JP3681390B2 - ２６，２８−メチレン−１アルファ，２５−ジヒドロキシビタミンｄ２化合物 - Google Patents

Description

発明の背景
本発明は、生物学的に活性なビタミンＤ化合物に関する。より具体的には、本発明は、２６，２８−メチレン−１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂化合物、一般的なその製造方法、および骨粗鬆症の治療におけるその使用に関する。
１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₃をビタミンの活性形態として発見したことにより、選択活性を有する類似体の発見を意図してビタミンＤのこのホルモン形態の類似体が盛んに研究されている。今日まで、ほとんどまたはまったくカルシウム活性を有さないで１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₃を他のものと区別させる役割をはたすいくつかの化合物が発見されている。さらに、腸のカルシウム輸送を刺激する高い活性を有し、骨からのカルシウムの移動に最低限の活性を有する、ほかの化合物が発見されている。２４−炭素で側鎖を長くすることによるビタミンＤ側鎖の修飾は、カルシウム活性の喪失をもたらし、かつ増強されたまたは乱されない他のものと区別される活性をもたらしている。１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂の２４−メチルをエピ−立体配置に位置させると、骨からのカルシウムの移動における活性を減少させると思われる。一方、２６−炭素および２７−炭素上で増大された疎水性は、もし２５−ヒドロキシルが存在するならばそのビタミンＤ化合物の全活性を増大すると考えられる。
これらの公知の化合物のいくつかは、生体内および生体外で高い効力ある活性を示し、有利な活性プロフィールを有している。したがって、これらの化合物のいくつかは、さまざまな病気、例えば、腎性骨異栄養症、ビタミンＤ抵抗性くる病、骨粗鬆症、乾癬およびある種の悪性腫瘍の治療に、使用されているか、または使用を提案されている。
閉経時の女性が、骨質量の顕著な喪失を受け、最終的にオステオペニア（ｏｓｔｅｏｐｅｎｉａ）となり、これがさらには、長い骨の骨折および椎骨の自然な圧迫骨折を起こすことが良く知られている。この病気は、一般的には閉経後骨粗鬆症として知られていて、米国および女性の寿命が少なくとも６０、７０才の年齢に到達するほとんどのほかの国で重大な医学的問題を提起している。一般的には、骨の痛みと減退した身体的活動とをしばしば伴う病気は、減少された骨質量を徴候とする１つまたは２つの椎骨の圧迫骨折により診断される。この病気は、カルシウムを吸収する能力の減少、性ホルモン、特にエストロゲン及びアンドロゲンの低下したレベル、並びに負のカルシウムバランスを伴うことが知られている。
骨喪失の同様な徴候は、老年の骨粗鬆症およびステロイドにより誘発される骨粗鬆症の特徴となっていて、ステロイドにより誘発される骨粗鬆症は、ある種の病気の状態に対する長期に渡るグルココルチコイド（コルチコ−ステロイド）治療の認識された結果である。
この病気を治療する方法はかなり変わってきたが、今日まで、完全に満足のいく治療法はまだ、知られていない。従来の治療法は、患者にカルシウム補充物を投与することである。しかしながら、カルシウムの補充それ自体では、この病気を防ぐまたは治療するのにうまくいっていない。別の従来の治療法は、性ホルモン、特に閉経後の女性が受ける骨質量の急速な喪失を防ぐのに有効であると報告されているエストロゲンの注射である。しかしながら、この方法は、その可能性のある発癌性の事実により複雑なものとされている。変わりやすい結果が報告されている、ほかの治療法は、多量投与量のビタミンＤ、カルシウムおよびフッ化物の組み合わせを含む。このアプローチの主な問題は、フッ化物が無層骨（ｗｏｖｅｎ ｂｏｎｅ）と呼ばれる構造的に健康でない骨を誘発し、さらには、多数の副作用、例えば、発生率が増大される骨折および投与された多量のフッ化物に対して胃腸が反応することである。提案されている別の方法は、カルシトニンを注射するかまたはホスホン酸塩を供給することにより骨吸収を遮断することである。
米国特許第４，２２５，５９６号は、骨質量の喪失に対する生理学的傾向を有するまたは徴候を示す、ほ乳動物の身体の中でカルシウムの吸収または保持を増大させるビタミンＤ₃のさまざまな代謝産物を用いることを示唆している。前記特許で特に挙げられている代謝産物、すなわち１α−ヒドロキシビタミンＤ₃、１α−ヒドロキシビタミンＤ₂、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₃、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂および１，２４，２５−トリヒドロキシビタミンＤ₃は、前記特許において権利が請求されかつ記載されている活性があり得るとされるが、特に従来のカルシウム補充物治療法により用いらると、過カルシウム血症を起こすという欠点によっても特徴付けられている。したがって、骨粗鬆症を治療するためにこれらの化合物を使用することは、広く受け入れられてはいない。米国特許第３，８３３，６２２号および同第３，９０１，９２８号は、それぞれ、これらの化合物の有用性の一般的表現において骨粗鬆症の治療に対して１α−ヒドロキシビタミンＤ₃および２５−ヒドロキシビタミンＤ₃の水和物を用いることを示唆している。これらの化合物の両方は、過カルシウム血症の危険を含む従来のビタミンＤ様の活性を示すことが良く知られている。
米国特許第４，５８８，７１６号も、骨粗鬆症のような骨質量の喪失を特徴とする骨の障害を治療するために１α，２５−ジヒドロキシ−２４−エピ−ビタミンＤ₂を使用することを示唆している。この化合物は、腸カルシウム輸送を増大させ、新たな骨のミネラル化を刺激するようなカルシウム代謝に影響を与えるビタミンＤ様の特徴のいくつかを示すが、骨からカルシウムを移動することへの最小の影響の利点を有する。この２４−エピ化合物は、単独で投与してもよくまたは骨移動を誘発する化合物、例えばホルモン、または１α−ヒドロキシビタミンＤ₃もしくはＤ₂または１α，２５−ジヒドキシビタミンＤ₃もしくはＤ₂などのビタミンＤ化合物と組み合わせて投与してもよい。
米国特許第５，１９４，４３１号は、骨粗鬆症の治療における２４−シクロプロパンビタミンＤ₂化合物の使用を開示している。また、米国特許第４，８５１，４０１号は、骨粗鬆症および関連する病気の治療におけるシクロペンタノ−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₃化合物の使用を開示している。
発明の要約
本発明は、所望の非常に有利な生物学的活性パターンを示す、新規な化合物を提供する。これらの化合物は、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₃のそれと比較して顕著な腸カルシウム輸送活性を特徴とし、一方、骨からカルシウムを流通させる能力に関して１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₃よりもより低い活性を示す。よって、これらの化合物は、そのカルシウム血症活性（ｃａｌｃｅｍｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ、カルセミック活性ともいう）に関して高度に特異的である。腸カルシウム輸送に関するその優先的活性と低い骨カルシウム流動化活性は、骨の喪失が重大な問題となる代謝性の骨の病気の治療におけるこれらの化合物の生体内投与を可能とする。その優先的なカルセミック活性のため、これらの化合物は、骨の形成が望ましい病気、例えば骨粗鬆症、骨軟化症および腎性骨異栄養症の治療に対する好ましい治療薬であろう。
