SK284191B6 - Aktín-rezistentný variant humánnej DNázy I - Google Patents

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka výsledkov získaných z výskumu humánnej deoxyribonukleázy 1 (DNáza 1), fosfodiesterázy, ktorá je schopná hydrolyzovať polydeoxyribonukleovú kyselinu. Týka sa všeobecne modifikovaných foriem (variantov) humánnej DNázy 1 a ich prípravy metódami rekombinantnej DNA.

Doterajší stav techniky

DNáza I je fosfodiesteráza, schopná hydrolyzovať kyselinu polydeoxy-ribonukleovú. DNáza I bola purifikovaná z rozličných druhov na rozličných stupňoch.

Bovinná DNáza 1 bola biochemický intenzívne študovaná. Pozri napr. Moore, in The Enzymes (Boyer, P.D., ed), str. 281-296, Academic press, New York (1981). Kompletná aminokyselinová sekvencia bovinnej DNázy I je známa (Liao, et al., J. Biol. Chem. 248: 1498 - 1495 (1973); Oefner, et al., J. Mol. Biol. 192: 605 - 632 (1986); Lahm, et al., J. Mol. Biol. 221: 645 - 667 (1991) a DNA kódujúca bovinnú DNázu I bola klonovaná a vytvorená (Worrall, et al., J. Biol. Chem. 265: 21889 - 21895 (1990)). Štruktúra bovinnej DNázy 1 bola stanovená rontgenovou kryštalografiou. Suck, et al., EMBO J. 3: 2423 - 2430 (1984); Suck, et al., Náture 321: 620 - 625 (1986); Oefner, et al., J. Mol. Biol. J92: 605 -632 (1986).

DNA kódujúca humánnu DNázu I bola izolovaná a sekvenovaná a táto DNA bola vytvorená v rekombinantných hostiteľských bunkách, aby sa umožnila produkcia humánnej DNázy I v komerčne použiteľných množstvách. Shak, et al., Proc. Nat. Acad. Sci. 87: 9188 - 9192 (1990).

DNáza 1 má množstvo známych užitočných vlastností a bola použitá na terapeutické účely. Jej zásadným terapeutickým použitím bolo zníženie viskoelasticity pľúcnych sekrétov (mucus) v takých ochoreniach, ako je zápal pľúc a cystická fibróza (CF), aby sa pomohlo pri uvoľnení respiračných ciest. Pozri napríklad Lourenco, et al., Árch. Intern. Med. 142: 2299 - 2308 (1982); Shak, et al., Proc. Nat. Acad. Sci. 87: 9188 - 9192 (1990); Hubbard, et al., New Engl. J. Med. 326: 812 - 815 (1992); Fuchs, et al., New Engl. J. Med. 331: 637 - 642 (1994); Bryson, et al., Drugs 48: 894 - 906 (1994). Hlien taktiež prispieva k morbidite pri chronickej bronchitíde, astmatickej bronchitíde, bronchoektázii, emfyzéme, akútnej a chronickej sínusitíde, ako aj pri bežných prechladnutiach.

Pľúcne sekréty osôb, ktoré majú takéto choroby, sú komplexnými materiálmi, ktoré obsahujú glykoproteínové hlieny, mukopolysacharidy, proteázy, aktín a DNA. Niektoré z týchto materiálov v pľúcnych sekrétoch sú uvoľnené z leukocytov (neutrofily), ktoré infiltrujú pľúcne tkanivo ako odpoveď na prítomnosť mikróbov (napr. kmene baktérií Pseudomonas, Pneumococcus alebo Staphylococcus) alebo ďalšie dráždivé látky (napríklad cigaretový dym, peľ). V priebehu reakcie s takýmito mikróbami alebo dráždivými látkami leukocyty môžu degenerovať a môže sa uvoľňovať ich obsah, ktorý prispieva k viskoelasticite pľúcnych sekrétov.

Schopnosť DNázy I redukovať (znižovať) viskoelasticitu pľúcnych sekrétov bola pripisovaná jej enzymatickej degradácii širokého množstva DNA, uvoľneného neutrofilmi. Shak, et al., Proc. Nat. Acad. Sci. 87: 9188 - 9192 (1990); Aitken, et al., J. Am. Med. Assoc. 267: 1947 - 1951 (1992).

Neskoršie sa pripisoval mukolytickému účinku DNázy I iný mechanizmus, zahrnujúci disagregáciu aktínu. Vas concellos, et al., Science 263: 969 - 971 (1994). Aktín je jedným z najpočetnejších proteínov v eukaryotických bunkách (napríklad, aktín zahrnuje okolo 10 % totálneho leukocytového proteínu) a bol intenzívne študovaný. Kabsch, et al., Ann. Rev. Biophys. Biomol. Struct. 21: 49 - 76 (1992); Sheterline, et al., Prot. Profde 1: 1 - 121 (1994). Aktín existuje v dvoch formách: v monomémej forme (G-aktín) a vláknitej forme (F-aktín), ktoráje zostavená z monomérov G-aktínu. Polyméme vlákna (filamenty) aktínu majú vysokú viskoelasticitu a jednoznačne prispievajú k viskozite pľúcnych sekrétov. Momet, et al., Proc. Nat. Acad. Sci. 8k 3680 - 3684 (1984); Newman, et al., Biochemistry 24: 1538 - 1544 (1985); Janmey, et al., Biochemistry 27: 8218 - 8226 (1988); Vasconcellos, et al., Science 263: 969-971 (1994).

Pretože DNáza I je známa na viazanie aktínu (Lazarides, et al., Proc. Nat. Acad. Sci. 71: 4742 - 4746 (1974); Kabsch, et al., Náture 347: 37 - 44 (1990) a depolymerizáciu vlákien aktínu (takisto aj na inhibíciu polymerizácie Gaktínu vo vláknach) (Mannherz, et al., FEBS Lett. 60: 34 - 38 (1975); Hitchock, et al., Celí 7: 531 - 542 (1976); Pinder, et al., Biochemistry 21: 4886 - 4890 (1982); Weber, et al., Biochemistry 33: 4780 - 4786 (1994)), boli predstavy, že mukolytický účinok DNázy I na spútum alebo na iné pľúcne výlučky viac spočíva v disagregácii (depolymerizácii) aktínu ako vhydrolýze DNA. Vasconcellos, et al., Science 263: 969 - 971 (1994). Ako zlúčiteľné s týmto názorom je známe, že v prítomnosti aktínu je DNA-hydrolytická aktivita DNázy I inhibovaná. Lazarides, et al., Proc. Nat. Acad. Sci. 7L 4742 - 4746 (1974); Mannherz, et al., Eur. J Biochem 104: 367 - 379 (1980). Tomuto názoru taktiež zodpovedá to, že bolo referované o tom, že niektoré proteíny aktínu (napr. gelsolin) sú účinné pri potláčaní viskoelasticity cystického fibrózneho spúta. Vasconcellos, et al., Science 263: 969 - 971 (1994); Stossel, et al., PCT Patent Publication No. WO 94/22465 (zverejnená 13. októbra 1994).

Predložený vynález je založený na časti výskumu vynálezcov - určiť biochemický základ mukolytickej aktivity DNázy I. Tento výskum zahrnuje vzor a syntézu rôznych variantov humánnej DNázy I, testovanie týchto variantov na posúdenie ich schopnosti hydrolyzovať DNA, viazať aktín a znižovať viskoelasticitu spúta in vitro. Vynálezcovia vytvorili niekoľko tried variantov humánnej DNázy I. Jedna trieda variantov (varianty aktín-rezistentné) znížila schopnosť viazať aktín, ale ešte má mukolytickú aktivitu a v niektorých prípadoch mukolytická aktivita vzrástla pri porovnaní s natívnou humánnou DNázou I. Tieto aktin-rezistentné varianty majú približne rovnakú DNA-hydrolytickú účinnosť ako natívna humánna DNáza I, ale táto účinnosť je menej náchylná na inhibiciu aktínom. Druhá trieda variantov viaže aktín s afinitou podobnou tej, ktorá bola zistená pre natívnu humánnu DNázu I, ale má zníženú mukolytickú účinnosť a zníženú DNA-hydrolytickú účinnosť pri porovnaní s natívnou humánnou DNázou I.

Tieto výsledky indikujú, že terapeutická efektívnosť humánnej DNázy I pri znižovaní viskoelasticity pľúcnych sekrétov je daná viac jej katalytickou, DNA-hydrolytickou aktivitou ako jej schopnosťou depolymerizovať vláknitý aktín. Preto varianty humánnej DNázy, ktoré viažu aktín s nižšou afinitou ako prírodná humánna DNáza, ale ešte majú DNA-hydrolytickú aktivitu, by mali byť použiteľné ako terapeutické činidlá, najmä pri liečení pacientov, ktorí majú pľúcne výlučky obsahujúce relatívne vysoké množstvo aktínu. Pretože takéto varianty znížili afinitu proti aktínu, ich DNA-hydrolytická aktivita je menej inhibovaná v prítomnosti aktínu a tak tieto varianty majú vyššiu mukolytickú ú činnosť v prítomnosti aktínu pri porovnaní s prírodnou humánnou DNázou I.

Podstata vynálezu

Podstatou predloženého vynálezu je teda poskytnúť varianty humánnej DNázy I, ktoré majú DNA-hydrolytickú aktivitu, ale viažu aktín s nižšou afinitou ako natívna humánna DNáza I.

Predmetom vynálezu je preto aktin-rezistentný variant humánnej DNázy I, ktorý obsahuje aspoň jednu aminokyselinovú substitúciu vybranú zo skupiny, ktorá zahŕňa H44Q, L45C, L45K, L45R, V48K, V48R, G491, G49K, G49R, G49Y, L52K, L52M, L52N, L52R, D53L, D53M, N56R, Y65K, Y65M, Y65S, Y65P, V66N, V67D, V67H, V67M, V67P, V67R, V67S, S68K, S68R, S68M, E69A, Al 14E, Al 14G, Al 14H, Al 14K, Al 14L, Al 14M, Al 14Q, A114R,A114WaA114Y.

Ďalšia podstata predloženého vynálezu spočíva v poskytnutí nukleových kyselín, kódujúcich takéto aktín-rezistentné varianty humánnej DNázy I

Podrobný opis

I. Definície

Ako je tu použité, pojmy „humánna DNáza I“, „natívna humánna DNáza I“ a „štandardný typ DNázy I“ sa týkajú polypeptidu, majúceho aminokyselinovú sekvenciu dospelej humánnej DNázy I, ako je uvedená na obr. 3.

„Variant“ alebo „aminokyselinová sekvencia variantu“ humánnej DNázy I je polypeptid, ktorý obsahuje aminokyselinovú sekvenciu odlišnú od natívnej humánnej DNázy I. Vo všeobecnosti variant bude mať minimálne 80 % sekvenčnú identitu (homológiu), výhodne minimálne 90 % sekvenčnú identitu, ešte výhodnejšie aspoň 95 % sekvenčnú identitu a najvýhodnejšie aspoň 98 % sekvenčnú identitu s natívnou humánnou DNázou I. Percento sekvenčnej identity je stanovené, napríklad, Fitch-om, et al., Proc. Nat. Acad. Sci. USA 80: 1382 - 1386 (1983), verziu algoritmu opísal Needleman, et al., J. Mol. Biol. 48: 443 - 453 (1970), po zoradení sekvencií na poskytnutie maximálnej homológie.

Pojmy „humánna DNáza I aktin-rezistentný variant“, „aktin-rezistentný variant“ a „aktin-rezistentný variant humánnej DNázy I“ sa týkajú variantu natívnej humánnej DNázy I, ktorá má (1) DNA-hydrolytickú aktivitu a (2) redukovanú viazaciu afinitu proti aktínu.

„DNA-hydrolytická aktivita“ sa týka enzymatickej aktivity natívnej humánnej DNázy I v hydrolyzujúcom (štiepiacom) substráte DNA za získania 5'-fosforylovaných oligonukleotidových koncových produktov. DNA-hydrolytická účinnosť je rýchlo stanovená niektorou z rôznych metód, známych v odbore, zahrnujúcich polyakrylamidovú a agarózovú gélovú elektroforézu, hyperchrómový test (Kunitz,

J. Gen. Physiol. 33: 349 - 362 (1950); Kunitz, J. Gen. Physiol. 33: 363 - 377 (1950)) alebo testom s metylovou zelenou (Kumick, Árch. Biochem. 29: 41 - 53 (1950); Sinicropi, et al., Anál. Biochem. 222: 351 - 358 (1994)).

„Viažuca afinita“ natívnej humánnej DNázy 1 alebo aktín-rezistentného variantu humánnej DNázy I proti aktínu sa týka schopnosti DNázy I nekovalentne sa naviazať na aktín. Viažuca afinita môže byť stanovená ktoroukoľvek z rozličných metód, známych v odbore, napríklad, ako opisuje Mannherz, et al., Eur. J. Biochem. 104: 367 - 379 (1980). Alternatívne, relatívne viazacie afinity rozličných DNáz (napríklad natívnej humánnej DNázy I a jej variantov) sú stanovené meraním naviazania DNáz na imobilizo vaný aktín v ELISA teste (opísaný v príklade 3), alebo porovnaním DNA-hydrolytickej aktivity DNáz v prítomnosti a bez aktínu (tiež opísané v príklade 3). Spôsoby opísané v príkladoch sú špeciálne vyhovujúce na skríning variantov humánnej DNázy I na rýchle identifikovanie takýchto variantov, ktoré majú zníženú viažucu afinitu proti aktínu.

„Humánna DNáza I aktin-rezistentný variant“, majúci „zníženú viazaciu afinitu proti aktínu“, je variant, majúci viazaciu aktivitu proti aktínu, ktorá jc relatívne nižšia ako afinita, s ktorou natívna humánna DNáza I viaže aktín, stanovené v porovnateľných podmienkach. Ak sa aktín-viažuci ELISA test, ako je opísaný v príklade 3, použije na stanovenie viazacej afinity humánnej DNázy I (natívnej alebo variantu) proti aktínu, potom aktin-rezistentný variant majúci „zníženú viazaciu afinitu proti aktínu“ bude ten, ktorý má hodnotu EC_So vyššiu, ako je hodnota natívnej humánnej DNázy I. V tomto pokuse aktín rezistentný variant bude mať typicky EC₅₀ hodnotu päťkrát až 100-krát vyššiu ako hodnota natívnej humánnej DNázy; ale aktín-rezistentné varianty, majúce EC₅₀ hodnotu viac ako 500-krát vyššiu ako hodnota natívnej humánnej DNázy I, sa tiež dajú rýchlo pripraviť, najmä viacnásobným adaptovaním aminokyselinových zvyškov natívnej humánnej DNázy I aminokyselinovej sekvencie (pozri, napríklad, obr. 5A, 5D).

„Mukolytická aktivita“ súvisí so znížením viskoelasticity (viskozity) spúta alebo iného biologického materiálu, napríklad ako sa pozorovalo pri spracovaní materiálu s natívnou humánnou DNázou I alebo variantom humánnej DNázy I. Mukolytická aktivita (účinnosť) sa rýchlo stanoví ktoroukoľvek z niektorých rôznych metód, známych v odbore, zahrnujúcich test kompaktnosti spúta (PCT Patent Publication WO 94/10567, zverejnená 11. mája 1994), testy využívajúce torzné kyvadlo (Janmey, J. Biochem. Biophys. Methods 22: 41 - 53 (1991), alebo ďalšie Teologické postupy.

„Polymerázová reťazová reakcia“ alebo „PCR“ vo všeobecnosti sa týka spôsobu amplifikácie (rozmnoženia) želanej nukleotidovej sekvencie in vitro, ako opisuje, napríklad, US pat. 4 683 195. Všeobecne, PCR spôsob zahrnuje opakované cykly syntézy predlžovania primeru, s použitím oligonukleotidových primerov schopných hybridizácie prednostne na matricovú nukleovú kyselinu.

„Bunka“, „hostiteľská bunka“, „bunková línia“ a „bunková kultúra“ sú tu navzájom zameniteľné používané a všetky takéto pojmy by mali byť chápané ako obsahujúce progén majúci pôvod v raste alebo kultivácii bunky. „Transformácia“ a „transefekcia“ sú zameniteľné používané a súvisia s procesom introdukcie (zavedenia) DNA do bunky.

„Použiteľné operatívne spojený“ sa týka kovalentného spojenia dvoch alebo viacerých DNA sekvencií prostriedkami enzymatickej ligácie alebo inakšie, v konfigurácii v pomere k jednému ďalšiemu, tak že môže byť splnená normálna funkcia sekvencií. Napríklad, DNA presekvencie alebo sekrečnej vedúcej sekvencie je operatívne spojená s DNA pre polypeptid, ak je vytvorený ako preproteín, ktorý sa podieľa na sekrécii polypeptidu; promótor alebo zosilňovač transkripcie (enhancer) je operatívne spojený s kódujúcou sekvenciou, ak ovplyvňuje transkripciu sekvencie; alebo miesto viažuce ribozóm je operatívne spojené s kódujúcou sekvenciou, ak je umiestnená tak, aby uľahčovala transláciu. Všeobecne, „operatívne spojený“ znamená, že DNA sekvencie, ktoré sa majú spojiť sú priľahlé a, v prípade sekrečnej vedúcej sekvencie, priľahlé a v čítacom rámci. Pripojenie sa dosiahne ligáciou na vhodných reštrikčných miestach. Ak takéto miesta neexistujú, potom sa použijú syntetické oligonukleotidové adaptory alebo linkery (spo jovníky), v spojení so štandardnými metódami rekombinantnej DNA.

