WO2022202263A1

WO2022202263A1 - イムノクロマトグラフ検査装置

Info

Publication number: WO2022202263A1
Application number: PCT/JP2022/009823
Authority: WO
Inventors: 康武田中; 裕康石井
Original assignee: 富士フイルム株式会社
Priority date: 2021-03-24
Filing date: 2022-03-07
Publication date: 2022-09-29
Also published as: EP4317985A1; CN117043606A; EP4317985A4; US20230386173A1; JPWO2022202263A1

Abstract

イムノクロマトグラフ検査装置は、検体が点着される点着領域と、検体が陽性か陰性かに応じて発色状態が変化する検査領域とを有する担体を備え、かつ、担体に試薬が供給されるカートリッジが、着脱可能に装填される装填部と、検査領域の発色状態を検知する第１検知部と、試薬の供給に起因して検査領域に生じる泡の発生状態を検知する第２検知部と、第１検知部によって検知された発色状態に基づいて、発色状態の変化の有無を判別するプロセッサであって、第２検知部によって検知された泡の発生状態に基づいて泡が無いと判別した場合に、発色状態の変化の有無を判別するプロセッサと、を備える。

Description

イムノクロマトグラフ検査装置

　本開示は、イムノクロマトグラフ検査装置に関する。

　免疫測定方法の中でもイムノクロマトグラフ法は、操作が簡便であり短時間で検査定可能であることから、一般に広く利用されている。

　国際公開第２０１６／１１４１２２号及び国際公開第２０１７／１０４１４３号にはイムノクロマトグラフ法を用いたイムノクロマトグラフキットが開示されている。イムノクロマトグラフキットは、検体が供給されるイムノクロマトグラフ担体を備える。イムノクロマトグラフ担体は、被検物質である抗原に特異的に結合する抗体を固定化した検査領域を備える。抗原と特異的に結合する標識抗体を、抗原が含まれている検体と共にイムノクロマトグラフ担体上に展開すると、抗原は検査領域に固定化された抗体と結合し、その抗原を介して標識物質が捕捉される。この検査領域に捕捉された標識物質より検査領域が発色した場合は、陽性と判定される。検査領域に捕捉される標識物質が微量であった場合、発色が微弱であり、陰性と判定される場合がある。そのため、国際公開第２０１６／１１４１２２号及び国際公開第２０１７／１０４１４３号には、標識物質が発する標識信号を増幅させる増幅技術が開示されている。開示されている増幅技術は、標識物質として金コロイド粒子が用いられ、増幅のための試薬として銀イオンおよび銀イオン還元剤が用いられる銀増幅の技術である。銀増幅では、金コロイド粒子を触媒として相対的に粒子径の大きな銀粒子を生成する増幅反応を生じさせる。この増幅反応により、金コロイド粒子が発する標識信号が増幅される。

　国際公開第２０１６／１１４１２２号及び国際公開第２０１７／１０４１４３号のイムノクロマトグラフキットは、銀イオン還元剤を含む第１増幅液（第１試薬に相当）を保持する第１増幅液ポッドと、銀イオンを含む第２増幅液（第２試薬に相当）を保持する第２増幅液を備えている。そして、イムノクロマトグラフキットには、第１増幅液ポッドに対して押圧力を加えるための機構、第２増幅液ポッドに対して押圧力を加えるための機構を備えている。それぞれの機構に押圧力を加えることで、イムノクロマトグラフ担体に第１増幅液及び第２増幅液を供給し、増幅反応を生じさせることが可能である。

　特表２００８－２７５４７３号公報は、複数のウェルを備えたマイクロウェルを用い、多数の検体に対する分析処理を並行して行う分析装置に関する。特表２００８－２７５４７３号公報の分析装置は、マイクロウェル中における泡あるいは異物の混入を判定する泡異物判定手段を備えている。各ウェル中の検体が陽性か陰性かの検査を行うに当たり、ウェル中に泡が有ったり、異物の混入が有ったりすると、誤判定が生じる可能性がある。そのため、特表２００８－２７５４７３号公報では、泡異物判定手段によって、泡あるいは異物の混入を判定し、泡異物判定手段による判定結果をもとに検体が陽性であるか陰性であるかを判定する。

　国際公開第２０１６／１１４１２２号及び国際公開第２０１７／１０４１４３号に記載のイムノクロマトグラフキットのように、第１増幅液ポッドと第２増幅液ポッドを備えたカートリッジを用いる検査装置が知られている。検査装置は、検査領域の発光状態を光学的に検知するセンサと、検知結果を表示する表示部とを備えている。検査装置を用いることで、ユーザは検体を点着したカートリッジを装填する作業を行うだけで、検体の陽性又は陰性の判定を機械的に行うことが可能である。

　国際公開第２０１６／１１４１２２号及び国際公開第２０１７／１０４１４３号に開示されているイムノクロマトグラフキットにおいて、担体に第２増幅液を展開させる際に、検査領域に泡が発生する場合があることが明らかになってきた。検査領域に泡が有る状態で、検査領域の判定を行うと、判定結果に誤判定が生じる恐れがある。

　特表２００８－２７５４７３号公報の分析装置では、泡が判定領域の一定以上の領域を占めると判断した場合には、泡によって、検体が陽性であるか陰性であるかを判定不能であるとして、オペレータによる目視処理または再検査対象とする。このように、泡がある状態で検査を行う場合、分析装置において、検体の陽性か陰性かの判定が不能となる場合があった。分析装置においては、誤判定の発生を抑制しつつ、判定不能で再検査対象となる検体の数を抑制することが望まれる。

　本開示は、上記事情に鑑みてなされたものであって、従来と比べて、誤判定の発生を抑制することができるイムノクロマトグラフ検査装置を提供することを目的とする。

　本開示のイムノクロマトグラフ検査装置は、検体が点着される点着領域と、検体が陽性か陰性かに応じて発色状態が変化する検査領域とを有する担体を備え、かつ、担体に試薬が供給されるカートリッジが、着脱可能に装填される装填部と、
　検査領域の発色状態を検知する第１検知部と、
　試薬の供給に起因して検査領域に生じる泡の発生状態を検知する第２検知部と、
　第１検知部によって検知された発色状態に基づいて、発色状態の変化の有無を判別するプロセッサであって、第２検知部によって検知された泡の発生状態に基づいて泡が無いと判別した場合に、発色状態の変化の有無を判別するプロセッサと、を備える。

　本開示のイムノクロマトグラフ検査装置において、第２検知部は、検査領域と検査領域の周辺領域とを含む観察領域を撮像することにより、その観察領域を含む観察画像を出力するイメージセンサであることが好ましい。

　本開示のイムノクロマトグラフ検査装置において、プロセッサは、観察領域内の注目領域の画像の画素値の標準偏差を求め、標準偏差が予め設定された閾値以下である場合、泡が無いと判別してもよい。

　本開示のイムノクロマトグラフ検査装置において、プロセッサは、泡無し状態の参照画像と、観察領域内の注目領域の画像との画素値の差分又は比を導出し、差分又は比が予め設定された閾値以下である場合に、泡が無いと判別してもよい。

　本開示のイムノクロマトグラフ検査装置において、プロセッサは、泡が有ると判別した場合は、予め設定された第１設定時間経過後に、再度、泡の有無を判別することが好ましい。

　本開示のイムノクロマトグラフ検査装置において、プロセッサは、カートリッジが装填された後の予め設定された時点から予め設定された第２設定時間が経過した後においても、泡が有る、と判別した場合は、エラーを報知することが好ましい。

　本開示のイムノクロマトグラフ検査装置において、プロセッサは、第２検知部から時間差のある２枚以上の観察画像を取得し、２枚以上の観察画像における観察領域内の注目領域の画像の画素値の差分又は比を導出し、差分又は比が予め設定された閾値以下となった場合に、泡が無いと判別してもよい。

　本開示のイムノクロマトグラフ検査装置において、第１検知部は、検査領域とその周辺領域を含む観察領域を撮像する撮像部であり、第１検知部と第２検知部は兼用されることが好ましい。

　本開示のイムノクロマトグラフ検査装置において、カートリッジは、担体を覆うカバー部材を備え、カバー部材内において、検査領域における担体の表面とカバー部材との間に試薬が供給される０．０１～１ｍｍの隙間を有しており、試薬は隙間を流路として検査領域に展開されることが好ましい。

　本開示のイムノクロマトグラフ検査装置において、カートリッジは、担体に供給される第１試薬を保持する第１試薬保持部と、第１試薬が担体に供給された後に担体に供給される第２試薬を保持する第２試薬保持部とを備え、泡の発生原因である試薬は第２試薬であり、プロセッサは、第２試薬が担体に供給された後に泡の有無を判別することが好ましい。

　本開示のイムノクロマトグラフ検査装置によれば、誤判定の発生を抑制することができる。

イムノクロマトグラフ検査装置の外観を示す斜視図である。カートリッジの斜視図である。カートリッジの分解斜視図である。カートリッジ内における、検査用ストリップ、多機能部材、第１試薬保持部及び第２試薬保持部の位置関係を示す図である。イムノクロマトグラフ法の説明図である。カートリッジが装填された状態の検査装置の一部破断側面図である。カートリッジが装填され、第２試薬供給機構が作動した状態の検査装置の一部破断側面図である。撮像領域の画像を模式的に示す図であり、図８Ａは泡有りの場合、図８Ｂは泡無の場合を示す図である。検査フローを示す図である。検査装置内における検査フローを示す図である。泡の有無を判別する工程の第１フローを示す図である。泡の有無を判別する工程の第２フローを示す図である。検査装置内における検査フローの変形例を示す図である。泡が無いことを確認する工程のフローを示す図である。

　本開示のイムノクロマトグラフ検査装置の実施形態を、図面を参照して説明する。図１は、一実施形態のイムノクロマトグラフ検査装置１１０（以下において、単に検査装置１１０という）の外観を示す斜視図である。図２は、検査装置１１０に装着されるカートリッジ１００の外観図であり、図３は、カートリッジ１００の分解斜視図である。図４は、カートリッジ１００内の主要な収容部品の位置関係を示す図である。

　カートリッジ１００は、検査の対象である検体毎に１つずつ用いられる１回使用型である。カートリッジ１００内には、図３に示すように、イムノクロマトグラフ担体２（以下において、担体２という。）を含む検査用ストリップ１が配置されている。担体２には検査領域Ｌ１が設けられており、検体が被検物質を含むか否か、すなわち検体が陽性か陰性かに応じて、発色状態が変化する。

　検体としては、被検物質を含む可能性のある試料であればよく、検体は特に限定されるものではない。検体は、例えば、生物学的試料、特には動物（特にヒト）の血液、血清、血漿、髄液、涙液、汗、尿、膿、鼻汁、鼻腔拭い液、咽頭拭液、鼻腔吸引液、又は喀痰等の体液、若しくは排泄物、臓器、組織、粘膜及び皮膚又はそれらを含むスワブ、または動植物それ自体若しくはそれらの乾燥体を含む液体試料である。被検物質としては、抗原、抗体、たんぱく質及び低分子化合物等が挙げられる。

　本例の検査装置１１０には、検体が点着された状態のカートリッジ１００が装填される。そして、検査装置１１０は、装填されたカートリッジ１００の検査領域Ｌ１の発色状態を検知して、検体が陽性か陰性かの判定結果を提示する。なお、以下において、検体が陽性か陰性かの判定を主判定という。複数の検体を検査する場合は、検体毎のカートリッジ１００が検査装置１１０に１つずつ装填される。