構造的には、これらの望ましい生物学的な特性を有する化合物の鍵となる特徴は、これらが、シクロペンタン環が側鎖上に導入されている１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂の類似体であることである。したがって、このタイプの化合物は次の一般構造によって特徴付けられる：

したがって、本発明は、腸カルシウム輸送に関する優先的な活性及び低減した骨カルシウムの流動活性、または高い骨カルシウム流動活性を示す新規な化合物を提供する。減ぜられた骨流動活性は、これらの化合物が骨入れ代わり率の高い（すなわち、閉経後型）骨粗鬆症を治療するのに特に適したものとし、一方、高い骨カルシウム移動活性を有する化合物は、年齢に関連した骨粗鬆症のような入れ代わり率の低い骨粗鬆症に適する。より具体的には、これらの化合物は、（２２Ｅ，２４Ｒ，２５Ｒ）−２６，２８−メチレン−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂；（２２Ｅ，２４Ｓ，２５Ｓ）−２６，２８−メチレン−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂；（２２Ｅ，２４Ｒ，２５Ｓ）−２６，２８−メチレン−１α−２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂；および（２２Ｅ，２４Ｓ，２５Ｒ）−２６，２８−メチレン−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂である。
本発明は、また、最終生成物の合成の間に形成される新規な中間体化合物を提供する。構造的には、その中間体化合物は、次の一般構造により特徴づけられる：

式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、水素またはヒドロキシ保護基であってよい。
本発明は別の局面では、骨粗鬆症の特徴である骨質量の喪失が、骨質量を増加するのに十分な量で２６，２８−メチレン−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂化合物を投与することにより効果的に治療されることが見いだされた。さらに具体的には、骨粗鬆症を治療する方法は、２６，２８−メチレン−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂の上記の４種の異性体のいずれかの有効量を投与することを含む。上記の化合物は、単独でまたは薬学的に受け入れられる他の薬剤と組み合わせて投与される。個々の化合物自体または組み合わせて、約０．５μｇ／日以上約５０μｇ／日以下の投与量が、通常、有効である。この方法は、この化合物の有意的でない骨移動活性に起因して骨質量を回復させるであろうという明確な利点を有し、さらには、この化合物は、適切な化合物投与量が用いられるかぎり（投与レベルは、当業者に公知の方法により監視されるように被験者の応答に応じて調節されるだろうことを理解しているものとして）、有利にも、前記化合物が毎日連続的に投与されても過カルシウム血症を起こさない。
２６，２８−メチレン−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂の上記４種の異性体のいずれかを指示された投与量で投与することを含む上記の方法は、骨質量の回復または維持に有効であり、よって、骨粗鬆症の各種の形態、例えば閉経後骨粗鬆症、老人性骨粗鬆症、およびステロイドで誘発される骨粗鬆症を治療または予防する新規な方法を提供する。この方法が、骨質量の喪失が指標であるような、ここに列記した以外の疾病状態の予防または治療に対する容易な適用を見いだすであろうことは明白であろう。
発明の詳細な説明
説明の中および請求の範囲のなかで用いられているような、用語ヒドロキシ保護基とは、ヒドロキシ基の一時的な保護に通常用いられるいずれかの基を指し、例えば、アルコキシカルボニル基、アシル基、アリキルシリル基、アルキルアリールシリル基およびアルコシキシアルキル基を意味し、保護されたヒドロキシ基は、そのような保護基により誘導されたヒドロキシ官能基である。アルコキシカルボニル保護基は、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ブトキシカルボニル、イソブトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、ベンゾイルオキシカルボニルまたはアリルオキシカルボニルのような基である。用語『アシル』は、すべての異性体を含む炭素１−６個のアルカノイル基、または炭素１−６個のカルボキシアルカノイル基であって例えば、オキサリル、マロニル、スクシニル、グルタリル基を意味するか、又は芳香族アシル基例えばベンゾイルまたはハロ、ニトロまたはアルキル置換ベンゾイルを意味する。説明または請求の範囲で用いられるごとき用語『アルキル』は、そのすべての異性体を含む炭素１−１０個の直鎖または分岐の炭化水素基を意味する。アルコキシ保護基は、たとえばメトキシメチル、エトキシエチル、メトキシエトキシメチルまたはテトラヒドロフラニルおよびテトラヒドロキシピラニルのような基である。好ましいアルキルシリル保護基は、トリメチルシリル、トリエチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリルおよび類似のアルキル化シリル基である。アルキルアリールシリル保護基は、たとえばｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルのような基である。
本発明の治療法で有用なビタミンＤ化合物は、（２２Ｅ、２４Ｒ、２５Ｒ）−２６，２８−メチレン−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂；（２２Ｅ、２４Ｓ、２５Ｓ）−２６，２８−メチレン−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂；（２２Ｅ、２４Ｒ、２５Ｓ）−２６，２８−メチレン−１α−２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂；および（２２Ｅ、２４Ｓ、２５Ｒ）−２６，２８−メチレン−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂である。上記の化合物は、単独で投与されてもまたはほかの薬学的に受け入れられる薬剤と組み合わせて投与されてもよい。
ビタミンＤ化合物、またはその組み合わせは、滅菌非経口溶液として、注射によりまたは静脈内的に、または経口投与量の形態として栄養管（ａｌｉｍｅｎｔａｒｙ ｃａｎａｌ）により、または経皮的に、坐薬により容易に投与され得る。２６，２８−メチレン−１α−ヒドロキシビタミンＤ₂化合物自体またはほかの１α−ヒドロキシル化ビタミンＤ化合物との組み合わせで（組み合わせの中の化合物のそれぞれの割合は、対象とした当前記病気の状態および所望される骨の無機化および／または骨の移動の程度に依存する）約０．５マイクログラム−約５０マイクログラムを一日あたりとした投与量が、通常、本発明の実施に有効である。すべての場合に、十分な量の化合物が骨質量の回復に使用されるべきである。一日当たり約５０マイクログラムを越える量またはほかの１α−ヒドロキシル化ビタミンＤ化合物との前記化合物との組み合わせは、所望の結果を達成するのに通常不必要であり、過カルシウム血症を起こし得、また、経済的に健全な実施ではないであろう。実際には、病気状態の治療での処置が所望する目的である時により高い投与量が用いられ、より低い投与量が予防の目的で通常用いられ、与えられた症例で投与される特定の投与量は、投与される特定の化合物、治療される病気、被験者の状態および薬の活性を変え得るほかの適当な医学的事実、または被験者の応答に従い周知のように当業者により調節され得ることが理解されるものとする。例えば、有効であるためには、２６，２８−メチレン−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂化合物は、投与範囲０．５−５０μｇ／日で好ましくは投与される。本分野で周知のように、通常、一回一日または一日複数回の投与として用いられる。
