiltio heterocíclico.

"Cicloalquilo" se refiere un grupo hidrocarburo monocíclico o policíclico, saturado y/o parcialmente insaturado que tiene de 3 a 20 átomos de carbono, preferiblemente de 3 a 12 átomos de carbono, y más preferiblemente de 3 a 6 átomos de carbono. Los ejemplos no limitantes de cicloalquilo monocíclico incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo, ciclohexenilo, ciclohexadienilo, cicloheptilo, cicloheptatrienilo, ciclooctilo, y similares. Cicloalquilo policíclico incluye un cicloalquilo que tiene un anillo espiro, un anillo condensado o un anillo puenteado.

"Espirocicloalquilo" se refiere a un grupo policíclico de 5 a 20 miembros con anillos conectados a través de un átomo de carbono común (llamado espiro átomo), en donde uno o más anillos pueden contener uno o más dobles enlaces, pero ninguno de los anillos tiene un sistema de electrones pi completamente conjugado, preferiblemente espiro cicloalquilo de 6 a 14 miembros, y más preferiblemente espiro cicloalquilo de 7 a 10 miembros. De acuerdo con el número de los espiroátomos compartidos entre los anillos, espiro cicloalquilo se puede dividir en mono-espiro cicloalquilo, di-espiro cicloalquilo o poli-espiro cicloalquilo, preferiblemente un mono-espiro cicloalquilo o di-espiro cicloalquilo, y más preferiblemente mono-espiro cicloalquilo de 4 miembros/4 miembros, de 4 miembros/5 miembros, de 4 miembros/6 miembros, de 5 miembros/5 miembros o de 5 miembros/6 miembros. Los ejemplos no limitantes de espiro cicloalquilos incluyen:

"Cicloalquilo condensado" se refiere a un grupo policíclico completamente de carbono de 5 a 20 miembros, en donde cada anillo en el sistema comparte un par adyacente de átomos de carbono con otro anillo, en donde uno o más anillos pueden contener uno o más dobles enlaces, pero ninguno de los anillos tiene un sistema de electrones pi completamente conjugado, preferiblemente cicloalquilo condensado de 6 a 14 miembros, más preferiblemente cicloalquilo condensado de 7 a 10 miembros. De acuerdo con el número de miembros de anillo, cicloalquilo condensado se puede dividir en cicloalquilo condensado bicíclico, tricíclico, tetracíclico o policíclico, preferiblemente cicloalquilo condensado bicíclico o tricíclico, y más preferiblemente cicloalquilo condensado bicíclico de 5 miembros/5 miembros o de 5 miembros/6 miembros. Los ejemplos no limitantes de cicloalquilo condensado incluyen: "Cicloalquilo puenteado" se refiere a un grupo policíclico completamente de carbono de 5 a 20 miembros, en donde cada dos anillos en el sistema comparten dos anillos desconectados, en donde los anillos pueden tener uno o más dobles enlaces, pero ninguno de los anillos tiene un sistema de electrones pi completamente conjugado, preferiblemente cicloalquilo puenteado de 6 a 14 miembros, y más preferiblemente cicloalquilo puenteado de 7 a 10 miembros. De acuerdo con el número de miembros de anillo, cicloalquilo puenteado se puede dividir en cicloalquilo puenteado bicíclico, tricíclico, tetracíclico o policíclico, preferiblemente cicloalquilo puenteado bicíclico, tricíclico o tetracíclico, y más preferiblemente cicloalquilo puenteado bicíclico o tricíclico. Los ejemplos no limitantes de cicloalquilos puenteados incluyen:

El anillo de cicloalquilo puede estar condensado con el anillo de arilo, heteroarilo o heterociclilo, en donde el anillo enlazado a la estructura precursora es cicloalquilo. Los ejemplos no limitantes incluyen indanilo, tetrahidronaftilo, benzocicloheptilo y similares. El cicloalquilo puede estar opcionalmente sustituido o sin sustituir. Cuando están sustituidos, el grupo o grupos de sustituyentes son preferiblemente uno o más grupos seleccionados independientemente entre el grupo que consiste en alquilo, alquenilo, alquinilo, alcoxi, alquiltio, alquilamino, halógeno, tiol, hidroxi, nitro, ciano, cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, cicloalcoxi, alcoxi heterocíclico, cicloalquiltio, alquiltio heterocíclico, oxo, carboxi y alcoxicarbonilo.

"Heterociclilo" se refiere a un grupo hidrocarburo monocíclico o policíclico, saturado y/o parcialmente insaturado de 3 a 20 miembros que tiene uno o más heteroátomos seleccionados entre el grupo que consiste en N, O y S(O)m (en donde m es un número entero de 0 a 2) como átomos en el anillo, pero excluyendo -O-O-, -O-S- o -S-S- en el anillo, siendo átomos de carbono el resto de los átomos del anillo. Preferiblemente, el heterociclilo tiene de 3 a 12 átomos en donde de 1 a 4 átomos son heteroátomos, más preferiblemente de 3 a 8 átomos en donde de 1 a 3 átomos son heteroátomos, y lo más preferiblemente de 3 a 6 átomos en donde de 1 a 2 átomos son heteroátomos. Los ejemplos no limitantes de heterociclilo monocíclico incluyen pirrolidinilo, imidazolidinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotienilo, dihidroimidazolilo, dihidrofurilo, dihidropirazolilo, dihidropirrolilo, piperidinilo, piperazinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, homopiperazinilo, piranilo y similares, preferiblemente piperidinilo, pirrolidinilo, piranilo, morfolinilo o

El heterociclilo policíclico incluye un heterociclilo que tiene un anillo espiro, un anillo condensado o un anillo puenteado.

"Espiro heterociclilo" se refiere a un heterociclilo policíclico de 5 a 20 miembros con anillos conectados a través de un átomo común (llamado espiro átomo), en donde los anillos tienen uno o más heteroátomos seleccionados entre el grupo que consiste en N, O y S(O)m (en donde m es un número entero de 0 a 2) como átomos en el anillo, siendo átomos de carbono el resto de los átomos del anillo, en donde uno o más anillos pueden contener uno o más dobles enlaces, pero ninguno de los anillos tiene un sistema de electrones pi completamente conjugado, preferiblemente espiro heterociclilo de 6 a 14 miembros, y más preferiblemente espiro heterociclilo de 7 a 10 miembros. De acuerdo con el número de los espiroátomos compartidos entre los anillos, espiro heterociclilo se puede dividir en mono-espiro heterociclilo, di-espiro heterociclilo o poli-espiro heterociclilo, preferiblemente mono-espiro heterociclilo o diespiro heterociclilo, y más preferiblemente mono-espiro heterociclilo de 4 miembros/4 miembros, de 4 miembros/5 miembros, de 4 miembros/6 miembros, de 5 miembros/5 miembros o de 5 miembros/6 miembros. Los ejemplos no limitantes de espiro heterociclilos incluyen:

"Heterociclilo condensado" se refiere a un grupo heterociclilo policíclico de 5 a 20 miembros, en donde cada anillo en el sistema comparte un par adyacente de átomos con otro anillo, en donde uno o más anillos pueden contener uno o más dobles enlaces, pero ninguno de los anillos tiene un sistema de electrones pi completamente conjugado, y en donde los anillos tienen uno o más heteroátomos seleccionados entre el grupo que consiste en N, O y S(O)m (en donde m es un número entero de 0 a 2) como átomos en el anillo, siendo átomos de carbono el resto de los átomos del anillo, preferiblemente heterociclilo condensado de 6 a 14 miembros, y más preferiblemente heterociclilo condensado de 7 a 10 miembros. De acuerdo con el número de miembros de anillo, heterociclilo condensado se puede dividir en heterociclilo condensado bicíclico, tricíclico, tetracíclico o policíclico, preferiblemente heterociclilo condensado bicíclico o tricíclico, y más preferiblemente heterociclilo condensado bicíclico de 5 miembros/5 miembros, o de 5 miembros/6 miembros. Los ejemplos no limitantes de heterociclilo condensado incluyen:

en el sistema comparten dos anillos desconectados, en donde los anillos pueden tener uno o más dobles enlaces, pero ninguno de los anillos tiene un sistema de electrones pi completamente conjugado, y los anillos tienen uno o más heteroátomos seleccionados entre el grupo que consiste en N, O y S(O)m ( n donde m es un número entero de 0 a 2) como átomos en el anillo, siendo átomos de carbono el resto de los átomos del anillo, preferiblemente heterociclilo puenteado de 6 a 14 miembros, y más preferiblemente heterociclilo puenteado de 7 a 10 miembros. De acuerdo con el número de miembros de anillo, heterociclilo puenteado se puede dividir en heterociclilo puenteado bicíclico, tricíclico, tetracíclico o policíclico, preferiblemente heterociclilo puenteado bicíclico, tricíclico o tetracíclico, y más preferiblemente heterociclilo puenteado bicíclico o tricíclico. Los ejemplos no limitantes de heterociclilos puenteados incluyen:

El anillo de heterociclilo puede estar condensado con el anillo de arilo, heteroarilo o cicloalquilo, en donde el anillo enlazado a la estructura precursora es heterociclilo. Los ejemplos no limitantes incluyen:

El heterociclilo puede estar opcionalmente sustituido o sin sustituir. Cuando están sustituidos, el grupo o grupos de sustituyentes son preferiblemente uno o más grupos seleccionados independientemente entre el grupo que consiste en alquilo, alquenilo, alquinilo, alcoxi, alquiltio, alquilamino, halógeno, tiol, hidroxi, nitro, ciano, cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, cicloalcoxi, alcoxi heterocíclico, cicloalquiltio, alquiltio heterocíclico, oxo, carboxi y alcoxicarbonilo.

"Arilo" se refiere a un anillo monocíclico completamente de carbono de 6 a 14 miembros o un anillo policíclico condensado (es decir, cada anillo en el sistema comparte un par adyacente de átomos de carbono con otro anillo en el sistema) que tiene un sistema de electrones pi completamente conjugado, preferiblemente arilo de 6 a 10 miembros, por ejemplo, fenilo y naftilo, y más preferiblemente fenilo. El anillo de arilo puede estar condensado con el anillo de heteroarilo, heterociclilo o cicloalquilo, en donde el anillo enlazado a la estructura precursora es un anillo de arilo. Los ejemplos no limitantes incluyen:

El arilo puede estar opcionalmente sustituido o sin sustituir. Cuando están sustituidos, el grupo o grupos de sustituyentes son preferiblemente uno o más grupos seleccionados independientemente entre el grupo que consiste en alquilo, alquenilo, alquinilo, alcoxi, alquiltio, alquilamino, halógeno, tiol, hidroxi, nitro, ciano, cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, cicloalcoxi, alcoxi heterocíclico, cicloalquiltio, alquiltio heterocíclico, carboxi y alcoxicarbonilo.

"Heteroarilo" se refiere a un sistema heteroaromático de 5 a 14 miembros que tiene de 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre el grupo que consiste en O, S y N como átomos en el anillo, preferiblemente un heteroarilo de 5 a 10 miembros con 1 a 3 heteroátomos, más preferiblemente un heteroarilo de 5 o 6 miembros con 1 a 2 heteroátomos, por ejemplo, imidazolilo, furilo, tienilo, tiazolilo, pirazolilo, oxazolilo, pirrolilo, tetrazolilo, piridinilo, pirimidinilo, tiadiazol, pirazinilo y similares, preferiblemente imidazolilo, tetrazolilo, tienilo, pirazolilo, pirimidinilo o tiazolilo, y más preferiblemente pirazolilo o tiazolilo. El anillo de heteroarilo puede estar condensado con el anillo de arilo, heterociclilo o cicloalquilo, en donde el anillo enlazado a la estructura precursora es un anillo de heteroarilo. Los ejemplos no limitantes incluyen:

El heteroarilo puede estar opcionalmente sustituido o sin sustituir. Cuando están sustituidos, el grupo o grupos de sustituyentes son preferiblemente uno o más grupos seleccionados independientemente entre el grupo que consiste en alquilo, alquenilo, alquinilo, alcoxi, alquiltio, alquilamino, halógeno, tiol, hidroxi, nitro, ciano, cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, cicloalcoxi, alcoxi heterocíclico, cicloalquiltio, alquiltio heterocíclico, carboxi y alcoxicarbonilo.

"Alcoxi" se refiere a un grupo -O-(alquilo) o un -O-(cicloalquilo sin sustituir), en donde el alquilo es como se ha definido anteriormente. Los ejemplos no limitantes incluyen metoxi, etoxi, propoxi, butoxi, ciclopropiloxi, ciclobutiloxi, ciclopentiloxi, ciclohexiloxi, y similares. El alcoxi puede estar opcionalmente sustituido o sin sustituir. Cuando está sustituido, el sustituyente es preferiblemente uno o más grupos seleccionados independientemente entre el grupo que consiste en alquilo, alquenilo, alquinilo, alcoxi, alquiltio, alquilamino, halógeno, tiol, hidroxi, nitro, ciano, cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, cicloalcoxi, alcoxi heterocíclico, cicloalquiltio, alquiltio heterocíclico, carboxi y alcoxicarbonilo.

"Haloalquilo" se refiere a un grupo alquilo sustituido con uno o más halógenos, en donde el alquilo es como se ha definido anteriormente.

"Haloalcoxi" se refiere a un grupo alcoxi sustituido con uno o más halógenos, en donde el alcoxi es como se ha definido anteriormente.

"Hidroxialquilo" se refiere a un alquilo sustituido con hidroxi(s), en donde el alquilo es como se ha definido anteriormente.

"Hidroxi" se refiere a un grupo -OH.

"Halógeno" se refiere a flúor, cloro, bromo o yodo.

"Amino" se refiere a un grupo -NH².

"Ciano" se refiere a un grupo -CN.

"Nitro" se refiere a un grupo -NO².

"Oxo" se refiere a un grupo =O.

"Carbonilo" se refiere a un grupo -C=O.

"Carboxilo" se refiere a un grupo -C(O)OH.

"Isocianato" se refiere a un grupo -NCO.

"Hidroxiimino" se refiere a un grupo =N-OH.

"Alcoxicarbonilo" se refiere a un grupo -C(O)O(alquilo) o -C(O)O(cicloalquilo), en donde el alquilo y cicloalquilo son como se han definido anteriormente.

"Haluro de acilo" se refiere a un compuesto que comprende un grupo -C(O)-halógeno.

"Opcional" o "de forma opcional" significa que el suceso o circunstancia descrita puede producirse posteriormente, pero no necesariamente, y una descripción de este tipo incluye la situación en la que no es necesario que se produzca el suceso o circunstancia. Por ejemplo, "el grupo heterociclilo opcionalmente sustituido con un alquilo" significa que un grupo alquilo puede estar, pero no necesariamente, presente, y una descripción de este tipo incluye la situación en la que el grupo heterociclilo está sustituido con un alquilo y el grupo heterociclilo está sin sustituir con un alquilo.

"Sustituido" se refiere a uno o más átomos de hidrógeno en un grupo, preferiblemente hasta 5, más preferiblemente de 1 a 3 átomos de hidrógeno, independientemente sustituido con un número correspondiente de sustituyentes. No hace falta decir que los sustituyentes solo existen en su posición química posible. El experto en la técnica puede determinar si la sustitución es posible o imposible por experimentos o teorías sin realizar esfuerzos excesivos. Por ejemplo, la combinación de amino o hidroxi que tiene átomos de hidrógeno y carbono libres que tienen enlaces insaturados (tales como olefínicos) puede ser inestable.

Una "composición farmacéutica" se refiere a una mezcla de uno o más de los compuestos de acuerdo con la presente invención o sales o profármacos fisiológica/farmacéuticamente aceptables de los mismos, y otros componentes químicos, y otros componentes tales como vehículos y excipientes fisiológica/farmacéuticamente aceptables. El fin de una composición farmacéutica es facilitar la administración de un compuesto a un organismo, lo que facilita la absorción del principio activo, presentando así actividad biológica.

"Sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a una sal del compuesto de la presente invención, que es segura y efectiva en mamíferos y tiene la actividad biológica deseada.

MÉTODO DE SÍNTESIS DEL COMPUESTO DE LA PRESENTE INVENCIÓN

Para alcanzar el objeto de la presente invención, la presente invención aplica las siguientes soluciones técnicas de síntesis.

Un proceso para preparar un compuesto de fórmula (I) de la presente invención, o un tautómero, mesómero, racemato, enantiómero, diastereómero, o mezcla de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, comprende las siguientes etapas:

Un compuesto de fórmula (1-1) se añade a ácido sulfúrico en un baño de hielo, se añaden nitrato sódico y N-bromosuccinimida en lotes para obtener el compuesto de fórmula (I-2) bajo calentamiento. El compuesto de fórmula (I-2) se somete a una reacción de esterificación con un cloruro bajo una condición alcalina para obtener un compuesto de fórmula (I-3), en donde el reactivo alcalino que proporciona la condición alcalina es preferiblemente carbonato potásico. El compuesto de fórmula (I-3) se reduce para obtener un compuesto de fórmula (I-4). Se obtiene un compuesto de (I-5) en presencia de ácido sulfúrico y nitrito sódico a partir del compuesto de fórmula (I-4). El compuesto de fórmula (I-5) se hace reaccionar con 2-bromo-1,1-dietoxietano bajo una condición alcalina para obtener un compuesto de fórmula (I-6). El compuesto de fórmula (I-6) se somete a una reacción de ciclación con 3-bromo-5-(2,2 dietoxietoxi)-2-etilbenzoato bajo calentamiento y en una condición ácida para obtener un compuesto de fórmula (I-7). El compuesto de fórmula (I-7) se hace reaccionar con un compuesto de fórmula (la) en presencia de un catalizador bajo calentamiento y en una condición alcalina para obtener un compuesto de fórmula (I-8), en donde el reactivo alcalino que proporciona la condición alcalina para esta reacción es preferiblemente carbonato potásico, y el catalizador es preferiblemente tris(dibencilidenoacetona)dipaladio o (±)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftaleno. El compuesto de fórmula (I-8) se hace reaccionar con haluro de alquilo bajo una condición alcalina para obtener un compuesto de fórmula (I-9). El compuesto de fórmula (I-9) se hace reaccionar con W,W-dimetilformamida bajo una condición alcalina para obtener un compuesto de fórmula (1-10), en donde el reactivo alcalino que proporciona la condición alcalina para esta reacción es preferiblemente diisopropilamida de litio. El compuesto de fórmula (1-10) se reduce a un compuesto de fórmula (1-11) en presencia de un agente reductor, en donde el agente reductor bajo esta condición es preferiblemente borohidruro sódico. El compuesto de fórmula (1-11) se hace reaccionar con tribromuro de fósforo para obtener un compuesto de fórmula (1-12). El compuesto de fórmula (1-12) se hace reaccionar con R¹H para obtener un compuesto de fórmula (1-13). El compuesto de fórmula (1-13) se hidroliza bajo una condición alcalina para obtener un compuesto de fórmula (VI), en donde el reactivo alcalino que proporciona la condición alcalina para esta reacción es preferiblemente hidróxido sódico. El compuesto de fórmula (VI) se somete a una reacción de acilación con un compuesto de fórmula (VII) para obtener un compuesto de fórmula (I).

El reactivo que proporciona una condición alcalina incluye bases orgánicas y bases inorgánicas, en donde las bases orgánicas incluyen, pero sin limitación, trietilamina, W,W-diisopropiletilamina, n-butil litio, diisopropilamida de litio, acetato de potasio, ferc-butóxido sódico y ferc-butóxido potásico, y en donde las bases inorgánicas incluyen, pero sin limitación, hidruro sódico, fosfato de potasio, carbonato de sodio, carbonato potásico y carbonato de cesio.

El catalizador implicado incluye, pero sin limitación, 2-diciclohexilfosfino-2',4',6'-triisopropilbifenilo, (±)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftaleno, tris(dibencilidenoacetona)dipaladio, acetato de paladio, [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio, trifenilfosfina, tetraquistrifenilfosfina paladio.

En donde:

R^xse selecciona entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, haloalquilo, hidroxialquilo, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo, en donde el alquilo, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo está cada uno independiente y opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados entre el grupo que consiste en alquilo, halógeno, hidroxi, amino, alcoxicarbonilo, nitro, ciano, alcoxi, hidroxialquilo, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo;

X es halógeno;

R¹a R⁵, anillos A, p, q y n son como se define en la fórmula (I).

Realizaciones preferidas

La presente invención se describirá adicionalmente con referencia a los siguientes ejemplos, pero los ejemplos no deben considerarse como limitantes del alcance de la invención.

Ejemplos

Las estructuras de los compuestos se identifican mediante resonancia magnética nuclear (RMN) y/o espectrometría de masas (EM). La RMN se determina mediante una máquina Bruker AVANCE-400. Los disolventes para la determinación son dimetilsulfóxido deuterado (DMSO-cfó), cloroformo deuterado (CDCb) y metanol deuterado (CD³OD), el patrón interno es tetrametilsilano (TMS), y los desplazamientos químicos de RMN (8) se dan en 10^{‘ 6}(ppm).

La EM se determina mediante un espectrómetro de masas FINNIGAN LCQAd (IEN) (fabricante: Thermo, tipo: Finnigan LCQ advantage MAX).

La cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) se determinó en un espectrómetro de cromatografía líquida de alta presión Agilent 1200DAD (columna cromatográfica Sunfire C18, 150 x 4,6 mm) y un espectrómetro de cromatografía líquida de alta presión Waters 2695-2996 (columna cromatográfica Gimini C18, 150 x 4,6 mm).

Las tasas de inhibición de cinasa promedio y los valores de CI⁵⁰se determinan mediante un aparato NovoStar ELISA (BMG Co., Alemania).

Se usa placa de gel de sílice Yantai Huanghai HSGF254 o Qingdao GF254 para cromatografía de capa fina sobre gel de sílice (CCF). La dimensión de la placa de gel de sílice usada en CCF es de 0,15 mm a 0,2 mm, y la dimensión de la placa de gel de sílice usada en la purificación de producto es de 0,4 mm a 0,5 mm.

Se usa gel de sílice de Yantai Huanghai de 200 a 300 de malla como vehículo para cromatografía en columna.

Los materiales de partida conocidos de la presente invención pueden prepararse mediante los métodos de síntesis convencionales en la técnica, o pueden adquirirse de ABCR GmbH & Co. KG, Acros Organnics, Aldrich Chemical Company, Accela ChemBio Inc., o Dari chemical Company, etc.

A menos que se indique otra cosa, las reacciones se llevan a cabo en una atmósfera de argón o atmósfera de nitrógeno.

La expresión "atmósfera de argón" o "atmósfera de nitrógeno" significa que un matraz de reacción está equipado con un balón de argón o nitrógeno de 1 l.

La expresión "atmósfera de hidrógeno" significa que un matraz de reacción está equipado con un balón de hidrógeno de 1 l.

