NL8005797A

NL8005797A - Werkwijze ter bereiding van een vetemulsie voor intraveneuze injectie, alsmede vetemulsie voor intraveneuze injectie.

Info

Publication number: NL8005797A
Application number: NL8005797A
Authority: NL
Original assignee: Green Cross Corp
Priority date: 1979-05-07
Filing date: 1980-10-21
Publication date: 1982-05-17
Also published as: NL189899C; DE2938807C2; FI70137C; FI70137B; NL189899B; FR2455888B1; IT1146936B; BE885844A; CA1142089A; US4280996A; AU5780980A; HK66685A; DE2938807A1; FI801336A; JPS55147228A; SU1311604A3; AU518087B2; IT8048587A0; JPS6030652B2; FR2455888A1

Description

.·? . ί^*5* * N. o. 29.524

Werkwijze ter bereiding van een veteraulsie voor intraveneuze injectie, alsmede vetemulsie voor intraveneuze injectie_

De onderhavige uitvinding heeft betrekking op .een voedende injectievloeistof en meer in het bijzonder op een vetemulsie voor intraveneuze injectie en een werkwijze ter bereiding daarvan.

Bij de bereiding van de gebruikelijke -vetemulsies zijn emul-5 geermiddelen gebruikt» zoals niet-ionogene oppervlakactieve middelen, eigeelfosfolipiden en sojaboonfosfolipiden. De eigenschappen / van een emulsie variëren vanzelfsprekend met het type emulgeermiddel of'van de gebruikte emulgeerhulpstof. Aangezien de emulsie, waarin hierop gezinspeeld wordt, een voedende infusievloeistof is, is het 10 gewenst, dat de emulsie snel in vivo verbruikt wordt als een energiebron na toediening. Opdat het intraveneuze geïnjecteerde vet snel door verbranding in het lichaam kan worden verbruikt, is het noodzakelijk, dat het vet niet lange perioden in het bloed blijft en dat het vet gemetaboliseerd wordt zonder afzetting en opzameling in 15 weefsels en organen, zoals de lever en de milt.

Vanwege de voorafgaande redenen is het noodzakelijk een emulsie te ontwikkelen, waarin de deeltjes fijn en voldoende stabiel zijn. Aanvraagster heeft gevonden dat door de toevoeging van verschillende emulgeermiddelen en emulsiehulpstoffen aan een gebruike-20 lijke vetemulsie voor intraveneuze injectie, die soja-olie, water en eigeelfosfolipiden bevat en door daaropvolgende homogenisering het mogelijk is een vetemulsie te bereiden die, in vergelijking met bekende emusleis veel fijnere deeltjes heeft, veel stabieler is en veel sneller wordt verbruikt als een energiebron in vivo. Gebaseerd 25 op deze bevinding is de onderhavige uitvinding tot stand gebracht.

Volgens de onderhavige uitvinding wordt een vetemulsie verschaft voor intraveneuze injectie, die 5 tot 50 gew/vol·# sojaolie, eigeelfosfolipiden bij een gewichtsverhouding tot de soja-olie van 1/4 tot 1/25» 0,01 tot 0,30 gew/vol·# van een vetzuur met 12 tot 20 30 koolstofatomen of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan, O, 005 tot 0,50 gew/vol»% van een cholesterol en de rest water bevat; gew/vol.$> is het percentage van het gewicht van een opgeloste stof of gedispergeerde fase in een eenheidsvolume van de emulsie.

De voor de bereiding van de infusievloeistof van de onderha-35 vige uitvinding te gebruiken soja-olie is een sterk gezuiverde soja-olie, bijvoorbeeld bereid volgens de stoomdestillatiemethode [H.J. Lips, J. Am Oil Chemist. Soc., 27 (1950) 422-423] uitgeraffi- 8005797 - 2 Μ -·* neerde soja-olie, waarbij de zuiverheid van het sterk gezuiverde soja-olie 99,9% of meer is uitgedrukt in het triglyceride-, diglyce-ride- en monoglyceridegehalte. Hoewel niet onderworpen aan een of andere bijzondere beperking is de gewichtsverhouding soja-olie tot 5 water in het algemeen 0,05 tot 0,43» bij voorkeur 0,05 tot 0,2.

