PT812205E - Peptidos e pseudo-peptidos antitromboticos de azacicloalqilalcacoilo - Google Patents

Description

DESCRIÇÃO “Péptidos e pseudo-péptidos antitrombóticos de azacicloalquilalcanoílo”

Antecedentes do invento

Este invento refere-se a compostos que possuem actividade antitrombótica. O invento refere-se mais especificamentc a péptidos e pseudo-péptidos de azacicloalquilalcanoílo que inibem a agregação de plaquetas e a formação de trombos em mamíferos, e que são úteis na prevenção e tratamento de trombose associada a estados de doença tais como enfarte do miocárdio, apoplexia, doença arterial periférica e coagulação intravascular disseminada. A hemostasc, a bioquímica de coagulação do sangue, é um fenómeno extremamente complexo pelo qual todo o sangue normal e todos os tecidos do corpo suspendem espontaneamente a hemorragia de vasos sanguíneos lesados. A hemostase eficaz requer a actividade combinada dc factores vasculares, de plaquetas e de plasma assim como de um mecanismo de controlo para prevenir a coagulação excessiva. Os defeitos, as deficiências ou os excessos de qualquer um destes componentes podem conduzir a consequências hemorrágicas ou trombóticas. A aderência, a dispersão e agregação de plaquetas em matrizes extracelulares são acontecimentos centrais na formação de trombos. Esses acontecimentos são mediados por uma família de glicoprotcínas aderentes, i.e., fibrinogénio, fibronectina, e factor von Willebrand. O fibrinogénio é um cofactor para a agregação de plaquetas, enquanto que a fibronectina auxilia ligações de plaquetas e reacções de dispersão, e o factor von Willebrand é importante na ligação e dispersão de plaquetas a/em matrizes subendoteliares. Localizaram-se os locais de ligação para fibrinogénio, fibronectina e factor von Willebrand no complexo de proteína e membrana de plaqueta conhecido como glicoproteína Ilb/IIIa.

As glicoproteínas aderentes, como o fibrinogénio, não se ligam a plaquetas normais em repouso. No entanto, quando uma plaqueta é activada com um agonista como a trombina ou a adenosina difosfato, a plaqueta altera a sua forma, tomando talvez acessível ao fibrinogénio o local de ligação de GPIIb/IIIa. Os compostos no âmbito do presente invento bloqueiam o receptor de fibrinogénio, inibindo assim a agregação de plaquetas e a subsequente formação de trombos e, quando administrados na forma de composições farmacêuticas compreendendo esses compostos, são úteis para a prevenção c tratamento dc *- *-

86 030

ΕΡ Ο 812 205 /PT 2 doenças trombogénicas, tais como o enfarte do miocárdio, a apoplexia, a doença arterial periférica e a coagulação intravascular disseminada. 2. Desenvolvimentos registados

Observou-se ser necessária a presença de Arg-Gly-Asp (RGD) em fibrinogénio, fibronectina o factor von Willebrand para a sua interacção com o receptor na superfície da célula (Ruoslahti E., Pierschbacher, Cell 1986, 44, 517-18). Duas outras sequências de aminoácidos parecem também participar na função de ligação de plaquetas do fibrinogénio, nomeadamente, a sequência Gly-Pro-Arg, e o dodecapéptido de sequência His-His-Leu-Gly-Gly-Ala-Lys-Gln-Ala-Gly-Asp-Val. Pequenos péptidos sintéticos contendo o RGD ou o dodecapéptido mostraram ligar-se ao receptor de GPIIb/IIIa de plaquetas e inibem por competição a ligação de fibrinogénio, fibronectina e factor von Willebrand, assim como inibem a agregação de plaquetas activadas (Plow, et al., Proc. Natl. Acad. Sei. USA 1985, 82, 8057-61; Ruggeri, et al., Proc. Natl. Acad. Sei. USA 1986, 5708-12; Ginsberg, et al., J. Biol. Chem. 1985,260,3931-36; e Gartner, et al, J. Biol. Chem. 1987, 260, 11,891-94).

