PT84972B - Processo para a preparacao de tioeteres relacionados com leucotrieno substituido, inibidores de fosfolipase a2 e composicoes farmaceuticas que os contem - Google Patents

Description

A presente invenção refere-se a novos compostos que inibem a actividade hidrolítica da fosfolipase A2, e os processos para sintetizar esses compostos. Os compostos são farmacológicamente activos no tratamento de estados inflamatórios alérgicos, incluindo a asma.

Deteataram-se leucotrienos e prostaglandi nas nos fluídos e exsudados ce reacções inflamatórios e de rea ção anafiláticas nos puln^as. f .l como os leucotrienos, as pros

- 1 taglandinas são poderosos vasodilatadores e são importantes mediadores de diversos aspectos da resposta inflamatória.

ácido araquidónico que á o material de partida para a biossíntese de leucotrieno e de prostaglandina, e libertado pelos fosfolípidos da membrana da célula através da activação das fosfolipases celulares e, em particula da fosfolipase A₂ (também referida como PA₂).

Em consequência, os compostos farmacológicamente activos que inibem a actividade hidrolítica da fosfolipase A₂ podem proporcionar um alívio mais completo dos estados inflamatórios c elérgicos do que os compostos anti-inflamatórios correntemente disponíveis, inibindo a produção de leucotrienos e de prostaglandinas.

Os leucotrienos são peptidolípidos que derivam do ácido araquidónico sendo reconhecidos como substâncias que obrigam à contracção lenta do músculo liso, em particular do músculo liso bronquial (referidas inicialmente como substancias de reacção lenta). Em contraste com a contracção rápida (no espaço de segundos) induzida pela histamina no músculo liso, os leucotrienos necessitam de diversos minutos para produzir o máximo de contracção.

C SRS-A (substância de reacção lenta de anafilaxia) é um leucotrieno que está associado com as inflamações e elergias incluindo a asma. Isolou-se inicialmente a partir de pulmões de porcos da índia imunologicamente estimulados e sensibilizados com albumina de ovo /“Morris e outros, Mature, 235, 104 LTC^ e LTE^ são outros poderosos agentes de contracção que actuam sobre o músculc liso broncúial e provocam vasoconstricção, espasmo brónquico e permeabilidade vascular acrescida, associada com asma e outras doenças de hipersensibilid.ade instantâneas.

SRS-A liberta-se das células dos mamíferos durante o estado inflamatório ou durante uma reaccão λ

— alérgica. Ο SRS-A excretado pelas células, tal como a histamina, contrai o tecido do músculo liso produzindo respostas inflamatórias e alérgicas, incluindo os ataques de asma. Sxiste a convicção de que a histamina e o SRS-A desempenham um efeito sinergico sobre o músculo liso e sobre os vasos sanguíneos, e que ambos os agentes contribuem para a libertação secundária de prostaglandinas.

Os leucotrienos preparam-se in vivo seguindo uma série de reacções que tem início com a e:nversão do ácido araquidónico pelas lipoxigenases de ácido gordo, em derivados hidro-peroxi, incluindo ΙΊΡΕΤΞ (ácido hidro-peroxi-isositetra-enoico) o qual se pode converter em líETE (ácido hidroxi-icositetra-enoico)· De modo semelhante, as prostaglandinas preparam-se in vivo após uma série de reacçSes que se iniciam com a eonversão do ácido araquidónico pelas ciclo-oxigenases do ácido gordo, em endoperóxidos de prostaglandina.

Os compostos anti-inflamatórios correntemente disponíveis englobam os corticosteróides o os fármacos anti-inflamatórios não esteroidais. Os corticosteroides produzem com frequência efeitos secundários indesejáveis. Os fármacos não esteroidais que englobam indometacina, naproxen, ibuprofen, tolectina e fenopropen, inibem a síntese de prostaglandina mas não inibem a síntese de leucotrieno.

Deste modo, os compostos que inibem a actividade hidrolítàca da fosfolipase para diminuir a produção de ácido araquidónico e em consequência a produção de leuco trienos e de fosfoglandinas serão benéficos para o tratamento de inflamatóes e de alergias. Tais compostos também são úteis para o tratamento de estados que englobam a artrite, psoriasee asma.

Alguns compostos estão descritos na literatura como sendo inibidores eficazes de fosfolipase A₂ celu• lar.

'4

Estão descritos os seguintes compostos quimicamente relacionados. Gleason s outros descreve a síntese de análogos de 2-eor-LTD^/ englobando o ácido 4R-hidroxi-5S-cisteinil-glicil-62-nonaàecenoico_z descritos como antagonistas de LTD₄ sobre o decido do músculo liso da traqueia dos porcos da índia.

Nota do ,pé da, páginas * Estado intitulado ¹¹2-Nor-Leuko tr ienes s A Novel Series of Leukotriene Antagonists apresentado na 186a.Reunião Nacional da American Qhemical Society-Division of keéicinal Chemistry, em S_etembro de 1983.

_ Δ _

Perchonock e outros * descreveram uma série de compostos análogos de desamino-2-Nor-lsucotrieno que antagonizam a contracção induzida por LTD^ na traqueia de porcos da í_ndia isolados. 0 compostos análogo mais poderoso descrito foi o ácido 4-hidroxi-5-(2-carboxi-ctil-tio)-6Znonadecenoico.

Também descreveram * a síntese de compostos de estrutura análoga ao ácido 4R-’nidroxi-5S-cisteinil-glicil-6Z-nonadecenoicos e a actividade antagonista de tais compostos naálogos sobre as respostas de contracção induzida por LTD^ na traqueia de porcos da índia isolados.

Faz-so referencia aos derivados 5S-hidroxi-6R-benzil-tio leucotrieno como inibidores da síntese de leucotrieno e como inibidores de actividade 5-lipoxigenase na Patente Japonesa N2. J57118555. Os derivados de ácido 5-hidroxi-alcanoico contendo enxofre também são referidos como úteis antagonistas de SRS-A no tratamento de estados alérgicos que incluem a asma (Patente dos Estados Unidos N2 4 513 005).

Chan e outros descrevem nas Patentes dos Estados Unidos Nrs. 4 345084 e 4 500 462 ácidos icosanoicos insaturados e respectivos derivados que inibem a síntese do SRS-A e são úteis como agentes anti-alérgicos, anti-asmáticos e anti-inflamatórios.

Nota de pé de página;

* Estudo apresentado com o título “Synthesis and LTD^-Antagonist Activity of Desamino-2-Nor-Leucotriene Analogs'* na 188a. Reunião Nacional da “American Cftemical Society-D,vision of Medicinal C^emistry, em Agosto de 1284.

Sumário da Invenção

A presente invenção refere-se a novos compostos, sua utilização e processos para os sintetizar.

Os compostos da presente invenção inibem a actividade hidrolítica de fosfolipase A? e são farmacologicamente activos para reduzir a inflamação e para o controlo de respostas alérgicas.

Em particular a invenção refere-se a compostos que possuem estruturas que correspondem â fórmulas

em que se escolhe entre o grupo constituído por fenil-sulfonilo ou tio-fenilo substituído ou insubstituido, cisteinilo, gluta-tionilo, cisteinil-glicinilo, sulfonil-alquil-acetamido ou tio-alquil-amino inferior substituído ou insubstituido, i e por radicais sulfonil-alquil-acetamido ou tio-alquil-acstamido inferior substituído ou insubstituido.

escolhe-se entre o grupo constituído por (alquil inferior)-hidroxi, (alquil inferior)-tetra-hidro-piraniloxi, (alquil inferior)-carboxi e alquenilo inferior;

R₃ escolhe-se entre o grupo constituído por radicais hidroxi, carboni.lo, oximino e alquilo inferior; e n é um inteiro compreendido entre 10 e

14.

Também estão contemplados os sais farmaceuticamente aceitáveis, esteres, epoxidos e lactonas que correspondem a fórmula anterior.

conjunto podem conjunto podem

Em particular, R^ e R^ considerados em formar um epoxido, e &₂ ^e ^3 considerados em formar uma lactona.

D_escobriu-se que os compostos que correspondem a fórmula anterior são eficazes para inibir a actividade hidrolítica de fosfolipase

Os compostos preferenciais da presente invenção possuem estruturas que correspondem âs da fórmula anterior em que R^ é tio-alquil-acetamido inferior substituído, R₉ é (alquil inferior)-hidroxi, R_o é hidroxi e n é 11; em que Rj é gluta-tionilo, R₂ ® (alquil inferior)-tetra-hidro-piranil-oxi, R^ ® hidroxi ene 11; em que R^ é cisteinilo, ^R2 ^é que Rj. é tio-alguil-acetamido inferior substituído, R₂ ® (alquil inferior)-hidroxi, R₉ ® oxiimino e n é 11.

(alquil-inferior)-hidroxi, R^ é hidroxi ene 11; e em

Conforme se descreve, os compostos anteriores preferenciais são N-acetil-S-6-/“*5S, 6R)-1,5~di-hidroxi-7(Z)-isosenil7-(R)-cisteinato de metilo;

di-hidrato de S-6/ (5S, 6R)-5-hidroxi-l-(2-tetra-hidro-piranil-oxi)-7 (Z)-icosenil7-glutationa-trietil-amonio; hemi-hidrato de (58, 6R)-6-/~3-(R)-cisteinil7-7(S)-icosen-l,5-diol; e N-acetil-S-6-/” (58, 68)-l-hidroxi-5-oximino-7 (Z)-icosenil)_7-(R)-cisteinato de metilo, respectivamente.

A presente invenção também contempla uma composição de farmacêutica constituída por uma quantidade eficaz de um composto (conforme atrás descrito) disperso num veículo fisiologicamente aceitável. Na prática preferencial a composição farmacêutica que contém o composto é susceptível de inibir a actividade hidrolítica da fosfolipase A₂ e é eficaz

- 7 » k

para o tratamento de estados cas sem dos aos inflamatórios e respostas alergios efeitos secundários que normalmente estão associaesteroides.

Também se contemplam os processos para reduzir a inflamação e para controlar as respostas alérgicas nos mamíferos. Estes processos consistem na administração e um mamífero de uma composição farmacêutica que contenha, como ingrediente activo, uma quantidade eficaz de um composto (conforme atrás descrito) num veículo fisiologicamente aceitável, á preferencial a administração oral da composição.

Conforme se descreve mais adiante, também estão contemplados os processos para sintetizar os compostos.

A presente invenção proporciona diversos benefícios e vantagens Um benefício particular da invenção consiste na preparação de compostos farmacologicamente activos que são úteis para o tratamento de estados inflamatórios e de estados alérgicos,

Uma vantagem particular de um dos processos da presente invenção consiste na síntese de compostos de elevada pureza em rendimentos relativaments elevados.

Outro benefício da presente invenção consiste no facto de os compostos farmacologicamente activos aqui descritos serem poderosos inibidores de PA^ proporcionando deste modo meios adicionais para se estudar esse processo biológico.

Outros benefícios e vantagens da presente invenção tornar-se-ão evidentes para os especialistas na matéria a partir da descrição pormenorizada e dos exemplos que se seguem:

Descrição Pormenorizada da Invenção

Descrevem-se seguidamente novos compostos, composições farmacêuticas que os contém como ingredientes activo, processos para o tratamento de um mamífero que apresen ta um estado inflamatório ou alérgico e processo para sintetizar os compostos referidos.

Sm cada composto da presente invenção que possua uma estrutura que corresponda à fórmula anterior, em que á um radical que contém enxofre, o átomo de enxofre está ligado ao composto (ver Tabela I adiante).

Na Tabela I seguinte apresentam-se exemplos de compostos da presente invenção cujas estruturas estio conforme a fórmula anterior.

Produto	do	A-	-h-	Λ-	n
exemplo	n2
l(e)		U^-R. epóxido	<8,01,0 (Ο,Λ,,Ο)·	—	11
2		-90H2CH (ODOCH3) NH0XH3	-CHjCHjOH	<H	11
3		-Glutathionyl	-ai,CH,O(CsHqO)	-OH	11
4		-Cyeteinyl	-CH2CH2OH	-OH	11
5		-SC3i2CH2t«XCH3	-Oí2CH2OH	-OH	11
6		-sch2ch (Odcch3) mkoch3	<H,OÍ,0(CçHq0)	-OH	11
7		-S3í2CH(C00CH3)NH2	-CH2CH2OH	-OH	11
B		w* ** ***	-CH2CH2O(C5H9O)	-OH	11
9		-EJM-S^CI*·*	-ai2ai20(c5Hg0)	-OH	11
10		-SO,CH,CH (OOOOi,) NHCXH^	-O^O^OH	-OH	11
11		-Κ6Η5	-CH2C2Í20H	-OH	11
12		-£â££-K 6H4ci	-Oí2CH2OH	-OH	11
13		-SCHjCH (CCOCH3) »£0CH3	-08,01,0(0,^0)	«0	11
14		-STH.CH (COOCH3) »hxch3	-CH2CH2OH	NOH	11
15		-9CH2CH (OOXH3) nwxch3	-Oí,QÍ,(C^HqO)	-OH	13
16		-SmijCH (COOCHj) NBXCH3	<h2oi2oh	-OH	13
17		<RX“*3 epú-ido	-ΟΚ(Ο13)2	—	11
18		-sc6h5	-CH-C(CH3)2	-(CHlOi,	11
19		·*6Η5	(Rj-Rj lactona	—-	11
20		•ShHc	-Oi-000'Na+	-OH	11

• (c₅HgO) · -fetra-hidro-pirranilo ** ^c6^h5 “ fenilo *** C₆H₄C1 « para -clOTO-f enllo

termo fenilo conforme utilizado nesta Memória Descritiva sozinho ou em combinação com outros termos, como tio-fenilo e fenil-sulfonilo significa grupos hidrocarbonetos aromáticos que podem ser insubstztuidos ou substituídos com um ou vários radicais alquilo inferior ou com halogéneos escolhidos entre os átomos cloro, bromo, iodo e fluor.

