ES2449396T3 - Cianoenonas monocíclicas y métodos de uso de las mismas - Google Patents

Abstract

Un compuesto de la fórmula:**Fórmula** en la que: R1 es alquilo(C8), alquilo(C8) sustituido, alquenilo(C8), alquenilo(C8) sustituido, alquinilo(C8), alquinilo(C8) sustituido,aralquilo(C18), aralquilo(C18) sustituido, heteroaralquilo(C18), -L-R10, aralquilidenamino(C12), aralquilidenamino(C12)sustituido o ciano; L es alcanodiilo(C6) o alcanodiilo(C6) sustituido R10 es alquilo(C8), alquilo(C8) sustituido, arilo(C12), arilo(C12) sustituido, aralquilo(C12) sustituido, aralquilo(C12)sustituido, heteroarilo(C12), heteroarilo(C12) sustituido, heteroaralquilo(C12), amino, alquilamino(C8), alquilamino(C8)sustituido, dialquilamino(C8), dialquilamino(C8) sustituido, hidroxi, alcoxi(C8), alcoxi(C8) sustituido, acilo(C8),acilo(C8) sustituido o -C>=C-R11, R11 es hidrógeno, hidroxi, halo, amino, hidroxiamino, ciano, mercapto, tio, alquilo(C8), alquilo(C8) sustituido,alquenilo(C8), alquenilo(C8) sustituido, alquinilo(C8), alquinilo(C8) sustituido, arilo(C8), arilo(C8) sustituido,aralquilo(C8), aralquilo(C8) sustituido, heteroarilo(C8), heteroaralquilo(C8), acilo(C8), acilo(C8) sustituido,alcoxi(C8), alcoxi(C8) sustituido, alqueniloxi(C8), alqueniloxi(C8) sustituido, alquiniloxi(C8), alquiniloxi(C8)sustituido, ariloxi(C8), ariloxi(C8) sustituido, aralcoxi(C8), aralcoxi(C8) sustituido, heteroariloxi(C8),heteroaralcoxi(C8), aciloxi(C8), aciloxi(C8) sustituido, alquilamino(C8), alquilamino(C8) sustituido,dialquilamino(C8), dialquilamino(C8) sustituido, alcoxiamino(C8), alcoxiamino(C8) sustituido, alquenilamino(C8),alquenilamino(C8) sustituido, alquinilamino(C8), alquinilamino(C8) sustituido, arilamino(C8), arilamino(C8)sustituido, aralquilamino(C8), aralquilamino(C8) sustituido, heteroarilamino(C8), heteroaralquilamino(C8),alquilsulfonilamino(C8), alquilsulfonilamino(C8) sustituido, amido(C8), amido(C8) sustituido, alquilamonio(C8),alquilamonio(C8) sustituido, alquilsulfonio(C8), alquilsulfonio(C8) sustituido, alquilsililo(C8), alquilsililo(C8)sustituido o alquilsililoxi(C8).

Description

Cianoenonas monocíclicas y métodos de uso de las mismas

5 I. Campo de la invención

La presente invención se refiere en general a los campos de biología y medicina. Más particularmente, atañe a compuestos y a su uso en el tratamiento y prevención de enfermedades tales como las asociadas con estrés oxidativo e inflamación.

II. Descripción de la técnica relacionada

Las IκB quinasas, IKKα e IKKβ, son quinasas relacionadas que desempeñan un papel principal en la activación y regulación del factor de transcripción, NF-κB. Están inducidas por estímulos tales como TNFα e IL-1 para fosforilar los 15 restos de Ser32 y Ser36 de IκBα, la subunidad reguladora de NF-κB. El complejo IκB quinasa (IKK) comprende tres proteínas: las subunidades catalíticas, IKKα e IKKβ, y la subunidad reguladora IKKγ (NEMO). Sin ligarse a ningún mecanismo o teoría particular, la fosforilación de IκBα produce ubiquitinación y posterior degradación en el proteasoma. Estos dímeros NF-κB liberados del complejo NF-κB-IκB citoplasmático, permiten la translocación de NF-κB al núcleo donde regula la transcripción de numerosos genes diana. Parece que IKKβ es la quinasa principal, 20 mientras que IKKα no se requiere para la activación de IKK y la degradación de IκBα por estímulos proinflamatorios. La IKKβ desencadena la activación de NF-κB en respuesta a agentes infecciosos y citocinas proinflamatorias, constituyendo una diana farmacológica atractiva para el tratamiento de enfermedades inflamatorias. Además, NF-κB se sobreexpresa o activa de manera constitutiva en muchas células cancerosas donde induce la expresión de genes antiapoptóticos y/o la supresión de genes proapoptóticos. Diversos agentes anticancerosos también pueden inducir la

25 activación de NF-κB, que puede culminar en la posibilidad de que las células malignas se vuelven resistentes a fármacos. Por tanto, el desarrollo de inhibidores de IKKβ representa posibles agentes terapéuticos para el tratamiento tanto del cáncer como de la inflamación (Karin et al., 2004).

La actividad antiinflamatoria y antiproliferativa del ácido oleanólico, triterpenoide, de origen natural, se ha mejorado por

30 modificaciones químicas. Por ejemplo, se ha desarrollado el ácido 2-ciano-3,12-dioxolean-1,9(11)-dien-28-oico (CDDO) y compuestos relacionados (Honda et al., 1997; Honda et al., 1998; Honda et al., 1999; Honda et al., 2000; Honda et al., 2000; Honda, et al., 2002; Suh et al. 1998; Suh et al., 1999; Place et al., 2003; Liby et al., 2005). El éster metílico, CDDO-Me, se está evaluando actualmente en ensayos clínicos en fase II para el tratamiento de melanoma, cáncer pancreático, nefropatía diabética y enfermedad renal crónica.

35 Se ha demostrado que los compuestos de tres anillos, cuyos anillos A y C tienen funcionalidades enona similares a las del CDDO, son una nueva clase de fuertes compuestos antiinflamatorios, citoprotectores, supresores de crecimiento y proapoptóticos (Favaloro et al., 2002; Honda et al., 2003; Honda et al., 2007). Entre estos compuestos, se descubrió que TBE-31 inhibe la producción de óxido nítrico (ON) a concentraciones nanomoleculares bajas en células RAW

40 estimuladas por interferón-γ (ensayo iNOS). De manera notable, TBE-31 activo por vía oral, es excepcionalmente fuerte contra cáncer de hígado inducido por aflatoxina en ratas (Liby et al., 2008). Además, las posibilidades in vitro e in vivo de TBE-31 son mucho más elevadas que las del CDDO.

45 Tanto CDDO como TBE-31 son agentes multifuncionales, que regulan proteínas implicadas en inflamación, estrés oxidativo, diferenciación, apoptosis y proliferación. Sin ligarse a ninguna teoría o mecanismo particular, estas proteínas, incluyendo, por ejemplo, IKKβ, Keap1 y JAK1, están reguladas por CDDO y TBE-31 por adición reversible y selectiva de Michael entre su funcionalidad cianoenona y los grupos SH de los restos de cisteína en estas proteínas

50 (Esquema 1); Couch et al., 2005; Dinkova-Kostova et al., 2005). Por ejemplo, en IKKβ se identificó Cys179 como una de las dianas de CDDO-Me (Ahmad et al., 2006). Mediante la unión a este sitio, CDDO-Me bloquea la unión de NF-κB al ADN y por tanto inhibe la activación transcripcional. También se ha descrito que CDDO-Me inhibe la ruta JAK1 →

STAT3 uniéndose directamente a JAK1 en Cys1077 y STAT3 en Cys259 (Ahmad et al., 2008). Los inhibidores de molécula pequeña de la ruta STAT3 son eficaces como agentes anticancerosos in vitro y en modelos animales.

El documento WO 2008/064133 desvela triciclos, uno de cuyos ciclos es un oxociclohexano u oxociclohexadieno sustituido por un resto alquinilo. Estos compuestos actúan contra el cáncer mediante inhibición de NO-sintasa.

También se ha demostrado que los análogos triterpenoides sintéticos del ácido oleanólico son inhibidores de procesos inflamatorios celulares, tales como la inducción por IFN-γ de la óxido nítrico sintasa inducible (iNOS) y de COX-2 en macrófagos de ratón. Véase Honda et al. (2000a); Honda et al. (2000b) y Honda et al. (2002). Por ejemplo, uno de estos, el éster metílico del ácido 2-ciano-3,12-dioxoolean-1,9(11)-dien-28-oico (CDDO-Me), está actualmente en 5 ensayos clínicos para diversos trastornos relacionados con inflamación, incluyendo cáncer y nefropatía diabética. También se ha demostrado que, derivados sintéticos de otro triterpenoide, el ácido botulínico, inhibe los procesos inflamatorios celulares, aunque estos compuestos se han caracterización menos ampliamente (Honda et al., 2006). La farmacología de estas moléculas triterpenoides sintéticas es compleja. Se ha demostrado que los compuestos derivados del ácido oleanólico afectan a la función de dianas de proteína múltiples y por lo tanto modulan la actividad 10 de diversas rutas de señalización celular importantes relacionadas con el estrés oxidativo, control del ciclo celular e inflamación (por ejemplo Dinkova-Kostova et al., 2005; Ahmad et al., 2006; Ahmad et al., 2008; Liby et al., 2007a). Se piensa que, derivados del ácido botulínico, han demostrado propiedades antiinflamatorias comparables, también parecen tener diferencias significativas en cuanto a su farmacología en comparación con productos derivados de OA (Liby et al., 2007b). Además, no es seguro que los materiales triterpenoides de partida empleados hasta ahora tengan 15 propiedades óptimas comparadas con los otros materiales de partida posibles. Dado que los perfiles de actividad biológica de derivados triterpenoides conocidos varían, y a la vista de la amplia diversidad de enfermedades que pueden tratarse o prevenirse con los compuestos que tienen fuertes efectos antioxidantes e antiinflamatorios, y el alto grado de necesidad médica no satisfecha representada dentro de esta diversidad de enfermedades, es deseable sintetizar nuevos compuestos con diversas estructuras que puedan tener perfiles de actividad biológica mejorados

20 para el tratamiento de una o más indicaciones.

Sumario de la invención

La presente invención se refiere a compuestos como se define en las reivindicaciones 1 a 10 adjuntas. La invención

25 también se refiere a una composición farmacéutica que comprende dichos compuestos, así como a compuestos para su uso como un agente farmacéutico, o en el tratamiento de un cáncer, una enfermedad con un componente inflamatorio, una enfermedad cardiovascular, una enfermedad neurodegenerativa o una enfermedad renal/de riñón.

También se desvelan en el presente documento compuestos de la fórmula:

30 en la que:

R1, R2, R3, R4, R5 y R6 son cada uno independientemente: hidrógeno, hidroxi, amino, ciano o alquilo(C�18), alquenilo(C�18), alquinilo(C�18), arilo(C�18),

35 aralquilo(C�18), heteroarilo(C�18), heteroaralquilo(C�18), acilo(C�18), alcoxi(C�18), alquenilox(C�18), alquiniloxi(C�18), ariloxi(C�18), aralcoxi(C�18), heteroariloxi(C�18), heteroaralcoxi(C�18), aciloxi(C�18), alquilamino(C�18), dialquilamino(C�18), alcoxiamino(C�18), alquenilamino(C�18), alquinilamino(C�18), arilamino(C�18), aralquilamino(C�18), heteroarilamino(C�18), heteroaralquilamino(C�18), alquilsulfonilamino(C�18), amido(C�18), alquilidenamino(C�18),

40 aralquilidenamino(C�18); R1 y R3 se toman juntos y son alcanodiilo(C�18), alquenodiilo(C�18), arenodiilo(C�18), alcoxidiilo(C�18), alqueniloxidiilo(C�18), alquilaminodiilo(C�18), alquenilaminodiilo(C�18), alquenilaminooxidiilo(C�18), alquenilaminotiodiilo(C�18), con R2, R4, R5 y R6 como se han definido anteriormente; o

45 R3 y R5 se toman juntos y son alcanodiilo(C�18), alquenodiilo(C�18), arenodiilo(C�18), alcoxidiilo(C�18), alqueniloxidiilo(C�18), alquilaminodiilo(C�18), alquenilaminodiilo(C�18), alquenilaminooxidiilo(C�18), alquenilaminotiodiilo(C�18), con R1, R2, R4 y R6 como se han definido anteriormente;

Con la condición de que: R4 esté ausente cuando el átomo al que esté enlazado forme parte de un doble enlace; R6 50 esté ausente cuando el átomo al que esté enlazado forme parte de un doble enlace; ni R1 ni R2 sea hidrógeno; y R1 y R2 no sean ambos metilo;

o sales farmacéuticamente aceptables, tautómeros o isómeros ópticos de los mismos.

También se desvelan en el presente documento compuestos de la fórmula:

en la que:

5 R1 y R2 son cada uno independientemente: hidroxi, amino, ciano o alquilo(C 18), alquenilo(C 18), alquinilo(C 18), arilo(C 18), aralquilo(C 18), heteroarilo(C 18), heteroaralquilo(C 18), arilo(C 18), alcoxi(C 18), alqueniloxi(C 18), alquiniloxi(C 18), ariloxi(C 18), aralcoxi(C 18), heteroariloxi(C 18), heteroaralcoxi(C 18), aciloxi(C 18), alquilamino(C 18), dialquilamino(C 18), alcoxiamino(C 18), alquenilamino(C 18),

10 alquinilamino(C 18), arilamino(C 18), aralquilamino(C 18), heteroarilamino(C 18), heteroaralquilamino(C 18), alquilsulfonilamino(C 18), amido(C 18), alquilidenamino(C 18), aralquilidenamino(C 18), con la condición de que R1 y R2 no sean ambos metilo; y

R7 y R8 son cada uno independientemente: hidrógeno, hidroxi, halo, oxo, amino, hidroxiamino, nitro, imino, ciano, azido, mercapto o tio; o alquilo(C 6), alquenilo(C 6), alquinilo(C 6), arilo(C 6), 15 aralquilo(C 6), heteroarilo(C 6), heteroaralquilo(C 6), acilo(C 6), alquilideno(C 6), alcoxi(C 6), alqueniloxi(C 6), alquiniloxi(C 6), ariloxi(C 6), aralcoxi(C 6), heteroariloxi(C 6), heteroaralcoxi(C 6), aciloxi(C 6), alquilamino(C 6), dialquilamino(C 6), alcoxiamino(C 6), alquenilamino(C 6) alquinilamino(C 6), arilamino(C 6), aralquilamino(C 6), heteroarilamino(C 6), heteroaralquilamino(C 6), alquilsulfonilamino(C 6), amido(C 6), alquilimino(C 6), 20 alquenilimino(C 6), alquinilimino(C 6), arilimino(C 6), aralquilimino(C 6), heteroarilimino(C 6), heteroaralquilimino(C 6), acilimino(C 6), alquiltio(C 6), alqueniltio(C 6), alquiniltio(C 6), ariltio(C 6), aralquiltio(C 6), heteroariltio(C 6), heteroaralquiltio(C 6), aciltio(C 6), tioacilo(C 6), alquilsulfonilo(C 6), alquenilsulfonilo(C 6), alquinilsulfonilo(C 6), arilsulfonilo(C 6), aralquilsulfonilo(C 6), heteroarilsulfonilo(C 6), heteroaralquilsulfonilo(C 6), alquilamonio(C 6),

25 alquilsulfonio(C 6), alquilsililo(C 6), alquilsililoxi(C 6) o una versión sustituida de cualquiera de estos grupos;

o sales farmacéuticamente aceptables, tautómeros, o isómeros ópticos de los mismos.

30 También se describen en el presente documento compuestos de la fórmula: ciano, azido o mercapto;

en la que:

R1 y R2

son cada uno independientemente: hidroxi, amino, ciano o alquilo(C 18), alquenilo(C 18),

35

alquinilo(C 18), arilo(C 18), aralquilo(C 18), heteroarilo(C 18), heteroaralquilo(C 18), acilo(C 18),

alcoxi(C 18), alqueniloxi(C 18), alquinilox(C 18), ariloxi(C 18), aralcoxi(C 18), heteroariloxi(C 18),

heteroaralcoxi(C 18), aciloxi(C 18), alquilamino(C 18), dialquilamino(C 18), alcoxiamino(C 18),

alquenilamino(C 18),

alquinilamino(C 18), arilamino(C 18), aralquilamino(C 18),

heteroarilamino(C 18),

heteroaralquilamino(C 18), alquilsulfonilamino(C 18), amido(C 18),

40

alquilidenamino(C 18), aralquilidenamino(C 18), con la condición de que R1 y R2 no sean

ambos metilo; y

R7 y R8

son cada uno independientemente: hidrógeno, hidroxi, halo, amino, hidroxiamino, nitro,

o alquilo(C 6), alquenilo(C 6), alquinilo(C 6), arilo(C 6), aralquilo(C 6), heteroarilo(C 6), heteroaralquilo(C 6), acilo(C 6), alcoxi(C 6), alqueniloxi(C 6), alquiniloxi(C 6), ariloxi(C 6), aralcoxi(C 6), heteroariloxi(C 6), heteroaralcoxi(C 6), aciloxi(C 6), alquilamino(C 6),

5 dialquilamino(C 6), alcoxiamino(C 6), alquenilamino(C 6), alquinilamino(C 6), arilamino(C 6), aralquilamino(C 6), heteroarilamino(C 6), heteroaralquilamino(C 6), amido(C 6), alquilsililo(C 6), alquilsililoxi(C 6), o una versión sustituida de cualquiera de estos grupos;

o sales farmacéuticamente aceptables, tautómeros, o isómeros ópticos de los mismos.

10 También se describen en el presente documento compuestos de la fórmula:

en la que: R1 y R2 son cada uno independientemente: hidroxi, amino, ciano, o alquilo(C 18), alquenilo(C 18), alquinilo(C 18),

15 arilo(C 18), aralquilo(C 18), heteroarilo(C 18), heteroaralquilo(C 18), acilo(C 18), alcoxi(C 18), alqueniloxi(C 18), alquiniloxi(C 18), ariloxi(C 18), aralcoxi(C 18), heteroariloxi(C 18), heteroaralcoxi(C 18), aciloxi(C 18), alquilamino(C 18), dialquilamino(C 18), alcoxiamino(C 18), alquenilamino(C 18), alquinilamino(C 18), arilamino(C 18), aralquilamino(C 18), heteroarilamino(C 18), heteroaralquilamino(C 18), alquilsulfonilamino(C 18), amido(C 18), alquilidenamino(C 18), aralquilidenamino(C 18), con la condición de que R1 y R2 no sean ambos metilo; y

20 R7 y R8 son cada uno independientemente: hidrógeno, hidroxi, halo, amino, hidroxiamino, nitro, ciano, azido o mercapto; o alquilo(C 6), alquenilo(C 6), alquinilo(C 6), arilo(C 6), aralquilo(C 6), heteroarilo(C 6), heteroaralquilo(C 6), acilo(C 6), alcoxi(C 6), alqueniloxi(C 6), alquiniloxi(C 6), ariloxi(C 6), aralcoxi(C 6), heteroariloxi(C 6), heteroaralcoxi(C 6), aciloxi(C 6), alquilamino(C 6), dialquilamino(C 6), alcoxiamino(C 6), alquenilamino(C 6), alquinilamino(C 6), arilamino(C 6), aralquilamino(C 6), heteroarilamino(C 6),

25 heteroaralquilamino(C 6), amido(C 6), alquilsililo(C 6), alquilsililoxi(C 6), o una versión sustituida de cualquiera de estos grupos;

o sales farmacéuticamente aceptables, tautómeros o isómeros ópticos de los mismos.

30 También se describen en el presente documento compuestos de la fórmula:

en la que: heteroarilamino(C 6), heteroaralquilamino(C 6), amido(C 6), alquilsililo(C 6), alquilsililoxi(C 6) o una versión sustituida de cualquiera de estos grupos;

R1 y R2

son cada uno independientemente: hidroxi, amino, ciano, o alquilo(C 18), alquenilo(C 18), alquinilo(C 18),

35

arilo(C 18), aralquilo(C 18), heteroarilo(C 18), heteroaralquilo(C 18), acilo(C 18), alcoxi(C 18), alqueniloxi(C 18),

alquiniloxi(C 18),

arilox(C 18), aralcoxi(C 18), heteroariloxi(C 18), heteroaralcoxi(C 18), aciloxi(C 18),

alquilamino(C 18), dialquilamino(C 18), alcoxiamino(C 18), alquenilamino(C 18), alquinilamino(C 18), arilamino(C 18),

aralquilamino(C 18), heteroarilamino(C 18),

heteroaralquilamino(C 18), alquilsulfonilamino(C 18), amido(C 18),

alquilidenamino(C 18), aralquilidenamino(C 18), con la condición de que R1 y R2 no sean ambos metilo; y

40

R7 es: hidrógeno, hidroxi, hallo, amino, hidroxiamino, nitro, ciano, azido o mercapto; o alquilo(C 6), alquenilo(C 6),

alquinilo(C 6), arilo(C 6), aralquilo(C 6), heteroarilo(C 6), heteroaralquilo(C 6), acilo(C 6), alcoxi(C 6), alqueniloxi(C 6),

alquiniloxi(C 6), ariloxi(C 6), aralcoxi(C 6), heteroariloxi(C 6), heteroaralcoxi(C 6), aciloxi(C 6), alquilamino(C 6),

dialquilamino(C 6), alcoxiamino(C 6), alquenilamino(C 6), alquinilamino(C 6), arilamino(C 6), aralquilamino(C 6),

o sales farmacéuticamente aceptables, tautómeros, o isómeros ópticos de los mismos. También se desvelan en el presente documento, compuestos de la fórmula;

en la que:

R2 y R5 son cada uno independientemente: hidrógeno, hidroxi, amino, ciano, o alquilo(C 18), alquenilo(C 18),

10 alquinilo(C 18), arilo(C 18), aralquilo(C 18), heteroarilo(C 18), heteroaralquilo(C 18), acilo(C 18), alcoxi(C 18), alqueniloxi(C 18), alquiniloxi(C 18), ariloxi(C 18), aralcoxi(C 18), heteroariloxi(C 18), heteroaralcoxi(C 18), aciloxi(C 18), alquilamino(C 18), dialquilamino(C 18), alcoxiamino(C 18), alquenilamino(C 18), alquinilamino(C 18), arilamino(C 18), aralquilamino(C 18), heteroarilamino(C 18), heteroaralquilamino(C 18), alquilsulfonilamino(C 18), amido(C 18), alquilidenamino(C 18), aralquilidenamino(C 18), con la condición de que R2 no sea hidrógeno; y

15 R7 y R8 son cada uno independientemente: hidrógeno, hidroxi, halo, oxo, amino, hidroxiamino, nitro, imino, ciano, azido, mercapto o tio; o alquilo(C 6), alquenilo(C 6), alquinilo(C 6), arilo(C 6), aralquilo(C 6), heteroarilo(C 6), heteroaralquilo(C 6), acilo(C 6), alquilideno(C 6), alcoxi(C 6), alqueniloxi(C 6), alquiniloxi(C 6), ariloxi(C 6), aralcoxi(C 6), heteroariloxi(C 6), heteroaralcoxi(C 6), aciloxi(C 6), alquilamino(C 6), dialquilamino(C 6), alcoxiamino(C 6), alquenilamino(C 6), alquinilamino(C 6), arilamino(C 6), aralquilamino(C 6) heteroarilamino(C 6),

20 heteroaralquilamino(C 6), alquilsulfonilamino(C 6), amido(C 6), alquilimino(C 6) alquenilimino(C 6), alquinilimino(C 6), arilimino(C 6), aralquilimino(C 6), heteroarilimino(C 6), heteroaralquilimino(C 6), acilimino(C 6), alquiltio(C 6), alqueniltio(C 6), alquiniltio(C 6), ariltio(C 6), aralquiltio(C 6), heteroariltio(C 6), heteroaralquiltio(C 6), aciltio(C 6), tioacilo(C 6), alquilsulfonilo(C 6), alquenilsulfonilo(C 6), alquinilsulfonilo(C 6), arilsulfonilo(C 6), aralquilsulfonilo(C 6), heteroarilsulfonilo(C 6), heteroaralquilsulfonilo(C 6), alquilamonio(C 6), alquilsulfonio(C 6),

25 alquilsililo(C 6), alquilsililoxi(C 6), o una versión sustituida de cualquiera de estos grupos;

o sales farmacéuticamente aceptables, tautómeros o isómeros ópticos de los mismos.

en la que:

R2 y R5 son cada uno independientemente: hidrógeno, hidroxi, amino, ciano o alquilo(C 18), alquenilo(C 18), alquinilo(C 18), arilo(C 18), aralquilo(C 18), heteroarilo(C 18), heteroaralquilo(C 18), 35 acilo(C 18), alcoxi(C 18), alqueniloxi(C 18), alquiniloxi(C 18), ariloxi(C 18), aralcoxi(C 18), heteroariloxi(C 18),

heteroaralcoxi(C 18), aciloxi(C 18), alquilamino(C 18), dialquilamino(C 18), alcoxiamino(C 18), alquenilamino(C 18), alquinilamino(C 18), arilamino(C 18), aralquilamino(C 18), heteroarilamino(C 18), heteroaralquilamino(C 18), alquilsulfonilamino(C 18), amido(C 18) alquilidenamino(C 18), aralquilidenamino(C 18), con la condición de que R2 no sea hidrógeno; y

5 R7 y R8 son cada uno independientemente: hidrógeno, hidroxi, halo, amino, hidroxiamino, nitro, ciano, azido o mercapto; o alquilo(C 6), alquenilo(C 6), alquinilo(C 6), arilo(C 6), aralquilo(C 6), heteroarilo(C 6), heteroaralquilo(C 6), acilo(C 6), alcoxi(C 6), alqueniloxi(C 6), alquiniloxi(C 6), ariloxi(C 6), aralcoxi(C 6), heteroariloxi(C 6), heteroaralcoxi(C 6), aciloxi(C 6), alquilamino(C 6), dialquilamino(C 6), alcoxiamino(C 6), alquenilamino(C 6), alquinilamino(C 6), arilamino(C 6), aralquilamino(C 6), heteroarilamino(C 6),

10 heteroaralquilamino(C 6), amido(C 6), alquilsililo(C 6), alquilsililoxi(C 6), o una versión sustituida de cualquiera de estos grupos;

o sales farmacéuticamente aceptables, tautómeros, o isómeros ópticos de los mismos.

15 También se describen en el presente documento compuestos de la fórmula:

en la que:

R2 y R5 son cada uno independientemente: hidrógeno, hidroxi, amino, ciano, o alquilo(C 18), alquenilo(C 18),

20 alquinilo(C 18), arilo(C 18), aralquilo(C 18), heteroarilo(C 18), heteroaralquilo(C 18), acilo(C 18), alcoxi(C 18), alqueniloxi(C 18), alquiniloxi(C 18), ariloxi(C 18), aralcoxi(C 18), heteroariloxi(C 18), heteroaralcoxi(C 18), aciloxi(C 18), alquilamino(C 18), dialquilamino(C 18), alcoxiamino(C 18), alquenilamino(C 18), alquinilamino(C 18), arilamino(C 18), aralquilamino(C 18), heteroarilamino(C 18), heteroaralquilamino(C 18), alquilsulfonilamino(C 18), amido(C 18), alquilidenamino(C 18), aralquilidenamino(C 18), con la condición de que R2 no sea hidrógeno; y

25 R7 y R8 son cada uno independientemente: hidrógeno, hidroxi, halo, amino, hidroxiamino, nitro, ciano, azido o mercapto; o alquilo(C 6), alquenilo(C 6), alquinilo(C 6), arilo(C 6), aralquilo(C 6), heteroarilo(C 6), heteroaralquilo(C 6), acilo(C 6), alcoxi(C 6), alqueniloxi(C 6), alquiniloxi(C 6), ariloxi(C 6), aralcoxi(C 6), heteroariloxi(C 6), heteroaralcoxi(C 6), aciloxi(C 6), alquilamino(C 6), dialquilamino(C 6), alcoxiamino(C 6), alquenilamino(C 6), alquinilamino(C 6), arilamino(C 6), aralquilamino(C 6), heteroarilamino(C 6),

30 heteroaralquilamino(C 6), amido(C 6), alquilsililo(C 6), alquilsililoxi(C 6) o una versión sustituida de cualquiera de estos grupos;

o sales farmacéuticamente aceptables, tautómeros, o isómeros ópticos de los mismos.

35 También se desvelan en el presente documento compuestos de la fórmula:

en la que: R1 y R2 son independientemente: hidroxi, amino, ciano, o

alquilo(C 18), alquenilo(C 18), alquinilo(C 18), arilo(C 18), aralquilo(C 18), heteroarilo(C 18), heteroaralquilo(C 18), acilo(C 18), alcoxi(C 18), alqueniloxi(C 18), alquiniloxi(C 18), ariloxi(C 18), aralcoxi(C 18), heteroariloxi(C 18), heteroaralcoxi(C 18), aciloxi(C 18), alquilamino(C 18), dialquilamino(C 18), alcoxiamino(C 18), alquenilamino(C 18), alquinilamino(C 18), arilamino(C 18), aralquilamino(C 18), heteroarilamino(C 18), heteroaralquilamino(C 18),

5 alquilsulfonilamino(C 18), amido(C 18), alquilidenamino(C 18), aralquilidenamino(C 18), o una versión sustituida de cualquiera de estos grupos, con la condición de que R1 y R2 no sean ambos metilo;

o sales farmacéuticamente aceptables, tautómeros, o isómeros ópticos de los mismos.

En algunas variantes de los anteriores, el enlace entre los átomos 4 y 5 es un enlace sencillo. En otras, el enlace entre los átomos 4 y 5 es un doble enlace.

En algunas variantes de los anteriores, R2 es alquenilo(C 12), alquenilo(C 12) sustituido, alquinilo(C 12) o alquinilo(C 12) sustituido. En otras variantes, R2 es alquinilo(C 8) o alquinilo(C 8) sustituido. Por ejemplo, R2 puede ser -C≡C-R9, donde

15 R9 es:

hidrógeno o ciano; o

alquilo(C 6), arilo(C 6), acilo(C 6), alquilsililo(C 6) o una versión sustituida de cualquiera de estos grupos.

En variantes de lo anterior, R9 es hidrógeno. En otras variantes, R9 es -Si(CH3)2C(CH3)3, En otras variantes, R9 es ciano. En otras variantes, R9 es -CO2H o -CO2CH3. R9 es fenilo.

En algunas variantes de los anteriores, R2 es alquenilo(C 8) o alquenilo(C 8) sustituido. Por ejemplo, R2 puede ser etenilo (vinilo). En otras variantes, R2 es ciano. En otras variantes, R2 es aralquilo(C 18), aralquilo(C 18) sustituido,

25 heteroaralquilo(C 18) o heteroaralquilo(C 18) sustituido. En otras variantes, R2 es fenilmetilo. En otras variantes, R2 es alquilo(C 8) o alquilo(C 8) sustituido. Por ejemplo, R2 puede ser aminometilo o hidroximetilo. En otras variantes, R2 es acilo(C 8) o acilo(C 8) sustituido. Por ejemplo, R2 puede ser -CO2H, -C(O)NH2 o -C(O)CH3.

En algunas variantes de los anteriores, R1 es alquilo(C 8) o alquilo(C 8) sustituido. Por ejemplo, R1 puede ser metilo, etilo o -(CH2)2C(CH3)3. En otras variantes, R1 es alquenilo(C 8) o alquenilo(C 8) sustituido. Por ejemplo, R1 puede ser alilo. En otras variantes, R1 es alquinilo(C 8) o alquinilo(C 8) sustituido. Por ejemplo, R1 puede ser -CH2C≡CH. En otras variantes, R1 es aralquilo(C 18), aralquilo(C 18) sustituido, heteroaralquilo(C 18) o heteroaralquilo(C 18) sustituido. Por ejemplo, R1 puede ser aralquilo(C 12) o aralquilo(C 12) sustituido. Por ejemplo, R1 puede ser fenilmetilo o feniletilo.

35 En algunas variantes de los anteriores, R1 es -L-R10, donde:

R10 es: hidrógeno, hidroxi, halo, amino, hidroxiamino, ciano o mercapto; o alquilo(C 12), alquenilo(C 12), alquinilo(C 12), arilo(C 12), aralquilo(C 12), heteroarilo(C 12), heteroaralquilo(C 12), acilo(C 12), alcoxi(C 12), alqueniloxi(C 12), alquiniloxi(C 12), ariloxi(C 12), aralcoxi(C 12), heteroariloxi(C 12), heteroaralcoxi(C 12), aciloxi(C 12), alquilamino(C 12), dialquilamino(C 12), alcoxiamino(C 12), alquenilamino(C 12), alquinilamino(C 12), arilamino(C 12), aralquilamino(C 12), heteroarilamino(C 12), heteroaralquilamino(C 12), alquilsulfonilamino(C 12), amido(C 12), alquiltio(C 12), alqueniltio(C 12), alquiniltio(C 12), ariltio(C 12), aralquiltio(C 12), heteroariltio(C 12), heteroaralquiltio(C 12), aciltio(C 12), tioacilo(C 12), alquilsulfonilo(C 12), alquenilsulfonilo(C 12), alquinilsulfonilo(C 12), arilsulfonilo(C 12), aralquilsulfonilo(C 12), heteroarilsulfonilo(C 12),

45 heteroaralquilsulfonilo(C 12), alquilamonio(C 12), alquilsulfonio(C 12), alquilsililo(C 12), alquilsililoxi(C 12), o una versión sustituida de cualquiera de estos grupos; y L es alcanodiilo(C 6) o alcanodiilo(C 6) sustituido.

En algunas variantes de los anteriores, L es alcanodiilo(C1-3). Por ejemplo, L puede ser metanodiilo, etanodiilo o propanodiilo.

En algunas variantes de los anteriores, R10 es alquilo(C 8) o una versión sustituida del mismo. Por ejemplo, R10 puede ser terc-butilo. En otras variantes, R10 es arilo(C 12), aralquilo(C 12), heteroarilo(C 12), heteroaralquilo(C 12) o una versión sustituida de cualquiera de estos grupos. Por ejemplo, R10 puede ser arilo(C 8) o una versión sustituida del mismo. Por

55 ejemplo, R10 puede ser fenilo. En otras variantes, R10 es amino, alquilamino(C 8), alquilamino(C 8) sustituido, dialquilamino(C 8) o dialquilamino(C 8) sustituido. Por ejemplo, R10 puede ser amino. En otras variantes, R10 es hidroxi, alcoxi(C 8) o alcoxi(C 8) sustituido. Por ejemplo, R10 puede ser hidroxi. En otras variantes, R10 es acilo(C 8) o acilo(C 8) sustituido. Por ejemplo, R10 puede ser -CO2H. En otras variantes, R10 es alquinilo(C 8) o alquinilo(C 8) sustituido. Por ejemplo, R10 puede ser -C≡C-R11, donde R11 es:

hidrógeno, hidroxi, halo, amino, hidroxiamino, ciano, mercapto, o tio; o alquilo(C 8), alquenilo(C 8), alquinilo(C 8), arilo(C 8), aralquilo(C 8), heteroarilo(C 8), heteroaralquilo(C 8), acilo(C 8), alcoxi(C 8), alqueniloxi(C 8), alquiniloxi(C 8), ariloxi(C 8), aralcoxi(C 8), heteroariloxi(C 8), heteroaralcoxi(C 8), aciloxi(C 8), alquilamino(C 8), dialquilamino(C 8), alcoxiamino(C 8), alquenilamino(C 8), alquinilamino(C 8), arilamino(C 8),

65 aralquilamino(C 8), heteroarilamino(C 8), heteroaralquilamino(C 8), alquilsulfonilamino(C 8), amido(C 8), alquilamonio(C 8), alquilsulfonio(C 8), alquilsililo(C 8), alquilsililoxi(C 8), o una versión sustituida de cualquiera de estos grupos.

En algunas variantes de los anteriores, R11 es heteroarilo(C 8), heteroaralquilo(C 8), o versiones sustituidas de todos estos grupos. Por ejemplo, R11 puede ser imidazoilo.

5 En algunas variantes de los anteriores, R1 es aralquilidenamino(C 12) o aralquilidenamino(C 8) sustituido. Por ejemplo, R1 puede ser -N=CHCH2Ph. En otras variantes, R1 es ciano.

También desvelado en el presente documento, el compuesto se define adicionalmente como:

en la que R1 es:

ciano o

15 alquilo(C 18), alquenilo(C 18), alquinilo(C 18), arilo(C 18), aralquilo(C 18), heteroarilo(C 18), heteroaralquilo(C 18), acilo(C 18), alcoxi(C 18), alqueniloxi(C 18), alquiniloxi(C 18), ariloxi(C 18), aralcoxi(C 18), heteroariloxi(C 18), heteroaralcoxi(C 18), aciloxi(C 18), alquilamino(C 18), dialquilamino(C 18), alcoxiamino(C 18), alquenilamino(C 18), alquinilamino(C 18), arilamino(C 18), aralquilamino(C 18), heteroarilamino(C 18), heteroaralquilamino(C 18), alquilsulfonilamino(C 18), amido(C 18), alquilidenamino(C 18), aralquilidenamino(C 18), o una versión sustituida de cualquiera de estos grupos;

o sales farmacéuticamente aceptables, tautómeros, o isómeros ópticos del mismo.

En algunas variantes de los anteriores, R3 es hidrógeno. En algunas variantes de las realizaciones anteriores, R4 es hidrógeno. En algunas variantes de las realizaciones anteriores, R5 es hidrógeno. En algunas variantes de las

25 realizaciones anteriores, R6 es hidrógeno. En algunas variantes de las realizaciones anteriores, R7 es hidrógeno. En algunas variantes de las realizaciones anteriores, R8 es hidrógeno.

Los ejemplos de los compuestos de la invención incluyen:

En el presente documento, también se describen compuestos de las fórmulas:

En algunas realizaciones, los compuestos de la presente invención están en forma de sales farmacéuticamente aceptables. En otras realizaciones, los compuestos de la presente invención no están en forma de sales 5 farmacéuticamente aceptables.

En algunas realizaciones, los compuestos de la presente invención se presentan como mezclas de estereoisómeros. En otras realizaciones, los compuestos de la presente invención se presentan como estereoisómeros sencillos.

10 En algunas realizaciones, los compuestos de la presente invención pueden usarse como inhibidores de la producción del óxido nitroso (ON) inducido por IFN-γ en macrófagos, por ejemplo, que tienen un valor CI50 menor de 0,2 μM.

Otros aspectos generales de la presente invención contemplan una composición farmacéutica que comprende, como principio activo, un compuesto de la presente invención y un transportador farmacéuticamente aceptable. La 15 composición puede, por ejemplo, adaptarse para administración mediante una vía seleccionada del grupo que consiste en vía oral, intraadiposa, intraarterial, intraarticular, intracraneal, intradérmica, intralesional, intramuscular, intranasal, intraocular, intrapericárdica, intraperitoneal, intrapleural, intraprostática, intrarectal, intratecal, intratraqueal, intratumoral, intraumbilical, intravaginal, intravenosa, intravesicular, intravítrea, liposomal, local, mucosa, oral, parenteral, rectal, subconjuntival, subcutánea, sublingual, tópica, transbucal, transdérmica, vaginal, en cremas, en 20 composiciones lipídicas, mediante un catéter, mediante un lavado, mediante infusión continua, mediante infusión, mediante inhalación, mediante inyección, mediante administración local, mediante perfusión localizada, por empapamiento de células diana directamente, o cualquier combinación de las mismas. En realizaciones particulares, la composición puede formularse para administración oral. En realizaciones particulares, la composición se formula como una cápsula dura o blanda, un comprimido, un jarabe, una suspensión, una oblea, o un elixir. En determinadas 25 realizaciones, la cápsula blanda es una cápsula de gelatina. Determinadas composiciones pueden comprender un recubrimiento protector, tales como aquellas composiciones formuladas para administración oral. Determinas composiciones comprenden adicionalmente un agente que retrasa la absorción, tales como aquellas composiciones

formuladas para administración oral. Determinadas composiciones pueden comprender adicionalmente un agente que potencia la solubilidad o dispersabilidad, tales como aquellas composiciones formuladas para administración oral. Determinadas composiciones pueden comprender un compuesto de la presente invención, en las que el compuesto está disperso en un liposoma, en una emulsión de aceite y agua o a una emulsión de agua y aceite.

5 Otro aspecto general adicional de la presente invención, contempla los compuestos de la invención para su uso en un método terapéutico que comprende administrar a un sujeto un compuesto farmacéuticamente eficaz de la presente descripción. El sujeto puede ser, por ejemplo, un ser humano. Adicionalmente, estos y otros métodos de la presente descripción pueden comprender identificar a un sujeto que necesite el tratamiento.

La presente invención también contempla un compuesto de la invención para su uso en un método de tratamiento del cáncer en un sujeto, que comprende administrar a un sujeto una cantidad farmacéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención. El cáncer puede ser cualquier tipo de cáncer, tal como un carcinoma, sarcoma, linfoma, leucemia, melanoma, mesotelioma, mieloma múltiple o seminoma. Otros tipos de cánceres incluyen cáncer de vejiga,

15 de sangre, hueso, cerebro, mama, del sistema nervioso central, de colon, de endometrio, esófago, del tracto genitourinario, de cabeza, laringe, hígado, pulmón, cuello, ovario, páncreas, próstata, bazo, intestino grueso, intestino delgado, estómago, testículo. En este método o en cualquier otro método, el sujeto puede ser un primate. Este método

o cualquier otro método pueden comprender adicionalmente identificar a un sujeto que necesite tratamiento. El sujeto puede tener una historia familiar o ser un paciente de cáncer. En determinadas realizaciones, el sujeto tiene síntomas de cáncer. Los compuestos descritos en el presente documento pueden administrarse mediante cualquier método descrito en el presente documento, tal como por vía local. En determinadas realizaciones, el compuesto se administra por inyección intratumoral directa o por inyección en la vasculatura tumoral. En determinadas realizaciones, los compuestos pueden administrarse por vía sistémica. En determinadas realizaciones, los compuestos pueden administrarse por vía intravenosa, intraarterial, intramuscular, intraperitoneal, subcutánea u oral.

25 En determinadas realizaciones relacionadas con un compuesto de la invención para su uso en métodos de tratamiento de cáncer en un sujeto, que comprenden administrar al sujeto una cantidad farmacéuticamente eficaz de un compuesto de la presente descripción, la cantidad farmacéuticamente eficaz es de 0,1 a 1000 mg/kg. En determinadas realizaciones, la cantidad terapéuticamente eficaz se administra en una sola dosis al día. En determinadas realizaciones, la cantidad farmacéuticamente eficaz se administra en dos o más dosis al día. El compuesto puede administrarse, por ejemplo, poniendo en contacto una célula tumoral durante la depuración ex vivo. El método puede comprender uno o más de los siguientes: a) inducir citotoxicidad en una célula tumoral; b) destruir una célula tumoral; c) inducir apoptosis en una célula tumoral; d) inducir diferenciación en una célula tumoral; o e) inhibir el crecimiento en una célula tumoral. La célula tumoral puede ser cualquier tipo de célula tumoral, tal como la célula de leucemia. Otros

35 tipos de células incluyen, por ejemplo, una célula de cáncer de vejiga, una célula de cáncer de mama, una célula de cáncer de pulmón, una célula de cáncer de colon, una célula de cáncer de próstata, una célula de cáncer de hígado, una célula de cáncer de páncreas, una célula de cáncer de estómago, una célula de cáncer de testículo, una célula de cáncer de cerebro, una célula de cáncer de ovario, una célula de cáncer linfático, una célula de cáncer de piel, una célula de cáncer de cerebro, una célula de cáncer de hueso, o una célula de cáncer de tejido blando.

También se contempla un compuesto de la invención para su uso en terapia de tratamiento de combinación. Por ejemplo, con respecto a un compuesto de la invención para su uso en métodos de tratamiento de cáncer en un sujeto, que comprende administrar a un sujeto una cantidad farmacéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención, el método puede comprender adicionalmente un tratamiento seleccionado del grupo que consiste en

45 administrar una cantidad farmacéuticamente eficaz de un segundo fármaco, radioterapia, terapia génica y cirugía. Dichos métodos pueden comprender adicionalmente (1) poner en contacto una célula tumoral con el compuesto antes de poner en contacto la célula tumoral con el segundo fármaco, (2) poner en contacto una célula tumoral con el segundo fármaco antes de poner en contacto la célula tumoral con el compuesto, o (3) poner en contacto una célula tumoral con el compuesto y el segundo fármaco al mismo tiempo. El segundo fármaco puede ser, en determinadas realizaciones, un antibiótico, un antiinflamatorio, un antineoplásico, un antiproliferativo, un antiviral, un inmunomodulador o inmunosupresor. El segundo fármaco puede ser un agente alquilante, un modulador de receptores de andrógeno, un desestabilizador citoesquelético, un modulador de receptores de estrógeno, un inhibidor de histona desacetilasa, un inhibidor de HMG-CoA reductasa, un inhibidor de prenil protein transferasa, un modulador de receptores retinoideos, un inhibidor de topoisomerasa o un inhibidor de tirosina quinasa. En determinadas

55 realizaciones, el segundo fármaco es 5-azacitidina, 5-fluorouracilo, ácido 9-cis-retinoico, actinomicina D, alitretinoina, ácido todo transretinoico, anamicina, axitinib, belinostat, bevacizumab, bexarotene, bosutinib, busulfán, capecitabina, carboplatino, carmustina, CD437, cediranib, cetuximab, clorambucilo, cisplatino, ciclofosfamida, citarabina, dacarbacina, dasatinib, daunorrubicina, decitabina, docetaxel, dolastatina-10, doxifluridina, doxorrubicina, epirrubicina, erlotinib, etopósido, gefitinib, gemcitabina, gemtuzumab ozogamicina, hexametil melamina, idarrubicina, ifosfamida, imatinib, irinotecán, isotretinoina, ixabepilona, lapatinib, LBH589, lomustina, mecloretamina, melfalán, mercaptopurina, metotrexato, mitomicina, mitoxantrona, MS-275, neratinib, nilotinib, nitrosourea, oxaliplatino, paclitaxel, plicamicina, procarbacina, semaxanib, semustina, butirato de sodio, fenilacetato sodico, estreptozotocina, ácido hidroxámico suberoilanilida, sunitinib, tamoxifeno, tenipósido, tiotepa, tioguanina, topotecán, TRAIL, trastuzumab, tretinoina, tricostatina A, ácido valproico, valrrubicina, vandetanib, vinblastina, vincristina, vindesina o vinorelbina.

65 También se contemplan compuestos de la invención para su uso en métodos de tratamiento o prevención de una enfermedad con un componente inflamatorio en un sujeto, que comprende administrar al sujeto una cantidad farmacéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención. La enfermedad puede ser, por ejemplo, lupus o artritis reumatoide. La enfermedad puede ser una enfermedad intestinal inflamatoria, tal como enfermedad de Crohn o colitis ulcerosa. La enfermedad con un componente inflamatorio puede ser una enfermedad cardiovascular. La

5 enfermedad con un componente inflamatorio puede ser diabetes, tal como diabetes de tipo 1 o tipo 2. Los compuestos de la presente invención también pueden usarse para tratar complicaciones asociadas con diabetes. Dichas complicaciones son bien conocidas en la técnica e incluyen, por ejemplo, obesidad, hipertensión, ateroesclerosis, cardiopatía coronaria, ictus, enfermedad vascular periférica, hipertensión, nefropatía, neuropatía, mionecrosis, retinopatía y síndrome metabólico (síndrome X). La enfermedad con un componente inflamatorio puede ser una enfermedad cutánea, tal como psoriasis, acné o dermatitis atópica. La administración de un compuesto de la presente invención en el tratamiento de dichas enfermedades cutáneas puede ser, por ejemplo, tópica u oral.

La enfermedad con un componente inflamatorio puede ser síndrome metabólico (síndrome X). Un paciente que tiene este síndrome se caracteriza porque tiene tres o más síntomas seleccionados del siguiente grupo de cinco síntomas:

15 (1) obesidad abdominal; (2) hipertrigliceridemia; (3) colesterol de lipoproteína de alta baja densidad (HDL) bajo; (4) presión arterial elevada y (5) glucosa en ayunas elevada, que puede estar en el intervalo característico de la diabetes de Tipo 2 si el paciente también es diabético. Cada uno de estos síntomas se define en el Third Report of the National Cholesterol Education Program Expert Panel on Detection, Evaluation and Treatment of High Blood Cholesterol in Adults (Adult Treatment Panel III, or ATP III), National Institutes of Health, 2001, Publication NIH No. 01-3670, incorporado en el presente documento por referencia. Los pacientes con síndrome metabólico, tanto si tienen o no o han desarrollado diabetes melitus aparente, tienen un riesgo aumentado de desarrollar las complicaciones macro- y micro- vasculares indicadas anteriormente que se producen con la diabetes de tipo 2, tales como ateroesclerosis y cardiopatía coronaria.

25 La presente descripción también incluye compuestos de la invención para su uso en un método de tratamiento o prevención de una enfermedad cardiovascular en un sujeto que comprende administrar al sujeto una cantidad farmacéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención. La enfermedad cardiovascular puede ser, por ejemplo, ateroesclerosis, cardiomiopatía, enfermedad cardiaca congénita, insuficiencia cardiaca congestiva, miocarditis, enfermedad cardiaca reumática, enfermedad de válvulas, cardiopatía coronaria, endocarditis, o infarto de miocardio. La terapia de combinación también se contempla para dichos métodos. Por ejemplo, dichos métodos pueden comprender adicionalmente administrar una cantidad farmacéuticamente eficaz de un segundo fármaco. El segundo fármaco puede ser, por ejemplo, un fármaco que disminuya el colesterol, un antihiperlipidémico, un bloqueador de canales de calcio, un antihipertensivo, o un inhibidor de HMG-CoA reductasa. Ejemplos no limitantes de segundos fármacos incluyen amlodipina, aspirina, ezetimibe, felodipina, lacidipina, lercanidipina, nicardipina,

35 nifedipina, nimodipina, nisoldipina o nitrendipina. Otros ejemplos no limitantes de segundos fármacos incluyen atenolol, bucindolol, carvedilol, clonidina, doxazosina, indoramina, labetalol, metildopa, metoprolol, nadolol, oxprenolol, fenoxibenzamina, fentolamina, pindolol, prazosina, propranolol, terazosin, timolol o tolazolina. El segundo fármaco puede ser, por ejemplo, una estatina, tal como atorvastatina, cerivastatina, fluvastatina, lovastatina, mevastatina, pitavastatina, pravastatina, rosuvastatina o simvastatina.

