SU1290134A1

SU1290134A1 - Device for determining compensatory abilities of organism

Info

Publication number: SU1290134A1
Application number: SU823457516A
Authority: SU
Inventors: Надежда Алексеевна Панченко; Анатолий Ефимович Дубицкий; Юрий Борисович Швецов
Original assignee: Научно-Исследовательский Институт Клинической И Экспериментальной Хирургии; Институт зоологии им.И.И.Шмальгаузена
Priority date: 1982-06-21
Filing date: 1982-06-21
Publication date: 1987-02-15

Abstract

Изобретение относитс к биологии и медицине, а именно к цитологическим способам определени компенсаторных возможностей организма, и может быть использовано дл прогнозировани цред- и послеоперационного периодов. дифференциальной диагностики онкологических заболеваний внутренних органов. Цель изобретени - повышение точности способа. Из крови выдел ют лейкоциты, смешивают их с питательной средой (1 часть взвеси лейкоцитов в аутоплазме и 2 части питательной среды). Плотность клеток составл ет при этом 1,5x10 -2x10 в суспензии. Флаконом дл инкубации может служить, например, чашка Петри диаметром 5 см, куда предварительно помещают покровное стекло, а затем суспензию клеток в объеме 3-4 см . Культивируют без митогенов при температуре в течение 24 ч. После культивировани стекла с монослоем клеток извлекают, высушивают при комнатной температуре, фиксируют и окрашивают, исследуют под микроскопом. Из фагоцитов определ ют диаметр гипертрофированных нейт- рофилов и при диаметре нейтрофилов от 15-22 мкм определ ют низкую степень , а при диаметре нейтрофилов от 23-60 мкм определ ют высокую степень компенсаторных возможностей организма . § (Л ю со со 4The invention relates to biology and medicine, in particular, to cytological methods for determining the compensatory capabilities of an organism, and can be used to predict the cerebral and postoperative periods. differential diagnosis of cancer of internal organs. The purpose of the invention is to improve the accuracy of the method. Leukocytes are isolated from blood, mixed with nutrient medium (1 part leukocyte suspension in autoplasma and 2 parts nutrient medium). The density of the cells is 1.5x10 -2x10 in suspension. An incubation bottle can be, for example, a Petri dish with a diameter of 5 cm, where a cover glass is placed beforehand, and then a suspension of cells in a volume of 3-4 cm. Cultured without mitogens at a temperature of 24 hours. After cultivation, glass with a monolayer of cells is removed, dried at room temperature, fixed and stained, examined under a microscope. From phagocytes, the diameter of hypertrophied neutrophils is determined, and with a diameter of neutrophils from 15-22 µm, a low degree is determined, and with a diameter of neutrophils from 23-60 µm, a high degree of compensatory capacity of the organism is determined. § (L u co 4

Description

Изобретение относитс к области биологии и медицины, а именно к цитологическим способам определени компенсаторных возможностей, и может быть использовано дл прогнозирова- нй пред- и послеоперационного периодов , дл коррекции медикаментозной тактики, определени т жести патологического процесса, дифференциальной ;диагностики онкологических заболева- НИИ внутренних органов.The invention relates to the field of biology and medicine, namely to cytological methods for determining compensatory capabilities, and can be used to predict the pre- and postoperative periods, for correcting drug tactics, determining the severity of the pathological process, differential diagnosis of oncological diseases organs.

Цель изобретени - повышение точности способа путем вы влени компенс торных реакций клеток и при исследовании морфологических преобразователей (гипертрофии) сегменто дерных нейтро- филов, св занных с их гиперфункцией в результате компенсаторной реакции.The purpose of the invention is to improve the accuracy of the method by identifying compensatory cell reactions and in the study of morphological transducers (hypertrophy) of segmented nuclear neutrophils associated with their hyperfunction as a result of a compensatory reaction.

Способ осуществл ют следующим образом.The method is carried out as follows.

У больного берут кровь в объеме ,5-2 см в предварительно обработанную гепарином пробирку (8-10 ед/мл), Кровь отстаивают при комнатнрй температуре 30-40 мин. Затем выдел ют лейкоциты , дл чего стерильной пипеткой отсасывают плазму с лейкоцитами и смешивают с питательной средой следующего состава, %: среда инактиви рованна сыворотка крупного рогатого скота с лактальбумином (стандартна смесь) 20; аминопептид 10 и антибиотики . Подготовленна дл инкубации в питательной среде клеточна суспензи должна состо ть из одной части взвеси лейкоцитов в аутоплазме и двух частей питательной среды. Плотность клеток составл ет при этом 1,5x10 - -2,0x10 в суспензии.Blood is taken from the patient in a volume of 5–2 cm into a test tube pretreated with heparin (8–10 U / ml). The blood is left to stand at room temperature for 30–40 min. Then leukocytes are isolated, for which a plasma with leukocytes is sucked off with a sterile pipette and mixed with the nutrient medium of the following composition,%: medium inactivated bovine serum from lactalbumin (standard mixture) 20; aminopeptide 10 and antibiotics. The cell suspension prepared for incubation in a nutrient medium should consist of one part of leukocyte suspension in autoplasma and two parts of nutrient medium. The density of the cells is 1.5x10 - -2.0x10 in suspension.