さまざまな化合物の投与形態が、本分野で周知のように、無毒な薬学的に受け入れられる担体と化合物を組み合わせてつくられ、即放出性配合物または遅放出性の配合物をつくるようにすることができる。そのよう担体は、固体または液体でもよく、例えば、コーンスターチ、ラクトース、ショ糖、落花生油、オリーブ油、ごま油およびプロピレングリコールであってよい。固体の担体が用いられるなら、化合物の投与形態は、錠剤、カプセル、粉体、トローチまたはロゼジンであってよい。液体担体が用いられるなら、軟質ゼラチンカプセルまたはシロップあるいは液体懸濁物、エマルジョンまたは溶液が投与形態であってよい。投与形態は、また、補助薬例えば保存剤、安定剤、湿潤剤または乳化剤、溶液促進剤などを含んでいてもよい。それらは、また、ほかの治療上価値のある物質を含んでいてもよい。
本発明は、以下の例により、より具体的に説明するが、例は、合成の方法とそれにより得られる新規化合物、最終生成物および中間体の説明だけを意味するものである。これらの例では、アラビア数字により区別した特定の化合物（例えば、化合物１、２、３、．．．など）は、方法スキームでそのように番号をつけた構造を指す。新規化合物の明白な生物学的特徴を説明する、例えば、代謝性の骨の病気でのこれら化合物の適用で基礎として働く特徴を説明する例を追加的に示す。
化合物の製造
一般的手順。紫外線（ＵＶ）吸収スペクトルを、しまずＵＶ可視記録分光光度計（Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＵＶ−Ｖｉｓｉｂｌｅ ｒｅｃｏｒｄｉｎｇ ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ）に記録した。プロトン核磁気共鳴（¹Ｈ−ＮＭＲ）スペクトルは、５００ＭＨｚでＢｒｕｋｅｒ ＡＭ−５００多核分光計（ｍｕｌｔｉｎｕｃｌｅａｒ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ）に、またはクロロホルム−ｄ（ＣＤＣｌ₃）中で２７０ＭＨｚでＪＥＯＬ ＪＮＭ−ＧＳＸ ２７０ ＦＴ ＮＭＲ分光計に記録した。化学的シフト（δ）は、内部テトラメチルシラン（ＴＭＳ：δ０．００）からダウンフィールドして記録する（ｒｅｐｏｒｔｅｄ ｄｏｗｎｆｉｅｌｄ）。質量スペクトル（ＭＳ）は、ＪＥＯＬ ＬＭＡ−ＤＡ５００質量データシステムを備えたＪＥＯＬ ＪＭＳ−ＨＸ１００質量分光計に７０ｅＶで記録した。シリカゲル６０（Ｍｅｒｃｋ、２３０−４００メッシュ）をカラムクロマトグラフィーに用いた。高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）は、Ｍｏｄｅｌ ６０００Ａ溶剤送りシステム、Ｍｏｄｅｌ Ｕ６ＫインジェクターおよびＭｏｄｅｌ ４５０可変波長検出器を備えたＷａｔｅｒｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ液体クロマトグラフィーを用いるか、またはＲｈｅｏｄｙｎｅ ７１２５インジェクター、Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＳＰＤ−６Ａ ＵＶ分光光度検出器、Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＦＣＶ−１００Ｂ画分コレクターおよびＳｈｉｍａｚｕ Ｃ−Ｒ４Ａクロマトパック（ｃｈｒｏｍａｔｏｐａｃ）を備えたＳｈｉｍａｚｕ Ｌ−６ＡＤ液体クロマトグラフシステムを用いて行った。テトラヒドロフランを、窒素の下で、ナトリウム−ベンゾフェノンケチルから蒸留した。ほかの溶剤は、標準的な方法により精製した。
プロセススキームでは、次の略号を用いてある：
Ｅｔ： エチル
Ｔｓ： トルエンスルホニル
Ｐｈ： フェニル
Ｂｎ： ベンジル
Ｂｕ： ブチル
ＴＨＦ： テトラヒドロフラン
Ｍｅ： メチル
ＤＭＡＰ： ４−ジメチルアミノピリジン
ＤＭＦ： Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ｍＣＰＢＡ： ３−クロロ過安息香酸
ＴＥＳ： トリエチルシリル
Ｔｆ： トリフルオロメタンスルホニル
ここでの説明とスキームとで、化合物１２は、公知の化合物であり、ＰＣＴ特許出願第ＷＯ８８／０７５４５号にしたがって製造され得ることが注目されるべきである。
例１−２６，２８−メチレン−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂の４種の異性体の合成（化合物１５ａ、１５ａ’、１５ｂおよび１５ｂ’；プロセススキーム）。
化合物１５ａ、１５ａ’、１５ｂおよび１５ｂ’の合成は、次のようにまとめることができる：
出発物質は、商業的に入手可能なエチル２−オキソシクロペンタカーボキシレート１であった。ケトン基は、アセタール（化合物２）として保護され、エステルは、水素化リチウムアルミニウムで還元してアルコール３を得た。３のヒドロキシル基は、ベンジルエーテル（化合物４）として保護され、ケトン官能性が、アセトン中の酸触媒による処理により再生されケトン５を与えた。メチルマグネシウムブロミドによる処理によりジアステレオマーアルコール６ａおよび６ｂが得られ、これらは、クロマトグラフィーにより分離され得、後に、２つのジアステレオマーは別個に変換された。
６ａのベンジル保護基は、水素化条件下で除去されてジオール７ａが得られた。ジオール７ａの第一級ヒドロキシル基が、対応するトシレート（化合物８ａ）に変換され、トシルオキシ基が、チオフェノキシドによる処理でフェニルチオ基で置換されてフェニルスルフィド９ａが得られた。フェニルスルフィドが、過酸により酸化されて対応するフェニルスルホン（化合物１０ａ）とされ最後に、シリルエーテルとしてのヒドロキシル基の保護が側鎖スルホン１１ａを与えた。同様にして、ジアステレオマー６ｂがスルフォン１１ｂに変換された。
ジュリアオレフィン化法（Ｊｕｌｉａ ｏｌｅｆｉｎａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ）を用いてステロイドアルデヒド（ｓｔｅｒｏｉｄａｌ ａｌｄｅｈｙｄｅ）１２とのカップリングを行い、トランス二重結合の形成を行った。このように、スルフォン１１ａまたは１１ｂのアニオンがアルデヒド１２と縮合され、得られるヒドロキシスルフォンをナトリウムアマルガムによる還元的脱離反応にかけて、無水酢酸による処理の後、それぞれ、化合物１３ａまたは１３ｂを得た。フッ化物イオンによるシリル保護基の脱保護は、プロビタミン１４ａおよび１４ｂを与え、これらは、ビタミンＤ誘導体１５ａと１５ａ’とのまたは１５ｂと１５ｂ’との混合物にそれぞれ通常の方法により（光異性化と熱異性化（ｔｈｅｒｏｍｏｉｓｏｍｅｒｉｚｔｉｏｎ）と、これに続く脱保護）変換された。ＨＰＬＣ精製と分離は、炭素−２４と炭素−２５のキラル中心に由来する４つの可能な異性体１５ａ、１５ａ’、１５ｂおよび１５ｂ’を与えた。
６−エトキシカルボニル−１，４−ジオキサスピロ［４，４］ノナン２。