Las reacciones de hidrogenación presurizadas se realizan con un instrumento de hidrogenación Parr 3916EKX y un generador de hidrógeno QL-500 o un instrumento de hidrogenación HC2-SS.

En reacciones de hidrogenación, el sistema de reacción se lleva generalmente a vacío y se carga con hidrógeno, repitiéndose la operación anterior tres veces.

El reactor de microondas de tipo CEM Discover-S 908860 se usa en reacción de microondas.

A menos que se indique otra cosa, la solución utilizada en las reacciones se refiere a una solución acuosa.

A menos que se indique otra cosa, la temperatura de reacción en las reacciones se refiere a temperatura ambiente. La temperatura ambiente es la temperatura de reacción más apropiada, y varía de 20 °C a 30 °C.

El proceso de reacción se monitoriza mediante cromatografía de capa fina (CCF), y el sistema de disolvente de revelado incluye: A: sistema de diclorometano y metanol, B: sistema de n-hexano y acetato de etilo, C: sistema de éter de petróleo y acetato de etilo, D: acetona. La proporción del volumen del disolvente puede ajustarse de acuerdo con la polaridad de los compuestos.

El sistema de elución para la purificación de los compuestos por cromatografía en columna y cromatografía de capa fina incluye: A: sistema de diclorometano y metanol, B: sistema de n-hexano y acetato de etilo, C: n-hexano, sistema de acetato de etilo y diclorometano, D: sistema de éter de petróleo y acetato de etilo, E: acetato de etilo. La proporción del volumen del disolvente puede ajustarse de acuerdo con la polaridad de los compuestos, y algunas veces también puede añadirse un poco de reactivo alcalino, tal como trietilamina o un reactivo ácido.

Ejemplo 1

5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-W-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-carboxamida

Etapa 1

Ácido 3-bromo-2-etil-5-nitrobenzoico

Se añadió ácido 2-etilbenzoico 1a (20,0 g, 133 mmol, preparado por un método divulgado en "Journal of the American Chemical Society, 1991, 113(13), 4931-6") a 150 ml de ácido sulfúrico, entonces se añadió nitrato sódico (11,3 g, 133 mmol) en lotes en un baño de hielo. La mezcla se agitó durante 3 horas, entonces se añadió N-bromosuccinimida (2,6 g, 14,5 mmol) en lotes. El sistema de reacción se agitó durante 1 hora a 60 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, la solución de reacción se vertió en agua helada, se agitó bien y se filtró. El filtrado se lavó con agua y se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto ácido 3-bromo-2-etil-5-nitrobenzoico 1b (35 g) en forma de un sólido de color blanco, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 2

3-Bromo-2-etil-5-nitrobenzoato de metilo

El producto en bruto ácido 3-bromo-2-etil-5-nitrobenzoico 1b (35 g, 128 mmol) se disolvió en 200 ml de N,N-dimetilformamida, entonces se añadieron yodometano (21,8 g, 153 mmol) y carbonato potásico (35,3 g, 255 mmol). El sistema de reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, la solución de reacción se concentró a presión reducida. Se añadió agua en exceso y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con agua y solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto 3-bromo-2-etil-5-nitrobenzoato de metilo 1c (36 g) en forma de un aceite de color amarillo, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 3

5-Amino-3-bromo-2-etilbenzoato de metilo

El producto en bruto 3-bromo-2-etil-5-nitrobenzoato de metilo 1c (35,0 g, 121 mmol) se añadió a 250 ml de etanol y 150 ml de agua. La mezcla se calentó a 70 °C, se añadió cloruro de amonio (52,8 g, 969 mmol), entonces se añadió polvo de hierro (34 g, 606 mmol) en lotes. El sistema de reacción se agitó durante 2 horas a 70 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, la mezcla se filtró a través de celite mientras seguía caliente. La torta de filtro se lavó con etanol caliente, entonces el filtrado se combinó y se concentró a presión reducida. Se añadieron acetato de etilo y una solución saturada de bicarbonato sódico. Dos fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 5-amino-3-bromo-2-etilbenzoato de metilo 1d (22,0 g, rendimiento 70 %) en forma de un sólido de color amarillo.

Etapa 4

3-Bromo-2-etil-5-hidroxibenzoato de metilo

5-Amino-3-bromo-2-etilbenzoato de metilo 1d (15,0 g, 58 mmol) se disolvió en 10 ml de acetonitrilo, entonces se añadieron 200 ml de ácido sulfúrico al 10 %. La mezcla se agitó bien y se enfrió a 3 °C en un baño de hielo-sal, entonces se añadieron 10 ml de una solución previamente preparada de nitrito sódico (4,4 g, 64 mmol). La mezcla se agitó durante 4 horas a la temperatura anterior, añadiéndose gota a gota 200 ml de ácido sulfúrico al 50 %, entonces se agitó durante 1 hora a 90 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, la solución de reacción se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 3-bromo-2-etil-5-hidroxibenzoato de metilo 1e (5,5 g, rendimiento 37 %) en forma de un sólido de color pardo.

Etapa 5

3-Bromo-5-(2,2-dietoxietoxi)-2-etilbenzoato de metilo

3-Bromo-2-etil-5-hidroxibenzoato de metilo 1e (35 g, 135 mmol) se disolvió en 200 ml de W,W-dimetilformamida, entonces se añadieron 2-bromo-1,1-dietoxietano (40 g, 202 mmol) y carbonato potásico (37 g, 269 mmol). El sistema de reacción se agitó a 120 °C durante 12 horas. Una vez completada la reacción, la solución de reacción se concentró a presión reducida para retirar W,W-dimetilformamida. Se añadió agua, y la mezcla se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 3-bromo-5- (2,2-dietoxietoxi)-2-etilbenzoato de metilo 1f (40 g, rendimiento 80 %) en forma de un aceite de color amarillo claro.

Etapa 6

6- Bromo-5-etilbenzofuran-4-carboxilato de metilo

Se añadió ácido polifosfórico (30 g) a 400 ml de tolueno. La mezcla se calentó a 100 °C, se añadieron 50 ml de una solución previamente preparada de 3-bromo-5-(2,2-dietoxietoxi)-2-etilbenzoato de metilo 1f (40 g, 107 mmol) en tolueno con agitación. La mezcla se agitó durante 16 horas a 100 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, se decantó el sobrenadante. Se añadieron agua y acetato de etilo al residuo. Dos fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de carbonato sódico y solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 6-bromo-5-etilbenzofuran-4-carboxilato de metilo 1g (11,8 g, rendimiento 39 %) en forma de un sólido de color amarillo.

Etapa 7

5- Etil-6-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-carboxilato de metilo

6- bromo-5-etilbenzofuran-4-carboxilato de metilo 1g (11,0 g, 39 mmol), tetrahidro-2H-piran-4-amina (5,89 g, 58 mmol), tris(dibencilidenoacetona)dipaladio (3,6 g, 3,9 mmol), (±)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftaleno (4,86 g, 7,8 mmol) y carbonato de cesio (38 g, 117 mmol) se disolvieron en 100 ml de tolueno. La mezcla se agitó durante 12 horas a 100 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, la mezcla se filtró a través de una capa de celite, y la torta de filtro se lavó con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 5-etil-6-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-carboxilato de metilo 1h (10,0 g, rendimiento 85 %) en forma de un sólido de color amarillo.

Etapa 8

5-Et¡l-6-(etil(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo

5- Et¡l-6-((tetrahidro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo 1h (10,0 g, 0,033 mmol) se d¡solv¡ó en 150 ml de 1,2-dicloroetano, entonces se añadieron acetaldehído (7,2 g, 0,165 mmol) y ácido acético (9,9 g, 0,165 mmol). La mezcla se agitó durante 1 hora, entonces se añadió triacetoxiborohidruro sódico (20,8 g, 0,1 mmol). La mezcla se agitó durante 12 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, la solución de reacción se concentró a presión reducida, se neutralizó con una solución saturada de bicarbonato sódico, y se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 5-etil-6- (etil(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo 1¡ (7,8 g, rendimiento 71 %) en forma de un sólido de color blanco.

EM m/z (CL-EM): 332,4 [M+1]

Etapa 9

5-Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-il)am¡no)-2-form¡lbenzofuran-4-carbox¡lato de metilo

5-Et¡l-6-(etil(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo 1¡ (1,6 g, 4,8 mmol) se disolvió en 25 ml de tetrahidrofurano. La mezcla se enfrió a -70 °C, entonces se añadió diisopropilamida de litio 2,0 M (3,6 ml, 7,3 mmol) gota a gota en una atmósfera de argón. La mezcla se agitó durante 90 minutos, entonces se añadió N,N-dimetilformamida (536 mg, 7,3 mmol). La mezcla se agitó durante 2 horas, entonces se calentó lentamente a temperatura ambiente. Se añadió cloruro de amonio en exceso. La mezcla se agitó bien y se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 5-etil-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-form¡lbenzofuran-4-carboxilato de metilo 1j (1,3 g, rendimiento 75 %) en forma de un aceite de color amarillo.

EM m/z (IEN): 360,2 [M+1]

Etapa 10

5-Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)amino)-2-(h¡drox¡met¡l)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo

5-Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-il)am¡no)-2-form¡lbenzofuran-4-carbox¡lato de metilo 1j (1,4 g, 3,9 mmol) se disolvió en 5 ml de tetrahidrofurano y 10 ml de metanol, entonces se añadió borohidruro sódico (222 mg, 5,8 mmol). La mezcla se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, la solución de reacción se concentró a presión reducida, se añadieron agua y una solución saturada de bicarbonato sódico, y la mezcla se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-il)am¡no)-2-(h¡drox¡met¡l)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo 1k (1,4 g, rendimiento 99 %) en forma de un aceite de color amarillo.

Etapa 11

2-(Bromomet¡l)-5-et¡l-6-(etil(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo

5-Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)amino)-2-(h¡drox¡met¡l)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo 1k (1,0 g, 2,8 mmol) se disolvió en 30 ml de tetrahidrofurano, entonces se añadió tribromuro de fósforo (1,12 g, 4,2 mmol) gota a gota. La mezcla se agitó durante 12 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, la mezcla se neutralizó con una solución saturada de bicarbonato sódico, y se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto 2-(bromometil)-5-et¡l-6-(et¡l(tetrahidro-2H-piran-4-¡l)amino)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo 11 (1,15 g) en forma de un aceite de color amarillo, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 12

5-Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-(piper¡d¡n-1-¡lmet¡l)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo

El producto en bruto 2-(bromometil)-5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carboxilato de metilo 11 (1,15 g, 2,7 mmol) se disolvió en 15 ml de acetonitrilo, entonces se añadieron 10 ml de una solución previamente preparada de piperidina (362 mg, 4,3 mmol) en acetonitrilo gota a gota. La mezcla se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, la solución de reacción se concentró a presión reducida. Se añadieron acetato de etilo y una solución saturada de bicarbonato sódico. Dos fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-carboxilato de metilo 1m (1,2 g, rendimiento 99 %) en forma de un aceite de color amarillo.

EM m/z (CL-EM): 429,2 [M+1]

Etapa 13

Ácido 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-carboxílico

5-Etil -6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-carboxilato de metilo 1m (1,2 g, 2,7 mmol) se disolvió en 5 ml de tetrahidrofurano y 20 ml de metanol, entonces se añadieron 5 ml de solución de hidróxido sódico 4 M. La mezcla se agitó durante 12 horas a 60 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, se añadió ácido clorhídrico concentrado para ajustar el pH de la solución de reacción a 4. La mezcla se concentró a presión reducida, y el residuo se disolvió en una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 5:1) y se filtró. La torta de filtro se lavó con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 5:1). El filtrado se combinó y se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto ácido 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-carboxílico 1n (1,1 g) en forma de un sólido de color amarillo, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

EM m/z (CL-EM): 415,2 [M+1]

Etapa 14

5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-carboxamida

El producto en bruto ácido 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-carboxílico 1n (150 mg, 0,36 mmol) se disolvió en 5 ml de N,N-dimetilformamida, entonces se añadieron 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (104 mg, 0,54 mmol), 1-hidroxibenzotriazol (73 mg, 0,54 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (232 mg, 1,8 mmol). La mezcla se agitó 1 horas, entonces se añadió clorhidrato de 3-(aminometil)-4-metoxi-6-metilpiridin-2(1H)-ona 1o (96 mg, 0,47 mmol, preparado por un método divulgado en la solicitud de patente "WO2014177982"). La mezcla se agitó durante 12 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, se añadió agua en exceso, y la solución de reacción se extrajo con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 8:1). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con agua y solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-carboxamida 1 (155 mg, rendimiento 76 %) en forma de un sólido de color blanco.

EM m/z (IEN): 565,3 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-cfe): 8 11,44 (s, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,40 (s, 1H), 6,53 (s a, 1H), 6,10 (s, 1H), 4,29 (d, 2H), 3,85 (s a, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,56 (s a, 2H), 3,22 (t, 2H), 3,03-3,08 (m, 2H), 2,93-2,98 (m, 1H), 2,78-2,84 (m, 2H), 2,42 (s a, 4H), 2,18 (s, 3H), 1,64-1,67 (d a, 2H), 1,47-1,56 (m, 6H), 1,38 (s a, 2H), 1,06 (t, 3H), 0,83 (t, 3H).

Ejemplo 2

N-((4,6-Dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-carboxamida

Ácido 5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-(p¡per¡d¡n-1-¡lmet¡l)benzofuran-4-carboxíl¡co 1n (1,0 g, 2,4 mmol) se d¡solv¡ó en 30 ml de W,W-d¡met¡lformam¡da, entonces se añad¡eron 1-et¡l-3-(3-d¡met¡lam¡noprop¡l)carbod¡¡m¡da (696 mg, 3,6 mmol), 1-h¡drox¡benzotr¡azol (490 mg, 3,6 mmol) y W,W-d¡¡soprop¡let¡lam¡na (1,56 g, 12,1 mmol). La mezcla se ag¡tó durante 1 hora, entonces se añad¡ó clorhidrato de 3-(am¡nomet¡l)-4,6-d¡met¡lp¡r¡d¡n-2(1H)-ona 2a (593 mg, 3,0 mmol, preparado por un método d¡vulgado en la sol¡c¡tud de patente "WO2014097041"). La mezcla se agitó durante 12 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón, se añad¡ó agua en exceso, y la soluc¡ón de reacc¡ón se extrajo con una mezcla de d¡clorometano y metanol (V:V = 8:1). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con agua y soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co, se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía en columna sobre gel de síl¡ce con el s¡stema de eluc¡ón A para obtener el compuesto del título W-((4,6-d¡met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)-5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-(p¡per¡d¡n-1-¡lmet¡l)benzofuran-4-carboxam¡da 2 (750 mg, rend¡m¡ento 57 %) en forma de un sól¡do de color blanco.

EM m/z (IEN): 549,7 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de): 811,48 (s, 1H), 8,15 (t, 1H), 7,39 (s, 1H), 6,46 (s, 1H), 5,86 (s, 1H), 4,32 (d, 2H), 3,83 (d, 2H), 3,54 (s, 2H), 3,21 (t, 2H), 3,01-3,07 (m, 2H), 2,92-2,97 (m, 1H), 2,77-2,82 (m, 2H), 2,39 (s a, 4H), 2,23 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,64-1,67 (d a, 2H), 1,47-1,55 (m, 6H), 1,36-1,37 (d a, 2H), 1,02 (t, 3H), 0,82 (t, 3H).

Ejemplo 3

5-Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-W-((4-et¡l-6-met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)-2-(p¡per¡d¡n-1-¡lmet¡l)benzofuran-4-carboxam¡da

Ác¡do 5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-(p¡per¡d¡n-1-¡lmet¡l)benzofuran-4-carboxíl¡co 1n (50 mg, 0,12 mmol) se d¡solv¡ó en 3 ml de W,W-d¡met¡lformam¡da, entonces se añad¡eron 1-et¡l-3-(3 dimetilaminopropil)carbodiimida (35 mg, 0,18 mmol), 1-hidroxibenzotriazol (24 mg, 0,18 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (78 mg, 0,60 mmol). La mezcla se agitó durante 1 hora, entonces se añadió clorhidrato de 3-(aminometil)-4-etil-6-metilpiridin-2(1H)-ona 3a (36 mg, 0,18 mmol, preparado por un método divulgado en la solicitud de patente "WO2013173441"). La mezcla se agitó durante 12 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, se añadió agua en exceso, y la solución de reacción se extrajo con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 8:1). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con agua y solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-etil-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-carboxamida 3 (58 mg, rendimiento 85 %) en forma de un sólido de color blanco.

EM m/z (IEN): 563,7 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de): 811,51 (s, 1H), 8,12 (t, 1H), 7,39 (s, 1H), 6,47 (s, 1H), 5,91 (s, 1H), 4,33 (d,2H), 3,81 3,83 (d a, 2H), 3,54 (s a, 2H), 3,20 (t, 2H), 3,01-3,06 (m, 2H), 2,91-2,97 (m, 1H), 2,76-2,82 (m, 2H), 2,59 (c, 2H), 2,39 (s a, 4H), 2,13 (s, 3H), 1,63-1,66 (d a, 2H), 1,48-1,50 (m, 6H), 1,36 (s a, 2H), 1,37 (t, 3H), 1,01 (t, 3H), 0,81 (t, 3H).

Ejemplo 4

6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-metil-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-carboxamida

Etapa 1

5-Amino-3-bromo-2-metilbenzoato de metilo

Se añadió 3-bromo-2-metil-5-nitrobenzoato de metilo 4a (13 g, 47,3 mmol, preparado por un método divulgado en la solicitud de patente "WO2012061602") a 200 ml de etanol y 50 ml de agua. La mezcla se calentó a 70 °C, entonces se añadió cloruro de amonio (20,6 g, 378 mmol), y se añadió polvo de hierro (13,3 g, 236 mmol) en lotes. El sistema de reacción se agitó durante 2 horas a 70 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, la mezcla se filtró a través de una capa de celite mientras seguía caliente. La torta de filtro se lavó con etanol caliente, entonces el filtrado se combinó y se concentró a presión reducida. El residuo se neutralizó con una solución saturada de bicarbonato sódico, y se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 5-amino-3-bromo-2-metilbenzoato de metilo 4b (11,0 g, rendimiento 95 %) en forma de un sólido de color amarillo.

Etapa 2

3-Bromo-5-hidroxi-2-metilbenzoato de metilo

5- Amino-3-bromo-2-metilbenzoato de metilo 4b (3,0 g, 0,012 mmol) se suspendió en 20 ml de ácido sulfúrico al 10 %. La mezcla se enfrió a 0 °C, entonces se añadieron 5 ml de una solución previamente preparada de nitrito sódico (1,0 g, 14,7 mmol) gota a gota. Después de agitar durante 3 horas a la temperatura anterior, la solución de reacción se vertió en 30 ml de ácido sulfúrico al 10 % preparado previamente a 80 °C, entonces se agitó durante 1 hora a 80 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, la solución de reacción se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 3-bromo-5-hidroxi-2-metilbenzoato de metilo 4c (1,1 g, rendimiento 32 %) en forma de un sólido de color amarillo.

Etapa 3

3-Bromo-5-(2,2-dietoxietoxi)-2-metilbenzoato de metilo

3-Bromo-5-hidroxi-2-metilbenzoato de metilo 4c (800 mg, 3,3 mmol) se disolvió en 15 ml de W,W-dimetilformamida, entonces se añadieron 2-bromo-1,1-dietoxietano (965 mg, 4,9 mmol) y carbonato potásico (900 mg, 6,5 mmol). El sistema de reacción se agitó durante 12 horas a 120 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, se añadió agua en exceso, y la mezcla se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 3-bromo-5-(2,2-dietoxietoxi)-2-metilbenzoato de metilo 4d (820 mg, rendimiento 69 %) en forma de un aceite de color amarillo claro.

Etapa 4

6- Bromo-5-metilbenzofuran-4-carboxilato de metilo

3-Bromo-5-(2,2-dietoxietoxi)-2-metilbenzoato de metilo 4d (650 mg, 1,8 mmol) se disolvió en 10 ml de tolueno, entonces se añadieron 10 ml de una solución previamente preparada de ácido polifosfórico (10 g) en tolueno. La mezcla se agitó durante 5 horas a 100 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, se decantó la fase orgánica superior. El residuo se añadió con agua, y se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de carbonato sódico y solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 6-bromo-5-metilbenzofuran-4-carboxilato de metilo 4e (220 mg, rendimiento 45 %) en forma de un sólido de color amarillo.

Etapa 5

5- Met¡l-6-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo

6- bromo-5-metilbenzofuran-4-carboxilato de met¡lo 4e (250 mg, 0,93 mmol), tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-am¡na (141 mg, 1,4 mmol), tr¡s(d¡benc¡l¡denoacetona)d¡palad¡o (85 mg, 0,09 mmol), (±)-2,2'-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)-1,1'-b¡naftaleno (116 mg, 0,19 mmol) y carbonato de ces¡o (909 mg, 2,79 mmol) se d¡solv¡eron en 10 ml de tolueno. La mezcla se ag¡tó durante 12 horas a 100 °C. Después de que se hub¡era completado la reacc¡ón, la mezcla se f¡ltró a través de una capa de cel¡te, y la torta de f¡ltro se lavó con acetato de et¡lo. Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón B para obtener el compuesto del título 5-met¡l-6-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo 4f (250 mg, rend¡m¡ento 90 %) en forma de un sól¡do de color amar¡llo.

Etapa 6

6-(Et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-5-met¡lbenzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo

5- Met¡l-6-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo 4f (250 mg, 0,87 mmol) se d¡solv¡ó en 10 ml de 1,2-d¡cloroetano, entonces se añad¡eron acetaldehído (190 mg, 4,3 mmol) y ác¡do acét¡co (260 mg, 4,3 mmol). La mezcla se ag¡tó durante 1 hora, entonces se añad¡ó tr¡acetox¡boroh¡druro sód¡co (545 mg, 2,6 mmol). La mezcla se ag¡tó durante 12 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón, la soluc¡ón de reacc¡ón se concentró a pres¡ón reduc¡da. Se añad¡eron acetato de et¡lo y una soluc¡ón saturada de b¡carbonato sód¡co. Dos fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con acetato de et¡lo. Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co, se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón B para obtener el compuesto del título 6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-5-met¡lbenzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo 4g (180 mg, rend¡m¡ento 56 %) en forma de un ace¡te de color amar¡llo.

