TW202116770A

TW202116770A - 類鐸受體促效劑

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Publication number: TW202116770A
Application number: TW109124069A
Authority: TW
Inventors: 歐瑪阿瑪德; 安德魯汎森; 伊桑勞倫斯費雪; 艾瑞克奧爾菲萊恰貝爾; 雷歐曼德Ｊ昂瓦拉; 蕭軍; 磊張
Original assignee: 美商輝瑞大藥廠
Priority date: 2019-07-17
Filing date: 2020-07-16
Publication date: 2021-05-01
Also published as: CU20220003A7; CO2022000259A2; ECSP22003665A; JP2022534125A; US11339159B2; PE20220342A1; EP3999507A1; WO2021009676A1; CL2022000032A1; MX2022000656A; US20210017172A1; AU2020315210B2; CN114364677B; JP7137733B2; CN114364677A; WO2021009676A8; US11976064B2; BR112022000341A2; KR20220034862A; UY38786A

Abstract

本發明係關於咪唑并-吡啶基化合物或其醫藥學上可接受之鹽，包含此類化合物及鹽之醫藥組合物及使用此類化合物、鹽及組合物來治療個體體內之異常細胞生長(包括癌症)之方法。

Description

類鐸受體促效劑

類鐸受體(Toll-like receptors；TLR)為識別自病原體獲得且為病原體特有的結構上保守性分子之跨膜蛋白家族，其稱為病原體相關分子模式(PAMPS)。因而，TLR以病原體相關分子模式之前線感測器形式作用於哺乳動物免疫系統中，從而偵測侵入病原體之存在(Takeuchi及Akira 2010 Cell 140:805-820)。前哨免疫細胞中之TLR接合使得生物合成選定細胞介素(例如，I型干擾素)、誘導共刺激分子且增大抗原呈遞容量。此等為活化固有及適應性免疫反應之重要分子機制。因此，TLR之促效劑及拮抗劑可用於調節免疫反應。TLR促效劑通常用於刺激免疫反應，而TLR拮抗劑通常用於抑制免疫反應(Gosu等人，2012. Molecules 17:13503-13529)。

人類基因體含有10個已知TLR，其中TLR3、TLR7、TLR8及TLR9識別核酸及其降解產物。TLR7、TLR8及TLR9之分佈受限於細胞之核內體腔中且其較佳地表現於免疫系統之細胞中。在活化二聚受體組態下，TLR7及TLR8分別識別一個配位體結合位點處之單股RNA及第二配位體結合位點處之核苷降解產物鳥苷及尿苷(以及具有相關結構基元之小分子配位體) (Zhang等人2016 Immunity 45(4);737-748: Tanji 等人2015 Nat Struct Mol Biol 22: 109-115)。

已識別出一些小分子TLR7或TLR8促效劑。彼等促效劑可分組為類嘌呤分子，諸如7-硫雜-8-側氧基鳥苷(TOG，艾沙托立賓(isatoribine))；或基於咪唑并喹啉之化合物，諸如咪喹莫特(imiquimod)。迄今為止，咪喹莫特為唯一經批准之TLR7促效劑，以5%乳霜(Aldara)形式出售。其產生大致80%之淺表底細胞癌瘤(其為全世界最常見癌症)之5年清除率，因此展現TLR7促效劑在癌症免疫療法中之重要性。TLR7之功能表現似乎受限於特定免疫細胞。漿細胞樣樹突狀細胞中之TLR7接合引起干擾素α/β誘導，該干擾素α/β在適應性免疫反應之控制中起重要作用(Bao及Liu 2013 Protein Cell 4:40-5)。

骨髓樹突狀細胞、單核球及單核球衍生之樹突狀細胞中之TLR8接合誘導顯著促發炎細胞介素特徵，其特徵在於增大腫瘤壞死因子-α、介白素-12及IL-18之產生(Eigenbrod等人，J Immunol, 2015, 195,1092-1099)。

亦已研究小分子TLR促效劑用作疫苗佐劑(Dowling,ImmunoHorizons 2018, 2(6) 185-197)。

因此，幾乎所有主要類型之單核球性及樹突狀細胞可藉由TLR7及TLR8促效劑活化成為高效抗原呈現細胞，從而促進有效的固有且適應性免疫反應。大部分抗原呈現細胞類型僅表現此等兩個受體中之一者，因此對TLR7及TLR8受體兩者具有有效促效劑活性之小分子潛在地為比單獨TLR7促效劑更有效的免疫佐劑。

因此，具有雙生物活性之TLR7/TLR8 (TLR7/8)小分子促效劑可提供比更具選擇性TLR7促效劑更多的益處且將在更寬範圍之抗原呈現細胞及其他關鍵免疫細胞類型(包括漿細胞樣及骨髓樹突狀細胞、單核球及B細胞)中引起固有免疫反應(van Haren等人2016 J Immunol 197:4413-4424；Ganapathi等人2015 Plos One 10(8).e0134640)。此類有效雙TLR7/8促效劑亦可有效地在癌症中刺激有效的抗腫瘤反應(Singh等人2014 J. Immunol 193 4722-4731: Sabado等人2015 Cancer Immunol Res 3 278-287, Spinetti等人2016 Oncoimmunol 9;5(11):e1230578: Patil等人2016 Mini Rev Med Chem 16:309-322)。

儘管咪喹莫特(Aldera)成功治療淺表基底細胞癌，但不僅仍需要更有效的TLR7促效劑，且亦需要均衡有效的TLR7/8促效劑以擴增各種癌症患者的治療選項。此等治療選項可為將藥物直接遞送至腫瘤，同時限制全身性副作用之局部投與。替代地，全身性投與之TLR7促效劑或TLR7/8促效劑之優勢在於經由全身循環而能夠到達難以投與之腫瘤以及多種腫瘤。

本發明部分地提供式(I) (包括式(Ia)及(Ib))化合物，統稱為本發明之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽。此類化合物活化人類TLR7 (hTLR7)，且亦活化人類TLR8 (hTLR8)，從而影響生物學功能。在一些實施例中，本發明提供作為對TLR7及TLR8兩者具有選擇性之雙促效劑(TLR7/8促效劑)的化合物。在另一實施例中，本發明提供作為對TLR7具有選擇性之促效劑之化合物。另一實施例提供醫藥組合物及藥物，其包含單獨或與額外的抗癌治療劑組合的本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。

本發明亦部分地提供用於製備本發明之化合物、醫藥學上可接受之鹽及組合物的方法，及單獨或與額外抗癌治療劑組合使用前述內容之方法。

在一個態樣中，本發明提供一種式(I)化合物：

或其醫藥學上可接受之鹽，其中 R¹ 及R² 獨立地為C_1-3 烷基；或 R¹ 及R² 接合形成5至7員碳環，其中該碳環可為飽和或不飽和的； R³ 為

； R⁴ 為C_1-6 烷基或(CH₂ )_n O(CH₂ )_m CH₃ ，其中C_1-6 烷基或(CH₂ )_n O(CH₂ )_m CH₃ 基團的任一碳在價數允許時經0至3個鹵素取代； R⁵ 為C_1-3 烷基或OC_1-3 烷基，其中C_1-3 烷基經0至3個F取代； R⁶ 為H或C_1-3 烷基，其中C_1-3 烷基經0至3個F取代； m為0至2；且 n為1至3。

在另一態樣中，本發明提供一種醫藥組合物，其包含根據本文中所述之式中任一者的本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之載劑或賦形劑。在一些實施例中，醫藥組合物包含兩種或更多種醫藥學上可接受之載劑及/或賦形劑。

在另一態樣中，本發明亦提供治療方法及用途，其包含投與本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。

在另一態樣中，本發明提供一種用於治療有需要之個體之異常細胞生長(特定言之癌症)之方法，其包含向該個體投與治療有效量之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。本發明之化合物可作為單一藥劑投與或可與其他抗癌治療劑，包括適合於特定形式之癌症的護理標準藥劑組合投與。此亦包括本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其用於製造用於治療有需要之個體之異常細胞生長，特定言之癌症的藥物。

在另一態樣中，本發明提供本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用作藥物，特定言之用於治療異常細胞生長，諸如癌症之藥物。

在又一態樣中，本發明提供本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其用於製造用於治療個體之異常細胞生長，諸如癌症的藥物。

在另一態樣中，本發明在其範疇內包括本發明之化合物之醫藥學上可接受之鹽。因此，除非明確相反指示，否則片語「或其醫藥學上可接受之鹽」隱含於本文所描述的所有化合物之描述中。

如所提供，本發明係關於如上文所提供之式(I)化合物。

藉由參考以下對本發明之額外實施例的詳細描述及其中包括的實例，可更容易理解本發明。應理解，本文中所使用之術語係出於僅描述具體實施例之目的而提供，且並不意欲為限制性的。應進一步理解，除非在本文中加以特定限制，否則本文所用之術語具有其在相關技術中所知的傳統含義。

除非另外規定，否則如本文所用，單數形式「一(a/an)」及「該(the)」包括複數個參考物。舉例而言，「一」取代基包括一或多個取代基。當由一般熟習此項技術者考慮時，術語「約」意謂具有落入可接受之平均值誤差標準內的值。

如本文所使用，術語「烷基」意謂式-C_n H_(2n+1) 之直鏈或分支鏈單價烴基。非限制性實例包括甲基、乙基、丙基、丁基、2-甲基-丙基、1,1-二甲基乙基、戊基及己基。

在一些個例中，烴基(例如，烷基)中之碳原子數由前綴「C_x -C_y 」或「C_x-y 」指示，其中x為基團中之最小碳原子數目且y為最大碳原子數目。因此，例如，「(C₁ -C₆ )烷基」或「C_1-6 烷基」係指含有1至6個碳原子之烷基取代基。

如本文中所用，術語「鹵素」係指氟、氯、溴或碘。

如本文中所用，術語「鹵代烷基」係指經至少一個鹵素取代基取代之烷基。在超過一個氫原子經鹵素原子置換的情況下，鹵素可相同或不同。非限制性實例包括氟甲基、二氟甲基、三氟甲基及2,2,2-三氟乙基。

如本文中所用，「生物治療劑」意謂阻斷任一生物學路徑中之配位體/受體信號傳導之生物學分子，諸如抗體或融合蛋白，該配位體/受體信號傳導支持腫瘤維持及/或生長或抑制抗腫瘤免疫反應。

如本文中所用，「化學治療劑」為適用於治療癌症之化學化合物。適用於本發明之治療方法之化學治療劑包括細胞生長抑制劑及/或細胞毒素劑。化學治療劑包括藥劑自身或其任何醫藥學上可接受之鹽、共晶體或溶劑合物。本文中進一步描述化學治療劑。

如本文中所用，以下術語可互換使用且意謂除本發明之化合物以外的可用於治療癌症之任何一或多種治療劑：「額外抗癌治療劑」或「額外化學治療劑」或「額外治療劑」。

生物治療劑及化學治療劑均為額外抗癌治療劑之實例。

如本文中所用，「細胞毒素劑」係指對細胞具有細胞毒素及/或細胞生長抑制效果之藥劑且「細胞生長抑制效果」係指抑制細胞增殖。

如本文中所用，「細胞生長抑制劑」係指對細胞具有細胞生長抑制效果，從而抑制特定子集細胞(亦即腫瘤細胞)之生長及/或擴增之藥劑。

如本文中所用，「免疫調節劑」係指經由產生細胞介素及/或抗體及/或調節T細胞功能，從而藉由允許另一藥劑更有效而直接地或間接地抑制或減小細胞(亦即腫瘤細胞)子集之生長來刺激免疫反應之藥劑。

如本說明書及申請專利範圍中所用，「基本上由......組成(Consists essentially of)」及諸如「基本上由......組成(consist essentially of/consisting essentially of)」之變化形式指示包括任何所述要素或要素群，及視情況包括具有與所述要素類似或不同性質之其他要素，其並不在材料上改變指定給藥方案、方法或組合物之基礎或新穎特性。作為一非限制性實例，基本上由所列舉胺基酸序列組成之OX40促效劑亦可包括一或多個胺基酸，包括一或多個胺基酸殘基之取代基，其並未在材料上影響結合化合物之特性。

如本文中所用，藥物、化合物或醫藥組合物之「有效劑量」或「有效量」為足以影響疾病之任何一或多種有益或所需的症狀(包括生物化學、組織學及/或行為學症狀)、在疾病發展期間展現的其併發症及中間病理表型的量。對於治療用途，「治療有效量」係指將在一定程度上緩解所治療病症之一或多種症狀的所投與的化合物量。參考癌症治療，治療有效量係指具有以下效果之量：(1)減小腫瘤之大小；(2)抑制(亦即，在一定程度上減緩，較佳地停止)腫瘤轉移；(3)在一定程度上抑制(亦即，在一定程度上減緩，較佳地停止)腫瘤生長或腫瘤侵襲，(4)在一定程度上減輕(或較佳地，消除)與癌症相關之一或多種病徵及症狀，(5)減小治療疾病所需之其他藥物之劑量及/或(6)增強另一藥物之效果，及/或(7)延緩患者之疾病進展。

可以一或多次投藥形式來投與有效劑量。出於本發明之目的，藥物、化合物或醫藥組合物之有效劑量為足以直接或間接地實現預防性或治療性治療之量。如在臨床情形下所理解，藥物、化合物或醫藥組合物之有效劑量可或不可連同另一藥物、化合物或醫藥組合物一起達成。

「醫藥組合物」係指本發明之化合物、或其醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物、水合物或前藥中之一或多者作為活性成份及至少一種醫藥學上可接受之載劑或賦形劑之混合物。在一些實施例中，醫藥組合物包含兩種或更多種醫藥學上可接受之載劑及/或賦形劑。在其他實施例中，醫藥組合物進一步包含至少一種額外抗癌治療劑。

在一個態樣中，本發明提供一種醫藥組合物，其包含本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之載劑或賦形劑。在一些實施例中，醫藥組合物包含兩種或更多種醫藥學上可接受之載劑及/或賦形劑。

在一些實施例中，醫藥組合物進一步包含至少一種額外抗癌治療劑。在一些此類實施例中，組合提供累加抗癌效果，超過累加的抗癌效果或協同抗癌效果。

「腫瘤」在應用於經診斷患有或疑似患有癌症之個體時係指任何尺寸之惡性或潛在惡性贅瘤或組織塊狀物，且包括原發性腫瘤及繼發性贅瘤。實體腫瘤為通常不含囊腫或液體區域之組織之異常生長或塊狀物。實體腫瘤之實例為肉瘤、癌瘤及淋巴瘤。白血病(血液癌)通常不形成實體腫瘤(國家癌症學會(National Cancer Institute)，癌症術語詞典(Dictionary of Cancer Terms))。

「腫瘤負荷(tumor burden/tumor load)」係指分佈在整個身體中之腫瘤物質之總量。腫瘤負荷係指整個身體中(包括淋巴結及骨髓)癌細胞之總數目或腫瘤之總大小。腫瘤負荷可藉由此項技術中已知之多種方法測定，諸如(例如)使用測徑規，或在身體內時使用成像技術，例如超音波、骨骼掃描、電腦斷層掃描(CT)或磁共振成像(MRI)掃描。

術語「腫瘤大小」係指可量測為腫瘤之長度及寬度的腫瘤之總大小。腫瘤大小可藉由此項技術中已知之多種方法，諸如例如藉由在自個體移出之後例如使用測徑規量測腫瘤之尺寸，或當在身體內時使用成像技術，例如骨骼掃描、超音波、CR或MRI掃描來測定。

如本文中所用，「個體」係指人類或動物個體。當個體為人類時，個體亦可稱為「患者」。

如本文中所使用，術語「治療(treat/treating)」意謂向患有癌症或診斷患有癌症之個體投與本發明之化合物，以達成至少一種正向治療效果，諸如(例如)減小癌細胞數目、減小腫瘤尺寸、降低癌細胞浸潤至外圍器官中之速率或降低腫瘤癌轉移或腫瘤生長之速率，逆轉、緩解、抑制此類術語應用之病症或病狀的進展或預防該病症或病狀或此類病症或病狀之一或多種症狀。除非另外指明，否則如本文所用，術語「治療(treatment)」係指如緊接上文所定義之「治療(treating)」的治療行為。術語「治療」亦包括對個體之輔助治療及新輔助治療。

出於本發明之目的，有益或所需臨床結果包括但不限於以下中之一或多者：減小(或破壞)贅生性或癌細胞之增殖；抑制癌轉移或贅生性細胞；縮小或減小腫瘤大小；緩解癌症；減少由癌症引起的症狀；提高罹患癌症之彼等患者的生活品質；減少治療癌症所需之其他藥物的劑量；延緩癌症之進展；治癒癌症；克服癌症之一或多種抗性機制；及/或延長癌症患者的存活期。對癌症之積極治療效果可以若干方式量測(參見例如W. A. Weber, Assessing tumor response to therapy, J. Nucl. Med. 50 增刊1:1S-10S (2009))。舉例而言，相對於腫瘤生長抑制(T/C)，根據國家癌症研究所(National Cancer Institute；NCI)標準，T/C小於或等於42%為抗腫瘤活性之最低水準。T/C ＜10%視為高抗腫瘤活性水準，其中T/C (%) =經治療之腫瘤體積中值/對照之腫瘤體積中值× 100。

在一些實施例中，藉由本發明之化合物達成之治療由對以下中之任一者的參考限定：部分反應(PR)、完全反應(CR)、總體反應(OR)、無進展存活率(PFS)、無疾病存活率(DFS)及總存活率(OS)。PFS (亦稱為「腫瘤進展時間」)指示在癌症不生長之治療期間及之後的時間長度，且包括患者已經歷CR或PR之時間量以及患者已經歷穩定疾病(SD)之時間量。DFS係指在患者保持無疾病之治療期間及之後的時間長度。OS係指與原生或未治療個體或患者相比之預期壽命延長。在一些實施例中，對本發明之組合之反應為使用實體腫瘤反應評估準則(RECIST) 1.1反應準則評估之PR、CR、PFS、DFS、OR或OS中之任一者。

術語「累加」用於意謂兩種化合物、組分或靶向藥劑之組合的結果不大於每一化合物、組分或靶向藥劑單獨的總和。

術語「協同作用」或「協同性」用於意謂兩種化合物、組分或靶向藥劑之組合的結果大於每一化合物、組分或靶向藥劑單獨的總和。經治療之疾病、病狀或病症中之此改良為「協同性」效果。「協同量」為產生協同效果之兩種化合物、組分或靶向藥劑之組合之量，正如「協同性」在本文中所定義。

測定一或兩種組分之間的協同相互作用，該效果之最佳範圍及用於該效果之每一組分之絕對劑量範圍可藉由按不同劑量範圍及/或劑量比率向需要治療之患者投與組分來確定地量測。然而，活體外模型或活體內模型中之協同作用觀察可預測如本文所述之在人體及其他物種內以及活體外模型或活體內模型中存在效果，以量測協同效果。此類研究結果亦可用於諸如藉由應用藥物代謝動力學及/或藥效動力學方法來預測人體及其他物種內需要的有效劑量及血漿濃度比率範圍以及絕對劑量及血漿濃度。

有效治療癌症患者之本發明之化合物的治療方案可根據以下因素變化，諸如患者之疾病病況、年齡及體重，及療法引發該個體之抗癌反應的能力。儘管本發明之態樣中之任一者之實施例可能未有效地在每一個體中達成正向治療效果，但應在如藉由此項技術中已知的任一統計測試所測定的統計顯著數目之個體中進行該治療，該測試諸如斯圖登式t檢定(Student's t-test)、chi2檢定、曼-惠特尼U檢定(U-test according to Mann and Whitney)、克拉斯卡-瓦立斯檢定(Kruskal-Wallis test) (H檢定)、喬卡契爾-特普斯特拉特檢定(Jonckheere-Terpstrat-testy)及威爾康檢定(Wilcon on-test)。

術語「治療方案」、「給藥協定」及「給藥方案」可互換使用以指代本發明之每一化合物單獨或與另一治療劑組合的劑量及投與時序。

「改善」意謂與未投與組合相比，在用本文所描述之組合治療之後的一或多種症狀減輕或好轉。「改善」亦包括縮短或減小症狀之持續時間。

除非另外指明，否則如本文中所用，「異常細胞生長」係指不依賴於正常調節機制的細胞生長(例如接觸抑制喪失)。異常細胞生長可為良性(非癌性)或惡性(癌性)的。

術語「癌症」或「癌」係指由異常細胞生長引起之任何惡性及/或侵襲性生長或腫瘤。癌症包括源自身體特定部位之原發性癌症、自開始之位置擴散至身體其他部分之轉移性癌症、初始原發性癌症在緩解後之復發及患者之新型原發性癌症之第二原發性癌症，該患者之先前癌症病史與第二原發性癌症之類型不同。癌症包括以形成其之細胞的類型命名之實體腫瘤，血液、骨髓或淋巴系統之癌症。實體腫瘤之實例包括肉瘤及癌瘤。血液之癌症包括白血病、淋巴瘤及骨髓瘤。癌症之額外實例包括母細胞瘤及光化性角化症。癌症亦包括原發性癌症或選自由以下組成之群之部位癌轉移：口腔、消化系統、呼吸系統、皮膚、乳房、生殖器系統、泌尿系統、眼部系統、神經系統、內分泌系統及淋巴瘤。

除非另外指明，否則本文對本發明化合物之所有參考包括對其鹽、溶劑合物、水合物及複合物，及其鹽之溶劑合物、水合物及複合物(包括其多晶型物、立體異構體及經同位素標記之版本)的參考。

本發明之化合物可呈醫藥學上可接受之鹽的形式，諸如本文提供之式中之一者之化合物的酸加成鹽及鹼加成鹽。如本文中所使用，術語「醫藥學上可接受之鹽」係指保留親本化合物之生物有效性及特性的彼等鹽。除非另外指明，否則如本文中所用，片語「醫藥學上可接受之鹽」包括可存在於本文所揭示之式之化合物中的酸性或鹼性基團之鹽。

