UA17008U - Method for preparing and staining histological sections - Google Patents
Method for preparing and staining histological sections Download PDFInfo
- Publication number
- UA17008U UA17008U UAU200600725U UAU200600725U UA17008U UA 17008 U UA17008 U UA 17008U UA U200600725 U UAU200600725 U UA U200600725U UA U200600725 U UAU200600725 U UA U200600725U UA 17008 U UA17008 U UA 17008U
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- sections
- histological sections
- freezing
- solution
- preparing
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 238000010186 staining Methods 0.000 title claims abstract description 6
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims abstract description 8
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims abstract description 8
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 claims description 9
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 claims description 7
- IACFXVUNKCXYJM-AKSHDPDZSA-N 2-(chloromethyl)oxirane (2R,3R,4S,5S,6R)-2-[(2S,3S,4S,5R)-3,4-dihydroxy-2,5-bis(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound ClCC1CO1.O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 IACFXVUNKCXYJM-AKSHDPDZSA-N 0.000 claims description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 2
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 abstract description 3
- 239000002313 adhesive film Substances 0.000 abstract 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 7
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 7
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 5
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 5
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 3
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 3
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000007173 Abies balsamea Nutrition 0.000 description 2
- 239000004857 Balsam Substances 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000018716 Impatiens biflora Species 0.000 description 2
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N isoamylol Chemical compound CC(C)CCO PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 2
- 229920000298 Cellophane Polymers 0.000 description 1
- 241000078511 Microtome Species 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 238000007605 air drying Methods 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- -1 celloidin Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000003771 laboratory diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 1
- 239000003973 paint Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
Abstract
Description
Опис винаходуDescription of the invention
Корисна модель відноситься до ветеринарної медицини, переважно до морфологічних і патоморфологічних 2 досліджень і може бути використана при лабораторній діагностиці захворювань, де провідним чинником є оцінка морфологічних змін органів і тканин.The useful model refers to veterinary medicine, mainly to morphological and pathomorphological 2 studies and can be used in the laboratory diagnosis of diseases, where the leading factor is the assessment of morphological changes in organs and tissues.
Відомі способи отримання гістологічних препаратів після заливки шматочків органів в парафін, целоїдин, ізоаміловий спирт, отримання гістологічних зрізів із застосуванням целофанових плівок, розчинів желатину на заморожуючих мікротомах. |Гаврилин П.Н. Методические особенности изготовления тотальньїх гистотопограмм 70 кроветворньїх органов // Проблеми зооінженерії та ветеринарної медицини / 36. наук. пр. Харківок. Зоовет.Known methods of obtaining histological preparations after embedding pieces of organs in paraffin, celloidin, isoamyl alcohol, obtaining histological sections using cellophane films, gelatin solutions on freezing microtomes. |Gavrylin P.N. Methodical features of production of total histotopograms of 70 hematopoietic organs // Problems of zooengineering and veterinary medicine / 36. Nauk. Kharkivok Ave. Zoovet.
Ін-ту. - Харків: ХЗВІ. - 1999. - вип.5(29). - Ч.2. - С.25-30;; Горальський Л.П., Хомич В.Т., Кононський 0.1.Institute - Kharkiv: KhZVI. - 1999. - issue 5(29). - Part 2. - P.25-30;; Horalskyi L.P., Khomych V.T., Kononskyi 0.1.
Основи гістологічної техніки і морфофункціональні методи дослідження у нормі та при патології / Навчальний посібник. Житомир: "Полісся", 2005-288с.; Меркулов Г.А. Курс патологогистологической техники. - Л.:Медицина, 1969. - 424с.; Лилли Р. Патологогистологическая техника и практическая гистохимия. - М.: Мир, 1969. - 645с.; 715 Ромейс Б. Микроскопическая техника. - М.: Изд-во ин. лит., 1953. - 467с.; Кисели Д. Практическая микротехника и гистохимия. - Будапешт: Изд. Академии Наук Венгрии, 19652. - 269с.|.Fundamentals of histological technique and morphofunctional research methods in normal and pathological conditions / Training manual. Zhytomyr: "Polyssia", 2005-288 p.; Merkulov G.A. Pathological histological technique course. - L.: Medicine, 1969. - 424 p.; Lilly R. Pathological histological technique and practical histochemistry. - M.: Mir, 1969. - 645 p.; 715 Romeis B. Microscopic technique. - M.: Izd-vo in. lit., 1953. - 467 p.; D. Kisely. Practical microtechnique and histochemistry. - Budapest: Izd. Academy of Sciences of Hungary, 19652. - 269 p.|.
Недоліком відомого способу є великі затрати часу на отримання гістологічних препаратів, а також значна кількість використовуваних допоміжних речовин (парафін, целоїдин, ксілол та бальзам).The disadvantage of the known method is that it takes a lot of time to obtain histological preparations, as well as a significant amount of auxiliary substances used (paraffin, celloidin, xylene, and balsam).
