MX2010006927A - Composiciones farmaceuticas que contienen al menos un ingrediente activo de proteina protegido contra las enzimas digestivas. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a composiciones farmacéuticas que contienen al menos un ingrediente activo de proteína protegido de las enzimas digestivas; dichas composiciones farmacéuticas contienen dicho al menos un ingrediente activo de proteína, en la forma libre, así como para líquidos, un sistema capaz de amortiguarlos a un pH mayor que 4 y menor que o igual a 8 o, para sólidos, un sistema que ejerce, cuando se colocan en un medio líquido, un efecto amortiguador entre un pH mayor que 4 y menor que o igual a 8.

Description

COMPOSICIONES FARMACEUTICAS QUE CONTIENEN AL MENOS UN INGREDIENTE ACTIVO DE PROTEINA PROTEGIDO CONTRA LAS ENZIMAS DIGESTIVAS MEMORIA DESCRIPTIVA El objetivo principal de la presente invención son composiciones - composiciones para uso como un fármaco o composiciones farmacéuticas -que contienen al menos un ingrediente activo de proteína protegido contra las enzimas digestivas. Dentro de dichas composiciones, dicho al menos un ingrediente activo se formula de tal manera que resista ser metabolizado en el medio ambiente gástrico y en el medio ambiente intestinal. Dichas composiciones son composiciones para administración por vía oral (a través del tracto gastrointestinal) de dicho al menos un ingrediente activo de proteína (sensible a las enzimas digestivas).

A la fecha, los ingredientes de proteína activa, sensibles a las enzimas digestivas, en particular insulina y análogos de la misma (más precisamente sensibles a las proteasas, tales como pepsina en el estómago y principalmente tripsina en el intestino), permanece esencialmente administrada por vía parenteral independientemente de muchos estudios que han sido realizados para investigar vías de suministro alternativas (en particular esas más cómodos para los pacientes).

El artículo escrito por Simona Cernea e Itamar Raz, publicado en Timely Top. Med. Cardiovasc. Dis. 2006 Nov. 1 ; vol. 10: E29, recapituló, en 2006, alternativas para administrar insulina por inyección. Acerca del tema también existe un número de documentos de patente, por ejemplo WO 85/05029, US 5,824,638 y WO2006/127361.

El trabajo más avanzado probablemente es ese que se refiere a la administración por vía nasal. Esta vía de administración puede ser en realidad menos problemática técnicamente que la ruta parenteral. La mucosa nasal altamente vascular tiene la capacidad de absorber proteínas y transmitirlas al sistema sanguíneo, lo que la hace una buena candidata potencial. No obstante, sufre de una cierta dificultad para controlar las dosis suministrada por los inhaladores dependiendo del paciente (notablemente si el paciente tiene un resfriado, etc.).

De acuerdo con la técnica previa, los ingredientes activos de proteína que se han modificado químicamente de acuerdo con numerosas variantes y esos formulados de acuerdo con numerosas variantes han sido descritos más comúnmente. Por lo tanto: - la patente de US 4,692,433 describe la administración por la vía oral de hormonas de polipéptido. Dichas hormonas se administran, convenientemente, en soluciones acuosas amortiguadas, encapsuladas en una liposoma. No se administran en la forma libre; - los documentos WO 97/33531 , WO 02/072075 y US 2003/0017230 describen formas gastro-resistentes para la administración de péptidos por vía oral. Estas formas combinan un revestimiento gastro- resistente y un agente que disminuye el pH. Dicho revestimiento protege al ingrediente activo durante su paso en el estómago. Una vez en el intestino, se disuelve dicho revestimiento, liberando tanto al ingrediente activo como al agente que disminuye el pH. Debido a la acción de dicho agente que disminuye el pH, el pH del intestino disminuye localmente, reduciendo de hecho la actividad proteolítica de las proteasas intestinales presentes. Entonces, se asegura la protección en el estómago y a la entrada del intestino por dos medios diferentes cuya acción se desarrolla sucesivamente. Los péptidos en cuestión no intervienen ni en la forma libre ni en la presencia de un amortiguador. Incidentemente, deberá apreciarse aquí que el cuadro 1 en la página 23 de la solicitud WO 97/33531 presenta resultados para la biodisponibilidad de soluciones amortiguadas de calcitonina. Las pruebas se realizaron para estudiar la influencia del pH de la solución administrada localmente (directamente en el intestino de ratas) en la absorción del ingrediente activo. Estas pruebas se realizaron para optimizar la naturaleza del agente que disminuye el pH que interviene en la forma gastro-resistente propuesta. Estas pruebas no describen ni sugieren la composición oral de la invención (composiciones farmacéuticas o fármacos) descritas en lo siguiente; - la solicitud US 2002/0132757 se refiere a la administración de calcitonina, en la forma de partículas sólidas, a través de las membranas epiteliales, a través de la mucosa oral o nasal. Para este tipo especifico de administración, que no involucra al tracto gastrointestinal, el ingrediente activo se trata como sigue. Primero se disuelve en un amortiguador (sólo como auxiliar de procesamiento). La solución obtenida, suplementada con uno o más agentes tensoactivos y uno o más mejoradores de absorción, se liofiliza. Las partículas secas obtenidas se empacan finalmente en un recipiente presurizado con un solvente o vehículo adecuado (por ejemplo, etanol). La función de este solvente o vehículo es dispersar bajo presión dichas partículas sobre un área, tan grande como sea posible, de la mucosa. Dichas partículas no se administran en la presencia de un amortiguador; - la solicitud US 2007/0154559 describe el método complicado de formulación de ingredientes activos para la administración por la vía oral. Se busca una solución gastrointestinal mejorada. La absorción en cuestión es esa de las nanopartículas que contienen dichos ingredientes activos. De acuerdo con el método descrito, el ingrediente activo se disuelve primero en un amortiguador (sólo como auxiliar de procesamiento) y luego se forma un complejo con un contraión. El complejo obtenido se coloca en solución, en presencia de un polímero y un lípido, en un solvente orgánico. Entonces se genera una emulsión con la solución orgánica obtenida y una solución acuosa que contiene un emulsificante. Las nanopartículas se forman finalmente por la evaporación de dicho solvente orgánico. Por lo tanto, el ingrediente activo no se administra ni en la forma libre ni en la presencia de un amortiguador; - la solicitud WO 2007/032018 describe un método complicado de formulación de ingredientes activos, para la administración por vía oral, del mismo tipo que se describe en la solicitud norteamericana anterior. El ingrediente activo también se suministra en forma de nanopartículas. Dichas nanopartículas (a base de ácido graso y polímero) son sensibles al pH. Se encogen a un pH ácido. Entonces el ingrediente activo se protege de mejor manera durante su paso en el estómago. Aquí de nuevo, el ingrediente activo no se administra ni en la forma libre ni en la presencia de un amortiguador; - la solicitud FR 2,123,524 describe un derivado de insulina obtenido mediante acilación. La reacción química en cuestión se implementa en un medio amortiguado. La solicitud WO 01/36656 describe un complejo entre una biomolécula y ácido hialurónico. Estos dos documentos de la técnica previa no describen ni sugieren las composiciones farmacéuticas que combinan su ingrediente activo en la forma libre y un sistema amortiguador protector.