　なお、以下において、カートリッジ１００は、検査装置１１０に装填されることを前提に説明するが、本例のカートリッジ１００は、検査装置１１０を用いずに、検体が陽性か陰性かをユーザが目視によって確認することが可能な構成を有している。このようなカートリッジ１００は、イムノクロマトグラフ検査用具、あるいはイムノクロマトグラフ検査キットなどとも呼ばれる。

　図１に示すように、検査装置１１０は、筐体１１１を備えており、筐体１１１は、カートリッジ１００が着脱可能に装填されるカートリッジ装填部１１２を備える。一例として、筐体１１１の前面には、カートリッジ１００を筐体１１１内に挿入するための開口と、この開口を開閉する開閉蓋１１２ａとが設けられている。カートリッジ１００を装填する際に開閉蓋１１２ａが開かれて、カートリッジ１００が筐体１１１内に挿入され、カートリッジ装填部１１２に装填されると開閉蓋１１２ａが閉じられる。開閉蓋１１２ａが閉じられた状態で検査が行われる。

　また、筐体１１１の前面には、電源スイッチ１１３が設けられており、さらに、筐体１１１の上面にはモニタ１１９が設けられている。モニタ１１９には、主判定の結果及びエラーメッセージなどが表示される。モニタ１１９は一例としてタッチパネルモニタであって、各種操作画面が表示される。ユーザは、操作画面を通じて、処理の開始指示の入力、及び検査手順の選択等の操作指示を入力することが可能となっている。

　図２及び図３に示すように、カートリッジ１００は、一例として、ケース部材２０とカバー部材１０とで構成されるハウジング９を備えている。ハウジング９は例えば樹脂材料で形成される。ケース部材２０は、上部に開口が形成されており、内部に、検査用ストリップ１の他、第１試薬保持部４０及び第２試薬保持部４５などを収容する。カバー部材１０は、ケース部材２０の開口部分に取り付けられることにより、ケース部材２０の開口を覆う。ハウジング９は、検査用ストリップ１の細長形状に合わせて、全体として細長形状をしている。

　本例においてカバー部材１０によって構成されるハウジング９の上部において、滴下口１６、観察窓１８、第１被押圧部１１及び第２被押圧部１２が設けられている。これらの各部は、一例としてカバー部材１０と一体成形されている。滴下口１６は、ハウジング９の内部に検体を滴下するための開口である。滴下口１６の縁には、上部に向けてボスが立設されている。観察窓１８は、検査領域Ｌ１を外部から観察するための窓であり、一例として透明部材で形成されている。本例においては、観察窓１８のサイズは、検査領域Ｌ１に加えて、後述するコントロール領域Ｌ２及び発色領域Ｌ３も観察可能なサイズである。

　第１被押圧部１１は、第１試薬保持部４０内の第１試薬４１（図４参照）を担体２に供給するために操作される操作部ある。第２被押圧部１２は、第２試薬保持部４５内の第２試薬４６（図４参照）を担体２に供給するために操作される操作部である。第１試薬４１及び第２試薬４６は、後述するように、検体５０が陽性である場合において、検査領域Ｌ１の発色を増幅するための増幅薬である。

　第１被押圧部１１に対して外力として、外部から押圧力が加わると、第１被押圧部１１は変形する。一例として、第１被押圧部１１は、四角錐形状をしており、四角錐の頂点を含む領域に対して上方から押圧力が加わると、四角錐の頂点がハウジング９の内部に沈み込むように変形する。第１被押圧部１１がこのように変形すると、ハウジング９の内部の第１試薬保持部４０に対して押圧力が加わる。第１試薬保持部４０には、第１被押圧部１１を通じて加わる押圧力によって変形等が生じる。この変形等によって、第１試薬保持部４０が保持している第１試薬４１が検査用ストリップ１に供給される。

　また、第１被押圧部１１は、押圧によって変形された後、変形後の状態が維持されるようになっていることが好ましい。理由は、次のとおりである。後述するように、本例の検査装置１１０は、第１被押圧部１１がユーザによって予め押圧された状態のカートリッジ１００を装填可能である。検査装置１１０に装填する前に、第１被押圧部１１がユーザによって押圧された場合は、ユーザが手を放した後も第１被押圧部１１の変形が維持されていた方が、第１試薬４１の供給を継続させやすいためである。

　同様に、第２被押圧部１２に対して外力として、外部から押圧力が加わると、第２被押圧部１２は変形する。本例の第２被押圧部１２も、第１被押圧部１１と同様に、四角錐形状をしており、四角錐の頂点を含む領域に対して上方から押圧力が加わると、四角錐の頂点がハウジング９の内部に沈み込むように変形する。第２被押圧部１２がこのように変形すると、ハウジング９の内部の第２試薬保持部４５に対して押圧力が加わる。第２試薬保持部４５には、第２被押圧部１２を通じて加わる押圧力によって変形等が生じる。この変形等によって、第２試薬保持部４５が保持している第２試薬４６が検査用ストリップ１に供給される。本例の第２被押圧部１２には、第２試薬保持部４５と当接する当接部１２ｂが設けられている（図６及び図７参照）。

　本例の検査装置１１０は、後述するように、複数の検査フローを選択することが可能である。検査装置１１０で選択可能な検査フローのうち、検査装置１１０で第２試薬４６を供給する検査フローを選択する場合、第２被押圧部１２は検査装置１１０の内部機構によって押圧される。そのため、第２被押圧部１２は、内部機構によって押圧可能であればよい。第１試薬４１及び第２試薬４６の供給後に、カートリッジ１００を検査装置１１０に装填する検査フローを選択する場合、カートリッジ１００が使用される場合は、第２被押圧部１２もユーザによって押圧可能な態様であることが好ましい。

　図３及び図４に示すように、ケース部材２０には、長手方向に沿って、担体２を含む検査用ストリップ１が収容される。ケース部材２０には、長手方向の一方の端部側（図４に示す上流側）に、第１試薬保持部４０が配置される。ケース部材２０において、第１試薬保持部４０が配置される部分には、第１試薬保持部４０の形状に合わせて凹部形状の第１収容部２４が形成されている。検査用ストリップ１の一方の端部は、第１収容部２４に収容された状態の第１試薬保持部４０の上方に配置される。

　第１試薬保持部４０は、第１試薬４１を保持する。第１試薬保持部４０は、例えば、樹脂材料で形成され、一面に開口を有する容器４２と、容器４２の開口を覆い、かつ破断可能なシート部材４３とによって構成される。容器４２には、第１試薬４１が充填され、その容器４２の開口はシート部材４３によって封止される。第１試薬保持部４０は、第１収容部２４内において、シート部材４３を上向きにした姿勢で配置される。第１被押圧部１１から加わる押圧力は、検査用ストリップ１の端部を介して第１試薬保持部４０のシート部材４３に伝わり、シート部材４３を破断させる（図６及び図７参照）。シート部材４３が破断されることにより、検査用ストリップ１に第１試薬４１が供給される。なお、本例の第１被押圧部１１には、シート部材４３と当接する突条部１１ｂが設けられている（図６及び図７参照）。突条部１１ｂは、シート部材４３を破断しやすいように、例えば、検査用ストリップ１の幅方向に長手方向が延びる細長形状で、かつ先端がシート部材４３に向けて尖った形状をしている。

　また、カートリッジ１００は、第２試薬保持部４５を収容する機能を有する多機能部材３０を備えている。多機能部材３０は、ケース部材２０の他方の端部側（図４に示す下流側）で、かつ、検査用ストリップ１の上方に配置されている。多機能部材３０は、第２収容部３２と流路形成部３５とが一体に形成された部材である。第２収容部３２は、第２試薬保持部４５を収容する部位である。第２収容部３２は、上面が開口した箱型形状をしている。図４に示すように、第２収容部３２の底部には、第２試薬保持部４５の後述するシート部材４８を破断するための突起部３４と、第２試薬保持部４５から流出する第２試薬４６を担体２に向けて流す開口３３とが形成されている。

　流路形成部３５は、第２収容部３２から上流側に向かって連接して設けられている。流路形成部３５は、平板状をしており、担体２の長手方向において検査領域Ｌ１等と対向する位置に配置されており、かつ、担体２との間に間隔を空けて配置される。そして、流路形成部３５は、担体２との間に、第２収容部３２から流出する第２試薬４６を検査領域Ｌ１などに向けて流す流路を形成する。このように、流路形成部３５は、観察窓１８と、担体２の検査領域Ｌ１等との間に配置される。そのため、流路形成部３５は、透明部材で形成されており、観察窓１８を通じて検査領域Ｌ１等が観察できるようになっている。

　第２試薬保持部４５は、第２試薬４６を保持する。第２試薬保持部４５は、例えば、樹脂材料で形成され、一面に開口を有する容器４７と、容器４７の開口を覆い、かつ破断可能なシート部材４８とによって構成される。容器４７には、第２試薬４６が充填され、その容器４７の開口はシート部材４８によって封止される。第２試薬保持部４５は、第２収容部３２内において、シート部材４８を下向きにした姿勢で配置される。これにより、第２収容部３２内においてシート部材４８が突起部３４と対向する。

　第２被押圧部１２から第２試薬保持部４５に加わる押圧力は、第２試薬保持部４５を下方に押し下げる方向に作用し、これによりシート部材４８が突起部３４に押し当てられる。シート部材４８が突起部３４に押し付けられることにより、シート部材４８が破断される（図６及び図７参照）。シート部材４８が破断されることにより、第２収容部３２の底部の開口３３及び流路形成部３５によって形成される流路を通じて担体２に第２試薬４６が供給される。

　図４に示されているように、多機能部材３０の流路形成部３５の裏面３６と、検査用ストリップ１の担体２との間には、第２試薬４６の流路に相当する隙間（クリアランス）Ｄが形成される。隙間Ｄは例えば０．０１ｍｍ～１ｍｍの範囲である。第２試薬４６は、第２収容部３２の底部の開口３３から担体２に向けて流出し、流出した第２試薬４６は、隙間Ｄによって形成される流路を流れて少なくとも検査領域Ｌ１上まで到達する。検査領域Ｌ１に到達した第２試薬４６は、流路から検査領域Ｌ１に浸潤する。すなわち、ハウジング９内において、検査領域Ｌ１における担体２の表面と流路形成部３５との間に第２試薬４６が供給される０．０１～１ｍｍの隙間Ｄを有しており、第２試薬４６は隙間Ｄを流路として検査領域Ｌ１に展開される。

　検査用ストリップ１において下流側の端部には、後述する吸収パッド６が配置されている。ケース部材２０には、吸収パッド６と対向する位置に、吸収パッド６を含む検査用ストリップ１の端部を支持する支持部２２が形成されている。吸収パッド６の上方には多機能部材３０の第２収容部３２が配置される。支持部２２は、吸収パッド６を介して多機能部材３０も支持する。また、ケース部材２０には、検査用ストリップ１の中央部を支持する支持部２１が形成されている。

