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DE2858345C2 - Feed mixture containing oleandomycin and proteolytic enzymes - Google Patents

Feed mixture containing oleandomycin and proteolytic enzymes

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Publication number
DE2858345C2
DE2858345C2 DE2858345A DE2858345A DE2858345C2 DE 2858345 C2 DE2858345 C2 DE 2858345C2 DE 2858345 A DE2858345 A DE 2858345A DE 2858345 A DE2858345 A DE 2858345A DE 2858345 C2 DE2858345 C2 DE 2858345C2
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DE
Germany
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feed
oleandomycin
proteolytic enzymes
enzyme
feed mixture
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DE2858345A
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German (de)
Inventor
Günter Dipl.-Chem. Dr. 4006 Erkrath Hiller
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Henkel AG and Co KGaA
Original Assignee
Henkel AG and Co KGaA
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Publication date
Application filed by Henkel AG and Co KGaA filed Critical Henkel AG and Co KGaA
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Description

Hochleistungstierfutter, wie sie heute üblicherweise in der Intensiv-Tierhaltung verwendet werden, enthalten eine Reihe von Zusatzstoffen mit prophylaktischer und/oder nutritiver Wirkung. Hierzu zählen u.a. Antibiotika und Enzyme. Während sich die Verwendung von Antibiotika bereits in Mischfuttern aller Typen durchgesetzt hat, werden Enzyme in der Praxis noch nicht in größerem Umfange verwendet.High-performance animal feed, as commonly used in intensive animal husbandry today, contains a number of additives with a prophylactic and/or nutritional effect. These include antibiotics and enzymes. While the use of antibiotics has already become established in all types of compound feed, enzymes are not yet used on a large scale in practice.

Enzymhaltige Futtermittel sind im Prinzip aus der DE-AS 10 84 123 bekannt. Dort wird ein protein- und stärkehaltiges Ergänzungsfutter für Saugferkel im Alter von weniger als 8 Wochen beschrieben. Als Enzyme werden Pilzproteasen oder bakterielle Proteasen und/oder Pilzamylasen oder bakterielle Amylasen beschrieben. Ein Hinweis auf die besonders günstige Wirkung von Futtermittelmischungen, die eine Enzymaktivität in einem genau definierten Bereich einerseits und einen Gehalt an Antibiotika andererseits aufweisen, findet sich nicht.Feedstuffs containing enzymes are known in principle from DE-AS 10 84 123. This describes a protein and starch-containing supplementary feed for suckling piglets aged less than 8 weeks. The enzymes described are fungal proteases or bacterial proteases and/or fungal amylases or bacterial amylases. There is no reference to the particularly beneficial effect of feed mixtures that have an enzyme activity in a precisely defined range on the one hand and a content of antibiotics on the other.

Die in der modernen Intensiv-Tierhaltung verwendeten Futtermischungen sind im allgemeinen in allen Nährstoffkomponenten so weit optimiert, daß eine weitere Verbesserung nicht ohne weiteres möglich erscheint. In der älteren Patentanmeldung gemäß DE-OS 26 33 105 wird beschrieben, daß Hochleistungsfutter hinsichtlich der Futterverwertung und/oder des damit erzielbaren Gewichtszuwachses noch verbessert werden können, wenn man diesen Futtern Virginiamycin zusammen mit proteolytischen Enzymen zusetzt.The feed mixtures used in modern intensive animal husbandry are generally optimized in all nutrient components to such an extent that further improvement does not seem possible. The older patent application according to DE-OS 26 33 105 describes that high-performance feeds can be further improved in terms of feed utilization and/or the weight gain that can be achieved with them if virginiamycin is added to these feeds together with proteolytic enzymes.

Es wurde nunmehr gefunden, daß Zusätze von Oleandomycin und bestimmte Mengen proteolytischer Enzyme hervorragende Futtermittel ergeben.It has now been found that additions of oleandomycin and certain amounts of proteolytic enzymes produce excellent feedstuffs.

