CN111989111A

CN111989111A - 睡眠促进用组合物及使用该睡眠促进用组合物的药物组合物和饮食品组合物

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Publication number: CN111989111A
Application number: CN201980022403.7A
Authority: CN
Inventors: 村田麻衣; 南淳一; 山田明男; 久原徹哉
Original assignee: Morinaga Milk Industry Co Ltd
Current assignee: Morinaga Milk Industry Co Ltd
Priority date: 2018-03-28
Filing date: 2019-03-22
Publication date: 2020-11-24
Anticipated expiration: 2039-03-22
Also published as: US11324784B2; EP3777869A4; TW202003003A; CN111989111B; TWI815872B; JP2023133435A; JP7323510B2; AU2019241546B2; US20210077548A1; AU2019241546A1; EP3777869B1; AU2019241546A2; EP3777869A1; CN118319957A; EP3777869C0; JPWO2019188806A1; WO2019188806A1

Abstract

本发明提供新的睡眠促进用组合物。提供以属于短双歧杆菌的细菌作为有效成分的、睡眠促进用组合物。本发明的睡眠促进用组合物能够使非快速眼动睡眠和快速眼动睡眠长期化、或使睡眠中的自发活动量减少、或使睡眠中的苏醒时间减少而使睡眠时间长期化。本发明的睡眠促进用组合物还能够减少白天的苏醒困难。本发明的睡眠促进用组合物能用于药物组合物、饮食品组合物。

Description

睡眠促进用组合物及使用该睡眠促进用组合物的药物组合物和饮食品组合物

技术领域

本发明涉及睡眠促进用组合物及使用该睡眠促进用组合物的药物组合物和饮食品组合物。

背景技术

在现代社会中，由于日常生活、工作中的精神压力、24小时型的生活方式而苦恼于失眠的人日益增加。在以日本人为对象的调查中，怀疑患有失眠症的人的比例约达到40％，这成为严重的社会问题(参照非专利文献1)。

作为对睡眠感觉的不满，例如可示例出失眠、做噩梦、在起床时仍困倦、没有深度睡眠(感觉沉睡)、即使醒来疲劳仍存在、白天苏醒困难(白天感到困意)等。这些睡眠障碍导致工作的效率降低、还有导致意外事故发生的危险性。作为它们的原因，不仅有睡眠时间短，还可举出无法获得优质的睡眠。即，由于如下原因：在就寝后直至出现非快速眼动睡眠所需的时间(入睡时间)长、非快速眼动睡眠时间短、快速眼动睡眠与非快速眼动睡眠之间适当的睡眠类型紊乱等，从而无法得到较深的非快速眼动睡眠。因此，可认为对于改善期望舒适睡眠的人的失眠的药的需求，将来会逐渐增加。

对此，作为改善睡眠质量的手段，可考虑出利用作为药物的安眠药。然而，在利用安眠药时需要医生的诊断。安眠药还存在唤醒力差、记忆障碍、依赖性等副作用，难以简便且安全地利用的情况较多。另外，在作为药物的安眠药中，还有如以苯并二氮

系、巴比妥酸盐系为主的安眠药那样减少非快速眼动睡眠的药物，若未正确使用则反而还会降低睡眠质量。使用其它缓和精神压力的镇定剂、抗焦虑药、安眠药等化学合成药剂的情况，在严重的副作用、习惯性方面均存在不适于日常使用或长期使用这样的问题。

另外，作为改善睡眠改善的应对方法，还尝试了生活方式的改善、心理训练(Mental training)等应对法，但其有效性是有限的。

除了药物以外，还积极进行了从天然成分、饮食品中研发睡眠改善剂的研究，并提出了各种方案。作为这样的睡眠改善剂的有效成分，例如可列举出茄科睡茄属植物来源成分(参照专利文献1)、常绿萱草的发酵处理物(参照专利文献2)、茶叶来源的茶氨酸(参照专利文献3)等。另外，还提出了含有S-腺苷甲硫氨酸的酵母(专利文献4)、欧洲白蜡树提取物和西伯利亚落叶松提取物(参照专利文献5)、含有α硫辛酸和锌的组合物(参照专利文献6)等。

近些年，逐渐明确了肠道环境参与由肠向脑的信号传递，报道了控制以肠道为起点的睡眠。

例如，专利文献7中，公开了在给予了长双歧杆菌ATCC BAA-999的小鼠中，非快速眼动睡眠时间的延长效果和快速眼动睡眠时间的缩短效果。另外，非专利文献2中，公开了乳酸菌短乳杆菌(Lactobacillus brevis)SBC8803的投与具有调节近昼夜节律并促进非快速眼动睡眠的效果。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2006-28051号公报

专利文献2：日本特开2006-62998号公报

专利文献3：WO2005/097101

专利文献4：日本特开2013-082641号公报

专利文献5：WO2013/051727

专利文献6：WO2015/098441

专利文献7：WO2010/060722

非专利文献

非专利文献1：Sleep Med 2012；13(7):831-837

非专利文献2：Life Science 2014；111(1-2):47-52

发明内容

发明要解决的问题

如前所述，虽然迄今为止已经报道了一些通过摄取益生菌的菌体或发酵产物所带来的改善非快速眼动睡眠的作用，但已知益生菌每个菌株显示出不同的生理作用，无法得到一致的结果。尚不知晓减少中途苏醒、促进非快速眼动睡眠和/或快速眼动睡眠这两者方的成分。

因此，本发明中的主要目的在于提供新的睡眠促进用组合物。

用于解决问题的方案

即，本发明中，首先，提供以属于短双歧杆菌的细菌作为有效成分的睡眠促进用组合物。

本发明的睡眠促进用组合物中，作为属于前述短双歧杆菌的细菌，可以使用短双歧杆菌MCC1274(FERM BP-11175)。

本发明的睡眠促进用组合物能够促进睡眠而使睡眠时间长期化。

更具体而言，本发明的睡眠促进用组合物能使非快速眼动睡眠和/或快速眼动睡眠长期化、或使睡眠中的自发活动量减少、或使睡眠中的苏醒时间减少而使睡眠时间长期化。

本发明的睡眠促进用组合物还能够减少白天的苏醒困难。

本发明的睡眠促进用组合物能用于药物组合物、饮食品组合物。

发明的效果

根据本发明，可以提供新的睡眠促进用组合物。

需要说明的是，未必限定于此处记载的效果，还可以是本说明书中记载的任意效果。

具体实施方式

以下对用于实施本发明的适宜的实施方式进行说明。需要说明的是，以下说明的实施方式是示出本发明的代表性实施方式的一个例子，因此不是用于狭窄地解释本发明的范围。

1.睡眠促进用组合物

本发明的睡眠促进用组合物以属于短双歧杆菌的细菌作为有效成分。

短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)是属于双歧杆菌属的菌种之一。短双歧杆菌大多数居住在婴幼儿的大肠内，在属于双歧杆菌属的菌种中还可知长婴儿长双歧杆菌(Bifidobacterium longum subsp.infantis)等及婴幼儿型的双歧杆菌属细菌。

