DE69031913T2

DE69031913T2 - Antivirale mittel

Info

Publication number: DE69031913T2
Application number: DE69031913T
Authority: DE
Inventors: Sheldon Hendler; Robert Sanchez; Tara Tara
Original assignee: BIODOR US HOLDING CORP; Vyrex Corp
Current assignee: BIODOR US HOLDING CORP; 374Water Inc
Priority date: 1989-07-14
Filing date: 1990-07-12
Publication date: 1998-07-09
Anticipated expiration: 2010-07-13
Also published as: ATE161717T1; EP0482071B1; AU5965890A; JPH05501860A; EP0482071A4; WO1991001124A1; DE69031913D1; DK0482071T3; US5981603A; EP0482071A1; US5874478A

Description

HINTERGRUND DER ERFINDUNG

Erkrankungen, die mit Virus- und Retrovirus-Infektionen in Zusammenhang stehen, stellen in den USA und auf der ganzen Welt große medizinische, veterinärmedizinische und landwirtschaftliche Probleme dar. Krankheiten mit bekanntermaßen viralem Ursprung sind z.B. Windpocken, Schnupfen, Cytomegalie-Syndrom (CMV), Denguefieber, Enzephalitis, Maul- und Klauenseuche, Herpesinfektionen, Grippe, Keratokonjunktivitis, Masern, Mumps, Pseudogeflügelpest, Poliomyelitis, Tollwut, Röteln, Scrapie, Gürtelrose, Blattern, Zeckenfieber, Westnil-Fieber und Gelbfieber, um nur einige wenige zu nennen. Ein besonders schwerwiegendes Problem ist derzeit der sprunghafte Anstieg der Anzahl an gemeldeten Fällen von AIDS ("Acquired Immune Deficiency Syndrome", erworbenes Immunschwächesyndrom), dessen Erreger höchstwahrscheinlich HIV (menschliches lmmunschwächevirus) ist.
Es gibt dringende und zwingende Gründe, wirksamere und sicherere Behandlungen viraler und retroviraler Infektionen zu entwickeln. Man schätzt, daß zumindest 11/2 Millionen US-Amerikaner mit dem menschlichen Immunschwächevirus (HIV), dem AIDS- Virus, infiziert sind. HIV bewirkt den Verfall eines wesentlichen Teils des Immunsystems, der Immun-Helferzellen (T4-Helfer- oder CD4&spplus;-Helferzellen). Dieser Verfall führt zu einem breiten Krankheitsspektrum, das üblicherweise HIV-Erkrankung genannt wird; die schwerwiegendste und bedrohlichste Form davon ist AIDS. Man nimmt an, daß in Zukunft mehr als 1/3 des amerikanischen Cesundheitsbudgets für die HIV-Erkrankung aufgewandt werden wird. Es ist auch ein eskalierendes Auftreten anderer viraler Erkrankungen festzustellen. Beispielsweise breiten sich Cytomegalovirus-(CMV-)Infektionen rasch unter US-amerikanischen Teenagern aus.
Die Anmeder haben einschlägigen Berichten entnommen, daß zwei häufig verwendete Antioxidantien und Konservierungsmittel, nämlich butyliertes Hydroxyanisol (BHA) und butyliertes Hydroxytoluol (BHT), bei der Linderung einiger viraler Infektionen eine gewisse Wirkung zeigen. Einige dieser Berichte sind nachstehend zusammengefaßt:
Es wurde beobachtet, daß bestimmte Viren und Retroviren, z.B. Cytomegalovirus (CMV), Herpes si mplex-Virus, Herpes zoster-Virus, Epstein-Barr-Virus (EBV), Pseudogeflügelpestvirus, Semliki-Forest-Virus, Grippevirus, Pseudotol lwutvirus und das menschliche Immunschwächevirus (HIV), zur Lipidmembran-Variante zählen. Außerdem haben die Anmelder die Hypothese aufgestellt, daß BHT, BHA und/oder die Verbindungen der Erfindung einen gewissen Einfluß auf die Membranen ausüben, wenn auch andere derzeit unbekannte Mechanismen für die unerwartete Wirksamkeit der Verbindungen der Erfindung verantwortlich sein können.
Außerdem wurde die Theorie aufgestellt, daß Sauerstoffradikale an der Pathogenese bestimmter viraler Infektionen beteiligt sein können (siehe Oda et al., Science 244, 974- 976 (1989)) und daß Antioxidantien einen Einfluß auf virale oder retrovirale Infektionen haben können (siehe S. Hendler, "The Oxygen Breakthrough", William Morrow and Company, Inc., New York, 1989; oder S. Hendler, "Ihe Complete Guide to Anti-Aging Nutrients", Simon and Schuster, New York, 1984).
Infolge der unabhängig davon durchgeführten Beobachtungen sind die Anmelder der Ansicht, daß es Substanzen geben könnte, die die Fähigkeit besitzen, virale Membranen zu verflüssigen oder ansonsten ihre Strukturen in einer Weise zu beeinflussen, die ihre Fähigkeit zur Infektion von Zeilen verringert. Es ist aber ausdrücklich zu beachten, daß die hierin geoffenbarte Erfindung nicht auf eine bestimmte Funktionstheorie beschränkt ist.
In den letzten Jahren haben viele Forscher neuartige Behandlungsmethoden zur Bekämpfung heimtückischer Krankheitsformen vorgeschlagen, an denen oft Viren oder Retroviren als Erreger beteiligt sind. Aufgrund der zahlreichen Unterschiede zwischen diesen Erregern -- z.B. ihrer Struktur, ihrer Replikationsart und ihrer Empfindlichkeit oder Resistenz gegen verschiedene Behandlungsweisen - ist nicht zu erwarten, daß ein einziges Verfahren zur Hemmung der Entwicklung viraler und retroviraler Infektionen anwendbar ist. Trotzdem steht nun aufgrund der überraschenden Wirksamkeit bekannter und neuartiger Verbindungen, u.a. bei der Beeinflussung der Membranfluidität, eine solche Verfahrensweise zur Verfügung.
Infolge der absoluten Notwendigkeit, sicherere utid wirksamere Behandlungen viraler und retroviraler Infektionen zu entwickeln, und im Lichte der Beobachtungen der Anmelder wurden zahlreiche neue Moleküle konstruiert und synthetisiert und Verfahren zu deren Verwendung vorgeschlagen, um die Beziehung zwischen Struktur und Aktivität in der Hoffnung, sogar noch effektivere antivirale Substanzen zu entdecken, näher zu untersuchen.
Die vorliegende Erfindung betrifft auch Verfahren zur Hemmung viraler und retroviraler Infektionen unter Verwendung bekannter Verbindungen mit unerwarteter Wirksamkeit bei der Bekämpfung viraler und retroviraler Infektionen. Die Erfindung schlägt außerdem die Verwendung neuartiger Verbindungen zur Hemmung dieser Infektionen sowie Verfahren zu deren Verwendung in lebenden Organismen vor.

ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG

Im Idealfall sollte eine Art von Substanz, welche die Infektiosität eines viralen oder retroviralen Erregers mekrlich beeinflussen kann, einige oder alle der folgenden Eigenschaffen aufweisen: a) Löslichkeit in Lipidmembranen, mit bevorzugter Löslichkeit in den Lipidmembranen von Viren im Gegensatz zu den Zellen des Wirtskörpers; b) Fähigkeit, Cholesterin aus viralen Membranen zu extrahieren; c) Wirksamkeit als Antioxidantien, um Lipidperoxidation zu verhindern; d) leichte Absorbierbarkeit in den Körper; e) Fähigkeit, in die Blut-Hirn-Schranke einzudringen; und f) sehr hoher therapeutischer Index (Verhältnis zwischen therapeutischer Wirksamkeit und Toxizität). Es wird angenommen, daß alle Membranen aufweisenden Viren, z.B. Herpes simplex, Herpes zoster, CMV, EBV, Grippeviren und die menschlichen lmmunschwächeviren, durch solche Substanzen in Dosierungen, die keine toxischen Nebenwirkungen erzeugen, in bestimmtem Ausmaß gehemmt werden können. Außerdem ist zu erwarten, daß die Erfindung erfolgreich bei Viren und Retroviren angewendet werden kann, denen eine Hülle fehlt, einschließlich von DNA- und RNA-Viren. Die geoffenbarte Erfindung ist jedoch auf keine bestimmte Funktionstheorie beschränkt. Es wird lediglich vorgeschlagen, daß die beobachtete Wirksamkeit von hierin geoffenbarten Zusammensetzungen zumindest teilweise auf die obigen Eigenschaften zurückgeführt werden kann.
Die Erfindung betrifft neuartige Zusammensetzungen und Verfahren zu deren Verwendung, um virale und retrovirale Inektionen zu hemmen. Insbesondere wird die Verwendung sterisch gehinderter Phenol-Antioxidantien vorgeschlagen. Insbesondere betrifif die Erfindung Verfahren zur Verwendung neuartiger pharmazeutischer Zusammensetzungen zur in vivo-Hemmung viraler und retroviraler Infektionen, worin die Zusammensetzungen eine wirksame Menge einer Bis(dialkylphenol)mercaptal- oder einer Bis(dialkylphenol)mercaptol-Verbindung umfassen.
Eine in Frage kommende Substanz, die unerwartet vielversprechende antivirale Aktivität in dieser Hinsicht aufweist, ist das Arzneimittel Probucol, das unter dem Namen Lorelco (Merrell Dow Pharmaceuticals, Inc.) erhältlich ist. Verfahren zur Verwendung dieser Verbindung zur Senkung des Serum-Cholesterins werden in US-A-3.862.332, das hierin durch Verweis aufgenommen ist, geoffenbart
Ein erster Aspekt der Erfindung betrifft die Verwendung einer Verbindung der Formel:
worin R&sub1; Wasserstoff oder Niederalkyl mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist, R&sub2; Niederakyl mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist, n = 2, 3 oder 4 ist und R&sub3; gemisches Alkyl/Aryl mit insgesamt 5-25 Kohlenstoffatomen, Alkyl oder Aryl ist;
zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung einer viralen oder retroviralen Infektion eines Tiers. in einem zweiten Aspekt betrifft die Erfindung die Verwendung einer Verbindung der Formel:
worin R&sub1; Wasserstoff oder Niederalkyl mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist, R&sub2; Niederalkyl mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist, n = 2, 3 oder 4 ist und R&sub3; gemisches Alkyl/Aryl mit insgesamt 5-25 Kohlenstoffatomen, Alkyl oder Aryl ist;
zur Hemmung oder Linderung einer viralen oder retroviralen Infektion einer Pflanze.
Die gemäß dem ersten Aspekt hergestellten Medikamente können in einem Verfahren zur Hemmung viraler und retroviraler Infektionen in lebenden Organismen verwendet werden, umfassend die Verabreichung einer wirksamen Menge des Medikaments an einen lebenden Organismus. Die im ersten und zweiten Aspekt der Erfindung verwendeten Verbindungen können sterisch gehindert sein.
In einer bevorzugten Ausführungsform des ersten Aspekts sind die hierin geoffenbarten Verbindungen in einen pharmazeutisch annehmbaren Träger oder Arzneimittelträger eingearbeitet. Bevorzugte Verfahren zur Verabreichung der Verbindungen der Erfindung sind die parenterale, orale, intrperitoneale, transdermale und topische Verabreichung sowie die Verabreichung durch Inhalation.
Es ist somit ein Ziel der Erfindung, Verfahren zur Verwendung von Verbindungen oder pharmazeutischen Zusammensetzungen zur Hemmung viraler und retroviraler Infektionen durch Verabreichung an lebende Organismen, wie z.B. Pflanzen und Tiere, bereitzustellen. Ein weiteres Ziel der Erfindung ist die Bereitstellung eines neuartigen Verfahrens zur Behandlung viraler und retroviraler Infektionen in lebenden Organismen. Ein weiteres Ziel der Erfindung ist die Bereitstellung eines neuartigen Verfahrens zur Hemmung viraler und retroviraler Infektionen in lebenden Organismen. Ein zusätzliches Ziel der Erfindung ist die Ermöglichung neuartiger Verwendungen für Zusammensetzungen, die die Fähigkeit besitzen, virale und retrovirale Replikation in lebenden Organismen zu hemmen, und die in Dosierungen, die ihrer angegebenen Aktivität entsprechen, geringe Toxizität besitzen. Ein weiteres Ziel der Erfindung ist die Bereitstellung von Verfahren zur Linderung viraler und retroviraler Infektionen einer Vielzahl von Organismen, wie z.B. von Pflanzen, Tieren und insbesondere Säugetieren, einschließlich des Menschen.
Die Erfindung offenbart auch Verfahren zur Behandlung viraler und retroviraler Infektionen und zur Hemmung viraler und retroviraler Replikation in lebenden Organismen, umfassend die Verabreichung einer antiviral wirksamen Menge der oben erwähnten Verbindungen an lebende Organismen.
In bevorzugten Ausführungsformen der Erfindung sind R&sub1; und R&sub2; t-Butyl.
Beispiele für Verbindungen, die gemäß den geoffenbarten Ausführungsformen verwendet werden können, sind: Bis(3,5-di-tert-butyl-4-hydroxyphenyl)acetonmercaptol; Bis(3,5-di-tert-butyl-4-hydroxyphenyl)butanonmercaptol; Bis(3-tert-butyl-4-hydroxy-5-isopropylphenyl)acetonmercaptol; Bis(3-tert-butyl-4-hydroxy-5-methylphenyl)acetonmercaptol; 1,12-Di(3,5-di-tert-butyl-4-hydroxyphenylthio)dodecan; α,α'-Di(3,5-di-tert-butyl- 4-hydroxyphenylthio)-p-xylol; 1,4-Di(3,5-di-tert-butyl-4-hydroxyphenylthio)butan; Acetonbis(3,5-di-tert-butyl-4-hydroxyphenyl)mercaptol ("Probucol"); Dimethyl-γ-ketopimelatbis(3,5-di-tert-butyl-4-hydroxyphenyl)mercaptol.
Andere Beispiele sind Bis(3,5-di-t-butyl-4-methoxyphenyl)mercaptol; 1,10-Di(3,5-di-t- butyt-4-hydroxyphenylthio)decan; 1,14-Di(3,5-di-t-butyl-4-hydroxyphenylthio)tetradecan: 2-Octanonbis(3,5-di-t-butyl-4-hydroxyphenyl)mercaptol; Acetessigsäurebis(3,5-di-t- butyl-4-hydroxyphenyl)mercaptol.
In einer bevorzugten Ausführungsform sind die hierin geoffenbarten Verbindungen in einen pharmazeutisch annehmbaren Träger oder Arznei m ittelträger eingearbeitet. Bevorzugte Verfahren zur Verabreichung der Verbindungen der Erfindung sind die parenterale, orale, intraperitoneale, transdermale, topische und liposomale Verabreichung sowie die Verabreichung durch Inhalation.
Bevorzugte Zusammensetzungen umfassen antiviral wirksame Mengen einer Verbindung nach der obigen Formel; Beispiele für geeignete Verbindungen sind oben angeführt.
In anderen Ausführungsformen ist die Verbindung in einen pharmazeutisch annehmbaren Träger oder Arzneimittelträger eingearbeitet. In verschiedenen alternativen Ausführungsformen kann die Zusammensetzung parenteral, oral, intraperitoneal, topisch, transdermal, duch Inhalation oder liposomal verabreicht werden.
In verschiedenen anderen Ausführungsformen kann die Verbindung zur Herstellung eines Medikaments zur Hemmung viraler oder retroviraler Replikation oder Infektion in einem lebenden Organismus verwendet werden; in verschiedenen Ausführungsformen kann das Medikament zur parenteralen, oralen, intraperitonealen, topischen, transdermalen, Inhalations- oder liposomalen Verabreichung dienen.
Die obigen Zusammensetzungen können an lebende Organismen verabreicht werden, um virale und retrovirale Replikation und/oder Infektionen in diesen lebenden Organismen zu hemmen. Dieses Verfahren umfaßt die Verabreichung einer Zusammensetzung, die eine antiviral wirksame Menge einer Antioxidans-Verbindung (siehe oben) umfaßt, die in einen pharmazeutisch annehmbaren Träger oder Arzneimittelträger eingearbeitet ist, an einen lebenden Organismus.
Andere Ausführungsformen - ob zur Hemmung viraler Replikation oder Behandlung viraler Infektionen - offenbaren, daß zur Verabreichung an Pflanzen die Verbindungen vorzugsweise in einem flüssigen Medium (z.B. in einem Öl oder einem wäßrigen Lösungsmittel mithilfe eines Tensids oder eines andere Dispergators) in einer Konzentration im Bereich von etwa 0,001% bis 1% gelöst oder dispergiert und durch Besprühen oder Bespritzen aufgebracht werden. Zur Verabreichung an Tiere, einschließlich von Säugetieren, fallen die Dosierungseinheiten der Zusammensetzungen vorzugsweise in den Bereich von etwa 1 mg/kg Körpergewicht bis etwa 100 mg/kg, wobei ein Bereich von etwa 2 mg/kg bis etwa 80 mg/kg noch bevorzugter ist.
Die Erfindung offenbart auch die Verwendung der vorliegenden Verbindungen oder Zusammensetzungen zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung viraler oder retroviraler Infektionen in einem lebenden Organismus. Darüber hinaus betrifft die Erfindung die Verwendung der geoffenbarten Verbindungen oder Zusammensetzungen zur Herstellung eines Medikaments zur Hemmung viraler oder retroviraler Replikation in einem lebenden Organismus.