Gegenstand der Erfindung ist dementsprechend eine Futtermittelmischung auf der Basis von Kohlenhydraten, Eiweiß, Fetten und gegebenenfalls üblichen Zusatzstoffen sowie einem Gehalt an Oleandomycin und proteolytischen Enzymen in einer solchen Menge, daß eine enzymatische Aktivität von 0,05 bis 2,5 mTU/g vorliegt, wobei eine Enzymeinheit (TU) diejenige Menge Enzym ist, die aus einer Caseinlösung in einer Minute Spaltprodukte freisetzt, die die gleiche Extinktion besitzen wie eine 1 mol/l Tyrosinlösung, dadurch gekennzeichnet, daß der Gehalt an Oleandomycin 1 bis 250 ppm beträgt.The invention accordingly relates to a feed mixture based on carbohydrates, protein, fats and optionally conventional additives and a content of oleandomycin and proteolytic enzymes in such an amount that an enzymatic activity of 0.05 to 2.5 mTU/g is present, where one enzyme unit (TU) is the amount of enzyme which releases cleavage products from a casein solution in one minute which have the same extinction as a 1 mol/l tyrosine solution, characterized in that the content of oleandomycin is 1 to 250 ppm.

Das Antibiotikum Oleandomycin gehört zur Gruppe der Makrolidantibiotika und wird in bekannter Weise aus Streptomyces antibioticus-Kulturen isoliert. Die Summenformel der Base lautet: C[tief]35H[tief]61O[tief]12N. Als Futtermitteladditiv können auch weitere, daraus abgeleitete Verbindungen, z.B. Salze, Ester oder Komplexe oder eine Adsorbatform des Oleandomycins Verwendung finden.The antibiotic oleandomycin belongs to the group of macrolide antibiotics and is isolated in the usual way from Streptomyces antibioticus cultures. The molecular formula of the base is: C[deep]35H[deep]61O[deep]12N. Other compounds derived from it, e.g. salts, esters or complexes or an adsorbate form of oleandomycin, can also be used as feed additives.

Geeignete proteolytische Enzyme werden vor allem durch Züchten von Mikroorganismen und Abtrennen aus den Nährlösungen erhalten.Suitable proteolytic enzymes are mainly obtained by culturing microorganisms and separating them from the nutrient solutions.

Die Verfahren hierzu sind bekannt. Beispielsweise werden proteolytische Enzyme aus Bacillus licheniformis, Bacillus natta, Bacillus subtilis usw. verwendet. Besonders bevorzugt werden saure Proteasen, z.B. aus Aspergillus niger oder aus Rhizopus rhizopodiformis entsprechend DE-OS 25 28 490. Derartige Proteasen haben ein besonders breites Wirkungsspektrum im schwach sauren Bereich zwischen pH 2,5 - 6,5.The processes for this are known. For example, proteolytic enzymes from Bacillus licheniformis, Bacillus natta, Bacillus subtilis, etc. are used. Acidic proteases, e.g. from Aspergillus niger or from Rhizopus rhizopodiformis according to DE-OS 25 28 490, are particularly preferred. Such proteases have a particularly broad spectrum of activity in the weakly acidic range between pH 2.5 - 6.5.

Handelsübliche Futtermischungen sind für die speziellen Bedürfnisse der einzelnen Tierarten möglichst optimal zusammengestellt. Die Grundlage bilden Kohlenhydrate vor allem aus Getreidekomponenten, Mais oder dgl. Als Eiweißträger dienen in erster Linie Sojaschrot, Fischmehl, Tierkörpermehl, Kleie und dgl. Fehlende Aminosäuren, z.B. Methionin oder Lysin, können zusätzlich zugegeben werden. Fette werden in Form von pflanzlichen oder tierischen Fetten oder Abfallfetten beigefügt. Zum Körperaufbau werden ferner Salze, wie Dicalciumphosphat, Calciumcarbonat, Kochsalz zugesetzt. Gegebenenfalls wird die Futtermischung durch Zugabe von Spurenelementen, Vitaminen, Ballaststoffen usw. abgerundet. Auch fermentativ hergestellte Substanzen wie Einzellerproteine aus Erdölfraktionen oder Alkoholen, diverse Hefen, Algeneiweiß oder sonstige, eventuell auch aus Abfallstoffen gewonnene Substanzen können z.T. in erheblichem Maße Bestandteile der Futterrezeptur sein.Commercial feed mixtures are composed as optimally as possible for the specific needs of the individual animal species. The basis is carbohydrates, mainly from grain components, corn or similar. The main sources of protein are soya meal, fish meal, animal meal, bran and similar. Missing amino acids, e.g. methionine or lysine, can also be added. Fats are added in the form of vegetable or animal fats or waste fats. Salts such as dicalcium phosphate, calcium carbonate and table salt are also added to build up the body. If necessary, the feed mixture is rounded off by adding trace elements, vitamins, fiber, etc. Substances produced by fermentation such as single-cell proteins from petroleum fractions or alcohols, various yeasts, algae protein or other substances, possibly also obtained from waste materials, can also be part of the feed recipe to a considerable extent.