C_onfcrme utilizado nesta descrição, o termo alquilo inferior nas suas diversas formas, significa um hidrocarboneto de cadeia linear ou ramificada que possua entre 1 e 8 átomos de carbono. Por exemplo os radicais alquilo inferior englobam metilo, etilo. propilo, isopropilo, n-butilo, sec-butilo, t-butilo, n-pentilo, 2-metil-3-butilo, 1-metil-butilo, 2-metil-butilo, neopentilo, n-hexilo, 1-metil-pentilo, 3-raetil-pentilo, 1-etil-butilo, 2-etil-butilo, 2-hexilo, 3-hexilo, 1-octilo, 2-octilo e semelhantes. Ao longo desta memória descritiva o termo inferior refere-se a alquilo, salvo quando especificado de outro modo. Deste modo, o termo tio-alquil-amino inferior, por exemplo, significa uma parte alquilo inferior quo possui tio.l e amina.

De modo semelhante o termo alquenilo inferior refere-se a um hidrocarboneto insaturado de cadeia linear ou ramificada que possua entre 1 e 8 átomos de carbono, Os radicais alquenilo inferior adequados englobam os anteriores radicais alquilo gue possuem pelo menos uma dupla ligação carbono-carbono, de preferência uma única ligação carbono-carbono.

termo substituído utilizado relativamente a tio-fenilo ou tio-alquil-amino, por exemplo, significa um grupo fenilo ou alquilo, respectivamente, que engloba um átomo de halogéneo escolhido entre bromo, cloro, iodo e fluor ou um grupo -OOOR em que R é alquilo inferior mas em que R e preferencialmente metilo.

Também se faz a descrição de uma composição farmacêutica constituída por uma quantidade anti-inflamatória de um composto atrás referido disposta num veículo farmaceuticamente aceitável. A composição engloba uma dose unitária do composto.

Os compostos da presente invenção são susceptíveis de inibir a actividade hidrolítica de fosfolipase. - Na prática preferencial o composto á susceptível de inibir a actividade hidrolítica de PAg com a quantidade de composto presente na composição farmacêutica, quando se introduz essa composição como dose unitária no mamífero adequada.

termo dosagem unitária e os seus equivalentes gramaticais tal como utiLlizados nesta descrição •referem-se a unidades fisicamente discretas adequadas para administração em pacientes humanos e em mamíferos de sangue quente. Cada unidaõfe contem uma quantidade predeterminada eficas de um ingrediente activo antiinflamatório ou anti-alérgico, calculada de modo a proporcionar o desejado efeito anti-inflamatório ou anti-alárgico em associação com o necessário veículo fisiologicamente aceitável, por exemplo um diluente.

A especificação para as novas formas de dosagem unitária da presente invenção, são determinadas e directamente dependentes de (a) características únicas do ingrediente activo e (b) limitações inerentes è especialidade de composições de tais ingredientes activos para rapeutica nas pessoas e nos outros mamíferos, forma de dosagem unitária adequadas de acordo invenção são as pastilhas, cápsulas, pílulas, grânulos, bolachas e semelhantes, múltiplos de quaisquer das unidades anteriores, em conjunto com soluções líquidas, suspensões líquidas, elixires e suspensões para aerossol.

utilização teOs exemplos de com a presente sacos de pó.

Faz-se aqui referência ao facto do ingrediente activo se apresentar em dispersão no veículo. Deste modo# a dispersão formada pode ser uma mistura simples, uma 12 -

lepósito como no caso de algumas emulsões, ou final# uma solução propriamente dita. Em tais ingrediente activo está normalmente presente > de pelo menos 0,5 por cento em peso com base la composição e no máximo 90% em peso.

A quantidade de ingrediente activo que ae administra in vivo depende da idade e do peso do mamífero l· tratado# do estado particular inflamatório ou alérgico que se pretende tratar# da frequência de administração# e da via de ,'j administração. 0 doseamento pode variar entre 0,001 e 50 milientre O#Ô1 e 10 miligramas por quilograma de peso do corpo por dia# e aindt mais preferencialmente entre 0,1 e 5 miligramas pôr quilograma de peso do corpo por dia. A dose para o adulto humano varia entre 100 e 500 miligramas diários, administrados numa dose simples ou divididos em 3 ou 4 doses. As doses para veterinária correspondem às doses humanas sendo as quantidades administradas proporcionais ao peso do animal por comparação com as pessoas adultas.

As doses unitárias administradas oral- mente contendo entre 1 e 50 miligramas de composto activo por quilograma de peso do corpo de uma ratazana de laboratório (por examplç# cerca de 200 gramas cada) são úteis para reduzir os estados inflamatórios e para controlar as reacções alérgicas.

Todavia, deve subentender-se que a quantidade administrada é determinada pelo médico ou veterinário tendo em consideração as circunstâncias relevantes que ergLobam o estado a ser tratado# o composto que se vai administrar e a via de administração. Por isso, os intervalos de variação das dosagens anteriores não pretendem limitar o âmbito da presente invenção.

Os veículos fisiologicamente toleráveis são bem conhecidos na especialidade, Os veículos líquidos ade ?

Ί’ quados englobam as soluções aquosas que não contem materiais »em adição ao composto, ou que contém um tampão tal como o fos fato de sodio com um valor de pH fisiologico, uma solução salina ou equivalentes.

As composições líquidas também podem conter fases líquidas em adição ou para exclusão de água.

: Os exemplos de tais fases líquidas adi/ _n____ _____J Z_{z f} cionaia são a glicerina e os oleos vegetais incluindo oleo de , amendoim e o óleo de semente de algodão.

Os veículos sólidos adequados (diluentes) englobam os materiais normalmente utilizados para a preparação de pílulas ou de pastilhas e incluem o amido de cereal, lactose, fosfato de dicálcio, agentes espessantes tais como goma alcantlra e metil-celulose U.S.P. sílica finamente dividida, polivinil pirrolidona, estearato de magnésio e semelhantes· Os agentes anti-oxidantes tais como metil-paraben e metil-paraben podem estar presentes tanto nas composições sólidas como nas composições líquidas, o mesmo sendo verdadeiro para os edulcorantes tais como açúcar de cana, açúcar de beterraba, sacarina de sódio, ciclamato de sódio e o edulcorante dipeptido ester meti1ico vendido sob o nome comercial NOTRASWEET (aspartamo) por G.D. Searle Co. Skokie, IL.

T_ambém se contemplam os processos para reduzir um estado inflamatório e para controlar o estado alérgico no mamífero que apresente um estado inflamatório ou alérgico· 0 processo consiste em administrar a esses mamíferos uma quantidade eficaz de uma composição farmacêutica que englobe uma dose unitária de um ingrediente activo que seja o composto atrás referido em dispersão num veículo farmaceuticamente aceitável. De preferencia, a composição farmacêutica manter-se-á no interior do mamífero até que o composto seja eliminado pelo corpo do mauní^ero por meios naturais tais como o metabolismo ou a excreção.

A composição farmacêutica pode administrar-se oralmente# por injecção# por inalação (por exemplo na forma de um aerossol), pó micropulverizado ou uma solução nebulizada), topicamente ou por quaisquer outros meios bem conhecidos na especialidade. Na prática preferencial a composição administra-se como aerossol# oralmente na forma de pastilha# cápsula ou dispersão aquosa# ou topicamente na forma de uma loção# creme ou unguento.

Quando se administra na forma de aerossol# dissolve-se o composto no solvente adequado farmaceuticamente aceitável (por exemplo# álcool etílico# água ou combina' · · L· ções miscíveis de solvente flsiologicamente aceitáveis) e mistura-se com um propulsor farmaceuticamente aceitável. Tais composições para aerossol# embalam-se para utilização em ambientes pressurizados equipados com uma válvula para aerossol adequado para libertar a composição pressurizada. De preferáncia, a válvula para aerossol é uma válvula regulada que ao ser activada liberta uma dose eficaz predeterminada da comjosição aerossol.

Uma vez que a composição farmacêutica se administrar 3 ou mais vezes por dia (durante um período de 24 horas) o processo para aliviar a inflamação ou para controlar as reacções alérgicas# pode incluir a administração em série da composição farmacêutica num mamífero tratado, durante um dado período de tempo; por exemplo# semanas# meses ¹ ou taxes, Na prática preferencial a composição farmacêutica administra-se ao mamífero diversas vezes durante um período de cerca de 30 dias·

Um processo para sintetizar os compostos é também outro aspecto da presente invenção. De acordo com uma das características deste processo# faz-se reagir um composto constituído por um tgeMats-epóxido com uma configuração 7Z, que corresponde à fórmula anterior (em que R₁ e R₃ considerados em conjunto formam um epóxido) com um tiol substituído. 0 derivado 5S-hidroxi-6S-tio resultante pode utilizar-se conforme

sintetizado ou pode ainda modificar-se por reacção em um reagente adequado, tal como o carbonato de prata para formar um produto em que R₂ e R₃ da fórmula anterior, considerados em conjunto, formam a lactona interna correspondente.

Segundo outro sepecto, oxida-se o derivado anterior, 5S-hidroxi-6S-tio com um reagente adequado, tal como o cloreto de oxalila e DMSO, para formar o derivado correspondente 5-ceto o qual ao reagir com cloridrato de hidroxil-amina proporciona o derivado 5-oximino correspondente.

Os exemplos seguintes ilustram a preparação de diversos compostos de acordo com a presente invençãc. A título de sumário, os compostos preferenciais da presente invenção podem preparar-se pelo processo seguinte.

Conforme se indica na seguinte sequência de reacção 1, faz-se a redução de um heptanoato de tetra-hidro-plranilo protegido (THP) - /Composto 1 (a)_7, com hldreto de di-isobutil-alumínio (DIBAL-H) para proporcionar um álcool alílico /Composto 1 (b), que por sua vez é oxidado

em condições suaves (isopropoxido de titânio, L-tartarato de dietilo e hidro-peroxido de t-butilo) para proporcionar o álcool primário trans - epoxi /Composto 1 (c).

A oxidação de Collins /“complexo Cro^. Piridina_/ do álcool primário epoxi produz um aldeído epoxi correspondente /Composto 1 (dl?/ θ qual se trata depois com um reagente de Wittig apropriado para formar um epoxidoetilenico /Composto 1 (e//. Os reagentes de Wittig adequados englobam os brometos de dodecil-trifenil)-fosfónio e o brometo de pentadecil-trifenil-fosfónio. 0 sal de fosfónio converte-se num radical ileto (Ylide) por tratamento com uma base forte tal como n-butil-litio. 0 radical ileto (Ylide) reage com o aldeído epoxi para proporcionar o intermediário trans-epoxido /“Composto 1 (e/7 com uma configura 7Z.

A abertura do epoxido para proporcionar ,um derivado 5S-hidroxi-6S-tio consegue-se utilizando-se um tiol apropriado substituído, uma mistura de trietil-amina:metanol conforme descrito nos Exemplos 2-9 inclusive.

Nos casos em que R^ ® ^um 9^ruP° hidroxi-etilo (como no caso dos Compostos 2, 4, 5, 7, 10-12, 14 e 16), pode remover-se o grupo de protecção THP por tratamento com ácido num solvente tal como o metanol.

Para além do grupo de protecção THP, podem utilizar-se outros grupos éter hidrolisáveis convencionais para proteger um grupo hidroxi. Entre os grupos de protecÇão ester preferenciais englobam-se também os éteres t-butílico e aril-metílico. O éter aril-metllico preferencial é um derivado de benzilo.

ESQUEMA DE REACÇÃO 1

Exesaplo r.s(s) (a)

DIBAL-H

(b) oxidação suave

l(c) oxidação de collins

	reacção de Wittig
cx	l(e)
;CH3(CH2)n	tiol substituído
OH	3,6,e,9 B 15
1 * R. 3 2 n OH	H*
	_ 2 1 R 7 1n, 12 lo Θ dO
S>3<™2>„ 1

M em que representa o tiol substituído

- 18 -Μ

Tomando como referência o seguinte esquema de reacção 2_t nos casos em que R₂ á um grupo hidroxi-etilo (Compostos 2, 4, 5, 7, 10-12, 14 e 16), podem formar-se as lactonas correspondentes por tratamento do composto de grupo funcional hidroxi-etllo com o reagente de Fetizon (carbonato prata em celite).

Por exemplo, trata-se o 1,5-diol (Composto 11) com reagente de Fetizon para proporcionar a lactona (Composto 19). A adição de hidroxido de sódio em tetra-hidrofurano à lactona proporciona o correspondente sal de ácido carboxílico (por exemplo, Composto 20).