EM m/z (CL-EM): 318,2 [M+1]

Etapa 7

6- (Et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-form¡l-5-met¡lbenzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo

6-(Et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l-)am¡no)-5-met¡lbenzofuran-4-carbox¡lato de 5 met¡lo 4g (180 mg, 0,57 mmol) se d¡solv¡ó en 5 ml de tetrah¡drofurano. La mezcla se enfr¡ó a -70 °C, se añad¡ó d¡¡soprop¡lam¡da de l¡t¡o 2,0 M (0,57 ml, 1,14 mmol) gota a gota en una atmósfera de argón. La mezcla se ag¡tó durante 1 hora, entonces se añad¡ó 4-form¡lmorfol¡na (98 mg, 0,85 mmol). La mezcla se ag¡tó durante 1 hora, entonces se calentó lentamente a temperatura amb¡ente, y se añad¡ó soluc¡ón de cloruro de amon¡o. La mezcla se ag¡tó durante 20 m¡nutos, y se extrajo tres veces con acetato de et¡lo. Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co, se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón B para obtener el compuesto del título 6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-form¡l-5-met¡lbenzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo 4h (130 mg, rend¡m¡ento 66 %) en forma de un ace¡te de color amar¡llo.

Etapa 8

6-(Et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-(h¡drox¡met¡l)-5-met¡lbenzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo

6-(Et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-form¡l-5-met¡lbenzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo 4h (130 mg, 0,38 mmol) se d¡solv¡ó en 1 ml de tetrah¡drofurano y 5 ml de metanol, entonces se añad¡ó boroh¡druro sód¡co (22 mg, 0,57 mmol) en lotes. La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante 1 hora a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón, la soluc¡ón de reacc¡ón se concentró a pres¡ón reduc¡da. Se añad¡ó soluc¡ón saturada de b¡carbonato sód¡co, y la mezcla se extrajo tres veces con acetato de et¡lo. Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co, se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da para obtener el compuesto del título en bruto 6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-(h¡drox¡met¡l)-5-met¡lbenzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo 4¡ (120 mg) en forma de un ace¡te de color amar¡llo, que se usó d¡rectamente en la s¡gu¡ente etapa s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal. EM m/z (CL-EM): 348,0 [M+1]

Etapa 9

2-(Bromomet¡l)-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-5-met¡lbenzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo

El producto en bruto 6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-(h¡drox¡met¡l)-5-met¡lbenzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo 4¡ (130 mg, 0,36 mmol) se d¡solv¡ó en 5 ml de tetrah¡drofurano, entonces se añad¡ó tr¡bromuro de fósforo (146 mg, 0,54 mmol) gota a gota. La mezcla se agitó durante 12 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, se añadió agua, y la mezcla se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con una solución saturada de bicarbonato sódico y solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto 2-(bromometil)-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metilbenzofuran-4-carboxilato de metilo 4j (152 mg) en forma de un aceite de color amarillo, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 10

6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metil-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-carboxilato de metilo

El producto en bruto 2-(bromometil)-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metilbenzofuran-4-carboxilato de metilo 4j (140 mg, 0,33 mmol) se disolvió en 5 ml de acetonitrilo, entonces se añadieron 5 ml de una solución previamente preparada de piperidina (56 mg, 0,66 mmol) en acetonitrilo gota a gota. La mezcla se agitó durante 1 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, la solución de reacción se concentró a presión reducida, entonces se añadieron acetato de etilo y una solución saturada de bicarbonato sódico. Dos fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-metil-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-carboxilato de metilo 4k (120 mg, rendimiento 86 %) en forma de un aceite incoloro.

Etapa 11

Ácido 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metil-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-carboxílico

6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metil-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-carboxilato de metilo 4k (120 mg, 0,29 mmol) se disolvió en 10 ml de metanol, entonces se añadieron 3 ml de solución de hidróxido sódico 4 M. La mezcla se agitó durante 12 horas a 60 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, se añadió ácido clorhídrico concentrado para ajustar el pH de la solución de reacción a 4. La mezcla se concentró a presión reducida, y el residuo se disolvió en una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 5:1) y se filtró. La torta de filtro se lavó con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 5:1). El filtrado se combinó y se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto ácido 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metil-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-carboxílico 4¡ (120 mg) en forma de un sólido de color amarillo, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

EM m/z (CL-EM): 399,0 [M+1]

Etapa 12

El producto en bruto ácido 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metil-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-carboxílico 4¡ (40 mg, 0,1 mmol) se disolvió en 3 ml de N,N-dimetilformamida, entonces se añadieron 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (29 mg, 0,15 mmol), 1-hidroxibenzotriazol (20 mg, 0,15 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (63 mg, 0,48 mmol). La mezcla se agitó durante 16 horas, entonces se añadió clorhidrato de 3-(aminometil)-4-metoxi-6-metilpiridin-2(1H)-ona 1o (26 mg, 0,13 mmol). La mezcla se agitó durante 12 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, se añadió agua en exceso, y la solución de reacción se extrajo con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 8:1). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con agua y solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-metil-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-carboxamida 4 (35 mg, rendimiento 64 %) en forma de un sólido de color blanco.

EM m/z (IEN): 551,7 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 811,45 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,40 (s, 1H), 6,91 (s a, 1H), 6,12 (s, 1H), 4,30 (d, 2H), 3,84 (s a, 5H), 3,23 (t, 2H), 3,04-3,09 (m, 2H), 2,95-3,01 (m, 1H), 2,62 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 1,64-1,81 (d a, 6H), 1,50-1,55 (m, 4H), 1,38 (s a, 2H), 0,81 (t, 3H).

Ejemplo 5

5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-carboxamida

Etapa 1

4-((5-Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-4-(metox¡carbon¡l)benzofuran-2-il)met¡l)p¡peraz¡na-1-carbox¡lato de ferc-butilo

Se añad¡eron 5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-il)am¡no)-2-form¡lbenzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo 1j (30 mg, 0,083 mmol), 1-(ferc-butoxicarbon¡l)piperaz¡na (24 mg, 0,13 mmol) y ácido acético (25 mg, 0,42 mmol) a 5 ml de metanol. La mezcla se ag¡tó durante 1 hora, entonces se añad¡ó tr¡acetox¡boroh¡druro sód¡co (53 mg, 0,25 mmol). La mezcla se agitó durante 12 horas. Una vez completada la reacc¡ón, la soluc¡ón de reacc¡ón se concentró a pres¡ón reduc¡da, se neutral¡zó con una soluc¡ón saturada de b¡carbonato sód¡co, se extrajo tres veces con acetato de et¡lo. Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co, se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se purificó por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón B para obtener el compuesto del título 4-((5-etil-6-(etil(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-4-(metox¡carbonil)benzofuran-2-¡l)met¡l)p¡peraz¡na-1-carbox¡lato de ferc-butilo 5a (40 mg, rend¡m¡ento 90 %) en forma de un ace¡te de color amar¡llo.

EM m/z (CL-EM): 530,3 [M+1]

Etapa 2

5- Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-((4-¡sopropilp¡peraz¡n-1-¡l)met¡l)benzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo

Se añad¡ó 4-((5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-4-(metoxicarbon¡l)benzofuran-2-¡l)met¡l)p¡peraz¡na-1-carbox¡lato de ferc-butilo 5a (40 mg, 0,075 mmol) a 10 ml de ác¡do tr¡fluoroacét¡co. La mezcla se ag¡tó durante 1 hora a temperatura amb¡ente, después se concentró a pres¡ón reduc¡da. Se añad¡eron 5 ml de W,W-dimet¡lformamida y carbonato potás¡co (21 mg, 0,15 mmol) al res¡duo, y la mezcla se ag¡tó durante 30 m¡nutos. Entonces, se añad¡ó 1-yodopropano (20 mg, 0,11 mmol), y el s¡stema de reacc¡ón se agitó durante 1 hora a 70 °C. Después de que se hub¡era completado la reacc¡ón, la soluc¡ón de reacc¡ón se vert¡ó en agua en exceso, y se extrajo tres veces con una mezcla de d¡clorometano y metanol (V:V = 8:1). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con agua y soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co, se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se purificó por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón A para obtener el compuesto del título 5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-((4-isoprop¡lp¡peraz¡n-1-¡l)met¡l)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo 5b (25 mg, rendimiento 70 %) en forma de un aceite incoloro.

EM m/z (CL-EM): 472,3 [M+1]

Etapa 3

Ácido 5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-((4-¡soprop¡lp¡peraz¡n-1-¡l)met¡l)benzofuran-4-carboxíl¡co

5-Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-((4-¡soprop¡lp¡peraz¡n-1-¡l)met¡l)benzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo 5b (10 mg, 0,021 mmol) se d¡solv¡ó en 3 ml de metanol y 1 ml de tetrah¡drofurano, entonces se añad¡eron 13 ml de soluc¡ón de h¡dróx¡do sód¡co 2 M. El s¡stema de reacc¡ón se ag¡tó durante 12 horas a 60 °C. Después de que se hub¡era completado la reacc¡ón, la soluc¡ón de reacc¡ón se neutral¡zó con ác¡do sulfúr¡co concentrado, después se concentró a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo se d¡solv¡ó en una mezcla de d¡clorometano y metanol (V:V = 5:1) y se f¡ltró. La torta de f¡ltro se lavó con una mezcla de d¡clorometano y metanol (V:V = 5:1). El f¡ltrado se comb¡nó y se concentró a pres¡ón reduc¡da para obtener el compuesto del título en bruto ác¡do 5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-((4-¡soprop¡lp¡peraz¡n-1-¡l)met¡l)benzofuran-4-carboxíl¡co 5c (9 mg) en forma de un sól¡do de color blanco, que se usó d¡rectamente en la s¡gu¡ente etapa s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal.

EM m/z (CL-EM): 458,4 [M+1]

Etapa 4

5-Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-((4-¡soprop¡lp¡peraz¡n-1-¡l)met¡l)-N-((4-metox¡-6-met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)benzofuran-4-carboxam¡da

El producto en bruto ác¡do 5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-((4-¡soprop¡lp¡peraz¡n-1-¡l)met¡l)benzofuran-4-carboxíl¡co 5c (10 mg, 0,022 mmol) se d¡solv¡ó en 3 ml de N,N-d¡met¡lformam¡da, entonces se añad¡eron 1-et¡l-3-(3-d¡met¡lam¡noprop¡l)carbod¡¡m¡da (7 mg, 0,033 mmol), 1-h¡drox¡benzotr¡azol (5 mg, 0,033 mmol) y N,N-d¡¡soprop¡let¡lam¡na (6 mg, 0,044 mmol). La mezcla se ag¡tó durante 30 m¡nutos, entonces se añad¡ó clorh¡drato de 3-(am¡nomet¡l)-4-metox¡-6-met¡lp¡r¡d¡n-2(1H)-ona 1o (5,8 mg, 0,028). La mezcla se ag¡tó durante 12 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón, se añad¡ó agua en exceso, y la soluc¡ón de reacc¡ón se extrajo con una mezcla de d¡clorometano y metanol (V:V = 8:1). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con agua y soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co, se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón A para obtener el compuesto del título 5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-((4-¡soprop¡lp¡peraz¡n-1-¡l)met¡l)-N-((4-metox¡-6-met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)benzofuran-4-carboxam¡da 5 (9 mg, rend¡m¡ento 69 %) en forma de un sól¡do de color blanco. EM m/z (IEN): 608,6 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 811,45 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,39 (s, 1H), 6,56 (s a, 1H), 6,11 (s, 1H), 4,29 (d, 2H), 3,85 (s a, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,63 (s a, 3H), 3,22 (t, 2H), 3,03-3,07 (m, 2H), 2,93-2,99 (m, 2H), 2,79-2,82 (m, 2H), 2,34-2,68(s a, 8H), 2,19 (s, 3H), 1,64-1,67 (d a, 2H), 1,50-1,52 (m, 2H), 1,24-1,26 (d a, 2H), 1,06 (t, 3H), 0,98 (s a, 6H), 0,83 (t, 3H).

Ejemplo 6

5-Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-N-((4-metox¡-6-met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)-2-(morfol¡nomet¡l)benzofuran-4-carboxam¡da

Etapa 1

6-Bromo-5-etil-2-formilbenzofuran-4-carboxilato de metilo

6-Bromo-5-etilbenzofuran-4-carboxilato de metilo 1g (260 mg, 0,92 mmol) se disolvió en 8 ml de tetrahidrofurano. La mezcla se enfrió a -70 °C, entonces se añadió diisopropilamida de litio 2,0 M (0,92 ml, 1,84 mmol) gota a gota en una atmósfera de argón. La mezcla se agitó durante 1 hora, entonces se añadió 4-formilmorfolina (158 mg, 1,38 mmol). La reacción se calentó lentamente a temperatura ambiente, y se añadió cloruro de amonio en exceso. La mezcla se agitó bien, y se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 6-bromo-5-etil-2-formilbenzofuran-4-carboxilato de metilo 6a (80 mg, rendimiento 48 %) en forma de un sólido de color amarillo y blanco.

Etapa 2

6-Bromo-5-etil-2-(hidroximetil)benzofuran-4-carboxilato de metilo

6-Bromo-5-etil-2-formilbenzofuran-4-carboxilato de metilo 6a (80 mg, 0,26 mmol)) se disolvió en 4 ml de metanol y 0,5 ml de tetrahidrofurano, entonces se añadió borohidruro sódico (20 mg, 0,51 mmol) en lotes a temperatura ambiente. La mezcla se agitó durante 3 minutos. Una vez completada la reacción, se añadieron acetato de etilo y una solución saturada de bicarbonato sódico. Dos fases se separaron, y la mezcla se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto 6-bromo-5-etil-2-(hidroximetil)benzofuran-4-carboxilato de metilo 6b (80 mg) en forma de un sólido de color blanco, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 3

6-Bromo-5-etil-2-(morfolinometil)benzofuran-4-carboxilato de metilo

El producto en bruto 6-bromo-5-etil-2-(hidroximetil)benzofuran-4-carboxilato de metilo 6b (80 mg, 0,26 mmol) se disolvió en 5 ml de diclorometano, entonces se añadieron cloruro de metanosulfonilo (45 mg, 0,38 mmol) y ácido trifluoroacético (130 mg, 1,29 mmol). La mezcla se agitó durante 12 horas. La mezcla se concentró a presión reducida, entonces se añadieron 5 ml de W,W-dimetilformamida, carbonato potásico (71 mg, 0,51 mmol) y morfolina (40 mg, 0,51 mmol). El sistema de reacción se agitó durante 1 hora a 80 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, se añadió agua, y la mezcla se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 6-bromo-5-etil-2-(morfolinometil)benzofuran-4-carboxilato de metilo 6c (65 mg, rendimiento 64 %) en forma de un sólido de color blanco.

EM m/z (IEN): 382,0 [M+1]

Etapa 4

5- Etil-2-(morfolinometil)-6-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-carboxilato de metilo

6- Bromo-5-etil-2-(morfolinometil)benzofuran-4-carboxilato de metilo 6c (90 mg, 0,24 mmol), tetrahidro-2H-piran-4-amina (36 mg, 0,35 mmol), tris(dibencilidenoacetona)dipaladio (22 mg, 0,02 mmol), (±)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftaleno (30 mg, 0,05 mmol) y carbonato de cesio (230 mg, 0,71 mmol) se disolvieron en 5 ml de tolueno. La mezcla se agitó durante 12 horas a 100 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, la mezcla se filtró a través de una capa de celite. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 5-etil-2-(morfolinometil)-6-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-carboxilato de metilo 6d (85 mg, rendimiento 89 %) en forma de un sólido de color blanco.

EM m/z (CL-EM): 401,2 [M+1]

Etapa 5

5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(morfolinometil)benzofuran-4-carboxilato de metilo

5-Etil-2-(morfolinometil)-6-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-carboxilato de metilo 6d (85 mg, 0,21 mmol) se disolvió en 5 ml de 1,2-dicloroetano, entonces se añadieron acetaldehído (93 mg, 2,1 mmol) y ácido acético (63 mg, 1,06 mmol). La mezcla se agitó durante 2 horas, entonces se añadió triacetoxiborohidruro sódico (133 mg, 0,63 mmol). La mezcla se agitó durante 12 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, la solución de reacción se concentró a presión reducida, se neutralizó con una solución saturada de bicarbonato sódico, y se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(morfolinometil)benzofuran-4-carboxilato de metilo 6e (75 mg, rendimiento 82 %) en forma de un sólido de color blanco.

EM m/z (CL-EM): 344,1 [M-86]

Etapa 6

Ácido 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(morfolinometil)benzofuran-4-carboxílico

5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(morfolinometil)benzofuran-4-carboxilato de metilo 6e (75 mg, 0,17 mmol) se disolvió en 1 ml de tetrahidrofurano y 3 ml de metanol, entonces se añadieron 3 ml de solución de hidróxido sódico 4 M. La mezcla se agitó durante 12 horas a 60 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, se añadió ácido clorhídrico concentrado para ajustar el pH de la solución de reacción a 4. La mezcla se concentró a presión reducida. El residuo se lavó con metanol y se filtró para retirar un sólido de color blanco. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto ácido 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(morfolinometil)benzofuran-4-carboxílico 6f (71 mg) en forma de un sólido de color blanco, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 7

5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-W-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(morfolinometil)benzofuran-4-carboxamida

El producto en bruto ácido 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(morfolinometil)benzofuran-4-carboxílico 6f (45 mg, 0,11 mmol) se disolvió en 5 ml de W,W-dimetilformamida, entonces se añadieron 1-etil-3-(3 dimetilaminopropil)carbodiimida (31 mg, 0,16 mmol), 1-hidroxibenzotriazol (22 mg, 0,16 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (70 mg, 0,54 mmol). La mezcla se agitó durante 1 hora, entonces se añadió clorhidrato de 3-(aminometil)-4-metoxi-6-metilpiridin-2(1H)-ona 1o (33 mg, 0,16 mmol). La mezcla se agitó durante 36 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, se añadió agua en exceso, y la solución de reacción se extrajo con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 8:1). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con agua y solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(morfolinometil)benzofuran-4-carboxamida 6 (35 mg, rendimiento 57 %) en forma de un sólido de color blanco.

EM m/z (IEN): 567,4 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 811,43 (s, 1H), 7,99 (t, 1H), 7,39 (s, 1H), 6,54 (s, 1H), 6,10 (s, 1H), 4,28 (d, 2H), 3,84 (s a, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,59 (s, 2H), 3,55-3,57 (m, 4H), 3,21 (t, 2H), 3,02-3,07 (m, 2H), 2,92-2,97 (m, 1H), 2,78-2,83 (m, 2H), 2,43 (s a, 4H), 2,18 (s, 3H), 1,64-1,67 (d a, 2H), 1,45-1,55 (m, 2H), 1,05 (t, 3H), 0,82 (t, 3H).

Ejemplo 7

2-((4,4-Difluoropiperidin-1-il)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-carboxamida

Etapa 1

2-((4,4-Difluoropiperidin-1-il)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-carboxilato de metilo

Se añadieron 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-formilbenzofuran-4-carboxilato de metilo 1j (50 mg, 0,14 mmol), clorhidrato de 4,4-difluoropiperidina (33 mg, 0,21 mmol) y ácido acético (42 mg, 0,49 mmol) a 5 ml de metanol. La mezcla se agitó 1 horas, entonces se añadieron tamices moleculares y triacetoxiborohidruro sódico (88 mg, 0,42 mmol). La mezcla se agitó durante 12 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, la mezcla se neutralizó con una solución saturada de bicarbonato sódico, y se extrajo con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 5:1). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 2-((4,4d¡fluorop¡per¡d¡n-1-¡l)met¡l)-5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo 7a (25 mg, rendimiento 45 %) en forma de un ace¡te ¡ncoloro.

EM m/z (IEN): 465,1 [M+1]

Etapa 2

Ác¡do 2-((4,4-d¡fluorop¡per¡d¡n-1-¡l)met¡l)-5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carboxíl¡co

2-((4,4-D¡fluorop¡per¡d¡n-1-¡l)met¡l)-5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo 7a (20 mg, 0,043 mmol) se d¡solv¡ó en 1 ml de tetrah¡drofurano y 3 ml de metanol, entonces se añad¡eron 3 ml de soluc¡ón de h¡dróx¡do sód¡co 4 M. La mezcla se ag¡tó durante 12 horas a 60 °C. Después de que se hub¡era completado la reacc¡ón, la soluc¡ón de reacc¡ón se neutral¡zó con ác¡do clorhídrico concentrado, después se concentró a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo se d¡solv¡ó en una mezcla de d¡clorometano y metanol (V:V = 5:1) y se f¡ltró. La torta de f¡ltro se lavó con una mezcla de d¡clorometano y metanol (V:V = 5:1). El f¡ltrado se comb¡nó y se concentró a pres¡ón reduc¡da para obtener el compuesto del título en bruto ác¡do 2-((4,4-d¡fluorop¡per¡d¡n-1-¡l)met¡l)-5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4- ¡l)am¡no)benzofuran-4-carboxíl¡co 7b (20 mg) en forma de un sólido de color blanco, que se usó d¡rectamente en la s¡gu¡ente etapa s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal.

Etapa 3

2-((4,4-D¡fluorop¡per¡d¡n-1-¡l)met¡l)-5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-W-((4-metox¡-6-met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)benzofuran-4-carboxam¡da

El producto en bruto ác¡do 2-((4,4-d¡fluorop¡per¡d¡n-1-¡l)met¡l)-5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carboxíl¡co 7b (20 mg, 0,044 mmol) se d¡solv¡ó en 5 ml de W,W-d¡met¡lformam¡da, entonces se añad¡eron 1-et¡l-3-(3-d¡met¡lam¡noprop¡l)carbod¡¡m¡da (13 mg, 0,066), 1-h¡drox¡benzotr¡azol (9 mg, 0,066 mmol) y W,W-d¡¡soprop¡let¡lam¡na (29 mg, 0,22 mmol). La mezcla se ag¡tó 1 horas, entonces se añad¡ó clorh¡drato de 3-(am¡nomet¡l)-4-metox¡-6-met¡lp¡r¡d¡n-2(1H)-ona 1o (12 mg, 0,058 mmol). La mezcla se ag¡tó durante 12 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón, se añad¡ó agua en exceso, y la soluc¡ón de reacc¡ón se extrajo con una mezcla de d¡clorometano y metanol (V:V = 8:1). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con agua y soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co, se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se futraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón A para obtener el compuesto del título 2-((4,4-d¡fluorop¡per¡d¡n-1-¡l)met¡l)-5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-W-((4-metox¡-6-met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)benzofuran-4-carboxam¡da 7 (21 mg, rend¡m¡ento 78 %) en forma de un sól¡do de color blanco. EM m/z (IEN): 601,5 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 811,43 (s, 1H), 8,00 (t, 1H), 7,39 (s, 1H), 6,55 (s, 1H), 6,10 (s, 1H), 4,28 (d, 2H), 3,84 (s a, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,69 (s, 2H), 3,21 (t, 2H), 3,02-3,07 (m, 2H), 2,92-2,98 (m, 1H), 2,78-2,83 (m, 2H), 2,57 (s a, 4H), 2,17 (s, 3H), 1,95-1,98 (m, 4H), 1,64-1,66 (d a, 2H), 1,46-1,55 (m, 2H), 1,05 (t, 3H), 0,82 (t, 3H).