También se contempla un compuesto de la invención para su uso en métodos de tratamiento o prevención de una enfermedad neurodegenerativa en un sujeto, que comprende administrar al sujeto una cantidad farmacéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención. La enfermedad neurodegenerativa puede seleccionarse, por ejemplo, del grupo que consiste en enfermedad de Parkinson, enfermedad de Alzheimer, esclerosis múltiple (EM),

45 enfermedad de Huntington y esclerosis lateral amiotrófica. En realizaciones particulares, la enfermedad neurodegenerativa es enfermedad de Alzheimer. En realizaciones particulares, la enfermedad neurodegenerativa es EM, tal como EM progresiva primaria, progresiva secundaria remitente recidivante o progresiva recidivante. El sujeto puede ser, por ejemplo, un primate. El sujeto puede ser, un ser humano.

En realizaciones particulares de los compuestos de la invención para su uso en métodos de tratamiento o prevención de una enfermedad neurodegenerativa en un sujeto, que comprende administrar al sujeto una cantidad farmacéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención, el tratamiento suprime la desmielinización de neuronas en el cerebro o médula espinal del sujeto En determinadas realizaciones, el tratamiento suprime la desmielinización inflamatoria. En determinadas realizaciones, el tratamiento suprime la transección de axonas

55 neuronales en el cerebro o médula espinal del sujeto. En determinadas realizaciones, el tratamiento suprime la transección de neuritas en el cerebro o médula espinal del sujeto. En determinadas realizaciones, el tratamiento suprime la apoptosis neuronal en el cerebro o médula espinal del sujeto. En determinadas realizaciones, el tratamiento estimula la remielinización de axones neuronales en el cerebro o médula espinal del sujeto. En determinadas realizaciones, el tratamiento restablece la pérdida de función después de un ataque de EM. En determinadas realizaciones, el tratamiento previene un nuevo ataque de EM. En determinadas realizaciones, el tratamiento previene una discapacidad resultante de un ataque de EM.

En el presente documento también se describe un método de tratamiento o prevención de un trastorno caracterizado por sobreexpresión de genes iNOS en un sujeto, que comprende administrar al sujeto una cantidad

65 farmacéuticamente eficaz de un compuesto de la presente descripción. En el presente documento también se describe un método de inhibición de la producción de óxido nítrico inducido por IFN-γ en células de un sujeto, que comprende administrar a dicho sujeto una cantidad farmacéuticamente eficaz de un compuesto de la presente descripción.

Otro método adicional descrito en el presente documento es un método de tratamiento o prevención de un trastorno 5 caracterizado por sobreexpresión de genes COX-2 en un sujeto, que comprende administrar al sujeto una cantidad farmacéuticamente eficaz de un compuesto de la presente descripción.

También se contempla un compuesto de la invención para su uso en métodos de tratamiento de una enfermedad renal/de riñones (RKD, por sus siglas en inglés) en un sujeto, que comprende administrar al sujeto una cantidad 10 farmacéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención. Véase la Solicitud de Patente de Estados Unidos 12/352,473. La RKD puede producirse, por ejemplo, por un ataque tóxico. El ataque tóxico puede producirse, por ejemplo, por un agente o un fármaco para el diagnóstico por imágenes. El fármaco puede ser, por ejemplo, un agente quimioterapéutico. En determinadas realizaciones la RKD puede producirse por lesión de isquemia/reperfusión. En determinadas realizaciones, la RKD se produce por diabetes o hipertensión. La RKD puede producirse por una

15 enfermedad autoinmunitaria. La RKD puede definirse adicionalmente como una RKD crónica, o una RKD aguda.

En determinadas realizaciones de los compuestos de la presente invención para su uso en métodos de tratamiento de enfermedad renal/de riñones (RKD) en un sujeto, que comprende administrar al sujeto una cantidad farmacéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención, el sujeto se ha sometido o está siendo sometido

20 a diálisis. En determinadas realizaciones, el sujeto se ha sometido, o es un candidato para someterse a, trasplante renal. El sujeto puede ser un primate. El primate puede ser un ser humano. El sujeto en este o en cualquier otro método puede ser, por ejemplo, una vaca, un caballo, un perro, un gato, un cerdo, un ratón, una rata o una cobaya.

En el presente documento también se describe un método para mejorar en un sujeto la tasa de filtración glomerular o

25 la eliminación de creatinina, que comprende administrar al sujeto una cantidad farmacéuticamente eficaz de un compuesto de la presente descripción.

En el presente documento también se describen kits, tal como un kit que comprende: un compuesto de la presente descripción; e instrucciones que comprenden una o más formas de información seleccionadas del grupo que consiste

30 en indicar una patología para la que se administra el compuesto, información de conservación del compuesto, información de dosificación e instrucciones con respecto a como administrar el compuesto. El kit puede comprender un compuesto de la presente descripción en una forma de dosificación múltiple.

En el presente documento también se describen compuestos de la presente descripción que pueden usarse en la

35 prevención y tratamiento de enfermedades y trastornos cuya patología implica estrés oxidativo, inflamación y mala regulación de rutas de señalización inflamatorias. En particular, los compuestos descritos en el presente documento pueden usarse en el tratamiento de enfermedades y trastornos caracterizados por sobreexpresión de óxido nítrico sintasa inducible (iNOS), ciclooxigenasa inducible (COX-2) o ambas, en tejidos afectados; altos niveles de producción de especies reactivas de oxígeno (ROS) o especies reactivas de nitrógeno (RNS) tal como superóxido, peróxido de

40 hidrogeno, óxido nítrico o peroxinitrito; o una producción excesiva de citocinas inflamatorias u otras proteínas relacionadas con inflamación tales como TNFα, IL-6, IL-1, IL-8, ICAM-1, VCAM-1 y VEGF. Dichas enfermedades o trastornos pueden implicar proliferación indeseable de determinadas células, como en el caso del cáncer (por ejemplo, tumores sólidos, leucemias, mielomas, linfomas u otros cánceres), fibrosis asociada con insuficiencia orgánica, o cicatrización excesiva. Otros trastornos de ese tipo incluyen (pero sin limitación), enfermedades autoinmunitarias tales

45 como lupus, artritis reumatoide, diabetes de aparición juvenil, esclerosis múltiple, psoriasis y enfermedad de Crohn; enfermedades cardiovasculares tal como ateroesclerosis, insuficiencia cardiaca, infarto de miocardio, síndrome coronario agudo, restenosis después de cirugía vascular, hipertensión, y vasculitis; enfermedades neurodegenerativas

o neuromusculares tales como enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington, ELA y distrofia muscular; trastornos neurológicos tales como epilepsia y distonía; afecciones neurosiquiátricas tales como 50 depresión mayor, trastorno bipolar, trastorno por estrés postraumático, esquizofrenia, anorexia nerviosa, ADHD, trastornos del espectro autista, enfermedades retinales tales como degeneración macular, retinopatía diabética, glaucoma, y retinitis; síndromes de dolor crónico y agudo, incluyendo dolor inflamatorio y neuropático; pérdida auditiva y acúfenos; diabetes y complicaciones de la diabetes, incluyendo síndrome metabólico, nefropatía diabética, neuropatía diabética, y úlceras diabéticas; enfermedades respiratorias, tales como, asma, enfermedad pulmonar 55 obstructiva crónica, síndrome de distrés respiratorio agudo y fibrosis quística; enfermedades intestinales inflamatorias; osteoporosis, osteoartritis y otras afecciones degenerativas de hueso y cartílago; disfunción orgánica aguda o crónica, incluyendo disfunción renal, disfunción hepática (incluyendo cirrosis y hepatitis) y pancreatitis; lesión por reperfusión-isquemia asociada con ictus trombótico o hemorrágico, hemorragia subaracnoidea, vasoespasmo cerebral, infarto de miocardio, choque o traumatismo; complicaciones de trasplante de órganos o tejidos, incluyendo

60 fallo o rechazo de trasplante agudo o crónico y enfermedad de injerto contra huésped; enfermedades cutáneas incluyendo dermatitis atópica y acné; septicemia y choque séptico; inflamación excesiva asociada con infección, incluyendo inflamación respiratoria asociada con gripe e infecciones de las vías respiratorias superiores; mucositis asociada con terapia del cáncer, incluyendo radioterapia o quimioterapia, y quemaduras graves.

65 Breve descripción de las figuras

Las siguientes figuras forman parte de la presente memoria descriptiva y se incluyen para demostrar adicionalmente determinados aspectos de la presente divulgación. La invención puede comprenderse adicionalmente por referencia a una de estas figuras junto con la descripción detallada de las realizaciones específicas presentadas en el presente documento.

5 Las FIGS. 1A-D , muestran como el espectro UV de cuatro MCE cambia en presencia de ditiotreitol (DTT) (MCE-1, FIG 1A; MCE-2, FIG. 1B; MCE-3, FIG. 1C) o NaOH (MCE-4 (dhMCE-1), FIG. 1D). La FIG. 2 muestra el espectro UV de MCE-1 en diferentes disolventes. La FIG. 3 muestra el espectro UV de MCE-1 en diferentes disolventes. En contraste a la FIG. 2, se amplía el intervalo de absorbancia menor. La FIG. 4 muestra como el espectro UV de MCE-5 cambia en presencia de ditiotreitol (DTT). La FIG. 5 muestra como la presencia de base tiene efecto sobre el espectro UV de los tautómeros dhMCE-5. La FIG. 6 muestra como el espectro UV de MCE-10 cambia en presencia de ditiotreitol (DTT). La FIG. 7 muestra como el espectro UV de MCE-10 cambia en presencia de ditiotreitol (DTT). En contraste a la

15 FIG. 6, se amplía el intervalo de absorbancia menor. La FIG. 8 muestra como el espectro UV de MCE-12 cambia en presencia de ditiotreitol (DTT) La FIG. 9 muestra como el espectro UV de MCE-12 cambia en presencia de ditiotreitol (DTT). En contraste a la FIG. 8, se amplía el intervalo de absorbancia menor. La FIG. 10 muestra como el espectro UV de MCE-15 cambia en presencia de ditiotreitol (DTT). La línea sólida corresponde al espectro UV en ausencia de DTT, la línea de puntos corresponde al espectro UV en presencia de DTT 0,1 mM , y la línea de punto y raya corresponde al espectro UV en presencia de DTT 1 mM. La FIG. 11 muestra como el espectro UV de MCE-7 cambia en presencia de ditiotreitol (DTT). La línea sólida corresponde al espectro UV en ausencia de DTT, la línea de puntos corresponde al espectro UV en presencia de DTT 0,1 mM, y la línea de punto y corresponde al espectro UV en presencia de DTT 1 mM.

25 La FIG. 12 muestra como el espectro UV de MCE-13 cambia en presencia de ditiotreitol (DTT). La línea sólida corresponde al espectro UV en ausencia de DTT, la línea de puntos corresponde al espectro UV en presencia de DTT 0,1 mM, y la línea de punto y raya corresponde al espectro UV en presencia de DTT 1 mM. La FIG. 13 muestra que MCE-1 da un aducto de Michael reversible según RMN 1H. En el RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6 a 21 ºC) de MCE-1, los protones olefínicos Ha, Hb y Hc se observan a 5 8,17 ppm (d, J = 3 Hz), 7,21 ppm (dd, J = 3 y 10 Hz), y 6,35 ppm (d, J = 10 Hz), respectivamente, mientras que los protones olefínicos Ha, Hb, y Hc de MCE-1 disminuyen, un protón enol [a 5 11,12 ppm (s a)] y nuevos protones olefínicos Hd y HE aparecen y aumentan de acuerdo con cantidades crecientes de DTT. La FIG. 14 muestra como el espectro RMN 1H de MCE-1 + 1 equiv. de DTT (500 MHz, DMSO-d6 a 21 ºC) cambia según se aumenta la temperatura.

Descripción de las realizaciones ilustrativas

I. Definiciones

Cuando se usa en el contexto de un grupo químico, "hidrógeno" significa -H; "hidroxi" significa -OH; "oxo" significa =O; "halo" significa independientemente -F, -Cl, -Br o -I; "amino" significa -NH2 (véase más adelante para definiciones de grupos que contienen el término amino, por ejemplo, alquilamino); "hidroxiamino" significa -NHOH; "nitro" significa -NO2; imino significa =NH (véase más adelante para definiciones de grupos que contienen el término imino, por ejemplo, alquilimino); "ciano" significa -CN; "azido" significa -N3; en contexto monovalente "fosfato" significa

45 -OP(O)(OH)2 o una forma desprotonada del mismo; en un contexto divalente "fosfato" significa -OP (O)(OH)O- o una forma desprotonada del mismo; "mercapto" significa -SH; "tio" significa =S; "tioéter" significa -S-; "sulfonamido" significa -NHS(O)2- (véase más adelante para definiciones de grupos que contienen el término sulfonamido, por ejemplo, alquilsulfonamido); "sulfonilo" significa -S(O)2- (véase más adelante para definiciones de grupos que contienen el término sulfonilo, por ejemplo, alquilsulfonilo); "sulfinilo" significa -S (O)- (véase más adelante para definiciones de grupos que contienen el término sulfinilo, por ejemplo, alquilsulfinilo); y "sililo" significa -SiH3 (véase más adelante para definiciones de uno o más grupos que contienen el término sililo, por ejemplo, alquilsililo).

El símbolo "-" significa un enlace sencillo, "=" significa un doble enlace, y "≡" significa un triple enlace. El símbolo "-—"

representa un enlace sencillo o un doble enlace. El símbolo " ", cuando se representa perpendicularmente

55 cruzando un enlace indica el punto de unión del grupo. Cabe señalar que el punto de unión normalmente se identifica únicamente de esta manera para grupos más grandes para ayudar al lector a identificar rápida y sin ambigüedad un punto de unión. El símbolo " " significa un enlace sencillo en el que el grupo acoplado al extremo ancho de la cuña está "hacia el exterior de la página". El símbolo " " significa un enlace sencillo en el que el grupo unido al extremo ancho de la cuña "hacia el interior de la página". El símbolo "

" significa un enlace sencillo en el que la conformación es desconocida (por ejemplo, tanto R o S), la geometría es desconocida (por ejemplo, tanto E como Z) o el compuesto está presente en forma de una mezcla de conformación o geometrías (por ejemplo, una mezcla 50 %/50 %).

Cuando un grupo "R" se representa como un "grupo flotante" en un sistema de anillo, por ejemplo, en la fórmula: entonces R puede reemplazarse por cualquier átomo de hidrógeno unido a cualquiera de los átomos en el anillo, incluyendo un hidrógeno representado, implícito o expresamente definido, siempre y cuando se forme una estructura estable.

Cuando un grupo "R" se representa como un "grupo flotante" en un sistema de anillo condensado, como por ejemplo en la fórmula:

entonces R puede reemplazar cualquier hidrógeno unido a cualquiera de los átomos en el anillo de ambos anillos

10 condensados a menos que se especifique lo contrario. Los hidrógenos reemplazables incluyen hidrógenos representados (por ejemplo, el hidrógeno unido al nitrógeno en la fórmula anterior), hidrógenos implícitos (por ejemplo, un hidrógeno de la fórmula anterior que no se muestra pero que se entiende que está presente), hidrógenos expresamente definidos e hidrógenos opcionales cuya presencia depende de la identidad de un átomo del anillo (por ejemplo, un hidrógeno unido al grupo X, cuando X es igual a -CH-), siempre y cuando se forme una estructura estable.

15 En el ejemplo representado, R puede residir tanto en el anillo de 5 miembros como en el anillo de 6 miembros del sistema de anillos condensado. En la fórmula anterior, la letra en subíndice "y" que sigue inmediatamente al grupo "R" encerrado entre paréntesis, representa una variable numérica. A menos que se especifique lo contrario, esta variable puede ser 0, 1, 2 o cualquier número entero mayor que 2, únicamente limitado por el número máximo de átomos de hidrógeno reemplazables del anillo o sistema de anillos.

20 Cuando y es 2 y "(R)y" se representa como un grupo flotante en un sistema de anillos que tiene uno o más átomos en el anillo que tiene dos hidrógenos reemplazables, por ejemplo, un anillo de carbono saturado, como por ejemplo en la fórmula:

25 entonces cada uno de los dos grupos R puede residir en el mismo átomo o en átomos diferentes. Por ejemplo, cuando R es metilo y ambos grupos R están unidos en el mismo átomo, dan como resultado un grupo dimetilo geminal. Cuando se proporcionan específicamente, dos grupos R pueden tomarse juntos para formar un grupo divalente, tal como uno de los grupos divalentes que se definen adicionalmente más adelante. Cuando dicho grupo divalente está unido al mismo átomo del anillo, dará como resultado una estructura de anillo espirocíclico.

30 En el caso de un grupo R doblemente enlazado R (por ejemplo, oxo, imino, tio, alquilideno, etc.), cualquier par de átomos de hidrógeno implícito o explícito unido a un átomo del anillo puede reemplazarse por el grupo R. Este concepto se ilustra a continuación:

35 representa

Para los grupos de más adelante, los siguientes subíndices entre paréntesis definen adicionalmente los grupos como

se indica a continuación: "(Cn)" define el número exacto (n) de átomos de carbono en el grupo. "(C n)" define el número máximo (n) de átomos de carbono que puede estar en el grupo, siendo el número mínimo de átomos de carbono en el mismo de al menos uno, pero por lo demás tan pequeño como sea posible para el grupo en cuestión. Por ejemplo, se entiende que el número mínimo de átomos de carbono en el grupo "alquenilo(C 8)" es dos. Por ejemplo,

5 "alcoxi(C 10)" designa aquellos grupos alcoxi que tienen de 1 a 10 átomos de carbono (por ejemplo, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10, o cualquier intervalo derivable de los mismos (por ejemplo, de 3 a 10 átomos de carbono). (Cn-n') define tanto el número mínimo (n) como el número máximo (n') de átomos de carbono en el grupo. De forma análoga, "alquilo(C2-10)" designa aquellos grupos alquilo que tienen de 2 a 10 átomos de carbono (por ejemplo, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, o 10, o cualquier intervalo derivable de los mismos (por ejemplo, de 3 a 10 átomos de carbono)).

El término "alquilo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere a un grupo monovalente no aromático con como un carbono saturado como el punto de unión, una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, ningún doble ni triple enlace carbono-carbono, y ningún átomo distinto de carbono e hidrógeno. Los grupos, -CH3 (Me), -CH2CH3 (Et), -CH2CH2CH3 (n-Pr), -CH(CH3)2 (iso-Pr), -CH(CH2)2 (ciclopropilo), -CH2CH2CH2CH3 (n-Bu),

15 -CH(CH3)CH2CH3 (sec-butilo), -CH2CH(CH3)2 (iso-butilo), -C(CH3)3 (terc-butilo), -CH2C(CH3)3 (neo-pentilo), ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y ciclohexilmetilo son ejemplos no limitantes de grupos alquilo. La expresión "alquilo sustituido" se refiere a un grupo monovalente no aromático con como un carbono saturado como el punto de unión, una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, ningún doble ni triple enlace carbono-carbono, y al menos un átomo seleccionado independientemente entre el grupo que consiste en N, O, F, Cl, Br, I, Si, P y S. Los siguientes grupos son ejemplos no limitantes de grupos alquilo sustituidos: -CH2OH, -CH2Cl, -CH2Br, -CH2SH, -CF3, -CH2CN, -CH2C(O)H, -CH2C(O)OH, -CH2C(O)OCH3, -CH2C(O)NH2, -CH2C(O)NHCH3, -CH2C(O)CH3, -CH2OCH3, -CH2OCH2CF3, -CH2OC(O)CH3, -CH2NH2, -CH2NHCH3, -CH2N(CH3)2, -CH2CH2Cl, -CH2CH2OH, -CH2CF3, -CH2CH2OC(O)CH3, -CH2CH2NHCO2C(CH3)3 y -CH2Si(CH3)3.

25 El término "alcanodiilo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere a un grupo divalente no aromático, en el que el grupo alcanodiilo está unido con dos enlaces 0. Los grupos, -CH2- (metileno), -CH2CH2-, -CH2C(CH3)2CH2-, -CH2CH2CH2- y

son ejemplos no limitantes de grupos alcanodiilo. La expresión "alcanodiilo sustituido" se refiere a un grupo monovalente no aromático, en el que el grupo alcanodiilo está unido con dos enlaces 0, como uno o dos átomos de carbono saturados como uno o más de los puntos de unión, una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, ningún doble ni triple enlace carbono-carbono, y al menos un átomo seleccionado independientemente entre el grupo que consiste en N, O, F, Cl, Br, I, Si, P y S. Los siguientes grupos son ejemplos no limitantes de grupos alcanodiilo sustituido: -CH(F)-, -CF2-, -CH(Cl)-, -CH(OH)-, -CH(OCH3)- y -CH2CH(Cl)-.

35 El término "alquenilo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere a un grupo monovalente con un átomo de carbono no aromático como el punto de unión, una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, al menos un doble enlace carbono-carbono no aromático, ningún triple enlace carbono-carbono, y ningún átomo distinto de carbono e hidrógeno. Los ejemplos no limitantes de grupos alquenilo incluyen: -CH=CH2 (vinilo), -CH=CHCH3, -CH=CHCH2CH3, -CH2CH=CH2 (alilo), -CH2CH=CHCH3 y -CH=CH-C6H5. La expresión "alquenilo sustituido" se refiere a un grupo monovalente con un átomo de carbono no aromático como el punto de unión, al menos un doble enlace carbono-carbono no aromático, ningún triple enlace carbono-carbono, una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, y al menos un átomo seleccionado independientemente entre el grupo que consiste en N, O, F, Cl, Br, I, Si, P y S. Los grupos, -CH=CHF, -CH=CHCl y -CH=CHBr, son ejemplos no limitantes de grupos alquenilo sustituidos.

45 El término "alquenodiilo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere a un grupo divalente que no es aromático antes de la unión, en el que el grupo alquenodiilo está unido con dos enlaces 0, que puede volverse aromático después de la unión, con dos átomos de carbono como puntos de unión, una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, al menos un doble enlace carbono-carbono no aromático, ningún triple enlace carbono-carbono y ningún átomo distinto de carbono e hidrógeno. Los grupos, -CH=CH-, -CH=C(CH3)CH2-, -CH=CHCH2-, -CH=CH-CH=CH-, y

son ejemplos no limitantes de grupos alquenodiilo. La expresión "alquenodiilo sustituido" se refiere a un grupo divalente que no es aromático antes de la unión, en el que el grupo alquenodiilo está unido con dos enlaces 0, que

55 puede volverse aromático después de la unión, con dos átomos de carbono como puntos de unión, una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, al menos un doble enlace carbono-carbono no aromático, ningún triple enlace carbono-carbono y al menos un átomo seleccionado independientemente entre el grupo que consiste en N, O, F, Cl, Br, I, Si, P y S. Los siguientes grupos son ejemplos no limitantes de grupos alquenodiilo sustituidos: -CF=CH-, -C(OH)=CH- y -CH2CH=C(Cl)-.

La expresión "alquinilo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere a un grupo monovalente con un átomo de carbono no aromático como el punto de unión, una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, al menos un triple enlace carbono-carbono y ningún átomo distinto de carbono e hidrógeno. Los grupos, -C≡CH, -C≡CCH3, -C≡CC6H5 y -CH2C=CCH3, son ejemplos no limitantes de grupos alquinilo. La expresión "alquinilo sustituido" se refiere a un grupo monovalente con un átomo de carbono no aromático como el punto de unión y al menos un triple

5 enlace carbono-carbono, una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, y al menos un átomo seleccionado independientemente entre el grupo que consiste en N, O, F, Cl, Br, I, Si, P y S. El grupo, -C≡CSi(CH3)3, es un ejemplo no limitante de un grupo alquinilo sustituido.

El término "alquinodiilo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere a un grupo divalente no aromático, en

10 el que el grupo alquinodiilo está unido con dos enlaces 0, con dos átomos de carbono como puntos de unión, una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, al menos un triple enlace carbono-carbono y ningún átomo distinto de carbono e hidrógeno. Los grupos, -C≡C-, -C≡CCH2- y -C≡CCH(CH3)- son ejemplos no limitantes de grupos alquinodiilo. La expresión "alquinodiilo sustituido" se refiere a un grupo divalente no aromático, en el que el grupo alquinodiilo está unido con dos enlaces 0, con dos átomos de carbono como puntos de unión, una estructura lineal o

15 ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, al menos un triple enlace carbono-carbono y al menos un átomo seleccionado independientemente entre el grupo que consiste en N, O, F, Cl, Br, I, Si, P y S. Los grupos -C≡CCFH- y -C≡CHCH(Cl)son ejemplos no limitantes de grupos alquinodiilo sustituidos.

El término "arilo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere a un grupo monovalente con un átomo de

20 carbono aromático como el punto de unión, dicho átomo de carbono formando parte de una o más estructuras aromáticas de seis miembros, en la que los átomos en el anillo son todos carbono, y en la que el grupo monovalente consiste en ningún átomo distinto de carbono e hidrógeno. Los ejemplos no limitantes de grupos arilo incluyen fenilo (Ph), metilfenilo, (dimetil)fenilo, -C6H4CH2CH3 (etilfenilo), -C6H4CH2CH2CH3 (propilfenilo), -C6H4CH(CH3)2, -C6H4CH(CH2)2, -C6H3(CH3)CH2CH3 (metiletilfenilo), -C6H4CH=CH2 (vinilfenilo), -C6H4CH=CHCH3, -C6H4C=CH,

25 -C6H4C=CCH3, naftilo y el grupo monovalente derivado de bifenilo. La expresión "arilo sustituido" se refiere a un grupo monovalente con un átomo de carbono aromático como el punto de unión, formando parte dicho átomo de carbono de una o más estructuras de anillo aromático de seis miembros, en la que todos los átomos en el anillo son carbono, y en la que el grupo monovalente tiene además al menos un átomo seleccionado independientemente entre el grupo que consiste en N, O, F, Cl, Br, I, Si, P y S. Los ejemplos no limitantes de grupos arilo sustituidos incluyen los grupos:

30 -C6H4F, -C6H4Cl, -C6H4Br, -C6H4I, -C6H4OH, -C6H4OCH3, -C6H4OCH2CH3, -C6H4OC(O)CH3, -C6H4NH2, -C6H4NHCH3, -C6H4N(CH3)2, -C6H4CH2OH, -C6H4CH2OC(O)CH3, -C6H4CH2NH2, -C6H4CF3, -C6H4CN, -C6H4CHO, -C6H4CHO, -C6H4C(O)CH3, -C6H4C(O)C6H5, -C6H4CO2H, -C6H4CO2CH3, -C6H4CONH2, -C6H4CONHCH3 y -C6H4CON(CH3)2.

El término "arenodiilo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere a un grupo divalente, en el que el grupo

35 arenodiilo está unidos con dos enlaces 0, con dos átomos de carbono aromáticos como puntos de unión, formando parte dichos átomos de carbono de una o más estructuras de anillo aromático de seis miembros, en la que todos los átomos en el anillo son carbono, y la que el grupo monovalente consiste en ningún átomo distinto de carbono e hidrógeno. Los ejemplos no limitantes de grupos arenodiilo incluyen:

40 La expresión "arenodiilo sustituido" se refiere a un grupo divalente, en el que el grupo arenodiilo está unido con dos enlaces 0, con dos átomos de carbono aromáticos como puntos de unión, formando parte dichos átomos de carbono de una o más estructuras de anillo aromático de seis miembros, en el que los átomos en el anillo son carbono y en el que el grupo divalente tiene además al menos un átomo seleccionado independientemente entre el grupo que consiste en N, O, F, Cl, Br, I, Si, P y S.

45 El término "aralquilo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere al grupo monovalente -alcanodiilarilo, en el que cada uno de los términos alcanodiilo y arilo usados son coherentes con las definiciones proporcionadas anteriormente. Son ejemplos no limitantes de aralquilos: fenilmetilo (bencilo, Bn), 1-fenil-etilo, 2-fenil-etilo, indenilo y 2,3-dihidroindenilo, con la condición de que indenilo y 2,3-dihidro-indenil son únicamente ejemplos de aralquilo

50 siempre y cuando el punto de unión en cada caso sea uno de los átomo de carbono saturados. Cuando el término "aralquilo" se usa con el modificador "sustituido", tanto uno como ambos de alcanodiilo y arilo están sustituidos. Los ejemplos no limitantes de grupos aralquilo sustituidos son: (3-clorofenilo)-metilo, 2-oxo-2-fenil-etilo (fenilcarbonilmetilo), 2-cloro-2-fenil-etilo, cromanilo en el que el punto de unión es uno de los átomos de carbono saturados, y tetrahidroquinolinilo en el que el punto de unión es uno de los átomos saturados.

55 El término "heteroarilo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere a un grupo monovalente con un átomo de carbono aromático con un átomo de carbono aromático o átomo de nitrógeno el punto de unión, dicho átomo de carbono o átomo de nitrógeno formando parte de una estructura de anillo aromático, en la que al menos uno de los átomos en el anillo es nitrógeno, oxígeno o azufre, y en la que el grupo monovalente consiste en ninguno de los átomos

60 distintos de carbono, hidrógeno, nitrógeno aromático, oxigeno aromático y azufre aromático. Los ejemplos no limitantes de grupos arilo incluyen acridinilo, furanilo, imidazoimidazolilo, imidazopirazolilo, imidazopiridinilo,

imidazopirimidinilo, indolilo, indazolinilo, metilpiridilo, oxazolilo, fenilimidazolilo, piridilo, pirrolilo, pirimidilo, pirazinilo, quinolilo, quinazolilo, quinoxalinilo, tetrahidroquinolinilo, tienilo, triazinilo, pirrolopiridinilo, pirrolopirimidinilo, pirrolopirazinilo, pirrolotriazinilo, pirroloimidazolilo, cromenilo (en el que el punto de unión es uno de los átomos aromáticos) y cromanilo (en el que el punto de unión es uno de los átomos aromáticos). La expresión "heteroarilo 5 sustituido" se refiere a un grupo monovalente con un átomo de carbono aromático con un átomo de carbono aromático

o átomo de nitrógeno el punto de unión, formando parte dicho átomo de carbono o átomo de nitrógeno de una estructura de anillo aromático, en la que al menos uno de los átomos en el anillo es nitrógeno, oxígeno o azufre, y en la que el grupo monovalente tiene además al menos un átomo seleccionado independientemente entre el grupo que consiste en nitrógeno no aromático, oxígeno no aromático, azufre no aromático F, Cl, Br, I, Si y P.

La expresión "heteroarenodiilo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere a un grupo divalente, en el que el heteroarenodiilo grupo está unido con dos enlaces 0, con un átomo de carbono aromático con un átomo de carbono aromático o átomo de nitrógeno como el punto de unión, formando parte dicho átomo de carbono o átomo de nitrógeno de una o más estructuras de anillo aromático, en la que al menos uno de los átomos en el anillo es nitrógeno, oxígeno

15 o azufre, y en el que el grupo divalente consiste en ninguno de los átomos distintos de carbono, hidrógeno, nitrógeno aromático, oxígeno aromático y azufre aromático. Los ejemplos no limitantes de grupos heteroarenodiilo incluyen:

La expresión "heteroarenodiilo sustituido" se refiere a un grupo divalente, en el que el grupo heteroarenodiilo está unido con dos enlaces 0, con un átomo de carbono aromático o átomo de nitrógeno como puntos de unión, formando parte dicho átomo de carbono o átomo de nitrógeno de una o más estructuras de anillo aromático de seis miembros, en las que al menos uno de los átomos en el anillo es nitrógeno, oxígeno o azufre, y en la que el grupo divalente tiene además al menos un átomo seleccionado independientemente entre el grupo que consiste en nitrógeno no aromático, oxígeno no aromático, azufre no aromático F, Cl, Br, I, Si y P.

25 El término "heteroaralquilo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere al grupo monovalente alcanodiilheteroarilo, en que los términos alcanodiilo y heteroarilo se usan cada uno de una manera coherente con las definiciones proporcionadas anteriormente. Son ejemplos no limitantes de aralquilos: piridilmetilo y tienilmetilo. Cuando el término "heteroaralquilo" se usa con el modificador "sustituido", tanto uno como ambos de alcanodiilo y el heteroarilo están sustituidos.

El término "acilo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere a un grupo monovalente con un átomo de carbono de un grupo carbonilo como el punto de unión, que tiene además una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, que además no tiene ningún átomo que no sea carbono o hidrógeno, además del átomo de oxígeno del grupo carbonilo. Los grupos, -CHO, -C(O)CH3 (acetilo, Ac), -C(O)CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH3, -C(O)CH(CH3)2,

35 -C(O)CH(CH2)2, -C(O)C6H5, -C(O)C6H4CH3, -C(O)C6H4CH2CH3, -COC6H3(CH3)2 y -C(O)CH2C6H5, son ejemplos no limitantes de grupos acilo. Por lo tanto, la expresión "acilo" abarca, pero sin limitación, grupos denominados algunas veces como grupos "alquil carbonilo" y "aril carbonilo". La expresión "acilo sustituido" se refiere a un grupo monovalente con un átomo de carbono de un grupo carbonilo como el punto de unión, que tiene además una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, que además tiene al menos un átomo, además del oxígeno del grupo carbonilo, seleccionado independientemente entre el grupo que consiste en N, O, F, Cl, Br, I, Si, P, y S. Los grupos, -C(O)CH2CF3, -CO2H (carboxilo), -CO2CH3 (metilcarboxilo), -CO2CH2CH3, -CO2CH2CH2CH3, -CO2C6H5, -CO2CH(CH3)2, -CO2CH(CH2)2, -C(O)NH2 (carbamoilo), -C(O)NHCH3, -C(O)NHCH2CH3, -CONHCH(CH3)2, -COnHCH(CH2)2, -CON(CH3)2, -CONHCH2Cf3, -CO-piridilo, -CO-imidazoilo y -C(O)N3, son ejemplos no limitantes de grupos acilo sustituidos. La expresión "acilo sustituido" abarca, pero sin limitación, grupos "heteroarilcarbonilo".

45 El término "alquilideno" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere al grupo divalente =CRR', en el que el grupo alquilideno está unido con un enlace 0 y un enlace n, en que R y R' son independientemente hidrógeno, alquilo, alquenilo o R y R' se toman juntos para representar alcanodiilo o alquenodiilo. Los ejemplos no limitantes de grupos alquilideno incluyen: =CH2, =CH(CH2CH3) y =C(CH3)2. La expresión "alquilideno sustituido" se refiere al grupo =CRR', en el que el grupo alquilideno está unido con un enlace 0 y un enlace n, en que R y R' son independientemente hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, alquenilo, alquenilo sustituido, con la condición de que uno de R y R' sea un alquilo sustituido o alquenilo sustituido, o R y R' se toman juntos para representar un alcanodiilo sustituido o un alquenodiilo sustituido.

55 El término "aralquilideno" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere al grupo divalente =CRR', en el que el grupo aralquillideno está unido con un enlace 0 y un enlace n, en que R y R' son independientemente hidrógeno, alquilo, arilo o aralquilo, con la condición de que al menos uno de R y R' sea arilo o aralquilo. La expresión "aralquilideno sustituido" se refiere al grupo =CRR', en el que el grupo aralquillideno está unido con un enlace 0 y un enlace n, en el que R y R' son independientemente hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, aralquilo

o aralquilo sustituido, con la condición de que al menos uno de R y R' sea arilo, arilo sustituido, aralquilo o aralquilo sustituido.

El término "alcoxi" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere al grupo -OR, en el que R es un alquilo, según se ha definido anteriormente dicho término. Los ejemplos no limitantes de grupos alcoxi incluyen: -OCH3, -OCH2CH3, -OCH2CH2CH3, -OCH(CH3)2, -OCH(CH2)2, -O-ciclopentilo y -O-ciclohexilo. La expresión "alcoxi sustituido"

5 se refiere al grupo -OR, en que R es un alquilo sustituido, según se ha definido anteriormente dicho término. Por ejemplo, -OCH2CF3 es un grupo alcoxi sustituido.

El término "alcoxidiilo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere a un grupo divalente no aromático, en el que el grupo alcoxidiilo está unido con dos enlaces 0, con (a) dos átomos de carbono saturados como puntos de unión,

(b) un átomo de carbono saturado y un átomo de oxígeno como puntos de unión, o (c) dos átomos de oxígeno como puntos de unión, que además tiene una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, ningún doble ni triple enlace carbono-carbono en la estructura principal del grupo, que además no tiene ningún átomo de la estructura principal distinto de carbono u oxígeno y que tiene al menos uno de cada uno de estos átomos en la estructura principal del grupo, y ninguna de las cadenas laterales comprende grupos distintos de hidrógeno o alquilo. Los grupos,

15 -O-CH2CH2-, -CH2-O-CH2CH2-, -O-CH2CH2-O- y -O-CH2-O- son ejemplos no limitantes de grupos alcoxidiilo. La expresión "alcaniloxidiilo sustituido" se refiere a un grupo divalente que está unido con dos enlaces 0, con (a) dos átomos de carbono saturados como puntos de unión, (b) un átomo de carbono saturado y un átomo de oxígeno como puntos de unión, o (c) dos átomos de oxígeno como puntos de unión, que además tiene una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, ningún doble ni triple enlace carbono-carbono y al menos un átomo seleccionado independientemente entre el grupo que consiste en N, F, Cl, Br, I, Si, P, y S, o que tiene átomos de oxígeno adicionales, además de los de la estructura principal del grupo. Los siguientes grupos son ejemplos no limitantes de un grupo alcoxidiilo sustituido: -O-CH2C(OH)H-O- y -O-CH2C(Cl)H-O-.

De forma análoga, los términos "alqueniloxi", "alquiniloxi", "ariloxi", "aralcoxi", "heteroariloxi", "heteroaralcoxi" y

25 "aciloxi", cuando se usan sin el modificador "sustituido", se refiere a grupos, definidos como -OR, en que R es alquenilo, alquinilo, arilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo y acilo, respectivamente, según se han definido anteriormente dichos términos. Cuando cualquiera de los términos alqueniloxi, alquiniloxi, ariloxi, aralquiloxi y aciloxi está modificado con "sustituido", se refiere al grupo -OR, en que R es alquenilo sustituido, alquinilo, arilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo y acilo, respectivamente.

El término "alqueniloxidiilo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere a un grupo divalente que es un grupo no aromático antes de la unión, en el que el grupo alqueniloxidiilo está unido con dos enlaces 0, que puede volverse aromático después de la unión, con (a) dos átomos de carbono como puntos de unión, (b) un átomo de carbono y un átomo de oxígeno como puntos de unión, o (c) dos átomos de oxígeno como puntos de unión, que 35 además tiene una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, al menos un doble enlace carbono-carbono que no es aromático, al menos antes de la unión, que además no tiene ningún átomo de la estructura principal distinto de carbono u oxígeno y que tiene al menos uno de cada uno de estos átomos en la estructura principal del grupo, y ninguna de las cadenas laterales comprendiendo grupos distintos de hidrógeno o alquilo. Los grupos, -O-CH=CH-,- O-CH=CHO- y -O-CH=CHCH2- son ejemplos no limitantes de grupos alqueniloxidiilo. La expresión " alqueniloxidiilo sustituido" se refiere a un grupo divalente que no es aromático antes de la unión, en el que el grupo alqueniloxidiilo sustituido está unido con dos enlaces 0, que puede volverse aromático después de la unión, con (a) dos átomos de carbono como puntos de unión, (b) un átomo de carbono y un átomo de oxígeno como puntos de unión, o (c) dos átomos de oxígeno como puntos de unión, que además tiene una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, al menos un doble enlace carbono-carbono que no es aromático, al menos antes de la unión y al menos un

45 átomo seleccionado independientemente entre el grupo que consiste en N, F, Cl, Br, I, Si, P y S, o que tiene átomos de oxígeno adicionales, además de los de la estructura principal del grupo. Los siguientes grupos son ejemplos no limitantes de un grupo alqueniloxidiilo sustituido: -O-CH=C(OH)-O- y -O-CH=C(Cl)-O-.

El término "alquilamino" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere al grupo -NHR, en el que R es un alquilo, según se ha definido anteriormente dicho término. Los ejemplos no limitantes de grupos alquilimino incluyen: -NHCH3, -NHCH2CH3, -NHCH2CH2CH3, -NHCH(CH3)2, -NHCH(CH2)2, -NHCH2CH2CH2CH3, -NHCH(CH3)CH2CH3, -NHCH2CH(CH3)2, -NHC (CH3)3, -NH-ciclopentilo y -NH-ciclohexilo. La expresión "alquilimino sustituido" se refiere al grupo NHR, en que R es un alquilo sustituido, según se ha definido anteriormente dicho término. Por ejemplo, -NHCH2CF3 es un grupo alquilimino sustituido.

55 El término "dialquilamino" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere al grupo -NRR', en que R y R' pueden ser grupos alquilo iguales o diferentes, o R y R' pueden tomarse juntos para representar un alcanodiilo que tiene dos o más átomos de carbono saturados, al menos dos de los mismos están unidos al átomo de nitrógeno. Los ejemplos no limitantes de grupos dialquilamino incluyen: -NHC(CH3)3, -N(CH3)CH2CH3, -N(CH2CH3)2, N-pirrolidinilo y N-piperidinilo. La expresión "dialquilamino sustituido" se refiere al grupo -NRR', en que R y R' pueden ser grupos alquilo sustituidos iguales o diferentes, uno de R o R' es un alquilo y el otro es un alquilo sustituido, o R y R' pueden tomarse juntos para representar un alcanodiilo sustituido con dos o más átomos de carbono saturados, al menos dos de los mismos están unidos al átomo de nitrógeno.

65 Los términos "alcoxiamino", "alquenilamino", "alquinilamino", "arilamino", "aralquilamino", "heteroarilamino", "heteroaralquilamino" y "alquilsulfonilamino" cuando se usan sin el modificador "sustituido", se refiere a grupos, definidos como -NHR, en que R es alcoxi, alquenilo, alquinilo, arilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo y alquilsulfonilo, respectivamente, según se han definido anteriormente dichos términos. Un ejemplo no limitante de un grupo arilamino es -NHC6H5. Cuando cualquiera de los términos alcoxiamino, alquenilamino, alquinilamino, arilamino, aralquilamino, heteroarilamino, heteroaralquilamino y alquilsulfonilamino está modificado con "sustituido", se refiere al

5 grupo -NHR, en el que R es alcoxi sustituido, alquenilo, alquinilo, arilo; aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo y alquilsulfonilo, respectivamente.

El término "amido" (acilamino), cuando se usan sin el modificador "sustituido", se refiere al grupo -NHR, en el que R es acilo, según se ha definido anteriormente dicho término. Un ejemplo no limitante de un grupo acilamino es -NHC(O)CH3. Cuando el término amido se usa con el modificador "sustituido", se refiere a grupos, definidos como -NHR, en el que R es acilo sustituido, según se ha definido anteriormente dicho término. Los grupos -NHC(O)OCH3 y -NHC(O)NHCH3 son ejemplos no limitantes de grupos amido sustituidos.

El término "alquilidenamino" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere al grupo -N=Ra, en el que Ra es un

15 alquilideno, según se ha definido anteriormente dicho término. La expresión "alquilidenamino sustituido" se refiere al grupo N=Ra, en que Ra es un alquilideno sustituido, según se ha definido anteriormente dicho término.

El término "aralquilidenamino" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere al grupo -N=Ra, en el que Ra es un aralquilideno, según se ha definido anteriormente dicho término. La expresión "aralquilidenamino sustituido" se refiere al grupo N=Ra, en que Ra es un aralquilideno sustituido, según se ha definido anteriormente dicho término.

El término "alquilaminodiilo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere a un grupo divalente no aromático, en el que el grupo alquilaminodiilo está unido con dos enlaces 0, con (a) dos átomos de carbono saturados como puntos de unión, (b) un átomo de carbono saturado y un átomo de nitrógeno como puntos de unión, o (c) dos átomos 25 de nitrógeno como puntos de unión, que además tiene una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, sin dobles ni triples enlaces en la estructura principal del grupo, que además no tiene ningún átomo de la estructura principal distinto de carbono o nitrógeno y que tiene al menos uno de cada uno de estos átomos en la estructura principal del grupo, y ninguna de las cadenas laterales comprendiendo grupos distintos de hidrógeno o alquilo. Los grupos, -NH-CH2CH2-, -CH2-NH-CH2CH2-, -NH-CH2CH2-NH- y -NH-CH2-NH- son ejemplos no limitantes de grupos alquilaminodiilo. La expresión "alquilaminodiilo sustituido" se refiere a un grupo divalente, en el que el grupo alquilaminodiilo sustituido está unido con dos enlaces 0, con (a) dos átomos de carbono saturados como puntos de unión, (b) un átomo de carbono saturado y un átomo de nitrógeno como puntos de unión, o (c) dos átomos de nitrógeno como puntos de unión, que además tiene una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, ningún doble ni triple enlace carbono-carbono en la estructura principal del grupo, y al menos un átomo seleccionado

35 independientemente entre el grupo que consiste en O, F, Cl, Br, I, Si, P, y S, o que tiene un átomo de nitrógeno adicional, además de los de la estructura principal del grupo. Los siguientes grupos son ejemplos no limitantes de un grupo alquilaminodiilo sustituido: -NH-CH2C(OH)H-NH- y -NH-CH2C(Cl)H-CH2-.

El término "alquenilaminodiilo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere a un grupo divalente que no es aromático antes de la unión, en el que el grupo alquenilaminodiilo está unido con dos enlaces 5, que puede volverse aromático después de la unión, con (a) dos átomos de carbono como puntos de unión, (b) un átomo de carbono y un átomo de nitrógeno como puntos de unión, o (c) dos átomos de nitrógeno como puntos de unión, que además tiene una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, al menos un doble enlace carbono-carbono o doble carbono-nitrógeno que no es aromático, al menos antes de la unión, que además no tiene ningún átomo de la 45 estructura principal distinto de carbono o nitrógeno, y ninguna de las cadenas laterales comprende grupos distintos de hidrógeno o alquilo. Los grupos, -NH-CH=CH-, -NH-CH=N- y -NH-CH=CH-NH- son ejemplos no limitantes de grupos alquenilaminodiilo. La expresión "alquenilaminodiilo sustituido" se refiere a un grupo divalente que no es aromático antes de la unión, en el que el grupo alquenilaminodiilo sustituido está unido con dos enlaces 0, que puede volverse aromático después de la unión, con (a) dos átomos de carbono como puntos de unión, (b) un átomo de carbono y un átomo de nitrógeno como puntos de unión, o (c) dos átomos de nitrógeno como puntos de unión, que además tiene una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, al menos un doble enlace carbono-carbono o doble enlace carbono-nitrógeno que no es aromático, al menos antes de la unión y al menos un átomo seleccionado independientemente entre el grupo que consiste en O, F, Cl, Br, I, Si, P, y S, o que tiene átomos adicionales de nitrógeno además de los de la estructura principal del grupo. Los siguientes grupos son ejemplos no limitantes de un

55 grupo alquenilaminodiilo sustituido: -NH-CH=C(OH)-CH2- y -N=CHC(Cl)H-.

El término "alquenilaminooxidiilo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere a un grupo divalente, en el que el grupo alquenilaminooxidiilo está unido con dos enlaces 0, que puede volverse aromático después de la unión, con dos átomos seleccionados entre el grupo que consiste en carbono, oxígeno y nitrógeno como puntos de unión, que además tiene una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, al menos un doble enlace carbono-carbono, doble enlace carbono-nitrógeno o doble enlace nitrógeno-nitrógeno que no es aromático, al menos antes de la unión, que además no tiene ningún átomo de la estructura principal distinto de carbono, nitrógeno u oxígeno y que tiene al menos uno de cada uno de estos tres átomos en la estructura principal, y ninguna de las cadenas laterales comprende grupos distintos de hidrógeno o alquilo. El grupo -O-CH=N-, es un ejemplo no limitante de un grupo 65 alquenilaminooxidiilo. La expresión "alquenilaminooxidiilo sustituido" se refiere a un grupo divalente que está unido con dos enlaces 0, que puede volverse aromático después de la unión con dos átomos seleccionados entre el grupo que

consiste en carbono, oxígeno y nitrógeno como puntos de unión, que además tiene una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, al menos un doble enlace carbono-carbono o doble enlace carbono-nitrógeno que no es aromático, al menos antes de la unión y al menos un átomo seleccionado independientemente entre el grupo que consiste en F, Cl, Br, I, Si, P y S, o que tiene uno o más átomos de nitrógeno y/u oxígeno adicionales además de los de

5 la estructura principal del grupo. Los siguientes grupos son ejemplos no limitantes de un grupo alquenilaminooxidiilo sustituido: -NH-CH=C(OH)-O- y -N=CHC(Cl)H-O-.

