CN103127143A - 一种含有布地奈德和nos抑制剂的吸入药物组合物 - Google Patents

Abstract

一种含有布地奈德和NOS抑制剂的吸入药物组合物，含有作为活性成分的布地奈德和作为NOS抑制剂的氨基酸衍生物，以及一种或多种适用于吸入的药物辅料。

Description

一种含有布地奈德和NOS抑制剂的吸入药物组合物

技术领域

本发明涉及一种药物组合物，一种含有皮质激素和NOS抑制剂的吸入药物组合物。

背景技术

糖皮质激素有抗炎、抗过敏、抗风湿、免疫抑制作用，广泛的用于治疗过敏性与自身免疫性炎症性疾病。如结缔组织病、活动性风湿病、类风湿性关节炎、红斑狼疮、严重支气管哮喘、严重皮炎、溃疡性结肠炎、急性白血病等，也用于某些严重感染及中毒、恶性淋巴瘤的综合治疗。

哮喘是一种慢性气道炎症，其特征为可逆性气道阻塞和气道反应性增高，气道阻塞由支气管粘膜炎症引起的分泌物增加、粘膜水肿和炎症刺激平滑肌痉挛两种因素造成；而气道反应性增高也是由于气道炎症引起的支气管上皮细胞损伤的结果。人们认识到，只有控制气道粘膜的炎症，才能达到最终降低气道高反应性、缓解哮喘症状的目的。目前治疗哮喘等肺部疾病的药物主要有以下几种：(1)β2-受体激动剂，(2)黄嘌呤类药物，(3)抗胆碱药，(4)糖皮质激素，(5)抗过敏药。中国文献“吸入性激素药代学和药效学”(王长征，实用医院临床杂志，2007年1月第4卷第1期，16-18)指出，吸入类激素(ICS)已经成为哮喘长期治疗的一线药物，如环索奈德、丙酸氟替卡松、糠酸莫米松、布地奈德等。该文献还指出，理想的ICS应该是有效性和安全性的完美结合，尽管ICS较全身性激素在治疗的安全性方面已有巨大的进步，但是仍不能很好地满足临床治疗的需要。长期大剂量使用ICS仍会出现肾上腺皮质功能抑制等不良反应，而且单独使用所谓安全剂量的ICS(次大剂量)还不能有效地控制多数中重度哮喘。

NO是一种生物功能广泛的无机小分子，参与循环、神经、免疫等系统及骨的代谢，在体内由NOS(一氧化氮合酶)合成，NO代谢异常可导致风湿性关节炎、哮喘、中风、早老性痴呆等疾病，一氧化氮合酶(NOS)抑制剂是一类可以抑制一氧化氮合酶活性，从而降低体内NO含量的物质。在多项研究证明NOS抑制剂可以通过抑制NOS活性降低体内的NO含量从而用于治疗上述疾病如关节炎等炎症性疾病。但是其减少NO的合成可能产生血管内皮功能失调、痛觉敏化等副反应的主要机制，同时也有报道将国外公司非甾体抗炎药与一氧化氮相结合可以更好的镇痛消炎作用(CN200880004081.5)，所以一氧化氮、一氧化氮合酶抑制剂两者哪种在体内可以起到更好的消炎作用还存在较大的分歧，由于药理作用含混、副反应较大，所以NOS抑制剂现在还没有作为药物施用。现有的用于研究实验的NOS抑制剂主要氨基酸衍生物如L-N⁶-(1-亚氨乙基)-赖氨酸、N-硝基-L-精氨酸、N-单甲基-L-精氨酸、Nω，Nω-非对称性二甲基精氨酸以及S-甲基异硫脲、氨基胍等。但我们同时也发现S-甲基异硫脲以及氨基胍等药物，一方面由于其本身化学性质的原因，当用于吸入治疗时存在着较大的刺激性，已引起生物咳嗽，造成吸入效果欠佳，另一方面与糖皮质激素联用也无法起到协同作用，这可能是由于激素与S-甲基异硫脲以及氨基胍等药物在肺内无法形成“允许作用”(Permissive action)。允许作用是指一种物质存在却为另一种物质的生理学效应创造了条件(即对另一物质起支持作用)。现有吸入制剂主要分为气雾剂和粉雾剂(干粉吸入剂，DPI)两种，其中粉雾剂由于其顺应性好，制剂成本较低，使用和存储方便，应用前景更为广泛，对于粉雾剂来说，制剂学上的问题在于找到一种排空率、肺部沉积率和存储稳定性均较高的载体，中国文献“干粉吸入剂的有效性及质量评价”(陈桂良、侯惠民；中国医药工业杂志；2004，35(1)；50-54)中指出，无水乳糖作为干粉吸入剂的载体有较好的效果。