KURZE BESCHREIBUNG DER ABBILDUNGEN

Fig. 1 ist eine schematische Darstellung der chemischen Struktur und der Markierungen, die für einige der Verbindungen der Erfindung verwendet werden.
Fig. 2 ist eine schematische Darstellung der chemischen Struktur und der Markierungen, die für einige der Verbindungen der Erfindung verwendet werden.
Fig. 3 veranschaulicht die Ergebnisse von Versuchen zur Messung der Auswirkungen der erfindungsgemäßen Verbindungen auf die Synzytiumzellbildung.
Fig. 4 veranschaulicht die Ergebnisse von Versuchen zur Messung der Auswirkungen der erfindungsgemäßen Verbindungen auf p24-Antigenwerte.

AUSFÜHRLICHE BESCHREIBUNG

Die Anmelder haben beobachtet, daß die Membranfluidität oder andere Eigenschaften viraler und retroviraler Erreger durch Verabreichung substituierter Verbindungen, Zusammensetzungen oder Formen von Dosierungseinheiten gestört oder beeinträchtigt werden können, wobei solche Verbindungen der folgenden Formel entsprechen:
worin R&sub1; Wasserstoff oder Niederalkyl mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist, R&sub2; Niederalkyl mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist, n = 2, 3 oder 4 ist und R&sub3; gemischtes Alkyl/Aryl mit insgesamt 5-25 Kohlenstoffatomen, Alkyl oder Aryl ist.
Eine besonders bevorzugte Gruppe von Verbindungen zur Durchführung der Erfindung umfaßt nichtionogene Verbindungen, die der obigen Formel entsprechen. Diese Verbindungen können hergestellt werden, wie weiter unten dargestellt. Aus praktischen Gründen werden Verbindungen mit den oben angeführten chemischen Strukturen nachstehend als "BHT-Derivate" oder kollektiv als "Antioxidantien" bezeichnet.
Andere Beispiele sind S,S'-disubstituierte Mercaptale von Aldehyden oder S,S'-disubstituierte Mercaptole von Ketonen mit 2-20 Kohlenstoffatomen (Grenzen eingeschlossen), worin die Substituenten 3-tert-Alkyl-4-hydroxy-5-niederalkylphenylgruppen sind, wobei die tertiären Alkylgruppen tertiäre Butylgruppen sind und die Niederalkygruppen Methyl, Ethyl, Propyl oder Butyl sind.
Die obigen Verbindungen können topisch, oral oder parenteral durch subkutane, intramuskuläre, intravenöse oder intraperitoneale Injektion oder durch Implantation oder dergleichen verabreicht werden, wobei die orale Verabreichung bevorzugt ist. Die Antioxidantien-Verbindungen, einschließlich von BHT-Derivaten, werden vorzugsweise als pharmazeutische Zusammensetzungen in Form von Dosierungseinheiten verabreicht. Solche Zusammensetzungen können nach bekannten Verfahren, wie z.B. Tablettierung oder Verkapselung, hergestellt werden. Zur Verabreichung an Menschen enthalten die Dosierungseinheiten der Antioxidantien einschließlich der BHT-Derivate vorzugsweise 100, 200 oder 500 mg bis etwa 1 oder 5 g des Wirkstoffs. Die an die orale Verabreichung angepaßten Dosierungseinheiten, z.B. Flüssigkeiten, Tabletten, Kapseln, Pastillen und dergleichen, können bis zu etwa 5 g Wirkstoff enthalten, obgleich sie zur Vereinfachung der Verabreichung vorzugsweise etwa 100 bis etwa 500 mg Wirkstoff enthalten. Die Verbindungen können auch als Zusammensetzungen verabreicht werden, die als Teil oder Gesamtheit der Nahrung dem Organismus zugeführt werden.
Zur Verabreichung an Pflanzen werden die Verbindungen in einem flüssigen Medium (z.B. in einem Öl oder einem wäßrigen Lösungsmittel mit Hilfe eines Tensids oder anderen Dispergators) in einer Konzentration im Bereich von etwa 0,001% bis 1% gelöst oder dispergiert und durch Aufsprühen oder Aufspritzen aufgebracht. Zur Verabreichung an Tiere, einschließlich von Säugetieren, liegen die Dosierungseinheiten der Zusammensetzungen normalerweise bevorzugt im Bereich von etwa 1 mg/kg Körpergewicht bis etwa 100 mg/kg, wobei ein Bereich von etwa 2 mg/kg bis etwa 80 mg/kg noch bevorzugter ist.
Bei der Bildung der Zusammensetzungen der Erfindung wird der Wirkstoff in einen pharmazeutischen Träger eingearbeitet. In der vorliegenden Beschreibung und den Patentansprüchen bezieht sich der Ausdruck "pharmazeutischer Träger" auf pharmazeutische Arzneimittelträger und umfaßt Nährstoffzusammensetzungen, wie z.B. feste oder flüssige Nahrungsmittel. "Pharmazeutischer Arzneimittelträger" bezieht sich hierin auf bekannte pharmazeutische Arzneimittelträger, die in Dosierungen, die ihrer gewünschten Aktivität entsprechen, z.B. der cholesterinreduzierenden Aktivität im Falle von Probucol, im wesentlichen nicht-toxisch und nicht-sensibilisierend sind. Ein bevorzugter pharmazeutischer Träger ist z.B. ein oberflächenaktiver Dispergator oder liposomaler Träger.
Geeignete feste pharmazeutische Träger, die zur Formulierung der Zusammensetzungen der Erfindung verwendet werden können, sind z.B. Stärke, Lactose, Glucose, Saccharose, Gelatine, mikrokristalline Cellulose, Lakritze in Pulverform Tragantpulver, Maiz, Reismehl, Kieselgel, Magnesiunistearat, Magnesiumcarbonat, Hydroxypropylmethylcellulose, Kreide und dergleichen, sowie verträgliche Gemische davon. Bei der Herstellung fester Zusammensetzungen kann der Wirkstoff mit einem festen pharmazeutischen Träger oder Gemischen davon gepulvert oder auf andere Weise mechanisch zermahlen werden, um ein einheitliches Gemisch zu erhalten. Die Gemische können nach bekannten Verfahren zu Tabletten gepreßt oder in Kapseln gefüllt werden, oder sie können als Pulver verwendet werden, oder dergleichen. Die festen Zusammensetzungen enthalten im allgemeinen etwa 0,02 bis etwa 90 Gew.-% (Grenzen eingeschlossen) des Wirkstoffs, obwohl auch Dosierung in purer Form möglich ist.
Zu den geeigneten flüssigen pharmazeutischen Trägern zählen Ethylalkohol, Propylenglykol, Polyethylenglykole, Erdnußöl, Maisöl, Wasser, Salzlösung, Liposome, Glyceride, Glycerin und Gemische mit Wasser, Glucosesirup, Gummiarabicum-Sirup, Tragantlösung und dergleichen, sowie verträgliche Gemische davon.