El término "alquenilaminotiodiilo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere a un grupo divalente que no es aromático antes de la unión, en el que el grupo alquenilaminotiodiilo está unido con dos enlaces 0, que puede volverse aromático después de la unión, con dos átomos seleccionados entre el grupo que consiste en carbono, nitrógeno y azufre como puntos de unión, que además tiene una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, al menos un doble enlace carbono-carbono, doble enlace carbono-nitrógeno, o doble enlace nitrógeno-nitrógeno que no es aromático, ala menos antes de la unión, que además no tiene ningún átomo de la estructura principal distinto de carbono, nitrógeno o azufre y que tiene al menos uno de cada uno de estos tres átomos en la estructura principal y

15 ninguna de las cadenas laterales comprende grupos distintos de hidrógeno o alquilo. El grupo -S-CH=N-, es un ejemplo no limitante de un grupo alquenilaminotiodiilo. La expresión "alquenilaminotiodiilo sustituido" se refiere a un grupo divalente que está unido con dos enlaces 0, que puede volverse aromático después de la unión con dos átomos seleccionados entre el grupo que consiste en carbono, nitrógeno y azufre como puntos de unión, que tiene además una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, al menos un doble enlace carbono-carbono o doble enlace carbono-nitrógeno que no es aromático, al menos antes de la unión, y al menos un átomo seleccionado independientemente entre el grupo que consiste en O, F, Cl, Br, I, Si y P, o que tiene uno o más átomos de nitrógeno y/o azufre adicionales además de los de la estructura principal del grupo. Los siguientes grupos son ejemplos no limitantes de un grupo alquenilaminotiodiilo sustituido: -NH-CH=C(OH)-S- y -N=CHC(Cl)H-S-.

25 El término "alquilimino" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere al grupo =NR, en el que el grupo alquilimino está unido con un enlace 0 y un enlace n, en el que R es un alquilo, según se ha definido anteriormente dicho término. Los ejemplos no limitantes de grupos alquilimino incluyen: =NCH3, =NCH2CH3 y =N-ciclohexilo. La expresión "alquilimino sustituido" se refiere al grupo =NR, en el que el grupo alquilimino está unido con un enlace 0 y un enlace n, en que R es un alquilo sustituido, según se ha definido anteriormente dicho término. Por ejemplo, =NCH2CF3 es un grupo alquilimino sustituido.

De forma análoga, los términos "alquenilimino", "alquinilimino", "arilimino", "aralquilimino", "heteroarilimino", "heteroaralquilimino" y "acilimino", cuando se usan sin el modificador "sustituido", se refiere a grupos, definidos como =NR, en el que el grupo alquilimino está unido con un enlace 0 y un enlace n, en el que R es alquenilo, alquinilo, arilo,

35 aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo y acilo, respectivamente, según se han definido anteriormente dichos términos. Cuando cualquiera de los términos alquenilimino, alquinilimino, arilimino, aralquilimino y acilimino está modificado con "sustituido", se refiere al grupo =NR, en el que el grupo alquilimino está unido con un enlace 0 y un enlace n, en el que R es alquenilo sustituido, alquinilo, arilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo y acilo, respectivamente.

El término "fluoroalquilo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere a un alquilo, según se ha definido anteriormente dicho término, en el que uno o más de los grupo flúor se han sustituido por hidrógeno. Los grupos, -CH2F, -CF2H, -CF3 y -CH2CF3 son ejemplos no limitantes de grupos fluoroalquilo. La expresión "fluoroalquilo sustituido" se refiere a un grupo monovalente no aromático con un carbono saturado como el punto de unión, una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, al menos un átomo de flúor, ningún doble ni triple enlace

45 carbono-carbono, y al menos un átomo seleccionado independientemente entre el grupo que consiste en N, O, Cl, Br, I, Si, P y S. El siguiente grupo es un ejemplo no limitante de u fluoroalquilo sustituido: -CFHOH.

El término "alquilfosfato" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere al grupo -OP(O)(OH)(OR), en el que R es un alquilo, según se ha definido anteriormente dicho término. Los ejemplos no limitantes de grupos alquilfosfato incluyen: -OP(O)(OH)(OMe) y -OP(O)(OH)(OEt). La expresión "alquilfosfato sustituido" se refiere al grupo -OP(O)(OH)(OR), en el que R es un alquilo sustituido, según se ha definido anteriormente dicho término.

El término "dialquilfosfato" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere al grupo -OP(O)(OR)(OR'), en que R y R' pueden ser grupos alquilo iguales o diferentes, o R y R' pueden tomarse juntos para representar un alcanodiilo que

55 tiene dos o más átomos de carbono saturados, al menos dos de los mismos están unidos mediante los átomos de oxígeno al átomo de fósforo. Los ejemplos no limitantes de grupos dialquilfosfato incluyen: -OP(O)(OMe)2, -OP(O)(OEt)(OMe) y -OP(O)(OEt)2. La expresión "dialquilfosfato sustituido" se refiere al grupo -OP(O)(OR)(OR'), en el que R y R' pueden ser grupos alquilo sustituidos iguales o diferentes, uno de R o R' es un alquilo y el otro es un alquilo sustituido, o R y R' pueden tomarse juntos para representar un alcanodiilo sustituido con dos o más átomos de carbono saturados, al menos dos de los mismos están unidos mediante los átomos de oxígeno a los fósforos.

El término "alquiltio" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere al grupo -SR, en el que R es un alquilo, según se ha definido anteriormente dicho término. Los ejemplos no limitantes de grupos alquiltio incluyen: -SCH3, -SCH2CH3, -SCH2CH2CH3, -SCH(CH3)2, -SCH(CH2)2, -S-ciclopentilo y -S-ciclohexilo. La expresión "alquiltio sustituido"

65 se refiere al grupo -SR, en que R es un alquilo sustituido, según se ha definido anteriormente dicho término. Por ejemplo, -SCH2CF3 es un grupo alquitio sustituido.

De forma análoga, los términos "alqueniltio", "alquiniltio", "ariltio", "aralquiltio", "heteroariltio", "heteroaralquiltio" y "aciltio", cuando se usan sin el modificador "sustituido", se refieren a grupos, definidos como -SR, en el que R es alquenilo, alquinilo, arilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo y acilo, respectivamente, según se han definido anteriormente dichos términos. Cuando cualquiera de los términos alqueniltio, alquiniltio, ariltio, aralquiltio, heteroariltio, heteroaralquiltio y aciltio está modificado con "sustituido", se refiere al grupo -SR, en que R es alquenilo sustituido, alquinilo, arilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo y acilo, respectivamente.

-

El término "tioacilo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere a un grupo monovalente con un átomo de carbono de un grupo tiocarbonilo como el punto de unión, que tiene además una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, que además no tiene ningún átomo que no sea carbono o hidrógeno, además del átomo de azufre del grupo carbonilo. Los grupos, -CHS, -C(S)CH3, -C(S)CH2CH3, -C(S)CH2CH2CH3, -C(S)CH(CH3)2, -C(S)CH(CH2)2, -C(S)C6H5, -C(S)C6H4CH3, -C(S)C6H4CH2CH3, -C(S)C6H3(CH3)2 y -C(S)CH2C6H5, son ejemplos no limitantes de grupos tioacilo. La expresión "tioacilo" por lo tanto abarca, pero sin limitación, grupos denominados algunas veces como grupos "alquilo tiocarbonilo" y "arilo tiocarbonilo". La expresión "tioacilo sustituido" se refiere a un radical con un átomo de carbono como el punto de unión, siendo el átomo de carbono parte de un grupo tiocarbonilo, que además tiene una estructura lineal o ramificada, de ciclo, cíclica o acíclica, que además tiene al menos un átomo, además del átomo de azufre del grupo carbonilo, seleccionado independientemente entre el grupo que consiste en N, O, F, Cl, Br, I, Si, P y S. Los grupos, -C(S)CH2CF3, -C(S)O2H, -C(S)OCH3, -C(S)OCH2CH3, -C(S)OCH2CH2CH3, -C(S)OC6H5, -C(S)OCH(CH3)2, -C(S)OCH(CH2)2, -C(S)NH2 y -C(S)NHCH3, son ejemplos no limitantes de grupos tioacilo sustituidos. La expresión "tioacilo sustituido" abarca, pero sin limitación, grupos "heteroarilo tiocarbonilo".

El término "alquilsulfonilo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere al grupo -S(O)2R, en el que R es un alquilo, según se ha definido anteriormente dicho término. Los ejemplos no limitantes de grupos alquilsulfonilo incluyen: -S(O)2CH3, -S (O)2CH2CH3, -S(O)2CH2CH2CH3, -S(O)2CH(CH3)2, -S(O)2CH(CH2)2, -S(O)2-ciclopentilo, y -S(O)2-ciclohexilo. La expresión "alquilsulfonilo sustituido" se refiere al grupo -S(O)2R, en que R es un alquilo sustituido, según se ha definido anteriormente dicho término. Por ejemplo, -S(O)2CH2CF3 es un grupo alquilsulfonilo sustituido.

De forma análoga, los términos "alquenilsulfonilo", "alquinilsulfonilo", "arilsulfonilo", "aralquilsulfonilo", "heteroarilsulfonilo" y "heteroaralquilsulfonilo" cuando se usan sin el modificador "sustituido", se refieren a grupos, definidos como -S(O)2R, en el que R es alquenilo, alquinilo, arilo, aralquilo, heteroarilo y heteroaralquilo, respectivamente, según se han definido anteriormente dichos términos. Cuando cualquiera de los términos alquenilsulfonilo, alquinilsulfonilo, arilsulfonilo, aralquilsulfonilo, heteroarilsulfonilo y heteroaralquilsulfonilo está modificado con "sustituido", se refiere al grupo -S(O)2R, en el que R es alquenilo sustituido, alquinilo, arilo, aralquilo, heteroarilo y heteroaralquilo, respectivamente.

El término "alquilsulfinilo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere al grupo -S(O)R, en el que R es un alquilo, según se ha definido anteriormente dicho término. Los ejemplos no limitantes de grupos alquilsulfinilo incluyen: -S(O)CH3, -S(O)CH2CH3, -S(O)CH2CH2CH3, -S(O)CH(CH3)2, -S(O)CH(CH2)2, -S(O)-ciclopentilo, y -S(O)-ciclohexilo. La expresión "alquilsulfinilo sustituido" se refiere al grupo -S(O)R, en que R es un alquilo sustituido, según se ha definido anteriormente dicho término. Por ejemplo, -S(O)CH2CF3 es un grupo alquilsulfinilo sustituido.

De forma análoga, los términos "alquenilsulfinilo", "alquinilsulfinilo", "arilsulfinilo", "aralquilsulfinilo", "heteroarilsulfinilo" y "heteroaralquilsulfinilo" cuando se usan sin el modificador "sustituido", se refieren a grupos, definidos como -S(O)R, en el que R es alquenilo, alquinilo, arilo, aralquilo, heteroarilo y heteroaralquilo, respectivamente, según se han definido anteriormente dichos términos. Cuando cualquiera de los términos alquenilsulfinilo, alquinilsulfinilo, arilsulfinilo, aralquilsulfinilo, heteroarilsulfinilo y heteroaralquilsulfinilo está modificado con "sustituido", se refiere al grupo -S(O)R, en que R es alquenilo sustituido, alquinilo, arilo, aralquilo, heteroarilo y heteroaralquilo, respectivamente.

El término "alquilamonio" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere a un grupo, definido como -NH2R+, -NHRR'+ o -NRR'R"+, en el que R, R' y R" son grupos alquilo iguales o diferentes, o cualquier combinación de dos de R, R' y R" pueden tomarse juntos para representar un alcanodiilo. Los ejemplos no limitantes de grupos de catión de alquilamonio incluyen: -NH2(CH3)+, -NH2(CH2CH3)+, -NH2(CH2CH2CH3)+, -NH(CH3)2+, -NH(CH2CH3)2+,

+++ +

-

NH(CH2CH2CH3)2 , -N(CH3)3 , -N(CH3)(CH2CH3)2 , -N(CH3)2(CH2CH3)+, -NH2C(CH3)3 , -NH(ciclopentilo)2+ y -NH2(ciclohexilo)+. La expresión "alquilamonio sustituido" se refiere a -NH2R+, -NHRR'+ o -NRRR"+, en que al menos uno de R, R' y R" es un grupo alquilo sustituido o dos de R, R' y R" pueden tomarse juntos para representar un alcanodiilo sustituido. Cuando más de uno de R, R' y R" es un alquilo sustituido, pueden ser iguales o diferentes. Cualquiera de R, R' y R" que no sea alquilo sustituido ni alcanodiilo sustituido, puede ser alquilo, igual o diferente, o pueden tomarse juntos para representar un alcanodiilo con dos o más átomos de carbono, al menos dos de los mismos están acoplados a los átomo de nitrógeno mostrados en la fórmula.

El término "alquilsulfonio" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere al grupo -SRR'+, en que R y R' pueden ser grupos alquilo iguales o diferentes, o R y R' pueden tomarse juntos para representar un alcanodiilo. Los ejemplos no limitantes de grupos alquilsulfonio incluyen: -SH(CH3)+, -SH(CH2CH3)+, -SH(CH2CH2CH3)+, -S(CH3)2+, -S(CH2CH3)2+, -S(CH2CH2CH3)2+, -SH(ciclopentilo)+, y -SH(ciclohexilo)+. La expresión "alquilsulfonio sustituido" se refiere al grupo -SRR+, en el que R y R' pueden ser grupos alquilo sustituidos iguales o diferentes, uno de R o R' es un alquilo y el otro es un alquilo sustituido, o R y R' pueden tomarse juntos para representar un alcanodiilo sustituido. Por ejemplo, -SH(CH2CF3)+ es un grupo alquilsulfonio sustituido.

5 El término "alquilsililo" cuando se usa sin el modificador "sustituido" se refiere a un grupo monovalente, definidos como -SiH2R, -SiHRR' o -SiRR'R", en que R, R' y R" pueden ser grupos alquilo iguales o diferentes, o cualquier combinación de dos de R, R' y R" pueden tomarse juntos para representar un alcanodiilo. Los grupos, -SiH2CH3, -SiH(CH3)2, -Si(CH3)3 y -Si(CH3)2C(CH3)3, son ejemplos no limitantes de grupos alquilsililo sin sustituir. La expresión "alquilsililo

10 sustituido" se refiere un -SiH2R, -SiHRR' o -SiRR'R", en el que al menos uno de R, R' y R" es un grupo alquilo sustituido

o dos de R, R' y R" pueden tomarse juntos para representar un alcanodiilo sustituido. Cuando más de uno de R, R' y R" es un alquilo sustituido, pueden ser iguales o diferentes. Cualquiera de R, R' y R" que no sea alquilo sustituido ni alcanodiilo sustituido, puede ser alquilo, igual o diferente, o pueden tomarse juntos para representar un alcanodiilo con dos o más átomos de carbono saturados, al menos dos de los mismos están acoplados al mismo átomo de silicio.

15 Además de los átomos que constituyen los compuestos de la presente invención se pretenden incluir todas las formas isotópicas de dichos átomos. Los isótopos, como se usa en el presente documento, incluyen aquellos átomos que tienen el mismo número atómico pero diferente número másico. A modo de ejemplo general y sin limitación, los isótopos de hidrógeno incluyen tritio y deuterio, y los isótopos de carbono incluyen 13C y 14C. De forma análoga, se

20 contempla que uno o más de los átomos de carbono de un compuesto de la presente invención puedan estar reemplazados por uno o más átomos de silicio. Además, se contempla que uno o más de los átomos de oxígeno de un compuesto de la presente invención puedan estar reemplazados por uno o más átomos de azufre o selenio.

Un compuesto que tiene una fórmula que se representa con una línea de puntos pretende incluir las fórmulas que 25

incluye las estructuras

y

30 Como se comprenderá por un experto en la materia, ninguno de dichos átomos de anillo forma parte de más de un doble enlace.

Cualquier valencia no definida en un átomo de una estructura mostrada en la presente solicitud, representa 35 implícitamente un átomo de hidrógeno enlazado al átomo.

Como se usa en el presente documento, un "auxiliar quiral" se refiere a un grupo quiral retirable que es capaz de influir sobre la estereoselectividad de una reacción. Los expertos en la materia están familiarizados con dichos compuestos, y pueden estar disponibles en el mercado.

40 El uso de la palabra "un" o "uno", cuando se usa junto con el término "que comprende" en las reivindicaciones y/o en la memoria descriptiva puede significar "uno", pero también es coherente con el significado de "uno o más", "al menos uno" y "uno o más de uno".

45 A lo largo de la presente solicitud, el término "aproximadamente" se usa para indicar que un valor incluye la variación inherente a un error del dispositivo, el método que se esté empleando para determinar el valor, o la variación que exista entre los objetos de estudio.

Los términos "comprende", "tiene" e "incluye" son verbos de unión de final abierto. Cualquiera de las formas o tiempos

50 de uno o más de estos verbos, tal como "comprende", "comprendiendo", "tiene", "teniendo", "incluye" e "incluyendo", también tiene final abierto. Por ejemplo, cualquier método que "comprende", "tiene" o "incluye" una o más etapas no se limita a la posesión únicamente a una o más de las etapas y también cubre otras etapas no enumeradas.

El término "eficaz", como tal término, se usa en la memoria descriptiva y/o reivindicaciones, significa adecuado para 55 conseguir un resultado, deseado, esperado o pretendido.

El término "hidrato" cuando se usa como un modificador para un compuesto, significa que el compuesto tiene menos de una (por ejemplo, hemihidrato), una (por ejemplo, monohidrato) o más de una (por ejemplo, dihidrato) moléculas de agua asociadas con cada uno de los compuestos de la molécula, tal como en formas sólidas del compuesto.

Como se usa en el presente documento, el término "CI50" se refiere a una dosis inhibidora que es el 50 % de la 5 respuesta máxima obtenida.

Un "isómero" de un primer compuesto es un compuesto separado en el que cada molécula contiene los mismos átomos constituyentes que el primer compuesto, pero donde la configuración de dichos átomos en tres dimensiones es diferente.

10 Como se usa en el presente documento, el término "paciente" o "sujeto" se refiere a un organismo de un mamífero vivo, tal como un ser humano, mono, vaca, oveja, cabra, perro, cato, ratón, rata, cobaya o especies transgénicas de los mismos. En determinadas realizaciones, el paciente o sujeto es un primate. Los ejemplos no limitantes de sujetos humanos son adultos, jóvenes, niños y fetos.

15 "Farmacéuticamente aceptable" significa que es útil en la preparación de una composición farmacéutica que generalmente es segura, no tóxica ni tampoco biológicamente ni de ninguna otra forma indeseada e incluye que es aceptable para uso veterinario, así como para uso en farmacéutica humana.

20 "Sales farmacéuticamente aceptables" significa sales de compuestos de la presente invención que son farmacéuticamente aceptables, como se ha definido anteriormente, y que poseen la actividad farmacológica deseable. Dichas sales incluyen sales de adición de ácidos formadas con ácidos inorgánicos, tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico y similares; o con ácidos orgánicos, tales como ácido 1,2-etanodisulfónico, ácido 2-hidroxietanosulfónico, ácido 2-naftalenosulfónico, ácido 3-fenilpropiónico,

25 4,4'-metilenobis(ácido 3-hidroxi-2-eno-1-carboxílico), ácido 4-metilbiciclo[2,2,2]oct-2-eno-1-carboxílico, ácido acético, ácidos mono y dicarboxílicos alifáticos, ácidos sulfúricos alifáticos, ácido sulfúricos aromáticos, ácido bencenosulfónico, ácido benzoico, ácido canforsulfónico, ácido carbónico, ácido cinámico, ácido cítrico, ácido ciclopentanopropiónico, ácido etanosulfónico, ácido fumárico, ácido glucoheptónico, ácido glucónico, ácido glutámico, ácido glicólico, ácido heptanoico, ácido hexanoico, ácido hidroxinaftoico, ácido láctico, ácido laurilsulfúrico, ácido

30 maleico, ácido málico, ácido malónico, ácido mandélico, ácido metanosulfónico, ácido mucónico, ácido o-(4-hidroxibenzoil)benzoico, ácido oxálico, ácido p-clorobencenosulfónico, ácido alcanólico sustituido con fenilo, ácido propiónico, ácido p-toluenosulfónico, ácido pirúvico, ácido salicílico, ácido esteárico, ácido succínico, ácido tartárico, ácido butilacético terciario, ácido trimetilacético y similares. Las sales farmacéuticamente aceptables también incluyen sales de adición de bases que pueden formarse cuando los protones ácidos presentes son capaces de

35 reaccionar con bases inorgánicas u orgánicas. Las bases inorgánicas aceptables incluyen hidróxido sódico, carbonato sódico, hidróxido potásico, hidróxido de aluminio e hidróxido de calcio. Las bases orgánicas aceptables incluyen etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, trometamina, N-metilglucamina y similares. Debe reconocerse que el anión o catión particular que forma parte de cualquier sal de la presente invención no es crítico, siempre y cuando la sal, en su conjunto, sea farmacéuticamente aceptable. Se presentan ejemplos adicionales de sales

40 farmacéuticamente aceptables y sus métodos de preparación y uso en Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, and Use (2002).

Como se usa en el presente documento, "predominantemente un enantiómero" significa que un compuesto contiene al menos aproximadamente 85 % de un enantiómero, o más preferiblemente al menos aproximadamente 90 % de un

45 enantiómero, o incluso más preferiblemente al menos aproximadamente 95 % de un enantiómero, o lo más preferido al menos aproximadamente 99 % de un enatiómero. De forma análoga, la frase "sustancialmente libre de otros isómeros ópticos" significa que la composición contiene al menos aproximadamente 15 % de otro enantiómero o diastereómero, más preferiblemente al menos aproximadamente 10 % de otro enantiómero o diastereómero, incluso más preferiblemente al menos aproximadamente 5 % de otro enantiómero o diastereómero, y lo más preferiblemente al

50 menos aproximadamente 1 % de otro enantiómero o diastereómero.

"Prevención" o "que previene" incluye: (1) inhibir el comienzo de una enfermedad en un sujeto o paciente que puede estar en riesgo y/o predispuesto a la enfermedad pero que aún no la experimentado o muestra cualquiera o todas de las patologías o sintomatología de la enfermedad, y/o (2) disminuir el comienzo de la patología o sintomatología en un

55 sujeto o un paciente que puede estar en riesgo y/o predispuesto a la enfermedad pero que todavía no la experimentado o muestra cualquiera o todas de las patologías o sintomatología de la enfermedad.

El término "saturado" cuando se refiere a un átomo está conectado a otros átomos únicamente por medio de enlaces simples.

60 Un "estereoisómero" o "isómero" es un isómero de un compuesto dado en el que los mismos átomos o están enlazados a los mismos otros átomos, pero en el que la configuración de estos átomos en tres dimensiones es diferente. "Enantiómeros" son estereoisómeros de un compuesto dado que son imágenes especulares entre sí, como las manos izquierda y derecha. "Diastereómeros" son estereoisómeros de un compuesto dado que no son

65 enantiómeros.

La invención contempla que para cualquier estereocentro o eje de quiralidad estereocentro o eje de quiralidad para el que no se ha definido estereoquímica, dicho estereocentro o eje de quiralidad puede ser presente en su forma R, S, o como una mezcla de las formas R y S, incluyendo mezclas racémicas y no racémicas.

5 "Sustituyente convertirle en hidrógeno in vivo "significa cualquier grupo que puede convertirse en un átomo de hidrógeno mediante un medio enzimológico o químico incluyendo, pero sin limitación, hidrólisis e hidrogenólisis. Los ejemplos incluyen grupo hidrolizables, tales como grupos acilo, grupos que tiene un grupo oxicarbonilo, restos de aminoácido, restos de péptido, o-nitrofenilsulfenilo, trimetilsililo, tetrahidro-piranilo, difenilfosfinilo y similares. Los ejemplos de grupos acilo incluyen formilo, acetilo, trifluoroacetilo y similares. Los ejemplos de grupos que tienen un grupo oxicarbonilo incluyen etoxicarbonilo, terc-butoxicarbonilo (-C(O)OC(CH3)3), benciloxicarbonilo, p-metoxibenciloxicarbonilo, viniloxicarbonilo, �-(p-toluenosulfonilo)etoxicarbonilo y similares. Los restos aminoacídicos adecuados incluyen, pero sin limitación, restos de Gly (glicina), Ala (alanina), Arg (arginina); Asn (asparagina), Asp (ácido aspártico), Cys (cisteína), Glu (ácido glutámico), His (histidina), ILe (isoleucina), Leu (leucina), Lys (lisina), Met (metionina), Phe (fenilalanina), Pro (prolina), Ser (serina), Thr (treonina), Trp (tritófano), Tyr (tirosina), Val (valina), Nva

15 (norvalina), Hse (homoserina), 4-Hyp (4-hidroxiprolina), 5- Hyl (5-hidroxilisina), Orn (ornitina) y �-alma. Los ejemplos de restos aminoacídicos adecuados también incluyen restos aminoacídicos que están protegidos con un grupo protector. Los ejemplos de grupos protectores adecuados incluyen aquellos que se emplean normalmente en la síntesis de péptidos, incluyendo grupos acilo (tales como formilo y acetilo), grupos arilmetiloxicarbonilo (tales como benciloxicarbonilo y p-nitrobenciloxicarbonilo), grupos terc-butoxicarbonilo (-C(O)OC(CH3)3) y similares. Los restos peptídicos adecuados incluyen restos de péptidos que comprenden de dos a cinco, y opcionalmente restos aminoacídicos. Los restos de estos aminoácidos o péptidos puede estar presentes en configuraciones estequiométricas de la forma D, la forma L o mezclas de los mismos. Además, el resto de aminoácido o péptido puede tener un átomo de carbono asimétrico. Los ejemplos de restos amionoacídicos adecuados que tienen un carbono asimétrico incluyen restos de Ala, Leu, Phe, Trp, Nva, Val, Met, Ser, Lys, Thr y Tyr. Los restos de péptido que tienen un

25 átomo de carbono asimétrico incluyen restos de péptido que tienen uno o más restos de aminoácido constituyente que tienen un átomo de carbono asimétrico. Los ejemplos de grupos protectores de aminoácidos adecuados incluyen aquellos que se emplean normalmente en la síntesis de péptidos, incluyendo grupos acilo (tales como formilo y acetilo), grupos arilmetiloxicarbonilo (tales como benciloxicarbonilo y p-nitrobenciloxicarbonilo), grupos terc-butoxicarbonilo (-C(O)OC(CH3)3) y similares. Otros ejemplos de sustituyentes "convertibles en hidrógeno in vivo" incluyen grupos hidrogenolizables que pueden eliminarse reductoramente. Los ejemplos de grupos hidrogenolizables que pueden eliminarse reductoramente incluyen, pero sin limitación, grupos arilsulfonilo (tales como o-toluenosulfonilo); grupos metilo sustituidos con fenilo o benciloxi (tales como bencilo, tritilo y benciloximetilo); grupos arilmetoxicarbonilo (tales como benciloxicarbonilo y o-metoxi-benciloxicarbonilo); y grupos haloetoxicarbonilo (tales como �,�,�-tricloroetoxicarbonilo y �-yodoetoxicarbonilo).

35 “Cantidad terapéuticamente eficaz” o “cantidad farmacéuticamente eficaz” significa la cantidad que, cuando se administra a un sujeto o a un paciente para tratar una enfermedad, es suficiente para efectuar dicho tratamiento para la enfermedad.

“Tratamiento” o “tratar” incluye (1) inhibir una enfermedad en un sujeto o paciente que sufre o presenta la patología o sintomatología de la enfermedad (por ejemplo, deteniendo adicionalmente el desarrollo de la patología y/o sintomatología) (2) mejorar la enfermedad en un sujeto o paciente que sufre o presenta la patología o sintomatología de la enfermedad (por ejemplo, invirtiendo la patología y/o sintomatología), y/o (3) efectuar cualquier disminución medible en una enfermedad en un sujeto o paciente que sufre o presenta la patología o sintomatología de la

45 enfermedad.

Como se usa en el presente documento, la expresión “soluble en agua” significa que el compuesto se disuelve en agua al menos hasta el grado de 0,010 mol/litro o se clasifica como soluble de acuerdo con la bibliografía anterior.

Otras abreviaturas utilizadas en el presente documento son las siguientes: DMSO, dimetil sulfóxido; NO, óxido nítrico; iNOS, óxido nítrico sintasa inducible; COX-2, ciclooxigenasa-2; NGF, factor de crecimiento nervioso; IBMX, isobutilmetilxantina; FBS, suero bovino fetal; GPDH, glicerol 3-fosfato deshidrogenasa; RXR, receptor X retinoideo; TGF-β, factor de crecimiento transformante �; IFNγ o IFN-γ, interferón-γ; LPS, lipopolisacárido endotóxico bacteriano; TNFα o TNF-α, factor de necrosis tumoral-α; IL-1β, interleucina-1β; GAPDH, gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa;

55 MTT, bromuro de 3-[4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,5-difeniltetrazolio; TCA, ácido tricloroacético; HO-1, hemoxigenasa inducible.

Las definiciones anteriores sustituyen cualquier definición conflictiva en cualquier referencia del presente documento. Sin embargo, el hecho de que se definan algunos términos, no debe considerarse como indicativo de que cualquier término que no se defina sea indefinido. Más bien, se piensa que todos los términos usados describen la invención en términos de tal manera que un experto habitual puede apreciar el alcance y realización práctica de la presente invención.

II. Cianoenonas monocíclicas

65 Se sintetizaron nuevas cianoenonas monocíclicas (MCE) y su reactividad de Michael y actividad biológica se sometió a ensayo para identificar fragmentos útiles en el descubrimiento de fármacos. Como parte de estas investigaciones, se descubrió que la MCE-1 era una aceptora de Michael muy reactiva. La MCE-1 produce aductos de Michael reversibles y selectivos con nucleófilos tiol. La MCE-1 también es muy fuerte para la inhibición de la producción de NO en células RAW estimuladas por interferón-γ (ensayo iNOS) e inducción de la respuesta de fase 2, específicamente, sobre la elevación de NAD(P)H quinona óxidorreductasa en células Hepalclc7 (ensayo NQO1).

5 Se descubrió que la fuerza de la MCE-1 era mayor que la del CDDO en el ensayo iNOS. Se ha generado un modelo de homología de IRKβ basado en la estructura de rayos X de la quinasa de punto de control 2 y se ha examinado su empleo en modelos de unión de MCE-1 con Cys179 de IKKβ. Sin ligarse a ninguna teoría o mecanismo, estos estudios están en consonancia con la creencia de que los ligandos que comprenden el núcleo farmacóforo MCE-1, el anillo A

10 del CDDO y TBE-31, actuarán de manera reversible y selectiva sobre Cys179 en el dominio quinasa en IKKβ. Esta serie de nuevos ligandos proporciona inhibidores de IRKβ exclusivos que son ATP-no competitivos. Los compuestos descritos en el presente documento también pueden usarse para interaccionar con diversas dianas de proteína diferentes incluyendo JAK1 y Keap1.

15 A. Síntesis

MCE-1, 3 y 4 se sintetizaron mediante la secuencia que se muestra en el Esquema 2 (Ejemplo 2). El Compuesto 2 se preparó con un rendimiento del 99 % mediante conversión de cetal de éster etílico del ácido 4-oxociclohexanonacarboxílico disponible en el mercado (1) (Phansavath et al., 1998). La adición nucleófila del 20 enolato de 2 en yodometano dio 3 con un rendimiento del 85 %. La reducción de 3 con LiA1H4, seguido de oxidación con CrO3 proporcionó 5 (94 % de rendimiento). La reacción de Wittig de 5 con cloruro de (clorometil)trifenilfosfonio (Mella et al., 1988), seguido de deshidrocloración con MeLi y tratamiento posterior con clorotrimetilsilano (TMSCI) (Corey et al., 1973) produjo 6 con un rendimiento del 71 %. El cetal de 6 se retiró en condiciones ácidas para producir 7 con un rendimiento del 98 %. La enona 8 se preparó mediante la adición de un grupo fenilselenilo al enolato de litio 25 de 7 y posterior oxidación/eliminación con peróxido de hidrógeno acuoso al 30 % (36 % de rendimiento). La formilación de 8 con formiato de etilo, seguido de la condensación con hidroxilamina, dio el isoxazol 9 con un rendimiento del 94 %. La escisión del anillo isoxiazol de 9 en condiciones básicas produjo MCE-4 (5,6-dihidro-MCE-1, dhMCE-1) con rendimiento cuantitativo. MCE-1 se obtuvo de MCE-4 (dhMCE-1) mediante oxidación de DDQ (47 % de rendimiento). El compuesto 10 se preparó con un rendimiento del 78 % a partir de 7 por cianación con cianuro de p-toluenosulfonilo

30 (p- TsCN, Kahne et al., 1981), seguido de oxidación de DDQ. La retirada del grupo TMS de 10 proporcionó MCE-3 con un rendimiento del 50 %. MCE-1 en sí mismo se sintetizaría en cuatro etapas a partir de un compuesto conocido, 4-etinil- 4-metilciclohex-2-en-1-ona (Semmelhack et al., 1993) mediante la misma secuencia que para MCE-1 a partir de 8.

35 El compuesto conocido MCE-2 se preparó a partir de 4,4-dimetilciclohex-2-enona de acuerdo con los métodos de la bibliografía (Liu et al., 2000), como se resume aquí:

40 (a) HCO2Et, NaOMe, PhH; (b) NH2OH-HCl. EtOH acuoso: (c) NaOMe, MeOH, Et2O; (d) DDQ, PhH.

El nuevo compuesto, MCE-5 se sintetizó en 5 etapas a partir de 14 (Esquema 3, Ejemplo 3), que se preparó por anulación de Robinson con isobutiraldehído y etil vinil cetona (Paquette et al., 1989). El compuesto conocido 15 se preparó con un rendimiento del 50 % mediante metilación reductora de 14 (Smith et al., 1967). La formilación de 15,

45 seguido del tratamiento con hidroxilamina, dio 17 con un rendimiento del 77 %. La escisión del isoxazol de 17 con metóxido sódico proporcionó dhMCE-5 con un rendimiento del 90 %. MCE-5 se obtuvo por oxidación de DDQ de dhMCE-5 con un rendimiento del 23 %.

El nuevo compuesto, MCE-15 se sintetizó a partir de 5 mediante la secuencia de reacción que se muestra en el

50 Esquema 4 (Ejemplo 4). La reacción de Wittig de 5 con yoduro de metiltrifenilfosfonio, seguido de desacetalización, dio 19 con un rendimiento del 86 %. La enona 20 se obtuvo como una mezcla inseparable de 20 y 19 (relación molar 1,4:1) mediante la adición de un grupo fenilselenilo a enolato de litio de 19 y posterior oxidación/eliminación con peróxido de hidrógeno acuoso al 30 %. La formilación de la mezcla con formiato de etilo proporcionó una mezcla de 21 y 22. El compuesto 21 se aisló de la mezcla por cromatografía ultrarrápida. MCE- 15 se preparó a partir de 21 mediante la

55 misma secuencia que para MCE-2 (véase antes).

El análogo de MCE-1, MCE-13 que tiene un grupo bencilo se sintetizó mediante la secuencia de reacción que se muestra en el Esquema 5 (Ejemplo 5). La adición nucleófila del enolato de 2 en el bromuro de bencilo dio 25 con un rendimiento del 81 %. La reducción de 25, seguido de oxidación produjo 27 con un rendimiento del 59 %. El aldehído 27 se convirtió en 28 usando el reactivo de Bestmann-Ohira (dimetil-1-diazo-2-oxopropilfosfonato) y carbonato potásico (rendimiento del 85 %, Müller, et al., 1996). El grupo etinilo de 28 se protegió con TMS para dar 29 con un rendimiento del 89 %. MCE-13 se obtuvo con un rendimiento del 3,4 % a partir de 29 mediante la misma secuencia que

5 para MCE-1 a partir de 6 (véase Esquema 2 posterior).

MCE-7, triciclo que contiene MCE-1 como fragmento, se sintetizó a partir del compuesto conocido 33 (Honda et al., 2007) mediante la secuencia de reacción que se muestra en el Esquema 6. El grupo etinilo de 33 se protegió con un grupo TMS para dar 34 con un rendimiento del 89 %. Una oxidación alílica mediada con cromo (Muzart, 1987) proporcionó 35 con un rendimiento del 47 %. El compuesto 36 se sintetizó con un rendimiento del 57 % mediante cianación de 35 con LDA y p-TsCN, seguido de oxidación DDQ. La desacetalización de 36 en condiciones ácidas dio 37 con un rendimiento del 86 %. El grupo TMS se retiró con fluoruro de tetra-(n-butil)amonio (TBAF) para dar MCE-7 con un rendimiento del 81 %.

15 Los compuestos de la presente divulgación se fabricaron usando los procedimientos indicados anteriormente y en la sección de Ejemplos posterior. Estos métodos pueden modificarse adicionalmente y optimizarse usando los principios y técnicas de química orgánica según se aplican por un experto en la materia. Dichos principios y técnicas se muestran, por ejemplo, en March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure (2007).

B. Estudios de UV Usando DTT y Keap1

MCE-1 da la segunda absorción de UV con una alta longitud de onda (en torno a 334 nm) de acuerdo con la adición de ditiotreitol (DTT) por debajo de la cantidad de dilución (0,1 mM de MCE-1) y condiciones acuosas neutras (solución salina tamponada con fosfato de pH 7,4, etanol al 1 %), que son similares a las condiciones fisiológicas (véase la FIG.

25 1A). La absorción de MCE-1 a alta longitud de onda, que aumenta de acuerdo con la adición de DTT, es idéntica a la absorción de MCE-4 (dhMCE-1) (véase la FIG. 1D) a alta longitud de onda (en torno a 330 nm), que aumenta mediante la adición de NaOH (presumiblemente debido a una unión de H mejorada al hidroxilo de enol). Esta observación es coherente con la segunda absorción de MCE-1 que se deriva del aducto de Michael de DTT con MCE-1, porque el cromóforo del aducto de Michael debe ser igual que la forma enol de MCE-4 (dhMCE-1), que muestra la absorción a una longitud de onda mayor que la forma ceto de MCE-4 (dhMCE-1).

Los solicitantes aprecian que el espectro de UV de MCE-1 (c = 0,1 mM) en solución tamponada con fosfato de pH 7,4 muestra dos absorciones a 230 nm (log £ = 3,96) y 322 nm (log £ = 2,92). Sin embargo, en etanol y agua desionizada, no se observa la banda de longitud de onda (FIG. 2 y 3). El tampón fosfato (pH 7,4) incluye KH2PO41 mM, Na2HPO4 5,6

35 mM y NaCl 154 mM. Aunque los aniones fosfato y cloruro son nucleófilos mucho más débiles que el grupo SH, debido a que la concentración de NaCl es 1540 veces menor que la concentración de DTT (0,1 mM), estos resultados sugieren que MCE-1 reacciona con anión cloruro para dar un aducto de Michael.

Una vez que DTT (0,1 mM) se añade a la solución tampón de MCE-1, el aducto con cloruro desaparece (322 nm) y el aducto con DTT aparece (333 nm) (véase la FIG. 1A), proporcionando así la evidencia de que MCE-1 da aducción selectiva de Michael con nucleófilos de tiol. Los solicitantes aprecian que este resultado se obtiene a pesar de que la concentración de DTT es 1,540 veces inferior a la de NaCl.

El espectro UV de MCE-5 muestra una absorción débil a 275 nm tras la adición de DTT 1,0 mM, mientras que no

45 sucede ningún cambio aparente tras la adición de DTT 0,1 mM (FIG. 4). Los solicitantes aprecian que esta absorción es coherente con la absorción de dhMCE-5 a 265 nm que aumenta mediante la adición de NaOH (FIG. 5), sugiriendo que la débil absorción detectada para MCE-5 con DTT 1,0 nM se deriva del aducto de Michael de DTT con MCE-5.

MCE-2 y MCE-15 no dan la segunda absorción mediante la adición de DTT en las mismas condiciones que para MCE-1. Véanse FIG. 1B y 10, que proporcionan los resultados para MCE-2 y 15, MCE-3 (ciano enona enolizable acetilénica) no cambian cuando se añade 0,1 mM de DTT aunque muestra un pequeño desplazamiento rojo cuando se añade 1 mM de DTT (FIG. 1C).

MCE-7 y 13 como MCE-1 muestran segundas absorciones a aproximadamente 330 nm, que se derivan de aductos de

55 Michael con DTT. La absorbancia de MCE-7 (FIG. 11) es similarmente más intensa que la absorción correspondiente de MCE-1. La absorbancia de MCE-13 es un poco más débil que la absorción correspondiente de MCE-1 (FIG. 12)

Keap1 es un sensor electrófilo en la ruta de respuesta de fase II de los elementos de respuesta antioxidante celular de Keap1-Nrf2 (ARE) que regula la transcripción de genes para enzimas citoprotectoras, tales como HO-1 y NQO1, Keap1 es una proteína enriquecida en tiol que posee 25 residuos de cisteína, algunos de los mismo son altamente reactivos (Dinkova-Kostova et al., 2002). Los estudios UV en MCE con Keap 1 son coherentes con aquellos con DTT, mostrando NICE-1 la reactividad más alta del grupo. Es decir, MCE-1 mostró la reactividad más alta, tanto en una proteína enriquecida con tiol como también en nucleófilos de tiol pequeños, confirmando además la hipótesis de que MCE-1 reacciona selectivamente con nucleófilos de tiol.

C. Estudios de RMN 1H

También se describen en el presente documento resultados de RMN 1H que proporcionan evidencias adicionales de que MCE-1 da un aducto de Michael reversible con DTT. En el RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6 a 21 ºC) de MCE-1, los protones olefínicos HA, HB y HC se observan en 5 8,17 ppm (d, J = 3 Hz), 7,21 ppm (dd, J = 3 y10 Hz), y6,35 ppm (d,

5 J = 10 Hz), respectivamente, mientras que los protones olefínicos HA, HB y HC de MCE-1 disminuyen, u protón enol [a 5 11,12 ppm (s a)] y nuevos protones olefínicos HQ y HE aparecen y aumentan de acuerdo con cantidades crecientes de DTT. Véase la FIG. 13. Estos nuevos protones son coherentes con formación de aducto mediante adición de Michael de DTT a MCE-1. El desarrollo de pequeñas señales adicionales sugiere que se también forma un segundo aducto estereoisoméricos.

10 En experimentos adicionales, a temperatura elevadas, aunque el protón enol y los protones olefínicos HD y HE de aducto de Michael disminuyen, los protones olefínicos HA, HB y HC de MCE-1 aumentan. Véase la FIG. 14. Estas observaciones con coherentes con adición de Michael reversible. Aunque se observan aductos de Michael de CDDO y MCE-1 con DTT por RMN y UV, no ha sido posible el aislamiento y puede que no sea posible. Estos resultados

15 sugieren que la conversión de los aductos de Michael en CDDO y MCE-1 es rápida (Couch et al., 2005).

D. Actividad biológica

Los compuestos de la presente descripción se han sometido a ensayo para determinar la inhibición de la producción

20 de óxido nítrico (NO) en células RAW estimuladas por interferón-γ (ensayo iNOS) y la inducción de NAD(P)H quinona óxidorreductasa en células Hepalclc7 (ensayo NQO1), ambos sistemas de ensayo se han empleado previamente. Al mismo tiempo, en los mismos ensayos se sometieron a ensayo el CDDO y TBE-31 como controles positivos. En la Tabla 1 se muestran los resultados del ensayo iNOS. En particular, la MCE-1 muestra la mayor fuerza entre las MCE en ambos ensayos. La fuerza del ensayo iNOS es mayor que el CDDO (pentaciclo), cuyo éster metílico está

25 actualmente evaluándose en ensayos clínicos en Fase II como un fármaco antiinflamatorio. Además la fuerza se correlaciona con su reactividad como aceptores de Michael basándose en los estudios UV anteriormente resumidos. Sin embargo, aunque la reactividad de la MCE-7 es similar a la de la MCE-1 (compárese la FIG. 1A con la FIG. 11), esta es inactiva a una concentración de 300 nM en el ensayo iNOS y menos fuerte que la MCE-1 en el ensayo NQO1.

30 Tabla 1. Supresión de la producción de NO inducida por IFN .

Compuesto

Estructura CI50 de RAW (IFN 10 ng/ml)

MCE-1

8 nM

Compuesto de referencia MCE-2

380 nM

Compuesto de referencia MCE-7

> 300 nM

Compuesto de referencia MCE-15

300 nM

Compuesto de referencia CDDO

20 nM

Compuesto de referencia TBE-31

1 nM

III. Modelo de homología de IKK e identificación de candidatos MCE adicionales

Se generó un modelo de homología de IKKβ basado en la estructura de rayos X de la quinasa de punto de control 2

5 (2CN5.ent) y los dos bolsillos, uno hidrófobo y uno hidrófilo, alrededor de Cys179 se dirigieron para identificar compuestos principales adicionales. La síntesis propuesta de estos compuestos (así como la de otros) se proporciona más adelante en la sección de ejemplos.

El modelo de homología de IKKβ se construyó usando SWISSMODEL y las estructuras de rayos X de otras quinasas

10 relacionadas (quinasa de punto de control 2, 2cn5.pdb) dentro del Banco de Datos de Proteínas. La comparación de secuencias de las dos proteínas tiene una similitud de secuencia suficiente (identidad de secuencia del 36 %) para proporcionar un buen modelo de trabajo. El dímero IKKβ basado en homología se sometió a varios ciclos de minimización de energía para eliminar la tensión inicial, usando el campo de fuerza AMBER dentro del programa InsightII (Molecular Simulations, Inc.). Después, el complejo se colocó en el centro en un cubo de 12 nm y se empapó

15 con agua (37.700 moléculas de agua) y después se minimizó la energía usando un algoritmo descendiente pronunciado. Se realizaron simulaciones dinámicas moleculares (DM) extensivas (a 300 K, con una etapa de tiempo de integración de 2 fs y una presión constante de 0,10 MPa (1 bar)) con el complejo usando el programa GROMACS (Berendsen et al., 1995) procesadores Pentium III que corren en Linux. Comenzando con este modelo de homología inicial, se examinó un grupo inicial de ligandos para la actividad biológica (MCE-1, CDDO, TBE-31) (véase la Tabla 1).

20 Por ejemplo, la unión de MCE-1 a Cys179 basada en simulaciones dinámicas moleculares y la minimización de energía sugiere que las dos Gln (Q176/ Q197) constituyen el bolsillo de unión para la función ciano/hidroxilo, mientras que L178, F182 y L194 constituyen el bolsillo hidrófobo.

25 Basándose en esta estrategia, pueden diseñarse ligandos adicionales racionalmente para potenciar adicionalmente la unión, conduciendo los dos bolsillos proximales a la Cys179. En la sección de Ejemplos más adelante se proporcionan ejemplos de dichos ligandos y su síntesis y/o síntesis propuesta. Adicionalmente, pueden utilizarse dos estrategias “no racionales” para ampliar adicionalmente el conjunto de posibles ligandos (autoacoplamiento, ligamiento de fragmentos). Todos estos métodos pueden usarse en un procedimiento iterativo, junto con los resultados de los

30 ensayos biológicos, para optimizar la afinidad de unión.

Exploración basada en estructura racional – Los diseños y/o modificaciones de ligandos pueden examinarse por modelado molecular y simulaciones por ordenador, que permiten el refinamiento y la optimización de las propiedades físico-químicas antes de realizar la síntesis. Se utilizan INSIGHT II y Chimera (UCSF) para la visualización y

35 manipulación interactiva y construcción de las estructuras proteicas. Para un modulado de homología extensivo puede utilizarse WHATIF (Vriend, 1990) o Modeler. Procheck (Laskowski et al., 1996) se usará para examinar la “salud” de todas las estructuras proteicas. Las estructuras proteicas se refinan después usando simulaciones de dinámica molecular extensiva usando los programas de simulación GROMACS o NAMD, dentro de una célula de simulación completamente solvatada.

40 Exploración virtual a través de una estrategia de ligamiento de fragmentos – Complementaria a la estrategia de exploración de diseño racional “educada”, también puede realizarse un diseño de novo de análogos mediante una estrategia de ligamiento de fragmentos. Este método implica hacer crecer sustituyentes sobre un núcleo farmacóforo del compuesto principal para generar una biblioteca de compuestos para exploración virtual, analizando el bolsillo de

45 unión y determinando donde podría unirse un grupo funcional específico fuertemente a los sitios útiles en el bolsillo.

Posteriormente, estos grupos químicos se ligaron virtualmente para producir un esqueleto molecular que se convierte en una molécula bio-orgánica plausible a sintetizar. El programa informático, Discovery Studio, permite que dicha estrategia de “ligamiento de fragmentos” haga crecer sustituyentes sobre un núcleo farmacóforo del compuesto principal para generar una biblioteca de compuestos para exploración virtual. Ofrece la posibilidad de descubrir las moléculas inhibidoras sin un esfuerzo posiblemente sesgado hacia una clase específica de compuestos en las bibliotecas/bases de datos existentes.

5 Por ejemplo, usando la estructura de MCE-1 acoplada a IKKβ como estructura núcleo, pueden examinarse dos núcleos de sustitución con fragmentos de diferentes propiedades de voluminosidad y estéreo electrónica a partir de una “biblioteca de fragmentos” interna seleccionada para propiedades disponibles y farmacológicas sintéticas. Los compuestos “virtuales” resultantes pueden después acoplarse en los bolsillos de IKKβ para priorizar la afinidad de

10 unión.

Autoacoplamiento – También pueden identificarse diferentes dianas ligando utilizando acoplamiento para obtener estructuras de partida/orientaciones topológicas que después pueden refinarse adicionalmente con simulaciones MD. El acoplamiento puede realizarse con autoacoplamiento 4.0 (Scripps) usando el modelo de homología del IKKβ 15 generado como se ha descrito anteriormente. Este procedimiento de acoplamiento rígido proporcionará estructuras de partida múltiples para refinamiento posterior mediante simulaciones MD, que es importante tener en cuenta para cambios conformacionales que puedan tener lugar durante la unión, un aspecto que está apreciándose cada vez más en diseño farmacológico por ordenador. Además del autoacoplamiento, recientemente se ha comenzado a usar GOLD (versión 2.0) y las bibliotecas de moléculas pequeñas asociadas. Los inventores realizarán acoplamiento GOLD para 20 generar nuevos fragmentos moleculares que se ajusten bien en los bolsillos de unión que rodean a Cys179, que después pueden incorporarse en los esfuerzos de síntesis detallados en el OBJETIVO Nº 2. Los complejos obtenidos a partir de los dos procedimientos de acoplamiento se empaparán con moléculas de agua TIP4 y después se someterán a simulaciones MD extensivas usando el programa GROMACS. Durante las simulaciones MD tanto a la proteína como al ligando se les permitirá sufrir cambios conformacionales, permitiendo la generación de ajuste óptimo.

