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WO2012117170A2 - Extrait de rameaux d'hiver d'hippophae et son utilisation dans une composition cosmétique. - Google Patents

Extrait de rameaux d'hiver d'hippophae et son utilisation dans une composition cosmétique. Download PDF

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Publication number
WO2012117170A2
WO2012117170A2 PCT/FR2012/000068 FR2012000068W WO2012117170A2 WO 2012117170 A2 WO2012117170 A2 WO 2012117170A2 FR 2012000068 W FR2012000068 W FR 2012000068W WO 2012117170 A2 WO2012117170 A2 WO 2012117170A2
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
extract
hippophae
branches
composition
winter
Prior art date
Application number
PCT/FR2012/000068
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English (en)
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WO2012117170A3 (fr
WO2012117170A4 (fr
Inventor
Alain Meybeck
Original Assignee
Am Phyto Conseil
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Am Phyto Conseil filed Critical Am Phyto Conseil
Priority to CN201280010597.7A priority Critical patent/CN103501761A/zh
Publication of WO2012117170A2 publication Critical patent/WO2012117170A2/fr
Publication of WO2012117170A3 publication Critical patent/WO2012117170A3/fr
Publication of WO2012117170A4 publication Critical patent/WO2012117170A4/fr

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    • A—HUMAN NECESSITIES
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    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
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    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
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    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
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    • A61Q19/02—Preparations for care of the skin for chemically bleaching or whitening the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q5/00—Preparations for care of the hair
    • A61Q5/08—Preparations for bleaching the hair

Definitions

  • Hippophae winter branch extract and its use in a cosmetic composition.
  • the present invention relates to the use of an extract of Hippophae twigs, in particular winter shoots of Hippophae rhamnoides in a cosmetic composition for attenuating the pigmentation of the skin, hair and hair.
  • the coloration of the skin as well as the hair and the hair, is due to brown pigments called melanins and secreted by specialized cells called melanocytes following a complex biochemical process involving more than 90 genes (Tadokoro T., in Mechanisms of Suntanning, edited by JP Ortonne and R Ballotti, Martin Dunitz, 2002, p .67).
  • hydroquinone and its derivatives such as arbutin, kojic acid, azelaic acid, octadecenedioic acid, certain plant extracts such as Morus alba or Glycyrrhiza glabra, ascorbic acid (vitamin C) and its derivatives such as ascorbyl phosphate or vitamin C double phosphate and vitamin E, certain cysteine derivatives.
  • depigmentation agent and / or whitening of the skin and / or superficial body growths is described in document FR-2.848.846-A: these are derivatives of ascorbic acid.
  • compositions based on hydroquinone are currently prohibited over-the-counter.
  • one of the aims of the present invention is it relates to the use of a cosmetic or dermatological composition whose active ingredient does not have the disadvantages described above.
  • Another object of the invention is to provide such a composition having a better efficiency and at a competitive cost.
  • Plant extracts are often used in cosmetic or dermatological compositions.
  • the secondary metabolites can have interesting effects on the skin cells sought for developing more effective cosmetic formulations.
  • composition of secondary metabolites varies according to the seasons, and according to the parts of the plant, root, leaf, branch, flower, fruit, seed ...
  • a methanolic or hydroethanolic extract contains most of the polar secondary metabolites.
  • the crude extracts can be fractionated using solvents of different polarity.
  • a butanol can extract the less polar molecules of a crude aqueous or methanolic or hydro-ethanolic extract.
  • the crude extracts or extract fractions can be characterized by high pressure liquid chromatography (HPLC). Each molecule is characterized by an elution peak at a specific time for a given column, under given elution conditions (solvents and gradient).
  • An extract or an extract fraction can also be characterized by thin layer chromatography (TLC). This technique makes it possible to characterize molecules of complete structure still unknown, by the elution distance of each of them on the plate (Rf) and by their revelation by more or less specific reagents of a given chemical family.
  • TLC thin layer chromatography
  • the genus Hippophae of the family Elaéagnacées includes the species H.goniocarpa, H.gyantsensis, H. litangensis, H.neurocarpa, H.rhamnoides, H.salicifolia, H.tibetana (www.NCBI.nlm.nih.gov / Taxonomy / Browser).
  • Hippophae rhamnoides is a deciduous bushy deciduous shrub very common in northern Asia and Europe. In desert areas, it serves as food for domestic animals.
  • the ancient Greeks named it “Hippos phaos” which means “shining horse", because the horses fed on its leaves or twigs had shiny hair (Production and use of sea buckthorn Hippophae rhamnoides L., T. Li and T. Beveridge, NRC Research Press, Ottawa 2004). It is called in French Argousier. It grows in France in its natural state in the Southern Alps and in the North-West on the sandy shores of the English Channel in Picardy and Flanders (Pierre Lieuthaghi, The book of shrub and shrub trees, Robert Morel, 1969) .
  • H. rhamnoides show nodosities due to Actiomycete bacteria of the genus Frankia symbiotic and fixing atmospheric nitrogen (E. Small et al, Biodiversity, 2002, 3, 25-27).
  • the fruits or berries of H. rhamnoides are consumed as such or in juice, jam, condiment, or other forms, in Russia, Mongolia, China as well as in Europe, and in Canada where the species was introduced to fix the soil and as agri-food culture.
  • the content of berries of H. r. in Vitamin C is extremely high.
  • Another peculiarity of these fruits is that their pulp, like that of the olive, contains an oil.
  • Another oil of different fatty acid composition can be extracted from the seeds. Both oils contain tocopherol and carotenoids that give the berries their yellow, orange or red color (Sea Buckthorn - A versatile and promising crop for Saskatchewan, Agriculture and Agri-Food Canada, 2007. http://www4.agr.gc. it).
  • H.rhamnoides When H.rhamnoides is grown for fruit production, it is advisable to optimize their number and quality, to prune branches in winter. It is not recommended to cut branches in summer or late fall to prevent the introduction of diseases by wounds (Production and use of sea buckthorn Hippophae rhamnoides, Li T. and Beveridge T., 2004 National Research Council Canada).
  • H. rhamnoides was sown by plane or helicopter over large areas of the Loess Plateau (Inner Mongolia, Shanxi) to enrich and fix soils and to develop economic activity around fruit enhancement. But it also serves as firewood and fodder for domestic animals (sheep, cattle ...) whose health is improved (weight gain, better appearance of the hair, better resistance to diseases) (Ruan Chengjiang and Li Daiqiong, Function and Benefit of Hippophae rhamnoides L. Improving eco-environment of loess plateau of China.12th ISCO Conference, Beijing, 2002).