舉例而言，本質上呈鹼性之本發明之化合物能夠與各種無機及有機酸形成多種鹽。儘管此類鹽在向動物投與時必須為醫藥學上可接受的，但在實踐中常常需要首先自反應混合物分離呈醫藥學上不可接受之鹽形式的本發明之化合物，且接著藉由用鹼性試劑處理來簡單地將後者重新轉化為游離鹼化合物，且隨後將後一游離鹼轉化為醫藥學上可接受之酸加成鹽。本發明之鹼性化合物之酸加成鹽可藉由在水性溶劑介質中或在諸如甲醇或乙醇之適合有機溶劑中，用大體上等量之選定無機或有機酸處理鹼性化合物來製備。在蒸發溶劑之後，獲得所需固體鹽。所需酸式鹽亦可藉由向溶液中添加適當的無機或有機酸而自游離鹼於有機溶劑中之溶液中沈澱。

可用於製備此類鹼性化合物之醫藥學上可接受之酸加成鹽的酸為形成無毒性酸加成鹽的彼等酸，該等無毒性酸加成鹽亦即含有藥理學上可接受之陰離子的鹽，諸如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、酸式磷酸鹽、異菸鹼酸鹽、乙酸鹽、乳酸鹽、水楊酸鹽、檸檬酸鹽、酸式檸檬酸鹽、酒石酸鹽、泛酸鹽、酒石酸氫鹽、抗壞血酸鹽、丁二酸鹽、順丁烯二酸鹽、龍膽酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡糖酸鹽、葡萄糖醛酸鹽、葡糖二酸鹽、甲酸鹽、苯甲酸鹽、麩胺酸鹽、甲烷磺酸鹽、乙烷磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽及雙羥萘酸鹽。

鹽之實例包括(但不限於)乙酸鹽、丙烯酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽(諸如氯苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、羥基苯甲酸鹽及甲氧基苯甲酸鹽)、碳酸氫鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸氫鹽、酒石酸氫鹽、硼酸鹽、溴化物、丁炔1,4二酸鹽、乙二胺四乙酸鈣、樟腦磺酸鹽、碳酸鹽、氯化物、己酸鹽、辛酸鹽、克拉維酸鹽(clavulanate)、檸檬酸鹽、癸酸鹽、二氫氯化物、磷酸二氫鹽、乙二胺四乙酸鹽、依地斯酸鹽(edislyate)、依託酸鹽、乙磺酸鹽、乙基丁二酸鹽、甲酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、麩胺酸鹽、乙醇酸鹽、乙內醯胺苯胂酸鹽、庚酸鹽、己炔1,6二酸鹽、己基間苯二酚酸鹽、海卓胺(hydrabamine)、氫溴酸鹽、鹽酸鹽、γ羥基丁酸鹽、碘化物、異丁酸鹽、異硫代硫酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、月桂酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、杏仁酸鹽、甲磺酸鹽、偏磷酸鹽、甲烷磺酸鹽、甲基硫酸鹽、單氫磷酸鹽、半乳糖二酸鹽(mucate)、萘磺酸鹽、萘1磺酸鹽、萘2磺酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、雙羥萘酸鹽(恩波酸鹽(embonate))、棕櫚酸鹽、泛酸鹽、苯乙酸鹽、苯丁酸鹽、苯基丙酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、磷酸鹽/二磷酸鹽、聚半乳糖醛酸鹽、丙磺酸鹽、丙酸鹽、丙炔酸鹽、焦磷酸鹽、焦硫酸鹽、柳酸鹽、硬脂酸鹽、次乙酸鹽、辛二酸鹽、丁二酸鹽、硫酸鹽、磺酸鹽、亞硫酸鹽、丹寧酸鹽、酒石酸鹽、茶氯酸鹽、甲苯磺酸鹽及戊酸鹽。

適合鹽之說明性實例包括衍生自胺基酸之有機鹽，該等胺基酸諸如甘胺酸及精胺酸、氨、一級胺、二級胺及三級胺，及環狀胺，諸如哌啶、嗎啉及哌

，及衍生自以下之無機鹽：鈉、鈣、鉀、鎂、錳、鐵、銅、鋅、鋁及鋰。

包括鹼基部分((諸如胺基)之本發明之化合物可與除上文所提及之酸以外的各種胺基酸形成醫藥學上可接受之鹽。

替代地，本質上為酸性之適用化合物可能夠與各種藥理學上可接受之陽離子形成鹼鹽。此類鹽之實例包括鹼金屬或鹼土金屬鹽，且特定言之鈉鹽及鉀鹽。此等鹽全部藉由習知技術製備。用作製備本發明之醫藥學上可接受之鹼鹽之試劑的化學鹼為與本文中之酸性化合物一起形成無毒鹼鹽之彼等鹼。此等鹽可藉由任何適合的方法來製備，例如用無機或有機鹼來處理游離酸，該等鹼係諸如胺(一級、二級或三級胺)、鹼金屬氫氧化物或鹼土金屬氫氧化物或其類似物。此等鹽亦可藉由用含有所需藥理學上可接受之陽離子的水溶液處理對應酸性化合物，且接著較佳在減壓下將所得溶液蒸發至乾燥來製備。替代地，其亦可藉由將酸性化合物之較低碳數烷醇溶液與所需鹼金屬醇鹽混合在一起，且隨後以與之前相同之方式將所得溶液蒸發至乾燥來製備。在任一情況下，較佳使用化學計量之試劑以確保反應完成且所需最終產物之產率最大。

可用作製備本發明之本質上為酸性的化合物之醫藥學上可接受之鹼鹽之試劑的化學鹼為與此類化合物一起形成無毒鹼鹽之彼等鹼。此類無毒鹼鹽包括(但不限於)衍生自此類藥理學上可接受之陽離子(諸如鹼金屬陽離子(例如鉀及鈉)及鹼土金屬陽離子(例如鈣及鎂))的彼等鹼鹽、銨或水溶性胺加成鹽(諸如N甲基葡糖胺(葡甲胺)及低碳數烷醇銨)，及醫藥學上可接受之有機胺之其他鹼鹽。

亦可形成酸及鹼之半鹽，例如半硫酸鹽及半鈣鹽。

關於適合鹽之綜述，參見Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use by Stahl and Wermuth (Wiley VCH, 2002)。用於製得本發明之化合物及互換鹽及游離鹼形式之醫藥學上可接受之鹽的方法為熟習此項技術者已知的。

本發明之鹽可根據熟習此項技術者已知之方法來製備。本發明化合物之醫藥學上可接受之鹽可容易藉由將化合物之溶液及所需酸或鹼(視需要)混合在一起來製備。鹽可自溶液沈澱且藉由過濾來收集或可藉由溶劑蒸發來回收。鹽之離子化程度可介於完全離子化至幾乎非離子化之範圍內。

熟習此項技術者應理解，具有鹼基官能基之呈游離鹼形式之本發明之化合物可藉由用化學計量過量之適當酸處理而轉化為酸加成鹽。本發明之化合物之酸加成鹽可通常在水溶劑存在下且在約0℃與100℃之間的溫度下藉由用化學計量過量之適合鹼(諸如碳酸鉀或氫氧化鈉)處理而再轉化為對應游離鹼。游離鹼形式可藉由習知方式，諸如用有機溶劑萃取來分離。另外，本發明之化合物之酸加成鹽可利用鹽之不同溶解度、酸之揮發性或酸性或藉由用適當負載之離子交換樹脂處理來進行互換。舉例而言，互換可能受本發明之化合物之鹽與略微化學計量過量之酸的反應影響，該酸之PK低於起始鹽之酸組分的PK。此轉化通常在約0℃與用作程序之介質之溶劑的沸點之間的溫度下進行。類似交換可能由鹼加成鹽，通常經由游離鹼形式之中間性實現。

本發明之化合物可以非溶劑化及溶劑化形式兩者存在。當溶劑或水緊密地結合時，複合物將具有與濕度無關之明確化學計量。然而，當溶劑或水弱結合時(如在通道溶劑合物及吸濕性化合物中)，水/溶劑含量將視濕度及乾燥條件而定。在此類情況下，非化學計量將為標準。術語『溶劑合物』在本文中用以描述包含本發明之化合物及一或多種醫藥學上可接受之溶劑分子(例如乙醇)之分子複合物。當溶劑為水時，採用術語『水合物』。根據本發明之醫藥學上可接受之溶劑合物包括水合物及其中結晶之溶劑可經同位素取代之溶劑合物，例如D₂ O、d₆ -丙酮、d₆ -DMSO。

本發明之範疇內亦包括複合物，諸如籠形物，包括藥物-主體之複合物，其中與上述溶劑合物相比，藥物及主體以化學計量或非化學計量量存在。亦包括含有兩種或更多種有機及/或無機組分之藥物的複合物，該等組分可為化學計量或非化學計量的量。所得複合物可為離子化、部分離子化或非離子化的。關於此類複合物之綜述，參見Haleblian之J Pharm Sci, 64 (8), 1269 1288 (1975年8月)，其揭示內容以全文引用的方式併入本文中。

本發明亦係關於本文提供之式之化合物的前藥。因此，可具有少量藥理學活性或本身無藥理學活性的本發明之化合物的某些衍生物在向患者投與時可例如藉由水解裂解而轉化為本發明化合物。此類衍生物稱為『前藥』。關於前藥之用途之其他資訊可見於『Pro drugs as Novel Delivery Systems』, 第14卷, ACS Symposium Series (T Higuchi及W Stella)；『Bioreversible Carriers in Drug Design』, Pergamon Press, 1987 (E B Roche編, American Pharmaceutical Association)及Guarino, V.R; Stella, V.J.: Biotech Pharm. Aspects 2007 5 (Pt2) 133 - 187中，其揭示內容以全文引用之方式併入本文中。

根據本發明之前藥可例如藉由用熟習此項技術者已知之某些部分作為『前部分』置換本發明化合物中存在之適當官能基而產生，例如H Bundgaard之「Design of Prodrugs」(Elsevier, 1985)中所描述，其揭示內容以全文引用的方式併入本文中。

根據本發明之前藥之一些非限制性實例包括： (i)其中化合物含有羧酸官能基(-COOH)、其酯，例如用(C₁ -C₆ )烷基置換氫； (ii)其中化合物含有醇官能基(OH)、其醚，例如用(C₁ -C₆ )烷醯氧基甲基或用磷酸酯醚基置換氫；及 (iii)其中化合物含有一級或二級胺基官能基(NH2或NHR，其中R ≠ H)、其醯胺，例如用適當代謝不穩定基團，諸如醯胺、胺基甲酸酯、脲、膦酸酯、磺酸酯等置換一或兩個氫。

根據前述實例之置換基團之其他實例及其他前藥類型之實例可見於前述參考文獻中。

最後，某些本發明化合物自身可充當其他本發明化合物之前藥。

本發明之範疇內亦包括本文中所述之式之化合物的代謝物，亦即投與藥物時在活體內形成之化合物。

本文提供之式之化合物可具有不對稱碳原子。本發明之化合物的碳-碳鍵在本文中可使用實線(

)、實楔線(

)或虛楔線(

)描繪。使用實線來描繪與不對稱碳原子之鍵意謂指示包括彼碳原子處之所有可能立體異構體(例如，特定對映異構體、外消旋混合物等)。使用實楔線或虛楔線描繪與不對稱碳原子之鍵意謂指示僅意欲包括所示之立體異構體。本發明之化合物可能含有超過一個不對稱碳原子。在彼等化合物中，使用實線描繪與不對稱碳原子之鍵意謂指示意欲包括所有可能的立體異構體及所連接之立體異構中心。舉例而言，除非另外說明，否則預期本發明之化合物可以對映異構體及非對映異構體形式或以外消旋體形式及其混合物形式存在。使用實線描繪與本發明之化合物中之一或多個不對稱碳原子之鍵且使用實楔線或虛楔線描繪與同一化合物中之其他不對稱碳原子之鍵意謂指示存在非對映異構體之混合物。

具有對掌性中心之本發明之化合物可以立體異構體，諸如外消旋體、對映異構體或非對映異構體之形式存在。

本文中式之化合物之立體異構體可包括本發明之化合物之順式及反式異構體、光學異構體(諸如(R)及(S)對映異構體)、非對映異構體、幾何異構體、旋轉異構體、滯轉異構體、構形異構體及互變異構體，包括展現超過一個異構類型之化合物；及其混合物(諸如外消旋體及非對映異構體對)。

亦包括酸加成鹽或鹼加成鹽，其中相對離子具有光學活性，例如d乳酸鹽或l離胺酸，或具有外消旋性，例如dl酒石酸鹽或dl精胺酸。

當任一外消旋物結晶時，可能有兩種不同類型之晶體。第一類型為上文所提及之外消旋化合物(真實外消旋體)，其中產生含有等莫耳量之兩種對映異構體的一種均質晶體形式。第二類型為外消旋混合物或聚結物，其中產生等莫耳量的各自包含單一對映異構體的兩種晶體形式。

本發明之化合物可展現互變異構及結構異構之現象。舉例而言，化合物可以若干互變異構形式存在，包括烯醇與亞胺形式，及酮與烯胺形式，以及幾何異構體及其混合物。所有此類互變異構形式包括於本發明之化合物之範疇內。互變異構體以溶液中互變異構體集合之混合物形式存在。在固體形式中，通常以一種互變異構體佔主導。儘管可描述一種互變異構體，但本發明包括所提供之式之化合物的所有互變異構體。

另外，一些本發明化合物可形成滯轉異構體(例如經取代之聯芳基)。滯轉異構體為當圍繞分子中之單鍵旋轉得以阻止或大大減緩時由於與分子之其他部分之立體相互作用及單鍵兩端之取代基不對稱而存在之構形立體異構體。滯轉異構體之互變足夠緩慢以使得在預定條件下分離且隔離。熱外消旋化之能量障壁可藉由形成對掌性軸線之一或多個鍵之自由旋轉的位阻來測定。

在本發明之化合物含有烯基或伸烯基的情況下，幾何順式/反式(或Z/E)異構體係可能的。順式/反式異構體可藉由熟習此項技術者熟知之習知技術(例如層析及分步結晶)來分離。

用於製備/分離個別對映異構體之習知技術包括自適合的光學純前驅體對掌性合成或使用例如對掌性高壓液相層析(HPLC)或超流體臨界層析(SFC)解析外消旋體(或鹽或衍生物之外消旋體)。

替代地，外消旋體(或外消旋前驅體)可與適合的光學活性化合物(例如醇)反應，或在化合物含有酸性或鹼性部分之情況下與酸或鹼(諸如酒石酸或1苯乙胺)反應。所得非對映異構混合物可藉由層析及/或分步結晶來分離，且藉由熟習此項技術者熟知之方式將非對映異構體中之一或兩者轉化為對應純對映異構體。

本發明之對掌性化合物(及其對掌性前驅體)可使用層析(通常HPLC)在不對稱樹脂上用行動相來獲得對映異構性增濃形式，該行動相由烴(通常庚烷或己烷)組成，含有0%至50% (通常2%至20%) 異丙醇及0%至5%烷基胺(通常0.1%二乙胺)。濃縮溶離液得到增濃混合物。

立體異構聚結物可藉由熟習此項技術者已知之習知技術分離；參見例如E L Eliel之「Stereochemistry of Organic Compounds」 (Wiley, New York, 1994),其揭示內容以全文引用的方式併入本文中。

本文所述之化合物之對映異構體純度可以對映異構過量(ee)描述，其指示樣品含有一種對映異構體之量大於另一種的程度。外消旋混合物之ee為0%，而單個完全純對映異構體之ee為100%。類似地，非對映異構體純度可以非對映異構過量(de)描述。

本發明亦包括經同位素標記之化合物，其與所提供式中之一者所述之彼等化合物相同，但事實係一或多個原子經原子質量或質量數與自然界中所常見之原子質量或質量數不同之原子置換。

本發明之經同位素標記之化合物一般可藉由熟習此項技術者已知之習知技術或藉由與本文所述之方法類似的方法，使用經適當同位素標記之試劑代替原本使用之未標記試劑來製備。

可併入本發明之化合物中之同位素之實例包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟及氯之同位素，諸如(但不限於)² H、³ H、¹³ C、¹⁴ C、¹⁵ N、¹⁸ O、¹⁷ O、³² P、³⁵ S、¹⁸ F及³⁶ Cl。某些經同位素標記之本發明化合物(例如其中併有諸如³ H及¹⁴ C之放射性同位素者)適用於藥物及/或基質組織分佈分析。氚化(亦即³ H)及碳-14 (亦即¹⁴ C)同位素因其容易製備及可偵測性而尤其較佳。此外，用諸如氘(亦即² H)之較重同位素進行取代可獲得由更大代謝穩定性產生之某些治療優勢，例如增加之活體內半衰期或降低之劑量需求，且因此在某些情況下可為較佳的。本發明之經同位素標記之化合物一般可藉由實施下文流程及/或實例及製備中所揭示之程序，藉由用經同位素標記之試劑取代未經同位素標記之試劑來製備。

既定用於醫藥用途之本發明之化合物可以結晶或非晶形產物或其混合物形式投與。其可藉由諸如沈澱、結晶、冷凍乾燥、噴霧乾燥或蒸發乾燥之方法以例如固體塞、散劑或膜形式獲得。可使用微波或射頻乾燥。

在另一實施例中，本發明提供一種式(Ia)化合物

或其醫藥學上可接受之鹽，其中 R¹ 及R² 獨立地為C_1-2 烷基；或 R¹ 及R² 接合形成5至7員碳環，其中該碳環可為飽和或不飽和的； R³ 為

； R⁴ 為C_3-5 烷基或(CH₂ )_n O(CH₂ )_m CH₃ ； R⁵ 為C_1-2 烷基； m為1；且 n為1。

在另一實施例中，本發明提供一種式(Ia)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R¹ 及R² 獨立地為C_1-2 烷基。

在另一實施例中，本發明提供式(Ia)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R¹ 及R² 接合形成5至7員碳環，其中該碳環可為飽和或不飽和的。

在另一實施例中，本發明提供一種式(Ia)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中 R¹ 及R² 接合形成5至7員碳環，其中該碳環可為飽和或不飽和的；且 R⁴ 為(CH₂ )_n O(CH₂ )_m CH₃ 。

在另一實施例中，本發明提供一種式(Ia)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中碳環為環戊基。

在另一實施例中，本發明提供一種式(Ia)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中碳環為環己基。

在另一實施例中，本發明提供一種式(Ia)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中 R¹ 及R² 接合形成5至7員碳環，其中該碳環可為不飽和的；且 R⁴ 為C_3-5 烷基。

在另一實施例中，本發明提供一種式(Ia)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中碳環為苯基。

在另一實施例中，本發明提供一種式(Ib)化合物

； R⁴ 為C_1-6 烷基或(CH₂ )_n O(CH₂ )_m CH₃ ，其中該C_1-6 烷基或(CH₂ )_n O(CH₂ )_m CH₃ 基團之任一碳在價數允許時經0至3個鹵素取代，其中鹵素為F； R⁵ 為C_1-3 烷基或OC_1-3 烷基，其中C_1-3 烷基經0至3個F取代； R⁶ 為H或C_1-3 烷基，其中C_1-3 烷基經0至3個F取代； m為0至2；且 n為1至3。

在另一實施例中，本發明提供一種式(Ib)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中 R¹ 及R² 獨立地為C_1-2 烷基；或 R¹ 及R² 接合形成5至7員碳環，其中該碳環可為飽和或不飽和的； R³ 為

； R⁵ 為C_1-3 烷基或OC_1-3 烷基，其中C_1-3 烷基經0至2個F取代；且 R⁶ 為H。

在另一實施例中，本發明提供一種式(Ib)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R⁵ 為C_1-2 烷基。

在另一實施例中，本發明提供一種式(I)、(Ia)、(Ib)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R⁴ 為正丙基、正丁基或正戊基。

在另一實施例中，本發明提供一種式(I)、(Ia)、(Ib)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R⁴ 為-CH₂ -O-CH₂ CH₃ 。

在另一實施例中，本發明提供式(I)、(Ia)、(Ib)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R⁵ 為甲基或乙基。

在另一實施例中，本發明提供一種式(I)、(Ia)、(Ib)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R⁶ 為H。

本發明之另一實施例為本文中所述之每一實例中之一或多者，且包括但不限於選自以下之化合物： 2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇； 2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-1H -咪唑并[4,5-c ]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇； 2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-7,8-二氫環戊并[b]咪唑并[4,5-d]吡啶-1(6H)-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇； 2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7,8,9-四氫-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇； 3-(4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)-2-甲基丙-1-醇； (R)-3-(4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)-2-甲基丙-1-醇； (S)-3-(4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)-2-甲基丙-1-醇； 2-((4-胺基-6,7-二甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇； 2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)甲基)-2-乙基丙烷-1,3-二醇； 2-((4-胺基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇； 2-((4-胺基-2-丁基-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇；及 2-((4-胺基-2-戊基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇；或其醫藥學上可接受之鹽。

本發明之另一實施例為本文中所述之每一實例中之一或多者，且包括但不限於選自以下之化合物： 2-((4-胺基-2-丁基-6,7,8,9-四氫-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇； 2-((4-胺基-2-丁基-7,8-二氫環戊并[b]咪唑并[4,5-d]吡啶-1(6H)-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇； 2-((4-胺基-2-乙基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇；及 2-((4-胺基-2-丙基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇；或其醫藥學上可接受之鹽。

本發明之另一實施例提供一種醫藥組合物，其包含式(I)及其任何實施例之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接受之載劑或賦形劑。

本發明之另一實施例提供一種用於治療有需要之個體之癌症的方法，其包含向該個體投與治療有效量之式(I)及其任何實施例之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。

待治療之癌症包括鱗狀細胞癌、底細胞癌瘤、骨髓瘤、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、神經膠質瘤、霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma)、非霍奇金氏淋巴瘤、急性骨髓白血病(AML)、多發性骨髓瘤、胃腸(道)癌症、腎癌、卵巢癌、肝癌、淋巴母細胞白血病、淋巴球性白血病、結腸直腸癌、子宮內膜癌、腎癌、前列腺癌、甲狀腺癌、黑素瘤、軟骨肉瘤、神經母細胞瘤、胰臟癌、多形性膠質母細胞瘤、子宮頸癌、腦癌、胃癌、子宮癌、膀胱癌(包括非肌肉浸潤性膀胱癌)、肝癌、乳癌及頭頸癌。