Tjoeng, et al, patentes US N° 5037808 e N° 4879313, referem compostos de indolilo contendo porções de guanidinoalcanoíl- e guandinoalcenoíl-aspartilo como inibidores de agregação de plaquetas. A Patente US N° 4992463 (Tjoeng, et al.), publicada a 12 de Fevereiro de 1991, divulga genericamente que uma série de compostos miméticos de péptido de aril- e aralquil-guanidinoalquilo exibem actividade inibidora de agregação de plaquetas e divulga, especificamente, uma série de compostos miméticos de péptido de mono- e di-metoxifenilo e um composto mimético de péptido de bifenilalquilo. A Patente US N° 4857508 (Adams, et ai), publicada a 15 de Agosto de 1989, divulga genericamente que uma série de derivados de péptido de guandinoalquilo contendo substituintes terminais aralquilo exibem actividade inibidora de agregação de plaquetas e divulga especificamente uma série de derivados de O-metiltirosina, bifenilo, e naftilo contendo uma função amida terminal.

Haverstick, D. M. et al, em Blood 66 (4), 946-952 (1985), divulga que um número de péptidos sintéticos, incluindo arg-gly-asp-ser e gly-arg-gly-asp-ser conseguem inibir a agregação de plaquetas induzida por trombina.

86 030

ΕΡ 0 812205/PT 3

Plow, E. F. et al, em Proc. Natl. Acad. Sei. USA 79, 3711-3715 (1982), revela que o -tetrapéptido glicil-L-prolil-L-arginil-L-prolina inibe a ligação de fibrinogénio a plaquetas humanas. Λ publicação francesa N° 2608160, depositada a 15 de Dezembro de 1986, revela que os denvados de tetra-, penta- e hexa-péptidos contendo a sequência -arg-gly-asp- são úteis como antitrnmhóficos. A Patente US N° 4683291 (Zimmerman, et al), publicada a 28 de Julho de 1987, revela que uma serie dc péptidos, constituída por seis a quarenta aminoácidos, que contêm a sequência -arg-gly-asp- são inibidores de ligação de plaquetas. Λ publicação dc pedido europeu N° 0319506, publicada a 7 de Junho de 1989, revela que uma senc de derivados de tetra-, penta, e hexa-péptido contendo a sequência -arg-gly-asp- são inibidores de agregação de plaquetas.

Na patente US N° 5023233 referem-se análogos cíclicos de péptidos contendo a porção Gly-Asp como antagonistas do receptor de fibrinogénio. Péptidos e pseudo-péptidos contendo porções amino-, guanidino-, imidizaloílo e/ou porções amidinoalcanoílo e alcenoílo são referidos como agentes antitrombóticos na patente dos Estados Unidos da América N° 5332726, assim como na patente US N° 4952562, e no Pedido Internacional N° WO/91/04746, todas transmitidas ao mesmo cessionário, tal como o presente invento. Péptidos e pseudo-péptidos contendo porções amino-, guanidino-alquilo e alcenil-benzoílo, feniialcanoílo e fenilalcenoílo são referidas como agentes antitrombóticos na patente pendente US N° 5086069, e no Pedido Internacional N° PCT/US91/02471, depositado a 11 de Abril de 1991, publicado como Publicação Internacional N° WO 92/13117 a 29 de Outubro de 1992, transmitida ao mesmo cessionário, tal como o presente invento.

Referern-se os derivados de ácido alcanoíl- e alcaloíl-substituído-azacicloalquilformilaspártico e como inibidores de agregação de plaquetas na Patente US N° 5053392, depositada a 1 de Dezembro de 1989, e cedida ao mesmo requerente e possuindo o mesmo inventor que o presente invento.

86 030

ΕΡ 0 812 205/PT 4

Os derivados cíclicos de azacicloalquilcarbonilo substituídos em N de ácido aminoacilaspártico são referidos como antitrombóticos na Patente US N° 5064814, depositada a 5 de Abril de 1990, pelos mesmos inventores, e transmitida aos mesmos cessionários, como o presente invento. Os derivados de ácido azacicloalquilformilglicil-aspártico são referidos como antitrombóticos na patente US N° 5051405, depositada a 10 de Outubro de 1989, e transmitida ao mesmo cessionário, como o presente invento. O pedido de patente europeia 0479481, publicada a 8 de Abril de 1992, expõe aminoácidos de glicil-aspartil-azacicloalquilalcanoílo como antagonistas dos receptores de fibrinogénio. O pedido de patente europeia 0478362, publicada a 1 de Abril de 1992, expõe β-alaninas de azacicloalquilalcanoílpeptidilo como antagonistas do receptor de fibrinogénio. O presente invento refere-se a péptidos e a pseudo-péptidos com azacicloalquilalcanoílo que inibem a agregação de plaquetas e a formação de trombos.