对于本发明的睡眠促进用组合物，其有效成分主要是大多数居住于婴幼儿的大肠内的短双歧杆菌，因此安全性优异、即使长期、连续地给药也无需担心副作用，因此是非常有用。进而，在与其它药剂的组合使用时，安全性也高。

作为属于短双歧杆菌的细菌，例如可列举出短双歧杆菌MCC1274(FERM BP-11175)、M-16V(NITE BP-02622)、UCC2003、YIT4010、YIT4064、BBG-001、BR-03、B632(DSMZ24706)、C50、Bb99(DSM 13692)、R0070、ATCC15700、ATCC15698、DSM 24732等，其中，优选使用MCC1274(FERM BP-11175)、M-16V(NITE BP-02622)。

MCC1274于2009年8月25日在独立行政法人产业技术综合研究所专利生物保藏中心((现在的国家高级工业科学技术学院，国际专利生物保藏中心(IPOD，NITE)、邮政编码：292-0818、地址：千叶县木更津市上总镰足2-5-8 120号室)以保藏编号IPOD FERM BP-11175进行保藏。

M-16V于2018年1月26日在国家技术评估学会，专利微生物保藏中心(NPMD)(邮政编码：292-0818、地址：千叶县木更津市上总镰足2-5-8 122号室)以NITE BP-02622的保藏编号，进行了基于布达佩斯条约的国际保藏。

本发明中，其中，作为属于前述短双歧杆菌的细菌，优选使用短双歧杆菌MCC1274(FERM BP-11175)。

需要说明的是，以上述示例的菌株名所特定的菌株中不限定于以该菌株名保藏、注册在规定的机关的菌株其本身(以下为了方便说明，也称为“保藏菌株”)，还包括与其实质上同等的菌株(也称为“派生菌株”或“衍生株”)。即，例如，“短双岐杆菌MCC1274(FERMBP-11175)”不限定于以MCC1274(FERM BP-11175)的保藏编号保藏在上述保藏机关的菌株其本身，还包括与其实质上同等的菌株。

对于菌株，“与上述保藏菌株实质上同等的菌株”是指：属于与上述保藏菌株相同的种，且可以得到作为本发明的效果的睡眠促进效果的菌株。与上述保藏菌株实质上同等的菌株例如还可以是将该保藏菌株作为亲本菌株的派生菌株。作为派生菌株，可列举出由保藏菌株经育种而得到的菌株、由保藏菌株经自然生长的菌株。

实质上相同的菌株、派生菌株可列举出下述那样的株。

(1)利用RAPD法(Randomly Amplified Polymorphic DNA，随机扩增多态性DNA)、PFGE法(Pulsed-field gel electrophoresis，脉冲场凝胶电泳)法被判定为相同的菌株的菌株(记载于Probiotics in food/Health and nutritional properties andguidelines for evaluation 85Page43)

(2)仅具有源自该保藏菌株的基因且不具有源自外来的基因，DNA的同一性为95％以上的菌株

(3)由该菌株经育种而得到的菌株(包括基因工程改性、突变、自然突变)、具有相同的性质的菌株

本发明的睡眠促进用组合物能够促进睡眠而使睡眠时间长期化。更具体而言，本发明的睡眠促进用组合物能使非快速眼动睡眠和快速眼动睡眠长期化、或使睡眠中的自发活动量减少、或使睡眠中的苏醒时间减少而使睡眠时间长期化。例如，通过摄取本发明的睡眠促进用组合物，从而能够长时间持续地睡眠，减少睡眠过程中的苏醒，因此能够改善睡眠质量、进行深度睡眠。

另外，本发明的睡眠促进用组合物还能够减少白天的苏醒困难。

进而，本发明的睡眠促进用组合物还具有镇静效果。

本发明的睡眠促进用组合物通过促进睡眠，而能够用于在睡眠不佳下所引起的症状、疾病的预防和/或治疗。作为在睡眠不佳下所引起的症状、疾病，例如可列举出失眠症(入睡差、中途起来无法再入睡、一大早就起床、无法熟睡)、嗜睡症(白天困得不行、打盹而被提醒)、昼夜节律性睡眠障碍、多动腿综合征(Restless legs syndrome)、打鼾、睡眠呼吸暂停综合征、异态睡眠、发作性睡病(narcolepsy)、梦游症、意识不清的觉醒、睡眠恐惧(night terrors)、节律性运动障碍、睡眠时痉挛、梦呓、夜啼、婴儿腹绞痛(colic)、夜间下肢抽筋、噩梦、睡眠麻痹、与睡眠相关的阴茎勃起功能障碍、快速眼动睡眠行为障碍、磨牙症、夜尿、打鼾、阵发性肌张力障碍、周期性肢体抽动障碍、婴儿瘁死综合症(SIDS)等。

进而，本发明的睡眠促进用组合物还能够促进在特定状况下的睡眠。具体而言，例如，由于更年期、高龄者、哺乳期妇女、按班轮换的工人、海外渡航的时差昏聩、假期后的社会时差昏聩、智能手机/电脑的光刺激所致的苏醒(电子压力失眠)等而长时间无法不能睡得很香时是有效的。

本发明的睡眠促进用组合物的对象没有特别限定，可以用于包括人在内的动物。例如，可以用于失眠(入睡障碍)、暂时入睡后夜里醒来(中途苏醒)、醒得比人期望的早(清晨苏醒)、没有睡得很好的满足感(深度睡眠障碍)。另外，其对象性别、对象年龄等没有特别限定，作为人，可以用于失眠婴幼儿、容易出现睡眠障碍的中老年。

另外，尤其可以特别有效地用于35岁以上、期望的是40岁以上、进而期望的是45岁以上的中老年以上。

本发明的睡眠促进用组合物中作为其有效成分属于短双歧杆菌属的细菌，还可以含有包含属于短双歧杆菌的细菌的培养物。

作为培养本发明中使用的短双歧杆菌的培养基，没有特别限定，属于双歧杆菌属的细菌的培养可以使用通常使用的培养基。

即，作为碳源，可以根据同化性使用例如：葡萄糖、半乳糖、乳糖、阿拉伯糖、甘露糖、蔗糖、淀粉、淀粉水解物、废糖蜜等糖类。作为氮源，可以使用例如：氨、硫酸铵、氯化铵、硝酸铵等铵盐类，硝酸盐类。另外，作为无机盐类，可以使用例如：氯化钠、氯化钾、磷酸钾、硫酸镁、氯化钙、硝酸钙、氯化锰、硫酸亚铁等。另外，也可以使用蛋白胨、大豆粉、脱脂大豆粕、肉提取物、酵母提取物等有机成分。