更特定言之，待治療癌症之實例包括底細胞癌瘤、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、非霍奇金氏淋巴瘤、卵巢癌、結腸直腸癌、腎癌、前列腺癌、甲狀腺癌、黑素瘤、胰臟癌、膀胱癌(非肌肉浸潤性膀胱癌)、肝癌、乳癌及頭頸癌。

本發明之另一實施例涉及治療選自以下之癌症：底細胞癌瘤、卵巢癌、黑素瘤、非肌肉浸潤性膀胱癌、乳癌及頭頸癌。

本發明之另一實施例涉及治療黑素瘤、胃腸(道)癌症、乳癌、卵巢癌及頭頸癌。

本發明之另一實施例涉及治療胃腸道癌症。此類胃腸癌包括口腔癌、食道癌、胃癌、膽系統癌症、胰臟癌、小腸癌、大腸癌、直腸癌及肛門癌。

本發明之另一實施例涉及治療非肌肉侵潤性膀胱癌。

本發明之另一實施例涉及用於治療有需要之個體之癌症的式(I)及其任何實施例之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。

本發明之另一實施例涉及用於治療癌症之式(I)及其任何實施例之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該治療包含投與額外治療劑。

在另一態樣中，本發明提供一種抑制個體體內之癌細胞增殖的方法，其包含以有效抑制細胞增殖的量向該個體投與本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。

在另一態樣中，本發明提供一種抑制個體之癌細胞侵襲之方法，其包含以有效抑制細胞侵襲的量向該個體投與本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。

在另一態樣中，本發明提供一種誘導個體體內之癌細胞的細胞凋亡之方法，其包含以有效誘導細胞凋亡的量向該個體投與本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。

在另一態樣中，本發明提供一種抑制個體體內之癌細胞轉移的方法，其包含以有效抑制細胞轉移的量向該個體投與本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。

在另一態樣中，本發明提供一種抑制個體體內之血管生成的方法，其包含以有效抑制血管生成的量向該個體投與本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。

在另一態樣中，本發明提供一種用於治療有需要之個體之癌症的方法，其包含向該個體投與治療有效量之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。該方法亦包括投與本發明之化合物及至少一種額外治療劑。

本發明亦提供預防有需要之個體之傳染病之方法，其包含以足以預防該個體之傳染病的量投與醫藥組合物。亦即，在一些實施例中，本發明提供防治性疫苗。在一些實施例中，哺乳動物個體處於暴露於感染媒介物風險下。「預防」傳染病意謂保護個體免於罹患傳染病。在一些實施例，預防傳染病進一步包含保護個體免於受感染媒介物感染(例如保護個體免於出現急性或慢性感染)。另外，本發明提供改善有需要之哺乳動物個體之傳染病之症狀的方法，其包含以足以改善該個體之傳染病的症狀的量投與醫藥組合物。亦即，在一些實施例中，本發明提供治療性疫苗。在一些實施例中，個體急性或慢性地感染有感染媒介物。傳染病可為病毒性(例如，肝炎、疱疹或人類乳頭瘤病毒)、細菌性、真菌性或寄生疾病。在一些實施例中，醫藥組合物進一步包含病毒性、細菌性、真菌性或寄生抗原。「改善」傳染病之症狀意謂改善症狀，較佳地降低疾病程度。治療方法及用途

本發明進一步提供治療方法及用途，其包含將本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽單獨或與其他治療劑或緩解性藥劑組合投與。

在一個態樣中，本發明提供一種用於治療有需要之個體之異常細胞生長之方法，其包含向該個體投與治療有效量之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。

在另一態樣中，本發明提供一種用於治療有需要之個體之異常細胞生長的方法，其包含向該個體投與一定量的本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽以及一定量的額外治療劑(例如，抗癌治療劑)，該等量結合在一起有效的治療該異常細胞生長。

在另一態樣中，本發明提供一種本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療個體體內之異常細胞生長。

在另一態樣中，本發明提供本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於治療個體體內之異常細胞生長。

在另一態樣中，本發明提供一種用於治療有需要之個體之異常細胞生長的醫藥組合物，該醫藥組合物包含本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接受之載劑或賦形劑。

在另一態樣中，本發明提供本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用作藥物，特定言之用於治療異常細胞生長之藥物。

在又一態樣中，本發明提供本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其用於製造用於治療個體體內之異常細胞生長的藥物。

在本文所提供之方法的常見實施例中，異常細胞生長為癌症。本發明之化合物可作為單一藥劑投與或可與其他抗癌治療劑，特定言之與適合於特定癌症之護理標準藥劑組合投與。

在一些實施例中，所提供之方法產生以下效果中之一或多者：(1)抑制癌細胞增殖；(2)抑制癌細胞侵襲；(3)誘導癌細胞之細胞凋亡；(4)抑制癌細胞轉移；或(5)抑制血管生成。

在一些實施例中，本發明之化合物係作為第一線療法投與。在其他實施例中，本發明化合物係作為第二(或後續)線療法投與。劑型及方案

本發明之化合物之投藥可受能夠將化合物遞送至作用部位之任何方法影響。此等方法包括經口途徑、十二指腸內途徑、非經腸注射(包括靜脈內、皮下、肌肉內、血管內或輸注)、局部及直腸投與。

可調整給藥方案以提供最佳所需反應。舉例而言，可投與單一大丸劑，可隨時間投與多個分次劑量，或可如治療情況之緊急需要所指示而按比例減少或增加劑量。就投與簡便性及劑量均一性而言，將非經腸組合物調配成單位劑型尤其有利。如本文所使用，單位劑型係指適合以單位劑量用於待治療之哺乳動物個體的物理上離散單元；每一單元均含有經計算與所需醫藥學載劑聯合產生所需治療效果之預定量之活性化合物。本發明之單位劑型之規格係由下列情況指定且直接取決於下列情況：(a)化學治療劑之獨特特徵及待達成之特定治療或預防作用，及(b)混合用於治療個體敏感性之此類活性化合物之技術中的固有限制。

因此，基於本文提供之揭示內容，熟習此項技術者應瞭解，根據治療技術中熟知之方法來調整劑量及給藥方案。亦即，可容易確定最大可耐受劑量，且亦可測定向患者提供可偵測治療益處之有效量，亦可測定投與每一藥劑以向患者提供可偵測治療益處的暫時需求。因此，儘管本文中舉例說明某些劑量及投藥方案，但此等實例決不限制在實踐本發明時可向患者提供之劑量及投與方案。

應注意，劑量值可隨待減輕之病狀的類型及嚴重程度而變化，且可包括單次或多次劑量。此外應理解，對於任何特定個體而言，特定劑量方案應根據個體需要及投與組合物或監督組合物投與之人員的專業判斷而隨時間調整，且本文所闡述之劑量範圍僅具例示性且不意欲限制所主張之組合物的範疇或實務。舉例而言，可基於藥物動力學或藥效學參數來調整劑量，所述參數可包括臨床效果，諸如毒性效果及/或實驗值。因此，本發明涵蓋如熟習此項技術者所判定之患者內劑量遞增。判定投與化學治療劑之適當劑量及方案為相關技術中所熟知，且一旦提供本文所揭示之教示，則熟習此項技術者應理解該等判定之劑量及方案涵蓋於此教示中。

所投與之本發明之化合物的量將視所治療之個體、病症或病狀之嚴重程度、投藥率、化合物之配置及處方醫師之判斷而定。然而，有效劑量在每天約0.001至約100 mg/kg體重、較佳每天約1至約35 mg/kg範圍內，呈單次或分次劑量。對於70 kg人類而言，此將相當於每天約0.05至約7 g、較佳地每天約0.1至約2.5 g。在一些個例中，低於前述範圍之下限的劑量水準可能已完全足夠，而在其他情況下，在不引起任何有害副作用之情況下仍可採用較大劑量，其限制條件為首先將該等較大劑量分成若干較小劑量以在一整天中投與。調配物及投與途徑

如本文中所用，「醫藥學上可接受之載劑」係指不會對生物體造成顯著刺激且不消除所投與化合物之生物活性及特性之載劑或稀釋劑。

醫藥學上可接受之載劑可包含任何習知醫藥學載劑或賦形劑。載劑及/或賦形劑之選擇在很大程度上將視以下因素而定，諸如特定投與模式、載劑或賦形劑對溶解性及穩定性之影響及劑型性質。

適合之醫藥學載劑包括惰性稀釋劑或填充劑、水及各種有機溶劑(諸如水合物及溶劑合物)。視需要，醫藥組合物可含有額外成分，諸如調味劑、黏合劑、賦形劑及其類似物。因此，對於經口投與而言，含有各種賦形劑(諸如檸檬酸)之錠劑可與各種崩解劑(諸如澱粉、褐藻酸及某些複合矽酸鹽)以及黏合劑(諸如蔗糖、明膠及阿拉伯膠)一起使用。賦形劑之實例包括(但不限於)碳酸鈣、磷酸鈣、各種糖及各種類型之澱粉、纖維素衍生物、明膠、植物油及聚乙二醇。另外，潤滑劑(諸如硬脂酸鎂、月桂基硫酸鈉及滑石)通常適用於製錠目的。類似類型之固體組合物亦可以軟及硬之填充明膠膠囊形式採用。因此，材料之非限制性實例包括乳糖或牛奶糖及高分子量聚乙二醇。當需要經口投與水性懸浮液或酏劑時，可將其中之活性化合物與各種甜味劑或調味劑、著色物或染料及(視需要)乳化劑或懸浮劑以及稀釋劑(諸如水、乙醇、丙二醇、甘油或其組合)合併。

醫藥組合物可例如呈適用於經口投與之形式(如錠劑、膠囊、丸劑、散劑、持續釋放調配物、溶液、懸浮液)，適用於非經腸注射之形式(如無菌溶液、懸浮液或乳液)；適用於局部投與之形式(如軟膏或乳膏)，或適用於直腸投與之形式(如栓劑)。

例示性非經腸投與形式包括在活性化合物於無菌水溶液(例如，丙二醇或右旋糖水溶液)中之溶液或懸浮液。視需要，可適當地緩衝此類劑型。

醫藥組合物可呈適用於單一投與精確劑量之單位劑型。

適合於遞送本發明之化合物的醫藥組合物及其製備方法對熟習此項技術者而言將為顯而易見的。此類組合物及其製備方法可見於例如『Remington's Pharmaceutical Sciences』, 第19版(Mack Publishing Company, 1995)中，其揭示內容以全文引用的方式併入本文中。

本發明之化合物可以經口投與。經口投與可涉及吞嚥，以使化合物進入胃腸道；或可採用經頰或舌下投與，藉此使化合物直接自口進入血流。

適用於經口投與之調配物包括固體調配物，諸如錠劑，含有微粒、液體或散劑之膠囊，口含錠(包括填充液體)、咀嚼片、多微粒及奈米微粒、凝膠、固溶體、脂質體、薄膜(包括黏液黏著劑)、卵形栓劑、噴霧劑及液體調配物。

液體調配物包括懸浮液、溶液、糖漿及酏劑。此類調配物可作為填充劑用於軟或硬膠囊中，且通常包括載劑，例如水、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甲基纖維素或適合之油，及一或多種乳化劑及/或懸浮劑。液體調配物亦可藉由使例如來自藥囊之固體復原來製備。

本發明之化合物亦可以快速溶解、快速崩解劑型，諸如Liang及Chen之Expert Opinion in Therapeutic Patents, 11 (6), 981 986 (2001)中所述之劑型使用，其揭示內容以全文引用的方式併入本文中。

對於錠劑劑型而言，視劑量而定，藥物可佔劑型之1 wt%至80 wt%，更通常佔劑型之5 wt%至60 wt%。除藥物之外，錠劑一般含有崩解劑。崩解劑之實例包括羥基乙酸澱粉鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素鈣、交聯羧甲基纖維素鈉、交聯聚維酮、聚乙烯吡咯啶酮、甲基纖維素、微晶纖維素、經低碳數烷基取代之羥丙基纖維素、澱粉、預膠凝化澱粉及褐藻酸鈉。一般而言，崩解劑將包含劑型之1 wt%至25 wt%，較佳地5 wt%至20 wt%。

黏合劑一般用於向錠劑調配物賦予黏聚品質。適合的黏合劑包括微晶纖維素、明膠、糖、聚乙二醇、天然及合成膠、聚乙烯吡咯啶酮、預膠凝化澱粉、羥丙基纖維素及羥丙基甲基纖維素。錠劑亦可含有稀釋劑，諸如乳糖(單水合物、噴霧乾燥之單水合物、無水物及其類似物)、甘露糖醇、木糖醇、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、微晶纖維素、澱粉及二水合磷酸氫鈣。

錠劑亦可視情況包括界面活性劑，諸如月桂基硫酸鈉及聚山梨醇酯80，及滑動劑，諸如二氧化矽及滑石。當存在時，界面活性劑通常佔錠劑之0.2 wt%至5 wt%之量，且滑動劑通常佔錠劑之0.2 wt%至1 wt%。

錠劑一般亦含有潤滑劑，諸如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂酸鋅、硬脂醯反丁烯二酸鈉、及硬脂酸鎂與月桂基硫酸鈉之混合物。潤滑劑一般佔錠劑之0.25 wt%至10 wt%，較佳較佳地0.5 wt%至3 wt%。

其他習知成分包括抗氧化劑、著色劑、調味劑、防腐劑及味覺掩蔽劑。

例示性錠劑含有至多約80 wt%藥物、約10 wt%至約90 wt%黏合劑、約0 wt%至約85 wt%稀釋劑、約2 wt%至約10 wt%崩解劑及約0.25 wt%至約10 wt%潤滑劑。

錠劑摻合物可直接或藉由滾筒壓縮以形成錠劑。錠劑摻合物或摻合物之一部分可在製錠之前交替地進行濕式、乾式或熔融粒化、熔融凝結或擠出。最終調配物可包括一或多個層，且可經包衣或未包衣；或經囊封。

錠劑之調配詳細論述於H. Lieberman及L. Lachman之「Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, 第1卷」, Marcel Dekker, N.Y., N.Y., 1980 (ISBN 0 8247 6918 X)中，其揭示內容以全文引用的方式併入本文中。

用於經口投與之固體調配物可經調配以立即釋放及/或調節釋放。調節釋放調配物包括延遲、持續、脈衝、受控、靶向及程式化釋放。

適合的調節釋放調配物描述於美國專利第6,106,864號中。其他適合的釋放技術(諸如高能分散體、及滲透且包衣之粒子)之細節可見於Verma等人, Pharmaceutical Technology On line, 25(2), 1 14 (2001)中。使用口嚼錠以達成受控釋放描述於WO 00/35298中。此等參考之揭示內容以全文引用的方式併入本文中。

本發明之化合物亦可經直接投與至血流中、肌肉中或內部器官中。適用於非經腸投與之方式包括靜脈內、動脈內、腹膜內、鞘內、心室內、尿道內、胸骨內、顱內、肌肉內及皮下。適用於非經腸投與之裝置包括針(包括微針)注射器、無針注射器及輸注技術。

非經腸調配物典型地為水溶液，其可含有賦形劑，諸如鹽、碳水化合物及緩衝劑(較佳地3至9之pH)，但對於一些應用，其更適合調配為無菌非水性溶液或調配為待與適合之媒劑(諸如無菌無熱原質水)結合使用的乾燥形式。

在無菌條件下例如藉由凍乾來製備非經腸調配物可使用熟習此項技術者熟知之標準醫藥技術來容易地實現。

用於製備非經腸溶液之本發明之化合物的溶解度可藉由使用適當的調配技術，諸如併入溶解度增強劑來增大。

用於非經腸投與之調配物可經調配為立即釋放及/或調節釋放。調節釋放調配物包括延遲、持續、脈衝、受控、靶向及程式化釋放。因此，本發明之化合物可經調配為固體、半固體或搖溶性液體以作為植入儲存物形式投與，從而提供活性化合物之調節釋放。此類調配物之實例包括經藥物塗佈之血管內支架及PGLA微球體。

本發明之化合物亦可經局部投與至皮膚或黏膜，亦即經真皮或經皮。用於此目的之典型調配物包括凝膠、水凝膠、乳液、溶液、乳膏、軟膏、敷粉、敷料、泡沫劑、薄膜、皮膚貼劑、糯米紙囊劑、植入物、海綿、纖維、繃帶及微乳液。亦可使用脂質體。典型載劑包括醇、水、礦物油、液體石蠟脂、白石蠟脂、甘油、聚乙二醇及丙二醇。可併入滲透增強劑；參見例如Finnin及Morgan之J Pharm Sci, 88 (10), 955 958, (1999年10月)。局部投與之其他方式包括藉由電穿孔、離子導入療法、超音波藥物透入療法、超音波電滲法及微針或無針(例如Powderject™、Bioject™等)注射來遞送。此等參考之揭示內容以全文引用的方式併入本文中。

用於局部投與之調配物可經調配以立即釋放及/或調節釋放。調節釋放調配物包括延遲、持續、脈衝、受控、靶向及程式化釋放。

本發明之化合物亦可經鼻內或藉由吸入投與，通常以乾粉形式(單獨作為混合物，例如與乳糖乾摻合，或作為混合組分粒子，例如與磷脂(諸如磷脂醯膽鹼)混合)由乾粉吸入器投與，或作為氣溶膠噴霧由使用或不使用適合推進劑(諸如1,1,1,2四氟乙烷或1,1,1,2,3,3,3七氟丙烷)的加壓容器、泵、噴霧器、霧化器(較佳為使用電流體動力學產生細霧之霧化器)或噴灑器投與。對於鼻內使用，散劑可包括生物黏著劑，例如聚葡萄胺糖或環糊精。

加壓容器、泵、噴霧器、霧化器或噴灑器含有本發明之化合物之溶液或懸浮液，該溶液或懸浮液包含例如乙醇、乙醇水溶液或適用於分散、溶解活性物質或延長活性物質之釋放的替代藥劑、作為溶劑之推進劑及視情況選用之界面活性劑(諸如脫水山梨糖醇三油酸酯、油酸或寡聚乳酸)。

在以乾粉或懸浮液調配物使用之前，藥物經微米尺寸化至適合於藉由吸入來遞送之尺寸(通常小於5微米)。此可藉由任何適當之粉碎方法達成，諸如螺旋噴射研磨、流化床噴射研磨、形成奈米粒子之超臨界流體加工、高壓均質化或噴霧乾燥。

用於吸入器或吹入器中之膠囊(由例如明膠或HPMC製得)、泡殼及藥筒可經調配而含有本發明之化合物、適合的散劑基質(諸如乳糖或澱粉)及效能調節劑(諸如l白胺酸、甘露糖醇或硬脂酸鎂)之散劑混合物。乳糖可為無水的或呈單水合物形式，較佳為後者。其他適合之賦形劑包括聚葡萄糖、葡萄糖、麥芽糖、山梨糖醇、木糖醇、果糖、蔗糖及海藻糖。

適用於使用電流體動力學產生細霧之霧化器的溶液調配物每次致動可含有1 μg至20 mg本發明之化合物，且致動體積可在1 μL至100 μL範圍內變化。典型調配物包括本發明之化合物、丙二醇、無菌水、乙醇及氯化鈉。可代替丙二醇使用之替代性溶劑包括甘油及聚乙二醇。

可將適合的調味劑(諸如薄荷醇及左薄荷腦)或甜味劑(諸如糖精或糖精鈉)添加至既定用於吸入/鼻內投與之本發明之彼等調配物中。

用於吸入/鼻內投與之調配物可使用例如聚(DL乳酸共乙醇酸) (PGLA)調配為立即釋放及/或調節釋放。調節釋放調配物包括延遲、持續、脈衝、受控、靶向及程式化釋放。

在乾粉吸入劑及噴霧劑之情況下，藉助於遞送定量之閥來判定劑量單元。根據本發明之單元通常經配置以投與含有所需量之本發明化合物的計量劑量或「每噴一次劑量(puff)」。總日劑量可以單次劑量，或更通常在一整天中以分次劑量投與。

本發明之化合物可例如以栓劑、子宮托或灌腸形式經直腸或經陰道投與。可可脂為傳統的栓劑基質，但適當時可使用各種替代物。

用於經直腸/經陰道投與之調配物可經調配以立即釋放及/或調節釋放。調節釋放調配物包括延遲、持續、脈衝、受控、靶向及程式化釋放。

本發明之化合物亦可典型地以微米尺寸化懸浮液或溶液於等滲、pH經調節之無菌生理鹽水中之滴劑形式經直接投與至眼睛或耳朵。適用於經眼及經耳投與之其他調配物包括軟膏、生物可降解植入物(例如可吸收凝膠海綿體、膠原蛋白)及不可生物降解植入物(例如聚矽氧)、糯米紙囊劑、鏡片及粒子或囊泡系統(諸如囊泡(niosome)或脂質體)。諸如交聯聚丙烯酸、聚乙烯醇、玻尿酸、纖維素聚合物(例如羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素或甲基纖維素)或雜多醣聚合物(例如結冷膠)之聚合物可連同防腐劑(諸如苯紮氯銨)一起併入。此類調配物亦可藉由離子導入療法來遞送。

用於經眼/經耳投與之調配物可經調配以立即釋放及/或調節釋放。調節釋放調配物包括延遲、持續、脈衝、受控、靶向或程式化釋放。其他技術

本發明之化合物可與可溶性大分子實體(諸如環糊精及其適合的衍生物或含聚乙二醇之聚合物)組合，以改良其用於前述投與模式中之任一者中之溶解度、溶解速率、味覺掩蔽、生物可用性及/或穩定性。