Todavia, pode utilizar-se qualquer sal convencional farmaceuticamente aceitável. Entre os sais que se podem preparar estão o sal de metal alcalino que englobam os de litio, sódio e potássio; os sais de metais alcalino terrosos que englobam os de cálcio e de magnésio; e os de alumínio, zinco e ferre. Também são adequados os sais de amónio ou de amónio substituido incluindo os que se prepararam a partir de (alquil inferior)-aminas tais como tri-etil-amina; hidroxi-alΪ.· quil-aminas tais como 2-hidroxi-etil-amina, tris- (hidroxi-metil)| í -amino-metano, bis-(2-hidroxi-etil)amina e tris-(2-hidroxi-etil)-amina; ciclo-alquil-aminas tais como biciclo-hexil-amina e bases do tipo piridina tais como piridina, colidina e quinolina.

Tais como sais podem formar-se a partir dos compostos da presente invenção que possuem um grupo ácido carboxílico, tratando o ácido por um processo convencional, ou uma base tal como o hidróxido metálico, hidróxido de amónio ou com uma amina.

Lfoa vez que os compostos da presente invenção podem englobar mais de um grupo de ácido carboxílico, também se contemplam os sais parciais ou os esteres de alquilo inferior parciais (Compostos nos quais nem todos os grupos funcionais de ácido carboxílico estão na forma de sal ou de ester), assim como as formas mistas sal/ester.

SEQUENCIA DE REACÇÃO 2

Exemplo Ne(s)

2,4,5,7,10-12

O~Na⁺

Tomando como referência a seguinte sequência de reacçao 3, pode oxidar-se um THP-diol protegido (Composto 3, 5, 8, 9 e 15) para formar a correspondente THP-cetona protegida.

Trata-se o THP - diol protegido (Compos to 6) com cloreto de oxalilo/DMSO (dimetil sulfóxido) em cloreto de metileno, a uma temperatura reduzida para formar a cetona (Composto 13). A reacção da cetona, sob condições adequadas, com cloridrato de hidrdákl-amina proporciona a oxima correspondente (Composto 14).

de uma de descrever a invenção tomando como

Acabada forma geral, pode obter-se um referência diversos exemplos, fins ilustrativos e não protendem ser limitativos da presente invenção.

OH

melhor conhecimento os quais se incluem apenas para

Na Tabela 1 seguinte apresenta-se uma o processo da presente invenção. Conforme indicado, o número . atribuído a cada composto corresponde ao número de exemplo seguinte que descreve a síntese desse composto.

Conforme se podé verificar, os compostos da presente invenção possuem centros quiral em C^lCg e, em consequência, existem nas formas estereoisoméricas 5R, 6R;

5S, 6S; 5R, 6S e 5S, 6R,

Também são possíveis outros centros quiral conforme a natureza dos substituintes R^, R₂ e R^. Contudo, os composto^ da presente invenção não se limitam a qualquer forma isomérica particular.

Nos exemplos seguintes, os pontos de fusão (p.f.) determinaram-se num equipamento ttiomas-Hoover, e os pontos de fusão assinalados não estão corrigidos. Os espectros infravermelhos (IV) registaram-se num espectrofotómetro IR-8 *Beckman Instruments e exprimem-se em cm~^. os espectros de ressonância magnética nuclear (RMN) para os átomos de hidrogénio obtiveram-se em CDC1₃ salvo quando indicado de outro modo, com tetra-metil-silano (TMS) como padrão interno, num espectrémetro Varian T-6OA ou num IBM WP-1OO. Os valores exprimem-se em partes por milhão relativamente a TMS. Os símbolos do hidrogénio sublinhados entre parêntesis estão associados com as posições de ressonância imediatamente anteriores ao parêntesis. Os espectros de massa obtiveram-se com um espectrómetro de massa quadripolar Finnigan 1015D ligado a um cromatágrafo de gás Finnigan 9500 ou num espectrémetro de massa de elevada resolução de focagem dupla Finnigan MAT 8230,

Preparação de 7-(2-tetra-piranil-oxi)-2(E)-heptanoato de metiMZoemataJdâlZ

A uma solução de 17,98 gramas de 5-hidroxi-valeraldeído (176,O3mM) em 2,50 ml de tetra-hidrofurano seco (THF) sób uma atmosfera de azoto, adicionaram-se 61,80

I ' «I

gramas de (trifenil-fosforanilideno)-acetato de metilo

I (184,83mM). Aqueceu-se a mistura de reacção ao refluxo durante í 4,5 horas e, depois de se arrefecer para a temperatura ambienI te concentrou-se in vacuo apóskse obter uma massa branca. AdiL cionou-se eter dietilico (500 ml) e hexano (400 ml), e depois Sf | arrefeceu-se a mistura para 0°C e'.«manteve-se a esta temperatuI ra durante 1 hora, após o que se filtraram os sólidos e concenI trou-se o filtrado in vacuo para proporcionar uma quantidade f adicional de precipitado. 0 precipitado total proporcionou f 38,8 gramas de 7-hidroxi-2(E)-heptanoato de metilo (70% puro f verificado por RMN). Fez-se a cromatografia de uma porção de I heptenoato de metilo (2,0 gramas) (gel de silica Merck 60, l 100 gramas) com uma mistura de hexano» éter dietilico 2:1 como I eluente para proporcionar 1,38 gramas de 7-hidroxi-2(E)-hep[ tanoato de metilo puro na forma de um líquido incolor límpido (96 %).

Γ A uma solução de 7,0 gramas do hepta|. no ato de metilo cru anterior (30,84 mM) em 300 ml de cloreto I de metileno a 0°C, sob uma atmosfera de azoto, adicionaram-se 4,24 ml de di-hidropirano (46,46 mM) e uma quantidade catalítica (1 mg) de mono-hidrato de ácido p-tolueno-sulfónico.

[ Depois de se agitar durante 20 horas, adicionaram-se 0,5 gramas de carbonato de sódio, filtrou-se o sólido, e concentrou-se a mistura de reacção in vacuo para proporcionar um líquido / castanho límpido. Decorridas 16 horas precipitou-se um sólido, adicionaram-se 100 ml de hexano e filtrou-se a solução e concentrou-se in vacuo para proporcionar 9,11 gramas de 7-(2--tetra-hidro-piranil-oxi)-2(E)-heptanoato de metilo /“Composto 1 (a/7· Fez-se a cromatografia de uma porção de 2 gramas do composto 1(1) bruto (gel de sílica da “Merck, 200 gramas) [ com uma mistura de tri-etil-amina»hexano 1»19 como eluente para proporciona^ 1,34 gramas de composto l(a) na forma de um líquido incolor lívido (82 %).

*

:· r k

í

RMN 1,2-2.0 (multipleto, 10 H, -OCH₂CH₂CH₂CH» e -OCH₂qH₂CH₂CH₂CH-): 2.0-2,5 (multipleto, 2 H, -CHCH₂CH₂-) ; 3,1-4,1 (multipleto, 4 H, CH₂ÇH₂0CH0ÇH₂-): 3,68 (singleto, 3 H, -COOCHg); 4.4-4.7 (multipleto, 1 H, -OCHO); 4.80 (multipleto distorcido, J“15 Hz, «CHCOOCHj); 6.96 (tripleto. J-15 Hz, J*7 Hz, OH₂Çg-).

IV purot 2950

J-l Hz, 1H,

H, >, 2870, 1730 e 1660;

IMr m/e 242 (M⁺), 211, 210 e 101 e 85 (100 %) Análise calculada para ^βΐ3^Η22°4* ^C* ^64/43;

C, 63,98; H, encontrado

Exemplo l(b)

9,15

9,05.

Preparação de 7-(2-tetra-hidro-piraníl-oxi)-2(E)-heptan-l-ol zfQoap&gtQ-Hb)/----------------------------------------A uma solução de 5,00 gramas (16,71 mM) de Composto l(a) (82 %) puro verificado por RMN) em 125 ml de cloreto de metileno e a 0°C sob uma amosfera de azoto adicionaram-se 41,8 ml de hidijéto de di-isobutil-aluminio (41,8 mM). D pois de se agitar durante 0,5 horas adicionaram ©

-se à mistura de reacção 5,0 ml de metanol em 5,0 ml de cloreto de metileno seguidos por 5.0 ml de uma mistura água:metanol lil. DqPoís de cessar a libertação de gaz, filtrou-se a mistura através de uma âmofada de Celite e concentrou-se in vacuo para proporcionar 3,65 g de 7-(2-tetra-hidro-piranil-oxi)-2(E)-hepten-l-ol bruto /Composto Kb)/?. A cromatografia (gel de sílica 60 da Mterck 185 gramas) com uma mistura de trietil-amina;acetato de etiloihexano 117:12 como eluente proporcionou 2,60 gramas de composto 1(b) na forma de um líquido incolor límpido (73 %).

ii·-.

iS

RMNi 1,1-2.4 (multipleto, 13 H, -OCH₂(CH₂)₃CH-, OCH₂(CK₂)₃CH- e -OH); 3.1-4.0 (m<Ltipleto, 4 H, (multipleto# 2 H, -OCgp-); 5,4-5,8

IV (puro) t 3430,

BMt m/e 214 (M⁺),

Análise calculada

-CH₂CH₂0CH0CH₂CH): 3.8-4.3 «aCHCHgOH); 4.4-4.7 (multipleto, 1 H, (multipleto, 2 H, -CH-aCH-), sj 11

Hl· |ί SçssEio_lísl fel

2940, 2880 e 1445.

196 (M-H₂O), 85 (100 %).

para ^ci2^íl22°3^{t C}' 67,25; H, 10.35

Encontrado : C, 67,08; H, 10,40

Preparação de (2R, 3S)-7-(2-tetra-hidro-piranil-oxil)-2,3-trans-epoxi-heptan-l-olZ~Compostp„lIc) / __________________ íh* ia !

Jt t

adicionaram-se com uma seringa 9,54 Composto (l(b) seguido por 21,72 ml terc-butilo 4,1 Mfcjlar (M). A mistura a -2o°C durante 5 horas, tapou-se e arf

o.

A^icionou-se isopropóxido de titânio (IV) (13,25 ml; 44,52 mM) e 9,18 gramas de L-tartarato de (+)-tlétiló (44,52 mM), com uma seringa, a 400 ml de cloreto de metileno à temperatura de -20°C sob uma atmosfera de azoto. Decorridos 5 minutos gramas (44,52 mM) de de hidro-peróxido de de reacção agitou-se mazenou-se a -10°C durante 16,5 horas. Arrefeceu-se a mistura para -20°C e adicionaram-se 100 ml de uma solução de ácido tartárico a 10% em água com agitação vigorosa. Renovou-se o banho de arrefecimento decorridos 30 minutos, e manteve-se a agitação durante 1 hora. Separaram-se as camadas e lavou-se a camada orgânica com água, secou-se sobre sulfato de sódio anidro. filtrou-se e concentrou-se in vacuo. Diluiu-se o resíduo com 300 ml de eter dietílico e arrefeceu-se para 0°C. Adicionou-se hidróxido de sódio 1N (125 ml), e agitou-se o sistema de duas fases durante 30 minutos. Separaram-se as camadas ....... _/ e lavou-se a camada de eter com uma solução saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre sulfato de sódio anidro, filtrou-se e concentrou-se in vacuo para proporcionar 8,17 gramas

de 2R, 3Sík-7-(2-tetra-hidro-piranil-oxi)-2-3-trans-epoxi-heptan-l-ol bruto (Composto l(c)na forma de um óleo amarelo claro. A cromatografia (gel de síli ca 60 da Merck, 700 gramas) com uma mistura de trietil-aminaíacetato de etiloíhexano 1j6i13 como eluente, proporcionou 4,29 g do composto l(c) na forma de um óleo amarelo claro e límpido (42 %).

RMNi 1.3-2.1 (multipleto, 12 H,

OCK₂((3g₂)₃a»O e OCH₂(CH₂)₃CH-í 2.2-2.5 (singleto largo, 1 H, -OH): 2.8-3.2 (multipleto. 2 H, epoxido Hs): 3.2-4.2 (multipleto, 6 H, -CHgOCHOÇHg- e -CH₂0H); 4.5-4.7 (multipleto, 1 H, -OCHO).

IV (puro): 3450 e EM: m/e 230 e 129 Análise calculada E_ncontrado

1260 para ^ci2^H22°4ⁱ C,

C,

62, 58; H,

62,43; H,

9,63

9, 58

Sxewlo KM

Preparação do (2R, 3S)-7-(2-tetra-hidro-piranil-oxi)-2,3-trans-epoxi-heotanal/~Composto.....l(d)7 _

Aflicionou-se uma porção simples do trióxido de crómio (4,27 g; 42,73 mM) a uma solução de 6,91 ml de piridina (85,44 mM) em cloreto de metileno. Depois de se agitar durante 15 minutos adicionaram-se 1,64 gramas (7,12 mM) de Composto l(c) em 10 ml de cloreto de metileno com uma seringa. Manteve-se a agitação durante 30 minutos e decorrido esse tempo filtrou-se a mistura de reacção através de uma almofada de Celite e concentrou-se in vacuo. Extraíu-se o resíduo castanho escuro com 100 ml de éter dietílico e filtrou-se através da mesma almofada de Celite. Lavou-se o filtrado com 50 ml duma solução saturada de sulfato de cobre, com 50 ml de uma solução saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre sulfato de sódio anidro, filtrou-se e concentrou in vacuo para proporcionar 1,20 gramas de (2R, 3S)-7-(2-tetra-hidro-piranil-oxi)-2,3-trans-epoxi-heptanal bruto /Composto 1 (d) bruto na foirma de um óleo amarelo claro límpido. A cromatografia (gel de sílica 60 da Merck, 60 g) com uma mistura de trietil-amina:acetato de etilo:hexano 1:9:10 como eluente proprocionou O,95 gramas do composto 1(d) puro na forma de um óleo incolor límpido (58%).

