[go: up one dir, main page]
More Web Proxy on the site http://driver.im/

RU2303602C2 - Способ получения трипептидов - Google Patents

Способ получения трипептидов Download PDF

Info

Publication number
RU2303602C2
RU2303602C2 RU2006104889/04A RU2006104889A RU2303602C2 RU 2303602 C2 RU2303602 C2 RU 2303602C2 RU 2006104889/04 A RU2006104889/04 A RU 2006104889/04A RU 2006104889 A RU2006104889 A RU 2006104889A RU 2303602 C2 RU2303602 C2 RU 2303602C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
pro
gly
general formula
mmol
solution
Prior art date
Application number
RU2006104889/04A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2006104889A (ru
Inventor
Андрей Андреевич Азьмуко (RU)
Андрей Андреевич Азьмуко
Жанна Дмитриевна Беспалова (RU)
Жанна Дмитриевна Беспалова
Александр Сергеевич Молокоедов (RU)
Александр Сергеевич Молокоедов
Михаил Владимирович Овчинников (RU)
Михаил Владимирович Овчинников
Марина Евгеньевна Палькеева (RU)
Марина Евгеньевна Палькеева
Мари Владимировна Сидорова (RU)
Мария Владимировна Сидорова
Original Assignee
Закрытое акционерное общество "Синтез пептидов"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Закрытое акционерное общество "Синтез пептидов" filed Critical Закрытое акционерное общество "Синтез пептидов"
Priority to RU2006104889/04A priority Critical patent/RU2303602C2/ru
Publication of RU2006104889A publication Critical patent/RU2006104889A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2303602C2 publication Critical patent/RU2303602C2/ru

Links

Landscapes

  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области фармацевтической химии, конкретно к способу получения трипептидов общей формулы I:
A-Pro-Gly-Pro-OX, где А - Н, Ас; Х - Н, Bzl, But и имеет своей целью упрощение процесса получения и повышение выхода целевых трипептидов. Сущность изобретения заключается в том, что синтез осуществляют жидкофазным методом путем конденсации С-концевого производного пролина общей формулы H-Pro-ОХ1, где X1 - Bzl, But с N-защищенным дипептидом общей формулы: Y-Pro-Gly-OH, где Y - Z, Boc и полученный защищенный трипептид общей формулы: Y-Pro-Gly-Pro-OX1, где Y и X1 имеют значения указанные выше, обрабатывают деблокирующими реагентами и полученный продукт в случае необходимости подвергают ацетилированию и необязательно получают гидрохлориды. 1 з.п. ф-лы.