Los comentarios anteriores resumen las enseñanzas de la técnica previa con respecto a los conceptos de la composición oral, ingrediente activo de proteína en la forma libre y amortiguador, en tanto que dichos conceptos constituyen el fundamento de la presente invención, que se describe en lo siguiente.

El problema técnico de la administración por la vía oral de un ingrediente activo de proteína (por lo tanto sensible a las enzimas digestivas) es doble ya que en el sistema de protección proporcionado debe ser efectivo a príorí tanto en el estómago como en la entrada del intestino. Debe resistir primero a priori los jugos gástricos y luego el jugo pancreático, a la salida del estómago, en el píloro, cuando fluye ácido quimo en el duodeno, se libera secretina del intestino y estimula al páncreas para secretar tanto bicarbonato (para disminuir la acidez de dicho quimo) y colecistoquinina (pancreozimina), que estimula la secreción de jugo pancreático rico en enzimas (tripsinógeno y quimotripsinógeno, transformado en tripsina y quimotripsina activada por una enterocinasa). Una vez neutralizada la acidez en el duodeno mediante la secretina hidrocarbonada, ocurren entonces la retroalimentación e inhibición de las secreciones pancreáticas. Este mecanismo digestivo normal es familiar para los expertos en la técnica.

Para confrontar al problema técnico de administrar por la vía oral con ingrediente activo de proteína, los inventores proponen una solución completamente novedosa, que no se basa en un sistema doble de protección sino no sistema de protección en el estómago que también inhibe la secreción pancreática (lo cual elimina el problema de la degradación del ingrediente activo a la entrada del intestino). Los inventores proponen a posterior! esta explicación con base en los buenos resultados obtenidos con las composiciones de la invención. El sistema novedoso de protección propuesto es un sistema amortiguador. De una manera completamente sorprendente, dicho sistema de protección novedoso, un sistema amortiguador, permite la administración por la vía oral (a través del tracto gastrointestinal), del ingrediente de proteína activa, en la forma libre.

De acuerdo con este primer objetivo, la presente invención se refiere entonces a composiciones novedosas para uso como un fármaco o composiciones farmacéuticas, , proyectadas para (adecuadas) la administración por la vía oral de al menos un ingrediente activo de proteína; dichas composiciones son amortiguadas.

De manera más exacta, las composiciones de la invención se proporcionan en la forma líquida o sólida. Dichas composiciones son composiciones orales que contienen al menos un ingrediente activo de proteína. Son adecuadas para administración por la vía oral de dicho ingrediente activo.

En sus características, dichas composiciones son: - líquidos que contienen un sistema (un sistema amortiguador) capaz de amortiguarlos a un pH mayor que 4 y menor que o igual a 8; - sólidos que contienen un sistema (un sistema amortiguador) que ejerce, cuando están colocados en un medio líquido, generalmente acuoso, un efecto amortiguador entre un pH mayor que 4 y un pH menor que o igual a 8.