  • Hippophae oil (Russian vernacular Oblipika name) is the basis of many drugs in the countries of the former USSR intended in particular to heal the skin and mucous membranes (Lu Rongsen already cited). It's mostly the fruit oil that is used. In China the production of Hippophae oil began in 1988, and some . Flavone tablets of Hippophae fruit were launched in 1986 for the treatment of coronary heart disease (Lu Rongsen already cited).
  • the main industrial products derived from Hippophae are the juice of the fruit obtained by pressing, the cream of pulp oil obtained by centrifugation of the juice, the seed oil obtained by extraction with hexane, the flavones extracted with the alcohol of the fruit peels resulting from the separation of the juice and seeds (Li and Beveridge already mentioned).
  • the leaves are dried in China to make herbal teas.
  • JP-123851 1-A describes a cosmetic containing the oil extracted from the pericarp of Hippophae rhamnoides.
  • the document FR-2840808-A1 describes a cosmetic, dermatological or pharmaceutical composition containing a hydrophilic fraction of Hippophae rhamnoides fruit.
  • the document FR-2840809-A1 also describes a cosmetic, dermatological or pharmaceutical composition containing a hydrophilic fraction of Hippophae rhamnoides fruit, more particularly for the prevention or treatment of the dermis.
  • Winter twigs are branches or ends of branches taken from Hippophae that have lost leaves or have no leaves. The appropriate harvest period obviously depends on the latitude and altitude of the collection site as well as the climatic conditions.
  • the crude methanol extract was evaporated to dryness on a rotary evaporator and then taken up in 500 ml of water. The suspension obtained was then extracted successively with 3 portions of 200 ml of 2-butanol.
  • the maximum concentration tested for each fraction was chosen based on the results of a previous cytotoxicity test.
  • the butanol fraction at concentrations of 0.0004; 0.002; and 0.01 mg / ml did not result in a significant decrease in the amount of melanin produced by melanocytes.
  • aqueous fraction at concentrations of 0.0002; 0.001; and 0.005 mg / ml resulted in a significant and dose-dependent decrease in the amount of melanin produced by melanocytes which increased to 99% of the control, 94% of the control (p less than 0.01) and 87% of the control, respectively. (p less than 0.01).
  • the remaining aqueous phase was also rotovapped, and the resulting residue was also lyophilized to give the aqueous fraction.
  • the main compound of Rf 0.47 as well as other bands of Rf 0.58; 0.55; 0.41; revealed to FeCl3 (which reacts with indole groups), and ninhydrin (which reacts with amino groups) could be an indolamine compound.
  • melanocytes of line B16 stimulated by an analog of MSH-a-NPH-MSH were chosen.
  • the culture medium was then changed to replace it according to the wells with medium supplemented or not with NDP-MSH, as well as with different concentrations of the butanolic and aqueous fractions of the Hippophae extract. of Example 3.
  • the maximum concentration tested for each fraction was chosen based on the results of a previous cytotoxicity test.
  • Example 3 It was found that the butanolic fraction of Example 3 significantly reduces melanogenesis of B16 cells by 100 to 72%, at a concentration of 0.02 mg / ml.
  • the aqueous fraction of the hydroethanolic extract of Example 3 reduced the melanogenesis significantly from 100 to 71% at the concentration of 0.02 mg / ml, and from 100 to 54% highly significant at the concentration of 0.1 mg / ml.
  • compositions intended to reduce the pigmentation of the skin, hair and hair.
  • the collected material was immediately frozen at -80 ° C and dried by lyophilization.
  • Example 3 stored at -80 ° C.
  • Example 5 The three crude extracts of Example 5 as well as their butanolic and aqueous fractions were characterized by chromatography.
  • HPLC High Pressure Liquid Chromatography
  • the detection was carried out by an alignment of photodiodes at 220, 280, and
  • Extracts of winter twigs have a characteristic double peak eluted around 5 - 5.5 min.
  • the summer branch extract is richer in compounds, but contains very significantly less compounds forming the double peak at 5 - 5.5 min.
  • the eluted plates were photographed under visible light, and UV at 254 and 366 nm.
  • Example 5 Four of the extract fractions obtained in Example 5 were evaluated for their ability to inhibit melanin pigment synthesis of NDP-MSH-stimulated B16 melanocytes, following the same protocol as for Example 4.
  • the maximum concentration tested for each fraction was chosen based on the results of a previous cytotoxicity test.
  • the most active extracts on the inhibition of melanogenesis are also those which contain the most indole compounds.
  • Composition No. 1 Cosmetic cream to reduce skin pigmentation.
  • a hydrophobic lipidic phase and an aqueous phase each containing ingredients intended to impart the usual properties of a cosmetic formulation such as stability and consistency, are mixed with stirring at 85 ° C. , pleasant spreading, hydrating power, good microbiological stability.
  • the mixture is cooled with stirring, and when the temperature has dropped to 45 ° C., 2% by weight of an aqueous fraction of hydroethanolic extract of winter shoots of Hippophae rhamnoides as in Example 3 is added. .
  • Composition N ° 2. Cosmetic cream to prevent skin pigmentation.
  • An oil-in-water emulsion is carried out as above with a hydrophobic lipid phase containing anti-UV filters A and B.
  • a hydrophobic lipid phase containing anti-UV filters A and B.
  • 1.5% by weight is added.
  • a suspension of liposomes containing a hydroethanolic extract of winter shoots of Hippophae rhamnoides (H.r.) of the following composition is prepared:
  • composition No. 4 Cosmetic cream to improve the radiance of the complexion.
  • a cosmetic cream is used to improve the radiance of the complexion by associating an extract of Hippophae rhamnoides (H.r.) with other active ingredients according to the formula:
  • Composition No. 5 Lotion to lighten hair or hair.
  • a suspension of liposomes containing a dry crude aqueous extract of H.r. winter branches is prepared according to the same procedure as for composition No. 3. of following composition:
  • composition according to the present invention can also contain one or other of the following products:
  • At least one other depigmenting active product such as arbutin, kojic acid, azelaic acid, octadecenedioic acid, an extract of Morus alba, an extract of Glycyrrhiza glabra, an extract of Griffonia simplicifolia, the acid ascorbic acid and its derivatives such as ascorbyl glucoside, ascorbyl phosphate or vitamin C and vitamin E double phosphate, ecdysterone, a cysteine derivative, ellagic acid, 5-hydroxytryptophan.