25 Se han desarrollado ficheros de comandos para conversión automática de los archivos de resultados de los procedimientos de acoplamiento de estas simulaciones MD.

Se generó un modelo de homología de IKKβ basado en estructura de rayos X de la quinasa de punto de control 2 (2CN5.ent) y los dos bolsillos, uno hidrófobo y uno hidrófilo, que rodean a Cys179 se dirigieron para identificar

30 compuestos principales adicionales. Basándose en los bolsillos hidrófobo e hidrófilo identificados que rodean a Cys179 de IKKβ y que la distancia entre Cys179 y cualquiera de los dos bolsillos hidrófobo o hidrófilo es de 7-8 Å, se ha diseñado un conjunto preliminar de compuestos. La síntesis propuesta de algunos de los compuestos se proporciona en la sección de Ejemplos más adelante.

35 En determinadas realizaciones, se proporciona una serie hidrófoba, por ejemplo, con estructuras como definen las fórmulas I y II, con los compuestos 38 y 39 como ejemplos respectivos de cada una.

Sin estar ligado por teoría o mecanismo, basándose en la información desgranada del modelo de homología de IKK�, n = 1-3 y m = 1-2 daría una longitud razonable en algunas realizaciones debido a la distancia entre los sitios reactivos del aceptor de Michael y el grupo fenilo de estas moléculas es similar a la distancia entre Cys179 y el bolsillo hidrófobo (aproximadamente 7-8 Or).

Sin estar ligado por teoría o mecanismo, basándose en la información desgranada del modelo de homología de IKK�, n = 1-3 proporcionaría una longitud razonable en algunas realizaciones. Una síntesis propuesta para 48 y otros compuestos de las series hidófilas se proporciona en la sección de Ejemplos más adelante. Otros ejemplos de grupos

15 hidrófilos incluyen compuestos que tienen grupos hidroxilo o carboxilo. Véase, por ejemplo, el Ejemplo 13.

Pueden sintetizarse diversos compuestos adecuadamente escalados para bolsillos hidrófilos o hidrófobos usando acoplamiento de Sonogashira (Sonogashira et al., 1975), por ejemplo, el compuesto conocido 65 (Phansavath et al.,

1998) y un haluro aromático.

Si uno inserta, por ejemplo, un fenilo, un tiofenilo o un grupo furilo, el compuesto resultante de la fórmula generalizada IV tendría un resto hidrófobo unido. Si en lugar de uno se insertaran grupos piridinilo e imidazolilo, el compuestos resultante de la fórmula IV tendría un resto hidrófilo unido. Puesto que los grupos tiazolilo y oxazolilo son neutros, son 25 hidrófobos. Sin embargo, las sales cuaternarias de ambos grupos son hidrófilas. Por lo tanto, los compuestos IV que

tiene un grupo tiazolilo u oxazolilo pueden mostrar tanto propiedades hidrófobas como hidrófilas y pueden variar dependiendo de las condiciones, por ejemplo, el entorno dentro de células vivas o proximidad a una célula viva. El Esquema A proporciona ejemplos de restos con estas diferentes propiedades.

Además de cianoenonas monocílicas, también se describen cianoenonas bicíclicas y tricíclicas. Por ejemplo:

También se describen en el presente documento compuestos que tienen tanto grupos hidrófilos como grupos 10 hidrófobos, por ejemplo, compuestos de acuerdo con la fórmula VII:

La síntesis de determinadas cianoenonas bicíclicas de fórmula VII se propone en el Ejemplo de Referencia 17 más adelante. Se proporcionan ejemplos de cianoenonas tricíclicas en los Ejemplos de Referencia 6-8, más adelante.

Una vez sintetizados estos compuestos su actividad biológica puede evaluarse adicionalmente, por ejemplo, a través de un ensayo IKKβ quinasa in vitro usando un Kit de Ensayo IKKβ Quinasa HTScan® disponible en el comercio. Un 5 protocolo adecuado para dicho ensayo se describe en el Ejemplo 1 más adelante.

IV. Enfermedades asociadas con inflamación y/o estrés oxidativo

La inflamación es un proceso biológico que proporciona resistencia contra organismos infecciosos o parasitarios y la 10 reparación de tejido dañado. La inflamación se caracteriza normalmente por vasodilatación localizada, enrojecimiento, hinchazón y dolor, el reclutamiento de leucocitos en el sitio de infección o lesión, producción de citocinas inflamatorias tales como TNF-α e IL-1 y producción de especies reactivas de oxígeno o de nitrógeno tales como peróxido de hidrógeno, superóxido y peroxinitrito. En fases tardías de inflamación, como parte del proceso de curación de heridas, puede producirse remodelación tisular, angiogénesis, formación de cicatrices (fibrosis). En circunstancias normales, la

5 respuesta inflamatoria es regulada y temporal y se resuelve en una forma orquestada una vez que la infección o lesión se ha tratado adecuadamente. Sin embargo, la inflamación aguda puede volverse excesiva y letal si falla el mecanismo regulador. Como alternativa, la inflamación puede volverse crónica y ocasionar lesión tisular acumulativa o complicaciones sistémicas.

Muchas enfermedades humanas graves e intratables implican mala regulación de procesos inflamatorios, incluyendo enfermedades tales como cáncer, ateroesclerosis y diabetes, que tradicionalmente no se consideraban como afecciones inflamatorias. En el caso del cáncer, los procesos inflamatorios están asociados con formación tumoral, progresión, metástasis y resistencia a terapia. La ateroesclerosis, considerada desde hace mucho tiempo como un trastorno del metabolismo de lípidos, ahora se entiende que es principalmente una afección inflamatoria,

15 desempañando los macrófagos activados una importante función en la formación y eventual rotura de placas ateroescleróticas. También se ha observado que la activación de rutas de señalización inflamatorias desempeña una función en el desarrollo de la insulinorresistencia, así como en el daño a tejidos periféricos asociado con hiperglucemia diabética. La producción excesiva de especies reactivas de oxígeno y especies reactivas de nitrógeno tales como superóxido, peróxido de hidrógeno, óxido nítrico y peroxinitrito es una característica de afecciones inflamatorias. Se han comunicado evidencias de la producción de peroxinitrito mal regulada en una amplia diversidad de enfermedades (Szabo et al., 2007; Schulz et al., 2008; Forstermann, 2006; Pall, 2007).

Enfermedades autoinmunitarias, tales como artritis reumatoide, lupus, psoriasis y esclerosis múltiple, implican activación inapropiada y crónica de procesos inflamatorios en tejidos afectados, producidos por disfunción de

25 mecanismos de respuesta y de auto-reconocimiento frente a no auto-reconocimiento en el sistema inmunitario. En enfermedades neurodegenerativas, tales como enfermedad de Alzheimer y enfermedad de Parkinson, el daño neuronal se correlaciona con activación de microglia y niveles elevados de proteínas pro-inflamatorias tales como óxido nítrico sintasa inducible (iNOS). La insuficiencia orgánica crónica, tal como insuficiencia renal, insuficiencia cardiaca y enfermedad pulmonar obstructiva crónica, están muy asociadas con la presencia de estrés oxidativo crónico e inflamación, conduciendo al desarrollo de fibrosis y eventual pérdida de función orgánica.

Muchos otros trastornos implican estrés oxidativo e inflamación en tejidos afectados, incluyendo enfermedad intestinal inflamatoria; enfermedades cutáneas inflamatorias; mucositis relacionadas con radioterapia y quimioterapia; enfermedades oculares tales como uveítis, glaucoma, degeneración macular y diversas formas de retinopatía; fracaso

35 y rechazo de trasplante; lesión por isquemia-reperfusión; dolor crónico; afecciones degenerativas de huesos y articulaciones incluyendo osteoartritis y osteoporosis; asma y fibrosis quística; trastornos de ataques; y afecciones neurosiquiátricas incluyendo esquizofrenia, depresión, trastorno bipolar, enfermedad de estrés postraumático, trastornos de déficit de atención, trastornos del espectro autista y trastornos alimenticios, tales como anorexia nerviosa. Se piensa que la mala regulación de rutas de señalización inflamatorias es un factor principal en la patología de enfermedades de atrofia muscular incluyendo distrofia muscular y diversas formas de caquexia.

Varias enfermedades letales agudas para la salud también implican señalización inflamatoria mal regulada, incluyendo insuficiencia orgánica aguda que implica el páncreas, riñón, hígado o pulmones, infarto de miocardio o síndrome coronario agudo, ictus, choque séptico, traumatismo, quemaduras graves y anafilaxis.

45 Muchas complicaciones de enfermedades infecciosas también implican mala regulación de respuestas inflamatorias. Aunque una respuesta inflamatoria puede destruir patógenos invasores, una respuesta inflamatoria excesiva también puede ser muy destructiva y, en algunos casos, puede ser una fuente principal de daño en tejidos infectados. Además, una respuesta inflamatoria excesiva también puede conducir a complicaciones sistémicas debido a la sobreproducción de citocinas inflamatorias, tales como TNF-α e IL-1. Se piensa que este es un factor en la mortalidad que se origina de gripe grave, síndrome respiratorio agudo grave y septicemia.

La expresión aberrante o excesiva de iNOS o ciclooxigenasa-2 (COX-2) se ha implicado en la patogénesis de muchos procesos de enfermedad. Por ejemplo, está claro que el ON es un fuerte mutágeno (Tamir y Tannebaum, 1996) y que

55 el óxido nítrico también puede activar COX-2 (Salvemini et al., 1994). Además, existe un notable aumento en iNOS en tumores de colon de rata inducido por el carcinógeno, azoximetano (Takahashi et al., 1997). Se ha observado que una serie de análogos triterpenoides sintéticos del ácido oleanólico son poderosos inhibidores de procesos inflamatorios celulares, tales como la inducción de óxido nítrico sintasa inducible (iNOS) y de COX-2 por IFN-γ en macrófagos de ratón. Véase Honda et al. (2000a); Honda et al. (2000b) y Honda et al. (2002).

Los compuestos descritos en el presente documento se caracterizan por su capacidad para inhibir la producción de óxido nítrico en células 264.7 RAW derivadas de macrófagos inducido por exposición a γ interferón. Adicionalmente se caracterizan por su capacidad para inducir la expresión de proteínas antioxidantes, tales como NQO1 y reducir la expresión de proteínas proinflamatorias, tales como COX-2 y óxido nítrico sintasa inducible (iNOS). Estas propiedades 65 son relevantes para el tratamiento de una amplia serie de enfermedades que implican estrés oxidativo y mala regulación de procesos inflamatorios que incluyen cáncer, mucositis resultante de radioterapia o quimioterapia,

enfermedades autoinmunitarias, enfermedades cardiovasculares incluyendo ateroesclerosis, lesión por isquemia-reperfusión, insuficiencia orgánica aguda y crónica incluyendo insuficiencia renal e insuficiencia cardiaca, enfermedades respiratorias, diabetes y complicaciones de la diabetes, alergias graves, rechazo de trasplante, enfermedad de injerto contra huésped, enfermedades neurodegenerativas, enfermedades del ojo y retina, dolor

5 crónico y agudo, enfermedades óseas degenerativas incluyendo osteoartritis y osteoporosis, enfermedades intestinales inflamatorias, dermatitis y otras enfermedades cutáneas, septicemia, quemaduras, trastornos de ataques y trastornos neurosiquiátricos.

Sin quedar ligado a la teoría, se piensa que la activación de la ruta antioxidante/antiinflamatoria Keapl/Nrf2/ARE está implicada en las propiedades tanto antiinflamatorias como anticarcinogénicas de los compuestos descritos en el presente documento.

Los compuestos descritos en el presente documento pueden usarse para el tratamiento de un sujeto que tiene una afección ocasionada por niveles elevados de estrés oxidativo en uno o más tejidos. El estrés oxidativo se produce por

15 niveles anómalamente altos o prolongados de especies reactivas de oxígeno tales como superóxido, peróxido de hidrógeno, óxido nítrico y peroxinitrito (formado por la reacción de óxido nítrico y superóxido). El estrés oxidativo puede venir acompañado por inflamación aguda o crónica. El estrés oxidativo puede estar producido por disfunción mitocondrial, por activación de células inmunitarias tales como macrófagos y neutrófilos, por exposición aguda a un agente externo tal como radiación ionizante o un agente quimioterapéutico citotóxico (por ejemplo, doxorrubicina), por traumatismo u otra lesión tisular aguda, por isquemia/reperfusión, por una mala circulación o anemia, por hipoxia o hiperoxia localizada o sistémica, por niveles elevados de citocinas inflamatorias y otras proteínas relacionadas con inflamación y/o por otros estados fisiológicos anómalos tales como hiperglucemia e hipoglucemia

En modelos animales de muchas de dichas afecciones, se ha demostrado que la estimulación de la expresión de la

25 hemoxigenasa inducible (HO-1), un gen diana de la ruta Nrf2, tiene un efecto terapéutico significativo, incluyendo modelos de infarto de miocardio, insuficiencia renal, fallo y rechazo de trasplante, ictus, enfermedad cardiovascular y enfermedad autoinmunitaria (por ejemplo, Sacerdoti et al., 2005; Abraham & Kappas, 2005; Bach, 2006; Araujo et al., 2003; Liu et al., 2006; Ishikawa et al., 2001; Kruger et al., 2006; Satoh et al., 2006; Zhou et al., 2005; Morse y Choi, 2005; Morse y Choi, 2002). Esta enzima descompone el hemo libre en hierro, monóxido de carbono (CO) y biliverdina (que posteriormente se convierte en una fuerte molécula antioxidante, la bilirrubina).

Los compuestos descritos en el presente documento pueden usarse en la prevención o tratamiento de daño tisular o insuficiencia orgánica, aguda y crónica, resultante de estrés oxidativo agravado por inflamación. Son ejemplos de enfermedades que se encuentran dentro de esta categoría: insuficiencia cardiaca, insuficiencia hepática, insuficiencia

35 por trasplante y rechazo, insuficiencia renal, pancreatitis, enfermedades pulmonares fibróticas (fibrosis quística y EPOC, entre otras), diabetes (incluyendo complicaciones), ateroesclerosis, lesión por isquemia-reperfusión, glaucoma, ictus, enfermedades autoinmunitarias, autismo, degeneración macular, y distrofia muscular. Por ejemplo, en el caso de autismo, estudios realizados sugieren que el aumento de estrés oxidativo en el sistema nervioso central puede contribuir al desarrollo de la enfermedad (Chauhan y Chauhan, 2006).

Evidencias también relacionan el estrés oxidativo y la inflamación con el desarrollo y patología de muchos otros trastornos del sistema nervioso central, incluyendo trastornos psiquiátricos, tales como psicosis, depresión mayor y trastorno bipolar; trastornos de ataques, tal como epilepsia; dolor y síndromes sensoriales tales como migraña, dolor neuropático o acúfenos; y síndromes conductual tal como trastornos de déficit de atención. Véase, por ejemplo,

45 Dickerson et al., 2007; Hanson et al., 2005; Kendall-Tackett, 2007; Lencz et al., 2007; Dudhgaonkar et al., 2006; Lee et al., 2007; Morris et al., 2002; Ruster et al., 2005; McIver.et al., 2005; Sarchielli et al., 2006; Kawakami et al., 2006; Ross et al., 2003. Por ejemplo, niveles elevados de citocinas inflamatorias, incluyendo TNF, interferón-γ e IL-6, están asociados con enfermedad mental principal (Dickerson et al., 2007). La activación microglial también se ha relacionado con enfermedad mental principal. Por lo tanto, la regulación negativa de citocinas inflamatorias y la inhibición excesiva de la activación de microglia pueden ser beneficiosas en pacientes con esquizofrenia, depresión principal, trastorno bipolar, trastornos del espectro autista y otros trastornos neurosiquiátricos.

Por consiguiente, en patologías que implican solo estrés oxidativo o estrés oxidativo agravado por inflamación, el tratamiento puede comprender administrar a un sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la

55 presente invención, tal como los descritos anteriormente o a lo largo de esta memoria descriptiva. Los compuestos para su uso en dichos tratamientos pueden administrarse de manera preventiva, antes de un estado previsible de estrés oxidativo (por ejemplo, trasplante de órgano o la administración de radioterapia a un paciente con cáncer), o pueden administrarse terapéuticamente en entornos que implican estrés oxidativo establecido e inflamación.

Los compuestos descritos en el presente documento pueden aplicarse generalmente al tratamiento de afecciones inflamatorias, tales como septicemia, dermatitis, enfermedad autoinmunitaria y osteoartritis. En un aspecto, los compuestos de la presente invención pueden usarse para tratar dolor inflamatorio y/o dolor neuropático, por ejemplo induciendo Nrf2 y/o inhibiendo NF-κB.

65 En un aspecto, los compuestos de la invención pueden usarse para actuar como moduladores de inflamación antioxidantes (MIA) que tienen fuertes propiedades antiinflamatorias que imitan la actividad biológica de prostaglandinas ciclopentenona (cyPG). En una realización, los compuestos de la invención pueden usarse para controlar la producción de citocinas proinflamatorias dirigiendo selectivamente restos de cisteína reguladores (RCR) sobre proteínas que regulan la actividad transcripcional de factores de transcripción sensibles a redox. Se ha demostrado que la activación de RCR mediante cyPG o MIA inicia un programa de pro-resolución en el que la actividad

5 del antioxidante y del factor de transcripción citoprotector Nrf2 está fuertemente inducida, y las actividades de los factores de transcripción pro-oxidativos y pro-inflamatorios NF-κB y STAT se suprimen. Esto aumenta la producción de moléculas antioxidantes y reductoras (por ejemplo, NQO1, HO-1, SOD1 y/o γ-GCS) y/o disminuye el estrés oxidativo y la producción de moléculas pro-oxidativas y pro-inflamatorias (por ejemplo, iNOS, COX-2, y/o TNF-α).

10 En algunas realizaciones, los compuestos descritos en el presente documento pueden usarse en el tratamiento y prevención de enfermedades tales como cáncer, inflamación, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, esclerosis múltiple, autismo, esclerosis lateral amiotrófica, enfermedades autoinmunitarias tal como artritis reumatoide, lupus y EM, enfermedad intestinal inflamatoria, enfermedades restantes cuya patogénesis se piensa que está implicada en la producción excesiva de óxido nítrico o prostaglandinas y patologías que implican solo estrés oxidativo

15 o estrés oxidativo agravado por inflamación.

Otro aspecto de inflamación es la producción de prostaglandinas inflamatorias, tal como prostaglandina E. Estas moléculas promueven vasodilatación, extravase plasmático, dolor localizado, temperatura elevada y otros síntomas de inflamación. La forma inducible de la enzima COX-2 está asociada con su producción y en tejidos inflamados se 20 encuentran altos niveles de COX-2. Consecuentemente, la inhibición de COX-2 puede aliviar muchos síntomas de inflamación y una serie de fármacos antiinflamatorios importantes (por ejemplo, ibuprofeno y celecoxib) actúa inhibiendo la actividad de COX-2. Sin embargo, recientes investigaciones han demostrado que una clase de prostaglandinas ciclopentenona (cyPG) (por ejemplo 15-desoxi prostaglandina J2, a.k.a. PGJ2) desempeña una función estimulando la resolución orquestada de inflamación (por ejemplo, Rajakariar et al., 2007). COX-2 también

25 está asociada con la producción de prostaglandinas ciclopentenona. Por consiguiente, la inhibición de COX-2 puede interferir con la resolución completa de inflamación, posiblemente promoviendo la persistencia de células inmunitarias activadas en tejidos y conduciendo a inflamación “latente” crónica. Este efecto puede ser responsable de la frecuencia aumentada de enfermedad cardiovascular en pacientes que utilizan inhibidores COX-2 selectivos durante largos periodos de tiempo.

30 En un aspecto, los compuestos de la invención pueden usarse para controlar la producción de citocinas proinflamatorias dentro de la célula activando selectivamente restos de cisteína reguladores (RCR) en proteínas que regulan la actividad de factores de transcripción sensibles a redox. Se ha demostrado que la activación de RCR mediante cyPG inicia un programa de pro-resolución en el que la actividad del antioxidante y del factor de transcripción

35 citoprotector Nrf2 está fuertemente inducida y las actividades de los factores de transcripción pro-oxidativos y pro-inflamatorios NF-κB y STAT se suprimen. En algunas realizaciones, esto aumenta la producción de moléculas antioxidantes y reductoras (por ejemplo, NQO1, HO-1, SOD1, γ-GCS) y disminuye el estrés oxidativo y la producción de moléculas pro-oxidativas y pro-inflamatorias (iNOS, COX-2, y/o TNF-α). En algunas realizaciones, los compuestos de la presente invención pueden hacer que las células que alojan el acontecimiento inflamatorio vuelvan a un estado

40 no inflamatorio promoviendo la resolución de inflamación y daño tisular excesivo limitante al hospedador.

E. Cáncer

Adicionalmente, los compuestos de la presente invención pueden usarse para inducir apoptosis en células tumorales,

45 para inducir diferenciación celular, para inhibir proliferación de células cancerosas, para inhibir una respuesta antiinflamatoria y/o para funcionar en una capacidad quimiopreventiva. Por ejemplo, la invención proporciona nuevos compuestos que tienen una o más de las siguientes propiedades: (1) una capacidad para inducir apoptosis y diferenciar células tanto malignas como no malignas, (2) una actividad a niveles submicromolares o nanomolares como un inhibidor de proliferación de muchas células malignas o premalignas, (3) una capacidad para suprimir la

50 síntesis de novo de la enzima inflamatoria óxido nítrico sintasa inducible (iNOS), (4) una capacidad para inhibir la activación de NF-κB y (5) una capacidad para inducir la expresión de la hemoxigenasa-1 (HO-1).

Los niveles de iNOS y COX-2 son elevados en determinados cánceres y se han implicado en carcinogénesis y se ha demostrado que inhibidores COX-2 reducen la frecuencia de adenomas de colon primarios en seres humanos 55 (Rostom et al., 2007; Brown y DuBois, 2005; Crowel et al., 2003). iNOS se expresa en células supresoras derivadas de la línea mieloide (MDSC) (Angulo et al., 2000) y se ha demostrado que la actividad de COX-2 en células cancerosas da como resultado la producción de prostaglandina E2 (PGE2), que se ha demostrado que induce la expresión de arginasa en MDSC (Sinha et al., 2007). La arginasa y la iNOS son enzimas que utilizan L-arginina como un sustrato y producen L-ornitina y urea, y L-citrulina y NO, respectivamente. Se ha observado que el empobrecimiento de arginina del

60 microentorno tumoral por las células supresoras derivadas de la línea mieloide (MDSC), combinado con la producción de NO y peroxinitrito, inhibe la proliferación e induce la apoptosis de linfocitos T (Bronte et al., 2003). Se ha demostrado que la inhibición de COX-2 e iNOS reduce la acumulación de las células supresoras derivadas de la línea mieloide (MDSC), restablece la actividad citotóxica de linfocitos T asociados a tumores y retrasa el crecimiento tumoral (Sinha et al., 2007; Mazzoni et al., 2002; Zhou et al., 2007).

65 La inhibición de las rutas de señalización NF-κB y JAK/STAT se ha implicado como una estrategia para inhibir la proliferación de células epiteliales cancerosas e inducir su apoptosis. Se ha demostrado que la activación de STAT3 y NF-κB da como resultado la supresión de la apoptosis en células cancerosas y la promoción de proliferación, invasión y metástasis. Se ha demostrado que muchos de los genes diana implicados en estos procesos se regulan

5 transcripcionalmente por NF-κB y STAT3 (Yu et al., 2007).

Además de sus funciones directas en células epiteliales cancerosas, NF-κB y STAT3 también tienen funciones importantes en otras células encontradas dentro del microentorno tumoral. Experimentos realizados en modelos animales han demostrado que NF-κB se requiere en células tanto cancerosas como hematopoyéticas para propagar 10 los efectos de inflamación sobre el inicio y la progresión del cáncer (Greten et al., 2004). La inhibición de NF-κB en células cancerosas y mieloides reduce el número y tamaño, respectivamente, de los tumores resultantes. La activación de STAT3 en células cancerosas da como resultado la producción de diversas citocinas (IL-6, IL-10) que suprimen la maduración de células dendríticas (CD) asociadas a tumor. Además, estas citocinas activan STAT3 en las propias células dendríticas. La inhibición de STAT3 en modelos de cáncer de ratón restablece la maduración de CD, promueve

15 la inmunidad antitumoral e inhibe el crecimiento tumoral (Kortylewski et al., 2005).

F. Tratamiento de esclerosis múltiple

Los compuestos de la presente invención pueden usarse para el tratamiento de pacientes con esclerosis múltiple

20 (EM). Se sabe que la EM es una afección inflamatoria del sistema nervioso central (Williams et al., 1994; Merrill y Benvenist, 1996; Genain y Nauser, 1997). Basándose en diversas investigaciones, existen evidencias que sugieren que los mecanismos inflamatorios, oxidativos y/o inmunitarios están implicados en la patogénesis de la enfermedad de Alzheimer (EA), enfermedad de Parkinson (EP), esclerosis lateral amiotrófica (ELA) y EM (Bagasra et al., 1995; McGeer y McGeer, 1995; Simonian y Coyle, 1996; Kaltschmidt et al., 1997). Tanto astrocitos reactivos como microglia

25 activada se han implicado en la causa de enfermedad neurodegenerativa (END) y enfermedad neuroinflamatoria (ENI); ha habido un énfasis particular sobre la microglia como células que sintetizan ON y prostaglandinas como productos de las enzimas respectivas, iNOS y COX-2. La formación de novo de estas enzimas puede dirigirse por citocinas inflamatorias tales como interferón-γ o interleucina-1. A su vez, la producción excesiva de NO puede conducir a cascadas inflamatorias y/o a daño oxidativo en células y tejidos de muchos órganos, incluyendo neuronas y

30 oligodendrocitos del sistema nervioso, con manifestaciones consecuentes en EA y EM, y posible EP y ELA (Coyle y Puttfarcken, 1993; Beal, 1996; Merrill y Benvenist, 1996; Simonian y Coyle, 1996; Vodovotz et al., 1996). Datos epidemiológicos indican que el uso crónico de fármacos antiinflamatorios no esteroideos (AINE) que bloquean la síntesis de prostaglandinas a partir de araquidonato, disminuye notablemente el riesgo de desarrollar EA (McGeer et al., 1996; Stewart et al., 1997). Por tanto, en estrategias para la prevención y el tratamiento de END pueden usarse

35 agentes que bloquean la formación de ON y prostaglandinas. Candidatos terapéuticos satisfactorios para el tratamiento de dicha enfermedad normalmente requieren una capacidad para penetrar en la barrera hematoencefálica. Véase, por ejemplo, la Publicación de Patente de Estados Unidos 2009/0060873.

G. Neuroinflamación

40 La neuroinflamación sintetiza la idea de que las respuestas microgliales y astrocíticas y las acciones en el sistema nervioso central tienen un carácter fundamentalmente similar al de la inflamación, y que estas respuestas son primordiales para la patogénesis y progresión de una amplia diversidad de trastornos neurológicos. Esta idea originada en el campo de la enfermedad de Alzheimer (Griffin et al., 1989; Rogers et al., 1988) revolucionó el entendimiento que

45 se tiene de esta enfermedad (Akiyama et al., 2000). Estas ideas se han extendido a otras enfermedades neurodegenerativas (Eikelenboom et al., 2002; Ishizawa y Dickson, 2001), a enfermedades isquémicas/tóxicas (Gehrmann et al., 1995; Touzani et al., 1999), a la biología tumoral (Graeber et al., 2002) e incluso al desarrollo normal del cerebro.

50 La neuroinflamación incorpora un amplio espectro de respuestas celulares complejas que incluyen la activación de la microglia y astrocitos e inducción de citocinas, quimiocinas, proteínas del complemento, proteínas de fase aguda, lesión oxidativa y procesos moleculares relacionados. Estos acontecimientos pueden tener efectos perjudiciales sobre la función neuronal, conduciendo a lesión neuronal, activación glial posterior y finalmente a la neurodegeneración.

55 Basándose en resultados experimentales obtenidos, incluyendo los presentados en esta solicitud, los compuestos de la presente invención pueden usarse para el tratamiento de pacientes con neuroinflamación.

H. Tratamiento de insuficiencia renal

60 Otro aspecto de la presente invención se refiere a nuevos compuestos para su uso en el tratamiento y prevención de enfermedad renal. Véase la Solicitud de Patente de Estados Unidos 12/352,473. La insuficiencia renal, producida por una eliminación inadecuada de los productos metabólicos de desecho de la sangre y por concentraciones anómalas de electrolitos en la sangre, es un problema médico significativo en todo el mundo, especialmente en países desarrollados. La diabetes y la hipertensión se encuentran entre las causas más importantes de insuficiencia renal

65 crónica (CKD, por sus siglas en inglés), pero también está asociada con otras afecciones tales como lupus. La insuficiencia renal aguda puede producirse por exposición a determinados fármacos (por ejemplo, paracetamol) o productos químicos tóxicos, o por lesión por isquemia-reperfusión asociada con choque o procedimientos quirúrgicos, tal como un trasplante, y puede dar como resultado insuficiencia renal crónica. En muchos pacientes, la insuficiencia renal avanza a una fase en la que el paciente requiere diálisis regular o trasplante de riñón para seguir viviendo. Estos

5 dos procedimientos son muy invasivos y están asociados con efectos secundarios significativos y con cuestiones de calidad de vida. Aunque hay tratamientos eficaces para algunas complicaciones de insuficiencia renal, tales como hiperparatiroidismo e hiperfosfatemia, ningún tratamiento disponible ha demostrado detener o invertir la progresión subyacente de la insuficiencia renal. Por tanto, en el tratamiento de la insuficiencia renal, agentes que puedan mejorar la función renal comprometida representarían un avance significativo.

10 La inflamación contribuye significativamente a la patología de CKD. También hay un fuerte vínculo mecanicista entre el estrés oxidativo y la disfunción renal. La ruta de señalización NF-κB desempeña una función importante en la progresión de CKD ya que NF-κB regula la transcripción de MCP-1, una quimiocina que es responsable del reclutamiento de monocitos/macrófagos dando como resultado una respuesta inflamatoria que finalmente daña el

15 riñón (Wardle, 2001). La ruta Keap1/Nrf2/ARE controla la transcripción de diversos genes que codifican enzimas antioxidantes, incluyendo la hemoxigenasa 1 (HO-1). La supresión del gen Nrf2 en ratones hembra da como resultado el desarrollo de nefritis glomerular lúpica (Yoh et al., 2001). Además, diversos estudios han demostrado que la expresión de la HO-1 está inducida en respuesta a lesión e inflamación renal y que esta enzima y sus productos bilirrubina y monóxido de carbono - desempeñan una función protectora en el riñón (Nath et al., 2006).

20 El glomérulo y la cápsula de Bowman circundante constituyen la unidad funcional básica del riñón. La tasa de filtración glomerular (TFG) es la medición convencional de la función renal. La eliminación de creatinina se usa normalmente para medir la TFG. Sin embargo, el nivel de creatinina en suero se usa normalmente como una medida sustituta de eliminación de creatinina. Por ejemplo, generalmente se acepta que niveles excesivos de creatinina en suero indican

25 función renal inadecuada y se acepta que reducciones de creatinina en suero con el paso del tiempo indican función renal mejorada. Los niveles normales de creatinina en la sangre son aproximadamente de 0,6 a 1,2 miligramos (mg) por decilitro (dl) en machos adultos y de 0,5 a 1,1 miligramos por decilitro en hembras adultas.

La lesión renal aguda (AKI, por sus siglas en inglés) puede producirse después de isquemia-reperfusión, de

30 tratamientos con determinados agentes farmacológicos, tales como cisplatino y rapamicina, e inyección intravenosa de medios de radiocontraste utilizados en imaginología médica. Como en la CKD, la inflamación y el estrés oxidativo contribuyen a la patología de AKI. Los mecanismos moleculares subyacentes de neuropatía inducida por radiocontraste (NRC) no se conocen bien; sin embargo, posiblemente se trate de que toda una combinación de acontecimientos que incluyen, vasoconstricción prolongada, autorregulación renal afectada y toxicidad directa de los

35 medios de contraste, contribuya a una insuficiencia renal (Tumlin et al., 2006). La vasoconstricción se produce por un flujo sanguíneo renal disminuido y ocasiona isquemia-reperfusión y la producción de especies reactivas de oxígeno. La HO-1 está fuertemente inducida en estas condiciones y se ha demostrado que previene la lesión por isquemia-reperfusión en diversos órganos diferentes, incluyendo el riñón (Nath et al., 2006). Específicamente, se ha demostrado que la inducción de la HO-1 es protectora en un modelo de NRC en rata (Goodman et al., 2007). La

40 reperfusión también induce una respuesta inflamatoria, en parte a través de la activación de la señalización de NF-κB (Nichols, 2004). El direccionamiento de NF-κB se ha propuesto como una estrategia terapéutica para prevenir el daño orgánico (Zingarelli et al., 2003).

Basándose en resultados experimentales obtenidos, incluyendo los presentados en esta solicitud, los compuestos de 45 la presente invención pueden usarse para el tratamiento de pacientes con insuficiencia renal.

I. Enfermedad cardiovascular

Los compuestos de la presente invención pueden usarse para el tratamiento de pacientes con enfermedad

50 cardiovascular. Véase la Solicitud de Patente de Estados Unidos l2/352,473. La enfermedad cardiovascular (EC) está entre las causas más importantes de mortalidad en todo el mundo y es la causa principal de muerte en muchos países desarrollados. La etiología de la EC es compleja, pero la mayoría de las causas están relacionadas con un suministro inadecuado o completamente interrumpido de sangre a un órgano o tejido crítico. Frecuentemente dicha afección se produce por la rotura de una o más placas ateroescleróticas, lo que conduce a la formación de un trombo que bloquea

55 el flujo sanguíneo en un vaso crítico. Dicha trombosis es la causa principal de ataques cardiacos, en los que una o más arterias coronarias se bloquean y el flujo sanguíneo del propio corazón se interrumpe. La isquemia resultante es muy perjudicial para el tejido cardiaco, tanto por la ausencia de oxígeno durante el acontecimiento isquémico como por una formación excesiva de radicales libres después del restablecimiento del flujo sanguíneo (un fenómeno conocido como lesión por isquemia-reperfusión). En el cerebro se producen daños similares durante un ictus trombótico, cuando una

60 arteria cerebral u otro vaso principal se bloquea por trombosis. En cambio, el ictus hemorrágico implica la rotura de un vaso sanguíneo y el sangrado en el tejido cerebral circundante. Esto crea estrés oxidativo en el área inmediata de la hemorragia, debido a la presencia de grandes cantidades de hemo libre y de otras especies reactivas e isquemia en otras partes del cerebro debido a un flujo sanguíneo comprometido. La hemorragia subaracnoidea, que viene frecuentemente acompañada por vasoespasmo cerebral, también produce lesión por isquemia/reperfusión en el

65 cerebro.

Como alternativa, la ateroesclerosis puede ser tan extensiva en vasos sanguíneos críticos como el desarrollo de la estenosis (estrechamente de las arterias) y el flujo sanguíneo en órganos críticos (incluyendo el corazón) es crónicamente insuficiente. Dicha isquemia crónica puede conducir a muchos tipos de daño orgánico terminal, incluyendo la hipertrofia cardiaca asociada con insuficiencia cardiaca congestiva.

5 La ateroesclerosis, el defecto subyacente que conduce a muchas formas de enfermedad cardiovascular, se produce cuando un defecto físico o una lesión en la pared (endotelio) de una arteria desencadena una respuesta inflamatoria que implica la proliferación de células de la musculatura lisa vascular y la infiltración de leucocitos en el área afectada. Finalmente, puede formarse una lesión complicada, conocida como placa ateroesclerótica, compuesta de las células anteriormente mencionadas, combinada con depósitos de lipoproteínas portadoras de colesterol y otros materiales (por ejemplo, Hansson et al., 2006).

Los tratamientos farmacéuticos para enfermedades cardiovasculares incluyen tratamientos preventivos, tales como el uso de fármacos destinado a disminuir la presión arterial o niveles circulantes de colesterol y lipoproteínas, así como

15 tratamientos diseñados para reducir las tendencias de plaquetas adherentes u otras células sanguíneas (reduciendo de este modo la tasa de progresión de placas y el riesgo de formación de trombos). Más recientemente, se han introducido fármacos, tales como estreptoquinasa y activador de plasminógeno tisular y se usan para disolver los trombos y restablecer el flujo sanguíneo. Los tratamientos quirúrgicos incluyen injerto de derivación aortocoronaria para crear un suministro de sangre alternativo, angioplastia con balón para comprimir el tejido de la placa y aumentar el diámetro del lumen arterial y endoarterectomía carotídea para eliminar el tejido de la placa en la arteria carótida. Dichos tratamientos, especialmente la angioplastia con balón, pueden venir acompañados por el uso de endoprótesis vascular, tubos de malla expandible diseñados para sujetar las paredes arteriales en el área afectada y mantener el vaso abierto. Recientemente, el uso de endoprótesis vasculares liberadoras de fármaco ha sido habitual para prevenir la restenosis posquirúrgica (reestrechamiento de la arteria) en el área afectada. Estos dispositivos son endoprótesis

25 vasculares de alambre revestidas de una matriz polimérica biocompatible que contiene un fármaco que inhibe la proliferación celular (por ejemplo, paclitaxel o rapamicina). El polímero permite una liberación lenta, localizada del fármaco en el área afectada con exposición mínima de tejidos no diana. A pesar de los beneficios significativos ofrecidos por dichos tratamientos, la mortalidad por enfermedad cardiovascular continúa siendo una necesidad alta y significativa no satisfecha para el tratamiento de enfermedad cardiovascular.

Como se ha indicado anteriormente, se ha demostrado que la inducción de HO-1 es beneficiosa en diversos modelos de enfermedad cardiovascular y bajos niveles de expresión de HO-1 se han correlacionado clínicamente con riesgo elevado de enfermedad CV. Por lo tanto, los compuestos descritos en el presente documento pueden usarse en el tratamiento o prevención de diversos trastornos cardiovasculares incluyendo, pero sin limitación, ateroesclerosis,

35 hipertensión, infarto de miocardio, insuficiencia cardiaca crónica, ictus, hemorragia subaracnoidea y restenosis.

J. Diabetes

La diabetes es una enfermedad compleja caracterizada por una insuficiencia del organismo para regular los niveles de glucosa en circulación. Véase la Solicitud de Patente de Estados Unidos 12/352.473. Esta insuficiencia puede producirse por una carencia de insulina, una hormona peptídica que regula la producción y la absorción de glucosa en diversos tejidos. La deficiencia de insulina compromete la capacidad del músculo, tejido adiposo y otros tejidos para absorber la glucosa apropiadamente, conduciendo a hiperglucemia (niveles anormalmente elevados de glucosa en la sangre). Más comúnmente, dicha deficiencia de insulina es el resultado de una producción inadecuada en las células

45 de los islotes pancreáticos. En la mayoría de los casos se genera por una destrucción autoinmunitaria de estas células, una afección conocida como diabetes de aparición juvenil o de tipo 1, pero también puede deberse a traumatismo físico o a cualquier otra causa.

La diabetes también puede generarse cuando los miocitos y los adipocitos se vuelven menos sensibles a la insulina y no absorben correctamente glucosa, dando como resultado hiperglucemia. Este fenómeno se conoce como insulinorresistencia, y la afección resultante se conoce como diabetes de Tipo 2. La diabetes de Tipo 2, el tipo más común, está muy asociada con la obesidad y la hipertensión. La obesidad está asociada con un estado inflamatorio del tejido adiposo que se piensa que desempeña una función principal en el desarrollo de la insulinorresistencia (por ejemplo Hotamisligil, 2006; Guilherme et al., 2008).

55 La diabetes está asociada con lesión en muchos tejidos, principalmente debido a hiperglucemia (e hipoglucemia, que puede producirse por dosis de insulina excesivas o mal programadas). Es una fuente significativa de estrés oxidativo. La insuficiencia renal crónica, la retinopatía, la neuropatía periférica, la vasculitis periférica y el desarrollo de úlceras dérmicas que cicatrizan lentamente o no del todo, se encuentran entre las complicaciones más comunes de la diabetes. Por su capacidad protectora contra el estrés oxidativo, particularmente por la inducción de la expresión de HO-1, los compuestos descritos en el presente documento pueden usarse en tratamientos para muchas complicaciones de diabetes. Como se ha indicado anteriormente (Cai et al., 2005), se sospecha que la inflamación crónica y el estrés oxidativo en el hígado son factores principales que contribuyen al desarrollo de la diabetes de Tipo

2. Además, agonistas de PPARγ, tales como tiazolidinodionas, son capaces de reducir la insulinorresistencia y se sabe

65 que son tratamientos eficaces para la diabetes de Tipo 2. Basándose en resultados experimentales obtenidos, incluyendo los presentados en esta solicitud, los compuestos de la presente invención pueden usarse para el tratamiento de pacientes con neuroinflamación.

El efecto del tratamiento de la diabetes puede evaluarse de la siguiente manera. Si es posible, se evalúa tanto la eficacia biológica de la modalidad de tratamiento así como la eficacia clínica. Por ejemplo, la propia enfermedad se

5 manifiesta por un aumento de azúcar en sangre, por lo tanto la eficacia biológica del tratamiento puede evaluarse, por ejemplo, observando el retorno de la glucosa en sangre evaluada al nivel normal. La medición de un criterio de valoración clínico que puede dar a una indicación de regeneración de linfocitos b después de, por ejemplo, un periodo de tiempo de seis meses, puede dar una indicación de la eficacia clínica del régimen de tratamiento.

Basándose en resultados experimentales obtenidos, incluyendo los presentados en esta solicitud, los compuestos de la presente invención pueden usarse para el tratamiento de pacientes con diabetes.

K. Artritis reumatoide

15 Los compuestos de la presente invención pueden usarse para el tratamiento de pacientes con AR. Normalmente los primeros síntomas de la artritis reumatoide (AR) aparecen en la capa de recubrimiento sinovial, con proliferación de fibroblastos sinoviales y su adhesión a la superficie articular en el margen articular (Lipsky, 1998). Posteriormente, macrófagos, linfocitos T y otras células inflamatorias se acumulan en la articulación, donde producen diversos mediadores, incluyendo las citocinas, interleucina-1 (IL-1), que contribuye a las secuelas crónicas que conducen a destrucción de huesos y cartílagos, y el factor de necrosis tumoral (TNF-α), que desempeña una función en una inflamación (Dinarello, 1998; Arend y Dayer, 1995; van den Berg, 2001). La concentración de IL-1 en plasma es significativamente más alta en pacientes con AR que en individuos sanos y, particularmente, los niveles de IL-1 en plasma se correlacionan con actividad de enfermedad AR (Eastgate et al., 1988). Además, los niveles de IL-1 en líquido sinovial se correlacionan con diversas características radiográficas e histológicas de AR (Kahle et al., 1992;

25 Rooney et al., 1990).

En articulaciones normales, los efectos de estas y otras citocinas proinflamatorias están equilibrados por diversas citocinas inflamatorias y factores reguladores (Burger y Dayer, 1995). El significado de este equilibrio de citocinas se refleja en pacientes con AR juvenil, que, a lo largo del día, tienen aumentos clínicos febriles (Prieur et al., 1987). Después de cada pico de fiebre, un factor que bloquea los efectos de IL-1 se encuentra en suero y orina. Este factor se ha aislado, clonado y se ha identificado como un antagonista del receptor de IL-1 (IL-1ra), un miembro de la familia génica de IL-1 (Hannum et al., 1990). Como su nombre indica, IL-1ra, es un antagonista del receptor natural que compite con IL-1 por la unión con receptores de IL-1 de tipo I y, como resultado, bloquea los efectos de IL-1 (Arend et al., 1998). Para bloquear eficazmente la IL-1 puede necesitarse un exceso de 10 a 100 veces de IL-1a; sin embargo,

35 aislados de células sinoviales de pacientes con AR no parecen producir suficiente IL-1ra para contrarrestar los efectos de la IL-1 (Firestein et al., 1994; Fujikawa et al., 1995).

L. Artritis psoriásica

La ppsoriasis es un trastorno inflamatorio y proliferativo de la piel con una frecuencia del 1,5-3 %. Aproximadamente el 20 % de los pacientes con ppsoriasis desarrollan una forma característica de artritis que tiene diversos patrones (Gladman, 1992; Jones et al., 1994; Gladman et al., 1995). Algunos individuos presentan primero síntomas en articulaciones pero en la mayoría primero se presenta la ppsoriasis cutánea. Aproximadamente un tercio de los pacientes tienen empeoramiento simultáneo de su enfermedad cutánea y articular (Gladman et al., 1987) y hay una

45 relación topográfica entre la enfermedad articular interfalángica distal y en uñas (Jones et al., 1994; Wright, 1956). Aunque los procesos inflamatorios que vinculan la enfermedad en piel, uñas y articulaciones continúan sin esclarecerse, está implicada una patología inmunomediada.

La artritis psoriásica (APs) es una artropatía inflamatoria crónica caracterizada por la asociación de artritis y ppsoriasis y se reconoció como una entidad clínica distinta de la artritis reumatoide (AR) en 1964 (Blumberg et al., 1964). Estudios posteriores han revelado que la APs comparte diversas características genéticas, patogénicas y clínicas con otras espondiloartropatías (SpAs), un grupo de enfermedades que comprende espondilitis anquilosante, artritis reactiva y artritis enteropática (Wright, 1979). La idea de que la APs pertenece al grupo de ASp ha ganado recientemente apoyo adicional a partir de estudios de formación de imágenes que demuestran entesitis generalizada en la APs pero no en la

55 AR (McGonagle et al., 1999; McGonagle et al., 1998). Más específicamente, se ha postulado que la entesitis es uno de los acontecimientos más tempranos que se producen en las SpAs, lo que conduce a remodelamiento óseo y anquilosis en la médula espinal, así como a sinovitis articular cuando la entesis inflamada se encuentra cerca de las articulaciones periféricas. Sin embargo, la relación entre la entesitis y las manifestaciones clínicas en la APs continúan siendo muy inciertas, ya que la APs puede presentarse con patrones bastante heterogéneos de implicación articular con grados variables de gravedad (Marsal et al., 1999; Salvarani et al., 1998). Por tanto, aunque para tener en cuenta las características multiformes de la APs deben plantearse otros factores, solamente se han identificado algunos de ellos (tales como la expresión de la molécula HLA-B27, muy asociada con enfermedad axial). Como una consecuencia, continua siendo difícil trazar un mapa de las manifestaciones de la enfermedad con mecanismos patógenos específicos, lo que significa que el tratamiento de esta afección continua siendo muy empírico.

65 Estudios genealógicos han sugerido una contribución genética al desarrollo de la APs (Moll y Wright, 1973). Se piensa que otras formas inflamatorias crónicas de artritis, tales como espondilitis anquilosante y artritis reumatoide, tienen una base genética compleja. Sin embargo, el componente genético de la APs ha sido difícil de evaluar por diversas razones. Existe una fuerte evidencia de una predisposición genética solo a psoriasis que puede enmascarar los factores genéticos que son importantes para el desarrollo de la APs. Aunque la mayoría aceptaría la APs como una

5 entidad de enfermedad distinta, a veces hay un solapamiento fenotípico con artritis reumatoide y espondilitis anquilosante. Además, la propia APs no es una afección homogénea y se han propuesto varios subgrupos.

Se han descrito cantidades de TNF-α aumentadas tanto en piel psoriásica (Ettehadi et al., 1994) como en líquido sinovial (Partsch et al., 1997). Experimentos recientes han demostrado un beneficio positivo de tratamiento con

10 anti-TNF tanto en APs (Mease et al., 2000) como en espondilitis anquilosante (Brandt et al., 2000).

Basándose en resultados experimentales obtenidos, incluyendo los presentados en esta solicitud, los compuestos de la presente invención pueden usarse para el tratamiento de pacientes con artritis psoriásica.

15 M. Artritis reactiva

En la artritis reactiva (ARe) el mecanismo de lesión articular es incierto, pero probablemente se debe a que las citocinas desempeñan funciones críticas. Se ha descrito un perfil de Th1 más frecuente de altos niveles de interferón gamma (IFN-γ) y bajos niveles de interleucina 4 (IL-4) (Lahesmaa et al., 1992; Schlaak et al., 1992; Simon et al., 1993; 20 Schlaak et al., 1996; Kotake et al., 1999; Ribbens et al., 2000), pero diversos estudios han demostrado una predominancia relativa de IL-4 e IL-10 y una ausencia relativa de IFN-γ y factor alfa de necrosis tumoral (TNF-α) en la membrana (Simon et al., 1994; Yin et al., 1999) y fluido sinovial (FS) (Yin et al., 1999; Yin et al., 1997) de pacientes con artritis reactiva en comparación con pacientes con artritis reumatoide (AR). También se ha descrito un nivel más bajo de secreción de TNF-α en pacientes con artritis reactiva que en pacientes con AR después de estimulación ex vivo de

25 células mononucleares de sangre periférica (CMSP) (Braun et al., 1999).