Sumário do invento

Os compostos do presente invento são descritos pela Fórmula I

m O O O R· y N-

{CH2)^-C—N-(CH2]-C-NH-CH-C-'Z B CH2COOH

Fórmula I onde: A é -H, amidino, ou amidino substituído; B é alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilciclo-alquilalquilo, arilo, aralquilo, alquilarilo, ou alquilaralquilo; Zé

E F onde: E é -H ou forma, combinado com F, um anel azacicloalcano de 4, 5, 6 ou 7 membros, 86 030

ΕΡ 0 812 205/PT 5 F é a cadeia lateral do carbono α de um α-aminoácido que ocorre naturalmente, -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo, arilo substituído, aralquilo, aralquilo substituído, heterociclilo, heterocíclilo substituído, heterociclilalquilo, heterociclilalquilo substituído, ou forma, combinado com E, um anel azacicloalcano de 4, 5,6 ou 7 membros, G é alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo, arilo substituído, aralquilo, aralquilo substituído, heterociclilo, heterociclilo substituído, heterociclilalquilo, heterociclilalquilo substituído, OR1, ou NR*R2, onde R1 e R2 são independentemente -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo, aralquilo, alquilarilo, ou alquilaralquilo, e rcOou 1; R é H-, alquilo, arilo, ou aralquilo; m é de 1 a 5; n éde 0 a 6; e p é de 1 a 4; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. O presente invento refere-se também a composições farmacêuticas compreendendo esses compostos, e a métodos de prevenção ou tratamento de trombose num mamífero a necessitar dessa terapia, compreendendo a administração desses compostos e composições farmacêuticas. O presente invento caracteriza-se pela actividade antitrombótica marcada ou prolongada dos compostos de Fórmula I, acima, observada após a sua administração oral.

Descrição detalhada do invento

Tal como se utiliza acima, e ao longo da descrição deste invento, os termos que se seguem, a menos que se indique o contrário, devem ser entendidos como tendo os seguintes significados: ‘Amidino” significa um grupo

NH

II —C~NH2

86 030

EP 0 812 205 /PT 6 “Amidino substituído” significa um grupo amidino substituído em N num ou nos dois azotos por um ou mais grupos alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo ou aralquilo. “Alquilo” significa um grupo hidrocarboneto alifático saturado que pode ser linear ou ramificado e que possui cerca de 1 a cerca de 20 átomos de carbono na cadeia. Ramificado significa que um grupo alquilo inferior como o metilo, etilo ou propilo está ligado a uma cadeia linear alquilo. Os grupos alquilo lineares ou ramificados preferidos são os grupos “alquilo inferior” que são os grupos alquilo que possuem de 1 a cerca de 10 átomos de carbono. Os grupos alquilo inferior mais preferidos têm de 1 a cerca de 6 átomos de carbono. “Cicloalquilo” significa um grupo carbocíclico saturado possuindo um ou mais anéis e possuindo cerca de 3 a cerca de 10 átomos de carbono. Grupos cicloalquilo preferidos incluem ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo, ciclo-heptilo, e deca-hidronaftilo. “Cicloalquilalquilo” significa um grupo alquilo substituído com um grupo cicloalquilo. Grupos cicloalquilalquilo preferidos incluem ciclopentilmetilo, ciclo-hexilmetilo, ciclo-hexiletilo, deca-hidronaft-l-ilmetilo e deca-hidronaft-2-ilmetilo. “Alquilcicloalquilo” significa um grupo cicloalquilo substituído com um grupo alquilo. Exemplos de grupos alquilcicloalquilo incluem 1-, 2-, 3-, ou 4-metil ou etilciclo-hexilo. “Alquilcicloalquilalquilo” significa um grupo alquilo substituído por um grupo alquilcicloalquilo. Exemplos de grupos alquilcicloalquilo incluem 1-, 2-, 3-, ou 4-metil ou etilciclo-hexilmetilo ou 1-, 2-, 3-, ou 4-metil ou etilciclo-hexiletilo. “Azacicloalcano” significa um anel alifático saturado contendo um átomo de azoto. Azacicloalcanos preferidos incluem pirolidina e piperidina. “α-Aminoácido que ocorre naturalmente” significa glicina, alanina, valina, leucina, isoleucina, serina, treonina, fenilalanina, tirosina, triptofano, cisteína, metionina, prolina, hidroxiprolina, ácido aspártico, asparagina, glutamina, ácido glutâmico, histidina, arginina, omitina, e lisina. “Cadeia lateral de carbono α de um α-aminoácido que ocorre naturalmente” significa uma porção que substitui o carbono α de um α-aminoácido que ocorre naturalmente.

