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WO2019088176A1 - 抗体薬物複合体効果増強剤 - Google Patents

抗体薬物複合体効果増強剤 Download PDF

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WO2019088176A1
WO2019088176A1 PCT/JP2018/040536 JP2018040536W WO2019088176A1 WO 2019088176 A1 WO2019088176 A1 WO 2019088176A1 JP 2018040536 W JP2018040536 W JP 2018040536W WO 2019088176 A1 WO2019088176 A1 WO 2019088176A1
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WO
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antibody
drug
drug complex
linker
effect
Prior art date
Application number
PCT/JP2018/040536
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English (en)
French (fr)
Inventor
広 松岡
Original Assignee
国立大学法人神戸大学
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
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Publication date
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Definitions

  • the present invention relates to means etc. for enhancing the effect of antibody drug complex.
  • the results of chemotherapy for acute myeloid leukemia (AML) are not satisfactory, and the 5-year survival rate remains at less than 40%.
  • the molecular target drug Gemtuzumab ozogamicin (Gemtuzumab Ozogamicin (GO)) is an antibody-drug complex (Antibody-Drug Conjugates: ADC) in which an anti-CD33 monoclonal antibody and calicheamicin having a potent cell-killing effect are combined. Since expression was observed in about 90% of AML cases, it was hoped to be a breakthrough molecular targeting drug for AML.
  • An object of the present invention is to provide a method for enhancing the effect of GO (gemtuzumab ozogamicin).
  • the present inventors activate lysosomes by activating lysosomes (in particular, increasing the number of intracellular lysosomes) to effectively cleave the linker (hydrazone linker) that links GO gemtuzumab and ozogamicin. It has been found that mTOR inhibitors can be suitably used to convert (especially to increase the number of intracellular lysosomes). Then, after the antibody drug complex (Antibody-Drug Conjugate: ADC) is bound to the cells recognized by the antibody, it is usually taken up into the cell by endocytosis, and in lysosome, the linker that binds the antibody and the drug is cleaved. It is recognized that activating the lysosome can enhance the effect of not only GO, but also the antibody drug complex, since the separated drug exerts its drug effect in cells, and further improvement is completed to complete the present invention. It reached.
  • ADC Antibody-Drug Conjugate
  • the present invention includes, for example, the subject matters described in the following sections.
  • Item A-1 An antibody drug complex effect enhancer comprising a lysosomal activator.
  • Item A-2 The enhancer according to Item A-1, wherein the lysosomal activator is an mTOR inhibitor.
  • Item A-3 The enhancer according to item A-1, wherein the lysosomal activator is at least one selected from the group consisting of rapamycin, temsirolimus, everolimus, PP242, Torin1, AZD2014, and MLN0128.
  • Item A-4 The enhancer according to item A-1, wherein the lysosomal activator is at least one selected from the group consisting of rapamycin, temsirolimus, everolimus, PP242, Torin1, AZD2014, and MLN0128.
  • the drug of the antibody-drug complex is an anticancer drug (eg, calicheamicin, esperamycin, emtansine, auristatin F-HPA (F-hydroxypropylamide), a derivative of DX-8951 (DXd), and monomethyl auristatin E (The enhancer according to any one of Items A-1 to A-3, which is at least one selected from the group consisting of MMAE). Item A-5.
  • an anticancer drug eg, calicheamicin, esperamycin, emtansine, auristatin F-HPA (F-hydroxypropylamide), a derivative of DX-8951 (DXd), and monomethyl auristatin E
  • the enhancer according to any one of Items A-1 to A-3, which is at least one selected from the group consisting of MMAE). Item A-5.
  • the antibody of the antibody-drug complex and the drug are linked by a linker that is cleaved in lysosome (preferably, a linker that is cleaved by an acidic cleavable linker or a linker that is cleaved by an intralysosomal enzyme)
  • a linker that is cleaved in lysosome preferably, a linker that is cleaved by an acidic cleavable linker or a linker that is cleaved by an intralysosomal enzyme
  • the enhancer according to any one of Items A-1 to A-4.
  • Item A-6 Item A-1 to A, wherein the antibody of the antibody-drug complex and the drug are linked by at least one selected from the group consisting of a hydrazone linker, a maleimide linker, a thioether linker, a peptide linker, and a combination thereof
  • the antibody of the antibody drug complex is at least one selected from the group consisting of gemtuzumab, trastuzumab, brentuximab, inotuzumab, rituximab, ofatumumab, mogamulizumab, and alemtuzumab, at least one of items A-1 to A-4.
  • Item B-1 An antibody-drug complex composition used to be administered to a patient in a state where a lysosomal activator is or has been administered.
  • Item B-2 The antibody / drug conjugate composition according to Item B-1 wherein the lysosomal activator is an mTOR inhibitor.
  • Item B-3 The antibody-drug complex composition according to Item B-1, wherein the lysosomal activating agent is at least one selected from the group consisting of rapamycin, temsirolimus, everolimus, PP242, Torin1, AZD2014, and MLN0128.
  • Item B-4 The antibody-drug complex composition according to Item B-1, wherein the lysosomal activating agent is at least one selected from the group consisting of rapamycin, temsirolimus, everolimus, PP242, Torin1, AZD2014, and MLN0128.
  • the drug of the antibody-drug complex is an anticancer drug (eg, calicheamicin, esperamycin, emtansine, auristatin F-HPA (F-hydroxypropylamide), a derivative of DX-8951 (DXd), and monomethyl auristatin E (The antibody-drug complex composition according to any one of Items B-1 to B-3, which is at least one selected from the group consisting of MMAE). Item B-5.
  • an anticancer drug eg, calicheamicin, esperamycin, emtansine, auristatin F-HPA (F-hydroxypropylamide), a derivative of DX-8951 (DXd), and monomethyl auristatin E
  • the antibody-drug complex composition according to any one of Items B-1 to B-3, which is at least one selected from the group consisting of MMAE). Item B-5.
  • the antibody of the antibody-drug complex and the drug are linked by a linker that is cleaved in lysosome (preferably, a linker that is cleaved by an acidic cleavable linker or a linker that is cleaved by an intralysosomal enzyme)
  • a linker that is cleaved in lysosome preferably, a linker that is cleaved by an acidic cleavable linker or a linker that is cleaved by an intralysosomal enzyme
  • the antibody of the antibody-drug complex is at least one selected from the group consisting of gemtuzumab, trastuzumab, brentuximab, inotuzumab, rituximab, ofatumumab, mogamulizumab, and alemtuzumab, any one of paragraphs B-1 to B-4
  • the antibody-drug complex composition according to any one of the above.
  • Item C An antibody-drug complex according to any one of Items A-1 to A-7, comprising: the enhancer according to any one of Items A-1 to A-7; and the antibody-drug complex composition according to any one of Items B-1 to B-7.
  • Item D-1 A leukemia therapeutic composition containing an anti-CD33 antibody-DNA cleaving anticancer drug complex, which is used to be administered to a patient in a state in which a lysosomal activator is or has been administered.
  • Item D-2 The leukemia therapeutic composition according to Item D-1, wherein the lysosomal activator is an mTOR inhibitor.
  • Item D-3 The leukemia therapeutic composition according to Item D-1 or D-2, wherein the mTOR inhibitor is at least one selected from the group consisting of rapamycin, temsirolimus, everolimus, PP242, Torin1, AZD2014, and MLN0128.
  • Item D-4 A leukemia therapeutic composition containing an anti-CD33 antibody-DNA cleaving anticancer drug complex, which is used to be administered to a patient in a state in which a lysosomal activator is or has been administered.
  • Item D-2 The leukemia therapeutic composition according to I
  • Item D-7 The leukemia therapeutic composition according to any one of Items D-1 to D-5, wherein the anti-CD33 antibody-DNA cleaving anticancer drug complex is gemtuzumab ozogamicin.
  • An anti-CD33 antibody-DNA cleavage anti-cancer agent complex effect enhancing composition comprising an anti-CD33 antibody-DNA cleavage anti-cancer agent complex and a lysosomal activator.
  • Item D-8. A kit for treating leukemia, comprising an anti-CD33 antibody-DNA cleavage anticancer drug complex and a lysosomal activator.
  • Item D-9. An anti-CD33 antibody-DNA cleavage anti-cancer drug complex effect enhancer comprising a lysosomal activator.
  • the therapeutic effect of GO (gemtuzumab ozogamicin) as well as the therapeutic effect of an antibody-drug complex other than GO can be enhanced, and there are few side effects.
  • the percentage of dead cells (specific apoptosis) when treated with cells at each concentration of PP242 is shown.
  • concentration PP242 analyzed by a western blot is shown.
  • the result of having evaluated the dead cell percentage (specific apoptosis)% is shown, when PP242 single treatment, GO (gemtuzumab ozogamicin) single treatment, or a combination treatment of PP242 and GO is performed on each AML cell line.
  • Acute myeloid leukemia cell line (SKM-1) is treated with AZD2014 alone, GO (gemtuzumab ozogamicin) alone, or combined treatment with AZD2014 and GO, and after culture for 36 hours, Annexin V-PI (propidium iodide) It shows the result of performing staining and evaluating dead cell percentage (specific apoptosis)% using flow cytometry.
  • the results of staining and analysis of the U937 cell line (without treatment, treatment with AZD2014 alone, treatment with GO alone, or treatment with AZD2014 and a combination of GOD) using the fluorescent dye LysoTracker (registered trademark) are shown.
  • Primary cultured cells were prepared from 6 patients with AML, and using these AML primary cultured cells (AML cells 1 to 6), it was examined whether the GO effect was enhanced by the combination of AZD2014 and GO. (Percentage of dead cells) is shown.
  • the mTOR inhibitor PP242 400 nM and the antibody / drug complex inotuzumab ozogamicin (IO) were used alone or in combination at 2 ng / ml. (Percentage of dead cells) is shown.
  • the present invention encompasses antibody drug complex effect enhancers containing lysosomal activators. (It may be referred to as “the enhancer of the present invention”.)
  • Antibody-Drug Conjugate (ADC) is bound to cells recognized by antibody, then taken up into the cell usually by endocytosis, and further in lysosomes.
  • the linker that binds the antibody and the drug is cleaved, and the separated drug exerts its drug effect in cells. Therefore, activating the lysosome can enhance the effect of the antibody-drug complex.
  • lysosome activating agent one which increases the number of lysosomes per cell (lysosome number increasing agent) is particularly preferable.
  • a lysosomal activator for example, an mTOR inhibitor is preferably mentioned.
  • mTOR is a mammalian target of rapamycin in mammals and is one of protein kinases (serine and threonine kinases) involved in intracellular signal transduction. mTOR forms a complex with multiple proteins, and the complex is called mTORC.
  • mTOR forms two functionally different complexes, mTOR complex 1 (mTORC1) and mTOR complex 2 (mTORC2).
  • the mTOR inhibitor may be an mTORC1 inhibitor, an mTORC2 inhibitor, or an mTORC dual inhibitor (ie an inhibitor that inhibits both mTORC1 and mTORC2), with the mTORC dual inhibitor being preferred.
  • mTOR inhibitors known mTOR inhibitors can be used. More specifically, for example, rapamycin, temsirolimus, everolimus, PP242 (torquinib), Torin1, AZD2014, MLN0128, ductorisive (BEZ235), AZD8055, SF2523, CZ415, PI-103, KU-0063794, tacrolimus, ridaforolimus, Voxtalisib (SAR 245409, XL 765) Analogue, Omiparisib (GSK 2126458, GSK 458), OSI-027, PF-04691502, Apitrisive (GDC-0980, RG 7422), GSK 1059615, Gedatrisive, WYE-354, Torin 2, WYE-125132 (WYE-132) , BGT226 (NVP-BGT226), P529, PP1 1, WYE-687, WAY-600, ETP
  • mTORC1 inhibitors Can. Rapamycin, temsirolimus and everolimus are mTORC1 inhibitors, and PP242, Torin1, AZD2014 and MLN0128 are mTORC dual inhibitors. mTOR inhibitors can be purchased commercially and used.