Description

Изобретение относится к фармацевтической химии, конкретно к способу получения трипептидов общей формулы:
A-Pro-Gly-Pro-OX,
где А - Н, Ас; Х - Н, Bzl, But, или их гидрохлоридов, и может найти применение в медицине для получения физиологически активных пептидов.
Трипептиды, содержащие последовательность Pro-Gly-Pro, входят в состав известных регуляторных пепидов (β-казоморфин, кальцитонин, гастрин) и целого ряда нейротропных пептидных препаратов, таких как семакс и селанк [1]. Кроме того, трипептид Pro-Gly-Pro обладает противоязвенной активностью [2].
Известен способ получения бромгидрата H-Pro-Gly-Pro-OH путем ацилирования С-концевого дипептида хлорангидридом N-бензилоксикарбонил-L-пролина с последующим удалением N-концевой защитной группы обработкой раствором бромистого водорода в уксусной кислоте [3].
Недостатком этого способа является низкий выход целевого продукта и необходимость использования в синтезе хлорангидрида N-бензилоксикарбонил-L-пролина, который является нестабильным соединением; кроме того, при его получении используют высокотоксичные реагенты - тионилхлорид или пятихлористый фосфор [4].
Известен способ получения трипептида Ac-Pro-Gly-Pro-OH, твердофазным методом путем конденсации С-концевого пролина, связанного с полимерной подложкой, с Boc-Pro-Gly-OH с использованием N,N'-дициклогексилкарбодиимида в качестве конденсирующего агента с последующим отщеплением от трипептидилполимера N-концевой защитной группы, ацилированием уксусным ангидридом и отщеплением от полимерной положки обработкой безводным HF [5]. Недостатками этого способа являются необходимость использования специального аппаратурного оформления (твердофазного синтезатора и прибора для работы с жидким фтористым водородом) и применение в синтезе высокотоксичного фтористого водорода, что делает этот метод малопригодным для препаративной наработки целевых соединений.
Наиболее близким по технической сущности к описываемому способу является способ получения H-Pro-Gly-Pro-OH, основанный на конденсации метилового эфира L-пролина и N-карбобензокси-L-пролилглицина с последующей обработкой защищенного трипептида деблокирующими реагентами [6]. Недостатками известного способа является многостадийность и низкий выход целевого продукта.
Задачей данного изобретения является упрощение процесса получения и повышения выхода целевых трипептидов.
Решение поставленной задачи достигается заявленным способом, который заключается в том, что синтез трипептидов общей формулы (I) осуществляют в растворе путем конденсации производного пролина общей формулы: Н-Pro-ОХ1, где X1 - бензил (Bzl), трет.-бутил (But), с защищенным дипептидом общей формулы: Y-Pro-Gly-OH, где Y - бензилоксиакрбонил (Z), трет.-бутилоксикарбонил (Boc), и полученный защищенный трипептид общей формулы: Y-Pro-Gly-Pro-OX1, где Y и X1 имеют значения, указанные выше, обрабатывают деблокирующими реагентами и полученный продукт в случае необходимости подвергают ацетилированию.
Список сокращений
АсОН - уксусная кислота
Ас - ацетил
AcONp - пара-нитрофенилацетат
Вос - трет.-бутилоксикарбонил
But - трет.-бутил
Bzl - бензил
DCC - N,N'-дициклогексилкарбодиимид
DCHU - N,N'-дициклогексилмочевина
DMF - N,N-диметилформамид
HOBt - 1-гидроксибензотриазол
HONp - пара-нитрофенол
HONSu - N-гидроксисукцинимид
TFA - трифторуксусная кислота
Z - бензилоксикарбонил
ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография
ТСХ - тонкослойная хроматография
Экспериментальная часть
