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CN111789816B - 一种糠酸氟替卡松脂质体混悬液及其制备方法 - Google Patents

一种糠酸氟替卡松脂质体混悬液及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种糠酸氟替卡松脂质体及其制备方法,糠酸氟替卡松脂质体包括成分磷脂、甾醇和糠酸氟替卡松,其中糠酸氟替卡松的量为0.01%~1%,磷脂量为0.065%~0.196%,甾醇量为0.035%~0.104%,该糠酸氟替卡松脂质体的制备方法,包括:(1)混合和注入(2)透滤浓缩步骤,本发明的方法操作简单,工艺稳定,适合大批量生产。

Description

一种糠酸氟替卡松脂质体混悬液及其制备方法
技术领域
本发明属于药物制剂技术领域,具体涉及糠酸氟替卡松脂质体混悬液及其制备方法。
背景技术
某些适于吸入给药的缓释技术使用脂质体和脂质复合物通过缓释和寻靶能力以及提高药物在疾病位点的吸收来向肺部和全身提供延长的药物治疗效果。本发明包含一种脂质体糠酸氟替卡松吸入混悬液来治疗肺部疾病的方法。
对于在胃肠道中易被破坏的药物或不能口服的药物,吸入给药是比注射给药更优的给药方式。激素类药物系统生物利用度低,通过吸入途径给药可以克服口服给药或静脉注射的激素治疗的缺点,尤其是直接将药物递送至药物作用部位,可以在相对低的剂量有效,从而减少长期治疗时常见的副作用;另外,通过将激素类药物,如几乎不溶于水的糠酸氟替卡松制成脂质体吸入混悬液,可以减少给药次数,提高患者的依从性。为了实现肺部给药,开发了许多装置,例如定计量吸入器和干粉吸入器。目前,在临床上,雾化器被广泛地应用于水溶性好的药物的吸入给药,然而,在水不溶性药物的吸入给药的应用受到限制。通过将水不溶的糠酸氟替卡松制成脂质体吸入混悬液,则可以使用雾化器吸入给药。脂质体吸入混悬液制剂具有诸多优点,包括水相容性、药物在肺部的缓慢释放以维持治疗药物水平。
对于脂质药物传输系统来说,通常期望尽可能地降低脂质与药物的比例以使脂质负担最小化从而避免体内的饱和效应。对于通过吸入进行的肺传输来说,这一点是特别正确的。本发明制备了浓缩的、高剂量的糠酸氟替卡松-磷脂脂质体吸入混悬液制剂,使脂质体粒径小于1微米。
发明内容
本发明提供一种糠酸氟替卡松脂质体的制备方法,包括以下步骤:
步骤(1)混合和注入:
将磷脂和甾醇在水浴中直接溶解在乙醇中,再加入糠酸氟替卡松,将其完全溶解。将上述乙醇溶液缓慢注入至50ml生理盐水中,混匀,用生理盐水定容至100ml,得到100ml的初始体积。
步骤(2)透滤浓缩步骤:
通过切向流过滤方法,糠酸氟替卡松脂质体制剂分割成匀质的脂质体,然后浓缩。
进一步地,步骤(1)混合和注入包括将一种或多种磷脂和脂溶性药物溶于少量的乙醇中以形成脂质溶液,然后将该溶液注入到含水介质中。
进一步地,步骤(1)糠酸氟替卡松脂质体混悬液,并且其中脂质重量与糠酸氟替卡松重量的比为10∶1到30∶1。
进一步地,步骤(1)所述的制备方法,其中含药的脂质溶液的温度是50℃~70℃,优选的是35℃~45℃,更有选的是40℃。水溶液的温度是室温。
进一步地,步骤(1)慷酸氟替卡松脂质体吸入混悬液的制备方法,在室温下向水溶液中注入糠酸氟替卡松和脂质的醇溶液,其中注入是从上方进行的。
进一步地,步骤(2)脂质体的粒径大小可以通过挤出、超声处理和匀质化技术,优选的过滤器包括直通过滤器或曲径过滤器。挤出还可以通过使用不对称过滤器,如Anopore过滤器。挤出包括在压力下使脂质体一次或多次地通过具有规定孔径尺寸的过滤器。
本发明说明书中使用的术语“脂质重量”指的是磷脂加甾醇的重量总和。
本发明进一步提供一种糠酸氟替卡松脂质体的组合物,按照重量百分比计包含以下组分组成:
糠酸氟替卡松:0.01%~2%,优选的是0.01%~1%,更优选的是0.01%,
磷脂:0.1%~3%,优选的是0.1%~0.3%,更优选的是0.065%-0.196%,
甾醇:0.01%~%,优选的是0.01%~1%,更优选的是0.035%~0.104%,以及余量的生理盐水。
所述糠酸氟替卡松脂质体组合物中所使用的磷脂包括卵磷脂酰胆碱(EPC)、卵磷脂酰甘油(EPG)、卵磷脂酰肌醇(EPI)、卵磷脂酰丝氨酸(EPS)、卵磷脂酰乙醇胺(EPE)和卵磷脂酸(EPA)、大豆磷脂酰胆碱(SPC),二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)、二油酰磷脂酰胆碱(DOPC)、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱(DMPC)、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油(DMPG)、二棕榈酰磷脂酰甘油(DPPG)、二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)、二硬脂酰磷脂酰甘油(DSPG)等。
本发明的一种有益效果是:本发明的糠酸氟替卡松脂质体,采用乙醇注入法,按照加入磷脂,脂质体,最后注入生理盐水的步骤。
本发明的另外一种有益效果是:糠酸氟替卡松脂质体的包封率高,生产工艺简单,重复性好,适合肺部吸入给药,利于药物吸收。
本发明的还有一种有益效果是:本方法制得的糠酸氟替卡松脂质体不含油溶性成分。所述制备方法操作简单,适用于工业化生产。
附图说明
图1为本发明实施例3样品#1的糠酸氟替卡松脂质体粒径分布图
图2为本发明实施例3样品#2的糠酸氟替卡松脂质体粒径分布图
图3为本发明实施例3样品#3的糠酸氟替卡松脂质体粒径分布图
图4为本发明实施例3样品#4的糠酸氟替卡松脂质体粒径分布图
图5为本发明实施例3样品#5的糠酸氟替卡松脂质体粒径分布图
具体实施方式
以下结合具体实施例,对本发明进一步阐述。应理解,这些实施例仅用于本发明而不用于限制本发明的范围。除非另有定义或说明,本专利所述的科学技术术语与本领域普通技术人员所理解具有相同的含义。
实施例1
10ml的脂质体的制备方法
总初始体积=100ml,
乙醇含量30%,脂质组合物:DPPC/胆固醇(摩尔比为1∶1),
