UA63896C2 - Morphogenetic material for repairing cartilage and bone and method for treating - Google Patents
Morphogenetic material for repairing cartilage and bone and method for treating Download PDFInfo
- Publication number
- UA63896C2 UA63896C2 UA98063095A UA98063095A UA63896C2 UA 63896 C2 UA63896 C2 UA 63896C2 UA 98063095 A UA98063095 A UA 98063095A UA 98063095 A UA98063095 A UA 98063095A UA 63896 C2 UA63896 C2 UA 63896C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- bone
- cartilage
- morphogenetic
- polyoxyethylene
- protein
- Prior art date
Links
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 title claims abstract description 42
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 title claims abstract description 36
- 239000000463 material Substances 0.000 title claims abstract description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 230000001002 morphogenetic effect Effects 0.000 title claims description 19
- 229920002503 polyoxyethylene-polyoxypropylene Polymers 0.000 claims abstract description 36
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 12
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 claims abstract description 11
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical group C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 108010007726 Bone Morphogenetic Proteins Proteins 0.000 claims description 32
- 102000007350 Bone Morphogenetic Proteins Human genes 0.000 claims description 32
- 229940112869 bone morphogenetic protein Drugs 0.000 claims description 28
- 101100472152 Trypanosoma brucei brucei (strain 927/4 GUTat10.1) REL1 gene Proteins 0.000 claims description 12
- 108010049931 Bone Morphogenetic Protein 2 Proteins 0.000 claims description 9
- 102100024506 Bone morphogenetic protein 2 Human genes 0.000 claims description 9
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 8
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 claims description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 4
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 abstract description 7
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 abstract description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 6
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 3
- 239000000411 inducer Substances 0.000 abstract 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 abstract 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 abstract 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 30
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 28
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 20
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 20
- 239000004174 erythrosine Substances 0.000 description 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 13
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 12
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 11
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 10
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 9
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 6
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 6
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 6
- 210000003000 inclusion body Anatomy 0.000 description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 6
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 4
- 230000034127 bone morphogenesis Effects 0.000 description 4
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 4
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 4
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 4
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 4
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 4
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 4
- 230000001191 orthodromic effect Effects 0.000 description 4
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 4
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 3
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 2
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 2
- 230000003459 anti-dromic effect Effects 0.000 description 2
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000002805 bone matrix Anatomy 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 230000007355 cartilage morphogenesis Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000011164 ossification Effects 0.000 description 2
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 2
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 2
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 2
- FGDZQCVHDSGLHJ-UHFFFAOYSA-M rubidium chloride Chemical compound [Cl-].[Rb+] FGDZQCVHDSGLHJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 2
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N thiamine Chemical compound CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 2
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical group [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 1
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 108010053070 Glutathione Disulfide Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 108010090290 Growth Differentiation Factor 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100040892 Growth/differentiation factor 2 Human genes 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 101710167839 Morphogenetic protein Proteins 0.000 description 1
- RAQQRQCODVNJCK-JLHYYAGUSA-N N-[(4-amino-2-methylpyrimidin-5-yl)methyl]-N-[(E)-5-hydroxy-3-(2-hydroxyethyldisulfanyl)pent-2-en-2-yl]formamide Chemical compound C\C(N(Cc1cnc(C)nc1N)C=O)=C(\CCO)SSCCO RAQQRQCODVNJCK-JLHYYAGUSA-N 0.000 description 1
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 1
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 108020005038 Terminator Codon Proteins 0.000 description 1
- 229910001069 Ti alloy Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002587 anti-hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 239000002473 artificial blood Substances 0.000 description 1
- 108010045569 atelocollagen Proteins 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 210000003321 cartilage cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000022159 cartilage development Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000012459 cleaning agent Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 229920006237 degradable polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- YPZRWBKMTBYPTK-BJDJZHNGSA-N glutathione disulfide Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CSSC[C@@H](C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)CC[C@H](N)C(O)=O YPZRWBKMTBYPTK-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- 239000000710 homodimer Substances 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000000622 irritating effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008141 laxative Substances 0.000 description 1
- 229940125722 laxative agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003589 local anesthetic agent Substances 0.000 description 1
- 229960005015 local anesthetics Drugs 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 210000001259 mesencephalon Anatomy 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- YPZRWBKMTBYPTK-UHFFFAOYSA-N oxidized gamma-L-glutamyl-L-cysteinylglycine Natural products OC(=O)C(N)CCC(=O)NC(C(=O)NCC(O)=O)CSSCC(C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)CCC(N)C(O)=O YPZRWBKMTBYPTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 229940102127 rubidium chloride Drugs 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 229910001256 stainless steel alloy Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006277 sulfonation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002700 tablet coating Substances 0.000 description 1
- 238000009492 tablet coating Methods 0.000 description 1
- 235000019157 thiamine Nutrition 0.000 description 1
- 239000011721 thiamine Substances 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000820 toxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N triphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/14—Macromolecular materials
- A61L27/22—Polypeptides or derivatives thereof, e.g. degradation products
- A61L27/227—Other specific proteins or polypeptides not covered by A61L27/222, A61L27/225 or A61L27/24
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
- A61F2/00—Filters implantable into blood vessels; Prostheses, i.e. artificial substitutes or replacements for parts of the body; Appliances for connecting them with the body; Devices providing patency to, or preventing collapsing of, tubular structures of the body, e.g. stents
- A61F2/02—Prostheses implantable into the body
- A61F2/28—Bones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
- A61F2/00—Filters implantable into blood vessels; Prostheses, i.e. artificial substitutes or replacements for parts of the body; Appliances for connecting them with the body; Devices providing patency to, or preventing collapsing of, tubular structures of the body, e.g. stents
- A61F2/02—Prostheses implantable into the body
- A61F2/30—Joints
- A61F2/30756—Cartilage endoprostheses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
- A61K38/1875—Bone morphogenic factor; Osteogenins; Osteogenic factor; Bone-inducing factor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
- C07K14/51—Bone morphogenetic factor; Osteogenins; Osteogenic factor; Bone-inducing factor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
- A61F2/00—Filters implantable into blood vessels; Prostheses, i.e. artificial substitutes or replacements for parts of the body; Appliances for connecting them with the body; Devices providing patency to, or preventing collapsing of, tubular structures of the body, e.g. stents
- A61F2/02—Prostheses implantable into the body
- A61F2/28—Bones
- A61F2002/2817—Bone stimulation by chemical reactions or by osteogenic or biological products for enhancing ossification, e.g. by bone morphogenetic or morphogenic proteins [BMP] or by transforming growth factors [TGF]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
- A61F2/00—Filters implantable into blood vessels; Prostheses, i.e. artificial substitutes or replacements for parts of the body; Appliances for connecting them with the body; Devices providing patency to, or preventing collapsing of, tubular structures of the body, e.g. stents
- A61F2/02—Prostheses implantable into the body
- A61F2/30—Joints
- A61F2002/30001—Additional features of subject-matter classified in A61F2/28, A61F2/30 and subgroups thereof
- A61F2002/30003—Material related properties of the prosthesis or of a coating on the prosthesis
- A61F2002/3006—Properties of materials and coating materials
- A61F2002/30062—(bio)absorbable, biodegradable, bioerodable, (bio)resorbable, resorptive
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
- A61F2210/00—Particular material properties of prostheses classified in groups A61F2/00 - A61F2/26 or A61F2/82 or A61F9/00 or A61F11/00 or subgroups thereof
- A61F2210/0004—Particular material properties of prostheses classified in groups A61F2/00 - A61F2/26 or A61F2/82 or A61F9/00 or A61F11/00 or subgroups thereof bioabsorbable
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
Description
Опис винаходу
Данное изобретение относится к морфогенетическим материалам для восстановления хряща и кости для 2 лечения костньїх переломов и костньїх дефектов. Болеє конкретно, данноє изобретениє касаєтся морфогенетических материалов для восстановления хряща и кости, которве содержат полиоксизтилен-полиоксипропиленовьй сополимер и костньій морфогенетический протеин.