В синтезе использованы производные L-аминокислот фирмы Bachem (Швейцария). DCC, TFA, HONSu, HONp фирмы Fluka (Швейцария). DMF очищали перегонкой над нингидрином и окисью бария. Аналитическую ВЭЖХ проводили на хроматографе фирмы Gilson (Франция).
ТСХ проводили на стеклянных хроматографических пластинках Merck-Kiselgel 60 (Германия) в следующих системах растворителей:
А - хлороформ:метанол:АсОН 9:1:0.5
Б - хлороформ:метанол:32% АсОН 15:4:1
В - хлороформ:метанол:32% АсОН 5:3:1
Г - хлороформ:метанол:этилацетат 6:3:1
1Н-ЯМР - спектры снимают на спектрометре WH-500 Bruker 500 МГц (ФРГ) в DMSO-d6 при 300 К. Химические сдвиги (δ, м.д.) измеряют относительно тетраметилсилана.
Масс-спектры регистрируют на масс-спектрометре Analytical Compact MALDI 4 фирмы Kratos (Великобритания).
Описываемый способ иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1.
Figure 00000001
1.
Figure 00000002
4.1 г (55 ммоль) глицина растворяют в 55 мл 1н. раствора NaOH, добавляют при охлаждении раствор 15.6 г (50 ммоль) Boc-Pro-ONSu в 100 мл DMF и перемешивают в течение 24 ч, контролируя протекание реакции с помощью ТСХ в системе Б. Раствор упаривают, остаток растворяют в воде, водный раствор экстрагируют эфиром (2×20 мл), подкисляют до рН 2-3 12 н. раствором HCl и экстрагируют смесью этилацетата с бутанолом в соотношении 2:1 (2×150 мл). Объединенные органические вытяжки промывают насыщенным раствором NaCl и водой до нейтральной реакции и упаривают. Остаток кристаллизуют из смеси эфир-гексан 1:1, отфильтровывают, сушат в вакууме. В итоге получают 11.6 г (85%) Ia с Rf 0.57 (А), 0.71 (Б), 0.86 (В).
2.
Figure 00000003
К раствору 9.0 г (44 ммоль) H-Pro-OBzl в 100 мл DMF, охлажденному до -10°С, прибавляют при интенсивном перемешивании охлажденный до той же температуры раствор 10.9 г (40 ммоль) Ia, 6.7 г (44 ммоль) HOBt и 9.2 г (44 ммоль) DCC в DMF. Реакционную смесь перемешивают 10 мин при -10°С и оставляют при комнатной температуре на 24 ч. Полноту конденсации контролируют с помощью ТСХ в системах А и Г. По окончании реакции выпавший осадок DCHU отфильтровывают, фильтрат упаривают, остаток растворяют в этилацетате и промывают последовательно 2% H2SO4 (3×20 мл), водой, 2% раствором НаНСО3, водой до нейтральной реакции. Раствор упаривают, остаток растирают с гексаном, отфильтровывают, сушат в вакууме. В итоге получают 17.1 г (93%) Iб с Rf 0.80 (A), 0.88 (Б), 0.50 (Г).
3.
Figure 00000004
6 г (13.1 ммоль) трипептида Iб растворяют в 3 н. растворе HCl в АсОН в течение 1 ч. Полноту деблокирования контролируют с помощью ТСХ в системе Б. Через 1 ч реакционную смесь упаривают в вакууме. Остаток растирают с сухим холодным эфиром, отфильтровывают, сушат в вакууме. В итоге получают 5.0 г (97%) I. Гомогенность полученного продукта подтверждают с помощью аналитической ВЭЖХ в условиях градиентного элюирования буфером Б в буфере А (А - 0.1% TFA, Б - 80% ацетонитрила в буфере А) от 10 до 70% буфера Б за 30 мин на колонке Ultrasphere ODS 4.6×250 мм, размер зерна 5 мкм, детекция при 220 нм. Чистота, по данным ВЭЖХ 95%, Rt 17.5 мин (в указанных условиях). Rf 0.19 (А), 0.52 (Б), 0.76 (В). 1Н-ЯМР - спектр (DMSO-d6), δ, м.д.): 7.36 (аром. 5H), 5.11(CH2-Ph, 2H);
Pro: 4.24 (α-CH, 1H); 2.32, 1.88 (β-СН2, 2Н); 1.92 (γ-СН2, 2Н); 3.58, 3.54 (δ-CH2, 2H);
Gly: 8.72 (NH, 1H); 4.11, 3.98 (α-СН2, 2Н);
Pro: 4.39 (α-СН, 1H); 2.20, 1.86 (β-СН2, 2H); 1.92, 1.86 (γ-СН2, 2H); 3.41, 3.25 (δ-СН2, 2H).
Пример 2.
Figure 00000005
1.
Figure 00000006