Se ha argumentado que la eliminación de bacterias asociadas con la artritis reactiva requiere la producción de niveles apropiados de IFN-γ y TNF-α, mientras que la IL-10 actúa suprimiendo estas respuestas (Autenrieth et al., 1994; Sieper y Braun, 1995). La IL-10 es una citocina reguladora que inhibe la síntesis de IL-12 y TNF-γ por macrófagos

30 activados (de Waal et al., 1991; Hart et al., 1995; Chomarat et al., 1995) y de IFN-γ por linfocitos T (Macatonia et al., 1993).

Basándose en resultados experimentales obtenidos, incluyendo los presentados en esta solicitud, los compuestos de la presente invención pueden usarse para el tratamiento de pacientes con artritis reactiva.

N. Artritis enteropática

Normalmente la artritis enteropática (AE) se produce en combinación con enfermedades intestinales inflamatorias (EII), tales como enfermedad de Crohn o colitis ulcerosa. También puede afectar a articulaciones de la médula espinal

40 y sacroiliacas. La artritis enteropática implica las articulaciones periféricas, habitualmente las extremidades inferiores, tales como rodillas o tobillos. Normalmente solo implica un pequeño número o un número limitado de articulaciones y puede producirse poco después una afección intestinal. Esto ocurre aproximadamente en el 11 % de pacientes con colitis ulcerosa y en el 21 % de pacientes con enfermedad de Crohn. La sinovitis es generalmente auto-limitada y no deformante.

45 Las artropatías enteropáticas comprenden un grupo de afecciones reumatológicas que comparten una relación con patologías GI. Estas afecciones incluyen artritis reactiva (es decir relacionada con infección) debida a bacterias (por ejemplo, especies de Shigella, Salmonella, Campylobacter, Yersinia, Clostridium difficile), parásitos (por ejemplo, Strongyloides stercoralis, Taenia saginata, Giardia lamblia, Ascaris lumbricoides, y especies de Cryptosporidium) y

50 espondiloartropatías asociadas con enfermedad intestinal inflamatoria (EII). Otras afecciones y trastornos incluyen derivación intestinal (yeyunoileal), artritis, enfermedad celiaca, enfermedad de Whipple, y colitis colagenosa.

Basándose en resultados experimentales obtenidos, incluyendo los presentados en esta solicitud, los compuestos de la presente invención pueden usarse para el tratamiento de pacientes con artritis enteropática.

O. Artritis reumatoide juvenil

La artritis reumatoide juvenil (ARJ) un término para la forma más frecuente de artritis en niños, se aplica a una familia de dolencias caracterizada por inflamación crónica e hipertrofia de las membranas sinoviales. El término se solapa,

60 pero no es completamente sinónimo, con la familia de dolencias denominada artritis crónica juvenil y/o artritis idiopática juvenil en Europa.

Los sistemas inmunitarios tanto innato como adaptativo utilizan múltiples tipos de células, una inmensa variedad de proteínas de la superficie celular y segregadas, y redes de retroalimentación positiva y negativa interconectadas (Lo et 65 al., 1999). Además, aunque separable en pensamiento, las alas innatas y adaptativas del sistema inmunitario están

funcionalmente entrecruzadas (Fearon y Locksley, 1996), y los acontecimientos patológicos que se producen en estos puntos de intersección son probablemente muy relevantes para nuestro entendimiento sobre la patogénesis de las formas de artritis crónica en adultos y en niños (Warrington, et al., 2001).

5 La ARJ poliarticular es un subtipo clínico distinto caracterizado por inflamación y proliferación sinovial en articulaciones múltiples (cuatro o más), incluyendo las pequeñas articulaciones de las manos (Jarvis, 2002). Este subtipo de ARJ puede ser grave, debido tanto a su implicación articular múltiple como a su capacidad para progresar rápidamente a lo largo del tiempo. Aunque clínicamente distinta, la ARJ poliarticular no es homogénea y los pacientes varían en cuanto a las manifestaciones de enfermedad, la edad de aparición, pronóstico y respuesta terapéutica. Estas diferencias reflejan muy claramente un espectro de variación en la naturaleza del ataque inmunitario e inflamatorio que puede ocurrirse en esta enfermedad (Jarvis, 1998).

Basándose en resultados experimentales obtenidos, incluyendo los presentados en esta solicitud, los compuestos de la presente invención pueden usarse para el tratamiento de pacientes con ARJ.

P. Artritis inflamatoria precoz

Los compuestos de la presente invención pueden usarse para el tratamiento de pacientes con artritis inflamatoria precoz. La presentación clínica de las diferentes artropatías inflamatorias es similar al inicio del ciclo de la enfermedad. Como resultado, a menudo es difícil diferenciar pacientes que están en riesgo de desarrollar la sinovitis grave y persistente, que conduce a lesión articular erosiva, de aquellos cuya artritis es más auto-limitada. Dicha diferenciación es crítica para seleccionar la terapia apropiadamente, para tratar agresivamente a los pacientes con enfermedad erosiva e impedir toxicidad innecesaria en pacientes con enfermedad más auto-limitada. Los criterios clínicos actuales para diagnosticar artropatías erosivas, tales como artritis reumatoide (AR), son menos eficaces en enfermedades

25 precoces y los marcadores tradicionales de actividad de enfermedad, tales como recuentos en articulaciones y respuesta en fase aguda, no identifican adecuadamente a los pacientes que probablemente tienen malos desenlaces (Harrison et al., 1998). Los parámetros reflexivos de los acontecimientos patológicos que se producen en la membrana sinovial tienen más probabilidades de tener un valor de pronóstico significativo.

Recientes esfuerzos para identificar indicadores de mal desenlace en artritis inflamatoria precoz han identificado la presencia de autoanticuerpos específicos de AR, en particular anticuerpos contra péptidos citrulinados, asociados con enfermedad erosiva y persistente en cohortes de artritis inflamatoria precoz. Basándose en esto, se ha desarrollado un péptido cíclico citrulinado (PCC) para ayudar en la identificación de anticuerpos anti-PCC en sueros de pacientes. Usando esta estrategia, se ha demostrado que la presencia de anticuerpos anti-PCC es específica y susceptible para

35 AR, puede diferenciar la AR de otras artropatías y posiblemente puede predecir la sinovitis persistente erosiva antes de que estos desenlaces se manifiesten clínicamente. Hay que destacar que, los anticuerpos anti-PCC son frecuentemente detectables en los sueros muchos años antes que los síntomas clínicos lo que sugiere que pueden reflejar acontecimientos inmunitarios subclínicos (Nielen et al., 2004; Rantapaa-Dahlqvist et al., 2003).

Q. Espondilitis anquilosante

La EA es un subconjunto de enfermedades dentro de una clasificación más amplia de enfermedades de espondiloartropatías. Los pacientes afectados con los diversos subconjuntos de espondiloartropatías tienen etiologías de enfermedad que a menudo son muy diferentes, variando de infecciones bacterianas a hereditarias. Incluso, en

45 todos los subgrupos, el resultado final del proceso de la enfermedad es artritis axial. A pesar de las diferencias clínicamente iniciales observadas en las diversas poblaciones de pacientes, muchas de ellas acaban siendo casi idénticas después de un ciclo de enfermedad de diez a veinte años. Estudios recientes sugieren que el tiempo medio del diagnóstico clínico de la espondilitis anquilosante a partir de la aparición de la enfermedad es de 7,5 años (Khan, 1998). Estos mismos estudios sugieren que las espondiloartropatías pueden tener una frecuencia parecida a la de la artritis reumatoide (Feldtkeller et al., 2003; Doran et al., 2003).

La EA es un trastorno reumático inflamatorio sistémico crónico del esqueleto axial con o sin manifestaciones extra-esqueléticas. Las articulaciones sacroiliacas y la médula espinal están principalmente afectadas, si bien las articulaciones de cadera y hombro, y generalmente menos, las articulaciones periféricas o determinadas estructuras

55 extra-articulares, tales como el ojo, vasculatura, sistema nervioso y sistema gastrointestinal, también pueden estar implicadas. Su etiología aun no se entiende del todo (Wordsworth, 1995; Calin y Taurog, 1998). Está muy asociada con el alelo HLA-B27 del complejo de histocompatibilidad mayor de clase I (MHC I) (Calin y Taurog, 1998). La EA afecta a los individuos en la plenitud de su vida y es temida debido a su potencial para producir dolor crónico y daño irreversible de tendones, ligamentos, articulaciones y huesos (Brewerton et al., 1973a; Brewerton et al., 1973b; Schlosstein et al., 1973). La EA puede producirse sola o en asociación con otra forma de espondiloartropatía tal como artritis reactiva, psoriasis, artritis psoriásica, entesitis, colitis ulcerosa, enfermedad intestinal irritable o enfermedad de Crohn, en cuyo caso se clasifica como EA secundaria.

Normalmente, los sitios afectados incluyen las articulaciones discovertebrales, apofisarias, costovertebrales y

65 costotransversales de la médula espinal, y las estructuras ligamentosas paraverterbrales. La inflamación de las entesis, que son sitios de uniones músculo-tendinosas y ligamentosas a huesos, es también notable en esta enfermedad (Calin y Taurog, 1998). El sitio de entesitis se sabe que está infiltrado por células plasmáticas, linfocitos y células polimorfonucleares. El proceso inflamatorio produce frecuentemente anquilosis gradual fibrosa y ósea (Ball, 1971; Khan, 1990).

5 El diagnóstico retardado es habitual porque los síntomas se atribuyen frecuentemente a problemas de espalda más habituales. Una pérdida drástica de flexibilidad en la espina lumbar es un síntoma precoz de EA. Otros síntomas comunes incluyen dolor crónico y rigidez en la región lumbar de la espalda que normalmente comienza donde la médula espinal inferior se une a la pelvis, o cadera. Aunque la mayoría de los síntomas comienzan en las áreas lumbar y sacroiliaca, estas también pueden implicar el cuello y la región dorsal de la espalda. La artritis también puede producirse en hombro, cadera y pie. Algunos pacientes presentan inflamación ocular, y deben observarse los casos más graves con implicación de la válvula cardiaca.

La presentación más frecuente es la dorsalgia, aunque la enfermedad puede comenzar anormalmente en articulaciones periféricas, especialmente en niños y mujeres, y raramente con iritis aguda (uveítis anterior). Otros

15 síntomas y signos tempranos son expansión pectoral disminuida a partir de implicación costo vertebral difusa, fiebre de baja intensidad, fatiga, anorexia, pérdida de peso y anemia. La dorsalgia recurrente - frecuentemente nocturna y de intensidad variable - es una dolencia ocasional, así como la rigidez matutina normalmente aliviada por la actividad. Una postura flexionada o inclinada alivia la dorsalgia y el espasmo muscular paraespinal; por tanto, en pacientes no tratados es común cierto grado de cifosis.

En 1/3 de pacientes se producen manifestaciones sistémicas. La iritis aguda, recurrente, normalmente auto-limitada, (uveítis anterior) rara vez es lo suficientemente grave y prolongada como para afectar a la visión. Los signos neurológicos ocasionalmente pueden ser el resultado de una radiculopatía o ciática por compresión, fractura vertebral

o subluxación, y síndrome de cola de caballo (cauda equina) (que consiste en impotencia, incontinencia urinaria

25 nocturna, pérdida de sensibilidad en la vejiga urinaria y en el recto e incapacidad de arrastrar los pies). Las manifestaciones cardiovasculares pueden incluir insuficiencia aórtica, angina de pecho, pericarditis y anomalías de conducción del ECG. Un hallazgo pulmonar inusual es la fibrosis en el lóbulo superior, ocasionalmente con cavitación que puede confundirse con TB y que puede complicarse por infección con Aspergillus.

La EA se caracteriza por erupciones leves o moderadas de espondilitis activa alternando con periodos de inflamación casi o totalmente inactiva. El tratamiento correcto en la mayoría de los pacientes da como resultado una discapacidad mínima o ninguna y una vida completamente productiva a pesar de la rigidez lumbar. Ocasionalmente, el curso es grave y progresivo, produciendo deformidades incapacitantes pronunciadas. El pronóstico es poco prometedor para pacientes con iritis refractaria y para los escasos pacientes con amiloidosis secundaria.

35 Basándose en resultados experimentales obtenidos, incluyendo los presentados en esta solicitud, los compuestos de la presente invención pueden usarse para el tratamiento de pacientes con espondilitis anquilosante.

R. Colitis Ulcerosa

La colitis ulcerosa es una enfermedad que produce inflamación y llagas, denominadas úlceras, en la pared del intestino grueso. Normalmente la inflamación se produce en el recto y en la parte inferior del colon, pero puede afectar a todo el colon. La colitis ulcerosa raramente afecta al intestino delgado excepto en la sección terminal, denominada íleo. La colitis ulcerosa también puede denominarse colitis o proctitis. La inflamación hace que el colon se vacíe con

45 frecuencia, ocasionando diarrea. Las úlceras se forman en lugares donde la inflamación ha destruido las células de la pared del colon; son sangrantes y producen pus.

La colitis ulcerosa es una enfermedad intestinal inflamatoria (EII), el nombre general de las enfermedades que producen inflamación en el intestino delgado y colon. La colitis ulcerosa puede ser difícil de diagnosticar porque sus síntomas son similares a otros trastornos intestinales y a otro tipo de EII, la enfermedad de Crohn. La enfermedad de Crohn se diferencia de la colitis ulcerosa porque produce inflamación más profunda en la pared intestinal. Además, la enfermedad de Crohn normalmente se produce en el intestino delgado, aunque también puede producirse en boca, esófago, estómago, duodeno, intestino grueso, apéndice y ano.

55 La colitis ulcerosa puede producirse en personas de cualquier edad, pero más frecuentemente comienza entre los 15 y 30 años, o menos, frecuentemente entre 50 y 70 años. Los niños y adolescentes a veces desarrollan la enfermedad. La colitis ulcerosa afecta de la misma manera a hombres y a mujeres y parece que se desarrolla en algunas familias. Las teorías acerca de las causas de la colitis ulcerosa son abundantes. La teoría más popular es que el sistema inmunitario del organismo reacciona contra un virus o una bacteria ocasionando inflamación constante en la pared intestinal. Las personas con colitis ulcerosa presentan anomalías del sistema inmunitario, pero los médicos no saben si estas anomalías son una causa o un resultado de la enfermedad. La colitis ulcerosa no está producida por desequilibrio emocional o sensibilidad a determinados alimentos o productos alimenticios, sino que estos factores pueden desencadenar síntomas en algunas personas.

65 Los síntomas más habituales de la colitis ulcerosa son dolor abdominal y diarrea sanguinolenta. Los pacientes también pueden presentar fatiga, pérdida de peso, pérdida de apetito, sangrado rectal y pérdida de líquidos corporales y nutrientes. Aproximadamente la mitad de los pacientes tienen síntomas leves. Otros padecen fiebre frecuente, diarrea sanguinolenta, náuseas y calambres abdominales graves. La colitis ulcerosa también puede producir problemas tales como artritis, inflamación ocular, enfermedad hepática (hepatitis, cirrosis y colangitis esclerosante primaria), osteoporosis, erupciones cutáneas y anemia. Nadie conoce con seguridad que problemas se producen fuera del colon.

5 Los científicos piensan que estas complicaciones pueden suceder cuando el sistema inmunitario desencadena inflamación en otras partes del organismo. Algunos de estos problemas desaparecen cuando se trata la colitis.

Para diagnosticar la colitis ulcerosa pueden ser necesario un examen físico minucioso y una serie de ensayos. Pueden realizarse análisis de sangre para comprobar la anemia, lo que podría indicar sangrado en el colon o recto. Los análisis de sangre también pueden revelar un alto recuento de leucocitos, que es un síntoma de inflamación en alguna parte del organismo. Analizando una muestra de heces, el médico puede detectar sangrado o infección en el colon o recto. El médico puede realizar una colonoscopia o una sigmoidoscopía. Para cualquier ensayo, el médico inserta en el ano un endoscopio - un tubo con luz, flexible y alargado conectado a un ordenador y a una pantalla TV - para observar el interior del colon y recto. El médico podrá observar cualquier inflamación, sangrado o úlceras en la pared del colon.

15 Durante el examen, el médico puede realizar una biopsia, que implica extraer una muestra de tejido del revestimiento del colon para observarla al microscopio. También puede requerirse un enema de bario con rayos x del colon. Este procedimiento implica llenar el colon con bario, una solución blanca calcárea. El bario aparece de color blanco en una película de rayos x, lo que permite al médico observar claramente el colon, incluyendo cualquier úlcera u otra anomalía que pudiera existir.

El tratamiento de la colitis ulcerosa depende de la gravedad de la enfermedad. La mayoría de las personas se tratan con medicación. En casos graves, un paciente puede necesitar cirugía para extirpar el colon enfermo. La cirugía es la única cura de la colitis ulcerosa. Algunas personas cuyos síntomas se han desencadenado por determinados alimentos pueden controlar los síntomas evitando los alimentos que alteran su intestino, como alimentos muy

25 condimentados, verduras y hortalizas crudas, azúcar lácteo (lactosa). Cada persona puede experimentar colitis ulcerosa de una manera diferente, de modo que el tratamiento se ajusta a cada individuo. El apoyo emocional y psicológico es importante. Algunas personas presentan remisiones - periodos en los que desaparecen los síntomas - que duran meses o incluso años. Sin embargo, los síntomas de la mayoría de los pacientes finalmente vuelven a aparecer. Este patrón cambiante de la enfermedad significa que no siempre se puede decir cuando ha surtido efecto un tratamiento. Algunas personas con colitis ulcerosa pueden necesitar cuidados médicos durante algún tiempo, con visitas médicas regulares para controlar la afección.

Basándose en resultados experimentales obtenidos, incluyendo los presentados en esta solicitud, los compuestos de la presente invención pueden usarse para el tratamiento de pacientes con colitis ulcerosa.

S. Enfermedad de Crohn

Otro trastorno en el que se ha probado la inmunosupresión es la enfermedad de Crohn. Los síntomas de la enfermedad de Crohn incluyen inflamación intestinal y el desarrollo de estenosis y fístulas intestinales; la neuropatía a menudo acompaña estos síntomas. Los fármacos antiinflamatorios, tales como 5-aminosalicilatos (por ejemplo, mesalamina) o corticoesteroides, se prescriben normalmente, pero no siempre son eficaces (revisado en Botoman et al., 1998). La inmunosupresión con ciclosporina a veces resulta beneficiosa en pacientes resistentes a, o que no tolerantes, corticoesteroides (Brynskov et al., 1989).

45 Se han enfocado esfuerzos para desarrollar herramientas de diagnóstico y tratamiento contra la enfermedad de Crohn sobre la función principal de citocinas (Schreiber, 1998; van Hogezand y Verspaget, 1998). Las citocinas son pequeñas proteínas segregadas o factores (de 5 a 20 kD) que tienen efectos específicos sobre interacciones célulacélula, comunicación intercelular, o comportamiento de otras células. Las citocinas se producen en linfocitos, especialmente linfocitos TH1 y TH2, monocitos, macrófagos intestinales, granulocitos, células epiteliales y fibroblastos (revisado en Rogler y Andus, 1998; Galley y Webster, 1996). Algunas citocinas son proinflamatorias (por ejemplo, TNF-α, It-1(α y β), IL-6, IL-8, IL-12, o factor inhibidor de leucemia [FIL]); otras son antiinflamatorias (por ejemplo, antagonistas de receptores de IL-1, IL-4, IL-10, IL-11 y THF-β). Sin embargo, en determinados estados inflamatorios sus efectos pueden solaparse y ser funcionalmente redundantes.

55 En casos activos de enfermedad de Crohn, en la circulación sanguínea se segregan concentraciones elevadas de TNF-α e IL-6 y las células mucosas producen TNF-α, IL-1, IL-6, e IL-8 en exceso localmente (id.; Funakoshi et al., 1998). Estas citocinas pueden tener efectos de largo alcance sobre sistemas fisiológicos incluyendo desarrollo óseo, hematopoyesis y función hepática, tiroidea y neurosiquiátrica. Además, en pacientes con enfermedad de Crohn, se ha observado un desequilibrio de la proporción IL-1β/IL-1ra, a favor de la It-1β proinflamatoria (Rogler y Andus, 1998; Saiki et al., 1998; Dionne et al., 1998; pero véase Kuboyama, 1998). Un estudio sugiere que los perfiles de citocinas en muestras de heces podrían ser una herramienta de diagnóstico útil para la enfermedad de Crohn (Saiki et al., 1998).

Los tratamientos que se han propuesto para la enfermedad de Crohn incluyen el uso de diversos antagonistas de citocinas (por ejemplo IL-lra), inhibidores (por ejemplo, de la enzima convertidora de IL-1β y antioxidantes) y 65 anticuerpos anti-citocina (Rogler y Andus, 1998; van Hogezand y Verspaget, 1998; Reimund et al., 1998; Lugering et

al., 1998; McAlindon et al., 1998). En particular, se han ensayado anticuerpos monoclonales contra TNF-α con algún éxito en el tratamiento de enfermedad de Crohn (Targan et al., 1997; Stack et al., 1997; van Dullemen et al., 1995). Estos compuestos pueden usarse en terapia de combinación con compuestos de la presente descripción.

5 Otra estrategia para el tratamiento de la enfermedad de Crohn se ha enfocado en erradicar, al menos parcialmente, la comunidad bacteriana que puede ser la desencadenante de la respuesta inflamatoria y reemplazarla con una comunidad no patógena. Por ejemplo, la Patente de Estados Unidos 5.599.795 describe un método para la prevención y tratamiento de la enfermedad de Crohn en pacientes humanos. Su método se dirige a esterilizar el tracto intestinal con al menos un antibiótico y al menos un agente antifúngico para destruir la flora existente y reemplazarla con bacterias diferentes, seleccionadas, bien caracterizadas extraídas de seres humanos normales. Borody explicó un método de tratamiento de la enfermedad de Crohn retirando al menos parcialmente la microflora intestinal existente por lavado y reemplazándola con una nueva comunidad bacteriana introducida mediante inóculo fecal de un donante humano protegido de enfermedad o mediante una composición que comprende Bacteroides y la especie Escherichia coli. (Patente de Estados Unidos 5.443.826).

15 Basándose en los resultados experimentales obtenidos, incluyendo los presentados en esta solicitud, los compuestos de la presente invención pueden usarse para el tratamiento de pacientes con enfermedad de Crohn.

T. Lupus eritematoso sistémico

También se desconoce la causa de enfermedades autoinmunitarias, tales como, lupus eritematoso sistémico. El lupus eritematoso sistémico (LES) es una enfermedad reumática autoinmuntaria caracterizada por deposición en tejidos de autoanticuerpos y complejos inmunitarios que conducen a lesión tisular (Kotzin, 1996). A diferencia de enfermedades autoinmunitarias tales como EM y diabetes melitus de tipo 1, el LES posiblemente implica sistemas orgánicos múltiples

25 directamente, y sus manifestaciones clínicas son diversas y variables (revisado por Kotzin y O’Dell, 1995). Por ejemplo, algunos pacientes pueden presentar primero erupción cutánea y dolor articular, mostrando remisiones espontáneas, y requieren poca meditación. En el otro extremo del espectro están los pacientes que presentan implicación renal grave y progresiva que requiere terapia con altas dosis de esteroides y fármacos citotóxicos tales como ciclofosfamida (Kotzin, 1996).

La característica serológica del LES y los ensayos de diagnóstico primarios disponibles, es niveles en suero elevados de anticuerpos IgG contra constituyentes de los núcleos celulares, tales como ADN bicatenario (ADNbc), ADN monocatenario (ADNmc) y cromatina. Entre estos autoanticuerpos, los anticuerpos IgG anti-ADNbc desempeñan una función principal en el desarrollo de glomerulonefritis (GN) lúpica (Hahn y Tsao, 1993; Ohnishi et al., 1994). La

35 glomerulonefritis es una afección grave en la que las paredes capilares de los glomérulos que purifican sangre del riñón se vuelven más gruesas por acreciones en el lado epitelial de las membranas basales glomerulares. Esta enfermedad es a menudo crónica y progresiva y puede conducir a insuficiencia renal final.

Basándose en resultados experimentales obtenidos, incluyendo los presentados en esta solicitud, los compuestos de la presente invención pueden usarse para el tratamiento de pacientes con LES.

U. Síndrome del intestino irritable

Los compuestos de la presente invención pueden usarse para el tratamiento de pacientes con síndrome del intestino

45 irritable (SII). El SII es un trastorno funcional caracterizado por dolor abdominal y hábitos intestinales alterados. Este síndrome puede comenzar en la adolescencia y puede estar asociado con discapacidad significativa. Este síndrome no es un trastorno homogéneo. En cambio, se han descrito subtipos de SII basándose en síntomas predominantes-diarrea, estreñimiento o dolor. En ausencia de síntomas “alarmantes”, tales como fiebre, pérdida de peso y sangrado gastrointestinal, se requieren pruebas diagnósticas. Una vez realizado el diagnóstico de SII, una estrategia de tratamiento integrada puede reducir eficazmente la gravedad de los síntomas. El SII es un trastorno habitual, aunque su índice de frecuencia ha variado. En general, el SII afecta aproximadamente al 15 % de adultos en Estados Unidos y se produce aproximadamente tres veces más frecuentemente en mujeres que en hombres (Jailwala et al., 2000).

55 El SII representa entre 2,4 millones y 3,5 millones de visitas al médico cada año. No es solo la afección más común observada por gastroenterólogos sino también es una de las afecciones gastrointestinales más común observada por médicos de cabecera (Everhart et al., 1991; Sandler, 1990).

El SII es también un trastorno costoso. En comparación con las personas que no padecen síntomas intestinales, las que padecen SII presentan bajas laborales de tres días y probablemente son las que más comunican que están demasiado enfermas para trabajar (Drossman et al., 1993; Drossman et al., 1997). Además, las personas con SII incurren en gastos médicos cientos de dólares más que las personas sin trastornos intestinales (Talley et al., 1995).

Para los empeoramientos y remisiones del dolor abdominal y hábitos intestinales alterados que padecen los pacientes

65 con SII no se justifican anomalías específicas. La teoría en desarrollo del SII sugiere mala regulación a niveles múltiples del eje cerebro-intestinal. La dismotilidad, hipersensibilidad visceral, modulación anómala del sistema nervioso central (SNC), e infección, todas ellas se han implicado. Además, los factores psicosociales desempeñan una función modificadora importante. La motilidad intestinal anómala se ha considerado desde hace tiempo un factor en la patogénesis del SII. El tiempo de tránsito a través del intestino delgado después de una comida se ha demostrado que es más corto en pacientes con SII con diarrea predominante que en pacientes que tienen el subtipo con dolor

5 predominante o estreñimiento predominante (Cann et al., 1983).

En estudios del intestino delgado en ayunas, la presencia de contracciones tanto agrupadas como separadas y prolongadas, se han descrito contracciones propagadas en pacientes con SII (Kellow y Phillips, 1987). Estos pacientes también padecen dolor con contracciones irregulares más frecuentemente que las personas sanas (Kellow y Phillips, 1987; Horwitz y Fisher, 2001).

Estos hallazgos de motilidad no representan todo el complejo sintomático en pacientes con SII; de hecho, la mayoría de estos pacientes no han presentado anomalías (Rothstein, 2000). Los pacientes con SII tienen sensibilidad aumentada a dolor visceral. Estudios que implican distensión con globo del colon rectosigmoidal se ha observado que

15 los pacientes con SII experimentan dolor y distención abdominal a presiones y volúmenes muchos más bajos que los sujetos de control (Whitehead et al., 1990). Estos pacientes mantienen percepción normal de estímulos somáticos.

Se han propuesto múltiples teorías para explicar este fenómeno. Por ejemplo, receptores en las vísceras pueden tener sensibilidad aumentada en respuesta a distensión o al contenido intraluminal. Las neuronas en el cuerno dorsal de la médula espinal pueden tener excitabilidad aumentada. Además, puede estar implicada una alteración en el procesamiento de sensaciones en el SNC (Drossman et al., 1997). Estudios de formación de imágenes de resonancia magnética funcional han demostrado recientemente que en comparación con los sujetos control, los pacientes con SII tienen activación aumentada de la corteza cingulada anterior, un centro de dolor importante, en respuesta a estímulo rectal doloroso (Mertz et al., 2000).

25 Las pruebas sugieren cada vez más una relación entre enteritis infecciosa y desarrollo posterior de SII. Las citocinas inflamatorias pueden desempeñar una función. En una encuesta de pacientes con un historial de gastroenteritis bacteriana confirmado (Neal et al., 1997), el 25 % describen alteración persistente de hábitos intestinales. La persistencia de síntomas puede deberse a estrés psicológico en el momento de infección aguda (Gwee et al., 1999).

Datos recientes sugieren que el crecimiento bacteriano en el intestino delgado puede tener una función en síntomas del SII. En un estudio (Pimentel et al., 2000), 157 (78 %) de 202 pacientes con SII remitidos a prueba de hidrógeno en aliento hubo hallazgos que fueron positivos para el crecimiento bacteriano. De los 47 sujetos que tenían prueba de seguimiento, 25 (53 %) notificaron mejoría en cuanto a síntomas (es decir, dolor abdominal y diarrea) con tratamiento

35 con antibióticos.

El SII puede presentarse con una serie de síntomas. Sin embargo, el dolor abdominal y los hábitos intestinales alterados siguen siendo las características principales. Las molestias abdominales a menudo se describen como calambres de naturaleza y se localizan en el cuadrante inferior izquierdo, aunque la gravedad y la localización pueden diferir enormemente. Los pacientes pueden notificar diarrea, estreñimiento o episodios alternos de diarrea y estreñimiento. Los síntomas de diarrea se describen normalmente como heces sueltas, de pequeño volumen y algunas veces vienen acompañadas de secreción mucosa. Los pacientes también pueden notificar distensión abdominal, incontinencia fecal, evacuación incompleta y distensión abdominal. También pueden presentarse síntomas gastrointestinales del tracto superior, tales como, reflujo gastroesofágico, dispepsia o náuseas (Lynn y Friedman,

45 1993).

La persistencia de síntomas no es una indicación de ensayo adicional; esto es una característica del SII y en sí mismo es un síntoma esperado del síndrome. Se indica evaluación de diagnóstico más ampliada en pacientes cuyos síntomas son de empeoramiento o de cambio. Las indicaciones de ensayo adicional también incluyen la presencia de síntomas alarmantes, aparición de síntomas después de 50 años y un historial familiar de cáncer de colon. Los ensayos pueden incluir colonoscopia, tomografía computarizada de abdomen y pelvis, y estudios con bario del intestino delgado o grueso.

V. Síndrome de Sjogren

55 Los compuestos de la invención pueden usarse para el tratamiento de pacientes con SS. El síndrome de Sjögren (SS) primario es una enfermedad autoinmunitaria sistémica, crónica, de progresión lenta, que afecta predominantemente a mujeres de mediana edad (proporción de mujeres con respecto a hombres de 9:1), aunque también puede observarse en todas las edades incluyendo la infancia (Jonsson et al., 2002). Se caracteriza por infiltración linfocítica y destrucción de las glándulas exocrinas, en las que se han infiltrado células mononucleares incluyendo linfocitos CD4+, CD8+ y linfocitos B (Jonsson et al., 2002). Además, se observan manifestaciones extraglandulares (sistémicas) en un tercio de los pacientes (Jonsson et al., 2001).

La infiltración linfocítica glandular es una característica progresiva (Jonsson et al., 1993), que, cuando es extensiva,

65 puede reemplazar grandes porciones de los órganos. Cabe destacar que, en algunos pacientes los infiltrados glandulares se parecen mucho a microestructuras linfoides ectópicas en las glándulas salivares (denominado centros germinales ectópicos) (Salomonsson et al., 2002; Xanthou et al., 2001). En el SS, los CG ectópicos se definen como agregados de linfocitos T y B de células proliferantes con una red de células dendríticas foliculares y células endoteliales activadas. Estas estructuras similares a CG formadas dentro del tejido diana también reflejan propiedades funcionales con una producción de anticuerpos (anti-Ro/SSA y anti-La/SSB) (Salomonsson y Jonsson, 2003).

5 En otras enfermedades autoinmunitarias sistémicas, tales como AR, se han definido factores críticos para CG ectópicos. Se observó que los tejidos sinoviales reumatoides con CG producían quimiocinas CXCL13, CCL21 y linfotoxina (LT)-β (detectada en linfocitos B del centro folicular y zona del manto). Análisis de regresión multivariante de estos analitos identifican CXCL13 y LT-β como las citocinas aisladas que predicen los CG en sinovitis reumatoide (Weyand y Goronzy, 2003). Recientemente se ha observado que CXCL13 y CXCR5 en glándulas salivares desempeñan una función esencial en los procesos inflamatorios reclutando linfocitos T y B, contribuyendo por tanto a la neogénesis linfoidea y a la formación de CG ectópicos en SS (Salomonsson et al., 2002).

W. Psoriasis

15 Los compuestos de la presente invención pueden usarse para el tratamiento de pacientes con psoriasis. La psoriasis es una enfermedad de la piel crónica de descamación e inflamación que afecta del 2 al 2,6 por ciento de la población de los Estados Unidos, o entre 5,8 y 7,5 millones de personas. Aunque la enfermedad se produce en todos los grupos de edad, principalmente afecta a los adultos. Aparece casi por igual en mujeres y en hombres. La psoriasis se produce cuando las células de la piel se elevan rápidamente desde su origen por debajo de la superficie de la piel y se apilan sobre la superficie antes de su maduración. Normalmente este movimiento (denominado también renovación) dura un mes, pero en la psoriasis puede producirse en solo unos días. En su forma típica, la psoriasis produce parches de piel gruesa, roja (inflamada) cubierta con escamas plateadas. Estos parches, que a veces se denominan placas, normalmente escuecen o duelen. A menudo se producen en codos, rodillas, otras partes de las piernas, cuero

25 cabelludo, espalda, rostro, palma de la mano y planta del pie, pero también pueden producirse en cualquier sitio de la piel del cuerpo. La enfermedad también puede afectar a las uñas de las manos y de los pies y a los tejidos blandos de los genitales, y al interior de la boca. Aunque no es raro que la piel alrededor de las articulaciones afectadas se agriete, aproximadamente 1 millón de personas con psoriasis padece inflamación articular que produce síntomas de artritis. Esta afección se denomina artritis psoriásica.

La psoriasis es un trastorno de piel estimulado por el sistema inmunitario, implicando especialmente un tipo de leucocito denominado linfocito T. Normalmente, los linfocitos T ayudan a proteger al organismo contra infecciones y enfermedades. En el caso de la psoriasis, los linfocitos T se ponen en acción por error y se vuelven tan activos que desencadenan otras respuestas inmunitarias, lo que conduce a inflamación y a una rápida renovación de las células de

35 la piel. Aproximadamente en un tercio de los casos, existe un historial familiar de psoriasis. Los investigadores han estudiado una gran cantidad de familias afectadas por psoriasis y han identificado genes vinculados con la enfermedad. Las personas con psoriasis pueden advertir que hay veces que su piel empeora, y después mejora. Las afecciones que pueden producir agravamiento incluyen infecciones, estrés y cambios climáticos que secan la piel. Además, determinadas medicinas, incluyendo litio y betabloqueantes, que se prescriben para la presión arterial elevada, pueden desencadenar un brote o un empeoramiento de la enfermedad.

X. Enfermedades infecciosas

Los compuestos de la presente invención pueden ser útiles en el tratamiento de enfermedades infecciosas, incluyendo

45 infecciones virales y bacterianas. Como se han indicado anteriormente, dichas infecciones pueden asociarse con respuestas inflamatorias localizadas o sistémicas graves. Por ejemplo, la gripe puede producir inflamación grave del pulmón y la infección bacteriana puede producir la respuesta hiperinflamatoria sistémica, incluyendo la producción excesiva de citocinas inflamatorias múltiples, que es la característica de la septicemia. Además, los compuestos descritos en el presente documento pueden ser útiles inhibiendo directamente la replicación de patógenos virales. Estudios previos han demostrado que compuestos relacionados, tales como CDDO, pueden inhibir la replicación del VIH en macrófagos (Vazquez et al., 2005). Otros estudios han indicado que la inhibición de la señalización NF-kappa B puede inhibir la replicación del virus de la gripe, y que las prostaglandinas de ciclopentanona pueden inhibir la replicación viral (por ejemplo, Mazur et al., 2007; Pica et al., 2000).

55 V. Formulaciones farmacéuticas y vías de administración

Los compuestos de la presente descripción pueden administrarse por diversos métodos, por ejemplo, por vía oral o por inyección (por ejemplo subcutánea, intravenosa, intraperitoneal, etc.). Dependiendo de la vía de administración, los compuestos activos pueden revestirse con un material para proteger el compuesto de la acción de ácidos y de otras condiciones naturales que pueden activar el compuesto. También pueden administrarse por perfusión/infusión continua en un sitio de herida o de enfermedad.

Para administrar el compuesto terapéutico por un modo distinto de la administración parenteral, puede ser necesario revestir el compuesto con, o coadministrar el compuesto con, un material que impida su inactivación. Por ejemplo, el

65 compuesto terapéutico puede administrarse a un paciente en un transportador apropiado, por ejemplo, en liposomas, o en un diluyente. Como diluyentes farmacéuticamente aceptables se incluyen solución salina y soluciones tampónacuosas. Los liposomas incluyen emulsiones CGF de agua en aceite en agua, así como liposomas convencionales (Strejan et al., 1984).

El compuesto terapéutico también puede administrarse por vía parenteral, intraperitoneal, intraespinal o intracerebral.

5 Pueden prepararse dispersiones en glicerol, polietilenglicoles líquidos y mezclas de los mismos y en aceites. En condiciones habituales de conservación y uso, estas preparaciones pueden contener un conservante para impedir el crecimiento de microorganismos.

Las composiciones farmacéuticas adecuadas para uso inyectable incluyen soluciones o dispersiones acuosas estériles (solubles en agua) y polvos estériles para la preparación improvisada de soluciones o dispersiones inyectables estériles. En todos los casos, la composición debe ser estéril y líquida hasta el grado de que pueda inyectarse fácilmente. Debe ser estable en las condiciones de fabricación y conservación y debe preservarse contra la acción contaminante de microorganismos tales como bacterias y hongos. El transportador puede ser un disolvente o un medio de dispersión que contenga, por ejemplo, agua, etanol, poliol (tal como, glicerol, propilenglicol, y

15 polietilenglicol líquido y similares), mezclas adecuadas de los mismos y aceites vegetales. Puede conservarse la fluidez adecuada, por ejemplo, usando un recubrimiento tal como lecitina, manteniendo el tamaño de partícula necesario en el caso de dispersión y utilizando tensioactivos. La prevención de la acción de microorganismos puede conseguirse mediante diversos agentes antibacterianos y antifúngicos, por ejemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, ácido ascórbico, timerosal, y similar. En muchos casos, será preferible incluir en la composición agentes isotónicos, por ejemplo, azúcares, cloruro de sodio, o polialcoholes tales como manitol y sorbitol. La absorción prolongada de las composiciones inyectables puede realizarse incluyendo en la composición un agente que retrase la absorción, por ejemplo, monoestearato de aluminio o gelatina.

Pueden prepararse soluciones inyectables estériles incorporando el compuesto terapéutico en la cantidad necesaria

25 en un disolvente apropiado con uno o una combinación de principios indicados anteriormente, según se necesite, seguido de esterilización por filtración. Generalmente, las dispersiones se preparan incorporando el compuesto terapéutico en un transportador estéril que contiene un medio de dispersión básico y los restantes principios necesarios indicados anteriormente. En el caso de polvos estériles para la preparación de soluciones inyectables estériles, los métodos de preparación preferidos son el secado al vacío y la liofilización que produce un polvo del principio activo (es decir, el compuesto terapéutico) más cualquier principio adicional deseado a partir de una solución previamente esterilizada por filtración de la misma.

El compuesto terapéutico puede administrarse por vía oral, por ejemplo, con un diluyente inerte o un transportador asimilable comestible. El compuesto terapéutico y los otros principios también pueden incluirse en una cápsula de

35 gelatina de carcasa blanda o dura, comprimirse en comprimidos, o incorporarse directamente en la dieta del sujeto. Para la administración terapéutica oral, el compuesto terapéutico puede incorporarse con excipientes y usarse en forma de comprimidos, comprimidos bucales, trociscos, cápsulas, elixires, suspensiones, jarabes, obleas y similares que pueden ingerirse. El porcentaje del compuesto terapéutico en las composiciones y preparaciones puede, por supuesto, modificarse. La cantidad de compuesto terapéutico en dichas composiciones terapéuticamente útiles es tal que se obtendrá una dosificación adecuada.

Es especialmente ventajoso formular composiciones parenterales en forma unitaria de dosificación para facilitar la administración y para uniformidad de la dosificación. La forma unitaria de dosificación como se usa en el presente documento se refiere a unidades físicamente individuales adaptadas como dosificaciones unitarias para los sujetos a

45 tratar; conteniendo cada unidad una cantidad predeterminada del compuesto terapéutico calculada para producir el efecto terapéutico deseado en asociación con el transportador farmacéutico necesario. Las especificaciones para las formas unitarias de dosificación de la invención son dictaminadas por y dependen directamente de (a) las características exclusivas del compuesto terapéutico y del efecto terapéutico particular a conseguir y (b) las limitaciones intrínsecas en la técnica de formación de compuestos tal como un compuesto terapéutico para el tratamiento de una afección seleccionada en un paciente.

El compuesto terapéutico también puede administrarse por vía tópica en la piel, ojo o mucosas. Como alternativa, si se desea la administración local en los pulmones el compuesto terapéutico puede administrarse por inhalación en una formulación en polvo seco o en aerosol.

55 Los compuestos activos se administran a una dosificación terapéuticamente eficaz suficiente para tratar una afección asociada con una afección en un paciente. Una “cantidad terapéuticamente eficaz” reduce preferentemente la cantidad de síntomas de la afección en el paciente infectado al menos aproximadamente un 20 %, más preferentemente al menos un 40 %, incluso más preferentemente al menos un 60 % y aún más preferentemente al menos aproximadamente un 80 % con respecto a sujetos no tratados. Por ejemplo, la eficacia de un compuesto puede evaluarse en un sistema de modelo animal que puede ser predictivo de eficacia en el tratamiento de enfermedades en seres humanos, tal como el sistema de modelo mostrado en los ejemplos y dibujos. La cantidad de dosificación real de un compuesto o composición de la presente descripción que comprende un compuesto de la presente descripción administrada a un sujeto puede determinase por factores físicos y fisiológicos

65 tales como la edad, el sexo, el peso corporal, la gravedad de la afección, el tipo de enfermedad que vaya a tratarse, las intervenciones terapéuticas previas o simultáneas, la idiopatía del sujeto y/o la vía de administración. Estos factores puede determinarlos un experto en la técnica. El responsable facultativo de la administración determinará normalmente la concentración del principio (o principios) activo en una composición y la dosis (o las dosis) apropiada para el sujeto individual. El médico puede ajustar la dosificación en caso de cualquier complicación.

5 Una cantidad eficaz normalmente variará de aproximadamente 0,001 mg/kg a aproximadamente 1000 mg/kg, de aproximadamente 0,01 mg/kg a aproximadamente 750 mg/kg, de aproximadamente 100 mg/kg a aproximadamente 500 mg/kg, de aproximadamente 1,0 mg/kg a aproximadamente 250 mg/kg, de aproximadamente 10,0 mg/kg a aproximadamente 150 mg/kg en una o más administraciones de dosis diarias, durante uno o varios días (dependiendo del ciclo del modo de administración y de los factores indicados anteriormente). Otros intervalos de dosis adecuados incluyen de 1 mg a 10000 mg por día, de 100 mg a 10000 mg por día, de 500 mg a 10000 mg por día y de 500 mg a 1000 mg por día. En algunas realizaciones particulares, la cantidad es menor de 10.000 mg por día con un intervalo de 750 mg a 9000 mg por día.

La cantidad eficaz puede ser menor de 1 mg/kg/día, menor de 500 mg/kg/día, menor de 250 mg/kg/día, menor de 100

15 mg/kg/día, menor de 50 mg/kg/día, menor de 25 mg/kg/día o menor de 10 mg/kg/día. Como alternativa puede estar en el intervalo de 1 mg/kg/día a 200 mg/kg/día. Por ejemplo, con respecto al tratamiento de pacientes diabéticos, la dosificación unitaria puede ser una cantidad que reduzca la glucemia al menos un 40 % en comparación con un sujeto no tratado. En otra realización, la dosificación unitaria es una cantidad que reduce la glucemia a un nivel que es ± 10 % del nivel de glucemia de un sujeto no diabético.

En otros ejemplos no limitantes, una dosis también puede comprender de aproximadamente 1 microgramo/kg/peso corporal, aproximadamente 5 microgramos/kg/peso corporal, aproximadamente 10 microgramos/kg/peso corporal, aproximadamente 50 microgramos/kg/peso corporal, aproximadamente 100 microgramos/kg/peso corporal, aproximadamente 200 microgramos/kg/peso corporal, aproximadamente 350 microgramos/kg/peso corporal,

25 aproximadamente 500 microgramos/kg/peso corporal, aproximadamente 1 miligramo/kg/peso corporal, aproximadamente 5 miligramos/kg/peso corporal, aproximadamente 10 miligramos/kg/peso corporal, aproximadamente 50 miligramos/kg/peso corporal, aproximadamente 100 miligramos/kg/peso corporal, aproximadamente 200 miligramos/kg/peso corporal, aproximadamente 350 miligramos/kg/peso corporal, aproximadamente 500 miligramos/kg/peso corporal, a aproximadamente 1000 mg/kg/peso corporal o más por administración, y en cualquier intervalo derivable delos mismos. En ejemplos no limitantes de un intervalo derivable de los números indicados en el presente documento, puede administrarse un intervalo de aproximadamente 5 mg/kg/peso corporal a aproximadamente 100 mg/kg/peso corporal, de aproximadamente 5 microgramos/kg/peso corporal a aproximadamente 500 miligramos/kg/peso corporal, etc., en función de los números descritos anteriormente.

35 En determinadas realizaciones, una composición farmacéutica de la presente invención puede comprender, por ejemplo, al menos aproximadamente el 0,1 % de un compuesto de la presente invención. En otras realizaciones, el compuesto de la presente invención puede comprender entre aproximadamente del 2 % a aproximadamente el 75 % del peso de la unidad, o entre aproximadamente el 25 % a aproximadamente el 60 %, por ejemplo, y cualquier intervalo derivable en su interior.

Se contemplan dosis sencillas o múltiples de los agentes. Los intervalos de tiempo deseados para la administración de dosis múltiples puede determinarlos un experto habitual en la técnica empleando solo experimentación rutinaria. Como un ejemplo, a los sujetos se les puede administrar dos dosis al día a intervalos de 12 horas aproximadamente. En

45 algunas realizaciones, el agente se administra una vez al día.

El agente (o agentes) puede administrarse siguiendo una programación rutinaria. Como se usa en el presente documento, una programación rutinaria se refiere a un periodo de tiempo designado predeterminado. La programación rutinaria puede incluir periodos de tiempo que sean idénticos o que difieran en duración, siempre que la programación sea predeterminada. Por ejemplo, la programación rutinaria puede implicar administración dos veces al día, cada día, cada dos días, cada tres días, cada cuatro días, cada cinco días, cada seis días, semanalmente, mensualmente o cualquier conjunto de días o semanas entre los mismos. Como alternativa, la programación rutinaria predeterminada puede implicar la administración de dos veces al día durante la primera semana, seguido de administración diaria durante varios meses, etc. En otras realizaciones, la invención estipula que el agente (o agentes) puede tomarse por

55 vía oral y que el momento de administración del mismo depende o no de la toma de alimento. De este modo, por ejemplo, el agente puede tomarse cada mañana y/o cada tarde, independientemente de si el sujeto ha comido o de si comerá.

VI. Terapia de combinación

Además de utilizarse como una monoterapia, los compuestos de la presente invención también pueden encontrar uso en terapias de combinación. Una terapia de combinación eficaz puede realizarse con una sola composición o formulación farmacológica que incluya ambos agentes, o con dos composiciones o formulaciones distintas, al mismo tiempo, en la que una composición incluye un compuesto de la presente descripción, y la otra incluye el segundo

65 agente (o agentes). Como alternativa, la terapia puede preceder o ir después del otro tratamiento con agente mediante intervalos que varían de minutos a meses.

Pueden emplearse diversas combinaciones, como por ejemplo cuando un compuesto de la presente descripción es “A” y “B” representa un agente secundario, a continuación se describen ejemplos no limitantes de los mismos:

A/B/A B/A/B B/B/A A/A/B A/B/B B/A/A A/B/B/B B/A/B/B

B/B/B/A B/B/A/B A/A/B/B A/B/A/B A/B/B/A B/B/A/A

B/A/B/A B/A/AB A/A/A/B B/A/A/A A/B/A/A A/A/B/A

5 La administración de los compuestos de la presente invención a un paciente seguirá los protocolos generales para la administración de compuestos farmacéuticos, teniendo en cuenta la toxicidad, si la hubiera, del fármaco. Se espera que los ciclos de tratamiento se repitan, caso de ser necesario.

10 Los beta interferones pueden ser adecuados como agentes secundarios. Se trata de medicaciones derivadas de citocinas humanas que ayudan a regular el sistema inmunitario. Incluyen interferón β-1b e interferón β-1a. El betaserón se ha aprobado por la FDA para formas reincidentes de EM progresiva secundaria. Además, la FDA ha aprobado el uso de diversos β-interferones como tratamientos para personas que han sufrido un solo ataque que sugiere esclerosis múltiple y que pueden estar en riesgo de futuros ataques y de desarrollar EM definitiva. Por ejemplo, el riesgo de EM

15 puede sugerirse cuando un escáner MRI del cerebro muestra lesiones que predicen un alto riesgo de conversión a EM definitiva.