Die Verbindungen der Erfindung können in verschiedenen wirksamen Mengen verabreicht werden. Der bevorzugte Dosierungsbereich des Wirkstoffs reicht für Erwachsene von etwa 0,25 bis etwa 5 g/Tag, wobei ein Bereich von 0,5 bis 2 g/Tag etwas bevorzugter ist. Der Wirkstoff kann topisch, transdermal, oral, parenteral (z.B. subkutan, intravenös oder intramuskulär), intraperitoneal oder durch Inhalation verabreicht werden.
Die Membranfluidität oder andere Eigenschaften viraler und retroviraler Erreger können durch Verabreichug einer substituierten Verbindung, Zusammensetzung oder Dosierungseinheit gestört werden, wobei es sich um ein S,S'-disubstituiertes Mercaptol eines Ketons mit 2-20 Kohlenstoffatomen (Grenzen eingeschlossen) handelt, worin die Substituenten 3-tert-Alkyl-4-hydroxy-5-niederalkylphenylgruppen sind, wobei die tertiären Alkylgruppen tertiäre Butylgruppen und die Niederalkylgruppen Methyl, Ethyl, Propyl oder Butyl sind. Eine besonders bevorzugte Gruppe von Verbindungen zur Durchführung der Erfindung umfaßt die Bis(3-t-butyl-4-hydroxy-5-niederalkylphenyl)ketonmercaptole, die der obigen Formel entsprechen. Eine weitere bevorzugte Gruppe umfaßt die Bis(3,5-di-t-butyl-4-hydroxyphenyl)ketonmercaptol-Verbindungen der obigen Formel, wobei die Verbindung Bis(3,5-di-t-butyl-4-hydroxyphenyl)acetonmercaptol zur Verwendung in den Zusammensetzungen und im Verfahren der Erfindung besonders bevorzugt ist. Diese Verbindungen können gemäß US-A-3.862.332 hergestellt werden.
Der Einfachkeit halber können die Verbindungen mit den oben angeführten chemischen Strukturen nachstehend als "substituierte Ketonmercaptol-Verbindungen" bezeichnet werden. Man beachte, daß diese Verbindungen auch als Antioxidantien agieren können.
Die obigen Verbindungen können topisch, oral oder parenteral durch subkutane, intramuskuläre, intravenöse oder intraperitoneale Injektion oder durch Implantation oder dergleichen verabreicht werden, wobei die orale Verabreichung bevorzugt ist. Die Antioxidans-Verbindungen, einschließlich von substituierten Ketonmercaptol-Verbindungen, werden vorzugsweise als pharmazeutische Zusammensetzungen in Form von Dosierungseinheiten verabreicht. Solche Zusammensetzungen können nach bekannten Verfahren, wie z.B. Tablettierung oder Verkapselung, hergestellt werden. Die Dosierungsein heiten der Antioxidantien, einschließlich von substituierten Mercaptol-Verbindungen, enthalten vorzugsweise etwa 100 bis etwa 200 mg über etwa 500 mg bis zu etwa 1-5 g des Wirkstoffs. Oraler Verabreichung entsprechende Dosierungseinheiten, wie z.B. Tabletten, Kapseln, Pastillen und dergleichen, können bis zu etwa 5 g Wirkstoff enthalten, obgleich sie zur Vereinfachung der Verabreichung vorzugsweise etwa 100 bis etwa 500 mg des Wirkstoffs enthalten. Die Verbindungen können auch als Zusammensetzungen verabreicht werden, die dem Organismus als Teil oder Gesamtheit der Nahrung zugeführt werden.
Bei der Bildung der Zusammensetzungen der Erfindung wird der Wirkstoff in einen pharmazeutischen Träger eingearbeitet. In der vorliegenden Beschreibung und den Patentansprüchen bezieht sich der Ausdruck "pharmazeutischer Träger" auf pharmazeutische Arzneimittelträger und umfaßt Nährstoffzusammensetzungen, wie z.B. feste oder flüssige Nahrungsmittel. "Pharmazeutischer Arzneimittelträger" bezieht sich hierin auf bekannte pharmazeutische Arzneimittelträger, die in Dosierungen, die ihrer gewünschten Aktivität entsprechen, z.B. der cholesterinreduzierenden Aktivität im Falle von Probucol, im wesentlichen nicht-toxisch und nicht-sensibilisierend sind. Ein bevorzugter pharmazeutischer Träger ist z.B. ein oberflächenaktiver Dispergator oder liposomaler Träger.
Geeignete pharmezeutische Träger, die sich zur Formulierung der Zusammensetzungen der Erfindung eignen, sind z.B. Stärke, Lactose, Glucose, Saccharose, Gelatine, mikrokristalline Cellulose, Lakritze in Pulverform, Trangantpulver, Malz, Reismehl, Kieselgel, Magnesiumstearat, Magnesiumcarbonat, Hydroxypropyl methylcellulose, Kreide und dergleichen, sowie verträgliche Gemische davon. Bei der Herstellung fester Zusammensetzungen kann der Wirkstoff zusammen mit einem festen pharmazeutischen Träger oder Gemischen davon gepulvert oder auf andere Weise mechanisch vermahlen werden, um ein einheitliches Gemisch zu erhalten. Die Gemische können nach bekannten Verfahren zu Tabletten gepreßt oder in Kapseln gefüllt werden, oder sie können als Pulver verwendet werden, oder dergleichen. Die festen Zusammensetzungen enthalten im allgemeinen etwa 0,02 bis etwa 90 Gew.-% (Grenzen eingeschlossen) des Wirkstoffs, obwohl auch Dosierungen in purer Form möglich sind.
Zu den geeigneten flüssigen pharmazeutischen Trägern zählen Ethylalkohol, Propylenglykol, Polyethylenglykole, Erdnußöl, Maisöl, Wasser, Salzlösung, Liposome, Glyceride, Glycerin und Gemische mit Wasser, Glucosesirup, Gummiarabicum-Sirup, Tragantlösung und dergleichen, sowie verträgliche Gemische davon.
Die Verbindungen der Erfindung können in verschiedenen wirksamen Mengen verabreicht werden. Der bevorzugte Dosierungsbereich des Wirkstoffs reicht von etwa 0,25 bis etwa 5 g/Tag, wobei der Bereich von 0,5 bis 2 g/Tag etwas bevorzugter ist. Der Wirkstoff kann topisch, transdermal, oral, parenteral (z.B. subkutan, intravenös oder intramuskulär), intraperitoneal oder durch Inhalation verabreicht werden.
Die Erfindung wird anhand der folgenden Beispiele näher erläutert; sie stellen die bevorzugten Ausführungsformen der Erfindung dar, sollen aber deren Schutzbereich nicht einschränken.