舉例而言，發現藥物環糊精複合物一般適用於多數劑型及投與途徑。可使用包合複合物及非包合複合物兩者。作為與藥物直接複合之替代例，環糊精可用作輔助添加劑，亦即用作載劑、稀釋劑或增溶劑。最常用於此等目的之環糊精為α-環糊精、β-環糊精及γ-環糊精，其實例可見於PCT公開案第WO 91/11172號、第WO 94/02518號及第WO 98/55148號中，其揭示內容以全文引用之方式併入本文中。

所投與之活性化合物的量將視所治療之個體、病症或病狀之嚴重程度、投藥率、化合物之配置及處方醫師之判斷而定。然而，有效劑量通常為每天約0.001至約100 mg/kg體重，且更頻繁地每天約0.01至約35 mg/kg的範圍內，以單一劑量或分次劑量形式。對70 kg人類而言，此將合計為約0.07毫克/天至約7000毫克/天，更通常約10毫克/天至約1000毫克/天。有時，劑量為每天約10、20、30、40、50、60、75、100、125、150、175、200、225、250、275、300、325、350、375、400、425、450、475、500、525、550、575、600、625、650、675、700、750、800、900、或1000 mg。有時，劑量為約10毫克/天至約1000毫克/天、約10毫克/天至約750毫克/天、約10毫克/天至約600毫克/天、約10毫克/天至約300毫克/天、約10毫克/天至約150毫克/天、約20毫克/天至約750毫克/天、約20毫克/天至約600毫克/天、約20毫克/天至約300毫克/天、約20毫克/天至約150毫克/天、約50毫克/天至約750毫克/天、約50毫克/天至約600毫克/天、約50毫克/天至約300毫克/天、約50毫克/天至約150毫克/天、約75毫克/天至約750毫克/天、約75毫克/天至約600毫克/天、約75毫克/天至約300毫克/天或約75毫克/天至約150毫克/天。

在一些個例中，低於前述範圍之下限的劑量水準可更適合，而在其他情況下，可使用更大劑量而不產生任何有害副作用，此類較大劑量通常分成若干較小劑量以在一整天中投與。分裝部分之套組

因為(例如)為達到治療特定疾病或病狀之目的而可能需要投與活性化合物之組合，因此在本發明之範疇內，其中之至少一者含有根據本發明之化合物的兩種或更多種醫藥組合物可適宜地以適合於共投與組合物之套組形式組合。因此，本發明之套組包括兩種或更多種個別醫藥組合物，其中之至少一者含有本發明之化合物，及用於分別保持該等組合物之構件，諸如容器、分次瓶或分次箔包。此類套組之一實例係常用於錠劑、膠囊及其類似物之封裝的泡殼包裝。

本發明之套組尤其適用於投與不同劑型(例如經口及非經腸)，用於以不同給藥間隔投與各別組合物，或用於針對彼此滴定各別組合物。為有助於順應性，套組通常包括投藥指導且可具備記憶輔助件。組合療法

如本文中所使用，術語「組合療法」係指本發明之化合物連同至少一種額外醫藥或藥用劑(例如，抗癌治療劑)一起依序或同時投與。

如本文中所提及，本發明之化合物可與一或多種額外抗癌治療劑組合使用。本發明之化合物在某些腫瘤中之功效可藉由與其他經批准的或實驗癌症療法(例如輻射、手術、化學治療劑、靶向療法、抑制腫瘤中失調之其他信號傳導路徑的藥劑及其他免疫增強劑(諸如PD-1或PD L1拮抗劑及其類似物))組合來增強。

當使用組合療法時，一或多種額外抗癌治療劑可與本發明之化合物依序或同時投與。在一個實施例中，在投與本發明之化合物之前，向哺乳動物(例如人類)投與額外抗癌治療劑。在另一實施例中，在投與本發明之化合物後，向哺乳動物投與額外抗癌治療劑。在另一實施例中，在投與本發明之化合物的同時向哺乳動物(例如人類)投與額外抗癌治療劑。

本發明亦係關於一種用於治療哺乳動物(包括人類)之異常細胞生長的醫藥組合物，其包含一定量的如上文所定義之本發明之化合物(包括該化合物或其醫藥學上可接受之鹽之水合物、溶劑合物及多晶形物)以及一或多種(較佳地一至三種)額外抗癌治療劑。

可與本發明之化合物組合投與的額外化學治療劑之類別包括(但不限於)：烷基化劑、抗代謝物、激酶抑制劑、紡錘體毒素(spindle poison)植物鹼、細胞毒素/抗腫瘤抗生素、拓樸異構酶抑制劑、光敏劑、抗雌激素及選擇性雌激素受體調節劑(SERM)、抗孕酮、雌激素受體下調劑(ERD)、雌激素受體拮抗劑、黃體生成激素釋放激素促效劑；IL-2受體促效劑(針對細胞介素受體之重組細胞介素或促效劑)；及抑制涉及異常細胞增殖或腫瘤生長之基因表現的反義寡核苷酸或寡核苷酸衍生物。

其他額外化學治療劑不僅包括紫杉烷或鉑藥劑，且亦包括HER2靶向劑，例如曲妥珠單抗(trastuzumab)。

在另一實施例中，此類額外抗癌治療劑包括自以下類別獲得之化合物：有絲分裂抑制劑、烷基化劑、抗代謝物、抗腫瘤抗生素、抗血管生成劑、拓樸異構酶I及II抑制劑、植物鹼、紡錘體毒素植物鹼、KRAS抑制劑；MCT4抑制劑；MAT2a抑制劑；alk/c-Met/ROS抑制劑(包括克卓替尼(crizotinib)或勞拉替尼(lorlatinib))；mTOR抑制劑(包括坦羅莫司(temsirolimus)或吉達力絲(gedatolisib))；src/abl抑制劑(包括伯舒替尼(bosutinib))；細胞週期素依賴性激酶(CDK)抑制劑(包括帕博昔布(palbociclib)、PF-06873600)；erb抑制劑(包括達可替尼(dacomitinib))；PARP抑制劑(包括拉唑帕尼(talazoparib))；SMO抑制劑(包括格拉吉伯(glasdegib))；EGFR T790M抑制劑；PRMT5抑制劑；TGFβR1抑制劑；生長因子抑制劑；細胞週期抑制劑；生物反應調節劑；酶抑制劑及細胞毒劑。

在另一實施例中，此類額外抗癌治療劑包括自抗血管生成劑獲得之化合物，該抗血管生成劑包括例如酪胺酸激酶/血管內皮生長因子(VEGF)受體(VEGFR)抑制劑(包括舒尼替尼(sunitinib)、阿西替尼((axitinib)、索拉非尼(sorafenib)及替沃紮尼(tivozanib))、TIE-2抑制劑、PDGFR抑制劑、血管生成素抑制劑、PKCβ抑制劑、COX-2 (環加氧酶II)抑制劑、整合素(α-v/β-3)、MMP-2 (基質-金屬蛋白酶2)抑制劑及MMP-9 (基質-金屬蛋白酶9)抑制劑。較佳抗血管生成劑包括舒尼替尼(sunitinib) (Sutent™)、貝伐單抗(bevacizumab) (Avastin™)、阿西替尼(axitinib) (Inlyta™)、SU 14813 (Pfizer)及AG 13958 (Pfizer)。額外抗血管生成劑包括凡塔藍尼(vatalanib) (CGP 79787)、派加替尼八鈉(pegaptanib octasodium) (Macugen™)、凡德他尼(vandetanib) (Zactima™)、PF-0337210 (Pfizer)、SU 14843 (Pfizer)、AZD 2171 (AstraZeneca)、蘭比珠單抗(ranibizumab) (Lucentis™)、Neovastat™ (AE 941)、四硫莫里德塔(tetrathiomolybdata) (Coprexa™)、AMG 706 (Amgen)、VEGF Trap (AVE 0005)、CEP 7055 (Sanofi-Aventis)、XL 880 (Exelixis)、特拉替尼(telatinib) (BAY 57-9352)及CP-868、596 (Pfizer)。其他抗血管生成劑包括恩紮妥林(enzastaurin) (LY 317615)、米哚妥林(midostaurin) (CGP 41251)、哌立福新(perifosine) (KRX 0401)、替普瑞酮(teprenone) (Selbex™)及UCN 01 (Kyowa Hakko)。抗血管生成劑之其他實例包括塞內昔布(celecoxib) (Celebrex™)、帕瑞昔布(parecoxib) (Dynastat™)、德拉昔布(deracoxib) (SC 59046)、魯米昔布(lumiracoxib) (Preige™)、伐地昔布(valdecoxib) (Bextra™)、羅非昔布(rofecoxib) (Vioxx™)、艾拉莫德(iguratimod) (Careram™)、IP 751 (Invedus)、SC-58125 (Pharmacia)及依託昔布(etoricoxib) (Arcoxia™)。又其他抗血管生成劑包括依昔舒林(exisulind) (Aptosyn™)、雙水楊酸酯(salsalate) (Amigesic™)、二氟尼柳(diflunisal) (Dolobid™)、布洛芬(ibuprofen) (Motrin™)、酮基布洛芬(ketoprofen) (Orudis™)、萘丁美酮(nabumetone) (Relafen™)、吡羅昔康(piroxicam) (Feldene™)、萘普生(naproxen) (Aleve™、Naprosyn™)、雙氯芬酸(diclofenac) (Voltaren™)、吲哚美辛(indomethacin) (Indocin™)、舒林酸(sulindac) (Clinoril™)、托美丁(tolmetin) (Tolectin™)、依託度酸(etodolac) (Lodine™)、酮咯酸(ketorolac) (Toradol™)及奧沙普𠯤(oxaprozin) (Daypro™)。又其他抗血管生成劑包括ABT 510 (Abbott)、阿雷司他(apratastat) (TMI 005)、AZD 8955 (AstraZeneca)、英環奈德(incyclinide) (Metastat™)及PCK 3145 (Procyon)。又其他抗血管生成劑包括阿曲汀(acitretin) (Neotigason™)、普利肽新(plitidepsin) (aplidine™)、希倫泰德(cilengtide) (EMD 121974)、康柏斯達汀A4 (combretastatin A4) (CA4P)、非瑞替尼(fenretinide) (4 HPR)、鹵夫酮(halofuginone) (Tempostatin™)、Panzem™ (2-甲氧基雌二醇)、PF-03446962 (Pfizer)、瑞馬司他(rebimastat) (BMS 275291)、卡妥索單抗(catumaxomab) (Removab™)、來那度胺(lenalidomide) (Revlimid™)、角鯊胺(squalamine) (EVIZON™)、沙立度胺(thalidomide) (Thalomid™)、Ukrain™ (NSC 631570)、Vitaxin™ (MEDI 522)及唑來膦酸(zoledronic acid) (Zometa™)。

在另一實施例中，此類額外抗癌治療劑包括自激素藥劑及拮抗劑獲得的化合物。在抗激素劑用以調節或抑制腫瘤上之激素活性的情況下，實例包括諸如抗雌激素及選擇性雌激素受體調節劑(SERM)及選擇性雌激素受體降解劑(SERD)，包括他莫昔芬(tamoxifen)、雷諾昔酚(raloxifene)、曲洛昔芬(droloxifene)、4-羥基他莫昔芬、曲沃昔芬(trioxifene)、雷洛昔芬(keoxifene)、LY117018、奧那司酮(onapristone)、托瑞米芬(toremifene) (Fareston)及氟維司群(fulvestrant)。實例亦包括抑制芳香酶(其調節腎上腺中之雌激素產生)的芳香酶抑制劑且包括如以下化合物：4(5)-咪唑、胺麩精、乙酸甲地孕酮(megestrol acetate)、依西美坦(exemestane)、福美司坦(formestane)、法屈唑(fadrozole)、伏羅唑(vorozole)、來曲唑(letrozole)及阿那曲唑(anastrozole)；及抗雄性激素，諸如氟他胺(flutamide)、尼魯胺(nilutamide)、比卡魯胺(bicalutamide)、亮丙立德(leuprolide)、氟羅地爾(fluridil)、阿帕魯胺((apalutamide)、恩雜魯胺(enzalutamide)、西咪替丁(cimetidine)及戈舍瑞林(goserelin)。

在另一實施例中，此類額外抗癌治療劑包括自信號轉導抑制劑獲得的化合物，該等信號轉導抑制劑諸如蛋白質酪胺酸激酶及/或絲胺酸/蘇胺酸激酶之抑制劑：信號轉導抑制劑(例如，抑制調節分子控管細胞生長、分化之基本過程及細胞內傳達之存活期的方式)。信號轉導抑制劑包括小分子、抗體及反義分子。信號轉導抑制劑包括例如激酶抑制劑(例如酪胺酸激酶抑制劑或絲胺酸/蘇胺酸激酶抑制劑)及細胞週期抑制劑。更特定言之，信號轉導抑制劑包括例如法呢基蛋白質轉移酶抑制劑、EGF抑制劑、ErbB-1 (EGFR)、ErbB-2、pan erb、IGF1R抑制劑、MEK (包括畢尼替尼(binimetinib) (Mektovi™))、c-Kit抑制劑、FLT-3抑制劑、K-Ras抑制劑、PI3激酶抑制劑、JAK抑制劑、STAT抑制劑、Raf激酶抑制劑、BRAF (包括恩拉非尼(encorafenib) (Braftovi™))、Akt抑制劑、mTOR抑制劑、P70S6激酶抑制劑、WNT路徑之抑制劑及多靶向激酶抑制劑。

在另一實施例中，此類額外抗癌治療劑包括多西他賽(docetaxel)、太平洋紫杉醇(paclitaxel)、太平洋紫杉醇蛋白結合之粒子、順鉑、卡鉑、奧沙利鉑(oxaliplatin)、卡培他濱(capecitabine)、吉西他濱(gemcitabine)或長春瑞賓(vinorelbine)。

在另一實施例中，此類額外抗癌治療劑包括自表觀遺傳調節劑獲得之化合物，其中實例包括EZH2 (包括PF-06821497)、SMARCA4、PBRM1、ARID1A、ARID2、ARID1B、DNMT3A、TET2、MLL1/2/3、NSD1/2、SETD2、BRD4、DOT1L、HKMTsanti、PRMT1-9、LSD1、UTX、IDH1/2或BCL6之抑制劑。

在另一實施例中，此類額外抗癌治療劑包括為腫瘤免疫劑(包括免疫調節劑)之化合物。

在另一實施例中，涵蓋與樣式辨識受體(PRR)之組合。PRR為由免疫系統之細胞表現且辨識與病原體及/或細胞損傷或死亡相關之多種分子的受體。PRR涉及先天性免疫反應及適應性免疫反應兩者。PRR促效劑可用於刺激個體之免疫反應。存在多種類別之PRR分子，包括類鐸受體(TLR)、類RIG-I受體(RLR)、類核苷酸結合之寡聚結構域(NOD)受體(NLR)、C型凝集素受體(CLR)及干擾素基因刺激蛋白(STING)蛋白質。

STING蛋白質充當胞質DNA感測器及1型干擾素信號傳導中之接附蛋白兩者。術語「STING」及「干擾素基因刺激蛋白」係指任何形式之STING蛋白以及保持至少一部分STING之活性的變體、異構體及物種同系物。除非以不同方式指示，諸如對人類STING之特定參考，否則STING包括具有天然序列STING之所有哺乳動物物種，例如人類、猴及小鼠STING亦稱為TMEM173。

如本文中所使用，「STING促效劑」意謂在結合於STING時 (1)刺激或活化STING，(2)增強、增加、促進、誘導或延長STING之活性、功能或存在，或(3)增強、增加、促進或誘導STING之表現的任何分子。適用於本發明之治療方法、藥物及用途中之任一者的STING促效劑包括例如結合STING之核酸配位體。

適用於本發明之治療方法、藥物及用途之STING促效劑之實例包括各種免疫刺激核酸，諸如合成雙股DNA、環狀二-GMP、環狀-GMP-AMP (cGAMP)；合成環二核苷酸(CDN)，諸如MK-1454及ADU-S100 (MIW815)；及小分子，諸如WO2019027858、WO20180093964、WO2017175156、WO2017175147。

治療性抗體可具有針對多種不同抗原之特異性。舉例而言，治療性抗體可針對腫瘤相關抗原，使得抗體與抗原之結合促使表現抗原之細胞死亡。在另一實例中，治療性抗體可針對免疫細胞上之抗原，使得抗體之結合阻止表現抗原之細胞之活性的下調(且因此促進表現抗原之細胞的活性)。在一些情形中，治療性抗體可經由多種不同機制起作用(例如，其可同時i)促使表現抗原之細胞死亡且ii)防止抗原造成接觸表現抗原之細胞的免疫細胞之活性下調)。

在另一實施例中，此類額外抗癌治療劑包括將在標靶處阻斷或抑制之抗體：CTLA-4 (包括伊派利單抗(ipilimumab)或曲美單抗(tremelimumab))、PD-1或PD-L1 (包括阿特珠單抗(atezolizumab)、阿維魯單抗(avelumab)、測米匹單抗(cemiplimab)、德瓦魯單抗(durvalumab)、納武單抗(nivolumab)或派立珠單抗(pembrolizumab))、LAG-3、TIM-3或TIGIT。

在另一實施例中，此類額外抗癌治療劑包括為4-1BB、OX40、GITR、ICOS或CD40促效劑之抗體。

在另一實施例中，抗癌療法可為CAR-T細胞療法。

治療性抗體之實例包括：抗OX40抗體、抗4-1BB抗體、抗HER2抗體(包括抗HER2抗體藥物共軛物(ADC))、雙特異性抗CD47/抗-PD-L1抗體及雙特異性抗P-鈣黏素/抗CD3抗體。可併入於ADC中之細胞毒素劑之實例包括蒽環黴素(anthracycline)、奧瑞他汀(auristatin)、海兔毒素(dolastatin)、康柏斯達汀、多卡黴素(duocarmycin)、吡咯并苯并二氮呯二聚體、吲哚啉并苯并二氮呯二聚體、烯二炔、格爾德黴素(geldanamycin)、美登素(maytansine)、嘌呤黴素、紫杉烷、長春花生物鹼、喜樹鹼、特吡萊辛(tubulysin)、哈米特林(hemiasterlin)、斯考他汀(spliceostatin)、普蘭立德(pladienolide)及其立體異構體、電子等排體、類似物或衍生物。可併入於ADC中之例示性免疫調節劑包括更昔洛韋(gancyclovier)、依那西普(etanercept)、他克莫司(tacrolimus)、西羅莫司(sirolimus)、伏環孢素(voclosporin)、環孢靈(cyclosporine)、雷帕黴素(rapamycin)、環磷醯胺(cyclophosphamide)、硫唑嘌呤(azathioprine)、微酚酸酯(mycophenolgate mofetil)、甲胺喋呤(methotrextrate)、糖皮質激素及其類似物、細胞介素、幹細胞生長因子、淋巴毒素(lymphotoxin)、腫瘤壞死因子(TNF)、造血因子、介白素(例如介白素-1 (IL-1)、IL-2、IL-3、IL-6、IL-10、IL-12、IL-15、IL-18及IL-21)、群落刺激因子(例如粒細胞群落刺激因子(G-CSF)及粒細胞巨噬細胞群落刺激因子(GM-CSF))、干擾素(例如干擾素-α、干擾素-β及干擾素-γ)、標示為「S 1因子」之幹細胞生長因子、紅血球生成素及血小板生成素或其組合。

治療性抗體之其他實例可包括以下抗原，其中下文亦包括針對抗原之例示性抗體(在抗原後之方括號/括號中)。如下之抗原在本文中亦可稱為「靶抗原」或其類似物。本文中用於治療性抗體之靶抗原包括例如：4-1BB (例如，烏圖木單抗(utomilumab))；5T4；A33；α葉酸受體1 (例如，米妥昔單抗索拉夫坦辛(mirvetuximab soravtansine))；Alk-1；BCMA [例如參見US9969809]；BTN1A1 (例如，參見WO2018222689)；CA-125 (例如，阿巴伏單抗(abagovomab))；碳酸酐酶IX；CCR2；CCR4 (例如，莫格利珠單抗(mogamulizumab))；CCR5 (例如，勒隆利單抗(leronlimab))；CCR8；CD3 [例如，布林莫單抗(blinatumomab) (CD3/CD19雙特異性)、CD3/P-鈣黏素雙特異性、CD3/BCMA雙特異性] CD19 (例如，布林莫單抗、MOR208)；CD20 (例如，替伊莫單抗替歇坦(ibritumomab tiuxetan)、奧比珠單抗(obinutuzumab)、奧伐木單抗(ofatumumab)、利妥昔單抗(rituximab)、烏妥昔單抗(ublituximab))；CD22 (英妥珠單抗奧佐米星(inotuzumab ozogamicin)、帕西妥莫單抗(moxetumomab pasudotox))；CD25；CD28；CD30 (例如，貝倫妥單抗維多汀(brentuximab vedotin))；CD33 (例如，吉妥單抗奧佐米星(gemtuzumab ozogamicin))；CD38 (例如，達雷木單抗(daratumumab)、伊薩土西單抗(isatuximab))、CD40；CD-40L；CD44v6；CD47 (例如，Hu5F9-G4、CC-90002、SRF231、B6H12)；CD52 (例如，阿侖單抗(alemtuzumab))；CD56；CD63；CD79 (例如，保納珠單抗維多汀(polatuzumab vedotin))；CD80；CD123；CD276/B7-H3 (例如，翁布他單抗(omburtamab))；CDH17；CEA；ClhCG；CTLA-4 (例如，伊派利單抗(ipilimumab)、曲美單抗(tremelimumab)), CXCR4；橋粒蛋白(desmoglein) 4；DLL3 (例如，洛伐妥珠單抗替西林(rovalpituzumab tesirine))；DLL4；E-鈣黏素；EDA；EDB；EFNA4；EGFR (例如，西妥昔單抗(cetuximab)、德帕土西珠單抗馬佛多坦(depatuxizumab mafodotin)、萊西單抗(necitumumab)、帕尼單抗(panitumumab))；EGFRvIII；內皮唾酸蛋白(Endosialin)；EpCAM (例如，奧普珠單抗莫納托克斯(oportuzumab monatox))；FAP；胎兒乙醯膽鹼受體；FLT3 (例如，參見WO2018/220584)；GD2 (例如，迪奴圖單抗(dinutuximab)、3F8)；GD3；GITR；GloboH；GM1；GM2；HER2/neu [例如，馬爾吉土西單抗(margetuximab)、帕妥珠單抗(pertuzumab)、曲妥珠單抗(trastuzumab)；曲妥珠單抗-美坦新偶聯物(ado-trastuzumab emtansine)、曲妥珠單抗杜卡瑪𠯤(trastuzumab duocarmazine)，[參見US8828401]；HER3；HER4；ICOS；IL-10；ITG-AvB6；LAG-3 (例如，瑞拉單抗(relatlimab))；Lewis-Y；LG；Ly-6；M-CSF [參見US7326414]；MCSP；間皮素(mesothelin)；MUC1；MUC2；MUC3；MUC4；MUC5AC；MUC5B；MUC7；MUC16；Notch1；Notch3；黏附分子-4 (例如，因福土單抗維多汀(enfortumab vedotin))；OX40 [參見US7960515]；P-鈣黏蛋白(P-Cadherein) [參見WO2016/001810]；PCDHB2；PDGFRA (例如，奧拉單抗(olaratumab))；漿細胞抗原；PolySA；PSCA；PSMA；PTK7 [參見US9409995]；Ror1；SAS；SCRx6；SLAMF7 (例如，埃羅妥珠單抗(elotuzumab))；SHH；SIRPa (例如，ED9、Effi-DEM)；STEAP；TGF-β；TIGIT；TIM-3；TMPRSS3；TNF-α前驅體；TROP-2 (例如，薩西土珠單抗戈維特坎(sacituzumab govitecan))；TSPAN8；VEGF (例如，貝伐單抗(bevacizumab)、布羅盧西珠單抗(brolucizumab))；VEGFR1 (例如，蘭比珠單抗(ranibizumab))；VEGFR2 (例如，雷莫蘆單抗(ramucirumab)、蘭比珠單抗)；Wue-1。