培养条件只要不损害本发明的效果就没有特别限定，例如，培养温度通常为25～50℃，优选为35～42℃。另外，培养优选在厌氧条件下进行，例如，可以边通入二氧化碳气体等厌氧气体边进行培养。另外，还可以在液体静置培养等微好氧条件下进行培养。

本菌体可以直接使用培养后得到的培养物，也可以稀释或浓缩而使用，还可以使用由培养物回收的菌体。另外，只要不有损本发明的效果，就可以在培养后进行加热和冷冻干燥等各种追加操作。另外，本菌体可以是活菌或死菌。活菌的情况，优选利用菌液冷冻法、喷雾干燥法、冷冻干燥法、油滴法进行处理。作为死菌，可列举出利用加热、冷冻干燥等进行了灭菌而得到的死菌。作为其它死菌体的制备法，可列举出喷雾干燥法(喷雾干燥法)、蒸煮灭菌法、冷冻干燥法、UHT灭菌法、加压灭菌法、高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法、流通蒸汽消毒法、电磁波灭菌法、电子射线灭菌法、高频率灭菌法、辐射线灭菌法、紫外线灭菌法、环氧乙烷气体灭菌法、过氧化氢气体等离子体灭菌法、化学灭菌法(醇灭菌法、福尔马林固定法、电解水处理法)等。另外，本菌体可以是破碎物。破碎物可以是将活菌破碎而得到的破碎物或将死菌破碎而得到的破碎物，在破碎后还可以实施加热、冷冻干燥等。

另外，破碎可以选择使用了本发明领域中公知的方法和机器的、例如利用物理破碎、酶溶破碎处理、药物处理、自溶酶处理等进行的破碎。

物理破碎可以是在菌体悬浮液的状态下的处理、在菌体粉末的状态下的处理中的任意种。作为物理破碎的例子，可以选择：使用了超声波均质器、均质器、球磨机、珠磨机、磨机、行星磨机等的利用搅拌进行的破碎；使用了喷射式粉碎机、喷射式粉碎机、细胞破碎机等的利用压力进行的破碎；利用过滤器过滤处理使菌体损伤所进行的破碎。

作为酶溶解处理，例如可以使用溶菌酶等酶来破坏乳酸菌菌体的细胞结构。

作为药物处理，可以使用大豆磷脂质、甘油脂肪酸酯等表面活性剂来破坏乳酸菌菌体的细胞结构。

作为自溶酶处理，可以通过一部分乳酸菌自身的酶来溶解乳酸菌菌体。

需要说明的是，本发明中，由于无需添加其它药物、化合物，故而优选物理破碎。

需要说明的是，本说明书中的“培养物”还包括培养上清液。

本发明的睡眠促进用组合物可以仅是前述有效成分，还可以是配混前述有效成分和除有效成分以外的任意成分而成的组合物。

作为前述任意成分，没有特别限定，可以配混一直以来在药物中配混的添加剂(例如，后述的制剂载体等)。

2.本发明的睡眠促进用组合物的具体的形态

本发明的睡眠促进用组合物可以以饮食品、药物、准药物、饲料等形态使用。

需要说明的是，本实施方式的用途可以是治疗目的使用，还可以是非治疗目的使用。

“非治疗目的”是指不包括医疗行为、即通过治疗对人体进行的处置行为的概念。例如可列举出健康增进、美容行为等。

“改善”是指疾病、症状或状态的好转；防止、延迟疾病、症状或状态的恶化；逆转、防止或延迟疾病或症状的加剧。

“预防”是指防止、延迟适用对象发生疾病或症状，或者降低适用对象的疾病或症状的危险性。

＜饮食品＞

本发明的睡眠促进用组合物可以添加在公知的饮食品中来制备，还可以混合在饮食品的原料中来制造新的饮食品。

使用本发明的睡眠促进用组合物的饮食品无论液体、糊剂状、固体、粉末等的形态，除了压片糖、流质食品等之外，可列举出例如：小麦粉制品、速食品、农产加工品、水产加工品、畜产加工品、乳/乳制品、油脂类、基础调味剂、复合调味剂/食品类、冷冻食品、点心类、饮料、除此以外的市售品等。

作为前述小麦粉制品，可列举出例如：面包、通心粉、意大利细面条、面类、蛋糕混合料、油炸粉、面包粉等。

作为前述速食品类，可列举出例如：方便面、杯面、蒸煮/烹调食品、烹调罐头、微波用食品、速溶汤/日式炖菜、速溶大酱汤/吸入物、罐装浓汤、冻/干食物、其它速食品等。

作为前述农产加工品，可列举出例如：农作物罐头、水果罐头、果酱(jam)/橘子酱(Marmalade)类、咸菜、煮豆类、农产品干物类、谷物(谷物加工品)等。

作为前述水产加工品，例如可列举出：水产罐头、鱼肉火腿/香肠、水产糜类制品、水产鱼贝类、佃煮类等。

作为前述畜产加工品，例如可列举出：畜产罐头/糊剂类、畜肉火腿/香肠等。

作为前述乳/乳制品，例如可列举出：发酵乳、加工乳、乳饮料、酸奶类、乳酸菌饮料类、乳酪、冰淇淋类、配方奶粉类、奶油、育儿用配方奶粉、婴幼儿用营养辅助食品及其它乳制品等。

作为前述油脂类，例如可列举出：黄油、人造奶油类、植物油等。

作为前述基础调味剂，可列举出例如：酱油、大酱、沙司(Sauce)类、西红柿加工调味剂、味醂类、食醋类等；作为前述复合调味剂/食品类，可列举出：烹调混合料、咖喱的原料类、鱼露类、沙拉(dressing)类、面汤类、香辛料类、其它复合调味剂等。

作为前述冷冻食品，可列举出例如：材料冷冻食品、半烹调冷冻食品、经烹调的冷冻食品等。

作为前述点心类，可列举出例如：焦糖、冰糖、口香糖、巧克力、曲奇(cookie)、饼干(biscuits)、蛋糕(cake)、馅饼(pie)、小吃(snack)、薄脆饼(cracker)、日本点心、米点心、豆点心、西式甜点、其它点心等。

作为前述饮料，例如可列举出：碳酸饮料、天然果汁、果汁饮料、带有果汁的清凉饮料、果肉饮料、带有果粒的果实饮料、蔬菜系饮料、豆奶、豆奶饮料、咖啡饮料、茶饮料、粉末饮料、浓缩饮料、运动饮料、营养饮料、酒精饮料、其它嗜好饮料等。