86 030

ΕΡ 0 812 205 / PT

Exemplos de cadeias laterais do carbono α de α-aminoácidos que ocorrem naturalmente incluem isopropilo, metilo, e carboximetilo para valina, alanina, e ácido aspártico, respectivamente. “Arilo” significa um grupo fenilo ou naftilo. “Arilo substituído” significa um grupo fenilo ou naftilo substituído por um ou mais substituintes do grupo arilo que podem ser o mesmo ou diferentes, onde “substituinte do grupo arilo” inclui alquilo, alcenilo, alcinilo, arilo, aralquilo, hidroxi, alcoxi, ariloxi, aralcoxi, hidroxialquilo, acilo, formilo, carboxi, alcenoílo, aroílo, halo, nitro, tri-halometilo, ciano, alcoxicarbonilo, ariloxicarbonilo, aralcoxicarbonilo, acilamino, aroílamino, carbamoílo, alquilcarbamoílo, dialquilcarbamoílo, arilcarbamoílo, aralquilcarbamoílo, alquilsulfonilo, alquilsulfinilo, arilsulfonilo, arilsulfinilo, aralquilsulfonilo, aralquilsulfinilo, ou -NRaRh onde Ra e Rh são independentemente hidrogénio, alquilo, arilo, ou aralquilo. “Aralquilo” significa um grupo alquilo substituído por um radical arilo. Grupos aralquilo preferidos incluem benzilo, naft-l-ilmetilo naft-2-ilmetilo, e fenetilo. “Aralquilo substituído” significa um grupo aralquilo substituído na porção arilo por um ou mais substituintes do grupo arilo. “Heterociclilo” significa um sistema de anel monocíclico ou multicíclico de 4 a cerca de 15 membros no qual um ou mais dos átomos no anel é outro elemento que não o carbono, por exemplo azoto, oxigénio, ou enxofre. Grupos heterociclilo preferidos incluem piridilo, pirimidilo, e pirrolidilo. “Heterociclilo substituído” significa um grupo heterociclilo substituído por um ou mais substituintes do grupo arilo. “Heterociclilalquilo” e “heterociclilalquilo substituído” significa um grupo alquilo que está substituído por um grupo heterociclilo e heterociclilo substituído, respectivamente.

Uma classe preferida de compostos do presente invento é descrita pela Fórmula I onde F é -H, alquilo, hidroximetilo, 1-hidroxietilo, mercaptometilo, 2-metiltioetilo, carboximetilo, 2-carboxietilo, 4-aminobutilo, 3-guanidinopropilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo, arilo substituído, aralquilo, aralquilo substituído, heterociclilo, heterociclilo substituído, heterociclilalquilo,

Fórmula II 86 030

ΕΡ 0 812205/PT heterociclilalquilo substituído, ou forma, combinado com E, um anel azacicloalcano de 4, 5, 6 ou 7 membros, desde que o heterociclilalquilo seja outro que não o indol-3-ilmetilo.

Uma classe mais preferida de compostos do presente invento é descrita pela classe preferida de compostos onde F é -H, alquilo, hidroximetilo, 1-hidroxietilo, mercaptometilo, 2- metiltioetilo, carboximetilo, 2-carboxietilo, 4-aminobutilo, 3-guanidinopropilo, cicloalquilo, ciclnnlqiiilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo, arilo substituído, aralquilo, aralquilo substituído, ou forma, combinado com E, um anel azacicloalcano de 4. 5. 6 ou 7 membros.