. .

Флаконом дл инкубации может служить , наприме р , чашка Петри диаметро 5 см,- куда предварительно помещают покровное стекло, а затем - суспензию клеток в объеме см , - An incubation bottle can be, for example, a Petri dish 5 cm in diameter, where the cover glass is placed beforehand, and then the suspension of cells in a volume of cm, -

Культивируют без митогенов при в течение 24 ч. После культивировани стекла с монослоем клеток извлекают, высушивают при комнатной температуре, фиксируют и окрашивают любым красителем, примен емым дл окраски мазков крови. Препарат монтируют на предметное стекло и наблюдают в микроскопе.Cultured without mitogens for 24 hours. After cultivation, glass with a monolayer of cells is removed, dried at room temperature, fixed, and stained with any dye used to stain blood smears. The drug is mounted on a glass slide and observed in the microscope.

Из фагоцитов определ ют диаметр гипертрофированных нейтрофилов и при диаметрб нейтрофилов от 15-22 мкм огфедел ют низкук) степень компенсаторных возможностей организма, а при диаметре нейтрофилов от 23-60 мкм определ ют высокую степень компенсаторных возможностей организма.The diameter of hypertrophied neutrophils is determined from phagocytes and, when the diameter of neutrophils is from 15 to 22 µm, the level of the compensatory abilities of the body is decoupled, and with a diameter of neutrophils from 23 to 60 µm, a high degree of compensatory capabilities of the body are determined.

Пример 1. Больной Л. В зоне роста культуры лейкоцитов крови обнаруживались гипертрофические нейтро филы, число которых составл ло 80- 90%. Размеры их превьш1али контрольны образцы в 2-3 раза, т.е. диаметр име 180-200 ед. окул р-микрометра. Гипертрофированные нейтрофилы имели правильную форму, четко контурированное дро, состо щее из 3-4 сегментов. Послеоперационный период у данного больного протекал без осложнений. Показатель гипертрофии нейтрофилов (55-60 мкм) и клинические данные свидетельствуют о высокой компенса торной возможности организма больного .Example 1. Patient L. In the growth zone of the blood leukocyte culture, hypertrophic neutrophils were detected, the number of which was 80–90%. The sizes of their samples were control in 2-3 times, i.e. diameter was 180-200 units. the eye of the p-micrometer. Hypertrophied neutrophils had a regular shape, a clearly contoured nucleus consisting of 3-4 segments. The postoperative period in this patient was uneventful. The neutrophil hypertrophy index (55-60 µm) and clinical data indicate a high compensatory ability of the patient.

Пример 2. Больной П. Оперирван . Анализ культуры лейкоцитов (до операции) показал отсутствие в зоне роста гипертрофированных нейтрофилов Размер клеток составил 15-22 мкм, чт свидетельствовало о низкой компенсатной возможности организма. Осложненный послеоперационный период закончилс летальным исходом.Example 2. Patient P. Operairvan. The analysis of the leukocyte culture (before the operation) showed the absence of hypertrophied neutrophils in the growth zone. The cell size was 15-22 μm, which indicated a low compensating potential of the organism. Complicated postoperative period was fatal.

Предлагаемый.способ обеспечивает высокую точность, отличаетс простотой постановки, может быть использован как объективный показатель реактивности организма и функционального состо ни неспецифического иммунитета и дает возможность судить о т жести заболевани и эффективности проводимой терапии.The proposed method provides high accuracy, is characterized by simplicity of formulation, can be used as an objective indicator of the body's reactivity and functional state of nonspecific immunity, and makes it possible to judge the severity of the disease and the effectiveness of the therapy.

Claims

Invention Formula

The method of determining the compensatory abilities of the body, including blood sampling, leukocyte isolation, incubation in a nutrient medium and phagocyte counting, characterized in that leukocytes are incubated on coverslips to increase the accuracy of the method, and the diameter of hypertrophied neutrophils and phagocytes are determined with a neutrophil diameter of 15-22 µm, a low degree of compensatory abilities of the body is determined, and with a neutrophil diameter of 23-60 µm, a high degree of compensatory capacity of the organism is determined.