El acetato de glatiramer es un ejemplo adicional de un agente secundario que puede usarse en un tratamiento de combinación. Glatiramer se usa actualmente para tratar EM remitente recurrente. Se fabrica con cuatro aminoácidos

20 que se encuentran en la mielina. Este fármaco se refiere como un estimulador de linfocitos T en el sistema inmunitario del organismo para cambiar agentes proinflamatorios, dañinos, por agentes antiinflamatorios, beneficiosos, que actúan reduciendo la inflamación en sitios de lesión.

Otro posible agente secundario es la mitoxantrona, un fármaco quimioterapéutico utilizado para muchos cánceres.

25 Este fármaco también ha sido aprobado por la FDA para el tratamiento de formas agresivas de EM remitente recurrente, así como determinadas formas de EM progresiva. Se administra por vía intravenosa, normalmente cada tres meses. Esta medicación es eficaz, pero está limitada por su toxicidad cardiaca. La novantrona ha sido aprobada por la FDA para EM progresiva secundaria, progresiva recurrente y recurrente con empeoramiento.

30 Otro posible agente secundario es el natalizumab. En general, natalizumab actúa bloqueando la adhesión de células inmunitarias a vasos sanguíneos cerebrales, que es una etapa necesaria para que las células inmunitarias atraviesen el cerebro, reduciendo así la acción inflamatoria de células inmunitarias en neuronas cerebrales. Se ha observado que el natalizumab reduce significativamente la frecuencia de ataques en personas con EM recurrente.

35 En el caso de EM remitente recurrente, a los pacientes se les puede administrar corticoesteroides intravenosos, tal como metilprednisolona, como un agente secundario, para poner fin al ataque cuanto antes y dejar menos déficits duraderos.

Otros fármacos comunes para la EM que pueden utilizarse en combinación con los compuestos de la presente 40 descripción incluyen fármacos inmunosupresores, tales como, azatioprina, cladribina y ciclofosfamida.

Se contempla que puedan usarse otros agentes antiinflamatorios junto con los tratamientos de la presente invención. Pueden usarse otros inhibidores de COX, incluyendo ácidos arilcarboxílicos (ácido salicílico, ácido acetilsalicílico, diflunisal, trisalicilato de colina y magnesio, salicilato, benorilato, ácido flufenámico, ácido mefenámico, ácido

45 meclofenámico y ácido triflúmico), ácidos arilalcanoicos (diclofenaco, fenclofenaco, alclofenaco, fentiazac, ibuprofeno, flurbiprofeno, quetoprofeno, naproxeno, fenoprofeno, fenbufeno, suprofeno, indoprofeno, ácido tiaprofénico, benoxaprofeno, pirprofeno, tolmetina, zomepirac, clopinac, indometacina y sulindac) y ácido enólicos (fenilbutazona, oxifenbutazona, azapropazona, feprazona, piroxicam e isoxicam. Véase, por ejemplo, la Patente de Estados Unidos

6.025.395.

50 También pueden utilizarse agentes bloqueadores de los receptores de histamina H2 junto con los compuestos de la presente invención, incluyendo cimetidina, ranitidina, famotidina y nizatidina.

Se contempla el tratamiento con inhibidores de acetilcolinesterasa, tales como tacrina, donepizil, metrifonato y

55 rivastigmina, para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer y otras enfermedades junto con los compuestos de la presente invención. Pueden desarrollarse otros inhibidores de acetilcolinesterasa que una vez aprobados pueden usarse e incluyen rivastigmina y metrifonato. Los inhibidores de acetilcolinesterasa incrementan la cantidad de acetilcolina neutrotransmisora en las terminaciones nerviosas disminuyendo su degradación por la enzima colinesterasa.

60 Pueden utilizarse inhibidores de MAO-B, tales como selegileno, junto con los compuestos de la presente invención. El selegileno se usa para la enfermedad de Parkinson e inhibe irreversiblemente la monoamina oxidasa de tipo B (MAO-B). La monoamina oxidasa es una enzima que inactiva los neurotransmisores monoamina norepinefrina, serotonina y dopamina.

Los complementos dietéticos y nutricionales con beneficios declarados para el tratamiento o prevención de

5 enfermedad de Parkinson, Alzheimer, esclerosis múltiple, esclerosis lateral amiotrófica, artritis reumatoide, enfermedad intestinal inflamatoria y otras enfermedades cuya patogénesis se piensa que implica la producción excesiva de óxido nítrico (ON) o prostaglandinas, tales como acetil-L-carnitina, octacosanol, aceite de onagra, vitamina B6, tirosina, fenilalanina, vitamina C, L-dopa o una combinación de diversos antioxidantes, pueden usarse junto con los compuestos de la presente invención.

10 Para el tratamiento o prevención del cáncer, los compuestos descritos en el presente documento pueden combinarse con uno o más de: radiación, agentes quimioterapéuticos (por ejemplo, agentes citotóxicos, tales como antraciclinas, vincristina, vinblastina, agentes dirigidos a microtúbulos tales como paclitaxel y docetaxel, 5-FU y agentes relacionados, cisplatino y otros compuestos que contienen platino, irinotecán y topotecán, gemcitabina, temozolomida,

15 etc.), terapias dirigidas (por ejemplo, imatinib, bortezomib, bevacizumab, rituximab), o terapias de vacuna diseñadas para promover una respuesta inmunitaria potenciada dirigida a células cancerosas.

Para el tratamiento o la prevención de enfermedades autoinmunitarias, los compuestos descritos en el presente documento pueden combinarse con uno o más de los siguientes: corticoesteroides, metrotexato, anticuerpos anti-TNF,

20 otras terapias de proteína que se dirigen al TNF y fármacos antiinflamatorios no esteroideos (AINE). Para el tratamiento y prevención de enfermedades cardiovasculares, los compuestos descritos en el presente documento pueden combinarse con terapias antitrombóticas, terapias anticolesterol tales como estatinas (por ejemplo, atorvastatina), e intervenciones quirúrgicas tales como injerto de endoprótesis vascular o derivación aortocoronaria. Para el tratamiento de osteoporosis, los compuestos descritos en el presente documento pueden combinarse con

25 agentes antireabsortibos tales como bifosfonatos o terapias anabólicas tales como teriparatida u hormona paratiroidea. Para el tratamiento de afecciones neurosiquiátricas, los compuestos descritos en el presente documento pueden combinarse con antidepresivos (por ejemplo, imipramina o SSRI (inhibidores selectivos de la recaptacion de serotonina) tal como fluoxetina), agentes antipsicóticos (por ejemplo, olanzapina, sertindol, risperidona), estabilizadores anímicos (por ejemplo, litio, valproato semisódico) u otros agentes convencionales tales como agentes

30 ansiolíticos. Para el tratamiento de trastornos neurológicos, los compuestos descritos en el presente documento pueden combinarse con agentes anticonvulsivos (por ejemplo, valproato semisódico, gabapentina, fenitoína, carbamazepina y topiramato), agentes antitrombóticos (por ejemplo, activador de plasminógeno tisular) o analgésicos (por ejemplo, opioides, bloqueadores de canal de sodio y otros agentes antinociceptivos).

35 VII. Ejemplos

Los siguientes ejemplos se incluyen para demostrar realizaciones preferidas de la invención. También se incluyen ejemplos y compuestos de referencia. Los expertos en la técnica deben apreciar que en las técnicas descritas en los siguientes ejemplos representan técnicas descubiertas por el inventor que funcionan bien en la realización práctica de

40 la invención y por tanto puede considerarse que constituyen modos preferidos para su realización práctica.

Ejemplo 1- Métodos y materiales

Se midieron espectros UV en el espectrofotómetro Shimadzu UV1201 UV-VIS. Todos los espectros de RMN se

45 registraron en un espectrómetro de transformación de Fourier. Los dos instrumentos utilizados eran de 500 MHz para 1H y 125 MHz para 13C o 300 MHz para 1H y 75 MHz para 13C. Los desplazamientos químicos se presentaron en δ (ppm) usando la señal δ 7,27 de CHCl3 (1H NMR) y la señal δ 77,23 de CDCl3 (13C NMR) como patrones internos para el cloroformo marcado con deuterio, la señal δ 2,05 de CD3COCHD2 (1H NMR) y la señal δ 29,92 de CD3COCD3 (13C NMR) como patrones internos para la acetona-d6. Las constantes de acoplamiento se presentaron en hercios (Hz) y la

50 multiplicidad aparente como se describió como s = singlete, m = multiplete, d = doblete y t = triplete.

Se obtuvieron datos de espectroscopia de masas de alta resolución y de baja resolución mediante ESI+ y EI.

Para la CCF y la CCF preparativa se utilizaron placas de CCF previamente revestidas con gel de sílice 60 F254.

55 Se realizó cromatografía en columna ultrarrápida con gel de sílice (malla de 230-400). Todos los experimentos se realizaron bajo atmosférica de nitrógeno a menos que se indique otra cosa.

Se preparó tetrahidrofurano anhidro y diclorometano mediante un sistema de purificación con disolvente. Todos los

60 disolventes (calidad analítica), incluyendo los disolventes anhidros, y los reactivos se usaron tal cual se recibieron. Todas las referencias a “agua” corresponden a agua desionizada de osmosis inversa (RODI, por sus siglas en inglés). Todas las referencias a “salmuera” se refieren a una solución de cloruro de sodio acuosa saturada. La expresión “al vacío” se refiere a la eliminación de disolvente por evaporación rotatoria seguido de un ambiente a presión más reducida (≤ 0,2 Torr; ≤ 26,66 Pascales).

65 Para el ensayo iNOS, se trataron células RAW con diversas concentraciones de compuestos e interferón-γ (10 ng/ml) durante 24 horas. Los sobrenadantes se analizaron con respecto al óxido nítrico (ON) mediante la reacción de Griess. Los valores CI50 son una media de dos experimentos distintos.

5 Ensayo IKKβ quinasa in vitro usando el Kit de Ensayo IKKβ quinasa HTScan® disponible en el comercio. Se presenta el siguiente protocolo: 1. Cien μl de ATP 10 mM se añadieron a 1,25 ml de péptido biotinilado IκB-α (Ser32) 6 μM (péptido sustrato). La mezcla se diluyó con H2O desionizada a 2,5 ml para preparar un coctel de ATP/sustrato ([ATP]=400 (μM, [sustrato] = 3 μM). 2. La IKKβ Quinasa (humana recombinante) (enzima, 5 μg) se transfirió de -80 ºC a hielo. La enzima se descongeló en hielo. 3. La enzima se microcentrifugó brevemente a 4 ºC para volverse líquida en el fondo del vial.

10 La enzima volvió a ponerse inmediatamente en hielo. 4. Se añadió 1 ml de tampón quinasa [1 ml de Tampón Quinasa: Tris-HCl 250 mM pH 7,5, MgCl2 100 mM, Na3VO4 1 mM, β-glicerofosfato 50 mM] a 1,5 ml de H2O desionizada para preparar 2,5 ml de tampón de reacción. 5. Se transfirieron 1,25 ml del tampón de reacción al tubo con la enzima para preparar el coctel de reacción ([enzima]) = 4 ng/μl en el coctel de reacción). 6. Se añadieron 12,5 μl del coctel de reacción a 12,5 μl/pocillo de solución de nuevos ligandos a cada concentración y la mezcla se incubó durante 5

15 minutos a temperatura ambiente. 7. Se añadieron 25 μl del coctel de ATP/sustrato a 25 μl/pocillo del compuesto/coctel de reacción preincubado. [En esta fase, las Condiciones de Ensayo Final para una Reacción de 50 l son Tris-HCl 25 mM (pH 7,5), MgCl2 10 mM, β-glicerolfosfato 5 mM, Na3VO4 0,1 mM, ATP 200 μM, péptido 1,5 μM, IKKβ Quinasa 50 ng] 8. La placa de reacción se incubó a temperatura ambiente durante 30 minutos. 9. Se añadieron 15 μl/pocillo de Tampón de Detención (EDTA 50 mM, pH 8) para detener la reacción. 10. Veinticinco μl de cada reacción se

20 transfirieron a una placa de 96 pocillos revestida con estreptavidina que contenía 75 μl de H2O desionizada/pocillo y se incubó a temperatura ambiente durante 60 minutos. 11. La mezcla de reacción se lavó tres veces con PBS/T 200 μl/pocillo. 12. Se preparó una dilución de anticuerpo primario, mAb fosfo-IκB-α (Ser32/36) (5A5) de Ratón, 1:1000 en PBS/T con BSA al 1 %. Se añadieron 100 μl/pocillo de anticuerpo primario a la mezcla de reacción. 13. La mezcla se incubó a temperatura ambiente durante 120 minutos. 14. La mezcla de reacción se lavó tres veces con PBS/T 200

25 μl/pocillo. La mezcla de reacción se evaluó mediante ensayo ELISA colorimétrico de la siguiente manera: 1. Se preparó una dilución apropiada de anticuerpo secundario marcado con peroxidasa de rábano picante (HRP) en PBS/T con BSA al 1 % (dilución 1:500 para anti-IgG de ratón o 1:1000 para anti-IgG de conejo). 2. A la mezcla de reacción obtenida en el punto 14 se añadieron 100 μl/pocillo de solución de anticuerpo secundario. 3. La mezcla se incubó a temperatura ambiente durante 30 minutos. 4. La mezcla se lavó cinco veces con PBS/T 200 μl/pocillo. 5. A la mezcla

30 resultante se añadieron 100 μl/pocillo de sustrato TMB (3,3’,5,5”-tetrametilbenzidina). 6. La mezcla se incubó a temperatura ambiente durante 15 minutos. 7. Se añadieron 100 μl/pocillo de la solución de detención y después se mezcló bien. 8. Con un lector de placa de microtitulación se midió la absorbancia a 450 nm.

Ejemplo 2 - Síntesis y Caracterización de MCE-1 y MCE-3

35 Se sintetizaron MCE-1 y MCE-3 como se describe a continuación y se resume en el Esquema 2.

1,4-Dioxaspiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo (2). Una mezcla de 4-oxociclohexanocarboxilato de etilo (25 g), ácido 10-camfarsulfónico, etilenglicol (40 ml) y tolueno (400 ml) se calentó a reflujo con un aparato Dean-Stark durante 2,5 h (temp. del baño 135 ºC). La mezcla se enfrió y después se diluyó con éter (200 ml). Después de separar la fase de etilenglicol, la fase orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (2 x) y salmuera (1x), se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se evaporó al vacío para dar 2 en forma de un aceite (31,29 g, 99 %): RMN 1H (CDCl3) 5 4,13 (2H, c, J = 7,1 Hz), 3,95 (4H, s), 2,33 (1H, m), 1,93 (2H, m), 1,79 (4H, m), 1,56 (2H, m) 1,25 (3H, t, J =7,1 Hz); RMN 13C (CDCl3) 5 175,4, 108,3, 64,5, 60,5, 41,8, 33,9, 26,5, 14,4.

8-Metil-1,4-dioxa-espiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo (3). Se disolvió 1,4-dioxaspiro[4,5]decano-8-carboxilato

5 de etilo (2) (5,8 g) en una atmósfera de nitrógeno en THF seco (60 ml) y se enfrió en un baño de hielo seco/isopropanol a -78 ºC. Se añadió gota a gota LDA (solución 2 M en THF/n-heptano/etilbenceno, 20 ml, 40 mmol) a la solución en agitación y la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se enfrió de nuevo a -78 ºC y se le añadió una solución de yodometano (5,5 g, 39 mmol) en THF seco (15 ml) usando una bomba de jeringa durante 20 minutos. Esta mezcla se agitó a -78 ºC durante 1 h. Después, se dejó que la mezcla alcanzara

10 temperatura ambiente. Después, la mezcla de reacción se diluyó con éter etílico (100 ml) y la fase orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (2 x 50 ml) y salmuera (1 x 50 ml), después se secó sobre cloruro de magnesio, se filtró y se concentró al vacío para dar un aceite de color pardo-amarillo (8 g). El aceite se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida [éter de petróleo-éter etílico (2:1)] para dar 3 (5,22 g, 85 %) en forma de un aceite incoloro: RMN 1H (CDCl3) 5 4,14 (2H, c, J = 7,1 Hz), 3,93 (4H, s), 2,13 (2H, m), 1,64 (6H, m), 1,25 (3H, t, J =7,1

15 Hz), 1,18 (3H, s); RMN 13C (CDCl3) 5 177,2, 108,7, 64,4, 60,6, 42,5, 33,1, 32,3, 26,2, 14,4.

(8-Metil-1,4-dioxa-espiro[4,5]dec-8-il)-metanol (4). En una atmósfera de nitrógeno, hidruro de litio y aluminio (31,2 mmol, 1,25 g, 2,43 equiv.) se añadió a una solución agitada de 3(12,84 mmol, 2,93 g) en éter etílico anhidro (275 ml) enfriada a 0 ºC en un baño de hielo. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 horas. Para 20 inactivar el hidruro de litio y aluminio restante, se añadieron sucesivamente agua (2,48 ml), seguido de una solución acuosa al 40 % de hidróxido sódico (1,68 ml) y más cantidad de agua (3,47 ml) con agitación a la mezcla de reacción. Después, el precipitado insoluble se retiró por decantación y filtración. El filtrado se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró al vacío para dar 4 (12,75 mmol, 2,28 g, 99 %) en forma de un aceite de color amarillo que se eluyó en la siguiente reacción sin purificación adicional: RMN 1H (CDCl3) 5 3,94 (4H, s), 3,39 (2H, s), 1,68-1,35 (8H, m), 0,96

25 (3H, s); RMN 13C (CDCl3) 5 109,3, 71,8, 64,4, 34,5, 31,5, 30,7, 21,3.

8-Metil-1,4-dioxa-espiro[4,5]decano-8-carbaldehído (5). En una atmósfera de nitrógeno, se añadió óxido de cromo

(IV) (84,7 mmol, 8,47 g, 6,6 equiv.) a una solución agitada de extra piridina seca (171 mmol, 14,53 ml, 13,3 equiv.) en cloruro de metileno seco (123 ml) enfriado a 0 ºC en un baño de hielo. La solución resultante se agitó a temperatura 30 ambiente durante 15 minutos. Después, a esta mezcla se le añadió una solución de 4 (12,83 mmol, 2,28 g) en cloruro de metileno seco (19 ml) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Después, la mezcla de reacción se decantó en un embudo de separación y el residuo se lavó con éter etílico (40 ml y 50 ml). Los lavados se combinaron y la fase orgánica se lavó con una solución acuosa al 5 % de hidróxido sódico (2 x 40 ml), una solución acuosa al 5 % de ácido clorhídrico (3 x 40 ml), una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (3 x 40 ml)

35 y salmuera (3 x 40 ml), después se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró al vacío para dar 5 (12,24 mmol, 2,35 g, 95 %) en forma de un sólido amorfo. El producto se usó en la siguiente reacción sin purificación adicional: RMN 1H (CDCl3) 5 9,47 (1H, s), 3,95 (4H, s), 2,00-1,96 (2H, m), 1,71-1,67 (2H, m), 1,61-1,53 (4H, m), 1,05 (s, 3H); RMN 13C (CDCl3) 5 205,9, 108,4, 64,4, 64,4, 45,7, 31,4, 29,9, 21,2.

40 Trimetil((8-metil-1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-il)etinil)silano (6). A una suspensión de cloruro de clorometileno trifenilfosfonilo (95 %, 24,2 g, 66 mmol) en THF (72 ml) se le añadió gota a gota n-BuLi (1,6 M en hexano, 41,5 ml, 66 mmol) en un baño de hielo-agua. A la mezcla se le añadió HMPA (11,8 ml). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 min. A la mezcla se le añadió una solución de 5 (3,06 g, 16,6 mmol) en THF (72 ml). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. A la mezcla se le añadió una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (600

45 ml) La mezcla acuosa se extrajo con cloruro de metileno/éter (1:2, 300 ml x 3). El extracto se lavó con salmuera (x 2), se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se evaporó al vacío para dar un sólido cristalino de color pardo (21, 31 g). El sólido se lavó con éter varias veces. La solución de éter se evaporó al vacío para dar un sólido cristalino (9,78 g). El sólido se purificó por cromatografía ultrarrápida [éter de petróleo-éter (5:1)] para dar 8-(2-clorovinil)-8-metil1,4-dioxaspiro[4,5]decano (2,74 g, 76 %). A una solución del sólido en THF (340 ml) se le añadió gota a gota MeLi (1,6

50 M en éter, 100 ml, 160 mmol) en un baño de hielo-agua. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. A la mezcla de reacción se añadió agua (500 ml). La mezcla acuosa se extrajo con cloruro de metileno/éter (1:2, 300 ml x 3). El extracto se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (300 ml x 1) y salmuera (300 ml x 2), se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se evaporó al vacío para dar un aceite (3, 2 g). El aceite se purificó por cromatografía ultrarrápida para dar 6 en forma de un sólido cristalino (2,86 g, 90 %): RMN 1H (CDCl3) 5

55 3,94 (4H, m), 1,95, 1,73, 1,61, 1,50 (cada uno 2H, m), 1,22 (3H, s), 0,14 (9H,s); RMN 13C (CDCl3) 5 112,8, 108,9, 85,1, 64,4, 36,9, 32,7, 32,2, 29,4, 0,5.

4-Metil-4-((trimetilsilil)etinil)ciclohexanona (7). A una solución de 6 (2,1 g, 8,3 mol) en acetona (25 ml) se le añadió una solución acuosa al 10 % de HCl (15 ml). La solución fue turbia. Por lo tanto, a la solución turbia se le añadió gota a 60 gota acetona (total 12 ml) hasta que la solución fue transparente. La solución transparente se agitó a temperatura ambiente durante 5 h. La mezcla se diluyó con salmuera (250 ml). La mezcla acuosa se extrajo con cloruro de metileno/éter (1:2, 200 ml x 3). El extracto se lavó con una solución saturada de bicarbonato sódico (2 x100 ml) y salmuera (100 ml x 1), se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se evaporó al vacío para dar 7 en forma de un sólido cristalino (1,7 g, 98 %): RMN 1H (CDCl3) 5 2,75, 2,29, 2,04, 1,65 (cada uno 2H, m), 1,32 (3H, s), 0,17 (9H, s); RMN 13C

65 (CDCl3) 5 211,8, 110,8, 86,9, 39,2, 38,8, 32,9, 28,8, 0,4.

4-Metil-4-((trimetilsilil)etinil)ciclohex-2-enona (8). A una solución de 7 (260 mg, 1,25 mmol) en THF (10 ml) se le añadió LDA (2 M en THF/n-heptano/etilbenceno, 935 ml, 1,87 mmol) a -78 ºC (en un baño de isopropanol-hielo seco). La mezcla se dejó alcanzar temperatura ambiente durante 20 min. A la mezcla se le añadió una solución de cloruro de fenilselenilo (472 mg, 2,5 mmol) en THF (3 ml) a -78 ºC. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La

5 mezcla de reacción se inactivó con salmuera (10 ml). La mezcla acuosa se extrajo con cloruro de metileno/ éter (1:2, 50 ml x 3). El extracto se lavó con salmuera (50 ml x 1), se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se evaporó al vacío para dar un residuo de color pardo (758 mg). A una solución del residuo en cloruro de metileno (20 ml) se le añadió peróxido de hidrógeno acuoso al 30 % (0,3 ml). Cinco minutos después de la adición, se añadió de nuevo peróxido de hidrógeno acuoso al 30 % (0,3 ml). El color pardo se volvió un amarillo pálido. Cinco minutos después, la mezcla de reacción se lavó con agua (5 ml x 1), una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (5 ml x 2), y salmuera (5 ml x 1), se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se evaporó al vacío para dar un residuo (290 mg). El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida [éter de petróleo-éter (5:1)] para dar 8 en forma de un sólido cristalino (91,5 mg, 36 %): RMN 1H (CDCl3) 5 6,69 (1H, dd, J = 1,5 y 10 Hz), 5,88 (1H, d, J = 10 Hz), 2,73 (1H, m), 2,44 (1H, m), 2,22 (1H, m), 1,95 (1H. m), 1,43 (3H, s), 0,14 (9H, s); RMN 13C (CDCl3) 5 199,2, 153,7, 127,6, 107,8, 99,4, 36,7, 35,2, 28,2, 0,2.

15 5-Metil-5-((trimetilsilil)etinil)-4,5-dihidrobenzo[d]isoxazol (9). A una solución de 8 (139 mg, 0,67 mmol) en benceno seco (7,8 ml) se le añadieron formiato de etilo (97 %, 244 mg, 3,2 mmol) y metóxido sódico (176 mg, 3,3 mmol), sucesivamente. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla se diluyó con cloruro de metileno/éter (1:2, 40 ml). La mezcla se lavó con una solución acuosa al 5 % de HCl (15 ml x 2). Los lavados ácidos se extrajeron con cloruro de metileno/éter (1:2, 20 ml x 1). La solución orgánica original y el extracto se combinaron. La solución orgánica combinada se lavó con agua (15 ml x 2) y salmuera (15 ml x 1), se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se evaporó al vacío para dar 6-(hidroximetileno)-4-metil-4-((trimetilsilil)-etinil)ciclohex-2-enona (148 mg, 94 %): RMN 1H (CDCl3) 5 13,69 (1H, s a), 7,53 (1H, s), 6,64 (1H, d, J = 9,9 Hz), 6,00 (1H, d, J = 9,9 Hz), 2,78 (1H, d, J = 14,6 Hz), 2,47 (1H, d, J = 14,6 Hz), 1,38 (3H, s), 0,14 (9H, s); RMN 13C (CDCl3) 5 187,7, 168,0, 152,3, 126,8, 110,2, 109,5,

25 106,1, 37,2, 37,1, 26,9, 0,2. Este material se usó sin purificación adicional para la siguiente etapa.

-

A una solución de 6-(hidroximetileno)-4-metil-4-((trimetilsilil)etinil)-ciclohex-2-enona (147 mg, 0,63 mmol) en etanol (15 ml) se le añadió una solución de clorhidrato de hidroxilamina (452 mg) en agua (0,65 ml). La mezcla se calentó a reflujo durante 1 h. A la mezcla se le añadió agua (50 ml). La mezcla acuosa se extrajo con cloruro de metileno/éter (1:2, 50 ml x 3). El extracto se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (50 ml x 1) y salmuera (50 ml x 1), se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se evaporó al vacío para dar 9 en forma de un sólido cristalino (145 mg, rendimiento cuantitativo): RMN 1H (CDCl3) 5 8,06 (1H, s), 6,47 (1H, d, J = 9,9 Hz), 6,03 (1H, d, J = 9,9 Hz), 3,07 (1H, d, J = 16,1 Hz), 2,77 (1H, d, J = 16,1 Hz), 1,37 (3H, s), 0,14 (9H, s). Este material se usó sin purificación adicional para la siguiente etapa.

35 5-Etinil-5-metil-2-oxociclohex-3-enecarbonitrilo (MCE-4, dhMCE-1). A una solución de 9 (75 mg, 0,32 mmol) en éter seco (7,4 ml) se le añadió una solución de metóxido sódico (565 mg) en metanol seco (6 ml). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla se diluyó con cloruro de metileno/éter (1:2, 40 ml). La mezcla se lavó con una solución acuosa al 5 % de HCl (10 ml x 2). Los lavados ácidos se extrajeron con cloruro de metileno/éter (1:2, 10 ml x 1). La solución orgánica original y el extracto se combinaron. La solución orgánica combinada se lavó con agua (15 ml x 2) y salmuera (15 ml x 1), se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se evaporó al vacío para dar MCE-4 en forma de un sólido cristalino (51 mg, rendimiento cuantitativo). Este material se usó sin purificación adicional para la siguiente etapa.

45 3-Etinil-3-metil-6-oxociclohexa-1,4-dienecarbonitrilo (MCE-1). Una solución de MCE-4 (47,7 mg, 0,3 mmol) y DDQ (102 mg, 0,45 mmol,) en benceno seco (3 ml) se calentó a reflujo durante 15 min. Después de la retirada del material insoluble, el filtrado se concentró al vacío para dar un residuo (149 mg). El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida [hexanos-acetato de etilo (2:1)] y posterior TLC preparativa [hexanos-acetato de etilo (2:1)] para dar MCE-1 en forma de un sólido cristalino (22,3 mg, 47 %): RMN 1H (CDCl3) 5 7,54 (1H, d, J = 2,9 Hz), 6,96 (1H, dd, J = 2,9 y 9,9 Hz), 6,34 (1H, d, J = 9,9 Hz), 2,44 (1H, s), 1,65 (3H, s); RMN 13C (CDCl3) 5 177,9, 160,0, 150,6, 126,6, 116,5, 113,5, 79,2, 73,5, 36,0, 27,2.

3-Metil-6-oxo-3-((trimetilsilil)etinil)ciclohex-1-enecarbonitrilo (10). A una solución de 7 (163 mg, 0,78 mmol) en THF (8,8 ml) se le añadió LDA (solución 2 M en THF/n-heptano/etilbenceno, 1,08 ml, 2,16 mmol) a -78 ºC (en un baño

55 de isopropanol-hielo seco). La mezcla se dejó alcanzar temperatura ambiente durante 20 min. A la mezcla se le añadió una solución turbia de cianuro de p-toluenosulfonilo (95 %, 591 mg, 3,1 mmol) en THF (6,8 ml) a -78 ºC. La mezcla se agitó a -78 ºC durante 30 min. A la mezcla de reacción se le añadió una solución saturada de cloruro de amonio (4,5 ml) a -78 ºC. La mezcla se dejó alcanzar temperatura ambiente. La mezcla se acidificó con una solución acuosa al 10 % de HCl. La mezcla se extrajo con acetato de etilo (30 ml x 3). El extracto se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (40 ml x 2) y salmuera (40 ml), se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se evaporó al vacío para dar 5-metil-2-oxo-5-((trimetilsilil)etinil)ciclohexanocarbonitrilo (270 mg).

Una solución de 5-metil-2-oxo-5-((trimetilsilil)etinil)ciclohexano-carbonitrilo (270 mg) y DDQ (350 mg) en benceno (20 ml) se calentó a reflujo durante 10 min. Después de la retirada del material insoluble, el filtrado se concentró al vacío

65 para dar un residuo (407 mg). El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida [hexanos-acetato de etilo (4:1)] para dar 10 en forma de un sólido cristalino (142 mg, 78 %): RMN 1H (acetona-d6) 5 7,71 (1H, d, J = 1, 5 Hz), 2,72 (1H, m), 2,62 (1H, m), 2,21 (2H, m), 1,55 (3H, s), 0,15 (9H, s); RMN 13C (acetona-d6) 5 192,0, 164,8, 116,4, 114,8, 106,5, 88,7, 35,9, 35,0, 0,0.

3-Etinil-3-metil-6-oxociclohex-1-enocarbonitrilo (MCE-3). Una solución de 10 (20 mg, 0,086 mmol) en THF (0,6 ml)

5 se desgasificó con una corriente abundante de argón durante 5 min. A la solución se le añadió fluoruro de tetra-(n-butil)amonio (TBAF, 70 mg). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 min. La mezcla se diluyó con cloruro de metileno/éter (1:2, 20 ml). La mezcla se extrajo con una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (10 ml x 3). El extracto básico se acidificó con una solución acuosa al 5 % de HCl. La mezcla ácida se extrajo con cloruro de metileno/éter (1:2, 10 ml x 4). El extracto se lavó con agua (10 ml x 2), se secó sobre MgSO4 y se filtró. El

10 filtrado se evaporó al vacío para dar un sólido cristalino. El sólido se purificó por TLC preparativa [hexanos-acetato de etilo (2,5: 1)] para dar MCE-3 en forma de un sólido cristalino (6,9 mg, 50 %): RMN 1H (CDCl3) 5 7,39 (1H, d, J = 1,8 Hz), 2,84 (1H, m), 2,62 (1H, m), 2,38 (1H, s), 2,32 (1H, m), 2,05 (1H, m), 1,55 (3H, s).

Reference Ejemplo 3 - Síntesis y Caracterización del Compuesto de Referencia MCE-5

15 MCE-5 se sintetizó como se describe a continuación y se resume en el Esquema 3.

2,2,4,4-Tetrametilciclohexanona (2). Un matraz de tres bocas equipado con un embudo de adición y un condensador de hielo seco se secó al vacío con calentamiento. En una atmósfera de nitrógeno, se recogió amoniaco líquido (45 ml) en el matraz de la condensación de gas de amonio. El matraz se enfrió a -78 ºC en un baño de isopropanol/hielo seco y se le añadió un cable de litio cortado recién preparado (108 mg, 15,5 mmol, 2,6 equiv.) hasta que persistió un color azul. La mezcla se agitó a -78 ºC durante 15 minutos. Una solución de 14 (829,3 mg, 6 mmol) y terc-butanol (445 mg,

6 mmol, 1 equiv.) en éter etílico anhidro (24 ml) después se añadió gota a gota durante quince minutos. Cuando la solución se añadió por completo, el baño de isopropanol se retiró y la mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y comenzó a calentarse a reflujo. Después, la solución se enfrió a -33 ºC en un baño de tetracloruro de carbono (CCl4)/hielo seco y la reacción se agitó a la temperatura de reflujo durante 45 minutos, después 5 de lo cual el baño de CCl4 se retiró. En ese momento, todavía persistía el color azul, indicando un exceso de litio. Por lo tanto, se añadió isopreno (0,2 ml) a la mezcla de reacción hasta que desapareció el color azul. Después, la mezcla de reacción se enfrió a -78 ºC y una solución de yoduro de metilo (2,24 ml, 36 mmol, 6 equiv.) en éter etílico anhidro (15 ml) se añadió gota a gota durante 15 minutos. El baño de isopropanol se retiró de nuevo y cuando la mezcla de reacción comenzó a reflujo, se puso en un baño CCl4 y se agitó a reflujo durante 1 hora. Después, el baño de CCl4 se retiró. Finalmente, el amoniaco líquido se retiró con la ayuda de una corriente de nitrógeno y el amoniaco restante se neutralizó mediante la adición de una solución acuosa al 10 % de ácido clorhídrico (25 ml). La solución resultante se extrajo con cloruro de metileno/éter etílico (1:2, 5 x 30 ml) y las fases orgánicas se combinaron y se lavaron con una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (1 x 40 ml) y salmuera (1 x 40 ml), se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró al vacío para dar 15 en bruto (724,1 mg) en forma de un líquido de color naranja-pardo. El

15 producto en bruto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida [hexanos-acetato de etilo (9:1)] para dar 15 (461 mg, 2,98 mmol, 50 %) en forma de un aceite de color amarillo-pardo: RMN 1H (CDCl3) 5 2,44 (2H, t, J = 6,8 Hz), 1,70 (2H, t, J = 6,8 Hz), 1,59 (2H, s), 1,12 (6H, s), 1,08 (6H, s); RMN 13C (CDCl3) 5 217,7, 53,5, 38,8, 35,4, 30,8, 30,3, 28,0.

6-Hidroximetileno-2,2,4,4-tetrametilciclohexanona (16). En una atmósfera de argón, se añadieron sucesivamente formiato de etilo (1,18 ml, 14,3 mmol, 11 equiv.) después metóxido sódico (772,5 mg, 14,3 mmol, 11 equiv.) a una solución de 15 (200 mg, 1,30 mmol) en benceno seco (5,83 ml). Esta mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora, tiempo durante el cual sucedió un cambio de color una solución de color amarillo pálido, turbia. Después, la mezcla se diluyó con una mezcla de cloruro de metileno/éter etílico (1:2, 20 ml) y se lavó con una solución acuosa

25 saturada de cloruro de amonio (2 x 8 ml). Los lavados acuosos se combinaron y se extrajeron con cloruro de metileno/éter etílico (1:2, 3x 8 ml). Después, las fases orgánicas se combinaron y se lavaron con salmuera (1 x 8 ml), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron al vacío para dar 16 en forma de un líquido amarillo (207,6 mg, 1,14 mmol, 88 %). El producto se usó en la siguiente reacción sin purificación adicional: RMN 1H (CDCl3) 5 14,82 (1 H, d, J = 4 Hz), 8,42 (1H, d, J = 5 Hz), 2,12 (2H, s), 1,45 (2H, s), 1,22 (6H, s), 0,99 (6H, s); RMN 13C (CDCl3) 5 193,6, 185,1, 106,8, 50,8, 38,4, 38,0, 30,6, 29,3, 29,2. EM: No se observó ningún pico de ion molecular por los métodos de IEN+ y EI.

5,5,7,7-Tetrametil-4,5,6,7-tetrahidrobenzo[d]isoxazol (17). En una atmósfera de nitrógeno, y con agitación, una solución de 16 (140 mg, 0,77 mmol) en etanol (19,1 ml) se añadió a una solución de clorhidrato de hidroxilamina (7,98

35 mmol, 555 mg, 10,4 equiv.) en agua (980 1l) a temperatura ambiente. La mezcla se calentó a 110 ºC y se agitó a reflujo durante 1 hora. Después de calentar, la mezcla de reacción se diluyó con agua (10 ml) y la fase acuosa se extrajo con cloruro de metileno/éter etílico (1:2, 3 x 10 ml). Después, las fases orgánicas se combinaron y se lavaron con una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (1 x 12 ml) y salmuera (2 x 12 ml), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron al vacío para dar 17 en forma de un aceite de color amarillo (122 mg, 0,68 mmol, 89 %). El material se usó en la siguiente reacción sin purificación adicional: RMN 1H (CDCl3) 5 8,00 (1H, s), 2,24 (2H, s), 1,60 (2H, s), 1,34 (6H, s), 1,03 (6H, s); RMN 13C (CDCl3) 8 173,2, 150,0, 110,4, 52,4, 34,4, 32,6, 32,4, 29,7, 29,3. EM: No se observó ningún pico de ion molecular por los métodos de IEN+ y EI.

3,3,5,5-Tetrametil-2-oxociclohex-1-enecarbonitrilo (Compuesto de Referencia MCE-5). En una atmósfera de

45 argón y con agitación, se añadió una solución de 17 (152 mg, 0,848 mmol) en éter etílico anhidro (19,5 ml) a una solución de metóxido sódico (687 mg, 12,7 mmol, 15 equiv.) en metanol seco (15,8 ml). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas, dando una solución de color amarillo claro. Después, la mezcla de reacción se diluyó con cloruro de metileno/éter etílico (1:2, 30 ml) y se lavó con una solución acuosa al 5 % de ácido clorhídrico (2 x 7 ml). Las fases acuosas se combinaron y se extrajeron con cloruro de metileno/éter etílico (1:2, 3 x 15 ml). Después, las fases orgánicas se combinaron y se lavaron con agua (2 x 10 ml) y salmuera (1 x 10 ml), se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró al vacío para dar dhMCE-5 en forma de un aceite de color amarillo (136,1 mg, 90 %).

Los cálculos para la siguiente etapa de reacción se realizaron, asumiendo que la etapa anterior dio un rendimiento cuantitativo. Se introdujo 2,3-dicloro-5,6-dicianobenzoquinona (DDQ) (148,6 mg, 0,642 mmol, 1 equiv.) en un matraz

55 que contenía dhMCE-5 (115 mg, 0,642 mmol) y los contenidos del matraz se disolvieron en una atmósfera de nitrógeno en benceno seco (18,6 ml). La mezcla se calentó a reflujo durante 20 minutos. Después, la mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y se filtró a través de una pipeta Pasteur con algodón y se enjuagó con benceno. La solución resultante se concentró al vacío para dar un sólido de color rojo oscuro como el producto en bruto. El material en bruto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida [hexanos:acetato de etilo (4:1)] para dar MCE-5 (35,0 mg, 0,197 mmol, 31 %) en forma de un sólido de color blanco: RMN 1H (CDCl3) 5 7,32 (1H, s), 1,83 (2H, d, J = 1 Hz), 1,27 (6H, s), 1,20 (6H, s); RMN 13C (CDCl3) 5 197,5, 169,0, 114,8, 113,7, 48,2, 41,5, 34,4, 29,9, 26,9. EM (IEN+) m/z 178,1 [M+H]+, HRMS (IEN+) calc. para C11H15NO + H 178,1232, encontrado 178,1227.

Ejemplo de Referencia 4- Síntesis y Caracterización del Compuesto de Referencia MCE-15

65 MCE-15 se sintetizó como se describe a continuación y se resume en el Esquema 4.

8-Metil-8-vinil-1,4-dioxaspiro[4,5]decano (18). En un matraz de tres bocas en una atmósfera de nitrógeno, se añadió terc-butóxido potásico (73,2 mmol, 8,21 g, 7,93 equiv.) a una solución agitada de yoduro de metiltrifenilfosfonio (87,3

mmol, 35,7 g, 9,73 equiv.) en THF seco (130 ml) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos. A la mezcla se le añadió una solución de 5 (9,23 mmol, 1,7 g) en THF seco (130 ml) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Después, la mezcla se diluyó con agua (255 ml) y se extrajo con cloruro de metileno/éter etílico (1:2, 3 x 300 ml). Las fases orgánicas se combinaron y se lavaron con salmuera (2 x 350 ml), después se secaron con sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron al vacío para dar un sólido de color amarillo (13,4 g). El producto en bruto se purificó lavando con éter de petróleo-éter etílico (2:1, lavados de 5 x 75 ml) y separando el compuesto soluble del residuo de reacción insoluble. Después, los lavados de combinaron, se filtraron y se concentraron al vacío, revelando el material insoluble en forma de cristales de color blanco. Por lo tanto, el material insoluble se decantó, y los cristales se lavaron con éter de petróleo-éter etílico (2:1, lavados de 2 x 50 ml). Los lavados se combinaron de nuevo, se filtraron y se concentraron al vacío para dar 18 (8,5 mmol, 1,55 g, 92 %) en forma de un residuo de color amarillo: RMN 1H (CDCl3) 5 5,79 (1H, dd, J = 13,5, 18 Hz), 5,03 (1H, dd, J = 1,2, 4,5 Hz), 4,98 (1H, dd, J = 1,2, 2,7 Hz), 3,94 (4H, s), 1,70-1,61 (6H, m), 1,55-1,46 (2H, m), 1,01 (3H, s); RMN 13C (CDCl3) 5 147,2, 111,6, 109,3, 64,4, 64,3, 35,9, 34,8, 31,4. EM: No se observó ningún pico de ion molecular por los métodos de IEN+ y EI.

4-Metil-4-vinilciclohexanona (19). A una solución agitada de 2 (1,98 mmol, 360 mg) en acetona (7,76 ml) se le añadió una solución acuosa al 10 % de ácido clorhídrico (3,02 ml) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2,5 horas. Después, la mezcla de reacción se diluyó con salmuera (40 ml) y se extrajo con cloruro de metileno/éter etílico (1:2, 3 x 30 ml). Las fases orgánicas se combinaron y se lavaron con una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (2 x 30 ml) y salmuera (1 x 30 ml), después se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron al vacío para dar 19 (251,6 mg, 1,92 mmol, 94 %) en forma de un aceite de color amarillo que se eluyó en la siguiente reacción sin purificación adicional: RMN 1H (CDCl3) 5 5,89 (1H, dd, J = 0,5, 17,3 Hz), 5,15 (1H, dd, J = 1, 3,5 Hz), 5,12 (1H, dd, J = 0,5, 10 Hz), 2,42-2,28 (4H, m), 1,97-1,91 (2H, m), 1,74-1,68 (2H, m), 1,12 (3H, s); RMN 13C (CDCl3) 5 212,4, 145,5, 112,9, 38,2, 37,1, 27,4; EM (EI) m/z 138,1 [M+], 123,1, 110,1, 105,1, 97,1, 86,0 (100 %), 68,1, 63,0, 54,9; HRMS (EI) calc. para C9H14O 138,1045, encontrado 138,1048.

4-Metil-4-vinilciclohex-2-enona (20). En una atmósfera de nitrógeno, se enfrió una solución agitada de 19 (123,8 mg, 0,899 mmol) en THF seco (7,12 ml) a -78 ºC en un baño de hielo seco/isopropanol y se le añadió LDA (2 M en THF/n-heptano/etilbenceno, 672 1l, 1,34 mmol, 1,5 equiv.). Después, el baño de hielo seco se retiró y la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente durante 20 minutos. A la mezcla se le añadió una solución de cloruro de fenilselenenilo (350 mg, 1,79 mmol, 2 equiv.) en THF seco (2,2 ml) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La reacción se interrumpió con salmuera (10 ml) y después se extrajo con cloruro de metileno/éter etílico (1:2, 3 x 15 ml). Las fases orgánicas se combinaron y se lavaron con salmuera (1 x 25 ml), después se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron al vacío para dar un aceite de color amarillo. Después, este residuo se disolvió en cloruro de metileno (13,5 ml) y se le añadieron 3 porciones sucesivas de peróxido de hidrógeno (3 x 210 1l), dejando la mezcla 5 minutos en agitación a temperatura ambiente entre cada adición. Después de la tercera porción, la solución se volvió de color amarillo claro y ópticamente transparente. Después, la mezcla se diluyó con éter etílico (20 ml) y la fase orgánica se lavó con agua (1 x 10 ml), una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (2 x 10 ml) y salmuera (1 x 10 ml), después se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró al vacío para dar un aceite de color amarillo (153,8 mg). El producto en bruto se combinó con el material en bruto de una reacción idéntica previa (131,7 mg) y se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida [hexanos-acetato de etilo (7:1)] para dar un aceite de color amarillo (62,1 mg). Cuando el aceite se analizó por RMN 1H, se encontró que el material de partida 19, existía con el producto deseado 20 en una proporción 1:1,4. Por lo tanto, el producto purificado incluyó 0,204 mmol de 20, dando un rendimiento total del 16 %. RMN 1H (CDCl3) 5 6,63 (1H, d, J = 10 Hz), 5,99 (1H, d, J = 10,2 Hz), 5,83 (1H, dd, J = 6,5, 30 Hz), 5,12 (1H, ddd, J = 1, 13, 18 Hz), 5,02 (1H, dd, J = 1, 30 Hz), 2,5-2,26 (4H, m), 1,25 (3H, s); RMN 13C (CDCl3) 5 156,1, 142,7, 128,7, 114,5, 38,3, 34,9, 34,4, 27,2.

6-Hidroximetileno-4-metil-4-vinil-ciclohex-2-enona (21) y 6-hidroximetileno-4-metil-4-vinil- ciclohexanona (22). El producto de la reacción anterior (62,1 mg) se combinó con el producto purificado de una reacción idéntica y secuencia de purificación posterior (455 mg) que también se descubrió que contenía 19 (material de partida) en una proporción 1:1,4 con 20. A una solución de este material de partida (517 mg, 1,56 mmol 3, 202,18 mmol) en una atmósfera de argón en benceno seco (39 ml) se le añadió formiato de etilo (1,9 g, 26 mmol, 10 equiv. por mol 20, 5 equiv. por mol 19 (doble)), seguido de metóxido sódico (1,3 g, 24 mmol, 10 equiv. por mol 20, 5 equiv. por mol 19) y la solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Después, la mezcla de reacción se transfirió a un embudo de separación y se añadió una solución acuosa al 5 % de ácido clorhídrico y cloruro de metileno/éter etílico

(1:2) hasta que se observó la separación de las fases. Después, la fase orgánica se lavó con una solución acuosa al 5 % de ácido clorhídrico y los lavados acuosos combinados se extrajeron con cloruro de metileno/éter etílico (1:2, 3 x). Después, las fases orgánicas se combinaron y se lavaron con salmuera (3 x), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron al vacío para dar un aceite (500 mg). El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida [éter de petróleo-éter etílico (5:1), seguido de éter de petróleo-éter etílico (3:1) para eluir el producto restante] para obtener 22 (114 mg, 0,686 mmol, rendimiento del 43 % a partir de 19) y 5 (183,6 mg, 1,118 mmol, 50 % rendimiento a partir de 20) como fracciones separadas.

21: RMN 1H (CDCl3) 5 13,72 (1H, s a), 7,45 (1H, s a), 6,48 (1H, d, J = 10 Hz), 6,06 (1H, d, J = 10 Hz), 5,80 (1H, dd, J = 10,6, 17,2 Hz), 5,06 (1H, dd, J = 1, 4,4 Hz), 5,01 (J = 1, 11 Hz), 2,42 (2H, s), 1,22 (3H, s); RMN 13C (CDCl3) 5 188,8, 167,2, 164,6, 154,4, 143,0, 127,6, 113,7, 39,7, 36,2, 25,7; EM (IEN+) m/z 165,1 [M+H]+, HRMS (IEN+) calc. para C10H12O2 + H 165,0916, encontrado 165,0908.

22: RMN 1H (CDCl3) 5 14,41 (1H, s a), 8,60 (1H, s), 5,78 (1H, dd, J = 10,6 Hz, 17,2 Hz), 5,03 (1H, dd, J = 1, 4 Hz), 4,98 (1H, dd, J = 1,1, 10,6 Hz), 2,39-2,16 (4H, m), 1,70-1,50 (2H, m), 1,07 (3H, s); RMN 13C (CDCl3) 5 187,3, 184,8, 145,4, 112,4, 107,6, 35,6, 34,5, 32,2, 28,9, 26,2. EM: No se observó ningún pico de ion molecular por los métodos de IEN+ y EI.

5-metil-5-vinil-4,5-dihidro-benzo[d]isoxazol (23). A una solución agitada de 21 (177 mg, 1,078 mmol) en etanol (15 ml) en una atmósfera de nitrógeno, se le añadió una solución de clorhidrato de hidroxilamina (741 mg, 10,66 mmol, 10 equiv.) en agua (1 ml). La mezcla de reacción se calentó a reflujo a 115 ºC durante 1 hora. Después, se añadió agua a la mezcla hasta que se volvió turbia y la mezcla acuosa se extrajo con cloruro de metileno/éter etílico (1:2, 4 x). Después, las fases orgánicas se combinaron y se lavaron con una solución saturada de bicarbonato sódico (1 x) y salmuera (1 x), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron al vacío para dar 23 (159,7 mg, 0,99 mmol, 92 %) en forma de un aceite. El producto se usó en la siguiente reacción sin purificación adicional: RMN 1H (CDCl3) 5 8,03 (1H, s), 6,52 (1H, dd, J = 0,6, 10 Hz), 5,87 (1H, d, J = 10 Hz), 5,81 (1H, d, J = 10,6 Hz), 5,04 (1H, dd, J = 0,6, 18,3 Hz), 5,00 (1H, dd, J = 1,2, 11,4 Hz), 2,69 (2H, dd, J = 16,2, 34,8 Hz) 1,23 (3H, s); RMN 13C (CDCl3) 5 165,0, 148,8, 143,6, 141,6, 114,4, 112,7, 109,5, 40,4, 31,4, 26,0; EM (IEN+) m/z 162,1 [M+H]+, HRMS (IEN+) calc. para C10H11NO + H 162,0919, encontrado 169 0913.