发明内容：

在不断地科学研究中，我们惊奇的发现，作为NOS抑制剂的氨基酸衍生物与布地奈德使用作为吸入制剂，与单用布地奈德相比，能够显著提高布地奈德的治疗效果。此外我们还发现，当将NOS抑制剂的氨基酸衍生物与布地奈德复方吸入剂制备成为粉雾剂时，载体选用将5％-9％α-乳糖一水合物和无水乳糖混合制备的混合乳糖微粉，得到的粉雾剂经过存储后的肺部沉积率(雾粒分布量)更好。而意外的是，当同样的混合乳糖应用于其他常用的吸入糖皮质激素时，则无此技术效果。

本发明提供了一种吸入药物组合物，含有作为活性成分的氟替卡松和作为NOS抑制剂的氨基酸衍生物，以及一种或多种适用于吸入的药物辅料。

优选一种吸入药物组合物，含有作为活性成分的布地奈德、N-单甲基-L-精氨酸和含有5-9％重量百分比α-乳糖一水合物的无水乳糖，以及一种或多种适用于吸入的药物辅料。

所述的吸入药物组合物，其特征在于。所述的作为NOS抑制剂的氨基酸衍生物为L-N⁶-(1-亚氨乙基)-赖氨酸、N-硝基-L-精氨酸、N-单甲基-L-精氨酸、Nω，Nω-非对称性二甲基精氨酸及其酯或盐的一种或几种。

所述的吸入药物组合物，其特征在于布地奈德和NOS抑制剂的重量配比为1∶0.1-10。优选为1∶0.5-5，更优选为1∶0.5-2。

所述的吸入药物组合物，制备成为气雾剂或粉雾剂。优选制备成为粉雾剂。

所述的吸入药物组合物，作为活性成分的布地奈德和作为NOS抑制剂氨基酸衍生物优选制成微粉，所述微粉的粒径为0.5～10μm，优选1～8μm，特别优选为2～5μm。

所述的吸入药物组合物，优选制成粉雾剂或气雾剂。所述的吸入药物组合物，制成粉雾剂时，优选所述的药用辅料包括载体和附加剂，所述载体微粉的粒径为20～100μm，优选α-乳糖一水合物、无水乳糖粒径为20～100μm。优选载体的粒径为30～80μm。所述载体微粉也可以为粒径5-15μm的微粉与粒径30-80μm的微粉的混合。

所述的载体是糖类载体、氨基酸中的一种或几种，所述氨基酸包括但不仅限于甘氨酸、缬氨酸、亮氨酸。所述糖类载体包括单糖、二糖和/或其衍生糖，所述单糖包括但不仅限于甘露醇、果糖、葡萄糖，所述二糖包括但不仅限于麦芽糖、海藻糖、纤维二糖、乳糖、蔗糖，所述的衍生糖是指糖分子上至少一个羟基被包含至多20个碳原子的直链或支链烃链取代，包括但不仅限于八醋酸纤维二糖酯、八醋酸蔗糖酯、八醋酸乳糖酯、五醋酸葡萄糖酯、六醋酸甘露醇酯和八醋酸海藻糖酯，所述的衍生糖还可以参照国际专利WO99/33853的说明书中所公开的衍生糖实例，在衍生糖中优选作为载体的是八醋酸-D-纤维二糖酯；在上述各种载体中，最优选载体为乳糖。所述乳糖选自α-乳糖一水合物，无水乳糖中的一种或几种，优选含有5-9％重量百分比α-乳糖一水合物的无水乳糖。