  • the lysosomal activator can be used singly or in combination of two or more.
  • the antibody-drug conjugate ADC
  • known antibody-drug conjugates can be used.
  • the antibody and the drug are linked by a linker.
  • the linker for example, a linker that is cleaved in lysosome is preferable.
  • the linker that is cleaved in lysosome includes, for example, a linker that is linked by a linker that is cleaved in an acidic state or that is cleaved by an enzyme in lysosome.
  • a linker known in the art (particularly in the antibody drug complex field) or a linker under development can be used.
  • linkers more specifically, for example, hydrazone linker (eg, semicarbazone linker), maleimide linker, thioether linker, peptide linker (eg, valine-citrulline (vc) dipeptide linker, valine-alanine (valine) And the like) and the like, and the like) and the like) and the like.
  • the linker comprised by these combination is also preferable.
  • a peptide linker and a maleimide linker can be combined and used as one linker (for example, a maleimide linker can be disposed between an antibody and a peptide linker).
  • linkers have a structure including the structures (semicarbazone, maleimide, hydrazone, thioether, valine-citrulline dipeptide, valine-alanine dipeptide, glycyn-glycyn-phenylalanyn-glycyn (GGFG) peptide etc.) described in each of them.
  • GGFG glycyn-glycyn-phenylalanyn-glycyn
  • linker has a structure including the structures (semicarbazone, maleimide, hydrazone, thioether, valine-citrulline dipeptide, valine-alanine dipeptide, glycyn-glycyn-phenylalanyn-glycyn (GGFG) peptide etc.) described in each of them.
  • the hydrazone linker is stable in serum and, after internalization into cells, is hydrolyzed in the acidic environment within the lysosome
  • Thioether linkers are not easily cleaved, have excellent stability in serum, and are difficult to release drugs in serum, and thus are considered to be less likely to cause side effects. After being taken up by tumor cells, the whole antibody is degraded in lysosome to release toxin.
  • a linker such as Fleximer linker (Mersana Therapeutics) can also be used.
  • linkers listed in, for example, Int J Mol Sci. 2016 Apr; 17 (4): 561 or linkers that can be easily conceived from the known linkers can be used.
  • the linker contained in the antibody drug complex may be one kind alone, or two or more kinds may be combined.
  • One or more of the above linkers may be disposed in one linker.
  • all of the linkers that bind the antibody and the drug may be the same, or two or more types of linkers may be used.
  • the drug (payload) of the antibody-drug complex is not particularly limited, but an anticancer drug is preferably exemplified.
  • an anticancer drug for example, one which exerts an anticancer effect by cleaving DNA (a DNA cleaving anticancer agent) is preferably mentioned, but there is no particular limitation.
  • anticancer agents more specifically, for example, calicheamicin, esperamycin, emtansine, auristatin F-HPA (F-hydroxypropylamide), a derivative of DX-8951 (DXd), monomethyl auristatin E (MMAE) and the like can be mentioned.
  • the antibody may be a monoclonal antibody or a polyclonal antibody, preferably a monoclonal antibody.
  • the antibody is preferably a chimeric antibody, a humanized antibody or a fully humanized antibody (human antibody).
  • These antibodies can be produced by known methods or methods easily conceived from known methods. Although not particularly limited, the contents described in, for example, WO2008 / 026603, WO2009 / 041643 and the like can be referred to.
  • the antibody and the drug that make up the antibody drug complex are related to each other. That is, it is preferable that the antibody recognizes a site where the drug effect is particularly required.
  • the drug of the antibody drug complex is an anticancer drug
  • the antibody of the antibody drug complex is preferably an antibody that recognizes a cancer cell, and more preferably an antibody that specifically binds to a cancer cell.
  • An antibody that recognizes such cancer cells can be appropriately prepared using known cancer cell markers as antigens.
  • anti-CD33 antibody, anti-CD30 antibody, anti-CD22 antibody, anti-Her2 antibody and the like can be mentioned.
  • anti-Her2 antibody and the like are particularly preferable.
  • gemtuzumab trastuzumab, brentuximab, inotuzumab, rituximab, ofatumumab, mogamulizumab, alemtuzumab and the like are preferably mentioned.
  • the antibody-drug complex more specifically, for example, Gemtuzumab ozogamicin (product name Myrotag (registered trademark)), Trastuzumab emtansine (product name Kadthyra (registered trademark)), XMT-1522, DS-8201a, Brentuximab bedotin (product name: Adcetris (registered trademark)), inotuzumab ozogamicin (product name: Besponsa), and the like.
  • a known antibody drug conjugate can be searched, and a known antibody drug conjugate obtained as a search result can also be preferably used in the present invention.
  • the known antibody-drug conjugates are grouped together, and these can also be preferably used in the present invention.
  • the potentiator of the present invention may consist of only the lysosomal activator, or may contain other components other than the lysosomal activator.
  • the other ingredients are not particularly limited, and pharmaceutically acceptable bases, carriers, additives (eg, excipients, binders, disintegrants, lubricants, solvents, sweeteners, coloring agents, flavoring agents, odorants) Agents, surfactants, moisturizers, preservatives, pH adjusters, thickening agents, and the like.
  • bases, carriers, additives eg, excipients, binders, disintegrants, lubricants, solvents, sweeteners, coloring agents, flavoring agents, odorants
  • surfactants e.g, surfactants, moisturizers, preservatives, pH adjusters, thickening agents, and the like.
  • the form of the preparation is also not particularly limited, and the active ingredient and other ingredients are mixed in a conventional manner, for example, tablets, coated tablets, powders, granules, fine granules, capsules, pills, solutions, suspensions, emulsions It can be prepared into a formulation such as a jelly, a chewable, a soft tablet and the like.
  • a route of administration of the enhancer of the present invention for example, oral administration or intravenous administration is preferable.
  • the enhancer of the present invention is preferably administered to a patient in an amount capable of activating (particularly increasing the number of lysosomes) to the patient by the lysosomal activator contained, and various lysosomal activators based on the degree of activation.
  • the dose and route of administration can be set as appropriate. And according to this, the dose and administration route of the enhancer of this invention can also be set suitably.
  • the dose and administration route used in the administration studies can also be appropriately set by reference.
  • AZD2014 is an orally administrable drug in clinical trials by AstraZeneca, and Phase 1 test results including PK results have already been published in the literature (above-mentioned non-patent document 2).
  • the recommended dose (recommended dose, RD) is 50 mg twice a day, which can be used as a reference. For example, it can be about 50 to 200 mg, 60 to 180 mg, 70 to 160 mg, 80 to 140 mg, or 90 to 120 mg per day for adults.
  • the daily dose may be administered at once, or may be divided into two, three, or four times a day.
  • the present invention also relates to an antibody-drug complex composition (composition containing an antibody-drug complex), which is used to be administered to a patient to which a lysosomal activating agent has been or has been administered.
  • the antibody drug complex composition may be a composition consisting only of the antibody drug complex, or may further contain other components.
  • the other components are not particularly limited, and, for example, the same components as the other components in the lysosomal activator described above can be used.
  • a pharmaceutically acceptable carrier for example, sterile water, physiological saline, vegetable oil, emulsifier, suspension agent, surfactant, stabilizer, flavoring agent, excipient, vehicle, preservative, binder, binder Etc.
  • sterile compositions for injection can be formulated according to the usual formulation practices using vehicles such as distilled water for injection.
  • the aqueous solution for injection includes, for example, physiological saline, glucose, and isotonic solutions containing other adjuvants (eg, D-sorbitol, D-mannose, D-mannitol, sodium chloride).
  • Suitable solubilizers may be used in combination with, for example, alcohols (ethanol etc.), polyalcohols (propylene glycol, polyethylene glycol etc.), nonionic surfactants (polysorbate 80 (TM), HCO-50 etc.).
  • oily liquid examples include sesame oil, soybean oil and the like, and benzyl benzoate and / or benzyl alcohol may be used in combination as a solubilizing agent. They may also be formulated with buffers (eg, phosphate buffer and sodium acetate buffer), soothing agents (eg, procaine hydrochloride), stabilizers (eg, benzyl alcohol and phenol), and antioxidants.
  • buffers eg, phosphate buffer and sodium acetate buffer
  • soothing agents eg, procaine hydrochloride
  • stabilizers eg, benzyl alcohol and phenol
  • the lysosomal active agent and antibody-drug complex used in the antibody-drug complex composition are the same as described above.
  • a composition containing an anti-CD33 antibody-DNA cleaving anticancer drug complex (that is, a complex in which an anti-CD33 antibody and a DNA cleaving anticancer drug are bound) is particularly preferable as the antibody drug complex composition.
  • an anti-CD33 antibody-DNA cleaving anticancer drug complex that is, a complex in which an anti-CD33 antibody and a DNA cleaving anticancer drug are bound
  • the antibody drug complex composition is particularly preferable as the antibody drug complex composition.
  • a composition having a leukemia cell recognition antibody (preferably a leukemia cell specific antibody) -anticancer drug complex is useful as a leukemia treatment composition.
  • a composition having a leukemia cell recognition antibody (preferably a leukemia cell specific antibody) -anticancer drug complex is useful as a leukemia treatment composition.
  • the leukemia therapeutic composition of the present invention such a composition may be referred to as "the leukemia therapeutic composition of the present invention”.
  • a composition containing an anti-CD33 antibody-DNA cleaving anticancer drug complex is particularly useful as a leukemia therapeutic composition.
  • the leukemia composition of the present invention is not limited thereto, and those skilled in the art are not For example, it can be understood that the applicable portion of the antibody-drug complex composition using different antibodies and / or drugs is also applicable to the antibody-drug complex composition using different antibodies and / or drugs.
  • anti-CD33 antibody-DNA cleavage anticancer drug complex means “cancer cell recognition antibody (preferably cancer cell specific antibody) -anticancer drug complex”, “leukemic cell recognition” It can be read as an antibody (preferably leukemia cell specific antibody) -anticancer drug complex "," leukemia cell recognition antibody (preferably leukemia cell specific antibody) -DNA cleavage anticancer drug complex "and the like.
  • the anti-CD33 antibody may be any antibody that recognizes the CD33 antigen, and is preferably an antibody that specifically recognizes the CD33 antigen.
  • the antibody may be a polyclonal antibody or a monoclonal antibody, preferably a monoclonal antibody.
  • the antibody is preferably a chimeric antibody, a humanized antibody or a fully humanized antibody (human antibody).
  • These antibodies can be produced by known methods or methods easily conceived from known methods. Although not particularly limited, the contents described in, for example, WO2008 / 026603, WO2009 / 041643 and the like can be referred to.
  • DNA cleaving anticancer agents are anticancer agents that exhibit an anticancer effect by cleaving DNA.
  • an anticancer agent a known one can be preferably used. Among them, calicheamicin or esperamycin is preferred, and calicheamicin (especially ozogamicin) is more preferred.
  • the anti-CD33 antibody and the DNA cleaving anticancer agent are preferably linked by a linker that is cleaved (hydrolyzed) in an acidic state, or linked by a linker that is cleaved by an enzyme in lysosome.
  • a linker examples include a maleimide linker, a hydrazone linker (for example, a semicarbazone linker), a thioether linker and the like, and among them, a hydrazone bond is preferable.
  • the anti-CD33 antibody-DNA cleaving anticancer drug complex for example, a complex having a structure in which the anti-CD33 antibody is bound to the DNA cleaving anticancer drug by the binding can be preferably used.
  • Gemtuzumab ozogamicin GO: trade name “Mylotag” (registered trademark) is preferable.
  • the leukemia to be treated with the composition for treating leukemia of the present invention is preferably leukemia (CD33 positive leukemia) in which leukemia cells expressing anti-CD33 antigen are present (CD33 positive leukemia in acute myeloid leukemia (AML)). It is particularly preferred for treatment because of the high proportion of cells.
  • the anti-CD33 antibody-DNA cleaving anticancer drug complex can be used singly or in combination of two or more.