Aminokyseliny sú tu identifikované tromi písmenami alebo jednopísmenovým označením, ako je uvedené. Asp D kyselina asparágová íle I izoleucín Thr T treonín Leu L leucín

Ser S serin Tyr Y tyrozin

Glu E kyselina glutamová Phe F fenylalanín

Pro P prolín

Gly G glycín

Ala A alanín

Cys C cysteín

Val V valín Met M metionín

His H histidín

Lys K lyzín

Arg R arginín

Trp W tryptofán

Gin Q glutamín Asn N asparagín

II. Selekcia aktín-rezistentných variantov

Predložený vynález je založený na štúdiu štruktúry, aktín viažucich (viazacích) vlastností, DNA-hydrolytickej aktivity a mukolytickcj aktivity aminokyselinovej sekvencia variantov humánnej DNázy I. Aktín-rezistentné varianty predloženého vynálezu majú DNA-hydrolytickú aktivitu, ale viazanie aktínu s nižšou afinitou ako natívna humánna DNáza I. Zníženie vo viazaní aktínu sa výhodne dosiahne vytvorením mutácií na a/alebo okolo takýchto aminokyselinových zvyškov v natívnej humánnej DNáze I, ktoré sa javia ako ovplyvňujúce viazanie aktínu, zahrnujúc, napríklad, Glul3, His44, Leu45, Val48, Gly49, Leu52, Asp53, Asn56, Asp58, His64, Tyr65, Val67, Ser68, Glu69, Pro70, Ser94, Tyr96 a Alal 14 zvyšky natívnej humánnej DNázy I (číslo nasledujúce po trojpísmenovom aminokyselinovom označení indikuje špecifickú polohu aminokyselinového zvyšku v sekvencii na obr. 1).

Existuje množstvo spôsobov, ktorými sa môžu vyrobiť aktín-rezistentné varianty humánnej DNázy I. V jednom príklade tohoto vynálezu sa aktín-rezistentný variant pripraví introdukciou buď jednou alebo viacnásobnými aminokyselinovými substitúciami, inzerciami (vsunutím) a/alebo deléciami (vynechaniami) na, alebo priľahlých k (tzn. v približne piatich z aminokyselinových zvyškov) takým aminokyselinovým zvyškom natívnej humánnej DNázy I, ktoré ovplyvňujú viazanie aktínu. Niektoré ilustratívne príklady takýchto mutácií sú nasledujúce: D53R, D53K, D53Y, D53A, Y65A, Y65E, Y65R, V67E, V67K, E69R, D53R:Y65A, D53R:E69R, H44A:D53R:Y65A, H44A:Y65A:E69R (pozri obr. 2 až 6).

V ďalšom príklade tohto vynálezu sa aktín-rezistentný variant pripraví introdukčnou mutáciou(-iami), ktorá vytvorí nové miesto glykozylácie na (alebo na priľahlých) (t. j. v asi piatich z aminokyselinových zvyškov) aminokyselinových zvyškoch natívnej humánnej DNázy I, ktoré ovplyvňujú viazanie aktínu. Napríklad, miestom riadená mutagenézaje použitá na introdukciu jednej z tripeptidových sekvencii, asparagín-X-serín alebo asparagin-X-treonín (kde X je akákoľvek aminokyselina s výnimkou prolínu), ktoré sú rozpoznávacími sekvenciami na enzymatické naviazanie uhľovodíkovej skupiny na asparagínovú stranu reťazca. Creighton, Proteins, str. 76 - 78 (W. H. Freeman, 1984). Stérická zábrana, vyskytujúca sa medzi uhľovodíkovou skupinou výsledného N-glykozylovaného variantu DNázy I a aktínom môže znížiť alebo zamedziť viazanie aktínu a následne inhibíciu DNázy I DNA-hydrolytickej aktivity, pri porovnaní s natívnou humánnou DNázou I. Niektoré ilustratívne príklady takýchto mutácii na zavedenie nového glykozylačného miesta sú nasledujúce: H44N, D58S, D58T, V66N, H44N:T46S, H64N:V66S, H64N:V66S, H64N:V66T, Y65N:V67S, Y65N:V67T, V66N:S68T,

V67N:E69S, V67N:E69T, S68N:P70S, S68N:P70T,

S94N:Y96S, S94N:Y96T.

Ľubovoľne, v spojení s takýmito mutáciami na vytvorenie nového miesta glykozylácie, prirodzene sa vyskytujúce miesto glykozylácie v polohách 18 a/alebo 106 v natívnej humánnej DNáza I aminokyselinovej sekvencii môže byť vynechané, v závislosti od rozsahu glykozylácie želanej v aktín-rezistentom variante.

V ďalšom riešení tohto vynálezu miestom riadená mutagenéza sa použije na introdukciu zvyškov na, (alebo na priľahlých) (t. j. v asi piatich z aminokyselinových zvyškov) aminokyselinových zvyškoch natívnej humánnej DNázy I, ktoré sú obsiahnuté pri viazaní aktínu a ktoré sú vhodné na posttranslačnú modifikáciu biologicky alebo chemicky (pozri nižšie). Means, et al., Chemical Modifícation of Proteins (Holden-Day, 1971); Glazer, et al., Chemical Modification of Proteins: Selected Methods and Analvtical Procedures (Elsevier, 1975); Creighton, Proteins, str. 70 - 87 (W. H. Freeman, 1984); Lundblad, Chemical Reagents for Proteín Modification (CRC Press, 1991). Takéto posttranslačné modifikácie môžu predstavovať stérickú zábranu alebo zmenené elektrostatické vlastnosti v DNáze I, ktoré budú znižovať alebo zabraňovať viazaniu aktínu a následnej inhibícii DNA-hydrolytickej aktivity, pri porovnaní s natívnou humánnou DNázou I. Napríklad, cysteínový zvyšok môže byť zavedený na (alebo na priľahlý) zvyšok natívnej humánnej DNázy I, ktorý je obsiahnutý pri viazaní aktínu. Voľný tiol cysteínového zvyšku môže tvoriť intermolekulový disulfidický spoj (mostík) a s ďalším takým variantom DNázy I vytvoriť dimér DNázy I, alebo môžu byť modifikované, napríklad, so špecifickým tiolovým alkylačným činidlom. Niektorými ilustratívnymi príkladmi takýchto mutácií sú: H44C, L45C, V48C, G49C, L52C, D53C, N56C, Y65C, V67C, E69C, Al 14C.

Kvôli jednoduchosti sú substitúcie, inzercie a/alebo delécie v aminokyselinovej sekvencii natívnej humánnej DNázy I zvyčajne vykonané introdukčnými mutáciami do príslušnej nukleotidovej sekvencie DNA kódujúcej natívnu humánnu DNázu I, napríklad miestne riadenou mutagenézou. Expresia zmenenej DNA potom vedie k produkcii variantu humánnej DNázy I, majúceho požadovanú (nenatívnu) aminokyselinovú sekvenciu.

Zatiaľ čo akákoľvek technika, známa v odbore, môže byť použitá na miestne riadenú mutagenézu, napríklad ako opisuje Sambrook, et al., Molecular Cloning: A Laboratorv Manual, Second Edition (Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York (1989)), oligonukleotidom-riadená mutagenéza je preferovaným spôsobom prípravy variantov humánnej DNázy I tohto vynálezu. Tento spôsob, ktorý je dobre známy v odbore (Zoller, et al., Meth. Enz. JOO: 4668

- 500 (1983); Zoller, et al., Meth. Enz. 154: 329 - 350 (1987); Carter, Meth. Enz. 154: 382 - 403 (1987); Kunkel, et al., Meth. Enzymol 154: 367 - 382 (1987); Horwitz, et al., Meth. Enz. 185: 599 - 611 (1990)), je vhodný najmä na vyrobenie substitučných variantov, hoci môže byť taktiež výhodne použitý na prípravu variantov deléciou (vyštiepením, vynechaním) a inzerciou (vsunutím).

Technika miestne riadenej mutagenézy typicky využíva fágový vektor, ktorý existuje v dvoch formách - jednovláknovej a dvojvláknovej. Typické vektory, užitočné pre miestne riadenú mutagenézu, zahrnujú vektory, ako je M13 fág a plazmidové vektory, ktoré obsahujú jednovláknového fága replikačného pôvodu (Messing, et al., Meth. Enzymol. 101: 20 - 78 (1983); Veira, et al., Meth. Enzymol. 153: 3 - 11 (1987); Short, et al., Nuc. Acids. Res. 16: 7583 -

- 7600 (1988)). Replikácia týchto vektorov vo vhodných hostiteľských bunkách vedie k syntéze jednovláknovej

DNA, ktorá môže byť použitá na miestne riadenú mutagenézu.

V skratke, pri uskutočňovaní miestne riadenej mutagenézy DNA kódujúcej natívnu humánnu DNázu I (alebo jej variant), je DNA modifikovaná prvou hybridizáciou oligonukleotidu kódujúceho želanú mutáciu jedného vlákna DNA. Po hybridizácii je použitá DNA polymeráza na syntetizovanie celého druhého vlákna, využijúc hybridizovaný oligonukleotid ako primer a využijúc jedno vlákno DNA ako templát. Teda, oligonukleotid kódujúci želanú mutáciu je zabudovaný vo výslednej dvojvláknovej DNA.

Oligonukleotidy na použitie ako hybridizačné sondy alebo primery môžu byť pripravené akoukoľvek vhodnou metódou, ako je purifikácia prirodzene sa vyskytujúcej DNA alebo in vitro syntézou. Napríklad, oligonukleotidy sa dajú rýchlo syntetizovať s využitím rôznych techník v organickej chémii, ako sú opísané v Narang, et al., Meth. Enzymol. 68: 90 - 98 (1979); Brown, et al., Meth. Enzymol. 68: 109 - 151 (1979); Caruthers, et al., Meth. Enzymol. 154: 287 - 313 (1985). Všeobecný prístup k selekcii vhodnej hybridizačnej sondy alebo primeru je veľmi dobre známy. Keller, ct al., DNA Probes, str. 11 - 18 (Stockton Press, 1989). Typicky bude hybridizačná sonda alebo primer obsahovať 10-25 alebo viac nukleotidov a bude zahrnovať aspoň 5 nukleotidov na obidvoch stranách sekvencie kódujúcej želanú mutáciu tak, aby sa zaistilo, že oligonukleotid bude prednostne hybridizovať na želanom mieste molekuly matrice jednovláknovej DNA.

Samozrejme, miestne riadená mutagenéza môže byť použitá na introdukciu viacnásobných mutácií substitúciou, inzerciou alebo deléciou vo východiskovej DNA. Ak miesta, na ktorých sa majú mutácie uskutočniť, sú lokalizované blízko seba, mutácie môžu byť zavedené súčasne s použitím jedného oligonukleotidu, ktorý kóduje všetky želané mutácie. Ale ak miesta, ktoré majú byť mutované, sú rozmiestnené od seba v určitej vzdialenosti (oddelené viac ako desiatimi nukleotidmi), je ťažšie generovať jeden oligonukleotid, ktorý kóduje všetky želané zmeny. Miesto toho môže byť využitá jedna z dvoch alternatívnych metód.

V prvej metóde je generovaný separátny oligonukleotid pre každú žiaducu mutáciu. Oligonukleotidy sú potom naraz teplotné hybridizované na jednovláknovú matricovú (templátovú) DNA a druhé vlákno DNA, ktoré je syntetizované z matrice, bude kódovať všetky zo žiaducich aminokyselinových substitúcií.

Alternatívna metóda obsahuje dva alebo viac cyklov mutagenézy na produkciu želaného variantu. Prvý cyklus je taký, ako je opísané pri vykonávaní jednej mutácie. Druhý cyklus mutagenézy využíva zmenenú DNA, produkovanú v prvom cykle mutagenézy ako templát. Teda, tento templát už obsahuje jednu alebo viac mutácií. Oligonukleotid kódujúci ďalšiu(e) želanú(é) aminokyselinovú(é) substitúciu(e) je potom teplotné hybridizovaný na tento templát a výsledné vlákno DNA teraz kóduje mutácie obidvoch cyklov - prvého aj druhého - mutagenézy. Výsledná DNA môže byť použitá ako matrica v treťom cykle mutagenézy, atď.

PCR mutagenéza (Higuchi, in PCR Protocols, str. 177 - 183 (Academic Press, 1990); Vallette, et al., Nuc. Acids Res. 17: 723 - 733 (1989); je tiež vhodná na vyrobenie variantov humánnej DNázy I. Stručne, keď sa použijú malé množstvá matricovej DNA ako východiskové materiály v PCR, primery, ktoré sa nepatrne odlišujú v sekvencii od príslušného regiónu v matricovej DNA, môžu byť použité na generovanie relatívne veľkých množstiev špecifického fragmentu DNA, ktorý sa líši od sekvencie matrice len na miestach, kde sa primery líšia od matrice. Na zavedenie mutácie do plazmidovej DNA sekvencia jedného z primerov obsahuje, napríklad, želanú mutáciu a je označená na hybridizovanie jedného vlákna plazmidovej DNA na mieste mutácie; sekvencia druhého primeru musí byť zhodná s nukleotidovou sekvenciou protiľahlého vlákna plazmidovej DNA, ale táto sekvencia môže byť lokalizovaná kdekoľvek pozdĺž plazmidovej DNA. Ale je výhodné, keď sekvencia druhého primeru je umiestnená v 200 nukleotidoch z prvého primeru tak, že na konci celej amplifikovanej oblasti DNA viazanej primermi môže byť ľahko sekvenovaná. PCR amplifikácia využívajúca pár primerov ako jeden, už práve opísaný, sa prejavuje v populácii DNA fragmentov, ktoré sa líšia na mieste mutácie špecifikovanom primerom, a možno na iných miestach, pretože kopírujúca matrica je trocha náchylná na chyby. Wagner, et al., m PCR Topics, str. 69-71 (Springer-Verlag, 1991).

Ak pomer matrice k amplifikovanej DNA produktu je extrémne nízky, väčšina DNA fragmentov produktu zabuduje želanú(é) mutáciu(e). Táto DNA produktu sa použije na premiestnenie príslušnej oblasti v plazmide, ktorý slúžil ako PCR matrica, využijúc metódy štandardnej rekombinantnej DNA. Mutácie na oddelených miestach môžu byť zavedené súčasne buď využitím mutantu druhého primeru alebo vykonaním druhej PCR s rôznymi primermi mutantu a ligáciou dvoch výsledných PCR fragmentov súčasne na plazmidový fragmet v troj- (alebo viac-)stupňovej ligácii.

Ďalší spôsob prípravy variantov, kazetová mutagenéza, je založený na technológii opísanej vo Wels, et al., Gene 34: 315 - 323 (1985). Východiskovým materiálom je plazmid (alebo iný vektor), zahrnujúci DNA sekvenciu, ktorá má byť zmenená. Kodón(y) vo východiskovej DNA, ktorá má byť zmenená, sú identifikované. Tu musí byť typické miesto pre reštrikčnú endonukleázu na každej strane identifikovaného(ých) miesta(miest) mutácie. Ak žiadne takéto reštrikčné miesta neexistujú, môžu byť vytvorené s použitím opísanej metódy oligonukleotidom sprostredkovanej mutagenézy na ich vytvorenie na patričných miestach v DNA. Plazmidová DNA je vyrezaná na týchto miestach kvôli linearizácii. Dvojvláknový oligonukleotid kódujúci sekvenciu DNA medzi reštrikčnými miestami, ale obsahujúci želanú mutáciu(e) je syntetizovaný s využitím štandardných postupov, v ktorých dve vlákna oligonukleotidu sú syntetizované oddelene a potom spolu hybridizované s využitím štandardných technológií. Tomuto dvojvláknovému oligonukleotidu sa hovorí kazeta. Táto kazeta je konštruovaná tak, že má 5 a 3 konce, ktoré sú kompatibilné s koncami linearizovaného plazmidu, takže tento sa môže priamo ligovať na plazmid. Výsledný plazmid obsahuje zmenenú DNA sekvenciu.

Prítomnosť mutácie(ií) v DNA sa stanoví spôsobmi, ktoré sú v odbore známe a zahrnujú reštrikčné mapovanie a/alebo DNA sekvenovanie. Výhodnou metódou na sekvenovanie DNA je metóda dideoxy reťazovej terminácie podľa Sangera, et al., Proc Nat. Acad. Sci. USA 72: 3918 - 3921 (1979).

DNA kódujúca variant humánnej DNázy I je vložená do replikovateľného vektora na ďalšie klonovanie a expresiu. „Vektory“ sú plazmidy a iné DNA, ktoré sú schopné replikácie v hostiteľskej bunke samy osebe sú užitočné na uskutočnenie dvoch funkcií v spojení s kompatibilnými hostiteľskými bunkami (vektor-hostiteľský systém). Jednou funkciou je uľahčiť klonovanie nukleovej kyseliny, ktorá kóduje variant humánnej DNázy I, tzn. produkovať užitočné množstvá nukleovej kyseliny. Druhou funkciou je viesť expresiu variantu humánnej DNázy I. Jedna alebo obidve tieto funkcie sú uskutočnené vektorom v zvláštnej hostiteľskej bunke, použitej na klonovanie alebo expresiu. Vektory budú obsahovať rozličné zložky, v závislosti od funkcie, ktorú majú vykonať.

Aby sa produkoval variant humánnej DNázy I, bude expresný vektor obsahovať DNA kódujúci variant, ako už bolo uvedené, operatívne spojený s promótorom a ribozóm viažucim miestom. Variant je potom vytvorený priamo v rekombinantnej bunkovej kultúre, alebo ako fúzia s heterologickými polypeptidmi, výhodne signálnou sekvenciou alebo iným polypeptidom, ktorý má špecifické štiepiace miesto na spojení medzi heterologickým polypeptidom a variantom humánnej DNázy I.