优选在所述的载体微粉中加入附加剂，所述附加剂包括但不仅限于表面活性剂、润滑剂、抗静电剂。所述附加剂的用量与种类可以参考任何公知的现有技术和文献，如“药剂学”(崔福德等，2003年8月第五版，人民卫生出版社)所公开。

所述的表面活性剂优选泊洛沙姆。活性成分的总和：泊洛沙姆重量比为1∶0.01～5。泊洛沙姆也作为抗静电剂。所述润滑剂还可以包括但不仅限于硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉中的一种或几种，用量为载体微粉重量的0.01％～1％。

所述的活性成分的总和与载体的重量比为1∶5～100。

所述活性成分的微粉化方法可以采用喷雾干燥法，流化床超音速气流粉碎法，高速研磨法、球磨法、流能磨法、溶剂法等，优选采用喷雾干燥法。

所述吸入组合物，在制备成粉雾剂时可以单次或多次剂量的形式包装，优选采用胶囊剂的方式分装，每个胶囊含有5-40mg上述的粉雾剂。优选每个胶囊含有10-30mg上述粉雾剂。

优选每个胶囊含有50-250μg布地奈德，25-2500μgNOS抑制剂。

所述含有粉雾剂的胶囊可以采用公知的粉雾剂胶囊吸入器进行吸入。所述的吸入器例如WO94/28958所公开的。

所述吸入组合物，在制备成粉雾剂时的制备方法是将活性成分微粉化成微粉，再将载体与附加剂微粉化成微粉，将载体与附加剂微粉与活性成分微粉混合过200目筛3次混匀后装在胶囊中。

本发明所述的粒径为质量平均粒径(mass mean diameter)。

所述的吸入组合物，还可以制备成为气雾剂，所述的药用辅料包括适用于气雾剂的可药用的抛射剂和其它可选附加剂。

所述抛射剂为为氟烃类化合物中的一种或几种。优选为1，1，1，2-四氟乙烷(HFA134a)和1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷(HFA227)中的一种或其组合。优选采用HFA134a。

所述的附加剂中包含溶剂，选自甘油、丙二醇、聚乙二醇、乙醇或油酸，优选使用乙醇。

所述附加剂还可以包括其它低挥发性组分，包括其它醇、二醇，例如链烷醇，如癸醇(癸基醇)、包括山梨糖醇、甘露糖醇、乳糖醇、麦芽糖醇的糖醇、glycofural(四氢呋喃基甲醇)和一缩二丙二醇。包括植物油、有机酸如包括十二烷酸和十四烷酸及硬脂酸的饱和羧酸；包括山梨酸，特别是油酸的不饱和羧酸，公知的应用于气雾剂，以改善药物混悬液的物理稳定性，其作为分散剂用于保持悬浮颗粒不附聚的成分有：糖精、抗坏血酸、环己氨磺酸、氨基酸或阿斯巴甜；烷烃如十二烷和十八烷；萜烯如薄荷醇、桉油精、柠檬烯；糖如乳糖、葡萄糖、蔗糖；多糖如乙基纤维素、右旋糖酐；抗氧化剂如丁基化羟基甲苯、抗坏血酸、焦亚硫酸钠，丁基化羟基苯甲醚；聚合物如聚乙烯醇、聚乙烯醋酸酯、聚乙烯吡咯烷酮；胺如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺；甾类如胆固醇、胆固醇酯。可以不加入其他低挥发组分。

所述的气雾剂的制备方法为：向气雾剂瓶中加入处方量的活性成分微粉，打开瓶上的阀门，将预混合的抛射剂与可选附加剂的混合物通过阀门导入，关闭阀门，得到所需的气雾剂。可选对气雾剂瓶进行超声浴以增溶

或者可以采用以下制备方法：将微粉化的活性成分分散到附加剂中，再加入预冷后的抛射剂中混匀，再分装到气雾剂瓶中。

制备成气雾剂时，所需的活性成分粉碎成为粒径为0.5-10μm的微粉。

应当理解，因为公知的原因，如活性成分在吸入装置中的潴留，患者吸入的每种活性成分的量可以不同于计量的量。因此活性成分之间的施用比例可不同于计量的比例。优选的施用的比例是在所述的指明的计量比例内。