作为上述以外的市售食品，例如可列举出：婴儿食品、米饭伴侣、茶泡饭海带等。

本发明的饮食品组合物可以通过在通常的饮食品的原料中添加本菌体来制造，除了添加本菌体之外，可以与通常的饮食品同样地制造。可以在饮食品组合物的制造工序中的任意阶段进行本菌体的添加。另外，还可以经过基于添加的本菌体的发酵工序来制造饮食品组合物。作为这样的饮食品组合物，可列举出乳酸菌饮料和发酵乳等。

作为饮食品组合物的原料，可以使用在通常的饮食品中使用的原料。所制得的饮食品组合物可以经口地摄取。

另外，本发明的饮食品组合物中只要不损害本发明的效果就还可以使用公知的或未来会发现的、具有益生菌效果的成分或辅助益生菌效果的成分。例如，本发明的饮食品组合物可以将乳清蛋白、酪蛋白、大豆蛋白质、或豌豆蛋白(pea protein)等各种蛋白质或其混合物、分解物；亮氨酸、缬氨酸、异亮氨酸或谷氨酰胺等氨基酸；维生素B6或维生素C等维生素类；肌酸；柠檬酸；鱼油；或者低聚异麦芽糖、低聚半乳糖、低聚木糖、大豆低聚糖、低聚果糖、乳酮糖等低聚糖等成分与本菌体配混来制造。

本发明的饮食品中的属于短双歧杆菌的细菌的含量只要不损害本发明的效果就可以自由地设定。本发明中，特别是对于饮食品中的属于短双歧杆菌的细菌的含量，相对于饮食品的最终组合物，更优选含有1×10³～1×10¹²CFU/g。另外，每天的给药量至少添加1×10³CFU/天以上、更优选1×10⁶CFU/天以上、更优选1×10⁸CFU/天以上、更优选2×10¹⁰CFU/天以上、或进一步添加。“cfu”表示菌落形成单位(Colony forming unit)。本菌体为死菌时，cfu/g或cfu/ml可以替换为个细胞/g或个细胞/ml。本菌体为破碎物时，可以由破碎之前的菌数(个细胞/g)以重量换算来表示。

〔功能性标示饮食品〕

另外，本发明中定义的饮食品等也可以以标示了特定的用途(特别是保健用途)、功能的饮食品的形式来提供/销售。

“标示”行为中包括用于向需求者通知上述用途的全部行为，只要是能唤起/类推前述用途的表现，无论标示的目的、标示的内容、标示的对象物/介质等如何全部均属于本发明的“标示”行为。

另外，“标示”优选的是通过需求者能直接识别上述用途的表现来进行。具体而言，可列举出：为了转让、交付、用于转让或交付而展示在饮食品的商品或商品的包装上记载了前述用途的物品，在进口行为、涉及商品的广告、价格表或说明书类上将上述用途记载并展示、或进行发布，或在将这些作为内容的信息中记载上述用途并利用电磁(网络等)方法来提供的行为等。

另一方面，作为标示内容，优选为根据行政等许可的标示(例如基于行政规定的各种制度而获得许可，在基于这样的许可的状态下进行的标示等)。另外，优选将这样的标示内容附于包装、容器、目录、小册子、POP(购买点广告，Point of purchase advertising)等销售现场的宣传材料、其它资料等上。

另外，“标示”还可列举出作为健康食品、功能性食品、患者用食品、经肠营养食品、特殊用途食品、保健功能食品、特定保健用食品、功能性标示食品、营养功能食品、药物用准药物的标示。其中特别是被消费者厅许可的标示、例如可列举出通过特定保健用食品制度、功能性标示食品制度、与其相似的制度许可的标示等。更具体而言，可以列举出作为特定保健用食品的标示、作为带有条件的特定保健用食品的标示、作为功能性标示食品的标示、对身体的构造、功能产生影响内容的标示、疾病风险降低标示等。其中作物典型的例子，可列举出健康增进法实施规则(平成15年4月30日日本厚生劳动省第86号令)中所规定的作为特定保健用食品的标示(特别是保健用途的标示)、作为食品标示法(平成25年法律第70号)中所规定的作为功能性标示食品的标示和与其类似的标示。

需要说明的是，为了进行上述那样的标示而使用的语句不仅限于睡眠促进等语句，作为除此之外的语句，只要是表示与睡眠促进相关的各种疾病、症状的预防、治疗和/或改善的效果的语句，就不用说包括在本权利要求书中。作为这样的语句，列举出例如还可以是“失眠者”“希望改善睡眠质量者”“担心失眠者”“起床时残留疲惫者”等基于对需要者意识到促进睡眠的效果那样的各种用途的标示。

另外，例如还可以采用如下方法：针对新生儿、婴儿，在经搾乳的母乳中添加本菌体，使其经口摄取或通过经鼻胃营养管等进行摄取。

另外，本发明的饮食品组合物中只要不损害本发明的效果就可以使用公知的或未来会发现的、具有益生元效果的成分或辅助益生元效果的成分。例如，本发明的饮食品组合物可以通过将乳清蛋白、酪蛋白、大豆蛋白质、或豌豆蛋白(pea protein)等各种蛋白质或其混合物、分解物；亮氨酸、缬氨酸、异亮氨酸或谷氨酰胺等氨基酸；维生素B6或维生素C等维生素类；肌酸；柠檬酸；鱼油；或者低聚异麦芽糖、低聚半乳糖、低聚木糖、大豆低聚糖、低聚果糖、乳酮糖、母乳低聚糖(HMO)等低聚糖等成分与本菌体配混来制造。作为本发明中可以使用的母乳低聚糖，可以使用2’-岩藻糖基乳糖、3-岩藻糖基乳糖、2’,3-二岩藻糖基乳糖、乳糖-N-丙糖II、乳糖-N-四糖、乳糖-N-新四糖、乳糖-N-岩藻五糖I、乳糖-N-新岩藻五糖、乳糖-N-岩藻五糖II、乳糖-N-岩藻五糖III、乳糖-N-岩藻五糖V、乳糖-N-新岩藻五糖V、乳糖-N-二岩藻六糖I、乳糖-N-二岩藻六糖II、6’-半乳糖基乳糖、3’-半乳糖基乳糖、乳糖-N-六糖和乳糖-N-新六糖等中性母乳低聚糖；3’-唾液乳糖、6’-唾液乳糖、3-岩藻糖基-3’-唾液乳糖、二唾液-乳糖-N-四糖等酸性母乳低聚糖。