　検査用ストリップ１は、担体２と、送液用パッド４と、吸収パッド６とを備える。そして、担体２は、バック粘着シート７上に固定されて支持されている。

　担体２は、検体を展開させるための多孔質の不溶性担体であり、検査領域Ｌ１、コントロール領域Ｌ２及び発色領域Ｌ３を備える。また、担体２は標識保持パッド３を備える。標識保持パッド３は、検体が点着される点着領域を構成する。点着領域を基準に検査領域Ｌ１に向かう方向を担体２の下流側としたときに、発色領域Ｌ３は、検査領域Ｌ１よりも下流側に配置されている。本例において、検査領域Ｌ１、コントロール領域Ｌ２及び発色領域Ｌ３はそれぞれ担体２における検体の展開方向に垂直な方向に延びるライン状の領域である。

　検査領域Ｌ１、コントロール領域Ｌ２及び発色領域Ｌ３をラインとして発現している状態を示しているが、これらは常に発現しているわけではない。詳細は後述するが、検体５０（図５参照）、第１試薬４１（図４参照）及び第２試薬４６（図４参照）を展開する前においては、検査領域Ｌ１及びコントロール領域Ｌ２の色は担体２の色（例えば白）とほぼ同色であるため、この段階では、検査領域Ｌ１及びコントロール領域Ｌ２を明確に視認することはできない。検査領域Ｌ１は、検体５０が展開され、かつ、展開された検体５０が陽性の場合に発色濃度が上がることにより、ラインとして発現する。これにより検査領域Ｌ１は視認可能となる。検査領域Ｌ１の発色は、後述する銀増幅によって増幅されるため、検査領域Ｌ１は黒色に発色する。

　コントロール領域Ｌ２も、検体５０が展開されると発色濃度が上がることにより、ラインとして発現する。これによりコントロール領域Ｌ２は視認可能となる。コントロール領域Ｌ２の発色も、銀増幅されるため、コントロール領域Ｌ２も黒色に発色する。

　一方、発色領域Ｌ３だけは、第１試薬４１が展開される前の段階でも、黒味がかった暗い緑色（以下、暗緑色という）のラインとして発現しており、視認可能である。しかし、発色領域Ｌ３は、第１試薬４１が展開されると、暗緑色がオレンジ色に変色することにより、オレンジ色のラインとして発現する。

　担体２としては、例えば、ニトロセルロースメンブレンなどの多孔質材料を使用することができる。また、担体２が固定されるバック粘着シート７は、担体２が貼り付けられる面が粘着面であるシート状基材である。

　図５に示すように、標識保持パッド３には標識物質５３が固定されている。標識物質５３は、検体５０に含まれる被検物質５１に特異的に結合する第１結合物質５２で修飾されている。この標識保持パッド３は、担体２上において、カバー部材１０の滴下口１６に対向する位置に固定されている。従って、検体５０は滴下口１６から標識保持パッド３上に滴下される。このため、標識保持パッド３は検体５０が点着される点着領域に相当する。

　標識保持パッド３は、担体２の長手方向のほぼ中央位置に固定されている。標識物質５３としては、例えば、直径５０ｎｍの金コロイド粒子（ＥＭ．ＧＣ５０、ＢＢＩ社製）を用いることが可能である。なお、標識物質５３は、金コロイドに限らず、通常のクロマトグラフ法に用いることができる金属硫化物、免疫凝集反応に用いられる着色粒子などを使用することができ、特には、金属コロイドが好ましい。金属コロイドとしては、金コロイド、銀コロイド、白金コロイド、鉄コロイド、水酸化アルミニウムコロイド、およびこれらの複合コロイドなどが挙げられ、特に、適当な粒径において、金コロイドは赤色、銀コロイドは黄色を示す点で好ましく、その中でも金コロイドが最も好ましい。

　図５に示すように、検査領域Ｌ１は、被検物質５１と特異的に結合する第２結合物質５６を含み、被検物質５１を捕捉する。検査領域Ｌ１において、第２結合物質５６が被検物質５１と結合することにより被検物質５１が捕捉されると、被検物質５１に結合された第１結合物質５２及び標識物質５３が捕捉される。検体５０に被検物質５１が含まれている場合は、検査領域Ｌ１において被検物質５１及び標識物質５３が捕捉されることにより、検査領域Ｌ１の発色濃度が予め設定された基準以上に上昇する。検査領域Ｌ１は、被検物質５１を介して捕捉された標識物質５３からの標識信号により被検物質５１の有無を確認するための領域である。

　コントロール領域Ｌ２は、第１結合物質５２に特異的に結合する第３結合物質５８を含み、第１結合物質５２を介して標識物質５３を捕捉する。標識保持パッド３上に検体５０が点着された場合、第１結合物質５２で修飾された標識物質５３のうち、被検物質５１と結合されていない標識物質５３も検体５０とともに、検査領域Ｌ１に向けて担体２内を展開する。被検物質５１と結合されていない標識物質５３は、検査領域Ｌ１に捕捉されることなく、検査領域Ｌ１を通過する。検査領域Ｌ１を通過した標識物質５３は、第１結合物質５２が第３結合物質５８と結合することにより、第１結合物質５２を介してコントロール領域Ｌ２に捕捉される。コントロール領域Ｌ２において標識物質５３が捕捉されることにより、コントロール領域Ｌ２の発色濃度が予め設定された基準以上に上昇する。コントロール領域Ｌ２は、第１結合物質５２を介して捕捉された標識物質５３からの標識信号により、検体５０の展開の完了を確認するための領域である。そのため、コントロール領域Ｌ２は確認領域と呼ばれる場合もある。

　標識物質５３を修飾し、かつ被検物質５１と特異的に結合する第１結合物質５２とは、例えば、被検物質が抗原である場合は、その抗原に対する抗体、被検物質が抗体である場合は、その抗体に対する抗原、被検物質がたんぱく質及び低分子化合物等の場合は、たんぱく質及び低分子化合物等に対するアプタマーなど、被検物質と特異的に結合する物質である。

　検査領域Ｌ１に固定され、かつ被検物質５１と特異的に結合する第２結合物質５６とは、例えば、被検物質が抗原である場合は、その抗原に対する抗体、被検物質が抗体である場合は、その抗体に対する抗原、被検物質がたんぱく質及び低分子化合物等の場合は、たんぱく質及び低分子化合物等に対するアプタマーなど、被検物質と特異的に結合する物質である。第１結合物質５２と第２結合物質５６とは同一のものであってもよいし、異なるものであってもよい。

　第１結合物質５２に特異的に結合する第３結合物質５８とは、被検物質５１そのものであってもよいし、第１結合物質５２が認識する部位を持つ化合物でもよく、例えば、被検物質５１の誘導体とタンパク質とを結合させたような化合物などが挙げられる。

　例えば、被検物質５１がインフルエンザＡ型ウィルスあるいはそのバイオマーカーである場合、第１結合物質５２及び第２結合物質５６として、抗インフルエンザＡ型モノクローナル抗体（Ａｎｔｉ－Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ　Ａ　ＳＰＴＮ－５　７３０７、Ｍｅｄｉｘ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａ社製）を用い、第３結合物質５８として、抗マウスＩｇＧ抗体（抗マウスＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）、ウサギＦ（ａｂ'）２、品番５６６－７０６２１、和光純薬工業（株）社製）を用いることができる。

　発色領域Ｌ３は、第１試薬４１と反応して発色状態が変化する物質を含む。発色領域Ｌ３は、第１試薬４１と反応して発色する、もしくは色が変化することにより、第１試薬４１がその領域まで展開されたことを示す。例えば、第１試薬４１として、硝酸鉄水溶液とクエン酸（和光純薬工業（株）社製、０３８－０６９２５）の混合水溶液を使用する場合には、ブロモクレゾールグリーン（和光純薬工業（株）社製）がライン状に固定化された発色試薬固定化ラインにより発色領域Ｌ３を構成する態様が好ましい。この態様は、本例の発色領域Ｌ３の態様であり、本例の発色領域Ｌ３は、上述のとおり、第１試薬４１と反応する前は暗緑色であり、第１試薬４１が発色領域Ｌ３に到達すると、オレンジ色へと変化する。なお、発色領域Ｌ３は、発色状態が変化することで、第１試薬４１が展開され、第２試薬４６の供給するタイミングを示すことから、増幅指標領域と呼ばれることもある。

　送液用パッド４は、担体２の一端に接触して配置されており、点着領域（標識保持パッド３によって構成される）よりも上流側から第１試薬４１を担体２に送液する。送液用パッド４は、第１被押圧部１１が押圧された場合に、送液用パッド４の一端が第１試薬保持部４０内に浸漬される。送液用パッド４は、多孔質材料で形成されており、第１試薬４１を吸収し、吸収した第１試薬４１を毛管現象により担体２に送液する。

　吸収パッド６は、担体２の他端に接触して配置されており、担体２に展開される検体５０、第１試薬４１及び第２試薬４６を吸収する。吸収パッド６も多孔質材料で形成されている。

　本実施形態においては、第１試薬４１及び第２試薬４６は、両者が反応することにより、検査領域Ｌ１及びコントロール領域Ｌ２の発色を増幅させる増幅薬である。本例のように、標識物質５３として、金コロイドなどの金属系の標識物質を用いる場合は、例えば、標識物質５３の標識信号を増幅させる方法として銀増幅が用いられる。第１試薬４１及び第２試薬４６は、一例として銀増幅に用いられる増幅薬であり、標識物質５３を触媒とする第１試薬４１及び第２試薬４６の反応が増幅反応である。増幅反応により、標識物質５３よりも相対的に粒子径の大きな銀粒子６０（図５参照）が生成される。

　より具体的には、本例において、第１試薬４１は銀イオンを還元する還元剤であり、第２試薬４６は銀イオンである。標識物質５３に還元剤である第１試薬４１と銀イオンである第２試薬４６とを接触させると銀粒子６０（図５参照）が生成され、生成された銀粒子６０が標識物質５３を核として標識物質５３に沈着する。標識物質５３に銀粒子が沈着することによって、標識物質５３よりも粒子径の大きな銀粒子６０（図５参照）が生成される。これにより、標識物質５３が発する標識信号が増幅され、その結果、検査領域Ｌ１及びコントロール領域Ｌ２は標識物質５３の発色が増幅される。

（第１試薬）
　第１試薬４１としての還元剤としては、第２試薬４６として用いる銀イオンを銀に還元することができるものであれば、無機・有機のいかなる材料、またはその混合物でも用いることができる。無機還元剤としては、Ｆｅ²⁺、Ｖ²⁺あるいはＴｉ³⁺などの金属イオンで原子価の変化し得る還元性金属塩、還元性金属錯塩を好ましく挙げることができる。無機還元剤を用いる際には、酸化されたイオンを錯形成するか還元して、除去するか無害化する必要がある。例えば、Ｆｅ²⁺を還元剤として用いる系では、クエン酸やＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）を用いて酸化物であるＦｅ³⁺の錯体を形成し、無害化することができる。本系ではこのような無機還元剤を用いることが好ましく、より好ましくはＦｅ²⁺の金属塩が好ましい。

　なお、湿式のハロゲン化銀写真感光材料に用いられる現像主薬（例えばメチル没食子酸塩、ヒドロキノン、置換ヒドロキノン、３－ピラゾリドン類、ｐ－アミノフェノール類、ｐ－フェニレンジアミン類、ヒンダードフェノール類、アミドキシム類、アジン類、カテコール類、ピロガロール類、アスコルビン酸（またはその誘導体）、およびロイコ色素類）、および本分野の当業者にとって明らかなその他の材料、例えば米国特許第6,020,117号に記載されている材料も用いることができる。