Для восстановления хрящей и костей, в дополнение к аутопластике, используется методика, в которой протезнье материальй для поврежденньїх участков хряща и кости, состоящие из комбинации костного 70 морфогенетического протейна и подходящего носителя, укрепляют в поврежденном участке. В данной методике, дефектное место может бьіть подвергнуто хирургическому вмешательству для введения хрящевого и костного восстанавливающего материала, содержащего костньій морфогенетический протеин непосредственно в поврежденньй участок, и позтому находят широкое применение материаль! в твердой форме, такие как блоки, тампоньї, пластиньі и подобнье, которье простьї в применений. Также используют такие полутвердье форми, 79 как гели или пасть. В качестве носителей, которье делают такиє твердье или полутвердье формь применимьіми, используют, например, металль, такие как нержавеющие или титановье сплавь! или коллаген и гидроксиапатит (ГАП) или их смеси.
С другой стороньі, предпринимались попьїтки вводить костньій морфогенетический протеин для лечения костньїх переломов или остеоартритов, не прибегая к каким-либо хирургическим операциям. Такой способ введения крайне желателен с той точки зрения, что бескровноє введениє, а именно иньекции, сможет облегчить боли опациентов. Тем не менее, иньекции простьїх водньїх жидких препаратов костного морфогенетического протеина приводят к диффузии и исчезновению препарата после введения, и, таким образом, для того, чтобь! достигнуть зффективного введения, костньій морфогенетический протеин должен удерживаться в месте иньекции некоторьій период времени. В виду вьішесказанного, необходим носитель, с 22 которьій обладаєт способностью в жидком состояний проходить через иглу при введений, а затем Го) трансформироваться в гелеобразное состояние после введения для удерживания костного морфогенетического протеина в месте иньекции. Предпочтительно, носитель должен бьть нетоксичньм, иметь хорошие биосовместимость и вьісокую бисабсорбцию в живом организме.
Коллаген является известньім носителем для костного морфогенетического протеина и обладает желаемой о 30 биосовместимостью "й биоабсорбцией (Чарапезе Раїепі РиБбіїсайоп Мо 75425/1993). Также сообщалось о дФ) коллагене с характеристиками для иньекций, которьій может обеспечить иньецируемьй морфогенетический материал для восстановления хряща и кости (Чарапезе Раїепі Рибіїсайоп МоМо 23322/1995 и 53140/1993). со
Однако доступньій в настоящее время коллаген для использования в медицине получают из натуральньх со источников, таких как рогатьй скот или свиньи, таким образом, его свойства, такие как молекулярньй вес, 35 состав аминокислот и свойство сохранять влагу, не всегда постоянньі. Кроме того, существуют некоторье о побочнье зффектьї, такие как антигенность, т.к. для человека он является ксеногенньім протеийном. В частности, антигенность не может бьть полностью ликвидирована даже у ателоколлагена, т.е. коллагена, из которого удалень!ї теропептиднье участки, как отмечено у (.). Асадету ої ЮОегтай|іІоду 10, 638-646 и 647-651, 1984 и іБіа. « 21, 1203-1208, 1989). З 70 С другой стороньї указьівалось, что биологически разлагаемье полимерь, такие как полимолочная кислота с или сополимерьі полимолочной кислотьІ--лиКколевой кКислотьЬ, могут бьть использованьй в качестве
Із» фармацевтических носителей (0.5. Райепі Мо 5,385,887 и дарапезе Раїепі Рибіїсайоп Мо 22570/1994). Однако биологически разлагаемье полимерь существуют в твердом или полутвердом состоянийи, которьіе могут сохранять данную форму, и с зтой точки зрения, они классифицируются как группьї материалов, применимьсх 45 для хирургических операций. Даже если иньецируємьй комплекс может бьть приготовлен с использованием б таких биологически разлагаемьїх полимеров, в процессе приготовления должен применяться органический со растворитель, с которьм можно легко предвидеть возникновение проблемь инактивации активного ингредиента, костного морфогенетического протеина. со Обьектом данного изобретения является получение такого морфогенетического материала для
Те) 20 восстановления хряща и кости, которьій позволит избежать неблагоприятньїх показателей и недостатков известньїх средств, которне обсуждались вьіше, которьій имеет вьісокую бисабсорбцию и хорошее сродство с с активньім ингредиентом или костньім морфогенетическим протеийном, и которое демонстрирует постоянное расположение костного морфогенетического протеина, вьізьіваемое зависимьм от температурь! обратимьм превращением золь-гель, при отсутствии побочньїх зффектов, таких как антигенность и подобньєе.
Бьіли проведень ранние исследования соотношения между активньм ингредиентом, костньІм
ГФ) морфогенетическим протейном, и носителем в случае методики восстановления кости без хирургического вмешательства и обнаружено, что некоторье классьї полиоксизтилен-полиоксипропиленовьх сополимеров о могут демонстрировать вьісокую бисабсорбцию, хорошее сродство с костньім морфогенетическим протеином и зависимое от температурь! обратимое превращение золь-гель. 60 Получен КОСТНЬІЙ морфогенетический материал смешиванием водного раствора полиоксизтилен-полиоксипропиленового сополимера и костного морфогенетического протеина, которьй представлял собой иньекционную жидкость при температуре от 1"С до 30"С на момент введения, и мог желатинизироваться при температуре около 37"С в течение З минут после введения. Обнаружено, что зктопический хрящевой и костньій морфогенез имел место при введений указанного материала мьіши бо внутримьшечно в бедренную мьішцу и последующем удерживаний костного морфогенетического протеина при введений іп мімо, на основе чего данное исследование бьіло завершено.
Данное изобретение относится к морфогенетическому материалу для хрящевого и костного восстановления, которьій содержит полиоксизтилен-полиоксипропиленовьій сополимер и костньій морфогенетический протеин.
Используемьїй здесь термин "полиоксизтилен-полиоксипропиленовьій(е) сополимер(ь)" является общим названием неионньїх поверхностно-активньїх агентов полимерного типа, имеющих меньше гидрофильньмх полиоксипропиленгликолей в качестве гидрофобной группьі и зтиленоксид в качестве гидрофильной группь.
Легко получить поверхностно-активньіе агентьї, имеющие различнье свойства, изменяя молекулярньій вес полиоксипропиленгликоля и его соотношение с зтиленоксидом. Синтезируемье 7/0 полиоксизтилен-полиоксипропиленовье сополимерьі имеют молекулярньй вес полиоксипропиленгликоля в пределах от 900 до 4000 и массовьй процент зтиленоксида в целой молекуле 5905-9095. Например, блок-полимерь! полиоксизтилен-полиоксипропиленового сополимера (АЮЕКА), производимье Авзапі ЮОепкКа
Кодуо К.К, имеют систематическое название согласно молекулярному весу полиоксипропиленгликоля и массовому проценту зтиленоксида, классификационньй перечень которьїх представлен на фиг.1.