De acuerdo con este primer objetivo, la presente invención entonces se refiere a: - composiciones, en la forma líquida o sólida, que contienen al menos un ingrediente activo de proteína en la forma libre, así como para líquidos, un sistema (un sistema amortiguador) capaz de amortiguarlos a un pH mayor que 4 y menor que o igual a 8 o, para sólidos, un sistema (un sistema amortiguador) que ejerce, cuando se colocan en un medio líquido, un efecto amortiguador entre un pH mayor que 4 y un pH menor que o igual a 8, para uso como un fármaco, para administración por la vía oral (a través del tracto gastrointestinal) de dicho al menos un ingrediente activo de proteína; - composiciones farmacéuticas, en la forma líquida o sólida, para la administración por la vía oral (a través del tracto gastrointestinal), que contienen al menos un ingrediente activo de proteína, que contiene dicho ingrediente activo de proteína, en la forma libre así como para líquidos, un sistema (un sistema amortiguador) capaz de amortiguarlos a un pH mayor que 4 y menor que o igual a 8 o, para sólidos, un sistema (un sistema amortiguador) que ejerce, cuando se colocan en un medio líquido, un efecto amortiguador entre un pH mayor que 4 y un pH menor que o igual a 8.

Dichas composiciones de la invención se obtienen mediante formulación (simple) de dicho al menos un ingrediente activo de proteína en la forma libre con un sistema (un sistema amortiguador) capaz de amortiguarlos, en la forma líquida, a un pH mayor que 4 y menor que o igual a 8 o, en la forma sólida, con un sistema (un sistema amortiguador) que ejerce, cuando dicha forma sólida se coloca en un medio líquido, un efecto amortiguador entre un pH mayor que 4 y un pH menor que o igual a 8.

En sus características, las composiciones líquidas o sólidas (monofásicas (una sola fase), en todos los casos) de la invención son composiciones orales que se combinan con al menos un ingrediente activo de proteína en la forma libre y un sistema amortiguador. Dicho sistema amortiguador permite, como se indicó anteriormente, la administración por la vía oral del ingrediente activo de proteína, en la forma libre. Es efectivo para proteger dicha forma libre en el tracto gastrointestinal. > Dentro de las composiciones de la invención, el ingrediente activo de proteína está por lo tanto presente "como es", no protegido per se, notablemente no protegido por una barrera física. Está presente como es o en una mezcla simple con los excipientes requeridos para su formulación. "Forma libre de dicho ingrediente activo" significa más notablemente a dicho ingrediente activo sin un sistema de protección físico, más o menos complejo, tal como un revestimiento, pared de matriz o cápsula (dicho ingrediente activo no está revestido, en matriz o encapsulado (notablemente en liposomas), etc).

El sistema amortiguador, dados los valores de pH establecidos, es capaz de amortiguar las composiciones de la invención en el medio ambiente gástrico y en el medio ambiente intestinal. Por supuesto es capaz de ejercer su efecto amortiguador durante toda la digestión: al menos por 2 horas, convenientemente hasta por 3 horas (en las condiciones ácidas del estómago y las condiciones básicas del intestino). Los expertos en la técnica están familiarizados con dichos sistemas amortiguadores. Como un ejemplo no restrictivo, a continuación se especifica la naturaleza de dichos sistemas.

Las composiciones de la invención combinan: - al menos un ingrediente activo de proteína en la forma libre (ver lo anterior), generalmente uno de dichos ingredientes activos (pero la intervención combinada de muchos ingredientes activos de este tipo (o de al menos un ingrediente activo de este tipo y al menos otro ingrediente activo), en una mezcla o por separado, no se excluye del alcance de la invención); y - un sistema (un sistema amortiguador) capaz de ejercer un efecto amortiguador en la escala de pH es establecida anteriormente.

La conducción de dicho efecto amortiguador en dicha escala de pH (4 < pH < 8) por supuesto es compatible con la estabilidad de dicho al menos un ingrediente activo de proteína (en cualquier caso con la estabilidad del ingrediente(s) activo presente).

Las composiciones de la invención son amortiguadas a un pH: 4 < pH < 8. Convenientemente son amortiguadas a un pH entre 4.5 y 7.5 (4.5 < pH < 7.5), de manera altamente conveniente son amortiguadas a un pH entre 5 y 7 (5 < pH < 7), de hecho a un pH mayor que 5 y menor que o igual a 7 (5 < pH < 7). En una variante particularmente preferida, son amortiguadas a un pH de 6.5 o cerca de 6.5 (6.5 + 0.2). Este valor es particularmente preferido en el contexto de una composición de la invención que contiene insulina.

Las composiciones de la invención contienen al menos un ingrediente activo de proteína al que pueden proteger de las enzimas digestivas. Ya se ha mencionado a la insulina como uno de dichos ingredientes activos sensibles a las enzimas digestivas. Esta invención se desarrolló específicamente con referencia a este ingrediente activo (ver los ejemplos y pruebas presentadas en lo siguiente). No obstante, los expertos en la técnica entenderán claramente que este campo de aplicación es indudablemente más amplio. El mecanismo de interés a priori (ese que los inventores proponen a posteriori) - la protección durante el paso en el estómago (al pH > 4 la pepsina ya no es (o prácticamente ya no es) activa) y la inhibición (más o menos consecuente) de las secreciones pancreáticas en tanto que en el ácido quimo ya no fluya en el duodeno - es adecuado para proteger todos los ingredientes activos de proteína de las enzimas digestivas.