33e gezuiverde .sigeelfosfolipiden, toegepast bij de onderhavige uitvinding, kunnen bereid worden door de gebruikelijke fractionering met een organisch oplosmiddel op de volgende wijze: Aan een oplossing van 150 g onzuivere eigeelfosfolipiden in een koud mengsel van 10 200 ml n-hexaan en 100 ml aceton, worden geleidelijk onder roeren 1170 ml koude aceton toegevoegd. 33e onoplosbare bestanddelen worden door filtratie verzameld en opnieuw opgelost in een koud mengsel van 260 ml n-hexaan en 130 ml aceton. Aan de geroerde oplossing worden 1170 ml koude aceton toegevoegd. De onoplosbare bestanddelen 15 worden door filtratie verzameld en van het oplosmiddel bevrijd door verdamping, waarbij 60 g van een gedroogd produkt verkregen wordt, dat 70-80% fosfatidylcholine, 12-25% fosfatidylethanolamine en andere fosfolipiden, met inbegrip van fosfatidylinositol, fosfatidyl-serine, sfingomyeline en lyzofosfatidylcholine [D.J. Hanahan e.s., 20 J. Biol. Chem., J£2, (1951) 623-628] bevat.

De toe te passen vetzuren kunnen vrije vetzuren met 12 tot 20 koolstofatomen zijn, die geschikt zijn als geneesmiddelen of farmaceutisch aanvaardbare zouten daarvan. Voorbeelden zijn stearine-zuur, oliezuur, linolzuur, palmitinezuur, linoleenzuur en kalium-25 of natriumzouten daarvan. De toe te passen hoeveelheid is 0,01 tot 0,30, bij voorkeur 0,04 tot 0,07 gew./vol.% als een eindconcentra-tie in de emulsie. De cholesterolen kunnen die zijn, die geschikt zijn voor de geneeskundige behandeling door intraveneuze injectie.

De toe te voegen hoeveelheid is 0,005 tot 0,50 gew./vol.% als een 30 eindconcentratie in de emulsie.

De emulsie van de onderhavige uitvinding wordt zodanig bereid, dat een mengsel van soja-olie, eigêelfosfolipide en een vetzuur met 12 tot 20 koolstofatomen of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan en een cholesterol vooraf bereid wordt en met water 35 wordt gemengd en dat het verkregen mengsel grof geëmulgeerd wordt door middel van een gebruikelijke menger, en de grove emulsie verder gehomogeniseerd wordt voor het vormen van de beoogde emulsie.

De homogenisering kan op een gebruikelijke wijze worden uitgevoerd door middel van ultrasonefeehandeling of verstuiving onder druk.

40 De beoogde emulsie wordt bijvoorbeeld verkregen door het stroombare 8005797 ί * - $ 3 preparaat 10 maal door een Manton-Gaulin homogeniseerinrichting te leiden onder toepassing van een druk van 50.000 kfa [R.P. Geyer e.s., J. Am. Oil Chem. Soc., ^2, (1955) 3^5-370].

De emulsie van de onderhavige uit landing kan een i so t oormiddel 5 bevatten, zoals bijvoorbeeld glycerol, glirose of dergelijke in een isotone hoeveelheid om de emulsie isotöon te maken. Het isotone middel kan aan de emulsie worden toegevoegd in de vorm van een water bevattende oplossing, wanneer de grove emulsie wordt bereid of daarna.

10 In vergelijking met gebruikelijke vetemulsies, waarin sojaboon-fosfolipiden, niet-ionogene opppervlakactieve middelen en èigeel-fosfolipiden als emulgeermiddelen gebruikt worden, is de vetemul-sie voor intraveneuze injectie volgens de onderhavige uitvinding beter in fysisch-chemische stabiliteit en door geringere nevenef-15 fecten. De emulsie van de onderhavige uitvinding bevat gedisper-geerde oliedruppels met een gemiddelde diameter van 0,1 micrometer of minder, geen van de deeltjes heeft een diameter groter dan 1 micrometer en de toestand van de fijne dispersie blijft onveranderd gedurende een lange tijdsperiode.

20 De vetemulsie van de onderhavige uitvinding vertoonde een LD50 bij ratten van 200 ml of meer per kg lichaamsgewicht voor een 10 procentige vetemulsie en 150 of meer voor een 20 procentige vetemulsie;. Geen hemolyse wordt waargenomen na indruppeling bij een normale snelheid.

25 Instructie voor toepassing van de onderhavige uitvinding:

Een dosering van 500 tot 1000 ml van een 10 procentige vetemulsie wordt eenmaal per dag door intraveneus druppelen toegediend. De dosering wordt op geschikte wijze geregeld volgens het lichaamsgewicht en het symptoom en de hoeveelheid intraveneus toegediend vet 30 is 2 g (20 ml van de emulsie) of minder per dag per kg lichaamsgewicht .