トルエン（１５０ｍｌ）に含むようにしたエチル２−オキソシクロペンタンカルボキシレート（Ａｄｒｉｃｈ、１０．０ｇ、６４．０ｍｍｏｌ）、エチレングリコール（１８ｍｌ、３２３ｍｍｏｌ）、トリエチルオルソホルメート（２１ｍｌ、１２６ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水塩（０．６１ｇ、３．２１ｍｍｏｌ）からなる混合物を、１時間、留出物をディーンスターク装置（Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋ ａｐｐａｒａｔｕｓ）で除去しながら還流下で加熱した。混合物は冷却させてから、ＮａＨＣＯ₃溶液に注ぎ、次に有機層を分離した。水性層をジエチルエーテルで抽出してから一緒にした有機層をＮａＣｌ溶液で洗浄してから、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させた。濾過と濃縮により１６．４１ｇの２がうす黄色の油状物として得られ、これは、さらに精製することなく次の反応に用いられた。
¹Ｈ−ＮＭＲ δ（ｐｐｍ、５００ＭＨｚ）：１．２７（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ）、１．５８−１．７３（１Ｈ、ｍ）、１．７７−１．８８（２Ｈ、ｍ）、１．８８−１．９８（２Ｈ、ｍ）、２．０７−２．１７（１Ｈ、ｍ）、２．９０（１Ｈ、ｔ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、３．８６−３．９８（３Ｈ）、３．９８−４．０６（１Ｈ、ｍ）、４．０９−４．２３（２Ｈ、ｍ）。
６−ヒドロキシメチル−１，４−ジオキサスピロ［４，４］ノナン３。
ジエチルエーテル（５０ｍｌ）に含むようにしたリチウムアルミニウム水素化物（２．４３ｇ、６４．０ｍｍｏｌ）の懸濁物へ、２（１６．４１ｇ、粗製物）の溶液を５０分間にわたり氷浴中で窒素の下で滴下した。この混合物に、リチウムアルミニウム水素化物（１．２ｇ）を加え、混合物を２５分間攪拌した。この混合物へ、水（３．６ｍｌ）、１５％ＮａＯＨ溶液（１０．８ｍｌ）、水（１０．８ｍｌ）およびＮａ₂ＳＯ₄（２０ｇ）を加えた。次に混合物をセライトのパッドを通して濾過し、ＥｔＯＡＣによりよく洗浄した。ろ液と洗液とを一緒にしてから濃縮して１０．９５ｇの３をうす黄色の油状物として得、これを次の反応に精製することなく使用した。１５¹Ｈ−ＮＭＲ δ（ｐｐｍ、５００ＭＨｚ）：１．４９−１．９６（６Ｈ）、２．１４（１Ｈ、ｍ）、２．６５（１Ｈ，ｂｒ ｓ）、３．５７−３．７５（２Ｈ）、３．８５−４．０８（４Ｈ）。
６−ベンジルオキシメチル−１，４−ジオキサスピロ［４，４］ノナン４。
ＴＨＦ（３０ｍｌ）に含むようにした水素化ナトリウム（６０％懸濁物、２．８２ｇ、７０．５ｍｍｏｌ）の懸濁物に、ＴＨＦ（５０ｍｌ）に含むようにした３（１０．９５ｇ、粗製物）を３０分かけ氷浴中で滴下した。この混合物にテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムヨージド（２．３６ｇ、６．３９ｍｍｏｌ）を加えてから、塩化ベンジル（９ｍｌ、７８．２ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を周囲温度で夜通し攪拌した。混合物は、還流下で５０分間加熱した。この混合物を冷却してから、氷水に注ぎ、有機層を分離した。水性層をジエチルエーテルで抽出してから、一緒にした有機層をＮａＣｌ溶液で洗浄し、次にＮａ₂ＳＯ₄で乾燥した。濾過と、濃縮により、油状の物質が２１．０２ｇ得られ、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ₂ゲル１００ｇ、ｎ−ヘキサン中のＥｔＯＡｃ、０−１０％）により精製したところ４がうす黄色の油として１２．９４ｇ（１から８１．４％）得られた。
¹Ｈ−ＮＭＲ δ（ｐｐｍ、５００ＭＨｚ）：１．４２−１．５６（１Ｈ、ｍ）、１．５６−１．８７（４Ｈ）、１．９７（１Ｈ、ｍ）、２．２９（１Ｈ、ｍ）、３．３７（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝９．４および７．６Ｈｚ）、３．５９（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝９．４および６．２Ｈｚ）、３．７９−４．０１（４Ｈ）、４．５０（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１２．０Ｈｚ）、４．５２（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１２．０Ｈｚ）、７．２４−７．４３（５Ｈ）。
２−ベンジルオキシメチルシクロペンタ−１−ノン５。
アセトン（１６０ｍｌ）中に含むようにした４（７．９５ｇ、３２．０ｍｍｏｌ）とｐ−トルエンスルホン酸一水塩（０．３０ｇ、１．５８ｍｍｏｌ）とからなる混合物を１００分間周囲温度で攪拌した。この混合物をＮａＨＣＯ₃で中和してから、アセトンを減圧下で蒸発させた。残分を水で希釈してからＥｔＯＡｃで抽出した。一緒にした有機層をＮａＣｌ溶液で洗浄してからＮａ₂ＳＯ₄で乾燥した。濾過と濃縮により油状の物質を８．９４ｇ得、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ₂ゲル５０ｇＥｔＯＡｃをｎ−ヘキサンに含むようにした５−１０％）で精製して５を５．８３ｇ（８９．２％）うすい黄色油状物として得た。
¹Ｈ−ＮＭＲ δ（ｐｐｍ、５００ＭＨｚ）：１．８０（１Ｈ、ｍ）、１．９３（１Ｈ、ｍ）、２．０５（１Ｈ、ｍ）、２．１４（１Ｈ、ｍ）２．２０−２．４３（３Ｈ）、３．６３（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝９．０および６．２Ｈｚ）、３．６７（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝９．０および４．１Ｈｚ）、４．４９（２Ｈ、ｓ）、７．２０−７．４２（５Ｈ）。
（１Ｒ Ｓ，２Ｒ Ｓ）−２−ベンジルオキシメチル−１−メチルシクロペンタン−１−オール６ａおよびその（１Ｓ Ｒ，２Ｒ Ｓ）−異性体６ｂ。
メチルマグネシウムブロミド（ジエチルエーテルに含むようにした３．０Ｍ溶液：１０．５ｍｌ、３１．５ｍｍｏｌ）を、ジエチルエーテル（６０ｍｌ）に含むようにした５（５．８３ｇ、２８．５ｍｍｏｌ）の溶液に氷浴中で、窒素の下で５分間かけて滴下した。この混合物を１０分間攪拌してから、ＮＨ₄Ｃｌ溶液を加えて反応を静めた。有機層を分け、水性層をジエチルエーテルで抽出した。一緒にした有機層をＮａＣｌの溶液で洗浄してから、Ｎａ₂ＳＯ₄により乾燥した。濾過と濃縮により６．５７ｇの油状物質を得た。ＳｉＯ₂ゲルによる繰り返したクロマトグラフィーによる分離で、６ａをうすい黄色の油状物として３．１１ｇ（４９．５％）および６ｂを無色の油状物として２．１８ｇ（３４．７％）得た。
¹−ＮＭＲ δ（ｐｐｍ、５００ＭＨｚ）：６ａ １．３４（３Ｈ、ｓ）、１．４９−１．９４（７Ｈ）、２．７８（１Ｈ、ｂｒｓ）、３．６５（２Ｈ）、４．５１（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．９Ｈｚ）、４．５６（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．９Ｈｚ）、７．２５−７．４２（５Ｈ）；６ｂ １．１９（３Ｈ、ｓ）、１．４８−１．８８（６Ｈ）、２．２２（１Ｈ、ｍ）、２．５７（１Ｈ、ｂｒｓ）、３．４５（１Ｈ、ｔ、Ｊ＝８．８Ｈｚ）、３．５３（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．８および４．６Ｈｚ）、４．５１（２Ｈ、ｓ）、７．２６−７．４５（５Ｈ）。
（１Ｒ Ｓ，２Ｒ Ｓ）−２−ヒドロキシメチル−１−メチルシクロペンタン−１−オ−ル７ａ。
エタノール（６０ｍｌ）に含むようにした６ａ（３．１１ｇ、１４．１ｍｍｏｌ）の溶液を、１．５時間周囲温度でパラジウム−木炭（１０％、０．３％）を用いて水素添加した。この混合物をセライトのパッドを通して濾過した。ろ液を濃縮して７ａを１．７８ｇ得、これをさらに精製することなく次の反応に用いた。