19,5 г (0,260 М) глицина растворяют в 260 мл 1 н. NaOH, полученный раствор добавляют к охлажденному до 0°С раствору 96,0 г (0,260 М) Z-Pro-ONp в 600 мл DMF. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 часов, упаривают, остаток растворяют в 300 мл воды и трижды экстрагируют эфиром. Эфирный слой отделяют, к водному слою добавляют 150 мл 2 н. раствора HCl, выпавшее масло экстрагируют 600 мл этилацетатата. Органический слой отделяют и промывают водой до нейтральной реакции, сушат над Na2SO4, упаривают, остаток перекристаллизовывают из эфира. В итоге получают: 67,5 г (85%) IIa с Т.пл. 122-123°С; Rf 0,67 (A); Rf 0,81 (В), Rf 0,65 (С).
2.
Figure 00000007
0,920 г (3 мМ) соединения IIa растворяют в 40 мл DMF, к полученному раствору добавляют 0.33 мл (3 мМ) N-метилморфолина, охлаждают до -15°С и при перемешивании добавляют 0,39 мл (3 мМ) изобутилхлорформиата. Реакционную смесь перемешивают в течение 5 минут при -10°С, затем прибавляют к ней раствор 0,73 г (3 мМ) HCl·H-Pro-OBzl и 0.33 мл (3 мМ) N-метилморфолина в 20 мл DMF. Через час реакционную смесь упаривают, образовавшееся масло растворяют в 50 мл этилацетата и последовательно промывают 2% H2SO4, водой, 5% NaHCO3, водой. Органический слой упаривают. Получают 1.48 г (100%) соединения IIб в виде масла. Rf 0,87 (Б).
3.
Figure 00000008
1,48 г (3 мМ) соединения IIб растворяют в 60 мл этилового спирта и гидрируют над 5% Pd/C. Полноту процесса гидрирования контролируют с помощью ТСХ в системе Б. Катализатор отфильтровывают, трижды промывают этиловым спиртом, фильтрат упаривают, образовавшееся масло растирают в эфире, полученный осадок отфильтровывают. Получают 0,78 г (96%) соединения II с Т.пл 151-155°С, Rt 5,44 мин и чистотой 96,6% по данным аналитической ВЭЖХ. Колонка Ultropac TSK ODS-120T 4,6×250 мм, 5 мкм. Буфер А: 0,05 М КН2PO4, рН 3,0; буфер В: 70% ацетонитрил + 30% Н2О; градиент: 10-70% В за 30 мин Rf 0,16 (В).
MALDI-MS m/z, найдено: 270,23 [М+Н]+, вычислено: 269,3
1Н-ЯМР - спектр (DMSO-d6, δ, м.д.): наблюдается наличие cis-, trans-конформеров в соотношении 1:6:
для trans-конформера:
Pro - 4,24 (α-СН, 1Н); 2,30/1,88 (β-СН, 2Н)
Gly - 8,70 (NH, 1H); 4,07/3,96 (α-CH, 1H)
Pro - 4,24 (α-CH, 1H); 2,13/1,85 (β-СН, 2Н)
Пример 3.
Figure 00000009
0,79 г (2 мМ) соединения I растворяют в 40 мл воды и гидрируют над 5% Pd/C. Полноту процесса гидрирования контролируют с помощью ТСХ в системе Б. Катализатор отфильтровывают, промывают на фильтре водой, фильтрат упаривают, оставшееся масло трижды упаривают с изопропиловым спиртом, растирают в эфире, полученный осадок отфильтровывают. Получают 0,57 г (93%) соединения III с Т.пл. 172-176°С, Rt 5,44 мин. и чистотой 96,6% по данным аналитической ВЭЖХ. Колонка Ultropac TSK ODS-120T 4.6×250 мм, 5 мкм. Буфер А: 0,05 М КН2PO4, рН 3,0; буфер В: 70% ацетонитрил + 30% H2O; градиент: 10-70% В за 30 мин Rf 0,16 (В).
MALDI-MS m/r, найдено: 270,23 [М+Н]+, вычислено: 269,3
1Н-ЯМР - спектр (DMSO-d6, δ, м.д.): наблюдается наличие cis-, trans-конформеров в соотношении 1:6:
для trans-конформера:
Pro - 4,24 (α-СН, 1Н); 2,30/1,88 (β-СН, 2Н)
Gly - 8,70 (NH, 1H); 4,07/3,96 (α-СН, 1Н)
Pro - 4,24 (α-CH, 1H); 2,13/1,85 (β-СН, 2Н)
Пример 4.
Figure 00000010