3-metil-6-oxo-3-vinil-ciclohexa-1,4-dienecarbonitrilo (Compuesto de referencia MCE-15). En una atmósfera de argón, se añadió una solución de 23 (155 mg, 0,962 mmol) en éter etílico anhidro (17 ml) a una solución agitada de metóxido sódico (1,6 g, 29,61 mmol, 30 equiv.) en metanol seco y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Después, la mezcla de reacción se diluyó con cloruro de metileno/éter etílico (1:2, 120 ml) y la solución se lavó con una solución acuosa al 5 % de ácido clorhídrico (2 x). Los lavados ácidos se combinaron y se extrajeron con cloruro de metileno/éter etílico (1:2, 30 ml). Después, todas las fases orgánicas se combinaron, y se lavaron con agua (2 x) y salmuera (1 x), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron al vacío para dar 24 en forma de un aceite de color amarillo (148,8 mg, 96 %).

Los cálculos para la siguiente etapa de reacción se realizaron asumiendo que la etapa anterior dio un rendimiento cuantitativo. En una atmósfera de nitrógeno, el sólido de color amarillo (80 mg, 0,5 mmol) se disolvió en benceno seco (4 ml) y se añadieron DDQ (150 mg, 0,661 mmol, 1,33 equiv.). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 10 minutos. Cuando se comprobó por cromatografía de capa fina, todavía quedaba un poco de material de partida. Por lo tanto, se añadió más cantidad de DDQ (40 mg, 0,176 mmol) y la mezcla de reacción se agitó de nuevo a reflujo durante 10 minutos. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y el material insoluble se retiró por filtración a través de una pipeta Pasteur con algodón y lavando con benceno. El filtrado se concentró al vacío para dar un residuo de color naranja (400 mg). Después el residuo en bruto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida [éter de petróleo-éter etílico (1:1)] para dar MCE-15 (48 mg, 0,301 mmol, 61 %) en forma de un sólido cristalino: RMN 1H (CDCl3) 5 7,51 (1H, d, J = 3 Hz), 6,90 (1H, dd, J = 3, 10,2 Hz), 6,34 (1H, d, J = 10,2 Hz), 5,73 (1H, dd, J = 10,2, 17,7 Hz), 5,27 (1H, d, J = 10,5 Hz), 5,21 (1H, d, J = 17,4 Hz), 1,46 (3H, s); RMN 13C (CDCl3) 5 179,0, 163,8, 153,8, 136,7, 126,8, 110,1, 116,1, 114,0, 45,0, 24,1; EM (IEN+) m/z 160,1 [M+H]+, HRMS (IEN+) calc. para C10H9NO+ H 160,0762, encontrado 160,0755.

Ejemplo 5 - Síntesis y Caracterización de MCE-13

MCE-13 se sintetizó como se describe a continuación y se resume en el Esquema 5.

8-Bencil-1,4-dioxa-espiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo (25). En una atmósfera de nitrógeno, se añadieron gota a gota LDA (2 M en THF/n-heptano/etilbenceno, 20 ml, 40 mmol, 1,5 equiv.) con agitación a una solución de 2 (5,8 g, 27 mmol) en tetrahidrofurano seco (THF, 60 ml) se enfrió a -78 ºC en un baño de hielo seco/isopropanol. La mezcla se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente durante 20 minutos. La mezcla de reacción se enfrió de nuevo a -78 ºC y se añadió una solución de bromuro de bencilo (5,42 g, 32 mmol, 1,17 equiv.) en THF seco (15 ml) usando una bomba de jeringa durante 20 minutos. Después, la mezcla de reacción se agitó a -78 ºC en el baño de hielo seco/isopropanol durante 1 hora. Después de calentar a temperatura ambiente, la mezcla se diluyó con éter etílico (100 ml) y la fase orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (2 x 50 ml) y salmuera (1 x 50 ml), después se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró al vacío para dar un residuo de color pardo (14,9 g) en forma de un material en bruto. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida [hexanos-acetato de etilo (4:1)] para dar 25 (6,67 g, 81 %) en forma de un aceite. RMN 1H (CDCl3) 5 7,28-7,18 (3H, m), 7,07-7,04 (2H, m), 4,08 (4H, c, J = 7,1 Hz), 3,94 (4H, s), 2,83 (2H, s), 2,17-2,14 (2H, m), 1,72-1,53 (6H, m); RMN 13C (CDCl3) 5 175,5, 137,3, 130,0, 128,2, 126,8, 108,8, 64,5, 64,4, 60,5, 47,9, 46,7, 33,9, 32,3, 31,7, 26,5, 14,3; EM (IEN+) m/z 305,2 [M+H]+, HRMS (IEN+) calc. para C18H24O4 + H 305,1753, encontrado 305,1753.

(8-Bencil-1,4-dioxa-espiro[4,5]dec-8-il)-metanol (26). Una muestra de 25 (687,6 mg, 2,26 mmol) se disolvió en éter etílico anhidro (48,8 ml) a 0 ºC en una atmósfera de nitrógeno y con agitación. A esto se le añadió hidruro de litio y aluminio (214,4 mg, 5,64 mmol, 2,5 equiv.) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de verificar la finalización de la reacción por cromatografía de capa fina, se añadieron sucesivamente agua (3,6 ml), una solución acuosa al 40 % de hidróxido sódico (2,56 ml) y más cantidad de agua (5,2 ml) a la mezcla mientras se agitaba para desactivar el exceso de hidruro de litio y aluminio. La solución resultante se filtró, después se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró de nuevo y se concentró al vacío para dar un aceite incoloro (1,50 g). El producto en bruto se combinó con el material en bruto de una reacción idéntica previa (84,8 mg) y se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida [hexanos-acetato de etilo (5:1)] para dar 26 (609,6 mg, 2,32 mmol, 91 %) en forma de un aceite: RMN 1H (CDCl3) 5 7,31-7,19 (5H, m), 3,96 (4H, t, J = 2,3 Hz), 3,37 (2H, d, J = 4,8 Hz), 2,71 (2H, s), 1,81-1,51 (8H, m), 1,34 (1H, s a); RMN 13C (CDCl3) 5138,6, 130,6, 128,3, 126,3, 109,2, 66,3, 64,5, 40,7, 30,7, 30,0; EM (IEN+) m/z 263,1 [M+H]+, HRMS (IEN+) calc. para C16H22O3 + H 263,1647, encontrado 263,1640.

8-bencil-1,4-dioxa-espiro[4,5]decano-8-carbaldehído (27). En una atmósfera de nitrógeno y con agitación, se añadió óxido de cromo (IV) sólido (140 mg, 1,40 mmol, 7 equiv.), a una solución de extra piridina seca (220 1l, 2,72 mmol, 13,6 equiv.) en cloruro de metileno seco (2,44 ml) enfriada a 0 ºC en un baño de hielo. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos y se le añadió una solución de 3 (52,0 mg, 0,2 mmol) en cloruro de metileno seco (0,4 ml + enjuague (3 x 5 ml)). Después de agitar a temperatura ambiente durante 30 minutos, la mezcla de reacción se decantó en un embudo de separación y el residuo se lavó con éter etílico (1,67 ml + 1,3 ml + 1,3 ml). Después, la fase orgánica se lavó con una solución acuosa al 5 % de hidróxido sódico (3 x 1,67 ml), una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (3 x 1,67 ml) y salmuera (3 x 1,67 ml). La solución resultante se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró al vacío para dar un sólido de color blanco (29,7 mg). El sólido se disolvió en un mínimo de hexanos-acetato de etilo (3:1) y se combinó con el producto en bruto de una reacción idéntica posterior (364,7 mg), después se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida [hexanos-acetato de etilo (3:1)] para dar 27 (332,8 mg, 1,27 mmol, 61 %) en forma de un aceite incoloro por encima de un sólido amorfo de color blanco. Nota, se recuperó más cantidad de material impuro (33,9 mg) y se conservó para purificación a una fecha posterior, dando un rendimiento total del 65 %. RMN 1H (CDCl3) 5 9,55 (1H, s), 7,32-.04 (5H, m), 3,93 (4H, s), 2,78 (2H, s), 1,68-1,47 (8H, m).

8-Bencil-8-etinil-1,4-dioxaspiro[4,5]decano (28). En una atmósfera de nitrógeno, se añadieron carbonato potásico (343 mg, 2,48 mmol, 2 equiv.) seguido de una solución de 27 (324 mg, 1,24 mmol) en metanol seco (10 ml) a una solución agitada de dimetil-1-diazo-2-oxopropilfosfonato recién preparada (397 mg, 2,06 mmol, 1,5 equiv.) (Müller, et al.) en metanol seco (10 ml) enfriada en un baño de hielo. La mezcla de reacción se agitó en el baño de hielo durante 30 minutos y después se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La reacción se interrumpió con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (28,6 ml) y se extrajo con cloruro de metileno (4 x 57 ml). Las fases orgánicas se combinaron y se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se secaron al vacío para dar un sólido de color beige (351,3 mg). El producto en bruto se combinó con el producto de una reacción idéntica previa (36,3 mg) y se disolvió en hexanos-acetato de etilo (5:1). Se encontró que el material era únicamente un ligeramente soluble, mostrando la cromatografía de capa fina que los cristales insolubles (86,9 mg) eran aproximadamente producto puro. Por tanto, los cristales se separaron por decantación, y el material insoluble se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida [hexanos-acetato de etilo (5:1)] para dar un sólido cristalino de color blanco (212,6 mg). Las dos muestras cristalinas se combinaron para dar el producto puro 28 (299,5 mg, 1,17 mmol, 85 %): RMN 1H (CDCl3) 5 7,32-7,21 (5H, m), 3,94 (4H, dd, J = 2,5, 3 Hz), 2,76 (2H, s), 2,20 (1H, s), 2,01-1,91, 1,76-1,56 (8H, m); RMN 13C (CDCl3) 5 137,6, 130,8, 127,9, 126,7, 110,0, 108,9, 87,9, 72,3, 64,5, 64,4, 48,1, 37,0, 35,1, 31,8. EM (ES+) m/z 257,1 [M+H]+, HRMS (IEN+) calc. para C17H20O2 + H 257,1542, encontrado 257,1541.

((8-Bencil-1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-il)etinil)trimetilsilano (29). En una atmósfera de nitrógeno y con agitación a 0 ºC, se añadió gota a gota metillitio (1,6 M en hexanos, 4,78 ml, 7,65 mmol, 9,2 equiv.) a una solución de 28 (212,6 mg, 0,829 mmol) en THF seco (9,56 ml). Después, el baño de hielo se retiró y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 25 minutos. A la mezcla se le añadió gota a gota una solución de cloruro trimetilsililo (3,24 ml, 24,87 mmol, 30 equiv.) en THF seco (3,9 ml) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 45 minutos. Durante este tiempo, la solución se volvió opaca y de color amarillo pálido. Después, la reacción se inactivó con agua (15 ml) y la fase acuosa se extrajo con cloruro de metileno/éter etílico (1:2, 3 x 15 ml). Las fases orgánicas se combinaron y se lavaron con una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (1 x 15 ml) y salmuera (1 x 15 ml), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron al vacío para dar 29 (243,1 mg, 0,74 mmol, 89 %) en forma de cristales de color amarillo pálido. El producto se usó en la siguiente reacción sin purificación adicional: RMN 1H (CDCl3) 5 7,32-7,30 (5H, m), 3,95 (4H, dd, J = 2,5, 3,5 Hz), 2,72 (2H, s), 2,00-1,90, 1,71-1,50 (8H, m), 0,14 (9H, s); RMN 13C (CDCl3) 5 137,8, 130,9, 127,7, 126,5, 110,6, 109,1, 88,2, 64,5, 64,4, 48,2, 38,0, 35,2, 31,9, 0,36. EM (EI) m/z 328,1 [M+], 284,2, 237,2, 193,1, 99,1 (100 %), 73,1, 59,0; HRMS (EI) calc. para C20H28O2Si 328,1859, encontrado 328,1856.

4-Bencil-4-((trimetilsilil)etinil)ciclohexanona (30). Una muestra de 29 (243,1 mg, 0,74 mmol) se disolvió en acetona (2,89 ml) para dar una solución translúcida de color amarillo. A la solución se añadió una solución de una solución acuosa al 10 % de ácido clorhídrico (1,15 ml) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 horas. Después, la mezcla se diluyó con salmuera (25 ml) y la fase acuosa se extrajo con cloruro de metileno/éter etílico (1:2, 3 x 20 ml). Las fases orgánicas se combinaron y se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (2 x 20 ml) y salmuera (1 x 20 ml), después se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró al vacío para dar el material en bruto 30 en forma de cristales de color amarillo pálido (195 mg). Los cristales se combinaron con el producto en bruto de una reacción previa (62,5 mg) y se purificaron por cromatografía en columna ultrarrápida [hexanos-acetato de etilo (5:1)] para dar 30 en forma de cristales de color blanco (197,1 mg, 0,69 mmol, 74 %). Nota, una fracción impura se recogió y se conservó para una futura purificación. RMN 1H (CDCl3) 5 7,31-7,24 (5H, m), 2,81 (2H, s), 2,74 (2H, td, J = 6, 14,5 Hz), 2,30 (2H, dt, J = 2, 15 Hz), 2,00 (2H, dt, J = 3, 14 Hz), 1,68 (2H, dt, J = 4, 13,5 Hz), 0,17 (9H, s); RMN 13C (CDCl3) 5 211,7, 137,1, 130,8, 128,0, 126,9, 109,0, 47,6, 38,6, 38,0, 37,2, 0,29. EM (IEN+) m/z 285,1 [M+H]+, HRMS (IEN+) calc. para C18H24OSi + H 285,1675, encontrado 285,1661,

4-Bencil-4-((trimetilsilanil)etinil)ciclohex-2-enona (31). En una atmósfera de nitrógeno, y con agitación, se suspendió una muestra de 30 (50 mg, 0,176 mmol) en THF seco (1,4 ml) y la solución se enfrió a -78 ºC en un baño de hielo seco/isopropanol. A la mezcla en agitación se le añadió gota a gota diisopropilamida de litio (LDA, 2 M en THF/n-heptano/etilbenceno, 132 1l, 0,26 mmol). Después, el baño de isopropanol se retiró y la mezcla se dejó alcanzar temperatura ambiente durante 20 minutos. La mezcla se enfrió de nuevo a -78 ºC y se añadió gota a gota una solución de cloruro de fenilselenenilo (66,5 mg, 0,347 mmol, 2 equiv.) en THF seco (0,42 ml). El baño de isopropanol se retiró y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Durante este tiempo, apareció un precipitado de color amarillo, indicando la formación de cloruro de litio sólido. Después, la reacción se inactivó con salmuera (5 ml) y la fase acuosa se extrajo con diclorometano/éter etílico (1:2, 3 x 4 ml). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera (1 x 4 ml), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron al vacío para dar un residuo color amarillo oscuro-pardo. Este residuo se disolvió en éter etílico (2,82 ml) y se añadió peróxido de hidrógeno (acuoso al 30 %, 3 x 42,3 1l) en 3 porciones sucesivas, dejando la mezcla en agitación durante 5 minutos entre cada adición. Después de añadir la tercera porción, el color de la mezcla cambió de pardo a amarilló pálido y translúcido. Después, la mezcla de reacción se lavó con agua (1 x 4 ml), una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (2 x 4 ml) y salmuera (1 x 4 ml). Las fases orgánicas se combinaron y se secó sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron al vacío para dar el producto en bruto en forma de un aceite de color amarillo (43,1 mg). El material en bruto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida [hexanos-acetato de etilo (5:1)] para dar 31 (19,2 mg, 0,068 mmol, 39 %) en forma de un aceite transparente: RMN 1H (CDCl3) 5 7,34-7,24 (5H, m), 6,74 (1H, dd, J = 1,5, 10 Hz), 5,94 (1H, dd, J = 0,6, 10 Hz), 2,98 (1H, d, J = 13 Hz), 2,89 (1H, d, J = 13 Hz), 2,46 (2H, dt, J = 5, 17 Hz), 2,08 (2H, td, J = 1,5, 6 Hz), 0,16 (9H, s); RMN 13C (CDCl3) 5 209,1, 199,1, 152,1, 135,9, 130,9, 128,2, 128,1, 127,3, 109,0, 106,1, 89,4, 46,4, 38,5, 35,0, 34,5, 0,11; EM (IEN+) m/z 283,1 [M+H]+, HRMS (IEN+) calc. para C18H22OSi + H 283,1518, encontrado 283,1508.

5-Bencil-5-((trimetilsilil)etinil)-4,5-dihidrobenzo[d]isoxazol (32). En una atmósfera de argón, se añadieron sucesivamente formiato de etilo (110,6 1l, 1,33 mmol, 5 equiv.), después metóxido sódico (71,7 mg, 1,33 mmol, 3 equiv.) a una solución de 31 (75 mg, 0,265 mmol) en benceno seco (3,07 ml). Esta mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora, tiempo durante el cual sucedió un cambio de color de naranja a rojo-pardo. Después, la mezcla se diluyó con una mezcla de cloruro de metileno/éter etílico (1:2, 20 ml) y se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (2 x 8 ml). Los lavados acuosos se combinaron y se extrajeron con cloruro de metileno/éter etílico (1:2, 3x 10 ml). Después, las fases orgánicas se combinaron y se lavó con salmuera (1 x 10 ml), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron al vacío para dar 4-bencil-6-hidroximetileno-4-((trimetilsilil)etinil)ciclohex-2-enona (83 mg, 100 %) en forma de un aceite de color amarillo-pardo. El producto se usó en la siguiente reacción sin purificación adicional: RMN 1H (CDCl3) 5 13,67 (1H, s a), 7,45 (1H, s a), 7,23-7,16 (5H, m), 6,51 (1H, dd, J = 1, 10,5 Hz), 5,98 (1H, d, J = 10 Hz), 2,84 (1H, d, J = 13 Hz), 2,68 (1H, d, J = 13 Hz), 2,57 (1H, dd, J = 1, 14,5 Hz), 2,40 (1H, d, J = 15 Hz); RMN 13C (CDCl3) 5 187,5, 168,7, 151,4, 136,0, 130,8, 128,5, 128,1, 127,2, 127,1, 109,9, 108,0, 44,4, 38,9, 34,6, 0,10.

En una atmósfera de nitrógeno, una solución de 4-bencil-6-hidroximetileno-4-((trimetilsilil)etinil)ciclohex-2- enona (76 mg, 0,245 mmol) en etanol (6,13 ml) se añadió a una solución agitada de clorhidrato de hidroxilamina (177,6 mg, 2,53 mmol, 10,3 equiv.) en agua (256 1l) a temperatura ambiente. La mezcla se calentó a 120 ºC y se agitó a reflujo durante 1 hora. Después de calentar, la mezcla de reacción se diluyó con agua (10 ml) y la fase acuosa se extrajo con diclorometano/éter etílico (1:2, 3 x 10 ml). Después, las fases orgánicas se combinaron y se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (1 x 10 ml) y salmuera (2 x 10 ml), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron al vacío para dar el producto en bruto en forma de un aceite de color amarillo-pardo (76,4 mg). El material en bruto se purificó en primer lugar disolviendo el producto en éter de petróleo/éter etílico (5:1) y decantando la porción soluble del sólido insoluble. El material insoluble se lavó varias veces con éter de petróleo/éter etílico (5:1) y se encontró por cromatografía de capa fina (TLC) que el licor madre resultante contenía el compuesto deseado. Las aguas madre se purificaron por cromatografía en columna ultrarrápida [éter de petróleo-éter etílico (5:1)] para dar 32 (17,1 mg, 0,055 mmol, 22 %) en forma de un aceite incoloro: RMN 1H (CDCl3) 5 8,09 (1H, s), 7,32-7,22 (5H, m), 6,56 (1H, dd, J = 1, 10 Hz), 6,0 (1H, d, J = 10 Hz), 2,96 (1H, d? J = 16 Hz), 2,94 (1H, d, J = 13 Hz), 2,83 (1H, d, J = 16 Hz), 2,73 (1H, d, J = 13 Hz), 0,16 (9H, s); RMN 13C (CDCl3) 5 164,4, 148,7, 139,3, 135,0, 131,0, 128,0, 127,1, 114,4, 109,1, 88,4, 44,2, 39,2, 30,3, 0,13. EM (IEN+) m/z 308,1 [M+H]+, HRMS (IEN+) calc. para C19H21NOSi + H 308,1471, encontrado 308,1467.

3-Bencil-3-etinil-6-oxociclohexa-1,4-dienecarbonitrilo (MCE-13). En una atmósfera de argón y con agitación, una solución de 32 (17,1 mg, 0,055 mmol) en éter etílico anhidro (1,27 ml) se añadió a una solución de metóxido sódico (44,7 mg, 0,829 mmol, 15 equiv.) en metanol seco (1,03 ml). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Después, la mezcla de reacción se diluyó con cloruro de metileno/éter etílico (1:2, 10 ml) y se lavó con una solución acuosa al 5 % de ácido clorhídrico (2 x 5 ml). Las fases acuosas se combinaron y se extrajeron con cloruro de metileno/éter etílico (1:2, 3 x 8 ml). Después, las fases orgánicas se combinaron y se lavaron con agua (2 x 8 ml) y salmuera (1 x 8 ml), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron al vacío para dar un aceite de color amarillo (12,2 mg).

La siguiente etapa de reacción se calculó asumiendo que la última reacción dio un rendimiento cuantitativo. Se introdujo DDQ (11,76 mg, 0,0518 mmol, 1 equiv.) en un matraz que contenía dhMCE-13 (12,2 mg, 0,0518 mmol, 1 equiv.), y los contenidos del matraz se disolvieron en una atmósfera de nitrógeno en benceno seco (1,5 ml). La mezcla se calentó a reflujo y se agitó durante 20 minutos. Después, la mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y se filtró a través de una pipeta Pasteur con algodón y se enjuagó con benceno. La solución resultante se concentró al vacío para dar un producto en bruto de color naranja oscuro. El material en bruto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida [hexanos-acetato de etilo (2:1)] para dar MCE-13 (6,5 mg, 0,0277 mmol, 54 %) en forma de un sólido de color blanco: RMN 1H (CDCl3) 5 7,50 (1H, d, J = 3 Hz), 7,34-7,33 (3H, m), 7,20-7,18 (2H, m), 6,92 (1H, dd, J = 3, 10 Hz), 6,34 (1H, d, J = 10 Hz), 3,32 (1H, d, J = 13 Hz), 3,20 (1H, d, J = 13 Hz), 2,53 (1H, s).

Ejemplo de Referencia 6 - Síntesis y Caracterización del Compuesto de Referencia MCE-6 y Compuesto de referencia MCE-7

MCE-6 y MCE-7 se sintetizaron como se describe a continuación y se resume en el Esquema 6.

Protocolo para la síntesis de 34: A una solución agitada de 33 (1,5 mmol, 472 mg) en THF seco (14 ml) se le añadió gota a gota a 0 ºC, en una atmósfera de N2, MeLi (1,6M en hexanos, 4 equiv., 6 mmol, 3,75 ml). La solución de color

amarillo se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. Después se añadió gota a gota TMSC1 (98 %, 4 equiv., 6 mmol, 785 1l) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Después de la adición de 25 ml de H2O, las dos fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con Et2O/CH2Cl2: 2/1 (3 x 20 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una solución acuosa saturada de NaHCO3 (1 x 25 ml) y con salmuera (1 x 25 ml), se secaron sobre MgSO4 y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar 630 mg de un producto en bruto, en forma de un aceite de color amarillo. El material en bruto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (Hexanos/EtOAc: 10/1) para proporcionar 34 (518 mg, 89 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (CDCl3) 5 5,43-5,46 (m, 1H), 3,84-4,01 (m, 4H), 1,34 (s, 3H), 1,01 (s, 3H), 0,86 (s, 3H), 0,13 (s, 9H); RMN 13C (CDCl3) 5 148,3, 118,8, 115, 8, 113,4, 84,7, 65,1, 65,0, 52,1, 43,1, 42,6, 40,9, 40,4, 36,3, 35,5, 27,3, 26,3, 23,3, 23,2, 20,3, 19,7, 19,3, 0,3.

Protocolo para la síntesis de 35: A una solución agitada de 34 (0,914 mmol, 353 mg) en CH2Cl2 seco (4,6 ml) se le añadieron sucesivamente, en una atmósfera de N2, K2CO3 (0,5 equiv., 0,457 mmol, 63 mg) y Rh2(cap)4 (0,5 %, 0,00455 mmol, 3 mg). A la suspensión de color azul se le añadió t-BuOOH en una vez (5 M en decano, 5 equiv., 4,57 mmol, 910 μl) de manera que la mezcla se volvió inmediatamente de color rojo púrpura. Después de 1h y 15 min de agitación a temperatura ambiente, todavía se añadieron Rh2(cap)4 (0,5 %, 0,00455 mmol, 3 mg) después t-BuOOH en una vez (5 M en decano, 5 equiv., 4,57 mmol, 910 1l). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una hora más. La mezcla se filtró a través de una capa de sílice con CH2Cl2/MeOH: 95/5 para deshacerse del catalizador. El filtrado se concentró a presión reducida para dar 682 mg de material en bruto en forma de un residuo de color púrpura. El material en bruto se purificó por cromatografía ultrarrápida (Hexanos/EtOAc: 5/1) para proporcionar 35 (175 mg, 47 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (CDCl3) 5 5,86 (s, 1H), 3,87-4,38 (m, 4H), 2,77-2,85 (ddd, 1H, J = 4,5, 15,0, 17 Hz), 2,35-2,40 (dt, 1H, J = 2,7, 17 Hz), 2,17-2,21 (dt, 1H, J = 3,0, 12,8 Hz), 2,05-2,10 (ddd, 1H, J = 2,6, 4,4, 12,8 Hz), 1,80-1,96 (m, 3H), 1,61-1,75 (m, 4H), 1,43-1,50 (m, 2H), 1,40 (s, 3H), 1,04 (s, 3H), 0,89 (s, 3H), 0,13 (s, 9H); RMN 13C (CDCl3) 5 201,1, 172,7, 122,4, 112,6, 109,1, 87,2, 65,2, 65,1, 50,7, 42,9, 42,5, 41,7, 39,3, 36,9, 34,9, 34,6, 27,0, 23,3, 23,1, 20,5, 19,3, 0,1.

Protocolo para la síntesis de 36: Una solución agitada de 35 (0,307 mmol, 123 mg) en THF seco (1,5 ml) se enfrió a -78 ºC y se añadió LDA (2 M en THF/heptano, 1,4 equiv., 0,43 mmol, 215 1l). La mezcla de color pardo se agitó a temperatura ambiente durante 20 min y después se enfrió de nuevo a -78 ºC. Se añadió una solución turbia de p-TsCN (95 %, 1,7 equiv., 0,522 mmol, 100 mg) en THF seco (1 ml) y la mezcla se agitó a -78 ºC durante 45 min. Después, se añadió una solución acuosa saturada de NH4OH (1,5 ml) y se dejó que la mezcla alcanzara temperatura ambiente. Se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una solución acuosa saturada de NaHCO3 (1 x 10 ml) y con salmuera (1 x 10 ml), se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida para dar 158 mg de un producto en bruto en forma de un aceite de color pardo. Esta reacción se consideró completa y el material en bruto se disolvió directamente en una atmósfera de N2 en benceno seco (9 ml). Se añadió DDQ (98 %, 1,5 equiv., 0,460 mmol, 106 mg) y la suspensión de color pardo se calentó a reflujo a 100 ºC durante 10 min. Después de enfriar a temperatura ambiente, la suspensión se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para dar 230 mg de material en bruto en forma de un aceite de color pardo. El material en bruto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (CH2Cl2/Acetona: 100/1) para proporcionar 36 (75 mg, 57 %) en forma de sólido de color rosa pálido. RMN 1H (CDCl3) 5 7,34 (s, 1H), 6,24 (s, 1H), 3,86-4,01 (m, 4H), 2,78-2,31 (dt, 1H, J = 3,0, 12,5 Hz), 2,01-2,09 (m, 1H), 1,93-1,99 (m, 1H), 1,80-1,85 (m, 2H), 1,65-1,71 (m, 2H), 1,48-1,53 (m, 1H), 1,48 (s, 3H), 1,38-1,41 (dd, 1H, J = 2,0, 12,5 Hz), 1,06 (s, 3H), 0,88 (s, 3H), 0,16 (s, 9H); RMN 13C (CDCl3) 5 180,4, 168,9, 160,7, 121,5, 113,9, 112,2, 109,9, 101,2, 92,4, 65,2, 65,1, 51,6, 43,2, 42,3, 40,7, 40,1, 34,6, 27,0, 23,3, 21,5, 20,2, 18,9, -0,3.

Protocolo para la síntesis de 37 (Compuesto de referencia MCE-6): Una suspensión de 36 0,177 mmol, 75 mg) en metanol (3,5 ml) se calentó a reflujo para conseguir una disolución total. Después, se añadió una solución acuosa al 10 % de HCl (2 ml) a la solución caliente y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 15 min. Después de neutralización a un pH neutro con Et3N para conseguir un pH neutro, la mezcla se concentró al vacío. El residuo de color blanco se disolvió en H2O (5 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una solución acuosa saturada de NaHCO3 (1 x 10 ml) y con salmuera (1 x 10 ml), se secaron sobre MgSO4 y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para dar 78 mg de material en bruto en forma de un sólido de color pardo pálido. El material en bruto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (CH2Cl2/Acetona: 100/1) para proporcionar 37 (58 mg, 86 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (CDCl3) 5 7,37 (s, 1H), 6,24 (s, 1H), 2,75-2,82 (ddd, 1H, J = 6,7, 12,7, 16,5 Hz), 2,51-2,56 (ddd, 1H, J = 2,7, 5,7, 16,5 Hz), 2,33-2,37 (dt, 1H, J = 3,1, 12,8 Hz), 2,18-2,27 (m, 1H), 2,08-2,13 (ddd, 1H, J = 2,7, 6,7, 12,8 Hz), 1,81-1,91 (m, 2H), 1,65 (s, 3H), 1,50-1,55 (m, 1H), 1,43-1,46 (dd, 1H, J = 2,7, 12,2 Hz), 1,18 (s, 3H), 1,13 (s, 3H), 0,10 (s, 9H); RMN 13C (CDCl3) 5 214,2, 180,0, 167,1, 160,4, 122,3, 114,2, 113,7, 100,7, 93,1, 53,8, 48,1, 41,9, 40,7, 39,4, 36,3, 34,2, 26,2, 22,1, 20,7, 20,0, -0,3.

Protocolo para la síntesis del Compuesto de referencia MCE-7: Una solución de TBAF (98 %, 3 equiv., 0,336 mmol, 90 mg) en THF (850 1l) se añadió a 37. La solución de color amarillo se agitó a temperatura ambiente durante 15 min. Después de dilución en EtOAc (8 ml), la fase orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de NaHCO3 (2 x 4 ml). Las fases acuosas básicas se extrajeron con EtOAc (2 x 4 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (1 x 7 ml), se secaron sobre MgSO4 y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para conseguir 48 mg de material en bruto en forma de un sólido de color amarillo pálido. El material en bruto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (CH2Cl2/Acetona: 99/1) para proporcionar MCE-7 (28 mg, 81 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (CDCl3) 5 7,40 (s, 1H), 6,27 (s, 1H), 2,77-2,84 (ddd, 1H, J 6,7, 12,7, 16,5 Hz), 2,53 (s, 1H), 2,51-2,57 (ddd, 1H, J = 2,7, 6,0, 19,2 Hz), 2,38-2,42 (dt, 1H, J = 3,1, 12,8 Hz), 2,23-2,29 (m, 1H), 2,10-2,14 (ddd, 1H, J = 2,7, 6,7, 12,8 Hz), 1,84-1,92 (m, 1H), 1,66 (s, 3H), 1,53-1,59 (m, 1H), 1,44-1,47 (dd, 1H, J = 2,5, 7,5 Hz), 1,18 (s, 3H), 1,14 (s, 3H); RMN 13C (CDCl3) 5 214,1, 179,8, 166,7, 160,2, 122,5, 114,6, 113,4, 80,4, 75,6, 53,8, 48,1, 41,9, 39,5, 39,4, 36,2, 34,2, 26,2, 22,2, 20,7, 20,0.

5 Rendimiento total de MCE-7 (a partir de 33): 16 %.

Reference Ejemplo 7 - Síntesis y Caracterización del Compuesto de Referencia MCE-12

10 MCE-12 se sintetizó como se describe a continuación y se resume en el Esquema 7.

Protocolo para la síntesis de 34: A una solución agitada de 33 (2 mmol, 629 mg) en THF seco (18 ml) se le añadió gota a gota a 0 ºC, en una atmósfera de N2, MeLi (1,6 M en hexanos, 3 equiv., 6 mmol, 3,75 ml). La solución de color amarillo se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. Después, se añadió gota a gota TMSCl (98 %, 3 equiv., 6 mmol, 780 1l) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Después de la adición de 20 ml de H2O, las dos fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con Et2O/CH2Cl2: 2/1 (3 x 25 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una solución acuosa saturada de NaHCO3 (1 x 25 ml) y con salmuera (1 x 25 ml), se secaron sobre MgSO4 y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar 34 (738 mg, 95 % en bruto) de un material en bruto en forma de un sólido de color amarillo. El material en bruto se usó para la siguiente etapa de desacetilación sin purificación adicional.

Protocolo para la síntesis de A3: Una suspensión de 34 (1,91 mmol, 738 mg) en metanol (40 ml) se calentó a 60 ºC para conseguir una disolución total. Después, se añadió una solución acuosa al 10 % de HCl (8 ml) a la solución caliente y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. Después de neutralización a pH neutro con Et3N para conseguir un pH neutro, la mezcla se concentró al vacío. El residuo de color blanco se disolvió en H2O (20 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 25 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una solución acuosa saturada de NaHCO3 (1 x 25 ml) y con salmuera (1 x 25 ml), se secaron sobre MgSO4 y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para dar 683 mg de material en bruto en forma de un sólido de color amarillo pálido. El material en bruto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (Hexanos/EtOAc: 10/1) para proporcionar A3 (537 mg, 82 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (CDCl3) 5 5,47-5,49 (dd, 1H, J = 3,0, 5,0 Hz), 2,68-2,75 (ddd, 1H, J = 6,7, 12,7, 15,9 Hz), 2,39-2,44 (ddd, 1H, J = 3,0, 5,7, 15,9 Hz), 1,84-2,14 (m, 7H), 1,72-1,78 (td, 1H, J = 6,0, 12,7 Hz), 1,54-1,66 (m, 2H), 1,47 (s, 3H), 1,31-1,38 (m, 2H), 1,23-1,29 (td, 1H, J = 3,5, 13,0 Hz), 1,11 (s, 3H), 1,08 (s, 3H), 0,14 (s, 9H); RMN 13C (CDCl3) 5 217,3, 147,2, 120,1, 115,1, 85,3, 54,2, 47,9, 42,5, 40,7, 40,2, 37,4, 36,3, 34,9, 26,3, 26,1, 22,7, 22,0, 20,7, 19,2, 0,3.

Síntesis de A4. A una solución de A3 (589 mg, 1,69 mmol) en i-propanol (20 ml) se le añadió i-propóxido de aluminio (2,89 g, 14,2 mmol). La mezcla se calentó a reflujo durante una noche. A la mezcla de reacción se añadió una solución acuosa al 5 % de HCl (25 ml). La mezcla acuosa se extrajo con cloruro de metileno (25 ml x 4). El extracto se lavó con bicarbonato sódico acuoso saturado (35 ml x 1) y salmuera (35 ml x 1), se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se evaporó al vacío para dar un sólido cristalino (570 mg). El sólido se purificó por cromatografía ultrarrápida [hexanos-acetato de etilo (10:1, 7:1 y 5:1)] para dar A4 en forma de un sólido cristalino (190 mg, 32 %): RMN 1H (CDCl3) 5 5,48 (1H, t, J = 3,6 Hz), 3,43 (1H, d, J = 3,3 Hz), 1,32, 0,97, 0,92 (cada uno 3H, s), 0,13 (9H, s).

Síntesis de A5. A una solución de A4 (308 mg, 0,89 mmol) en cloruro de metileno seco (12 ml) se le añadió cloruro de 2-(trimetilsilil)etoximetilo (SEMCI, 480 1l, 2,7 mmol). Posteriormente, se añadió lentamente N,N-diisopropiletilamina (DIEA, 740 1l, 4,48 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reacción se diluyó con cloruro de metileno (35 ml) y agua (10 ml). La fase orgánica se separó y se lavó con salmuera (10 ml x 1), se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se evaporó al vacío para dar un sólido cristalino (733 mg). El sólido se purificó por cromatografía ultrarrápida [hexanos-acetato de etilo (10:1)] para dar A5 en forma de un aceite (424 mg, 100 %): RMN 1H (CDCl3) 5 5,45 (1H, dd, J = 2,5 y 4,5 Hz), 4,74 (1H, d, J = 7,3 Hz), 4,64 (1H, d, J = 7,3 Hz), 3,65 (2H, m), 3,27 (1H, s), 1,31, 0,94, 0,92 (cada uno 3H, s), 0,13, 0,02 (cada uno 9H, s); RMN 13C (CDCl3) 5 148,6, 118,4, 94,0, 91,8, 84,5, 82,1, 65,2, 48,6, 43,1, 41,0, 40,6, 38,3, 36,4, 32,0, 28,9, 26,3, 23,3, 22,7, 22,6, 19,4, 19,2, 18,3, 0,4, -1,2.

Síntesis de A6. A una solución de A5 (424 mg, 0,89 mmol) en cloruro de metileno (9 ml) se le añadió hidroperoxido de t-butilo (70 % en agua, 1,28 ml, 8,93 mmol), seguido de trióxido de cromo (115 mg, 1,15 mmol) en un baño de hielo. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla de reacción se diluyó con cloruro de metileno/éter (1:2, 30 ml) y agua (5 ml). La mezcla se lavó con una solución acuosa al 5 % de NaOH (15 ml x 1), una solución acuosa al 5 % de HCl (15 ml x 1), una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (15 ml x 1), y salmuera (15 ml x 1), se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se evaporó al vacío para dar un residuo de color pardo (529 mg). El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida [hexanos-acetato de etilo (7:1)] para dar A6 en forma de un sólido amorfo (236 mg, 54 %): RMN 1H (CDCl3) 5 5,87 (1H, s), 4,72 (1H, d, J = 7,3 Hz), 4,63 (1H, d, J = 7,3 Hz), 3,65 (2H, m), 3,29 (1H, s), 2,81, 2,37, 2,18, 2,07 (cada uno 1H, m), 1,37, 0,98, 0,96 (cada uno 3H, s), 0,13, 0,02 (cada uno 9H, s); RMN 13C (CDCl3) 5 201,2, 173,2, 122,2, 109,3, 94,0, 87,0, 81,2, 65,4, 47,2, 42,5, 41,9, 39,4, 38,6, 37,0, 34,8, 31,2, 28,8, 23,2, 22,8, 22,3, 18,9, 18,3, 0,1, -1,2.

Síntesis de A7. A una solución de A6 (49 mg, 0,10 mmol) en THF seco (325 1l) se le añadió LDA (solución 2 M en THF/n-heptano/etilbenceno, 60 1l, 0,12 mmol) a -78 ºC (en un baño de hielo seco/i-propanol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 20 min. A la mezcla se le añadió lentamente una solución turbia de p-TsCN (95 %, 31,3 mg, 0,17 mmol) en THF seco (490 1l) a -78 ºC. La mezcla se agitó a -78 ºC durante 45 min y después se añadió lentamente una solución saturada de cloruro de amonio (490 1l). La mezcla se dejó alcanzar temperatura ambiente y se añadió más cantidad de una solución saturada de cloruro de amonio (2 ml). La mezcla se extrajo con acetato de etilo (6 ml x 3). El extracto se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (8 ml x 1) y salmuera (8 ml x 1), se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se evaporó al vacío para dar un residuo (51 mg).

La mezcla del residuo y DDQ (28 mg, 0,122 mmol) en benceno seco (2,3 ml) se calentó a reflujo durante 30 min. Después de la retirada del material insoluble, el filtrado se evaporó al vacío para dar un aceite residual (76 mg). El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida [cloruro de metileno-acetona (130:1)] para dar A7 en forma de un sólido cristalino (20 mg, 40 %): RMN 1H (CDCl3) 5 7,33 (1H, s), 6,25 (1H, s), 4,71 (1H, d, J = 7,3 Hz), 4,61 (1H, d, J = 7,3 Hz), 3,62 (2H, m), 3,30 (1H, s a), 1,46, 0,99, 0,97 (cada uno 3H, s), 0,16, 0,02 (cada uno 9H, s).

Síntesis de A8. Una suspensión de A7 (38 mg, 0,074 mmol) en una solución acuosa al 48 % de HF /CH3CN (1:10, 2,7 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. La mezcla de reacción se diluyó con cloruro de metileno/éter (1:2, 10 ml), se lavó con agua (5 ml x 3), una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (5 ml x 1), y salmuera (5 ml x 1), se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se evaporó al vacío para dar A8 en forma de un sólido cristalino (25 mg, 88 %): RMN 1H (CDCl3) 5 7,33 (1H, s), 6,26 (1H, s), 3,48 (1H, s a), 2,30 (1H, m), 2,01 (4H, m), 1,45, 0,99, 0,98 (cada uno 3H, s), 0,16 (9H, s); RMN 13C (CDCl3) 5 180,5, 169,3, 160,9, 121,4, 114,0, 109,9, 101,4, 92,3, 75,4, 47,5, 42,6, 40,9, 40,3, 38,8, 30,7, 28,7, 25,6, 22,4, 21,4, 18,8, -0,2. Este material se usó para la siguiente etapa sin purificación

5 adicional.

Síntesis de Compuesto de referencia MCE-12. Una mezcla de A8 (25 mg, 0,065 mmol) y fluoruro de tetra-(n-butil)amonio (TBAF, 52 mg, 0,20 mmol) en THF (500 1M) se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. La mezcla se diluyó con acetato de etilo (8 ml) y se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (4 ml x 10 2). Los lavados básicos acuosos se extrajeron con acetato de etilo (4 ml x 2). El extracto y la solución orgánica original se combinaron. La solución orgánica combinada se lavó con salmuera (8 ml) x 1), se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se evaporó al vacío para dar un sólido amorfo (19 mg). El sólido se purificó por cromatografía ultrarrápida [hexanos-acetato de etilo (1:1)] para dar MCE-12 en forma de un sólido cristalino (14 mg, 70 %): RMN 1H (CDCl3) 5 7,36 (1H, s), 6,29 (1H, s), 3,49 (1H, t, J = 2,5 Hz), 2,46 (1H, s), 2,35 (1H, m), 2,08 (2H, m), 1,96 (1H, m), 1,78 (2H, m),

15 1,48, 1,00, 0,98 (cada uno 3H, s); RMN 13C (CDCl3) 5 180,2, 168,8, 160,7, 121,5, 114,3, 113,7, 80,9, 75,4, 75,1, 47,5, 42,6, 40,2, 39,7, 38,7, 30,7, 28,6, 25,6, 22,3, 21,4, 18,8. Reference Ejemplo 8 - Síntesis y Caracterización de Compuestos de referencia MCE-8, MCE-9, MCE-10 y MCE-11

20 MCE-8-11 se sintetizaron como se describe a continuación y se resume en el Esquema 8.

Protocolo para la síntesis de B4: A una solución agitada de A3 (1,57 mmol, 537 mg) en MeOH seco (25 ml) se le añadió NaBH4 (98 %, 2 equiv., 3,14 mmol, 121 mg). La mezcla se calentó a reflujo durante 15 min en una atmósfera de N2. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se concentró al vacío para obtener un residuo de color blanco. El residuo se diluyó en CH2Cl2 (35 ml) y se lavó con H2O (2 x 15 ml). Las fases orgánicas combinadas se extrajeron con CH2Cl2 (2 x 10 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (1 x 15 ml), se secaron sobre MgSO4 y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para dar 560 mg de material en bruto en forma de un sólido de color pardo pálido. El material en bruto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (Hexanos/EtOAc: 5/1) para proporcionar B4 (420 mg, 77 %) en forma de un sólido de color blanco amorfo. RMN 1H (CDCl3) 5 5,43-5,44 (dd, 1H, J = 2,5, 5,0 Hz), 3,17-3,24 (m, 1H), 1,30 (s, 3H), 0,99 (s, 3H), 0,85 (s, 3H), 0,13 (s, 9H); RMN 13C (CDCl3) 5 148,6, 118,7, 115,5, 84,8, 79,0, 53,7, 43,2, 40,9, 40,6, 39,4, 36,9, 36,3, 28,5, 27,9, 26,3, 23,4, 19,6, 19,2, 15,8, 0,3.

Protocolo para la síntesis de B5: A una solución agitada de B4 (0,725 mmol, 250 mg) en CH2Cl2 seco (10 ml) se le añadieron sucesivamente SEM-Cl (90 %, 3 equiv., 2,175 mmol, 430 1l) y DIEA (5 equiv., 3,625 mmol, 600 1l). La mezcla se agitó en una atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente durante una noche. Se volvió ligeramente de color amarillo. Después de diluir con CH2Cl2 (30 ml), la fase orgánica se lavó con H2O (2 x15 ml) y con salmuera (1 x 15 ml), se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida para dar 538 mg de material en bruto en forma de una mezcla de aceite de color amarillo/sólido. El material en bruto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (Hexanos/EtOAc: 10/1) para proporcionar B5 (384 mg) en forma de un aceite incoloro. Un residuo de SEM-Cl permaneció después de la purificación. Se considera que la reacción fue cuantitativa (344 mg, 100 %) para la siguiente etapa. RMN 1H (CDCl3) x 5,41-5,43 (1H, dd, J = 3,0, 4,5 Hz), 4,80 (d, 1H, J = 7,0 HZ), 4,67 (D, 1H, J = 7,0 HZ), 3,60-3,68 (M, 2H), 3,07-3,12 (dd, 1H, J = 4,2, 11,7 Hz), 1,30 (s, 3H), 0,95 (s, 3H), 0,87 (s, 3H), 0,13 (s, 9H), 0,02 (s, 9H); RMN 13C (CDCl3) 5 148,7, 118,6, 115,6, 94,2, 84,7, 84,6, 65,2, 54,1, 43,3, 40,9, 40,5, 39,2, 36,8, 36,3, 28,5, 26,3, 24,5, 23,4, 19,6, 19,3, 18,3, 16,7, 0,3, -1,2.

Protocolo para la síntesis de B6: A una solución agitada de B5 (0,725 mmol, 344 mg) en CH2Cl2 a 0 ºC se le añadieron sucesivamente t-BuOOH (70 % en agua, 5 equiv., 3,625 mmol, 500 1l) y CrO3 (0,7 equiv., 0,508 mmol, 51 mg). El baño de hielo se retiró y la mezcla de color púrpura se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Después, se añadieron t-BuOOH (70 % en agua, 5 equiv., 3,625 mmol, 500 1l) y CrO3 (0,7 equiv., 0,508 mmol, 51 mg) se le añadieron sucesivamente a 0 ºC y la mezcla se agitó durante una hora más. Después de diluir con Et2O/CH2Cl2: 2/1 (50 ml), la capa orgánica se lavó sucesivamente con una solución acuosa al 10 % de NaOH (1 x 20 ml), con una solución acuosa al 5 % de HCl (1 x 20 ml), con una solución acuosa saturada de NaHCO3 (1 x 20 ml) y con salmuera (1 x 20 ml), se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida para dar 410 mg de material en bruto en forma de un aceite de color rojo púrpura. El material en bruto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (Hexanos/EtOAc: 7/1) para proporcionar B6 (191 mg, 54 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (CDCl3) 5 5,84 (s, 1H), 4,79 (d, 1H, J = 7 Hz), 4,66 (d, 1H, J = 7 Hz), 3,65 (t, 2H, J = 8,5 Hz), 3,08-3,12 (dd, 1H, J = 4,0, 12,0 Hz), 2,78-2,85 (ddd, 1H, J = 4,7, 15,0, 17,1 Hz), 2,36-2,40 (dt, 1H, J = 3,0, 17,0 Hz), 2,19-2,23 (dt, 1H, J = 3,0, 12,8 Hz), 2,07-2,11 (ddd, 1H, J = 3,1, 4,6, 12,8 Hz), 1,81-1,97 (m, 4H), 1,63-1,74 (m, 2H), 1,35-1,44 (m, 1H), 1,37 (s, 3H), 1,25-1,28 (m, 1H), 0,98-1,03 (m, 1H), 0,99 (s, 3H), 0,86-0,96 (m, 2H), 0,91 (s, 3H), 0,13 (s, 9H), 0,02 (s, 9H); RMN 13C (CDCl3) 5 201,1, 172,8, 122,4, 109,3, 94,3, 87,2, 83,9, 63,4, 52,9, 42,7, 41,8, 39,5, 39,3, 36,9, 36,0, 34,9, 28,4, 24,2, 23,2, 19,2, 18,3, 16,9, 0,1, -1,2.