（１Ｓ Ｒ，２Ｒ Ｓ）−２−ヒドロキシメチル−１−メチルシクロペンタン−１−オ−ル７ｂ。
７ａについてと同様にして、６ｂ（２．１８ｇ、９．９０ｍｍｏｌ）を変換して７ｂを１．０５ｇ得、これをさらに精製することなく次の反応に用いた。
（１Ｒ Ｓ，２Ｒ Ｓ）−１−メチル−２−ｐ−トルエンスルホニルオキシメチルシクロペンタン−１−オ−ル８ａ。
ＣＨ₂Ｃｌ₂（４０ｍｌ）中に含むようにした７ａ（１．７８ｇ、粗製物）、ピリジン（５．５ｍｌ、６８．０ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン（０．１７ｇ、１．３７ｍｍｏｌ）からなる混合物に、塩化ｐ−トルエンスルホニル（３．１３ｇ、１６．４ｍｍｏｌ）を一度に加え、この混合物を夜通し４℃に放置した。この混合物を周囲温度で１００分間攪拌した。混合物に氷を加え、周囲温度で攪拌してから、有機層を分離した。水性層をＥｔＯＡｃで抽出してから、一緒にした有機層を水、ＣｕＳＯ₄溶液、水、ＮａＨＣＯ₃溶液およびＮａＣｌ溶液で洗浄してから、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した。濾過と濃縮により３．８６ｇの８ａが得られ、これをさらに精製することなく次の反応に用いた。
（１Ｓ Ｒ，２Ｒ Ｓ）−１−メチル−２−ｐ−トルエンスルホニルオキシメチルシクロペンタン−１−オ−ル８ｂ。
８ａについてと同様な方法で、７ｂ（１．０５ｇ、粗製物）を、２．１２ｇの８ｂに変換し、これをさらに精製することなく次の反応に用いた。
（１Ｒ Ｓ，２Ｓ Ｒ）−１−メチル−２−フェニルチオメチルシクロペンタン−１−オール９ｂ。
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３０ｍｌ）に含むようにした８ａ（３．８６ｇ、粗製物）およびトリエチルアミン（９．６ｍｌ、６８．９ｍｍｏｌ）からなる溶液を一度にチオフェノール（２．１ｍｌ、２０．５ｍｌ）に加え、この混合物を夜通し周囲温度で攪拌した。この混合物に、チオフェノール（１．１ｍｌ）を加え、混合物を４０分間攪拌した。混合物にＮａＩ（触媒量）を加え、混合物を８５分間攪拌した。混合物にトリエチルアミン（５ｍｌ）を加え混合物を１４５分間攪拌した。混合物ヘチオフェノール（２ｍｌ）およびテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムヨージド（触媒量）を加えて、混合物を３５分間攪拌した。混合物を、冷たい希釈したＨＣｌに注ぎ、ジエチルエーテルにより抽出した。一緒にした有機層を冷たい希釈したＨＣｌ、水、ＮａＨＣＯ₃溶液およびＮａＣｌ溶液で洗浄してから、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した。濾過と濃縮により油状物質を６．４０ｇ得、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ₂ゲル１００ｇ、ＥｔＯＡｃをｎ−ヘキサンに含むようにした１−２０％）で精製したところ１．８４ｇ（６ａから６０．４％）の９ａがうすい黄色の油状物として得られた。
₁Ｈ−ＮＭＲ δ（ｐｐｍ、５００ＭＨｚ）：１．３５（３Ｈ、ｓ）、１．４９−１．６７（３Ｈ）、１．６７−１．８０（２Ｈ）、１．８２（１Ｈ、ｍ）、２．０２（１Ｈ、ｍ）２．８９（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１２．２および９．０Ｈｚ）、３．２１（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１２．２および９．０Ｈｚ）、７．１６（１Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ）、７．２８（２Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝７．８および７．３Ｈｚ）、７．３３（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ）。
（１Ｓ Ｒ，２Ｓ Ｒ）−１−メチル−２−フェニルチオメチルシクロペンタン−１−オール９ｂ。
９ａについてと同様にして、８ｂ（２．１２ｇ、粗製物）を１．４８ｇ（６ｂから８２．５％）のうすい黄色の油状物の９ｂに変換した。
¹Ｈ−ＮＭＲ δ（ｐｐｍ、５００ＭＨｚ）：１．２４（３Ｈ、ｓ）、１．３６（１Ｈ、ｍ）、１．５８（１Ｈ、ｍ）、１．６２−１．８１（３Ｈ）、１．９３（１Ｈ、ｂｒｓ）、１．９６−２．１２（２Ｈ）、２．８１（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１２．５および４．９Ｈｚ）、３．０７（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１２．５および６．５Ｈｚ）、７．１９（１Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、７．２９（２Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝７．６および７．２Ｈｚ）、７．３５（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）。
（１Ｒ Ｓ，２Ｓ Ｒ）−２−ベンゼルスルホニルメチル−１−メチルシクロペンタン−１−オール１０ａ。
ＣＨ₂Ｃｌ₂（４０ｍｌ）および水（１７ｍｌ）からなる混合物に含むようにした９ａ（１．８４ｇ、８．２８ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ₃（２．４５ｇ、２９．２ｍｍｏｌ）からなる混合物に、ｍＣＰＢＡ（８５％、３．３６ｇ、１６．５ｍｍｏｌ）を氷浴中で激しく攪拌を行いながら少しづつ加えた。混合物１９を１５分間攪拌した。混合物に、水（１６ｍｌ）、ＮａＨＣＯ₃（２．４５ｇ）およびｍＣＰＢＡ（１．６８ｇ）を加え、２０分間攪拌を継続させた。過剰量の過酸を、触媒量のＫＩの存在下でＮａ₂Ｓ₂Ｏ₃溶液により分解させた。有機層を分離させ、水性層をＥｔＯＡｃにより抽出した。一緒にした有機層をＮａＣｌ溶液により洗浄してから、Ｎａ₂ＳＯ₄により乾燥させた。濾過と濃縮により１０ａを白色の固体として２．６９ｇ得、これをさらに精製することなく次の反応に用いた。
（１Ｓ Ｒ，２Ｒ Ｓ）−２−ベンゼンスルホニルメチル−１−メチルシクロペンタン−１−オール１０ｂ。
１０ａについてと同じようにして、９ｂ（１．４８ｇ、６．６６ｍｍｏｌ）を、２．１４ｇのうすい黄色の粘稠な油状物としての１０ｂに変換し、これをさらに精製することなく次の反応に用いた。
（１Ｒ Ｓ，２Ｓ Ｒ）−２−ベンゼンスルホニルメチル−１−メチル−１−トリエチルシロキシ−シクロペンタン１１ａ。
ＣＨ₂ＣＬ₂（５０ｍｌ）に含むようにした１０ａ（２．６９ｇ、粗製物）とイミダゾール（５．６ｇ、８２．３ｍｍｏｌ）とからなる溶液に、クロロトリエチルシラン（１．７ｍｌ、１０．１ｍｍｏｌ）を加え、混合物を夜通し周囲温度で攪拌した。この混合物に、２，６−ルチジン（１．９ｍｌ、１６．３ｍｍｏｌ）とトリエチルシリルトリフルオロメタンスルホネート（１．９ｍｌ、８．４０ｍｍｏｌ）とを加え、混合物を周囲温度で３５分間攪拌してから還流下で加熱した。さらにトリエチルシリルトリフルオロメタンスルホネート（０．８ｍｌ）を添加して加熱と攪拌をさらに夜通し行った。混合物に氷を加えて、有機層を分離した。水性層をｎ−ヘキサンで抽出してから、一緒にした有機層を冷たい希釈したＨＣｌ、水、ＮａＨＣＯ₃溶液およびＮａＣｌ溶液で洗浄してから、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した。濾過と濃縮を行ってから、クロマトグラフィー精製（ＳｉＯ₂ゲル５０ｇ、ＥｔＡＯｃをｎ−ヘキサンに含むようにしたもの５％）を行い、３．２１ｇ（９ａから定量的な収量）の１１ａを無色の油状物として得た。