　還元剤としては、アスコルビン酸還元剤も好ましい。有用なアスコルビン酸還元剤は、アスコルビン酸と類似物、異性体とその誘導体を含み、例えば、Ｄ－またはＬ－アスコルビン酸とその糖誘導体（例えばγ－ラクトアスコルビン酸、グルコアスコルビン酸、フコアスコルビン酸、グルコヘプトアスコルビン酸、マルトアスコルビン酸）、アスコルビン酸のナトリウム塩、アスコルビン酸のカリウム塩、イソアスコルビン酸（またはＬ－エリスロアスコルビン酸）、その塩（例えばアルカリ金属塩、アンモニウム塩または当技術分野において知られている塩）、エンジオールタイプのアスコルビン酸、エナミノールタイプのアスコルビン酸、チオエノ－ルタイプのアスコルビン酸等を好ましく挙げることができ、特にはＤ、ＬまたはＤ，Ｌ－アスコルビン酸（そして、そのアルカリ金属塩）若しくはイソアスコルビン酸（またはそのアルカリ金属塩）が好ましく、ナトリウム塩が好ましい塩である。必要に応じてこれらの還元剤の混合物を用いることができる。

（第２試薬）
　第２試薬４６として用いられる銀イオンを含む溶液としては、溶媒中に銀イオン含有化合物が溶解されているものが好ましい。銀イオン含有化合物としては有機銀塩、無機銀塩、もしくは銀錯体を用いることができる。好ましくは、無機銀塩もしくは銀錯体である。無機銀塩としては、水などの溶媒に対して溶解度の高い銀イオン含有化合物を使用することが可能であり、硝酸銀、酢酸銀、乳酸銀、酪酸銀、チオ硫酸銀などが挙げられる。特に好ましくは硝酸銀である。銀錯体としては、水酸基やスルホン基など水溶性基を有する配位子に配位された銀錯体が好ましく、ヒドロキシチオエーテル銀などが挙げられる。

＜イムノクロマトグラフ法＞
　図５を参照して、イムノクロマトグラフ法について説明する。ここでは、検体５０が被検物質５１を含む場合について、つまり、検体５０が陽性であることを前提として説明する。

　まず、検体５０が点着領域である標識保持パッド３上に点着される（工程Ｓ１）。標識保持パッド３に点着された検体５０中の被検物質５１は、標識保持パッド３中に含まれている標識物質５３を修飾する第１結合物質５２と特異的に結合する。検体５０は、担体２における毛細管現象により担体２内において、標識保持パッド３から下流側に展開される。検体５０は一部上流側にも展開される。矢印Ｓは検体５０が展開している様子を示す。

　次に、第１試薬４１が供給される（工程Ｓ２）。第１試薬４１は送液用パッド４側から供給される。第１試薬４１は送液用パッド４を介して担体２に供給されて、下流側に展開される。

　その後、第１試薬４１が下流側に展開されるまで待機する（工程Ｓ３－Ｓ４）。図５に示す「Ｗａｉｔ」は待機を意味する。第１試薬４１は下流側に徐々に展開され、標識保持パッド３から展開されつつある検体５０及び第１結合物質５２で修飾された標識物質５３は第１試薬４１に押されるように、下流側に展開される（工程Ｓ３）。

　下流側に展開され、検査領域Ｌ１に到達した検体５０中の被検物質５１は、検査領域Ｌ１の第２結合物質５６に捕捉される。すなわち、被検物質５１と第１結合物質５２を介して標識物質５３が検査領域Ｌ１に捕捉される。他方、被検物質５１と結合していない標識物質５３は、捕捉されることなく検査領域Ｌ１を通過し、コントロール領域Ｌ２の第３結合物質５８に捕捉される。

　第１試薬４１の展開が進み、第１試薬４１が発色領域Ｌ３に到達すると（工程Ｓ４）、発色領域Ｌ３は第１試薬４１と反応して発色状態が変化する。本例では、発色領域Ｌ３は、第１試薬４１と反応する前は暗緑色であり、第１試薬４１と反応することによってオレンジ色に変色する。

　第１試薬４１が十分に展開された後、第２試薬４６を担体２に供給する（工程Ｓ５）。第２試薬４６は、発色領域Ｌ３よりも下流側から担体２に供給され、上流側に展開される。ここで、第１試薬４１は、銀イオンを還元する還元剤を含む第１増幅液であり、第２試薬４６は、銀イオンを含む第２増幅液である。第１増幅液と第２増幅液とが反応することによって、標識物質５３である金コロイド粒子を触媒として銀粒子６０が生成される。これによって、標識信号が増幅される（工程Ｓ６）。

　本実施形態のカートリッジ１００において、第１試薬４１は送液用パッド４及び担体２における毛細管現象により下流側に展開される。一方、第２試薬４６は、多機能部材３０の流路形成部３５と担体２の表面との隙間Ｄを流路として担体２の表面上を流れて検査領域Ｌ１に展開される。第２試薬４６が、多機能部材３０の第２収容部３２の底部の開口３３から流路となる隙間Ｄに流出する際、および隙間Ｄを流れる際に、隙間Ｄに泡が発生する場合がある。すなわち、第２試薬４６を担体２に供給すると、担体２の流路形成部３５と対向する位置に配置されている検査領域Ｌ１及びその周辺上に泡が発生した状態となる場合がある。泡が発生する原因は、隙間Ｄに勢いよく第２試薬４６が流れ込むことで、溜まっている空気と第２試薬４６が混ざり合うことが原因の１つと推察される。また、隙間Ｄに流れ込んだ第２試薬４６が担体２中に浸潤する際に、担体２中の空気が担体２表面に浮き上がってくるためという原因も推察される。これらのうち少なくとも１つが原因となり、泡が発生すると推察される。

　図６及び図７は、カートリッジ１００が装填された状態の検査装置１１０の一部破断側面図である。以下、図６及び図７を用いて、検査装置１１０の構成及び機能を説明する。

　本例の検査装置１１０は、例えば、以下の第１検査フロー、第２検査フロー及び第３検査フローの３つの検査フローを選択することが可能である。第１～第３のいずれの検査フローにおいても、装填前にカートリッジ１００の担体２に対して検体５０が点着されている必要がある。

　第１検査フローは、装填前において、検体５０の点着及び第１試薬４１の供給が開始された状態のカートリッジ１００に対して検査を行うフローである。第１検査フローの場合は、検査装置１１０へのカートリッジ装填後において、第１試薬４１及び第２試薬４６のうち、第２試薬４６の担体２への供給のみが検査装置１１０によって行われる。

　第２検査フローは、装填前において、検体５０の点着のみ行われたカートリッジ１００に対して検査を行うフローである。第２検査フローの場合は、検査装置１１０へのカートリッジ装填後において、第１試薬４１及び第２試薬４６の両方の担体２への供給が検査装置１１０によって行われる。

　第３検査フローは、装填前において、検体５０の点着、第１試薬４１の供給及び第２試薬４６の供給が開始された状態のカートリッジ１００に対して検査を行うフローである。第３検査フローの場合は、検査装置１１０へのカートリッジ装填後において、検査装置１１０では第１試薬４１及び第２試薬４６の供給は行われない。

　以下において、検査装置１１０の構成を説明した後、第１検査フローについて説明する。

（検査装置１１０の構成）
　図６及び図７に示すように、検査装置１１０は、内部機構として、第１試薬供給機構１１６と、第２試薬供給機構１１８とを備えている。第１試薬供給機構１１６は、第１試薬保持部４０から担体２に対して第１試薬４１の供給を開始させるための機構である。第１試薬供給機構１１６は、例えば電磁石と電磁石に対して移動可能なプランジャとを備えたソレノイドなどのアクチュエータが使用される。例えば、プランジャが移動することにより、プランジャが第１被押圧部１１と当接して第１被押圧部１１を押圧する。第１試薬供給機構１１６は、装填されたカートリッジ１００の第１被押圧部１１と対向する位置に配置されている。

　第１試薬供給機構１１６は、カートリッジ１００の第１被押圧部１１を押圧することにより、第１被押圧部１１に対して外部から押圧力を加える押圧機構である。第１試薬供給機構１１６によって第１被押圧部１１に対して押圧力が加えられると、上述の作用によって第１試薬保持部４０から担体２に第１試薬４１が供給される。第１検査フロー及び第３検査フローにおいては、第１試薬供給機構１１６は使用されず、第２検査フローにおいてのみ用いられる。

　第２試薬供給機構１１８は、第２試薬保持部４５から担体２に対して第２試薬４６の供給を開始させるための機構である。第２試薬供給機構１１８も、第１試薬供給機構１１６と同様にソレノイドなどのアクチュエータが使用される。第２試薬供給機構１１８は、装填されたカートリッジ１００の第２被押圧部１２と対向する位置に配置されている。第２試薬供給機構１１８は、カートリッジ１００の第２被押圧部１２を押圧することにより、第２被押圧部１２に対して外部から押圧力を加える押圧機構である。第２試薬供給機構１１８によって第２被押圧部１２に対して押圧力が加えられると、上述の作用によって第２試薬保持部４５から担体２に第２試薬４６が供給される。第３検査フローにおいては、第２試薬供給機構１１８は使用されず、第１検査フロー及び第２検査フローにおいてのみ使用される。

　検査装置１１０は、筐体１１１内に、装填部１１２、第１試薬供給機構１１６、及び第２試薬供給機構１１８に加えて、さらに、検知部１１４と、プロセッサ１２０と、メモリ１２１とを備える。図６において、プロセッサ１２０及びメモリ１２１は、検査装置１１０の筐体１１１外に図示されているが、これは模式図であり、実際には筐体１１１内に配置されている。

　検知部１１４は、検査領域Ｌ１、コントロール領域Ｌ２及び発色領域Ｌ３の発色状態を光学的に検知し、かつ、発色状態を表す検知信号をプロセッサ１２０に出力する。また、検知部１１４は、第２試薬４６の供給に起因して検査領域Ｌ１に生じる泡の発生状態を検知し、かつ、泡の発生状態を表す検知信号をプロセッサ１２０に出力する。

　検知部１１４は、例えば、ＣＭＯＳ（Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ　Ｍｅｔａｌ　Ｏｘｉｄｅ　Ｓｅｍｉｃｏｎｄｕｃｔｏｒ）イメージセンサ及びＣＣＤ（Ｃｈａｒｇｅ　Ｃｏｕｐｌｅｄ　Ｄｅｖｉｃｅ）イメージセンサなどのイメージセンサである。検知部１１４は、例えば観察窓１８と対向する位置に配置される。検知部１１４は、観察窓１８を中心にその周辺を含む予め設定された範囲を撮像する。検知部１１４が撮像した撮像画像には、検査領域Ｌ１、コントロール領域Ｌ２及び発色領域Ｌ３など、観察窓１８から露呈される観察領域７０（図８参照）が含まれる。そして、撮像画像は検知部１１４からプロセッサ１２０に出力される。