作为本发明的饮食品，可以列举出婴幼儿用配方奶粉。婴幼儿用配方奶粉是指以0～12个月的婴儿为对象的婴幼儿用配方奶粉、以6～9个月以下的婴儿和幼儿(3岁为止)为对象的较大婴儿配方奶粉、以出生时的体重低于2500g的新生儿(低出生体重儿)为对象的低出生体重儿用配方奶粉、用于治疗具有牛乳过敏症、乳糖不耐症等疾病状态的孩子的各种治疗用奶粉等。进而，可以将该组合物用于保健功能食品、患者用食品。保健功能食品制度是鉴于内外动向、与一直以来的特定保健用食品制度的整合性、不仅以通常的食品还将制成片剂、胶囊等形状的食品作为对象而设计得到的，包括特定保健用食品(个别许可型)和营养功能食品(规格基准型)这2种类型。

作为本发明的饮食品，可以列举出面向妊娠期/哺乳期的母亲的妈妈用奶粉(配方奶粉)、营养辅助食品。妈妈用奶粉是指平衡良好地配混妊娠/哺乳期所需的营养而得到的奶粉等。

本发明的配方奶粉具体而言例如可以利用以下的方法来制造。

即，本发明提供睡眠促进用奶粉的制造方法，其通过将包含属于短双歧杆菌的细菌的菌体粉末与益生元和/或奶粉混合而得到睡眠促进用的奶粉。

具体而言，例如提供睡眠促进用奶粉的制造方法，其包括下述工序(A)～(C)：

(A)用含有乳成分的培养基培养属于短双歧杆菌的细菌而得到培养物的工序；

(B)将前述培养物供于喷雾干燥和/或冷冻干燥而得到菌体粉末的工序；

(C)混合前述菌体粉末和益生元而得到睡眠促进用的奶粉的工序。

另外，本发明提供睡眠促进用奶粉的制造方法，其包括下述工序(A)：

(A)将益生元、属于短双歧杆菌的细菌和乳成分混合而得到奶粉的工序。

另外，本发明的食品组合物具体而言还可以是例如睡眠促进用营养强化剂。睡眠促进用营养强化剂例如可以利用以下的方法来制造。

即，本发明提供睡眠促进用营养强化剂的制造方法，其包括下述工序(A)和(B)：

(A)将属于短双歧杆菌的细菌、和赋形剂混合而得到混合物的工序；

(B)对前述混合物进行压片的工序。

对于上述任意的制造方法，可以适宜组合使用除了上述工序中所提及的成分以外的成分。

＜药物、准药物＞

本发明的睡眠促进用组合物可以添加在公知的药物或准药物(以下也称为“药物等”)来制备，还可以混合在药物等原料中来制造新的药物等。

将本发明的睡眠促进用组合物配混于药物等中时，该药物等可以根据经口给药、非经口给药等给药方法而适宜制成期望的剂型。对于其剂型没有特别限定，经口给药的情况，例如可以制成散剂、颗粒剂、片剂、锭剂、胶囊剂等固体制剂；溶液剂、糖浆剂、悬浮剂、乳剂等液体制剂等。非经口给药的情况，例如可以制成栓剂、喷雾剂、吸入剂、软膏剂、贴剂、注射剂等。本发明中，优选制成经口给药的剂型。

需要说明的是，制剂化可以根据剂型适宜利用公知的方法来实施。

在进行制剂化时，可以适宜配混制剂载体等进行制剂化。另外，除了本发明的睡眠促进用组合物之外，可以使用通常制剂化中所使用的赋形剂、pH调节剂、着色剂、矫味剂等成分。进而，还可以根据适宜目的组合使用公知的或未来会发现的、具有疾病、症状的预防、改善和/或治疗的效果的成分。

作为前述制剂载体，可以根据剂型使用各种有机或无机的载体。作为固体制剂的情况的载体，例如可列举出赋形剂、结合剂、崩解剂、润滑剂、稳定剂、矫味矫臭剂等。

作为前述赋形剂，例如可列举出乳糖、白糖、葡萄糖、甘露糖醇、山梨糖醇等糖衍生物；玉米淀粉、马铃薯淀粉、α-淀粉、糊精、羧甲基淀粉等淀粉衍生物；结晶纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钙等纤维素衍生物；阿拉伯胶；葡聚糖；普鲁兰多糖；轻质无水硅酸、合成硅酸铝、偏硅酸铝酸镁等硅酸盐衍生物；磷酸钙等磷酸盐衍生物；碳酸钙等碳酸盐衍生物；硫酸钙等硫酸盐衍生物等。

作为前述结合剂，除了上述赋形剂之外可列举出例如：明胶；聚乙烯基吡咯烷酮；聚乙二醇等。

作为前述崩解剂，除了上述赋形剂之外可列举出例如：交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯基吡咯烷酮等经化学修饰的淀粉或纤维素衍生物等。

作为前述润滑剂，可列举出例如：滑石；硬脂酸；硬脂酸钙、硬脂酸镁等硬脂酸金属盐；胶体二氧化硅；硅酸铝镁盐(Veegum)、鲸蜡等蜡类；硼酸；二元醇；富马酸、己二酸等羧酸类；苯甲酸钠等羧酸钠盐；硫酸钠等硫酸盐类；亮氨酸；月桂基硫酸钠、月桂基硫酸镁等月桂基硫酸盐；硅酸酐、硅酸水合物等硅酸类；淀粉衍生物等。

作为前述稳定剂，可列举出例如：对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯等对羟基苯甲酸酯类；氯丁醇、苄醇、苯基乙醇等醇类；苯扎氯铵；乙酸酐；山梨酸等。

作为前述矫味矫臭剂，例如可列举出：甜味剂、酸味剂、香料等。

需要说明的是，作为用于经口给药用的液体制剂的情况下的载体，可列举出：水等溶剂、矫味矫臭剂等。

本发明的药物等中的属于短双歧杆菌的细菌的含量只要不损害本发明的效果就可以自由地设定。

药物组合物中的本菌体的含量可根据剂型、用法、对象的年龄、性别、疾病、症候、症状或障碍的种类、其程度和其它条件等进行适宜设定，通常更优选含有1×10³～1×10¹²CFU/g。另外，每天的给药量至少为1×10³CFU/天以上、更优选1×10⁶CFU/天以上、更优选1×10⁸CFU/天以上、更优选2×10¹⁰CFU/天以上或优选为在其以上。本菌体为死菌时，cfu/g或cfu/ml可以替换为个细胞/g或个细胞/ml。本菌体为破碎物时，cfu/g或cfu/ml或个细胞/g或个细胞/ml可以替换为上述cfu/g或cfu/ml或个细胞/g或个细胞/ml的活菌或死菌的破碎物。

＜饲料＞

本发明的睡眠促进用组合物可以在公知的饲料中添加来制备，或还可以在饲料的原料中混合来制造新的饲料。

将本发明的睡眠促进用组合物配混于饲料时，作为饲料的原料，例如可列举出：玉米、小麦、大麦、黑麦等谷类；麦麸、麦糠、米糠、脱脂米糠等糠类；玉米蛋白粗粉、玉米浆粗粉等制造糟粕类；脱脂奶粉、乳清、鱼粉、骨粉等的动物性饲料类；啤酒酵母等酵母类；磷酸钙、碳酸钙等矿物饲料；油脂类；氨基酸类；糖类等。另外，作为前述饲料的形态，例如可列举出：宠物动物用饲料(宠物食品等)、家畜饲料、养鱼饲料等。