Промьішленное применение полиоксизтилен-полиоксипропиленовьїх сополимеров включаєт легкие слабительнье средства, основьі для мазей, искусственную кровь, оболочки для таблеток, наполнители, солюбилизаторьі или агентьї, увеличивающие растворимость вещества для иньекций и другие области фармации, кроме того, они используются в качестве основньїх очищающих агентов или пенопонижающих агентов. В частности, Рішгопіс Е-68 (молекулярньй вес полиоксипропиленгликоля 1,750 и содержание 2о Зтипеноксида 8090) имеет замечательное антигемолитическое действие и продается под названием
ЕХОСОРОЇ Я от ОСгееп Стгозв Согрогайоп в качестве добавки для зкстракорпорального кровообращения. Из результатов тестов на токсичность с о использованием различньїх животньїх, очевидно, что полиоксизтилен-полиоксипропиленовье сополимерь имеют крайне низкую токсичность и раздражающее действиє, при отсутствий данньїх о возможньх побочньїх зффектах, таких как антигенность и подобнье с дв (Етадгапсе дошгпаї, 7, 82-87, 1974). Результать тестов на токсичность показань! в таблице 1. о
Ф з
Ф со со
Полиоксизтилен-полиоксипропиленовье сополимерь являются лучшими в отношений легкости их со использования по сравнению с коллагеном, демонстрирующим необратимое переходное фазовое превращение при изменении температурь! с той точки зрения, что они демонстрируют обратимое фазовое превращение золь-гель. Зто свойство может контролироваться вьібором оптимальной температурь! для достижения фазового превращения полиоксизтилен-полиоксипропиленового сополимера и изменением концентрации водного « 0 Ваствора указанного полиоксизтилен-полиоксипропиленового сополимера (Іпб У. Рпагт. 22, 207-218, 1984 й ЕР З с 0551626А1).
Исходя из вьішеизложенного, очевидно, что полиоксизтилен-полиоксипропиленовье сополимерь! имеют з превосходнье характеристики в качестве носителей для лекарств. Уже предпринимались попьітки обьединять их с препаратами, имеющими низкий молекулярньй вес, такими как местнье анестезирующие средства, Ппротивоопухолевніе агенть и так далее (Іпї. 9. Ріагт. 8, 89-99, 1981 и Спет. Рпагт. ВиїІ. 32, 4205-4208, 1984)
ФО и смешивать их с физиологически активньм протеийном с вьсоким молекулярньм весом, таким как интерлейкинь и подобньсе (РНагт. Кез. 9, 425-434, 1992). і Данное изобретение относится к морфогенетическому материалу для восстановления хряща и кости, оо которьій содержит полиоксизтилен-полиоксипропиленовьйй сополимер и костньій морфологический протеин, где 5р Полиоксипропиленгликоль в качестве составляющего указанного полиоксизтилен-полиоксипропиленового со сополимера имеет молекулярньїй вес около 1500-4000 и содержание зтиленоксида составляет около 40-8095 на
Ф молекулу. В указанньїх пределах обеспечиваєтся способность Рійгопісв совершать зависимое от температурь обратимое превращение золь-гель, которое характеризует данньй Рінигопісв.
Далее, данное изобретение относится к морфогенетическому материалу для восстановления хряща и кости, вв В котором концентрация полиоксизтилен-полиоксипропиленовьїх сополимеров, как описано вьіше, в водном растворе составляет 10-5095. Мзвестно, что температура обратимого фазового превращения (Ф. полиоксизтилен-полиоксипропиленовьїх сополимеров обьічно варьируется в зависимости от концентрации их
ГІ приготовленньїх водньїх растворов, и полиоксизтилен-полиоксипропиленовье сополимерь!ї, в указанньїх вьіше пределах, могут превращаться в, гель при температуре тела, т.е. около 37"С при концентрации около 10-9095 в бо Водньх растворах. В качестве предпочтительного примера, получают водньй раствор блок-полимера полиоксизтилен-полиоксипропиленового сополимера с концентрацией 15-3095, имеющий молекулярньй вес полиоксипропиленгликоля 3850 и содержание зтиленоксида 7095 (Ріигопіс Б-127).
Используемь!й здесь костньій морфогенетический протеин (КМП) является протеийном, обладающим способностью индуцировать недифференцированньюе клетки среднего мозга до клеток хряща, обеспечивая вв таким образом костньій морфогенез.
Костнье морфогенетические протеинь), используемье в данном изобретений, включают, но не ограничиваются, рядом протеинов, относящихся к суперсемейству генов ТОЕ- Д, таких как от ВМР-2 до ВМР-9 и так далее, протеин, названньій МР5Б2, протейин, названньій ПВА-5 и подобнье. Особо предпочтительньй ВМР-2 является протеином, полученньім с использованием клеток яичника китайского хомяка (ЯКХ) по технологии генной инженерии, описанной УУапо, еї аІ. (Ргос. Май. Асад. Зеї. О5БА, 87, 2220-2224, 1990 и Ц.5. Райепі Мо 4,877,864), и особенно предпочтительньій протеин МР5Б2 является новьім протеийном, полученньїм по технологий генной инженерии, предлагаемой в данном изобретений (дарапезе Раїйепі Арріїсайоп Мо 93664/1995). Зтот новьій протеин может бьіть получен конструированием плазмидьї, содержащей последовательность ДНК, кодирующую последовательность аминокислот, как показано в 5ЕБО І МО. | Зедцепсе І ів(іпд производную от МРБ2 и 7/0 имеющую дополнительньй кодон кодирующего метионина на М-терминале указанной последовательности ДНК; превращением плазмида в Е. соїї; инкубированием Е. соїї с получением телец включений; и солюбилизацией и очисткой телец включений с получением мономерного протеина, которьій затем димеризируют и очищают.
Водньй раствор 15-3095 блок-полимера полиоксизтилен-полиоксипропиленового сополимера, содержащий в качестве активного ингредиента ВМР-2 или МРБ2 внутримьішечно вводят мьіши в бедренную мьішцу. МР52 7/5 удерживаєтся в месте введения и затем наблюдают іп мімо зктопическую способность хрящевого и костного морфогенеза.
До сих пор не публиковались даннье об иньекционном морфогенетическом материале для восстановления хряща и кости, включающем полиоксизтилен-полиоксипропиленовьій сополимер в сочетаний с костньім морфогенетическим протеином, которьй мог бьі использоваться для восстановления костей и хрящей, особенно в качестве агента для лечения переломов костей.
Данное изобретение далее относится к агенту для восстановления хряща и кости, содержащему полиоксизтилен-полиоксипропиленовьй сополимер и костньій морфогенетический протеин.
Более того, данное изобретение относится к методу лечения для восстановления хряща и кости, в котором хрящевой и костньй морфогенетический агент, состоящий из полиоксизтилен-полиоксипропиленового с сополимера в сочетаний с костньм морфогенетическим протеином, вводят локально в место перелома или повреждения кости человека или животного. о
Краткие пояснения к рисункам.
На фиг. 1 представлена классификация АЮЕКА Я Ріигопісв где содержание зтиленоксида в масс. 90 по отношению к весу полной молекульї полиоксизтилен-полиоксипропиленового сополимера указано по оси «(о зо абсцисс, а молекулярньій вес компонента полиоксипропиленгликоля в полиоксизтилен-полиоксипропиленовом сополимере указан по оси ординат. о
Фиг. 2 представляет мягкие рентгеновские снимки кальцинированной ткани бедренной кости/хряща правой со задней лапь! мьіши, полученнье в примере 4. Снимки (а) и (б) бьіли сделаньі через 2 недели после введения чистого АБЕКАФ Рішигопісв Е-127, и АОЕКАФ Рішигопісв Е-127, содержащего МР5Б2 соответственно. Явно і, Ззатемненньсе части мускула указьівают на зктопически образовавшуюся кость. Ге)
Фиг. З представляет микрофотографии окрашенньїх тканей не декальцинированного участка бедренной кости правой задней лапьії мьіши, полученнье в примере 4. Образование костной основьі и костной основь! с остеобластами и костного мозга может бьть подтверждено окрашиванием моп-Козза (а) и окрашиванием
Нетайохуїїп-Еовзіп (Б) соответственно. «
Фиг. 4 представляет карту плазмидов вектора зкспрессии протеина МР5О2, как получено в ссьІлочномМ шщ с примере 1 (2). й Описание предпочтительньїх воплощений изобретения. "» Зффект данного изобретения иллюстративно обьясняется с помощью следующих примеров и ссьІілочньх примеров. Тем не менее, данное изобретение не должно бьїіть ограничено данньіми примерами.