  • depigmenting active product such as arbutin, kojic acid, azelaic acid, octadecenedioic acid, an extract of Morus alba, an extract of Glycyrrhiza glabra, an extract of Griffonia simplicifolia, the acid ascorbic acid and its derivatives such as ascorbyl glucoside, ascorbyl phosphate or vitamin C and vitamin E double phosphat
  • At least one substance for filtering or blocking ultraviolet B and / or A radiation such as pigments based on titanium oxide, pearlescent pigments, benzophenone, anthranilate, cinnamic, dibenzoyl methane, salicylic, derived from camphor, or any other product listed in Annex VII of the "Cosmetic" Directive No 76/7688 / EEC as amended.
  • At least one anti-inflammatory product such as an extract of Glycyrrhiza glabra, glycyrrhetinic acid, an extract of Scutellaria baicalensis, an extract of Aloe vera, bisabolol.
  • At least one desquamation promoting agent such as salicylic acid, lactic acid or another alpha-hydroxy acid, urea.
  • At least one humectant such as glycerol, sorbitol, serine, salts of pyroglutamic acid (pyrrolidone carboxylic acid), hyaluronic acid.
  • composition can be in one of the following forms:
  • aqueous or hydro-alcoholic lotion in the form of an aqueous or hydro-alcoholic lotion, an aqueous or hydroalcoholic gel, a microemulsion, a liquid or thick emulsion, a free or compacted powder.
  • composition in the form of a patch, the composition being placed on a solid support.
  • the winter shoot extract of Hippophae rhamnoides can be incorporated in particles such as liposomes (as described for composition No. 3), vesicles of non-amphiphilic molecules ionic, dispersed lamellar phases, capsules, sponges, or disposed on the surface of particles such as particles of synthetic polymers, cellulose particles, or mineral particles.
  • the present composition comprises from 0.05 to 20%, and preferably from 0.5 to 5%, by weight of dry extract of Hippophae rhamnoides branches.
  • This composition may also contain at least one other depigmenting active product and / or an agent for promoting desquamation.
  • the present invention relates not only to the aqueous or hydroalcoholic extracts of branches or branches of Hippophae but also the more or less purified fractions of these extracts.

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Abstract

La présente invention est relative à un extrait de rameaux, notamment d'hiver, d'Hippophae, en particulier, d'Hippophae rhamnoides, ainsi qu'à l'utilisation d'un tel extrait dans une composition cosmétique.

Description

Extrait de rameaux d'hiver d'Hippophae et son utilisation dans une composition cosmétique.
La présente invention est relative à l'utilisation d'un extrait de rameaux d'Hippophae, en particulier de rameaux d'hiver d'Hippophae rhamnoides dans une composition cosmétique pour atténuer la pigmentation de la peau, des poils et des cheveux.
La coloration de la peau ainsi que des poils et des cheveux, est due à des pigments bruns appelés mélanines et sécrétés par des cellules spécialisées appelées mélanocytes suivant un processus biochimique complexe faisant intervenir plus de 90 gènes (Tadokoro T., dans Mechanisms of Suntanning, édité par J-P Ortonne et R Ballotti, Martin Dunitz, 2002, p .67) .
Dans beaucoup de cultures, et notamment en Asie, on préfère avoir la peau la plus claire possible, en tout cas sans taches pigmentaires.
C'est pourquoi l'industrie cosmétique commercialise un grand nombre de produits destinés à empêcher la peau de bronzer, ou à l'éclaircir, ou à en atténuer les taches. En outre, il existe aussi des préparations dermatologiques destinées à atténuer les taches de pigmentation telles que les éphélides (taches de rousseur) et les chloasmas (masques de grossesse), ou à éclaircir la peau autour des taches blanches de vitiligo pour qu'elles se voient moins.
Ainsi, on connaît des substances qui permettent de diminuer la synthèse de mélanine par les mélanocytes, et donc d'atténuer la pigmentation cutanée telles que : l'hydroquinone et ses dérivés comme l'arbutine, l'acide kojique, l'acide azélaique, l'acide octadécènedioïque, certains extraits de plantes comme Morus alba ou Glycyrrhiza glabra, l'acide ascorbique (vitamine C) et ses dérivés comme le phosphate d'ascorbyle ou le phosphate double de vitamine C et de vitamine E, certains dérivés de cystéine.
Un exemple d'agent de dépigmentation et/ou blanchissant de la peau et/ou des phanères est décrit dans le document FR-2.848.846-A: il s'agit en l'occurrence de dérivés de l'acide ascorbique.
Un autre exemple est décrit dans le document FR-2.841.550-A : il s'agit là de molécules dérivées de la tyramine.
Un autre exemple est décrit dans le document FR-2.886.843-A : il s'agit là d'extraits de Griffonia.
Mais les substances ci-dessus sont quelquefois cytotoxiques pour les mélanocytes, et/ou insuffisamment efficaces, et/ou trop coûteuses et/ou difficiles à utiliser : par exemple, les compositions à base d'hydroquinone sont actuellement interdites à la vente libre.
Aussi un des buts de la présente invention est-il relatif à l'utilisation d'une composition cosmétique ou dermatologique dont le principe actif ne présente pas les inconvénients exposés ci-dessus.
Un autre but de l'invention est de fournir une telle composition présentant une meilleure efficacité et à un coût compétitif.
Ces buts, ainsi que d'autres qui apparaîtront par la suite, sont atteints par l'utilisation d'un extrait de Hippophae dans une composition cosmétique ou dermatologique pour atténuer la pigmentation de la peau, des poils ou des cheveux.
Les extraits végétaux sont souvent utilisés dans des compositions cosmétiques ou dermatologiques.
En dehors des molécules nécessaires au métabolisme des végétaux tels que les sucres qui stockent l'énergie, les alpha-aminoacides nécessaires à l'élaboration des protéines, le glucose qui sert à la synthèse de la cellulose constitutive des parois cellulaires ... il y a dans les plantes des métabolites secondaires de nature très variable selon les familles et les genres.