¹Ｈ−ＮＭＲ δ（ｐｐｍ、５００ＭＨｚ）：０．５４（６Ｈ、ｑ、Ｊ＝７．９Ｈｚ）、０．９０（９Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．９Ｈｚ）、１．２１（３Ｈ、ｓ）、１．４４−１．６３（３Ｈ）、１．６３−１．７８（２Ｈ）、１．８１−１．９６（２Ｈ）、３．０７（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１４．７および９．９Ｈｚ）、３．３１（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１４．７Ｈｚ）、７．５６（２Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝７．５および７．４Ｈｚ）、７．６４（１Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）、７．９２（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）。
（１Ｓ Ｒ，２Ｓ Ｒ）−２−ベンゼンスルホニルメチル−１−メチル−１−トリエチルシロキシ−シクロペンタン１１ｂ。
１１ａについてと同様にして、１０ｂ（２．１４ｇ、粗製物）を変換して無色の油状物として１１ｂを３．２１ｇ（９ｂから定量的収量）得た。
¹Ｈ−ＮＭＲ δ（ｐｐｍ、５００ＭＨｚ）：０．４６（６Ｈ、ｑ、Ｊ＝７．８Ｈｚ）、０．８４（９Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．８Ｈｚ）、０．９９（３Ｈ、ｓ）、１．２７（１Ｈ、ｍ）、１．４５−１．７５（４Ｈ）、１．９６−２．１５（２Ｈ）、２．８９（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１３．１および１２．０Ｈｚ）、３．３７（１Ｈ、ｄ、１３．１Ｈｚ）、７．５６（２Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．０および７．４Ｈｚ）、７．６４（１Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）、７．９１（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）。
（２２Ｅ，２４Ｒ，２５Ｒ）−および（２２Ｅ，２４Ｓ，２５Ｓ）−３β−ｔｅｒｔ−ブチルジフェニル−シロキシ−１α−メトキシカルボニルオキシ−２６，２８−メチレン−２５−トリエチルシロキシ−エルゴスタ−５，７，２２−トリエン１３ａ。
ＴＨＦ（１０ｍｌ）に含むようにした１１ａ（５７４ｍｇ、１．５６ｍｍｏｌ）の溶液へ、ＬｉＮＥｔ₂の溶液（ＴＨＦ６．８ｍｌに含むようにしたｎ−ヘキサンの１．６Ｎのｎ−ブチルリチウムの３．１ｍｌとジエチルアミン０．５４ｍｌとから得た；３．４ｍｌ）を、窒素の下で、ドライアイス−ＭｅＯＨ浴のなかで３０分間かけて滴下した。この混合物に、ＴＨＦ（１０ｍｌ）に含むようにした（２０Ｓ）−３β−ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシロキシ−１α−メトキシカルボニルオキシ−２０−メチルプレグナ−５，７−ジエン−２１−アル１２（１．００ｇ、１．５６ｍｍｏｌ）の溶液を同じ温度で２５分間かけて滴下した。反応は、ＮＨ₄Ｃｌ溶液の添加により静め、混合物は周囲温度まで温かくなるまでそのままとした。有機層を分離し、水性層をＥｔＯＡｃにより抽出した。一緒にした有機層を、ＮａＣｌ溶液で洗浄してからＮａ₂ＳＯ₄で乾燥した。濾過と濃縮により粗生成物１．８４ｇが得られ、これはさらに精製することなく次の反応に用いた。
ＣＨ₂Ｃｌ₂（４０ｍｌ）に含むようにした粗生成物（１．８４ｇ）、４−ジメチルアミノピリジン（１．９１ｇ）および無水酢酸（０．７４ｍｌ）からなる混合物を、夜通し窒素の下で周囲温度で攪拌した。この混合物に氷を加え、混合物を周囲温度で攪拌した。有機層を分離し、水性層をＥｔＯＡｃで抽出した。一緒にした有機層を、ＮａＣｌ溶液で洗浄してからＮａ₂ＳＯ₄で乾燥した。濾過と濃縮によりうすい黄色の油状物の粗生成物２．４５ｇが得られ、これはさらに精製することなく次の反応に用いた。
ＴＨＦ（２０ｍｌ）とＭｅＯＨ（２０ｍｌ）とからなる混合物に含むようにした粗生成物（２．４５ｇ）の溶液に、Ｎａ₂ＨＰＯ₄（６．６ｇ、４６．５ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を窒素の下で−４０−−５０℃で攪拌した。この混合物にＮａ−Ｈｇ（５％、７．１７ｇ、１５．６ｍｍｏｌ）を加えてから、１．５時間同じ温度で攪拌した。この混合物に、Ｎａ₂ＨＰＯ₄（１３．２ｇ）とＮａ−Ｈｇ（１４．４ｇ）を加え、混合物を同じ温度で１時間、さらに−３０−−４０℃で１．２５時間攪拌した。混合物をセライトのパッドを通して濾過し、ＥｔＯＡｔで洗浄した。ろ液と洗液とをＮａＣｌ溶液に注ぎ、有機層を分離した。水性層をＥｔＯＡｃで抽出し、一緒にした有機層をＮａＣｌ溶液で洗浄してからＮａ₂ＳＯ₄で乾燥させた。濾過と濃縮により粗生成物３．２１ｇが得られ、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ₂ゲル５０ｇ、ｎ−ヘキサン中に含むようにしたＥｔＯＡｃ１−３％）で精製して白色のフォームとして１３ａを７１９ｍｇ（５４．１％）得た。
¹Ｈ−ＮＭＲ δ（ｐｐｍ、５００ＭＨｚ）：０．５５（６Ｈ、ｑ、Ｊ＝７．９Ｈｚ）、０．６０（３Ｈ、ｓ）、０．９３（９Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．９Ｈｚ）、０．９８（３Ｈ、ｓ）、０．９６−１．０４（３Ｈ）、１．０５（９Ｈ、ｓ）、１．２０（３Ｈ、ｓ）、２．４７（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ）、３．６４（３Ｈ、ｓ）、３．９７（１Ｈ、ｍ）、４．６３（１Ｈ、ｂｒｓ）、５．１１−５．２６（１Ｈ）、５．２６−５．４３（２Ｈ）、５．５３（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝５．６Ｈｚ）、７．３２−７．４５（６Ｈ）、７．６４（４Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）。
（２２Ｅ，２４Ｒ，２５Ｓ）−および（２２Ｅ，２４Ｓ，２５Ｒ）−３β−ｔｅｒｔ−ブチルジフェニル−シロキシ−２５−トリエチルシロキシ−１α−メトキシカルボニルオキシ−２６，２８−メチレンエルゴスタ−５，７，２２−トリエン１３ｂ。
１３ａについてと同様にして、１１ｂ（５７４ｍｇ、１．５６ｍｍｏｌ）を変換して白色のフォームとして１３ｂを５６９ｍｇ（４２．８％）得た。
¹Ｈ−ＮＭＲ δ（ｐｐｍ、５００ＭＨｚ）：０．５５（６Ｈ、ｑ、Ｊ＝７．９Ｈｚ）、０．５９（３Ｈ、ｓ）、０．９３（９Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．９Ｈｚ）、０．９８（３Ｈ、ｓ）、０．９６−１．０３（３Ｈ）、１．０５（９Ｈ、ｓ）、１．０８、１．０９（３Ｈ、２つのｓ）、２．４７（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ）、３．６４（３Ｈ、ｓ）、３．９６（１Ｈ、ｍ）、４．６３（１Ｈ、ｂｒｓ）、５．１０−５．２８（２Ｈ）、５．３１（１Ｈ、ｂｒｓ）、５．５３（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝５．４Ｈｚ）、７．３１−７．４７（６Ｈ）、７．６４（４Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．１Ｈｚ）。