  • the leukemia therapeutic composition of the present invention is used to be administered to a patient in a (i) state or (ii) a state in which a lysosomal activator is administered. That is, the leukemia therapeutic composition of the present invention may be used to (i) be administered to a patient to which a lysosomal activator has already been administered, or (ii) a lysosomal activator has not been administered yet. May be used to be administered to a patient scheduled to be administered. In any case, the administration interval between the lysosomal activator and the leukemia therapeutic composition of the present invention is not particularly limited as long as the effects of the present invention are not impaired.
  • the administration interval may be about two weeks, 1.5 weeks, one week, 6, 5, 4, 3, 2, or 1 day.
  • the interval may be such that the body can reach leukemia cells.
  • the administration interval between the lysosomal activator and the leukemia therapeutic composition of the present invention is preferably within 6, 5, 4, 3, 2, or 1 hour, and more preferably within 30 minutes. It is further preferred that it be within 15 minutes, and even more preferred that it be administered sequentially or simultaneously within 3 minutes.
  • the use of (ii) above includes co-administration with a lysosomal activator.
  • the dosage of the leukemia therapeutic composition of the present invention can be appropriately set based on the amount of the anti-CD33 antibody-DNA cleavage anticancer drug complex contained. That is, the dose of the leukemia therapeutic composition of the present invention may be adjusted so that the dose of the anti-CD33 antibody-DNA cleaving anticancer drug complex contained can exert an anticancer effect.
  • intravenous administration is preferred as the administration route.
  • the dose of GO is preferably 1 to 20 mg / m 2 per adult day, 2, 3, 4, 5 6, 7, 8, 9, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 or 20 mg / m 2 is more preferable.
  • multiple administrations for example, 2, 3, 4 or 5 administrations
  • lysosomal activating agent it is preferable to administer to the patient an amount capable of activating lysosome (in particular, increase the number of lysosomes) to the lysosomal activating agent, and the dosage and administration route of various lysosomal activating agents are appropriately determined It can be set.
  • the dose and administration route used in the administration studies can also be appropriately set by reference.
  • AZD2014 is an orally administrable drug in clinical trials by AstraZeneca, and Phase 1 test results including PK results have already been published in the literature (above-mentioned non-patent document 2).
  • the recommended dose (recommended dose, RD) is 50 mg twice a day, which can be used as a reference. For example, it can be about 50 to 200 mg, 60 to 180 mg, 70 to 160 mg, 80 to 140 mg, or 90 to 120 mg per day for adults.
  • the daily dose may be administered at once, or may be divided into two, three, or four times a day.
  • oral administration or intravenous administration is preferred.
  • a composition containing GO which is used to be administered to a patient to which AZD 2014 has been administered or to be administered, is given as a particularly preferred embodiment of the leukemia therapeutic composition of the present invention.
  • the dose of AZD 2014 be the above dose and the number of doses
  • the dose of GO be also the above dose and the number of doses.
  • a preferred example is a dosing schedule in which GOD is administered 2 or 3 times in 2 weeks (9 to 10 mg in a single dose), and AZD 2014 is dosed twice daily at around 50 mg twice daily. Can.
  • the leukemia therapeutic composition of the present invention may contain, in addition to the anti-CD33 antibody-DNA cleavage anticancer drug complex, a pharmaceutically acceptable carrier and the like.
  • a pharmaceutically acceptable carrier include sterile water and physiological saline, vegetable oils, emulsifiers, suspensions, surfactants, stabilizers, flavors, excipients, vehicles, preservatives, binders, and the like.
  • sterile compositions for injection can be formulated according to the usual formulation practices using vehicles such as distilled water for injection.
  • the aqueous solution for injection includes, for example, physiological saline, glucose, and isotonic solutions containing other adjuvants (eg, D-sorbitol, D-mannose, D-mannitol, sodium chloride).
  • Suitable solubilizers may be used in combination with, for example, alcohols (ethanol etc.), polyalcohols (propylene glycol, polyethylene glycol etc.), nonionic surfactants (polysorbate 80 (TM), HCO-50 etc.).
  • examples of the oily liquid include sesame oil, soybean oil and the like, and benzyl benzoate and / or benzyl alcohol may be used in combination as a solubilizing agent. They may also be formulated with buffers (eg, phosphate buffer and sodium acetate buffer), soothing agents (eg, procaine hydrochloride), stabilizers (eg, benzyl alcohol and phenol), and antioxidants.
  • the present invention provides an anti-CD33 antibody-DNA cleavage anticancer drug complex effect enhancing composition
  • an anti-CD33 antibody-DNA cleavage anticancer drug complex and a lysosomal activator ie, an anti-CD33 antibody—
  • compositions that have an enhanced effect compared to administration of a DNA cleaving anticancer drug complex alone.
  • the anti-CD33 antibody-DNA cleavage anticancer drug complex and the lysosomal activator included in the effect enhancing composition are the same as described above.
  • the effect-enhancing composition may contain other components other than the anti-CD33 antibody-DNA cleavage anticancer drug complex and the lysosomal activator.
  • the same pharmaceutically acceptable carrier in the above-mentioned leukemia therapeutic composition can be used.
  • the administration route of the effect enhancing composition is preferably intravenous administration.
  • the description is also valid for antibody-drug complex compositions using different antibodies and / or drugs. That is, the present invention also encompasses the antibody drug conjugate effect enhancing composition, which comprises an antibody drug conjugate and a lysosomal activator.
  • the present invention also encompasses a kit for treating leukemia, which comprises an anti-CD33 antibody-DNA cleavage anticancer drug complex and a lysosomal activator.
  • the anti-CD33 antibody-DNA cleaving anticancer drug complex and the lysosomal activator provided in the kit are the same as described above.
  • the kit may also contain equipment other than the anti-CD33 antibody-DNA cleavage anticancer drug complex and the lysosomal activator. Such equipment is not particularly limited, and examples thereof include a drip needle and a disinfectant (for example, ethanol).
  • the description is also valid for antibody-drug complex compositions using different antibodies and / or drugs. That is, the present invention also encompasses a kit for treating a disease to be treated by a drug of antibody drug complex, comprising an antibody drug complex and a lysosomal activator.
  • the present invention also encompasses an anti-CD33 antibody-DNA cleavage anti-cancer drug complex effect enhancer comprising a lysosomal activator.
  • the lysosomal activator is the same as described above.
  • the anti-CD33 antibody-DNA cleaving anticancer drug complex to be enhanced is the same as described above.
  • the effect enhancer may include other components other than the lysosomal activator. As such other components, for example, the same pharmaceutically acceptable carrier in the above-mentioned leukemia therapeutic composition can be used.
  • the description is also valid for antibody-drug complex compositions using different antibodies and / or drugs. That is, the present invention also encompasses antibody drug complex effect enhancers, including lysosomal activators.
  • the term “comprising” also includes “consisting essentially of” and “consisting of” (The term “comprising” includes “consisting essentially of” and “consisting of.”). Also, the contents described in the documents and web pages listed in the present specification are incorporated herein by reference. In addition, various characteristics (properties, structures, functions, etc.) described for each embodiment of the present invention described above may be combined in any way in specifying the subject matter included in the present invention. That is, the present invention includes all the subject matter consisting of all combinations of the combinable features described in the present specification.
  • SKNO-1 JCRB Cell Bank, Tokyo, Japan
  • U937 ATCC, Manassas, VA, USA
  • THP-1 ECACC, PD, UK
  • SKM-1 established by the inventor
  • Non-Patent Document 3 Investigation of mTOR Inhibitor Use Concentration It is suggested in the above-mentioned Non-Patent Document 3 that some mTOR inhibitors have the effect of increasing the number of lysosomes per cell.
  • the mTOR inhibitor PP242 used in the literature was selected as the mTOR inhibitor used in the present invention, etc., and the PP242 concentration that did not cause cell damage and exhibits the mTOR inhibitory action was examined.
  • PP242 purchased and used a commercial item. The cells were cultured at 37 ° C., 5% CO 2 and passaged every 48 hours using RPMI 1640 as a culture medium, and used for examination.
  • 100-600 nM of PP242 is added to culture medium of acute myeloid leukemia cell line (U937), and culture is performed for 24 hours, and the concentration which does not cause cell damage as compared with the case of not adding PP242 (control) investigated.
  • the degree of cell damage was determined by comparing the% specific apoptosis.
  • the Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit (Nacalai Tesque, Inc., Japan) was used to examine the percentage of dead cells.
  • Specific apoptosis is the percentage of dead cells calculated by subtracting the natural cell death in the control (normally 4 to 5% of cell death is usually observed naturally in cell line culture) from the cell death measurement value by flow cytometry. It is.
  • Annexin V-FITC PI Propidium Iodide
  • dead cells were determined by flow cytometry.
  • the examination was performed using a kit: Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit (Nacalai Tesque, Inc., Japan).
  • the degree of phosphorylation of AKT protein and S6K protein was analyzed by Western blot. It is well known that inhibition of mTOR reduces phosphorylation of AKT protein and S6K protein, and the phosphorylation is widely used for mTOR inhibition studies. A decrease in phosphorylated S6K indicates mTORC1 inhibition and a decrease in phosphorylated AKT indicates mTORC2 inhibition.
  • the source of the antibody used for Western blot analysis is described below.
  • FIG. 1 shows the specific apoptosis% (FIG. 1a) and the result of Western blot analysis (FIG. 1b) in the examination.
  • FIG. 1a “Ctr” indicates a control
  • P100 indicates PP242 100 nM
  • FIG. 1 b “p-AKT” indicates phosphorylated AKT protein
  • FIG. 1b “(p-) 70S6k” indicates (phosphorylated) S6K protein. From the results, it was confirmed that almost no cell damage occurred at 100 to 500 nM of PP242 (FIG. 1a), and an mTOR inhibitory effect was obtained at 200 to 500 nM (FIG. 1b). Based on the results, PP242 treatment was performed at a concentration of 500 nM unless otherwise specified in the following study.
  • the GO treatment concentration was 0.5 ⁇ g / ml for THP-1 and SKNO-1, and 2.5 ⁇ g / ml for other cell lines. This concentration setting is based on the following circumstances.
  • the blood concentration (Pharmacokinetics, PK) under administration of an approved dose of GO (9 mg / m 2 twice a day for 14 days or more) has been reported (MIROTAGG® Interview Form).
  • PK Pharmacokinetics, PK
  • GO was administered at 0.5 ⁇ g / ml in a cell line in which the effect was strongly observed.
  • the GO treatment concentration for each AML cell line was the same in the subsequent studies unless otherwise stated.
  • Lysosomes in Acute Myeloid Leukemia (AML) Cell Line The AML cells were stained with the fluorescent dye LysoTracker (registered trademark) (Invitrogen) to examine lysosomes.
  • the fluorescent dye functions to stain an acidic structure in cells and is considered to stain normal acidic lysosome.
  • lysosomes of U937 and THP-1 were stained by the fluorescence expression. The results are shown in FIG. In the left panel of FIG. 3, cell corners are blue and lysosomes are red. Further, the right side of FIG. 3 is a graph of the intensity of red fluorescence.
  • LysoTracke fluorescent spot in AML cells was very small and thus the number of lysosomes was small.
  • LysoTracke fluorescent spots were enhanced about 1.5 times in the U937 cell line, and with the PP242 and GO combined treatment, the LysoTracke fluorescence remained enhanced. Similar results were obtained with the THP-1 cell line.
  • the action mechanism of GO which is an antibody-drug conjugate (ADC) is digestion of a linker in lysosome.
  • the linker of GO is a hydrazone linker which is hydrolyzed in an acidic environment, and the linker links the anti-CD33 monoclonal antibody and calicheamicin (ozogamicin).
  • ADC antibody-drug conjugate
  • the phagocytes fuse with lysosomes to become secondary phagocytes, and the linker is hydrolyzed in the acidic environment in lysosomes to release calicheamicin to become active form. Free and active calicheamicin binds to DNA in the nucleus, causing DNA double strand breaks, leading to cell death (FIG. 4). Thus, retention of lysosomal function in leukemia cells is important for GO effect expression.