Por lo tanto, las composiciones de la invención contienen, convenientemente, al menos un ingrediente activo de proteína (en la forma libre) seleccionado entre insulina, sus análogos y derivados de la misma (generalmente convenientemente contiene insulina o un análogo o derivado de la misma como un solo ingrediente activo de este tipo, o como un solo ingrediente activo). Los expertos en la técnica están familiarizados con los análogos de la insulina tales como, por ejemplo, insulina Lipro, insulina Aspart, insulina Glargine e insulina Detemir. Los expertos en la técnica también están familiarizados con los derivados de la insulina tales como esos que se describen en la solicitud FR 2,123,524.

Por lo tanto, las composiciones de la invención contienen, convenientemente, como ingrediente activo (en la forma libre): - insulina o un análogo o derivado de la misma, - somatotropina (hormona del crecimiento humano) o un derivados de la misma, - calcitonina, o - un análogo de LHRH (Hormona Liberadora de la Hormona Luteínizante) tal como triptorelina.

Se insiste en que las composiciones de la invención pueden contener muchos de estos ingredientes activos y que la lista anterior, lejos de estar completa, no es restrictiva en manera alguna.

Los sistemas amortiguadores adecuados para los propósitos de la invención son sistemas amortiguadores convencionales, convenientemente de alta capacidad. Los expertos en la técnica están familiarizados con dichos sistemas y son capaces de optimizar una combinación en el contexto de la invención: al menos un ingrediente activo de proteína (en la forma libre)/sistema amortiguador (por ejemplo: insulina/sistema amortiguador).

De una manera totalmente no restrictiva, puede establecerse que el sistema responsable para el efecto amortiguador dentro de las composiciones de la invención es convenientemente un amortiguador seleccionado entre amortiguadores de fosfato, acetato, maleato, ftalato, succinato, citrato, imidazol, tetrabutilamonio, 2-amino-2-hidroximetil-1 ,3-propanodiol (o trihidroximetilaminometano o Trometamol o Tham o Tris), tris-glicina, barbitol, tris-EDTA BSA, sulfato de cobre y anfóteros.

De manera más general, el sistema amortiguador de las composiciones de la invención puede seleccionarse entre la lista de sistemas amortiguadores dados en la European Pharmacopeia, edición actual (monografía 4.1.3).

Dicho sistema amortiguador es convenientemente un fosfato o amortiguador Tris.

Un amortiguador de fosfato sugerido contiene: de 2 a 3% en peso de fosfato diácido de sodio, y de 97 a 98% en peso de fosfato ácido de disodio, y convenientemente contiene: aproximadamente 2.8% en peso de fosfato diácido de sodio, y aproximadamente 97.2% en peso de fosfato ácido de disodio.

Las composiciones orales de la invención (que combinan convenientemente al menos un ingrediente activo de proteína, en la forma libre, y el sistema amortiguador seleccionado: 4 < pH < 8) puede existir de acuerdo con dos variantes.

De acuerdo con una primera variante, más convencional, dichas composiciones se formulan en una forma unitaria. Todos los ingredientes constitutivos, incluyendo el sistema amortiguador, se formulan conjuntamente. Dentro del alcance de esta primera variante, existen muchas posibilidades. Las composiciones de la invención pueden proporcionarse notablemente en formas líquidas (amortiguadas directamente a un pH adecuado) tales como soluciones, suspensiones y jarabes, o en las formas sólidas (que desarrollan el efecto amortiguador, al consumirse, en un líquido, generalmente agua, o después de su consumo, en el estómago) tales como tabletas (convencionales (para ser tragadas), para chupar, sublinguales, dispersables, orodispersables, efervescentes), cápsulas, polvos, polvos efervescentes, gránulos, gránulos efervescentes y liofilizados. Estas listas no están completas. Los expertos en la técnica saben cómo formular, en una u otra de las formas unitarias y citadas anteriormente, el ingrediente activo en cuestión con un sistema adecuado responsable para buscar el efecto amortiguador.

En la preparación de las formas farmacéuticas efervescentes, es aconsejable añadir ingredientes que proporcionen el carácter efervescente esperado. Estos tipos de ingredientes (reactivos (generalmente dos reactivos) que reaccionan mediante la liberación de gas) son familiares para los expertos en la técnica.

Dentro del alcance de esta primera variante, las composiciones de la invención se proporcionan convenientemente como preparaciones farmacéuticas sólidas, en particular tabletas dispersables o tabletas efervescentes.

De acuerdo con una segunda variante, las composiciones de la invención son composiciones con al menos dos componentes separados, notablemente composiciones que comprenden por separado: - un componente que contiene al menos un ingrediente activo de proteína en la forma libre; y - otro componente que contiene al menos un sistema que genera el efecto amortiguador deseado.