Пример 1. Получение морфогенетического материала для восстановления кости и хряща, содержащего б ВМР-2
АРЕКАФ Ріигопісв Б-127 (Авайі ЮОепка Кодуо К. К) известен как один из наименее токсичньх о полиоксизтилен-полиоксипропиленовьїх сополимеров (ЗЕЇМАКО КОШО" б, 875-880, 1986). В 7,0г о дистиллированной водьі для иньекций растворяют при охлаждениий льдом З, 0г АЮЕКА Ф Ріигопісв Б-127 с 5ор получением 3095 водного раствора АЮЕКАФ Рішйгопісв Е-127. Водньій раствор АОЕКАФ Рішгопісв Р-127 о порциями вливают при охлаждениий льдом в 9б-ячеячньій титровочньій планшет по Збомкл/ячейку, в каждую
Ф ячейку добавляют 4О0мкл 0,01М НС, содержащей 8Омкг ВМР-1 и смешивают. Смесь стерилизуют пропуская через 0,22мкм фильтр при 4"С с получением иньекционного раствора ВМР-2 общим обьемом около 400мкл (конечная концентрация АЮЕКА Ф Рішигопісв Е-127 составляет 2790). Таким же образом готовят иньекционнье растворьі ВМР-2, имеющие конечную концентрацию АОЕКАФ Рішигопісв Р-127 10, 15, 18 и 22,59.
Обнаружено, что иньекционньй раствор может существовать при 5"С или ниже, если конечная концентрация іФ) АРЕКАЄ Рінигопісв Е-127 составляет 27965, при 10"С и ниже, если конечная концентрация АОЕКА Ф Рішигопісз ко БЕ-127 составляет 22,596, или при 257"С или ниже, если конечная концентрация АЮОЕКА 8 Рішйгопісв Б-127 составляет 10-1895, в то время как иньекционньім раствором АСЕКАЄ Рішигопісв Е-127, переходящим в гелевое бо состояние при 37"С, является препарат, имеющий конечную концентрацию 1595 и вьіше. Позтому, найболее предпочтительньм является препарат АОЕКА Ф Рійгопісв Е-127 с конечной концентрацией 1895, которьій при комнатной температуре имеет жидкое состояние и превращается в гель при 37".
Пример 2. Получение морфогенетического материала для восстановления кости и хряща, содержащего
МРБ2 65 Иньекционньій раствор МР52, имеющий конечную концентрацию АБСЕКАФ РіІйгопісв Е-127 10, 15, 18, 22,5 и 2796 получают согласно методике, описанной в примере 1. Для МРБ2 получают те же иньекционнье препаратьі, что и для ВМР-2; то есть, иньекционньій раствор, может существовать при 5"С или ниже, если конечная концентрация АОЕКАЄ Рішигопісв Е-127 составляет 27905, при 10"С и ниже, если конечная концентрация
АРЕКАЄ Рішйгопісв Б-127 составляет 22,595, или при 257"С или ниже, если конечная концентрация АОЕКА
Рінйгопісв Е-127 составляет 10-1890.
Пример З. Остаточнье количества МР52 іп мімо после введения морфогенетического материала для восстановления хряща и кости 125|-меченьій иньекционньій раствор МР52, имеющий конечную концентрацию АРЕКАФ Рішигопісв Е-127 18, 22,5 и 2795, которьій получают, используя ту же методику и состав лекарственного средства, что и в примере 2, 70 за исключением того, что дополнительно добавляют 7292І-меченьй МРБ2, внутримьішечно вводят самцу мьіши (СК штамм, возраст 8 недель) при анестезиий в бедренную мьішцу правой задней лапь! в количестве 100мкл, используя иглу 2305 (около 37КБк 122І-МРБ2/участок) и затем фиксируют радиоактивность правой задней лапь через 0,5, 2 и 8 часов после введения. В качестве контроля используют иньекционньій водньй раствор 125|-МР5Б2. Результать показань в таблице 2.
Ріигопісв Е-127 1895) или водного жидкого препарата вместе
Из таблицьі 2 видно, что МР52 при использований полиоксизтилен-полиоксипропиленового сополимерав «с качестве фармацевтического носителя удерживаєтся гораздо лучше, чем при введений простого водного раствора МРБ2. Также, сходнье результатьіь наблюдались и при использований иньекционного препарата из о примера 1.
Пример 4. Фармакологическое действие на зктопический хрящевой и костньій морфогенез
Иньекционньій препарат МР5Б2 с конечной концентрацией АОЕКАФ Рішигопісв Б-127 1895, такой какполучен «0 в примере 2, внутримьішечно вводят самцу мьіши (штамм ІСК, возраст 8 недель) при анестезии в бедренную мьішцу правой задней лапьї в количестве 100мкл, используя иглу 230 (20мкг МР52/место). В качестве контроля б используют иньекционньій препарат АОЕКАФ Ріигопісв Е-127, не содержащий МРБ2. Образование хряща и о кости определяют через 2 недели после введения. Мьішь умерщвляли смещением шейньїх позвонков и правую заднюю лапу с местом иньекции отрезали и исследовали образование кости в месте введения, используя Шк
Мягкий рентгеновский облучатель. Результать! показань на фиг.2 (п-5). Из рентгеновских снимков видно, что (Се) при использованиий чистого АОЕКАФ РіІйгопісв Е-127 в месте введения не наблюдается никаких затемнений (фиг.2-а), в то время как у 8095 и более животньїх, получивших АСЕКА Ф Рійгопісв Е-127, содержащий МРБ2, наблюдаются явнье затемнения (фиг.2-Б). «
Затем, после получения снимков с помощью мягкого рентгеновского облучения, образцьі помещали в 1090 формалин и проводили гистологические исследования. Микроскопические фотографии окрашенньїх тканей - с мьіши, которье можно видеть на фиг.2-6 справа, показаньї на фиг.3. На фиг.3 наблюдают отложение кальция на ц затемненном участке при окрашиваний моп-Козза (фиг.3-а) и остеобластьі, костнье матриць! и костньій мозг "» подтверждались окрашиванием Нептаїйохуїїп-Еозіп (фиг.3-5), тем самьм подтверждая образование кости.
Никаких воспалительньїх реакций не наблюдалось. На данньїх рисунках костная матрица, остеобласт и костньй мозг обозначень как ВМ, ОВ и МА соответственно.
Ге») Проводили подобньюе тестьі с использованием иньекционного раствора ВМР-2, имеющего конечную концентрацию АБЕКАЄ Рішигопісв Е-127 1895, которне дали сходньсе результать!. о Приведенньіми вьше результатами подтверждается безопасность и полезность (ос полиоксизтилен-полиоксипропиленового сополимера при использований его в качестве носителя для фактора формирования кости. шо Ссьілочньйй пример. Получение нового протеина МР52 4) 1. Конструирование вектора (1) Вьіделение зрелой части варианта МР52
Человеческий МРБО2КДНК амплифицируют цепной реакцией полимеризации (ЦРП) только зрелой части, используя плазмидньій вектор, содержащий кДНК, описанньій в УХО 93/16099 (рекб525) в качестве матричной
ДНК. і) Часть ДНК зрелого гена типа МР52 замещают согласно методике увеличения продуктивности желаемого ко протеина, увеличивая содержание АТ вокруг инициаторного кодона АТГ (описано у М. Мобинага еї аї., Аадгіс.