可包括於ADC中之例示性成像劑包括螢光素、若丹明(rhodamine)、鑭系元素磷光體及其衍生物或與螯合劑結合之放射性同位素。螢光團之實例包括(但不限於)異硫氰酸螢光素(FITC) (例如，5-FITC)、螢光素胺基酸酯(FAM) (例如，5-FAM)、曙紅(eosin)、羧基螢光素、紅螢素(erythrosine)、Alexa Fluor® (例如，Alexa 350、405、430、488、500、514、532、 546、555、568、594、610、633、647、660、680、700或750)、羧基四甲基若丹明(carboxytetramethylrhodamine) (TAMRA) (例如，5,-TAMRA)、四甲基若丹明(TMR)及磺醯若丹明(SR) (例如，SR101)。螯合劑之實例包括(但不限於) 1,4,7,10-四氮雜環十二烷-N,N',N'',N'''-四乙酸(DOTA)、1,4,7-三氮雜環壬烷-1,4,7-三乙酸(NOTA)、1,4,7-三氮雜環壬烷、1-戊二酸-4,7-乙酸(去鐵胺)、二伸乙三胺五乙酸(DTPA)及1,2-雙(鄰胺基苯氧基)乙烷-N,N,N',N'-四乙酸) (BAPTA)。

可包括於ADC中之例示性治療蛋白包括毒素、激素、酶及生長因子。

可併入於ADC中之例示性生物相容性聚合物包括水溶性聚合物，諸如聚乙二醇(PEG)或其衍生物，及含兩性離子之生物相容性聚合物(例如，含磷酸膽鹼之聚合物)。

可併入於ADC中之例示性生物相容性聚合物包括反義寡核苷酸。

本發明亦涉及使用輻射以及本文中投與之任一抗癌治療劑。更特定言之，本發明之化合物可與額外療法(諸如放射療法及/或化學療法)組合投與。化學合成

以下流程及書面描述提供關於製備本發明之化合物的一般細節。

本發明之化合物可藉由此項技術中已知之用於製備具有類似結構之化合物的任何方法製備。特定言之，本發明化合物可藉由參考下文方案所描述之程序製備，或藉由實例中所描述之特定方法或藉由與其類似的方法製備。

熟習此項技術者將瞭解下文流程中所闡述的實驗條件係說明用於實現所展示轉化之適合條件且可能需要或期望改變用於製備式(I)化合物所採用之精確條件及屬於式(I)之化合物，例如式(I)、(Ia)或(Ib)之化合物以及類似物。

另外，熟習此項技術者將瞭解，可能需要或期望在合成本發明之化合物之任何階段保護一或多個敏感基團，以防止非所需的副反應。詳言之，可能需要或期望保護胺基或醇基團。用於製備本發明之化合物的保護基(PG)可以習知方式使用。參見例如Theodora W Greene及Peter G M Wuts之『Greene's Protective Groups inOrganic Synthesis』，第三版(John Wiley and Sons, 1999)，特定言之第7章(「Protection for the Amino Group」)及第2章 (「Protection for the Hydroxyl Group, Including 1,2- and 1,3-Diols」)中所描述之彼等保護基，該文章以引用之方式併入本文中，其亦描述用於移除此類基團的方法。

式(I)之所有衍生物可藉由下文呈現之通用方法中所描述之程序製備或藉由其常規變型來製備。本發明亦涵蓋用於製備式(I)衍生物(除其中所用的任何新穎中間物之外)的任何一或多種此等方法。熟習此項技術者將瞭解，以下反應物可以熱方式或在微波照射下或在流動化學條件下加熱。

應進一步理解，可能需要或期望以與流程中所描述之次序不同的次序來進行轉化，或修改一或多種轉化，以提供本發明之所需化合物。

根據第一製程，式(I )化合物可如流程 1 所說明由中間物(i)之化合物製備。

流程 1

可能的PG包括4-甲氧基苯甲基、N,N-雙-(4-甲氧基苯甲基)、第三辛基或其他適合之胺保護基；N,N-雙-(4-甲氧基苯甲基)最長用於式(I)化合物。

中間物(i )、(iv )、(vi )、(ix )、(x )為可商購的或可由一般技術者根據本文中所述之文獻或製備合成。對於本文中所論述的流程，當式(I )化合物具有對掌性中心時，視需要，可經由對掌性分離外消旋體來分離個別對映異構體。此外，當R³ 含有保護基(諸如縮酮或矽基)時，可視需要採用適合之去保護條件，諸如含甲磺酸之二氯甲烷/甲醇/水。

中間物(ii )可由中間物(i )根據步驟(a )硝化反應來製備。典型方法採用適合之硝化劑及適合之有機或無機溶劑。較佳條件包含在10℃下在硫酸中使用硝酸。

中間物(iii )可由中間物(ii )根據步驟(b )三氟甲磺酸鹽形成反應來製備。典型方法採用在降低溫度下在適合之有機溶劑中使用三氟甲磺酸酐及適合之有機或無機鹼。較佳條件包含在0℃下在二氯乙烷中使用三乙胺。

中間物(v )可由中間物(iii )根據步驟(c )與中間物(iv )之親核芳族取代反應來製備。典型方法採用在RT下或在以熱方式、在微波照射下或流動化學條件下升高的溫度下在適合之有機溶劑中使用適合之有機或無機鹼。較佳條件包含在二氯乙烷中使用三乙胺。

中間物(vii )可由中間物(v )根據步驟(d )與中間物(vi )之親核芳族取代反應來製備。典型方法採用在RT下或在以熱方式、在微波照射下或流動化學條件下升高的溫度下在適合之有機溶劑中使用適合之有機或無機鹼。舉例而言，在以熱方式加熱之50℃下在二氯乙烷中使用雙(4-甲氧基苯甲基)胺及三乙胺或在75℃下在甲苯中使用第三辛胺及三乙胺。

中間物(viii )可由中間物(vii )根據步驟(e )硝基還原步驟來製備。典型方法在RT下或在以熱方式加熱、在微波照射下或流動化學條件下之升高溫度下在適合之有機溶劑中採用具有適合之氫源及適合之氫化催化劑的氫化條件或在適合之有機溶劑中使用適合之金屬及適合之氫或質子供體。較佳條件包含使用含鋅粉及甲酸銨之甲醇。

中間物(xi )可由中間物(viii )根據步驟(f )與中間物(ix )或(x )之醯胺鍵形成步驟來製備。典型方法採用在適合之有機溶劑中使用中間物(ix )及適合之有機或無機鹼或在適合之有機溶劑中使用中間物(x )及適合之醯胺偶合劑及適合之有機或無機鹼。當使用中間物(ix )時，典型條件使用三乙胺及二氯甲烷。當使用中間物(x )時，典型條件在乙酸乙酯、三乙胺及乙酸乙酯中使用50 wt%丙基膦酸酸酐溶液。

中間物(xii )可由中間物(xi )根據步驟(g )咪唑環形成來製備。典型方法採用在以熱方式或在微波照射下或流動化學條件下升高的溫度下利用適合之有機或無機鹼的鹼性條件；替代地，在以熱方式或在微波照射下或流動化學條件下升高的溫度下利用適合之有機或無機酸的酸性條件。替代地，在以熱方式或在微波照射下或流動化學條件下升高的溫度下在適合之有機溶劑中採用適合之脫水劑。較佳條件包含在以熱方式加熱之80℃下在乙醇中使用氫氧化鈉或在以熱方式加熱之80℃下在四氯化碳中使用三苯膦及三乙胺。

式(I )化合物可由中間物(xii )根據步驟(h )，移除PG及R³ 中所含有的彼等PG (若存在，例如矽基或縮酮)來製備。典型去保護方法包含在RT下或在以熱方式，或在微波照射下或流動化學條件下升高的溫度下在適合之有機溶劑中之適合之有機或無機酸。較佳條件包含在以熱方式加熱之45℃下之二氯甲烷中之甲磺酸，隨後添加甲醇及水。

替代地，式(I )化合物可如流程 2 所說明由中間物(iii )製備。

流程 2

可能的胺基PG包括4-甲氧基苯甲基、N,N-雙(4-甲氧基苯甲基)、第三辛基，其中第三辛基最常用於該等實例。

脫離基(LG)為輔助特定反應之官能基且包括OH、Cl、Br、I、OM、OT及OTf，其中OH最常用於該等實例。

中間物(ix )、(x )、(xiii )、(xv )為可商購的或可由熟習此項技術者根據本文中所述之文獻或製備合成。

中間物(xiv )可由中間物(iii )根據步驟(i )與中間物(xiii )之親核芳族取代反應來製備。典型方法採用在RT下或在以熱方式、在微波照射下或流動化學條件下升高的溫度下在適合之有機溶劑中使用適合之有機或無機鹼。較佳條件包含在二氯乙烷中使用三乙胺。

中間物(xvi )可由中間物(xiv )根據步驟(j )與中間物(xv )之親核芳族取代反應來製備。典型方法採用在RT下或在以熱方式、在微波照射下或流動化學條件下升高的溫度下在適合之有機溶劑中使用適合之有機或無機鹼。較佳條件包含在以熱方式加熱之50℃下在二氯乙烷中使用雙(4-甲氧基苯甲基)胺及三乙胺或在75℃下在甲苯中使用第三辛胺及三乙胺。

中間物(xvii )可由中間物(xvi )根據步驟(k )串疊型硝基還原及脫苄基作用步驟來製備。典型方法在RT下或在以熱方式加熱、在微波照射下或流動化學條件升高的溫度下在適合之有機溶劑中採用具有適合之氫源及適合之氫化催化劑之氫化條件。較佳條件包含在55℃下在乙醇中使用甲酸銨及30%鈀/碳。

中間物(xviii )可由中間物(xvii )根據步驟(l )與中間物(ix )或(x )之醯胺鍵形成步驟來製備。典型方法採用在適合之有機溶劑中使用中間物(ix )及適合之有機或無機鹼或在適合之有機溶劑中使用中間物(x )及適合之醯胺偶合劑及適合之有機或無機鹼。較佳條件包含在0℃下使用中間物(ix )及三乙胺及二氯甲烷。

中間物(xix )可由中間物(xviii )根據步驟(m )咪唑環形成來製備。典型方法採用在以熱方式、在微波照射下或流動化學條件下升高的溫度下利用適合之有機或無機鹼的鹼性條件；在以熱方式、在微波照射下或流動化學條件下升高的溫度下利用適合之有機或無機酸的酸性條件或在以熱方式、在微波照射下或流動化學條件下升高的溫度下在適合之有機溶劑中使用適合之脫水劑。較佳條件包含在以熱方式加熱的75℃下在乙醇中使用氫氧化鈉。

中間物(xxi )可由中間物(xix )根據步驟(n )與中間物(xx )之親核取代反應或光延反應(Mitsunobu reaction)來製備。典型方法包含在RT下或在以熱方式、在微波照射下或流動化學條件下升高的溫度下在適合之有機溶劑中之適合之有機或無機鹼。替代地，當LG為羥基時，在RT或以熱方式、在微波照射下或流動化學條件下升高的溫度下在適合之有機溶劑中用適合之膦及適合之偶氮二羧酸酯(或呈單一試劑形式之二者之組合)進行處理。其中LG為羥基之較佳條件包含在以熱方式加熱之90℃或100℃下在甲苯中使用氰基亞甲基三丁基磷烷。

式(I )化合物可由中間物(xxi )根據步驟(o )，移除PG及R³ 中所含有的任何PG (若存在)，例如縮酮或矽烷來製備。典型方法包含在RT下或在以熱方式、在微波照射下或流動化學條件下升高的溫度下在適合之有機溶劑中之適合之有機或無機酸。較佳條件包含在六氟異丙醇中之甲磺酸或在二氯甲烷中之三氟乙酸，隨後添加甲醇。

在執行本發明之化合物之合成中，熟習此項技術者將藉由常見方法監測反應，該等方法包括薄層層析(TLC)、液相層析/質譜分析(LCMS)及核磁共振(NMR)。

熟習此項技術者亦將認識到，本發明之化合物可以非對映異構體或幾何異構體(例如環烷烴環上之順式及反式取代)之混合物形式製備。此等異構體可藉由標準層析技術分離，諸如矽膠正相層析、逆相製備性高壓液相層析或超臨界流體層析。熟習此項技術者亦將認識到，一些本發明化合物具有對掌性且因此可以對映異構體之外消旋或非外消旋混合物形式製備。分離對映異構體的若干方法可獲得且已為熟習此項技術者所熟知。實例

除非另外指示，否則在氮氣氛圍下進行反應。使用增壓氮氣(約10至15 psi)使用250至400目矽膠來進行矽膠層析以驅使溶劑穿過管柱(「急驟層析」)。在指示的情況下，在真空下藉由旋轉蒸發來濃縮溶液及反應混合物。

¹ H及¹⁹ F核磁共振(NMR)譜在所有情況下均與所提出之結構一致。特徵化學位移(δ)以偏離四甲基矽烷之低磁場百萬分率給出(針對¹ H-NMR)，使用習知縮寫以標示主要峰：例如s，單峰；d，二重峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰；br，寬峰。以下縮寫已用於常見溶劑：CDCl₃ ，氘代氯仿；d₆ -DMSO，氘化二甲亞碸；及CD₃ OD，氘代甲醇。適當時，互變異構體可記錄於NMR資料內；且一些可交換質子可能不可見。

使用電噴霧電離(ESI)或大氣壓化學電離(APCI)記錄質譜MS (m/z)。適當時且除非另外陳述，否則所提供的m/z資料係針對同位素¹⁹ F、³⁵ Cl、⁷⁹ Br及¹²⁷ I。

在Perkin Elmers Chemdraw 18.0內產生如IUPAC (國際理論與應用化學聯合會(International Union of Pure and Applied Chemistry))所描述來書寫命名。

在本文中陳述的非限制性實例及製備中，應用以下縮寫： AcOH為乙酸； aq為水性； Bn為苯甲基； br為寬； tBu為第三丁基； ℃為攝氏度； CO₂ 為二氧化碳； CMBP為氰基亞甲基三丁基磷烷； Cs₂ CO₃ 為碳酸銫； DCE為二氯乙烷； DCM為二氯甲烷(dichloromethane/methylene chloride)； DIPEA/DIEA為N-乙基二異丙胺、N,N-二異丙基乙胺； DMA為二甲基乙醯胺； DMF為N,N-二甲基甲醯胺； DMSO為二甲亞碸； ee為對映異構過量； EtOAc為乙酸乙酯； EtOH為乙醇； Et₃ N為三乙胺； g為公克； HCO₂ NH₄ 為甲酸銨； HCl為鹽酸； HFIP為1,1,1,3,3,3-六氟異丙醇； HNO₃ 為硝酸； HPLC為高壓液相層析； H₂ O為水； H₂ SO₄ 為硫酸； Hr或hr為小時； IPA/iPrOH為異丙醇； L為公升； LCMS為液相層析質譜分析； LiAlH₄ 為氫化鋰鋁； LiOH為氫氧化鋰； M為莫耳； MeCN為乙腈； MeI為碘化甲基； MeOH為甲醇； mg為毫克； MgSO₄ 為硫酸鎂； MHz為兆赫茲； min為分鐘； mL為毫升； mmol為毫莫耳； mol為莫耳； MS m/z為質譜峰； MsOH為甲磺酸； NaH為氫化鈉； NaHCO₃ 為碳酸氫鈉； NaOH為氫氧化鈉； Na₂ SO₄ 為硫酸鈉； NH₃ 為氨； NH₄ OH為氫氧化銨； NH(PMB)₂ 為雙(4-甲氧基苯甲基)胺； NMR為核磁共振； Pd/C為鈀/碳； pH為氫離子濃度指數； ppm為百萬分率； psi為磅/平方吋； Rt為滯留時間； RT為室溫； TBDMS為第三丁基二甲基矽基； TBSCl為氯化第三丁基甲基矽基； TBME/MTBE為第三丁基二甲醚； TEA為三乙胺； Tf₂ O為三氟甲磺酸酐； TFA為三氟乙酸； TFAA為三氟乙酸酐； THF為四氫呋喃； TLC為薄層層析； TsOH為對甲苯磺酸； Zn為鋅； µL為微升； µmol為微莫耳。

對掌性分離用於在製備本發明之化合物期間分離一些中間物之對映異構體。在進行此類分離時，分離對映異構體根據其溶離次序而經標示為ENT-1或ENT-2。對於具有二個對掌性中心之化合物，在不同時間分離每一立構中心處之立體異構體。中間物或實例之ENT-1或ENT-2標示係指彼步驟處進行之分離的對掌性中心。應認識到，當對掌性中心處之立體異構體在具有兩個或更多個中心之化合物中分離時，經分離對映異構體為彼此的非對映異構體。ENT-1或ENT-2標示在本文中用於一致性且係指分離的對掌性中心。舉例而言(但不限制)實例6及實例7具有對掌性中心。在最後步驟分離對映異構體。對掌性中心經繪製為兩種可能性，但不瞭解哪一實例為哪一對映異構體。因此，(R)及(S)標示與實例6或7無關。若在此等製備中對中間物進行分離，則在混合物經歷分離程序後，藉由靠近彼中心之「abs」標識對掌性中心，其中應理解分離的對映異構體可能不為對映異構性純淨的且由於不確定對映異構體，因此未繪製彼鍵之特定定向。通常，每一對掌性中心處之增濃對映異構體為＞90%經分離物質。亦努力使中心處之對映異構體純度增濃至＞98%混合物且甚至＞99%。

可使用偏光計量測對映異構體之旋光度。根據其所觀察之旋轉資料(或其特定旋轉資料)，順時針旋轉之對映異構體標示為(+)-對映異構體且逆時針旋轉之對映異構體標示為(-)-對映異構體。藉由缺少繪製或描述之立體化學，或藉由存在鄰近於結構之(+/-)來指示外消旋化合物；在此後一情況下，所指示立體化學表示化合物之取代基的相對(並非絕對)構型。

在已使用製備型TLC或矽膠層析的情況下，熟習此項技術者可選擇溶劑之任何組合以純化所需化合物。

實例 (1) ： 2-((4- 胺基 -2-( 乙氧基甲基 )-6,7- 二甲基 -1H- 咪唑并 [4,5-c] 吡啶 -1- 基 ) 甲基 ) 丙烷 -1,3- 二醇三氟乙酸鹽

步驟 1 ：合成三氟甲磺酸4-(苯甲基胺基)-5,6-二甲基-3-硝基吡啶-2-基酯

向氮氣下之圓底燒瓶中添加含5,6-二甲基-3-硝基吡啶-2,4-二醇(7.56 g，41.05 mmol)之二氯甲烷(300 ml)。向此燒瓶中添加三乙胺(12.5 g，123 mmol，17.2 ml)且使反應物冷卻至0℃。在8 min內逐滴添加三氟甲磺酸酐(23.2 g，82.1 mmol，13.8 ml)。在0℃下攪拌反應物1.5小時。向此反應物中添加苯甲胺(4.84 g，45.2 mmol，4.93 ml)且使反應物升溫至RT並攪拌3小時。將反應混合物用水(2 × 100 ml)及鹽水(1 × 100 ml)洗滌。有機物經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠層析(庚烷:乙酸乙酯0-50%梯度)純化殘餘物，以提供標題化合物。產率：12.4 g，30.5 mmol，74.3%。LCMSm/z 406.2 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, CDCl₃ ) δ 7.34-7.44 (m, 3H), 7.28-7.31 (m, 2H), 5.24 (br. s., 1H), 4.31 (d,J =5.07 Hz, 2H), 2.47 (s, 3H), 2.12-2.20 (m, 3H)。