  • AZD2014 is a drug under investigation by AstraZeneca, and Phase 1 test results including PK results have already been published in the literature (above Non-Patent Document 2), and can be purchased from a reagent company.
  • the recommended dose (recommended dose, RD) for humans defined in the Phase 1 study of AZD 2014 is 50 mg twice daily.
  • Acute myelogenous leukemia cell line (U937 or SKM-1) is treated with AZD2014 alone, GO (gemtuzumab ozogamicin) alone, or combined treatment with AZD2014 and GO, and cultured for 36 hours after Annexin V-PI (propidium) Iodide) staining was performed to assess the% specific apoptosis using flow cytometry.
  • the results are shown in Figure 5a (U937) and Figure 5b (SKM-1).
  • lysosomes are stained by staining each U937 cell (without treatment, treatment with AZD2014 alone, treatment with GO alone, or treatment with AZD2014 in combination with AZD2014) with the fluorescent dye LysoTracker (registered trademark) (Invitrogen) went.
  • LysoTracker registered trademark
  • FIG. 6 cell nuclei are blue and lysosomes are red.
  • the right side of FIG. 6 is a graph of the intensity of red fluorescence (a relative value with the control being 1).
  • primary cultured cells are prepared from 6 patients with AML, and using the AML primary cultured cells (AML cells 1 to 6), the GO effect is enhanced by the combination of AZD2014 and GO in the same manner as above. We examined whether it was recognized. The results (percentage of dead cells) are graphed and shown in FIG. Also from the results, it can be confirmed that the GO effect is enhanced by the combined use of the mTOR inhibitor (AZD2014) and GO.
  • the preparation of primary culture cells was performed according to the method described in the above-mentioned supplementary materials and methods of Non-Patent Document 1 (Leukemia (2013) 27, 233-235).
  • MLN 0128 also referred to as INK128 or TAK-228
  • AML acute myeloid leukemia
  • the lysosomal activator (in particular, the mTOR inhibitor) exerts an effect of enhancing the effect of the antibody-drug complex.

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Abstract

ＧＯ（ゲムツズマブ・オゾガマイシン）等の抗体薬物複合体の効果増強方法が提供される。具体的には、リソソーム活性化剤を含有する、抗体薬物複合体効果増強剤が提供される。

Description

抗体薬物複合体効果増強剤
　本発明は、抗体薬物複合体の効果を増強する手段等に関する。
　急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）に対する化学療法の成績は満足すべきものではなく、５年生存率は４０％弱に留まっている。分子標的薬ゲムツズマブ・オゾガマイシン（Ｇｅｍｔｕｚｕｍａｂ　Ｏｚｏｇａｍｉｃｉｎ：ＧＯ）は、抗ＣＤ３３　モノクローナル抗体と強力な殺細胞効果を持つカリケアマイシンを結合させた抗体薬物複合体　（Ａｎｔｉｂｏｄｙ－Ｄｒｕｇ　Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ：ＡＤＣ）であり、ＣＤ３３はＡＭＬ症例の約９０％で発現が認められるため、ＡＭＬに対する画期的な分子標的薬として期待を集めた。２０００年に米国にて再発・難治性高齢者ＡＭＬに対して承認され、２００５年には我が国においても再発・難治性　ＡＭＬに対して単剤でのＧＯ投与が承認された。ただ、再発・難治性ＡＭＬに対する単剤での５年生存率は３０％弱に留まっていた。そこで、初発ＡＭＬに対する従来の標準治療法　Ｄａｕｎｏｒｕｂｉｃｉｎ＋ＡｒａＣへＧＯを上乗せすることにより効果増強を図るべく臨床試験（第三相臨床試験（ＳＷＯＧ　Ｓ０１０６　試験））が行われたが、ＧＯ上乗せ群でＡＭＬに対する効果は変らず、むしろ致死的な副作用発現が多かった事から、２０１０年に発売元Ｐｆｉｚｅｒ社は米国市場からＧＯを自主的に取り下げた（なお、その後、ＧＯは２０１７年９月１４日にＦＤＡによって再承認されている）。ただし、日本では承認続行となっていて使用されている。
国際公開第２００８／０２６６０３号 国際公開第２００９／０４１６４３号
Ｌｅｕｋｅｍｉａ　（２０１３）　２７，　２３３-２３５ Ｃｌｉｎ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ．　２０１５　Ａｕｇｕｓｔ　１；　２１（１５）：　３４１２-３４１９ Ｃｅｌｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　（２０１３）　２３：５０８－５２３
　本発明は、ＧＯ（ゲムツズマブ・オゾガマイシン）の効果増強方法の提供を課題とする。
　本発明者らは、リソソームを活性化する（特に細胞内リソソーム数を増加させる）ことで、ＧＯのゲムツズマブとオゾガマイシンとを結合するリンカー（ヒドラゾンリンカー）が効果的に切断されること、リソソームを活性化する（特に細胞内リソソーム数を増加させる）ためにｍＴＯＲ阻害剤を好適に用い得ること、を見出した。そして、抗体薬物複合体（Ａｎｔｉｂｏｄｙ－Ｄｒｕｇ　Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ：ＡＤＣ）は抗体が認識した細胞に結合した後、通常エンドサイトーシスにより細胞に取り込まれ、さらにリソソームにおいて抗体と薬物とを結合するリンカーが切断され、分離した薬物が細胞内で薬効を発揮することから、リソソームを活性化させることで、ＧＯに限らず抗体薬物複合体の効果を増強できることを認識し、さらに改良を重ねて本発明を完成させるに至った。
　本発明は例えば以下の項に記載の主題を包含する。
項Ａ－１．
リソソーム活性化剤を含有する、抗体薬物複合体効果増強剤。
項Ａ－２．
リソソーム活性化剤が、ｍＴＯＲ阻害剤である、項Ａ－１に記載の増強剤。
項Ａ－３．
リソソーム活性化剤が、ラパマイシン、テムシロリムス、エベロリムス、ＰＰ２４２、Ｔｏｒｉｎ１、ＡＺＤ２０１４、及びＭＬＮ０１２８からなる群より選択される少なくとも１種である、項Ａ－１に記載の増強剤。
項Ａ－４．
前記抗体薬物複合体の薬物が抗ガン剤（例えば、カリケアマイシン、エスペラマイシン、エムタンシン、ａｕｒｉｓｔａｔｉｎ　Ｆ－ＨＰＡ（F-hydroxypropylamide）、ａ　ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ　ｏｆ　ＤＸ－８９５１　（ＤＸｄ）、及びモノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）からなる群より選択される少なくとも１種）である、項Ａ－１～Ａ－３のいずれかに記載の増強剤。
項Ａ－５．
前記抗体薬物複合体の抗体と薬物とが、リソソーム内で切断されるリンカー（好ましくは、酸性状態で切断されるリンカーにより結合されているか、あるいはリソソーム内酵素により切断されるリンカー）で結合されている、項Ａ－１～Ａ－４のいずれかに記載の増強剤。
項Ａ－６．
前記抗体薬物複合体の抗体と薬物とが、ヒドラゾンリンカー、マレイミドリンカー、チオエーテルリンカー、ペプチドリンカー、及びこれらの組み合わせからなる群より選択される少なくとも１種により結合されている、項Ａ－１～Ａ－４のいずれかに記載の増強剤。
項Ａ－７．
前記抗体薬物複合体の抗体が、ゲムツズマブ、トラスツズマブ、ブレンツキシマブ、イノツズマブ、リツキシマブ、オファツムマブ、モガムリズマブ、及びアレムツズマブからなる群より選択される、少なくとも１種である、項Ａ－１～Ａ－４のいずれかに記載の増強剤。
項Ｂ－１．
リソソーム活性化剤が投与された状態若しくは投与される状態の患者に投与されるように用いられる、抗体薬物複合体組成物。
項Ｂ－２．
リソソーム活性化剤が、ｍＴＯＲ阻害剤である、項Ｂ－１に記載の抗体薬物複合体組成物。
項Ｂ－３．
リソソーム活性化剤が、ラパマイシン、テムシロリムス、エベロリムス、ＰＰ２４２、Ｔｏｒｉｎ１、ＡＺＤ２０１４、及びＭＬＮ０１２８からなる群より選択される少なくとも１種である、項Ｂ－１に記載の抗体薬物複合体組成物。
項Ｂ－４．
前記抗体薬物複合体の薬物が抗ガン剤（例えば、カリケアマイシン、エスペラマイシン、エムタンシン、ａｕｒｉｓｔａｔｉｎ　Ｆ－ＨＰＡ（F-hydroxypropylamide）、ａ　ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ　ｏｆ　ＤＸ－８９５１　（ＤＸｄ）、及びモノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）からなる群より選択される少なくとも１種）である、項Ｂ－１～Ｂ－３のいずれかに記載の抗体薬物複合体組成物。
項Ｂ－５．
前記抗体薬物複合体の抗体と薬物とが、リソソーム内で切断されるリンカー（好ましくは、酸性状態で切断されるリンカーにより結合されているか、あるいはリソソーム内酵素により切断されるリンカー）で結合されている、項Ｂ－１～Ｂ－４のいずれかに記載の抗体薬物複合体組成物。
項Ｂ－６．
前記抗体薬物複合体の抗体と薬物とが、ヒドラゾンリンカー、マレイミドリンカー、チオエーテルリンカー、ペプチドリンカー、及びこれらの組み合わせからなる群より選択される少なくとも１種により結合されている、項Ｂ－１～Ｂ－４のいずれかに記載の抗体薬物複合体組成物。
項Ｂ－７．
前記抗体薬物複合体の抗体が、ゲムツズマブ、トラスツズマブ、ブレンツキシマブ、イノツズマブ、リツキシマブ、オファツムマブ、モガムリズマブ、及びアレムツズマブからなる群より選択される、少なくとも１種である項Ｂ－１～Ｂ－４のいずれかに記載の抗体薬物複合体組成物。
項Ｃ．
項Ａ－１～Ａ－７のいずれかに記載の増強剤と、項Ｂ－１～Ｂ－７のいずれかに記載の抗体薬物複合体組成物と、を備えた、前記抗体薬物複合体の薬物が治療対象とする疾患の治療用組成物若しくは治療用キット。
項Ｄ－１．