Preferovanými hostiteľskými bunkami iniciálnych klonovacích krokov podľa tohto vynálezu sú prokaryoty (napríklad E. coli a ďalšie baktérie). Sú použiteľné najmä na rýchlu produkciu veľkých množstiev DNA, na produkciu templátov jednovláknovej DNA používaných na miestne riadenú mutagenézu a na sekvenovanie DNA generovaných variantov. Prokaryotické hostiteľské bunky môžu byť taktiež použité na expresiu DNA kódujúcej variant humánnej DNázy I. Polypeptidy, ktoré sú produkované v prokaryotických bunkách, typicky budú neglykozylované.

Okrem toho varianty humánnej DNázy I podľa tohto vynálezu môžu byť vytvorené v eukaryotických hostiteľských bunkách, zahrnujúc eukaryotické mikróby (napríklad kvasinky) alebo bunky odvodené zo živočíšneho alebo iného mnohobunkového organizmu (napríklad ovariálne bunky čínskeho škrečka a iné cicavčie bunky) alebo v živých zvieratách (napríklad dobytok, kozy, ovca).

Klonovacie a expresné metodológie sú v odbore veľmi dobre známe. Príkladmi prokaryotických a eukaryotických hostiteľských buniek a expresných vektorov, vhodných na použitie pri produkcii variantov humánnej DNázy I podľa predloženého vynálezu sú napríklad tie, ktoré sú opísané v Shak, PCT Patent Publication WO 90/07572 (zverejnená

12. júla 1990).

Ak sú prokaryotické bunky alebo bunky, ktoré obsahujú podstatné konštrukcie bunkovej steny, použité ako hostitelia, preferovanými spôsobmi transfekcie buniek DNA je spôsob spracovania vápnikom, ktorý opísali Cohen et al., Proc. Natl. Acad. Sci. 69: 2110 - 2114 (1972) alebo polyetylénglykolový spôsob, ktorý opísali Chung, et ah, Nuc. Acids. Res. 16: 3580 (1988). Ak sú ako hostiteľ použité kvasinky, transfekcia sa vo všeobecnosti vykoná s použitím polyetylénglykolu, ako uvádza Hinnen, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 75: 1929 - 1933 (1978). Ak sa ako hostiteľské bunky použijú cicavčie bunky, transfekcia sa vo všeobecnosti uskutočňuje zrážacou metódou fosforečnanom vápenatým, Graham, et al., Virology 52: 546 (1978), Gorman, et al., DNA and Proteín Eng. Tech. 2: 3 - 10 (1990). Ale aj ďalšie známe spôsoby na zavedenie DNA do prokaryotických a eukaryotických buniek, ako napríklad jadrová injekcia, elektroporácia alebo fúzia protoplastov, sú tiež vhodné na použitie v tomto vynáleze.

Obzvlášť užitočné v tomto vynáleze sú expresné vektory, ktoré sa starajú o dočasnú expresiu v cicavčích bunkách DNA, kódujúcej varianty humánnej DNázy I. Všeobecne, dočasná expresia zahrnuje použitie expresného vektora, ktorý je schopný účinnej replikácie v hostiteľskej bunke, takže hostiteľská bunka nahromadí veľa kópií expresného vektora a v dôsledku toho syntetizuje vysoké hladiny želaného polypeptidu kódovaného expresným vektorom. Systémy dočasnej expresie, pozostávajúce z vhodného expresného vektora a hostiteľskej bunky, berú do úvahy praktickú pozitívnu identifikáciu polypeptidov, kódovaných DNA, ako aj rýchly skríning takýchto polypeptidov na požadované biologické alebo fyziologické vlastnosti. Wong, et al., Science 228: 810 - 815 (1985); Lee, et al., Proc. Nat. Acad.

Sci. USA 82: 4360 - 4364 (1985); Yang, et al., Celí 47: 3 - 10 (1986). Teda, dočasné expresné systémy sú vhodné na použitie na expresiu DNA, kódujúcej aminokyselinovú sekvenciu variantov natívnej humánnej DNázy I, v spojení s testami na identifikovanie týchto variantov, ktoré viažu aktín s nižšou afinitou ako natívna DNáza I, ako aj s testami na vyhodnotenie týchto variantov s DNA-hydrolytickou aktivitou.

Variant humánnej DNázy I je výhodne vylučovaný z buniek, v ktorých je vytvorený, a v tomto prípade sa získa späť z kultivačného média, v ktorom hostiteľské bunky rastú. V tom prípade môže byť žiaduce, aby bunky rástli v kultivačnom médiu bez séra, pretože neprítomnosť sérových proteínov a iných zložiek séra v médiu môže uľahčiť purifikáciu variantu. Ak sa nevylučuje, potom sa variant humánnej DNázy I získa naspäť z lyzátov hostiteľských buniek. Keď je variant vytvorený v hostiteľskej bunke iného ako ľudského pôvodu, variant bude kompletne bez proteínov ľudského pôvodu. V každom prípade bude potrebné purifikovať variant od rekombinantných bunkových proteínov, aby sa získali podstatne homogénne preparáty variantu humánnej DNázy I. Na terapeutické použitie budú mať purifikované varianty výhodne vyššiu čistotu ako 99 % (napríklad, akékoľvek ďalšie proteíny budú pozostávať z menej ako 1 % celkového proteínu v purifikovanej zmesi).

Všeobecne, purifikácia variantu humánnej DNázy I je uskutočnená s využitím diferenciálnych fyzikálnochemických vlastností variantov pri porovnaní s kontaminantmi, s ktorými môže byť spojená. Napríklad, ako prvý krok sa centrifuguje kultivačné médium alebo lyzát hostiteľských buniek, aby sa odstránili najmä pozostatky buniek. Variant humánnej DNázy I sa potom zbavuje znečistenín rozpustných proteínov a polypeptidov, napríklad zrážaním síranom amónnym alebo etanolom, gélovou filtráciou (molekulová vytesňovacia chromatografia), ionexovou chromatografiou, hydrofóbnou chromatografiou, imunoafinitnou chromatografiou (napríklad s použitím kolóny, pozostávajúcej z protilátok proti humánnej DNáze I naviazaných na Sepharose), zachytávacou kationexovou výmennou chromatografiou (Frenz, et al., PCT Patent Publication WO 93/25670, zverejnená 23. decembra 1993), reverznou fázovou HPLC a/alebo gélovou elektroforézou.

Je samozrejmé, že odborník v odbore pochopí, že metódy čistenia, ktoré sú použité pre natívnu humánnu DNázu I, si môžu vyžadovať nejakú modifikáciu, aby boli použiteľné na purifikáciu variantu humánnej DNázy I, zdôvodnenú štrukturálnymi alebo inými rozdielmi medzi natívnymi proteínmi a proteínmi variantu. Tak napríklad v niektorých hostiteľských bunkách (najmä v bakteriálnych hostiteľských bunkách) môže byť variant humánnej DNázy I vytvorený na začiatku v nerozpustnej, agregovanej forme (spomenuté v stave techniky ako „refŕaktilné telieska“ alebo „inklúzne telieska“), v prípade ktorej bude nevyhnutná solubilizácia a renaturácia variantu humánnej DNázy I v priebehu jeho čistenia. Spôsoby solubilizácie a renaturácie refraktilných teliesok rekombinantného proteínu sú v odbore známe (pozri, napríklad, Builder, et al., US patent 4 511 502).

V ďalšom príklade tohto vynálezu sa varianty humánnej DNázy I pripravia uskutočnením kovalentných modifikácií priamo v proteíne natívnej alebo variantu humánnej DNázy I. Takéto modifikácie sa robia kvôli aktín-viažucej (viažucej) účinnosti alebo kvôli inej vlastnosti proteínu (napríklad stabilite, biologickému polčasu rozpadu, imunogenicite) a môžu byť urobené namiesto, alebo okrem, mutácii aminokyselinovej sekvenčnej substitúcie, inzercie a delécie, opísaných skôr.

Kovalentné modifikácie môžu byť zavedené reakciou cieľových aminokyselinových zvyškov natívnej DNázy I alebo variantu DNázy I s organickým derivatizačným činidlom, ktoré je schopné reakcie s vybranými aminokyselinovými postrannými reťazcami alebo N- alebo C-koncovými zvyškami. Vhodné derivatizačné činidlá a spôsoby sú v odbore dobre známe.

Tak napríklad cysteinylové zvyšky najčastejšie reagujú s a-halogénacetátmi (a zodpovedajúcimi amínmi), ako je kyselina chlóroctová alebo chlóracetamid, za vzniku karboxymetyl alebo karboxyamidometyl derivátov. Cysteinylové zvyšky sú derivatizované reakciou s brómtrifluóracetónom, a-bróm-P-(5-imidazoyl)propiónovou kyselinou, chlóracetylfosfátom, N-alkylmaleínimidom, 3-nitro-2-pyridyldisulfídom, metyl-2-pyridyldisulfidom, p-chlórmerkuribenzoátom, 2-chlórmerkuri-4-nitrofenolom alebo chlór-7-nitrobenzo-2-oxa-l ,3-diazolom.

Histidylové zvyšky sú derivatizované reakciou s dietylpyrokarbonátom pri pH 5,5-7,0, pretože toto činidlo je relatívne špecifické pre histidylový bočný reťazec. Použiteľný je aj para-brómfcnacylbromid; reakcia sa výhodne uskutočňuje v O,1M kakodylane sodnom pri pH 6,0.

Lyzinylové a aminokoncové zvyšky reagujú so sukcinanhydridom alebo s anhydridom inej karboxylovej kyseliny. Derivatizácia týchto činidiel má účinok na reverziu náboja lyzinylových zvyškov. Iné vhodné činidlá na derivatizáciu zvyškov, obsahujúcich α-amino, zahrnujú imidoestery, ako je metylpikolínimidát; pyridoxalfosfát; pyridoxal; chlórbórhydrid; kyselina trinitrobenzénsulfónová; O-dimetylizomočovina; 2,4-pentándión a katalyzovanú transaminázovú reakciu s glyoxalátom.

Arginylové zvyšky sú modifikované reakciou s jedným alebo niekoľkými konvečnými činidlami, medzi iným fenylglyoxalom, 2,3-butándiónom, 1,2-cyklohexándiónom a mnhydrínom. Derivatizácia arginínových zvyškov vyžaduje, aby sa reakcia uskutočnila v alkalických podmienkach kvôli vysokej pK_a guanidínovej funkčnej skupiny. Okrem toho tieto činidlá môžu reagovať so skupinami lyzinu ako aj s epsilon-aminoskupinou arginínu.

Bočné karboxylové skupiny (aspartyl alebo glutamyl) sú selektívne modifikované rekaciou s karbodiimidmi (R-N=C=N-R'), kde R a R sú rozličné alkylskupiny, ako je l-cyklohexyl-3-(2-morfolinyI-4-etyl)karbodiimid alebo 1-etyl-3-(4-azonia-4,4-dimetylpentyl)karbodiimid. Aspartylové a glutamylové zvyšky sú ďalej konvertované na asparaginylové a glutaminylové zvyšky reakciou s amónióvými iónmi.

Kovalentné pripájanie glykozidov na aminokyselinové zvyšky proteínu môže byť použité na modifikáciu alebo na zvyšovanie počtu alebo profilu uhľovodíkových zvyškov, najmä na, alebo pri, spojoch týchto zvyškov, ktoré sú zahrnuté pri viazaní aktínu. V závislosti od použitia kopulačného spôsobu sa môže(u) pridať cukor(kry) k (a) arginínu a histidínu, (b) voľnej karboxylovej skupine, (c) voľnej sulfohydrylovej skupine, ako je skupina cysteínu, (d) voľnej hydroxylovej skupine, ako je skupina serínu, treonínu alebo hydroxyprolínu, (e) aromatickým zvyškom, ako sú zvyšky fenylalanínu, tyrozínu alebo tryptofánu alebo (f) amidovej skupine glutamínu. Vhodné spôsoby sú opísané, napríklad, v PCTpatentovej publikácii WO 87/05330 (zverejnená 11. septembra 1987) a v Aplin, et al., CRC Crit. Rev. Biochem. str. 259 - 306 ) 1981).

Kovalentná väzba činidiel, ako je polyetylénglykol (PEG) alebo humánny sérumalbumín, na varianty humánnej DNázy I môže znížiť imunogenicitu a/alebo toxicitu variantu a/alebo predĺžiť jeho polčas rozpadu, ako sa zistilo pri iných proteínoch. Abuchowski, et al., J. Biol. Chem.

252: 3582 - 3586 (1977); Poznansky, et al., FEBS Ĺetters 239: 18 -22 (1988); Goodson, et al., Biotechnology 8: 343 - 346 (1990); Katre, J. Immunol 144: 209 - 213 (1990); Harris, Polyetyléne Glycol Chemistry (Plénum Press, 1992). Okrem toho modifikácia natívnej humánnej DNázy I alebo jej variantu týmito činidlami na, alebo v susedstve s (t.zn. asi v piatich z aminokyselinových zvyškov) aminokyselinovým zvyškom, ktorý pôsobí aktín-viažuco, môže viesť k aktín-rezistentným variantom.

V ďalšom riešení aktín-rezistentný variant humánnej DNázy I môže obsahovať mutáciu na Asn zvyšku, ktorý sa vyskytuje na pozícii 74 natívnej humánnej DNázy I aminokyselinovej sekvencie (napríklad N74D, N74K alebo N74S mutácia), aby sa znížila alebo aby sa zabránilo deamidácii variantu DNázy I. Frenz, et al., PCT Patent Publication WO 93/25670, zverejnená 23. decembra 1993. Ako ďalší príklad môže aktín-rezistentný variant humánnej DNázy I obsahovať mutáciu aminokyselinovej sekvencie alebo inú kovalentnú modifikáciu, ktorá zníži náchylnosť variantu na degradáciu proteázami (napríklad neutrofilnou elastázou), ktoré môžu byť prítomné v spútu alebo v iných biologických materiáloch.

DNA-hydrolytická aktivita a aktín-viažuca afinita variantov humánnej DNázy f pripravených, ako je opísané skôr, sa rýchlo stanoví s využitím testov a spôsobov známych v odbore a tu opísaných. Akýkoľvek takýto variant, ktorý má DNA-hydrolytickú aktivitu a zníženú viažucu aktivitu pre aktín (ako je definované), je aktín-rezistentným variantom, spadajúcim do rozsahu tohto vynálezu.

Aktín-rezistentné varianty humánnej DNázy I tohto vynálezu sa použijú na zníženie viskoelasticity materiálu, obsahujúceho DNA, ako je spútum, hlien alebo iné pľúcne sekréty (výlučky). Takéto varianty sú užitočné predovšetkým na liečenie pacientov s pľúcnymi ochoreniami, ktorí majú abnormálnu viskóznu (lepkavú) alebo zhustenú sekréciu a v podmienkach, ako sú akútne alebo chronické bronchiálno-pľúcne choroby, zahrnujúce infekčné zápaly pľúc, bronchitídu alebo tracheobronchitídu, bronchoektáziu, cystickú fibrózu, astmu, tuberkulózu a hubovité infekcie. Na takúto liečbu sa roztok alebo jemne rozdrobený suchý preparát aktín-rezistentného variantu dodá bežným spôsobom do vzduchových ciest (napríklad do priedušiek) alebo pľúc pacienta, napríklad aerosolizáciou.

Aktín-rezistentné varianty sú taktiež užitočné na doplnkovú liečbu abscesov alebo ťažkých uzavretých infekcii pri stavoch, ako sú empyema, meningitída, absces, peritonitída, sinusitída, otitída, periodontitída, perikarditída, pankreatitída, cholelitiáza, endokarditída a septická artritída, ako aj na topickú liečbu v rôznych druhoch zápalových a infikovaných lézií, ako sú infikované lezie pokožky a/alebo slizníc, chirurgických rán, ulceratívnych lézií a popálenín. Aktín-rezistentný variant môže zlepšiť účinnosť antibiotík, použitých pri liečení takýchto infekcií (napríklad účinnosť gentamycínu je rapídne znížená reverzibilným viazaním na intaktnú DNA).

Natívna humánna DNáza a jej aktín-rezistentné varianty môžu byť užitočné aj na liečenie systémového lupus erythematosus (SLE), život ohrozujúceho autoimunitného ochorenia, charakterizovaného produkciou rozmanitých autoprotilátok. DNA je hlavnou antigénnou zložkou imunitných súborov. V tomto prípade môže byť humánna DNáza I (Natívna alebo variant) podávaná systémovo, napríklad intravenóznou, subkutánnou, intratekálnou alebo intramuskulámou cestou postihnutému pacientovi.

Natívna humánna DNáza a jej aktín-rezistentné varianty môžu byť taktiež užitočné na prevenciu nového rozvinutia a/alebo zhoršenia dýchacích infekcií, ktoré sa môžu

Nasledujúce príklady sú ponúkané len ako spôsob ilustrácie a v žiadnom prípade sa nemajú chápať ako akýmkoľvek spôsobom obmedzujúce vynález. Všetky patenty a literárne odkazy, tu citované, sú výslovne začlenené.

odohrať u pacientov s cystickou fibrózou, chronickou bronchitídou, astmou, zápalom pľúc alebo inými pľúcnymi ochoreniami alebo u pacientov, u ktorých sa pri dýchaní napomáha s ventilátorom alebo iných mechanickým zariadením alebo u iných pacientov pri riziku vyvinutia respiračných infekcií, napríklad u pacientov po chirurgickom zákroku.

Aktin-rezistentné varianty môžu byť spracované do aplikačných foriem spôsobmi, známymi na prípravu farmaceutický použiteľných kompozícií. Výhodnou terapeutickou kompozíciou je roztok aktín-rezistentného variantu v tlmivom alebo netlmivom vodnom roztoku, výhodne v izotonickom fyziologickom roztoku, ako je 150 mM chloridu sodného obsahujúceho 1,0 mM chloridu vápenatého pri pH 7. Tieto roztoky sú obzvlášť prispôsobiteľné na použitie v komerčne dostupných nebulizátoroch, zahrnujúcich dýzové (hubicové) a ultrazvukové nebulizátory, použiteľné na podanie priamo do vzduchových ciest alebo pľúc postihnutého pacienta.