Estos dos componentes separados se van a administrar conjuntamente o casi conjuntamente, de tal manera, por supuesto, que se desarrolle el efecto amortiguador durante el paso del ingrediente activo en el tracto digestivo (antes que nada en el estómago).

Las composiciones de la invención (de acuerdo con la primera o segunda variantes anteriores) contienen dicho al menos un ingrediente activo de proteína en la forma libre (o dicho al menos un ingrediente activo de proteína en la forma libre y al menos otro ingrediente activo) y el amortiguador del sistema unido, generalmente en un excipiente farmacéuticamente aceptable (con, en caso de ser necesario, los ingredientes que los harán efervescentes), puede por supuesto contener otros ingredientes que están presentes en las composiciones farmacéuticas convencionales, tales como edulcorantes, saborizantes y/o auxiliares de procesamiento (lubricantes, etc.). Las composiciones líquidas pueden contener sólo dicho al menos un ingrediente activo de proteína (o dicho al menos un ingrediente activo de proteína en la forma libre y al menos otro ingrediente activo) y el amortiguador del sistema adecuado. Generalmente contienen, además de estos dos componentes, ingredientes de formulación usados convencionalmente en las formulaciones farmacéuticas (tales como los ingredientes listados anteriormente). Las composiciones sólidas contienen por lo general, además de dicho al menos un ingrediente activo de proteína (o además de dicho al menos un ingrediente activo de proteína en la forma libre y al menos otro ingrediente activo) y el sistema amortiguador, un excipiente sólido (de base, opcionalmente con ingredientes responsables de la efervescencia) con diversos aditivos (tales como los ingredientes listados anteriormente).

La preparación de las composiciones de la invención, en formas unitarias o no, como se describió anteriormente, constituye el segundo objetivo de la presente invención. Dicha preparación es una preparación de una composición farmacéutica que está amortiguada o que está combinada con un amortiguador. En sus características, comprende la formulación (siempre) de al menos un ingrediente activo de proteína en la forma libre con un sistema (un sistema amortiguador) capaz de amortiguar dicha composición en la forma líquida (notablemente en el medioambiente gástrico y en el medie-ambiente intestinal) a un pH mayor que 4 y menor que o igual a 8 o, en la forma sólida, con un sistema (con sistema amortiguador) que ejerce, cuando se coloca dicha forma sólida en un medio líquido, notablemente un medio acuoso (notablemente en el medioambiente gástrico y en el medioambiente intestinal), un efecto amortiguador entre un pH mayor que 4 y un pH menor que o igual a 8. El término "formulación" debe interpretarse en el sentido convencional del término (galénico) para la preparación de composiciones unitarias, y en el sentido amplio (formulación=empaque) para la preparación de composiciones con componentes separados.

Convencionalmente, pueden incluirse otros ingredientes en la preparación de las composiciones de la invención.

Los expertos en la técnica entenderán la importancia de la presente invención, la cual se confirma mediante los ejemplos y resultados de las pruebas que se presentan a continuación. El "efecto positivo doble" del amortiguador - gastroprotección e inhibición de las secreciones pancreáticas -es particularmente efectivo. Este efecto doble y su efectividad son genuinamente sorprendentes.

De acuerdo con otro de sus aspectos, la invención proporciona una nueva aplicación de los sistemas amortiguadores y por lo tanto se refiere al uso de un sistema amortiguador como se especificó anteriormente, notablemente seleccionado entre esos identificados anteriormente, para proteger al menos un ingrediente activo de proteína en la forma libre durante su paso a través del tracto gastrointestinal. En otras palabras, la invención proporciona un método novedoso para proteger, con respecto a las enzimas digestivas (durante el paso gas intestinal), a los ingredientes activos de proteína. Dicho método comprende esencialmente la formulación, ya sea o no en la forma unitaria, de dichos ingredientes activos en la forma libre, con un sistema amortiguador tal como el que se especificó anteriormente, seleccionado notablemente entre esos identificados anteriormente.

Finalmente, la invención puede observarse como un método de tratamiento terapéutico que comprende la administración mediante la vía oral de al menos un ingrediente activo de proteína y/o un método para la administración oral de al menos un ingrediente activo de proteina. En sus características, en el contexto de dicho método, dicho al menos un ingrediente activo se administra (formulado en una composición sólida o liquida, ya sea o no en la forma unitaria), en forma libre, con un sistema amortiguador como se especificó anteriormente, es decir, amortiguado a un pH como se especificó anteriormente, 4 < pH < 8 (en el caso de una forma líquida), o capaz de ser amortiguado a dicho pH cuando se coloca en un medio líquido (en el caso de una forma sólida). Los tratamientos conocidos de interés actual son esos de las enfermedades o trastornos que se precisan a continuación: diabetes (con referencia a la administración de insulina), inhibición de crecimiento (con referencia a la administración de somatropina), osteoporosis (con referencia a la administración de calcitonina), cáncer de próstata (con referencia a la administración de LHRH)...

La invención se ilustrará ahora mediante la especificación, en una base puramente ilustrativa, de la fórmula para dos tabletas de insulina amortiguada de la invención, y el gran interés de dicha invención se demostrará al presentar a continuación los resultados comparativos de pruebas fisicoquímicas conducidas in vitro y pruebas farmacológicas conducidas in vivo con insulina.