RMCÍí 1.3-2.1 (multipleto, 12 H.

OCH₂(CH₂)₃CHO- e -0CH₂(CH₂)₃CH-): 3.0-4.2 (multipleto, 6 H, (multipleto, 1 H,

IV (puro): 2730,

BM: m/e 228 (M⁺),

Análise: calculada para encontrado

-ÇH₂OCHOÇH₂- ^e epoxido Hs): 4. 5-4. 7

-0040); 9.03 (doubleto, J=6 Hz, 1 H, -CHO).

2660 e

127 e

1730.

101.

^C12^H2O°4^{: C}‘ ⁶³'^{13; H}' ⁸'⁸³

C, 63,04; H, 8,78 «xeaclo Κ«)

Preparação de (5S,6S)-1-(2«tetra-hidro-piranil-oxi)-5_/6-transram^.lí^.r.icp.âgaS^ÇQ.gRogto,.......Λίθ.ΙΖ

...

‘λ

Com uma seringa adicionou-se N-butil-litio (3,71 ml; 5,78 mM) a uma solução de 1,33 ml de hexa-metil-di-silazano (6,31 mM) em 50 ml de tetra-hidrofurano seco (THF) a 0 C sob uma atmosfera de azoto. Decorridos 15 minutos adicionaram-se 3,04 gramas de brometo de dodecil-trifenil-fosfonio em pó (5,78 mM) numa porção simples, Decorridos 15 minutos, adicionou-se com uma seringa 1,20 gramas (5,26 mM) do composto l(d) em 5 ml de THF seco. Manteve-se a agitação durante 1 hora e decorrido esse tempo concentrou-se a mistura de reacção in vacuo para proporcionar 5,62 gramas de (5S-6S)-l-(2-tetra-hidro-piranil-oxi)-5,6-trans-epoxi-7(Z)-icoseno bruto /^Composto 1 (e_)_7 na forma de um óleo viscoso castanho. A cromatografia (gel de sílica 60 da Merck 500 g) com uma mistura de trietil amina:Hexano 1:19 como eluente proporcionou 0,97 gramas do composto l(e) puro na forma de um óleo incolor límpido (47%)

- 27 sig· ·<:/'

RMNt 0,7-1.0 (tripleto, 3 H, -¾) } 1.0-2,5

UL ímtipletsk 34 Η, OCH₂ (CHOCHO.

® ‘Wii⁰^ 2.6-3.0 gí (multipleto, 1 H,OGHGHC®); 3.0-4.1 (mui tiple to, 5 H, ;J©CW(5É>· ® -CH₂°CHOCH₂-h 4.4-4.7 (multipleto, 1 H,

; 4,7-5,4 (multipleto, 1 H, -OCHCH-CH); 5,68 [ (tripleto, J-ll Hz e 7 Hz, 1 H, -CH«CHCH₂). IV (CKCl₃)i 3020 e 1260.

BMt m/e 394 (M⁺), 293 e 117 (100%).

r Preparação de N-acetil-S-6-/(5S, 6S)-1,5-di-hidroxi-7(Z)Γ' ÍRl=SU.teí.nado, de .metilo.....(Cgroposto 2)___________

Adicionou-se ester N-acetil-cisteinaBEf _:, - Ί<

-metálico (0,98 gramas; 5, 55 mM) e 1,55 ml de trietil-amina È (11,10 mM) a uma solução de 1,46 gramas (3,70 mM) no comF posto l(e) em 35 ml de metanol na presença de azoto, depois r de se agitar durante a noite, concentrou-se a mistura de r reacção in vacuo para proporcionar N+acetil-S-6-/5S, 6R/-5f -hidroxi-1-(2-tetra-hidro-piranil-oxi)-7(Z)-icosenil-(R)| -cisteinato de metilo.

Diluiu-se a mistura de reacção com 4o ml de metanol e adicionou-se uma quantidade catalítica (1 mg) de ácido β-tolueno-sulfónico.

Depois de se agitar durante a noite, neu·» tralizpu-se a mistura de reacção e secou-se sobre carbonato [ de sódio anidro, filtrou-se e concentrou-se in vacuo. 0 resíL duo remanescente extraiu-se com cerca de 50 ml de cloreto de metileno, filtrou-se e concentrou-se in vacuo para proporcior nar 2,48 gramas de N-acetil-S-6-/~5S-6R/-l,5-di-hidroxi-7(2/7 -icpsenil-(R)-cisteinato de metilo bruto (Composto 2) na ; forma de um óleo amarelo límpido. A cromatografia (gel de sí* lica de 40 /iM da Baker, 75 gramas) com uma mistura de meta28 tf*

eluente proporcionou 1,78 um oleo incolor límpido · 0**i * 8 .β nol*cloreto de metileno 1*9 como . gramas do composto 2 na forma de (98,69().

RMN» 0,88 (tripleto, 3 H, -¾) * (multipleto, 26 H, CH^ (^2^0^2 ⁶ -CH(OH) (Q||)₃CH₂OH)» 1,8-2, 3 (multipleto, 2 H, «j^aho^a®-»’ 2.07 (singleto largo, 5 H, -NHCOCHg e 2 -OH)* 2.88 (doubleto largo, J=6 Hz, 2 H, -SÇHjOB-)* 3.3 - 3.9 (multipleto, 4 H, -CHCHCH(OH)- e ; -ÇggOH)* 3.75 (singleto, 3 H, -C00CH₃)* 4.5-5.0 (multipleto, 1 H, CH₂CHNH); 5.0 - 5.9 (multipleto, 2 H,

6.2 -6.8 (multipleto, 1 H, -CH-NH-).

IV (puro)* 3300, 1750 e 1660.

J 1M» m/e 385.

Análise* calculado para CggH^NOgS: C, 64,02* H, 10,13* N, 2,87 encontrado C, 63,87* H, 10,20* N, 3,09 | Ixemplo 3

ft/:

l Preparação do di-hidrato do sal S-6/^-(5S,6R)-5-hidroxi-l-(2||WW* _

Γ -tetrahidro-piranil-oxi)-7(Z)-icosenil/-glutationa-trietil(<aaffiPQstQ 3)-----------------------------------------------------| Um frascocb 500 ml de fundo redondo f contendo 0,50 gramas (1,27 /nM) de Composto l(e) em 15 ml de Γ metanol adicionaram-se 1,17 g (3,8 mM) de glutationa e 1,06 ml (7,60 mH) de trietil-amina. Libertaram-se os gases da mis/ tura de reacção e colocou-se sob uma atmosfera de azoto.

D corridos 5 dias, concentrou-se a mistura de reacção in vacuo ⁵ para proporcionar 1,93 gramas de di-hidrato do sal de S-6' *Z(58# 6R)-5-hidroxi~l-(2-tetra-hidro-piranil-oxi)-7(Z)- / *lcosenil7»glutationa-trietil-amonio bruto (composto 3). A cromatografia (gel de sílica de 40^aM da Baker, 80 gramas) £ com uma mistura de trietil-amina*metano_clorofórmio 1:9:10 Γ como eluente proponcionou O,94 g do composto 3, ξ p.f. - 140,5 - 143°C (88 %).

RMN (DgO)t O,85 (tripleto, 3 H,

CHgíCHg)£!*·)* 1.0-2.0 (multipleto, 41 H, CH₃(CH₂)_1OCH₂-, -OH(OH) (CH₂)₃CH₂ -, -OCa((»₂)₃CH₂O- e (CH₃CH₂)₃N 2.0-2.8 multipleto» 6 H, -CH₂CH=CH- e -COQi^CH-);

2.8-3.4 (multipleto, 2 H, -SÇH₂CH-); 3.17 (qàarteto, J=7.5

Hz, 6 H, (CH₃CH₂) ₃N⁺) t 3.4 - 4.3 (multipleto, 10 H, -CHCHCH(OH)-, 2(-C0CHNH-), -NHÇHgCOOH e

-CHgOCHOÇHg-); 4.4 - 4.6 (singleto largo, 1 H, -OCHO-); 4.67 (singleto, 7 H, -CH(OH)-,2-(-COOH), 2(-NH-) e -NH₂); 5.0 - 6.2 (multipleto, 2 H, -CH=CH-).

IV (CHCl₃)l 3300, 1650 e 1520

KM» m/e 368.

Análise* calculado para C₃gH₆₃N₃O_gS.C₆H₁₅N.2H₂O*

C, 58,68; H, 9,85; N, 6,68

C, 58,73; H, 9,23; N, 6,50.

encontrado

Preparação do hemi-hidrato de (5S, 6R)-6-/~S- (R)-cisteini.17-7~(Z)-icosen-l,5-diol (Cnmposto 4)

A um frasco de 50 ml de fundo redondo contendo 1,36 gramas (3,45 mM) de composto 1 (e) em 25 ml de metanol adicionaram-se 0,46 gramas de cisteina (3,79 mM) e 1,08 ml de trietil-amina (7,75 mM). Eliminaram-se os gases da mistura de reacção e colocou-se sob uma atmosfera de azoto. Decorridos 6 dias, concentrou-se a mistura de reacção in vacuo para proporcionar 6-S/“ (5S, 6R)-5-hidroxi-l-(2-tetra-hidro2piranil-oxi)-7(Z)-icosenil/~cistelna bruta. A cromatografia (gel de sílica de 40 ^uM, da Baker, 75 g) com uma mistura de metanolclorofórmio 1*2 como eluente proporcionou 1,31 g do anterior intermediário de cisteina na forma de um sólido cercão branco (74 %).

gf:

A um frasco de 250 ml de fundo redondo contendo 1,26 g do anterior intermediário de cisteina (2,44 mM)

- 30 t em 25 ml de metanol adicionaram-se 3,60 ml de uma solução L HCL IN (3,60 mM). Depois de se agitar durante a noite, neutra L li«ot»»se a mistura de reacção com uma solução NaOH (3,60 ml;

k 3-, 60 mM)«

p.' p Decorrida uma hora concentrou-se a tnis[ tura de reacção in vacuo. Repartiu-se o resíduo resultante Ι entre clorofórmio e água, secou-se a camada de clorofórmio so [ bre sulfate de sódio anidro, filtrou-se através de uma aImofa t da de Celite e concentrou-se in vacuo para proporcionar 1,04 de bemi-hidrato de (5S, 6R)-6-/S-(R)-cisteinil/-7 (z)_ [ -icosen-l,5-diol puro (Composto 4) na forma de um sólido

I cristalino branco, p.f. « 140,5 - 143°C (97 %)

L Intermediário de cisteinax ^; RMNt 0,87 (tripleto, 3 H, > . Qgg (CHg) ; 1.0 - 1.8 (multipleto, 32 H, ; Ca₃(Ca₂)₁₀aH₂-. -CH (OH) (CH₂)₃CH₂ e t -oatca^o-), 1.8 - 2.4 (multipleto,

H, CH₃(CH₂)1OCH₂CH-); 2.7 - 4.2 (multipleto, 8 H, L «CJHqgqHÍOH)-, -CH₂OCHOCH₂- e -000H); 4,3 - 4.8 k (multipleto, 2 H, -OCHO- e H₂NCHCOOH); 4,8 - 6,2 È (multipleto, 2 H, -CH-CH-).

; Composto 4t RMN (CDC1₃ e CD₃OD)x 0.87 (tripleto, 3 H, C^CH^); 1.0 - 1.8 (multipleto, 26 H, QB₃(CS₂)_1OÇH2 ® -CH(OH) (CH₂)₃CH₂); 1.8 - 2.4 (multipleto, 2 H, -CH₂-CH»); 2.7 - 3.3 (multipleto, 2 H, -1CH-CH-X; 3.4 - 4.0 (multipleto, 4 H, «CHCHCH(OH) e -CggOH): 4.07 (singleto largo, 5 H, 2 (-0H), -COOH e -Ngg); 4.2 - 4.8 (multipleto, 1 H, H^NGHCOOH); 5.0 - 6.0 (multipleto, 2 H, -CH-CH-).

IV (KBr)x 3200, 1650 e 1580. KM; m/e 369, 208, 103 e 85.

ιΛΛ'.

Analise;

calculado para encontrado C_{g2 β}θχ H, 10.52; n, 3.18 encontrado C62,27; H, 10,57; N, 3,59.

Preparação de N-acetil-S-6/^- (5S, 6R)-1, 5-di-hidroxi-7 (z)-icose· nil7-cisteamlna (Composto 5).........................................

A um frasco de 500 ml de fundo redondo contendo 1,40 gramas (3,55 mM) de Composto l(e) em 50 ml de metanol adicionaram-se 0, 63 gramas de N-acetil-cisteamina (5,32 mM) e 1,48 ml de trietil-amina (10,64 mM). Eliminaram-se os gases da solução e colocou-se sob uma atmosfera de azoto. Depois de se agitar durante a noite à temperatura ambiente, concentrou-se a solução in vacuo para proporcionar 2.06 gramas de N-acetil-S-6/5S, 6R)-5-hidroxi-l-(2-tetra-hidro-piranil-O9cl)-7 (Z)-icosenil7-cisteamina. A cromatografia (fel de sílica de 40 mM, 80 gramas) com uma mistura de trietil-amina«acetato de etil«hexano 1«14í5 como eluente proporcionou 1,69 gramas do anterior intermediário de cisteamina na forma de um óleo incolor límpido (93 %).