Корисною моделлю ставиться завдання спрощення способу отримання гістологічних препаратів, без 20 порушення структурних компонентів гістологічних зрізів і впливу на клітинні елементи.A useful model is the task of simplifying the method of obtaining histological preparations without disturbing the structural components of histological sections and affecting cellular elements.
Поставлене корисною моделлю завдання досягається тим, що у способі отримання і фарбування гістологічних зрізів, що включає фіксацію в нейтральному розчині 1095 формаліну шматочків органів товщиною до 0,бсм, промивку і заморожування, згідно корисній моделі після заморожування шматочки органів прикріплюють до стрічки типу ,Скотч", виготовлюють гістологічні зрізи товщиною 12...15мкм, занурюють їх на 29 4.2сек. в 596 розчин "Фіколлу-400" з гліцерином, просушують при кімнатній температурі протягом 20...30Х8. ДО пт) утворення плівки, фарбування зрізів проводять гематоксиліном і еозином 1..2х8в.The task set by the useful model is achieved by the fact that in the method of obtaining and staining histological sections, which includes fixation in a neutral solution of 1095 formalin of pieces of organs with a thickness of up to 0.bsm, washing and freezing, according to the useful model, after freezing, the pieces of organs are attached to tape of the "Scotch" type , prepare histological sections with a thickness of 12...15 μm, immerse them for 29 4.2 seconds in 596 "Ficoll-400" solution with glycerol, dry at room temperature for 20...30X8. UNTIL pt) the formation of a film, the sections are stained with hematoxylin and eosin 1..2x8v.
Здійснення способу відбувається наступним чином. Після фіксації шматочків органів товщиною не більшThe method is carried out as follows. After fixation, pieces of organs are no more thick
О,5см в нейтральному розчині 1095 формаліну їх розміщували в проточній воді на 24год. Після цього шматочки органів розташовували на металевих столиках, що використовуються в мікротомі-кріостаті. Після заморожування со 30 шматочків на металевих столиках до поверхні шматочків прикріплювали стрічку "Скотч". Готували зрізи «3 товщиною 12-15мкм. З метою запобігання пересихання гістологічні зрізи поміщали на 1-2сек. в розчин наступного складу: 5г фіколла-400 (Швеція), який розчиняли в 100мл дистильованої води і додавали 5мл хімічно чистого о гліцерину (9995). Після підсушування зрізів протягом 20-30хв. при кімнатній температурі на їх поверхні ча утворювалась плівка, яка захищала зрізи від механічних пошкоджень. Для забарвлення отриманих гістологічних 3о зрізів їх прикріплювали за допомогою клейкої поверхні стрічки до скла. Після висушування на повітрі зрізи -- фарбували гематоксиліном і еозіном за наступною схемою: фарбування зрізів гематоксиліном та еозіном - 1-2хв.; занурення зрізів в 7Огетиловий спирт -1-2 хв.; занурення зрізів в 502 етиловий спирт - 1-2хв.; занурення зрізів в 196 водний розчин еозіна - 1-2хв.; промивка зрізів в 5095 водному розчині гліцерину - 1-5хв. : ( до « відсутності залишків фарби). Вміщення зрізів в 9995 розчин гліцерину на 5хв. 7About 5 cm in a neutral solution of 1095 formalin, they were placed in running water for 24 hours. After that, pieces of organs were placed on metal tables used in a cryostat microtome. After freezing 30 pieces on metal tables, tape "Scotch" was attached to the surface of the pieces. Sections "3 with a thickness of 12-15 microns were prepared. In order to prevent drying, the histological sections were placed for 1-2 seconds. in a solution of the following composition: 5 g of ficol-400 (Sweden), which was dissolved in 100 ml of distilled water and 5 ml of chemically pure glycerin (9995) was added. After drying the slices for 20-30 minutes. at room temperature, a film formed on their surface that protected the sections from mechanical damage. To color the obtained histological 3o sections, they were attached to the glass using the adhesive surface of the tape. After air-drying, the sections were stained with hematoxylin and eosin according to the following scheme: staining the sections with hematoxylin and eosin - 1-2 min.; Immersion of slices in 7-ethyl alcohol - 1-2 min.; immersion of slices in 502 ethyl alcohol - 1-2 min.; immersion of sections in 196 aqueous eosin solution - 1-2 min.; washing of sections in 5095 aqueous glycerin solution - 1-5 min. : (to the absence of paint residues). Place the slices in 9995 glycerin solution for 5 minutes. 7
Нанесення на зрізи суміші гліцерин - желатин. Цей розчин готували завчасно таким чином: 1 частину с харчового желатину змішували з З частинами дистильованої води. Після набухання желатину при кімнатній "з температурі до суміші додавали 5 частин чистого гліцерину і одну частину карболової кислоти. Цю процедуру виконували при нагріванні ( не доводячи до кипіння) і постійному помішуванні до повного переходу желатину у гель. -з 15 Гістологічні зрізи разом з плівкою розміщували на предметному склі (суміш гліцерин-желатин по краплях розміщували на поверхні зрізів). На краплі желатину і гліцерину накладали поверхневе скло. -І Наведений спосіб отримання гістологічних зрізів до цього часу не використовувався у ветеринарній медицині, зокрема у лабораторній діагностиці. о Запропонований метод дозволяє істотно скоротити час для проведення досліджень. При цьому не («в 50 використовуються парафін, целоїдин, значна кількість