Voorbeeld I.

Aan 20,0 g gezuiverde soja-olie werden 2,4 g gezuiverde eige'el-fosfolipiden, 0,05 g natriumoleaat en 0,04 g cholesterol toege-55 voegd. Het mengsel werd tot 65-75°C verwarmd voor het vormen van een oplossing. Aan de oplossing werden 5,0 g glycerol en 173 ml gedestilleerd water voor injectie toegevoegd, die verwarmd waren tot 65-75°C. Het verkregen mengsel werd grof geëmulgeerd door middel van een Homomenger. De grove emulsie werd fijn geëmulgeerd 40 door 10 maal leiden door een Manton-Gaulin homogeniseerinrichting 8 -0 ö 5 7 9 7 4 onder een druk 'bij de eerste trap van 12.000 kPa en een totale druk van 50.000 kPa voor het verkrijgen van een gehomogeniseerde en zeer fijn gedispergeerde vetemulsie.

Voorbeeld II.

5 Aan 40,0 g gezuiverde soja-olie werden 2,4 g gezuiverde eigeel- fosfolipiden, 0,05 S natriumoleaat en 0,04 g cholesterol toegevoegd. Het mengsel weid tot 65-75°C verwarmd voor het vormen van een oplossing. Aan de oplossing werden 5,0 g glycerol en 173 ml gedestilleerd water voor -V injectie toegevoegd, die tot 65-75°C waren verwarmd.

10 Het verkregen mengsel werd grof geëmulgeerd door middel van een

Homomenger. De grove emulsie werd fijn geëmulgeerd door 10 maal leiden door een Manton-Gaulin homogeniseerinrichting onder een druk bij de eerste/vana·^2000 kPa en een totale druk van 50.000 kPa voor • het verkrijgen van een gelijkmatige en fijn gedispergeerde vetemulsie. 15 Experimenteel Voorbeeld I.

Een vergelijkende proef werd uitgevoerd over de stabiliteit van de emulsie in verband met de samenstelling van het emulgeermid-del. Emulsiemonsters werden bereid op soortgelijke wijze als die in voorbeeld I onder toepassing van vier emulgeersystemen bestaande uit 20 gezuiverde eigeelfosfolipiden alleen, een combinatie van gezuiverde eigeelfosfolipiden en cholesterol of een vrij vetzuur, of een combinatie (volgens de onderhavige uitvinding) van gezuiverde eigeelfosfolipiden, cholesterol en een vrij vetzuur.

De deeltjesgrootte van elk emulsiemonster werd gemeten door 25 middel van een electronenmicroscoop onmiddellijk na de bereiding en na opslag gedurende 24 maanden bij 4°C. De gebruikte electronenmicroscoop was model JEM-T 7 van Nippon Denshi Co. De gemiddelde s deeltjesdiameter werd bepaald door meting van de deeltjesgrootte van de foto·, genomen volgens de koolstof replica techniek. Gevonden 30 werd, dat de emulsie bereid onder toepassing van een emulgeermiddel systeem bestaande uit gezuiverde eigeelfosfolipiden, een vrij vetzuur en cholesterol gelijkmatige en fijne deeltjes had, die stabiel bleven zonder merkbare achteruitgang gedurende een lange tijdsperiode, hetgeen er op wijst, dat deze emulsie de beste van de vier 35 emulsies is (tabel A) 8005797 / 5 4 < % >

If Η ra ft o cö d o 0 d ^ Φ -μ ·π> <D ·Η

g b /—v Φ (Λ N"\ tA

CÖ d Ο Ο Ο O

•ri d <0 » — — —

ft .Φ +5 O O O O

ia nj Φ φ ö a +1+1 +1 +i

•n cö O

- +> cö d mo m T- rl S O CM CM T- V- <D »r\ ·» ·* ** Λ 03 *3- a o o o o ft OJ'—' +3

CD

•P

•rl S a .Q CÖ CÖ >

-P

ra d Φ d 4s φ φ φ

a .Η'-' m m cm CM

Φ cö m d o ö Ο O

•rl ·Η Η φ - ** “

CQ ft d +3 Ο Ο Ο O

d S § fi +1+1 +1 +1 • a ·π>+= o «!φ -p ra d m m on co HÏ>Ot-t-00 ' Η Φ Φ ft - - - - φίϋ&Ο ra ra s οο ο ο p cö ft ftw CÖ d Η B rö m !> ft o d Φ cö -p d φ