リソソーム活性化剤が投与された状態若しくは投与される状態の患者に投与されるように用いられる、抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体を含有する白血病治療組成物。
項Ｄ－２．
リソソーム活性化剤が、ｍＴＯＲ阻害剤である、項Ｄ－１に記載の白血病治療組成物。
項Ｄ－３．
ｍＴＯＲ阻害剤が、ラパマイシン、テムシロリムス、エベロリムス、ＰＰ２４２、Ｔｏｒｉｎ１、ＡＺＤ２０１４、及びＭＬＮ０１２８からなる群より選択される少なくとも１種である、項Ｄ－１又はＤ－２に記載の白血病治療組成物。
項Ｄ－４．
白血病が急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である、項Ｄ－１～Ｄ－３のいずれかに記載の白血病治療組成物。
項Ｄ－５．
ＤＮＡ切断抗ガン剤がカリケアマイシン又はエスペラマイシンである、項Ｄ－１～Ｄ－４のいずれかに記載の白血病治療組成物。
項Ｄ－６．
抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体が、ゲムツズマブ・オゾガマイシンである、項Ｄ－１～Ｄ－５のいずれかに記載の白血病治療組成物。
項Ｄ－７．
抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体と、リソソーム活性化剤と、を含む、抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体効果増強組成物。
項Ｄ－８．
抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体と、リソソーム活性化剤と、を備えた、白血病治療用キット。
項Ｄ－９．
リソソーム活性化剤を含む、抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体効果増強剤。
　本発明によれば、ＧＯ（ゲムツズマブ・オゾガマイシン）の治療効果はもちろんのこと、ＧＯに限らない抗体薬物複合体の治療効果を増強させることができ、また副作用の懸念も少ない。
各濃度ＰＰ２４２で細胞処理した時の死細胞割合（ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）％を示す。 各濃度ＰＰ２４２で細胞処理した時のＡＫＴタンパク質及びＳ６Ｋタンパク質のリン酸化の程度をウエスタンブロットで解析した結果を示す。 各ＡＭＬ細胞株に対して、ＰＰ２４２単独処理、ＧＯ（ゲムツズマブ・オゾガマイシン）単独処理、又はＰＰ２４２及びＧＯの併用処理を行った際の、死細胞割合（ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）％を評価した結果を示す。 各ＡＭＬ細胞株（処理なし、ＰＰ２４２単独処理、ＧＯ単独処理、又はＰＰ２４２及びＧＯ併用処理）を蛍光色素ＬｙｓｏＴｒａｃｋｅｒ（登録商標）により染色し解析した結果を示す。 ＧＯ（ゲムツズマブ・オゾガマイシン）の作用機序を示す。 急性骨髄性白血病細胞株（Ｕ９３７）に対して、ＡＺＤ２０１４単独処理、ＧＯ（ゲムツズマブ・オゾガマイシン）単独処理、又はＡＺＤ２０１４及びＧＯの併用処理、を行い、３６時間培養後にＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＰＩ（ｐｒｏｐｉｄｉｕｍ　ｉｏｄｉｄｅ）染色を施行して、フローサイトメトリーを用いて、死細胞割合（ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）％を評価した結果を示す。 急性骨髄性白血病細胞株（ＳＫＭ－１）に対して、ＡＺＤ２０１４単独処理、ＧＯ（ゲムツズマブ・オゾガマイシン）単独処理、又はＡＺＤ２０１４及びＧＯの併用処理、を行い、３６時間培養後にＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＰＩ（ｐｒｏｐｉｄｉｕｍ　ｉｏｄｉｄｅ）染色を施行して、フローサイトメトリーを用いて、死細胞割合（ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）％を評価した結果を示す。 Ｕ９３７細胞株（処理なし、ＡＺＤ２０１４単独処理、ＧＯ単独処理、又はＡＺＤ２０１４及びＧＯ併用処理）を蛍光色素ＬｙｓｏＴｒａｃｋｅｒ（登録商標）により染色し解析した結果を示す。 ＡＭＬ患者６名から初代培養細胞（プライマリーセル）を調製し、当該ＡＭＬ初代培養細胞（ＡＭＬｃｅｌｌ　１～６）を用いて、ＡＺＤ２０１４とＧＯとの併用によりＧＯ効果の増強が認められるかを検討した結果（死細胞割合）を示す。 ＳＫＭ－１細胞を用いて、４８時間培養後にＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＰＩ（ｐｒｏｐｉｄｉｕｍ　ｉｏｄｉｄｅ）染色を施すことにより、ＩＮＫ１２８とＧＯとの併用によりＧＯ効果の増強が認められるかを検討した結果（死細胞割合）を示す。 Ｄａｕｄｉ細胞を用いて、ｍＴＯＲ阻害剤ＰＰ２４２を４００ｎＭ、及び抗体薬物複合体イノツズマブ オゾガマイシン（ＩＯ）を２ｎｇ／ｍｌを単独使用又は併用し、これらの併用によりＩＯ効果の増強が認められるかを検討した結果（死細胞割合）を示す。
　以下、本発明の各実施形態について、さらに詳細に説明する。
　本発明には、リソソーム活性化剤を含有する、抗体薬物複合体効果増強剤が包含される。（「本発明の増強剤」ということがある。）抗体薬物複合体（Ａｎｔｉｂｏｄｙ－Ｄｒｕｇ　Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ：ＡＤＣ）は抗体が認識した細胞に結合した後、通常エンドサイトーシスにより細胞に取り込まれ、さらにリソソームにおいて抗体と薬物とを結合するリンカーが切断され、分離した薬物が細胞内で薬効を発揮することから、リソソームを活性化させることで、抗体薬物複合体の効果を増強することができる。
　リソソーム活性化剤としては、特に細胞当たりのリソソームの数を増加させるもの（リソソーム数増加剤）が好ましい。このようなリソソーム活性化剤としては、例えば、ｍＴＯＲ阻害剤が好ましく挙げられる。一部のｍＴＯＲ阻害剤には細胞当たりのリソソームの数を増加させる効果があることが、上記非特許文献３で示唆されている。ｍＴＯＲは哺乳類におけるラパマイシン標的タンパク質（ｍａｍｍａｌｉａｎ　ｔａｒｇｅｔ　ｏｆ　ｒａｐａｍｙｃｉｎ）であり、細胞内シグナル伝達に関与するタンパク質キナーゼ（セリン・スレオニンキナーゼ）の１種である。ｍＴＯＲは、複数のタンパク質による複合体（ｃｏｍｐｌｅｘ）を形成し、複合体はｍＴＯＲＣと呼ばれる。ｍＴＯＲは機能的に異なる２種類の複合体、ｍＴＯＲ複合体１（ｍＴＯＲＣ１）とｍＴＯＲ複合体２（ｍＴＯＲＣ２）を形成する。ｍＴＯＲ阻害剤としては、ｍＴＯＲＣ１阻害剤、ｍＴＯＲＣ２阻害剤、又はｍＴＯＲＣデュアル阻害剤（すなわち、ｍＴＯＲＣ１及びｍＴＯＲＣ２の両方を阻害する阻害剤）であってよく、ｍＴＯＲＣデュアル阻害剤が好ましい。
　ｍＴＯＲ阻害剤としては、公知のｍＴＯＲ阻害剤を用いることができる。より具体的には、例えば、ラパマイシン、テムシロリムス、エベロリムス、ＰＰ２４２（トルキニブ）、Ｔｏｒｉｎ１、ＡＺＤ２０１４、ＭＬＮ０１２８、ダクトリシブ（ＢＥＺ２３５）、ＡＺＤ８０５５、ＳＦ２５２３、ＣＺ４１５、ＰＩ－１０３、ＫＵ－００６３７９４、タクロリムス、リダフォロリムス、Ｖｏｘｔａｌｉｓｉｂ　（ＳＡＲ２４５４０９，　ＸＬ７６５）　Ａｎａｌｏｇｕｅ、オミパリシブ（ＧＳＫ２１２６４５８，　ＧＳＫ４５８）、ＯＳＩ－０２７、ＰＦ－０４６９１５０２、アピトリシブ（ＧＤＣ－０９８０，　ＲＧ７４２２）、ＧＳＫ１０５９６１５、ゲダトリシブ、ＷＹＥ－３５４、Ｔｏｒｉｎ２、ＷＹＥ－１２５１３２　（ＷＹＥ－１３２）、ＢＧＴ２２６　（ＮＶＰ－ＢＧＴ２２６）、Ｐ５２９、ＰＰ１２１、ＷＹＥ－６８７、ＷＡＹ－６００、ＥＴＰ－４６４６４、ＧＤＣ－０３４９、ゾタロリムス（ＡＢＴ－５７８）、Ｖｏｘｔａｌｉｓｉｂ　（ＸＬ７６５，　ＳＡＲ２４５４０９）、クリソファニック酸、ＣＣ－２２３、ＬＹ３０２３４１４、３ＢＤＯ、ＭＨＹ１４８５等を用いることができる。なお、ラパマイシン、テムシロリムス、及びエベロリムスはｍＴＯＲＣ１阻害剤であり、ＰＰ２４２、Ｔｏｒｉｎ１、ＡＺＤ２０１４、及びＭＬＮ０１２８はｍＴＯＲＣデュアル阻害剤である。ｍＴＯＲ阻害剤は市販品を購入して用いることができる。
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　リソソーム活性化剤は１種単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。
　抗体薬物複合体（Ａｎｔｉｂｏｄｙ－Ｄｒｕｇ　Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ：ＡＤＣ）としては、特に制限はされず、例えば公知の抗体薬物複合体を用いることができる。抗体薬物複合体において、抗体と薬物はリンカーにより結合されている。当該リンカーとしては、例えばリソソーム内で切断されるリンカーが好ましい。リソソーム内で切断されるリンカーとしては、例えば、酸性状態で切断されるリンカーにより結合されているか、あるいはリソソーム内酵素により切断されるリンカーが挙げられる。このようなリンカーは、当該分野（特に抗体薬物複合体分野）において公知のリンカーや、あるいは開発中のリンカーを用いることができる。このようなリンカーとしては、より具体的には、例えば、ヒドラゾンリンカー（例えばセミカルバゾンリンカー）、マレイミドリンカー、チオエーテルリンカー、ペプチドリンカー（例えば、valine-citrulline (vc) dipeptideリンカー、valine-alanine (va) dipeptideリンカー、 phenylalanine-lysine (Phe-Lys) dipeptide リンカー、glycyn-glycyn-phenylalanyn-glycyn (GGFG) peptide リンカー等）等が挙げられる。また、これらの組み合わせにより構成されるリンカーも好ましい。例えば、ペプチドリンカーとマレイミドリンカーを組み合わせて一つのリンカーとして用いる（例えば、抗体とペプチドリンカーとの間にマレイミドリンカーを配置する）こともできる。なお、これらのリンカーは、それぞれに記載される構造（セミカルバゾン、マレイミド、ヒドラゾン、チオエーテル、valine-citrulline dipeptide、valine-alanine dipeptide、glycyn-glycyn-phenylalanyn-glycyn (GGFG) peptide等）が含まれた構造を有するリンカーである。ヒドラゾンリンカーは血清中では安定で、細胞内への内在化の後、リソソーム内の酸性環境で加水分解される。ペプチドリンカーはリソソーム内プロテアーゼ（例えばカテプシンＢ等）によって、分解される。チオエーテルリンカーは容易に切断されず、血清中での安定性に優れ、血清中で薬物をリリースしにくいため、副作用が出にくいと考えられている。腫瘍細胞に取り込まれた後、リソソーム内で抗体全体が分解されてトキシンが遊離するとされる。あるいはまた、当該リンカーとして、Fleximerリンカー（Mersana Therapeutics社）等のリンカーを用いることもできる。
　また、例えば、Int J Mol Sci. 2016 Apr; 17(4): 561に挙げられる公知のリンカー又は当該公知のリンカーから容易に想到できるリンカーを用いることができる。
抗体薬物複合体に含まれるリンカーは、１種単独であってもよいし、２種以上が組み合わせられていてもよい。一つのリンカーに上記の各リンカーの１種又は２種以上が配置されていてもよい。また、一つの抗体薬物複合体において、抗体と薬物とを結合するリンカーが全て同一であってもよいし、２種以上のリンカーが用いられていてもよい。
　また、抗体薬物複合体の薬物（ペイロード）としては、特に制限はされないが、抗ガン剤が好ましく例示される。抗ガン剤としては、例えばＤＮＡを切断することで抗ガン効果を奏するもの（ＤＮＡ切断抗ガン剤）が好ましく挙げられるが、特に限定はされない。また、抗ガン剤として、より具体的には、例えば、カリケアマイシン、エスペラマイシン、エムタンシン、ａｕｒｉｓｔａｔｉｎ　Ｆ－ＨＰＡ（F-hydroxypropylamide）、ａ　ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ　ｏｆ　ＤＸ－８９５１　（ＤＸｄ）、モノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）等を挙げることができる。