V inom príklade terapeutická zmes pozostáva zo suchého prášku aktín-rezistentného variantu, výhodne pripraveného rozprašovacím sušením roztoku aktín-rezistentného variantu, v podstate opísaného v US patentovej prihláške 08/206,020 (podaná 4. marca 1994), ktorá je v konaní.

V ďalšom príklade terapeutická zmes pozostáva z buniek, aktívne produkujúcich aktín-rezistentný variant humánnej DNázy I. Takéto bunky môžu byť priamo zavedené do tkaniva pacienta alebo môžu byť enkapsulované v pórovitých membránach, ktoré sa potom pacientovi implantujú, v obidvoch prípadoch zaisťujúc dodanie aktín-rezistentného variantu do oblasti v tele pacienta, kde je potrebný nárast koncentrácie DNA-hydrolytickej aktivity. Napríklad, vlastné bunky pacienta by mohli byť transformované, buď in vivo alebo ex vivo, DNA kódujúcou aktín-rezistentný variant humánnej DNázy I, a potom použité na produkciu DNázy I priamo v pacientovi.

Terapeuticky účinné množstvo aktín-rezistentného variantu humánnej DNázy I bude závisieť, napríklad, od obsahu DNA a aktínu v materiáli, ktorý má byť ošetrený, od cieľov liečby, aplikačnej cesty a od stavu pacienta. Pre terapeuta bude preto nevyhnutné titrovať dávku a modifikovať spôsob aplikácie tak, ako si to vyžaduje dosiahnutie optimálneho terapeutického efektu. Vzhľadom na zníženú viazaciu afinitu pre aktín a následný nárast DNA-hydrolytickej aktivity v prítomnosti aktínu v pomere k natívnej humánnej DNáze I, množstvo aktín-rezistentného variantu požadovaného na dosiahnutie terapeutického účinku môže byť menšie ako množstvo natívnej humánnej DNázy I potrebné na dosiahnutie rovnakého účinku za rovnakých podmienok. Vo všeobecnosti terapeuticky účinné množstvo aktín-rezistentného variantu bude dávkou približne od 0,1 pg do 5 mg variantu na kilogram telesnej hmotnosti pacienta, podanou vo farmaceutickej zmesi, ako už bolo opísané.

Variant aktín-rezistentnej DNázy I sa dá ľubovoľne kombinovať s, alebo podať v spojení, s jedným alebo viacerými ďalšími farmakologickými činidlami, použiteľnými na liečenie stavov, uvedených skôr, ako sú antibiotiká, bronchodilatátory, protizápalové prostriedky, mukolytiká (napríklad n-acetyl-cysteín), aktín-viažuce alebo aktín-oddeľujúce proteíny (napríklad gelsolin; Matsudaira, et al., Celí 54: 139 - 140 (1988); Stossel, et al., PCT Patent Publication WO 94/22465 (zverejnená 13. októbra 1994)), inhibítory proteázy alebo produkty génovej terapie (napríklad zahrnujúce gén cystickej fibrózy regulujúci vedenie cez membránu (CFTR), Riordan, et al., Science 245: 1066 - 1073 (1989).

Prehľad obrázkov na výkresoch

Obr. 1 predstavuje aminokyselinovú sekvenciu humánnej zrelej DNázy I (SEQ. ID. NO:1). Čísla označujú sekvenčné polohy aminokyselinových zvyškov v sekvencií.

Obr. 2 až 6 predstavujú údaje nasledujúcich variantov:

A1X4C	(SEQ. ID. RC: $8)	OS3A	(SEQ. ID- NO: 13)
A114E	(SEQ. XD. NO: €9)	DS3Y	(SEQ. ID· NO: 14}
A114G	(SEQ. Π). NO: 70)	D53T	(5EQ. ID. NO: 80)
A114K	(SEQ. ID. NO: 71)	B13A	(5SQ. ID. NO; 3)
KL14X	(SEQ. ID. NO: 72)	K13S	(SEQ. ID. NO: 3)
A114X	(SEQ. ID. NO: 73)	EUR	(SEQ. ID. NO: 4)
A114H	(SEQ. XD. NO: 74)	EUW	(SEQ. ID. NO: 5}
A114Q	(SEQ. ID. NO: 75)	EUY	(SEQ. ID. NO: 6)
AX14R	(SEQ. ID. NO: 7«)	E69A	(SEQ. ID. NO; 65)
A1X4W	(SEQ. ID. NO: 77)	I69C	(SEQ. ID. NO: 6«)
A114Y	(SEQ. ID. NO: 78}	IS9K	(SEQ. ID. NO: 21)
DS3Ä.	(SEQ. ID. NC: 11)	X69H	(SEQ. ID. NO: 67}
C53C	(SEQ. ID. NC: 42)	E69R	(SEQ. ID. NO: 22)
DS3X	(SEQ. ID. NC: 11)	049C	(SEQ. ID. NO: 35)
	(SEQ. ID. NO: 44)	«495	(SEQ. ID. NO: 36)
DS3H	(SEQ. ID. NO: 4S)	G4 9K	(SEQ· ID. NO: 37)
G-ÍSR	(SSQ. ID. SC; 33)	V»7Ä	(SEQ. ID. NO: 18)
	ISSS. ID. NC: 39)	767 C	(SEQ. ID. NO.· SS)
H44A	(SEQ. ID. NC: 7)	VS7O	(SEQ. ID. NO: 36)
K44C	(SEQ. ID. MC: 28)	V67E	(SEQ. ID. NC: X9)
K44Q	(SEQ. ID. NO: S)	7673	(SEQ. ID. NO: 37)
E44E	(SEQ. ID. NO: 86)	V67X	(SEQ. ID. NO: 20)
Κ44Π	(SEQ. ID. NO: 79)	V67M	(SEQ. ID. NO: S8)
H44Q	(SEQ. ID. NC: 19)	757?	(SEQ. ID. NO: SS)
K44W	(SEQ. ID. NO: 101	V57R	(SEQ. ID. NO: 60)
M44?	(SEQ. ID. NO; 5)	VÍ7S	(SEQ. ÍO. NO: 61)
D4SC	(SEQ. ID. NO: 301	Y S: A	(SÍC- ID- NO i lf)
L45X	(SEQ. ID. NO: 31)	X63C	(SEQ. ID. NO: 51)
L45R	(SEQ. ID. NC: 32)	Y552	(SEQ. ID. NO: 07)
L52C	(SEQ. ID. NO: 40)	Y55X	(SEQ. ID. NC: SC)
L51X	(SEQ. ID. NC: 41)	Ϊ55Μ	(SEQ. ID. NO: Sj)
L5IM	(SEQ. ID. NO; 42)	YS5?	(SEQ. ID. NO: 97}
LS2N	(SEQ. ID. NO: 90)	Y55R	(SEQ. ID. NO: 16)
L52R	(SEQ. ID- NO: 91)	Y55S	(SEQ- ID. NO: 54)
N5eC	(SEQ. ID. NO: 46)	Y55W	(SEQ. ID. NC: 17)
NSóC	(SEQ. ID. NO: 92)	DS3R:E65R	(SEQ. ID- NO: 2S)
N5ór	(SEQ. ID. NO; 47)	D53R:H44Ä	{SEQ. ID. NC: 23)
N5ÍP	(SEQ. ID. NC: 93)	DS3R:Y6SA	(SEQ. ID. NO: 24}
	(SEQ. ID. NO: 94)	BÍ4N:VSST	(SEQ. ID. NO: 81)
nsóe	(SEQ. ID. NO: 48)	SÍ3N;J>7CT	(SEQ. ID. NO: 98)
K5 6R	(SEQ. XD. NO: 49)	S54N:Y967	(SEQ. ID. NO: 85)
N56R	(SEQ. ID. NO: 95)	V«7K:ES9T	(SEQ. ID. NO: 84)
K5ÍW	(SEQ. ID. NO: SO)	T«5«:V«75	(S£Q. ID. NO: 82)
HSfiW	(SEQ. ID. NO: 96)	D53R:I65A:£69R (SEQ. ID. NC;
S63X	(SEQ. ID. NO: 62)	88)
S63M	(SEQ. ID. NO; 63)	H44A;D33R	:Y65A(SEQ. ID. NO;
S63R	(SEQ. ID. NO: 64)	26)
V48C	(SEQ. ID. NO:	K44A:Y65A	.:£69R (SEC· ID. NO;
V48X	(SEQ. ID. NO: 34)	2?)
V48R	(SEQ. ID. NO: B9)
V66N	(SEQ. ID. NO: B3)

Obr. 2A-D zobrazujú relatívnu špecifickú aktivitu natívnej humánnej DNázy I a variantov. Chybové stĺpce znamenajú štandardnú odchýlku (n-zaťaženie). Relatívna špecifická účinnosť humánnej DNázy I Pulmozyme®-u (Genentech, Inc., South San Francisco, Califomia, USA) je definovaná ako 1,0. Relatívna špecifická účinnosť humánnej DNázy I je vyššia ako Pulmozyme®, kvôli prítomnosti deamidovanej formy humánnej DNázy I, ktorá znížila DNA-hydrolytickú aktivitu (Frenz, et al., PCT Patent Publication WO 93/25670, zverejnená 23. decembra 1993).

Obr. 3 zobrazuje DNA-hydrolytickú aktivitu natívnej humánnej DNázy I a jednozvyškových variantov humánnej DNázy I v prítomnosti aktínu, ako bolo stanovené v teste hyperchrómového efektu (test hyperchromicity). „Percento aktivity“ je percento DNA-hydrolytickej aktivity humánnej DNázy I (natívnej alebo variantu) vypočítané spôsobom, ako je opísané v príklade 3; DNA-hydrolytická aktivita humánnej DNázy I za neprítomnosti aktínu je definovaná ako

100 % aktivita. Nepresné stĺpce (pruhy) reprezentujú štandardnú odchýlku.

Obr. 4 ukazuje DNA-hydrolytickú aktivitu natívnej humánne DNázy I a viaczvyškových variantov humánnej DNázy I v prítomnosti aktínu, ako bolo stanovené v hyperchrómovom teste alebo v teste s metylovou zelenou. „Percento účinnosti“ je percento DNA-hydrolytickej aktivity humánnej DNázy I (natívnej alebo variantu) vypočítané spôsobom, ako je opísané v príklade 3; DNA-hydrolytická aktivita humánnej DNázy I za neprítomnosti aktínu je definovaná ako 100 % aktivita. Nepresné stĺpce reprezentujú štandardnú odchýlku.

Obr. 5A-D zobrazujú relatívnu viazaciu afinitu variantov humánnej DNázy I proti aktínu, ako bola stanovená aktín-viažucim ELISA testom (ako je opísané v príklade 3). Hodnota EC₅₀ je koncentrácia DNázy I (natívnej alebo variantu), ktorá je nutná na to, aby poskytla polovicu maximálneho signálu v teste. Nepresné stĺpce reprezentujú štandardnú odchýlku. Hodnoty EC₅₀ pre Pulmozyme® a natívnu humánnu DNázu I sú 67 ±23 pM (n=31) prípadne 87 +14 pM (n=32). Relatívna viažuca afinita, znázornená na obrázku, je hodnota EC₅₀ určená pre variant humánnej DNázy I, delená hodnotou EC₅₀ určenou pre natívnu humánnu DNázu I. Varianty, kde hodnota EC₅₀ bola väčšia, ako mohlo byť odmerané v teste, sú označené ako majúce pomer (EC₅ovariantu DNázy I)/EC₅₀(natívnej DNázy I)) vyšší ako určitá hodnota (napríklad, >10, >100, >300, >2000, >20000, >35000).

Obr. 6 predstavuje mukolytickú účinnosť natívnej humánne DNázy I a variantov humánnej DNázy I vo vzorkách spúta od pacientov s cystickou fibrózou, ako bola stanovená v teste kompaktnosti. Nepresné stĺpce reprezentujú štandardnú chybu spôsobu.

Obr. 7 ukazuje schematické znázornenie aktín viažuceho ELISA testu, opísaného v príklade 3.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

Mutagenéza humánnej DNázy I

E. coli, kmeň CJ236 (BioRad Laboratories, Richmond, Califomia USA) sa transformuje plazmidom pRK.DNáza.3, s použitím spôsobu podľa Chung, et al. (Nuc. Acids. Res. 16: 3580 (1988)). Plazmid pRK.DNáza.3, použitý pri uskutočnení predloženého vynálezu, je ten, ako je opísaný v PCT patentovej publikácii WO 90/07572 (zverejnená 12. júla 1990) s výnimkou toho, že nukleotidová sekvencia kódujúca humánnu DNázu I je taká, ako je ukázaná na obr. 1. Transformované bunky sa naočkovali na LB agarové platne, obsahujúce 50 pg/l karbenicilínu a nechali rásť cez noc pri 37 °C. Bujón 2YT (5 ml), obsahujúci 50 pg/ml karbenicilínu a 10 pl VCSM13 pomocného fága (Stratagene, La Jolla, Califomia USA) sa naočkoval individuálnou kolóniou z agarovej platne a nechal sa, za pretrepávania, rásť cez noc pri 37 °C. Z tejto kultúry sa izolovala jednovláknová DNA a použila sa ako templát (matrica) na následnú mutagenézu.

Miestne riadená mutagenéza sa uskutočnila s použitím syntetických oligonukleotidov, podľa metódy Kunkel, et al. (Meth. Enzymol. 154: 367 - 382 (1987)). Mutagenetickými oligonukleotidmi boli 21-mers alebo 24-mers, majúce buď 9 alebo 12 súhlasných báz 5 k nesúhlasnému kodónu a 9 súhlasných báz 3 k nesúhlasnému kodónu. Nasledujúcou mutagenézou sa jednovláknová DNA z individuálnych klonov podrobila dideoxysekvenovaniu (Sanger, et al., Proc. Nat. Acad. Sci. USA 74: 5463 - 5467 (1977)). DNA majúca variant nukleotidových sekvencií, sa potom transformovala, ako je opísané, do E. coli kmeň XL1 Blue MRF (Stratagene). Po naočkovaní a izolovaní jednej kolónie, ako už bolo uvedené, sa individuálne kolónie použili na inokuláciu 0,5 1 LB bujónu, obsahujúceho 50 pg/ml karbenicilínu. Po raste za pretrepávania cez noc pri 37 °C sa bunky odobrali centrifugáciou, variant DNA (v expresnom vektore) sa purifikoval s použitím kolón Qiagen typ-500 (Qiagen Inc., Chatsworth, Califomia USA).

Obr. 2 až 6 identifikujú rôzne varianty humánnej DNázy I, ktoré boli pripravené. Na obrázkoch a v celom texte opis aminokyselinovej(ých) substitučnej(ých) mutácie(ií), prítomnej vo variante DNázy I, je skrátený prvým písmenom abecedy, číslom a druhým písmenom abecedy. Prvé písmeno abecedy je jednopísmenová skratka aminokyselinového zvyšku v natívnej (divý typ) humánnej dospelej DNáze I, číslo indikuje polohu tohto zvyšku v natívnej humánnej dospelej DNáze I (číslovanie ako na obr. 1) a druhé abecedné písmeno je jednopísmenová skratka aminokyselinového zvyšku pri tejto polohe vo variante DNázy I. Napríklad, vo variante DNázy 1, ktorá má D53R mutáciu, zvyšok kyseliny asparágovej (D) na polohe 53 v natívnej humánnej dospelej DNáze I bol nahradený arginínovým (R) zvyškom. Viacnásobné mutácie v jednom variante sú označené podobne, so stĺpcom (:) oddeľujúcim každú z rôznych mutácií, ktoré sú prítomné vo variante. Napríklad, označenie D53R:Y65A určuje, že variant má D53R mutáciu a Y65A mutáciu.

Príklad 2

Expresia variantov humánnej DNázy I

293 buniek zárodočných humánnych obličkových buniek (ATCC CRL 1573, Američan Type Culture Collection, Rockville, Maryland USA) sa kultivovalo v sérum obsahujúcej pôde (médium) v 150 mm plastických Petriho miskách. Bunky v logaritmickej fáze sa dočasne kotransfektovali s 22,5 pg purifikovaného variantu DNA (pripraveného ako je opísané) a 17 pg adenovírusu DNA s použitím kalciumfosfátovej zrážacej metódy (Gorman, ct al., DNA and Proteín Eng. Tech. 2: 3 - 10 (1990)). Približne 16 hodín po transfekcii sa bunky premyli 15 ml fosforečnanového tlmivého roztoku a pôda sa vymenila za pôdu bez séra. Dve úrody bunkovej pôdy (kultúry) sa zobrali z každej platne; prvá buď po 24 alebo 72 hodinách a posledná po 96 hodinách po zmene za pôdu bez séra. Týmto spôsobom sa získalo spolu približne 50 ml supematantu bunkovej kultúry, obsahujúceho variant DNázy I. Fond supematantu kultúry, pozberanej z každej platne, sa zakoncentroval 5- až 50-krát s využitím zahusťovača Centriprep 10 a koncentráty sa testovali, aby sa stanovili rozličné biochemické a biologické aktivity variantov DNázy I.