　また、一例として、検知部１１４を挟んで両側には撮像時に検査領域Ｌ１、コントロール領域Ｌ２及び発色領域Ｌ３を照明する発光ダイオード等の光源１１５を備えている。

　プロセッサ１２０は、検査装置１１０の各部を統括的に制御する。プロセッサ１２０の一例は、プログラムを実行することにより各種の制御を行うＣＰＵ（ＣｅｎｔｒａｌＰｒｏｃｅｓｓｉｎｇＵｎｉｔ）である。ＣＰＵは、プログラムを実行することにより、検知部制御部１２２、発色状態判別部１２３、第１試薬供給機構制御部１２４、第２試薬供給機構制御部１２５、表示制御部１２６、泡判別部１２９及びタイマ１２８を有する制御部として機能する。メモリ１２１は、プロセッサ１２０としてのＣＰＵに接続又は内蔵されたメモリの一例である。メモリ１２１内には、例えば、制御プログラムが格納されている。プロセッサ１２０は、ＣＰＵが制御プログラムを実行することにより、実現される。

　検知部制御部１２２は、検知部１１４による撮像タイミングを制御する。

　第１試薬供給機構制御部１２４は、第１試薬供給機構１１６を作動させて、第１被押圧部１１を押圧するように制御する。

　第２試薬供給機構制御部１２５は、発色領域Ｌ３の発色状態の変化に基づいて、第２試薬供給機構１１８を作動させて、第２被押圧部１２を押圧するように制御する。

　発色状態判別部１２３は、検知部１１４が出力する検知信号に基づいて、発色領域判別処理、コントロール領域判別処理及び検査領域判別処理を実行する。上述のとおり、検知部１１４は、検査領域Ｌ１、コントロール領域Ｌ２及び発色領域Ｌ３を含む観察領域７０の撮像画像を出力する。発色状態判別部１２３は、撮像画像に基づいて上記各判別処理を実行する。

　発色領域判別処理は、撮像画像に基づいて、発色領域Ｌ３の発色状態の変化、一例として、第１試薬４１との反応前の色である暗緑色からオレンジ色へ変色したか否かを判別する処理である。発色状態の変化が「有り」は、第１試薬４１が発色領域Ｌ３まで展開されたことを意味する。

　なお、「発色状態の変化」には、担体の色とは異なる第１色から別の第２色に変化する態様（すなわち変色）、担体と別の色が発色することにより、担体の色が別の色に変化する態様（すなわち発色）、色の濃度が変化する態様（すなわち濃度変化）のいずれかを含む。

　プロセッサ１２０は、発色状態判別部１２３が、発色領域Ｌ３の発色状態が変化していると判別した場合に、第２試薬供給機構制御部１２５を介して第２試薬供給機構１１８を作動させる。

　コントロール領域判別処理は、撮像画像に基づいて、コントロール領域Ｌ２の発色状態の変化の有無を判別する処理である。本例では、コントロール領域に標識物質５３が捕捉されるか、または捕捉された後に銀増幅されることによってコントロール領域Ｌ２にラインが発現するため、このコントロール領域Ｌ２におけるラインの発現の有無を判別する。発色状態判別部１２３においては、コントロール領域Ｌ２の発色状態が変化している、すなわちコントロール領域Ｌ２の発現有りと判別した場合に、次工程の検査領域判別処理が実行される。

　検査領域判別処理は、撮像画像に基づいて、検査領域Ｌ１の発色状態の変化の有無を判別する処理である。本例では、検査領域Ｌ１に標識物質５３が捕捉されるか、または捕捉された後に銀増幅されることによって検査領域Ｌ１にラインが発現するため、この検査領域Ｌ１におけるラインの発現の有無を判別する。

　プロセッサ１２０は、発色状態判別部１２３により検査領域Ｌ１について発色状態の変化ありと判別された場合には、表示制御部１２６を介してモニタ１１９に検査結果を「陽性」と表示する。また、検査領域Ｌ１について発色状態の変化なしと判別された場合には、表示制御部１２６を介してモニタ１１９に検査結果を「陰性」と表示する。

　泡判別部１２９は、検知部１１４によって検知された泡の発生状態に基づいて泡の有無を判別する。泡判別部１２９による泡の有無の判別は、第２試薬供給機構１１８の作動後、コントロール領域判別処理よりも前に実施される。泡判別部１２９において、泡が無いと判別した場合に、発色状態判別部１２３によるコントロール領域判別処理は実行される。

　図８Ａ及び図８Ｂは、検知部１１４が出力した撮像画像から切り出した観察画像７１の一例を模式的に示す。観察画像７１は、担体２のうち、観察窓１８から露呈される観察領域７０に対応する画像であり、観察領域７０には、検査領域Ｌ１、コントロール領域Ｌ２、及び発色領域Ｌ３が含まれる。

　図８Ａに示す観察画像７１Ａと図８Ｂに示す観察画像７１Ｂは、どちらも観察領域７０の観察画像７１であり、検査領域Ｌ１に泡が発生しているか否かが相違している。すなわち、図８Ａに示す観察画像７１Ａは、検査領域Ｌ１に泡が発生している状態を示し、図８Ｂに示す観察画像７１Ｂは、検査領域Ｌ１に泡が発生していない状態を示す。以下において、両者を区別する必要がある場合は、観察画像７１の符号にＡ又はＢの細別符号を付し、区別する必要が無い場合は、単に観察画像７１という。

　図８Ａ及び図８Ｂに示すように、検査領域Ｌ１に泡が発生している場合と、泡が無い場合とでは状態が異なり、その差異は観察画像７１Ａ及び観察画像７１Ｂに現れる。このように、泡が有る場合の観察画像７１Ａは、泡が無い場合の観察画像７１Ｂと差異があることから、泡判別部１２９は、撮像画像から切り出した観察画像７１に基づいて、検査領域Ｌ１における泡の有無を判別する。泡の有無判別方法については後述するが、本例では、図８Ａに示す観察画像７１Ａ及び図８Ｂに示す観察画像７１Ｂに示すように、検査領域Ｌ１の周辺領域に注目領域ＲＯＩ（Region of interest）を設定し、設定した注目領域ＲＯＩに対応するＲＯＩ画像７２に基づいて、泡の有無を判別する。ここで、検査領域Ｌ１の周辺領域とは、検査領域Ｌ１に泡が発生している場合に、検査領域Ｌ１と同様に泡が発生している領域であって、標識物質を捕捉するための結合物質を含まない領域である。検査領域Ｌ１から、例えば５ｍｍ以内の範囲であれば、検査領域Ｌ１の泡の有無の状態に応じた泡の有無の状態を呈するため、注目領域ＲＯＩを設定する周辺領域と見做すことができる。但し、周辺領域及び周辺領域に設定される注目領域ＲＯＩは、検査領域Ｌ１などと異なり、ラインが発現しない領域である。注目領域ＲＯＩは、検体５０が陽性か陰性かにかかわらず、泡以外の要因で濃度が大きく変動しないので、観察画像７１Ａのような泡有り画像におけるＲＯＩ画像７２Ａと、観察画像７１Ｂのような泡無し画像におけるＲＯＩ画像７２Ｂとの比較によって、泡の有無を容易に判別できる。ＲＯＩ画像７２についても、観察画像７１と同様に、泡有りと泡無しの区別が必要な場合は、ＲＯＩ画像７２の符号にＡ又はＢの細別符号を付し、区別する必要が無い場合は、単にＲＯＩ画像７２という。

　図８Ｂに示すＲＯＩ画像７２Ｂは、泡無し画像である観察画像７１Ｂの一部であり、ＲＯＩ画像７２Ｂは、泡の有無を判別するための比較の基準として参照される参照画像ＲＩとして使用される。泡無し状態の参照画像ＲＩは、例えば、後述の設定情報の１つとして、メモリ１２１内に予め保持される。

　また、メモリ１２１には、制御プログラムの他、プロセッサ１２０が各種の制御を行うために予め設定される設定情報が記憶されている。設定情報としては、発色状態判別部１２３が、発色状態の変化を判別する際に必要な情報が記録されている。設定情報の一例としては、後述の予め設定された第１設定時間ｔ１、予め設定された第２設定時間ｔ２、予め設定された第３設定時間ｔ３、予め設定された第４設定時間ｔ４、予め設定された回数Ｋ、Ｌなどが挙げられる。第１設定時間ｔ１は、プロセッサ１２０が、泡が有ると判断した場合に、再度泡の有無を判断するまでの待機時間である。第２設定時間ｔ２は、プロセッサ１２０が、泡が有ると判断した場合に、再度泡の有無の判別を繰り返す場合の許容時間である。また、第３設定時間ｔ３は、プロセッサ１２０が発色領域Ｌ３の発色状態の変化が無いと判断した場合に、再度、発色領域Ｌ３の発色状態の変化の有無を判断するまでの待機時間である。第４設定時間ｔ４は、カートリッジが装填された後の予め設定された時点から予め設定された時間であって、発色領域Ｌ３の発色状態の有無を繰り返す場合の許容時間である。

　本実施形態の検査装置１１０を用いたイムノクロマトグラフ検査の手順を図９～１１を参照して説明する。ここでは、第１試薬４１の供給はユーザが行い、第２試薬４６の供給は検査装置１１０で行う態様の第１検査フローについて説明する。

（第１検査フロー）
　図９は第１検査フローを示す図である。
　まず、ユーザが、カートリッジ１００の滴下口１６から検体５０を担体２の点着領域に滴下する（工程Ｓ１１）。

　次に、ユーザが、カートリッジ１００の第１被押圧部１１を押圧して、第１試薬４１の供給を開始する（工程Ｓ１２）。

　その後、ユーザは、カートリッジ１００を、電源が入った状態の検査装置１１０の装填部１１２に装填する（工程Ｓ１３）。

　検査装置１１０内において、装填されたカートリッジ１００についての検査が実行される（工程Ｓ１４）。

　なお、第１試薬４１の供給を開始した後、第１試薬４１が担体２を十分展開するまでの時間は、個々のカートリッジ毎で異なるが、概ね５分～１０分程度を要する。ユーザが第１被押圧部１１を押圧した後、装填部１１２に装填するまでの時間は、ユーザの都合に応じて定めればよい。

　図１０は、図９に示す検査装置１１０による検査実行（工程Ｓ１４）の詳細な検査フローを示す。
　検査装置１１０内にカートリッジ１００が装填されることにより、検査装置１１０における検査（図９の工程Ｓ１４）が開始される。

　図１０示すように、検査装置１１０においては、まず、プロセッサ１２０においてｎ＝１と設定される（工程Ｓ２０）。ここで、ｎは発色領域Ｌ３の判別処理の実行回数のパラメータである。プロセッサ１２０は、発色領域Ｌ３の発色状態が変化（具体的には暗緑色からオレンジ色への変化）しているか否かを判別する（工程Ｓ２１）。具体的には、プロセッサ１２０は、光源１１５を点灯させることにより観察窓１８から露呈される観察領域７０を照明し、その状態で、検知部１１４に撮像を行わせる。そして、プロセッサ１２０は検知部１１４から撮像画像を取得し、取得した撮像画像から観察領域７０の観察画像７１を切り出す。そして、プロセッサ１２０は、観察画像７１の発色領域Ｌ３の発色状態の変化を判別する。発色領域Ｌ３の発色状態の変化が有りと判別された場合、すなわち発色領域Ｌ３が暗緑色からオレンジ色に変化している場合は、第１試薬４１が、発色領域Ｌ３とその上流側の検査領域Ｌ１及びコントロール領域Ｌ２に到達していることを意味する。