初始脂质=0.3mg/ml,初始糠酸氟替卡松=0.01mg/ml,
最终产品的体积=10ml,
步骤(1)混合和注入:
将19.6mg DPPC和10.4mg胆固醇在50℃的水浴中直接溶解在30ml乙醇中,再加入1mg糠酸氟替卡松,将其完全溶解。在搅拌状态下,将上述乙醇溶液缓慢注入至50ml生理盐水中,混匀20分后,用生理盐水定容至100ml,得到100ml的初始体积。
步骤(2)透滤浓缩步骤:
将混合容器钩在蠕动泵和透滤筒上。透滤筒是截留分子量为500,000道尔顿的凹膜纤维。在室温下将产品从反应容器中抽出,接着通过透滤筒倒进混合容器中。在整个筒内产生了大约7psi的反压力。所述反压力迫使糠酸氟替卡松单体和乙醇通过中空纤维膜,而脂质体产品则留在后面。在室温下将产品浓缩至10ml。
实施例2
10ml的脂质体的制备方法
总初始体积=100ml,乙醇含量30%,
脂质组合物:DPPC/麦角固醇(摩尔比为1∶1),初始脂质=0.2mg/ml,
初始糠酸氟替卡松=0.01mg/ml,最终产品的体积=10ml,
步骤(1)混合和注入:
将19.6mg DPPC和10.4mg麦角固醇在50℃的水浴中直接溶解在30ml乙醇中,再加入1mg糠酸氟替卡松,将其完全溶解。在搅拌状态下,将上述乙醇溶液缓慢注入至50ml生理盐水中,混匀20分后,用生理盐水定容至100ml,得到100ml的初始体积。
步骤(2)透滤浓缩步骤:
将混合容器钩在蠕动泵和透滤筒上。透滤筒是截留分子量为500,000道尔顿的凹膜纤维。在室温下将产品从反应容器中抽出,接着通过透滤筒倒进混合容器中。在整个筒内产生了大约7psi的反压力。所述反压力迫使糠酸氟替卡松单体和乙醇通过中空纤维膜,而脂质体产品则留在后面。在室温下将产品浓缩至10ml。
实施例3
高包封率的糠酸氟替卡松脂质体
按下列步骤制备了5份不同的药物和脂质比的、高包封率的脂质体混悬液,制得的5份样品的包封率均在80%以上,其中样品5的包封率在90%以上,平均粒径在130nm-160nm之间。
样品#1:称取6.5mg DPPC和3.5mg胆固醇于烧杯中,在50℃水浴条件下,加入30ml乙醇,使其完全溶解,再加入1mg FF,使其完全溶解。在搅拌状态下,用注射器将上述溶液缓慢滴加至50ml生理盐水中,混匀20分钟,再用生理盐水定容至100ml。在室温下将产品通过中空纤维膜除去乙醇和游离的糠酸氟替卡松,并浓缩至10ml。
样品#2:称取9.8mg DPPC和5.2mg胆固醇于烧杯中,在50℃水浴条件下,加入30ml乙醇,使其完全溶解,再加入1mg FF,使其完全溶解。在搅拌状态下,用注射器将上述溶液缓慢滴加至50ml生理盐水中,混匀20分钟,再用生理盐水定容至100ml。在室温下将产品通过中空纤维膜除去乙醇和游离的糠酸氟替卡松,并浓缩至10ml。样品#3:称取13.1mg DPPC和6.9mg胆固醇于烧杯中,在50℃水浴条件下,加入30ml乙醇,使其完全溶解,再加入1mg FF,使其完全溶解。在搅拌状态下,用注射器将上述溶液缓慢滴加至50ml生理盐水中,混匀20分钟,再用生理盐水定容至100ml。在室温下将产品通过中空纤维膜除去乙醇和游离的糠酸氟替卡松,并浓缩至10ml。
样品#4:称取16.4mg DPPC和8.6mg胆固醇于烧杯中,在50℃水浴条件下,加入30ml乙醇,使其完全溶解,再加入1mg FF,使其完全溶解。在搅拌状态下,用注射器将上述溶液缓慢滴加至50ml生理盐水中,混匀20分钟,再用生理盐水定容至100ml。在室温下将产品通过中空纤维膜除去乙醇和游离的糠酸氟替卡松,并浓缩至10ml。
样品#5:称取19.6mg DPPC和10.4mg胆固醇于烧杯中,在50℃水浴条件下,加入30ml乙醇,使其完全溶解,再加入1mg FF,使其完全溶解。在搅拌状态下,用注射器将上述溶液缓慢滴加至50ml生理盐水中,混匀20分钟,再用生理盐水定容至100ml。在室温下将产品通过中空纤维膜除去乙醇和游离的糠酸氟替卡松,并浓缩至10ml。
表1 五份样品的参数汇总
Figure BSA0000181524070000071
结果表明:7份样品的包封率均在80%以上。
表2 七份样品的理化性质
Figure BSA0000181524070000072
Figure BSA0000181524070000081
实施例4
10ml的脂质体的制备方法
总初始体积=100ml,乙醇含量30%,
脂质组合物:DSPC/胆固醇(摩尔比为1∶1),初始脂质=0.2mg/ml,
初始糠酸氟替卡松=0.01mg/ml,最终产品的体积=10ml,
步骤(1)混合和注入:
将19.6mg DSPC和10.4mg胆固醇在50℃的水浴中直接溶解在30ml乙醇中,再加入1mg糠酸氟替卡松,将其完全溶解。在搅拌状态下,将上述乙醇溶液缓慢注入至50ml生理盐水中,混匀20分后,用生理盐水定容至100ml,得到100ml的初始体积。
步骤(2)透滤浓缩步骤:
将混合容器钩在蠕动泵和透滤筒上。透滤筒是截留分子量为500,000道尔顿的凹膜纤维。在室温下将产品从反应容器中抽出,接着通过透滤筒倒进混合容器中。在整个筒内产生了大约7psi的反压力。所述反压力迫使糠酸氟替卡松单体和乙醇通过中空纤维膜,而脂质体产品则留在后面。在室温下将产品浓缩至10ml。
实施例5
10ml的脂质体的制备方法
总初始体积=100ml,乙醇含量30%,
脂质组合物:DMPC/胆固醇(摩尔比为1∶1),
初始脂质=0.2mg/ml,初始糠酸氟替卡松=0.01mg/ml,最终产品的体积=10ml,
步骤(1)混合和注入:
将19.6mg DMPC和10.4mg胆固醇在50℃的水浴中直接溶解在30ml乙醇中,再加入1mg糠酸氟替卡松,将其完全溶解。在搅拌状态下,将上述乙醇溶液缓慢注入至50ml生理盐水中,混匀20分后,用生理盐水定容至100ml,得到100ml的初始体积。
步骤(2)透滤浓缩步骤:
将混合容器钩在蠕动泵和透滤筒上。透滤筒是截留分子量为500,000道尔顿的凹膜纤维。在室温下将产品从反应容器中抽出,接着通过透滤筒倒进混合容器中。在整个筒内产生了大约7psi的反压力。所述反压力迫使糠酸氟替卡松单体和乙醇通过中空纤维膜,而脂质体产品则留在后面。在室温下将产品浓缩至10ml。