A um frasco de 500 ml de fundo redondo contendo 1,64 gramas (3,16 mM) do anterior intermediário cisteamida em 40 ml de metanol adicionou-se uma quantidade catalítica (1 mg) de ácido p-tolueno-sulfónico. Depois de se agitar durante a noite, neutralizou-se a mistura de reacção com carbonato de sódio, filtrou-se e concentrou-se in vacuo. Bxtraíu-se o resíduo resultante com cloreto de metileno, filtrou-se através de uma almofada de C lite e concentrou-se in e — vacuo para proporcionar 1,66 gramas de N-acetil-S-6/ (5S, 6R)-1,5-di-hidroxi-7(Z)-icosenil7-cisteamina bruta (Composto 5). A cromatografia (gel de sílica de 40 juM da Baker, 7o gramas) com uma mistura de metanol«clorofórmio 6«94 como eluente proporcionou 1,34 gramas de composto 5 na forma de um óleo incolor límpido, o qual cristalizou a partir de éter dietílico/hexano para proporcionar um sólido cristalino branco, p.f. · - 46 - 48°C (98%).

2.60

-.-.Intermediário de cisteina: Rl-IIs 0,37 (tripleto, * 1*5 (multipleto, —2) 10^Gii2^_)' “ 1· $ (mult.ipl.eto, 12 ií, ₃CH₂O- e -CI1(CH₂)₃CH₂O); 1.9 - 2.3

H, -(CM„) _1r.CH_nCH=); 1.97 (singleto,

10 **Z ; 2.4 (singleto largo, 1 M, -CH(OM)-);

J = 6 Hz, 2 H, -SCH₉CH₉-); 3.0 - 4.2 (multipleto, CH₂CH₂NH-);

); 5.0 - 6.3 (multipleto, 3

H, CH₃(CH₂)_

Η, CH₃(CH₉) -ch(oh) (¾) (multipleto,

H, -NHOOÇH₃) (tripleto, J - 6 Hz, 2 H, -SCH₂CH₂8 h, =CHq<CH(o:i)-, ch₂0C;í00j₂- e -c: 4.4 - 4.7 (multipleto, 1 J, -0< H, -CH=Cri“ e -NH-).

Composto 5 i RLÍN: 0.90 (tripleto, 3 E,

1.0 - 1.5 (multipleto, 211

CH₃(CH₂)_1oCH₂-); 1.5 - 1.8 (multipleto,

H, -CH(OH) (0Η₂) )^-CH₂) í 1.8 - 2.3 (multipleto, 3 Π, -(CH₉)_1oCH₂CH=, e -CH₂(OH); 2.00 (singleto, 3 ., -NHCOCH₃); 2.4 - 2.8 (singleto largo, 1 M, -Oíl(OH)-); (tripleto, J - 6 Hz, 2 1., -S-OM₂-CÍã₂-); 3.2 - 3.9

(multipleto, 6 H, =CH-CH-CH(CH)-, ÇH₂OH, e

-CH₂-CH₂-NH-); 5.0 - 6.3 (multipleto, 3 H, -CH-CH- e

IV (puro): 3300 (-NH-, -OH), 1660 e 1555.

EM: m/e 327 (M⁺-102), 221 e 2OS.

Análise:

calculadr» para C_2ZLH^^l’O,S: C, encontrado C,

67,03; U, 11.03; 17,

66,99; fí, 11,09; N,

3.26

3, 24.

Exemplo 6

Preparação de N-acetil-C-6/(52, 6R)-5-hidroxi-l-hidro-pirinil-oxi)-7 (S)-icosenil7- (?.) -cisteinato (Cnmposto 6)........ ............... .... .............

(2- te.tr ade metilo

A um frasco de 50 ml de fundo redondo contendo 1,03 grama (2,61 mM) de composto l(e) em 25 ml de metanol adicionaram-se 0,46 gramas de IT-acetil-cisteina (2,61 mM) e 0,73 ml de trietil-omina (5,22 mM).

os gases da mistura de reacção e colocou-se sob umu atmosfera de azoto. Depois de se agitar durante a noite, concentrou-se a

mistura de reacção in vácuo. A cromatografia do produto do reacção (gel de sílica 40 uM da Baker, 60 gramas) com uma mistura de hexano:acetato de etilo:trietil-amina 12:7:1 como eluente proporcionou C,85 gramas de N-aceti1-3-6-/“ (5S, 6P.)-5-hidroxi-l-(2-tetra-hidro-piranil-oxi)-7(Z)-ieosenil7-(R)-cisteinato de metilo puro (Composto 6) na forma de um óleo amarelo límpido (57 %)

RMN: 0,83 (tripleto, 3 ΙΊ, CH, (Cld₂) ;

1,0 - 1.9 (multipleto, 3 2 H, Cilg (CK₂)

-CH(OH) (CH₂)₃CH₂- e -CHÍCHj gCi^G); 1.9 - 2.7 (multipleto, 3 H, -CHgCHgCH- e -CII(OH)-); 2.05 (singleto, 3 H, -ISiCOCH^); 2.93 (doubleto, J « 5 iís 2 bí, -3CH₂CH-); 3.1 - 4.1 (multipleto, 6 H, =CKCHCH(OH)- e -CH₂0CH0CH₂-)y 3.75 (singleto, 3 .1, -COOCHg); 4,4 - 4.7 (multipleto, 1H, -OCHO-); 4.7- 5.0 (multipleto, 1 11, -CH₂CHNH); 5.0 - 6.0 (multipleto, 2 H, -CE=C/-); 6.1 - 6.5 (multipleto, 1 H, -12IC0-).

IV (puro): 3300, 1745 e 1670.

SM: m/e 438, 385, 342 e 3 26. Analises

encontrado:

C/

2.45

Exemplo 7

Pr®pa^raÇ^o ele S-6-/~ (5S, 5·0-1, 5-d.i-hidroxi-7 (2)-icosenil/

- (R)-cisteinato de metilo (Composto 7)

A ura frasco de 100 ml de fundo redondo contendo 1,93 g (4,89 mlí) de composto 1 (e) em 50 ml de metanol adicionaram-se 1,36 gramas de cloridrato de ester cisteina -etílico (7,34 mil) e 3,07 ml ôo trietil-amina (22,0 m..·). Eliminaram-se os gazes da mistura de reacção a colocou-se sob uma atmosfera de azoto. Depois de se agitar durante 3.5 dias concentrou-se a mistura do reacção in vacuo. A cromatografia de resíduo (gel de sílica 40 rdΊ da Baker, 140 g) com uma mistura de clorofórmiosmetanol 97:3 como eluente para proporcio-

nar 1#76 gramas de S-6-/^- (5S, 6R)-5-hidroxi-l-(2-tetra-hidro-piranil-oxi)-7(Z)-icosenil?-(R)-cisteinato ãe etilo na forma de um óleo amarelo límpido (66%).

A uma solução de 1,76 gramas (3,24 mH) do cisteinato anterior em 30 ml de metanol, adicionaram-se

4,8o ml de uma solução HC1 IN (4,80 mH). Depois de se agitar curante 18 horas, neutralizou-se a mistura de reacção com 4#30 ml de uma solução de hidróxido de sódio IN (4,80 m..). Depois de se agitar durante 1 hora, concentrou-se a mistura ds reacção in vácuo. Depois repartiu-se o resíduo entre cloreto de metileno e agua. A camada de cloreto de metileno secou-se sobre sulfato de sódio anidro, filtrou-se e concentrou-se in vacuo. Fez-se a cromatografia do resíduo (gel de sílica 40 uM da Baker, 70 gramas) com uma mistura do metanol;clorofórmio ltl9 como eluente.. para proporcionar 1,05 gramas de 8-6-/ (5S, 6R)-1, 5-di-hidroxi-7 (2.)-icosenil/- (R)-cisteinato de etilo na forma de um óleo amarelo claro límpido (70 %).

A um frasco de fundo redondo contendo 1,05 gramas (2,28 mH) do anterior intermediário em cisteinato de etilo em 250 ml de metanol adicionaram-se 5,0 ml de uma solução de ?ÍC1 1N (5,00 mH). Depois de se agitar durante 2 dias, neutralizou-se a mistura de reacção com 5,0 ml de hidróxido de sódio 1 N (5,00 mií) e agitou-se durante 0,5 horas. ConQen>trou-se a mistura de reacção in vacuo. P.epartiu-se o resíduo entre cloreto de metileno e água. A solução da camada de cloreto de metileno secou-se sobre sulfato de sódio anidro, filtrou-se a concentrou-se in vacuo, para, proporcionar 0,97 gramas de S-6-/“ (5S, 6R)-1, 5-di-hidroxi-7 (2.)-icosenil7- (r) -cisteinato de metilo (Composto 7) na forma d.e um óleo amarelo claro límpido (95 %).

Composto 7í RHN: 0,87 (tripleto, 3 H, ΟΗθ (CHg).^-); ^1,1 “ ^1,8 (multipleto, 26 H, CH₃(ÇH₂)_1oCH₂- e -CH(OH)(CH₂)₃CH₂OH);

1.8 - 2.7 (multipleto, 6 H, - (¾) ₁₀CH₂CH=, -¾ e

-OH); 2.7 - 3.0 (multipleto, 2 - SG^CH-); 3.3 - 4.0 (multipleto, 4 li, =CHGHCM(Oa)- e 3.73 (singleto, 3 -L_t -COOCa₃); 5.2 - 6.o (multipleto, 2 H, -CH=CH-).

IV (puro): 3360, 3300 2 1745.

EM: m/e 427, 394 e 342.

Análise:

calculado para C, 64,67; H, 10,63; IT, 3.14 encontrado C, 64,94; 11, 10,94; IT, 3,06

Exemplo 8

Preparação de 1/4 de hidrato de (53, 6PJ-1- (2-tetra-hidro-piranil-oxi.)-_5-hiároxi-6-fenil-tio-7 (3.) -icoseno (Composto. 8)

Adicionou-se tio-fenol (0,30 ml;

2,89 mM) 1,21 ml de trietil-amina )8,67 mM) e 20 ml de metanol a 0,57 gramas (1,44 mM) de Co^raP^os-° l(e) sob uma atmosfera de azoto. D_epois de se agitar durante 24 boras concentrou-se a mistura de reacção in vacuo para proporcionar 0,92 gramas de 1/4 de hidrato de (5S, 61;)-1- (2-tetra-hidro-piranil-oxi)-5-hidroxi-6-fenil-tio-7(2,)-icoseno (Composto 8). A cromatografia (gel de sílica 60 da Aerk, 75 g) com una mistura de trietil-aminashezano 1:9 como eluente, proporcionou 0,67 gramas de composto puro na forma de um óleo incolor límpido (92 %).

P.MNs 0,7 - 1.0 (tripleto, 3 M, -0H₃); 1.0 - 2.6 (multipleto, 35 ;1, OCH^CX,)₃CHO, -OH, -OGH₂(CM₂)₃GH- e 0(0^)^); 3.0 - 4.2 (multipleto, 6 li, -CH^OCHOCH.,- e

-CII₂ÇH(OH)CH(SC₆H₅)-); 4.4 - 4.7 (multipleto, 1 H, -OÇHO-); 5.1 - 5.8 (multipleto, 2 *Z, -CH-CH-); 7.1 - 7.6 (multipleto, 5 H, aromático As).

IV (puro): 3450 e 1120

EM: m/e 504 (M⁺), 403, 318 e 140 (ICO %).

Análise: calculado para 1/441_OC: G, 73,10, H, 10,39 encontrado G, 73,16; 10, 22

ϊ:

Preparação de (5S, 6R)-6-(4-cloro-fenil-tio)-5-hidroxi-l-(2-tetra-hidro-DÍranil-oxi)-7(Z)~icoseno (Cnmpo sto 9)

Adicionou-se p-cloro-tio-fenol (0,88 gramas; 6.08 mM) e 1,70 ml de trietil-amina (12,16 mM) a uma solução de 1,60 gramas (4,05 mM) de Composto l(e) em 40 ml de metanol sob uma atmosfera de azoto. D_epois de se agitar durante a noite, concentrou-se a mistura de reacção in vacuo para proporcionar 2.68 gramas de (5S, 6R)-6-(4-cloro-fenil-tio) -5-hidroxi-l-(2-tetra-hidro-piranil-oxi)-7(Z)-icoseno bruto (Conçosto 9) na forma de um óleo amarelo claro límpido. A cromatografia (gel de sílica 40 da Baker, 80 gramas) com uma mistura de trietil-aminnshexano ls9 como eluente, proporcionou 2,06 g do Composto 9 puro na forma de um óleo incolor , RMN: 0,6 - 1.0 (multipleto, 3 Η, (CH^^CH^): 1.0 - 2.2 (multipleto, 35 H, »CH(qi₂)₁₁ CH₃, -CH(OH) (CH₂)₃CH₂0 e 0CH₂(CHOCHO); 3.1 - 4.2 > (multipleto, 6 H, «CHCHCH(OH)- e -CH₂OCHOCH₂-);

j 4.S - 4.7 (multipleto, 1 H, -OÇHO-); 5.1 - 5.8 (multipleto, 2 : -ÇH»CH-); 7.0 -7.5 (multipleto, 4 H, aromático H).