　発色領域Ｌ３の発色状態が変化している場合（工程Ｓ２１：Ｙｅｓ）、プロセッサ１２０は、第２試薬供給機構１１８を作動させることにより、第２試薬４６の供給を開始させる（工程Ｓ２２）。本実施形態においては、プロセッサ１２０は、第２試薬供給機構１１８によって、カートリッジ１００の第２被押圧部１２を押圧させる。第２被押圧部１２が押圧されると、第２被押圧部１２が第２試薬保持部４５に向けて沈み込むように変形する。この変形により、第２試薬保持部４５のシート部材４８が突起部３４に押しつけられて破断し、第２試薬４６が担体２上に供給される。

　一方、発色領域Ｌ３の発色状態が変化していない場合（工程Ｓ２１：Ｎｏ）、第４設定時間ｔ４以内であり、かつ、発色領域Ｌ３の発色状態の変化を判別した回数ｎがＫ回未満（ｎ＜Ｋ）であるかどうか判定を行う（工程Ｓ２３）。

　ここで、第４設定時間ｔ４を超えている、もしくはｎ＜Ｋでない場合（工程Ｓ２３：Ｎｏ）、プロセッサ１２０は、エラーを報知（工程Ｓ２６）し、検査フローを終了する。例えば、エラーの報知は、モニタ１１９にエラーメッセージを表示することにより行われる。なお、エラーの報知の方法としてモニタ１１９にエラーメッセージを表示する以外に、音声でエラーメッセージを通知するようにしてもよい。

　一方、第４設定時間ｔ４以内であり、かつｎ＜Ｋであれば（工程Ｓ２３：Ｙｅｓ）、第３設定時間ｔ３が経過するまでの間待機する（工程Ｓ２４）。図１０の工程Ｓ２４においては、「ｔ３　ｗａｉｔ」として示している。第３設定時間ｔ３は、例えば、３０秒程度であり、第４設定時間ｔ４は、例えば２０分等と予め設定されている。その後、ｎに１をインクリメント（図１０においてｎ＝ｎ＋１で示す）し（工程Ｓ２５）、再度発色領域Ｌ３の発色状態が変化しているか否かを判別する工程Ｓ２１に戻る。

　工程Ｓ２２において、第２試薬供給機構１１８を作動させ第２試薬４６の供給を開始させた後、プロセッサ１２０において、ｍ＝１と設定される（工程Ｓ２７）。ここで、ｍは泡の有無の判別工程（工程Ｓ２７）の判別処理の実行回数のパラメータである。そして、プロセッサ１２０は検査領域Ｌ１における泡の有無を判別する（工程Ｓ２８）。工程Ｓ２８では、具体的には、プロセッサ１２０は、工程Ｓ２１と同様に、観察領域７０を照明した状態で、検知部１１４に観察領域７０を撮像させる。そして、プロセッサ１２０は、検知部１１４が出力する撮像画像から、観察領域７０に対応する観察画像７１を切り出し、切り出した観察画像７１に基づいて泡の有無を判別する。観察画像７１が、観察画像７１Ｂ（図８Ｂ参照）のように泡が無しと判別された場合は、検査領域Ｌ１の発色状態の定量性は良好であり、陽性か陰性かの判別を適正に行うことができる状態を意味する。

　観察画像７１が泡無しと判別された場合（工程Ｓ２８：Ｙｅｓ）、ライン状のコントロール領域Ｌ２が発現しているか否かを判別する（工程Ｓ３２）。工程Ｓ３２において、プロセッサ１２０は、観察画像７１からコントロール領域Ｌ２の発色状態の変化を判別する。プロセッサ１２０は、例えば、コントロール領域Ｌ２の発色濃度が予め設定された基準以上の濃度に達しているか否かを判別し、基準以上の濃度の場合はコントロール領域Ｌ２が発現していると判別する。コントロール領域Ｌ２が発現していると判別された場合は、検体５０が、コントロール領域Ｌ２及びその上流側の検査領域Ｌ１に到達していることを意味する。

　一方、観察画像７１が、観察画像７１Ａ（図８Ａ参照）のように、泡有りと判別された場合（工程Ｓ２８：Ｎｏ）、第２設定時間ｔ２以内である、かつ、泡の有無を判別した回数ｍがＬ回未満（ｍ＜Ｌ）かどうかの判定を行う（工程Ｓ２９）。

　ここで、第２設定時間ｔ２を超えている、もしくはｍ＜Ｌでない場合（工程Ｓ２９：Ｎｏ）、プロセッサ１２０は、エラーを報知（工程Ｓ２６）し、検査フローを終了する。

　一方、第２設定時間ｔ２以内であり、かつ、ｍ＜Ｌであれば（工程Ｓ２９：Ｙｅｓ）、第１設定時間ｔ１が経過するまでの間待機する（工程Ｓ３０）。図１０の工程Ｓ３０においては、「ｔ１　ｗａｉｔ」として示している。第１設定時間ｔ１は、例えば、１０秒程度であり、第２設定時間ｔ２は、例えば５分等と予め設定されている。その後、ｍに１をインクリメント（図１０においてｍ＝ｍ＋１で示す）し（工程Ｓ３１）、再度泡の有無を判別する工程Ｓ２８に戻る。

　コントロール領域Ｌ２が発現しているか否かの判別（工程Ｓ３２）において、コントロール領域Ｌ２が発現している場合（工程Ｓ３２：Ｙｅｓ）、プロセッサ１２０は、検体５０が陽性であるか陰性であるかの主判定を行い（工程Ｓ３３）、検査フローを終了する。

　プロセッサ１２０は、例えば、主判定（工程Ｓ３３）において、ライン状の検査領域Ｌ１の発色濃度が予め設定された基準以上の濃度に達しているかを判別し、基準以上の濃度の場合は検査領域Ｌ１が発現していると判別する。検査領域Ｌ１が発現していると判別された場合は、検体５０が陽性であることを意味し、検査領域Ｌ１が発現していないと判別した場合は、検体５０が陰性であることを意味する。このように、プロセッサ１２０は、主判定において検査領域Ｌ１の発現の有無に応じて検体５０が陽性であるか陰性であるかの判定を行う。

　主判定を行ったプロセッサ１２０は、検査領域Ｌ１の発現有りと判別した場合には、モニタ１１９に検査結果を「陽性」と表示する。また、検査領域Ｌ１の発現無しと判別した場合には、モニタ１１９に検査結果を「陰性」と表示する。

　一方、工程Ｓ３２におけるコントロール領域Ｌ２が発現しているか否かの判別において、コントロール領域Ｌ２が発現していない場合（工程Ｓ３２：Ｎｏ）、エラーを報知し（工程Ｓ２６）、検査フローを終了する。なお、第２試薬４６を展開後、コントロール領域Ｌ２が発現しない場合は、検体５０が点着されていない可能性がある。第１検査フローは以上の通りである。

　ここで、上記第１検査フローにおける泡の有無を判別する工程Ｓ２８の詳細を説明する。工程Ｓ２８のフローには複数のフローが考えられる。図１１においては、工程Ｓ２８のフローの一例である第１フローを示す。

　図１１に示す第１フローでは、プロセッサ１２０は、まず、検知部１１４が出力した撮像画像から観察領域７０に対応する観察画像７１を切り出すことにより、観察画像７１を取得する（工程Ｓ４１）。

　次に、プロセッサ１２０は、取得した観察画像７１から注目領域（ＲＯＩ：Region of interest)のＲＯＩ画像７２（図８参照）を抽出する（工程Ｓ４２）。本例において、注目領域ＲＯＩは、検査領域Ｌ１の周辺領域のラインが発現しない領域である（図８参照）。そして、プロセッサ１２０は、設定情報としてメモリ１２１内に保持されている泡無しの状態を示す参照画像ＲＩを読み出す。なお、参照画像ＲＩは、予めメモリ１２１に保持しておいた画像であっても良いし、工程Ｓ２１で取得した画像のラインが発現していない領域の画像であっても良い。プロセッサ１２０は、工程Ｓ４３において、参照画像ＲＩと、工程Ｓ４２で抽出したＲＯＩ画像７２との画素値の差分である差分値ΔＰＶを導出する。なお、ＲＯＩ画像７２も参照画像ＲＩもそれぞれ行列状に二次元配列された複数の画素からなる。差分値ΔＰＶは、一例として、ＲＯＩ画像７２及び参照画像ＲＩの対応する画素毎に画素値の差分を算出し、画素毎の差分の平均値とする。

　工程Ｓ４４において、プロセッサ１２０は、差分値ΔＰＶが予め設定された閾値Ａ以下かどうかを判定する。工程Ｓ４４において、差分値ΔＰＶが予め設定された閾値Ａ以下（ΔＰＶ≦Ａ）であれば（工程Ｓ４４：Ｙｅｓ）、泡「無し」と判別し（工程Ｓ４５)、泡判別工程を終了する。一方、差分値ΔＰＶが閾値Ａより大きい場合（ΔＰＶ>Ａ）は（工程Ｓ４４：Ｎｏ）、泡「有り」と判別し（工程Ｓ４６）、泡判別工程を終了する。

　ＲＯＩ画像７２に対応する注目領域ＲＯＩは、既述の通り、検査領域Ｌ１の周辺のラインが発現しない領域である。ラインが発現しない領域は、検査領域Ｌ１などの背景となる担体２そのものの色を示し、泡が無い状態であれば、濃度が略一様である。すなわち、その領域内に含まれている画素の画素値は略一様である（図８Ｂ参照）。一方、検査領域Ｌ１に泡が発生している場合、その周辺領域においても泡が有る。そのため、その領域に含まれている画素の画素値は一様ではなく、泡の存在によって、濃淡が生じる。すなわち、ＲＯＩ画像７２Ａのような泡有り画像には濃淡があるため、画素値にばらつきがあり、画素値の平均値は、ＲＯＩ画像７２Ｂ（参照画像ＲＩに用いられる）のような泡無し画像に比べて小さくなる。そのため、参照画像ＲＩとの差分値ΔＲＩが閾値Ａ以下であれば、泡が無い、もしくは泡がラインの判別に影響を与えない程度であることを意味する。

　既に述べた通り、カートリッジ１００内において、第２試薬４６を担体２に供給する際には、流路形成部３５と担体２との間、すなわち、検査領域Ｌ１上に泡が発生することがある。検体５０が陽性である場合、検査領域Ｌ１は黒色に発色するが、検査領域Ｌ１に泡が発生していると、泡によって黒色の発色の視認性が著しく低下してしまう。そのため、検査領域Ｌ１に泡が発生した状態で主判定（図１０の工程Ｓ３３参照）を行うと、陽性であるにもかかわらず陰性と誤判定してしまう場合がある。逆に、検体５０が陰性である場合、検査領域Ｌ１は発色しないが、検査領域Ｌ１に泡が発生していると、泡がない状態と比較すると濃度が上昇するために、発色があるように視認され、陰性であるにもかかわらず陽性と誤判定してしまう場合がある。しかし、本実施形態の検査装置１１０は、プロセッサが、検知部１１４によって検知された泡の発生状態に基づいて泡が無いと判別した場合に、検査領域の発色状態の変化の有無を判別する。従って、泡の影響により、発色状態の変化の有無の誤判定が生じるのを抑制することができ、陽性か陰性かの主判定において誤判定を抑制することができる。

　上記において、プロセッサ１２０は、泡無し状態の参照画像ＲＩと、ＲＯＩ画像７２を一例として示した注目領域ＲＯＩの画像との差分（一例として差分値ΔＰＶ）が予め設定された閾値以下であるか否かに基づいて、泡の有無の判別を行う。この画像の比較という比較的簡単な方法で泡の有無を判別することができる。

