RU2012130945A - Способ снижения иммуногенности - Google Patents

Abstract

1. Способ снижения иммуногенности вариабельных доменов антитела, содержащего вариабельный домен легкой цепи и/или вариабельный домен тяжелой цепи, где способ включает стадию замены одного или более аминокислотных остатков вариабельного домена легкой цепи и/или вариабельного домена тяжелой цепи, при этом указанный остаток расположен на границе между вариабельным и константным доменом соответствующего полноразмерного антитела.2. Способ по п.1, где вариабельный домен антитела представляет собой scFv, Fv фрагмент или антитело с одним доменом, в частности, scFv.3. Способ по п.1, где один или более аминокислотных остатков, которые должны быть заменены, представляют собой лейцин (L), валин (V), аспарагиновую кислоту (D), фенилаланин (F), аргинин (R) и/или глутаминовую кислоту (E).4. Способ по п.1, где один или более аминокислотных остатков вариабельного домена легкой цепи находятся в положениях 99, 101 и/или 148 (нумерация AHo).5. Способ по п.1, где один или более аминокислотных остатков вариабельного домена тяжелой цепи находятся в одном или более из следующих положений 12, 97, 98, 99, 103 и/или 144 (нумерация AHo).6. Способ по п.1, где один или более аминокислотных остатков заменены аминокислотой с меньшей иммуноспособностью.7. Способ по п.6, где лейцин (L), валин (V) и/или фенилаланин (F) замещены на более полярную аминокислоту.8. Способ по п.7, где более полярная аминокислота представляет собой серин (S) и/или треонин (T).9. Способ по п.6, где один или более аминокислотных остатков вариабельного домена легкой цепи находятся в положениях 99, 101 и/или 148 (нумерация AHo).10. Способ по п.6, где один или более аминокислотных остатков вариабельного домена тяжелой цепи находятся в о

Claims (17)

1. Способ снижения иммуногенности вариабельных доменов антитела, содержащего вариабельный домен легкой цепи и/или вариабельный домен тяжелой цепи, где способ включает стадию замены одного или более аминокислотных остатков вариабельного домена легкой цепи и/или вариабельного домена тяжелой цепи, при этом указанный остаток расположен на границе между вариабельным и константным доменом соответствующего полноразмерного антитела.

2. Способ по п.1, где вариабельный домен антитела представляет собой scFv, Fv фрагмент или антитело с одним доменом, в частности, scFv.

3. Способ по п.1, где один или более аминокислотных остатков, которые должны быть заменены, представляют собой лейцин (L), валин (V), аспарагиновую кислоту (D), фенилаланин (F), аргинин (R) и/или глутаминовую кислоту (E).

4. Способ по п.1, где один или более аминокислотных остатков вариабельного домена легкой цепи находятся в положениях 99, 101 и/или 148 (нумерация AHo).

5. Способ по п.1, где один или более аминокислотных остатков вариабельного домена тяжелой цепи находятся в одном или более из следующих положений 12, 97, 98, 99, 103 и/или 144 (нумерация AHo).

6. Способ по п.1, где один или более аминокислотных остатков заменены аминокислотой с меньшей иммуноспособностью.

7. Способ по п.6, где лейцин (L), валин (V) и/или фенилаланин (F) замещены на более полярную аминокислоту.

8. Способ по п.7, где более полярная аминокислота представляет собой серин (S) и/или треонин (T).

9. Способ по п.6, где один или более аминокислотных остатков вариабельного домена легкой цепи находятся в положениях 99, 101 и/или 148 (нумерация AHo).

10. Способ по п.6, где один или более аминокислотных остатков вариабельного домена тяжелой цепи находятся в одном или нескольких следующих положениях 12, 97, 98, 99, 103 и/или 144 (нумерация AHo).

11. Способ по п.10, где один или более аминокислотных остатков вариабельного домена тяжелой цепи выбран из группы, состоящей из 12, 103 и/или 144 (нумерация AHo).

12. Способ по п.11, где один или более аминокислотных остатков вариабельного домена тяжелой цепи заменен

(a) серином (S) в аминокислотном положении 12 тяжелой цепи;

(b) серином (S) или треонином (T) в аминокислотном положении 103 тяжелой цепи; и/или

(c) серином (S) или треонином (T) в аминокислотном положении 144 тяжелой цепи.

13. Способ по п.11, где один или несколько аминокислотных остатков представляет собой:

(а) лейцин (L) в аминокислотном положении 12 тяжелой цепи;

(b) валин (V) в аминокислотном положении 103 тяжелой цепи; и/или

(с) лейцин (L) в аминокислотном положении 144 тяжелой цепи.

14. Способ по п.13, где один или несколько аминокислотных остатков вариабельного домена тяжелой цепи заменен

(a) серином (S) в аминокислотном положении 12 тяжелой цепи;

(b) серином (S) или треонином (T) в аминокислотном положении 103 тяжелой цепи; и/или

(c) серином (S) или треонином (T) в аминокислотном положении 144 тяжелой цепи.

15. Антиген-связывающий фрагмент, полученный способом по п.1.

16. Фармацевтическая композиция, содержащая антиген-связывающий фрагмент по п.15.

17. Способ по п.1, где один или более аминокислотных остатков, которые должны быть заменены, являются консенсусными остатками в соответствующем подтипе.