BEISPIEL I

Synthese von Analogen

Die Reinheit jeder Verbindung wurde anhand der Schmelzpunkte und mittels Dünnschicht-Chromatographie bestätigt. Die Struktur jeder Verbindung wurde durch Kemresonanzspektroskopie (NMR-Spektroskopie) bestätigt. Die unten angeführten Verbindungen sind in den Fig. 1 und 2 dargestellt.

I,II,III:

Diese Verbindungen wurden nach herkömmlichen Verfahren zur Thioether-Synthese unter Substitution eines Halogenidions eines Alkylhalogenids durch ein Thiophenolat- Nukleophil hergestellt (siehe z.B. March, J., Advanced Organic Chemistry, 3. Ausgabe, J. Wiley and Sons, 1985, S. 360-362). So wurde 2,6-Di-t-butyl-4-mercaptophenol mit 1,12-Dibromdodecan (bei I), p-Xylylendibromid (bei II) oder 1,2-Dibrombutan (bei III) in N,N-Dimethylformamid in der Gegenwart von gepulvertem Kaliumcarbonat umgesetzt. Die Produkte wurden mit Wasser von Lösungsmitteln und Salzen freigewaschen und durch Umkristallisation aus organischen Lösungsmitteln gereinigt.
Verbindung I lag in Form von weißen Kristallen aus Isopropylalkohol mit einem Schmelzpunkt von 74-75ºC vor. Verbindung II wurde in Form von weißen Kristallen aus Isopropylalkohol mit einem Schmelzpunkt von 159-161ºC erhalten. Verbindung III wurde in Form von weißen Kristallen aus Isopropylalkohol mit einem Schmelzpunkt von 143-145ºC erhalten.

IV, VI, IX, X:

Diese Ketonmercaptole wurden nach Standard-Syntheseverfahren hergestellt, worin ein Thiophenol mit einem Keton unter saurer Katalyse in einem organischen Lösungsmittel kondensiert wird (siehe March, J., Advanced Organic Chemistry, 3. Ausgabe, J. Wiley & Sons, 1985, S. 793-795). So wurde 2,6-Di-t-butyl-4-mercaptophenol mit Aceton (bei IV), Dimethyl-γ-ketopimelat (bei VI), N-Methyl-4-piperidon (bei IX) oder Methypyruvat (bei X, Methylester) umgesetzt, und die Produkte wurden durch Umkristallisation aus organischen Lösungsmitteln gereinigt.
Verbindung IV wurde in Form von weißen Kristallen aus Ethanol mit einem Schmelzpunkt von 125-126ºC vor. Verbindung VI wurde in Form von weißen Kristallen aus Iropsopylalkohol mit einem Schmelzpunkt von 152-154ºC erhalten. Verbindung IX wurde in Form von weißen Kristallen aus Isopropylalkohol mit einem Schmelzpunkt von 254-256ºC erhalten. Verbindung X, Methylester, wurde in Form von weißen Kristallen aus Isopropylalkohol mit einem Schmelzpunkt von 111-113ºC erhalten.
Bei Verbindung X wurde die freie Säure aus dem Methylester durch Verseifung mit Natriumhydroxid gebildet, gefolgt von Ansäuern mit HCl. Weiße Kristalle wurden erhalten und durch Umkristallisation aus Hexan gereinigt, wobei die Kristalle einen Schmelzpunkt von 151-153ºC aufwiesen.
Zusätzliche Analoge (als XII-XIX bezeichnet und mit "Testcode"-Nummern versehen, z.B. 1297-12-1), wie z.B. die schematisch in Fig. 2 dargestellten, wurden wie oben beschrieben hergestellt, mit Ausnahme jener, die aus den verschiedenen angegebenen Quellen erhalten wurden.
Die Analoge XII-XIX können weiter wie folgt identifiziert werden:
XII: Bis(3,5-di-t-butyl-4-methoxyphenyl)mercaptol;
XVI: 1,10-Di(3,5-di-t-butyl-4-hydroxyphenylthio)decan;
XVII: 1,14-Di(3,5-di-t-butyl-4-hydroxyphenylthio)tetradecan;
XVIII: 2-Octanon-bis(3,5-di-t-butyl-4-hydroxyphenyl)mercaptol;
XIX: Acetessigsäure-bis(3,5-di-t-butyl-4-hydroxyphenyl)mercaptol.