优选气雾剂每揿含有50-250μg布地奈德，25-2500μgNOS抑制剂。

所述的气雾剂瓶和阀门系统采用公知的气雾剂瓶和阀门系统，可以选用中国专利CN98805261.X中所公开气雾剂瓶和阀门系统。

本发明提供的吸入药物组合物，提供了一种布地奈德和NOS抑制剂的复方制剂，与单独布地奈德给药及先后吸入两种活性成分的实验组相比，药理实施例表明，本发明提供的复方吸入药物组合物能够显著降低哮喘模型大鼠血清IgE，IL-4和IL-5含量，显著改善因哮喘引起的气道重构，从而实现更好的治疗效果，而单独吸入相同剂量NOS抑制剂的模型动物的治疗哮喘效果并不明显，说明只有采用本发明提供的活性成分配比的吸入制剂，在治疗哮喘时才能产生协同作用。此外我们当复方制剂制备成为粉雾剂时，所述载体优选为乳糖优选5-9％重量百分比α-乳糖一水合物，及余量无水乳糖的混合乳糖。

当载体采用混合乳糖时，我们意外发现得到粉雾剂的存储稳定性比采用无水乳糖的载体出现了明显的提高，在高温条件存储3个月后的肺部沉积率明显高于采用无水乳糖的载体。上述混合乳糖作为本发明提供的粉雾剂载体时产生了意想不到的效果。

具体实施方式

本发明微粉化可以使用公知的机械粉碎法或喷雾干燥法。机械粉碎法是指利用流能磨的方法分别将活性成分和载体粉碎成所需要的粒径。喷雾干燥法是指将环索奈德或载体全溶于有机溶媒如乙醇中，经过喷雾干燥器，将固体物料制成所需要的粒径。使用喷雾干燥法时还可以加入表面活性剂如泊洛沙姆等。

粉雾剂采用3号植物胶囊(中美合资苏州胶囊有限公司生产，商品名：Vcaps)，每个实施例按照1000粒胶囊投料。粉雾剂的胶囊装入泡罩式铝塑包装，使用时取出，装入粉雾剂吸入器(上海天平制药厂)使用。

实施例1

将布地奈德80mg，L-N⁶-(1-亚氨乙基)-赖氨酸600mg溶于乙醇，过滤后，滤液喷雾干燥，微粉化使之平均粒径达到2μm，无水乳糖10g用流能磨微粉化至平均粒径20μm，混合后，过200目筛3次混匀后分装在3号胶囊中。每粒胶囊有布地奈德80μg，L-N⁶-(1-亚氨乙基)-赖氨酸600μg。

工艺条件为：进口温度为105℃，出口温度为68℃，气流量90％，喷嘴出口内径为0.1cm，喷嘴空气流速800ml/min，进样速度50mL/h

实施例2-1

将布地奈德250mg，N-硝基-L-精氨酸25mg溶于乙醇，过滤后，滤液喷雾干燥，微粉化使之平均粒径达到4μm，无水乳糖40g，用流能磨微粉化至平均粒径40μm，混匀，用200目筛3次混匀后分装到3号胶囊内。每粒胶囊有布地奈德250μg，N-硝基-L-精氨酸25μg。

工艺条件为：进口温度为105℃，出口温度为68℃，气流量90％，喷嘴出口内径为0.1cm，喷嘴空气流速800ml/min，进样速度50mL/h。

实施例2-2

按照实施例2-1的配方，将载体改变为平均粒径35μm的八醋酸-D-纤维二糖酯，按照实施例2-1的工艺制备粉雾剂。

实施例3

将布地奈德110mg，N-单甲基-L-精氨酸220mg溶于乙醇，过滤后，滤液喷雾干燥，使之平均粒径达到5μm，无水乳糖5g，用流能磨微粉化至平均粒径60μm，混合，过200目筛3次混匀后分装到3号胶囊内。每粒胶囊有布地奈德110μg，N-单甲基-L-精氨酸220μg