Les métabolites secondaires jouent souvent un rôle protecteur dans les plantes contre les agressions bactériennes et fongiques, ou contre les prédateurs tels que les insectes ou les mammifères herbivores. Ce sont des molécules complexes qui présentent des activités biologiques recherchées en pharmacie ou dans le domaine phytosanitaire.
Par ailleurs les métabolites secondaires peuvent avoir des effets intéressants sur les cellules de la peau recherchés pour l'élaboration de formulations cosmétiques plus performantes.
La composition en métabolites secondaires varie selon les saisons, et selon les parties de la plante, racine, feuille, branche, fleur, fruit, graine...
Ces molécules actives sont extraites des plantes en fonction de leurs propriétés de solubilité dans les solvants de nature plus ou moins polaire. Ainsi la polarité du solvant conditionne le type de molécules extraites et donc l'activité des extraits.
D'une façon générale un extrait méthanolique ou hydro-éthanolique contient la plupart des métabolites secondaires polaires.
De plus, les extraits bruts peuvent être fractionnés en utilisant des solvants de polarité différente. Ainsi, un butanol pourra extraire les molécules les moins polaires d'un extrait brut aqueux ou méthanolique ou hydro-éthanolique.
Les extraits bruts ou les fractions d'extraits peuvent être caractérisés par chromatographie liquide sous haute pression (HPLC). Chaque molécule est caractérisée par un pic d'élution à un temps spécifique pour une colonne donnée, dans des conditions données d'élution (solvants et gradient).
On peut également caractériser un extrait ou une fraction d'extrait par chromatographie sur couche mince (TLC). Cette technique permet de caractériser des molécules de structure complète encore inconnue, par la distance d'élution de chacune d'elle sur la plaque (Rf) et par leur révélation par des réactifs plus ou moins spécifiques d'une famille chimique donnée.
Le genre Hippophae de la famille des Elaéagnacées, comprend notamment les espèces H.goniocarpa, H.gyantsensis, H. litangensis, H.neurocarpa, H.rhamnoides, H.salicifolia, H.tibetana (www.NCBI.nlm.nih.gov/Taxonomy/Browser).
Hippophae rhamnoides est un arbuste buissonnant épineux à feuilles caduques très commun dans le nord de l'Asie et en Europe. Dans les régions désertiques, il sert de nourriture aux animaux domestiques. Les anciens grecs l'ont baptisé « Hippos phaos » ce qui veut dire « cheval luisant », parce que les chevaux nourris de ses feuilles ou rameaux avaient le poil brillant (Production et utilization de l'argousier Hippophae rhamnoides L., T. Li et T. Beveridge, Les Presses scientifiques du CNRC, Ottawa 2004). On l'appelle en français Argousier. Il pousse en France à l'état naturel dans les Alpes du Sud et dans le Nord-Ouest sur les rivages sablonneux de la Manche en Picardie et en Flandre (Pierre Lieuthaghi, Le livre des arbres arbustes et arbrisseaux. Robert Morel ed. 1969). Il est aussi commun sur le littoral en Belgique et en Hollande. Il se cultive facilement pour la production des baies ou comme buisson ornemental. En anglais il se nomme « Sea Buckthorn », en allemand « Sanddorn », en chinois « Sha Ji » et en russe « Oblepika ».
La Chine, la Mongolie et la Russie comptent au total plus de 800 000 ha de peuplements naturels d'Hippophae rhamnoides et plus de 300 000 à 500 000 ha de cultures de cet arbuste (T. Li et T. Beveridge déjà cités).
Les racines d'H. rhamnoides (H. r.) présentent des nodosités dues à une bactérie Actynomycete du genre Frankia symbiotique et fixatrice de l'azote atmosphérique (E. Small et al, Biodiversity, 2002, 3, 25-27).
Les fruits ou baies d'H. rhamnoides sont consommés tels quels ou en jus, en confitures, comme condiment, ou sous d'autres formes, en Russie, en Mongolie, en Chine aussi bien qu'en Europe, et au Canada où l'espèce a été introduite pour fixer les sols et comme culture agro-alimentaire. La teneur des baies d' H. r. en Vitamine C est extrêmement élevée. Une autre particularité de ces fruits est que leur pulpe, comme celle de l'olive, renferme une huile. Une autre huile de composition en acides gras différente peut être extraite des graines. Les deux huiles contiennent du tocophérol et des caroténoïdes qui donnent aux baies leur couleur jaune, orange ou rouge (L'Argousier - Une culture polyvalente et prometteuse pour le Saskatchewan. Agriculture et Agroalimentaire Canada. 2007. http//www4.agr.gc.ca).
Lorsque H.rhamnoides est cultivé pour la production de fruits, il est conseillé pour optimiser leur nombre et leur qualité, de tailler les branches en hiver. Il est déconseillé de couper les branches en été ou à la fin de l'automne pour éviter l'introduction de maladies par les plaies de taille (Production et utilisation de l'argousier. Hippophae rhamnoides. Li T. et Beveridge T., 2004, Conseil national de recherches Canada).
En Chine du nord, H. rhamnoides a été semé par avion ou hélicoptère sur de vastes étendues du plateau de loess (Mongolie Intérieure, Shanxi) pour enrichir et fixer les sols ainsi que pour développer une activité économique autour de la valorisation des fruits. Mais il sert aussi de bois de chauffe et de fourrage pour les animaux domestiques (moutons, bovins... ) dont la santé s'en trouve améliorée (prise de poids, meilleurs aspect du poil, meilleure résistance aux maladies) (Ruan Chengjiang et Li Daiqiong, Function and benefit of Hippophae rhamnoides L. Improving eco-environment of loess plateau of China.12th ISCO Conférence, Beijing, 2002).
Dans la région aride et froide du Ladakh en Inde, les chameaux, yaks, moutons, chèvres... survivent à l'hiver grâce aux Hippophae qui constituent alors le seul fourrage disponible (Tsering Stobdan, DRDO Science Spectrum, mai 2008, 255-
Dans les pâturages du Mustang au Népal, les bergers conduisent leur bétail au début de l'hiver pour qu'ils broutent les feuilles d'Hippophae tibetana. Les bergers de Lomanthang ont remarqué que leurs chevaux malades retrouvent leur poids et un poil brillant si on leur donne à manger des feuilles et des branches tendres de Hippophae tibetana ( Khilendra Gurung and Vimal Gupta, Traditional uses and commercial utilization of seabuckthorn ,Hippophae L , in Mustang district, Népal. 2008). Hippophae rhamnoides L. pousse à l'état sauvage en Russie dans les républiques sibériennes de l'Altai, de Bouriatie ainsi que de Tuva, et des cultures ont été développées dans de nombreuses autres régions pour l'exploitation du fruit en agro-alimentaire, médecine et cosmétique (Terekhina NV, Interactive Agricultural Ecological Atlas of Russia and Neighboring Countries, 2003-2009. http://www.agroatlas.ru).