本发明的饲料中的属于短双歧杆菌的细菌的含量只要不损害本发明的效果就可以根据体重等进行自由设定。

饲料组合物中的本菌体的含量可根据剂型、用法、对象的年龄、性别、疾病、症候、症状或障碍的种类、其程度和其它条件等进行适宜设定，通常更优选含有1×10³～1×10¹²CFU/g。另外，每天的给药量至少为1×10³CFU/天以上、更优选1×10⁶CFU/天以上、更优选1×10⁸CFU/天以上、更优选2×10¹⁰CFU/天以上或优选其以上。本菌体为死菌时，cfu/g或cfu/ml可以替换为个细胞/g或个细胞/ml。本菌体为破碎物时，cfu/g或cfu/ml或个细胞/g或个细胞/ml可以替换为上述cfu/g或cfu/ml或个细胞/g或个细胞/ml的活菌或死菌的破碎物。

本发明还可以采用以下的构成。

[1]一种睡眠促进用组合物，其以属于短双歧杆菌的细菌作为有效成分。

[2]根据[1]的睡眠促进用组合物，其中，所述细菌为短双歧杆菌MCC1274(FERMBP-11175)。

[3]根据[1]或[2]的睡眠促进用组合物，其使睡眠时间长期化。

[4]根据[3]的睡眠促进用组合物，其使非快速眼动睡眠和/或快速眼动睡眠长期化。

[5]根据[3]或[4]的睡眠促进用组合物，其使睡眠中的自发活动量减少。

[6]根据[1]至[5]中任一项的睡眠促进用组合物，其使睡眠中的苏醒时间减少。

[7]根据[1]至[6]中任一项的睡眠促进用组合物，其使白天的苏醒困难减少。

[8]根据[1]至[7]中任一项的睡眠促进用组合物，其为药物组合物。

[9]根据[1]至[7]中任一项的睡眠促进用组合物，其为食品组合物。

[10]一种属于短双歧杆菌的细菌在睡眠促进剂、睡眠促进用药物、或睡眠促进用饮食品中的应用。

[11]一种睡眠促进方法，其包括向对象给予属于短双歧杆菌的细菌。

[12]一种睡眠促进方法，其包括向35岁以上的人给予属于短双歧杆菌的细菌。

[13]一种属于短双歧杆菌的细菌在预防、治疗和/或改善睡眠不佳下所引起的疾病中的应用，所述疾病为：失眠症(入睡差、中途起来无法再入睡、一大早就起床、无法熟睡)、嗜睡症(白天困得不行、打盹而被提醒)、昼夜节律性睡眠障碍、多动腿综合征(Restless legs syndrome)、打鼾、睡眠呼吸暂停综合征、异态睡眠、发作性睡病、梦游症、意识不清的觉醒、睡眠恐惧(night terrors)、节律性运动障碍、睡眠时痉挛、梦呓、夜啼、婴儿腹绞痛(colic)、夜间下肢抽筋、噩梦、睡眠麻痹、与睡眠相关的阴茎勃起功能障碍、快速眼动睡眠行为障碍、磨牙症、夜尿、打鼾、阵发性肌张力障碍、周期性肢体抽动障碍、婴儿瘁死综合症(SIDS)。

[14]一种睡眠促进用奶粉的制造方法，其包括下述工序(A)～(C)：

(A)用含有乳成分的培养基培养短双歧杆菌而得到培养物的工序；

(C)将前述菌体粉末和益生元混合而得到睡眠促进用的奶粉的工序。

[15]一种睡眠促进用奶粉的制造方法，其包括下述工序(A)：

(A)将益生元、短双歧杆菌和乳成分混合而得到奶粉的工序。

[16]根据[14]或[15]所述的方法，其中，前述乳成分为乳蛋白质。

[17]根据[14]～[16]中任一项所述的方法，其中，前述乳蛋白质为选自由乳清、乳清水解物、酪蛋白组成的组中的至少1种成分。

[18]一种睡眠促进用营养强化剂的制造方法，其包括下述工序(A)和(B)：

(A)将短双歧杆菌和赋形剂混合而得到混合物的工序；

(B)对前述混合物进行压片的工序。

实施例

以下基于实施例对本发明进行进一步详细地说明。需要说明的是，以下说明的实施例是示出本发明的代表性实施例的一个例子，并非用于狭窄地解释本发明的范围。

[实验例1]

实验例1中，使用睡眠动物模型验证了属于短双歧杆菌的细菌的睡眠促进效果。

＜试验试样的制造＞

作为属于短双歧杆菌的细菌的一个例子，将短双歧杆菌MCC1274(FERM BP-11175)的培养液浓缩、干燥，得到活菌干燥物。

＜睡眠动物模型＞

使用Slc:Wistar大鼠(雄性、10周龄)，就试验试样的给药对动物睡眠的影响进行了研究。大鼠由Japan SLC,Inc.购入。对于大鼠，在每12小时明暗周期下(上午5点；明期的开始时刻)在室温23±3℃、湿度55±15％的环境下进行喂养。饲料使用ORIENTAL YEASTCo.,Ltd.的未灭菌灭MF固体饲料，使其自由摄食/自由饮水。对于大鼠，在戊巴比妥钠麻醉下用理发推子从颈部剔除背部的覆毛，消毒后切开，将行动量测定用的3轴加速度传感器和无线测定用电极埋设/留置。切开部在消毒后用缝合用线进行缝合，对切开部和缝合部用术后可卡因(R)注0.25％进行基于涂布的镇痛处置。进而手术后进行保温/观察恢复度，将完全从麻醉中苏醒过来的个体返回至喂养笼中。利用耳号钳法通过个体识别和笼牌来识别大鼠。对照组使用溶剂(生理盐水)，作为阳性对照，使用清酒酵母粉末(Mitsubishi GasChemical Company制)和长双歧杆菌ATCC BAA-999。

＜试验方法＞

基于使用一次性注射器、利用灌胃器的强制经口给药法给予各试验试样。如下述的表1所示，试样的给药液量以给药前一天的体重为基础用5mL/kg或10mL/kg计算出液量。在试验试样的给药前一天和给药当天从熄灯30分钟前至7小时为止记录行动量/脑电图测量数据。给药当天在测定开始之前将试样经口给药，开始进行测定。第1天(前一天)作为对照仅给予溶剂并进行测定，第二天将试验试样溶解于生理盐水中进行给药后测定。基于行动量的测定结果，确认了各试样在不同的时间段显示出镇静效果。接着，结合行动量的测定结果及脑电图、肌电图、心电图的测定结果，研究了睡眠促进效果的有无。苏醒、非快速眼动睡眠、快速眼动睡眠的判定使用KISSEI COMTEC Co.,Ltd.制睡眠解析软件“SleepSign”，依据常规方法(Kohtoh et al.，Sleep Biol Rhythms.2008；6：163-171)进行。对给药后6小时为止的脑电图数据进行解析，计算出每小时的苏醒、非快速眼动睡眠、快速眼动睡眠的时间。