Ejemplo 8

5- Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-W-((4-metox¡-6-met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)-2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡lmet¡l)benzofuran-4-carboxam¡da

Etapa 1

5-Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-(pirrol¡d¡n-1-¡lmet¡l)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo

5-Et¡l-6-(et¡l(tetrahidro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-form¡lbenzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo 1j (40 mg, 0,11 mmol), p¡rrol¡d¡na (15 mg, 0,22 mmol) y ácido acético (30 mg, 0,55 mmol) se disolvieron en 5 ml de metanol. La mezcla se agitó 1 horas, entonces se añadió triacetoxiborohidruro sódico (70 mg, 0,33 mmol). La mezcla se agitó durante 12 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, la mezcla se neutralizó con una solución saturada de bicarbonato sódico, y se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)amino)-2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡lmet¡l)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo 8a (44 mg, rendimiento 95 %) en forma de un aceite incoloro.

Etapa 2

Ácido de 5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)amino)-2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡lmet¡l)benzofurano -4-carboxílico

5-Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-(pirrol¡d¡n-1-¡lmet¡l)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo 8a (56 mg, 0,13 mmol) se disolvió en 1 ml de tetrahidrofurano y 5 ml de metanol, entonces se añadieron 2 ml de solución de hidróxido sódico 4 M. La mezcla se agitó durante 12 horas a 60 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, se añadió ácido clorhídrico concentrado para ajustar el pH a 4, entonces la mezcla se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 5:1) y se filtró. La torta de filtro se lavó con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 5:1). El filtrado se combinó y se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto ácido 5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-piran-4-¡l)am¡no)-2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡lmetil)benzofuran-4-carboxílico 8b (50 mg) en forma de un sólido de color blanco, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

EM m/z (IEN): 399,0 [M-1]

Etapa 3

5-Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-N-((4-metox¡-6-met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡rid¡n-3-¡l)met¡l)-2-(p¡rrol¡d¡n-1-ilmetil)benzofuran-4-carboxamida

El producto en bruto ácido 5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-(p¡rrolid¡n-1-¡lmet¡l)benzofuran-4-carboxíl¡co 8b (25 mg, 0,60 mmol) se disolvió en 3 ml de N,N-dimetilformamida, entonces se añadieron 1 -et¡l-3-(3-dimet¡lam¡noprop¡l)carbod¡¡mida (15 mg, 0,09 mmol), 1-hidroxibenzotriazol (12 mg, 0,09 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (387 mg, 3,0 mmol). La mezcla se agitó 1 horas, entonces se añadió clorhidrato de 3-(aminometil)-4-metoxi-6-metilp¡r¡d¡n-2(1H)-ona 1o (16 mg, 0,078 mmol). La mezcla se agitó durante 12 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, se añadió agua en exceso, y la solución de reacción se extrajo con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 8:1). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con agua y solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-W-((4-metox¡-6-met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-il)metil)-2-(pirrolidin-1-ilmetil)benzofuran-4-carboxamida 8 (12 mg, rend¡m¡ento 36 %) en forma de un sól¡do de color blanco.

EM m/z (IEN): 551,6 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 811,43 (s, 1H), 7,99 (t, 1H), 7,37 (s, 1H), 6,50 (s, 1H), 6,10 (s, 1H), 4,28 (d, 2H), 3,84 (s a, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,71 (s a, 2H), 3,18-3,26 (m, 4H), 3,03-3,07 (m, 2H), 2,92-2,97 (m, 1H), 2,78-2,81 (m, 2H), 2,17 (s, 3H), 1,70 (s a, 4H), 1,64 (s a, 2H), 1,46-1,54 (m, 2H), 1,23 (s a, 2H), 1,05 (t, 3H), 0,82 (t, 3H).

Ejemplo 9

W-((4,6-D¡met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)-5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-(1-¡soprop¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)benzofuran-4-carboxam¡da

Etapa 1

-Bromo-5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo

5-Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo 1¡ (1 g, 3,0 mmol) se d¡solv¡ó en 15 ml de tetrah¡drofurano, entonces se añad¡eron 1,8 ml de d¡¡soprop¡lam¡da de l¡t¡o 2 M gota a gota a -70 °C. La mezcla se ag¡tó 90 m¡nutos, entonces se añad¡ó 1,2-d¡bromotetracloroetano (978 mg, 3 mmol). La soluc¡ón de reacc¡ón se ag¡tó durante 1 hora, y se calentó a temperatura amb¡ente. Se añad¡ó soluc¡ón de cloruro de amon¡o, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co, se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se futraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón B para obtener el compuesto del título 2-bromo5-etil-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo 9a (320 mg, rendimiento 40 %) en forma de un aceite de color amarillo.

Etapa 2

4-(5-Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-4-(metox¡carbon¡l)benzofuran-2-¡l)-5,6-d¡h¡drop¡rid¡n-1(2H)-carbox¡lato de ferc-butilo

2-Bromo-5-et¡l-6-(etil(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo 9a (1,4 g, 3,4 mmol), 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-d¡oxaborolan-2-¡l)-5,6-d¡h¡drop¡r¡d¡n-1(2H)-carbox¡lato de ferc-butilo (1,6 g, 5,1 mmol), tris(d¡benc¡lidenoacetona)d¡palad¡o (312 mg, 0,34 mmol), 2-d¡c¡clohex¡lfosf¡no-2',4',6'-tr¡¡soprop¡lb¡fen¡lo (325 mg, 0,68 mmol) y carbonato de cesio (3,4 g, 10,2 mmol) se mezclaron en 50 ml de una mezcla de 1,4-dioxano y agua (V:V = 4:1). La mezcla se calentó hasta 80 °C y se agitó durante 16 horas. La solución de reacción se filtró a través de una capa de celite, y se lavó con acetato de etilo. Se añadió agua al filtrado, dos fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 4-(5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-4-(metox¡carbon¡l)benzofuran-2-¡l)-5,6-d¡hidrop¡r¡d¡n-1(2H)-carboxilato de ferc-butilo 9b (1,67 g, rendimiento 95 %) en forma de un aceite de color púrpura.

Etapa 3

4-(5-Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-4-(metox¡carbonil)benzofuran-2-¡l)p¡per¡d¡na-1-carbox¡lato de ferc-butilo

4- (5-Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-4-(metox¡carbon¡l)benzofuran-2-¡l)-5,6-d¡h¡drop¡rid¡n-1(2H)-carbox¡lato de ferc-butilo 9b (1,7 g, 3,3 mmol) se disolvió en 23 ml de una mezcla de metanol y tetrahidrofurano (V:V = 20:3), entonces se añadió Pd/C (200 mg, 10 %). El sistema de reacción se purgó tres veces con hidrógeno y se agitó durante 1 horas. La solución de reacción se filtró a través de una capa de celite. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 4-(5-et¡l-6-(et¡l(tetrahidro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-4-(metox¡carbon¡l)benzofuran-2-¡l)piper¡d¡na-1-carbox¡lato de ferc-butilo 9c (1,6 g, rendimiento 94 %) en forma de un aceite de color amarillo claro. EM m/z (IEN): 515,0 [M+1]

Etapa 4

5- Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)amino)-2-(p¡per¡d¡n-4-¡l)benzofuran-4-carbox¡lato 2,2,2-trifluoroacetato de metilo

4- (5-Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-4-(metox¡carbonil)benzofuran-2-¡l)p¡per¡d¡na-1-carbox¡lato de ferc-butilo 9c (1,6 g, 3,3 mmol) se disolvió en 20 ml de diclorometano, entonces se añadieron 4 ml de ácido trifluoroacético. La mezcla se agitó durante 2 horas, entonces se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto 5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-(p¡perid¡n-4-¡l)benzofuran-4-carbox¡lato 2,2,2-trifluoroacetato de metilo 9d (1,3 g) en forma de un aceite de color amarillo claro, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

EM m/z (IEN): 415,3 [M+1]

Etapa 5

5- Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-(1-¡soprop¡lpiper¡d¡n-4-¡l)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo

El producto en bruto 5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-(p¡perid¡n-4-¡l)benzofuran-4-carbox¡lato 2,2,2-trifluoroacetato de metilo 9d (1,3 g, 3,1 mmol) se disolvió en 30 ml de W,W-dimetilformamida, entonces se añadió carbonato potásico (1,3 g, 8,4 mmol). La mezcla se agitó 10 minutos, entonces se añadieron 2-bromopropano (575 mg, 4,7 mmol) y yoduro potásico (261 mg, 1,5 mmol). La mezcla se agitó durante 2 horas a 70 °C, entonces se añadió agua, y la solución de reacción se extrajo con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 5:1). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 5-etil-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)amino)-2-(1-¡sopropilp¡per¡d¡n-4-¡l)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo 9e (1,4 g, rendimiento 90 %) en forma de un aceite incoloro. EM m/z (IEN): 457,0 [M+1]

Etapa 6

Ácido 5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)amino)-2-(1-¡soprop¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)benzofuran-4-carboxíl¡co

5-Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-(1-¡soprop¡lpiper¡d¡n-4-¡l)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo 9e (1,1 g, 2,4 mmol) se disolvió en 30 ml de metanol, entonces se añadieron 5 ml de solución de hidróxido sódico 4 M. La mezcla se agitó durante 16 horas a 60 °C, entonces se añadió ácido clorhídrico concentrado para ajustar el pH de la solución de reacción a 4. La mezcla se concentró a presión reducida, y el residuo se disolvió en una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 5:1) y se filtró. La torta de filtro se lavó con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 5:1). El filtrado se combinó y se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto ácido 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(1-isopropilpiperidin-4-il)benzofran-4-carboxílico 9f (1,4 g) en forma de un sólido de color blanco, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

EM m/z (IEN): 443,3 [M+1]

Etapa 7

N-((4,6-Dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(1-isopropilpiperidin-4-il)benzofuran-4-carboxamida

El producto en bruto ácido 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(1-isopropilpiperidin-4-il)benzofuran-4-carboxílico 9f (1,1 g, 2,5 mmol) se disolvió en 20 ml de N,N-dimetilformamida, entonces se añadieron 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (715 mg, 3,7 mmol), 1-hidroxibenzotriazol (510 mg, 3,7 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (1,6 g, 12,5 mmol). La mezcla se agitó 1 horas, entonces se añadió clorhidrato de 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona 2a (470 mg, 2,5 mmol). La mezcla se agitó durante 16 horas. Una vez completada la reacción, se añadió agua en exceso, y la solución de reacción se extrajo con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 8:1). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con agua y solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(1-isopropilpiperidin-4-il)benzofuran-4-carboxamida 9 (850 mg, rendimiento 59 %) en forma de un sólido de color blanco.

EM m/z (IEN): 577,7 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 811,50 (s, 1H), 8,16 (t, 1H), 7,38 (s, 1H), 6,37 (s a, 1H), 5,87 (s, 1H), 4,31 (d, 2H), 3,82 (d, 2H), 3,21 (t, 2H), 3,01-3,07 (m, 4H), 2,91-2,96 (m, 1H), 2,79-2,81 (m, 2H), 2,24 (s, 3H), 2,17 (s a, 2H), 2,12 (s, 3H), 2,02 (s a, 2H), 1,63-1,66 (d a, 2H), 1,45-1,54 (m, 2H), 1,25 (s a, 6H), 1,01 (t, 3H), 0,81 (t, 3H).

Ejemplo 10

5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(1-isopropilpiperidin-4-il)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-carboxamida

El producto en bruto ácido 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(1-isopropilpiperidin-4-il)benzofuran-4-carboxílico 9f (30 mg, 0,07 mmol) se disolvió en 5 ml de N,N-dimetilformamida, entonces se añadieron 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (20 mg, 0,1 mmol), 1-hidroxibenzotriazol (15 mg, 0,1 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (45 mg, 0,34 mmol). La mezcla se agitó 1 horas, entonces se añadió clorhidrato de 3-(aminometil)-4-metoxi-6-metilpiridin-2(1H)-ona 1o (21 mg, 0,1 mmol). La mezcla se agitó durante 16 horas. Una vez completada la reacción, se añadió agua en exceso, y la solución de reacción se extrajo con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 8:1). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con agua y solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(1-isopropilpiperidin-4-il)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4carboxamida 10 (31 mg, rendimiento 77 %) en forma de un sólido de color blanco.

EM m/z (IEN): 593,3 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 8 11,44 (s, 1H), 7,95 (s a, 1H), 7,36 (s, 1H), 6,37 (s a, 1H), 6,11 (s, 1H), 4,28 (d, 2H), 3,84 (s a, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,21 (t, 3H), 3,01-3,06 (m, 3H), 2,90-2,96 (m, 2H), 2,77-2,83 (m, 3H), 2,19 (s, 3H), 2,01 (s a, 4H), 1,63-1,67 (d a, 2H), 1,45-1,53 (m, 2H), 1,22 (s a, 6H), 1,04 (t, 3H), 0,81 (t, 3H).

Ejemplo 11

W-((4,6-Dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-((4-(2-hidroxi-2-metilpropil)piperazin-1-il)metil)benzofuran-4-carboxamida 11

Etapa 1

5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(piperazin-1-ilmetil)benzofuran-4-carboxilato de metilo 11a

5a (60 mg, 0,12 mmol) se disolvió en 5 ml de diclorometano, entonces se añadieron 0,5 ml de ácido trifluoroacético. Después de agitar durante 2 horas, la mezcla se concentró a presión reducida, se neutralizó con solución saturada de carbonato sódico, y se extrajo con una mezcla de diclorometano y metanol. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto 11a (45 mg) en forma de un sólido de color amarillo, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 2

Ácido 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-((4-(2-hidroxi-2-metilpropil)piperazin-1-il)metil)benzofuran-4-carboxílico 11b

El producto en bruto 11a (25 mg, 0,06 mmol) se disolvió en 5 ml de etanol, entonces se añadieron 2,2-dimetiloxirano (6,5 mg, 0,09 mmol) y carbonato potásico (17 mg, 0,12 mmol). La mezcla se agitó a 60 °C durante 12 horas. Una vez completada la reacción, la mezcla se filtró, y se añadió ácido clorhídrico 12 M para ajustar el pH a 4. La mezcla se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía líquida de alto rendimiento para obtener el compuesto del título 11b (15 mg, rendimiento 52 %) en forma de un sólido de color blanco.

Etapa 3

N-((4,6-D¡met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)-5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-((4-(2-h¡drox¡-2-metilpropil)piperazin-1-il)metil)benzofuran-4-carboxamida 11

11b (15 mg, 0,031 mmol) se d¡solv¡ó en 4 ml de N,N-d¡met¡lformam¡da, entonces se añad¡eron 1-et¡l-3-(3-d¡met¡lam¡noprop¡l)carbod¡¡m¡da (9 mg, 0,046 mmol), 1-h¡drox¡benzotr¡azol (7 mg, 0,046 mmol) y N,N-d¡¡soprop¡let¡lam¡na (20 mg, 0,155 mmol) a la soluc¡ón de reacc¡ón anter¡or. La mezcla se ag¡tó 1 horas, entonces se añad¡ó 2a (9 mg, 0,046 mmol) a la soluc¡ón de reacc¡ón anter¡or. La mezcla se ag¡tó durante 12 horas. Una vez completada la reacc¡ón, se añad¡ó agua en exceso, y la soluc¡ón de reacc¡ón se extrajo con una mezcla de d¡clorometano y metanol (V:V = 10:1) (10 ml). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con agua (20 ml) y soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co (20 ml), se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se purificó por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón A para obtener el compuesto del título 11 (13 mg, rend¡m¡ento 70 %) en forma de un sól¡do de color blanco. EM m/z (IEN): 622,7 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 611,48 (s a, 1H), 8,17 (t, 1H), 7,39 (s, 1H), 6,48 (s, 1H), 5,86 (s, 1H), 4,32 (d, 2H), 4,04 (s a, 1H), 3,83 (d a, 2H), 3,58 (s, 2H), 3,21 (t, 2H), 3,04 (c, 2H), 2,91-2,97 (m, 1H), 2,79 (c, 2H), 2,56 (s a, 4H), 2,45 (s a, 4H), 2,23 (s, 3H), 2,16 (s a, 2H), 2,11 (s, 3H), 1,63-1,66 (m, 2H), 1,48-1,52 (m, 2H), 1,00-1,06 (m, 9H), 0,82 (t, 3H).

Ejemplo 12

5-Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-N-((4-metox¡-6-met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)-2-((4-met¡lp¡peraz¡n-1-¡l)met¡l)benzofuran-4-carboxam¡da 12

Etapa 1

5-Et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-((4-met¡lp¡peraz¡n-1-¡l)met¡l)benzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo 12a

5a (74 mg, 0,14 mmol) se d¡solv¡ó en 10 ml de 1,2-d¡cloroetano, entonces se añad¡eron 1,0 ml de ác¡do tr¡fluoroacét¡co. Tras ag¡tar durante 1 hora, la mezcla se concentró a pres¡ón reduc¡da. Entonces, se añad¡eron 5 ml de metanol, formaldehído (61 mg, 1,4 mmol) y tr¡acetox¡boroh¡druro sód¡co (88 mg, 0,42 mmol) al res¡duo suces¡vamente. La mezcla se ag¡tó durante 3 horas. Una vez completada la reacc¡ón, la mezcla se concentró a pres¡ón reduc¡da, se neutral¡zó con 20 ml de una soluc¡ón saturada de b¡carbonato sód¡co, y se extrajo con una mezcla de d¡clorometano y metanol (V:V = 8:1) (10 ml). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co (20 ml), se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se futraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón A para obtener el compuesto del título 12a (60 mg, rend¡m¡ento 97 %) en forma de un ace¡te de color amar¡llo.

Etapa 2

Ácido 5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-2-((4-met¡lp¡peraz¡n-1-¡l)met¡l)benzofuran-4-carboxíl¡co 12b

12a (60 mg, 0,13 mmol) se d¡solv¡ó en 4 ml de metanol, entonces se añad¡eron 4 ml de soluc¡ón de h¡dróx¡do sód¡co al 20 %. La mezcla se ag¡tó durante 12 horas a 60 °C. Después de que se hub¡era completado la reacc¡ón, se añad¡ó ác¡do clorhídr¡co 12 M para ajustar el pH a 4. La mezcla se concentró a pres¡ón reduc¡da, entonces el res¡duo se d¡solv¡ó en 10 ml de metanol y se f¡ltró. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da para obtener el compuesto del título en bruto 12b (55 mg) en forma de un sól¡do de color amar¡llo, que se usó d¡rectamente en la s¡gu¡ente etapa s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal.

Etapa 3

El producto en bruto 12b (25 mg, 0,058 mmol) se d¡solv¡ó en 3 ml de N,N-d¡met¡lformam¡da, entonces se añad¡eron 1-et¡l-3-(3-d¡met¡lam¡noprop¡l)carbod¡¡m¡da (17 mg, 0,087 mmol), 1-h¡drox¡benzotr¡azol (12 mg, 0,087 mmol) y N,N-d¡¡soprop¡let¡lam¡na (38 mg, 0,29 mmol). La mezcla se ag¡tó 2 horas, entonces se añad¡ó 1o (18 mg, 0,087 mmol) a la soluc¡ón de reacc¡ón. La mezcla se ag¡tó durante 12 horas. Una vez completada la reacc¡ón, se añad¡eron 20 ml de agua, la soluc¡ón de reacc¡ón se extrajo con una mezcla de d¡clorometano y metanol (V:V = 8:1) (10 ml x 3). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con agua (10 ml) y soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co (10 ml), se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón A para obtener el compuesto del título 12 (22 mg, rend¡m¡ento 65 %) en forma de un sól¡do de color blanco.

EM m/z (IEN): 580,3 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 811,43 (s a, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 6,56 (s, 1H), 6,10 (s, 1H), 4,28 (d, 2H), 3,85 (s a, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,63 (s, 2H), 3,21 (t, 2H), 3,02-3,07 (m, 2H), 2,92-2,97 (m, 1H), 2,79-2,81 (m, 2H), 2,58 (s a, 4H), 2,40 (s a, 4H), 2,18 (s, 3H), 1,64-1,66 (m, 2H), 1,46-1,55 (m, 2H), 1,05 (t, 3H), 0,82 (t, 3H).

Ejemplo 13

2-((D¡met¡lam¡no)met¡l)-5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-N-((4-metox¡-6-met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)benzofuran-4-carboxam¡da 13

Etapa 1

2-((D¡met¡lam¡no)met¡l)-5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo 13a

1j (30 mg, 0,084 mmol) se d¡solv¡ó en 5 ml de metanol, entonces se añad¡ó clorh¡drato de d¡met¡lam¡na (14 mg, 0,17 mmol). La mezcla se ag¡tó 1 horas, entonces se añad¡ó tr¡acetox¡boroh¡druro sód¡co (53 mg, 0,25 mmol). La mezcla se agitó durante 12 horas. Una vez completada la reacc¡ón, la soluc¡ón de reacc¡ón se concentró a pres¡ón reduc¡da, se neutral¡zó con una soluc¡ón saturada de b¡carbonato sód¡co, y se extrajo con una mezcla de d¡clorometano y metanol. Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 13a (30 mg, rendimiento 90 %) en forma de un aceite de color amarillo.

Etapa 2

Ácido 2-((dimetilamino)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-carboxílico 13b

13a (30 mg, 0,077 mmol) se disolvió en 3 ml de etanol y 1 ml de tetrahidrofurano, entonces se añadieron 5 ml de solución de hidróxido sódico 2 N. La mezcla se agitó durante 12 horas a 60 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, la solución de reacción se ajustó a acidez débil con ácido clorhídrico concentrado. La mezcla se concentró a presión reducida, y el residuo se disolvió en una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 1:1) y se filtró para retirar las sales inorgánicas. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto 13b (25 mg) en forma de un aceite de color amarillo, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 3

2-((Dimetilamino)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-carboxamida 13

El producto en bruto 13b (15 mg, 0,040 mmol) se disolvió en 3 ml de N,N-dimetilformamida, entonces se añadieron 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (7,7 mg, 0,04 mmol), 1-hidroxibenzotriazol (8 mg, 0,060 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (26 mg, 0,20 mmol). La mezcla se agitó 0,5 horas, entonces se añadió 1o (11 mg, 0,052 mmol). La mezcla se agitó durante 12 horas. Una vez completada la reacción, se añadió agua en exceso, y la solución de reacción se extrajo con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 8:1) (10 ml). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con agua (10 ml) y solución saturada de cloruro sódico (10 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 13 (7 mg, rendimiento 30 %) en forma de un sólido de color blanco.