BEISPIEL II

In vitro-Hemmversuche

Die folgenden Verbindungen wurden auf ihre Fähigkeit getestet, HIV-1-Virusinfektion in vitro zu hemmen. Die untersuchten Verbindungen waren: 1) 1,12-Di(3,5-di-t-butyl-4- hydroxyphenylthio)dodecan; 2) α,α'-Di(3,5-di-t-butyt-4-hvdroxyphenylthio)-p-xylol; 3) 1,4-Di(3,5-di-t-butyl-4-hydroxyphenylthio)butan; 4) Aceton-bis(3,5-di-t-butyl-4-hydroxyphenyl)mercaptol ("Probucol"); 6) Dimethyl-γ-ketopimelat-bis(3,5-di-t-butyl-4- hydroxyphenyl)mercaptol; 8) 2,6-Di-t-butyl-4-methylphenol (BHT); 9) N-Methyl-4-piperidon-bis(3,5-di-t-butyl-4-hydroxyphenyl)mercaptol; und 10) Benztraubensäure-bis(3,5-di- t-butyl-4-hydroxyphenyl)mercaptol.

Herstellung von Versuchslösungen

Die Stammlösungen der Verbindungen bestanden aus DMSO (Dimethylsulfoxid), das 1-3% (w/v) der Verbindung enthielt. Diese Stammlösungen wurden je nach Bedarf mit den wäßrigen Versuchsmedien verdünnt, um die gewünschte Endkonzentration zu erhalten. Ein zusätzlicher Vergleich in jeder Versuchsgruppe enthielt nur DMSO. Die untersuchten Konzentrationen waren wie folgt:
1) 300µg/ml (1-3% DMSO);
2) 100µg/ml (1% DMSO);
3) 30 µg/ml (mit 1% DMSO enthaltendem Medium verdünnt);
4) 10 µg/ml (mit 1% DMSO enthaltendem Medium verdünnt);
5) 3 µg/ml (mit 1% DMSO enthaltendem Medium verdünnt);
6) 1 µg/ml (mit 1% DMSO enthaltendem Medium verdünnt).
Die Vergleiche enthielten: 1) 3% DMSO, nicht infiziert; 2) 1% DMSO, nicht infiziert; 3) kein DMSO, nicht infiziert; 4) AZT 10 µM, 1% DMSO; 5) AZT 1 µM, 1% DMSO; 6) kein Arzneimittel, infiziert, 3% DMSO; und 7) kein Arzneimittel, infiziert 1% DMSO.

Versuchsvorschrift

15 ml jedes Mediums werden in den angegebenen Konzentrationen der Verbindung und/oder des Lösungsmittels gebildet. Ein gewaschenes Pellet, das aus 1,5 x 10&sup6; Zellen von Molt-3 (einem Klon-Derivat einer Lymphozyten-(T-Zellen-)Linie) japanischen Ursprungs bestand und von den National Institutes of Health, Bethesda, MD, USA, erhalten wurde, wurde in 1 ml jeder Verbindung oder jedes Vergleichsmediums suspendiert. Jedes Reagensglas wurde unter gelegentlichem Schütteln 4 Stunden lang bei 37ºC inkubiert.
Während der letzten Stunde der Präinkubationsphase wurde mit Molt-3-gezüchtetes HIV-1 mit 1 ml jedes Mediums vedünnt, um 200 TCID&sub5;&sub0;-Einheiten zu ergeben. Polybrene (10µg/ml) war in jedem Reagensglas enthalten.
Die Zellen wurden pelletiert und in den virushältigen Medien resuspendiert, sowie anschließend 60 Minuten lang bei 37ºC unter gelegentlichem Schütteln inkubiert. Die Zellen wurden dann pelletiert und in 5 ml jedes Mediums resuspendiert. Jedes Zellpellet wurde zweimal in vollständigem Wachstumsmedium gewaschen und dann in markierte 6-Napf-Schalen übergeführt.
Täglich wurden Riesenzellen und Synzytien gezählt. Gleichzeitig wurden 0,5 ml der Kultur entfernt und bei -70ºC eingefroren. Frisches Medium wurde zur Wiederauffüllung verwendet.
Am Ende der drei Tage wurde eine Antigen-Bindungsanalyse durch Immunassay durchgeführt. Em Ende einer Zeitspanne von 4-5 Tagen wurden nicht infizierte Zeilen anhand von Trypanblau-Ausschluß auf ihre Lebensfähigkeit untersucht. Ergebnisse Screening von Arzneimitteln im Molt-3/HIV-1-Assaysystem
Spalte 1 gibt die Identifikationsnummer jeder Substanz all. Die Molekularstruktur jeder Substanz ist aus Fig. 1 ersichtlich. Spalte 2 zeigt die ungefähre Konzentration jeder Verbindung, die eine 50%-ige Reduktion von Synzytiumzellen hervorruft, bezogen auf die Synzytiumzellbildung in einem infizierten Vergleich, der die Verbindung nicht aufweist. Die angegebene Konzentration ist ein Mittelwert der nach zwei-, drei- und viertägiger Inkubation erhaltenen Ergebnisse. Die Synzytiumzellbildung ist ein Indikator für die zytopathische Wirkung der HIV-1-Infektion in der Wirtszelle, und die Ergebnisse zeigen, daß alle Verbindungen in Konzentrationen von 3 µg/ml oder weniger wirksam sind.
Spalte 3 gibt die ungefähre Konzentration der Verbindung an, die eine 50%-ige Reduktion von löslichem p24-Antigen hervorruft (gemessen mittels p24-Bindungsimmunassay). Die angeführte Konzentration ist das Ergebnis von nach dreitägiger Inkubation vorgenommenen Messungen im Verhältnis zu infizierten Vergleichen ohne die Verbindung. p24 ist eine charakteristische Proteinkomponente des HIV-Kerns, deren Konzentration ein Indikator für die HIV-Konzentration ist. Die Ergebnisse zeigen, daß alle Verbindungen in Konzentrationen von 5 µg/ml oder weniger wirksam sind.
Spalte 4 gibt die ungefähre Konzentration der Verbindung an, die eine 50%-ige Reduktion der lebensfähigen Population in nicht infizierten Wirtszellen hervorruft - im Verhältnis zur Population überlebender Wirtszellen in einem nicht infizierten Vergleich (gemessen nach fünftägiger Inkubation). Die Ergebnisse zeigen große Unterschiede der Verbindungstoxizität, die von geringer Toxizität (I, II) bis zu hoher Toxizität (IX, X) reicht.