[表1]

组	试验试样	给药量	给药液量	动物数量(只)
					阴性对照组	溶剂(生理盐水)	0mg/kg	5mL/kg	6
阳性对照1	清酒酵母	200mg/kg	10mL/kg	6
					阳性对照2	ATCC BAA-999	10<sup>9</sup>cfu/大鼠	5mL/kg	6
试验组	MCC1274	10<sup>9</sup>cfu/大鼠	5mL/kg	6

<统计解析>

对于得到的行动量、脑电图的数值，计算出各组的平均值。每小时的苏醒时间、快速眼动睡眠时间、非快速眼动睡眠时间、行动量通过相对于前一天(未给药)的值进行Student’st检验来测定。各组之间的显著差异通过相对于对照组的Student’s t检验来测定。显著性水平为风险率5％。

<结果>

(1)阴性对照组

将阴性对照组的睡眠测定结果示于表2(*，p＜0.05)。

[表2]

[表2]阴性对照组的测定结果 *，p＜0.05

阴性对照组中，统计学上未见显著的变化。

(2)阳性对照组1(清酒酵母)

将阳性对照组1(清酒酵母)的睡眠测定结果示于表3。

[表3]

[表3]阳性对照组1(清酒酵母)的测定结果 *，p＜0.05

阳性对照组1(清酒酵母)中，给药后3-6时间段中的快速眼动睡眠、非快速眼动睡眠增加，但未观察到统计学上的显著差异。行动量在给药后5-6小时的时间段减少。

(3)阳性对照组2(ATCC BAA-999)

将阳性对照组2(ATCC BAA-999)的睡眠测定结果示于表4。

[表4]

[表4]阳性对照组2(ATCC BAA-999)的测定结果 *，p＜0.05

阳性对照组2(ATCC BAA-999)中，在给药后2小时的时间点的快速眼动睡眠的增加，但显示出统计学上的显著差异(p＜0.05)。另一方面，在给药后5小时、7小时，非快速眼动睡眠减少，观察到苏醒的倾向。

(4)试验组(MCC1274)

将试验组(MCC1274)的睡眠测定结果示于表5。

[表5]

[表5]试验组2(MCC 1274)的测定结果 *，p＜0.05

试验组(MCC1274)中，在给药后4、6小时的时间段苏醒时间减少，在给药后4-6小时行动量减少，显示出睡眠增加效果。在给药后6小时的时间点的苏醒的减少、快速眼动睡眠的增加、非快速眼动睡眠的增加均显示出统计学上的显著差异(p<0.05)。

由以上的结果，通过将属于短双歧杆菌的细菌给药，从而可观察到睡眠时的行动量的减少、睡眠时的苏醒时间的缩短、快速眼动睡眠的诱发、非快速眼动睡眠的诱发。作为阳性对照使用的清酒酵母、长双歧杆菌ATCC BAA-999中，由于苏醒时间和非快速眼动睡眠中均未观察到显著差异，因此与这些相比可观察到较高的睡眠促进效果。

[实验例2]

实验例2中，以人作为对象，验证了属于短双歧杆菌的细菌的睡眠促进效果。

＜试验试样的制造＞

利用与前述实验例1同样的方法制造的活菌干燥物与淀粉混合，将345mg填充于1个胶囊中，作为试验试样。

另一方面，制造在胶囊中仅填充了345mg淀粉的安慰剂胶囊，将其作为对照试样。

确认试验试样和对照试样在外观、颜色、味道上无法区分。

<被检者>

将20岁以上的健康的人(BMI25以上且低于30)作为被检者在临床试验中进行注册。进而，通过人体成分测量、验血、医生的问诊，将与以下的(1)～(7)的除外基准不冲突的对象作为解析对象。

(1)曾经受过严重的疾病等治疗的人或有过这些严重的病史的人

(2)患有胃肠疾病，并正在服药的人

(3)正在接受生活方式病(糖尿病、高血压、血脂异常)的药物治疗的人

(4)有药物过敏症或严重的食物过敏症病史的人

(5)正怀孕的人、在试验期间有怀孕意向的人、哺乳中的人

(6)烟瘾大的人、酗酒者、生活方式不规则的人

(7)由被检者背景、体检发现、问诊等的结果，根据试验责任医生或试验担当医生作为被检者被判断为不适当的人

将具体的被检者的背景因素示于下述表6。在对象组和试验组的年龄上未观察到显著差异。

[表6]

	对照组	试验组	组间差异
				被检者数(人)	40	40	N.S.
年龄(岁)	45.6±8.5	45.4±9.8	N.S.

<试验方法>

将健康的成人男女作为对象给予短双歧杆菌MCC1274，对在摄取前后的睡眠所产生的影响进行研究。对于被检者，在12周中每天进行1次试验试样或对照试样，在餐后30分钟以内与水等一起进行摄取。即，试验组每日的摄取量以短双歧杆菌MCC1274(FERM BP-11175)的活菌计为200亿个。

在摄取前、摄取后第12周，使用匹兹堡睡眠质量指数(Pittsburgh Sleep QualityIndex；PSQI)，计算出睡眠质量、入睡时间、睡眠时间、睡眠效率、睡眠困难、安眠药的使用、白天苏醒困难这7个要素的总得分。

<结果>

将摄取短双歧杆菌前后的匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)综合得分的平均值和变化量示于表7。

[表7]

摄取前	摄取后	变化量
			3.1	2.9	-0.2

如表7所示，与被检物质的摄取前相比，摄取12周后PSQI综合得分降低-0.20，睡眠质量、入睡时间、睡眠时间、睡眠效率、安眠药的使用、白天苏醒困难在总体上得到改善。

进而将按PSQI项目评分的平均值示于下述表8。

[表8]

[表8]按PSQI项目评分的平均值

*P＜0.05，Wilcoxon符号秩检验

如表8所示，睡眠时间(C3)、睡眠效率(C4)与摄取前相比得到改善，特别是白天苏醒困难(C7)与摄取前相比观察到显著的改善。

由以上的结果显示出，通过摄取属于短双歧杆菌的细菌，而使综合性的睡眠质量和睡眠状态得到改善。特别是按项目评分的睡眠时间(C3)和起床时间与就寝时间之差计算出的睡眠效率(C4)的结果启示出由睡眠时间延长，由此示出：在开车中、进餐中、社会活动中等不能犯困时无法醒来、或者完成任务所需的意志不能持续的白天苏醒困难(C7)的症状得到改善。