　また、抗体としては、モノクローナル抗体であってもポリクローナル抗体であってもよく、モノクローナル抗体が好ましい。また、本発明をヒトに適用する場合には、抗体はキメラ抗体、ヒト化抗体、又は完全ヒト化抗体（ヒト抗体）であることが好ましい。これら抗体は公知の方法か、又は公知の方法から容易に想到できる方法によって製造することができる。特に制限されないが、例えばＷＯ２００８／０２６６０３、ＷＯ２００９／０４１６４３等に記載の内容を参考にすることができる。
　抗体薬物複合体を構成する抗体と薬物とは、お互いに関連していることが好ましい。すなわち、薬物の効果が特に必要とされる部位を抗体が認識することが好ましい。例えば、抗体薬物複合体の薬物が抗ガン剤である場合には、当該抗体薬物複合体の抗体はガン細胞を認識する抗体が好ましく、ガン細胞特異的に結合する抗体がより好ましい。このようなガン細胞を認識する抗体としては、公知のガン細胞マーカーを抗原として用いて適宜調製することができる。特に制限されないが、例えば、抗ＣＤ３３抗体、抗ＣＤ３０抗体、抗ＣＤ２２抗体、抗Ｈｅｒ２抗体等が挙げられる。ガンが白血病の場合には、抗ＣＤ３３抗体、抗ＣＤ３０抗体、抗ＣＤ２２抗体などが特に好ましく、ガンが乳ガン等である場合には抗Ｈｅｒ２抗体などが特に好ましい。
　特に制限されないが、抗体としては、より具体的には、ゲムツズマブ、トラスツズマブ、ブレンツキシマブ、イノツズマブ、リツキシマブ、オファツムマブ、モガムリズマブ、及びアレムツズマブ等が好ましく挙げられる。
　また、特に制限されないが、抗体薬物複合体としては、より具体的には、例えば、ゲムツズマブ オゾガマイシン（製品名マイロターグ（登録商標））、トラスツズマブ エムタンシン（製品名カドサイラ（登録商標））、ＸＭＴ－１５２２、ＤＳ－８２０１ａ、ブレンツキシマブ　ベドチン（製品名アドセトリス（登録商標））、イノツズマブ オゾガマイシン（製品名Ｂｅｓｐｏｎｓａ）等が挙げられる。但し、これらに特に限定はされない。例えば、
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 において公知の抗体薬物複合体（antibody drug conjugate）を検索することができ、検索結果として得られる公知の抗体薬物複合体についても本発明に好ましく用いることができる。また例えば、
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000042
 には公知の抗体薬物複合体が纏められており、これらも本発明に好ましく用いることができる。
　本発明の増強剤は、リソソーム活性化剤のみからなるものであってもよいし、リソソーム活性化剤以外のその他成分を含有してもよい。その他成分としては特に制限されず、薬学的に許容される基剤、担体、添加剤（例えば賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、溶剤、甘味剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤、界面活性剤、保湿剤、保存剤、ｐＨ調整剤、粘稠化剤等）等が挙げられる。このような基材、担体、添加剤等は、例えば医薬品添加物辞典２０１６（株式会社薬事日報社）等に具体的に記載されており、例えばこれに記載されるものを用いることができる。また製剤形態も特に制限されず、常法により有効成分及びその他の成分を混合し、例えば錠剤、被覆錠剤、散剤、顆粒剤、細粒剤、カプセル剤、丸剤、液剤、懸濁剤、乳剤、ゼリー剤、チュアブル剤、ソフト錠剤等の製剤に調製することができる。また本発明の増強剤の投与経路としては、例えば経口投与又は静脈投与が好ましい。
　本発明の増強剤は、含有されるリソソーム活性化剤により、リソソームを活性化（特にリソソーム数を増加）できる量を患者に投与することが好ましく、活性化の程度を基準に各種リソソーム活性化剤の投与量及び投与経路を適宜設定することができる。そして、これに応じて、本発明の増強剤の投与量及び投与経路も適宜設定することができる。特に、既にヒト投与試験が行われているリソソーム活性化剤については、その投与試験で用いられた投与量及び投与経路を参考に適宜設定することもできる。例えば、ＡＺＤ２０１４はアストラゼネカ社が治験中の経口投与可能な薬剤で、ＰＫ結果を含めたＰｈａｓｅ１試験結果は既に論文発表されており（上記非特許文献２）、当該試験で定められたヒトへの推奨投与量（ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ　ｄｏｓｅ，　ＲＤ）は５０ｍｇを１日２回投与であるので、これを参考とすることができる。例えば、成人一日あたり、５０～２００ｍｇ、６０～１８０ｍｇ、７０～１６０ｍｇ、８０～１４０ｍｇ、又は９０～１２０ｍｇ程度とすることができる。また、当該１日投与量を一度に投与してもよいし、１日に２、３、又は４回程度に分けて投与することもできる。
　本発明は、また、リソソーム活性化剤が投与された状態若しくは投与される状態の患者に投与されるように用いられる、抗体薬物複合体組成物（抗体薬物複合体を含有する組成物）をも包含する。当該抗体薬物複合体組成物は、抗体薬物複合体のみからなる組成物であってもよいし、その他の成分をさらに含んでいてもよい。その他成分としては、特に制限されず、例えば、上述したリソソーム活性化剤におけるその他成分と同様の成分を用いることができる。なお、薬学的に許容される担体としては、例えば、滅菌水や生理食塩水、植物油、乳化剤、懸濁剤、界面活性剤、安定剤、香味剤、賦形剤、ベヒクル、防腐剤、結合剤等が挙げられる。特に、注射のための無菌組成物は注射用蒸留水のようなベヒクルを用いて通常の製剤実施に従って処方することができる。 より具体的には、注射用の水溶液としては、例えば生理食塩水、ブドウ糖やその他の補助薬（例えばＤ－ソルビトール、Ｄ－マンノース、Ｄ－マンニトール、塩化ナトリウム）を含む等張液が挙げられる。適当な溶解補助剤、例えばアルコール（エタノール等）、ポリアルコール（プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等）、非イオン性界面活性剤（ポリソルベート８０（ＴＭ）、ＨＣＯ－５０等）を併用してもよい。また、油性液としてはゴマ油、大豆油等があげられ、溶解補助剤として安息香酸ベンジル及び／またはベンジルアルコールを併用してもよい。また、緩衝剤（例えば、リン酸塩緩衝液及び酢酸ナトリウム緩衝液）、無痛化剤（例えば、塩酸プロカイン）、安定剤（例えば、ベンジルアルコール及びフェノール）、酸化防止剤と配合してもよい。
　なお、当該抗体薬物複合体組成物に用いられるリソソーム活性剤及び抗体薬物複合体については、上述したのと同じである。
　以下、当該抗体薬物複合体組成物として、特に抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体（すなわち、抗ＣＤ３３抗体とＤＮＡ切断抗ガン剤とが結合された複合体）を含有する組成物を好適な一例として挙げ、詳細に説明する。当該一例を用いた説明により、当業者はリソソーム活性化剤が投与された状態若しくは投与される状態の患者に投与されるように用いられる、抗体薬物複合体組成物全体について理解し得る。すなわち、当該一例を用いた説明中、当該一例のみならず他の抗体薬物複合体組成物についても適用可能な部分については、他の抗体薬物複合体組成物についても妥当する。
　白血病細胞認識抗体（好ましくは白血病細胞特異的抗体）－抗ガン剤複合体を有する組成物は、白血病治療組成物として有用である。以下、このような組成物を「本発明の白血病治療組成物」ということがある。中でも、抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体を含有する組成物は、特に白血病治療組成物として有用である。以下、代表的に、抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体を含有する組成物を詳細に説明するが、本発明の白血病組成物はこれに限定はされるものではなく、当業者であれば異なる抗体及び／又は薬物を用いた抗体薬物複合体組成物についても適用可能な部分については、異なる抗体及び／又は薬物を用いた抗体薬物複合体組成物についても妥当すると理解し得る。例えば、当該説明において、「抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体」との記載は、「ガン細胞認識抗体（好ましくはガン細胞特異的抗体）－抗ガン薬物複合体」、「白血病細胞認識抗体（好ましくは白血病細胞特異的抗体）－抗ガン剤複合体」、「白血病細胞認識抗体（好ましくは白血病細胞特異的抗体）－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体」等と読み替えることができる。
　抗ＣＤ３３抗体は、ＣＤ３３抗原を認識する抗体であればよく、ＣＤ３３抗原を特異的に認識する抗体が好ましい。また、抗体はポリクローナル抗体又はモノクローナル抗体であってよく、モノクローナル抗体が好ましい。また、本発明をヒトに適用する場合には、抗体はキメラ抗体、ヒト化抗体、又は完全ヒト化抗体（ヒト抗体）であることが好ましい。これら抗体は公知の方法か、又は公知の方法から容易に想到できる方法によって製造することができる。特に制限されないが、例えばＷＯ２００８／０２６６０３、ＷＯ２００９／０４１６４３等に記載の内容を参考にすることができる。
　ＤＮＡ切断抗ガン剤は、ＤＮＡを切断することにより抗ガン作用を示す抗ガン剤である。このような抗ガン剤としては、公知のものを好ましく利用することができる。中でも、カリケアマイシン又はエスペラマイシンがこのましく、カリケアマイシン（特にオゾガマイシン）がより好ましい。
　抗ＣＤ３３抗体とＤＮＡ切断抗ガン剤とは、酸性状態で切断（加水分解）されるリンカーにより結合されているか、あるいはリソソーム内酵素で切断されるリンカーにより結合されていることが好ましい。このようなリンカーとしては、上述したとおりであるが、例えば、マレイミドリンカー、ヒドラゾンリンカー（例えばセミカルバゾンリンカー）、チオエーテルリンカー等が挙げられ、中でもヒドラゾン結合が好ましい。
　抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体としては、例えば前記抗ＣＤ３３抗体が、前記結合により、前記ＤＮＡ切断抗ガン剤と結合した構造を有する複合体を、好ましく用いることができる。特に、ゲムツズマブ・オゾガマイシン（ＧＯ：商品名「マイロターグ」（登録商標））が好ましい。
　本発明の白血病治療組成物による治療の対象となる白血病は、抗ＣＤ３３抗原が発現している白血病細胞が存在する白血病（ＣＤ３３陽性白血病）が好ましく、中でも急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）ではＣＤ３３陽性白血病細胞の割合が多いため、治療対象として特に好ましい。
　抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体は、１種単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。
　本発明の白血病治療組成物は、リソソーム活性化剤が（ｉ）投与された状態若しくは（ｉｉ）投与される状態の患者に投与されるように用いられる。つまり、本発明の白血病治療組成物は、（ｉ）リソソーム活性化剤を既に投与された患者に投与されるように用いられてもよいし、（ｉｉ）リソソーム活性化剤が未だ投与されていないが投与されることが予定されている患者に投与されるように用いられてもよい。いずれの場合であっても、リソソーム活性化剤と本発明の白血病治療組成物との投与間隔は、本発明の効果が損なわれない範囲であれば特に制限はされない。例えば、当該投与間隔は、２週間、１．５週間、１週間、６、５、４、３、２、又は１日程度であってもよい。また、リソソーム活性化剤により白血病細胞におけるリソソームが活性化されている（特にリソソーム数が増加している）状態において、本発明の白血病治療組成物に含まれる抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体が白血病細胞に到達できる程度の投与間隔としてもよい。例えば、リソソーム活性化剤と本発明の白血病治療組成物との投与間隔は、６、５、４、３、２、又は１時間以内であることが好ましく、３０分以内であることがより好ましく、１５分以内であることがさらに好ましく、３分以内に連続投与又は同時投与することがよりさらに好ましい。なお、上記（ｉｉ）の用いられかたはリソソーム活性化剤との同時投与を包含する。