Les utilisations des fruits et des feuilles d' Hippophae rhamnoides sont multiples en alimentaire, en médecine, et en cosmétique (E . Small déjà cité).
En alimentaire, les fruits qui sont extrêmement riches en Vitamine C mais un peu trop acides pour être consommés tels quels, servent à faire des jus (purs ou en mélange), des gelées, des marmelades, des sauces et des liqueurs.
En médecine traditionnelle, Hippophae est connue depuis fort longtemps. Cette plante est citée dans le livre Tibétain rGyud bzi datant de 618-907 A.D. (Lu Rongsen, Seabuckthorn, ICIMOD Paper N°20, Kathmandu, Népal, 1992) et une représentation très fidèle en est donnée dans le « Tibetan Médicinal Paintings. Illustrations to the Blue Berry treatise of Sangye Gyamtso (1653-1705)" de Gyurne Dorje et Fernand Meyer (Serindia Publications, 1992). Elle était utilisée notamment comme expectorant et fluidifiant du sang.
En médecine moderne, depuis 1966, l'huile d' Hippophae (nom vernaculaire Russe Oblipika) est la base de nombreux médicaments dans les pays de l'ancienne URSS destinés notamment à soigner la peau et les muqueuses (Lu Rongsen déjà cité). C'est surtout l'huile du fruit qui est utilisée. En Chine la production d'huile d'Hippophae a commencé en 1988, et des. comprimés de Flavones des fruits d'Hippophae ont été lancés en 1986 pour le traitement de maladies coronariennes (Lu Rongsen déjà cité).
Les principaux produits industriels tirés des Hippophae sont le jus du fruit obtenu par pressurage, la crème d'huile de pulpe obtenue par centrifugation du jus, l'huile de graine obtenue par extraction à l'hexane, les flavones extraites à l'alcool des peaux de fruits résultant de la séparation du jus et des graines (Li et Beveridge déjà cités). Les feuilles sont séchées en Chine pour faire des tisanes.
En Cosmétique on utilise principalement les huiles de pulpe ou de graine pour protéger la peau, notamment contre le vieillissement (Li et Beveridge déjà cités). Ces huiles sont coûteuses car la cueillette des fruits d'Hippophae pose des problèmes en raison de leur petite taille et de leur fragilité (Li et Beveridge déjà cités). Ainsi le document JP-123851 1 -A décrit un cosmétique contenant l'huile extraite du péricarpe de Hippophae rhamnoides.
Le document FR-2840808-A1 décrit une composition cosmétique, dermatologique ou pharmaceutique contenant une fraction hydrophile de fruit de Hippophae rhamnoides.
Le document FR-2840809-A1 décrit également une composition cosmétique, dermatologique ou pharmaceutique contenant une fraction hydrophile de fruit de Hippophae rhamnoides, plus particulièrement pour la prévention ou le traitement du derme.
Mais aucun document antérieur ne mentionne l'obtention d'extraits de rameaux d'hiver de Hippophae pour la réalisation de compositions cosmétiques destinées à atténuer la pigmentation de la peau, des poils ou des cheveux.
Or il a été découvert de façon surprenante comme le montre la description des exemples qui vont suivre, que des extraits par un solvant polaire de rameaux d'hiver de Hippophae rhamnoides (H.r.) inhibent la biosynthèse des pigments mélanine par les cellules spécialisées de la peau (mélanocytes).
Par rameaux d'hiver, on entend des branches ou extrémités de branches prélevées sur des Hippophae ayant perdu leurs feuilles, ou n'ayant pas encore de feuilles. La période de récolte adéquate dépend évidemment de la latitude et de l'altitude du lieu de collecte ainsi que des conditions climatiques.
Exemple 1 . Extraction de branches d' Hippophae rhamnoides H.r.
Des jeunes branches de Hippophae rhamnoides ont été collectées en février dans les dunes côtières aux Pays Bas. Ces rameaux (rameaux d'hiver) n'avaient pas de feuilles, portaient des bourgeons, et étaient pauvres en bois.
Une portion de 300g de ce matériel végétal a été séché par lyophilisation, ce qui a donné 147g de produit sec qui a été broyé en une poudre de environ 100 mesh.
140g de cette poudre ont été extraits pendant une nuit par 700ml de méthanol.
Après filtration, l'extrait brut méthanolique a été évaporé à sec à l'évaporateur rotatif, puis repris par 500ml d'eau. La suspension obtenue a alors été extraite successivement par 3 portions de 200ml de 2-butanol.
Ces extraits butanoliques ont été rassemblés, puis évaporés à l'évaporateur rotatif. Le résidu a été gelé, puis lyophilisé pour donner la fraction butanolique. La phase aqueuse restante a également été passée à l'évaporateur rotatif, et le résidu obtenu a été également lyophilisé pour donner la fraction aqueuse.
On a ainsi obtenu 13,7g de fraction butanolique et 19,2g de fraction aqueuse.
L'extrait brut ainsi que les fractions butanolique et aqueuse ont été soumis à des analyses par chromatographie liquide HPLC sur colonne Phenomex Luna C18 avec un gradient linéaire d'acétonitrile dans une solution aqueuse de TFA à 0,01 %, ainsi qu'à des analyses par chromatographie sur couche mince (TLC) éluée avec le mélange acétate d'éthyle-acide acétique-acide formique-eau (70-8-8-18 en volumes).
Les plaques de TLC révélées avec les UV à 254 et 366 nm ainsi que par le réactif anisaldéhyde-acide sulfurique, montrent que les fractions butanolique et aqueuse sont assez similaires, mais que le composé principal de Rf voisin de 0,50 (révélé à l'anisaldéhyde) est plus important dans la fraction aqueuse.
Exemple 2 . Etude de l'activité des extraits de H.r. sur la synthèse de pigments mélanine par les cellules cutanées.
On étudie l'action des fractions butanolique et aqueuse de l'extrait de H.r. obtenues à l'exemple 1 sur la biosynthèse de la mélanine par les cellules de la peau.