[制造例]

下述示出睡眠促进用组合物、药物组合物和食品组合物的制造例。

＜制造例1＞

将短双歧杆菌MCC1274(FERM BP-11175)添加至MRS液体培养基3mL中，在37℃下进行16小时厌氧培养后，将培养液浓缩，进行冷冻干燥，得到细菌的冷冻干燥粉末(菌末)。将菌末与乳清蛋白浓缩物(Whey protein concentrate；WPC)与益生元(乳酮糖、棉子糖和低聚半乳糖)均匀地混合而得到组合物。将该组合物20g溶解于200g的水中，得到睡眠促进用组合物。通过给予该组合物而能够促进睡眠。

＜制造例2＞

将短双歧杆菌MCC1274(FERM BP-11175)添加至MRS液体培养基3mL中，在37℃下进行16小时厌氧培养后，将培养液浓缩，进行冷冻干燥，得到细菌的冷冻干燥粉末(菌末)。将菌末与乳蛋白质浓缩物的干燥粉末(MPC480、Fonterra公司制、蛋白质含量80质量％、酪蛋白：乳清蛋白＝约8：2)与益生元(乳酮糖、棉子糖和低聚半乳糖)均匀地混合而得到组合物。将该组合物20g溶解于200g的水中，得到睡眠促进用组合物。

＜制造例3＞

将短双歧杆菌MCC1274(FERM BP-11175)添加至MRS液体培养基3mL中，在37℃下进行16小时厌氧培养后，将培养液浓缩，进行冷冻干燥，得到细菌的冷冻干燥粉末(菌末)。接着，将益生元(乳酮糖、棉子糖和低聚半乳糖)、结晶纤维素投入搅拌造粒机进行混合。然后，加入精制水并将造粒、造粒物干燥，得到含有细菌的提取成分和益生元且含有赋形剂而成的造粒物(药物组合物)。通过给予该造粒物而能够促进睡眠。

＜制造例4＞

下述示出添加了短双歧杆菌MCC1274(FERM BP-11175)的发酵乳的制造法。

首先，将乳原料和根据需要的水、其它成分等混合，优选进行均质化处理，并进行加热灭菌处理。均质化处理和加热灭菌处理可以利用常规方法进行。在经加热灭菌的灭菌乳制剂中添加(接种)乳酸菌起子，保持在规定的发酵温度使其发酵，得到发酵物。通过发酵而形成凝乳。

作为乳酸菌起子，例如可以使用保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)等在制造酸奶时通常使用的乳酸菌。若pH达到目标值，通过搅拌将所形成的凝乳破碎，冷却至10℃以下而得到发酵物。通过冷却至10℃以下，从而能够降低乳酸菌的活性而抑制酸的生成。

接着，对发酵工序中得到的发酵物进行加热处理而得到加热后发酵物(加热处理后的发酵物)。通过对发酵物进行适度地加热，从而能够抑制由加热后发酵物中的乳酸菌所致的酸的生成。由此，能够抑制在之后的制造工序中和/或含有双歧杆菌的浓缩发酵乳在保存时的pH的降低，其结果，能够提高双歧杆菌的存活率。

接着，在加热处理工序中得到的加热后发酵物中添加短双歧杆菌MCC1274(FERMBP-11175)和益生元(乳酮糖、棉子糖和低聚半乳糖)。短双歧杆菌MCC1274(FERM BP-11175)的添加量相对于加热后发酵物、优选1×10⁷～1×10¹¹CFU/mL，更优选1×10⁸～1×10¹⁰CFU/mL。短双歧杆菌(NITE BP-02622、NITE BP-11175)为死菌时，CFU/mL可以替换为个细胞/mL。

在加热后发酵物中添加短双歧杆菌MCC1274(FERM BP-11175)和益生元后，进行浓缩。浓缩工序可以适宜使用公知的浓缩方法来进行。离心分离法中，被浓缩物(添加了双歧杆菌和益生元的加热后发酵物)中的乳清被去除而可以得到固体成分浓度得以提高的含有双歧杆菌和益生元的浓缩发酵乳。通过摄取得到的发酵乳而能够促进睡眠。

＜制造例5＞

下述示出添加了短双歧杆菌MCC1274(FERM BP-11175)的配方奶粉的制造法。

将脱盐牛乳乳清蛋白质粉末(Future Inc.制)10kg、牛乳酪蛋白粉末(Fonterra公司制)6kg、乳糖(Future Inc.制)48kg、矿物质混合物(富田制药株式会社制)920g、和维生素混合物(田边制药株式会社制)32g、乳酮糖(森永乳业株式会社制)500g、棉子糖(日本甜菜制糖株式会社制)500g和低聚半乳糖液糖(Yakult Pharmaceutical Industry Co.,Ltd.制)900g溶解于温水300kg中，进而在90℃下进行10分钟加热溶解，添加调制脂肪(太阳油脂株式会社制)28kg并进行均质化。然后，进行灭菌、浓缩的工序并进行喷雾干燥，制备配方奶粉约95kg。在其中加入在淀粉中冲淡的短双歧杆菌MCC1274(FERM BP-11175)的菌体粉末(1.8×10¹¹cfu/g、森永乳业株式会社制)100g而得到双歧杆菌/低聚糖配混制备配方奶粉约95kg。将得到的配方奶粉溶解于水中，在制成作为标准配方乳浓度的总固体成分浓度14％(w/V)的乳制剂时，乳制剂中的双歧杆菌数可以得到2.7×10⁹cfu/100ml。通过给予如上所述得到的配方奶粉而能够促进睡眠。

PCT/RO/134表

Claims

1.一种睡眠促进用组合物，其以属于短双歧杆菌的细菌作为有效成分。

2.根据权利要求1所述的睡眠促进用组合物，其中，所述细菌为短双歧杆菌MCC1274(FERM BP-11175)。

3.根据权利要求1或2所述的睡眠促进用组合物，其使睡眠时间长期化。

4.根据权利要求3所述的睡眠促进用组合物，其使非快速眼动睡眠和/或快速眼动睡眠长期化。

5.根据权利要求3或4所述的睡眠促进用组合物，其使睡眠中的自发活动量减少。

6.根据权利要求1～5中任一项所述的睡眠促进用组合物，其使睡眠中的苏醒时间减少。

7.根据权利要求1～6中任一项所述的睡眠促进用组合物，其使白天的苏醒困难减少。

8.根据权利要求1～7中任一项所述的睡眠促进用组合物，其为药物组合物。

9.根据权利要求1～7中任一项所述的睡眠促进用组合物，其为食品组合物。