EM m/z (IEN): 525,5 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 8 11,44 (s a, 1H), 8,00 (s a, 1H), 7,37 (s, 1H), 6,51 (s, 1H), 6,10 (s, 1H), 4,28 (d, 2H), 3,85 (s a, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,52 (s, 2H), 3,21 (t, 2H), 3,02-3,06 (m, 2H), 2,92-2,96 (m, 1H), 2,77-2,83 (m, 2H), 2,19 (s, 6H), 2,17 (s, 3H), 1,63-1,67 (m, 2H), 1,46-1,53 (m, 2H), 1,06 (t, 3H), 0,82 (t, 3H).

Ejemplo 14

2-Ciclopentil-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-carboxamida 14

Etapa 1

2-(C¡clopent-1-en-1-¡l)-5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo 14b

9a (70 mg, 0,17 mmol), 2-(c¡dopent-1-en-1-¡l)-4,4,5,5-tetramet¡l-1,3,2-d¡oxaborolano 14a (40 mg, 0,20 mmol), tr¡s(d¡benc¡l¡denoacetona)d¡palad¡o (16 mg, 0,017 mmol), 2-d¡c¡clohex¡lfosf¡no-2',4',6'-tr¡¡soprop¡lb¡fen¡lo (16 mg, 0,034 mmol) y carbonato sód¡co (52 mg, 0,51 mmol) se d¡solv¡eron en 5 ml de tolueno. La mezcla se agitó durante 12 horas a 100 °C en una atmósfera de argón. Una vez completada la reacc¡ón, la mezcla se f¡ltró a través de cel¡te. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón A para obtener el compuesto del título 14b (50 mg, rend¡m¡ento 75 %) en forma de un ace¡te de color amar¡llo.

Etapa 2

2-C¡clopent¡l-5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo 14c

14b (75 mg, 0,19 mmol) se d¡solv¡ó en 5 ml de metanol, se añad¡eron los 20 mg de Pd al 10 %/C. El s¡stema de reacc¡ón se purgó tres veces con h¡drógeno y se ag¡tó durante 1 horas. Una vez completada la reacc¡ón, la mezcla se f¡ltró a través de cel¡te. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón A para obtener el compuesto del título 14c (55 mg, rend¡m¡ento 73 %) en forma de un ace¡te ¡ncoloro.

Etapa 3

Ác¡do 2-c¡clopent¡l-5-et¡l-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carboxíl¡co 14d

14c (55 mg, 0,14 mmol) se d¡solv¡ó en 5 ml de una mezcla de metanol y tetrah¡drofurano (V:V = 3:2), entonces se añad¡eron 2 ml de soluc¡ón de h¡dróx¡do sód¡co 2 N. La mezcla se ag¡tó durante 12 horas a 60 °C. Después de que se hub¡era completado la reacc¡ón, la mezcla se concentró a pres¡ón reduc¡da para retirar los d¡solventes orgán¡cos, se neutral¡zó con ác¡do clorhídr¡co 12 M para ajustar el pH a 3, y se extrajo con acetato de et¡lo (10 ml x 3). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co (10 ml), se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da para obtener el compuesto del título en bruto 14d (45 mg, rend¡m¡ento 85 %)) en forma de un ace¡te ¡ncoloro.

Etapa 4

2-C¡clopent¡l-N-((4,6-d¡met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)-5-etil-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carboxamida 14

14d (15 mg, 0,065 mmol) se d¡solv¡ó en 4 ml de N,N-dimet¡lformamida, entonces se añad¡eron 1-etil-3-(3-d¡met¡lam¡noprop¡l)carbod¡¡m¡da (20 mg, 0,097 mmol), 1-h¡drox¡benzotr¡azol (15 mg, 0,097 mmol) y N,N-d¡¡soprop¡let¡lam¡na (50 mg, 0,33 mmol) a la soluc¡ón de reacc¡ón. La mezcla se ag¡tó 1 horas, entonces se añad¡ó 2a (18 mg, 0,097 mmol). La mezcla se ag¡tó durante 12 horas. Una vez completada la reacc¡ón, se añad¡eron 20 ml de agua, y la soluc¡ón de reacc¡ón se extrajo con una mezcla de d¡clorometano y metanol (V:V = 8:1) (10 ml x 3). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron sucesivamente con agua y soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co, se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se purificó por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón A para obtener el compuesto del título 14 (18 mg, rend¡m¡ento 53 %) en forma de un sól¡do de color blanco.

EM m/z (IEN): 520,5 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 811,49 (s a, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 6,30 (s, 1H), 5,87 (s, 1H), 4,31 (d, 2H), 3,82 (d a, 2H), 3,16-3,23 (m, 3H), 3,03 (c, 2H), 2,90-2,96 (m, 1H), 2,79 (c, 2H), 2,24 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 2,00 (d a, 2H), 1,67 (s a, 8H), 1,43-1,53 (m, 2H), 1,01 (t, 3H), 0,81 (t, 3H).

Ejemplo 15

N-((4,6-D¡met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡rano-4-¡l)am¡no)-5-met¡l-2-(1-met¡lpiper¡d¡n-4-¡l)benzofuran-4-carboxam¡da

Etapa 1

2-Bromo-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-il)am¡no)-5-met¡lbenzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo 15a

4g (330 mg, 1,04 mmol) se d¡solv¡ó en 6 ml de tetrah¡drofurano, entonces se añad¡eron 0,63 ml de d¡¡soprop¡lam¡da de l¡t¡o 2 M gota a gota a -70 °C en una atmósfera de argón. La mezcla se ag¡tó 1 horas, entonces se añad¡eron 20 ml de una soluc¡ón prev¡amente preparada de 1,2-d¡bromotetracloroetano (170 mg, 0,53 mmol) en tetrah¡drofurano. La mezcla se calentó lentamente y se agitó durante 1 hora. Una vez completada la reacc¡ón, se añad¡eron 5 ml de soluc¡ón saturada de cloruro de amon¡o para ¡nact¡var la reacc¡ón, y la mezcla se extrajo con acetato de et¡lo (10 ml x 3). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co (20 ml), se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 15a (145 mg, rendimiento 35 %) en forma de un aceite de color amarillo.

Etapa 2

4-(6-(Et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-4-(metox¡carbon¡l)-5-met¡lbenzofuran-2-¡l)-5,6-d¡h¡dropir¡d¡n-1(2H)-carboxilato de ferc-butilo 15b

15a (90 mg, 0,23 mmol), 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-carboxilato de ferc-butilo (105 mg, 0,34 mmol), tris(dibencilidenoacetona)dipaladio (21 mg, 0,023 mmol), 2-diciclohexilfosfino-2',4',6'-triisopropilbifenilo (22 mg, 0,045 mmol) y carbonato sódico (72 mg, 0,68 mmol) se disolvieron en 5 ml de una mezcla de 1,4-dioxano y agua (V:V = 4:1). La mezcla se agitó durante 12 horas a 90 °C en una atmósfera de argón. Una vez completada la reacción, la mezcla se filtró a través de una capa de celite, y dos fases se separaron. La fase orgánica se lavó sucesivamente con agua y solución saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 15b (100 mg, rendimiento 88 %) en forma de un sólido de color amarillo.

Etapa 3

4-(6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-4-(metoxicarbonil)-5-metilbenzofuran-2-il)piperidina-1-carboxilato de fercbutilo 15c

15b (100 mg, 0,2 mmol) se disolvió en 6 ml de etanol, se añadieron 30 mg de Pd al 10 %/C. El sistema de reacción se purgó tres veces con hidrógeno y se agitó durante 0,5 horas. La solución de reacción se filtró, el filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 15c (80 mg, rendimiento 80 %) en forma de un aceite de color amarillo.

Etapa 4

6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metil-2-(1-metilpiperidin-4-il)benzofuran-4-carboxilato de metilo 15d

15c (80 mg, 0,16 mmol) se disolvió en 10 ml de diclorometano, entonces se añadieron 1 ml de ácido trifluoroacético. Tras agitar durante 1 hora, la mezcla se concentró a presión reducida. Se añadieron 5 ml de metanol y 5 ml de formaldehído, y la mezcla se agitó durante 1 hora, entonces se añadió triacetoxiborohidruro sódico (100 mg, 0,48 mmol). Después de agitar durante 3 horas, la solución de reacción se concentró a presión reducida, se neutralizó con una solución saturada de bicarbonato sódico, y se extrajo con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 8:1). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico y se secaron sobre sulfato sódico anhidro. El residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 15d (60 mg, rendimiento 90 %) en forma de un aceite de color amarillo.

Etapa 5

Ácido 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metil-2-(1-metilpiperidin-4-il)benzofuran-4-carboxílico

15d (30 mg, 0,072 mmol) se disolvió en 5 ml de metanol y 2 ml de tetrahidrofurano, entonces se añadieron 2 ml de solución de hidróxido sódico 4 M. La mezcla se agitó durante 12 horas a 60 °C. Se añadió ácido clorhídrico 12 M para ajustar el pH de la solución de reacción a 4, y la mezcla se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en 10 ml de metanol, y se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto 15e (30 mg) en forma de un sólido de color blanco, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 6

N-((4,6-Dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-6-(etil(tetrahidro-2H-pirano-4-il)amino)-5-metil-2-(1-metilpiperidin-4-il)benzofuran-4-carboxamida 15

El producto en bruto 15e (25 mg, 0,06 mmol) se disolvió en 3 ml de N,N-dimetilformamida, entonces se añadieron 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (18 mg, 0,094 mmol), 1-hidroxibenzotriazol (15 mg, 0,094 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (40 mg, 0,31 mmol). La mezcla se agitó 1 horas, entonces se añadió 2a (18 mg, 0,094 mmol). La mezcla se agitó durante 12 horas. Una vez completada la reacción, se añadieron 20 ml de agua, y la solución de reacción se extrajo con una mezcla de diclorometano y metanol. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron sucesivamente con agua y solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 15 (24 mg, rendimiento 73 %) en forma de un sólido de color blanco.

EM m/z (IEN): 535,5 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 811,50 (s a, 1H), 8,10 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 6,29 (s, 1H), 5,87 (s, 1H), 4,31 (d, 2H), 3,81 (d a, 2H), 3,22 (t, 2H), 3,03 (c, 2H), 2,91-2,94 (m, 1H), 2,80 (d a, 2H), 2,67 (s a, 1H), 2,23 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,92-2,02 (m, 4H), 1,61-1,64 (m, 4H), 1,45-1,48 (m, 2H), 0,78 (t, 3H).

Ejemplo 16

N-((4,6-Dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metil-2-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)benzofuran-4-carboxamida 16

De acuerdo con la ruta sintética del Ejemplo 12, el material de partida 5a se sustituyó por 15b, y 1o se sustituyó por 2a, por consiguiente, se preparó el compuesto del título 16 (18 mg, rendimiento 62 %) en forma de un sólido de color blanco.

EM m/z (IEN): 533,5 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 811,51 (s a, 1H), 8,17 (t, 1H), 7,35 (s, 1H), 6,58 (s, 1H), 6,35 (s, 1H), 5,87 (s, 1H), 4,31 (d, 2H), 3,81 (d a, 2H), 3,19-3,25 (m, 3H), 3,02-3,07 (m, 3H), 2,90-2,97 (m, 1H), 2,43 (s a, 2H), 2,23 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,62-1,64 (m, 2H), 1,44-1,51 (m, 2H), 1,17 (t, 2H), 0,79 (t, 3H).

Ejemplo 17

5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-W-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(1-metilpiperidin-4-il)benzofuran-4-carboxamida 17

De acuerdo con la ruta sintética del Ejemplo 12, el material de partida 5a se sustituyó por 9c, por consiguiente, se preparó el compuesto del título 17 (17 mg, rendimiento 50 %) en forma de un sólido de color blanco.

EM m/z (IEN): 565,2 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 811,43 (s a, 1H), 7,94 (s a, 1H), 7,35 (s, 1H), 6,39 (s a, 1H), 6,10 (s, 1H), 4,27 (d, 2H), 3,83 (s a, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,20 (t, 2H), 3,02 (c, 2H), 2,90-2,95 (m, 2H), 2,79 (c, 2H), 2,44 (s a, 4H), 2,18 (s, 3H), 2,07 (s a, 2H), 1,81 (s a, 2H), 1,62-1,64 (m, 2H), 1,43-1,52 (m, 2H), 1,03 (t, 3H), 0,80 (t, 3H).

Ejemplo 18

6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-W-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-metilbenzofuran-4-carboxamida 18

Etapa 1

Ácido 6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-5-met¡lbenzofuran-4-carboxíl¡co 18a

4g (45 mg, 0,142 mmol) se d¡solv¡ó en 4 ml de una mezcla de metanol y agua (V:V = 1:1), entonces se añad¡ó h¡dróx¡do sód¡co (60 mg, 1,58 mmol). La mezcla se agitó durante 12 horas a 70 °C. Después de que se hub¡era completado la reacc¡ón, la soluc¡ón de reacc¡ón se concentró a pres¡ón reduc¡da para ret¡rar el metanol. Se añad¡ó ác¡do clorhídrico al 10 % para ajustar el pH a 3, y la mezcla se extrajo con acetato de et¡lo (10 ml x 3). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co (20 ml x 1) y se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón B para obtener el compuesto del título 18a (40 mg, rend¡m¡ento 93 %) en forma de un sól¡do de color blanco.

Etapa 2

6-(Et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-W-((4-metox¡-6-met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)-5-met¡lbenzofuran-4-carboxam¡da 18

18a (15 mg, 0,049 mmol) se d¡solv¡ó en 3 ml de W,W-d¡met¡lformam¡da, entonces se añad¡eron W,W-d¡¡soprop¡let¡lam¡na (18,9 mg, 0,147 mmol) y hexafluorofosfato de 2-(7-azabenzotr¡azol-1-¡l)-W,W,W',W'-tetramet¡luron¡o (27,9 mg, 0,0735 mmol). El s¡stema de reacc¡ón se ag¡tó durante 1 hora a 0 °C. Se añad¡ó 1o (12 mg, 0,0558 mmol) en una atmósfera de n¡trógeno. La mezcla se ag¡tó durante 12 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón, se añad¡eron 30 ml de agua, la mezcla se extrajo con acetato de etilo (10 ml x 3). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co (20 ml x 1), se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón A para obtener el compuesto del título 18 (4,4 mg, rend¡m¡ento 20 %) en forma de un sól¡do de color blanco.

EM m/z (IEN): 454,2 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, CDCla) 8 10,90 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 6,76 (s, 1H), 6,61 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,52 (s a, 2H), 3,90-3,93 (d a, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,28 (t, 2H), 3,02-3,07 (m, 2H), 2,91-2,95 (m, 1H), 2,29 (s, 3H), 1,83 (s, 3H), 1,56-1,68 (m, 4H), 0,83 (t, 3H).

Ejemplo 19

6-(Et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-W-((4-metox¡-6-met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)-2,5-d¡met¡lbenzofuran-4-carboxam¡da 19

Etapa 1

Ácido 3-bromo-2-metil-5-nitrobenzoico 19b

Ácido 2-metil-5-nitrobenzoico (30 g, 0,166 mol, Bide) se disolvió en 70 ml de ácido sulfúrico concentrado, entonces se añadió W-bromosuccinimida (35,4 g, 0,199 mol) en lotes. El sistema de reacción se agitó durante 3 horas a 60 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, se obtuvo la solución de reacción del compuesto del título 19b, que se usó directamente en la siguiente etapa sin tratamiento adicional.

Etapa 2

3-Bromo-2-metil-5-nitrobenzoato de metilo 19c

La solución de reacción anterior de 19b se añadió con 100 ml de metanol y se agitó continuamente durante 6 horas. Una vez completada la reacción, la solución de reacción se vertió en 1 l de agua, y se extrajo con acetato de etilo (100 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron sucesivamente con agua (100 ml) y solución saturada de cloruro sódico (200 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto 19c (53 g) en forma de un sólido de color blanco, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 3

5-Amino-3-bromo-2-metilbenzoato de metilo 19d

El producto en bruto 19c (52 g, 0,189 mol) se disolvió en 200 ml de etanol, entonces se añadió polvo de hierro (31,7 g, 0,569 mol), y se añadieron 16 ml de ácido clorhídrico 4 N lentamente gota a gota. La mezcla se calentó a 75 °C y se agitó durante 4 horas. Una vez completada la reacción, se añadieron 200 ml de agua, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (100 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico (200 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 19d (27 g, rendimiento 59 %) en forma de un sólido de color amarillo.

Etapa 4

3-Bromo-5-hidroxi-2-metilbenzoato de metilo 19e

19d (5 g, 0,02 mol) se disolvió en 50 ml de ácido sulfúrico al 10 %, entonces se añadieron 10 ml de una solución previamente preparada de nitrito sódico (1,55 g, 0,023 mol) a 0 °C. La mezcla se agitó 1 hora, entonces se añadieron 50 ml de ácido sulfúrico al 50 %. La mezcla se calentó a 100 °C y se agitó durante 1 hora. Una vez completada la reacción, la solución de reacción se extrajo con acetato de etilo (50 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico (100 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 19e (1,4 g, rendimiento 29 %) en forma de un sólido de color amarillo.

Etapa 5

3-Bromo-2-metil-5-(prop-2-in-1-iloxi)benzoato de metilo 19f

19e (0,5 g, 2,04 mmol) se disolvió en 20 ml de acetona, entonces se añadieron 3-bromopropina (0,73 g, 6,12 mmol) y carbonato potásico (0,85 g, 6,12 mmol). El sistema de reacción se agitó a 80 °C durante 12 horas. Una vez completada la reacción, la solución de reacción se concentró a presión reducida, entonces se añadieron 20 ml de agua, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (10 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico (20 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 19f (0,5 g, rendimiento 86,7 %) en forma de un líquido amarillo.

Etapa 6

6-Bromo-2,5-dimetilbenzofuran-4-carboxilato de metilo 19 g

Se añadieron 19f (0,5 g, 1,76 mmol) y fluoruro de cesio (0,79 g, 5,28 mmol) a 5 ml de W,W-dietilanilina. La mezcla se agitó durante 2 horas a 200 °C en un microondas. Una vez completada la reacción, se añadieron 20 ml de agua, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (20 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico (20 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 19g (0,2 g, rendimiento 40 %) en forma de un líquido amarillo.

Etapa 7

2,5-Dimetil-6-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-carboxilato de metilo 19h

19h (0,2 g, 0,70 mmol), tetrahidro-2H-piran-4-amina (14 mg, 0,14 mmol), tris(dibencilidenoacetona)dipaladio (64 mg, 0,07 mmol), (±)-2,2-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftaleno (87,15 mg, 0,14 mmol) y carbonato de cesio (455 mg, 1,4 mmol) se disolvieron en 5 ml de tolueno. La mezcla se agitó durante 12 horas a 110 °C en una atmósfera de nitrógeno. Una vez completada la reacción, se añadieron 10 ml de agua, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (10 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 19h (140 g, rendimiento 67 %) en forma de un sólido de color amarillo.

Etapa 8

6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2,5-dimetilbenzofuran-4-carboxilato de metilo 19¡

19h (90,0 g, 0,297 mmol), acetaldehído (39,2 mg, 0,89 mmol) y ácido acético (89,1 mg, 1,48 mmol) se disolvieron en 8 ml de metanol. La mezcla se agitó durante 1 hora a 0 °C y otras 4 horas a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno, entonces se añadió cianoborohidruro sódico (55,9 mg, 0,891 mmol). La mezcla se agitó durante 12 horas. Una vez completada la reacción, la solución de reacción se concentró a presión reducida, se añadieron 20 ml de agua, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (10 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico (20 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 19i (60 mg, rendimiento 61 %) en forma de un líquido incoloro.

Etapa 9

Ácido 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2,5-dimetilbenzofuran-4-carboxílico 19j

19i (60 mg, 0,18 mmol) e hidróxido potásico (50,6 mg, 0,90 mmol) se añadieron a 4 ml de una mezcla de metanol y agua (V:V = 1:1). La mezcla se agitó durante 16 horas a 75 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, la mezcla se enfrió, y se añadió ácido clorhídrico 2 N para ajustar el pH de la solución de reacción a 3-4. La mezcla se extrajo con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 10:1) (10 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico (20 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto 19j (30 mg) en forma de un sólido de color amarillo, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 10

6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-W-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropindin-3-il)metil)-2,5-dimetilbenzofuran-4-carboxamida 19

El producto en bruto 19j (15 mg, 0,047 mmol) se disolvió en 2 ml de W,W-dimetilformamida, entonces se añadieron W,W-dNsopropiletilamina (18,3 mg, 0,14 mmol) y hexafluorofosfato de 2-(7-azabenzotriazol-1-il)-W,W,W',W-tetrametiluronio (47,7 mg, 0,125 mmol). La mezcla se agitó 1 hora a 0 °C, entonces se añadió 1o (11,58 mg, 0,057 mmol). La mezcla se agitó durante 12 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, se añadieron 50 ml de agua, entonces la mezcla se extrajo con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 10:1) (10 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico (20 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 19 (20 mg, rendimiento 91 %) en forma de un sólido de color blanco.

EM m/z (IEN): 468,2 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, CDCla) 8 11,57 (s, 1H), 7,19 (s, 1H), 6,38 (s, 1H), 5,93 (s, 1H), 5,36 (s, 1H), 4,64 (d, 2H), 3,95 (s a, 2H), 3,91 (s, 3H), 3,28-3,33 (m, 2H), 3,03-3,05 (m, 2H), 2,92-2,96 (m, 1H), 2,37 (s, 3H), 2,34 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 1,69 (s a, 2H), 1,25 (s a, 2H), 0,85 (t, 3H).

Ejemplo 20

6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-W-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropindin-3-il)metil)-3,5-dimetilbenzofuran-4-carboxamida 20

De acuerdo con la ruta sintética del Ejemplo 19, el material de partida 3-bromopropina usado en la etapa 5 se sustituyó por 1-bromopropan-2-ona, por consiguiente, se preparó el compuesto del título 20 (17 mg, rendimiento 11 %) en forma de un sólido de color blanco. EM m/z (IEN): 468,3 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, CDCla) 8 11,22 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 7,21 (s, 1H), 6,94 (s, 1H), 5,94 (s, 1H), 4,61-4,62 (d a, 2H), 3,92-3,95 (d a, 2H), 3,89 (s, 3H), 3,29 (dt, 2H), 3,16-3,20 (m, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,65 (s a, 2H), 1,31 (s a, 2H), 0,86 (t, 3H).