0,61 г (2,25 мМ) соединения II растворяют в 5 мл DMF, к полученному раствору добавляют 0,25 мл (2,25 мМ) N-метилморфолина и 0,45 г (2,5 мМ) AcONp. Реакционную смесь выдерживают при комнатной температуре в течение 8 часов (полноту протекания реакции контролируют с помощью ТСХ в системе В). Затем реакционную смесь упаривают, образовавшееся масло растворяют в воде, дважды экстрагируют эфиром, эфирный слой отбрасывают, а водный подвергают очистке методом ВЭЖХ на колонке Диасорб 24×250 мм, 5 мкм. Буфер А: 0,1% TFA; буфер В: ацетонитрил; градиент: 0-40% В за 20 мин. Получают 0,67 г (95%) соединения IV с Т.пл 91-99°С, Rt 8,99 мин и чистотой 98,7% по данным аналитической ВЭЖХ. Колонка Ultropac TSK ODS-120T 4,6×250 мм, 5 мкм. Буфер А: 0,05 М KH2PO4, рН 3,0; буфер В: 70% ацетонитрил + 30% Н2O; градиент: 10-70% В за 30 мин Rf 0,25 (В).
MALDI-MS m/z, найдено: 312,4 [М+Н]+, вычислено: 311,3.
1Н-ЯМР - спектр (DMSO-d6, δ, м.д.): наблюдается наличие cis-; trans-конформеров в соотношении 1:1:
для cis-конформера:
Pro - 4,37 (α-СН, 1Н); 2,19/2,15 (β-СН, 2Н)
Gly - 8,20 (NH, 1H); 4,06/3,79 (α-СН, 1Н)
Pro - 4,56 (α-СН, 1Н); 2,20 (β-СН, 2Н)
Ac - 1,89 (-СН3, 3Н)
для trans-конформера:
Pro - 4,329 (α-СН, 1Н); 1,97 (β-СН, 2Н)
Gly - 7,88 (NH, 1H); 3,93/3,81 (α-СН, 1Н)
Pro - 4,23 (α-СН, 1Н); 2,13/2,09 (β-СН, 2Н)
Ac - 1,96 (-СН3, 3Н)
Пример 5.
Figure 00000011
0,61 г (2,25 мМ) соединения II растворяют в 5 мл DMF, к полученному раствору добавляют 0,25 мл (2,25 мМ) N-метилморфолина и 0,26 г (2,5 мМ) уксусного ангидрида. Реакционную смесь выдерживают при комнатной температуре в течение 1 часа (полноту протекания реакции контролируют с помощью ТСХ в системе В). Затем реакционную смесь упаривают, образовавшееся масло растворяют в воде и подвергают очистке методом ВЭЖХ на колонке Диасорб 24×250 мм, 5 мкм. Буфер А: 0,1% TFA; буфер В: ацетонитрил; градиент: 0-40% В за 20 мин. Получают 0,57 г (81%) соединения IV с Т. пл. 92-95°С, Rt 8,99 мин и чистотой 96,6% по данным аналитической ВЭЖХ. Колонка Ultropac TSK ODS-120T 4,6×250 мм, 5 мкм. Буфер А: 0,05 М KH2РО4, рН 3,0; буфер В: 70% ацетонитрил + 30% Н2O; градиент: 10-70% В за 30 мин Rf 0,25 (В).
MALDI-MS m/z, найдено: 312,4 [М+Н]+, вычислено: 311,3.
1Н-ЯМР - спектр (DMSO-d6, δ, м.д.): наблюдается наличие cis-, trans-конформеров в соотношении 1:1:
для cis-конформера:
Pro - 4,37 (α-СН, 1Н); 2,19/2,15 (β-СН, 2Н)
Gly - 8,20 (NH, 1H); 4,06/3,79 (α-CH, 1H)
Pro - 4,56 (α-СН, 1Н); 2,20 (β-СН, 2Н)
Ac - 1,89 (-СН3, 3Н)
для trans-конформера:
Pro - 4,329 (α-СН, 1Н); 1,97 (β-СН, 2Н)
Gly - 7,88 (NH, 1H); 3,93/3,81 (α-СН, 1Н)
Pro - 4,23 (α-СН, 1Н); 2,13/2,09 (β-СН, 2Н)
Ac - 1,96 (-СН3, 3Н)
Пример 6.
Figure 00000012
0,89 г (2,25 мМ) соединения I растворяют в 10 мл DMF, к полученному раствору добавляют 0,25 мл (2,25 мМ) N-метилморфолина и 0,26 г (2,5 мМ) уксусного ангидрида. Реакционную смесь выдерживают при комнатной температуре в течение 1 часа (полноту протекания реакции контролируют с помощью ТСХ в системе В). Затем реакционную смесь упаривают, остаток растворяют в воде и гидрируют над 5% Pd/C. После завершения процесса гидрирования (контроль с помощью ТСХ в системе А) катализатор отфильтровывают, промывают на фильтре трижды водой, водный раствор целевого продукта упаривают до 1/3 объема и подвергают очистке методом ВЭЖХ на колонке Диасорб 24×250 мм, 5 мкм. Буфер А: 0,1% TFA; буфер В: ацетонитрил; градиент: 0-40% В за 20 мин. Получают 0,63 г (91%) соединения IV с Т.пл. 90-94°С, Rt 8,99 мин и чистотой 96,2% по данным аналитической ВЭЖХ. Колонка Ultropac TSK ODS-120T 4,6×250 мм, 5 мкм. Буфер А: 0,05 М KH2PO4, рН 3,0; буфер В: 70% ацетонитрил + 30% Н2О; градиент: 10-70% В за 30 мин Rf 0,25 (В).
MALDI-MS m/z, найдено: 312,4 [М+Н]+, вычислено: 311,3.
1Н-ЯМР - спектр (DMSO-d6, δ, м.д.): наблюдается наличие cis-, trans-конформеров в соотношении 1:1:
для cis-конформера:
Pro - 4,37 (α-СН, 1Н); 2,19/2,15 (β-СН, 2Н)