工艺条件为：进口温度为105℃，出口温度为68℃，气流量90％，喷嘴出口内径为0.1cm，喷嘴空气流速800ml/min，进样速度50mL/h。

实施例4

取布地奈德50mg，Nω，Nω-非对称性二甲基精氨酸500mg溶于乙醇，过滤后滤液喷雾干燥，使之平均粒径达到7μm，无水乳糖40g，用流能磨微粉化至平均粒径80μm，过150目筛3次混匀后分装到3号胶囊内。每粒胶囊有布地奈德50μg，Nω，Nω-非对称性二甲基精氨酸500μg

工艺条件为：进口温度为105℃，出口温度为68℃，气流量90％，喷嘴出口内径为0.1cm，喷嘴空气流速800ml/min，进样速度50mL/h。

实施例5

布地奈德250mg

N-单甲基-L-精氨酸125mg溶于乙醇，过滤后，滤液喷雾干燥，微粉化使之平均粒径达到4μm，无水乳糖40g，用流能磨微粉化至平均粒径30μm，混匀，用200目筛3次混匀后分装到3号胶囊内。每粒胶囊有布地奈德250μg，N-硝基-L-精氨酸125μg。

工艺条件为：进口温度为105℃，出口温度为68℃，气流量90％，喷嘴出口内径为0.1cm，喷嘴空气流速800ml/min，进样速度50mL/h。

实施例6

布地奈德125mg

N-单甲基-L-精氨酸125mg溶于乙醇，过滤后，滤液喷雾干燥，微粉化使之平均粒径达到4μm，无水乳糖40g，用流能磨微粉化至平均粒径100μm，混匀，用200目筛3次混匀后分装到3号胶囊内。每粒胶囊有布地奈德125μg，N-硝基-L-精氨酸125μg。

工艺条件为：进口温度为105℃，出口温度为68℃，气流量90％，喷嘴出口内径为0.1cm，喷嘴空气流速800ml/min，进样速度50mL/h。

气雾剂的配制，所用乙醇为无水乙醇，所用活性成分为微粉化至粒径为0.5-10μm。采用不同规格的剂量阀门系统使得制得的气雾剂能够达到所需的每揿剂量。

实施例7

布地奈德 500mg Nω，Nω-非对称性二甲基精氨酸 1000mg

乙醇 198.5g

HFA227 1000g

制备工艺：将处方量的布地奈德和Nω，Nω-非对称性二甲基精氨酸加入乙醇，搅拌，使原料溶解，分剂量灌装，封接剂量阀门系统，分别再加压注入HFA227，即得。剂量每揿布地奈德50μg，Nω，Nω-非对称性二甲基精氨酸100μg。

实施例7-1

布地奈德 500mg

乙醇 199.5g

HFA227 1000g

制备工艺：将处方量的布地奈德加入乙醇，搅拌，使原料溶解，分剂量灌装，封接剂量阀门系统，分别再加压注入HFA227，即得。

实施例8

布地奈德 2500mg N-硝基-L-精氨酸 1250mg

乙醇 196.25g

HFA227 1000g

制备工艺：将处方量的布地奈德和N-硝基-L-精氨酸加入乙醇，搅拌，使原料溶解，分剂量灌装，封接剂量阀门系统，分别再加压注入HFA227，即得。每揿布地奈德250μg，N-硝基-L-精氨酸125μg。

实施例8-1

布地奈德 2500mg

乙醇 197.5g

HFA227 1000g

制备工艺：将处方量的布地奈德加入乙醇，搅拌，使原料溶解，分剂量灌装，封接剂量阀门系统，分别再加压注入HFA227，即得。

实施例9

布地奈德 2000mg N-单甲基-L-精氨酸 2000mg

乙醇 196g

HFA134a 1000g

制备工艺：将处方量的布地奈德和N-单甲基-L-精氨酸加入乙醇，搅拌，使原料溶解，分剂量灌装，封接剂量阀门系统，分别再加压注入HFA227，即得。每揿布地奈德200μg，N-单甲基-L-精氨酸200μg。