' IV (puro)í 3440 e 1900.

BMs m/e 438, 436 (m-102), 352 e 85 (100

Análises fe C_alculado para ^C3i^H ₃i^clO3^Sí C, 69,04; H,

Γ l_neontrado C, 69,15; H,

%).

9,53

9, 60 • Preparação de (5S, 6R)-6-/~(R)-2-acetil-amino-2-carbo-metoxi” xgWksflKa&JJZ-? (.¾} -ísqs.§q-^ 5-g.ipj., (Cnmpaako ____________

ΒΒ· ' ,?< ' · '' Ίΐ^: [ Adicionou-se ΟΧΟΝΑ (3,82 gramas; 6,21 ! ηΜ KHSO-) a uma solução de 1,01 gramas (2,07 mM) do Composto em 15 ml de metanol e 15 ml de água. 0X0NA é a marca comerΗ,

' ?' ' .. ' .. <

ciai da DuPont Company, Wilmington, DE para um complexo de peroxi-mono-sulfato de potássio p·.

Depois de se agitar durante a noite, concentrou-se a mistura de reacção in vacuo. Diluiu-se o resíduo com cloreto de metileno, lavou-se com água, secou-se sobre sulfato de sódio anidro, filtrou-se e concentrou-se in vacuo para proporcionar 0,90 gramas de (5S, 6R)-6-/^ (R)-2-aoetil-amlno-2-carbo-metoxi-etil-sulfonil/-7(z)-icosen-l,5forma de um óleo amarelo claro límpi-di©l (Coqposto 10) na do (84 %).

RMN; 0,88 (tripleto, 3 1.0 - 1.8 (multipleto,

H,

-OH(OH) (<3g₂)₃CH₂OH); 1.8 (ca₂)₁₁ ch₃);

H, -CHCH₂(CH₂)_1O CH₃ e • 2.4 (multipleto, 2 H,

CHj (GH₂)i_OCH2^GH*^ ^{9 2,05} (singleto largo, 5 H, -NHCOÇH₃ e 2 -OH); 3.5 - 4.0 (multipleto, 5 H, -ÇH(OH) (CH₂)₃ CHjOH e -SO^^-); 3.77 (singleto, 3 H, -OOOCHg); 4.2 - 4.7 (multipleto, 1 H, CHCgCH(OH)-); 4.7 - 5.2 (multipleto, 1 H, -CHgCHNH-);

(multipleto,

5.3 - 6.4 (multipleto, 2 H, -CH-CH); 1 Η. -NH—)·	6,5-7.	.0
IV (puro): 3660, 1750, 1665 e 1530.
SMt m/e 417 (M-102), 293, 192 e 145	(100 %) .
Anaxxseι ’ calculado para C2gH4gNO7S: C, 60,08;	H, 9, 50;	N,
encontrado c, 6o, 20;	H, 9,43;	N,

2, 70

2, 78

Preparação de (5S, 6R)-6-fenll-tio-7(Z)-icosen-l,5-diol (Çhfww nj

A<3icionou~se uma quantidade catalítica (Img) de ácido p-tolueno-sulfónico a uma solução de 1,06 gramas (2,10 mM) de Composto 8 em 20 ml de metanol, Depois de se agitar durante 3 horas, neutralizou-se a misturade reacção e secou-se com carbonato de sódio, filtrou-se e concentrou-se

Λ

in vacuo. Extraíu-se o resíduo com 50 ml de cloreto de metileno, filtrou-se e concentrou-se in vacuo para proporcionar ,

0,95 gramas de (5S, 6R)-6-fenil-tio-7(Z)-icosen-l,5-diol bruto (C^nfosto 11) na forma de um óleo incolor límpido. A cromatografia (gel de sílica 40 /iM da Baker, 30 gramas) com uma mistura de metanol;cloreto de metileno 1:19 como eluente, proporcionou 0,86 gramas de Composto 11 na forma de um óleo incolor límpido (97 %).

RMNl 0,88 (tripleto, 3 H, -¾)^ 1.0 - 2.6 (multipleto, 30 H, CH₃(CH₂)_1Σ0Η- e -CH(Og) (Cg₂)₃ CH₂0H); 3.3 - 4.9 (multipleto, 3 H, («₂)₃ (CH₂OH); 4.0 (doubleto duplo, J = 4 Hz e 11 Hz, 1 H, -CHÇHCH(OH)-); 5.1 - 5.9 (multipleto, 2 H, -CK*CH“·); 7.1 -7.6 (multipleto, 5 H, aromático Hs).

IV (puro): 3340 e 1020

BMf m/e 31« (M-102) e 218

Análise:

calculado para ^C ₂6^H44°2^S: (100 %).

C, 74, 23; Η, 10,54

C, 73,92; Η, 10,31

Preparação de (5S, 6R)-6-(4-cloro~fenil-tio)-7(Z)-icosen-l, 5

22):, ι

do ( 97 %h

RMN» 0,6 - 1.1 (tripleto, 3 H, -%); 1.1 - 2.6 (multipleto, 30 H, CH₃(CH₂)_U C e

-GH(OH) (Cg₂)₃0H)r 3.3 - 3.9 (multipleto, 3 H,

-Cg(OH) (CH_t)₃ÇH₂)0H); 3.93 (doubleto de doubletos, J = 4 « 9 HZ, 1 Η, »CHCHCH(OH)-); 4.8 - 6.0 (multipleto, 2 H, -Cg*ÇH·-); 7.0 - 7.5 (multipleto, 4 H, aromático Hs).

IV (puro); 3360 e 1100.

SM» m/e 354 (M+2 - 102 Cl monoisotopico).

352 (M-102), 81 (100%).

Análise» calculado para C₂gH₄₃C10₂Ss C, 68,61; H, 9,52 encontrado C, 68,29; H, 9,64.

I Preparação de N-acetil-S-6-/^- (5S, 6R)-1-(2-tetra-hidro-piraL nil-oxi)-5-oxo-7(z)-icosenil/-(R)-cisteinato de metilo (Com| B2etoJL3)-------------------;------------------------------------*---f A um frasco de 50 ml dom fundo redondo

I contendo 0|68 ml de cloreto de oxalilo (7,77 mM) em 18 ml de f- cloreto de metileno a -60°C (em banho de clorofórmio/gelo I moído seco), sob uma atmosfera de azoto, adicionaram-se 1,20 Γ ml de dimetil-sulfóxido (16,96 mM) em 4 ml de cloreto de meti[ leno. Depois de se agitar durante 2 minutos, adicionaram-se L 2,02 gramas (3,53 mM) do Composto 6 em 7 ml de cloreto de metileno numa porção simples. Substituiu-se o banho de arre» fecimento para -60°C por um banho de arrefecimento para -12°C (cloreto de sódio e gelo e água). Depois de a temperatura de f reacção ter atingido -5°C, manteve-se a agitação durante 15 [ minutos, e decorrido esse tempo adicdionaram-se 4,92 ml de í trietil-amina (35,3 mM) gota a gota enquanto se mantinha a j, temperatura de reacção inferior a -10°C. F_ormou-se um preci£ pitado branco, Depois de se agitar durante 15 minutos, deixou- -Se a mistura de reacção aquecer até à temperatura ambiente. í Lavou-se a mistura de reacção com 4o ml de água. 0 produto de - / - 40 -

Γ lavagem com água extraíu-se com 35 ml de cloreto de metileno | e combinou-se com a solução de reacção. A solução orgânica [ resultante lavou-se sucessivamente com 20 ml de uma solução f de HCL a 1%» 20 ml de uma solução de carbonato de sódio a 5% [ e com 20 ml de uma solução saturada de cloreto de sódio, DeF pois secou-*ee a solução sobre sulfato de sódio anidro, filI trou-se e concentrou-se in vacuo para proporcionar 2,26 gramas I de N-acetil-S-6/ (5S, 6R)-l~(2-tetra-hidro-piranil-oxi)-5-oxoI -7 (Zj-icoseni/ÃR)-cisteinato de metilo bruto (Composto 13), | na forma de um óleo amarelo límpido, A cromatografia (gel F de sílica 40 jsM da Baker, 90 gramas) com uma mistura de trieΓ til-amina;acetato de etilo: hexano 1:5:14 copo eluente, proF poncionou 1,35 gramas de composto 13 puro na forma de um óleo | amarelo límpido (67 %).

I RMN: 0,92 (tripleto, 3 H, CH₃ (CH/^-) f [' 1,0 -1.5 (multipleto, 20 H, CH₃ (CH/ _1QCH₂“) 1 1.4 - 1.9

I (multipleto, 10 H, -C0CH₂(CH₂)₂CH₂0- e | -OCH(CS₂)₃CH₂O); 2.05 (singleto, 3 H, -C0ÇH₃);

[ 1.9 - 2.4 (multipleto, 2 H, - (CH₂) ₁₀CH₂CH-); 2.4 - 2.8 E (multipleto, 2 H, -COCHgCH^); 2.92 (doubleto, J = 5 Hz, 2 í Hj -SCHgCH-); 3.0 -4.1 (multipleto, 4 H, f -CMjOCHOCHj-); 3.75 (singleto, 3 H, -COOCH₃); 4.30

I (doubleto, J * 9 Hz, 1 H, =CHCHS~); 4.4 - 4.7 (singleto largo, [ 1 H, -OÇHO-); 4.6 - 4.9 (multipleto, 1 H, -CH₂ÇHNH-); 5.0 - 6.0 Γ (multipleto, 2 H, -CH*ÇH-); 6.0 - 6.6 (multipleto, 1 H, ί -NHOO-).

IV (puro): 3300, 1750, 1670, 1530 e 1030.

I SM: m/e 467, 385, 144, 101 e 85 (100 %).

Análise:

: calculado para C₃₁H₅₅NOgS: C, 65,34; H, 9,73; N, 2,46 | encontrado C, 65,07; H, 9,96; N, 2,42

||l/ -

I,Preparação de N-acetil-S-6-/”5S, 6R)-l-hidroxi-5-oximino-7(z)~

-icosenil?-· (R)-cisteinato de metilo (Composto 14)

•I

·-!

fr·' { , ' í ‘ £

W

A um frasco de 250 ml de fundo redondo contendo 2,11 gramas (3,70 mM) de composto 13 adicionaram-se 0,27 gramas de cloridrato de hidroxilo-amina (3,89 mM) e 50 ml de etanol, Depois de se agitar durante 15 minutos adicionaram-se 0/60 ml de piridina (7,41 mM), e arrefeceu-se a mistura [ de reacçao e concentrou-se in vacuo. O resíduo resultante repartiu-se entre cloreto de metileno e água, Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio anidro, filtrou-se e concentrou-se in vacuo para proporcionar 2,01 gramas de N-acetil-S-6-/ (SS,6R)-l-hidroxi-5-oximino-7(Z)-icosenil7-(R)-cisteinato de metilo bruto (composto 14). a cromatografia (gel de slllca 60 da Merk, 200 gramas) com uma mistura de acetato de etilo:hexano 3:1 como eluente, proporcionou 0.57 gramas do composto 14 puro na forma de um óleo incolor límpido (31%).

iι·..

JL *<r ! íF r* 1 iir •s* >&

u' SP £i1| f <43 [ RMN: 0,88 (tripleto, 3 H, CH₃ (CHg) _u-);

I 1.0 - 1.5 (multipleto, 20 H, CH,(CH,)_lnCH₉-); 1.4 - 1.9 (multipletOf 4 H, —LN—2' (multipleto, 6 H,

-NeCCHgCHg-)f 2.05 (singleto (doubleto largo, J « 5 Hz, (multipleto} 2 H, -OOOQij); 4,42 (doubleto de 1 H_t -CH«CHCH-), 4,5 5.1-6.0 (multipleto, 1 H, -1^-).

2'11

3^k -2'102 - -N*CCH₂(Qi₂)₂CH₂OH); 1.9 - 2.7 -(CH₂)i₀CH₂ ^cH*r 2 -OH e , 3 H, -NHCOCH₃); 2.88 2 H, -SQigCH-); 3.4 - 3.9 -CHgOH); 3.75 (singleto, 3 H, doubletos, J a 9 Hz e 2 Hz, (multipleto, 1

-CH-CH-); 6,4

5.1

H,

H, -CH₂-CH-NH-); - 6, 8 (multipleto.

IV (puro): 3280, 1745, , 325,

1660

176, *1 wJB*' m/e soo·. (m+)

4· Análise:

: calculada para ^C26^H48^N2°5^S; _r í!Jl ' ' _f

Í4 ;

h

1/, ;

BÇ3 encontrado e 1540

169, 144 e 85 (100%)

C, 62,36; H, 9,66; N, 5,60

C, 62, 60; H, 10,01; N, 5,30.