•H

rij ra d d (D Φ Φ o Φ - -p r-l ft φ Φ Φ Η φ Ή ft ft ft Φ >d ft ft ·Γ+ ft Φ ft i+ ft ft ft p -Η H i+ ft ft , 'T' a O rH r+ i—I d 60 d «HO O O d fl φ raft 'h ft d ft φ o ra ra ra n ft 60 «ho o o += d Η ft 'y +< +1 φ ·Η d Φ ^ ft ft i> j> a φ φ φ φ += (Xl 60 &Q φ d ö -d ft ft 60 60 ® f* φ φ ft ft Η φ φ Η Φ Ο Oft ft ft d ft ft d ft ft cd ?+ dram φ ra += rad ra-Pd t>>m>di>rara •Η ·Η ra ·η d ft Φ 6o d dn d n d η η

N NO N+> NOO

ra rap rara rap{> 6o 6o o 60 i> 60 o—- d ra += m d Η Η H >

Ο Η Η H

jg H

8005797 6

Experimenteel Voorbeeld II.

Tier vetemulsies werden op dezelfde wijze "bereid als "bij experimenteel Toorbeeld I, behalve dat soja-olie met gemerkt linol-zuur in de structuur gebruikt werd. Tier groepen mannelijke ratten 5 van de Wistarstam (elk met een lichaamsgewicht van 150 g), die 16 uren waren gevast, kregen via de staartader de bovengenoemde emulsies respectievelijk toegediend bij een dosering van 20 ml (2 g als soja-olie) per kg lichaamsgewicht. Na de injectie werd de uit-ademingslucht van elke rat continu 6 uren verzameld en de 10 radioactiviteit werd gemeten om de emulsies met elkaar te vergelijken op de metabolische snelheid van vet als energiebron. Na de hiervoor vermelde proef werd elke rat opgeofferd en onderworpen aan laparotomy om de achtergebleven radioactiviteit in het plasma, de lever, de milt en de longen te bepalen.

15 Toorts werden de emulsies in de staartader van ratten op de zelfde wijze zoals hiervoor vermeld geïnjecteerd. Bloedmonsters werden verzameld uit het ooggebied van elke rat 10, 15> 20, 30, 60, 90, 120 en 180 minuten na de injectie. Het neutrale vetgehalte van het door centrifugeren afgescheiden plasma werd gemeten volgens de 20 acetylaceton methode voor het bepalen van de halfwaarde (T^·) van het neutrale vet in het plasma. De verkregen resultaten zijn in tabel B opgenomen.

8005797 Λ 7 Κ\ Τ- C\J Ί- Ο #*·>·>·* ' ο ο ο ο +1 +! +1 +1 ΝΛ 00 LO C0 » «ι *» η CM τ- ν τ- * , Η Ο ΚΝ ΙΓι φ ·»·»·>·* +=> τ- Ο Ο. Ο, •η +1 +1 +1 +1 |> CM "ή" CO <Μ • J-J ·> Λ Λ *»

-ρ ΙΓ\ CM τ- CM

Ο__—- ο •η < co ω ο\ fjj *ν *\ *» ·» CÖ \£> CM Lf\ 'Ö" Μ δ£ +1+1 +1 +1

<3 τ- Lf\ τ— VO

φ >Γ| «*»>·· ·* nj ö νο τ- Ο κ"ν φ rt· (Λ (Λ ΙΛ S3---- - }> 0) »1 ο

φ 4s LCV

•Η Ο CM CM V

-ρ CÖ ·»»·**

pi Ö O O O O

ιί +1 +1 +1 +1 f4 cd s .p Pl m ΙΛ \o in 05 pj CÖ ·>·>*> ·* •Η H O T- T- T- • R Ό f4 m H .......

O) § EH ^ m

•H

I m φ ö o δο Φ 'd · 4J f4 s r ·η p ft <3 o p o y

•H Ό Μ H

+J p3 δο ö 5 CÖ ·Η -P Ö Φ 1Λ r- r· vo ro

SjJd-i4,M ·.·>»·> >>

POöS CM CM KV CM I

d t) Ö (D O P*

Φ Φ Η ·Η M +| +1 +1 +1 H

δο-ρ 'ö 43 φ ·Η Φ <D Φ t- KV VO t— Φ ^-} 1¾ fH n n P. Λ tv Λ Ό Λ!·Η0-Ρ O ia N m H-P Φ CM CM CM CM Ö ® O ij ti r ® W cö cö Öv_y l>