Ejemplo 21

6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-W-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-(trifluorometil)benzofuran-4-carboxamida

Etapa 1

3-Bromo-5-(2,2-dietoxietoxi)benzoato de metilo 21b

3-Bromo-5-hidroxibenzoato de metilo 21a (1,9 g, 8,23 mmol, preparado por un método divulgado en "Journal of Medicinal Chemistry, 2013, 56(8), 3217-3227") se disolvió en 60 ml de W,W-dimetilformamida, entonces se añadieron 2-bromo-1,1-dietoxietano (3,23 g, 16,4 mmol) y carbonato de cesio (5,35 g, 16,4 mmol). El sistema de reacción se agitó durante 4 horas a 95 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, la solución de reacción se vertió en agua enfriada con hielo, se extrajo con acetato de etilo (50 ml x 3), se secó sobre sulfato sódico anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto 21b (3,5 g) en forma de un aceite de color amarillo, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 2

6-Bromobenzofuran-4-carboxilato de metilo 21c

Se añadió ácido polifosfórico (5,46 g, 16,4 mmol) a 20 ml de tolueno. La mezcla se calentó a 115 °C, entonces se añadieron 40 ml de una solución previamente preparada de 21b (3,5 g, 10 mmol) en tolueno con agitación. La mezcla se agitó durante 5 horas. Una vez completada la reacción, la mezcla se vertió en agua enfriada con hielo, se neutralizó con una solución saturada de bicarbonato sódico, se extrajo con acetato de etilo (20 ml x 3), se secó sobre sulfato sódico anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 21c (1,08 g, rendimiento 52 %) en forma de un sólido de color amarillo.

Etapa 3

6-((Tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-carboxilato de metilo 21d

21c (1,08 g, 4,25 mmol), tetrahidro-2H-piran-4-amina (0,644 g, 6,38 mmol), tris(dibencilidenoacetona)dipaladio (393 mg, 0,43 mmol), (±)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1 '-binaftaleno (267 mg, 0,43 mmol) y carbonato de cesio (2,6 g, 8,5 mmol) se disolvieron en 60 ml de tolueno. La mezcla se agitó durante 36 horas en una atmósfera de nitrógeno. Una vez completada la reacción, la solución de reacción se vertió en agua enfriada con hielo, se extrajo con acetato de etilo (30 ml x 3), se secó sobre sulfato sódico anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 21d (200 mg, rendimiento 17 %) en forma de un sólido de color amarillo.

Etapa 4

6-(Et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo 21e

21d (200 mg, 0,727 mmol), acetaldehído (160 mg, 3,64 mmol) y 0,2 ml de ác¡do acét¡co se d¡solv¡eron en 4 ml de metanol. Después de ag¡tar durante 24 horas, la mezcla se enfr¡ó por debajo de 0 °C. Se añad¡ó c¡anoboroh¡druro sód¡co (227 mg, 3,6 mmol), y la mezcla se calentó naturalmente a temperatura amb¡ente. La reacc¡ón se controló por CCF hasta que hubo desapareado la mayoría de los mater¡ales de part¡da. Una vez completada la reacc¡ón, la soluc¡ón de reacc¡ón se enfr¡ó a 0 °C, y se añad¡eron 20 ml de una soluc¡ón saturada de b¡carbonato sód¡co para ¡nact¡var la reacc¡ón. La mezcla se extrajo con acetato de et¡lo (10 ml x 3), se secó sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltró. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía en columna sobre gel de síl¡ce con el s¡stema de eluc¡ón B para obtener el compuesto del título 21e (140 mg, rend¡m¡ento 64 %) en forma de un sól¡do de color amar¡llo-verde.

Etapa 5

6-(Et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-5-yodobenzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo 21f

21e (13 mg, 0,043 mmol) se d¡solv¡ó en 2 ml de N,N-d¡met¡lformam¡da, entonces se añad¡eron 5 gotas de ác¡do tr¡fluoroacét¡co, y se añad¡ó N-yodosucc¡n¡m¡da (12 mg, 0,052 ml) a 0 °C. La mezcla se calentó naturalmente a temperatura amb¡ente. La reacc¡ón se controló por CCF hasta que hubo desapareado la mayoría de los mater¡ales de part¡da. Una vez completada la reacc¡ón, la soluc¡ón de reacc¡ón se enfr¡ó a 0 °C, se neutral¡zó med¡ante soluc¡ón saturada de carbonato sód¡co, y se extrajo con acetato de et¡lo. Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón B para obtener el compuesto del título 21f (16 mg, rend¡m¡ento 86 %) en forma de un ace¡te de color amar¡llo.

Etapa 6

6-(Et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-5-(tr¡fluoromet¡l)benzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo 21g

21f (16 mg, 0,0373 mmol), yoduro cuproso (36 mg, 0,187 mmol) y fluorosulfon¡l d¡fluoroacetato de met¡lo (140 mg, 0,75 mmol) se d¡solv¡eron en 2 ml de N,N-d¡met¡lformam¡da. La mezcla se ag¡tó durante 12 horas a 80 °C en una atmósfera de n¡trógeno. Una vez completada la reacc¡ón, la mezcla se concentró a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón B para obtener el compuesto del título 21g (10 mg, rend¡m¡ento 72 %) en forma de un sól¡do de color amar¡llo-verde.

Etapa 7

Ác¡do 6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-5-(tr¡fluoromet¡l)benzofuran-4-carboxíl¡co 21 h

21g (10 mg, 0,027 mmol) se d¡solv¡ó en 4 ml de una mezcla de metanol y tetrah¡drofurano (V:V = 1:1), entonces se añad¡eron 0,27 ml de soluc¡ón de h¡dróx¡do sód¡co 2 N. La mezcla se ag¡tó durante 4 horas a 60 °C. Después de que se hub¡era completado la reacc¡ón, la mezcla se concentró a pres¡ón reduc¡da para ret¡rar la mayoría del d¡solvente. Se añad¡eron 2 ml de tetrah¡drofurano al res¡duo a 0 °C, y se añad¡ó ác¡do clorhídr¡co 1 N para ajustar el pH a 3-4. La mezcla se concentró a pres¡ón reduc¡da para obtener el compuesto del título en bruto 21h (9 mg) en forma de un sól¡do de color amar¡llo, que se usó d¡rectamente en la s¡gu¡ente etapa s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal.

Etapa 8

6-(Et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-N-((4-metox¡-6-met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)-5-(tr¡fluoromet¡l)benzofuran-4-carboxam¡da 21

El producto en bruto 21h (9 mg, 0,025 mmol) se d¡solv¡ó en 3 ml de N,N-d¡met¡lformam¡da, entonces se añad¡eron hexafluorofosfato de 2-(7-azabenzotr¡azol-1-¡l)-N,N,N',N-tetramet¡luron¡o (14 mg, 0,041 mmol) y N,N-d¡¡soprop¡let¡lam¡na (17 mg, 0,135 mmol). La mezcla se ag¡tó 20 m¡nutos, entonces se añad¡ó 1o (8,3 mg, 0,041 mmol) a la soluc¡ón de reacc¡ón. La mezcla se ag¡tó durante 5 horas. Una vez completada la reacc¡ón, se añad¡eron 20 ml de soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co, y la mezcla se extrajo con acetato de et¡lo (10 ml x 3). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón A para obtener el compuesto del título 21 (10 mg, rend¡m¡ento 78 %) en forma de un sól¡do de color blanco.

EM (IEN) m/z: 508,3 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, CDCla) 87,98 (s a, 1H), 7,53 (m, 1H), 7,32 (m, 1H), 6,92 (s, 1H), 5,96 (s, 1H), 4,65 (d, 2H), 4,09 4,05 (m, 2H), 3,92 (s, 3H), 3,89-3,85 (m, 1H), 3,55-3,50 (m, 2H), 3,37 (c, 2H), 2,27 (s, 3H), 1,85-1,79 (m, 4H), 1,20 (t, 3H).

Ejemplo 22

5-Cloro-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-W-((4-metox¡-6-met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)benzofuran-4-carboxamida

Etapa 1

3-Bromo-2-cloro-5-n¡trobenzoato de met¡lo 22b

2-Cloro-5-n¡trobenzoato de met¡lo (6,0 g, 27,8 mmol) se d¡solv¡ó en 30 ml de ác¡do sulfúr¡co concentrado, entonces se añad¡ó W-bromosucc¡n¡m¡da (5,2 g, 29,2 mmol) a la soluc¡ón de reacc¡ón anter¡or. El s¡stema de reacc¡ón se agitó durante 1 hora a 60 °C. Después de que se hub¡era completado la reacc¡ón, el s¡stema de reacc¡ón se vert¡ó en 300 ml de agua helada y se extrajo con acetato de et¡lo (50 ml x 3). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con una soluc¡ón saturada de b¡carbonato sód¡co (100 ml) y soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co (100 ml), se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da para obtener el compuesto del título en bruto 22b (7,58 g) en forma de un sól¡do de color verde claro, que se usó d¡rectamente en la s¡gu¡ente reacc¡ón s¡n pur¡f¡cac¡ón.

Etapa 2

5-Am¡no-3-bromo-2-clorobenzoato de met¡lo 22c

El producto en bruto 22b (7,5 g, 25 mmol) se d¡solv¡ó en 55 ml de una mezcla de etanol y agua (V:V = 8:3), y se añad¡ó cloruro de amon¡o (11,2 g, 203 mmol). El s¡stema de reacc¡ón se calentó a 70 °C, se añad¡ó con polvo de h¡erro (7,1 g, 127 mmol), y se agitó durante 2 horas. Una vez completada la reacc¡ón, la mezcla se f¡ltró a través de una capa de cel¡te. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, se neutral¡zó con b¡carbonato sód¡co saturado, y se extrajo con acetato de etilo (50 ml x 3). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co (100 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto 22c (5,0 g) en forma de un sólido de color amarillo, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 3

3-Bromo-2-cloro-5-yodobenzoato de metilo 22d

El producto en bruto 22c (7,0 g, 26,5 mmol) se disolvió en 50 ml de ácido sulfúrico al 40 % y 10 ml de N,N-dimetilformamida. La mezcla se enfrió a 0 °C, y se añadieron 5 ml de una solución previamente preparada de nitrito sódico (2,0 g, 29,1 mmol) gota a gota. La mezcla se agitó 1 horas, entonces se añadieron 50 ml de una solución previamente preparada de yoduro potásico (22 g, 132 mmol) a la solución de reacción anterior. La mezcla se calentó a 70 °C y se agitó durante 30 minutos. Una vez completada la reacción, la mezcla se extrajo con acetato de etilo (50 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con agua (100 ml) y solución saturada de cloruro sódico (100 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de eluyente B para obtener el compuesto del título 22d (8,0 g, rendimiento 80 %) en forma de un sólido de color amarillo claro.

Etapa 4

Ácido 3-bromo-2-cloro-5-hidroxibenzoico 22e

22d (7,0 g, 18,7 mmol) se disolvió en 10 ml de tetrahidrofurano, entonces se añadieron 70 ml de solución de hidróxido sódico 4N. La mezcla se agitó durante 2 horas a 60 °C, entonces se concentró a presión reducida para retirar los disolventes orgánicos, y se añadió óxido cuproso (7,7 g, 53,5 mmol). La mezcla se agitó durante 1 hora a 120 °C en un microondas. Una vez completada la reacción, la mezcla se filtró. El filtrado se neutralizó con ácido clorhídrico 12 M, y se extrajo con acetato de etilo (100 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico (100 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto 22e (6,0 g) en forma de un aceite de color pardo, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 5

3-Bromo-2-cloro-5-hidroxibenzoato de metilo 22f

El producto en bruto 22e (6,0 g, 24 mmol) se disolvió en 30 ml de metanol, entonces se añadieron 2 ml de ácido sulfúrico concentrado gota a gota a la solución de reacción. El sistema de reacción se agitó durante 12 horas a 60 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, la mezcla se concentró a presión reducida, y se disolvió en 50 ml de acetato de etilo. se añadieron 100 ml de agua, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (50 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron sucesivamente con agua (100 ml) y solución saturada de cloruro sódico (100 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de eluyente B para obtener el compuesto del título 22f (3,3 g, rendimiento 52 %) en forma de un sólido de color blanco.

Etapa 6

3-Bromo-2-cloro-5-(2,2-dietoxietoxi)benzoato de metilo 22g

22f (3,3 g, 12,5 mmol) se disolvió en 30 ml de N,N-dimetilformamida, entonces se añadieron 2-bromo-1,1-dietoxietano (2,96 g, 15 mmol) y carbonato potásico (3,4 g, 25 mmol). La mezcla se agitó durante 3 horas a 120 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, se añadieron 150 ml de agua, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (50 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron sucesivamente con agua (100 ml) y solución saturada de cloruro sódico (100 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de eluyente B para obtener el compuesto del título 22g (3,5 g, rendimiento 74 %) en forma de un aceite incoloro.

Etapa 7

6-Bromo-5-clorobenzofuran-4-carboxilato de metilo 22h

Se añadió ácido polifosfórico (1,0 g) a 15 ml de tolueno. La mezcla se calentó a 100 °C, y se añadieron 10 ml de una solución previamente preparada de 22g (780 mg, 2,1 mmol) en tolueno con agitación. La mezcla se agitó durante 4 horas. Una vez completada la reacción, se separó el sobrenadante, y el residuo se añadió con agua y se extrajo con acetato de etilo (20 ml x 3). La fase de acetato de etilo y el sobrenadante se combinaron, se lavaron sucesivamente con una solución saturada de bicarbonato sódico (30 ml) y solución saturada de cloruro sódico (100 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 22h (150 g, rendimiento 25 %) en forma de un sólido de color amarillo claro.

Etapa 8

5-Cloro-6-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-carboxilato de metilo 22i

22h (120 mg, 0,41 mmol), tetrahidro-2H-piran-4-amina (60 mg, 0,6 mmol), tris(dibencilidenoacetona)dipaladio (38 g, 0,04 mmol), (±)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftaleno(26 mg, 0,04 mmol) y carbonato de cesio (405 mg, 1,24 mmol) se disolvieron en 2 ml de tolueno. El sistema de reacción se agitó durante 16 horas a 80 °C en una atmósfera de argón. Una vez completada la reacción, la mezcla se filtró a través de una capa de celite. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 22i (125 mg, rendimiento 87 %) en forma de un sólido de color amarillo.

Etapa 9

5-Cloro-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-carboxilato de metilo 22j

Se añadieron 22i (50 mg, 0,16 mmol), acetaldehído (36 mg, 0,81 mmol) y ácido acético (49 mg, 0,81 mmol) a 5 ml de 1,2-dicloroetano. La mezcla se agitó 2 horas, entonces se añadió triacetoxiborohidruro sódico (102 mg, 0,48 mmol). La mezcla se agitó durante 12 horas. Una vez completada la reacción, la solución de reacción se concentró a presión reducida, se neutralizó con una solución saturada de bicarbonato sódico, y se extrajo con acetato de etilo (10 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron sucesivamente con agua (50 ml) y solución saturada de cloruro sódico (50 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 22j (26 mg, rendimiento 50 %) en forma de un sólido de color amarillo.

Etapa 10

Ácido 5-cloro-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-carboxílico 22k

22j (51 mg, 0,16 mmol) se disolvió en 3 ml de una mezcla de tetrahidrofurano y metanol (V:V = 1:2), entonces se añadieron 3 ml de solución de hidróxido sódico 2 N. La mezcla se agitó durante 1 hora a 60 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, la mezcla se concentró a presión reducida para retirar los disolventes orgánicos, se añadió ácido clorhídrico 12 M para ajustar el pH de la solución de reacción a 5, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (10 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico (50 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto 22k (42 mg) en forma de un aceite de color rojo parduzco, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 11

5-Cloro-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-carboxamida 22

El producto en bruto 22k (8 mg, 0,025 mmol) se disolvió en 1 ml de N,N-dimetilformamida, entonces se añadieron hexafluorofosfato de 2-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N-tatrametiluronio (14 mg, 0,037 mmol), N,N-diisopropiletilamina (16 mg, 0,12 mmol) y 1o (7 mg, 0,032 mmol) a la solución anterior. La mezcla se agitó durante 12 horas. Una vez completada la reacción, se añadieron 10 ml de agua, y la solución de reacción se extrajo con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 8:1) (10 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con agua (50 ml) y cloruro sódico saturado (50 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 22 (8 mg, rendimiento 70 %) en forma de un sólido de color blanco.

EM (IEN) m/z: 474,3 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 811,46 (s a, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,97 (s, 1H), 7,56 (s, 1H), 6,78 (s, 1H), 6,10 (s, 1H), 4,27 (d, 2H), 3,85 (s a, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,23 (t, 2H), 3,11-3,15 (m, 3H), 2,18 (s, 3H), 1,66-1,69 (m, 2H), 1,50-1,57 (m, 2H), 0,83 (t, 3H).

Ejemplo 23

N-((4-Metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-metil-6-(metil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-carboxamida

Etapa 1

5-Met¡l-6-(met¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo 23a

4f (60 mg, 0,208 mmol) se d¡solv¡ó en 5 ml de metanol, entonces se añad¡eron formaldehído (18,7 mg, 0,623 mmol) y ác¡do acét¡co (62,4 mg, 1,04 mmol). La mezcla se ag¡tó durante 1 hora a 0 °C, entonces se calentó a temperatura amb¡ente. La mezcla se ag¡tó 12 horas, entonces se añad¡ó c¡anoboroh¡druro sód¡co (39,2 mg, 0,624 mmol) a la soluc¡ón anter¡or. La reacc¡ón se ag¡tó durante 6 horas. Una vez completada la reacc¡ón, la soluc¡ón de reacc¡ón se concentró a pres¡ón reduc¡da, entonces se añad¡eron 20 ml de agua, y se extrajo con acetato de etilo (10 ml x 3). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co (50 ml), se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se futraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón B para obtener el compuesto del título 23a (50 mg, rend¡m¡ento 75 %) en forma de un líqu¡do ¡ncoloro.

Etapa 2

Ác¡do 5-met¡l-6-(met¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carboxíl¡co 23b

23a (50 mg, 0,165 mmol) se d¡solv¡ó en 2 ml de mezcla de metanol y agua (V:V = 1:1), entonces se añad¡ó h¡dróx¡do sód¡co (33 mg, 0,825 mmol). El s¡stema de reacc¡ón se ag¡tó durante 16 horas a 75 °C. Después de que se hub¡era completado la reacc¡ón, la mezcla se enfr¡ó a temperatura amb¡ente. se añad¡ó ác¡do clorhídr¡co 2 N para ajustar el pH de la soluc¡ón de reacc¡ón a 3-4, y la mezcla se extrajo con acetato de et¡lo (10 ml x 3). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co (30 ml), se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltraron. El res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón B para obtener el compuesto del título 23b (20 mg, rend¡m¡ento 48 %) en forma de un líqu¡do ¡ncoloro.

Etapa 3

W-((4-Metox¡-6-met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)-5-met¡l-6-(met¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)benzofuran-4-carboxam¡da 23

23b (15 mg, 0,052 mmol) se disolvió en 2 ml de W,W-dimetilformamida, entonces se añadieron hexafluorofosfato de 2-(7-azabenzotriazol-1-il)-W,W,W',W'-tetrametiluronio (47,7 mg, 0,125 mmol) y W,W-diisopropiletilamina (18,3 mg, 0,14 mmol). La mezcla se agitó 1 hora a 0 °C, entonces se añadió 1o (11,58 mg, 0,057 mmol). La mezcla se agitó durante 12 horas. Una vez completada la reacción, se añadieron 50 ml de agua, y la solución de reacción se extrajo con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 10:1) (10 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico (30 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 23 (21 mg, rendimiento 91 %) en forma de un sólido de color blanco. EM (IEN) m/z: 440,3 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, CDCla) 812,30 (s a, 1H), 7,48 (d, 1H), 7,18 (s a, 1H), 6,74 (s, 1H), 5,94 (s, 1H), 4,64 (d, 2H), 3,95 3,98 (m, 2H), 3,91 (s, 3H), 3,30-3,36 (m, 2H), 2,96-3,01 (m, 1H), 2,65 (s, 3H), 2,39 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 1,69-1,73 (m, 2H), 1,45 (s a, 2H).

Ejemplo 24

6-(((1r,4r)-4-(Dimetilamino)ciclohexil)(etil)amino)-W-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-metilbenzofuran-4-carboxamida

Etapa 1

6-(((1r,4r)-4-(Dimetilamino)ciclohexil)amino)-5-metilbenzofuran-4-carboxilato de metilo 24b

4e (200 mg, 0,75 mmol), (1r, 4r)-W7,W7-dimetilciclohexano-1,4-diamina 24a (260 mg, 1,49 mmol, preparada por un método divulgado en "Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2011, 21(15), 4622-4628"), tris(dibencilidenoacetona)dipaladio (137 mg, 0,15 mmol), (±)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1 '-binaftaleno (140 mg, 0,22 mmol) y carbonato de cesio (731,25 mg, 2,25 mmol) se disolvieron en 20 ml de tolueno. El sistema de reacción se agitó a la temperatura de reflujo durante 12 horas en una atmósfera de nitrógeno. Una vez completada la reacción, se añadieron 100 ml de agua al sistema de reacción, y la mezcla se extrajo con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 10:1) (20 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico (50 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 24b (15 mg, rendimiento 6,1 %) en forma de un sólido de color amarillo.

Etapa 2

6-(((1r,4r)-4-(Dimetilamino)ciclohexil)(etil)amino)-5-metilbenzofuran-4-carboxilato de metilo 24c

Se añadieron 24b (15 mg, 0,045 mmol), acetaldehído (6,3 mg, 0,136 mmol) y ácido acético (13,3 mg, 0,22 mmol) a en 3 ml de etanol. La mezcla se agitó durante 1 hora a 0 °C, entonces se calentó lentamente a temperatura ambiente y se agitó durante 12 horas. Se añadió cianoborohidruro sódico (8,5 mg, 0,135 mmol), y la mezcla se agitó durante 10 horas. Una vez completada la reacción, el sistema de reacción se añadió con 20 ml de agua y se extrajo con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 10:1) (10 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con cloruro sódico saturado (30 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto 24c (20 mg) en forma de un sólido de color amarillo, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 3

Ácido 6-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclohexil)(etil)amino)-5-metilbenzofuran-4-carboxílico 24d

El producto en bruto 24c (20 mg, 0,056 mmol) se disolvió en 4 ml de una mezcla de metanol y agua (V:V = 1:1), entonces se añadió hidróxido potásico (18,7 mg, 0,335 mmol). La mezcla se agitó durante 12 horas a 80 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, se añadió ácido clorhídrico 2 N para ajustar el pH de la solución de reacción a 3-4. Después de concentrar la mezcla a presión reducida, el producto en bruto se disolvió en 8 ml de una mezcla de cloruro de metileno y tetrahidrofurano (V:V = 1:1), y se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto 24d (25 mg) en forma de un sólido de color pardo, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 4

6-((1r,4r)-4-(D¡met¡lam¡no)c¡clohex¡l)(et¡l)am¡no)-A/-((4-metox¡-6-met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡rid¡n-3-¡l)met¡l)-5-metilbenzofuran-4-carboxamida 24

El producto en bruto 24d (25 mg, 0,073 mmol) se disolvió en 2 ml de N,N-dimetilformamida, entonces se añadieron hexafluorofosfato de 2-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (41,8 mg, 0,110 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (28 mg, 0,219 mmol). La reacción se agitó durante 1 hora a 0 °C. Se añadió 1o (11,58 mg, 0,057 mmol), y la mezcla se agitó durante 12 horas. Una vez completada la reacción, se añadieron 2 ml de agua para inactivar la reacción, y la mezcla se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 24 (4,9 mg, rendimiento 14 %) en forma de un sólido de color blanco.