ксілолу, а також непотрібний бальзам. Для отримання со гістологічних зрізів використовується заморожуючий мікротом-кріостат.Applying a glycerin-gelatin mixture to the slices. This solution was prepared in advance as follows: 1 part of food gelatin was mixed with 3 parts of distilled water. After swelling of the gelatin at room temperature, 5 parts of pure glycerin and one part of carbolic acid were added to the mixture. This procedure was carried out with heating (without boiling) and constant stirring until the gelatin completely turned into a gel. 15 Histological sections together with the film was placed on a glass slide (the glycerin-gelatin mixture was placed dropwise on the surface of the sections). A surface glass was placed on the drop of gelatin and glycerin. -I The given method of obtaining histological sections has not been used in veterinary medicine, in particular in laboratory diagnostics, until now. o The proposed method allows you to significantly reduce the time for conducting research. At the same time, paraffin, celloidin, a significant amount of xylene, as well as unnecessary balsam are not used. A freezing microtome-cryostat is used to obtain histological sections.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU200600725U UA17008U (en) | 2006-01-27 | 2006-01-27 | Method for preparing and staining histological sections |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU200600725U UA17008U (en) | 2006-01-27 | 2006-01-27 | Method for preparing and staining histological sections |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA17008U true UA17008U (en) | 2006-09-15 |
Family
ID=37504962
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAU200600725U UA17008U (en) | 2006-01-27 | 2006-01-27 | Method for preparing and staining histological sections |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA17008U (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2447554C2 (en) * | 2006-12-22 | 2012-04-10 | Легран Франс | Quick connect socket outlet for multiconductor cable |
| RU2689171C2 (en) * | 2017-03-23 | 2019-05-24 | Федеральное Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Образования "Великолукская государственная сельскохозяйственная академия" | Method of investigating architectonics of structural elements of organs in small animals |
| RU2798126C1 (en) * | 2022-06-14 | 2023-06-15 | Николай Валерьевич Литвинов | Method of making histological preparations of an enucleated eye |
-
2006
- 2006-01-27 UA UAU200600725U patent/UA17008U/en unknown
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2447554C2 (en) * | 2006-12-22 | 2012-04-10 | Легран Франс | Quick connect socket outlet for multiconductor cable |
| RU2689171C2 (en) * | 2017-03-23 | 2019-05-24 | Федеральное Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Образования "Великолукская государственная сельскохозяйственная академия" | Method of investigating architectonics of structural elements of organs in small animals |
| RU2798126C1 (en) * | 2022-06-14 | 2023-06-15 | Николай Валерьевич Литвинов | Method of making histological preparations of an enucleated eye |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Kiernan | Histological and histochemical methods | |
| Klinger et al. | A universal stain for the sex chromatin body | |
| US4911915A (en) | Method of processing tissue specimens and dehydrant solvent for use therein | |
| de Martino et al. | Silver methenamine stain for electron microscopy | |
| JP5058676B2 (en) | Biological specimen preparation method | |
| CN105973673A (en) | Paraffin sectioning method for eucalyptus tissue | |
| ES2657487T3 (en) | Formalin-free fixing agents for histological staining of tissue samples | |
| JPWO2014069519A1 (en) | Clarified biological specimen preparation kit and transparent biological specimen preparation method | |
| Rai et al. | Tissue fixatives: A review | |
| UA17008U (en) | Method for preparing and staining histological sections | |
| CN105928752B (en) | A kind of insect imago paraffin section colouring method | |
| CA2740586A1 (en) | Methods and compositions for preventing artifacts in tissue samples | |
| RU2662681C2 (en) | Dab-containing substrate set for painting, which is carried out by the encryption enzyme | |
| EP3167272B1 (en) | Aqueous tissue clearing solution and uses thereof | |
| Dinh et al. | Procedure for performing a fixed microscopic specimen of the gonads of fish: https://doi. org/10.12982/VIS. 2022.049 | |
| RU2705594C1 (en) | Method of preparation of histological preparations for detection of intracellular lipid inclusions in human and animal tissues | |
| CN113432946A (en) | Aqueous dewaxing liquid and dewaxing method thereof | |
| Ojeda et al. | A technique for fluorescence microscopy in semithin sections | |
| CN114839020A (en) | Cell pathology slide fixing solution and preparation method thereof | |
| Shyamsundari et al. | Histochemistry in Focus: A Sourcebook of Techniques and Research Needs | |
| CN116202846B (en) | Method for identifying artery and vein | |
| WO2013102837A1 (en) | Fixing composition for cytology, cell-fixing method and the uses thereof | |
| GB2026015A (en) | Cell smear staining composition and material, and production and use thereof | |
| CN104663646A (en) | Embryonic tissue fixative and its preparation method and use | |
| Trigiano et al. | Histological techniques |