实施例9-1

布地奈德 2000mg

乙醇 198g

HFA134a 1000g

制备工艺：将处方量的布地奈德加入乙醇，搅拌，使原料溶解，分剂量灌装，封接剂量阀门系统，分别再加压注入HFA227，即得。

实施例10

布地奈德 1000mg L-N⁶-(1-亚氨乙基)-赖氨酸 5000mg

乙醇 194

HFA134a 1000g

制备工艺：将处方量的布地奈德和L-N⁶-(1-亚氨乙基)-赖氨酸加入乙醇，搅拌，使原料溶解，分剂量灌装，封接剂量阀门系统，分别再加压注入HFA134a，即得。每揿布地奈德100μg，L-N⁶-(1-亚氨乙基)-赖氨酸500μg。

实施例10-1

布地奈德 1000mg

乙醇 199

HFA134a 1000g

制备工艺：将处方量的布地奈德加入乙醇，搅拌，使原料溶解，分剂量灌装，封接剂量阀门系统，分别再加压注入HFA134a，即得。

实施例11

布地奈德 1000mg  N-单甲基-L-精氨酸 10000mg

乙醇 189g

HFA134a 1000g

制备工艺：将处方量的布地奈德和N-单甲基-L-精氨酸加入乙醇，搅拌，使原料溶解，分剂量灌装，封接剂量阀门系统，分别再加压注入HFA134a，即得。每揿布地奈德100μg，N-单甲基-L-精氨酸1000μg。

实施例12

布地奈德 2500mg Nω，Nω-非对称性二甲基精氨酸 250mg

乙醇 197.25g

HFA227 970g

制备工艺：将处方量的布地奈德和N-乙酰-L-半胱氨酸加入乙醇，搅拌，使原料溶解，分剂量灌装，封接剂量阀门系统，分别再加压注入HFA227，即得。每揿布地奈德250μg，Nω，Nω-非对称性二甲基精氨酸25μg

实施例13-1

Nω，Nω-非对称性二甲基精氨酸 2500mg

乙醇 94.7g

HFA134a 1098g

制备工艺：将处方量的N-乙酰-L-半胱氨酸加入乙醇，搅拌，使原料溶解，分剂量灌装，封接剂量阀门系统，分别再加压注入HFA134a，即得。

实施例13-2

N-单甲基-L-精氨酸 2500mg

乙醇 97.5g

HFA134a 1100g

制备工艺：将处方量的N-单甲基-L-精氨酸加入乙醇，搅拌，使原料溶解，分剂量灌装，封接剂量阀门系统，分别再加压注入HFA134a，即得。

实施例13-3

L-N⁶-(1-亚氨乙基)-赖氨酸 2500mg

乙醇 97.5g

HFA134a 1100g

制备工艺：将处方量的L-N⁶-(1-亚氨乙基)-赖氨酸加入乙醇，搅拌，使原料溶解，分剂量灌装，封接剂量阀门系统，分别再加压注入HFA134a，

实施例13-4

N-硝基-L-精氨酸 2500mg

乙醇 97.5g

HFA134a 1100g

制备工艺：将处方量的N-硝基-L-精氨酸加入乙醇，搅拌，使原料溶解，分剂量灌装，封接剂量阀门系统，分别再加压注入HFA134a，即得。

实施例18

布地奈德 2500mg 甲基异硫脲 1250mg

乙醇 196.25g

HFA227 1000g

制备工艺：将处方量的布地奈德和甲基异硫脲加入乙醇，搅拌，使原料溶解，分剂量灌装，封接剂量阀门系统，分别再加压注入HFA227，即得。每揿布地奈德250μg，甲基异硫脲125μg。

药理实施例1

根据中国文献“气道炎症性疾病”(刘春涛，人民卫生出版社，2004；506-507)公开，血清IgE，IL-4，IL-5在哮喘的发病机制中占有重要地位，因此本药理实施例中以上述三种因子的血清含量变化来表征药物对哮喘模型大鼠的治疗效果。