fH

«H

----- Λ o m

U

0) ® 'd cö i> cö m 43 Ai cö cö pi Ό j3 /—s HP LA KV ·φ CM ·Η

«H t—|CM ft S * - _T « H

H ·Η COCO'+tTV Φ CÖ'____ fi r CM KV IA Ai ' ω ·η 'w' f-i ___ a ---- ft u o Φ

+> UJ

ca · w ö H H H l> a o Η Η H ft

g H O

8005797

Zoals in het voorafgaande beschreven is het duidelijk, dat in vergelijking met de vetemulsie, waarin gezuiverde eigeelfosfoli-piden gebruikt werden als het enige emulgeermiddel, de vetemulsie bereid met toepassing van een vrij vetzuur en cholesterol als 5 emulgeerhulpstoffen samenvallend met eigeelfosfolipiden meer fijn gedispergeerde deeltjes bevatten, die gelijkmatig blijven gedurende een lange tijdsperiode en sneller gebruikt worden als energiebron in vivo, hetgeen er op wijst, dat in dit verband de emulsie van de onderhavige uitvinding beter is dan de gebruikte vetemulsies.

8005797

Claims

1. Vetemulsie voor intraveneuze injectie gekenmerkt door de aanwezigheid van 5 tot 50 gew./vol.% soja-olie, eigeel- fosfolipiden in een gewichtsverhouding tot de soja-olie van 1/4 tot l/25» 0,01 tot 0,30 gew./vol.% van een vetzuur met 12 tot 20 5 koolstofatomen of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan, 0,005 tot 0,50 gew./vol.% van een cholesterol en de rest water.

2. Emulsie volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat de gemiddelde deeltjesdiameter van de geëmulgeerde deeltjes 0,1 micrometer of minder is. 10

3· Emulsie volgens conclusie 1,met het kenmerk, dat de diameter van de geëmulgeerde deeltjes niet groter is dan 1 micrometer.

4· Emulsie volgens conclusies 1 tot 3» m e t het kenmerk, dat de hoeveelheid vetzuur of een farmaceutisch aanvaard-15 baar zout daarvan 0,04 tot 0,07 gew./vol.96 is.

5« Emulsie volgens conclusies 1 tot 4? ® e t het kenmerk, dat het vetzuur stearinezuur, oliezuur, linolzuur, palmi-tinezuur of linoleenzuur is.

6. Emulsie volgens conclusies 1 tot 5> met het ken-20 m e r k, dat de emulsie isotoon gemaakt is door de toevoeging van glycerol of glucose.

7. Werkwijze ter bereiding van een vetemulsie voor intraveneuze injectie, met het kenmerk, dat men een mengsel van soja-olie, eigeelfosfolipiden, een vetzuur met 12 tot 20 koolstof- 25 atomen of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan en een cholesterol in water homogeniseert, waarbij de hoeveelheden van de bestanddelen 5 tot 50 gew./vol.% soja-olie, eigeelfosfolipiden in een gewichtsverhouding tot de soja-olie 1/4 tot 1/25> 0,01 tot 0,30 gew./vol.% van een vetzuur met 12 tot 20 koolstofatomen of een far-30 maceutisch aanvaardbaar zout daarvan, 0,005 tot 0,50 gew./vol.% van een cholesterol en de rest water zijn.

8. Werkwijze volgens conclusie 7» met het kenmerk, dat men een gemiddelde deeltjesdiameter van de geëmulgeerde deeltjes van 0,1 micrometer of minder toepast. 35 9· Werkwijze volgens conclusie 7> met het kenmerk, dat men een diameter van de geëmulgeerde deeltjes niet groter dan 1 micrometer toepast.

9 - λ CONCLUSIES.

10. Werkwijze volgens conclusies 7 tot 9» met het ken- 8005797 ~ ^ 10 merk, dat men een hoeveelheid vetzuur of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan van 0,04 tot 0,07 gew./vol.% toepast.

11. Werkwijze volgens conclusies 7 tot 10, met het kenmerk, dat men als vetzuur stearinezuur, oliezuur, linol- 5 zuur, palmitinezuur of linoleenzuur toepast.

12. Werkwijze volgens conclusie 7>methetken- m e r k, dat men de emulsie isotoon maakt door de toevoeging van glycerol of glucose.

13. Werkwijze volgens conclusies 7 tot 12, met het 10kenmerk, dat men de homogenisering uitvoert door het mengsel met water te mengen, grof te emulgeren en vervolgens door verstuiving onder druk te homogeniseren. 8005797