Uma classe ainda mais preferida de compostos do presente invento é descrita pela classe mais preferida dc compostos onde F é -H, alquilo, hidroximetilo, 1-hidroxietilo, mercaptometilo, 2-mcti Itioctilo, carboximetilo, 2-carboxietilo, 4-aminobutilo, 3- guanidinopropilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, ou fomia, combinado com E, um anel azacicloalcano de 4, 5, 6 ou 7 membros.

Uma classe mais preferida de compostos do presente invento é descrita pela ainda mais preferida classe de compostos onde B é alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, ou alquilcicloalquilalquilo.

Uma concretização especial do presente invento é descrita pela Fórmula Π

A onde: A é —H ou amidino, B é alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo, aralquilo, alquilariln, ou alquilaralquilo, J é -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo, arilo substituído, aralquilo, aralquilo substituído, L é OR1, ou NR^2, onde R1 e R2 são independentemente -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilo, arilo, aralquilo, alquilarilo, ou alquilaralquilo,

86 030

ΕΡ 0 812 205/PT 9 m é de 1 a 5, n é de 2 a 6, e p é 1 ou 2; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Uma concretização especial mais preferida do presente invento é descrita pelos compostos da concretização especial onde Aé-H, B é alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilciclo-alquilalquilo, J é -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, ou alquil-cicloalquilalquilo, m é 3, e n é 3 ou 4.

Uma concretização especialmente preferida do invento é descrita pelos compostos da concretização especial mais preferida onde Aé-H, B é alquilo, J é alquilo, cicloalquilo, ou cicloalquilalquilo, R1 e R2 são independentemente -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquílalquilo, m é 3, n é 3 ou 4, e p é 1.

Compostos representativos do presente invento incluem: N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]valina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-D-valina, N-[N-[N-(3-(piperidin-4-il)propanoíl)-N-etilglicil]aspartil]valina, N-[N-[N-(5-(piperidin-4-il)pentanoíl)-N-etilglicil]aspartil]valina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-L-a-ciclo-hexilglicina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-p-ciclo-hexilalarirna, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]norleucina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-L-a-(2,2-dimetil)prop-3-il- glicina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-L-p-deca-hidronaft-l-il- alanina,

86 030

ΕΡ0 812 205/PT 10 N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-L-a-(2-ciclo-hexiletil)- glicina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspaitilJíemlalanina, N - [ N - [ N -(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-L-p-naft-1 -ilalanina, N-(N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-L-p-naft-2-ilalanina,

Am ida cie N-[N-[N-(4-(pipendm-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-L-P-ciclo-hexil-alaninu, Êstcr dc etilo e N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-L-P-ciclo-hexii-alanina. 2- C iclo-hexil-N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]etilamÍna, N*[N-[N-(4-( piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-L-p-cis-deca-hidro- naft-2-ilalanma. 3- Adamam-l-ilpropil-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartato, Ácido N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-a-aminociclo- hexanocarboxílico. N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-p-ciclo-hexil-D-alanina, N-[N-[N-(4-(pípendin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartÍl]-p-deca-hidronaft-l-il- alanina,

Etilamida dc N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-P-ciclo-hexil-alanina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilgHcil]aspartil]-P-cíclo-octilalanina, N-[N-[N-(4-(pipcridin-4-iI)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-a-ciclo-hexilmetiletanol- amina,

Amida de N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etiiglicil]aspartil]-P-ciclo-hexil-metilalanina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-P-adamant-l-ilalanina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-P-(l,2,3,4)-tetra-hidro- naft-5-ilalanina, N'[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-P-(4-ciclo-hexil)ciclo- hexilalanina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-P-ciclo-heptilalanina,

Amida de N-[N-[N-(4-(pipcridin-4-il)butanoíl)-N-etilgIicil]aspartil]-p-ciclo-octil-alanina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-a-ciclo-hexilpropilglicina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-P-ciclo-octilmetilalanina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-P-ciclo-pentilalanina, e

86 030 ΕΡ 0 812 205 /PT 11

Éster etílico e N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-P-ciclo-hexilmetilalanina, e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

Os compostos do presente invento contêm centros assimétricos. Esses centros assimétricos podem estar independentemente na configuração R ou S. O presente invento compreende os estereoisómeros individuais e suas misturas.

Os compostos do presente invento podem ser úteis na forma da base ou ácido livres ou na forma de um seu sal farmaceuticamente aceitável. Todas as formas estão no âmbito do invento.