　本発明の白血病治療組成物は、含有される抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体量を基準に、投与量を適宜設定することができる。つまり、含有される抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体が抗癌作用を発揮できる程度の投与量となるように、本発明の白血病治療組成物の投与量を調整すればよい。また、投与経路としては、静脈投与が好ましい。特に、抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体がＧＯである場合には、例えばＧＯの投与量が成人一日あたり１～２０ｍｇ／ｍ２となることが好ましく、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０ｍｇ／ｍ２となることがより好ましい。また、複数回（例えば、２、３、４、又は５回）投与してもよいが、その場合は先の投与から２～４週間後に投与することが好ましい。
　また、リソソーム活性化剤は、リソソームを活性化（特にリソソーム数を増加）できる量を患者に投与することが好ましく、活性化の程度を基準に各種リソソーム活性化剤の投与量及び投与経路を適宜設定することができる。特に、既にヒト投与試験が行われているリソソーム活性化剤については、その投与試験で用いられた投与量及び投与経路を参考に適宜設定することもできる。例えば、ＡＺＤ２０１４はアストラゼネカ社が治験中の経口投与可能な薬剤で、ＰＫ結果を含めたＰｈａｓｅ１試験結果は既に論文発表されており（上記非特許文献２）、当該試験で定められたヒトへの推奨投与量（ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ　ｄｏｓｅ，　ＲＤ）は５０ｍｇを１日２回投与であるので、これを参考とすることができる。例えば、成人一日あたり、５０～２００ｍｇ、６０～１８０ｍｇ、７０～１６０ｍｇ、８０～１４０ｍｇ、又は９０～１２０ｍｇ程度とすることができる。また、当該１日投与量を一度に投与してもよいし、１日に２、３、又は４回程度に分けて投与することもできる。また投与経路としては、経口投与又は静脈投与が好ましい。
　ＡＺＤ２０１４が投与された状態若しくは投与される状態の患者に投与されるように用いられる、ＧＯを含有する組成物が、本発明の白血病治療組成物の特に好ましい一態様としてあげられる。この場合には、ＡＺＤ２０１４の投与量を上記の投与量及び投与回数とし、ＧＯの投与量も上記の投与量及び投与回数とすることが好ましい。例えば、ＧＯは２週間に２又は３回の投与（一回の投与で９～１０ｍｇ）としつつ、ＡＺＤ２０１４は５０ｍｇ程度を１日２回投与を毎日行う、という投与スケジュールを、好ましい一例として挙げることができる。
　本発明の白血病治療組成物には、抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体の他、薬学的に許容される担体等が含まれていてもよい。当該担体としては、例えば、滅菌水や生理食塩水、植物油、乳化剤、懸濁剤、界面活性剤、安定剤、香味剤、賦形剤、ベヒクル、防腐剤、結合剤等が挙げられる。特に、注射のための無菌組成物は注射用蒸留水のようなベヒクルを用いて通常の製剤実施に従って処方することができる。 より具体的には、注射用の水溶液としては、例えば生理食塩水、ブドウ糖やその他の補助薬（例えばＤ－ソルビトール、Ｄ－マンノース、Ｄ－マンニトール、塩化ナトリウム）を含む等張液が挙げられる。適当な溶解補助剤、例えばアルコール（エタノール等）、ポリアルコール（プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等）、非イオン性界面活性剤（ポリソルベート８０（ＴＭ）、ＨＣＯ－５０等）を併用してもよい。また、油性液としてはゴマ油、大豆油等があげられ、溶解補助剤として安息香酸ベンジル及び／またはベンジルアルコールを併用してもよい。また、緩衝剤（例えば、リン酸塩緩衝液及び酢酸ナトリウム緩衝液）、無痛化剤（例えば、塩酸プロカイン）、安定剤（例えば、ベンジルアルコール及びフェノール）、酸化防止剤と配合してもよい。
　また、本発明は、抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体と、リソソーム活性化剤と、を含む、抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体効果増強組成物（すなわち、抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体単独投与に比べて効果が増強された組成物）をも包含する。当該効果増強組成物に含まれる抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体及びリソソーム活性化剤については、上述したのと同じである。また、当該効果増強組成物には、抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体及びリソソーム活性化剤以外の他の成分が含まれていてもよい。このような他成分としては、例えば、上述した白血病治療組成物における薬学的に許容される担体と同じものを用いることができる。なお、当該効果増強組成物の投与経路については、静脈投与が好ましい。
　なお、上述の通り、当該説明は、異なる抗体及び／又は薬物を用いた抗体薬物複合体組成物についても妥当する。すなわち、本発明は、抗体薬物複合体と、リソソーム活性化剤と、を含む、当該抗体薬物複合体効果増強組成物をも包含している。
　また、本発明は、抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体と、リソソーム活性化剤と、を備えた、白血病治療用キットをも包含する。当該キットに備えられる抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体及びリソソーム活性化剤については、上述したのと同じである。また、当該キットには、抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体及びリソソーム活性化剤以外の備品が含まれていてもよい。このような備品としては、特に制限されないが、例えば、点滴用針や消毒液（例えばエタノール）等が挙げられる。
　なお、上述の通り、当該説明は、異なる抗体及び／又は薬物を用いた抗体薬物複合体組成物についても妥当する。すなわち、本発明は、抗体薬物複合体と、リソソーム活性化剤と、を備えた、抗体薬物複合体の薬物が治療対象とする疾患の治療用キットをも包含している。
　また、本発明は、リソソーム活性化剤を含む、抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体効果増強剤をも包含する。当該リソソーム活性化剤については、上述したのと同じである。また、効果増強対象である抗ＣＤ３３抗体－ＤＮＡ切断抗ガン剤複合体についても、上述したのと同じである。当該効果増強剤は、リソソーム活性化剤以外の他の成分を含んでいてもよい。このような他成分としては、例えば、上述した白血病治療組成物における薬学的に許容される担体と同じものを用いることができる。
　なお、上述の通り、当該説明は、異なる抗体及び／又は薬物を用いた抗体薬物複合体組成物についても妥当する。すなわち、本発明は、リソソーム活性化剤を含む、抗体薬物複合体効果増強剤をも包含している。
　なお、本明細書において「含む」とは、「本質的にからなる」と、「からなる」をも包含する（The term "comprising" includes "consisting essentially of” and "consisting of."）。また、本明細書において挙げた文献及びウェブページに記載の内容は、参照により本明細書に組み込まれる。また、上述した本発明の各実施形態について説明した各種特性（性質、構造、機能等）は、本発明に包含される主題を特定するにあたり、どのように組み合わせられてもよい。すなわち、本発明には、本明細書に記載される組み合わせ可能な各特性のあらゆる組み合わせからなる主題が全て包含される。
　以下、本発明をより具体的に説明するが、本発明は下記の例に限定されるものではない。なお、検討に用いた各種ＡＭＬ細胞の入手先を次に記載する。ＳＫＮＯ－１（ＪＣＲＢ　Ｃｅｌｌ　Ｂａｎｋ，　Ｔｏｋｙｏ，　Ｊａｐａｎ）、Ｕ９３７（ＡＴＣＣ，　Ｍａｎａｓｓａｓ，　ＶＡ，　ＵＳＡ）、ＴＨＰ－１（ＥＣＡＣＣ，　ＰＤ，　ＵＫ）、ＳＫＭ－１（発明者により樹立）。
ｍＴＯＲ阻害剤使用濃度の検討
　一部のｍＴＯＲ阻害剤には細胞当たりのリソソームの数を増加させる効果があることが、上記非特許文献３で示唆されている。当該文献で使用されているｍＴＯＲ阻害剤であるＰＰ２４２を本件等に用いるｍＴＯＲ阻害剤として選択し、細胞障害を起こさず、且つｍＴＯＲ阻害作用を示すＰＰ２４２濃度を検討した。ＰＰ２４２は市販品を購入して使用した。なお、細胞は、培地としてＲＰＭＩ１６４０を用い、３７℃、ＣＯ２５％で、４８時間毎に継代して培養して、検討に用いた。
　具体的には、急性骨髄性白血病細胞株（Ｕ９３７）培養培地に、１００～６００ｎＭのＰＰ２４２を加えて２４時間培養し、ＰＰ２４２を加えない場合（コントロール）と比較して細胞障害を起こさない濃度を検討した。細胞障害の程度は死細胞割合（ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）％を比較することで決定した。当該死細胞割合の検討には、Ａｎｎｅｘｉｎ　Ｖ－ＦＩＴＣ　Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　Ｋｉｔ　（Ｎａｃａｌａｉ　Ｔｅｓｑｕｅ，Ｉｎｃ．，ｊａｐａｎ）を用いた。なお、ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓは、フローサイトメトリーによる細胞死実測値からコントロールにおける自然な細胞死（細胞株の培養では通常４～５％ほど常に自然に細胞死が見られる）を差し引いて算出した死細胞割合である。より詳細には、ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ　ＰＩ　（Ｐｒｏｐｉｄｉｕｍ　Ｉｏｄｉｄｅ）で細胞を二重染色し、フローサイトメトリーにて死細胞を判定した。当該検討は、キット：Ａｎｎｅｘｉｎ　Ｖ－ＦＩＴＣ　Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　Ｋｉｔ　（Ｎａｃａｌａｉ　Ｔｅｓｑｕｅ，Ｉｎｃ．，ｊａｐａｎ）を用いて行った。
　またさらに、各ＰＰ２４２濃度で培養した細胞において、ｍＴＯＲ阻害効果が得られているかを確認するため、ＡＫＴタンパク質及びＳ６Ｋタンパク質のリン酸化の程度をウエスタンブロットにより解析した。なお、ｍＴＯＲが阻害されることにより、ＡＫＴタンパク質及びＳ６Ｋタンパク質のリン酸化が減少することがよく知られており、当該リン酸化がｍＴＯＲ阻害検討のために広く用いられている。リン酸化Ｓ６Ｋの減少はｍＴＯＲＣ１阻害を示し、リン酸化ＡＫＴの減少はｍＴＯＲＣ２阻害を示す。なお、ウエスタンブロット解析に用いた抗体の入手先を次に記載する。Ｐｈｏｓｐｈｏ－Ａｋｔ　（Ｓｅｒ４７３）　Ａｎｔｉｂｏｄｙ　（ＣＳＴ，　＃４０６０）、Ａｋｔ　Ａｎｔｉｂｏｄｙ　（ＣＳＴ，　＃９２７２）、　Ｐｈｏｓｐｈｏ－ｐ７０　Ｓ６　Ｋｉｎａｓｅ　（Ｔｈｒ３８９）　Ａｎｔｉｂｏｄｙ　（ＣＳＴ，　＃９２０５）、　ｐ７０　Ｓ６Ｋ　Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（ＣＳＴ，　＃９２０２）。
　図１に、当該検討における、死細胞割合（ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）％（図１ａ）、及びウエスタンブロット解析結果（図１ｂ）を示す。図１ａにおいて、「Ｃｔｒ」はコントロールを示し、「Ｐ１００」はＰＰ２４２　１００ｎＭを示し、他も同様である。また、図１ｂにおいて、「ｐ－ＡＫＴ」はリン酸化ＡＫＴタンパク質を示し、「（ｐ－）７０Ｓ６ｋ」は（リン酸化）Ｓ６Ｋタンパク質を示す。当該結果から、ＰＰ２４２　１００～５００ｎＭでは細胞障害がほとんど起こらず（図１ａ）、且つ２００～５００ｎＭでｍＴＯＲ阻害効果が得られる（図１ｂ）ことが確認できた。当該結果を踏まえ、以下の検討では特に断らない限り、ＰＰ２４２処理は濃度５００ｎＭで行うこととした。