Вісі. Спет., 52 (6), 1331-1338, 1988). 60 Замещение проводят согласно методике ЦРП, используя ортодромньійй ЦРП-праймер ЗЕ ІЮО МО.:2.
Последовательность ДНК ЦРП-праймера использует ДНК, описанную в ЗЕО ІЮО Мо.:2 в качестве ортодромного праймера, и описанную в ЗЕО ІО Мо.:3 в качестве антидромного праймера.
ЦРП проводят добавлением в ту же пробирку для исследования матриць! ДНК (1Онг), 50 пикомоль каждого ортодромного и антидромного ЦРП-праймера, дезокси-нуклеозидтрифосфата (0,2 ммоль) и МосСі» (1,5 ммоль), 65 одновременно с Так ДНК полимеразой (5 ед.).
Предпочтительна ЦРП, состоящая из 30 циклов, каждьй цикл включаєт денатурацию (947С, одна минута),
гибридизацию праймера (55"С, одна минута) и удлинение праймера (72"С, 2 минутьї) (Все дальнейшие ЦРП проведень при указанньїх вьіше условиях).
Продукт, полученньій по методике ЦРП, отделяют злектрофорезом в 1,595 агарозе с низкой температурой плавления (доступной ФМК) с удалением ДНК, составленной из около 360 пар нуклеотидов соответствующей последовательности аминокислоть! ОЕО ІЮ Мо.:1, которая определена как фрагмент 1. (2) Конструирование вектора зкспрессии Е. соїЇ для данного протеина
С целью повьішения числа репликаций плазмида, первоначальную репликацию изменяли от клеточной линии рВК до клеточной линии рус. Тас промоторную область вектора зкспрессиий рКК223-3 имеющейся в /о продаже Е. сої (производимой РНагуасіа Віоїесп АВ) сжигают рестрикцией знзимов З2рі и ЕсокКіІ, обрабатьзвают нуклеазой Мипд Веап (Такага Зпйиго К.К., Саїаіосдце Мо 2420А), лигируют для инициирования кодона сайта фрагмента 1 с помощью лигазьії ТАДНК (ТаКага 5пйиго К.К., Сайїаіодце Мо 2011А) и гпВТ.Т»о терминаторньй участок рКК223-3, сжигают рестрикцией знзимов ЗаїЇ и 52рі, лигируют участок для терминации кодона сайта фрагмента 1, сжигаемого зЗаїЇ, интегрируют в Зта! сайт рОС18 с конструированием вектора зкспрессии для /5 получения данного протеина ІрКОТ245 (фиг.4)), которьій депонирован (Ассезвіоп Митбрег Вікокепкі РЕКМ-Р
Р-14895) в Майопа! Іпвзійше ої Віозсіепсе апа Нитап-Тесппоїоду (МІВН), Адепсу ої Іпдивігіаї Зсіепсе апа
ТесппоІоду расположенньй в 1-3, Нідазпі 1-споте, ТзиКибазвнпі, Ірагакі-кКеп, дарап 14 апреля 1995, и переведен в депозит (Ассеззіоп Мо ВІОКЕМ-КІ ВР-5499) 10 апреля 1996 согласно Видаревзі Тгеаїу оп (Пе Іпіегпайопаї
Кесодпійоп ої (Пе Оерозії ої Містоогдапізтв. ДНК рКОТ245 имеет длину 3,7 т.п.н. Зкспрессия вектора данного го протеина такая, как сконструирована, определена для его основной последовательности с помощью определителя последовательностей РНагтасіа АГ Е ДНК. (3) Трансформация
Трансформацию осуществляют по методу КизПппег ей аі. с использованием хлорида рубидия (Сепеїїс
Епадіпеегіпо, р. 17, ЕІзвеміег (1978)). Отмечено, что рКОТ245 мигрируют в хозяина Е. соїї М/311 ОМ согласно сч описанной вьіше методике получения Е. соїї, способной производить данньй протеин. 2. Культивирование і) (1) Культивирование
Данньій протеийн, производящий Е. соїї предварительно культивируют в модифицированной среде 5ОС (бактотриптон 20г/л, бактодрожжевой зкстракт 5г/л, Мас! О,5г/л, МоСІ».0"бНЬО 2,0Зг/л, глюкоза З,бг/л) и Ге зо добавляют 100моль/л суспензии мицелия к бл производительной средь (бактотриптон 5г/л, лимонная кислота 4,Зг/л, КонНРО,Х 4,675г/л, КНеРО»Х 1,275г/л, Масі 0,865г/л, РевО/77НьЬО 100мг/л, СиЗО)75Н2ЬО г/л, Мп5Оу-пНьО б»
О,5мг/л, СасСі»2Н»О 2мг/л, Ма»В.О7710Н2О 0,225мг/л, (МН.)бМо7О2474НоО 0,мг/л, 2п50,77НоО 225мМг/л, (З
СосСІ»бНЬО бмг/л, М95О/77НьЬО 2,2мг/л, Тиамин НСІ 5,Омг/л, глюкоза Зг/л) и затем культивируют при перемешивании и продуваний воздухом в 70л культивационном резервуаре и добавляют о 3о изопропил-Д-О-тиогалактопиранозид в концентрации їмММ на стадиий фазь! логаритмического роста (005505/0) ісе) и затем культивацию продолжают до тех пор, пока ООсво не достигнет 150. Во время культивации температуру поддерживают на уровне 32"С и уровень рН доводят до 7,15 добавлением аммиака, в то время как концентрацию кислорода поддерживают на уровне 5095 насьшщенности воздуха увеличениєм скорости «4, перемешивания для предотвращения какого либо снижения концентрации растворенного кислорода.