步驟 2 ：合成N4-苯甲基-5,6-二甲基-3-硝基-N2-(2,4,4-三甲基戊-2-基)吡啶-2,4-二胺

向圓底燒瓶中裝入所添加的三氟甲磺酸4-(苯甲基胺基)-5,6-二甲基-3-硝基吡啶-2-基酯(12.4 g，30.5 mmol)及甲苯(100 ml)。添加三乙胺(4.63 g，45.7 mmol，6.38 ml)，隨後第三辛胺(5.91 g，45.7 mmol，7.34 ml)。在75℃下加熱反應物16小時。添加第三辛胺(5.91 g，45.7 mmol，7.34 ml)且在75℃下加熱反應物48小時。在Celite^® 上濃縮溶液，且藉由矽膠層析(庚烷:乙酸乙酯0-50%梯度)純化，以提供呈紅色油狀之標題化合物。產率：8.93 g，23.2 mmol，76.2%。LCMSm/z 386.4 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, CDCl₃ ) δ 8.76 (s, 1H), 8.38 (br. s., 1H), 7.32-7.39 (m, 2H), 7.27-7.31 (m,J =3.12, 3.12 Hz, 3H), 4.46 (d,J =4.29 Hz, 2H), 2.33 (s, 3H), 2.14 (s, 3H), 1.99 (s, 2H), 1.56 (s, 6H), 0.98 (s, 9H)。

步驟 3 ：合成5,6-二甲基-N2-(2,4,4-三甲基戊-2-基)吡啶-2,3,4-三胺

向具有N4-苯甲基-5,6-二甲基-3-硝基-N2-(2,4,4-三甲基戊-2-基)吡啶-2,4-二胺(8.90 g，23.2 mmol)及乙醇(150 ml)之圓底燒瓶中添加甲酸銨(14.6 g, 231 mmol)。添加鈀/碳(200 mg，30% Pd)且在55℃下攪拌反應物2小時。接著將反應混合物冷卻至RT且經由Celite^® 過濾且濃縮濾液。將殘餘物於乙酸乙酯中攪拌1小時，接著藉由經Celite^® 過濾來移除固體。濃縮濾液，以提供呈橙色膠狀之標題化合物。產率：5.6 g，21.2 mmol，91.5%。LCMSm/z 265.3 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (600 MHz, CDCl₃ ) δ 8.62 (s, 1H), 2.40 (s, 3H), 1.98 (s, 3H), 1.66 (s, 2H), 1.29 (s, 6H), 1.05 (s, 9H)。

步驟 4 ：合成2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-N-(2,4,4-三甲基戊-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-胺

使5,6-二甲基-N2-(2,4,4-三甲基戊-2-基)吡啶-2,3,4-三胺(5.60 g，21.2 mmol)及二氯甲烷(100 ml)之溶液冷卻至0℃。向此溶液中添加2-乙氧乙醯氯(2.73 g，22.2 mmol，2.44 ml)，隨後三乙胺(3.21 g，31.8 mmol，4.43 ml)。在0℃下攪拌反應物1.5小時。反應物用二氯甲烷(100 ml)稀釋且將有機物用水(2 × 50 ml)洗滌。有機物經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。將殘餘物用乙醇(100 mL)稀釋且添加氫氧化鈉(5.08 g，127 mmol，8.47 ml，15N)。在75℃下加熱反應混合物16小時。使反應物冷卻至RT且用乙酸乙酯稀釋並用水(2 ×)洗滌。合併之水溶液用乙酸乙酯洗滌。合併之有機物經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠層析(庚烷:乙酸乙酯，0-100%梯度)純化殘餘物，以提供標題化合物。產率：1.40 g，4.21 mmol，19.8%。LCMSm/z 333.1 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, CDCl₃ ) δ 9.10 (br. s., 1H), 4.96 (br. s., 1H), 4.73 (s, 2H), 3.65 (q,J =7.02 Hz, 2H), 2.42 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.07 (s, 2H), 1.59 (s, 6H), 1.29 (t,J =7.02 Hz, 3H), 0.99 (s, 9H)。

步驟 5 ：合成1-((2,2-二甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-N-(2,4,4-三甲基戊-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-胺

向2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-N-(2,4,4-三甲基戊-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-胺(125 mg，0.376 mmol)、(2,2-二甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲醇(68.7 mg，0.470 mmol)於甲苯(2 ml)中之溶液中添加氰基亞甲基三丁基磷烷(136 mg，0.564 mmol，0.564 ml，1M於甲苯中)且在90℃下加熱反應物1.5小時，接著冷卻至RT且攪拌16小時。添加氰基亞甲基三丁基磷烷(136 mg，0.564 mmol，0.564 ml，1M於甲苯中)，且在90℃下攪拌反應物1.5小時。將反應混合物吸附於矽膠上且藉由矽膠層析(庚烷:乙酸乙酯0-100%梯度)純化，以提供標題化合物。產率：72 mg，0.156 mmol，42%。LCMSm/z 461.3 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, CDCl₃ ) δ 5.13 (s, 1H), 4.79 (s, 2H), 4.62 (d,J =7.81 Hz, 2H), 4.02 (dd,J =2.93, 12.29 Hz, 2H), 3.60 (q,J =7.02 Hz, 2H), 3.51 (d,J =10.93 Hz, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.38 (s, 3H), 2.06 (s, 2H), 1.90-1.98 (m, 1H), 1.58 (s, 6H), 1.47 (s, 6H), 1.24 (t,J =7.02 Hz, 3H), 0.99 (s, 9H)。

步驟 6 ：合成實例1 ： 2-((4- 胺基 -2-( 乙氧基甲基 )-6,7- 二甲基 -1H- 咪唑并 [4,5-c] 吡啶 -1- 基 ) 甲基 ) 丙烷 -1,3- 二醇三氟乙酸鹽

在RT下攪拌1-((2,2-二甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-N-(2,4,4-三甲基戊-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-胺(72 mg，0.16 mmol)於二氯甲烷:三氟乙酸的4:1混合物(5 ml)中之溶液30 min。添加甲醇(10 ml)且在RT下攪拌反應物1.5小時。反應物經濃縮且將殘餘物溶解於二甲亞碸(1 ml)中且藉由逆相HPLC純化。(管柱：Waters Sunfire C18 19×100，5μ；行動相A：0.05% TFA/水(v/v)；行動相B：0.05% TFA/乙腈(v/v)；梯度：保持在95.0% H₂ O/5.0%乙腈下1.0 min，9.0 min內95.0% H₂ O/5.0%乙腈線性變化至0% H₂ O/100%乙腈，保持在0% H₂ O/100%乙腈下10.0 min。流速：25 mL/min。)。產率：18.1 mg，0.043 mmol，27% HPLC滯留時間：1.17 min (管柱：Waters Atlantis^® dc18 4.6×50，5μ；行動相A：0.05% TFA/水(v/v)；行動相B：0.05% TFA/乙腈(v/v)；梯度：4.0 min內95.0% H₂ O/5.0%乙腈線性變化至5% H₂ O/95%乙腈，保持在5% H₂ O/95%乙腈下5.0 min。流速：2 mL/min。)；HPLCm/z 309.4 [M+H]⁺ 。

實例 (2) ： 2-((4- 胺基 -2-( 乙氧基甲基 )-6,7- 二甲基 --1H- 咪唑并 [4,5-c] 吡啶 -1- 基 ) 甲基 )-2- 甲基丙烷 -1,3- 二醇

步驟 1 ：合成5,6-二甲基-3-硝基吡啶-2,4-二醇

在18℃下向5,6-二甲基吡啶-2,4-二醇(40.0 g，287 mmol) (Org. Lett., 2003, 5 (25),第4779-4782頁)中添加濃硫酸(174 ml)。將反應物冷卻至0℃，此時在1.5小時內添加硝酸(68-70%，45.8 ml)，維持內部溫度低於10℃。添加完成之後，在10℃下攪拌反應物30 min。將此反應物與來自40 g 5,6-二甲基吡啶-2,4-二醇之第二反應物合併。將合併之反應混合物倒入冰水(2 L)中。藉由過濾收集黃色沈澱物且用水(5 × 200 ml)及MTBE (5 × 100 ml)洗滌。在真空下乾燥所收集固體，以提供呈黃色固體狀之標題化合物。合併產率： 50 g，271.7 mmol，47%產率(按80 g起始吡啶計)。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) 12.34 (br s, 1H), 11.90 (br s, 1H), 2.21 (s, 3H), 1.90 (s, 3H)。

步驟 2 ：合成N2,N2-雙(4-甲氧基苯甲基)-5,6-二甲基-3-硝基-N4-((2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)吡啶-2,4-二胺

向冷卻至0℃的5,6-二甲基-3-硝基吡啶-2,4-二醇(70.0 g，380.1 mmol)於二氯乙烷(1.4 L)中之溶液中添加三乙胺(80.8 g，798 mmol)。在0℃下在30 min內添加三氟甲磺酸酐(220 g，779 mmol)。在0℃下攪拌反應物1.5小時。添加三乙胺(42.3 g，418 mmol)，隨後逐份添加(2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲胺(72.6 g，456 mmol) (根據Organic & Biomolecular Chemistry, 14(2), 483-494; 2016製備)。在0℃下攪拌反應物20 min，接著在15℃下攪拌18小時。將反應物冷卻至0℃，此時添加三乙胺(115 g，1.14 mol)，隨後雙(4-甲氧基苯甲基)胺(127 g，494 mmol)。接著在50℃下攪拌反應物12小時。移除溶劑且經由矽膠管柱層析(石油醚:乙酸乙酯梯度0-10%)純化殘餘物。收集產物餾分且蒸發至10%體積。經由過濾收集固體且用石油醚(3×50 ml)洗滌濾餅。濃縮濾液且經由矽膠管柱層析(石油醚:乙酸乙酯梯度0-10%)純化。收集產物餾分且蒸發至10%體積。經由過濾收集固體且用石油醚(3 × 20 ml)洗滌濾餅，提供呈黃色固體狀之標題化合物。產率：98 g，173.6 mmol，45.7%。LCMSm/z 564.9 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, CDCl₃ ) δ 7.05 (d,J =8.78 Hz, 4H), 6.80 (d,J =8.78 Hz, 4H), 6.47 (t,J =6.15 Hz, 1H), 4.34 (s, 4H), 3.79 (s, 6H), 3.54-3.67 (m, 4H), 3.42 (d,J =6.02 Hz, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 1.43 (s, 3H), 1.41 (s, 3H), 0.83 (s, 3H)。

步驟 3 ：合成N2,N2-雙(4-甲氧基苯甲基)-5,6-二甲基-N4-((2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)吡啶-2,3,4-三胺

向N2,N2-雙(4-甲氧基苯甲基)-5,6-二甲基-3-硝基-N4-((2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)吡啶-2,4-二胺(57.0 g，100.9 mmol)於甲醇(673 ml)中之溶液中添加甲酸銨(63.7 g，1.01 mol)且接著鋅粉(66.0 g，1.01 mol)。在15℃下攪拌反應物10 min。經由Celite^® 過濾反應混合物且濃縮濾液。將殘餘物溶解於乙酸乙酯中且緩慢添加水，以形成白色沈澱物。用乙酸乙酯萃取水層。合併之有機物用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，以提供呈褐色油狀之標題化合物。不經進一步純化即使用，產率：50.0 g，96.4 mmol，95.5%。LCMSm/z 535.0 [M+H]⁺ 。

步驟 4 ：合成N-(2-(雙(4-甲氧基苯甲基)胺基)-5,6-二甲基-4-(((2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)-2-乙氧基乙醯胺

向N2,N2-雙(4-甲氧基苯甲基)-5,6-二甲基-N4-((2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)吡啶-2,3,4-三胺(100 g，192.8 mmol)於二氯甲烷(1 L)中之溶液中添加三乙胺(97.5 g，964 mmol，134 ml)。使反應物冷卻至0℃，此時逐滴添加2-乙氧基乙醯氯(37.8 g，308 mmol)。移除冰浴且在25℃下攪拌反應物16小時。移除溶劑且產物不經進一步純化即使用。產率：150 g，192.8 mmol，假定定量。

步驟 5 ：合成2-(乙氧基甲基)-N,N-雙(4-甲氧基苯甲基)-6,7-二甲基-1-((2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-胺

向來自上述反應之粗N-(2-(雙(4-甲氧基苯甲基)胺基)-5,6-二甲基-4-(((2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)-2-乙氧基乙醯胺於乙醇(3.45 L，冷卻至0℃)中之溶液中添加氫氧化鈉(64.4 ml，15N水溶液)。添加之後，將反應物加熱以回流16小時。使反應物冷卻至15℃，此時，形成白色沈澱物。過濾固體且用水及MTBE洗滌濾餅。將白色固體溶解於乙酸乙酯(1 L)中且有機層用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠層析(乙酸乙酯:石油醚梯度0-45%)純化殘餘物，以提供產物。將此物質與來自不同批料的額外7.2 g產物合併且在石油醚:MTBE之2:1溶液中攪拌20 min。濾出固體且在真空下乾燥，以提供呈白色固體狀之標題化合物。合併產率：94.52 g，157 mmol，76%產率。LCMSm/z 603.0 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (600 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 7.16 (d, J=8.22 Hz, 4H), 6.83 (d, J=8.80 Hz, 4H), 4.82-5.27 (m, 6H), 4.36-4.80 (m, 4H), 3.70 (s, 6H), 3.51-3.68 (m, 2H), 3.40-3.46 (m, 2H), 2.41 (s, 3H), 2.34 (s, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.34 (s, 3H), 1.07 (t, J=7.04 Hz, 3H), 0.56 (s, 3H)。

步驟 6 ：合成實例(2) ：2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇

向2-(乙氧基甲基)-N,N-雙(4-甲氧基苯甲基)-6,7-二甲基-1-((2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-胺(477 mg，0.791 mmol)及二氯甲烷(3 ml)於瓶中之溶液中逐滴添加濃鹽酸(7.91 mmol，0.66 ml)。將瓶加蓋且在RT下攪拌反應物2小時，接著在50℃下加熱1小時。添加額外的濃鹽酸(4.8 mmol，0.40 ml)且在50℃下持續加熱反應物30 min。接著將反應物冷卻至RT且攪拌16小時。添加水(2 ml)且用二氯甲烷(2 ×3 ml)洗滌水溶液。藉由固體碳酸鈉使水溶液達至pH 9。接著將反應物加熱以回流，且冷卻至4℃。濾出固體，並用水(5 ml)及醚(5 ml)洗滌且在真空下乾燥，以提供呈白色固體狀之標題化合物。產率：194 mg，0.602 mmol，76.0%。LCMSm/z 323.3 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 5.76 (s, 2H), 4.91-5.09 (m, 1H), 4.69-4.90 (m, 2H), 4.27-4.59 (m, 3H), 3.39-3.56 (m, 2H), 3.29-3.37 (m, 1H, 假定經H₂ O部分遮蔽), 3.14-3.29 (m, 2H), 2.95-3.13 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 1.06-1.14 (m, 3H), 0.48 (s, 3H)。

實例 (3) ： 2-((4- 胺基 -2-( 乙氧基甲基 )-1H- 咪唑并 [4,5-c] 喹啉 -1- 基 ) 甲基 )-2- 甲基丙烷 -1,3- 二醇

以類似於2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇之方式以喹啉-2,4-二醇為起始物進行製備。製備18.5 mg。LCMSm/z 345.4 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d₆ ) δ ppm 0.58 (s, 3 H) 1.15 (t, J=7.02 Hz, 3 H) 3.07 - 3.77 (m, 7 H) 4.58 - 5.26 (m, 5 H) 7.52 (t, J=8.0 Hz, 1 H) 7.71 (t, J=8.0 Hz, 1 H) 7.79 (d, J=8.0 Hz, 1 H) 8.74 (d, J=8.0 Hz, 1 H) 9.19 (br s, 1 H)

實例 (4) ： 2-((4- 胺基 -2-( 乙氧基甲基 )-7,8- 二氫環戊 [b] 咪唑并 [4,5-d] 吡啶 -1(6H)- 基 ) 甲基 )-2- 甲基丙烷 -1,3- 二醇

以類似於2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇之方式以6,7-二氫-5H-環戊并[b]吡啶-2,4-二醇為起始物進行製備，製備60 mg。LCMS滯留時間：0.715 min (管柱：ACQUITY UPLC BEH C18 50*2.1mm ,1.7um；行動相A：0.05% NH₄ OH/水(v/v)；行動相B：乙腈；梯度：保持在100% H₂ O下0.10 min，0.90 min內100% H₂ O至0% H₂ O/100%乙腈，保持在0% H₂ O/100%乙腈下0.2 min。流速：1.0 mL/min。)。LCMSm/z 335.3 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (CDCl₃ , 400 MHz), 特徵峰：δ 5.1-5.3 (m, 2H), 4.8-5.0 (m, 2H), 4.1-4.8 (m, 3H), 3.5-3.8 (m, 6H), 3.1-3.3 (m, 2H), 2.9-3.0 (m, 2H), 2.1-2.2 (m, 2H), 1.26 (t, 3H, J=7.0 Hz), 0.65 (s, 3H)。

實例 (5) ： 2-((4- 胺基 -2-( 乙氧基甲基 )-6,7,8,9- 四氫 -1H- 咪唑并 [4,5-c] 喹啉 -1- 基 ) 甲基 )-2- 甲基丙烷 -1,3- 二醇甲酸鹽

以類似於2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇之方式以6,7-二氫-5H-環戊并[b]吡啶-2,4-二醇為起始物進行製備，製備34 mg。LCMS滯留時間：0.621 min (管柱：ACQUITY UPLC BEH C18 50*2.1mm ,1.7um；行動相A：0.05% NH₄ OH/水(v/v)；行動相B：乙腈；梯度：1 min內95% H₂ O/5%乙腈至0% H₂ O/100%乙腈，保持在0% H₂ O/100%乙腈下0.2 min。流速：1.0mL/min。)。LCMSm/z 349.2 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (甲醇-d4, 400 MHz),特徵峰：δ 8.4-8.6 (m, 1H), 4.63 (s, 2H), 3.59-3.68 (m, 2H ), 3.1-3.6 (m, 5H, 假定經溶劑部分遮蔽), 2.8-3.0 (m, 3H), 1.72-2.06 (m, 4H), 1.22 (t, 3H, J=7.0 Hz), 0.60 (s, 3H)。

實例 (6) 及實例 (7) ： (R)-3-(4- 胺基 -2-( 乙氧基甲基 )-6,7- 二甲基 -1H- 咪唑并 [4,5-c] 吡啶 -1- 基 )-2-( 甲氧基甲基 )-2- 甲基丙 -1- 醇及 (S)-3-(4- 胺基 -2-( 乙氧基甲基 )-6,7- 二甲基 -1H- 咪唑并 [4,5-c] 吡啶 -1- 基 )-2-( 甲氧基甲基 )-2- 甲基丙 -1- 醇

步驟 1 ：合成(2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲醇

向2-(羥甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇(50.0 g，416.2 mmol)及2,2-二甲氧基丙烷(65.0 g，624.0 mmol)之經攪拌溶液中添加丙酮(46 ml)及對甲苯磺酸(3.96 g，20. 8 mmol)。在30℃下加熱反應混合物12小時。將反應物冷卻至RT且添加碳酸氫鈉(12 g)於水(400 ml)中之溶液。水溶液用乙酸乙酯萃取且有機層用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，以提供呈白色固體狀之標題化合物。產率：52.9 g，330.2 mmol，79.3%。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d₆ ) δ 4.58 (t, J=5.40 Hz, 1H), 3.53-3.57 (m, 2H), 3.41-3.45 (m, 2H), 3.33-3.36 (m, 2H, 經溶劑部分地遮蔽), 1.32 (s, 3H), 1.26 (s, 3H), 0.74 (s, 3H)。

步驟 2 ：合成5-(甲氧基甲基)-2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷

向冷卻至0℃之氫化鈉(33.8 g，844 mmol，60%於礦物油中之分散液)於甲苯(1.35 L)中之懸浮液中添加(2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲醇(67.6 g，421.9 mmol)且在0℃下攪拌反應物10 min，且接著歷經18小時攪拌至40℃。反應物經冷卻至0℃，添加碘代甲烷(135 g，951.1 mmol)且在15℃下攪拌反應物60 h。反應混合物用水(300 ml)稀釋且水溶液用石油醚(3×100 ml)萃取。合併之有機層經濃縮，以提供呈黃色油狀之標題化合物。產率：60.0 g，344.4 mmol，81.6%。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d₆ ) δ 3.51-3.57 (m, 2H), 3.43-3.49 (m, 2H), 3.28 (s, 2H), 3.25 (s, 3H), 1.33 (s, 3H), 1.27 (s, 3H), 0.79 (s, 3H)。

步驟 3 ：合成2-(甲氧基甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇

向冷卻至0℃之5-(甲氧基甲基)-2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷(55.0 g，315.7 mmol)於甲醇(316 ml)中之懸浮液中添加鹽酸(31.6 ml，3M水性)。在25℃下攪拌反應混合物30 min。反應混合物經濃縮且向殘餘物中添加水(100 ml)。水溶液用石油醚(3 × 200 ml)萃取且接著凍乾，以提供呈黃色油狀之標題化合物。產率：32.2 g，239.8 mmol，75.9%。¹ H NMR (400 MHz, CDCl₃ ) δ 3.65-3.69 (m, 2H), 3.62 (s, 2H), 3.54-3.58 (m, 2H), 3.37 (s, 2H), 3.34 (s, 3H), 0.81 (s, 3H)。

步驟 4 ：合成3-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-2-(甲氧基甲基)-2-甲基丙-1-醇

向冷卻至0℃之2-(甲氧基甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇(515 mg，3.84 mmol)於四氫呋喃(25 ml)中之溶液中添加氫化鈉(144 mg，3.61 mmol，60%於礦物油中之分散液)。在0℃下攪拌反應物15 min。逐滴添加含第三丁基二甲基矽基氯化物(579 mg，3.84 mmol)之四氫呋喃(5 ml)。在0℃下攪拌反應混合物30 min且在RT下攪拌3小時。接著用甲醇(1 ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10 ml)及水(15 ml)稀釋反應物。用二氯甲烷(2×40 ml)萃取水溶液。合併之有機物經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠層析(庚烷:乙酸乙酯，梯度0-60%)純化殘餘物，以提供標題化合物，產率：446 mg，1.80 mmol，46.8%。¹ H NMR (400 MHz, CDCl₃ ) δ 3.55-3.64 (m, 4H), 3.37 (d, J=3.90 Hz, 2H), 3.35 (s, 3H), 0.90-0.91 (s, 9H), 0.82 (s, 3H), 0.05-0.08 (s, 6H)。