EM (IEN) m/z: 495,4 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, CDCla) 811,62 (s a, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,20 (s a, 1H), 6,77 (s, 1H), 5,93 (s, 1H), 5,35 (s a, 1H), 4,66 (d, 2H), 3,91 (s, 3H), 3,07 (c, 2H), 2,65-2,71 (m, 1H), 2,39 (s, 3H), 2,21 (s, 6H), 2,15 (s, 3H), 2,02 (s a, 1H), 1,85-1,93 (m, 4H), 1,32-1,43 (m, 4H), 0,86 (t, 3H).

Ejemplo 25

6-(Etil(1-(metilsulfonil)piperidin-4-il)amino)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-metilbenzofuran-4-carboxamida

Etapa 1

4-((4-(Metoxicarbonil)-5-metilbenzofuran-6-il)amino)piperidina-1-carboxilato de ferc-butilo 25b

4e (810 mg, 3,02 mmol), 4-aminopiperidina-1-carboxilato de ferc-butilo 25a (1200 mg, 6,04 mmol, preparado por un método divulgado en "Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2011, 21(3), 983-988"), tris(dibencilidenoacetona)dipaladio (553 mg, 0,604 mmol), (±)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1 '-binaftaleno (564 mg, 6,04 mmol) y carbonato de cesio (1,96 g, 6,04 mmol) se disolvieron en 10 ml de tolueno. La mezcla se agitó durante 72 horas a 110 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, la mezcla se filtró a través de celite. se añadieron 60 ml de acetato de etilo, y la mezcla se lavó con cloruro sódico saturado (100 ml), se secó sobre sulfato sódico anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 25b (1 g, rendimiento 83 %) en forma de un líquido amarillo.

Etapa 2

4-(Etil(4-(metoxicarbonil)-5-metilbenzofuran-6-il)amino)piperidina-1-carboxilato de ferc-butilo 25c

25b (1 g, 2,58 mmol) se disolvió en 10 ml de metanol, entonces se añadieron acetaldehído (360 mg, 7,73 mmol) y ácido acético (774 mg, 12,9 mmol). La mezcla se agitó a 0 °C durante 1 hora, entonces se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 12 horas. Se añadió cianoborohidruro sódico (486 mg, 7,74 mmol), y la mezcla se agitó durante 10 horas. Una vez completada la reacción, se añadieron 50 ml de agua a la solución de reacción, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (20 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico (100 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 25c (573,8 mg, rendimiento 62,8 %) en forma de un líquido amarillo.

Etapa 3

6-(Etil(piperidin-4-il)amino)-5-metilbenzofuran-4-carboxilato de metilo 25d

Se añadió 25c (184 mg, 0,58 mmol) a 12 ml de diclorometano, entonces se añadieron 3 ml de ácido trifluoroacético.

La mezcla se agitó durante 2 horas. Una vez completada la reacción, la mezcla se neutralizó con una solución saturada de bicarbonato sódico, y se extrajo con acetato de etilo (20 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto 25d (156) en forma de un líquido de color pardo, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 4

6-(Etil(1-(metilsulfonil)piperidin-4-il)amino)-5-metilbenzofuran-4-carboxilato de metilo 25e

El producto en bruto 25d (52 mg, 0,16 mmol) se añadió a 10 ml de diclorometano, se añadió trietilamina (64,6 mg, 0,64 mmol), entonces se añadió cloruro de metanosulfonilo (37,8 mg, 0,33 mmol) a 0 °C. La mezcla se calentó lentamente a temperatura ambiente, y se agitó durante 12 horas. Una vez completada la reacción, se añadieron 50 ml de agua a la solución de reacción, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (20 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico (20 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 25e (20 mg, rendimiento 33 %) en forma de un líquido incoloro.

Etapa 5

Ácido 6-(etil(1-(metilsulfonil)piperidin-4-il)amino)-5-metilbenzofuran-4-carboxílico 25f

25e (20 mg, 0,05 mmol) se disolvió en 1 ml de metanol y 1 ml de agua, entonces se añadió hidróxido potásico (14,2 mg, 0,25 mmol). La mezcla se agitó durante 12 horas a 70 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, se añadió ácido clorhídrico 2 N para ajustar el pH de la solución de reacción a 3-4, y la mezcla se extrajo con una mezcla de diclorometano y tetrahidrofurano (V:V = 1:1) (10 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico (20 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto 25f (16 mg) en forma de un líquido incoloro, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 6

6-(Etil(1-(metilsulfonil)piperidin-4-il)amino)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-metilbenzofuran-4-carboxamida 25

El producto en bruto 25f (8 mg, 0,21 mmol) se disolvió en 2 ml de N,N-dimetilformamida, entonces se añadieron hexafluorofosfato de 2-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N,-tetrametiluronio (12 mg, 0,0315 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (8 mg, 0,063 mmol) a la solución anterior. La mezcla se agitó durante 1 hora a 0 °C. Se añadió 1o (5,2 mg, 0,025 mmol), y la reacción se agitó durante 48 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, se añadieron 20 ml de agua, y la mezcla se extrajo con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 10:1) (10 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico (20 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 25 (12,5 mg, rendimiento 11 %) en forma de un sólido de color blanco.

EM (IEN) m/z: 531,2 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, CDCla) 8 12,5 (s a, 1H), 7,51 (d, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,22 (s a, 1H), 6,77 (s, 1H), 5,96 (s, 1H), 4,65 (d, 2H), 3,92 (s, 3H), 3,72-3,69 (m, 2H), 3,17-3,11 (m, 1H), 3,07 (c, 2H), 2,96-2,89 (m, 2H), 2,74 (s, 3H), 2,67 (t, 2H), 2,39 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 1,90-1,71 (m, 4H), 0,88 (t, 3H).

Ejemplo 26

6-((1-Acetilpiperidin-4-il)(etil)amino)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-metilbenzofuran-4-carboxamida 26

De acuerdo con la ruta sintética del Ejemplo 25, el material de partida cloruro de metanosulfonilo usado en la etapa 4 se sustituyó por anhídrido acético, por consiguiente, se preparó el compuesto del título 26 (10 ,1 mg, rendimiento 50 %) en forma de un sólido de color blanco.

EM (IEN) m/z: 495,3 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, CD3OD) 87,76 (s a, 1H), 7,45 (s a, 1H), 6,80 (s a, 1H), 6,30 (s, 1H), 4,53 (s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,91 (s a, 2H), 3,36-3,30 (m, 2H), 3,23 (c, 2H), 3,11-3,05 (m, 3H), 2,41 (s a, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,07 (s, 3H), 1,85 (s a, 2H), 1,60 (s a, 2H), 0,90 (t, 3H).

Ejemplo 27

5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-fluoro-W-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-carboxamida

Etapa 1

Ácido 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-carboxílico 27a

1¡ (260 mg, 0,79 mmol) se disolvió en 15 ml de una mezcla de metanol y tetrahidrofurano (V:V = 2:1), entonces se añadieron 5 ml de solución de hidróxido sódico 4 N. La mezcla se agitó durante 12 horas a 60 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, se añadió ácido clorhídrico 12 M para ajustar el pH de la solución de reacción a 4, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (20 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico (50 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto 27a (220 mg) en forma de un sólido de color blanco, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 2

5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-carboxilato de 4-metoxibencilo 27b

El producto en bruto 27a (170 mg, 0,54 mmol) se disolvió en 15 ml de acetona, entonces se añadieron 1-(clorometil)-4- metoxibenceno (168 mg, 1,07 mol, Accela) y carbonato potásico (148 mg, 1,07 mmol) a la solución anterior. La mezcla se agitó durante 48 horas. Una vez completada la reacción, la mezcla se concentró a presión reducida, se añadieron sucesivamente 30 ml de agua y 20 ml de acetato de etilo. Dos fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (20 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico (50 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 27b (230 mg, rendimiento 99 %) en forma de un aceite incoloro.

Etapa 3

5- Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-fluorobenzofuran-4-carboxilato de 4-metoxibencilo 27c

Se añadió 27b (230 mg, 0,53 mmol) a 8 ml de tetrahidrofurano. La mezcla se enfrió a -70 °C, se añadieron 0,79 ml de diisopropilamida de litio 2,0 M, y la mezcla se agitó durante 1 hora a -70 °C. Se añadió N-fluorodibencenosulfonamida (182 mg, 0,58 mmol, Bepharm), y la mezcla se agitó durante 1 hora a -70 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, la mezcla se calentó lentamente a temperatura ambiente, entonces se añadieron 20 ml de solución saturada de cloruro de amonio para inactivar la reacción. La mezcla se extrajo con acetato de etilo (10 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico (20 ml), se secaron sobre sulfato sódico y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 27c (17 mg, rendimiento 7 %) en forma de un aceite de color amarillo.

Etapa 4

Ácido 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-fluorobenzofuran-4-carboxílico 27d

27c (17 mg, 0,037 mmol) se disolvió en 3 ml de diclorometano, entonces se añadieron 0,5 ml de ácido trifluoroacético. La reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, la mezcla se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto 27d (20 mg) en forma de un aceite de color amarillo, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 5

5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-fluoro-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-carboxamida 27

El producto en bruto 27d (20 mg, 0,06 mmol) se disolvió en 3 ml de N,N-dimetilformamida, entonces se añadieron hexafluorofosfato de 2-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (32,6 mg, 0,85 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (39 mg, 0,30 mmol) a la solución anterior. La mezcla se agitó durante 1 hora. Entonces, Se añadió 1o (18 mg, 0,00 mmol), y la mezcla se agitó durante 12 horas. Una vez completada la reacción, se añadieron 20 ml de agua, y la mezcla se extrajo con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 8:1). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 27 (12 mg, rendimiento 41 %) en forma de un sólido de color blanco.

EM (IEN) m/z: 486,4 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 811,48 (s a,1H), 8,06 (t, 1H), 7,43 (s, 1H), 1,55 (d, 1H), 6,10 (s, 1H), 4,25 (d, 2H), 3,83 (d a, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,21 (t, 2H), 3,03 (c, 2H), 3,90-3,96 (m, 1H), 2,82 (c, 2H), 2,18 (s, 3H), 1,63-1,67 (d a, 2H), 1,45 1,53 (m, 2H), 1,05 (t, 3H), 0,81 (t, 3H).

Ejemplo 28

2-Ciclopropil-6-((ciclopropilmetil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-etil-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-carboxamida

Etapa 1

6-((C¡cloprop¡lmet¡l)(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-5-et¡lbenzofuran-4-carbox¡lato de metilo 28a

1h (950 mg, 3,03 mmol) se d¡solv¡ó en 50 ml de 1,2-d¡cloroetano, entonces se añad¡eron c¡clopropanocarbaldehído (1,1 g, 15,7 mmol) y ác¡do acét¡co (940 mg, 15,7 mmol) a la soluc¡ón anter¡or. La mezcla se ag¡tó 12 horas, entonces se añad¡ó tr¡acetox¡boroh¡druro sód¡co (1,97 g, 9,4 mmol). La mezcla se agitó durante 3 horas. Una vez completada la reacc¡ón, la soluc¡ón de reacc¡ón se concentró a pres¡ón reduc¡da, se neutral¡zó con una soluc¡ón saturada de b¡carbonato sód¡co, y se extrajo con acetato de et¡lo (20 ml x 3). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron sucesivamente con agua (50 ml) y soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co (50 ml), se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía sobre gel de síl¡ce con el s¡stema de eluc¡ón B para obtener el compuesto del título 28a (850 mg, rend¡m¡ento 76 %) en forma de un ace¡te de color amar¡llo claro.

Etapa 2

2-Bromo-6-((c¡cloprop¡lmet¡l)(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-5-et¡lbenzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo 28b

28a (400 mg, 1,1 mmol) se d¡solv¡ó en 15 ml de tetrah¡drofurano. La mezcla se enfr¡ó a -70 °C, entonces se añad¡eron 1,65 ml de d¡¡soprop¡lam¡da de l¡t¡o 2,0 M a la soluc¡ón anter¡or. La mezcla se ag¡tó durante 1 hora a -70 °C. Se añad¡eron 15 ml de una soluc¡ón prev¡amente preparada de 1,2-d¡bromo-1,1,2,2-tetracloroetano (429 mg, 1,3 mmol) en tetrah¡drofurano gota a gota a la soluc¡ón de reacc¡ón. La reacc¡ón se ag¡tó durante 1 hora a -70 °C. Después de que se hub¡era completado la reacc¡ón, se añad¡eron 50 ml de soluc¡ón saturada de cloruro de amon¡o para ¡nact¡var la reacc¡ón, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (20 ml x 3). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co (50 ml), se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón B para obtener el compuesto del título 28b (150 mg, rend¡m¡ento 31 %) en forma de un ace¡te de color amar¡llo claro.

Etapa 3

2-C¡cloprop¡l-6-((c¡cloprop¡lmet¡l)(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-5-et¡lbenzofuran-4-carbox¡lato de met¡lo 28c

28b (50 mg, 0,11 mmol) se d¡solv¡ó en 5 ml de tolueno, entonces se añad¡eron ác¡do c¡cloprop¡lborón¡co (20 mg, 0,23 mmol), acetato de paladio (5 mg, 0,2 mmol), triciclohexilfosfina (10 mg, 0,03 mmol) y fosfato potásico trihidrato (91 mg, 0,34 mmol) a la solución anterior. La reacción se agitó durante 12 horas a 100 °C en una atmósfera de argón. Una vez completada la reacción, la mezcla se filtró a través de celite. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución B para obtener el compuesto del título 28c (33 mg, rendimiento 73 %) en forma de un aceite incoloro.

Etapa 4

Ácido 2-ciclopropil-6-((ciclopropilmetil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-etilbenzofuran-4-carboxílico 28d

Se añadió 28c (33 mg, 0,08 mmol) a 5 ml de tetrahidrofurano y 15 ml de metanol, entonces se añadieron 5 ml de solución de hidróxido sódico 4 M. El sistema de reacción se agitó durante 12 horas a 60 °C. Después de que se hubiera completado la reacción, la mezcla se concentró para retirar los disolventes orgánicos. Se añadió una pequeña cantidad de agua, se añadió ácido clorhídrico 12 M para ajustar el pH a 3, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (10 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con solución saturada de cloruro sódico (50 ml), se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título en bruto 28d (25 mg) en forma de un sólido de color blanco, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 5

2-Ciclopropil-6-((ciclopropilmetil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-etil-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-carboxamida 28

El producto en bruto 28d (25 mg, 0,065 mmol) se disolvió en 3 ml de N,N-dimetilformamida, entonces se añadieron hexafluorofosfato de 2-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (47 mg, 0,098 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (42 mg, 0,33 mmol) a la solución anterior. La mezcla se agitó durante 1 hora. Se añadió 1o (20 mg, 0,098 mmol), y la mezcla se agitó durante 12 horas. Una vez completada la reacción, se añadieron 20 ml de agua a la solución de reacción, y la mezcla se extrajo con una mezcla de diclorometano y metanol (V:V = 8:1). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron sucesivamente con agua y solución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 28 (12 mg, rendimiento 34 %) en forma de un sólido de color amarillo claro.

EM (IEN) m/z: 534,5 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 8 11,48 (s a, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 6,36 (s, 1H), 6,12 (s, 1H), 4,27 (s a, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,79 (s a, 2H), 3,28 (s a, 2H), 3,17-3,23 (m, 2H), 2,96-3,00 (m, 1H), 2,83-2,86 (m, 2H), 2,19 (s, 3H), 2,06 (s a, 1H), 1,38-1,46 (m, 2H), 1,24 (s a, 2H), 1,06 (t, 3H), 0,98 (s a, 2H), 0,83 (s a, 2H), 0,64 (s a, 1H), 0,28 (s a, 2H), 0,03 (s a, 2H).

Ejemplo 29

6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-metil-2-(trifiuorometil)benzofuran-4-carboxamida

Etapa 1

6-(Et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-5-metil-2-(tr¡fluoromet¡l)benzofuran-4-carbox¡lato de metilo 29a

15a (50 mg, 0,126 mmol) se d¡solv¡ó en 8 ml de N,N-dimet¡lformamida, entonces se añad¡eron fluorosulfonil d¡fluoroacetato de met¡lo (500 mg, 2,52 mmol) y yoduro cuproso (120 mg, 0,63 mmol) a la soluc¡ón anter¡or. La reacc¡ón se ag¡tó durante 24 horas a 120 °C en una atmósfera de nitrógeno. Una vez completada la reacc¡ón, se añad¡eron 50 ml de agua a la soluc¡ón de reacc¡ón, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (10 ml x 3). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co (50 ml), se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón B para obtener el compuesto del título 29a (10 mg, rend¡m¡ento 20,8 %) en forma de un líqu¡do amar¡llo.

Etapa 2

Ác¡do 6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)amino)-5-met¡l-2-(tr¡fluoromet¡l)benzofuran-4-carboxíl¡co 29b

Se añad¡ó 29a (10 mg, 0,026 mmol) a 2 ml de una mezcla de agua y metanol (V:V = 1:1), entonces se añad¡ó h¡dróx¡do sód¡co (5,16 mg, 0,129 mmol). El s¡stema de reacc¡ón se agitó durante 16 horas a 70 °C. Después de que se hub¡era completado la reacc¡ón, la soluc¡ón de reacc¡ón se enfr¡ó a 5 °C, se añad¡ó ác¡do clorhídr¡co 2 N para ajustar el pH a 3-4, y la mezcla se concentró a pres¡ón reduc¡da para obtener el compuesto del título en bruto 29b (10 mg) en forma de un sólido de color blanco, que se usó d¡rectamente en la s¡gu¡ente etapa s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal.

Etapa 3

6-(Et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-N-((4-metox¡-6-met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡din-3-¡l)met¡l)-5-met¡l-2-(tr¡fluoromet¡l)benzofuran-4-carboxam¡da 29

El producto en bruto 29b (10 mg, 0,027 mmol) se d¡solv¡ó en 3 ml de N,N-dimet¡lformamida, entonces se añad¡eron hexafluorofosfato de 2-(7-azabenzotr¡azol-1-il)-N,N,N',N'-tetramet¡luron¡o (15,4 mg, 0,041 mmol) y N,N-d¡¡soprop¡let¡lam¡na (10,5 mg, 0,081 mmol). El s¡stema de reacc¡ón se enfr¡ó a 0 °C y se ag¡tó durante 1 hora. Se añad¡ó 1o (6,6 mg, 0,032 mmol), y la mezcla se agitó durante 12 horas a temperatura amb¡ente. Una vez completada la reacc¡ón, se añad¡eron 40 ml de agua, y la mezcla se extrajo con una mezcla de d¡clorometano y metanol (V:V = 8:1) (10 ml x 3). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co (50 ml), se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se purificó por cromatografía de capa fina con el sistema de elución A para obtener el compuesto del título 29 (1,6 mg, rendimiento 11,4 %) en forma de un sólido de color blanco.

EM (IEN) m/z: 522,3 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, CDCla) 87,52 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,19 (s a, 1H), 5,98 (s, 1H), 4,66 (s, 2H), 4,00-3,95 (m, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,36-3,30 (m, 2H), 3,12 (c, 2H), 3,04-2,99 (m, 1H), 2,41 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 1,72 (s a, 4H), 0,89 (t, 3H).

Ejemplo 30

2-C¡ano-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-N-((4-metox¡-6-met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡rid¡n-3-¡l)met¡l)-5 metilbenzofuran-4-carboxamida

Etapa 1

Ácido 2-bromo-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-5-met¡lbenzofuran-4-carboxíl¡co

Se añad¡ó 15a (30 mg, 0,076 mmol) a 2 ml de una mezcla de agua y metanol (V:V = 1:1), entonces se añad¡ó h¡dróx¡do sód¡co (15,1 mg, 0,378 mmol). El s¡stema de reacc¡ón se agitó durante 12 horas a 70 °C. Después de que se hub¡era completado la reacc¡ón, la soluc¡ón de reacc¡ón se enfr¡ó a 5 °C, se añad¡ó ác¡do clorhídrico 2 N para ajustar el pH a 3-4, y la mezcla se concentró a pres¡ón reduc¡da para obtener el compuesto del título en bruto 30a (30 mg) en forma de un sólido de color blanco, que se usó d¡rectamente en la s¡gu¡ente etapa s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal.

Etapa 2

2-Bromo-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-N-((4-metox¡-6-met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)-5-met¡lbenzofuran-4-carboxam¡da 30b

El producto en bruto 30a (30 mg, 0,078 mmol) se d¡solv¡ó en 5 ml de N,N-d¡met¡lformam¡da, entonces se añad¡eron hexafluorofosfato de 2-(7-azabenzotr¡azol-1-¡l)-N,N,N',N'-tetramet¡luron¡o (44,5 mg, 0,117 mmol) y N,N-d¡¡soprop¡let¡lam¡na (30,2 mg, 0,234 mmol) a la soluc¡ón anter¡or. El s¡stema de reacc¡ón se enfr¡ó a 0 °C y se ag¡tó durante 1 hora. Se añad¡ó 1o (6,6 mg, 0,032 mmol), y la mezcla se ag¡tó durante 12 horas. Una vez completada la reacc¡ón, se añad¡eron 50 ml de agua, y la mezcla se extrajo con una mezcla de d¡clorometano y metanol (V:V = 8:1) (10 ml x 3). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con soluc¡ón saturada de cloruro sód¡co (20 ml), se secaron sobre sulfato sód¡co anh¡dro y se f¡ltraron. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da para obtener el compuesto del título en bruto 30b (50 mg) en forma de un líquido amar¡llo, que se usó d¡rectamente en la s¡gu¡ente etapa s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal.

Etapa 3

2-C¡ano-6-(et¡l(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-N-((4-metox¡-6-met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)-5-met¡lbenzofuran-4-carboxam¡da 30

El producto en bruto 30b (40 mg, 0,075 mmol) se d¡solv¡ó en 5 ml de N,N-d¡met¡lacetam¡da, entonces se añad¡eron c¡anuro cuproso (13,6 mg, 0,15 mmol) y yoduro cuproso (14,3 mg, 0,075 mmol) a la soluc¡ón anter¡or. El s¡stema de reacc¡ón se ag¡tó durante 1 hora a 170 °C. Después de que se hub¡era completado la reacc¡ón, la mezcla se f¡ltró, y el f¡ltrado se lavó con una mezcla de d¡clorometano y metanol (V:V = 10:1) (10 ml). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se concentraron a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía de capa f¡na con el s¡stema de eluc¡ón A para obtener el compuesto del título 30 (4,7 mg, rend¡m¡ento 12,5 %) en forma de un sól¡do de color blanco.