Diskussion

Die Daten zeigen, daß alle Verbindungen bei der Verringerung der Synzytiumzellbildung und p24-Antigenwerte sehr aktiv sind. Signifikanterweise tritt eine deutliche und offensichtliche Struktur/Aktivitäts-Korrelation hinsichtlich der Toxizität der Verbindungen zutage. Die toxischsten Strukturen sind IX und X, die unter physiologischen Bedingungen ionisch und stark polar sind, d.h. negativ geladenes Carboxylatanion (X) und positiv geladenes Ammoniumion (IX).
Die Verbindungen I bis VIII sind nichtionogen und stellen eine Reihe mit allmählich abnehmender Polarität (steigender Lipophihe) dar. Die phenolische -OH-Gruppe, die allen Strukturen zu eigen ist, ist schwach polar. Carboxylatester-Gruppen (wie in VI) sind weniger polar, und die übrigen Strukturkomponenten (Alkyl, Aryl, Thioether) sind am wenigsten polar oder apolar. Die Verbindungen I bis V umfassen die deutlichsten Beispiele progressiver Inkremente von Alkyl- und/oder Arylgruppen (steigende Lipophihe) und damit zusammenhängender Abnahme der Toxizität.
Verbindung VIII ist BHT, das eindeutog antivirale Eigenschaften aufweist. Verbindung IV ist Probucol, dessen antivirale Eigenschaften hierin ebenfalls veranschaulicht werden. Die vorliegende Studie belegt erstmals, daß eine Korrelation zwischen Struktur und Aktivität in dieser neuen Klasse antiviraler Erreger und eine rationale Grundlage zur Konstruktion verwandter Verbindungen mit verbessertem "therapeutischem Fenster", d.h. höheren Verhältnissen zwischen Wirksamkeit und Toxizität, besteht. Auf der Basis des in obiger Tabelle dargestellten Assaysystems besitzen die Analogen I und II therapeutische Fenster, die zumindest zehnmal besser sind als jenes von Probucol (IV) und zumindest 30 Mal besser sind als jenes von BHT (VIII).
Zusätzliche Daten sind aus den Fig. 3 und 4 ersichtlich. Obwohl die Ergebnisse starken Versuchsschwankungen unterliegen, zeigen alle Analoge substantielle Aktivität, obgleich einige die anderen durchwegs übertreffen.
Ein verbessertes therapeutisches Fenster für einen antiviralen Erreger ist für die erfolgreiche Behandlung viraler Infektionen von großer Bedeutung, da die Wirksamkeit dadurch verbessert werden kann, ohne die Toxizität und andere unerwünschte Nebenwirkungen zu erhöhen. Man geht außerdem davon aus, daß diese deutlich verbesserten antiviralen Analogen von BHT auch in einigen der hierin besprochenen therapeutischen Anwendungen von großem Nutzen sind, z.B. bei der Behandlung von AIDS-, CMV-, Herpesund SFV-Infektionen.

BEISPIEL III

Klinische Versuche

Probucol wurde an 6 erwachsene, männliche, erwiesenermaßen HIV-positive (HIV&spplus;) Patienten im Alter von 31-44 Jahren zum Zeitpunkt der Diagnose in jenen zur Behandung von Hypercholesterinämie indizierten entsprechenden Dosierungen verabreicht. Alle Probucol erhaltenden Patienten nahmen 1 g pro Tag in Teildosen über individuell variierende Zeitspannen (siehe unten) ein (bis auf Patient F, der 4,5 g/Tag erhielt). Jeder Patient wurde regelmäßig untersucht, und es wurden - sofern nicht anders angegeben - klinische Beobachtungen jeweils durch den gleichen behandelnden Arzt vorgenommen und aufgezeichnet. Blutproben jedes Patienten wurden regelmäßig gezogen und auf T- Helferzellen-(CD4&spplus;- oder T4-)Spiegel und T-Suppressorzellen-(CD8&spplus;- oder T8-)Spiegel untersucht. Das CD4&spplus;:CD8&spplus;-Verhältnis ("RN) wurde auch jedes Mal berechnet. Vor dem Beginn der Probucol-Behandlung gezogene Blutproben wurden analysiert und mit den während der Behandlungsphase gezogenen Proben verglichen. Die gleichen Parameter wurden bei allen Proben untersucht. Die Testergebnisse sind nachstehend angeführt.
* - Informationen durch den zuvor behandelnden Arzt zur Verfügung gestellt.
** - Kulturverfahren: Probe von peripherem Blut wird gezogen, mit Phytohämagglutinin (PHA) co-kultiviert, zeitlicher Zuwachs von p24 wird gemessen. (siehe Lane et al., "Acquired Immunodeficiency Syndrome and Related Deseases", Rose et al. (Hrsg.), Manual of Clinical Laboratory Immunology, 3. Ausg., Am. Soc. Microbiol., S. 582-586, 1986).

BEISPIEL IV

In vitro-Hemmversuche

Die folgenden Verbindungen wurden auf ihre Fähigkeit untersucht, HIV-1-Virusinfektion in vitro zu hemmen. Die untersuchten Verbindungen waren: Probucol (2,5%); 2) 2,6- Dicyclopentylphenol (5%) (als Vergleich); 2,6-Dicyclohexyl-p-kresol (5%); 3) 4,4'-Thio- bis(6-t-butyl-o-kresol), "Ethanox 322", 5%); 4) 4,4'-Methylenbis(2,6-di-t-butylphenol) ("Ethanox 702"), 1,25%); 5) 2,6-Di-t-butyi-α-dimethylamino-p-kresol ("Ethanox 703", 5%); 6) 1,3,5-Trimethyl-2,4,6-tris(3,5-di-t-butyl-4-hydroxybenzyl)benzol ("Ethanox 330", 1,25%); und 7) 4,4'-Methylenbis(2,6-di-t-butylphenol) ("Ethanox 728", 5%).
Die Verbindungen wurden mit vollständigem RPMI 1640-Medium (Gibco Laboratories, Grand Island, NY, USA) auf 300, 200, 100, 30, 10, 3 und 1 µg/ml verdünnt. Die verdünnten Verbindungen wurden mit 1:100 und 1:1000 verdünntem HIV-1 (Titer: 10^3,6) 1 Stunde lang präinkubiert und dann auf eine CEM-SS-Infektivitätsassay-Platte aufgebracht. (siehe Nara et al., Aids Res. and Human Retroviruses 3, 283-302 (1987), Mary Ann Liebert (Hrsg.), oder Nara und Fischinger, Nature 322, 469-470 (1988)). Die Verdünnungen wurden auch 1 Stunde lang auf den Zellen präinkubiert, dann mit 1: 100- und 1:1000-Verdünnungen von HIV-1 (Titer: 10^3,6) ohne Verbindung beimpft. Das Impfmaterial wurde nach 1 Stunde von den Näpfen abgesaugt, und die Zellen wurden 5 Tage lang zusammen mit Verbindung und Medien gehalten und dann auf Plaques untersucht.
Von den oben aufgelisteten Verbindungen zeigte Probucol die stärkste Wirkung nach HIV-1-Plaquebildung. Insbesondere war zu beobachten, daß Probucol die Plaquebildung in Konzentrationen von etwa 200 µg/ml unter beiden Versuchsbedingungen - d.h. präinkubiert mit HIV und präinkubiert mit den Zellen - ohne nennenswerte Toxizität für die Zellen deutlich hemmt. Probucol schien auch die Plaquebildung in Konzentrationen von etwa 100 µg/ml zu hemmen, obgleich die Hemmung nicht so ausgeprägt war wie in der doppelten Konzentration. Wiederum war keine signifikant toxische Wirkung auf die Zellen festzustellen. Die Wirkung der untersuchten Ethanox-Verbindungen war in den meisten Fällen nicht so ausgeprägt wie jene von Probucol. Trotzdem zeigten diese phenolischen Antioxidantien und insbesondere Ethanox 728 Wirksamkeit als antivirale und antiretrovirale Mittel.