步驟 5 ：合成1-(3-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-2-(甲氧基甲基)-2-甲基丙基)-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-N-(2,4,4-三甲基戊-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-胺

向2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-N-(2,4,4-三甲基戊-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-胺(69 mg，0.21 mmol)及3-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-2-(甲氧基甲基)-2-甲基丙-1-醇(111 mg，0.42 mmol)於甲苯(1 ml)中之溶液中添加氰基亞甲基三丁基磷烷(125 mg，0.519 mmol，0.519 ml，1.0M於乙腈中)。在100℃下攪拌反應物16小時。將反應混合物吸附於矽膠上且藉由矽膠層析(庚烷:乙酸乙酯，梯度0-60%)純化，以提供標題化合物。產率：69 mg，0.12 mmol，59%。LCMSm/z 563.7 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, MeOD) δ 4.38-4.78 (m, 4H), 3.44-3.65 (m, 4H), 3.02-3.22 (m, 2H), 2.47 (s, 3H), 2.41 (s, 3H), 2.08 (br. s., 2H), 1.56 (s, 6H), 1.25-1.35 (m, 4H), 1.19 (t, J=6.83 Hz, 3H), 0.94 (s, 9H), 0.92 (s, 9H), 0.69 (s, 3H), 0.07 (s, 6H)。

步驟 6 ：合成實例(6) 及(7) (R)-3-(4- 胺基 -2-( 乙氧基甲基 )-6,7- 二甲基 -1H- 咪唑并 [4,5-c] 吡啶 -1- 基 )-2-( 甲氧基甲基 )-2- 甲基丙 -1- 醇及 (S)-3-(4- 胺基 -2-( 乙氧基甲基 )-6,7- 二甲基 -1H- 咪唑并 [4,5-c] 吡啶 -1- 基 )-2-( 甲氧基甲基 )-2- 甲基丙 -1-

向1-(3-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-2-(甲氧基甲基)-2-甲基丙基)-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-N-(2,4,4-三甲基戊-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-胺(69 mg，0.12 mmol)於六氟異丙醇(5.0 ml)中之溶液中添加甲磺酸(70.7 mg，0.735 mmol，0.048 ml)。在RT下攪拌反應物5小時。反應混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液稀釋且用乙酸乙酯(1×)及二氯甲烷(1×)洗滌。有機物經合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠層析(二氯甲烷:甲醇，0-30%梯度)純化殘餘物。收集產物，濃縮且經由尼龍盤過濾。移除溶劑，以提供41 mg外消旋體。接著將外消旋體溶解於1 ml乙醇中且藉由超臨界流體層析純化。(管柱：Phenomenex Lux Cellulose 4 5um 21x250 mm)；行動相A：含0.2%氫氧化銨(v/v)之甲醇；行動相B：CO₂ (v/v)；梯度：70.0% CO₂ /30.0%含0.2%氫氧化銨之甲醇，等度歷時5 min。流速：75mL/min。背壓：120巴)，以得到Ent 1作為實例(6) ：13.8mg，0.041 mmol，33.6%、99%ee，及Ent 2作為實例(7) ：13.1 mg，0.039 mmol，31.9%、99% ee。SFC滯留時間Ent 1作為實例(6) ：3.04 min，m/z 337.5 [M+H]⁺ ，SFC滯留時間Ent 2作為實例(7) ：4.15 min，m/z 337.5 [M+H]⁺ (管柱：Phenomenex Lux Cellulose 4 5um 4.6x100mm；行動相A：含0.2%氫氧化銨之甲醇(v/v)；行動相B：CO₂ (v/v)；梯度：60.0% CO₂ /40.0%含0.2%氫氧化銨之甲醇，等度歷時5 min。流速：1.5mL/min。背壓：120巴)。未指定實例(6) 及實例(7) 之特定立體化學，但每一對映異構體為如上文所提供之99%ee。

實例 (8) ： 2-((4- 胺基 -6,7- 二甲基 -2-(2,2,2- 三氟乙基 )-1H- 咪唑并 [4,5-c] 吡啶 -1- 基 ) 甲基 )-2- 甲基丙烷 -1,3- 二醇三氟乙酸鹽

步驟 1 ：合成N-(2-(雙(4-甲氧基苯甲基)胺基)-5,6-二甲基-4-(((2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)-3,3,3-三氟丙醯胺

向3,3,3-三氟丙酸(15.1 mg，0.118 mmol，0.0104 ml)之溶液中添加N2,N2-雙(4-甲氧基苯甲基)-5,6-二甲基-N4-((2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)吡啶-2,3,4-三胺(60 mg，0.11 mmol)及三乙胺(22.7 mg，0.224 mmol，0.031 ml)。添加丙基膦酸酸酐(143 mg，0.224 mmol，0.101 ml，50%於乙酸乙酯中)且在RT下攪拌反應物1小時。添加水且用乙酸乙酯洗滌水溶液兩次。有機物經合併且經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。粗化合物未經進一步純化或分析即用於隨後步驟中，產率：60 mg，0.093 mmol，83%。

步驟 2 ：合成N,N-雙(4-甲氧基苯甲基)-6,7-二甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1-((2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-胺

向N-(2-(雙(4-甲氧基苯甲基)胺基)-5,6-二甲基-4-(((2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)-3,3,3-三氟丙醯胺(40 mg，0.062 mmol)之溶液中添加四氯化碳(1 ml)。向此溶液中添加三乙胺(18.8 mg，0.186 mmol，0.026 ml)及三苯膦(48.8 mg，0.186 mmol)。在80℃下加熱反應物16小時。接著將反應混合物冷卻至RT且經由Celite^® 過濾，且用乙酸乙酯洗滌濾餅。濃縮濾液，且藉由矽膠層析(庚烷:乙酸乙酯，梯度0-30%)純化殘餘物，以提供標題化合物。產率：10 mg, 0.016 mmol, 26%。¹ H NMR (400 MHz, CDCl₃ ) δ 7.27-7.30 (m, 4H, 假定經殘餘CHCl₃ 部分遮蔽), 6.82 (d, J=8.59 Hz, 4H), 5.25-5.37 (m, 2H), 4.83-5.01 (m, 3H), 4.33-4.58 (m, 2H), 3.79 (s, 6H), 3.76-3.84 (m, 1H, 假定經3.79 ppm處的峰部分遮蔽), 3.60-3.74 (m, 2H), 3.48-3.56 (m, 1H), 3.19-3.27 (m, 1H), 2.45 (s, 3H), 2.44 (s, 3H), 1.50 (s, 3H), 1.48 (s, 3H), 0.63 (s, 3H)。LCMSm/z 627.5 [M+H]⁺ 。

步驟 3 ：合成實例(8) ： 2-((4- 胺基 -6,7- 二甲基 -2-(2,2,2- 三氟乙基 )-1H- 咪唑并 [4,5-c] 吡啶 -1- 基 ) 甲基 )-2- 甲基丙烷 -1,3- 二醇三氟乙酸鹽

向N,N-雙(4-甲氧基苯甲基)-6,7-二甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1-((2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-胺(10 mg，0.016 mmol)於六氟異丙醇(0.5 ml)中之溶液中添加甲磺酸(2滴)。在RT下攪拌反應物3小時。接著濃縮反應物且殘餘物用1 ml二甲亞碸稀釋且經由逆向HPLC (管柱：Waters Sunfire C18 19×100，5μ；行動相A：0.05% TFA/水(v/v)；行動相B：0.05% TFA/乙腈(v/v)；梯度：8.5 min內95.0% H₂ O/5.0% 乙腈線性變化至70% H₂ O /30%乙腈，至9.0 min變化至0% H₂ O/100% MeCN，保持在0% H₂ O/100%乙腈下9.0至10.0 min。流速：25 mL/min。)純化，以提供標題化合物，產率：5.5 mg，0.012，75%；HPLC滯留時間：1.31 min。(管柱：Waters Atlantis^® dc18 4.6×50，5μ；行動相A：0.05% TFA/水(v/v)；行動相B：0.05% TFA/乙腈(v/v)；4.0 min內95.0% H₂ O/5.0%乙腈線性變化至5% H₂ O/95%乙腈，保持在5% H₂ O/95%乙腈下5.0 min。流速：2 mL/min。)。HPLCm/z 347.5 [M+H]⁺ 。

實例 (9) ： 2-((4- 胺基 -2-( 乙氧基甲基 )-6,7- 二甲基 -1H- 咪唑并 [4,5-c] 吡啶 -1- 基 ) 甲基 )-2- 乙基丙烷 -1,3- 二醇 三氟乙酸鹽

以類似於實例(2) 之方式藉由在步驟5中利用(5-乙基-2,2-二甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲醇(Polymer Chemistry, 8(3), 592-604; 2017)來進行製備。藉由逆相HPLC (管柱：Waters Sunfire C18 19×100，5μ；行動相A：0.05% TFA/水(v/v)；行動相B：0.05% TFA/乙腈(v/v)；梯度：8.5 min內95.0% H₂ O/5.0% 乙腈線性變化至45% H₂ O/55%乙腈，至9.0 min變化至0% H₂ O/100% MeCN，保持在0% H₂ O/100%乙腈下9.0至10.0 min。流速：25 mL/min。)分離產物，以得到標題化合物，產率：25.2 mg，0.056 mmol，46.7%；HPLC滯留時間：1.35 min (管柱：Waters Atlantis^® dc18 4.6×50，5μ；行動相A：0.05% TFA/水(v/v)；行動相B：0.05% TFA/乙腈(v/v)；4.0 min內95.0% H₂ O/5.0%乙腈線性變化至5% H₂ O/95%乙腈，保持在5% H₂ O/95%乙腈下5.0 min。流速：2 mL/min。)；HPLCm/z 337.5 [M+H]⁺ 。

實例 (10) ： 2-((4- 胺基 -2- 丁基 -1H- 咪唑并 [4,5-c] 喹啉 -1- 基 ) 甲基 )-2- 甲基丙烷 -1,3- 二醇

以類似於實例(1 ) 2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇之方式以步驟1中之喹啉-2,4-二醇為起始物且利用步驟4中之正戊醯氯進行製備。製備37.8 mg。HPLC滯留時間：1.69 min (管柱：Waters Atlantis^® dc18 4.6×50，5μ；行動相A：0.05% TFA/水(v/v)；行動相B：0.05% TFA/乙腈(v/v)；梯度：4.0 min內95.0% H₂ O/5.0%乙腈線性變化至5% H₂ O/95%乙腈，保持在5% H₂ O/95%乙腈下5.0 min。流速：2 mL/min。)。HPLCm/z 343.5 [M+H]⁺ 。

實例 (11) ： 2-((4- 胺基 -2- 丁基 -6,7- 二甲基 -1H- 咪唑并 [4,5-c] 吡啶 -1- 基 ) 甲基 )-2- 甲基丙烷 -1,3- 二醇

以類似於2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇之方式利用實例1，步驟4中之正戊醯氯進行製備。製備260 mg。¹ H NMR (DMSO-d₆ , 400 MHz) δ 5.56 (s, 2H), 4.8-5.0 (m, 2H), 4.3-4.5 (m, 1H), 4.1-4.3 (m, 1H), 3.1-3.3 (m, 3H), 3.0-3.1 (m, 1H), 2.8-3.0 (m, 2H), 2.40 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.6-1.7 (m, 2H), 1.3-1.4 (m, 2H), 0.91 (t, 3H,J =7.2 Hz), 0.45 (s, 3H)。LCMSm/z 321.2 [M+H]⁺ 。

實例 (12) ： 2-((4- 胺基 -2- 戊基 -1H- 咪唑并 [4,5-c] 喹啉 -1- 基 ) 甲基 )-2- 甲基丙烷 -1,3- 二醇

以類似於實例(1 ) 2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇之方式以步驟1中之喹啉-2,4-二醇為起始物且利用步驟4中之己醯氯進行製備。製備31.2 mg。HPLC滯留時間：1.88 min (管柱：Waters Atlantis^® dc18 4.6×50，5μ；行動相A：0.05% TFA/水(v/v)；行動相B：0.05% TFA/乙腈(v/v)；梯度：4.0 min內95.0% H₂ O/5.0%乙腈線性變化至5% H₂ O/95%乙腈，保持在5% H₂ O/95%乙腈下5.0 min。流速：2 mL/min。)。HPLCm/z 357.5 [M+H]⁺ 。

實例 (13) ： 2-((4- 胺基 -2- 丁基 -6,7,8,9- 四氫 -1H- 咪唑并 [4,5-c] 喹啉 -1- 基 ) 甲基 )-2- 甲基丙烷 -1,3- 二醇甲酸鹽

步驟1：合成3-硝基-5,6,7,8-四氫喹啉-2,4-二醇

向2 L燒瓶中添加硫酸(275 ml)。將反應物在冰浴中冷卻且在15分鐘內逐份添加5,6,7,8-四氫喹啉-2,4-二醇(65 g，390 mmol)。將反應物攪拌額外10分鐘。以將內部反應溫度維持低於30℃之速率逐份添加硝酸(39.6 ml，885 mmol)。在RT下攪拌反應物額外2小時。將反應物緩慢倒入冰(2 L)中，固體經過濾且用水洗滌。在50℃下在真空下乾燥固體。產率：52.2 g，390 mmol，63%。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 12.25 (br s, 1 H), 11.75 (br s, 1 H), 2.48 (m, 2 H), 2.34 (m, 2 H), 1.66 (m, 4 H)。LCMSm/z 211.2 [M+H]。

步驟2：合成2,4-二氯-3-硝基-5,6,7,8-四氫喹啉

向500 ml燒瓶中添加3-硝基-5,6,7,8-四氫喹啉-2,4-二醇(13.1 g，53.0 mmol)、二氯乙烷(70.0 mL)、氯氧化磷(V) (65.1 g，425 mmol，40.0 ml)。在80℃下加熱反應物16小時。接著將反應物冷卻至RT且蒸發，隨後自甲苯(2×)蒸發。經由矽柱藉由二氯甲烷過濾殘餘物且蒸發溶離劑，以提供棕色/橙色蠟狀固體。產率：9.2 g，37.2 mmol，70%。¹ H NMR (400 MHz, CDCl₃ ) δ 2.92-3.02 (m, 2H), 2.77-2.85 (m, 2H), 1.85-1.95 (m, 4H)。GCMSm/z 246.0。使用類似條件製備額外材料。

步驟3：合成2-氯-3-硝基-N-((2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)-5,6,7,8-四氫喹啉-4-胺

向2,4-二氯-3-硝基-5,6,7,8-四氫喹啉(10.9 g，44.5 mmol)及二甲基乙醯胺(55 mL，含有20%水)中添加三乙胺(9 g，89.0 mmol，12.4 mL)且接著(2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲胺(12.7 g，80.1 mmol)，且在35℃下加熱反應物16小時。將反應物冷卻至0℃，添加水(70 mL)且攪拌反應物45 min。濾出固體且用水洗滌，以提供呈橙色固體狀之標題化合物。產率：14.78 g，39.96 mmol，89.8%。¹ H NMR (400 MHz, CDCl₃ ) δ 5.57 (br. s., 1H), 3.67-3.78 (m, 4H), 3.21 (d,J =4.68 Hz, 2H), 2.83 (t,J =5.66 Hz, 2H), 2.48 (t,J =5.66 Hz, 2H), 1.78-1.92 (m, 4H), 1.47 (d,J =5.85 Hz, 6H), 0.87 (s, 3H)。LCMSm/z 370.4 [M+H]。

步驟4：合成N2,N2-雙(4-甲氧基苯甲基)-3-硝基-N4-((2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)-5,6,7,8-四氫喹啉-2,4-二胺

向2-氯-3-硝基-N-((2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)-5,6,7,8-四氫喹啉-4-胺(12.98 g，35.09 mmol)中添加雙(4-甲氧基苯甲基)胺(27.1 g，105 mmol)及異丙醇(65 mL)。使反應物回流51小時，接著在RT下攪拌16小時。反應物為經稀釋二氯甲烷(100 mL)且經由Celite^® 過濾。用二氯甲烷(50 mL)洗滌固體。濃縮有機物且用乙醇(40 mL)稀釋，且在RT下攪拌16小時。濾出固體，且用乙醇(60 mL)洗滌燒瓶。固體用乙醇(30 mL)洗滌，且在真空下乾燥，以提供黃色固體。產率：14.5 g，24.6 mmol，70.0%。¹ H NMR (400 MHz, CDCl₃ ) δ 7.07-7.12 (m, 4H), 6.76-6.84 (m, 4H), 6.39 (t,J =5.66 Hz, 1H), 4.30 (s, 4H), 3.79 (s, 6H), 3.55-3.67 (m, 4H), 3.45 (d,J =5.85 Hz, 2H), 2.73 (t,J =6.44 Hz, 2H), 2.66 (t,J =5.85 Hz, 2H), 1.72-1.86 (m, 4H), 1.44 (s, 3H), 1.41 (s, 3H), 0.82-0.88 (m, 3H)。LCMSm/z 591.4 [M+H]。

步驟5：N2,N2-雙(4-甲氧基苯甲基)-N4-((2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)-5,6,7,8-四氫喹啉-2,3,4-三胺

向N2,N2-雙(4-甲氧基苯甲基)-3-硝基-N4-((2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)-5,6,7,8-四氫喹啉-2,4-二胺(7.2 g，12.2 mmol)中添加甲醇(40.6 mL)、甲酸銨(3.84 g，60.9 mmol)及鋅粉(3.99 g，60.9 mmol)。攪拌反應物25分鐘。經由Celite^® 墊過濾反應物，且濃縮濾液。將殘餘物溶解於乙酸乙酯中，用水、鹽水洗滌且有機物經無水硫酸鈉乾燥。反應物經過濾且濃縮，以提供標題化合物。產率：6.83 g, 12.19 mmol, 100%.¹ H NMR (400 MHz,氯仿-d ) δ ppm 7.21 (d,J =8.59 Hz, 4 H), 6.81 (d,J =8.59 Hz, 4 H), 4.15 (s, 4 H), 3.99 (s, 2 H), 3.76 - 3.83 (m, 8 H), 3.63 - 3.70 (m, 2 H), 3.21 (br s, 2 H), 2.74 (br t,J =5.66 Hz, 2 H), 2.55 (br t,J =5.46 Hz, 2 H), 1.74 - 1.87 (m, 4 H), 1.48 (s, 3 H), 1.46 (s, 3 H), 0.93 (s, 3 H) LCMSm/z 561.5 [M+H]。

步驟6：合成N-(2-(雙(4-甲氧基苯甲基)胺基)-4-(((2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)胺基)-5,6,7,8-四氫喹啉-3-基)戊醯胺

向N2,N2-雙(4-甲氧基苯甲基)-N4-((2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)-5,6,7,8-四-氫喹啉-2,3,4-三胺(6.84 g，12.19 mmol)中添加二氯甲烷(60.9 mL)、水(30.5 mL)及碳酸氫鈉(2.56 g，30.5 mmol)。在1分鐘內逐滴添加戊醯氯(1.62 g，13.4 mmol，1.59 mL)且接著攪拌55分鐘。將有機層分離且用二氯甲烷洗滌水溶液。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，以提供其不經進一步純化即使用之標題化合物。產率：7.86 g，12.19 mmol。LCMSm/z 645.7 [M+H]。

步驟7：合成2-丁基-N,N-雙(4-甲氧基苯甲基)-1-((2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)-6,7,8,9-四氫-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺

向N-(2-(雙(4-甲氧基苯甲基)胺基)-4-(((2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)胺基)-5,6,7,8-四氫喹啉-3-基)戊醯胺(7.86 g，12.19 mmol)中添加乙醇(122 mL)及氫氧化鈉(4.88 g，60.9 mmol，3.22 mL，50% wt於水中之溶液)。在100℃下加熱反應物48小時。將反應物冷卻至RT且濾出固體，用乙醇洗滌且乾燥，以提供標題化合物。產率：6.7 g，10.7 mmol，87.7%。¹ H NMR (400 MHz,氯仿-d ) δ ppm 7.26 (d,J =8.59 Hz, 4 H), 6.81 (d,J =8.59 Hz, 4 H), 4.96 - 5.40 (m, 4 H), 4.39 - 4.72 (m, 2 H), 3.79 (s, 6 H), 3.41 - 3.69 (m, 4 H), 2.63 - 3.13 (m, 6 H), 1.84 (br s, 4 H), 1.69 (quin,J =7.51 Hz, 2 H), 1.57 (br s, 4 H), 1.46 (s, 6 H), 1.35 (dq,J =14.83, 7.41 Hz, 2 H), 0.89 (t,J =7.41 Hz, 3 H), 0.57 (s, 3 H)。LCMSm/z 627.7 [M+H]。

步驟8：合成2-((4-胺基-2-丁基-6,7,8,9-四氫-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇

向2-丁基-N,N-雙(4-甲氧基苯甲基)-1-((2,2,5-三甲基-1,3-二㗁烷-5-基)甲基)-6,7,8,9-四氫-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(6.70 g，10.69 mmol)中添加甲苯(32.4 mL)及濃鹽酸(21 mL)。在60℃下加熱反應物3.25小時。水層用甲苯洗滌，加熱至60℃且藉由固體碳酸鉀達至pH 10。接著在60℃下攪拌反應物1小時又40分鐘，隨後冷卻至RT。濾出固體，用水沖洗且在40℃下在真空下乾燥，以提供實例(13)。產率：2.44 g，7.04 mmol，65.9%產率。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 5.67 (br s, 2 H), 4.78 (br s, 2 H), 4.07 - 4.45 (m, 2 H), 2.71 - 3.30 (m, 8 H), 2.66 (br s, 2 H), 1.53 - 1.93 (m, 6 H), 1.35 (m,J =7.34, 7.34, 7.34, 7.34, 7.34 Hz, 2 H), 0.91 (t,J =7.41 Hz, 3 H), 0.43 (s, 3 H)。LCMSm/z 347.3 [M+H]。