Die erfindungsgemäßen Tierfuttermischungen enthalten neben den üblichen jeweils für eine bestimmte Tierart abgestimmten Bestandteilen zusätzlich 1 - 250 ppm, vorzugsweise 5 - 50 ppm Oleandomycin, je nach Alter des Tieres und der Art der Futtermischung, und proteolytische Enzyme in einer solchen Menge, daß die enzymatische Aktivität 0,05 - 2,5 mTU/g, vorzugsweise 0,2 - 0,5 mTU/g beträgt.The animal feed mixtures according to the invention contain, in addition to the usual components tailored to a specific animal species, an additional 1 - 250 ppm, preferably 5 - 50 ppm oleandomycin, depending on the age of the animal and the type of feed mixture, and proteolytic enzymes in such an amount that the enzymatic activity is 0.05 - 2.5 mTU/g, preferably 0.2 - 0.5 mTU/g.

Die genannten Additiv-Konzentrationen beziehen sich auf den Gehalt im Gesamtfutter. Bei Konzentraten oder Ergänzungsfuttern liegen die Konzentrationen entsprechend höher. Insbesondere wird eine Kombination aus Oleandomycin und einer sauren Pilz-Protease bzw. Proteasenmischung eingesetzt. Der damit erzielte Zuwachs bzw. die Verbesserung der Futterverwertung beträgt zusätzlich mehrere Prozent im Vergleich zu entsprechenden, lediglich Antibiotikum enthaltenden Kontrollmischungen.The additive concentrations mentioned refer to the content in the entire feed. The concentrations are correspondingly higher in concentrates or supplementary feeds. In particular, a combination of oleandomycin and an acidic fungal protease or protease mixture is used. The increase or improvement in feed utilization achieved in this way is several percent more than with corresponding control mixtures containing only antibiotics.

Die beanspruchte Kombination aus Oleandomycin und Enzymen bewährt sich vor allem in Futter für Geflügel, die Ferkelaufzucht und Schweinemast. Sie kann jedoch auch in Futtermischungen für andere Tierarten verwendet werden, in denen Oleandomycin selbst mit Vorteil eingesetzt wird.The claimed combination of oleandomycin and enzymes is particularly effective in feed for poultry, piglet rearing and pig fattening. However, it can also be used in feed mixtures for other animal species in which oleandomycin itself is used to advantage.

Das Antibiotikum wird zweckmäßig in Form einer Vormischung dem Futter zugesetzt, z.B. gebunden an Sojaextraktionsschrot. Bei Verwendung von mehlförmigen Futterzusammensetzungen wird auch die Enzymkomponente als Vormischung appliziert. Als Trägersubstanz fungiert eine beliebige Futterkomponente, z.B. ebenfalls Sojaschrot oder auch ein inerter Träger.The antibiotic is best added to the feed in the form of a premix, e.g. bound to soya meal. When using meal-based feed compositions, the enzyme component is also applied as a premix. Any feed component, e.g. soya meal or an inert carrier, can act as a carrier substance.

Bei Verwendung dampfpelletierten Futters muß die Zumischung der Enzyme in geeignet stabilisierter Form erfolgen, um eine Desaktivierung durch Feuchtigkeit und Hitze während des Pelletierens zu verhindern. Ein derartiges Verfahren ist z.B. Gegenstand der DE-OS 26 02 260.When using steam-pelleted feed, the enzymes must be added in a suitably stabilized form to prevent deactivation by moisture and heat during pelleting. One such process is the subject of DE-OS 26 02 260.