La concentration maximum testée pour chaque fraction a été choisie en fonction des résultats d'un essai préalable de cytotoxicité.
On cultive des mélanocytes épidermiques humains normaux pendant 10 jours en absence et en présence de quantités non cytotoxiques de ces fractions. On évalue la quantité de pigments mélaniniques par extraction à la soude 0,5 N suivie d'une mesure de densité optique.
a) - Effet de la fraction butanol.
La fraction butanol aux concentrations de 0,0004 ; 0,002 ; et 0,01 mg/ml n'a pas entraîné de diminution significative de la quantité de mélanine produite par les mélanocytes.
b) - Effet de la fraction aqueuse.
La fraction aqueuse aux concentrations de 0,0002 ; 0,001 ; et 0,005 mg/ml, a entraîné une diminution significative et dose-dépendante de la quantité de mélanine produite par les mélanocytes qui passe respectivement à 99% du témoin, 94% du témoin (p inférieur à 0,01 ) et 87% du témoin (p inférieur à 0,01 ).
De cet exemple, il apparaît qu'un extrait de branches de Hippophae rhamnoides a une action significative sur la production de pigments mélanine par les cellules cutanées. En conséquence, on peut réaliser des compositions cosmétiques ou dermatologiques ayant pour but d'atténuer la pigmentation de la peau, des poils et des cheveux. Quelques exemples, n'ayant aucun caractère limitatif, de telles compositions seront donnés ci-après.
Exemple 3. Extraction de branches ô'Hippophae rhamnoides.
De jeunes branches d'H.r. ont été collectées en avril (rameaux d'hiver) dans les dunes côtières aux Pays Bas. On a choisi des rameaux n'ayant pas encore de feuilles, portant des bourgeons, et pauvres en bois.
Une portion de 327g de ce matériel végétal a été séchée par lyophilisation, ce qui a donné 127g de produit sec qui a été broyé en une poudre de environ 100 mesh.
126g de cette poudre ont été extraits sous ultrasonication, pendant 30 mn, par 630ml d'éthanol à 70%. Après filtration, une nouvelle portion de 000ml d'éthanol à 70% a été rajoutée sur la poudre et laissée pendant la nuit.
Après filtration, ces extraits bruts éthanoliques ont été rassemblés, et évaporés à sec à l'évaporateur rotatif, puis repris par 400ml d'eau. La suspension obtenue a alors été extraite successivement par 3 portions de 160ml de 2-butanol.
Ces extraits butanoliques ont été rassemblés, puis évaporés à l'évaporateur rotatif. Le résidu a été gelé, puis lyophilisé pour donner la fraction butanolique.
La phase aqueuse restante a également été passée à l'évaporateur rotatif, et le résidu obtenu a été également lyophilisé pour donner la fraction aqueuse.
On a ainsi obtenu 1 1 ,6 g de fraction butanolique et 16,6 g de fraction aqueuse.
L'extrait brut ainsi que les fractions butanolique et aqueuse ont été soumis à des analyses par chromatographie liquide HPLC sur colonne Phenomex Luna C18 avec un gradient linéaire d'acétonitrile dans une solution aqueuse de TFA à 0,01%, ainsi que des analyses par chromatographie sur couche mince TLC éluée avec le mélange acétate d'éthyle-acide acétique-acide formique-eau (70-8-8-18 en volumes).
Les plaques de TLC révélées avec les UV à 254 et 366 nm ainsi que par les réactifs anisaldéhyde-acide sulfurique, chlorure ferrique-acide perchlorique (Salkowski), ninhydrine, et p-diméthylaminobenzaldéhyde (Ehrlich), montrent que les fractions butanolique et aqueuse présentent des différences dans la zone des faibles Rf. Le composé principal de Rf 0,47 ainsi que d'autres bandes de Rf 0,58 ; 0,55 ; 0,41 ; révélées au FeCI3 (qui réagit avec les groupements indole), et à la ninhydrine (qui réagit avec les groupements aminé) pourrait être un composé de type indole- amine.
Exemple 4 . Etude de l'activité des extraits de Hippophae r. sur la synthèse de pigments mélanine par les mélanocytes.
Pour cet essai on a choisi des mélanocytes de la lignée B16 stimulés par un analogue de l'a MSH, la NDP-MSH.
On a ensemencé des plaques à puits et laissé les mélanocytes croître à confluence.
Puis on a changé le milieu de culture pour le remplacer suivant les puits par du milieu supplémenté ou non en NDP-MSH, ainsi qu'en différentes concentrations des fractions butanolique et aqueuse de l'extrait de Hippophae r. de l'Exemple 3.
Après incubation pendant 72h, on a dosé la quantité de mélanine dans les cultures, en mesurant leur absorption à 405 nm.
On a ainsi pu évaluer l'inhibition par les produits de la biosynthèse de mélanine par les mélanocytes stimulés par la NDP-MSH.
La concentration maximum testée pour chaque fraction a été choisie en fonction des résultats d'un essai préalable de cytotoxicité.
Les résultats sont résumés dans le Tableau suivant :
Réf. AMP-C Saison Solvant Fraction Concentration % mg/ml Mélanine
Contrôle stimulé 100 (+NDP-MSH)
Contrôle non 96 stimulé
35 hiver 70% éthanol H20 0,004 105
0,020 71
0,100 54
36 hiver 70% éthanol BuOH 0,0008 104
0,004 97
0,020 72 On a ainsi trouvé que la fraction butanolique de l'Exemple 3 réduit de 100 à 72% de façon significative la mélanogénèse des cellules B16, à la concentration de 0,02 mg/ml.
De plus, on a trouvé que la fraction aqueuse de l'extrait hydro-éthanolique de l'Exemple 3 réduit la mélanogénèse de 100 à 71 % de façon significative à la concentration de 0,02 mg/ml, et de 100 à 54% de façon hautement significative à la concentration de 0, 1 mg/ml.
De cet exemple, il apparaît qu'un extrait de Hippophae rhamnoides a une action significative d'inhibition de la production de pigments mélanine par les cellules cutanées.
En conséquence, il paraît intéressant de réaliser des compositions cosmétiques ou dermatologiques ayant pour but d'atténuer la pigmentation de la peau, des poils et des cheveux. Quelques exemples, n'ayant aucun caractère limitatif, de telles compositions seront données ci-après.
Exemple 5 . Extraction de branches de Hippophae rhamnoides (H.r.).