P_reparação de N-acetil-S-6-/~ (5S, 6R)-5-hidroxi-l-(2-tetra-hidro-'pirabil-oxi)-7(Z)-docosenil7-)R)-cisteinato de metilo (toEpato 1,5)-------------------------------------------------42 -

Ji· x*K| ί! Α um frasco de 100 ml de fundo redondo

I contendo 1*29 ml de hexa-metil-di-silazano (5,78 mM) em 50 mM I de tetra-hldrofurano seco a 5°C, adicionaram-se 3,56 ml de n-butil-litío (5,52 mM). Removeu-se o banho de arrefecimento e decorridos 15 minutos adicionaram-se 3,20 gramas de penta,1 -decil-tri-fenil-fosfónio (5,78 mM) numa porção simples. A mistura de reacção adquiriu uma cor vermelha viva. D_ecorridos 20 minutos, adicionaram-se gota a gota 1,20 gramas (5,26 mM) do composto l(d), durante um período de 5 minutos, e a mis··. tura de reacção ficou esse tempo contentrada a solução de reacção in vacuo. Dissolveu-se o resíduo numa mistura de éter dietílico«hexano lil, filtrou-se e concentrou-se in vacuo. Acromatografia (gel de sílica (40 jjJA da Baker, 100 gramas) com uma mistura de trietil-amino«hexano 1;19 como eluente, proporcionou 1,72 gramas de (5S, 6R)-1-(2-tetra-hidro-piranil-0xl)-5,6~trans-epoxi-7(z)-docoseno na forma de um óleo incolor límpido (77 %).

*

Β:..·.·:

, A um frasco de 500 ml de fundo redondo contendo 1,79 gramas de intermediário do docoseno anterior (4,00 mM) em 50 mililitros de metanol adicionaram-se 0,81 gramas

B' de éster N-acetil-cisteina-metilico (4,60 mM) e 1,39 ml de triB -etil-amina (10,00 mM). Eliminaram-se os gases da mistura H de reacção e colocou-se sob uma atmosfera de azoto. Depois de se agitar durante 5 dias, concentrou-se a mistura de reacção || ifí vacuo. fez-se a cromatografia do resíduo (gel de sílica [' 40 uM da Biker, 100 gramas) com uma mistura de hexano«acetato B de etilo« tri-etil-amina (10«9il como eluente, para proporcioB nar 2,4 gramas do N-acetil-S-6-/“ (5S# 6R)-5-hidroxi-l-(2B -tetra-hidro-piranil-oxi)-7(Z)-docosenil7-(R)-cisteinato de B metilo (Coiposto 15) na forma de um óleo incolor límpido I (85 %).

ír',_ç·

' ' -

Intermediário docosenot RMN 0,7 - 1,0 (tripleto, 3 H,

-%)« 1-0

-(21(¾) ₃CH₂O- e -OCH(CH₂)₃CH₂0) : 2,6 (multipleto,

H— e ; 4.7 (tripleto, J

Composto 15»

Ç&j (CHjíis”); 1,0

·); 1.4 - 1.8 (multipleto,

H, -CH(OH) (CH₂)₃CH₂- e -0CH0CH₂ (¾) ₃) t

1.8 - 2.5 (multipleto, 3 H, -CHgCH-CH- e -CH(OH)-); 2.03 (singleto, 3 H, -NHC0CH₃); 2.92 (doubleto, J « 5 Hz, 2 H, -SCgjCH-); 3.1 - 4.1 (multipleto, 6 H, =CHCHCH(0H)- e -.CgjOCHOCHj-); 3,72 (singleto, 3 H, -000¾ (; 4.4 - 4.7 (multipleto, 1 H, -0CH0-); 4.7 - 5.1 (multipleto, 1 H, -CHjGKNH-, 5,2 - 6,9 (multipleto, 2 H, ' (doubleto largo, J » 9 Hz 1 Η, -NH-).

IV (puro): 3300, 1750 e 1665.

BMt m/e 413, 370, 354, 321 e 236.

Análise» calculado para C₃₃H₆₁NOgS: C, 66,07; H, encontrado C, 65,88; H,

2.5 (multipleto, 38 H, CH^ÍCl·^)^ CH=«, • 3,0

H, «CHCH0CH-); 3,0 - 4,1 (multipleto, 5 H, -CH₂0CH0-CH₂-); 4,4 - 4.7 (multipleto, 1 H

- 5.4 (multipleto, 1H, -CH-CHCH-); 5,68 « 11 Hz e 7 Hz, 1 H, -C^CH-CH-).

RMN» 0,85 (tripleto, 3 H,

- 1,5 (multipleto, 24 H,

6.30

10, 25; Ν,

10,16; Ν,

2, 34

2, 38

Pr-eparação de N-acetil-S-6/~5S, 6R)-1, 5-di~hidroxi-7(Z)-docoaenil/-(R)—cisteinato de metilo (Composto 16)

A um frasco de 100 ml de fundo redondo contendo 1/38 gramas de cisteinato do exemplo 15 (2,30 mM) em 25 ml dei· metanol adiciona-se 1 mg de ácido p-tolueno suli* Deppis de se agitar durante 6 dias, concentrou-se a Mistura de reacção in vacuo.

A cromatografia (gel de sílica 4o _zuM da Baker, 55 gramas) de resíduo com uma mistura de metanolxcloro44

ro f ormi o 1 s 19 como -acetil-S-6-/”(5S, teinato de metilo límpido (97 tá.

eluente proporcionou 1,15 gramas de N6P.) -1# 5-d.i-hidrozi-7 (S) -docosenil/- (R) -ais (Composto 16) na forma de linóleo incolor

RMN: 0,87 (tripleto 3 0/,

1,0 - 1.8 (multipleto, 3EI H,

-OH (OH) (¾) ₃CH_?OH); 1.8 - 2.3 (multipleto,

II, -CH₉CH=CH-); 2.05 (singleto, 3 a, -NlCOC/g); 2,33 (singleto, 2 H, 2 -OH); 2,90 (doubleto largo, J - 5 Hz,

-SCH₂CH); 3.4

-CHgOM); 3.75

-3.9 (multipleto, 4 H, -=0110^011(0..1)(singleto, 3 ?I, -COOCHg); 4.6 -5.1 (multipleto,

H, -CH-CH-);

H, -CH₂-CH-NH)-); 5,1 - 6.0 (multipleto,

6.2 - 6.7 (multipleto, 1 Η, -I7H-).

IV (puro): 3300, 1750, 1660 e 1540. EM: m/e 413, 370, 354, 321 e 236.

Análise:

calculado para encontrado

0, n

Exemplo 17
Preparação de mono-hidrato de (6>S, 7S)-2, -etooxi-henicosa-2, 8- (Z>)-dieno (Composto	6-dimetil-6,7-trans- 17)

Tratou-se uma solução de 1,68 ml de cli-isopropil—amina (12 mM) em 125 ml da tatra-hidrofurano com 6,41 ml de n-butil-litio (1,56 M, 10,0 mM), à temperatura ambiente. Decorridos 10 minutos, adicionou-se 5,43 gramas de brometo de tri-decil-trifenil-fosfónio (10,3 mM) numa porção simples, A solução vermelha resultante arrefeceu-se para -70°C e adicionaram-se 1,68 gramas (10,0 mM) de (2R, 28)—3,7-cb.metil-6-eno-2,3-trans-epoxi-octanal dissolvidos em 5 ml de THF.

o Agitou-se a mistura de reacção durante 1 hora a -70 C e depois deixou-se aquecer até à temperatura ambiente g agitou-se durante 40 minutos. Concentrou-se a mistura in vacuo e lavou-se o resíduo diversas vezes com porções de 50 ml de bexano. Os produtos de lavagem combinados concentraram-se para proporcio

- 45 n ar um óleo amarelo claro que continha algum material sólido (2,13 g).

A cromatografia do produto bruto era gel de sílica 60 da Merk (209 gramas) e eluição com uma mistura de hexano:éter dietílico: tri-etil-amina. (8:2:1 proporcionou

5-¾ (singleto

H,

H, 6-CH₃,

1.60 e 1.70 (multipleto,

1,83 gramas de raono-hidrato de (6S,-7S)-2, 6-diraetil-6, 7-trans-epoxi-henicosa-2,8- (*z)-dieno (Composto 17) na forma de um líquido muito claro (55 %).

RMN: 0,90 (tripleto, 3 H, CH_o03_n)8 1.30 (singleto largo,

Ο e CH₃(CH₂)₁₀):

largo, 6 H, C=C(CH_n)_o: 1.8 - 2.2 “o Z

10-CH₂ e 4-CH₂), 3,40 (doubleto, J = 7 .rgo, J = 5 Hs, ^:8-ií ^e °9-S>“X

Hz, 1H, J -	7 Hz, C7-H); 5,1 (tripleto la:
1 H	t C3-H);	5.1 -	6.0 (multipleto, 2 H,	Q
IV EM:	(CHC13): m/e 334	2530, (M*),	2860 e 1460. 291, 265, 109 (100 %)	•

calculado para '-i2^F*42°*^2^Oí 73,34; H, 12.58 encontrado C, 78,21: H, 12,00

Exemplo 18

Pr^eP^araÇSo de hemi-hidrato de (6S, 7R)-2, 6-dimetil-6-hidroxi-7-fenil-tia~henicosa-2, 8-(Z)-dieno (Composto 18) _____

Tratou-se uma solução de 1,00 gramas (3,0 mH) de composto 17 em 30 ml de metanol contendo 2,50 ml de trietil-amina (18 mH) com 0,95 ml de tio-fenol (9,0 raM) a temperatura ambiente. Siiminaram-se os gases d.a mistura e agitou-sc durante α noite e depois concentrou-se até se obter um óleo viscoso (1,90 gramas). Fez-se a cromatografia <3o produto bruto sobre 175 gramas de gel de sílica 60 da Merk e eluiu-se com uma mistura ds hexano:etil dietílico 9:1 para proporcionar 1,32 gramas de hemi-hidrato de (68, metil-6-hidroxi-7-fenil-tia~henicosa-2,8(Co mp o s bo

- .4 6 18) na forme de um óleo viscoso amarelo claro (99 %).

RMN: 0,85 (tripleto, 3 H, -¾) ΐ 0,9 - 1,4 (singleto largo, 6 H, C^CÍCH^)^); 1.8 - 2.4 (multipleto, 4 H, 10-¾ e 4-¾): 3,95 (doubleto complexo, J = 10 Hz, 1 H, C₇-H); 5.15 (tripleto largo, 7-5

Hz, 1 H, Cyll); 5.50 (doubleto de doubletos, ã « 10 Hz e

7,5 Hz, Cg-H e Ο,,-.ΐ); 7.0 -7.6 (multipleto, 5 H, aromático H).

IV (CHClg); 3450-3650, 2920 e 2850

EH: m/e NC M⁺, 354, 334, 318, 291, 218 (100 %), 185 e 155;

/-_7 n⁶ (CH01_o ) = +52, 8° lz O

Análise:

calculado para Ο^οΗ^θΟΟ.1/2 H^O encontrado ''f ±/

1O, 89

Exemplo 19

I_reparação de lactono do áciõo (53,

(2.) -icosenoico (Co mposto 19)

Adicionou-se benzeno (500 ml) a 92,8 gramas de reagente de Fetizon (carbonato de prata em Celite: carbonato de prata 148,5 mH) num frasco de 1J. de fundo redondo protegido da luz. Agueceu-se a mistura d-s reacção para se remover a água residual da reacção por destilação azeotrópica com benzeno. Recolheu-se o destilado até aos 80°0. Adicionou~se à mistura cie reacção o composto 11 (4,16 gramas; 9,90 mH) em 25 mililitros ô.s benzeno, Depois de se agitar ao refluxo durante 24 horas, deixou-se a mistura de reacção arrefecer até à temperatura ambiente, filtrou-se através ds· uma. almofada de sílica e concentrou-se in .vacuo para proporcionar 4,19 gramas de lactona do ácido (5S, 6R)-5-hidroxi-6-fenil-tio-7(i)-icosenoico bruto (Composto 19). A cromatografia (gel de sílica 60 da Merk, malha 70-230, 200 gramas) com uma mistura de acetato de etiloshexuno (de 1:9 até 1:3) como eluente, proporcionou 1,43 gramas de Composto 19 na forma de um óleo arsa- 47 -

relo claro límpido (35 %). RMH: 0,87 (triploto, 3 H, C

0,9 - 1,6 (multipleto, 20 i (multipleto, 6 H, Ca₀(CH₀)η & _L

2.3 - 2.

); 1.5

5.2 - 5.7 eto, 5 H, aromático

Λ

Z> / puro): 1750 e 1240. m/e 416 (1.¾ 307 o 317 (ICO ;ú).

O

9, 69 < o uo

Exemplo 20

Preparação de hemi-hidrato de (5S, 6R)-5-hidroxi-6-fenil-tio-7(Z)-icosenoato de sódio (Composto 20) ___________ o c₀mposto 1 IN (2, 55 ml;

2,55 mi4), 5,0 ml furano. Depois de a mistura óiente, oe com 15 mililitros de k liofilizacão da solução aguosa remanescente, proporcionou

1,14 gramas de hemi-hidrato d -tio-7 (z) -icosenoato sólido branco (98 /), 190°C) .

começou a (tripleto.

oe sód io

-p

X.·· .L · fsnil—

0,9 - 1.5 — <*il (Cxu) (CaI₂; CH₃ (Cli₂) _1oCH₂CH- e -0112¾^0003,5 =CHCHCH(OU)-);

(multipleto, 5

3	‘ · -1 Γ t ’' 4 's __ ) » 3’ '2',1J
o,	2A Ο, CiI,(CH9) CHO-	O
1.5	- 2.0 (multipleto,	3 Λ,
	); 2.0 - 2.5 (multe	. Ί
—
9 • íj	(multipleto, 2 0,

ς <o wi · K-

IV (^Br)s 3400 (-0M) e 156C (C-C).