Koncentrát obsahujúci natívnu humánnu DNázu I bol pripravený rovnakým postupom, ako je uvedené, okrem dočasného transfektovania 293 buniek plazmidom pRK.DNáza.3

Príklad 3

Biochemické a biologické účinky variantov humánnej DNázy I

I. Relatívna špecifická aktivita

Relatívny špecifický účinok variantov DNázy I sa testoval porovnávaním účinku variantu s variantom z natívnej humánnej DNázy I v dvoch rozdielnych testoch. Relatívna špecifická aktivita variantov je definovaná ako koncentrácia variantu (v pg/ml), stanovená testom aktivity s metylovou zelenou (Sinicropi, et ah, Anal. Biochem. 222: (351 9

- 358 (1994); Kumick, Árch. Biochem. 29: 41 - 53 (1950)), delené koncentráciou variantu (v pg/ml) stanovená v DNáze I ELISA testom (opísaný nižšie). V obidvoch testoch, v teste aktivity s metylovou zelenou a ELISA teste DNázy I, sa štandardné krivky stanovili s použitím Pulmozyme® humánnej DNázy I. Relatívna špecifická účinnosť natívnej humánnej DNázy I a variantov je znázornená na obr. 2A -D.

Test aktivity s metylovou zelenou (Sinicropi, et al., Anal. Biochem. 222: (351 - 358 (1994); Kumick, Árch. Biochem. 29: 41 - 53 (1950)) využíva farbivo metylzeleň, ktoré sa včleňuje po každých približne 10 bázach do DNA, výsledkom čoho je zelený substrát. Pretože DNA je štiepená DNázou I, metylzeleň sa uvoľňuje a oxiduje na bezfarebnú formu. Teda, strata zelenej farby je proporcionálna k množstvu DNázy I, pridaného do testovanej vzorky. Množstvo DNázy I, prítomné v teste, sa potom kvantifikuje porovnaním s krivkou štandardu, ktorá je pripravená testovaním známych množstiev DNázy I.

ELISA test DNázy I zahrnuje potiahnutie mikrotitračných platničiek s kozacou anti-DNáza I polyklonálnou protilátkou, pridanie vzorky, ktorá má byť testovaná a detegovanie akéhokoľvek výsledného pásma (hranice) DNázy I s králičou anti-DNáza I polyklonálnou protilátkou, ktorá je konjugovaná na chrenovú peroxidázu (HRP). Keď sa pridajú HRP substrát a činidlo na vyvolanie farby, rozvinutie farby je proporcionálne množstvu DNázy I, prítomnej vo vzorke. Množstvo DNázy I, prítomné v pokuse, sa potom kvantifikuje porovnaním so štandardnou krivkou, ktorá je pripravená testovaním známych množstiev DNázy I.

V obidvoch testoch sa testovali viacnásobné riedenia vzoriek a tie hodnoty, ktoré spadli do stredu rozsahu štandardnej krivky sa spriemerovali a vypočítali sa štandardné odchýlky.

Takisto koncentrácia DNázy I, stanovená DNáza I ELISA testom, bola použitá na štandardizovanie koncentrácií DNázy I v ďalších testoch, v ktorých boli charakterizované varianty DNázy I (napríklad v testoch inhibície aktínom, opísaných nižšie).

II. Inhibícia hydrolytickej aktivity DNázy I aktínom

G-aktín (Kabsch, et al., Ann. Rev. Biophys. Biomol. Struct. 21: 49 - 76 (1992) sa pripravil kratšie ako 10 dní pred použitím dialýzou cez noc 1 mg/ml roztoku komerčne dostupného aktínového preparátu (Sigma, St. Louis, Missouri USA) voči 5 mM HEPES, pH 7,2, 0,2 mM CaCl₂, 0,5 mM ATP, 0,5 mM β-merkaptoetanolu pri 4 °C. Po centrifugácii pri 13 000 x g počas 5 minút sa množstvo G-aktínu kvantifikovalo meraním absorbancie pri 290 nm; 1 mg/ml roztoku má absorbanciu 0,66 OD. Množstvo G-aktínového preparátu požadované na podstatnú (>50 % inhibíciu), ale nie totálnu, inhibíciu DNA-hydrolytickej aktivity natívnej humánnej DNázy I bolo stanovené v orientačných experimentoch za použitia rovnakých podmienok pre každý test.

Citlivosť na aktínovú inhibíciu bola vyhodnotená meraním DNA-hydrolytickej aktivity variantov v prítomnosti a bez aktínu v obidvoch rozličných testoch, v už opísanom teste s metylzeleňou a v teste hyperchromicity, ktorý je založený na náraste absorbancie pri 260 nm po denaturácii a depolymerizácii DNA (Kunitz, J. Gen. Physiol. 33: 349 -

- 362 (1950); Kunitz, J. Gen. Physiol. 33: 363 - 377 (1950)). Percentá inhibície vybraných variantov v týchto testoch sú uvedené na obr. 3 a 4.

V teste hyperchromicity zahustené supematanty kultúr (pripravené opísaným spôsobom, obsahujúce varianty DNázy I) sa inkubovali buď bez pridania alebo s 2- až 3

-násobným molovým prebytkom aktínu v tlmivom roztoku A (25 mM HEPES, pH 7,5, 4 mM CaCl₂, 4 mM MgCl₂, 0,1 % BSA) počas jednej hodiny pri teplote miestnosti a potom sa pridali do kyvety obsahujúcej 40 pg DNA v celkovom stanovovanom objeme 1,0 ml. Konečná koncentrácia variantu DNázy I v pokuse bola približne 26 nM, ako bolo stanovené DNáza I ELISA testom. Vyhodnotil sa stupeň DNA hydrolýzy variantmi DNázy I v prítomnosti aktínu a bez aktínu. Percento aktivity, uvedené na obr. 3 a 4, sa vypočítalo stanovením pomeru DNA hydrolytickej aktivity humánnej DNázy I (natívnej alebo variantu) v prítomnosti aktínu k jej DNA hydrolytickej aktivite bez aktínu, násobené 100.

V teste s metylovou zelenou zahustené supematanty kultúr (pripravené opísaným spôsobom, obsahujúce varianty DNázy I) sa inkubovali buď bez pridania alebo s 1000-násobným molovým prebytkom aktínu v tlmivom roztoku B (25 mM HEPES, pH 7,5, 4 mM CaCl₂, 4 mM MgCl₂, 0,1 % BSA, 0,01 % tiomersal a 0,05 % Tween 20) pri 37 °C 16 hodín. Koncentrácia aktívneho enzýmu v každom prípade bola odhadnutá porovnaním so štandardnou krivkou Pulmozyme®. Zostávajúce „percento aktivity“ variantu sa vzťahuje na lOOx pomer aktivity v prítomnosti aktínu k aktivite bez aktínu.

Ako je zobrazené na obr. 3 a 4 DNA-hydrolytická aktivita natívnej humánnej DNázy je podstatne znížená v prítomnosti aktínu. Pri porovnaní rôzne jedno- a viaczvyškové varianty natívnej humánnej DNázy I sú relatívne odolné proti inhibicii aktínom, ako naznačuje ich vyššia DNA-hydrolytická aktivita v prítomnosti aktínu ako natívnej humánnej DNázy I.

III. Aktín viažuca ELISA

Mikrotitračný test bol vyvinutý na vyhodnotenie viazania natívnej humánnej DNázy I a variantov DNázy I na imobilizovaný aktín. Po prvé, jamky MaxiSorp doštičky (Nunc, Inc., Naperville, Illinois USA) sa pokryli 100 μΐ/jamka humánneho DC globulínu (Calbiochem, La Jolla, Califomia USA), aktín viažucim proteínom (Goldschmidt-Clermont, et al., Biochem. J. 228: 471 - 477 (1985); McLeod, et al., J. Biol. Chem. 264: 1260 - 1267 (1989); Houmeida, et al., Eur. J. Biochem. 203: 499 - 503 (1992)) v koncentrácii 10 ug/ml v 25 ml HEPES, 4 mM MgCl₂, 4 mM CaCl₂, pH 7,2, pri 4 °C 16 až 24 hodín. Po odstránení GC globulínu prebytočné reakčné miesta boli blokované pridaním 200 ul/jamka tlmivého roztoku C (tlmivý roztok C je rovnaký, ako tlmivý roztok B, uvedený skôr, s prídavkom 0,5 mM adenozíntrifosfátu; tlmivý roztok C bol použitý ako testovacie riedidlo vo všetkých následných krokoch, ak nie je inak uvedené) a inkubáciou doštičky v trepačke 1 - 2 hodiny pri izbovej teplote. Každý inkubačný krok, ktorý nasleduje, sa uskutočňuje pri izbovej teplote 1 hodinu na trepačke Mini Orbital Shaker (Bellco Biotechnology, Vineland, New Jersey USA); po každom kroku platňa bola vyprázdnená a 6x premytá fosfátovým fyziologickým roztokom, obsahujúcim 0,05 % Tween 20 na premývačke platničiek Microwash II (Skatron A/S, Norway). Ďalej, G-aktín, pripravený, ako bolo opísané, sa zriedil na 50 ug/ml v tlmivom roztoku C a 100 ul sa pridalo do každej jamky; doštičky sa inkubovali a premyli a 100 μΐ rôznych zriedení Pulmozyme® a bunkovej kultivačnej pôdy, obsahujúcej buď natívnu humánnu DNázu I alebo jej varianty, sa pridalo do jamiek a platničky sa inkubovali a premyli. Nakoniec, 100 μΐ 1/25000 zriedenia konjugátu králičej anti-humánna DNáza I polyklonálnej protilátky s chrenovou peroxidázou (pôvodná koncentrácia východiskového materiálu bola 465 ug/ml) sa pridalo do každej jamky. Po inkubácii a premytí sa inicioval vývoj sfarbenia pridaním 100 μΐ na jamku činidla na vyvolanie farby (Sigma Fast o-fenyléndiamin a močovina/H₂O₂ tabletky solubilizované podľa odporučenia výrobcu) a zastavil pridaním 100 ul na jamku 4,5N H₂SO₄. Zaznamenala sa absorbancia pri 492 nm a zakreslila proti koncentrácii DNázy I pôvodne pridanej do jamky. Sigmoidálne krivky sú výsledkom pre natívnu humánnu DNázu I a tie varianty, ktoré sa viazali na aktín; tieto krivky prechádzali štyrmi parametrami rovnice nelineárnej regresnej analýzy (Marquardt, J. Soc. Indust. Appl. Math. Π.: 431 - 444 (1963); koncentrácia každej DNázy I (natívnej alebo variantu), požadovaná na poskytnutie polovice maximálnej reakcie v pokuse, sa vypočítala z kriviek a je označená ako EC₅₀ hodnota. Molová hmotnosť natívnej humánnej DNázy I a variantov bola predpokladaná ako 37 000 Daltonov.

Relatívna viažuca afinita každého variantu humánnej DNázy I bola vypočítaná delením EC₅₀ hodnoty variantu EC₅o hodnotou natívnej humánnej DNázy I, stanovenej v ELISA teste a výsledky sú ukázané na obr. 5A-5D. Podľa príkladu, ak relatívna viažuca afinita variantu humánnej DNázy I bola vypočítaná ako 5, táto hodnota by mala indikovať, že EC₅o hodnota variantu je 5x vyššia ako EC₅₀ hodnota natívnej humánnej DNázy, alebo inými slovami, že variant má afinitu proti aktínu, ktorá je 5x nižšia ako afinita natívnej humánnej DNázy I proti aktínu v tomto ELISA teste.

IV. Test hustoty spúta

Test hustoty spúta (PCT patentová publikácia WO 94/10567, zverejnená 11. mája 1994) sa použil na vyhodnotenie relatívnej viskoelasticity spúta od pacientov s cystickou fibrózou („CF spútum“) pred inkubáciou a po inkubácii s natívnou humánnou DNázou I a rozličnými variantmi DNázy I. Po zmiešaní CF spúta so vzorkou DNázy I a po 20-mi-nútovej inkubácii pri teplote miestnosti sa polotuhé roztoky naplnili do kapilárnych trubičiek, ktoré sa potom centrifugovali pri 12000 rpm 20 minút. Po centrifúgach sa zmerala výška peletky a porovnala s výškou roztoku + peletka. Tieto merania sa potom použili r>a vypočítanie percenta hustoty (kompaktnosti) spúta, ktorá je v korelácii s viskoelasticitou spúta.

Percento hustoty, stanovené po spracovaní CF spúta s natívnou humánnou DNázou I a aktín-rezistentnými variantmi humánnej DNázy I, je znázornené na obr. 6. Tieto výsledky značia, že aktín-rezistentné varianty humánnej DNázy I sú účinnejšie ako natívna humánna DNáza I pri znižovaní viskoelasticity CF spúta, ako sa stanovilo testom hustoty.

Zoznam sekvencii (1) Všeobecné informácie:

(i) Prihlasovateľ: Genentech, Inc.

Lazarus, Róbert A.

Shak, Steven Ulmer, Jana S.

(ii) Názov vynálezu: Varianty humánnej DNázy 1 (iii) Počet sekvencii: 98 (iv) Korešpondenčná adresa:

(A) Adresa: Genentech, Inc.

(B) Ulica: 460 Point San Bruno Blvd (C) Mesto: South San Francisco (D) Štát: Califomia (E) Krajina: USA (F) ZIP: 94080 (v) Počítačová forma:

(A) Typ média: 3.5 palcov, 1,44 Mb floppy disk (B) Počítač: IBM PC kompatibilný (C) Operačný systém: PC-DOS/MS-DOS (D) Softvér: patín (Genentech) (vi) Súčasné údaje o prihláške:

(A) Číslo prihlášky:

(B) Dátum podania:

(C) Zatriedenie:

(vii) Údaje o prioritnej prihláške:

(A) Číslo prihlášky: PCT/US95/02366 (B) Dátum podania: 24. 02. 1995 (viii) Informácie o zástupcovi:

(A) Meno: Johnston, Sean A.

(B) Registračné číslo: 35,910 (C) Značka: P092551PCT1 (ix) Telekomunikačné informácie:

(A) Telefón: 415/225-3562 (B) Telefax: 415/952-9881 (C) Telex: 910/371-7168 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 1 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) DÍžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 1

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin Thr

Phe

Gly

Glu

Thr Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr íle

Val

Gin

íle

Leu Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Aap

Asn Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

. Pro

SO

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

ser

Glu Pro

Leu

Gly

Arg

Asn Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg 1

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr .

Asp

Asp

Gly Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr '

Glu

val

Arg

Glu

Phe .

Ala

íle Val

Pro

Leu :

His

Ala

125 130 135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

ISO

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

19 5

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

Kí s

Cys

Ala

200

20S

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

lla

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245 350 255

Glu Val Mat Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 2 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 2

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin '

Thr Phe Cly Ala t

'hr I

ys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle Val Gin íle t

.eu S

er

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu ’

Val Arg Asp Ser His Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn.

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

es

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

12S

130

13S

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Αδρ

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

19S

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

24S

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 3 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 3

Leu Lys íle Ala Ala Phe Asn íle Gin Thr Phe Gly His Thr Lys 15 10 1S

Met Ser Asn Ala Thr Leu Val Ser Tyr íle Val Gin íle Leu Ser

25 30

Arg Tyr Asp íle Ala Leu Val Gin

Glu Val 40

Arg

Asp

Ser

His

Leu 45

35

Thr

Ala

Val

Gly Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

7S

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

60

65

SO

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

ASp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

11®

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

13S

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

ISO

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

val

Met

Leu

1S5

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

18S

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245 250 255

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 4 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 4

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Arg

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

ser

20

2S

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lye

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

S5

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

60

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

14 S

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Aap

Val

MeC

Leu

15S

160

16S

Met

Gly

Aap

Phe

Aan

Ala

Gly

Cya

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Íle

Pro

Aap

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

23S

240

Lau

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

360 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 5 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka : 260 aminokyselín (B) Typ : aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 5

Leu Lys íle Ala Ala Phe Asn íle Gin Thr Phe Gly Trp Thr Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Aan

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

ASp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

ryr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

90

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

1X0

lis

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

.*·

Arg

Leu

Trp Thr

Ser

Pro

Thr

Pne

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pre Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

ASp

Arg

íle

Val 215

Val

Ma

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ma Val 22$

val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ma

Tyr Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ma

íle

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro Val 255

Clu Val Mac Lau Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 6 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 6

Leu

Lya

íle

Ma

Ma

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Sly

Tyr

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ma

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ma

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

HÍ3

Leu

35

40

45

Thr

Ma

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ma

Pro

SO

55

60

ASp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

8S

90

Ma

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ma

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ma

íle

Val

Pro

Leu

His

Ma

125

130

135

Ma

Pro

Gly

Asp

Ma

Val

Ma

Glu

íle

Asp

Ma

Leu

Tyr

Asp

Val

140

14 S

1SC

Tyr

Leu

Aap

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

1S5

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ma

Gly

Cya

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

iao

Trp

Ser

Ser

íle

Arg 1 185

Leu Trp Thr Ser Pro Thr p: 190

ha g:

Ln Trp Leu 195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala i

Mp

Thr Thr Ma Thr l

'ro Thr H

is Cys Ma

200

205

3:

LO

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ma Gly 1

4et 1

Lau Leu Arg G

ly Ala Vi

al

215

220

2:

25

Val

Pro

Aap

Ser

Ma

Leu

Pro Phe .

Asn

Phe Gin Ma Ma Tyr G

iy

330

335

2

40

Leu

Ser

Asp

Gin

Lau

Ma

Gin Ala

íle

Ser Asp His Tyr P

ro V

al

246 350 255

Clu Val Met Lau Ly*

360 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 7 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) DÍžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 7

Leu

Lys

íle

Ma

Ma

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

S

10

1S

Mat

Ser

Asn

Ma

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ma

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

Ma

Leu

35

40

45

Thr

Ma

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ma

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Sar

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ma

Val

A1P

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Aap

Gly

Cya

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Aan

Aap

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ma

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

130

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

*rg

Glu

Phe

Ma

Ila

Val

Pro

Leu

Hia

Ma

125

130

135

Ma

Pro

Gly

Asp

Ma

Val

Ma

Glu

íle

Asp

Ma

Leu

Tyr

Aap

Val

140 1Í5 150 (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 9

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

ASp

val

Mec

Leu

1S5

150

155

Mae

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Aep

Arg

Zle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

22S

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Äll

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

HÍS

Tyr

Pro

val

245

250

255

Glu

Val

Mec

Leu

Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 8 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 8

Leu 1

Lys

Zle

Ala

Ala 5

Phe

Asn

íle

Gin

Thr 10

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys 15

Met

Ser

Asn.