Protocolo para la síntesis del Compuesto de Referencia MCE-8: Una solución agitada de B6 (0,333 mmol, 163 mg) en THF seco (1,4 ml) se enfrió a -78 ºC y se añadió LDA (2 M en THF/heptano, 1,4 equiv., 0,466 mmol, 230 1l). La mezcla de color pardo se agitó a temperatura ambiente durante 20 min y después se enfrió de nuevo a -78 ºC. Una solución turbia de p-TsCN (95 %, 1,7 equiv., 0,556 mmol, 108 mg) en THF seco (1,3 ml) se añadió y la mezcla se agitó a -78 ºC durante 45 min. Después, se añadió una solución acuosa saturada de NH4OH (1,6 ml) y se dejó que la mezcla alcanzara temperatura ambiente. Se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una solución acuosa saturada de NaHCO3 (1 x 8 ml) y con salmuera (1 x 8 ml), se secaron sobre MgSO4 y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para dar 198 mg de un producto en bruto en forma de un aceite de color naranja. Esta reacción se consideró que estaba completa y el material en bruto se disolvió directamente, en una atmósfera de N2, en benceno seco (10 ml). Se añadió DDQ (98 %, 1,0 equiv., 0,460 mmol, 77 mg) y la suspensión de color pardo se calentó a reflujo a 100 ºC durante 30 min. Después de enfriar a temperatura ambiente, la suspensión se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para dar 220 mg de material en bruto en forma de un aceite de color pardo. El material en bruto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (CH2Cl2/Acetona: 140/1) para proporcionar MCE-8 (89 mg, 52 %) en forma de sólido de color rosa pálido. RMN 1H (CDCl3) 5 7,34 (s, 1H), 6,21 (s, 1H), 4,79 (d, 1H, J = 7,0 Hz), 4,66 (d, 1H, J = 7,0 Hz), 3,63-3,67 (m, 2H), 3,08-3,11 (dd, 1H, J = 4,5, 11,5 Hz), 2,30-2,33 (dt, 1H, J = 3,0, 12,5 Hz), 1,46 (s, 3H), 1,0 (s, 3H), 0,94 (s, 3H), 0,16 (s, 9H), 0,02 (s, 9H); RMN 13C (CDCl3) 5 180,4, 169,1, 160,7, 121,4, 114,0, 113,9, 101,1, 94,3, 92,4, 83,6, 65,4, 54,0, 42,3, 40,7, 40,2, 39,8, 36,0, 28,4, 24,1, 21,6, 18,9, 18,3, 16,7, -0,3, -1,2.

Rendimiento total de MCE-8 (a partir de 33): 32 %

Protocolo para la síntesis del Compuesto de Referencia MCE-9: Una suspensión de MCE-8 (0,09 mmol, 46 mg) en HF (acuoso al 48 %)/CH3CN: 1/10 (3,15 ml) se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se diluyó con Et2O/CH2Cl2: 2/1 (15 ml) y se lavó con agua (3 x 8 ml), con una solución acuosa saturada de NaHCO3 (3 x 8 ml), se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar 37 mg de producto en bruto en forma de un sólido de color blanco. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (Hexanos/EtOAc: 1,5/1) para proporcionar MCE-9 (29 mg, 85 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (CDCl3) 5 7,35 (s, 1H), 6,21 (s, 1H), 3,21-3,23 (m, 1H), 2,30-2,34 (dt, 1H, J = 3,2, 12,5 Hz), 2,04-2,12 (m, 1H), 1,72-.1-90 (m, 4H), 1,65 (s a, 1H), 1,47-1,58 (m, 2H), 1,45 (s, 3H), 1,03 (s, 3H), 0,91-0,94 (m, 1H), 0,93 (s, 3H), 0,16 (s, 9H); RMN 13C (CDCl3) 5 180,4, 167,0, 160,7, 121,4, 114,0, 113,9, 101,1, 92,5, 78,0, 53,6, 42,4, 40,7, 40,2, 39,9, 36,1, 28,4, 27,3, 21,6, 18,9, 15,8, -0,3.

Rendimiento total de MCE-9 (a partir de 33): 27 %.

Protocolo para la síntesis del Compuesto de Referencia MCE-10: Una solución de TBAF (98 %, 3 equiv., 0,150 mmol, 40 mg) en THF (380 1l) se añadió a MCE-9 (0,0497 mmol, 19 mg) y la mezcla de color amarillo se agitó a temperatura ambiente durante 15 min. Después, la mezcla se diluyó con EtOAc (8 ml) y se lavó con una solución acuosa saturada de NaHCO3 (2 x 4 ml). Las fases acuosas combinadas se combinaron y se extrajeron con EtOAc (2 x 4 ml). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera (1 x 8 ml), se secaron sobre MgSO4 y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para dar 19 mg de producto en bruto en forma de un aceite de color amarillo/residuo sólido. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (Hexanos/EtOAc: 1/1), seguido de una TLC preparativa (Hexanos/EtOAc: 1/1) para proporcionar MCE-10 (8 mg, 53 %) en forma de cristales de color blanco. RMN 1H (CDCl3) 5 7,38 (s, 1H), 6,24 (s, 1H), 2,22-2,25 (dd, 1H, J = 5,0, 11,0 Hz), 2,48 (s, 1H), 2,34-2,38 (dt, 1H, J = 3,2, 12,7 Hz), 2,05-2,15 (m, 1H), 1,73-1,93 (m, 4H), 1,60 (s a, 1H), 1,45-1,58 (m, 2H), 1,48 (s, 3H), 1,03 (s, 3H), 0,93-0,96 (m, 1H), 0,93 (s, 3H); RMN 13C (CDCl3) 5 180,1, 168,6, 160,6, 121,7, 114,4, 113,7, 80,7, 78,1, 75,3, 53,6, 42,5, 40,2, 40,0, 39,6, 36,1, 28,5, 27,4, 21,7, 19,0, 15,9.

Rendimiento total de MCE-10 (a partir de 33): 14 %.

Protocolo para la síntesis del Compuesto de Referencia MCE-11: Una mezcla de MCE-8 (27 mg, 0,053 mmol) y TBAF (40 mg, 0,15 mmol, 2,9 equiv.) en THF (405 1l) se agitó a temperatura ambiente durante 45 min. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (8 ml) y se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (4 ml x 4). Los lavados se extrajeron con EtOAc (4 ml x 2). El extracto y la solución orgánica original se combinaron, y después se lavaron con salmuera (8 ml x 1), se secaron sobre MgSO4 y se filtraron. El filtrado se evaporó al vacío para dar un aceite de color amarillo (24 mg). El aceite se purificó por cromatografía ultrarrápida [hexanos-acetato de etilo (4:1)] para dar MCE-11 en forma de un sólido amorfo (12 mg, 51 %): RMN 1H (CDCl3) 5 7,37 (s, 1H), 6,23 (s, 1H), 4,80 (d, 1H, J = 7,3 Hz), 4,56 (d, 1H, J = 7,3 Hz), 3,65 (dd, 2H, J = 7,0, 9,7 Hz), 0,10 (dd, 1H, J = 4,5, 11,5 Hz), 2,47 (s, 1H), 2,35 (dt, 1H, J = 3,2, 12,7 Hz), 2,10 (m, 1H), 1,68-1,99 (m, 4H), 1,61 (s a, 1H), 1,48 (s, 3H), 1,03 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 0,02 (s, 9H); RMN 13C (CDCl3) 5 180,1, 168,7, 160,6, 121,6, 114,4, 113,7, 94,3, 83,6, 80,7, 75,2, 65,4, 53,9, 42,3, 40,1, 40,0, 39,8, 39,6, 36,0, 28,4, 24,1, 21,7, 18,9, 18,3, 16,7, -1,2.

Ejemplo 9 - Síntesis propuesta de Compuestos 38 y 39

El compuesto 38 puede sintetizarse como se describe a continuación y se resume en el Esquema 9.

Por ejemplo, el compuesto 38 puede sintetizarse a partir del compuesto conocido 2 (Phansavath et al., 1998) mediante la secuencia de reacción que se muestra en el Esquema 9. La adición nucleófila de enolato de 2 a bromuro de

homobencilo daría 40. La reducción de 40 con LiAlH4, seguido de oxidación con CrO3 daría 42. La reacción de Wittig de 42 con cloruro de (clorometil)trifenilfosfonio (Mella et al., 1988 ), seguido de deshidrocloración con MeLi y tratamiento posterior con clorotrimetilsilano (TMSCl) (Corey et al., 1973) proporcionaría 43. El cetal de 43 se retiraría en condiciones ácidas para producir 44. La enona 45 se prepararía mediante la adición un grupo fenilselenilo a un

5 enolato de litio de 44 y posterior oxidación/eliminación con peróxido de hidrógeno acuoso al 30 %. Un compuesto diana 38 se obtendría por cianación de 45 con cianuro de p-toluenosulfonilo (p-TsCN), seguido de oxidación de DDQ y posterior retirada del grupo TMS en condiciones ácidas.

De forma análoga, el compuesto 39 (mostrado más abajo) puede sintetizarse usando 1-bromo-2,2-difeniletano, que se

10 prepara a partir de 2,2-difeniletanol disponible en el mercado (Ohno et al., 2005) en lugar de bromuro de homobencilo en el Esquema 9 anterior.

Ejemplo 10 - Síntesis propuesta del Compuesto 46 15 El Compuesto 46 puede sintetizarse como se describe a continuación y se resume en el Esquema 10.

El Compuesto 46 que tiene un grupo t-butilo se ha designado como un compuesto con un grupo hidrófobo típico. El Compuesto 46 se sintetizaría a partir de 2 usando 1-bromo-3,3-dimetilbutano (Hsiao et al., 1988) en lugar de bromuro de homobencilo en el Esquema 9 anterior.

Ejemplo 11 - Síntesis propuesta del Compuesto 48 El Compuesto 48 puede sintetizarse como se describe a continuación y se resume en el Esquema 11.

El Compuesto 48, que tiene un grupo dimetilenamino, se sintetizaría a partir de 2 mediante la secuencia de reacción que se muestra en el Esquema 11. El Compuesto 49 se prepararía por adición nucleófila del enolato de 2 a Br(CH2)2NHBoc disponible en el mercado. El Compuesto 50 se obtendría a partir de 49 por la misma secuencia que para 43 a partir de 40 (véase Esquema 9). El cetal de 50 se retiraría en condiciones ácidas y la posterior reprotección 5 con Boc2O daría 51. La enona 52 se prepararía mediante la adición de un grupo fenilselenilo a enolato de litio de 51 y posterior oxidación/eliminación con peróxido de hidrógeno acuoso al 30 %. El Compuesto 48 (sal clorhidrato) se obtendría por cianación de 52 con p-TsCN, seguido de oxidación de DDQ y tratamiento posterior con HCl en metanol.

Ejemplo 12 - Síntesis propuesta del Compuesto 53

10 El Compuesto 53 puede sintetizarse como se describe a continuación y se resume en el Esquema 12.

El Compuesto 53, que tiene un grupo trimetilenamino, se sintetizaría a partir de 2 como se muestra en el Esquema 12 anterior. La adición nucleófila del enolato de 2 a 3-bromopropionitrilo disponible en el mercado (Shuman et al., 1995) daría 54. La reducción de 54, seguido de protección con Boc2O, produciría 55. La cetona 57 se obtendría por medio de 56 a partir 55 por la misma secuencia que para 51. Un clorhidrato de amina diana 53 se prepararía a partir de 57 por la misma secuencia que para 48 a partir de 51.

El alcohol 58 y el ácido 59 pueden sintetizarse por la secuencia que se muestra en el Esquema 13. La adición nucleófila del enolato de 2 a bromuro de vinilo daría 60. El Compuesto 61 se obtendría a partir de 60 por la misma secuencia que para 43 a partir de 40 (véase Esquema 9). La hidroboración de 61, seguido de protección de grupo hidroxilo, produciría 62. La retirada del cetal de 62, seguido de la adición del grupo fenilselenilo y posterior 5 oxidación/eliminación con peróxido de hidrógeno acuoso al 30 % daría la enona 63. El Compuesto 64 se produciría por cianacíón de 63 con p-TsCN, seguido de oxidación de DDQ. La desprotección de 64 proporcionaría el alcohol deseado

58. La oxidación de 58 daría el ácido 59 (por ejemplo, oxidación de Jones, oxidación de Ag2O del aldehído obtenido a partir de 58, etc).

10 Ejemplo 14 - Síntesis propuesta del Compuesto 66

El Compuesto 66 puede sintetizarse como se describe a continuación y se resume en el Esquema 14.

Por ejemplo, el Compuesto 66 se sintetizaría a partir de 2 mediante la secuencia de reacción que se muestra en el Esquema 14. El compuesto conocido 65 se prepara por adición nucleófila del enolato de 2 a bromuro de propargilo. El acoplamiento de Sonogashira entre 65 y 2-yodo-1-(trimetilsililetoximetoxi)imidazol (Paul et al., 2002) daría 67. El Compuesto 68 se obtendría a partir de 67 por la misma secuencia que para 43 a partir de 40 (véase Esquema 9).

5 Métodos habituales (retirada de un cetal, inserción de un doble enlace mediante la adición de grupo fenilselenilo y elimination oxidativa, cianación y oxidación de DDQ) daría 69. La retirada de los grupos SEM y TMS de 69 en ácido trifluoroacético (TFA) en THF daría 66, cuya sal clorhidrato es soluble en agua.

Ejemplo 15 - Síntesis propuesta de Compuestos de Fórmula VI

10 Los compuestos de fórmula VI, (por ejemplo, R = -Ph. -CH2Ph y -N=CHCH2Ph) pueden sintetizarse como se describe a continuación y se resume en el Esquema 15.

Una secuencia sintética fácil para los compuestos de fórmula VI se muestra en el Esquema 13. El material de partida V se protegería con benzaldehído (Clarke et al., 2004 ) para dar 70. La oxidación de Swern de 70 produciría el aldehído

71. El tratamiento de 71 con el reactivo de Bestmann-Ohira (Pietruszka et al., 2006) produciría el acetileno 72. La desprotección de 72, seguido de oxidación de Dess-Martin, proporcionaría 73. El Compuesto deseado VI se obtendría por condensación de aldol entre cianoacetona (Sauers et al., 2003 ) y 73. Los solicitantes indican que no tienen constancia de ningún informe anterior de un anillo de seis miembros por este método. Los materiales de partida V se obtendrían o prepararían fácilmente. Por ejemplo, los compuestos conocido 75a (V: R = fenilo) y 75b (V: R = bencilo) se preparan por condensación entre formaldehído y 2-feniletanal (74a) y 3-fenilpropanal (74b) en condiciones básicas, respectivamente (Rockendorf et al., 2002). También, el compuesto 77 (V: R = -N=CHCH2Ph) se sintetizaría por condensación entre 2-feniletanal (74a) y 76 disponible en el mercado.

Ejemplo 16 – Síntesis propuestas de Cianoenonas monocíclicas adicionales

Este Ejemplo contiene compuestos de la invención y compuestos de referencia según se especifique.

Pueden sintetizarse cianoenonas monocíclicas adicionales e intermedios de las mismas como se describe a continuación y se resume en los Esquemas 16-18.

En el Esquema 16, los compuestos de referencia C16 y C17 pueden sintetizarse a partir de C3 como se indica a continuación. La reacción de Grignard de bromuro de metilmagnesio con C3 daría terc-alcohol C32. C16 se obtendría a partir de C32 mediante la enona C33, por la misma secuencia que para MCE-15 a partir de 19 (véase Esquema 4). La deshidroxilación de C16 proporcionaría C17.

El compuesto de referencia C18 se sintetizaría a partir de C35 mediante C36 por la misma secuencia que para MCE-15 a partir de 19 (véase Esquema 4). El precursor C35 se obtendría a partir de 5 mediante C34 por reacción de Grignard de bromuro de fenilmagnesio, seguido de un método de deshidroxilación de Barton modificado.

El compuesto de referencia C19 se sintetizaría a partir de C3 mediante la misma secuencia que para MCE-15 a partir de 19 (véase Esquema 4). La hidrólisis alcalina de C19 daría el compuesto de referencia C20. El compuesto de referencia C21 se obtendría por tratamiento de C20 con cloruro de oxalilo, seguido de amidación con amoniaco.

El compuesto de referencia C22 se sintetizaría a partir de 5 como se indica a continuación. La condensación de 5 con hidroxilamina daría la oxima C38. La deshidratación de la oxima C38 produciría el nitrilo C39. La amina protegida C40 se prepararía por reducción de C39 con NaBH4-CoCl2 y posterior tratamiento con condiciones ácidas, seguido de protección con Boc2O. La enona C41 se obtendría por retirada del cetal de C40 y posterior protección del grupo amino con Boc2O, seguido de la adición de un grupo fenilselenilo y posterior oxidación/eliminación con peróxido de hidrógeno acuoso al 30 %. El compuesto de referencia C22 se produciría por cianación con p-TsCN y posterior oxidación de DDQ, seguido de desprotección en condiciones de ácido clorhídrico-MeOH.

El Compuesto C23 se sintetizaría a partir de C39 mediante C42 por la misma secuencia que para MCE-15 a partir de 19 (véase Esquema 4).

El Compuesto de referencia C24 se obtendría a partir de C43 mediante la misma secuencia que para MCE-15 a partir de 19 (véase Esquema 4). El precursor C43 se prepararía por protección del grupo hidroxilo de C4 con t-butilclorodimetilsilano (TBSCl). La retirada del grupo TBS de C24 con TBAF daría el compuesto de referencia C25.

El Compuesto de referencia C26 se sintetizaría a partir de C46 mediante la misma secuencia que para MCE-15 a partir de 19 (véase Esquema 4). El precursor C46 se prepararía por reacción de Grignard de bromuro de metilmagnesio con el aldehído 5, seguido de protección con TBSCl. La desprotección de C26 daría el compuesto de referencia C27. La oxidación de C27 con trióxido de cromo-piridina daría el compuesto de referencia C28.

Los compuestos C48-C53 se sintetizarían a partir de C2 de acuerdo con la misma secuencia que se muestra en el Esquema 17. Por ejemplo, C48 se sintetizaría en nueve etapas a partir de C56, que se obtendría por alquilación del éster enolato de litio C2 con yodoetano (reducción, oxidación, reacción de Wittig, deshidrocloración e inmovilización con TMSCl, desacetalización, inserción de doble enlace con PhSeCl y posterior oxidación/eliminación, cianación con p-TsCN, oxidación de DDQ y desprotección con TBAF).

Los compuestos de referencia C54 y C55 se sintetizarían como se indica a continuación. La cianación del éster enolato de litio C2 con PhOCN o p-TsCN daría C61. El Compuesto C62 se obtendría a partir de C61 en 4 etapas (reducción, oxidación, reacción de Wittig y deshidrocloración). La hidrólisis alcalina C62, seguido de tratamiento con yodometano proporcionaría el éster metílico C63. La enona C64 se produciría por retirada del cetal de C63, seguido de la adición de un grupo fenilselenilo y posterior oxidación/eliminación. El compuesto C54 se prepararía por cianación de C64 con p-TsCN y posterior oxidación de DDQ, seguido de desprotección. La hidrólisis alcalina de C54 produciría C55.

Los compuestos C65-C68 y C70 se sintetizarían a partir de 5 mediante la misma secuencia que se muestra en el Esquema 18. Por ejemplo, C65 se sintetizaría como se indica a continuación. La reacción de Wittig de 5 con cloruro de (clorometil)-trifenilfosfonio, seguido de deshidrocloración con MeLi y tratamiento posterior con una solución acuosa de NH4Cl daría C71. La metilación del acetiluro C71 con yodometano proporcionaría C72. C65 se obtendría en 4 etapas a partir de C72 (deacetalización, inserción de doble enlace, cianación con p-TSCN, oxidación de DDQ). C69 se sintetizaría a partir de C68 por hidrólisis alcalina.

Ejemplo de Referencia 17 -Síntesis propuesta de los Compuestos de Referencia de Fórmula VII

Los compuestos de fórmula VII, (por ejemplo, R = -CH2NH2 y -CO2H) pueden sintetizarse como se describe a continuación y se resume en los Esquemas 19 o 20.

El Compuesto de referencia D55 (VII: R = -CH2NH2) se sintetizaría a partir de un compuesto conocido D56 (Honda et al., 2005) mediante la secuencia de reacción que se muestra en el Esquema 19. La reacción de Schmidt en D56 daría D57 junto con la lactama (Finlay et al., 1997). La hidrogenólisis de D57, seguido de protección con Boc2O, produciría D58. El Compuesto D59 se prepararía por oxidación de D58, seguido de una reacción de Wittig y posterior inmovilización de acetiluro con TMSCI. La oxidación alílica mediada por cromo de D59 produciría D60. El compuesto deseado D55 se obtendría por cianación de D60, seguido de oxidación de DDQ y posterior retirada de los grupos Boc y TMS en condiciones ácidas.

De forma análoga, el compuesto de referencia D61 (VII: R = -CO2H) se sintetizaría a partir de D57 mediante la secuencia de reacción que se muestra en el Esquema 20. La hidrólisis de nitrilo de D57 en condiciones ácidas daría el ácido D62. La hidrogenólisis de D62, seguido de metilación, produciría el éster metílico D63. El Compuesto D65 se prepararía por medio de D64 a partir de D63 por la misma secuencia que para D60. El compuesto deseado D61 se obtendría por cianación de D65, seguido de oxidación de DDQ y posterior retirada de los grupos metilo y TMS en condiciones básicas.

Referencias

Patente de Estados Unidos 5.443.826 Patente de Estados Unidos 5.599.795 Patente de Estados Unidos 6.025.395 Solicitud de Patente de Estados Unidos 12/352.473 Publicación de Patente de Estados Unidos 2009/0060873

Abraham y Kappas, Free Radical Biol. Med., 39:1-25, 2005. Ahmad et al., Cancer Res., 68:2920-2926, 2008. Ahmad et al., J. Biol. Chem., 281:35764-35769, 2006. Akiyama et al., Alzheimer Dis. Assoc. Disord., 14(1):S47-53, 2000. Angulo et al., Eur. J. Immunol., 30:1263-1271, 2000. Araujo et al., J. Immunol., 171(3):1572-1580, 2003. Arend y Dayer, Arthritis Rheum., 38:151-160, 1995. Arend et al., Annu. Rev. Immunol., 16:27-55, 1998. Autenrieth et al., Infect. Immun., 62:2590-2599, 1994. Bach, Hum. Immunol., 67(6):430-432, 2006. Bagasra et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 92(26):12041-12045, 1995. Ball, Ann. Rheum. Dis., 30:213-223, 1971. Beal, Curr. Opin. Neurobiol., 6:661-666, 1996. Berendsen et al., Comp. Phys. Comm., 95: 43-56, 1995 Blumberg et al., Arthritis Rheum., 7:93-97, 1964. Botoman et al., Am. Fam. Physician, 57(1):57-68, 1998. Brandt et al., Arthritis Rheum., 43:1346-1352, 2000. Braun et al., Arthritis Rheum., 42:2039-2044, 1999. Brewerton et al., Lancet., 1:904-907, 1973a. Brewerton et al., Lancet., 1:956-957, 1973b. Bronte et al., Trends Immunol., 24:302-306, 2003. Brown y DuBois, Clin. Cancer Res., 10:4266s-4269s, 2005. Brynskov et al., N. Engl. J. Med., 321(13):845-850, 1989. Burger y Dayer, Neurology, 45(6S-6):S39-43, 1995. Cai et al., Nat. Med., 11 (2):183-190, 2005. Calin y Taurog, In: The Spondylarthritides, Calin et al., (Eds.), Oxford, UK. Oxford University Press, 179, 1998. Cann et al., Gut., 24(12):1135-1140, 1983. Chauhan y Chauhan, Pathophysiology, 13(3):171-181 2006. Chomarat et al., Arthritis Rheum., 38:1046-1054, 1995. Clarke et al., Tetrahedron, 60:3625-3636, 2004. Corey et al., Tetrahedron Lett., 1495-1499, 1973. Couch et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 15: 2215-2219, 2005. Coyle y Puttfarcken, Science, 262(5134):689-695, 1993. Crowell et al., Mol. Cancer Ther., 2:815-823, 2003. de Waal et al., J. Exp. Med., 174:1209-1220, 1991. Dickerson et al., Prog Neuropsychopharmacol Biol. Psychiatry, March 6, 2007. Dinarello, Int. Rev. Immunol., 16:457-499, 1998. Dinkova-Kostova et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 99(18):11908-11913,2002. Dinkova-Kostova et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 102(12):4584-4589,2005. Dionne et al., Clin. Exp. Imunol., 112(3):435-442, 1998. Doran et al., J. Rheumatol., 30(2):316-320, 2003. Drossman et al., Dig. Dis. Sci., 38(9):1569-1580, 1993. Drossman et al., Gastroenterol., 112(6):2120-2137, 1997. Dudhgaonkar et al., Eur. J. Pain, 10(7):573-9, 2006. Eastgate et al., Lancet, 2:706-709, 1988. Eikelenboom et al., Glia, 40(2):232-239, 2002. ttehadi et al., Clin. Exp. Immunol., 96(1):146-151, 1994. Everhart et al., Gastroenterol., 100(4):998-1005, 1991. Favaloro et al., J. Med. Chem., 45:4801-4805, 2002. Fearon y Locksley, Science, 272(5258):50-53, 1996. Feldtkeller et al., Rheumatol. Int., 23(2):61-66, 2003. Firestein et al., Arthritis Rheum., 37:644-652, 1994. Forstermann, Biol. Chem., 387:1521, 2006. Fujikawa et al., Ann. Rheum. Dis., 54:318-320, 1995. Funakoshi et al., Digestion, 59(1):73-78, 1998. Galley y Webster, Br. J. Anaesth., 77:11-16, 1996.

Gehrmann et al., Glia, 15(2):141-151, 1995. Genain y Nauser, J. Mol. Med., 75:187-197, 1997. Gladman et al., Br. J. Rheumatol., 22:675-679, 1995. Gladman et al., J. Med., 62:127-141, 1987. Gladman, Rheum. Dis. Clin. North Am., 18:247-256, 1992. Goodman et al., Kidney Int., 72(8):945-953, 2007. Graeber et al., Glia, 40(2):252-259, 2002. Greten et al., Cell, 118:285-296, 2004. Griffin et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 86(19):7611-7615, 1989. Guilherme et al., Nat. Rev. Mol. Cell Biol., 9(5):367-77, 2008. Gwee et al., Gut., 44(3):400-406, 1999. Hahn y Tsao, In: Dubois' Lupus Erythematosus, 4ª Ed, Wallace y Hahn (Eds.), Lea y Febiger, Philadelphia, 195-201, 1993. Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, and Use (Stahl y Wermuth Eds., Verlag Helvetica Chimica Acta, 2002). Hannum et al., Nature, 343:336-340, 1990. Hanson et al., BMC Medical Genetics, 6(7), 2005. Hansson y Anton, Annu. Rev. Entomol., 45, 203-231, 2006. Harrison et al., J. Rheumatol., 25(12):2324-2330, 1998. Hart et al., Immunology, 84:536-542, 1995. Honda et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 12:1027-1030, 2002. Honda et al., Bioorg Med Chem Lett., 16(24):6306-6309, 2006. Honda et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 7:1623-1628, 1997. Honda et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 8(19):2711-2714, 1998. Honda et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 9(24):3429-3434, 1999. Honda et al., J. Med. Chem., 43:4233-4246, 2000a. Honda et al., J. Med. Chem., 50:1731-1734, 2007. Honda et al., Org. Biomol. Chem., 1:4384-4391, 2003. Honda, et al., J. Med. Chem., 43:1866-1877, 2000b. Horwitz y Fisher, N. Engl. J. Med., 344(24):1846-1850, 2001. Hotamisligilo, Nature, 444(7121):860-7, 2006. Hsiao et al., J. Org. Chem., 53:2688-2699, 1988. Ishikawa et al., Circulation, 104(15):1831-1836, 2001. Ishizawa and Dickson, J. Neuropathol. Exp. Neurol., 60(6):647-657, 2001. Jailwala et al., Ann. Intern. Med., 133(2):136-147, 2000. Jarvis, Curr. Opin. Rheumatol., 10(5):459-467, 1998. Jarvis, Pediatr. Ann., 31(7):437-446, 2002. Jones et al., Br. J. Rheumatol., 33:834-839, 1994. Jonsson et al., Br. J. Rheumatol., 32(7):578-581 1993. Jonsson et al., Oral Dis., 8(3):130-140, 2002. Jonsson et al., Trends Immunol., 22(12):653-654, 2001. Kahle et al., Ann. Rheum. Dis., 51:731-734, 1992. Kaltschmidt et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 94:2642-2647, 1997. Karin et al., Nature Reviews, Drug Discovery. 3: 17-26, 2004. Kawakami et al., Brain Dev., 28(4):243-246, 2006. Kellow y Phillips, Gastroenterol., 92(6):1885-1893, 1987. Kendall-Tackett, Trauma Violence Abuse, 8(2):117-126, 2007. Khan, Clin. Exp. Rheumatol., 20(6):6-10, 1998. Khan, In: Ankylosing spondylitis and related spondyloarthropaties, Spine, State of the Art Reviews, 1990. Kortylewski et al., Cancer Metastasis Rev., 24:315-327, 2005. Kotake et al., Infect. Immun., 67:2682-2686, 1999. Kotzin y O'Dell, In: Samler's Immunologic Diseases, 5ª Ed., Frank et al., (Eds.), Little Brown & Co., Boston, 667-697, 1995. Kotzin, Cell, 85:303-306, 1996. Kruger et al., J. Pharmacol. Exp. Ther., 319(3):1144-1152, 2006. Kuboyama, Kurume Med. J., 45(1):33-37, 1998. Lahesmaa et al., J. Immunol., 148:3079-3085, 1992. Laskowski et al., J. Biomolecular RMN 8:477-486, 1996. Lee et al., Glia., 55(7):712-22, 2007. Lencz et al., Mol. Psychiatry, 12(6):572-80, 2007. Liby et al., Cancer Res., 65:4789-4798, 2005. Liby et al., Cancer Res., 68:6727-6733, 2008. Liby et al., Mol. Cancer Ther., 6(7), 2007b. Liby et al., Nat. Rev. Cancer, 7(5):357-69, 2007a. Lipsky, In: Harrison's principles of internal medicine, Fauci et al.,(Eds.), 14ª Ed., NY, McGraw-Hill, 1880-1888, 1998. Liu et al., FASEB J., 20(2):207-216, 2006.

Liu et al., Synlett, 1119-1122, 2000. Lo et al., Curr. Dir. Autoimmun., 1:226-246, 1999. Lugering et al., Ital. J. Gastroenterol. Hepatol., 30(3):338-344, 1998. Lynn y Friedman, N. Engl. J. Med., 329(26):1940-1945, 1993. Macatonia et al., J. Immunol., 150:3755-3765, 1993. March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, y Structure, 2007. Marsal et al., Rheumatology, 38:332-337, 1999. Mazur et al., Cell Microbiol., 9(7):1683-94, 2007. Mazzoni et al., J. Immunol., 168:689-695, 2002. McAlindon et al., Gut, 42(2):214-219, 1998. McGeer y McGeer, Brain Res. Brain Res. Rev., 21(2):195-218, 1995. McGeer et al., Neurology, 19:331-338, 1996. McGonagle et al., Arthritis Rheum., 41:694-700, 1998. McGonagle et al., Curr. Opin. Rheumatol., 11:244-250, 1999. McIver et al., Pain, 120(1-2):161-9, 2005. Mease et al., Lancet, 356:385-390, 2000. Mella et al., Tetrahedron, 44:1673-1678, 1988. Merrill y Benvenist, Trends Neurosci., 19:331-338, 1996. Mertz et al., Gastroenterol., 118(5):842-848, 2000. Moll y Wright, Ann. Rheum. Dis., 32:181-201, 1973. Morris et al., J. Mol. Med., 80(2):96-104, 2002. Morse y Choi, Am. J. Respir. Crit. Care Med., 172(6):660-670, 2005. Morse y Choi, Am. J. Respir. Crit. Care Med., 27(1):8-16, 2002. Müller et al., Synlett, 521-522, 1996. Muzart, Tetrahedron Lett., 28:4665-4668, 1987. Nath et al., Neurology, 66(1):149-150, 2006. Neal et al., BMJ., 314(7083):779-782, 1997. Nichols, Drug News Perspect., 17(2):99-104, 2004. Nielen et al., Arthritis Rheum., 50(2):380-386, 2004. Ohnishi et al., Int. Immunol., 6:817-830, 1994. Ohno et al., J. Med. Chem., 48:5279-5294, 2005. Pall, Med. Hypoth., 69:821-825, 2007. Paquette et al., Tetrahedron, 45:107-124, 1989. Partsch et al., Br. J. Rheumatol., 24:518-523, 1997. Paul et al., Inorg. Chem., 41:3699-3704, 2002. Phansavath et al., Synthesis, 436-443, 1998. Pica et al., Antimicrob A,gents Chemother., 44(1):200-204, 2000. Pietruszka et al., Synthesis, 4266-4268, 2006. Pimentel et al., Am. J. Gastroenterol., 95(12):3503-3506, 2000. Place et al., Clin. Cancer. Res., 9:2798-2806, 2003. Prieur et al., Lancet., 2:1240-1242, 1987. Rajakariar et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 104(52):20979-84, 2007. Rantapaa-Dahlqvist et al., Arthritis Rheum., 48(10):2741-2749, 2003. Reimund et al., Eur. J. Clin. Invest., 28(2):145-150, 1998. Ribbens et al., Eur. Cytokine Netw., 11:669-676, 2000. Rockendorf et al., Aust. J. Chem., 55:87-93, 2002. Rogers et al., Neurobiol Aging, 9(4):339-349, 1988. Rogler y Andus, World J. Surg., 22(4):382-389, 1998. Rooney et al., Rheumatol. Int., 10:217-219, 1990. Ross et al., Am. J. Clin. Pathol., 120(Suppl):S53-71, 2003. Ross et al., Expert Rev. Mol. Diagn., 3(5):573-585, 2003. Rostom et al., Ann. Intern. Med., 146, 376-389, 2007. Rothstein, Med. Clin. North Am., 84(5):1247-1257, 2000. Ruster et al., Scand. J. Rheumatol., 34(6):460-3, 2005. Sacerdoti et al., Curr Neurovasc Res. 2(2):103-111, 2005. Saiki et al., Scand. J. Gastroenterol., 33(6):616-622, 1998. Salomonsson y Jonsson, Arthritis Rheum., 48(11):3187-3201, 2003. Salomonsson et al., Scand. J. Immunol., 55(4):336-342, 2002. Salvarani et al., Curr. Opin. Rheumatol. 1998; 10:299-305, 1998. Salvemini et al., J. Clin. Invest., 93(5):1940-1947, 1994. Sandler, Gastroenterol., 99(2):409-415, 1990. Sarchielli et al., Cephalalgia, 26(9):1071-1079, 2006. Satoh et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 103(3):768-773, 2006. Sauers et al., J. Heterociclic Chem., 40:655-658, 2003. Schlaak et al., Clin. Exp. Rheumatol., 14:155-162, 1996. Schlaak et al., Eur. J. Immunol., 22:2771-2776, 1992.

Schlosstein et al., NE J. Medicine, 288:704-706, 1973. Schreiber, Neth. J. Med., 53(6):S24-31, 1998. Schulz et al., Antioxid. Redox. Sig., 10:115, 2008. Shuman et al., J. Med. Chem., 38:4446-4152, 1995. Sieper and Braun, Arthritis Rheum., 38:1547-1554, 1995. Simon et al., Clin. Exp. Immunol., 94:122-126, 1993. Simon et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 91:8562-85666, 1994. Simonian y Coyle, Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol., 36:83-106, 1996. Sinha et al., Cancer Res., 67:4507-4513, 2007. Smith et al., J. Org. Chem., 32:2851-2856, 1967. Sonogashira et al., Tetrahedron Lett., 4467-4470, 1975 Stack et al., Lancet, 349(9051):521-524, 1997. Stewart et al., Neurology, 48:626-632, 1997. Strejan et al., J. Neuroimmunol., 7:27, 1984. Suh, et al., Cancer. Res., 58:717-723, 1998. Suh, et al., Cancer. Res., 59:336-341, 1999. Szabo et al., Nature Rev. Drug Disc., 6:662-680, 2007. Takahashi et al., Cancer Res., 57:1233-1237, 1997. Talley et al., Gastroenterol., 109(6):1736-1741, 1995. Tamir and Tannenbaum, Biochim. Biophys. Acta., 1288:F31-F36, 1996. Targan et al., N. Engl. J. Med., 337(15):1029-1035, 1997. Third Report of the National Cholesterol Education Program Expert Panel on Detection, Evaluation and the treatment of High Blood Cholesterol in Adults (Adult Treatment Panel III, o ATP III), National Institutes of Health, NIH Publication Nº 01-3670, 2001. Touzani et al., J. Neuroimmunol., 100(1-2):203-215, 1999. Tu mlin et al., Am. J. Cardiol., 98(6A):14K-20K, 2006. Van den Berg, Semin. Arthritis Rheum., 30(5S-2):7-16, 2001. Van Dullemen et al., Gastroenterol., 109(1):129-135, 1995. Van Hogezand y Verspaget, Drugs, 56(3):299-305, 1998. Vazquez et al., J. Virol., 79(7):4479-91, 2005. Vodovotz et al., In; Handbook of Experimental Immunology, Volúmenes I-IV, 1996. Vriend, J. Mol. Graph., 8:52-56, 1990 Wardle, Nephrol. Dial. Transplant., 16(9):1764-8, 2001. Warrington et al., Arthritis and Rheumatism, 44:13-20, 2001. Weyand y Goronzy, Ann. NY Acad. Sci., 987:140-149, 2003. Whitehead et al., Gastroenterol., 98(5 Pt 1):1187-1192, 1990. Williams et al., Clin. Neurosci., 2(3-4):229-245, 1994. Wordsworth, In: Genes and Arthritis, Brit. Medical Bulletin, 51:249-266, 1995. Wright, Ann. Rheum. Dis., 15:348-356, 1956. Wright, Clin. Orthop. Related Res., 143:8-14, 1979. Xanthou et al., Arthritis Rheum., 44(2):408-418, 2001. Yin et al., Arthritis Rheum., 40:1788-1797, 1997. Yin et al., Rheumatology, 38:1058-1067, 1999. Yoh et al., Kidney Int., 60(4):1343-1353, 2001. Yu et al., Nat. Rev. Immunol., 7:41-51, 2007. Zhou et al., Am. J. Pathol., 166(1):27-37, 2005. Zhou et al., Cancer Sci., 98:882-889, 2007. Zingarelli et al., J. Immunol., 171(12):6827-6837, 2003.

Claims (14)

1. REIVINDICACIONES

   1. Un compuesto de la fórmula:

   en la que:

   5 R1 es alquilo(C 8), alquilo(C 8) sustituido, alquenilo(C 8), alquenilo(C 8) sustituido, alquinilo(C 8), alquinilo(C 8) sustituido, aralquilo(C 18), aralquilo(C 18) sustituido, heteroaralquilo(C 18), -L-R10, aralquilidenamino(C 12), aralquilidenamino(C 12) sustituido o ciano; L es alcanodiilo(C 6) o alcanodiilo(C 6) sustituido

   10 R10 es alquilo(C 8), alquilo(C 8) sustituido, arilo(C 12), arilo(C 12) sustituido, aralquilo(C 12) sustituido, aralquilo(C 12) sustituido, heteroarilo(C 12), heteroarilo(C 12) sustituido, heteroaralquilo(C 12), amino, alquilamino(C 8), alquilamino(C 8) sustituido, dialquilamino(C 8), dialquilamino(C 8) sustituido, hidroxi, alcoxi(C 8), alcoxi(C 8) sustituido, acilo(C 8), acilo(C 8) sustituido o -C=C-R11,

   15 R11 es hidrógeno, hidroxi, halo, amino, hidroxiamino, ciano, mercapto, tio, alquilo(C 8), alquilo(C 8) sustituido, alquenilo(C 8), alquenilo(C 8) sustituido, alquinilo(C 8), alquinilo(C 8) sustituido, arilo(C 8), arilo(C 8) sustituido, aralquilo(C 8), aralquilo(C 8) sustituido, heteroarilo(C 8), heteroaralquilo(C 8), acilo(C 8), acilo(C 8) sustituido, alcoxi(C 8), alcoxi(C 8) sustituido, alqueniloxi(C 8), alqueniloxi(C 8) sustituido, alquiniloxi(C 8), alquiniloxi(C 8) sustituido, ariloxi(C 8), ariloxi(C 8) sustituido, aralcoxi(C 8), aralcoxi(C 8) sustituido, heteroariloxi(C 8),

   20 heteroaralcoxi(C 8), aciloxi(C 8), aciloxi(C 8) sustituido, alquilamino(C 8), alquilamino(C 8) sustituido, dialquilamino(C 8), dialquilamino(C 8) sustituido, alcoxiamino(C 8), alcoxiamino(C 8) sustituido, alquenilamino(C 8), alquenilamino(C 8) sustituido, alquinilamino(C 8), alquinilamino(C 8) sustituido, arilamino(C 8), arilamino(C 8) sustituido, aralquilamino(C 8), aralquilamino(C 8) sustituido, heteroarilamino(C 8), heteroaralquilamino(C 8), alquilsulfonilamino(C 8), alquilsulfonilamino(C 8) sustituido, amido(C 8), amido(C 8) sustituido, alquilamonio(C 8),

   25 alquilamonio(C 8) sustituido, alquilsulfonio(C 8), alquilsulfonio(C 8) sustituido, alquilsililo(C 8), alquilsililo(C 8) sustituido o alquilsililoxi(C 8);

   R2 es -C≡C-R9 o ciano;

   30 R9 es hidrógeno, ciano, alquilo(C 6), alquilo(C 6) sustituido, arilo(C 6), arilo(C 6) sustituido, acilo(C 6), acilo(C 6) sustituido, alquilsililo(C 6) o alquilsililo(C 6) sustituido;

   y en el que

   35 alquilo sustituido es un grupo seleccionado entre -CH2OH, -CH2Cl, -CH2Br, -CH2SH, -CF3, -CH2CN, -CH2C(O)H, -CH2C(O)OH, -CH2C(O)OCH3, -CH2C(O)NH2, -CH2C(O)NHCH3, -CH2C(O)CH3, -CH2OCH3, -CH2OCH2CF3, -CH2OC(O)CH3, -CH2NH2, -CH2NHCH3, -CH2N(CH3)2, -CH2CH2Cl, -CH2CH2OH, -CH2CF3, -CH2CH2OC(O)CH3, -CH2CH2NHCO2C(CH3)3 y -CH2Si(CH3)3; alquenilo sustituido es un grupo seleccionado entre -CH=CHF, -CH=CHCl y -CH=CHBr;

   40 alquinilo sustituido es -C≡CSi(CH3)3; alcoxi, alqueniloxi, alquiniloxi, ariloxi, aralcoxi o aciloxi sustituidos son -ORx, en el que Rx es, respectivamente, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, aralquilo o acilo sustituidos; alquilamino, alcoxiamino, alquenilamino, alquinilamino, arilamino, aralquilamino o alquilsulfonilamino sustituidos son -NHRy, en el que Ry es, respectivamente, alquilo, alcoxi, alquenilo, alquinilo, arilo, aralquilo o alquilsulfonilo

   45 sustituidos; dialquilamino sustituido es -NRaRb, en el que Ra y Rb pueden ser grupos alquilo sustituidos iguales o diferentes, uno de Ra y Rb es -CH3, -CH2CH3, -CH2CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH(CH2)2, -CH2CH2CH2CH3, -CH(CH3) CH2CH3, -CH2CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CH2C(CH3)3, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo o ciclohexilmetilo y el otro de Ra y Rb es un alquilo sustituido, o Ra y Rb pueden tomarse juntos para representar un alcanodiilo sustituido;

   50 alquilsililo sustituido es -SiH2Rc, -SiHRcRd o -SiRcRdRe; alquilamonio sustituido es -NH2RC+, -NHRcRd+ o -NRcRdRe+;

   al menos uno de Rc, Rd y Re es un grupo alquilo sustituido o dos de Rc, Rd y Re pueden tomarse juntos para representar un alcanodiilo sustituido, y en el que cualquiera de Rc, Rd y Re que no sean alquilo sustituido ni alcanodiilo sustituido, pueden ser un grupo seleccionado entre -CH3, -CH2CH3, -CH2CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH(CH2)2, -CH2CH2CH2CH3, -CH(CH3)CH2CH3, -CH2CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CH2C(CH3)3, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y ciclohexilmetilo, o pueden tomarse juntos para representar un grupo seleccionado

   alquilsulfonilo sustituido es -S(O)2CH2CF3;

   alquilsulfonio sustituido es -SRfRg+, en el que Rf y Rg pueden ser grupos alquilo sustituidos iguales o diferentes, uno de Rf y Rg es un grupo seleccionado entre -CH3, -CH2CH3, -CH2CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH(CH2)2, -CH2CH2CH2CH3, -CH(CH3)CH2CH3, -CH2CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CH2C(CH3)3, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y ciclohexilmetilo y el otro de Rf y Rg es alquilo sustituido, o Rf y Rg representan juntos alcanodiilo sustituido; alcanodiilo sustituido es un grupo seleccionado entre -CH(F)-, -CF2-, -CH(Cl)-, -CH(OH)-, -CH(OCH3)- y -CH2CH (Cl)-; acilo sustituido es un grupo seleccionado entre -C(O)CH2CF3, -CO2H, -CO2CH3, -CO2CH2CH3, -CO2CH2CH2CH3, -CO2C6H5, -CO2CH(CH3)2, -CO2CH(CH2)2, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -C(O)NHCH2CH3, -CONHCH(CH3)2, -CONHCH(CH2)2, -CON(CH3)2, -CONHCH2CF3, -CO-piridilo, -CO-imidazoilo y -C(O)N3; amido sustituido es un grupo seleccionado entre -NHC(O)OCH3 y -NHC(O)NHCH3; arilo sustituido es un grupo seleccionado entre -C6H4F, -C6H4Cl, -C6H4Br, -C6H4I, -C6H4OH, -C6H4OCH3, -C6H4OCH2CH3, -C6H4OC(O)CH3, -C6H4NH2, -C6H4NHCH3, -C6H4N(CH3)2, -C6H4CH2OH, -C6H4CH2OC(O)CH3, -C6H4CH2NH2, -C6H4CF3, -C6H4CN,- C6H4CHO, -C6H4CHO, -C6H4C(O)CH3, -C6H4C(O)C6H5, -C6H4CO2H, -C6H4CO2CH3, - C6H4CONH2, -C6H4CONHCH3 y -C6H4CON(CH3)2; aralquilo sustituido es un grupo seleccionado entre (3-clorofenil)-metilo, 2-oxo-2-feniletilo, 2-cloro-2-feniletilo, cromanilo y tetrahidroquinolinilo (en el que el punto de unión a los últimos dos grupos es uno de los átomos saturados); aralquilidenamino saturado es N=Ra, en el que Ra es CRR';

   R y R' son independientemente

   hidrógeno, -CH3, -CH2CH3, -CH2CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH(CH2)2, -CH2CH2CH2CH3, -CH(CH3)CH2CH3, -CH2CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CH2C(CH3)3, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, ciclohexilmetilo, alquilo sustituido, arilo seleccionado entre fenilo, metilfenilo, (dimetil)fenilo, -C6H4CH2CH3, -C6H4CH2CH2CH3, -C6H4CH(CH3)2, -C6H4CH(CH2)2, -C6H3(CH3)CH2CH3, -C6H4CH=CH2, -C6H4CH=CHCH3, -C6H4C≡CH, -C6H4C≡CCH3, naftilo y bifenilo, o arilo sustituido, aralquilo seleccionado entre fenilmetilo, 1-fenil-etilo, 2-fenil-etilo, indenilo y 2,3-dihidro-indenilo (en el que el punto de unión a los últimos dos grupos es uno de los átomos saturados) o aralquilo sustituido, con la condición de que al menos uno de R y R' sea arilo, arilo sustituido, aralquilo o aralquilo sustituido;

   o sales, tautómeros o isómeros ópticos de los mismos farmacéuticamente aceptables.

2. 2.

   El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el enlace entre los átomos 4 y 5 es un enlace sencillo.

3. 3.

   El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el enlace entre los átomos 4 y 5 es un doble enlace.

4. 4.

   El compuesto de la reivindicación 1, en el que R2 es -C≡C-R9.

5. 5.

   El compuesto de la reivindicación 4, en el que R9 es hidrógeno, -Si(CH3)2C(CH3)3, ciano, -CO2H, -CO2CH3 o fenilo.

6. 6.

   El compuesto de la reivindicación 1, en el que R1 es metilo, etilo, -(CH2)2C(CH3)3, alilo, -CH2C≡CH, fenilmetilo, feniletilo o -N=CHCH2Ph.

7. 7.

   El compuesto de la reivindicación 1, en el que L es metanodiilo, etanodiilo o propanodiilo.

8. 8.

   El compuesto de la reivindicación 1, en el que R10 es terc-butilo, fenilo, amino, hidroxi o -CO2H.

9. 9.

   El compuesto de la reivindicación 1, en el que R11 es imidazoilo.

10. 10.

    Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 seleccionado entre el grupo que consiste en:

11. 11. Una composición farmacéutica que, como principio activo, comprende un compuesto de acuerdo con una 5 cualquiera de las reivindicaciones 1-10 y un transportador farmacéuticamente aceptable.

12. 12.

    Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-10 para su uso como agente farmacéutico.

13. 13.

    Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-10 para su uso en el tratamiento de un

    10 cáncer, una enfermedad con un componente inflamatorio, una enfermedad cardiovascular, una enfermedad neurodegenerativa o una enfermedad renal/de riñón.
14. 14. El uso de un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-10 en la preparación de un

    medicamento para su uso en el tratamiento de un cáncer, una enfermedad con un componente inflamatorio, una 15 enfermedad cardiovascular, una enfermedad neurodegenerativa o una enfermedad renal/de riñón.