　上記第１検査フローにおいて、プロセッサ１２０は、参照画像ＲＩとＲＯＩ画像７２との差分に基づいて、泡の有無の判別を行っているが、参照画像ＲＩとＲＯＩ画像７２とのの比を導出し、その比が予め設定された閾値以下であるか否かに基づいて、泡の有無の判別を行ってもよい。なお、差分を用いる場合と比を用いる場合とでは予め設定された閾値は異なる。

　既述の通り、プロセッサ１２０は、泡判別工程で泡が有ると判別した場合は、判別後、予め設定された第１設定時間ｔ１が経過した後に、再度、泡の有無を判別する。これにより、泡の発生から泡が消えるまでの時間が、カートリッジの個体差によってばらつく場合でも、確実な検査を行うことができる。

　また、プロセッサ１２０は、カートリッジ１００が装填された後の予め設定された時点から予め設定された第２設定時間ｔ２が経過した後においても、又は、予め設定された回数の判別を繰り返した後においても、泡が有る、と判別した場合は、エラーを報知する。これにより、第２設定時間ｔ２が経過した後、あるいは予め設定された回数の判別を繰り返した後においても、泡が消えない場合は、エラーを報知するので、検査装置１１０の不具合当による誤検出が生じている場合に、いつまでも装置を占有するのを防止できる。

　第２設定時間ｔ２のカウントを開始する予め設定された時点は、第２試薬４６の供給開始時、又は予め設定された回数の泡の有無の判別が終了した時点など適宜定められる。また、予め設定された回数Ｌは２以上で適宜設定すればよい。

　なお、上記第１検査フローにおいて、泡の有無の判別を行い泡が有ると判別した場合に（工程Ｓ２８：Ｎｏ）、第２設定時間ｔ２以内であり、かつ泡の有無を判別した回数ｍがＬ回未満（ｍ＜Ｌ）であるかどうかの判定を行う（工程Ｓ２９）こととしている。そして、第２設定時間ｔ２以内であり、かつｍ＜Ｌであれば、泡の有無の判別を繰り返し、第２設定時間ｔ２を超える、あるいはｍがＬになった場合には、エラー報知する（工程Ｓ２６）こととしている。しかし、工程Ｓ２９において、第２設定時間ｔ２以内であること、及びｍ＜Ｌであること、のいずれか一方の条件のみを判定するようにしてもよい。すなわち、工程Ｓ２９において、第２設定時間ｔ２以内かどうかのみを判定し、第２設定時間ｔ２以内であれば、泡の有無の判別（工程Ｓ２８）を繰り返し、第２設定時間ｔ２を超えれば、エラー報知する（工程Ｓ２６）ようにしてもよい。また、工程Ｓ２９において、ｍ＜Ｌであるかどうかのみを判定し、ｍ＜Ｌであれば、泡の有無の判別（工程Ｓ２８）を繰り返し、ｍがＬ回になれば、エラー報知する（工程Ｓ２６）ようにしてもよい。

　また、上記第１検査フローにおいて、プロセッサ１２０は、発色領域Ｌ３の発色状態の変化が無しと判別した場合において、判別後、予め設定された第３設定時間ｔ３が経過した後に、再度、発色状態の変化の有無を判別する。これにより、第１試薬４１が発色領域Ｌ３に到達するまでの展開時間が、カートリッジ１００の個体差によってばらつく場合にも、個々のカートリッジ１００の展開状態に応じて、確実な検査を行うことができる。

　また、第１検査フローにおいて、プロセッサ１２０は、カートリッジ１００が装填された後の予め設定された時点から予め設定された第４設定時間ｔ４が経過した後においても、又は、予め設定された回数の判別を繰り返した後においても、発色領域Ｌ３の発色状態が変化しない場合は、エラーを報知する。これにより、第４設定時間が経過した後、あるいは予め設定された回数の判別を繰り返した後においても、発色状態が変化しない場合は、エラーを報知するので、第１試薬４１の展開不良、あるいは展開がされていない場合に、いつまでもカートリッジ１００が装置を占有するのを防止できる。

　また、第４設定時間ｔ４のカウントを開始する予め設定された時点は、カートリッジ装填時、又は予め設定された回数の判別が終了した時点でもよい。また、予め設定された回数Ｋは２以上で適宜設定すればよい。

　なお、工程Ｓ２３についても、第４設定時間ｔ４以内であること、及びｎ＜Ｋであること、のいずれか一方の条件のみを判定するようにしてもよい。すなわち、工程Ｓ２３において、第４設定時間ｔ４以内かどうかのみを判定し、第４設定時間ｔ４以内であれば、発色領域Ｌ３の発色状態の変化の有無の判別（工程Ｓ２１）を繰り返し、第４設定時間ｔ４を超えれば、エラー報知する（工程Ｓ２６）ようにしてもよい。また、工程Ｓ２３において、ｎ＜Ｋであるかどうかのみを判定し、ｎ＜Ｋであれば、発色領域Ｌ３の発色状態の変化の有無の判別（工程Ｓ２１）を繰り返し、ｎがＫ回になれば、エラー報知する（工程Ｓ２６）ようにしてもよい。

　本実施形態において、検知部１１４は、検査領域Ｌ１、コントロール領域Ｌ２及び発色領域Ｌ３の全ての発色状態を検知するものであり、かつ、試薬の供給に起因して検査領域Ｌ１に生じる泡の発生状態を検知するものとしたが、発色状態を検知する検知部（第１検知部）と、泡の発生状態を検知する検知部（第２検知部）とを個別に備えてもよい。しかし、本実施形態のように、１つの検知部１１４で兼用することで、検知部を個別に設ける場合よりも構成を簡素化することができ、コストを抑制することができる。また、検知部１１４の数が１つで済むため、省スペース化にもなる。

　なお、泡の発生状態を検知する検知部としては、イメージセンサなどの画像を撮像する撮像部に限らず、光量を検出可能な光検出器などであってもよい。泡の発生状態によって、反射光の光量が異なるので、光検出器によって、光量の変化を検出することで泡の発生状態を検知してもよい。

　本開示において、第２試薬供給機構１１８は、ソレノイドなどのアクチュエータを例示したが、カートリッジ１００における第２試薬保持部の構成に応じて、第２試薬保持部４５から第２試薬４６の供給を開始させることが可能な機構であればよい。例えば、第２試薬保持部４５が、シャッタを備え、シャッタを開けることにより、第２試薬４６の供給を開始させるものである場合、第２試薬供給機構１１８はシャッタを開けるための機構であればよい。なお、第１試薬供給機構１１６についても同様である。

　上記実施形態において、第１試薬４１は第１増幅液であり、第２試薬４６は第２増幅液であるとしたが、第１試薬４１及び第２試薬４６はこの組み合わせに限るものではない。第１試薬４１が展開液であり、第２試薬４６が洗浄液である組み合わせ、あるいは、第１試薬４１が展開液あるいは洗浄液であり、第２試薬４６が増幅液である組み合わせ等であってもよい。

　但し、第２試薬４６が発色を増幅させる増幅薬であることが好ましい。第２試薬４６が検査領域Ｌ１の発色を増幅させる増幅薬である場合、検査領域Ｌ１の発色が増幅するので判定精度を向上させることができる。

　また、本実施形態のように、第１試薬４１及び第２試薬４６が検査領域Ｌ１の発色を増幅させる増幅液であることが好ましい。第１試薬４１及び第２試薬４６が検査領域Ｌ１の発色を増幅させる増幅薬である場合、検査領域Ｌ１の発色が増幅するので判定精度を向上させることができる。

　泡の有無を判別する工程Ｓ２８（図１０参照）は、上記第１フローに限るものではない、図１２は、工程Ｓ２８の別の例である第２フローを示す。

　図１２に示すように、第２フローでは、プロセッサ１２０は、光源１１５によって観察領域７０を照明した状態で、検知部１１４に観察領域７０を撮像させることにより、観察画像７１を取得する（工程Ｓ５１）。

　次に、プロセッサ１２０は、取得した観察画像７１から注目領域ＲＯＩに対応するＲＯＩ画像７２（図８参照）を抽出する（工程Ｓ５２）。注目領域ＲＯＩは、第１フローと同様に検査領域Ｌ１の周辺領域のラインが発現しない領域である。

　工程Ｓ５３において、プロセッサ１２０は、ＲＯＩ画像７２の各画素値からＲＯＩ画像７２の画素値の標準偏差σを導出する。プロセッサ１２０は、導出した標準偏差σが予め設定された閾値Ｂ以下（すなわち、σ≦Ｂ）であれば（工程Ｓ５４：Ｙｅｓ）、泡「無し」と判別し（工程Ｓ５５)、泡判別工程を終了する。一方、標準偏差σが閾値Ｂよりも大きい場合（σ>Ｂ）は（工程Ｓ５４：Ｎｏ）、泡「有り」と判別し（工程Ｓ５６）、泡判別工程を終了する。

　注目領域ＲＯＩは、既述の通り、例えば、検査領域Ｌ１の周辺のラインが発現しない領域である。ラインが発現しない領域は担体２そのものの色を示すため、泡が無い状態であれば、濃度が略一様である。すなわち、その領域内に含まれている画素の画素値は略一様であるので、標準偏差σは小さい。一方、検査領域Ｌ１に泡が発生している場合、その周辺領域においても泡が有る。そのため、その領域に含まれている画素の画素値は一様ではなく、泡の存在によって、濃淡が生じる。泡の有る画像には濃淡があるため、画素値にばらつきがあり、標準偏差σが大きくなる。すなわち、標準偏差σが閾値Ｂ以下であれば、泡が無い、もしくは泡がラインの判別に影響を与えない程度であることを意味する。

　泡の有無を判別する工程Ｓ２８の別の例である第２フローでは、プロセッサ１２０が、取得した注目領域ＲＯＩの画像（一例としてＲＯＩ画像７２）の画素値の標準偏差σを導出し、標準偏差σが閾値Ｂ以下である場合、泡が無いと判別するので、第１フローのように参照画像ＲＩのような泡無し画像と比較することなく、泡の発生の有無を判別することができる。

（変形例）
　なお、第１検査フローの泡の有無を判別する工程Ｓ２８に代えて、図１３に示すように、泡の発生状態の経時変化を検出して、泡が無くなったことを確認する工程Ｓ２８Ａを備えてもよい。図１３は、図１０に示した検査装置１１０における第１検査フローを一部変更した変形例の検査フローである。図１３においては、図１０の第１検査フローと同一の工程には同一の工程符号を付して、詳細な説明を省略する。

　図１３に示す検査フローでは、第２試薬供給機構１１８を作動させて第２試薬４６を供給する工程Ｓ２２の後、泡が無くなったことを確認する（工程Ｓ２８Ａ）。泡が無くなったことを確認した後に、ライン状のコントロール領域Ｌ２が発現しているか否かを判別する（工程Ｓ３２）。その他の工程は図１０に示した検査フローと同様である。