1、实验动物，雄性wistar大鼠，6-8周龄，体重200±20g，每组10只。分为模型组、对照组与实验组，实验组给药情况如下表(剂量单位μg/(kg*d))：

下表中A为激素剂量、B为NOS抑制剂剂量，数值单位均为μg

实验组1-6分别采用实施例7-12制得的气雾剂组合物，实验组7-10分别采用实施例7-1至10-1制得的气雾剂组合物，实验组18采用实施例18制得的气雾剂组合物，实验组13-16分别采用的是实施例13-1至13-4制得的气雾剂组合物，实验组17给药时，先用实施例10-1所用的药物组合物给药，15min后再用实施例13-2所用的药物组合物给药，对照组与模型组不给药，对照组为正常实验动物，模型组为造模成功后的实验动物。在实验中，根据给药剂量采用不同的定量阀门系统。

2、实验药物，鸡卵蛋白(OVA)((美国SIGMA公司)，灭活百日咳疫苗(5×10⁹/ml，)

3、造模与给药，按照中国文献“地塞米松对哮喘豚鼠气道壁厚度的影响”(王鲁宁等，中国病理生理杂志，2002，18(5)；564-565)中公开的方法进行造模，第1日，模型组和实验各组动物用1ml致敏液(含OVA10mg，灭活百日咳疫苗5×10⁹个，氢氧化铝凝胶100mg)腹腔注射致敏；第8日重复致敏一次；第15日起模型组和实验各组动物置于雾化吸入箱中(60cm×40cm×40cm)，每日一次以超声雾化器以1％OVA溶液雾化吸入以激发，每次放入10只大鼠，吸入20min，连续吸入八周。对照组采用相同量生理盐水代替造模药物进行注射和雾化吸入。实验各组于每日激发前30min采用气雾剂吸入给药，对照组与模型组采用空白HFA134a代替，气雾剂给药方法为：将动物固定于手术台上与水平成60-70°放置，用胶条封住鼻孔，使动物只能经口吸气，气雾剂喷嘴处接一塑料管(3cm)，将动物舌头拉出并将塑料管伸至咽喉位置，待动物吸气完成给药。

4、血清IgE，IL-4和IL5含量测定，按照哮喘大鼠经麻醉后腹主动脉取血，于4℃静置30min后，以1500r/min离心15min，收集上层血清，采用ELISA法测定血清IgE，IL-4和IL-5的含量)，ELISA试剂盒(武汉博士德生物有限公司)，结果如下表

血清IgE，IL-4和IL-5含量检测结果表明，与模型组相比实验组1-6血清IgE，IL-4和IL-5含量均有显著下降(P＜0.01)，而与实验组18和单用激素的实验组7-12相比，实验组1-6血清IgE，IL-4和IL-5含量也有显著下降(P＜0.05)，说明布地奈德与NOS抑制剂制成复方制剂较单用布地奈德制剂对哮喘模型大鼠能够产生显著的效果，实验组18的结果表明NOS抑制剂S-甲基异硫脲和布地奈德的复方制剂与单使用布地奈德的药物相比结果近似，没产生协同作用，因此甲基异硫脲不适于和糖皮质激素作为复方吸入制剂。而在两种药物不同比例的实验组中，布地奈德与NOS抑制剂比例达到1∶0.5的实验组2，血清IgE，IL-4和IL-5含量检测结果表明治疗效果明显好于NOS抑制剂比例更低的实验组6，而实验组1-5治疗效果没有明显差距，说明当布地奈德与NOS抑制剂比例达到1∶0.5时，NOS抑制剂与布地奈德即能产生较强的协同治疗效果，而NOS比例更高时如高至布地奈德的10倍时，疗效反而不再提高，说明更高的NOS抑制剂比例，并不能产生更好的疗效，因此本发明提供的技术方案中，优选了布地奈德与NOS抑制剂的质量比为0.5-5，并更进一步优选为0.5-2。而实验组13-16表明单用NOS抑制剂的实验组与模型组相比，治疗效果并不明显。采用先后给药的实验组17与采用复方给药的实验组4、5相比，治疗效果也有显著差异，而实验组17与相同激素剂量的实验组10相比，疗效基本相同，说明将两种药物制成复方制剂，比先后给药治疗效果更好。