Gly - 8,20 (NH, 1H); 4,06/3,79 (α-CH, 1H)
Pro - 4,56 (α-CH, 1H); 2,20 (β-CH, 2H)
Ac - 1,89 (-СН3, 3Н)
для trans-конформера:
Pro - 4,329 (α-CH, 1H); 1,97 (β-CH, 2H)
Gly - 7,88 (NH, 1H); 3,93/3,81 (α-CH, 1H)
Pro - 4,23 (α-CH, 1H); 2,13/2,09 (β-CH, 2H)
Ac - 1,96 (-СН3, 3Н)
Пример 7. Гидрохлорид трет-бутилового эфира пролил-глицил-пролина
Figure 00000013
1.
Figure 00000014
19,5 г (260 ммоль) глицина растворяют в 260 мл 1 н. NaOH, полученный раствор добавляют к охлажденному до 0°С раствору 96,0 г (260 ммоль) Z-Pro-ONp в 600 мл DMF. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 часов, упаривают, остаток растворяют в 300 мл воды и трижды экстрагируют эфиром. Эфирный слой отделяют, к водному слою добавляют 150 мл 2 н. раствора HCl, выпавшее масло экстрагируют 600 мл этилацетатата. Органический слой отделяют и промывают водой до нейтральной реакции, сушат над Na2SO4, упаривают, остаток перекристаллизовывают из эфира. В итоге получают: 67,5 г (85%) продукта с Т пл. 122-123°С; Rf 0,81 (Б), Rf 0,65 (Г).
2.
Figure 00000015
К раствору 45.7 г (220 ммоль) H-Pro-Obut HCl в 500 мл DMF, охлажденному до -10°С, прибавляют при интенсивном перемешивании охлажденный до той же температуры раствор 67.5 г (220 ммоль) Va, 33.4 г (220 ммоль) HOBt и 45.3 г (220 ммоль) DCC в 100 мл DMF. Реакционную смесь перемешивают 10 мин при -10°С и оставляют при комнатной температуре на 24 ч. Полноту конденсации контролируют с помощью ТСХ в системах А и Г. По окончании реакции выпавший осадок DCHU отфильтровывают, фильтрат упаривают, остаток растворяют в этилацетате (800 мл) и промывают последовательно 2% H2SO4 (3×250 мл), водой (3×250 мл), 2% раствором NaHCO3 (3×250 мл), водой до нейтральной реакции. Раствор упаривают, остаток растирают с гексаном, отфильтровывают, сушат в вакууме. В итоге получают 90.9 г (90%) Vб, с Rf 0.82 (A), 0.91 (Б), 0.6 (Г).
3.
Figure 00000013
90.9 г (198 ммоль) Vб растворяют в 1000 мл EtOH и гидрируют над 5% Pd/C до исчезновения исходного соединения по ТСХ в системе Б. Затем катализатор отфильтровывают, к фильтрату добавляют 198 мл 1 н. водного раствора соляной кислоты и упаривают досуха, маслообразный остаток упаривают с изопропиловым спиртом, остаток обрабатывают эфиром. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают на фильтре эфиром и сушат. В итоге получают 68.1 г (95%) V с Rf 0.15 (А), 0.45 (Б), 0.70 (В). Гомогенность полученного продукта также подтверждают с помощью аналитической ВЭЖХ в условиях градиентного элюирования буфером Б в буфере А (А - 0.1% TFA, Б - 80% ацетонитрила в буфере А) от 10 до 70% буфера Б за 30 мин на колонке Ultrasphere ODS 4.6×250 мм, размер зерна 5 мкм, детекция при 220 нм. Чистота, по данным ВЭЖХ, 96%, Rt 15.9 мин (в указанных условиях). 1Н-ЯМР - спектр (DMSO-d6), δ, м.д.: 1.37 (-С(СН3)3, 9Н);
Pro: 4.23 (α-CH, 1H); 2.32, 1.87 (β-СН2, 2Н); 1.91 (γ-СН2, 2Н); 3.58, 3.54 (δ-CH2, 2H);
Gly: 8.72 (NH, 1H); 4.11, 3.97 (α-СН2, 2Н);
Pro: 4.37 (α-СН, 1H); 2.22, 1.86 (β-СН2, 2Н); 1.92, 1.86 (γ-СН2, 2Н); 3.40, 3.25 (δ-CH2, 2H).
Как видно из вышеприведенных примеров, описанный способ отличается простотой и позволяет получать целевые продукты в препаративном масштабе с высоким выходом.
Литература
1. Успехи физиологических наук. Т.34, №1, с.14-19 (2003).
2. Патент РФ №2252779, кл. А61К 38/07 (2005).
3. J.Mol.Biol. V.17, р.255-272 (1966).
4. Гринштейн Дж., Виниц М. Химия аминокислот и пептидов. -М: Мир (1965).
5. Патент США 6310041, кл. 514/12 (2001).
6. Изв. АН СССР, Отд. хим. наук, 1959, №4, с.736-738.