Quando os compostos do presente invento estão substituídos com uma porção básica, podem formar-se sais de adição de ácido e são simplesmente uma forma mais conveniente para utilizar; e na prática, a utilização da forma salina é inerentemente equivalente ao uso da forma de base livre. Os ácidos que se podem usar para preparar sais de adição de ácido incluem preferencialmente aqueles que produzem, quando combinados com a base livre, sais farmaceuticamente aceitáveis, ou seja, sais cujos aniões são não tóxicos para o organismo animal em doses farmacêuticas dos sais, de forma a que as propriedades benéficas antitrombóticas inerentes na base livre não sejam viciadas pelos efeitos secundários imputados aos aniões. Embora se prefiram sais farmaceuticamente aceitáveis dos ditos compostos básicos, todos os sais de adição de ácido são úteis como fontes da forma de base livre, mesmo se o sal particular, per se, for desejado apenas como um produto intermediário como, por exemplo, quando se fonna o sal apenas com o objectivo de purificar, e identificar, ou quando este é utilizado como intermediário na preparação de um sal farmaceuticamente aceitável por procedimentos de permuta iónica. Sais farmaceuticamente aceitáveis no âmbito do invento são aqueles que derivam dos seguintes ácidos: ácidos minerais tais como o ácido clorídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico e ácido sulfãmico; e ácidos orgânicos tais como ácido acético, ácido cítrico, ácido láctico, ácido tartárico, ácido malónico, ácido metanossulfónico, ácido etanossulfónico, ácido benzenossulfónico, ácido p-toluenossulfónico, ácido ciclo-hexilsulfãmico, ácido quínico, e outros semelhantes. Os sais de adição de ácido correspondentes compreendem os seguintes: cloridrato, sulfato, fosfato, sulfamato, acetato, citrato, lactato, tartarato, malonato, metanossulfonato, etanossulfonato, benzenossulfonato, p-toluenossulfonato, ciclo-hexilsulfamato e quinato, respectivamente.

Os sais de adição de ácido dos compostos deste invento são preparados dissolvendo a base livre em solução aquosa ou aquoso-álcoolica, ou em outros solventes adequados, contendo o ácido adequado e isolando o sal por evaporação da solução, ou fazendo reagii a

86 030

ΕΡ 0 812205 /PT 12 base livre e o ácido num solvente orgânico, caso em que o sal se separa directamente ou se pode obter concentrando a solução.

Quando o composto do presente invento está substituído com uma porção acídica, podem formar-se sais de adição de base e são simplesmente uma forma mais conveniente para utilizar; e na prática, a utilização da forma salina é inerentemente equivalente ao uso da forma de ácido livre. As bases que se podem usar para preparar os sais de adição de base incluem preferencialmente aquelas que produzem, quando combinadas com o ácido livre, sais farmaceuticamcnte aceitáveis, ou seja, sais cujos catiões são não tóxicos para o organismo animal em doses farmacêuticas dos sais, de forma a que as propriedades benéficas antitrombóticas inerentes no ácido livre não sejam viciadas pelos efeitos secundários imputados aos catiões. Sais farmaceuticamente aceitáveis no âmbito do invento são os que derivam das seguintes bases: hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, hidróxido de cálcio, hidróxido de alumínio, hidróxido de lítio, hidróxido de magnésio, hidróxido de zinco, amónia, etilenodiamina, N-metil-glucamina, lisina, arginina, omitina, colina, Ν,Ν’-dibenziletilenodiamina, cloroprocaína, dietanolamina, procaína, N-benzilfenetilamina, dieti lamina, piperazina, írâ(hidroximetil)aminometano, hidróxido de tetrametilamónio, e outras semelhantes.

Sais metálicos dos compostos do presente invento podem ser obtidos promovendo o contacto de um hidróxido, carbonato ou composto reactivo semelhante do metal escolhido num solvente aquoso, com a forma de ácido livre do composto. O solvente aquoso utilizado pode ser água ou pode ser uma mistura de água com um solvente orgânico, de preferência um álcool como o metanol ou o etanol, uma cetona como a acetona, um éter alifático como o tetra-hidrofurano, ou um éster como o acetato de etilo. Essas reacções são normalmente conduzidas à temperatura ambiente mas, se desejado, podem ser conduzidas com aquecimento.