EM (IEN) m/z: 479,4 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, CDCla) 8 11,5 (s a, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,26 (s, 1H), 7,16 (s a, 1H), 5,97 (s, 1H), 4,66 (s, 2H), 3,98 3,96 (m, 2H), 3,93 (s, 3H), 3,35-3,30 (m, 2H), 3,11 (c, 2H), 3,04-2,99 (m, 1H), 2,41 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 1,75-1,66 (m, 4H), 0,89 (t, 3H).

Ejemplo 31

6-((4,4-D¡fluoroc¡clohex¡l)(et¡l)ammo)-5-et¡l-W-((4-metox¡-6-met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)benzofuran-4-carboxamida 31

De acuerdo con la ruta s¡ntét¡ca del Ejemplo 24, el mater¡al de part¡da 4e se sust¡tuyó por 1g, y 24a se sust¡tuyó por 4,4-d¡fluoroc¡dohex¡lam¡na, por cons¡gu¡ente, se preparó el compuesto del título 31 (10 mg, rend¡m¡ento 77 %) en forma de un sólido de color blanco.

EM (IEN) m/z: 502,4 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 811,47 (s a, 1H), 8,02 (t, 1H), 7,88 (d, 1H), 7,46 (s, 1H), 6,75 (d, 1H), 6,11 (s, 1H), 4,29 (d, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,05 (s a, 2H), 2,97 (m, 1H), 2,82 (c, 2H), 2,18 (s, 3H), 1,98 (s a, 2H), 1,81 (s a, 2H), 1,73 (m, 2H), 1,58 (c, 2H), 1,08 (t, 3H), 0,83 (t, 3H).

Ejemplo 32

6-((3,3-D¡fluoroc¡clobut¡l)(et¡l)am¡no)-5-et¡l-W-((4-metox¡-6-met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)benzofuran-4-carboxam¡da 32

De acuerdo con la ruta s¡ntét¡ca del Ejemplo 24, el mater¡al de part¡da 4e se sust¡tuyó por 1g, y 24a se sust¡tuyó por 3,3-d¡fluoroc¡clobutanam¡na, por cons¡gu¡ente, se preparó el compuesto del título 32 (15 mg, rend¡m¡ento 83 %) en forma de un sól¡do de color blanco.

EM (IEN) m/z: 474,4 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 811,45 (s a, 1H), 8,04 (t, 1H), 7,88 (d, 1H), 7,41 (s, 1H), 6,75 (d, 1H), 6,10 (s, 1H), 4,28 (d, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,79 (s a, 1H), 2,93 (c, 2H), 2,81 (c, 2H), 2,70 (s a, 2H), 2,25 (s a, 2H), 2,18 (s, 3H), 1,07 (t, 3H), 0,86 (t, 3H).

Ejemplo 33

6-((1,1-D¡ox¡dotetrah¡dro-2H-t¡op¡ran-4-¡l)(et¡l)am¡no)-5-et¡l-W-((4-metox¡-6-m et¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-¡l)met¡l)benzofuran-4-carboxam¡da 33

De acuerdo con la ruta sintética del Ejemplo 24, el material de partida 4e se sustituyó por 1g, y 24a se sustituyó por 1,1-dióxido de 4-aminotetrahidro-2H-tiopirano, por consiguiente, se preparó el compuesto del título 33 (9 mg, rendimiento 64 %) en forma de un sólido de color blanco.

EM (IEN) m/z: 516,3 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 811,46 (s a, 1H), 8,02 (t, 1H), 7,88 (d, 1H), 7,47 (s, 1H), 6,75 (d, 1H), 6,10 (s, 1H), 4,29 (d, 2H), 3,81 (s, 3H), 2,98-3,07 (m, 5H), 3,01 (c, 2H), 2,80 (c, 2H), 2,18 (s, 3H), 2,07 (s a, 4H), 1,09 (t, 3H), 0,83 (t, 3H). Ejemplo 34

6-((CiclopropilmetilX1-(2,2,2-trifluoroetil)piperidin-4-il)amino)-5-etil-W-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-carboxamida 34

De acuerdo con la ruta sintética del Ejemplo 25, el material de partida 4e se sustituyó por 1g, el material de partida acetaldehído usado en la etapa 2 se sustituyó por ciclopropanocarboxaldehído, el material de partida cloruro de metanosulfonilo usado en la etapa 4 se sustituyó por (2,2,2-trifluoroetil) sulfato de triclorometilo, por consiguiente, se preparó el compuesto del título 34 (14 mg, rendimiento 65 %) como un sólido de color blanco.

EM (IEN) m/z: 575,5 [M+1]

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 88,01 (s a, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 6,75 (s, 1H), 6,11 (s, 1H), 4,29 (d, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,10 (c,2H), 2,83-2,91 (m, 4H), 2,76 (s a, 1H), 2,26 (t, 2H), 2,19 (3H), 1,70 (s a, 2H), 1,49 (c, 2H), 1,24 (s a, 2H), 1,10 (t, 3H), 0,65 (s a, 1H), 0,28 (d, 2H), 0,003 (d, 2H).

ENSAYO BIOLÓGICO

La presente invención se describirá adicionalmente con referencia a los siguientes ejemplos de prueba, pero los ejemplos no deben considerarse como limitantes del alcance de la invención.

Ejemplo de prueba 1. Ensayo para determinar la actividad de los compuestos de ejemplo de la presente invención sobre la enzima EZH2 (mutante A677G o mutante Y641F).

La actividad de la enzima EZH2 (con mutante A677G o mutante Y641F) se sometió a prueba mediante el siguiente método.

El método se usa para determinar el efecto inhibidor de los compuestos de la presente invención sobre la actividad del mutante EZH2-A677G o mutante EZH2-Y641F.

1. Materiales experimentales e instrumentos

(1) . EZH2-A677G (BPS Bioscience)

(2) . EZH2-Y641F (BPS Bioscience)

(3) . Marcaje de histona H3 biotina (AnaSpec)

(4) . S-adenosil metionina (abreviada SAM, Sigma)

(5) . Anticuerpo monoclonal anti-histona H3K27 Me3 (Cisbio)

(6) . Estreptavidina-XL665 (Cisbio)

(7) . Tampón de detección HTRF (Cisbio)

(8) . Lector de microplacas multifuncional (Tecan)

2. Procedimiento experimental

El mutante EZH2-A677G (o EZH2-Y641F) se diluyó hasta una concentración de 15 ng/pl usando un tampón de cinasa (5x tampón: 5 mg/ml de BSA, Tris-CI 150 mM, MgCh 100 mM) y se añadió a una placa de microtitulación de 384 pocillos a 2 pl/pocillo. El marcaje con histona H3 biotina y S-adenosil metionina se diluyeron respectivamente hasta 50 nM y 50 pM con un tampón de cinasa, entonces se añadieron a una placa de 384 pocillos a 4 pl/pocillo. El compuesto de prueba se diluyó con un tampón de cinasa (se diluyó desde la concentración más alta 30 pM en un gradiente de concentración de 10 veces hasta 7 puntos de concentración), entonces se añadió a la placa de microtitulación de 384 pocillos a 4 pl/pocillo. La placa se incubó a temperatura ambiente durante 2 horas. Anticuerpo monoclonal anti-histona H3K27 Me3 y estreptavidina-XL665 se diluyeron hasta 30 nM y 500 nM mediante tampón de detección de HTRF, entonces se añadieron a la microplaca de 384 pocillos a 10 pl/pocillo y se incubaron durante 1 hora. Un pocillo sin una enzima EZH2 y un compuesto se usa como control negativo, y un pocillo con una enzima EZH2 sin un compuesto se usa como control positivo. Los valores de fluorescencia se leyeron en un lector de microplacas multifuncional a una longitud de onda de emisión de 620 nM y 665 nM. La concentración logarítmica de compuesto frente al porcentaje de inhibición con respecto al pocillo de control positivo se representó gráficamente usando GraphPad Prism, entonces se calcularon los valores de CI50.

La actividad de los compuestos de la presente invención sobre la enzima EZH2-A677G se sometió a prueba mediante el ensayo descrito anteriormente, y los valores de CI50 se muestran en la Tabla 1.

T l 1. I l m l r n inv n i n r inhi ir l ivi l nzim EZH2-A 77G

(continuación)

Conclusión: Los compuestos de la presente invención tienen un efecto inhibidor significativo sobre la actividad de la enzima EZH2-A677G.

La actividad de los compuestos de la presente invención sobre la enzima EZH2-Y641F se sometió a prueba mediante el ensayo descrito anteriormente, y los valores de CI50 se muestran en la Tabla 2.

T l 2. I l m l r n inv n i n r inhi ir l ivi l nzim EZH2-Y 41F

Ejemplo de prueba 2. Ensayo para determinar la actividad de crecimiento celular anti-tumoral in vitro de los compuestos de ejemplo de la presente invención

Este método se usa para determinar el efecto inhibidor de los compuestos de la presente invención sobre la actividad de crecimiento de células tumorales (Pfeiffer o WSU-DLCL2) in vitro. Las células de Pfeiffer portan el mutante A677G, y las células WSU-DLCL2 portan el mutante Y641F.

1. Materiales experimentales e instrumentos

(1) . RPMI-1640, Suero bovino fetal inactivado, Penicilina, Estreptomicina (Life technology)

(2) . Línea celular de Pfeiffer y WSU-DLCL2 (ATCC)

(3) . Placa de cultivo celular de 96 pocillos (Fisher Scientific)

(4) . Incubador celular (Fisher Scientific)

(5) . Detección de la vitalidad celular CellTiter - Glo®luminescent (Promega)

(6) . Lector de microplacas (Tecan)

2. Procedimiento experimental

La línea celular de suspensión de linfoma (Pfeiffer o WSU-DLCL2) se cultivó en un medio RPMI-1640 que contenía un 10 % de suero bovino fetal inactivado, 100 U/ml de penicilina, y 100 pg/ml de estreptomicina, se incubó en un incubador con un 5 % de dióxido de carbono a 37 °C bajo una condición de humedad saturada, y se pasó cada 3-4 días.

Se preparó una suspensión celular con un medio celular reciente, se añadió a una placa de cultivo celular de 96 pocillos a 8000 células/pocillo (Pfeiffer) o 2000 células/pocillo (WSU-DLCL2), y se incubó en un incubador con un 5 % de dióxido de carbono a 37 °C durante una noche. El día del experimento, los compuestos de prueba de EZH2 (concentración final: 20000, 2000, 200, 20, 2, 0,2 nM) se añadieron en los pocillos experimentales para 3 pocillos paralelos por grupo. Un pocillo de control con el medio solo sin células se estableció para obtener el valor de luminiscencia de fondo. La placa de cultivo celular se incubó en un incubador con un 5 % de dióxido de carbono a 37 °C durante 5 días.

Después de que los compuestos se aplicaron a las células durante 5 días, la placa de cultivo celular se puso a temperatura ambiente durante 30 minutos, entonces se añadió un reactivo CellTiter-Glo igual al volumen de medio de cultivo celular a cada pocillo. Los contenidos se mezclaron en un agitador durante 10 minutos, y se registraron los valores de señal de fluorescencia. La tasa de inhibición del crecimiento celular se calculó, y la fórmula es: tasa de inhibición de crecimiento celular = [(control negativo - grupo experimental) /(grupo de control negativo - valor de luminiscencia de fondo)] x 100 %. Los valores de CI50 (tasa de inhibición media CI50, es decir, una concentración de fármaco que se requiere para una tasa de inhibición de crecimiento celular del 50 %) se calcularon mediante software a partir de la tasa de inhibición de crecimiento celular y la concentración correspondiente.

La actividad de crecimiento celular anti-tumoral (Pfeiffer o WSU-DLCL2) in vitro de los compuestos de la presente invención se sometió a prueba mediante el ensayo descrito anteriormente, y los valores de CI50 se muestran en las Tablas 3 y 4.

Tabla 3. CI50 de los compuestos de la presente invención para inhibir la actividad de crecimiento de células tumorales Pfeiffer in vitro

Conclusión: Los compuestos de la presente invención tienen un efecto inhibidor significativo sobre el crecimiento de células de linfoma (Pfeiffer) in vitro.

Tabla 4. CI50 de los compuestos de la presente invención para inhibir la actividad de crecimiento de células tumorales WSU-DLCL2 in vitro.

Conclusión: Los compuestos de la presente invención tiene un efecto inhibidor significativo sobre la actividad de crecimiento de células de linfoma (WSU-DLCL2) in vitro.

Ensayos de farmacocinética

Ejemplo de prueba 3. Ensayo de farmacocinética de los compuestos de los Ejemplos 1, 2, 3 y 9 de la presente invención.

1. Resumen

Se usaron ratas SD como animales de prueba. La concentración de fármaco en plasma en diferentes puntos de tiempo se determinó mediante CL/EM/EM después de la administración intragástrica de los compuestos de los Ejemplos 1, 2, 3 y 9 a las ratas. Se estudió y evaluó en las ratas el comportamiento farmacocinético de los compuestos de la presente invención.

2. Protocolo

2.1 Compuestos de prueba

Compuestos de los Ejemplos 1, 2, 3 y 9

2.2 Animales de prueba

16 ratas Sprague-Dawley (SD) adultas sanas, la mitad hembra y la mitad macho, se adquirieron de SINO-BRITSH SIPPR/BK LAB. ANIMAL LTD., CO, con Certificación n.°: SCXK (Shanghai) 2008-0016.

2.3 Preparación de los compuestos de prueba

Se pesó la cantidad apropiada de cada compuesto, y se le añadió 0,5 % de CMC-Na (que contenía un 1 % de Tween 80) para preparar una suspensión de 1,0 mg/ml mediante trituración. 2.4 Administración

Después de un ayuno de una noche, las 16 ratas SD se dividieron en 4 grupos por igual, la mitad macho y la mitad hembra, y se administraron por vía intragástrica los compuestos de prueba a un volumen de administración de 5 ml/kg.

3. Procedimiento

Se extrajo sangre (0,2 ml) del seno orbital antes de la administración y a las 0,5, 1,0, 2,0, 4,0, 6,0, 8,0, 11,0 y 24,0 horas después de la administración. Las muestras se almacenaron en tubos heparinizados, y se centrifugaron durante 10 minutos a 3.500 rpm para separar el plasma sanguíneo. Las muestras de plasma se almacenaron a -20 °C.

La concentración plasmática de los compuestos de prueba en plasma de rata después de la administración intragástrica se determinó mediante CL-EM/EM.

4. Resultados de parámetros farmacocinéticos

Los parámetros farmacocinéticos de los compuestos de los Ejemplos 1, 2, 3 y 9 de la presente invención se muestran a continuación:

Conclusión: Los compuestos de la presente invención son bien absorbidos y tienen un efecto de absorción farmacológico excelente.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de Fórmula (I):

en donde:

cada R1 es idéntico o diferente y se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, alquilo, haloalquilo, alcoxi, haloalcoxi, amino, nitro, hidroxi, ciano, cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -OR6, -C(O)R6, -C(O)OR6, - S(O)mR6, -S(O)mNR7R8 y -(CH2)xRa, en donde el alquilo, haloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo está cada uno independiente y opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados entre el grupo que consiste en alquilo, haloalquilo, halógeno, amino, nitro, ciano, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi, hidroxialquilo, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo;

Ra se selecciona del grupo que consiste en halógeno, cicloalquilo, heterociclilo y -NR7R8, en donde el cicloalquilo y heterociclilo está cada uno independiente y opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados entre el grupo que consiste en alquilo, haloalquilo, halógeno, amino, nitro, ciano, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi, hidroxialquilo, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo;

R2 es hidrógeno o alquilo, en donde el alquilo está opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados entre el grupo que consiste en halógeno, hidroxi, ciano, cicloalquilo y heterociclilo;

R3 se selecciona entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, halógeno, ciano, alcoxi y haloalquilo; cada R4 es idéntico o diferente y se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, haloalquilo, hidroxi, amino, alcoxi, haloalcoxi, cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -OR6, -C(O)R6, -C(O)OR6, -S(O)mR6, -S(O)mNR7R8 y -NR7R8;

cada R5 es idéntico o diferente y se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, oxo, halógeno, haloalquilo, hidroxi, amino, alcoxi, haloalcoxi, cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -OR6, -C(O)R6, -C(O)OR6, -S(O)mR6, -S(O)mNR7R8 y -NR7R8;

R6 se selecciona entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, haloalquilo, alcoxi, hidroxialquilo, hidroxi, amino, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo;

R7 y R8 son idénticos o diferentes y se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, alcoxi, hidroxialquilo, hidroxi, amino, alcoxicarbonilo, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo, en donde el alquilo, amino, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo está cada uno independiente y opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados entre el grupo que consiste en alquilo, halógeno, hidroxi, amino, alcoxicarbonilo, nitro, ciano, alcoxi, hidroxialquilo, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo; m es 0, 1 o 2;

n es 0, 1, 2 o 3;

p es 0, 1, 2, 3, 4 o 5;

q es 0, 1 o 2; y

x es 0, 1, 2 o 3.

2. El compuesto de fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 1, en donde n es 2; y/o

en donde p y q son cada uno 0, 1 o 2.

3. El compuesto de fórmula (I) de acuerdo con una cualquiera de la reivindicación 1 o 2, en donde cada R1 es idéntico o diferente y se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, alquilo, haloalquilo, ciano, cicloalquilo, heterociclilo y -(CH2)xRa, en donde el alquilo y heterociclilo está cada uno independiente y opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados entre el grupo que consiste en alquilo, hidroxialquilo y halógeno; y Ra se selecciona entre el grupo que consiste en halógeno, cicloalquilo, heterociclilo y -NR7R8, en donde el cicloalquilo y heterociclilo está cada uno independiente y opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados entre el grupo que consiste en hidroxialquilo, alquilo y halógeno; y R7, R8 y x son como se definen en la reivindicación 1; opcionalmente en donde cada R1 es idéntico o diferente y se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, haloalquilo, ciano y -(CH2)xRa, en donde x es 0, y Ra es halógeno o cicloalquilo.

4. El compuesto de fórmula (I) de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde R2 es alquilo opcionalmente sustituido con cicloalquilo; y/o

en donde R3 se selecciona entre el grupo que consiste en alquilo, halógeno y haloalquilo.

5. El compuesto de fórmula (I) de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde cada R4 es idéntico o diferente y se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo y alcoxi; y/o

en donde cada R5 es idéntico o diferente y se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, oxo, haloalquilo, -C(O)R6, -S(O)mR6 y -NR7R8, en donde R6 a R8 y m son como se definen en la reivindicación 1, preferiblemente hidrógeno.

6. El compuesto de fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 1, que es un compuesto de fórmula (II):

en donde:

G se selecciona entre el grupo que consiste en CRbRc, C=O, NRd, S(O)m y oxígeno;

Rb y Rc se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, alcoxi, halógeno, amino, nitro, hidroxi, ciano, cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -OR6, -C(O)R6, -C(O)OR6, -S(O)mR6 y-NR7R8; Rd se selecciona entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, haloalquilo, hidroxialquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -C(O)R6, -C(O)OR6 y -S(O)mR6; y

R1 a R4, R6 a R8, n, m y q son como se definen en la reivindicación 1.

7. El compuesto de fórmula (II) de acuerdo con la reivindicación 6, que es un compuesto de fórmula (III):

en donde:

E es CH o átomo de N;

F se selecciona entre el grupo que consiste en CRbRc, C=O, NRd y oxígeno;

Rb y Rc se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, alcoxi, halógeno, amino, nitro, hidroxi, ciano, cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -OR6, -C(O)R6, -C(O)OR6, -S(O)mR6 y -NR7R8; Rd se selecciona entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, haloalquilo, hidroxialquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -C(O)R6, -C(O)OR6 y -S(O)mR6;

cada Re es idéntico o diferente y se selecciona cada uno independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, haloalquilo, halógeno, amino, nitro, ciano, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi, hidroxialquilo, cicloalquilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo;

t es 0, 1, 2, 3, 4 o 5;

x es 0, 1, 2 o 3;

y es 0, 1, 2 o 3; y

R1 a R4, R6 a R8, m y n son como se definen en la reivindicación 1.

8. El compuesto de fórmula (III) de acuerdo con la reivindicación 7, que es un compuesto de fórmula (IV):

en donde:

t es 0, 1, 2, 3, 4 o 5; y

R2 a R4 y n son como se definen en la reivindicación 1.

9. El compuesto de fórmula (III) de acuerdo con la reivindicación 7, que es un compuesto de fórmula (V):

en donde:

R2 a R4 y n son como se definen en la reivindicación 1.

10. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en donde el compuesto se selecciona entre el grupo que consiste en:

11. Un compuesto de fórmula (VI):

en donde:

anillo A, R1 a R3, R5, p y q son como se definen en la reivindicación 1.

12. Un procedimiento de preparación del compuesto de fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende una etapa de:

en donde:

R1 a R5, anillos A, p, q y n son como se definen en la reivindicación 1.

13. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de fórmula (I) de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, y uno o más vehículos, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables.

14. Un compuesto de fórmula (I) de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, o la composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 13 para su uso como inhibidor de EZH2 para prevenir y/o tratar tumor y cáncer.

15. Un compuesto o composición para su uso de acuerdo con la reivindicación 14, en donde el tumor y cáncer se seleccionan entre el grupo que consiste en linfoma, leucemia, cáncer de mama, cáncer de pulmón, cáncer de próstata, cáncer de ovario, cáncer de hígado, melanoma, rabdomiosarcoma, sarcoma sinovial, mesotelioma, cáncer de cuello uterino, cáncer de colon, cáncer rectal, cáncer de estómago, cáncer de páncreas, cáncer cerebral, cáncer de piel, cáncer oral, cáncer de hueso, cáncer de riñón, cáncer de vejiga, tumor de trompas de Falopio, tumor de ovario, tumor peritoneal, glioma, glioblastoma, cáncer de cabeza y cuello, y mieloma; preferiblemente linfoma, leucemia, cáncer de mama, cáncer de pulmón, cáncer de próstata, cáncer de ovario, cáncer de hígado, melanoma, rabdomiosarcoma, sarcoma sinovial y mesotelioma;

donde la leucemia es preferiblemente leucemia mieloide crónica, leucemia mieloide aguda o leucemia de linaje mixto; donde el linfoma es preferiblemente linfoma no de Hodgkin, linfoma difuso de linfocitos B grandes o linfoma folicular.