Альтернативно, культивацию проводят добавлением 5095 раствора глюкозь! при концентрации 0,295, используя З с в качестве стандарта бьістрое увеличение концентрации растворенного кислорода для сохранения вьісокой "» концентрации мицелия. " (2) Получение тельца включения Е. Соїї
Культуральньй бульон, полученньій как описано вьіше, центрифугируют для отделения мицелия, которьй 49 затем суспендируют 25мММ трис-НСІ буфера, содержащего 10ММ зтилендиаминтетрауксусноий кислоть (рН 7,3) и
Фо затем расщепляют бактерии с помощью аппарата для расщепления мицелия (производится Собіїп Со., Іпс.) и г) снова центрифугируют для отделения осадка, содержащего тельца включения. 3. Очистка бо (1) Солюбилизация телец включения Е. сої (Те) 20 Тельца включения Е. соїї триждь! промьівают 190 Ттйоп Х-100 и затем центрифугируют при 3000 Х г при 4"С в течение 30 минут. Полученньій таким образом осадок солюбилизируют при обработке ультразвуком с 20мММ що трис-НСІ буфером, рН 8,3, 8М мочевина, 10мММ дитиотреитола и їмМ ЗДТК. (2) Очистка мономера
Полученную таким образом солюбилизированную жидкость центрифугируют при 20000 Х г при 4"С в течение 22 30 минут для отделения надсадочной жидкости. Полученную надсадочную жидкость пропускают через (ФІ ЗР-Зерпагозе ЕЕ (РНагтасіа), которую уравновешивают 20мМ трис-НСІ буфером (рН 8,3), ЄМ мочевинь и 1мМ
ЗДТК, промьівают указанньим раствором и затем злюируют указанньм раствором, содержащим 0,5М хлорида о натрия. К злюату добавляют Ма»5О) и Ма»бЗ/ Ов при соответствующих конечньїх концентрациях 111мМ и 13мММ и проводят сульфирование при 4"С в течение 15 часов. Сульфированньій раствор-гель фильтруют с Зерпасгуї! 608-200 (Рпагтасіа), которьій уравновешивают 20мММ трис-НСІ буфером (рН 8,3), ЄМ мочевиньі), 0,2М хлорида натрия и 1М ЗДТК с получением единственного сульфированного мономера протеина данного изобретения. (3) Преобразование складок
К раствору сульфированного мономера протеина данного изобретения добавляют 9-кратньій обьем 50ММ
Ма-глицинового буфера (рН 9,8), 0,2М хлорида натрия, 16мМ СНАРБ5, 5ММ ЗДТК и 2мММ О5Н (глютатиона бо восстановленного типа) и їмМ 5550 (глютатиона окисленного типа) и затем смесь перемешивают при 4"С в течение 1 дня для осуществления преобразования складок. (4) Очистка димера
Образец растворяют в двукратном обьеме очищенной водьій и затем добавляют 6М Масі, доводя рн приблизительно до 74, и помещают для изозлектрического осаждения. Осадок, собранньй центрифугированием при 3000 х г в течение 20 минут, солюбилизируют в растворе с 3095 ацетонитрилом, содержащим 0,196 ТРА. Раствор разбавляют двумерньм обьемом очищенной водь и загружают в колонку
КЕБОШКСЕ КРС (Рпагтасіа) обращенно-фазовой ЖХВР, которую уравновешивают 2595 ацетонитрилом, содержащим 0,0595 ТЕА, и затем злюируют линейньм градиентом 25-4595 ацетонитрила, содержащего 0,0590 7/0 ТРА. Злюат регистрируют при 280нм поглощения. Очищеннье фракции гомодимера протейина собирают и лиофилизируют с помощью ЗреедраскК Сопсепігайг (Зегмапі Со.). (5) Определение физико-химических свойств данного очищенного протеина (а) Анализ М-окончаний последовательности аминокислот
Данньій очищенньій протеин, полученньй как описано вьше, анализируют на предмет М-окончаний /5 последовательности аминокислот с помощью определителя аминокислотньїх последовательностей, модель 476А (Арріїей Віозувіет) для подтверждения последовательности аминокислот от М-окончания до 30 аминокислоть, как показано в 5ЕО ІЮ Мо.:1 перечня последовательностей. (Б) Анализ состава аминокислот
Данньій очищенньй протеин, полученньій как описано вьіше, исследуют с помощью аминокислотного 2о анализатора |РІСО ТАС Зузіет (УМаїеге Со., Ца.)). Результать! показань! в таблице 3, где цифровьне индексь означают номер аминокислотного остатка в мономере. сч в о в18418
Те зо тв |в Ф со о з Те ев 11496 |в « 8 с вдлое 11598 | 6 . т з Длина последовательности| 000019 -ї неопределимо (Ге) (с) Анализ злектрофорезом
Молекулярньй вес данного очищенного протеина, полученного как описано вьіше, подтверждают с помощью о ЗО5Б-РАСЕ при восстанавливающих условиях, показавшего молекулярньй вес около 28кДа. (ее) Представленньє в пунктах (а), (Б) и (с) результать! подтверждают, что данньій протеин является протеином, состоящим из 119 аминокислотньїх остатков, начинающихся от М-окончания Рго. ї-о Промьішленная применимость 4) Морфогенетический материал для восстановления хряща и кости, согласно данному изобретению, может применяться на поврежденньх участках при терапии переломов кости, не требуя хирургического вмешательства, являясь простьім и безболезненньім способом благодаря вьісокой биоабсорбции, хорошему сродству с активньім ингредиентом, т.е. костньім морфогенетическим протеийном, и зависимому от температурь обратимому превращению золь-гель. Таким образом, действие костного морфогенетического протеина может
ІФ) бьть продлено и дополнительньій морфогенетический материал для восстановления хряща и кости без ко побочного действия может бьіть получен.
Перечень последовательностей во ЗБОЮ МО.
Длина последовательности: 119
Тип последовательности: аминокислота
Топология: линейная
Тип молекуль!: пептид 65 Тип фрагмента: фрагмент М-окончания
ИсходньйЙй Источник:
Организм: пото заріепз
Свойства: человеческий зародьш
Признак последовательности:
Расположение:
Другая информация: последовательность аминокислот от 383 до 501 в последовательности аминокислот
МРБ2
Описание последовательности:
ССА СТО БОС АСТ СОС СЬО БОС ААО СОА СОС АОС АКА АВС ОСТІ А ОСТ 48 70 Рко Пес АТа Твпх о Аха біп 51у дуз Аку Ро бек Пуз Азп ем уз Аїа 5 10 15
СОС ТОС АСТ СОС ААб ОСА СТО САТ ОТО ААС ОТТО ААО САС АТО бос тоб 95
Акч Суз Зехк Ах Буз А1іа цей Кіз Уаї Азп РПпе Буз Ар Меї О1у Тер й 20 25 30
САС ОАС ТбО АТС АТС СА ССС СТ СА ТАС БА ОСТ ТТ САС ТОС А 144
Азр Ар Тер І112 Т12е Аза Рго Гей бі Тук б1у діа Бе Ні Суз С1ц уй 35 40 45 обо СТО ТОоС сАС ТС ССА ТТ СОС ТОС САС СТО бАб СОС АСО ААТ САТ 192 біу це Суз 01 Рпе Рко цеч Аку беї Ніз їй біо Рго Тег деп Ніз 50 55 50 с й о
ПСА СТО АТС САС АС СТО АТО ДАСОТОС АТО САС ССС БАС ТОС АСА ССА 240
Аїа уаї І1е біп Тих Ше Меї Азп Баг МесАзр Рго Сі бег Так Рго 65 75 75 во . (Се)
ССС ВСС тТОосС тот Сто ССС АСО ССА СТО АСТ СОС АТС АбС О АТС Сто ТТ 248 Ф
Рхо ТвІ Суз Суз Ма! Рко ТНІ Ако Тецп бек Рго І1а бес 118 Бей Рпє 85 90 35 со
АТІ БАС ТСТ ОСС ААС ААС ОТО ОТО ТАТ ААб САС ТАТ САС БАС АТО сто 0336 о
І1е Ахтр бек Аїа Азп Азп Уаї уаї Тух уз біп Тух бі Авр Мес уаі іш
Й 100 195 110
ОТО бАб ТСо тот бос ТоС АС 357 «
Ууаї бі) бек Суз бі Суз Ак4 115 - що с а ЗЕО ІО Мо.2 ,» Длина последовательности: 27
Тип последовательности: нуклеиновая кислота
Тяж: одинарньй (о) Топология: линейная о Тип молекуль!: любье нуклеийновье кислоть
Исходньй источник: нет (ее) Организм: нет с 50 Клеточная линия: нет
Признак последовательности: ортодромньій РПЦ праймер для вьіделения зрелого типа МР52 4) Описание последовательности:
АТААТОССАС ТАССААСТСО ТСАСООС 27
ЗЕО ІЮ МОЗ
59 Длина последовательности: 26
ГФ) Тип последовательности: нуклеиновая кислота 7 Тяж: одинарньй
Топология: линейная
Тип молекуль!: любье нуклеийновье кислоть бо Исходньй источник: нет
Организм: нет
Клеточная линия: нет
Признак последовательности: антидромньій РПЦ праймер для вьіделения зрелого типа МР52
Описание последовательности: б5
Claims (7)
1. Морфогенетический материал для восстановления хряща и окости, которьій содержит 2 полиоксизтилен-полиоксипропиленовьй сополимер и костньій морфогенетический протеин.
2. Морфогенетический материал для восстановления хряща и кости по п. 1, где полипропиленгликоль в качестве составляющего указанного полиоксизтилен-полиоксипропиленового сополимера имеет молекулярньй вес около 1500-4000 и содержание зтиленоксида составляет около 40-8095/молекулу.