Zur Bestimmung der Enzymeinheit (TU) wird die proteolytische Aktivität der Protease nach dem bekannten Prinzip von Anson ermittelt: eine geeignet verdünnte Menge Enzymlösung wird bei 40°C 20 Minuten mit einem gleichen Volumen einer 1,2%igen Caseinlösung inkubiert, wobei diese 0,6 % Milchsäure, 6 mol/l Harnstoff und 0,1 mol/l Zitronen- oder Essigsäure enthält. Der pH-Wert der Caseinlösung wird durch Zusatz von 2 mol/l Natronlauge auf 4,5 eingestellt. Nach der Inkubation wird im Volumenverhältnis 1 : 1 mit 0,4 mol/l Trichloressigsäure versetzt, der sich bildende Niederschlag von unverdautem Casein abfiltriert und im Filtrat die beim Aufbau entstandenen Protein-Spaltstücke nach einer beliebigen Eiweißbestimmungsmethode ermittelt. Geeignet hierfür ist z.B. das von Layne in Methods in Enzymology 3 (1957), Seiten 448 ff. beschriebene Verfahren.To determine the enzyme unit (TU), the proteolytic activity of the protease is determined according to the well-known Anson principle: a suitably diluted amount of enzyme solution is incubated at 40°C for 20 minutes with an equal volume of a 1.2% casein solution containing 0.6% lactic acid, 6 mol/l urea and 0.1 mol/l citric or acetic acid. The pH of the casein solution is adjusted to 4.5 by adding 2 mol/l sodium hydroxide solution. After incubation, 0.4 mol/l trichloroacetic acid is added in a volume ratio of 1:1, the precipitate of undigested casein that forms is filtered off and the protein fragments that were formed during the synthesis are determined in the filtrate using any protein determination method. The method described by Layne in Methods in Enzymology 3 (1957), pages 448 ff., is suitable for this.

Für jede Meßprobe muß ein Blindwert angefertigt werden, bei dem zuerst Trichloressigsäure und dann Caseinlösung zugesetzt wird. Dieser Blindwert gibt neben dem Reagenzien-Leerwert den Anteil an niedermolekularen Peptiden an, der bereits vor der Verdauung in der Enzymlösung vorhanden ist. Die Differenz zwischen Haupt- und Blindwert wird bei der angegebenen Methode dann mit der Extinktion verglichen, die eine bestimmte Menge Tyrosin bei dieser Bestimmung liefert. Diese Menge Tyrosin ist dann ein Maß für die proteolytische Aktivität des vorliegenden Enzyms: eine Enzymeinheit (TU) ist diejenige Menge Enzym, die aus einer Caseinlösung in einer Minute Spaltprodukte freisetzt, die die gleiche Extinktion besitzen, wie eine 1 mol/l Tyrosinlösung. Üblich ist die Angabe in mTU = 10[hoch]-3 TU.A blank value must be prepared for each sample, in which trichloroacetic acid and then casein solution are added first. This blank value indicates, in addition to the reagent blank value, the proportion of low molecular weight peptides that are already present in the enzyme solution before digestion. The difference between the main value and the blank value is then compared with the extinction that a certain amount of tyrosine produces in this determination using the specified method. This amount of tyrosine is then a measure of the proteolytic activity of the enzyme in question: one enzyme unit (TU) is the amount of enzyme that releases cleavage products from a casein solution in one minute that have the same extinction as a 1 mol/l tyrosine solution. The usual indication is in mTU = 10[to the power of]-3 TU.

Beispiel 1example 1

450 Masteintagsküken, geschlechtssortiert männlich, weiblich (1 : 1) der Herkunft Ross wurden in Käfigen 4 Wochen mit jeweils gleichartig zusammengesetzten Futtermischungen, jedoch450 day-old chicks, sex-sorted male, female (1 : 1) of Ross origin were kept in cages for 4 weeks with feed mixtures of the same composition, but

a) ohne Zusatz von Antibiotikum oder Enzyma) without addition of antibiotic or enzyme

b) mit Zusatz von 10 ppm Oleandomycinb) with addition of 10 ppm oleandomycin

c) mit Zusatz von 10 ppm Oleandomycin und 0,6 mTU/g Futter saure Proteasen aus Rhizopus rhizopodiformisc) with the addition of 10 ppm oleandomycin and 0.6 mTU/g feed acid proteases from Rhizopus rhizopodiformis

gefüttert und nach Abschluß des Versuches das Endgewicht der Tiere und die Futterverwertung bestimmt. Unter Futterverwertung wird das Verhältnis Futterverbrauch : Zuwachs verstanden.fed and after completion of the experiment the final weight of the animals and the feed conversion rate are determined. Feed conversion is understood as the ratio of feed consumption to growth.