各急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）細胞株に対するＰＰ２４２及びＧＯによる処理の検討
　４つの急性骨髄性白血病細胞株（ＳＫＮＯ－１、Ｕ９３７、ＴＨＰ－１、ＳＫＭ－１）に対して、ＰＰ２４２単独処理、ＧＯ（ゲムツズマブ・オゾガマイシン）単独処理、又はＰＰ２４２及びＧＯの併用処理、を行い、３６時間培養後にＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＰＩ（ｐｒｏｐｉｄｉｕｍ　ｉｏｄｉｄｅ）染色を施行して、フローサイトメトリーを用いて、死細胞割合（ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）％を評価した。結果を図２示す。４つの細胞株において、両剤併用における相乗効果を認めた。図２中、＊はｐ＜０．００１を示す。
　なお、ＧＯ処理濃度は、ＴＨＰ－１及びＳＫＮＯ－１に関しては０．５μｇ／ｍｌ、そのほかの細胞株は２．５μｇ／ｍｌとした。この濃度設定は、次の事情による。ＧＯの承認用量（９ｍｇ／ｍ２を１４日間以上あけて２回投与）投与下での血中濃度（Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ，　ＰＫ）が報告されている（マイロターグ（登録商標）　インタビューフォーム）。ＰＫデータからは、ヒトへの投与後８時間から２４時間以上保たれる平均の最低血中濃度は約２．５μｇ／ｍｌであるため、ＧＯ２．５μｇ／ｍｌをＡＭＬ細胞株へ投与することとした。但し、効果を強く認めた細胞株では０．５μｇ／ｍｌでＧＯを投与することとした。各ＡＭＬ細胞株に対する当該ＧＯ処理濃度は、特に断らない限り、以降の検討でも同様とした。
急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）細胞株におけるリソソームの解析
　蛍光色素ＬｙｓｏＴｒａｃｋｅｒ（登録商標）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）によりＡＭＬ細胞を染めてリソソームの検討を行った。当該蛍光色素は、細胞内の酸性構造物を染める働きがあり、正常の酸性のリソソームを染めるとされる。具体的には、当該蛍光式により、Ｕ９３７及びＴＨＰ－１のリソソームを染色した。結果を図３に示す。図３左図では、細胞角が青く、リソソームが赤く染色されている。また、図３右図は、赤い蛍光の強度をグラフ化したものである。当該結果から、ＡＭＬ細胞におけるＬｙｓｏＴｒａｃｋｅ蛍光スポットは大変少なく、よってリソソーム数が少ないと考えられた。また、ＰＰ２４２処理により、ＬｙｓｏＴｒａｃｋｅ蛍光スポットはＵ９３７細胞株で約１．５倍に増強され、ＰＰ２４２及びＧＯ併用処理でもほぼ変わらず、ＬｙｓｏＴｒａｃｋｅ蛍光は増強されたままであることも分かった。ＴＨＰ－１細胞株でも同様の結果であった。
　抗体薬物複合体（Ａｎｔｉｂｏｄｙ－Ｄｒｕｇ　Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ：ＡＤＣ）であるＧＯの作用機序として、リソソームにおけるリンカーの消化がある。ＧＯのリンカーは酸性環境下において加水分解されるヒドラゾンリンカーであり、当該リンカーが抗ＣＤ３３モノクローナル抗体とカリケアマイシン（オゾガマイシン）を結合している。ＧＯが白血病細胞に結合してＧＯ－ＣＤ３３抗原複合体を形成すると、細胞の本来機能によってＧＯ－ＣＤ３３抗原複合体は細胞内に取り込まれ、貪食胞内にＧＯ－ＣＤ３３抗原複合体が存在する状態となる（内在化）。この貪食胞がリソソームと融合して二次貪食胞となり、リソソーム内の酸性環境下においてリンカーが加水分解を受け、カリケアマイシンが遊離し活性型となる。遊離・活性型カリケアマイシンは核内のＤＮＡと結合してＤＮＡ二重鎖切断を引き起こし、細胞死へ至る（図４）。このように白血病細胞内のリソソーム機能が保持されていることがＧＯ効果発現に重要である。
　ところが、図２及び図３の結果から、実はＡＭＬ細胞のリソソーム数は非常に少ないこと、及びｍＴＯＲ阻害剤（ここでは具体的にはＰＰ２４２）によりＡＭＬ細胞のリソソーム数を増加させることができること、さらにはｍＴＯＲ阻害剤とＧＯとの併用により、細胞死をより効果的に（相乗的に）誘導できることが分かった。また、当該効果は、ｍＴＯＲ阻害剤によりＡＭＬ細胞におけるリソソーム数が増えたことによって、ＧＯのヒドラゾンリンカーが効率的に切断され、より多くのカリケアマイシンがＤＮＡ二重鎖切断に寄与した結果であると推察された。
各急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）細胞株に対するＡＺＤ２０１４及びＧＯによる処理の検討　ＰＰ２４２をＧＯと併用した際にＧＯ効果の増強が認められたため、ＰＰ２４２と同様のｍＴＯＲＣデュアル阻害剤であるＡＺＤ２０１４に注目した。ＡＺＤ２０１４はアストラゼネカ社が治験中の薬剤で、ＰＫ結果を含めたＰｈａｓｅ１試験結果は既に論文発表されており（上記非特許文献２）、かつ、試薬会社から購入可能である。ＡＺＤ２０１４のＰｈａｓｅ１試験で定められたヒトへの推奨投与量（ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ　ｄｏｓｅ，　ＲＤ）は５０ｍｇを１日２回投与である。５０ｍｇ投与１２時間後の平均のトラフ値（＝平均の最低値）として達成可能である血中濃度は、約２５０ｎＭであった。また、２５０ｎＭのＡＺＤ２０１４単独投与ではＡＭＬ細胞株に対して強い殺細胞効果を示さなかった（代表的な細胞株であるＵ９３７細胞株では５００ｎＭまで殺細胞効果を示さなかった）。さらに、上記と同様にしてウエスタンブロット解析によりｍＴＯＲＣ１阻害効果を調べたところ、２５０ｎＭのＡＺＤ２０１４単独処理で、リン酸化Ｓ６Ｋの減少（ｍＴＯＲＣ１阻害を示す）、リン酸化ＡＫＴの減少（ｍＴＯＲＣ２阻害を示す）を認めた。よって、ＡＺＤ２０１４　２５０ｎＭをＡＭＬ細胞株へ投与することとした。（ＧＯは、上述の通り、２．５μｇ／ｍｌをＵ９３７細胞株へ投与した。）
　急性骨髄性白血病細胞株（Ｕ９３７又はＳＫＭ－１）に対して、ＡＺＤ２０１４単独処理、ＧＯ（ゲムツズマブ・オゾガマイシン）単独処理、又はＡＺＤ２０１４及びＧＯの併用処理、を行い、３６時間培養後にＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＰＩ（ｐｒｏｐｉｄｉｕｍ　ｉｏｄｉｄｅ）染色を施行して、フローサイトメトリーを用いて、死細胞割合（ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）％を評価した。結果を図５ａ（Ｕ９３７）及び図５ｂ（ＳＫＭ－１）に示す。
　さらにまた、上記と同様にして、蛍光色素ＬｙｓｏＴｒａｃｋｅｒ（登録商標）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）により各Ｕ９３７細胞（処理なし、ＡＺＤ２０１４単独処理、ＧＯ単独処理、又はＡＺＤ２０１４及びＧＯ併用処理）を染めてリソソームの検討を行った。結果を図６に示す。図６左図では、細胞核が青く、リソソームが赤く染色されている。また、図６右図は、赤い蛍光の強度をグラフ化（コントロールを１とした相対値）したものである。
　図５及び図６の結果から、ｍＴＯＲ阻害剤としてＡＺＤ２０１４を用いた場合も、ＧＯとの併用によりＧＯ効果の増強されることが確認できた。さらには、当該効果増強は、ｍＴＯＲ阻害剤によりＡＭＬ細胞におけるリソソーム数が増えたことによって、ＧＯのヒドラゾンリンカーが効率的に切断され、より多くのカリケアマイシンがＤＮＡ二重鎖切断に寄与した結果であると裏付けられた。
　さらに、ＡＭＬ患者６名から初代培養細胞（プライマリーセル）を調製し、当該ＡＭＬ初代培養細胞（ＡＭＬｃｅｌｌ　１～６）を用いて、上記と同様にして、ＡＺＤ２０１４とＧＯとの併用によりＧＯ効果の増強が認められるかを検討した。結果（死細胞割合）をグラフ化して図７に示す。当該結果からも、ｍＴＯＲ阻害剤（ＡＺＤ２０１４）とＧＯとの併用により、ＧＯ効果が増強されることが確認できた。なお、初代培養細胞の調製は、上記非特許文献１（Ｌｅｕｋｅｍｉａ　（２０１３）　２７，　２３３-２３５）のsupplementary materials and methodsに記載の方法に従って行った。
多種のｍＴＯＲ阻害剤及び抗体薬物複合体との併用効果の確認
　ｍＴＯＲ阻害剤として、ＰＰ２４２の代わりにＭＬＮ０１２８（ＩＮＫ１２８、若しくはＴＡＫ－２２８ともいう）を用いて、上記「急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）細胞株におけるリソソームの解析」欄に記載の方法と同様（細胞はＵ９３７を使用）に検討したところ、ＩＮＫ１２８処理（濃度５０ｎＭ）により、ＬｙｓｏＴｒａｃｋｅ蛍光スポットはＵ９３７細胞株で増強され、ＩＮＫ１２８及びＧＯ併用処理でもほぼ変わらず、ＬｙｓｏＴｒａｃｋｅ蛍光は増強されたままであることが確認できた。
　さらに、ＳＫＭ－１細胞（骨髄異形成症候群、すなわち骨髄機能の異常による前白血病状態となった細胞由来）を用いて、４８時間培養後にＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＰＩ（ｐｒｏｐｉｄｉｕｍ　ｉｏｄｉｄｅ）染色を施行した点以外は上記と同様にして、ＩＮＫ１２８とＧＯとの併用によりＧＯ効果の増強が認められるかを検討した。結果（死細胞割合）をグラフ化して図８に示す（＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１；ＧＯ単独使用との比較）。当該結果からも、ｍＴＯＲ阻害剤（ＩＮＫ１２８）とＧＯとの併用により、ＧＯ効果が増強されることが確認できた。
　またさらに、Ｄａｕｄｉ細胞（Ｂ細胞性腫瘍であるバーキットリンパ腫由来細胞）を用いて、ｍＴＯＲ阻害剤ＰＰ２４２を４００ｎＭ、及び抗体薬物複合体イノツズマブ オゾガマイシン（ＩＯ）を２ｎｇ／ｍｌを単独使用又は併用した以外は、上記と同様にして、これらの併用によりＩＯ効果の増強が認められるかを検討した。結果（死細胞割合）をグラフ化して図９に示す（左：ＰＰ２４２、中央：ＩＯ、右：ＰＰ２４２＋ＩＯ）。当該結果からも、ｍＴＯＲ阻害剤（ＰＰ２４２）と抗体薬物複合体（ＩＯ）との併用により、抗体薬物複合体効果が増強されることが確認できた。
　以上の結果から、リソソーム活性化剤（特にｍＴＯＲ阻害剤）は、抗体薬物複合体の効果を増強する効果を奏することが確認できた。

Claims (11)

  1. リソソーム活性化剤を含有する、抗体薬物複合体効果増強剤。
  2. リソソーム活性化剤が、ｍＴＯＲ阻害剤である、請求項１に記載の増強剤。
  3. リソソーム活性化剤が、ラパマイシン、テムシロリムス、エベロリムス、ＰＰ２４２、Ｔｏｒｉｎ１、ＡＺＤ２０１４、及びＭＬＮ０１２８からなる群より選択される少なくとも１種である、請求項１に記載の増強剤。
  4. 前記抗体薬物複合体の薬物が抗ガン剤である、請求項１～３のいずれかに記載の増強剤。
  5. 前記抗体薬物複合体の抗体と薬物とが、リソソーム内で切断されるリンカーで結合されている、請求項１～４のいずれかに記載の増強剤。
  6. リソソーム活性化剤が投与された状態若しくは投与される状態の患者に投与されるように用いられる、抗体薬物複合体組成物。
  7. リソソーム活性化剤が、ｍＴＯＲ阻害剤である、請求項６に記載の抗体薬物複合体組成物。
  8. リソソーム活性化剤が、ラパマイシン、テムシロリムス、エベロリムス、ＰＰ２４２、Ｔｏｒｉｎ１、ＡＺＤ２０１４、及びＭＬＮ０１２８からなる群より選択される少なくとも１種である、請求項６に記載の抗体薬物複合体組成物。
  9. 前記抗体薬物複合体の薬物が抗ガン剤である、請求項６～８のいずれかに記載の抗体薬物複合体組成物。
  10. 前記抗体薬物複合体の抗体と薬物とが、リソソーム内で切断されるリンカーで結合されている、請求項６～８のいずれかに記載の抗体薬物複合体組成物。
  11. 請求項１～５のいずれかに記載の増強剤と、請求項６～１０のいずれかに記載の抗体薬物複合体組成物と、を備えた、前記抗体薬物複合体の薬物が治療対象とする疾患の治療用組成物若しくは治療用キット。
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