3. Морфогенетический материал для восстановления хряща и кости по п. 2, где концентрация указанного
10. полиоксизтилен-полиоксипропиленового сополимера в водном растворе составляєт около 10-5095.
4. Морфогенетический материал для восстановления хряща и кости по любому из пп. 1-3, где указанньй костНьІй морфогенетический протеин является ВМР-2.
5. Морфогенетический материал для восстановления хряща и кости по любому из пп. 1-3, где указанньй костНньІй морфогенетический протеин является МР52. 19 б.
Хрящевой и костньій морфогенетический агент для восстановления кости и хряща, содержащий полиоксизтилен-полиоксипропиленовьй сополимер и костньій морфогенетический протеин.
7. Способ лечения для восстановления хряща и кости, в котором хрящевой и костньій морфогенетический агент, содержащий полиоксизтилен-полиоксипропиленовьій сополимер в сочетаний со костньІмМ морфогенетическим протеином, вводят локально в место перелома кости или повреждения кости человека или животного. с щі 6) (Се) (о) (ее) (зе) (Се)
- . и? (о) (95) (ее) се) 4) іме) 60 б5
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7322402A JPH09143093A (ja) | 1995-11-17 | 1995-11-17 | 軟骨・骨誘導性修復用材料 |
| PCT/JP1996/003333 WO1997018829A1 (fr) | 1995-11-17 | 1996-11-14 | Materiaux inducteurs d'os/de cartilage en vue de leur reparation |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA63896C2 true UA63896C2 (en) | 2004-02-16 |
Family
ID=18143268
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA98063095A UA63896C2 (en) | 1995-11-17 | 1996-11-14 | Morphogenetic material for repairing cartilage and bone and method for treating |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US6903071B2 (uk) |
| EP (1) | EP0884052B1 (uk) |
| JP (1) | JPH09143093A (uk) |
| KR (1) | KR100458413B1 (uk) |
| CN (1) | CN1165340C (uk) |
| AT (1) | ATE254470T1 (uk) |
| AU (1) | AU712445C (uk) |
| CA (1) | CA2235400C (uk) |
| DE (1) | DE69630811T2 (uk) |
| DK (1) | DK0884052T3 (uk) |
| ES (1) | ES2211993T3 (uk) |
| HK (1) | HK1018205A1 (uk) |
| HU (1) | HU226201B1 (uk) |
| NO (1) | NO325119B1 (uk) |
| NZ (1) | NZ322188A (uk) |
| PT (1) | PT884052E (uk) |
| RU (1) | RU2180234C2 (uk) |
| UA (1) | UA63896C2 (uk) |
| WO (1) | WO1997018829A1 (uk) |
Families Citing this family (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH09143093A (ja) * | 1995-11-17 | 1997-06-03 | Hoechst Japan Ltd | 軟骨・骨誘導性修復用材料 |
| WO1998034655A1 (en) † | 1997-02-07 | 1998-08-13 | Stryker Corporation | Matrix-free osteogenic devices, implants and methods of use thereof |
| US6309659B1 (en) | 1997-09-02 | 2001-10-30 | Gensci Orthobiologics, Inc. | Reverse phase connective tissue repair composition |
| AU1100101A (en) * | 1999-10-29 | 2001-05-14 | Children's Hospital Of Los Angeles | Bone hemostasis method and materials |
| US9616150B2 (en) | 1999-10-29 | 2017-04-11 | Children's Hospital Los Angeles | Bone hemostasis method and materials |
| DK1229940T3 (da) | 1999-11-15 | 2014-08-18 | Piramal Healthcare Canada Ltd | Temperaturstyret og ph-afhængig selvgelerende, vandig biopolymeropløsning |
| US7747332B2 (en) * | 2000-05-08 | 2010-06-29 | International Rehabilitative Sciences, Inc. | Electrical stimulation combined with a biologic to increase osteogenesis |
| CN1471412B8 (zh) * | 2000-06-29 | 2016-06-15 | 生物合成技术加拿大公司 | 用于修复和再生软骨和其它组织的组合物以及该组合物的用途 |
| JP2002306163A (ja) * | 2001-04-11 | 2002-10-22 | Chemo Sero Therapeut Res Inst | 大腸菌を宿主とする遺伝子組換えヒトトロンビンの調製方法 |
| US7205337B2 (en) * | 2001-12-21 | 2007-04-17 | Isotis Orthobiologics, Inc. | End-capped polymers and compositions containing such compounds |
| DE60209795T2 (de) * | 2001-12-21 | 2006-10-05 | IsoTis Orthobiologics, Inc., Irvine | Zusammensetzungen enthaltend endgruppen-verkappte polyalkylenglykole |
| ES2428027T3 (es) * | 2002-05-20 | 2013-11-05 | Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. | Composición que comprende adenosín-monofosfato para el tratamiento del melasma |
| WO2004022120A1 (en) * | 2002-09-04 | 2004-03-18 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem | Compositions comprising bone marrow cells, demineralized bone matrix and rtg polymers for use in the induction of bone and cartilage formation |
| EP1596767B1 (en) | 2003-02-12 | 2018-10-03 | Syncera, Inc. | Random and non-random alkylene oxide polymer alloy compositions |
| EP2001528A4 (en) * | 2006-03-23 | 2012-04-04 | Citagenix Inc | REVERSE-PHASE OSSEOCONDUCTIVE COMPOSITION |
| US20100047299A1 (en) * | 2007-01-25 | 2010-02-25 | Biopharm Gesellschaft Zur Biotechnologischen Entwicklung Von Pharmaka Mbh | Use of gdf-5 for the improvement or maintenance of dermal appearance |
| US8290780B2 (en) | 2009-06-24 | 2012-10-16 | International Business Machines Corporation | Dynamically extending the speech prompts of a multimodal application |
| KR101405104B1 (ko) * | 2011-12-26 | 2014-06-10 | 한남대학교 산학협력단 | 약물의 서방형 방출 특성을 가지는 골 시멘트 |
| US10743996B2 (en) * | 2017-03-24 | 2020-08-18 | Robert L. Bundy | Amnion putty for cartilage repair |
| CN109125791B (zh) * | 2018-09-29 | 2019-08-30 | 广州贝奥吉因生物科技有限公司 | 一种具有促进骨修复功能的可吸收骨蜡及制备方法 |
Family Cites Families (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61277612A (ja) * | 1985-05-31 | 1986-12-08 | Kiyoshi Morikawa | 接種用徐放性組成物 |
| JPH0723322B2 (ja) | 1985-12-07 | 1995-03-15 | 克之 藤井 | 液状骨形成剤からなる注射液 |
| NZ226171A (en) * | 1987-09-18 | 1990-06-26 | Ethicon Inc | Gel formulation containing polypeptide growth factor |
| US4863732A (en) * | 1987-12-16 | 1989-09-05 | Collagen Corporation | Injectable composition for inductive bone repair |
| US5162430A (en) * | 1988-11-21 | 1992-11-10 | Collagen Corporation | Collagen-polymer conjugates |
| JPH045227A (ja) * | 1990-04-17 | 1992-01-09 | Pharmetrix Corp | 歯周疾患治療システム |
| CA2040460C (en) * | 1990-05-01 | 1997-06-10 | Tacey X. Viegas | Drug delivery with thermoreversible gels |