Análise:

calculado para C₂₆?I₄,0,31¾ 1/2 11,0: C, 67,06, X, 9,09 encontrado 0, 65,77; :-í, 3,85

Resultados procedimento seguinte é uma modificação do ensaio de Pcsfolipase que foi descrito pela primeira vez por Costentino e outros., L-rostalglandins,.. 22,. 309 (1981) e 6 o processo utilizado -aqui para deter.:, inar actividade de fosfolipase A, no estômago das ratazanas e no pancreas dos suinos.

Diluiu-se uma suspensão de fosfolipase A₂ (Sigma. Chelical Co, St. Louis, .-10) com 25 militiol (rui) cie um tampão Tris-ZCl contendo 1 rnll de cloreto de cálcio ate se obter -uma concentração final de 10 milicrogramas de proteínas por mililitros (ml). A cada tubo de ensaio adicionari-se aliquocas de 0,1 ml (7_Z1 unidades) de suspensão de enzima. Adicionam-se os compostos de ensaio em aliyuotas ds 0,01 ml em dimetil-sulfóxido eu metanol e ajusta-se o volume para 0,15 ml com o tampão. Efectua-se uma incubação prévia a 37°O durante 5 minutos. Fara dar início â reacção, adícionam-se a cada tubo 0,01 microcuries (0,179 nanomol) de 2-araquidonil- (l-^C)-l-palmitoil-fcsfatiâil-colina (fsw England Nuclear, Boston, AA), incluindo também os 3 tubos neutros que não contém qualquer enzima, e efectua-se a incubação durante 10 minutes c a 37 C. Para-se a reacção com a adição <5s 0,07 mililitros AC1 IN a cada tubo. Os tubos neutros de controlo e cada concentração cio composto de ensaio experimentam-st· em triplicado.

’._s misturas de reacção extraem-se com acetato de etilo e a fase orgânica c aquosa separam-se por centrifugação de baixa velocidade. Seca-se a fase orgânica soturna atmosfera de azoto e depois faz-se nova suspensão em 0,01 mililitros de acctatc de etilo. Adiciona-ss a cada tubo de ensaio ácido araquidónico (50 microgramas em 0,01 ml de metanol^ „ 4? „ que se desenvolveram no ácido acético (99:1 em de fosfolípido que não

Wayne, NJ), e d cintilação

gel de sílica. C τ· acet contendo o substracto e o ácido araouidode Aquasol-2 (American byanamid. Co., contou-se

1{cuida a radioactividads proporção notência concentração necessária o ara inibir a reacção em inibição extensivo é ov

T _r ’* * .

•'5G ‘‘^a

Todavia, uma tícular do comoosto

A Tabela 2 seguinte apresenta a percentagem de inibição da actividade hic.ro .11 ti ca de fesfolipase A₂ obtida a partir de amostras de tecido de estômago de ratazana e de pâncreas de suíno com os compostos 2, 3, 4 e 14.

metilo.

-1,

Composto

2-1e t r a-h ic ro-p ir an i 1 -ox i) - 7 (d) - i 00 s eni/7-glutationa-trietil-aaónio.

do

-/ S- (R) -cisteinil/-7 UJ-icosen-l, 5-diol

Composto 14 : -acetil-S-6-/

-hidroxi-5-oximino-7 (^rd)-icosenil/7~ (.1)-cisteinato <5

Composto

Mf*

Tabela 2 *

Inibição percentual de Actividade

Hidrolítica de por a 6.5 x cento (IC_rz.)

..alar GJ e 57 a 10 por cento a 10 “'d ^ι·Λ com o procedimento seguinte

Apresentam-se os resultados de três íriências independentes i V-C padrões s inibidores de PA₂ apresentar.-se a seguir com os correspondentes va IC_c« extraídos da literatura cara cada composto e para

I

υ	<0	*
Ρ	Μ	Γ·
0	Λ	«
Ρ4	0	X
0	0	η
Ό	φ	4
W	TJ	τ>
<ϋ	ο	(1

I	Φ	Ο
ο	Ό	Η
Η		X
Κ	CM	«—1
\Ο		•
•
Η

ο <*> fq σ\ CM — A comparação da actividade do composto

2, por exemplo, com as actividades referidas para cada um dos

:.,:1 compostos padrão anteriores mostra que o Composto 2 é um inibidor de actividade de PA₂ mais poderoso do que os cornpostes que normalmente se utilizam como padrões.

KJ. Também se estudaram os efeitos do composBI to 2 numa experiência de edema de orelha de rato para propor|y| cionar uma medida de actividade anti-inflamatório tópica.

F' |H A actividade anti-inflamatória tópica

Q de um composto determina-se pela sua capacidade para inibir g* uma inflamação induzida experimentalmente na orelha do rato. λε Administra-se óleo de Cróton ou acetato de 12-0-tetra-decanoilKK¹'

-forbol em acetona sobre a parte dorsal de uma orelha do rato.

Decorridas 5 ou 6 horas sacrificam-se os ratos, remove-se uma Pjf secção de cada orelha com um perfurador de cortiça de 7 mm |fe pesa-se numa balança electrónica. Determina-se a diferença Kl em peso entre as orelhas tratadas e não tratadas. Os compostos BI cuja actividade anti-inflamatória se pretende avaliar incorpoHg|> . K gl raram-se na mistura irritante do óleo de Cróton ou aplicam-se K? no veículo apropriado.

Observou-se a inibição percentual para

doses seguintes.	Inibição percentual
Composto 2
(micrçgramas)	Rato ns 1	Rato n2 :
50	33	68
100	53	72
200	62	82
400	75	80

Fez-se a descrição da presente invenção 9relativamente a diversos aspectos preferenciais. Contudo, deve a subentender-se que se podem fazer inúmeas modificações e variaHl ções da matéria que se abordou sem afastamento do âmbito da |||ínvenção' aqui descrita.

FI

1«

Processo para a preparação de um compos·. to de fórmula

* | em que R, á escolhido no

| em que R^ é escolhido no grupo que consiste em radicais tio[ -fenilo substituido ou insubstituído, fenil-sulfonilo substituido ou insubstituído, cisteinilo, glutationilo, cisteinil-glidnilo, tio-alquilamino inferior substituido ou insubstií tuido, sulfonil-alquilamino substituido ou insubstituído, tio-alquilacetamldo inferior substituido ou insubstituido e sul^: fonilaMlqbil-acetamido substituido ou insubstituído;

^R2

Τ't· M <> 1 fc

SL-fs;

tli é seleccionado de entre o grupo que consiste em radicais alquil-hidróxi, alquil inferior-hidróxi, alquil inferior-tetra-hidro-piraniloxi, alquil inferior-carboxi e alquenilo inferior;

é seleccionado de entre o grupo que consiste em radicais hidróxi compreendido entre cerca de 10 e cerca de 14;

e do< sais, ésteres, epóxidos e lactonas internas correspondentes farmaceuticamente aceitáveis em que R^ e considerados em conjunto formam um grupo epóxi ou em que Rg e Rj bonsiderados em conjunto formam uma lactona, caracterizado por se fazer reagir um composto da fórmula ^R3

- r'

HS

Ég ·

FT

•ρ

com um agente redutor para formar um álcool alllico da fórmula

R| fazer-se reagir o álcool alllico com um primeiro agente oxidante para formar o álcool trans epóxi da fórmula

fazer-se reagir o álcool epóxi com um segundo agente oxidante /dipiridina óxido de crómio (VI/7 para formar um aldeído epóxido dá fórmula

tratar-se o aldeído epóxido com um reagente de Wittig da fórmula

CH₃ n^CH2^P® PH₃Br O para formar um epóxido etilénico da fórmula

fazer-se reagir o epóxido com um tiol da fórmula

R_XSH para formar um derivado tiol de fórmula

OH

CH₃(CH₂)_n R_x e fazer-se reagir o produto formado com um ácido em que é escolhido do grupo que consiste em tiofenilo, tlofenilo substituído, fenil-sulfonilo, fenil-sulfonilo substituído, cisteínilo, glutationilo, cisteínil-glicinilo, tio-alquilamino, tio-alquilamino substituído, sulfonil-alquilamino, sulfonilalquilamino substituído, tio-alquilacetamido, tio-acetamido substituído, sulfonil-alquilacetamido, e sulfonil-alquilacetamido substituído* é seleccionado de entre hidroxi, carbonilo, oximino, e alquile inferior*

Rg é alquil inferior-hidroxi, alquil inferior-tetra-hidropira niloxi, alquil inferior-carboxi e alquenilo inferior* e n é um número inteiro entre 10 e 14.

Claims (4)

1. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o agente redutor ser hidreto de di-iso-butilalumínio.

   - 3* Processo de acordo com a reivindicação

   1, caracterizado por o primeiro agente oxidante ser reagente de Sharpless e o segundo agente oxidante ser complexo de Piri· dina.

   Processo de acordo com a reivindicação

   1, caracterizado por o reagente de Wittig ser brometo de dodecil-trifenil-fos fónio.

   Processo para a preparação de um compoeto de fórmula em que á -CH₂COOH ou -CH₂GOO~; R_g é hidroxi e R₁ e escolhido no grupo que consiste em tiofenilo, tiofenilo substituído, fenil-sulfonilo substituido, fenil-sulfonilo, cisteí57 - nilo, glutationilo, cisteínil-glicinilo, tio-alquilamino, tio-alquilamino substituido, sulfonilalquilamino, sulfonilalquila· mino substituido, tioalquilacetamido, tio-acetamido substituido, sulfonil-alquilacetamido e sulfonil-alquilacetamido; caracterizado por se fazer reagir um composto da fórmula gh₃ lactona da fórmula fazer-se reagir a lactona com uma base respondente e tratar-se o sal com ácido para livre.

   para formar o sal oorformar o ácido

   6fi

   Processo de acordo com
2. 5, caracterizado por a base ser hidróxido de ser ácido clorídrico.

   a reivindicação sódio e o ácido

   Processo para a preparação de um composto de fórmula em que Rj ó escolhido no grupo que consiste em tiofenilo, tiofenilo substituido, fenil-sulfonilo, fenil-sulfonilo substituido, clsteínilo, glutationilo. cisteínil-glicinilo tio-alquilamino, tio-alquilamino substituido, sulfonilalquilamino, sulfonilalquilamino substituido, tio-alquilacetamido, tio-acetamido substituido , sulfonilalquilacetamido e sulfoni1alquilacetamido substituido;

   R₃ é oximino e R₂ é tetra-hidropiraniloxi e alquil inferior-hidroxi, caracterizado por se fazer reagir um composto de fórmula com um agente oxidante para formar uma cetona da fórmula fazer-se reagir a cetona com cloridrato de hidroxilamino para se formar uma exima da fórmula
3. 8* caracterizado por
4. 9s por por tratar-se o produto formado com acido.

   Processo de acordo com a reivindicação o ácido ser o ácido p-tolueno-sulfónico.

   Processo de acordo com a reivindicação o agente oxidante ser cloreto de oxalilo/

   Processo de acordo com a reivindicação caracterizado por R, ser glutationilo, R₂ ser alquil incaracterizado ser alquil-inferior-hidroxi, caracterizado /DMSO.

   Processo de acordo com a reivindicação Rjl ser tio-alquil inferior-acetamido, R₃ ser hidroxi e n ser 11.

   ferior- te tr a-h idropir an i lox i caracterizado caracterizado caracterizado , caracterizado rior-hidroxi, Rg ser hidroxi e n ser 11.

   por ser por

   Processo de acordo com a ser cisteínilo, R₂ ser hidroxi e n ser 11.

   13«

   Processo de acordo com a caracterizado ser alquil inferior-hidroxi, por por por reivindicação alquil infereivindicação ser tio-alquil inferior-acetamido, Rg ser oximino e n ser 11.

   - 14® Processo de acordo com a reivindicação ^ser para-clorotiofenilo.

   15®

   Processo de acordo com a reivindicação R_x ser CH₂CH(aOOCH₃)NHCOCH₃.

   16® Processo de acordo com a reivindicação R₂ ser 2-hidroxi-etilo.

   _ 17® -

   Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por R₂ ser (2-tetra-hidropiraniloxi)etilo.

   - 18® Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por R₃ ser hidroxi.

   - 19® -

   Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por N ser 11 ou 13.

   - 20® -

   Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se obter N-acetil-S-6-/5S, 6R.7-1, 5-di-hldroxi-7(Z)-eicosenilJZ- (R)-cisteinato de metilo.

   - 21« Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se obter o di-hidrato de 5,6-/~5S,6R)-5-hidroxi-l-(2-tetra-hidropiraniloxi)-7(Z)-eicosenil/glutationa-trietil-amónio.

   - 22® Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se obter o hemi-hidrato de (5S,6R)-6-/”S-(R)-cisteínil7-7(z)-eicosen-1,5-diol.

   ®T

   23a

   Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se obter N-acetil-S-6-/~5S,6R)-l-hidroxi-5-oximino-7(Z)-eicosenil/-(R)-cisteinato de metilo.

   248

   Processo para a preparação de uma composição farmacêutica caracterizado por se incorporar como ingrediente activo uma quantidade anti-inflamatória de um composto de fórmula I quando preparado de acordo com as reivindicações 1, 5 e 7 em associação com um veículo farmaceuticamente aceitável.

   rr

   A requerente declara que o primeiro pedido desta patente foi depositado nos Estados Unidos da América em 29 de Maio de 1986, sob o número de serie 867,995.