5、哮喘大鼠肺组织病理学改变，光镜下观察，与对照组相比，模型组大鼠气道壁及平滑肌明显增厚，上皮细胞脱落，管腔狭窄，管壁内及周围炎性细胞浸润，胶原沉积增多。实验组1-6上述改变明显减轻。实验组13-16与模型组相比无明显差异，而实验组7-10、18及采用先后吸入给药两种活性成分的实验组17的效果介于实验组1-6与实验组13-16之间，实验组1-6显示出将布地奈德与NOS抑制剂制成复方制剂吸入治疗对抑制哮喘模型大鼠的气道重构产生了显著的协同治疗效果。

药理实施例2

采用实施例5的处方与工艺制备粉雾剂，将无水乳糖替换为如下的混合物乳糖，其余处方与工艺皆不变，制得粉雾剂，

实施例5-1 5.0％α-乳糖一水合物与余量无水乳糖

对比例1～3分别以糠酸莫米松、环索奈德、丙酸氟替卡松为活性成分，NOS抑制剂和其他辅料按照实施例5-1的配方和工艺进行配制。

实施例5-2 7.5％α-乳糖一水合物与余量无水乳糖

实施例5-3 9.0％α-乳糖一水合物与余量无水乳糖

实施例5-4 15.0％α-乳糖一水合物与余量无水乳糖

实施例5-5 2.0％α-乳糖一水合物与余量无水乳糖

对比例4～6分别以糠酸莫米松、环索奈德、丙酸氟替卡松为活性成分，NOS抑制剂和其他辅料按照实施例5-3的配方和工艺进行配制。

对比实施例5至实施例5-3以及对比例1-6的粉雾剂在高温条件(40℃±2℃，相对湿度75％±5％，采用市售铝塑泡罩包装)下存储3个月前后雾滴(粒)分布(测定值与标识含量的比值)和排空率的变化。每组取40个胶囊，于0个月和存储3个月分别测定上述两项指标，每项指标每次用10粒胶囊测试

雾滴(粒)分布和排空率按照中国药典2005版附录IL和附录XH中公开的方法测定雾滴(粒)分布和排空率对比表

测定结果表明，采用优选的混合乳糖的实施例5-1～5-3其经过3个月高温存储后排空率与采用无水乳糖的粉雾剂基本相当，但雾粒分布的降低明显好于采用无水乳糖的实验组，说明实施例5-1～5-3粉雾剂经过储存后，还能保持较高的雾滴(粒)分布量，从而在实际使用中，能够在存储后保持到较高的肺部沉积率进而实现更好的治疗效果。而采用相同混合乳糖处方以其他吸入糖皮质激素为活性成分的粉雾剂(对比例1-6)经过高温存储后的雾滴(粒)分布的降低与实施例5基本相当。说明本发明提供的混合乳糖配方对提高上述几种活性成分的存储后的雾滴(粒)分布量的稳定性基本没有效果。而实施例5-4～5-5得到的粉雾剂虽然与实施例5相比有一定的改善，但是与实施例5-1～5-3相比雾粒分布、排空率两项指标有所下降，证明载体中α-乳糖一水合物与无水乳糖的比例并非越多越好，而是其比例与特定的活性成分有关。

Claims (5)

1.一种吸入药物组合物，含有作为活性成分的布地奈德、N-单甲基-L-精氨酸和含有5-9％重量百分比α-乳糖一水合物的无水乳糖，以及一种或多种适用于吸入的药物辅料。

2.如权利要求1所述吸入药物组合物，其特征在于所述布地奈德和N-单甲基-L-精氨酸的质量比为1∶0.1-10。

3.如权利要求1所述吸入药物组合物，其特征在于所述活性成分的布地奈德和N-单甲基-L-精氨酸为微粉，微粉的粒径为0.5～10μm。

4.如权利要求1所述吸入药物组合物，其特征在于所述活性成分的布地奈德和N-单甲基-L-精氨酸为微粉，微粉的粒径为2～5μm。

5.如权利要求1所述吸入药物组合物，其特征在于所述α-乳糖一水合物、无水乳糖的粒径为20～100μm。