| WO1992020371A1 (en) * | 1991-05-10 | 1992-11-26 | Celtrix Pharmaceuticals, Inc. | Targeted delivery of bone growth factors |
| JP3351525B2 (ja) | 1991-06-21 | 2002-11-25 | ジェネティックス・インスティテュート・インコーポレイテッド | 骨形成性蛋白医薬処方物 |
| EP0551626A1 (en) * | 1991-12-19 | 1993-07-21 | LEK, tovarna farmacevtskih in kemicnih izdelkov, d.d. | Thermoreversible gel as a liquid pharmaceutical carrier for a galenic formulation |
| JPH08502082A (ja) * | 1992-07-02 | 1996-03-05 | コラーゲン コーポレイション | 生体適合性ポリマー結合体 |
| IL110589A0 (en) * | 1993-08-10 | 1994-11-11 | Bioph Biotech Entw Pharm Gmbh | Growth/differentiation factor of the TGF- beta family |
| JP3696265B2 (ja) * | 1994-02-04 | 2005-09-14 | 日本オルガノン株式会社 | 点鼻液剤 |
| DE4423396C2 (de) | 1994-07-04 | 2001-10-25 | Fraunhofer Ges Forschung | Verfahren zum Herstellen einer mikromechanischen Oberflächenstruktur |
| WO1996021427A1 (en) | 1995-01-09 | 1996-07-18 | Atrix Laboratories, Inc. | Liquid polymer delivery system |
| US5902785A (en) * | 1995-06-06 | 1999-05-11 | Genetics Institute, Inc. | Cartilage induction by bone morphogenetic proteins |
| JPH09143093A (ja) * | 1995-11-17 | 1997-06-03 | Hoechst Japan Ltd | 軟骨・骨誘導性修復用材料 |
-
1995
- 1995-11-17 JP JP7322402A patent/JPH09143093A/ja active Pending
-
1996
- 1996-11-14 DE DE69630811T patent/DE69630811T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-11-14 CA CA002235400A patent/CA2235400C/en not_active Expired - Fee Related
- 1996-11-14 NZ NZ322188A patent/NZ322188A/xx not_active IP Right Cessation
- 1996-11-14 KR KR10-1998-0703705A patent/KR100458413B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1996-11-14 EP EP96938460A patent/EP0884052B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-11-14 RU RU98111599/14A patent/RU2180234C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1996-11-14 HU HU0000411A patent/HU226201B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1996-11-14 WO PCT/JP1996/003333 patent/WO1997018829A1/ja active IP Right Grant
- 1996-11-14 DK DK96938460T patent/DK0884052T3/da active
- 1996-11-14 UA UA98063095A patent/UA63896C2/uk unknown
- 1996-11-14 PT PT96938460T patent/PT884052E/pt unknown
- 1996-11-14 AT AT96938460T patent/ATE254470T1/de active
- 1996-11-14 ES ES96938460T patent/ES2211993T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-11-14 CN CNB961995645A patent/CN1165340C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1996-11-14 US US09/068,253 patent/US6903071B2/en not_active Expired - Fee Related
- 1996-11-14 AU AU75869/96A patent/AU712445C/en not_active Ceased
-
1998
- 1998-05-15 NO NO19982236A patent/NO325119B1/no not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-07-23 HK HK99103183A patent/HK1018205A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2004
- 2004-07-07 US US10/885,099 patent/US7238657B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US7238657B2 (en) | 2007-07-03 |
| HUP0000411A2 (hu) | 2001-04-28 |
| WO1997018829A1 (fr) | 1997-05-29 |
| JPH09143093A (ja) | 1997-06-03 |
| US20020168381A1 (en) | 2002-11-14 |
| CN1207047A (zh) | 1999-02-03 |
| HK1018205A1 (en) | 1999-12-17 |
| CN1165340C (zh) | 2004-09-08 |
| ATE254470T1 (de) | 2003-12-15 |
| CA2235400A1 (en) | 1997-05-29 |
| PT884052E (pt) | 2004-04-30 |
| NO982236L (no) | 1998-06-26 |
| DE69630811D1 (de) | 2003-12-24 |
| NO325119B1 (no) | 2008-02-04 |
| EP0884052A1 (en) | 1998-12-16 |
| AU712445B2 (en) | 1999-11-04 |
| HU226201B1 (en) | 2008-06-30 |
| NZ322188A (en) | 2000-10-27 |
| AU7586996A (en) | 1997-06-11 |
| RU2180234C2 (ru) | 2002-03-10 |
| EP0884052A4 (en) | 1999-05-06 |
| HUP0000411A3 (en) | 2005-11-28 |
| AU712445C (en) | 2002-03-28 |
| NO982236D0 (no) | 1998-05-15 |
| DK0884052T3 (da) | 2004-03-29 |
| DE69630811T2 (de) | 2004-06-17 |
| KR100458413B1 (ko) | 2005-04-06 |
| ES2211993T3 (es) | 2004-07-16 |
| EP0884052B1 (en) | 2003-11-19 |
| CA2235400C (en) | 2007-12-18 |
| US6903071B2 (en) | 2005-06-07 |
| US20050013864A1 (en) | 2005-01-20 |
| KR19990067676A (ko) | 1999-08-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| UA63896C2 (en) | Morphogenetic material for repairing cartilage and bone and method for treating | |
| US6380154B1 (en) | Synthetic proteins for in vivo drug delivery and tissue augmentation | |
| FI119816B (fi) | Eristetyt DNA-sekvenssit, jotka koodaavat jänteen/nivelsiteen kaltaisen kudoksen muodostumista indusoivaa BMP-12- tai BMP-13-proteiinia, sekä niiden sovellukset | |
| CN109568671B (zh) | 一种水凝胶负载细胞的3d骨修复支架及其制备方法 | |
| JP2004041236A (ja) | 骨形成具 | |
| CN112972760B (zh) | 一种负载内皮细胞外基质的3d打印骨缺损修复支架及其制备方法 | |
| JP7542880B2 (ja) | オルガノイドの生体移植用組成物 | |
| CN104800885B (zh) | 一种具有趋化功能的生物活性支架的制备和应用 | |
| CN109069661A (zh) | 利用聚合蛋白共轭物的治疗 | |
| CN104307040B (zh) | 一种组织工程用具控释能力的注射式水凝胶及其应用 | |
| JP2001131086A (ja) | エンドセリンを含む結合組織修復促進組成物および該組成物の調製におけるエンドセリンの使用 | |
| CN114805484B (zh) | 一种自组装多肽、自组装纳米水凝胶及其应用 | |
| KR100358080B1 (ko) | 생리활성물질을 서방화하는 다공성·생분해성 인공장기의제조방법 | |
| EP1844798A1 (en) | Implantable putty material | |
| RU2195940C2 (ru) | Способ регенерации суставного хряща | |
| JP2001122799A (ja) | プレイオトロフィンを含む結合組織修復促進組成物および該組成物の調製におけるプレイオトロフィンの使用 | |
| CN112206307B (zh) | 一种可注射的温敏型水凝胶及其制备方法与应用 | |
| Huang et al. | Biological activity of self-assembled peptide hydrogel scaffold RADA-RGD and its experimental study of BMP-2 release in vitro | |
| Ross et al. | Multipurpose On‐the‐Spot Peptide‐Based Hydrogels for Skin, Cornea, and Heart Repair | |
| KR20190012589A (ko) | 콘드로이틴설페이트가 함유된 젤란검 하이드로겔 조성물 | |
| ES2625654T3 (es) | Un método de producción de componentes nativos, tales como factores de crecimiento o proteínas de la matriz extracelular, mediante cultivo celular de muestras de tejido para la reparación de tejido | |
| WO2019151450A1 (ja) | 神経細胞培養材および神経損傷治療剤 | |
| CN114025846A (zh) | 用于治疗关节疾病的药物组合物及其制备方法 | |
| CN116478268A (zh) | Bmp2蛋白保护液、bmp2蛋白制剂及其制备方法 | |
| CN115287257A (zh) | 基于弓形虫外分泌蛋白的成骨诱导分化培养基、制备方法及成骨诱导分化方法 |