I FORMULAS Se prepararon dos tipos de tabletas de la invención, de acuerdo con un método conocido per se (método de formulación convencional), de los ingredientes indicados en las cantidades indicadas: - tabletas dispersables A; y - tabletas efervescentes B.

Tabletas A Insulina humana : 3.5 mg (100 U) Trometamol (TRIS) : 100 mg Fosfato de calcio (dicálc) : 250 mg Celulosa microcristalina : 250 mg Manitol : 250 mg Estearato de magnesio : 10 mg Sílice coloidal 1 mg Crospovidona : 50 mg Benzoato de sodio 30 mg Talco 10 mg Acido cítrico q.s. pH 6.5 Citrato monosódico Peso de la tableta: 1 gramo Tabletas B Insulina humana : 3.5 mg (100 U) Citrato monosódico anhidro : 1142.7 mg Bicarbonato de sodio anhidro : 2076 mg Benzoato de sodio : 152.60 mg Monofosfato de sodio : 120 mg Etanol 96% f :q.s. para granulación Agua desmineralizada Para una tableta de peso teórico: 3.5 g en solución pH 6.8.

II PRUEBAS IN VITRO Se condujeron pruebas in vitro para confirmar la función metabólica de la pepsina en un medio ácido, la función metabólica de la tripsina en un medio básico y la inactivación de una y la otra de estas enzimas digestivas en un medio amortiguado de acuerdo con la invención.

Durante estas diversas pruebas, se ensayó la insulina por cromatografía líquida.

Prueba 1 ' Solución de insulina humana (100 U) + HCI 0.1 N (50 ml) pH 1 + agitación a 37 °C por 1 h, 2h, 3h En un medio ácido, a pH 1 , sin pepsina, la insulina es estable por más de 3 horas a 37 °C.

Prueba 2' Solución de insulina humana (100 U) + HCI 0.1 N (50 mi) pH 1 + pepsina (160 mg) + agitación a 37 °C por 1h Tiempo Contenido de Insulina Tiempo 0 0 U 1h 0 U En la presencia de la enzima gástrica (pepsina), a pH 1 , la insulina se degrada inmediatamente.

Prueba 1 (invención) Solución de insulina humana (100 U) + HCI 0.1 N (50 ml) pH 1 + pepsina (160 mg) + amortiguador de fosfato pH 6.8 (50 mi) + agitación a 37 °C por 1 h, 2h, 3h En un medio amortiguado a pH 6.8, la pepsina ya no es activada y la insulina es estable por más de 3 horas a 37 °C.

Prueba 3' Solución de insulina humana (100 U) + HCI 0.1 N + amortiguador de fosfato pH 8.5 + agitación a 37 °C por 1h, 2h, 3h Tiempo Contenido de Insulina Tiempo 0 100 U 1 h 99.59 U 2h 100.24 U 3h 100.48 U Esta prueba verificó la efectividad del amortiguador y el hecho de que en la ausencia de enzima, la insulina es estable en un medio básico.

Pruebas 2a, 2b, 2c Solución de insulina humana (100 U) + amortiguador de fosfato pH 6 (prueba 2a), pH 6.5 (prueba 2b), pH 6.8 (prueba 2c) + tripsina 750 U + agitación a 37 °C por 1 h, 2h En un medio amortiguado al pH indicado, el efecto metabólico de la tripsina se atenúa en su mayor parte.

Prueba 4' Solución de insulina humana (100 U) + amortiguador de fosfato pH 8.5 + tripsina 750 U + agitación a 37 °C por 1 h, 2h En la presencia de la enzima intestinal (tripsina), a pH 8.5, la insulina se degradó fuertemente.

El análisis de estos resultados (a pH básico) muestra que a medida que el pH se incrementa hacia la alcalinidad, mayor efecto ejerce la tripsina metabólica.

El punto óptimo parece ser el pH 6.5 (cerca del pH neutral) donde después de dos horas, independientemente de la presencia de tripsina, se encontró un alto porcentaje de insulina: 72%. 8II PRUEBAS IN VIVO Se estudió la actividad hipoglucémica de dos tipos de tabletas efervescentes (con un sistema amortiguador de la invención: tabletas B (ver lo anterior) y sin un sistema amortiguador de la invención: tabletas efervescentes de control (tabletas B sin un amortiguador)) en ratas que se hicieron diabéticas (hiperglucémicas) mediante la administración de estreptozotocina.

La estreptozotocina, un antibiótico relacionado químicamente a las nitrosoureas, tiene propiedades diabetogénicas mediante la destrucción de las isletas de Langerhans del páncreas.

La prueba es muy familiar para los expertos en la técnica. Su principio se resume a continuación.

La administración en ratas Wistar macho (peso promedio de 200 g) por vía intraperitoneal de 70 mg/kg de estreptozotocina provoca en el animal después de 72 h una hiperglucemia grave combinada con polifagia, polidipsia y poliuria.

Los animales se dividieron en tres lotes de ocho.