Ala

Thr 20

Leu

Val

Ser

Tyr

Zle 25

Val

Gin

íle

Leu

Ser 30

Arg

Tyr Asp

Zle

Ala 35

Leu

Val

Gin

Glu

Val 40

Arg

Asp

Ser

Asp

Leu 45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys SO

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu 55

Asn

Gin .

Asp .

Ala :

Pro 60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr Val es

Val

Ser

Glu

Pro 70

Leu

Gly Arg Asn i

Ser 75

Tyr Lya

Glu

Arg

Tyr Leu 80

Phe

Val

Tyr

Arg 85

Pro

Asp Gin Val 1

Ser 90

Ala

val

Asp

bár

Tyr Tyr 95

Tyr Asp

Asp

Gly 100

Cys

Glu

Pro

Cys <

Gly 105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn 110

Arg

Glu

Pro

Ala

íle 115

Val

Arg

Phe

Phe

Ser 120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

íle 130

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala 140

Val

Ala

Glu

íle

Asp 145

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val 150

Tyr

Leu

Asp

val

Gin 155

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

Het

Gly

Asp

Phe

Asn 170

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr 175

Val

Arg

Pro

Ser

Gin 180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

íle

Pro

Asp

ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val 21S

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

íle

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met

Leu

Lys 260

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 9 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina

Leu 1

Lye

íle

Ala Ala Phe Aan íle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys

S

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

Zle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

30

25

30

Arg

Tyr Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu Val

Arg Asp

Ser

Tyr

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn Gin

Asp

Ala

Pro

50

35

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

val

Asp

Ser

Tyr

Tyr Tyr Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Wac

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr Asp

Arg

Zle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

21S

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 10 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 10

Leu Lys Zle Ala Ala Phe Asn íle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 15 10 15

Met Ser Asn Ala Thr Leu Val Ser Tyr Zle Val Gin Zle Leu Ser

25 30

Arg

tyr

Asp

. _e

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Abp

Ser

Trp

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

30

56

€0

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

ASp

Gin

Val

Ser

80

8S

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

G1U

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

Zle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

HO 115 120

Arg

Pha

Thr

Glu

val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

13 5

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Ila

Asp

Ala

Leu

Tyr

Aap

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

150

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ila

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Sar

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

203

210

Tyr

Asp

Arg

Zle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Sar

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Xle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

2S0

255

Glu

Val

Met

Leu

Lya

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 12

3S0 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 11 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 11

Leu Lya íle. 1

.a Ala S

Phe Asn

íle

Gin Thr Phe u -/ Glu Thr Lya

10

1S

Met

Ser

Asn

Ala

Thr 20

Leu

Val

Ser

Tyr

Zle 25

Val

Gin

Zle

Leu

Ser 30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala 35

Leu

Val

Gin

Glu

val 40

Arg

Asp

Ser

His

Leu 45

Thr

Ala

Val

Gly

Lya $0

Leu

Leu

Ala

Asn

Leu 55

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro 60

Asp

Thr

Tyr His

Tyr 65

Val

Val

Ser

Glu

Pro 70

Leu

Gly Arg

Asn

Ser 75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr 80

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg 85

Pro

Asp

Gin

Val

Ser 90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr 95

Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys 100

Glu

Pro

Cys

Gly 105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn 110

Arg

Glu

Pro

Ala

íle 115

Val

Arg

Phe

Phe

Ser 120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

íle 130

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala 140

Val

Ala

Glu

íle

Asp 145

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val 150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin 15S

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

Met

Gly Asp

Phe

Asn 170

Ala

Gly

Cya

Ser

Tyr 175

Val

Arg

Pro

Ser

Gin 180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 20S

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr Asp

Arg

íle

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Pha 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

ser

ASp

H18

Tyr

Pro

val

Leu

Lya

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

S

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Sar

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

2S

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

33

40

43

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Lya

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

Xle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

VaL

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Zle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Aap

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

G1U

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Sar

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Sar

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Zle

Pro

ASp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cye

Ala

300

205

210

Tyr

Aap

Arg

íle

Val

val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

315

330

335

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

330

235

240

Leu

Ser

Aap

Gin

t Leu

. Ala

Gin

Ala

Ila

Sar

Asp

Hla

Tyr

Pro

val

245

250

2S5

Glu Val Met ;U Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 13 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 13

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Arg

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

SO

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

85 90

34S 350 3SS

Glu val Mat Leu Lya

2(0 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 12 (i) Sekvenčné charakteristiky:

Ala

Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lye Trp Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met Leu

155

160

16S

Met

Gly Asp

Ph·

Asn

Ala

Gly Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Sar Gin

170

175

iao

Trp

Sex

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro 1

rhr Hĺb Cys Ala

200

20S

210

Tyr

Asp

Arg

Ila

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu .

Arg Gly Ala Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin .

Ala Ala Tyr Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His Tyr Pro Val

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 15 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ IDNO: 15

245 250 25S

Glu Val Mat Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 14 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 14

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

S

10

15

Met

Ser

Asr.

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

Ila

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Tyr

Asn

Leu

Asn

Gin

ASp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

H1S

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

7S

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Aep

Gin

Val

Ser

BO

95

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

ASp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

12 S

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Zle

Asp

Al*

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

so

ss

60

Asp

Thr

Tyr

His

Ala

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

ao

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Aap

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

□ly

95

100

LOS

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

G1U

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lye

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

1SS

Met

Gly

Asp

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

k. g

Pro

Ser

Gin

170

17S

iao

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

19S

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

250 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 16 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 16

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lye

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

15S

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

190

Trp

Ser

Ser

Ila

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

195

190

195

íle

Pro

Asp

.-r

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Tnr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

350 255

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

L

5

10

15

Met

Sar

Asn

Ala

Thr

Lau

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Aap

Ala

Pro

SO

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Arg

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Sar

65

70

75

Glu Val Met Leu Lye

260

Tyr

Lys

G1U

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

val

ASp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Aap

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

val

Arg

Glu

Phe

Ala

lla

Val

Pro

Leu

Bis

Ala

12S

130

13S

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

ASp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

3er

Ser

lla

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

150

195

Xle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

Hla

cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

lla

Val

Val

Ala

Gly

Mec

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

2S0 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 17 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) DÍžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 17

Leu :

cys

Xle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

8

10

1S

Met ;

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

2S

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Ara

Leu

Ara

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

tyr

His

Trp

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

10S

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

Xle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

val

Arg

Glu

Phe

Ala

Zle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

ASp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

1SS

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Zle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

US

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

SOS

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

All

Val

215

220

22S

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Xle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245 250 2S5 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 18 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) DÍžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 18

Leu

Lys

Xle

Ala

Ala

Phe

Asn

Xle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

2S

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

ASp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

SO

53

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Ala

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pre

Leu

His

Ala

125

130

13S

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Zle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

16S

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cya

Ser

Tyr

val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Xle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Xle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245 250 255

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 19 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) DÍžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 19

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lya

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

Zle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

Zla

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

HÍS

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Vaľ

^iy

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

ASp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Glu

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

200 105

Glu Val MeE Leu Lys

2€0

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn 110

Arg

Glu

Pre

Ala

Zle 11S

val

Arg

Phe

Phe

Ser 120

íle Pro Asp Ser Ala Asp Thr Thr Ala 200

Thr 205

Pro

Thr His

Cys Ala 210

Arg

Phe

Thr

Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

Zle 130

Val

Pro

Leu

Kí s

Ala 135

Tyr Asp Arg Zle Val Val Ala Gly Met

Leu

Leu Arg Gly

Ala Val

216

22C

225

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Val Pro Asp Ser Ala Leu Pro Phe Asn

Phe

Gin Ala Ala

Tyr Gly

230

23S

240

Tyr

Leu

A*p

val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

val

Met

Leu

155

140

145

Leu Ser Asp Gin Leu Ala Gin Ala íle

Ser

Asp

Hls Tyr

Pro val

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

245

250

255

170

175

180

Glu Val Met Leu Lys

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

260

185

190

195

ILe

Pro

Alp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thx

Ala

Thr

Pro

Thr

Bi s

Cys

Ala

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 21

200

205

210

(i) Sekvenčné charakteristiky:

Tyr Asp

Ar?

Zle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín

215

220

225

(B) Typ: aminokyselina

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr Gly 240

(C) Topológia: lineárna

(xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 21

Leu

ser

Asp

Gin Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

Hls

Tyr

Pro

Val

3tS 250

255

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Glu Val Het Leu Lya

260

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 20

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

Hls

Leu

(i) Sekvenčné charakteristiky:

35

40

45

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

(B) Typ: aminokyselina

50

55

60

(C) Topológia: lineárna

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Lys

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

(xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 20

65

70

75

Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

80

85

90

1

5

10

15

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr Asp

Asp

Gly

Cys

Glu Pro Cys Gly

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

95

100

105

20

25

30

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

Zle

Val .

Arg Phe Phe Ser

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

110

115

120

35

40

45

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

pro Leu His Ala

125

130

135

Thr

Ala

Val

Gly Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Zle

Asp

Ala

Leu Tyr Asp Val

140

145

150

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Lys

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

55

70

75

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu .

Asp Val Met Leu

155

160

165

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

8S

90

Het

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly Cys Ser Tyr

Val

Arg

Pro

Ser Gin

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr Tyr Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

170

175

180

95

100

105

Trp

Ser

Ser

Zle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp Leu

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

185

190

195

110

115

120

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys Ala

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

200

205

210

L25

130

135

Tyr

Asp

Arg

Zle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala Val

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr Asp

Val

215

220

225

140

145

150

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr Gly

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

230

235

240

155

160

165

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro Val

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

245

250

2SS

170

175

180

Glu

Val

Met

Leu

Lys

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

260

185 190 195 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 22 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 22

Leu 1	Lys	íle	Ala Ala Phe Asn íle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys
5	10	15
Mec	Ser	Asn	Ala Thr	Leu Val Ser Tyr íle Val Gin	íle Leu Ser
			20	25	30
Arg	Tyr	Asp	íle Ala	Leu Val Gin Glu Val Arg Asp	Ser His Leu
			35	40	45
Thr	Ala	Val	Gly Lys	Leu Leu Asp Asn Leu Asn Gin	Asp Ala Pro
			SO	SS	50
Asp	Thr	Tyr	His Tyr	Val Val Ser Arg Pro Leu Gly	Arg Asn Ser
			65	70	75
Tyr	Lys	Glu	Arg Tyr	Leu Phe Val Tyr Arg Pro Asp	Gin Val Ser
			80	85	90
Ala	Val	Asp	Ser Tyr	Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu	Pro Cys Gly
			95	100	105
Asn	Asp	Thr	Phe Asn	Arg Glu Pro Ala íle Val Arg	Phe Phe Ser
			110	115	120
Arg	Phe	Thr	Glu Val	Arg Glu Phe Ala íle Val Pro	Leu His Ala
			US	130	135
Ala	Pro	Gly	Asp Ala	Val Ala Glu Zle Asp Ala Leu	Tyr Asp Val
			140	145	150
Tyr	Leu	Asp	val Gin	Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp	Val Met Leu
			1S5	160	165
Mat	Gly Asp	Phe Asn	Ala Gly Cys Ser Tyr Val Arg	Pro Ser Gin
			170	175	180
Trp	Ser	Ser	íle Arg	Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe	Gin Trp Leu
			18S	190	19S
Zle	Pro Asp	Ser Ala	Asp Thr Thr Ala Thr Pro Thr	His Cys Ala
			200	205	210
Tyr Asp Arg	íle Val	Val Ala Gly Met Leu Leu Arg	Gly Ala Val
			215	220	225
Val	Pro	Asp	Ser Ala	Leu Pro Phe Asn Phe Gin Ala	Ala Tyr Gly
			230	235	240
Leu	Ser	Asp	Gin Leu	Ala Gin Ala Zla Ser Asp His	Tyr Pro Val
			24S	250	255
Glu	Val	Met	Leu Lys

360 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 23 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 23

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly 1

Glu 1

Thr

Lys

1

5

10

1S

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu .

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

Cle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val .

Arg

Asp

Ser .

Ala

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Arg

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

SS

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Axg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

11S

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

13S

Ala

Pro Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

GlU

Asp

val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

23S

240

Leu

Ser Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 24 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 24

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Cly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lye

Leu

Leu

Arg

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Ala

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

<5

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

10S

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Axg

Phe

Thr

Glu

Val

Axg

Glu

Phe

Ala

Ue

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cye

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Cle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245 250 255

Glu Val Met Leu Lys

250

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 25

Asp Thr Tyr Hla Ala Val Val Ser

Glu

Pro

Leu

Gly Arg

Asn

Ser

(i) Sekvenčné charakteristiky:

65

70

75

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín

Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe Val

Tyr Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

(B) Typ: aminokyselina

90

85

90

(C) Topológia: lineárna

Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

(xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 25

95

100

105

Asn Asp Thr Phe Asn Ar? Glu Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

Leu Lys íle Ala Ala Phe Asn íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

110

lis

120

1 S

10

15

Arg Phe Thr Slu Val Arg Glu Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

Met Ser Asn Ala Thr Leu Val Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

13 S

130

135

20

25

30

Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr Asp

Val

Ar? Tyr Asp íle Ala Leu Val Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

140

145

150

35

40

45

Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

Thr Ala val Gly Lys Leu Leu Ar?

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

155

160

165

SO

55

60

Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly Cys

Ser

Tyr

val

Ar?

Pro

Ser

Gin

170

L7S

180

Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser

Arg

Pro

Leu

Gly Arg

Asn

Ser

65

70

75

Trp Ser Ser íle Arg Leu Trp Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe Val

Tyr

Ar?

Pro

Asp

Gin

val

Ser

185

190

195

80

35

90

11« Pro Asp Ser Ala Asp Thr Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Tyr Asp Arg íle Val Val Ala Gly

Met

Leu

Leu

Arg Gly

Ala

Val

215

220

22S

Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Val Pro Asp Ser Ala Leu Pro Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe

Ala

Ila

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Leu Ser Asp Gin Leu Ala Gin Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyi

Asp

Val

140

145

150

Glu Val Met Leu Lys

260

Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lya Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly Cys

Ser

Tyr

val

Ar?

Pro

Ser

Gin

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 27

170

175

190

(i) Sekvenčné charakteristiky:

Trp Ser Ser íle Arg Leu Trp Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

□In

Trp

Leu

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín

1B5

190

19S

(B) Typ: aminokyselina

íle Pro Asp Ser Ala Asp Thr Thr Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

(C) Topológia: lineárna

200

205

210

(xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 27

Tyr Asp Arg Zlo Val Val Ala Gly

Mat

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Leu Lys íle Ala Ala Phe Asn íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

1 Lys

Val Pro Asp Ser Ala Leu Pro Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

1 S

10

15

230 235 240

Met Ser Asn Ala Thr Leu Val Ser Tyr íle Val Gin íle Leu Ser Leu Ser Asp Gin Leu Ala Gin Ala íle Ser Asp His Tyr Pro Val ^{20 25 30}

Ar? Tyr Asp íle Ala Leu Val Gin Glu Val Ar? Asp Ser Ala Leu

Glu Val Met Leu Lys

35

40

4S

260

Thr

Ala

Val Gly Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 26

Asp

Thr

Tyr His

Ala

Val

Val

Ser

Arg

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

(i) Sekvenčné charakteristiky:

65

70

75

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín

Tyr

Lys

Glu Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Ar?

Pro

Asp

Gin

val

Ser

(B) Typ: aminokyselina

80

95

90

(C) Topológia: lineárna

Ala

Val

Asp Ser

Tyr Tyr

Tyr Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

(xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 26

95

100

105

Asn

Asp

Thr sne

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Ar?

Phe

Phe

ser

Leu Lys íle Ala Ala Phe Asn íle Gin

Thr

Phe Gly

Glu

Thr

Lys

110

115

120

1 5

10

15

Ar?

Phe

Thr Glu

val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

Met Ser Asn Ala Thr Leu Val Ser Tyr

íle

Val Gin

íle

Leu

Ser

125

130

135

20

25

30

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr Asp

val

Ar? Tyr Asp íle Ala Leu Val Gin Glu

Val

Arg Asp

Ser

Ala

Leu

140

14 S

150

35

40

45

Tyr

Leu

Asp Val

Gin

Glu

Lys

Trp Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu Ar? Asn

Leu

Asn Gin

Asp

Ala

Pro

50

SS

60

Met

Gly

Asp Phe

Asn

Ala

Gly

Cys Ser Tyr

Val

Ar?

Pro

Ser

Gin

170

17S

180

Trp

Ser

Ser íle

Arg

Leu

Trp

Thr Ser Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185 1S0 135

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

HiS

Tyr

Pro Val

245

250

255

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 28 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) DÍžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 28

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Mat

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

GlU

val

Arg

Asp

Ser

Cys

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Aep

Ala

Pro

SO

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

60

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

11S

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

HiS

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lye

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

20S

no

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

ALa

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 29 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 29

Leu Lys íle 1

Ala Ala Phe Asn íle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu Val

Ser

Tyr

íle

val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu Val

Gin

Glu

val .