Futterzusammensetzung (%)Feed composition (%)

Mais 49,10Corn 49.10

Sojaschrot 36,00Soya meal 36,00

Maiskleber 4,00Corn Gluten 4.00

Sojaöl 5,65Soybean oil 5.65

Phosphorsaurer Futterkalk 2,15Phosphoric acid feed lime 2.15

Kohlensaurer Futterkalk 0,80Carbonic feed lime 0.80

Vitamin- u. Mineralprämix 1,85Vitamin and mineral premix 1.85

Kochsalz 0,35Table salt 0.35

DL-Methionin 0,10DL-methionine 0.10

____________

100,00100.00

ErgebnisResult

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

a) b) c)a) b) c)

ohne mit mit Oleandomycinwithout with with Oleandomycin

Zusatz Oleandomycin + EnzymAddition Oleandomycin + Enzyme

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Zunahme 748 g 755 g 771 gWeight gain 748 g 755 g 771 g

Futter- 1,57 1,54 1,52Feed- 1.57 1.54 1.52

verwertungrecycling

Beispiel 2Example 2

An 240 Ferkeln wurde im Gewichtsabschnitt 10 - 25 kg ein identisch zusammengesetztes Aufzuchtfutter verfüttert, jedoch240 piglets in the weight range 10 - 25 kg were fed an identically composed rearing feed, but

a) ohne Zusatz von Antibiotikum oder Enzyma) without addition of antibiotic or enzyme

b) mit Zusatz von 50 ppm Oleandomycinb) with addition of 50 ppm oleandomycin

c) mit Zusatz von 50 ppm Oleandomycin und 0,35 mTU/g Futter saure Proteasen aus Rhizopus rhizopodiformisc) with the addition of 50 ppm oleandomycin and 0.35 mTU/g feed acid proteases from Rhizopus rhizopodiformis

Die Tiere waren in Gruppen Durchschnittszeichen 3 Flatdecks gehalten und wurden ad libitum gefüttert. Über regelmäßige Wägungen wurde Wachstumsverlauf und die Futterverwertung bestimmt. Unter Futterverwertung wird dabei das Verhältnis Futterverbrauch : Zuwachs verstanden.The animals were kept in groups of 3 flat decks and were fed ad libitum. Growth and feed conversion were determined by regular weighing. Feed conversion is understood to be the ratio of feed consumption to growth.

Futterzusammensetzung (%)Feed composition (%)

Weizen 38,0Wheat 38.0

Haferflocken 20,0Oat flakes 20.0

Weizenkleie 9,9Wheat bran 9.9

Sojafeinmehl 16,4Soya flour 16.4

Malzkeime 5,0Malt germs 5.0

Fett 3,0Fat 3.0

Maisstärke/Dextrose 4,0Corn starch/dextrose 4.0

Mineralstoffe, Vitamine 3,7Minerals, vitamins 3,7

__________

100,0100.0

ErgebnisResult

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

a) b) c)a) b) c)

ohne mit mit Oleandomycinwithout with with Oleandomycin

Zusatz Oleandomycin + EnzymAddition Oleandomycin + Enzyme

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Tägl. 486 g 492 g 509 gDaily 486 g 492 g 509 g

Zunahmeincrease

Futter- 2,22 2,12 2,07Feed- 2.22 2.12 2.07

verwertungrecycling

Claims (2)

1. Futtermittelmischung auf der Basis von Kohlenhydraten, Eiweiß, Fetten und gegebenenfalls üblichen Zusatzstoffen sowie einem Gehalt an Oleandomycin und proteolytischen Enzymen in einer solchen Menge, daß eine enzymatische Aktivität von 0,05 bis 2,5 mTU/g vorliegt, wobei eine Enzymeinheit (TU) diejenige Menge Enzym ist, die aus einer Caseinlösung in einer Minute Spaltprodukte freisetzt, die die gleiche Extinktion besitzen wie eine 1 mol/l Tyrosinlösung, dadurch gekennzeichnet, daß der Gehalt an Oleandomycin 1 bis 250 ppm beträgt.1. Feed mixture based on carbohydrates, proteins, fats and optionally conventional additives and containing oleandomycin and proteolytic enzymes in an amount such that an enzymatic activity of 0.05 to 2.5 mTU/g is present, where one enzyme unit (TU) is the amount of enzyme which releases cleavage products from a casein solution in one minute which have the same extinction as a 1 mol/l tyrosine solution, characterized in that the oleandomycin content is 1 to 250 ppm. 2. Futtermittelmischung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die proteolytischen Enzyme saure Proteasen mit einem Wirkungsspektrum zwischen pH 2,5 und 6,5 sind.2. Feed mixture according to claim 1, characterized in that the proteolytic enzymes are acid proteases with an activity spectrum between pH 2.5 and 6.5.
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