　図１４は、泡が無くなったことを確認する工程Ｓ２８Ａにおける処理フローを示す図である。

　プロセッサ１２０は、検知部１１４を通じて、時刻ｔａで観察領域７０を撮像した観察画像７１（ｔａ）を取得（工程Ｓ６１）する。そして、観察画像７１（ｔａ）から注目領域ＲＯＩのＲＯＩ画像７２（ｔａ）を抽出する（工程Ｓ６２）。また、プロセッサ１２０は、時刻ｔｂで同じ観察領域７０を撮像した観察画像７１（ｔｂ）を取得し（工程Ｓ６３）、観察画像７１（ｔｂ）から注目領域ＲＯＩのＲＯＩ画像７２（ｔｂ）を抽出する（工程Ｓ６４）。注目領域ＲＯＩは、上記と同様に、例えば、検査領域Ｌ１の周辺領域であって、ラインが発現しない領域である。

　次に、プロセッサ１２０は、観察画像７１（ｔａ）から抽出したＲＯＩ画像７２（ｔａ）と観察画像７１（ｔｂ）から抽出したＲＯＩ画像７２（ｔｂ）との画素値の差分値ΔＰＶＴを導出する（工程Ｓ６５）。そして、差分値ΔＰＶＴが予め設定された閾値Ｃ以下であるかどうかを判別する（工程Ｓ６６）。

　差分ΔＰＶＴが閾値Ｃより大きい場合（工程Ｓ６６：Ｎｏ）、ＲＯＩ画像７２（ｔｂ）を新たなＲＯＩ画像７２（ｔａ）とし（工程Ｓ６８）、新たな観察画像７１（ｔｂ）を取得する工程Ｓ６３に戻り、工程Ｓ６３～工程Ｓ６６を泡が無くなるまで繰り返す。

　泡が発生した当初の状態から、時間が経過するにつれて、泡は、移動あるいは消滅することによって、検査領域Ｌ１に存在する量が徐々に減少する。検査領域Ｌ１に泡の量が多い初期においては、単位時間当たりの泡の減少量は多く、時間が経過するにつれて、単位時間当たりの泡の減少量は少なくなり、やがて、検査領域Ｌ１の発色状態の変化を検知する主判定に影響がでない程度まで泡が減少する。すなわち、泡の減少率は減少を開始する初期は大きく、徐々に小さくなり、やがて、減少率が一定程度以下になると、主判定に影響がでない程度まで泡が減少した状態となる。

　差分値ΔＰＶＴは、単位時間当たりの泡の減少量を意味しており、差分値ΔＰＶＴが閾値Ｃより大きいとは、泡が移動若しくは消滅による泡の減少量が大きいことを意味する。泡の減少量が大きいということは、泡が大きく減少する状態が継続していることを意味し、依然として検査領域Ｌ１に一定程度の泡が存在していることを意味する。他方、差分値ΔＰＶＴが閾値Ｃ以下であることは、泡の移動若しくは消滅による泡量の変化が小さくなり、主判定に影響がでない程度まで泡が減少していることを意味する。

　プロセッサ１２０は、差分値ΔＰＶＴが予め設定された閾値Ｃ以下である場合（工程Ｓ６６：Ｙｅｓ）、泡は「無し」と判別し（工程Ｓ６７）、泡が無くなったことを確認する工程Ｓ２８Ａは終了する。

　このように、プロセッサ１２０は、検知部１１４を介して、時間差のある２枚以上の観察画像を取得し、２枚以上の注目領域ＲＯＩの画像（一例としてＲＯＩ画像７２）の画素値の差分を導出し、差分が予め設定された閾値以下となった場合に、泡が無いと判別するので、泡が発生している状態から泡が消失するという泡の発生状態の経時変化を、時間差のある画像の比較という簡単な方法で判別することができる。

　なお、上記において、プロセッサ１２０は、２枚のＲＯＩ画像７２の画素値の差分が予め設定された閾値以下であるか否かに基づいて、泡の有無の判別を行う。しかし、プロセッサ１２０は、２枚のＲＯＩ画像７２の画素値の比を導出し、その比が予め設定された閾値以下であるか否かに基づいて、泡の有無の判別を行ってもよい。なお、差分を用いる場合と比を用いる場合とでは予め設定された閾値は異なる。

　上記実施形態においては、第１試薬４１の供給はユーザが行い、第２試薬４６の供給は検査装置１１０において行われる第１検査フローの場合について説明した。既述の通り、検査装置１１０においては第２検査フロー及び第３検査フローも選択可能である。

　第２検査フローでは、ユーザが検体５０を点着した後、第１試薬４１の供給を行うことなく、カートリッジ１００を検査装置１１０の装填部１１２に装填する。カートリッジ１００が装填された検査装置１１０では、プロセッサ１２０が、まず第１試薬供給機構１１６を作動して第１試薬４１を担体２に供給する。その後の処理は上記第１検査フローと同様である。

　第３検査フローでは、ユーザが検体５０を点着し、第１試薬４１を供給し、その後、所定時間経過後に、ユーザが第２試薬４６を供給した後に、カートリッジ１００を検査装置１１０の装填部１１２に装填する。カートリッジ１００が装填された検査装置１１０では、プロセッサ１２０が泡の有無を判別する工程、もしくは、泡が無くなったことを確認する確認工程を実施する。その後の処理は上記第１検査フローと同様である。

　上記実施形態において、プロセッサ１２０、さらにその内部構成としての検知部制御部１２２、発色状態判別部１２３、第１試薬供給機構制御部１２４、第２試薬供給機構制御部１２５、表示制御部１２６及び泡判別部１２９といった各種の処理を実行する処理部（Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　Ｕｎｉｔ）のハードウェア的な構造としては、次に示す各種のプロセッサ（Ｐｒｏｃｅｓｓｏｒ）を用いることができる。各種のプロセッサには、上述したように、ソフトウェアを実行して各種の処理部として機能する汎用的なプロセッサであるＣＰＵに加えて、ＦＰＧＡ（Ｆｉｅｌｄ　Ｐｒｏｇｒａｍｍａｂｌｅ　Ｇａｔｅ　Ａｒｒａｙ）等の製造後に回路構成を変更可能なプロセッサであるプログラマブルロジックデバイス（Ｐｒｏｇｒａｍｍａｂｌｅ　Ｌｏｇｉｃ　Ｄｅｖｉｃｅ:ＰＬＤ）、ＡＳＩＣ（Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　Ｓｐｅｃｉｆｉｃ　Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ　Ｃｉｒｃｕｉｔ）等の特定の処理を実行させるために専用に設計された回路構成を有するプロセッサである専用電気回路等が含まれる。

　１つの処理部は、これらの各種のプロセッサのうちの１つで構成されてもよいし、同種または異種の２つ以上のプロセッサの組み合わせ（例えば、複数のＦＰＧＡの組み合わせ、および／または、ＣＰＵとＦＰＧＡとの組み合わせ）で構成されてもよい。また、複数の処理部を１つのプロセッサで構成してもよい。

　複数の処理部を１つのプロセッサで構成する例としては、１つ以上のＣＰＵとソフトウェアの組み合わせで１つのプロセッサを構成し、このプロセッサが複数の処理部として機能する形態がある。第２に、システムオンチップ（Ｓｙｓｔｅｍ　Ｏｎ　Ｃｈｉｐ:ＳｏＣ）等に代表されるように、複数の処理部を含むシステム全体の機能を１つのＩＣ（Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ　Ｃｉｒｃｕｉｔ）チップで実現するプロセッサを使用する形態がある。このように、各種の処理部は、ハードウェア的な構造として、上記各種のプロセッサの１つ以上を用いて構成される。

　さらに、これらの各種のプロセッサのハードウェア的な構造としては、より具体的には、半導体素子等の回路素子を組み合わせた電気回路（ｃｉｒｃｕｉｔｒｙ）を用いることができる。

　２０２１年３月２４日に出願された日本国特許出願２０２１－０５０７７８号の開示は、その全体が参照により本明細書に取り込まれる。
　本明細書に記載された全ての文献、特許出願、および技術規格は、個々の文献、特許出願、および技術規格が参照により取り込まれることが具体的かつ個々に記された場合と同程度に、本明細書中に参照により取り込まれる。

Claims

　イムノクロマトグラフ検査装置であって、
　検体が点着される点着領域と、前記検体が陽性か陰性かに応じて発色状態が変化する検査領域とを有する担体を備え、かつ、前記担体に試薬が供給されるカートリッジが、着脱可能に装填される装填部と、
　前記検査領域の発色状態を検知する第１検知部と、
　前記試薬の供給に起因して前記検査領域に生じる泡の発生状態を検知する第２検知部と、
　前記第１検知部によって検知された前記発色状態に基づいて、前記発色状態の変化の有無を判別するプロセッサであって、前記第２検知部によって検知された泡の発生状態に基づいて前記泡が無いと判別した場合に、前記発色状態の変化の有無を判別するプロセッサと、を備えたイムノクロマトグラフ検査装置。
　前記第２検知部は、前記検査領域と前記検査領域の周辺領域とを含む観察領域を撮像することにより、前記観察領域を含む観察画像を出力するイメージセンサである、請求項１に記載のイムノクロマトグラフ検査装置。
　前記プロセッサは、前記観察領域内の注目領域の画像の画素値の標準偏差を求め、前記標準偏差が予め設定された閾値以下である場合、前記泡が無いと判別する、請求項２に記載のイムノクロマトグラフ検査装置。
　前記プロセッサは、泡無し状態の参照画像と、前記観察領域内の注目領域の画像との画素値の差分又は比を導出し、前記差分又は比が予め設定された閾値以下である場合に、前記泡が無いと判別する、請求項２に記載のイムノクロマトグラフ検査装置。
　前記プロセッサは、前記泡が有ると判別した場合は、予め設定された第１設定時間経過後に、再度、前記泡の有無を判別する、請求項１から４のいずれか１項に記載のイムノクロマトグラフ検査装置。
　前記プロセッサは、前記カートリッジが装填された後の予め設定された時点から予め設定された第２設定時間が経過した後においても、前記泡が有る、と判別した場合は、エラーを報知する、請求項１から５のいずれか１項に記載のイムノクロマトグラフ検査装置。
　前記プロセッサは、前記第２検知部から時間差のある２枚以上の前記観察画像を取得し、前記２枚以上の前記観察画像における前記観察領域内の注目領域の画像の画素値の差分又は比を導出し、前記差分又は比が予め設定された閾値以下となった場合に、前記泡が無いと判別する、請求項２に記載のイムノクロマトグラフ検査装置。
　前記第１検知部は、前記検査領域とその周辺領域を含む観察領域を撮像する撮像部であり、前記第１検知部と前記第２検知部は兼用される、請求項１から７のいずれか１項に記載のイムノクロマトグラフ検査装置。
　前記カートリッジは、前記担体を覆うカバー部材を備え、前記カバー部材内において、前記検査領域における前記担体の表面と前記カバー部材との間に試薬が供給される０．０１～１ｍｍの隙間を有しており、前記試薬は前記隙間を流路として前記検査領域に展開される、請求項１から８のいずれか１項に記載のイムノクロマトグラフ検査装置。
　前記カートリッジは、前記担体に供給される第１試薬を保持する第１試薬保持部と、前記第１試薬が前記担体に供給された後に前記担体に供給される第２試薬を保持する第２試薬保持部とを備え、
　前記泡の発生原因である前記試薬は前記第２試薬であり、
　前記プロセッサは、前記第２試薬が前記担体に供給された後に前記泡の有無を判別する、請求項１から９のうちのいずれか１項に記載のイムノクロマトグラフ検査装置。