Arg Alp

Ser

Gin 1

Leu

33

40

43

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

50

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

60

B5

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr Tyr Tyr Arp Aap

Gly Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ale

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

v*i

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

X45

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Sex

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

VaL

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 30 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 30

Leu Lys Zle Ala Ala Phe Asn íle Gin

Thr Phe Gly Glu Thr Lys

1 Met Ser Asn

Ala

5

Tyr

10

15 Leu Ser 30

Thr 20

Leu

Val

Ser

íle 25

Val

Gin

íle

Arg

Tyr Asp

Zle Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg Asp

Ser

H18

Cys

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

HiS

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lye

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Cly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155 160 165

Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin

170

175

180

Trp

Ser Ser

Ila

Arg 18S

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

íle

Pro Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr Asp Arg

íle

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

íle

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val Met

Leu

Lys 260

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 31 (1) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 31

Leu Lys íle Ala Ala Phe Asn íle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys

5 1015

Met Ser Asn Ala Thr Leu Val Ser Tyr íle Val Gin íle Leu Ser

2S30

Arg Tyr Asp íle Ala Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser His Lys

4045

Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro

5550

Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser $5 70?5

Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe val Tyr Arg Pro Asp Gin val Ser

8590

Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cye Gly

100105

Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Ala íle Val Arg Phe Phe Ser

110 115120

Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Ala íle Val Pro Leu His Ala

125 130135

Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala Glu íle Asp Ala Leu Tyr Asp Val

140 145150

Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu

155 160165

Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin

170 175180

Trp Ser Ser íle Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu

185 190195 íle Pro Asp Ser Ala Asp Thr Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala

200 205210

Tyr Asp Arg íle Val Val Ala Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala Val

215 22022S

Val Pro Asp Ser Ala Leu Pro Phe Asn Phe Gin Ala Ala Tyr Gly

230 235240

Leu Ser Asp Gin Leu Ala Gin Ala íle Ser Asp His Tyr Pre Val

245 250255

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 32 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 32

Leu Lys íle Ala Ala Phe	Asn	íle	Gin	Thr	Phe	Gly	Glu	Thr	Lys
1 5				10					15
Met Ser Asn Ala Thr Leu	Val	Ser	Tyr	íle	Val	Gin	íle	Leu	Ser
20				25					30
Arg Tyr Asp íle Ala Leu	val	Gin	Glu	Val	Arg	Asp	Ser	His	Arg
35				40					45
Thr Ala Val Gly Lys Leu	Leu	Asp	Asn	Leu	Asn	Gin	Asp	Ala	Pro
50				55					60
Asp Thr Tyr His Tyr Val	Val	Ser	Glu	Pro	Leu	Gly Arg	Asn	Ser
65				70					75
Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu	Phe	Val	Tyr	Arg	Pro	Asp	Gin	val	Ser
80				85					90
Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr	Asp	Asp	Gly	Cys	Glu	Pro	Cys	Gly
95				100					10S
Asn Asp Thr Phe Asn Arg	Glu	Pro	Ala	íle	Val	Arg	Phe	Phe	Ser
110				115					120
Arg Phe Thr Glu Val Arg	G1U	Phe	Ala	íle	Val	Pro	L«U	His	Ala
125				130					135
Ala Pro Gly Asp Ala Val	Ala	Glu	íle	Asp	Ala	Leu	Tyr	Asp	Val
140				145					150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu	Lys	Trp	Gly	Leu	Glu	Asp	val	Met	Leu
155				160					165
Met Gly Asp Phe Asn Ala	Gly Cys	Ser	Tyr	Val	Arg	Pro	Ser	Gin
170				175					180
Tzp Ser Ser íle Arg Leu	Trp Thr	Ser	Pro	Thr	Pha	Gin	Trp	Leu
185				190					19S
íle Pro Asp Ser Ala Asp	Thr	Thr	Ala	Thr	Pro	Thr	His	Cys	Ala
200				205					210
Tyr Asp Arg íle Val Val	Ala Gly	Met	Leu	Leu	Arg Gly Ala	val
215				220					22S
Val Pro Asp Ser Ala Leu	Pro	Phe	Asn	Phe	Gin	Ala	Ala	Tyr	Gly
230				23S					240
Leu Ser Asp Gin Leu Ala	Gin Ala	íle	Ser	Asp	His	Tyr	Pro	Val
24S				250					2S5
Glu Val Met ««u Lys
260
(2) Informácia pre SEQ ID NO: 33
(i) Sekvenčné charakteristiky:
(A) Dĺžka: 260 aminokyselín
(B) Typ: aminokyselina
(C) Topológia: lineárna
(xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 33
Leu Lys íle Ala Ala Phe	Asn	íle	Gin	Thr	Phe	Gly	Glu	Thr	Lys
1 5				10					15
Met Ser Asn Ala Thr Leu	Val	Ser	Tyr	íle	Val	Gin	íle	Leu	Ser
20				25					30
Arg Tyr Asp íle Ala Leu	Val	Gin	Glu	Val	Arg	Asp	Ser	His	Leu
35				40					45
Thr Ala Cys Gly Lys Leu	Leu	Asp	Asn	Leu	Asn	Gin	Asp	Ala	Pro
50				55					60
Asp Thr Tyr His Tyr Val	Val	Ser	Glu	Pro	Leu	Gly Arg	Asn	Ser
65				70					75
Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu	Phe	Val	Tyr	Arg	Pro	Asp	Gin	val	Ser
80				85					90
Ala Val Asp Ser Tyr Tyr	Tyr Asp Asp	Gly	cys	Glu	Pro	Cys	Gly
95				100					105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg	Glu	Pro	Ala	Ila	val	Arg	Phe	Phe	ser
1X0				115					120
Arg Phe Thr Glu Val Arg	Glu	Phe	Ala	íle	Val	Pro	Leu	His	Ala
125				130					13 5
Ala Pro Gly Asp Ala Val	Ala	Glu	íle	Asp	Ala	Leu	Tyr	Asp	Val
140				145					150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu	Lys	Trp Gly	Leu	Glu	Asp	Val	Met	Leu
155				160					165

Met

Gly Asp Phe Asn Ala Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro ser Gin

170

17S

180

Trp

ser

Ser

íle

Arg

Leu

Tip

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe Gin

Trp

Leu

185

190

195

Zle

Pro

Asp

Ser

Ma

Asp

Thr

Thr

Ma

Thr

Pro

Thr His

Cys

Ma

200

205

210

Tyr Asp

Arg

íle

Val

Val

Ma

Gly

Met

Leu

Leu

Arg Gly

Ala

Val

215

220

225

val

Pro

Asp

Ser Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

mn

Ala Ma

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Aep

Gin

Leu

Ala

Gin

Ma

Ha

Ser

Asp

His Tyr

Pro

Val

24S 250 255

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 34 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 34

Leu

Lys

íle

Ala

Ma

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ma

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

4S

Thr

Ala

Lys

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

Kis

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Leu

Lys

Zle

Ma

Ma

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

S

10

15

Met

Ser

Asn

Ma

Thr

Leu

Val

Sex

Tyr

Zle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

11a

Ala

Leu

val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Cys

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ma

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

7S

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

>5 100 105

Asn Asp

Thr Phe

Asn Arg Glu Pro Ma Zle Val Arg Phe Phe Ser

U0

lis

120

Arg

Phe

Thr

G1U

Val

Arg

Glu

Phe

Ma

íle

Val

Pro

Leu

His

Ma

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ma

Val

Ma

Glu

Zle

Asp

Ma

Leu

Tyr Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ma

Gly Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

18S

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ma

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ma

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

21S

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pre

Phe

Asn

Phe

Gin

Ma

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

243

250

255

Asn Asp Thr Phe Ara Arg Glu Pro Ala íle Val Arg Phe Phe Ser

110 115 120

Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Ala Ha Val Pro Leu His Ala

125 130 135

Ma

Pro Gly Asp Ma val Ala Glu íle Asp Ma

Leu Tyr Asp Val 150

140

14S

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin 155

Glu

Lys Trp

Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

Met

Gly Asp

Phe

Ara 170

Ala

Gly Cys

Ser

Tyr 175

Val

Arg

Pre

Ser

Gin 180

Trp

Ser

Ser

Zle

Arg 185

Lev

Trp Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

íle

Pro

Asp

Ser

Ma 200

Asp

Thr Thr

Ma

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val 215

Val

Ma Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ma

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ma 230

Leu

Pro Phe

Asn

Phe 335

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin Ma

íle

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu Val Met Leu Lys

360 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 35 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) DÍžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 35

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 36 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) DÍžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 36

Leu

Lys

íle

Alt

Ala

Phe

Asn

rie

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

Hla

Leu

35

40

4S

Thr

Ala

Val

Zle

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ma

Pro

SO

55

50

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

60

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

cys

Gly

95

100

10S

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Axg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

val

Arg

Glu

Phe

Ma

Zle

Val

Pro

Leu

Sia

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ma

Val

Ma

Glu

íle

Asp

Ma

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

1S0

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lye

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

val

Met

Leu

155 160 165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

114

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

18S

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

HiS

cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

:1a

Val

Val

Ala

oly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245 250 255

Glu Val Met Leu Lye

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 37 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 37

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

3S

40

45

Thr

Ala

Val

Lys

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

9S

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

Zle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

133

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

ASp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

GXy

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

LS5

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cye

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

rrp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

18S

190

195

Zle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

HiS

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

22S

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

23S

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 38 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 38

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

S

10

15

Mat

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Arg

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

S5

SO

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

~rg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pre

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

US

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

VaL

140

145

1S0

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

ser

Tyr

val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

913

Tyr

Pro

Val

345 3S0 2SS

Glu Val Mat Leu Lye

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 39 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 39

Leu

Lys

Zle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gla

Zle

Uu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

ASp

íle

Ala

Uu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

4$

Thr

Ala

Val

Tyr

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gla

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

val

Pro

Uu

His

Ala

125

130

13S

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

180

Tyr

Leu

Asp

Val

Gla

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170 17S 1B0

Trp

Ser Ser íle Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu

185

190

195

íle

Pro Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr Asp Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

NeC

Leu

Leu

Arg Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His Tyr

Pro

val

245

250

2S5

Glu

Val Met

Leu

Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 40 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 40

Leu Lys íle Ala Ala Phe Asn íle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

val

Gly

Lys

Leu

Cys

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lya

G1U

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr Tyr

Tyr Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

14$

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

HiS

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

23S

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

2S0

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

Iii

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Lys

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

val

Ala

Glu

íle

ASp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Tep

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Ph·

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

330

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pre

Val

245

2S0

255

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 42 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 42

360 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 41 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 41

Leu Lys 1

Zle

Ala

Ala 5

Phe Asn

íle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

Zle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly Lys

Leu

Met

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

SO

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

9Q

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

10S

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

11«

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

(C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 44

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Mat

Gly

Asp

Pha

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

17S

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

pro

Thr

His

Cys

Ala

20C

205

210

Tyr

Aap

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Het

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

220

235

140

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pre

Val

245

250

255

Glu Val Met Leu Ly·

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 43 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 43

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

Ila

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

1S

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Cys

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

7S

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

cys

Glu

Pro

cys

Gly

95

100

XOS

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cye

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

23S

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245 250 255

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 44 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

Zle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

Zle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

He

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

3S

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Leu

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

ASp

Gin

Val

Ser

80

95

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

Zle

val

Arg

Pha

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Sar

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

19S

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cye

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Lau

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

val

245

250

255

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 45 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 45

Leu

Lys

tie

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

KÍS

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Met

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

€0

Asp

Thr

Tyr

Kis

Tyr

val

val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Aap

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Pha

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arf

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

140

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

cys

Ser

ryr

val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

HÍS

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 47

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

X

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Phe

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

ASp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

G1U

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 46 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 46

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

L

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

2S

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Cys

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

ASp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

11S

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

ISO

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

24S

2S0

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260

(2) Informác

ia p

re S

IEQ

ID

NO

: 47

(i) Sekve

:nčn

é chara

kter

istiky:

Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Ala íle Val Arg Phe Phe Ser

110

115

12 0

Arg

Phe

Thr

Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

íle 130

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala 140

val

Ala

Glu

íle

Asp 145

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val ISO

Tyr

Leu

Asp

val

Gin 155

Glu

Lys

Trp Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn 170

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr 175

Val

Arg

Pro

Ser

Gin 180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 20S

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val 215

val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 22S

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

íle

Ser 250

Asp

HiS

Tyr

pro

val 25S

Glu

Val

Met

Leu

Lys 260

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 48 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 48

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

IS

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Lys

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lye

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

VaL

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Ala Ila Val Arg Phe Phe Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Zle

Asp

Ala

Leu

Tyr Asp

Val

140

145

150·

Tyr

Leu

Asp

v*l

<11 11

Glu

Lys

Txp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val Met

Leu

155

160

155

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ila

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

i Leu

185

190

195

Zle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

i Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

i Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyx

: Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pre

i Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

250 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 49 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 49

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

Zle

Val

Gin

Zle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gíy

Lya

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Arg

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

Zle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

11S

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

ASp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

*βΡ

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

S«r

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

17S

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Zle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Zle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

24S 2S0 255

Glu Val Met Lau lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 50 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 50

Leu Lys Zle Ala Ala

Phe

Asn

íle

Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

val

Ser

Tyr

Zle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr Asp

Zle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Trp

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

so

ASp

Thr

Tyr

His

Tyr val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg Tyr Leu Phe

Val

Tyr Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

ser

Tyr Tyr Tyr Asp

Asp Gly Cys

GlU

Pro

Cys

Gly

95

100

10S

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

val

Pro

Leu

HiS

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Zle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Zle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

250 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 51 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 51

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Cys

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Ala íle Val Arg Phe Phe Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

14S

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys Trp Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

150

16S

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

150

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Sar

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr Gly

230

235

240

Leu

Sar

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

Leu Ser Asp Gin Leu Ala

24$

Val Pro Asp Ser Ala Leu

230

Glu Val Met Leu Lys

250

250 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 52 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 52 >ln Ala íle Ser Asp His Tyr Pro Val 250 255

Pro Phe Asn Phe Gin

235 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 53 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminoky (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 53

'.selín

Leu

Met

Arg

Lys íle

Ser Asn

Tyr Asp

Ala

Ala

S íle

Gin

Thr phe

Gly

Glu Thr

Lys

Ala

Thr

Ser

Tyr íle Val is

Gin íle Leu

Ser

Zle

Ala

Gin

Glu

Val Arg Asp

Ser His

Leu

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

so

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Met

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

55

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

»5

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Glu

Phe

Val Pre

Leu His

Ala

13S

Val Arg

125

Ala íle

130

Leu L

Lys

íle

Ala

Ala 5

Phe

Asn

Zle

Gin

Thr 10

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys 15

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala 140

Val

Ala

Glu

íle

Asp 145

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val 150

Met

Ser

Asn

Ala

Thr 20

Leu

Val

Ser

Tyr

íle 25

Val

Gin

íle

Leu

Ser 30

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin 155

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cye

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

3$

40

45

170

175

ISO

Thr

Ala

val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

135

190

195

Asp

Thr

Tyr

His

Lys

val

val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

val

200

205

210

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

val

Tyr

Arg

Pro

ASp

Gin

Ser

80

BS

90

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

215

220

225

95

100

105

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

GLn

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Asn

ASp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

Glu

Val

Het

Leu

12S

130

13S

Lys

250

Ala

Pro Gly Asp Ala Val Ala Glu íle Asp Ala Leu Tyr Asp Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Sar

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg Gly

Ala

Val

220

215

225 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 54 (i) Sekvenčné charakter stiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 54

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

1

5

10

1S

155

160

165

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

20

25

3C

170

17S

180

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

35

40

45

185

190

195

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

íle

Pro

ASp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

50

55

€0

200

205

210

Asp

Thr

Tyr

His

Ser

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

55

70

75

215

220

225

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

80

85

90

230

23S

240

Ala

val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

95

100

105

245

250

255

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

Glu

Val

Met

Leu

Lys

110 115 120 260

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val Het

Leu

155

160

165

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 56 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 56

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Xle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

30

2S

30

Arg

Tyr

Asp

Zle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

4S

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 55 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 55

Leu Lys X

íle

Ala

Ala 5

Phe Asn

íle

Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys

10

15

Mec

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Sar

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Cys

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly Arg

Asn

Ser

6S

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

G1U

Pro

Ala

íle

val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

11S

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140 145 150

Thr Ala Val

Gly

Lys 50

Leu Leu Asp Asn

Leu Asn Gin Asp Ala Pro

55

60

Asp

Thr

Tyr

HÍS

Tyr

Val

Asp

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr Tyr Tyr Asp

Asp

Gly Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

1SS

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

ILe

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

val

21S

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

2S5

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 57 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 57

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

His

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

6S

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

14S

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

1S0

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

ALa

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

23S

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 58 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 58

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

Zle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

Zle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Met

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Lau

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

BO

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

VaL

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

He

Val

Pro

Leu

HiS

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Tip

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

18S

190

195

Zle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

val

315

220

22S

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Glr.