BEISPIEL V

Wirkung von Arzneimitteln gegen CMV in HS68-Zellen Virusverdünnung (log-Faktor) bei der zytopathische Wirkung festzustellen ist

TESTGRUPPE A

(* T kennzeichnet eine toxische Wirkung.)
[Testgruppe A ist Teil von Testgruppe 3 (siehe Fig. 3 und 4). Zytopathische Wirkung wurde an Tag 9 bewertet.] TESTGRUPPE B
[Testgruppe B ist Teil von Testgruppe 4 (siehe Fig. 3 und 4). Zytopathische Wirkung wurde an Tag 12 bewertet.]
HS68-Zellen wurden mit CMV 1 Stunde lang bei 37ºC in der angegebenen Virusverdünnung präinkubiert und dann Arzneimitteln in Konzentrationen von 300 - 1 µg/ml ausgesetzt. Die Arzneimittel wurden aus 3%-igen Stammlösungen in DMSO abgegeben und die Endkonzentration von DMSO in jedem Testnapf auf 1% eingestellt. Die Näpfe wurden an den angegebenen Tagen auf zytopathische Wirkung untersucht.

BEISPIEL VI

Wirkung von Arzneimitteln gegen HIV-1 in HS68-Zellen Virusverdünnung (log-Faktor) bei der zytopathische Wirkung festzustellen ist

TESTGRUPPE A

[Testgruppe A ist Teil von Testgruppe 3 (siehe Fig. 3 und 4). Zytopathische Wirkung wurde an Tag 3 bewertet.] TESTGRUPPE B
[Testgruppe B ist Teil von Testgruppe 4 (siehe Fig. 3 und 4). Zytopathische Wirkung wurde an Tag 3 bewertet.]
HS68-Zellen wurden mit CMV 1 Stunde lang bei 37ºC in der angegebenen Virusverdünnung präinkubiert und dann Arzneimitteln in Konzentrationen von 300 - 1 µg/ml ausgesetzt. Die Arzneimittel wurden aus 3%-igen Stammlösungen in DMSO abgegeben und die Endkonzentration von DMSO in jedem Testnapf auf 1% eingestellt. Die Näpfe wurden an den angegebenen Tagen auf zytopathische Wirkung untersucht. Obwohl die Erfindung unter Bezugnahme auf konkrete Ausführungsformen beschrieben wurde, ist zu beachten, daß ihr Schutzbereich nicht auf sie beschränkt ist, sondern durch die folgenden Patentansprüche definiert wird.

Claims

1. Verwendung einer Verbindung der Formel:

worin R&sub1; Wasserstoff oder Niederalkyl mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist, R&sub2; Niederakyl mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist, n = 2, 3 oder 4 ist und R&sub3; gemischtes Alkyl/Aryl mit insgesamt 5-25 Kohlenstoffatomen, Alkyl oder Aryl ist;

zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung einer viralen oder retroviralen Infektion eines Tiers.

2. Verwendung nach Anspruch 1, worin das Tier ein Säugetier ist.

3. Verwendung nach Anspruch 2, worin das Säugetier ein Mensch ist.

4. Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 3, worin das Medikament zur parenteralen Verabreichung dient.

5. Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 3, worin das Medikament zur oralen Verabreichung dient.

6. Verwendung nach einem der vorangegangenen Ansprüche, worin das Medikament zur Behandlung von HIV-, Cytomegalovirus- oder Herpes simplex-Virus- Infektionen dient.

7. Verwendung einer Verbindung der Formel:

worin R&sub1; Wasserstoff oder Niederalkyl mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist, R&sub2; Niederalklyl mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist, n = 2, 3 oder 4 ist und R&sub3; gemischtes Alkyl/Aryl mit insgesamt 5-25 Kohlenstoffatomen, Alkyl oder Aryl ist;

zur Hemmung oder Linderung einer viralen oder retroviralen Infektion einer Pflanze.

8. Verwendung nach einem der vorangegangenen Ansprüche, worin die Verbindung zur liposomalen Verabreichung vorgesehen ist.

9. Verwendung nach einem der vorangegangenen Ansprüche, worin die Verbindung zur topischen oder transdermalen Verabreichung vorgesehen ist.

10. Verwendung nach einem der vorangegangenen Ansprüche, worin die Verbindung ein S,S'-disubstituiertes Mercaptal eines Aldehyds oder ein S,S'-disubstituiertes Mercaptol eines Ketons ist, wobei der Aldehyd oder das Keton 2 bis 20 (Grenzen eingeschlossen) Koh lenstoffatome enthält, worin die Substituenten 3-t-Butyl-4-hydroxy- 5-Niederalkylphenylgruppen sind, worin die Niederalkygruppen aus Methyl, Ethyl, Propyl und Butyl ausgewählt sind.

11. Verwendung nach einem der vorangegangenen Ansprüche, worin n = 2 ist.

12. Verwendung nach einem der vorangegangenen Ansprüche, worin R&sub1; und R&sub2; t-Butyl sind.

13. Verwendung nach Anspruch 12, worin die Verbindung 1,12-Di-(3,5-di-t-butyl-4- hydroxyphenylthio)dodecan ist.

14. Verwendung nach Anspruch 12, worin die Verbindung α,α'-Di-(3,5-di-t-butyl-4- hydroxyphenylthio)-p-xylol ist.

15. Verwendung nach Anspruch 12, worin die Verbindung 1,4-Di-(3,5-di-t-butyl-4- hydroxyphenylthio)butan ist.

16. Verwendung nach Anspruch 12, worin die Verbindung Aceton-bis-(3,5-di-t-butyl- 4-hydroxyphenyl)mercaptol ("Probucol") ist.

17. Verwendung nach Anspruch 12, worin die Verbindung Bis-(3,5-di-t-butyl-4- methoxyphenyl)mercaptol ist.

18. Verwendung von Dimethyl-γ-ketopimelat-bis-(3,5-di-t-butyl-4-hydroxyphenyl)mercaptol zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung einer viralen oder retroviralen Infektion eines Tiers.

19. Verwendung von Dimethyl-γ-ketopimelat-bis-(3,5-di-t-butyl-4-hydroxyphenyl)mercaptol zur Hemmung oder Linderung einer viralen oder retroviralen Infektion einer Pflanze.

20. Verwendung von Brenztraubensäure-bis-(3,5-di-t-butyl-4-hydroxyphenyl)mercaptol zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung einer viralen oder retroviralen Infektion eines Tiers.

21. Verwendung von Brenztraubensäure-bis-(3,5-di-t-butyl-4-hydroxyphenyl)mercaptol zur Hemmung oder Linderung einer viralen oder retroviralen Infektion einer Pflanze.

22. Verwendung nach einem der vorangegangenen Ansprüche zur Behandlung, Hemmung oder Linderung einer retroviralen Infektion.

23. 1,12-Di-(3,5-di-t-butyl-4-hydroxyphenylthio)dodecan zur Verwendung zur Behandlung einer viralen oder retroviralen Infektion eines Tiers.

24. α,α-Di-(3,5-di-t-butyl-4-hydroxyphenylthio)-p-xylol zur Verwendung zur Behandlung einer viralen oder retroviralen Infektion eines Tiers.

25. 1,4-Di-(3,5-di-t-butyl-4-hydroxyphenylthio)butan zur Verwendung zur Behandlung einer viralen oder retroviralen Infektion eines Tiers.

26. Brenztraubensäure-bis-(3,5-di-t-butyl-4-hydroxyphenyl)mercaptol zur Verwendung zur Behandlung einer viralen oder retroviralen Infektion eines Tiers.

27. Dimethyl-γ-ketopimelat-bis-(3,5-di-t-butyl-4-hydroxyphenyl)mercaptol zur Verwendung zur Behandlung einer viralen oder retroviralen Infektion eines Tiers.