Claims (3)

1.一种糠酸氟替卡松脂质体,其特征在于,由以下比例的成分制成:
糠酸氟替卡松:1mg,
二棕榈酰磷脂酰胆碱:19.6mg,
胆固醇:10.4mg,
乙醇:30ml,
将如上成分用生理盐水定容至100ml,然后用中空纤维膜除去乙醇和游离的糠酸氟替卡松,并浓缩至10ml,得糠酸氟替卡松脂质体,所述糠酸氟替卡松脂质体为吸入脂质体混悬液制剂。
2.根据权利要求1所述的糠酸氟替卡松脂质体,其特征在于糠酸氟替卡松脂质体平均粒径为130.5nm。
3.根据权利要求1所述的糠酸氟替卡松脂质体的制备方法,包括以下步骤:
步骤(1)混合和注入:
将权利要求1中所述重量的二棕榈酰磷脂酰胆碱和胆固醇在水浴中直接溶解在30ml乙醇中,溶解温度为50℃,再加入权利要求1所述重量的糠酸氟替卡松,将其完全溶解,在搅拌状态下,将上述乙醇溶液缓慢注入至50ml生理盐水中,混匀,用生理盐水定容至100ml,得到100ml的初始体积;
步骤(2)透滤浓缩步骤:
将上述100ml初始体积通过中空纤维膜,并浓缩至10ml。
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