Sais de amina dos compostos do presente invento podem ser obtidas promovendo o contacto de uma amina num solvente aquoso com a forma de ácido livre do composto. Solventes aquosos adequados incluem água e misturas de água com álcoois como o metanol ou etanol, éteres como o tetra-hidrofurano, nitrilos como o acetonitrilo, ou cetonas como a acetona. Sais de aminoácidos podem ser preparados de modo semelhante.

Os compostos deste invento podem ser preparados em conformidade com as sequências reaccionais descritas abaixo, ou podem ser preparados pelos métodos conhecidos na arte. Os reagentes usados na preparação dos compostos deste invento são conhecidos ou

86 030 ΕΡ 0 812 205 /PT 13

estão comercialmente disponíveis, ou podem ser preparados por métodos conhecidos ou por esquemas específicos de reacção aqui descritos.

Os compostos do presente invento podem ser facilmente preparados por procedimentos padrão de síntese de péptidos em fase sólida ou em fase de solução usando reagentes e/ou intermediários facilmente disponíveis nas companhias de fornecimento de químicos como Aldrich ou Sigma, (H. Paulsen, G. Merz, V. Weichart, “Solid-Phase Synthesis of O-Glycopeptide Sequences”, Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 27 (1988); H. Mergler, R. Tanner, J. Gosteli, e P. Grogg, “Peptide Synthesis by a Combination of Solid-Phase and Solution Methods I: A New Very Acid-Labile Anchor Group for Solid-Phase Synthesis of Fully Protected Fragments'\ Tetrahedron Letters 29, 4005 (1988); Merrifield, R.B., “Solid Phase Peptide Synthesis after 25 Years: The Design and Synthesis of Antagonisls of Glucagon”, Makromol. Chem. Macromol. Symp. 19, 31 (1988)).

Um método preferido de preparação de compostos do presente invento é pelo método em fase de solução representada no Esquema I, abaixo.

Esquema I ligação

•G‘ ch2-c-op2 f H O

G' ch2-c-op2

* II

O

O P.-NH-CH-C-OH + HN—-CH CH,-C-OP2 E' F

1) ligação ch2-c- ii O O E II I -NH-CH-C—N·— CH2-C-OP2 f II O

O II

2) desprotecção

A' 1) ligação 2) desprotecção

A

onde A, B, E, F, G, R, m, n, p, e r são como se definiu anteriormente. A’, E’, F\ G’ e R’ são A, B, E, F, G, e R, respectivamente, ou são os seus análogos protegidos, ou seus substituintes percursores; e

Pi, P2, e P3 são grupos protectores de aminoácidos.

Geralmente, os compostos do presente invento ficam disponíveis agrupando inicialmente n aminoácido adequado ou outro percursor do grupo Z adequado, onde Z se define acima, que contem uma amina primária ou secundária livre à porção ácido carboxílico livre dc um derivado de ácido aspártico protegido.

Os grupos funcionais de ácido aspártico ou quaisquer gmpos funcionais do percursor de grupo Z que não sejam para acoplar são protegidos, quando necessário, por grupos de impedimento para prevenir a reacção cruzada durante o procedimento de acoplamento, como 0 são os derivados dc aminoácidos e derivados de ácido azacicloalquilalcanóico usados em passos de síntese subsequentes. Esses grupos de impedimento incluem N-a-í-butiloxi-carbonilo (BOC), benziloxicarbonilo (CBZ), benzilo, metilo, í-butilo, 9-fluorenil-metiloxicarbonilo (FMOC), 2-(trimetilsilil)etilo, e 4-metoxi-2,3,6-trimetilbenzenossulfonilo.