Lote 1 : animales normales, no hiperglucémicos, recibieron por vía oral usando una sonda esofágica 30 unidades de insulina contenida en una tableta amortiguada a pH 6.8 (tableta efervescente B (ver lo anterior)), en un volumen de 10 ml/kg.

Lote 2: animales diabéticos, recibieron por vía oral usando una sonda esofágica 30 unidades de insulina contenida en una tableta no amortiguada (tableta efervescente B pero sin amortiguador), en un volumen de 10 ml/kg.

Lote 3: animales diabéticos, recibieron por vía oral usando una sonda esofágica 30 unidades insulina contenida en una tableta amortiguada a pH 6.8 (tableta efervescente B (ver lo anterior)), en un volumen de 10 ml/kg.

Se extrajeron muestras de sangre cada 15 minutos por 3 horas de la cola del animal y se evaluó la glucemia usando un medidor de glucosa Abbot.

Los resultados se presentan en los cuadros siguientes. Se expresan en gramos de glucosa por litro y también en miliequivalentes (cuadro 1), y como un porcentaje de disminución de la glucemia (cuadro 2).

CUADRO 1 Glucemia (q/l v meq/l) CUADRO 2 % de dflsmniniueiioiiTi de gluceinniBa Los resultados del Cuadro 2 se graficaron en una sola figura en el apéndice (porcentaje de disminución de glucemia como una función del tiempo (expresado en minutos)): - la curva -¦- muestra los resultados para el lote 1 , - la curva -?- muestra los resultados para el lote 2, - la curva - A- muestra los resultados para el lote 3.

El examen de los resultados muestra: - en los animales normales (no hiperglucémicos) (lote 1), la administración de la insulina amortiguada después de 45 minutos lleva a una ligera disminución en la glucemia con un máximo al minuto 75°, y luego la glucemia regresa a valores normales después del minuto 150°. Estos animales con el páncreas intacto, compensan al secretar glucagon, que es un hiperglucémico; - en los animales diabéticos (lote 2), la administración de insulina no amortiguada lleva a una disminución muy ligera, insignificante en la glucemia. A través del experimento, los animales mantuvieron una glucemia muy alta; - en los animales diabéticos (lote 3), la administración de insulina amortiguada después de 45 minutos llegó a una disminución altamente significativa de la glucemia con un máximo en el minuto 105°, y luego se observó un incremento progresivo en la glucemia. Todos los animales mejoraron en gran medida, aunque no regresaron a la glucemia normal debido a la gravedad de la diabetes.

Estos resultados muestran que el sistema amortiguador usado hace posible conservar la actividad hipoglucémica de la insulina administrada por la vía oral (lo cual es completamente consistente con los resultados obtenidos in vitro) y confirma la buena biodisponibilidad de dicha insulina.

Los resultados, tanto in vitro como in vivo, demuestra la efectividad del sistema amortiguador al conservar la actividad de la insulina: - In vitro - en un medio ácido, no amortiguado, la insulina se metaboliza mediante la pepsina (prueba 2'). En un medio amortiguado a pH 6.8, la pepsina no se activa más como resultado se encuentra el 100% de la insulina después de 3 horas (prueba 1), - en un medio básico, la insulina se metaboliza mediante la tripsina (prueba 4').

En un medio amortiguado a pH 6, 6.5 y 6.8, se inhibe la actividad de dicha tripsina, más o menos disminuida; - In vivo - la preparación no amortiguada prácticamente no existe actividad. En contraste, la preparación amortiguada exige una actividad hipoglucémica fuerte.

En todas las pruebas, tanto in vitro como in vivo, se usó insulina humana. Es evidente que los resultados obtenidos aplican también a los análogos de la insulina.

Considerando estos resultados, es muy obvia la importancia de la presente invención. Esta importancia ha sido confirmada por pruebas preliminares en hombres.

Claims (21)

NOVEDAD DE LA INVENCION REIVINDICACIONES

1.- Una composición, en la forma líquida o sólida, que contiene: al menos un ingrediente activo de proteína en la forma libre, así como, para la forma líquida, un sistema capaz de amortiguarla a un pH mayor que 4 y menor que o igual a 8 o, para un sólido, un sistema que ejerce, cuando se coloca en un medio líquido, un efecto amortiguador entre un pH mayor que 4 y menor que o igual a 8, para uso como un fármaco, para la administración por la vía oral de dicho al menos un ingrediente activo de proteína.

2.- Una composición farmacéutica, en la forma líquida o sólida, para administración por la vía oral, que contiene al menos un ingrediente activo de proteína, caracterizada porque contiene dicho al menos un ingrediente activo de proteína en la forma libre, así como, para la forma líquida, un sistema capaz de amortiguarla a un pH mayor que 4 y menor que o igual a 8 o, para un sólido, un sistema que ejerce, cuando se coloca en un medio líquido, un efecto amortiguador entre un pH mayor que 4 y menor que o igual a 8.

3.- La composición de conformidad con la reivindicación 1 o 2, caracterizada además porque se obtiene mediante la formulación de dicho al menos un ingrediente activo de proteína en la forma libre con un sistema capaz de amortiguarlo, en la forma líquida, a un pH mayor que 4 y menor que o igual a 8 o, en la forma sólida, con un sistema que ejerce, cuando dicha forma sólida se coloca en un medio líquido, un efecto amortiguador entre un pH mayor que 4 y menor que o igual a 8.