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Aap

His

Tyr

Pro

• Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 59 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 59

Leu 1	Lys Zle Ala Ala S	Phe Asn íle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys
10	15
Met	Ser Asn Ala Thr	Leu Val Ser Tyr íle Val Gin íle	Leu Ser
	20	25	30
Arg	Tyr Asp 11« Ala	Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser	His Leu
	35	40	45
Thr	Ala Val Gly Lys	Leu Leu Asp Asn Leu Asn Gin Asp	Ala Pro
	SO	55	60
Asp	Thr Tyr His Tyr	Val Pro Ser Glu Pro Leu Gly Arg	Asn Ser
	65	70	75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr	Leu Phe Val Tyr Arg Pro Asp Gin	Val Ser
	60	85	90
Ala	Val Asp Ser Tyr	Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro	Cys Gly
	95	100	105
Asn	Asp Thr Phe Asn	Arg Glu Pro Ala íle Val Arg Phe	Phe Ser
	110	115	120
Arg	Phe Thr Glu Val	Arg Qlu Phe Ala íle Val Pro Leu	His Ala
	125	130	135
Ala	Pro Gly Asp Ala	Val Ala Glu íle Asp Ala L«u Tyr	Asp Val
	140	14S	150
Tyr	Leu Asp Val Gin	Glu Lys Trp Gly Leu Qlu Asp Val	Met Lau
	155	160	165
Met	Gly Asp Phe Asn	Ala Ôly Cys Ser Tyr Val Arg Pro	Ser Gin
	170	175	180
Trp	Ser Ser íle Arg	Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin	Trp Leu
	19$	190	195
íle	Pro Asp Ser Ala	Asp Thr Thr Ala Thr Pro Thr His	Cys Ala
	200	205	210
Tyr	Asp Arg Zle Val	Val Ala Gly Met Leu Leu Arg Gly	Ala Val
	215	220	225
Val	Pro Asp Ser Ala	Leu Pro phe Asn Phe Gin Ala Ala	Tyr Gly
	230	23S	240
Leu	Ser Asp Gin Leu	Ala Gin Ala íle Ser Asp His Tyr	Pro Val
	245	250	255
Glu	Val Met Leu Lys
	260
(2) Informácia pre SEQ ID NO: 60
(i) Sekvenčné charakteristiky:
(A) Dĺžka: 260 aminokyselín
(B) Typ: aminokyselina
(C) Topológia: lineárna
(xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 60

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Axa

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Arg

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Sar

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

19S

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

HiS

Tyr

Pro

Val

245

250

2S5

Glu Val MeC Leu Lys

250 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 61 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) DÍžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 61

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

G1U

Thr

Lys

1

$

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Ser

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

«5

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

10S

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

G1U

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

VaL

Pro

Leu

His

Ala

125

130

13S

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

14S

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

VaL

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245 250 2SS

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 62 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) DÍžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 62

Leu Lys íle Ala Ala

Phe Asn

íle

Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys

1

S

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

HÍS

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Lys

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr Tyr

Tyr Asp Asp Gly Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

9S

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

14S

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lvs

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

15S

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 63 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 63

SK 284191 Β6

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

val

Met

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

90

95

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

12S

130

13 S

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

1S0

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

1SS

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

190

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

135

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

val

215

220

225

Val

Pro

Asp

ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

23S

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

HiS

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 64 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 64

Leu Lys 1

íle

Ala

Ala 5

Phe Asn

íle

Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

ASp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

val

Arg

ASp

Ser

HiS

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Arg

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

5er

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

90

95

90

Ala

Val

Asp

Ser

ryr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

lis

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

13 0

135

Ala

Pro Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

14 5

150

Tyr

Leu Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser Ser

11«

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

195

190

195

íle

Pro Asp

Ser

Al*

Aap

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

20S

210

Tyr

Asp Arg

íle

val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

21S

220

225

Val

Pro Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser Asp 1

Gin

Leu .

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

24S

250

255

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 65 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 65

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

S

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Ala

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Zle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin

X70

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pre

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Aep

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

íle

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met

Leu

Lys 260

SK 284191 Β6 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 66 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 66

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn.

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Cys

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pra

Asp

Gin

Val

Ser

10

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

HiS

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

VaL

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

VaL

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

G1U

Asp

Val

Met

Leu

15S

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

1B0

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pra

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

18S

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

2QS

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pre

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 67 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 67

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

VaL

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Met

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Glv

Ala

val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

2S0 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 68 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 68

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

SO

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

val

Val

Seť

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

val

Ser

80

es

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

10S

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

cys

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

no

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

12S

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Zle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

22S

val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Αβρ

His

ryr

Pro

Val

245

2S0

255

G1U

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 69 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 69

Leu

Lys

Zle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

val

ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

95

90

Ala

Val

ASp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

LOS

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Glu

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

phe

Thr

Glu

val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

12S

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

1SS

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

1B5

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

11«

Val

Val

Ala

Cly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

HiS

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lye

260

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 70 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 70

Leu 1 Met

Lys íle Ala Ala 5

Phe Leu

Asn Val

íle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys

10

íle

Leu

15 Ser 30

Ser Asn Ala

Thr 20

Ser Tyr íle 25

Val Gin

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser

65	70	75
Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe Val	Tyr Arg Pro Asp Gin Val	Ser
90	85	90

Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe Val Tyr Arg pro Asp Gin Val Ser

8550

Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly cys Glu Pre Cys Gly

1Q0105

Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Gly íle Val Arg Phe Phe Ser

110 115120

Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Ala íle Val Pro Leu Hla Ala

12S 130135

Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala Glu íle Asp Ala Leu Tyr Asp Val

140 145150

Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu

155 160165

Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin

170 17S180

Trp Ser Ser íle Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu

185 190195 íle Pro Asp Ser Ala Asp Thr Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala

200 20S210

Tyr Asp Arg íle Val VaL Ala Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala Val

215 220225

Val Pro Asp Ser Ala Leu Pro Phe Asn Phe Gin Ala Ala Tyr Gly

230 235240

Leu Ser Asp Gin Leu Ala Gin Ala íle Ser Asp His Tyr Pro Val

245 250255

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 71 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) DÍžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO; 71

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

S

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

7S

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

90

85

90

Al*

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

His

íle

Val

Arg

Phe

Phe

ser

110

115

120

Arg

1 Phe Th:

í Glu Val

Arg

G1U

Phe

Ala

íle

val

Pro

Leu

His

ALa

125

130

13S

Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala Glu íle Asp Ala Leu Tyr Asp Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

LSO

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

L95

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

HiB

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

243

2S0

2S3

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 72 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 72

Leu 1

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

i Gly Glu Thr Lys

1

5

ία

15

Mat :

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

11«

Val

. Gin íle Lei

u Ser

20

25

30

Arg ‘

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg Asp Ser Hi:

a Leu

35

40

45

Thr ,

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn Gin Asp Al<

a Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

VaL

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Lys

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

12S

130

13S

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

val

Ala

G1U

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

ASD

Val

140

14S

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

cys

Ala

200

205

210

Tyr

ASp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

32S

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 73 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 73

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

Zle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn.

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

SO

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

0/3

Glu

Pro

C/S

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

?ro

Leu

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

11S

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

VaL

Pro

Leu

His

Ala

125

130

125

Ala

Pro

Gly

ASD

Ala

Val

Ala

G1U

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

ASp

val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

18 0

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245 250 255

Glu Val Mat Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 74 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 74

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

VaL

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

GlU

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Met

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

150

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Zle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

val

Pro

I Asp

Ser

' Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

. Set

- Asp

Gin

. Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 75 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) DÍžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 75

Leu 1

Lys

íle

Ala Ala Phe Asn íle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

Zle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

SO

55

60

Asp

Thr

Tyr

HiS

Tyr

val

val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

7S

Tyr

Lys

Glu

Arg Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

10S

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Gin

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

L10

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp Gly

Lau

Glu

Asp

Val

Met

Leu

L55

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

HÍS

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

13S

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

rie

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

val

Met

Leu

1S5

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

1B5

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

HiS

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

val

Met

Leu

Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 77 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 77

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Fhe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

Ila

val

Gin

íle

Leu

Sar

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Tlxr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

JSO (2) Informácia pre SEQ ID NO: 76 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 76

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Mec

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

Ila

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

ASp

ser

HiS

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

8C

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

GlU

Pro

Arg

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Asp

Thr

T/r

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

G1U

Pro

Trp

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

G1U

íle

ASp

Ala

Leu

Tyr

Asp

val

140

145

ISO

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

19S

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

ASp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

val

Pre

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 78 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 78

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

Zle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

3S

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

SO

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

7S

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Tyr

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

Zle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

ASp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

190

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

135

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Zle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Sar

Asp

Gin.

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 79 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) DÍžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 79

Leu

Lys

Xle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

Zle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

Asn.

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

6 S

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

val

Met

Leu

1S5

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Zle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

195

190

195

Zle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val Pro Asp Ser Ala Leu Pro Pha Asn Phe Gin Ala Ala Tyr Gly

				230	235	240
Leu	Ser	Asp	Gin	Leu Ala Gin Ala	íle Ser Asp His	Tyr Pro Val
				245	250	255
Glu	Val	Met	Leu	Lys
				260

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 80 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) DÍžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 80

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

LO

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

HÍS

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Thr

Ala

Pro

SO

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

8S

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

12S

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Mee

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

ieo

Trp Ser Ser íle Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

HÍS

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

G1U

Val

Met

Leu

Lys

260

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 81 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 81 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 83 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 83

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

S

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pre

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

Asn

Tyr

Thr

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lye

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

ao

85

90

Ale

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pre

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 82 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 82

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

S

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

Zle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

L«U

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

SO

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Asn

Val

Thr

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

ryr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

8S

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

zle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

val

140

14 5

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

24S

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260

Leu Lys íle Ala Ala

Phe Asn íle Gin Thr 10

Phe Gly Glu

Thr

Lys 15

1

5

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

SO

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Asn

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

11S

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

val

Ala

Glu

Zle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

val

140

14$

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

1S5

160

16S

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

ASp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

HÍS

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 84 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 84

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

rie

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Asn

Ser

Thr

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

VaL

Ser

80

85

90

Ala

val

ASp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

cys

Glu

Pro

cys

Gly

95

100

10S

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 85 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 85

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

Zle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

S

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

so

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

60

85

90

Ala

Val

Asp

Asn

Tyr

Thr

Tyr

Asp

Asp

Gly

cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

160

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Zle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 86 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 86

Leu Lys íle Ala Ala Phe Asn

íle Gin Thr Phe 10

Gly

•Glu

Thr

Lys

1

5

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

Glu

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

S5

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

cys

Glu

Pro

Cys

Gly

100 105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

13S

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

1S0

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

120 125 1S0

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

19S

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

HiS

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245 250 255

Glu Val Met Leu Lys

250 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 87 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) DÍžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 87

Leu Lys íle Ala 1

Ala Phe Asn íle Cln Thr Phe Gly

Glu Thr

15

5

10

Met

Ser

Asn

Ala

Thr :

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala 1

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys 1

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

90

Asp

Thr

m

His

Glu Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu .

Arg

Tyr 1

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val .

Asp ;

Ser

Tyr Tyr

Tyr .

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

LOS

Asn

Asp '

Thr :

Phe

Asn Arg ·

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg Phe

Thr

Glu

i val

Arg

Glu

Phe

; Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ald

i Pro

Gly

Asp

i Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

iso

Tyr

' Leu

. Asp

Val

Gin

Glu

. Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

; Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

190

Trp

> Ser

Ser

íle

Arg

Leu

. Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

135

190

195

íle

í Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

22S

val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

23S

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 88 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 88

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

S

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

val

Ser

Tyr

íle

val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

Ala

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Arg

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Ala

Val

Val

Ser

Arg

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

ao

85

90

Ala

Val

Asp

ser

Tyr

Tyr

Tyr

Aap

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

L2C

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

14 5

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

GLy

Cys

Ser

Tyr

Val

Are

Pro

Ser

Gin

170

175

1Θ0

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Tr?

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

1B5

190

195

íle

Pre

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 89 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 89

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

1S

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Arg

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tvr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lye

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pre

Asp

Gin

val

Ser

80

8S

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Ala íle

Val Arg

Phe

Phe

Ser 120

110

115

Arg

Phe

Thr

Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

íle 13 0

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala 140

Val

Ala

Glu

íle

Asp 14 5

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val 150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin 155

Glu

Lys

Trp Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 155

Met

Gly

Asp

Phe

Asn 170

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr 175

Val

Arg

Pro

Ser

G Ír. 180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

íle

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val 2X5

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ä_a

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 23 5

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

24S 250 255

Glu Val Met L«u Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 90 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 90

Leu

Lys

íle

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

1S

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Asn

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

ÓC

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Lau

Gly

Arg

Asn

Ser

65

7C

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asr.

Asp

Thr

Phe·

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

ASp

val

140

14S

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

HÍS

Tyr

Pro

val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 91 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) DÍžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 91

Leu

Lys

:le

Ala

Ala

Phe

Asn

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Are

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Arg

Asp

Asr.

Leu

Asn

Gin

ASD

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

BS

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

12S

130

13 5

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

14S

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

1Θ0

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gl.n

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

ASp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

20S

210

Tyr

Asp

Arg

Zle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

22S

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

Kifl

Tyr

Pro

Val

24S 2S0 2SE

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 92 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) DÍžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna

(xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 92

Clu

Thr

Lys 1=

Leu 1

Lys

íle

Ala

Ala 5

Phe

Asn

íle

Gin

Thr 10

Phe Gly

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Cys

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

ASp

Thr

Tyr

HÍS

Tyr

val

val

ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

6S

70

7S

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr 80

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg 85

Pro

Asp

Gin

Val

Ser 90

Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly

100 los

Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Ala tie Val Arg Phe Phe Ser

110 11S 120

Arg

Phe

Thr Glu

Val Arg Glu Phe Ala íle Val Pro Leu His Ala

125

130

13S

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

G1U

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

1B0

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

19S

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

GLv

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Glrt

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245 2S0

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 93 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 93

Leu 1

Lys

íle

Ala Ala Phe Asr. íle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr' íle

val

Gin

íle Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

val

Arg Asp

Ser His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lvs

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Phe

Gin

Asp Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

ASp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly Cys

Glu

Pro Cys

Glv

95

100

LOS

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr Asp

Val

14 0

145

15 C

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Tr?

Gly

Leu

Glu

Asp

Val Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro Ser

Glr.

170

175

ISO

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin Trp

Leu

185

190

1SS

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His Cys

Ala

200

20S

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly Ala

Val

215

220

225

val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr Pro

val

245

250

255

Glu

val

Met

Leu

Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 94 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 94

Leu Lys íle Ala Ala Phe Asn íle Gin. Thr Phe

Gly

Glu

Thr

Lys 1S

1

5

10

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Lys

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

ao

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr T)t Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pre

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pre

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Pha

Ser

110

lis

110

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

Hl 3

Ala

125

130

115

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

1S0

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

cys

Ser

Tyr

val

Arg

Pro

Ser

dr.

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

24S 250 255

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 95 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 95

Leu Lys íle Ala Ala Phe Asn íle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys

1

5

10

1S

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Arg

Glr.

Asp

Ala

Pro

50

53

SO

Asp

Thr

T/r

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Lau

Gly

Arg

Asr.

Ser

63

70

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

30

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Vaľ

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

130

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

rie

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260

(2) Informácia pre SEQ ID NO: 96 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 96

Leu

Lys

íle

ALa

Ala

Phe

Asn.

íle

Gin

Thr

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys

1

S

10

15

Mec

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

íle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

2S

2?

Arg

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Trp

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

60

65

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

□ Ly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

13 S

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

ASp

Pha

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

ryr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

23S

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 97 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 97

Leu Lys íle Ala 1

Ala 5

Phe Asn íle Gin

Thr 10

Phe Gly

Glu

Thr

Lys 15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

Zle

Val

Gin

íle

Leu

Ser

20

25

30

Are

Tyr

Asp

íle

Ala

Leu

Val

G In

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

SS

60

Asp

Thr

Tyr

HÍS

Pro

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Sar

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Oly

Cya

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

L6S

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

130

Trp

Ser

Ser

íle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

22 =

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tvr

Gly

230

235

I4Č

Leu :

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Zle

Ser

Asp

His

Tvr

Pro

Val

245

250

2 53

Glu Val Met Leu Lys

260 (2) Informácia pre SEQ ID NO: 98 (i) Sekvenčné charakteristiky:

(A) Dĺžka: 260 aminokyselín (B) Typ: aminokyselina (C) Topológia: lineárna (xi) Opis sekvencie: SEQ ID NO: 98

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

íle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

íle

Val

Pre

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

íle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Zle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

íle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

íle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

íle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

val

245 250 255

Glu Val Met Leu Lys

Claims (6)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Aktin-rezistentný variant humánnej DNázy I, ktorý obsahuje aspoň jednu aminokyselinovú substitúciu vybranú zo skupiny, ktorá zahŕňa H44Q, L45C, L45K L45R, V48K, V48R, G49I, G49K, G49R, G49Y, L52K, L52M, L52N, L52R, D53L, D53M, N56R, Y65K, Y65M, Y65S, Y65P, V66N, V67D, V67H, V67M, V67P, V67R, V67S, S68K, S68R, S68M, E69A, A114E, A114G, A114H, A114K, Al 14L, Al 14M, Al 14Q, Al 14R, Al 14W a Al 14Y.
2. 2. Variant podľa nároku, 1, ktorý obsahuje aspoň jednu aminokyselinovú substitúciu vybranú zo skupiny zahŕňajúcej V48K, G49I, G49R, D53M, N56R, V66N, A114G a A114H.
3. 3. Variant podľa nároku 1, ktorý obsahuje najmenej jednu kombináciu aminokyselinových substitúcií vybranú zo skupiny, ktorá zahŕňa Y65N:V67T, V67N:E69T, S68N:P70T aS94N:Y96T.
4. 4. Variant podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 3, ktorý je aspoň na 90 % identický s aminokyselinovou sekvenciou natívnej humánnej DNázy I.
5. 5. Variant podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 3, ktorý je aspoň na 95 % identický s aminokyselinovou sekvenciou natívnej ľudskej DNázy I.
6. 6. Izolovaná nukleová kyselina kódujúca aktín-rezistentný variant ľudskej DNázy I podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 5.

   Leu Lys íle Ala Ala Phe Asn íle Gla Thr Phe Gly Glu Thr Lys 1 5 10 15 Met Ser Asn Ala Thr Leu Val Ser Tyr íle Val Gin íle Leu Ser 20 25 30 Arg Tyr Asp íle Ala Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 35 40 45 Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu Asp Asn Leu Asn Gin ASp Ala Pro 50 55 60 Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Asn Glu Thr Leu Gly Arg Asn Ser 65 70 75 Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 80 85 90 Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro cys Gly 95 100 105