（２２Ｅ，２４Ｒ，２５Ｒ）−および（２２Ｅ，２４Ｓ，２５Ｓ）−１α−メトキシカルボニルオキシ−２６，２８−メチレンエルゴスタ−５，７，２２−トリエン−３β，２５−ジオール１４ａ。
ＴＨＦ（１５ｍｌ）に含むようにした１３ａ（７１９ｍｇ、０．８４５ｍｍｏｌ）の溶液へ、テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオリド（１．０ＭをＴＨＦに含むようにした、２．５ｍｌ）を加え、この混合物を１．５時間周囲温度で攪拌した。この混合物へテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオリド（１．０ＭをＴＨＦに含むようにした、２．５ｍｌ）に２度加え、混合物を周囲温度で夜通し攪拌した。混合物を冷たいＮａＨＣＯ₃溶液に注ぎ、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。一緒にした有機層をＮａＣｌ溶液で洗浄してからＮａ₂ＳＯ₄で乾燥させた。濾過と濃縮により粗生成物０．９７ｇが得られ、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ₂ゲル３０ｇ、ｎ−ヘキサン中に含むようにしたＥｔＯＡｃ２０−５０％）で精製して白色の固体として１４ａを３７３ｍｇ（８８．５％）得た。
¹Ｈ−ＮＭＲ δ（ｐｐｍ、５００ＭＨｚ）：０．６４（３Ｈ、ｓ）、１．０１（３Ｈ、ｓ）、１．０５、１．０６（３Ｈ、２つのｄ、Ｊ＝５．８および６．１Ｈｚ）、１．２５（３Ｈ、ｓ）、３．７８（３Ｈ、ｓ）、４．０１（１Ｈ、ｍ）、４．８２（１Ｈ、ｂｒｓ）、５．２８−５．４８（３Ｈ）、５．６６（１Ｈ）。
（２２Ｅ，２４Ｒ，２５Ｓ）−および（２２Ｅ，２４Ｓ，２５Ｒ）−１α−メトキシカルボニルオキシ−２６，２８−メチレンエルゴスタ−５，７，２２−トリエン−３β，２５−ジオール１４ｂ。
１４ａについてと同様にして、１３ｂ（５６９ｍｇ、０．６６８ｍｍｏｌ）を変換して白色の固体として１４ｂを３００ｍｇ（９０．２％）得た。
¹Ｈ−ＮＭＲ δ（ｐｐｍ、５００ＭＨｚ）：０．６３（３Ｈ、ｓ）、１．０１（３Ｈ、ｓ）、１．０４、１．０５（３Ｈ、２つのｄ、Ｊ＝７．１Ｈｚ）、１．１３（３Ｈ、ｓ）、３．７８（３Ｈ、ｓ）、３．９９（１Ｈ、ｍ）、４．８２（１Ｈ、ｂｒｓ）、５．２５−５．３５（２Ｈ）、５．３６（１Ｈｚ）、５．６６（１Ｈ）。
（２２Ｅ，２４Ｒ，２５Ｒ）−および（２２Ｅ，２４Ｓ，２５Ｓ）−２６，２８−メチレン−９，１０−セコエルゴスタ−５，７，１０（１９），２２−テトラエン−１α、３β、２５−トリオール１５ａおよび１５ａ’。
ジエチルエーテル（１００ｍｌ）とベンゼン（２０ｍｌ）とからなる混合物中に含むようにした１４ａ（１００ｍｇ、０．２０１ｍｍｏｌ）の溶液に、氷浴中で、３０分間、バイコールフィルターを通じて中圧水銀灯を照射し、この際反応混合物に窒素を通気しながら行った。混合物は、減圧下で濃縮し、残分をベンゼン（２０ｍｌ）に溶解させ、この溶液を窒素の下で、周囲温度で、１６日間静置した。混合物を減圧下で濃縮し、残分を、６．３時間、窒素の下で、氷浴中で、ＭｅＯＨ（９ｍｌ）に含むようにした１ＮのＬｉＯＨ溶液で処理した。混合物を氷水に注いでからＥｔＯＡｃで抽出した。一緒にした有機層をＮａＣｌ溶液で洗浄してからＮａ₂ＳＯ₄で乾燥させた。濾過と濃縮をして、さらにクロマトグラフィー精製（ＳｉＯ₂ゲル５ｇ、ｎ−ヘキサン中に含むようにしたＥｔＯＡｃ５０−８０％）して１５ａと１５ａ’とのジアステレオマー混合物を２２．９ｍｇ得た。調整用ＨＰＬＣ［Ｚｏｒｂａｘ Ｐｒｏ− １０ ＳＩＬ（三井東圧）、２０ｍｍΦｘ２５０ｍｍ、ｎ−ヘキサンに含むようにした８０％ＥｔＯＡｃ］により１５ａを７．１ｍｇ（８．０％）（これはより速く溶離された）と１５ａ’を１２．９ｍｇ（１４．６％）（これはより遅く溶離された）を得た：１５ａ：ＵＶ（ＥｔＯＨ）：λｍａｘ２６２ｎｍ、λｍｉｎ２２８ｎｍ。
¹Ｈ−ＮＭＲ δ（ｐｐｍ、２７０ＭＨｚ）：０．５６（３Ｈ、ｓ）、１．０５（３Ｈ、ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ）、１．２４（３Ｈ、ｓ）、４．２３（１Ｈ、ｍ）、４．４３（１Ｈ、ｍ）、５．００（１Ｈ、ｂｒｓ）、５．３２（１Ｈ、ｂｒｓ）、５．２８−５．５０（２Ｈ）、６．０１（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．０Ｈｚ）、６．３８（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．０Ｈｚ）。
ＭＳ Ｍ／ｚ：４４０（Ｍ⁺）、４２２（ベースピーク）、４０４、３８６、２６９、２５１、１５５、１３５、１０５、９３、８１。
１５ａ’：ＵＶ（ＥｔＯＨ）：λｍａｘ２６１ｎｍ、λｍｉｎ２２７ｎｍ。
¹Ｈ−ＮＭＲ δ（ｐｐｍ、２７０ＭＨｚ）：０．５６（３Ｈ、ｓ）、１．０４（３Ｈ、ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ）、１．２４（３Ｈ、ｓ）、４．２３（１Ｈ、ｍ）、４．４３（１Ｈ、ｍ）、５．００（１Ｈ、ｂｒｓ）、５．２３−５．４８（２Ｈ）、５．３５（１Ｈ、ｂｒｓ）、６．０１（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．０Ｈｚ）、６．３８（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．０Ｈｚ）。
ＭＳ ｍ／ｚ：４４０（Ｍ⁺）、４２２（ベースピーク）、４０４、３８６、２６９、２５１、１５５、１３５、１０５、９３、８１。
（２２Ｅ，２４Ｒ，２５Ｓ）−および（２２Ｅ，２４Ｓ，２５Ｒ）−２６，２８−メチレン−９，１０−セコエルゴスタ−５，７，１０（１９），２２−テトラエン−１α、３β、２５−トリオール１５ｂおよび１５ｂ。
ジエチルエーテル（１００ｍｌ）とベンゼン（２０ｍｌ）とからなる混合物中に含むようにした１４ｂ（１００ｍｇ、０．２０１ｍｍｏｌ）の溶液に、氷浴中で、３０分間、バイコールフィルターを通じて中圧水銀灯を照射し、この際反応混合物に窒素を通気しながら行った。混合物は、減圧下で濃縮し、残分をベンゼン（２０ｍｌ）に溶解させ、この溶液を窒素の下で、周囲温度で、１６日間静置した。混合物を減圧下で濃縮し、残分を、６．３時間、窒素の下で、氷浴中で、ＭｅＯＨ（９ｍｌ）に含むようにした１ＮのＬｉＯＨ溶液で処理した。混合物を氷水に注いでからＥｔＯＡｃで抽出した。一緒にした有機層をＮａＣｌ溶液で洗浄してからＮａ₂ＳＯ₄で乾燥させた。濾過と濃縮をして、さらにクロマトグラフィー精製（ＳｉＯ₂ゲル５ｇ、ｎ−ヘキサン中に含むようにしたＥｔＯＡｃ５０−８０％）して１５ｂと１５ｂ’とのジアステレオマー混合物を２１．３ｍｇ得た。調整用ＨＰＬＣ［Ｚｏｒｂａｘ Ｐｒｏ− １０ ＳＩＬ（三井東圧）、５０ｍｍΦｘ２５０ｍｍ、ｎ−ヘキサンに含むようにした８０％ＥｔＯＡｃ］により１５ｂを６．３ｍｇ（７．１％）（これはより速く溶離された）と１５ｂ’を４．５ｍｇ（５．１％）（これはより遅く溶離された）を得た：１５ｂ：ＵＶ（ＥｔＯＨ）：λｍａｘ２６３ｎｍ、λｍｉｎ２２８ｎｍ。
¹Ｈ−ＮＭＲ δ（ｐｐｍ、２７０ＭＨｚ）：０．５６（３Ｈ、ｓ）、１．０３（３Ｈ、ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ）、１．１３（３Ｈ、ｓ）、４．２３（１Ｈ、ｍ）、４．４３（１Ｈ、ｍ）、５．００（１Ｈ、ｂｒｓ）、５．１４−５．４３（２Ｈ）、５．３２（１Ｈ、ｂｒｓ）、６．０１（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．０Ｈｚ）、６．３８（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．０Ｈｚ）。