De jeunes branches de H.r. ont été récoltées le 8 septembre (rameaux d'été) au même endroit que pour les exemples 1 et 3. Ces rameaux d'été étaient porteurs de feuilles et de bourgeons. Seules les extrémités ont été prélevées de façon à ce que le matériel végétal ne comporte pas trop de bois.
Le matériel collecté a été immédiatement gelé à -80°C et séché par lyophilisation.
Puis on l'a broyé en poudre de 100 mesh.
On a procédé de même avec des rameaux d'hiver de l'exemple 3 stockés à - 80°C.
On a alors réalisé sous traitement aux ultra-sons pendant 30 mn, les 3 extractions suivantes :
- 75 g de rameaux d'hiver par 875 ml d'éthanol à 70% dans l'eau,
- 75 g de rameaux d'hiver par 875 ml d'eau,
- 144 g de rameaux d'été par 2050 ml d'éthanol à 70% dans l'eau.
Après filtration, les extraits ont été évaporés à l'évàporateur rotatif, puis repris par 200 ml d'eau (400 pour l'extrait de rameaux d'été). Ces suspensions ou solutions ont été extraites par 3 fois 80 ml de n-butanol (3 fois 160 ml pour l'extrait de rameaux d'été) et les extraits butanoliques ont été évaporés à l'évàporateur rotatif puis séchés par lyophilisation. Les rendements d'extraction ont été les suivants :
Figure imgf000012_0001
Exemple 6. Caractérisation des extraits et fractions.
Les trois extraits bruts de l'Exemple 5 ainsi que leurs fractions butanolique et aqueuse ont été caractérisés par chromatographie.
Chromatographie Liquide Haute Pression (HPLC).
On a utilisé une colonne Luna C18 3 microns et un gradient d'acétonitrile dans l'eau contenant 0,01 % d'acide trifluoroacétique passé à 0.75 ml/mn, et réalisé de la façon suivante :
Figure imgf000012_0002
La détection a été effectuée par une alignée de photodiodes à 220, 280, et
340 nm.
Les extraits de rameaux d'hiver comportent un double pic caractéristique élué autour de 5 - 5,5 mn.
L'extrait de rameaux d'été est plus riche en composés, mais contient très nettement moins des composés formant le double pic à 5 - 5,5 mn.
Chromatographie en couche mince (TLC).
Les trois extraits bruts et leurs fractions butanolique et aqueuse ont été chromatographiés sur quatre plaques avec le solvant : acétate d'éthyle/ acide acétique/ acide formique/ eau (70 :8 :8 : 18 en volumes).
Les plaques éluées ont été photographiées sous lumière visible, et UV à 254 et 366 nm.
De plus, les 4 plaques ont été révélées chacune avec l'un des réactifs suivants :
- anisaldéhyde/ acide sulfurique, un réactif non spécifique,
- chlorure ferrique dans l'acide perchlorique (réactif de Salkowski) qui révèle en particulier les indoles,
- ninhydrine, qui révèle les aminés,
- p-diméthylaminobenzaldéhyde (réactif d'Ehrlich), qui révèle les indoles.
Ces révélations mettent en évidence deux bandes intenses de Rf voisin de 0,5 dans les extraits de rameaux d'hiver, dont la plus importante est plus marquée dans les fractions aqueuses.
Ces bandes qui sont les plus importantes dans les extraits de rameaux d'hiver, sont nettement moins marquées dans l'extrait de rameaux d'été, même dans sa fraction aqueuse.
De plus, étant donné que ces bandes sont révélées en particulier par le chlorure ferrique et le réactif d'Ehrlich qui réagissent avec les indoles, ainsi que par la ninhydrine qui réagit avec les aminés, il pourrait s'agir de molécules de type indole- amine. Exemple 7 . Etude de l'activité des extraits de rameaux d'Hippophae r. sur la synthèse de pigments mélanine par les mélanocytes, en fonction de la saison de collecte.
Quatre des fractions d'extraits obtenues à l'Exemple 5 ont été évaluées en ce qui concerne leur aptitude à inhiber la synthèse de pigments mélanine des mélanocytes B16 stimulés par la NDP-MSH, suivant le même protocole que pour l'Exemple 4.
La concentration maximum testée pour chaque fraction a été choisie en fonction des résultats d'un essai préalable de cytotoxicité.
Les résultats sont résumés dans le tableau I suivant :
Tableau I
Réf. AMP-C Saison Solvant Fraction Indoles Conc. % Mélanine mg/ml (contrôle 100%)
44 (3) hiver 70% EtOH H20 +++++ 0,008 83
0,04 52
0,2 23
46 (6) hiver H20 H20 ++++ 0,008 87
0,04 51
0,2 26
47 (8) été 70% EtOH BuOH + 0,0016 106 0,008 100
0,04 95
48 (9) été 70% EtOH H20 ++ 0,008 105
0,04 97
0,02 79
- L'analyse des résultats permet les conclusions suivantes :
- les résultats confirment que des extraits de rameaux d'Hippophae rhamnoides inhibent la biosynthèse de mélanine par les mélanocytes, - les extraits de rameaux récoltés en hiver sont beaucoup plus actifs comme inhibiteurs de la mélanogénèse,
- les extraits les plus actifs sur l'inhibition de la mélanogénèse sont également ceux qui contiennent le plus de composés indoliques.
Il apparaît donc intéressant de réaliser de nouvelles formulations cosmétiques contenant des extraits de rameaux d'Hippophae rhamnoides.
Composition N°1. Crème cosmétique pour atténuer la pigmentation cutanée.
Pour réaliser une émulsion huile dans eau classique, on mélange sous agitation à 85°C une phase lipidique hydrophobe et une phase aqueuse contenant chacune des ingrédients destinés à conférer les propriétés d'usage habituelles d'une formulation cosmétique telles que la stabilité, la consistance, un étalement agréable, un pouvoir hydratant, une bonne stabilité microbiologique.
On refroidit sous agitation, et lorsque la température est descendue à 45°C, on ajoute 2% en poids d'une fraction aqueuse d'extrait hydro-éthanolique de rameaux d'hiver d'Hippophae rhamnoides tel qu'à l'Exemple 3.
Composition N°2. Crème cosmétique pour prévenir la pigmentation cutanée.