實例 (14) ： 2-((4- 胺基 -2- 丁基 -7,8- 二氫環戊并 [b] 咪唑并 [4,5-d] 吡啶 -1(6H)- 基 ) 甲基 )-2- 甲基丙烷 -1,3- 二醇

以類似於實例13之方式，以6,7-二氫-5H-環戊并[b]吡啶-2,4-二醇為起始物進行製備。製備336 mg(42.5%產率)。藉由HPLC (管柱：Welch Xtimate 75 × 40mm × 3um；行動相A：0.05% NH₄ OH/水(v/v)；行動相B：乙腈；梯度：10 min內80% A至40% A/60% B ，保持在0% H₂ O/100%乙腈下4 min。流速：25mL/min。)純化。LCMSm/z 333.1 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 5.72 (s, 2H), 4.80 (br. s., 2H), 4.14 (s, 2H), 3.25 (br. s., 3H), 2.99-3.34 (m, 3H), 2.88 (br. s., 2H), 2.62-2.78 (m, 2H), 2.02 (明顯五重峰,J =7.34 Hz, 2H), 1.64-1.75 (m, 2H), 1.35 (明顯四重峰,J =7.47, 14.74 Hz, 2H), 0.91 (t,J =7.28 Hz, 3H), 0.50 (s, 3H)。

實例 (15) ： 2-((4- 胺基 -2- 乙基 -1H- 咪唑并 [4,5-c] 喹啉 -1- 基 ) 甲基 )-2- 甲基丙烷 -1,3- 二醇

以類似於2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇之方式，以喹啉-2,4-二醇為起始物進行製備。製備301 mg。藉由HPLC (管柱：Phenomenex Gemini NX-C18 150×30mm×5um；行動相A：0.05% NH₄ OH/水(v/v)；行動相B：乙腈；梯度：在7 min內95% A至55% A/45% B，保持在0% H₂ O/100%乙腈下2 min。流速：30 mL/min。)純化。¹ H NMR (400MHz, DMSO-d6) d 8.51 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.58 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.38 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.18 (t, J=7.4 Hz, 1H), 6.43 (s, 2H), 4.98 (br s, 2H), 4.78 (br s, 1H), 4.45 (br s, 1H), 3.19 (br s, 4H), 3.02 (q, J=7.4 Hz, 2H), 1.34 (t, J=7.4 Hz, 3H), 0.55 (s, 3H)。LCMSm/z 315.1 [M+H]⁺ 。

實例 (16) ： 2-((4- 胺基 -2- 丙基 -1H- 咪唑并 [4,5-c] 喹啉 -1- 基 ) 甲基 )-2- 甲基丙烷 -1,3- 二醇

以類似於實例13之方式，以喹啉-2,4-二醇為起始物進行製備。製備15.8 mg。藉由HPLC (管柱：Waters XBridge C18 19×100, 5um；行動相A：0.03% NH₄ OH/水(v/v)；行動相B：0.03% NH₄ OH乙腈；梯度：8.5 min內95% A至50% A/50% B，保持在0% H₂ O/100%乙腈下1 min。流速：25 mL/min。)；HPLC QC (管柱：Waters Atlantis dC18 4.6×50, 5um；行動相A：0.05% TFA/水(v/v)；行動相B：0.05% TFA乙腈；梯度：4.0 min內95% A至5% A/95% B，保持在5% H₂ O/95%乙腈下1 min。流速：2mL/min。滯留時間：1.38 min。)純化。LCMSm/z 329.5 [M+H]⁺ 。

實例 (17) ： 2-((4- 胺基 -2-(2- 甲氧基乙基 )-7,8- 二氫環戊并 [b] 咪唑并 [4,5-d] 吡啶 -1(6H)- 基 ) 甲基 )-2- 甲基丙烷 -1,3- 二醇

實例17係以類似於2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇之方式以6,7-二氫-5H-環戊并[b]吡啶-2,4-二醇為起始物進行製備。製備70 mg。藉由HPLC (管柱：Phenomenex Gemini NX-C18 75×30mm×3um；行動相A：0.05% NH₄ OH/水(v/v)；行動相B：乙腈；梯度：7 min內100% A至70% A/30% B，保持在0% H₂ O/100%乙腈下2 min。流速：30 mL/min。)純化。LCMSm/z 335.1 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 5.87 (br. s., 2H), 4.81 (br. s., 2H), 4.17 (br. s., 2H), 3.71 (明顯三重峰,J =6.72 Hz, 2H), 3.30 (br. s., 3H), 3.20-3.28 (m, 4H), 3.23 (s, 3H), 2.68-2.79 (m, 2H), 2.03 (quin,J =7.27 Hz, 2H), 0.50 (s, 3H)。未觀測到1個質子(經遮蔽)。

實例 (18) ： 2-((4- 胺基 -2-(2- 甲氧基乙基 )-6,7,8,9- 四氫 -1H- 咪唑并 [4,5-c] 喹啉 -1- 基 ) 甲基 )-2- 甲基丙烷 -1,3- 二醇

實例(18)係以類似於2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇之方式，以5,6,7,8-四氫-喹啉-2,4-二醇為起始物進行製備。製備68 mg。藉由HPLC (管柱：Phenomenex Gemini NX-C18 75×30mm×3um；行動相A：0.05% NH₄ OH/水(v/v)；行動相B：乙腈；梯度：7 min內100% A至60% A/40% B，保持在0% H₂ O/100%乙腈下2 min。流速：30 mL/min。)純化。¹ H NMR (400MHz, DMSO-d₆ ) δ 5.70 (s, 2H), 4.82 (br s, 2H), 4.29 (br s, 2H), 3.69 (br s, 2H), 3.30 - 2.72 (m, 11H), 2.66 (br s, 2H), 1.74 (br s, 4H), 0.43 (s,3H)。LCMSm/z 349.2 [M+H]⁺ 。

實例 (19) ： 2-((4- 胺基 -2-(2- 甲氧基乙基 )-1H- 咪唑并 [4,5-c] 喹啉 -1- 基 ) 甲基 )-2- 甲基丙烷 -1,3- 二醇

實例(19)係以類似於2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇之方式以喹啉-2,4-二醇為起始物進行製備。製備108 mg。藉由HPLC (管柱：Phenomenex Gemini NX-C18 75×30mm×3um；行動相A：0.05% NH₄ OH/水(v/v)；行動相B：乙腈；梯度：7 min內97% A至57% A/43% B，保持在0% H₂ O/100%乙腈下2 min。流速：25 mL/min。)純化；LCMSm/z 345.3 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (400MHz, DMSO-d₆ ) δ = 8.52 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.58 (dd, J=1.1, 8.3 Hz, 1H), 7.43 - 7.34 (m, 1H), 7.23 - 7.14 (m, 1H), 6.45 (s, 2H), 5.00 (t, J=4.8 Hz, 2H), 4.76 (br s, 1H), 4.53 (br s, 1H), 3.79 (br s, 2H), 3.43 (br d, J=5.8 Hz, 3H), 3.30 - 3.24 (m, 4H), 3.19 (br s, 2H), 0.55 (s, 3H)。 生物學檢定

使用穩定地過度表現人類TLR7或TLR8之Hek293細胞在功能細胞分析中測試所描述實例之生物活性。分析測試每一實例在人類一級血液單核細胞(PBMC)中刺激干擾素α (IFNα)分泌之能力。

hTLR7 及 hTLR8 細胞功能分析 為測定每一實例活化人類類鐸受體7 (hTLR7)或人類類鐸受體8 (hTLR8)之能力，利用基於細胞之報導子系統。在與五個NF-κB及AP-1-結合位點融合之IFN-b最小啟動子的控制下穩定地過度表現hTLR7或hTLR8以及含有最佳分泌胚胎鹼性磷酸酶基因(SEAP)之報導基因的HEK293細胞係獲自Invivogen (HEK-Blue™ hTLR7, 目錄號Hkb-htlr7；HEK-Blue™ hTLR8, 目錄號Hkb-htlr8)。在此等細胞中刺激hTLR7或hTLR8使NF-κB及AP-1活化且誘導SEAP產生，其可使用鹼性磷酸酶偵測試劑進行定量。

將細胞保持在杜爾貝科氏經改良伊格爾培養基(Dulbecco's Modified Eagle Media；DMEM) (含有加熱不活化之胎牛血清(FBS) (10%)、格魯塔瑪(Glutamax) (2mM)、青黴素/鏈黴素、殺稻瘟菌素(Blasticidin) (10 µg/ml)、吉歐黴素(Zeocin) (100 µg/ml)及諾莫黴素(Normocin) (100 µg/ml))中。在分析的第一天，使用來自10 mM DMSO儲備溶液之11點半對數連續稀釋液製備實例且將50 nl點樣至384孔視盤(PerkinElmer, 目錄號6007480)中。正對照TLR7/8促效劑及負對照(DMSO，無實例)亦點樣在分析盤內且用於在分析方法期間測定效果百分比。在再懸浮於含加熱不活化之FBS(10%)、格魯塔瑪(2 mM)及青黴素/鏈黴素之DMEM分析培養基中之後，將10,000個細胞/20微升/孔添加至先前製備的盤。在5% CO₂ 環境中在37℃下培育盤隔夜(16至20小時)。使用預潤濕的Mcroclime蓋(Labcyte，LLS-0310)以防止蒸發。在分析的第二天，藉由用100 ml無菌水復原QUANTI-Blue™散劑(InvivoGen，Rep-qb1)且使其平衡至37℃保持15分鐘來製備QUANTI-Blue™偵測試劑。將20 µl QUANTI-Blue™偵測試劑添加至每一孔中且在室溫下培育盤180 min。在培育結束時，在捕獲650 nm下之吸光度之Envision (Perkin Elmer)盤式讀取器上讀取盤。

使用正(TLR7/8促效劑)及負(DMSO)對照，使用以下等式計算每一實例之效果百分比(%)：效果% = 100 - [100 * {(實例- 正對照) / (負對照-正對照)}]

每一實例之每一濃度下之效果%係利用ABase軟體程式組(IBDS)來計算且與每一分析盤內所含有的正及負對照孔中產生SEAP的量相關。每一實例之濃度及效果%值係使用ABase中之4參數對數模型進行擬合且計算產生50%反應(EC₅₀ )之每一實例的濃度。

外周血液單核細胞 (PBMC) 之 INFα 分析

利用均相時差式螢光(HTRF)分析來測定每一實例誘導自新鮮經分離外周血液單核細胞(PBMC)中釋放干擾素α (IFNα)之能力。由舒爾曼機構審查委員會(the Shulman Institutional Review Board)審批通過根據Pfizer協定(協定號GOHW RDP-01)經由靜脈穿刺自健康供體收集人類全血。藉由將來自個別供體之50 ml人類靜脈血液樣本添加至含有714個單位肝素鈉注射液MDV (Fresenius Kabi，目錄號70041)中之錐形管中，隨後輕緩翻轉該管數次使該樣本肝素化。接著將血液轉移至燒瓶，錐形管用40 ml含2 mM EDTA之PBS (PBS-EDTA)沖洗，且在平緩地混合下將沖洗液添加至血液燒瓶中。將30 ml稀釋血液添加至3個單獨histopaque管(Sigma，目錄號A0561)中，直接施加至篩板。接著在台面離心機中以1000×g旋轉Histopaque管15 min。在密度分離之後，將過量血漿上層相抽吸至高於中間相約5 ml內且將剩餘血漿以及含有PBMC之混濁中間相平緩地傾析至新的錐形管中。將15 ml PBS-EDTA添加至histopaque管中且平緩地渦旋以移除黏附於管壁之剩餘PBMC且將此洗滌液添加至管中之現有PBMC中。藉由PBS-EDTA使管之體積達至40 ml且在室溫下在250×g下旋轉試管12分鐘。在抽吸上清液後，藉由10 ml PBS-EDTA平緩地再懸浮丸粒且在250×g下再次離心12分鐘。傾析所得上清液且使丸粒再懸浮於20 ml ACK裂解緩衝液(ThermoFisher，目錄號A10492-01)中，隨後在室溫下培育5分鐘。藉由添加PBS-EDTA使每一導管之體積達至50 ml且在室溫下在177×g下旋轉管12分鐘。使PBMC丸粒再次再懸浮於10 ml無EDTA之PBS中且使管在177×g下最後旋轉10分鐘。傾析上清液且使PBMC再懸浮於分析培養基(具有10%加熱不活化之FBS、2 mM格魯塔瑪及青黴素/鏈黴素之RPMI基礎培養基)中。

使用來自2.5 mM DMSO儲備溶液之11點半對數連續稀釋液製備每一實例用於分析且將400 nl點樣至384孔視盤(Perkin Elmer，目錄號6007480)中。正及負對照(先前所描述)亦經點樣於分析盤內且用於測定分析方法期間的效果%。PBMC經計數且以100,000個細胞/100微升/孔之密度接種；盤經覆蓋有預濕潤microclime蓋以防止蒸發且在5% CO₂ 氛圍中在37℃下培育24小時。在培育結束時，移除microclime蓋且以1000 rpm旋轉盤5分鐘。將來自細胞盤之16 µl經調節之培養基轉移至單獨384孔低容量盤(Greiner One，784080)中。根據製造商說明書使用HTRF^® 套組(Cisbio，目錄號62HIFNAPEG)來定量IFNα量。套組供應兩種不同特異性抗體，一個標記有D2 (受體)且另一種標記有穴狀合物(供體)，及偵測緩衝液。將抗體原液在偵測緩衝液中以1:20稀釋。對於一個384孔盤，將62.5 µl D2抗體原液及62.5 µl穴狀合物抗體原液添加至2.375 ml偵測緩衝液中且充分混合。將4 µl抗體混合物添加至含有自視盤之對應孔獲得的經改良培養基的每一孔中。低容量盤經密封且在室溫下培育24小時。藉由Envision多標籤盤式讀取器(Perkin Elmer)使用330 nm激發光及615 nm及665 nm之發射光來讀取HTRF信號。結果經計算為(665 nm/615 nM比率)×10,000且使用細胞介素標準曲線將原始資料轉化為IFNα濃度(pg/ml)。如上文所論述，使用正(TLR7/8促效劑)及負(DMSO)對照使用以下等式來計算每一實例之效果百分比(%)：效果% = 100 - [100 * {(實例-正對照) / (負對照-正對照)}]

每一實例之每一濃度下的效果%係利用ABase軟體程式組(IBDS)計算且與每一分析盤內所含正及負對照孔中產生IFNα的量相關。當實例經測試超過一次時，每一實例之濃度及效果%值係使用ABase中之4參數對數模型進行擬合且產生50%反應(EC₅₀ )之實例之濃度經計算且以幾何平均EC₅₀ 形式提供於表1中。表1中之空白單元指示未獲得彼實例於彼特定分析中之資料。表 1

實例編號	hTLR7 ( 細胞) EC₅₀ (µM)	hTLR8 ( 細胞) EC₅₀ (µM)	IFNα　(PBMC) EC₅₀ (µM)
1	0.644	2.549	0.099
2	0.054	0.811	0.019
3	0.029	0.194	0.007
4	0.054	0.400
5	0.042	0.273
6	0.049	6.398	0.022
7	0.103	16.472	0.198
8	0.078	8.018	0.048
9	0.027	1.443	0.002
10	0.004	0.092	0.001
11	0.013	0.160
12	0.009	0.191
13	0.009	0.104	0.0004
14	0.014	0.247	0.007
15	0.075	0.613	0.012
16	0.019	0.325	0.011
17	0.156	1.064
18	0.016	0.119
19	0.009	0.310

本說明書中引用之所有公開案及專利申請案均以全文引用的方式併入本文中。一般熟習此項技術者將顯而易知，可在不背離隨附申請專利範圍之精神或範疇之情況下對其進行某些改變及修改。

Claims

一種式(I)化合物
或其醫藥學上可接受之鹽，其中 R¹ 及R² 獨立地為C_1-3 烷基；或 R¹ 及R² 接合形成5至7員碳環，其中該碳環可為飽和或不飽和的； R³ 為
； R⁴ 為C_1-6 烷基或(CH₂ )_n O(CH₂ )_m CH₃ ，其中該C_1-6 烷基或該(CH₂ )_n O(CH₂ )_m CH₃ 基團的任一碳在價數允許時經0至3個鹵素取代； R⁵ 為C_1-3 烷基或OC_1-3 烷基，其中該C_1-3 烷基經0至3個F取代； R⁶ 為H或C_1-3 烷基，其中該C_1-3 烷基經0至3個F取代； m為0至2；且 n為1至3。
一種式(Ia)化合物
或其醫藥學上可接受之鹽，其中 R¹ 及R² 獨立地為C_1-2 烷基；或 R¹ 及R² 接合形成5至7員碳環，其中該碳環可為飽和或不飽和的； R³ 為
； R⁴ 為C_3-5 烷基或(CH₂ )_n O(CH₂ )_m CH₃ ； R⁵ 為C_1-2 烷基； R⁶ 為H； m為1；且 n為1。
如請求項2之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽，其中R¹ 及R² 獨立地為C_1-2 烷基。
如請求項2之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽，其中R¹ 及R² 接合形成5至7員碳環，其中該碳環可為飽和或不飽和的。
如請求項4之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽，其中R¹ 及R² 接合形成5至7員碳環，其中該碳環可為飽和的。
如請求項5之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽，其中該碳環為環戊基。
如請求項5之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽，其中該碳環為環己基。
如請求項4之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽，其中 R¹ 及R² 接合形成5至7員碳環，其中該碳環可為不飽和的；且 R⁴ 為C_3-5 烷基。
如請求項8之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽，其中該碳環為苯基。
一種式(Ib)化合物
或其醫藥學上可接受之鹽，其中 R¹ 及R² 獨立地為C_1-3 烷基；或 R¹ 及R² 接合形成5至7員碳環，其中該碳環可為飽和或不飽和的； R³ 為
； R⁴ 為C_1-6 烷基或(CH₂ )_n O(CH₂ )_m CH₃ ，其中該C_1-6 烷基或該(CH₂ )_n O(CH₂ )_m CH₃ 基團之任一碳在價數允許時經0至3個鹵素取代，其中鹵素為F； R⁵ 為C_1-3 烷基或OC_1-3 烷基，其中該C_1-3 烷基經0至3個F取代； R⁶ 為H或C_1-3 烷基，其中該C_1-3 烷基經0至3個F取代； m為0至2；且 n為1至3。
如請求項10之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽，其中 R¹ 及R² 獨立地為C_1-2 烷基；或 R¹ 及R² 接合形成5至7員碳環，其中該碳環可為飽和或不飽和的； R³ 為
； R⁵ 為C_1-3 烷基或OC_1-3 烷基，其中該C_1-3 烷基經0至2個F取代；且 R⁶ 為H。
如請求項11之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽，其中R⁵ 為C_1-2 烷基。
一種化合物，其選自： 2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇； 2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-1H -咪唑并[4,5-c ]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇； 2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-7,8-二氫環戊并[b]咪唑并[4,5-d]吡啶-1(6H)-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇； 2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7,8,9-四氫-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇； 3-(4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)-2-甲基丙-1-醇； (R)-3-(4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)-2-甲基丙-1-醇； (S)-3-(4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)-2-甲基丙-1-醇； 2-((4-胺基-6,7-二甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇； 2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)甲基)-2-乙基丙烷-1,3-二醇； 2-((4-胺基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇； 2-((4-胺基-2-丁基-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇；及 2-((4-胺基-2-戊基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇；或其醫藥學上可接受之鹽。
一種化合物，其為2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇；或其醫藥學上可接受之鹽。
如請求項14之化合物，其為2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇。
一種化合物，其為2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇；或其醫藥學上可接受之鹽。
如請求項16之化合物，其為2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇。
一種化合物，其為2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-7,8-二氫環戊并[b]咪唑并[4,5-d]吡啶-1(6H)-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇；或 2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7,8,9-四氫-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇；或其醫藥學上可接受之鹽。
如請求項18之化合物，其為2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-7,8-二氫環戊并[b]咪唑并[4,5-d]吡啶-1(6H)-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇；或 2-((4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7,8,9-四氫-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇。
一種化合物，其為3-(4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)-2-甲基丙-1-醇； (R)-3-(4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)-2-甲基丙-1-醇；或 (S)-3-(4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)-2-甲基丙-1-醇；或其醫藥學上可接受之鹽。
如請求項20之化合物，其為3-(4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)-2-甲基丙-1-醇； (R)-3-(4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)-2-甲基丙-1-醇；或 (S)-3-(4-胺基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-2-(甲氧基甲基)-2-甲基丙-1-醇。
一種化合物，其為2-((4-胺基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇；或 2-((4-胺基-2-戊基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇；或其醫藥學上可接受之鹽。
如請求項22之化合物，其為2-((4-胺基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇；或 2-((4-胺基-2-戊基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇。
一種醫藥組合物，其包含如請求項1至23中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接受之載劑或賦形劑。
一種如請求項1至23中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用於治療癌症之藥物。
如請求項25之用途，其中該藥物與至少一種額外治療劑一起投與。
如請求項1至23中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療有需要之個體之癌症。
一種化合物，其選自 2-((4-胺基-2-丁基-6,7,8,9-四氫-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇； 2-((4-胺基-2-丁基-7,8-二氫環戊并[b]咪唑并[4,5-d]吡啶-1(6H)-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇； 2-((4-胺基-2-乙基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇；及 2-((4-胺基-2-丙基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇；或其醫藥學上可接受之鹽。
如請求項28之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽，其為2-((4-胺基-2-丁基-6,7,8,9-四氫-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇。
如請求項28之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽，其為2-((4-胺基-2-丁基-7,8-二氫環戊并[b]咪唑并[4,5-d]吡啶-1(6H)-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇。
如請求項28之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽，其為2-((4-胺基-2-乙基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇。
如請求項28之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其為2-((4-胺基-2-丙基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)甲基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇。
一種醫藥組合物，其包含如請求項28至32中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接受之載劑或賦形劑。
一種如請求項28至32中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用於治療癌症之藥物。
如請求項34之用途，其中該藥物與至少一種額外治療劑一起投與。
如請求項28至32中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療有需要之個體之癌症。