ＭＳ ｍ／ｚ：４４０（Ｍ⁺）、４２２（ベースピーク）、４０４、３８６、２６９、２５１、１５５、１３５、１０５、９３、８１。
１５ｂ’：ＵＶ（ＥｔＯＨ）：λｍａｘ２６４ｎｍ、λｍｉｎ２２７ｎｍ。
¹Ｈ−ＮＭＲ δ（ｐｐｍ、２７０ＭＨｚ）：０．５６（３Ｈ、ｓ）、１．０３（３Ｈ、ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ）、１．１３（３Ｈ、ｓ）、４．２３（１Ｈ、ｍ）、４．４３（１Ｈ、ｍ）、５．００（１Ｈ、ｂｒｓ）、５．１０−５．４２（２Ｈ）、５．３２（１Ｈ、ｂｒｓ）、６．０１（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．０Ｈｚ）、６．３８（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．０Ｈｚ）。
ＭＳ ｍ／Ｚ：４４０（Ｍ⁺）、４２２（ベースピーク）、４０４、３８６、２６９、２５１、１５５、１３５、１０５、９３、８１。
生物学的活性
例２−カルシウム血症活性
Ｈｏｌｔｚｍａｎ Ｃｏｍｐａｎｙから得た離乳（Ｗｅａｎｌｉｎｇ）雄ラットに低カルシウム（０．０２％）、０．３％燐、ビタミンＤ−不足食事を３週間与えた。この後、動物は、ひどい低カルシウム血症（ｈｅｒｐｏｃａｌｃｅｍｉｃ）となった。５％エタノール９５％プロピレングリコールに溶解させた表１および２の示した投与量を含むおよそ１３μｌの溶液を１日に出すＡｌｚｅｔミニポンプをこれらの動物に埋め込んだ。７日後、ラットを殺し、十二指腸を使用し、逆腸管サック法（ｉｎｔｅｒｎａｌ ｓａｃ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ）（Ｍａｒｔｉｎ ＆ ＤｅＬｕｃａ、１９６７）により腸カルシウム輸送と漿液カルシウム（骨カルシウム流動）の測定を行なった。テストは、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₃標準に対して行い、表１および２に報告してある。

結果は、ＬＴ−ＩＩ２６，２８メチレン−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂化合物が、骨からのカルシウムの移動で１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₃よりも活性でないことを示している。骨カルシウム移動活性の量は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₃よりもかなり少ない。しかしながら、両２６，２８−メチレン−Ｄ₂化合物は、高度に有意的な腸管カルシウム輸送活性を有する。したがって腸カルシウム輸送に対する優先的な活性と骨の中の減ぜられたカルシウム移動活性とを示すことにより、ＬＴ化合物は、これらが、骨の喪失が大きな問題である病気例えば骨粗鬆症、骨軟化症および腎性骨異栄養症の治療に対する好ましい薬剤であろうことを示唆している。ＬＴ−１およびＵＣ化合物は、骨カルシウム移動に有効であり、よって、低い骨入れ代わり骨粗鬆症が見られる、すなわち、年齢に関係した骨粗鬆症が見られる場合に有用であろう。

治療の目的に対しては、本発明の新規化合物が、無害な溶剤の溶液としてまたは適当な溶剤または担体に含むようにしたエマルジョン、懸濁物または分散物としてまたは固体の担体と共にピル、錠剤またはカプセルとして本分野で公知の慣用の方法に従って薬学的用途に対して配合され得る。そのような配合物は、ほかの薬学的に受け入れられる無害な賦形剤たとえば安定剤、酸化防止剤、バインダー、着色剤、乳化剤または味緩和剤を含んでいてもよい。
前記化合物は、経口投与、腸管外投与、または経皮的投与をされ得る。化合物は、有利には、注射によりまたは適当な滅菌溶液の静脈内注入によりまたは液体薬または固体薬の形態で消化管を通じて、あるいはクリーム、軟膏、パッチあるいは経皮的適用に適当な同様なビヒクルの形態で適用される。化合物０．５μｇ−５０μｇ／日の投与量が治療の目的に適当であり、この投与量は、治療される病気、その程度および被験者の応答に応じて、本分野で理解されるように調節される。新規化合物は、作用の特異性を示すので、それぞれ、カルシウムの輸送の刺激だけが所望される時は、適当に単独で投与されてもよく、あるいはある程度の骨の無機質移動（カルシウム輸送刺激と共に）が有利と見られる場合は、格づけした（ｇｒａｄｅｄ）投与量のもう１種の活性なビタミンＤ化合物−−たとえば１α−ヒドロキシビタミンＤ₂またはＤ₃または１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₃−−と一緒に適当に投与され得る。
本発明を実施する種々の態様が、本発明とみなされる主題を特に指摘しかつ明確に請求する下記請求の範囲の範囲内として企図されている。

Claims (20)

1. 次式を有する化合物：
   

   
2. （２２Ｅ，２４Ｒ，２５Ｒ）−２６，２８−メチレン−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂。
3. （２２Ｅ，２４Ｓ，２５Ｓ）−２６，２８−メチレン−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂。
4. （２２Ｅ，２４Ｒ，２５Ｓ）−２６，２８−メチレン−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂。
5. （２２Ｅ，２４Ｓ，２５Ｒ）−２６，２８−メチレン−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂。
6. 下記式で表される化合物を含んでなる骨質量の維持または増加が望まれる骨代謝疾病の治療用ビタミンＤ剤。
   

   
7. 前記疾病が骨粗鬆症である請求項６記載のビタミンＤ剤。
8. 前記疾病が骨軟化症である請求項６記載のビタミンＤ剤。
9. 前記疾病が腎性骨異栄養症である請求項６記載のビタミンＤ剤。
10. 経口投与される請求項６記載のビタミンＤ剤。
11. 腸管外投与される請求項６記載のビタミンＤ剤。
12. 経皮的に投与される請求項６記載のビタミンＤ剤。
13. 化合物が１日当たり投与量０．５μｇ〜５０μｇで含有される請求項６記載のビタミンＤ剤。
14. 次式を有する化合物：
    

    

    ここで、Ｒ¹、Ｒ²およびＲ³は、水素またはヒドロキシ保護基である。
15. Ｒ¹とＲ³とがいずれも水素であり、Ｒ²がヒドロキシ保護基である請求項１４記載の化合物。
16. 請求項１の少なくとも１種の化合物を薬学的に受け入れられる賦形剤と共に含む骨粗鬆症の治療又は予防用の薬学的組成物。
17. （２２Ｅ，２４Ｒ，２５Ｒ）−２６，２８−メチレン−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂を０．５μｇ〜５０μｇの量で含む請求項１６記載の骨粗鬆症の治療又は予防用の薬学的組成物。
18. （２２Ｅ，２４Ｓ，２５Ｓ）−２６，２８−メチレン−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂を０．５μｇ〜５０μｇの量で含む請求項１６記載の骨粗鬆症の治療又は予防用の薬学的組成物。
19. （２２Ｅ，２４Ｒ，２５Ｓ）−２６，２８−メチレン−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂を０．５μｇ〜５０μｇの量で含む請求項１６記載の骨粗鬆症の治療又は予防用の薬学組成物。
20. （２２Ｅ，２４Ｓ，２５Ｒ）−２６，２８−メチレン−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₂を０．５μｇ〜５０μｇの量で含む請求項１６記載の骨粗鬆症の治療又は予防用の薬学組成物。