On réalise une émulsion huile dans eau comme ci-dessus avec une phase lipidique hydrophobe contenant des filtres anti-UV A et B. Au cours du refroidissement sous agitation, lorsque la température est descendue à 45°C, on ajoute 1 ,5% en poids d'un extrait aqueux brut sec de rameaux d'hiver d'Hippophae rhamnoides tel qu'à l'Exemple 5. Composition N°3. Gel cosmétique pour éclaircir le teint.
On prépare une suspension de liposomes contenant un extrait hydro- éthanolique de rameaux d'hiver d'Hippophae rhamnoides (H.r.) de composition suivante :
Fraction aqueuse sèche d'extrait hydro-éthanolique telle qu'à l'Exemple 5 1 Phospholipides pro-liposomes 2 Eau avec conservateurs 50 Gel aqueux qsp 100 On dissout l'extrait sec d'H.r. dans l'eau, puis on disperse les phospholipides, et on homogénéise cette phase avant de rajouter le gel aqueux sous agitation modérée pour ajuster la consistance et stabiliser les liposomes.
Composition N°4. Crème cosmétique pour améliorer l'éclat du teint. On réalise comme pour la composition N°1 une crème cosmétique pour améliorer l'éclat du teint associanf un extrait d'Hippophae rhamnoides (H.r.) à d'autres ingrédients actifs suivant la formule :
Fraction aqueuse d'extrait aqueux de rameaux d'hiver
de H.r. tel qu'à l'Exemple 5 2 5-hydroxy-tryptophane extrait de Griffonia simplicifolia 0,5 Ecdystérone 0,2 Arbutine 1 Acide lactique 0,5 Excipient émulsionné de type H/E avec filtres UVB+A et conservateurs qsp 100
Composition N°5. Lotion pour éclaircir les poils ou les cheveux.
On prépare suivant le même mode opératoire que pour la composition N° 3, une suspension de liposomes contenant un extrait aqueux brut sec de rameaux d'hiver d'H.r. de composition suivante :
Extrait brut sec de H.r. tel qu'à l'exemple 5 1 Phospholipides pro-liposomes 1 Eau avec conservateurs 90 Gel aqueux qsp 100
Bien évidemment, une composition selon la présente invention peut aussi contenir l'un ou l'autre des produits suivants:
- au moins un autre produit actif dépigmentant tel que l'arbutine, l'acide kojique, l'acide azélaïque, l'acide octadécènedioïque, un extrait de Morus alba, un extrait de Glycyrrhiza glabra, un extrait de Griffonia simplicifolia, l'acide ascorbique et ses dérivés comme le glucoside d'ascorbyle, le phosphate d'ascorbyle ou le phosphate double de vitamine C et de vitamine E, l'ecdystérone, un dérivé de cystéine, l'acide ellagique, le 5-hydroxytryptophane.
- au moins une substance pour filtrer ou bloquer les rayonnements ultra-violets B et/ou A telle que des pigments à base d'oxyde de titane, des pigments nacrés, des molécules de type benzophénone, anthranilate, cinnamique, dibenzoyl méthane, salicylique, dérivés du camphre, ou tout autre produit cité à l'annexe VII de la Directive « cosmétique » N°76/7688/CEE modifiée.
- au moins un produit anti-inflammatoire tel qu'un extrait de Glycyrrhiza glabra, l'acide glycyrrhétinique, un extrait de Scutellaria baicalensis, un extrait d'Aloe vera, le bisabolol.
- au moins un agent favorisant la desquamation tel que l'acide salicylique, l'acide lactique ou un autre alpha-hydroxyacide, l'urée.
- au moins un agent humectant tel que le glycérol, le sorbitol, la sérine, les sels de l'acide pyroglutamique (acide pyrrolidone carboxylique), l'acide hyaluronique.
Cette composition peut être sous l'une des formes suivantes :
- sous forme de lotion aqueuse ou hydro-alcoolique, d'un gel aqueux ou hydro alcoolique, d'une micro-émulsion, d'une émulsion liquide ou épaisse, d'une poudre libre ou compactée.
- sous forme d'un patch, la composition étant disposée sur un support solide.
Par ailleurs, dans une composition selon la présente invention, l'extrait de rameaux d'hiver de Hippophae rhamnoides peut être incorporé dans des particules telles que des liposomes (comme décrit pour la composition N°3), des vésicules de molécules amphiphiles non-ioniques, des phases lamellaires dispersées, des capsules, des éponges, ou disposé à la surface de particules telles que des particules de polymères synthétiques, des particules de cellulose, ou des particules minérales.
Ainsi la présente composition comporte de 0,05 à 20%, et de préférence de 0,5 à 5%, en poids d'extrait sec de rameaux d'Hippophae rhamnoides. Cette composition peut également contenir au moins un autre produit actif dépigmentant et/ou un agent pour favoriser la desquamation. Par ailleurs, la présente invention concerne non seulement les extraits aqueux ou hydroalcooliques de branches ou de rameaux d'Hippophae mais également les fractions plus ou moins purifiées de ces extraits.

Claims

REVENDICATIONS
1 - Extrait de rameaux d'Hippophae caractérisé par le fait qu'il s'agit d'extrait de rameaux d'hiver et qu'on utilise comme solvant l'eau, le méthanol, l'éthanol, le propylène glycol, le glycérol ou leurs mélanges.
2 - Extrait selon la revendication 1 caractérisé par le fait qu'il renferme au moins une molécule présentant un groupe indole.
3 - Utilisation d'un extrait selon l'une des revendications 1 à 2 dans une composition cosmétique pour atténuer la pigmentation de la peau, des poils ou des cheveux.
4 - Utilisation d'un extrait selon la revendication 3 caractérisée par le fait que ladite composition contient de 0,05 à 20% en poids d'extrait sec de rameaux d' Hippophae rhamnoides.
5 - Utilisation d'un extrait selon la revendication 4 caractérisée par le fait que ladite composition contient de 0,5 à 5% en poids d'extrait sec de rameaux d' Hippophae rhamnoides.
6 - Utilisation d'un extrait selon la revendication 3 caractérisée par le fait que ladite composition contient également au moins un autre produit actif dépigmentant. 7 - Utilisation d'un extrait selon la revendication 3 caractérisée par le fait que ladite composition contient également une substance pour filtrer les rayonnements UVB et/ou A.
8 - Utilisation d'un extrait selon la revendication 3 caractérisée par le fait que ladite composition contient également un agent pour favoriser la desquamation.
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