Claims (2)

1. Способ получения трипептидов общей формулы
A-Pro-Gly-Pro-OX,
где А - Н, Ас; Х - Н, бензил (Bzl), трет.-бутил (But), или их гидрохлоридов, отличающийся тем, что синтез осуществляют жидкофазным методом путем конденсации С-концевого производного пролина общей формулы Н-Pro-ОХ1, где X1 - Bzl, But с N-защищенным дипептидом общей формулы Y-Pro-Gly-OH, где Y - бензилоксикарбонил (Z), трет.-бутилоксикарбонил (Boc), и полученный защищенный трипептид общей формулы Y-Pro-Gly-Pro-OX1, где Y и Х1 имеют значения, указанные выше, обрабатывают деблокирующими реагентами и полученный продукт в случае необходимости подвергают ацетилированию и необязательно получают гидрохлориды.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что X1 представляет собой бензил (Bzl), Y - бензилоксикарбонил (Z), а деблокирование защищенного трипептида осуществляется каталитическим гидрогенолизом.
RU2006104889/04A 2006-02-17 2006-02-17 Способ получения трипептидов RU2303602C2 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2006104889/04A RU2303602C2 (ru) 2006-02-17 2006-02-17 Способ получения трипептидов

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2006104889/04A RU2303602C2 (ru) 2006-02-17 2006-02-17 Способ получения трипептидов