4. - La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizada además porque el pH del amortiguador está entre 4.5 y 7.5, muy convenientemente entre 5 y 7.

5. - La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada además porque dicho al menos un ingrediente activo de proteína se selecciona entre: - insulina y análogos y derivados de la misma, - somatotropina y derivados de la misma, - calcitonina, y - análogos de LHRH.

6. - La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizada además porque dicho al menos un ingrediente activo de proteína se selecciona entre insulina y análogos y derivados de la misma.

7. - La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizada además porque dicho sistema, responsable del efecto amortiguador, es un amortiguador seleccionado entre amortiguadores de fosfato, acetato, maleato, ftalato, succinato, citrato, imidazol, tetrabutilamonio, trihidroximetilaminoetano, tris-glicina, barbitol, tris-EDTA BSA, sulfato de cobre y anfóteros.

8. - La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizada además porque se formula en una forma unitaria.

9. - La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizada además porque se encuentra, como un líquido, en la forma de una solución, suspensión o jarabe o, como un sólido, en la forma de tabletas, tabletas notablemente dispersables, orodispersables o efervescentes, cápsulas, polvo, polvo efervescente, gránulos, gránulos efervescentes, o un liofilizado.

10.- La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, caracterizada además porque está en la forma de preparaciones farmacéuticas sólidas, tabletas notablemente dispersables o tabletas efervescentes.

11. - La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizada además porque dicho sistema responsable del efecto amortiguador se formula por separado de dicho al menos un ingrediente activo de proteína.

12. - Un método para preparar una composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 , caracterizado porque comprende la formulación de dicho al menos un ingrediente activo de proteína en la forma libre con un sistema capaz de amortiguar dicha composición, en la forma líquida, a un pH mayor que 4 y menor que o igual a 8, o en la forma sólida, con un sistema que ejerce, cuando dicha forma sólida se coloca en un medio líquido, un efecto amortiguador entre un pH mayor que 4 y menor que o igual a 8.

13. - Una composición farmacéutica, en la forma líquida o sólida, caracterizada porque contiene: - al menos un ingrediente activo de proteína seleccionado de insulina, análogos de la insulina y derivados de la insulina, en la forma libre, y - para un líquido, un sistema capaz de amortiguarlo a un pH entre 5 y 7 o, para un sólido, un sistema amortiguador que ejerce, cuando se coloca en un medio líquido, un efecto amortiguador a un pH entre 5 y 7.

14. - La composición de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada además porque dicho sistema, responsable del efecto amortiguador, es un amortiguador seleccionado entre amortiguadores de fosfato, acetato, maleato, ftalato, succinato, citrato, imidazol, tetrabutilamonio, trihidroximetilaminoetano, tris-glicina, barbitol, tris-EDTA BSA, sulfato de cobre y anfóteros.

15. - La composición de conformidad con la reivindicación 13 o 14, caracterizada además porque se formula en una forma unitaria.

16. - La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 13 a 15, caracterizada además porque se encuentra, como un líquido, en la forma de una solución, suspensión o jarabe o, como un sólido, en la forma de tabletas, tabletas notablemente dispersables, orodispersables o efervescentes, cápsulas, polvo, polvo efervescente, gránulos, gránulos efervescentes, o un liofilizado.

17. - La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 13 a 16, caracterizada además porque está en la forma de preparaciones farmacéuticas sólidas, tabletas notablemente dispersables o tabletas efervescentes.

18. - La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 13 o 14, caracterizada además porque dicho sistema responsable del efecto amortiguador se formula por separado de dicho al menos un ingrediente activo de proteína.

19. - La composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 13 a 18, para uso en el tratamiento de diabetes por la vía oral.

: ¦-¦ ·-¦· 20.- El uso de un sistema amortiguador para la fabricación de una composición farmacéutica para el tratamiento de diabetes por la vía oral; dicha composición farmacéutica, en la forma líquida o sólida, contiene al menos un ingrediente activo de proteína seleccionado de insulina, análogos de la insulina, o derivados de la insulina, en la forma libre conjuntamente con dicho sistema amortiguador; dicho sistema amortiguador es capaz de amortiguar dicha composición farmacéutica líquida, a un pH entre 5 y 7 o es capaz de ejercer, cuando dicha composición farmacéutica sólida se coloca en un medio líquido, un efecto amortiguador a un pH entre 5 y 7.

21.- El uso de un sistema amortiguador para la fabricación de una composición farmacéutica para el tratamiento de una enfermedad por la vía oral; dicha composición farmacéutica, en la forma líquida o sólida, contiene al menos un ingrediente de proteína activa en la forma libre conjuntamente con dicho sistema amortiguador; dicho sistema amortiguador es capaz de amortiguar dicha composición farmacéutica líquida a un pH mayor que 4 y menor que o igual a 8 o es capaz de ejercer, cuando dicha composición farmacéutica sólida se coloca en un medio líquido, un efecto amortiguador entre un pH mayor que 4 y menor que o igual a 8.