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2006104889A RU2006104889A (ru) 2006-06-27
RU2303602C2 true RU2303602C2 (ru) 2007-07-27

Family

ID=36714581

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2006104889/04A RU2303602C2 (ru) 2006-02-17 2006-02-17 Способ получения трипептидов

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2303602C2 (ru)

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
СА 53: 121536 Original Ref. №53:21693f-i,21694a. Poroshin K.T. et al. Synthesis of peptides containing L-proline and glycine. Izvestya Academii Nauk SSSR, Seriya Khimicheskaya 736-6 1959. CODEN: IASKA6. ISSN: 0002-3353. AB cf. C.A. 53,3077g. *

Also Published As

Publication number Publication date
RU2006104889A (ru) 2006-06-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2407478A1 (en) New cyclotetrapeptides with pro-angiogenic properties
EP3274360B1 (en) Solution phase method for preparing etelcalcetide
US8217142B2 (en) Liquid phase peptide synthesis of KL-4 pulmonary surfactant
JP2013503176A (ja) C型肝炎ウイルスのプロテアーゼ阻害薬の調製方法
US6235876B1 (en) Liquid phase process for the preparation of GNRH peptides
BG60739B2 (bg) Трипептиди,влияещи върху централната нервна система и метод за тяхното получаване
US5100874A (en) Hydroxamic acid tetrapeptide derivatives
JPH07112969A (ja) 治療および診断用のc分枝を有する核酸結合性オリゴマー類
JP2017523957A (ja) D−アルギニル−2,6−ジメチル−l−チロシル−l−リシル−l−フェニルアラニンアミドの製造方法
EP3160984B1 (en) Process for preparing d-arginyl-2,6-dimethyl-l-tyrosyl-l-lysyl-l-phenylalaninamide
Wen et al. Macrocyclization studies and total synthesis of cyclomarin C, an anti-inflammatory marine cyclopeptide
Pozdnev Activation of carboxylic acids by pyrocarbonates. Synthesis of arylamides of N‐protected amino acids and small peptides using dialkyl pyrocarbonates as condensing reagents
US9850285B2 (en) Process for preparing eptifibatide
RU2303602C2 (ru) Способ получения трипептидов
Thutewohl et al. Solid-phase synthesis of a pepticinnamin E library
US5886147A (en) Compounds useful for the synthesis of dolastatin analogs
RU2303603C2 (ru) Способ получения гептапептида и промежуточные соединения для его получения
RU2804780C1 (ru) Способ получения антимикробного пептидомиметика
JPH01146896A (ja) 新規なペプチジルヒドロキサム酸誘導体
RU2442791C1 (ru) Способ получения бусерелина и промежуточные соединения для его получения
RU2315057C2 (ru) Способ получения аналогов аденокортикотропного гормона (актг), последовательности (4-10), обладающих нейротропной активностью, и тетрапептид для его получения
CZ2003165A3 (cs) Způsob přípravy solí 5-fenylpentanoyl-(S)-alanyl-(S)-arginyl-(S)-alanyl-{(S)-2-[(R)-3-amino-2-oxopyrrolidin-1-yl]propionyl}-(S)-alanyl-(S)-arginyl-(S)-alanyl-4-aminofenylacetamidu
JP2006511459A (ja) ペプチド合成方法
CA2779949A1 (en) Peptidomimetics comprising n-amino cyclic urea residues and uses thereof
US3780015A (en) Process for preparing lysine containing peptides

Legal Events

Date Code Title Description
NF4A Reinstatement of patent

Effective date: 20110810

MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20140218