Um derivado protegido de ácido aspártico preferido é 0 éster β-benzílico do ácido BOC-aspártico. 0 acoplamento é efectuado por métodos conhecidos na arte. Um método preferido para efectuar o acoplamento é combinando a amina e o ácido carboxílico num solvente orgânico aprótico adequado, por exemplo cloreto de metileno ou dimetilformamida (DMF), na presença de agentes de acoplamento adequados. Um agente de acoplamento adequado é 0 cloroformato de isopropilo na presença de N-metilpiperidina. Um outro agente de acoplamento preferido é o cloridrato de l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodi-imida (EDC) na presença de 1 -hidroxibenzotriazolo (HOBT) e trietilamina. Um ainda outro agente de acoplamento preferido é cloreto de Z>w(2-oxo-3-oxazolidinil)-fosfónico (BOP-C1) na presença de trietilamina. O produto protegido resultante é selectivamente desprotegido por métodos conhecidos para dar a amina de N-terminal livre da porção ácido aspártico. Um método preferido para remover o grupo BOC é o tratamento com trifluoroacético num solvente orgânico aprótico, por exemplo, cloreto de metileno. O produto desprotegido resultante é então acoplado com o derivado de glicina ou β-alanina com 0 N devidamente protegido e substituída em N possuindo um grupo carboxilo livre. Desprotege-se então o N do produto resultante. Depois acopla-se a amina livre

86 030

ΕΡ 0 812 205/PT 15 resultante com o ácido azacicloalquilalcanóico protegido adequado e efectua-se a desprotecção deste produto por métodos conhecidos para produzir o produto final.

Num outro método preferido, os compostos do presente invento podem ser preparados por métodos de fase sólida bem conhecidos na arte. No método sólido, o resíduo C-terminal liga-se na porção carboxilo a uma resina insolúvel, o resíduo pode ligar-se por exemplo como um éster dc resina e álcool jo-alcoxibenzilo. De modo semelhante ao método em fase de solução, adiciona-se o aminoácido protegido, ou outros resíduos, um de cada vez, até que se tenha construído a sequência total na resina. Efectua-se então a desprotecção do composto e a sua libertação da resina, por métodos padrão, para produzir o composto final.

Durante a preparação de compostos do presente invento, ou intermediários nessa, pode ser também desejável ou necessário prevenir a reacção cruzada entre outros substituintes quimicamente activos que não sejam os presentes em aminoácidos que ocorrem naturalmentc ou noutros. Os substituintes podem ser protegidos por grupos de impedimento padrão que podem depois ser removidos ou mantidos, conforme for necessário, por métodos conhecidos, para proporcionar os produtos ou intermediários desejados (ver, por exemplo, Green, “Protcctivc Cmmps in Organic Synthesis”, Wiley, New York, 1981). Pode também ser necessária ou desejável a protecção ou desprotecção selectiva para permitir a conversão ou remoção de substituintes existentes, ou para permitir posterior reacção para proporcionar o produto final desejado. O invento é ainda explicado pelos exemplos ilustrativos que se seguem. Nos exemplos seguintes, a menos que se indique algo em contrário, os α-aminoácidos que têm a possibilidade de ter carbonos α quirais estão na configuração L. A menos que se indique o contrário, os dados da análise por espectrometria de massa registados são de bombardeamento atómico rápido de baixa resolução efectuada num VG 70SE com os valores “calculados” sendo (M+H)+. Os dados espectrais de ressonância magnética nuclear são obtidos num Bucker ACF 300, em D2O. A cromatografia instantânea é efectuada em sílica gel. A cromatografia líquida de alto rendimento (HPLC) é efectuada numa coluna de fase inversa C-18 de 8μ, Dynamax 60 Á. 16 86 030

ΕΡ 0 812 205 /PT

Exemplo 1 N-rN-rN-(4-(piperidin-4-iDbutanoílVN-etilglicil1aspartill-B-ciclo-hexilalanina

A. Dissolve-se β-ciclo-hexilalanina (1,12 g) em metanol (50 ml) e borbulha-se cloreto de hidrogénio gás através da solução durante cerca de 15 minutos. Evapora-se a solução in vacuo e separa-se azeotropicamente o tolueno do resíduo para originar o éster de β-ciclohexil-L-alanina e metilo na forma de sal cloridrato. B. Dissolve-se o éster de ácido BOC-L-aspártico e β-benzilo (1,27 g) em cloreto de metileno (20 ml). Arrefece-se a solução até 0°C e adiciona-se N-metilpiperidina (0,48 ml) seguida de cloroformato de isopropilo (3,94 ml). Agita-se a solução a 0°C durante cerca de dois minutos e adiciona-se cloridrato de éster de β-ciclo-hexil-L-alanina e metilo (0,88g). Deixa-se a solução aquecer até à temperatura ambiente e agita-se durante a noite. Evapora-se a solução in vacuo e submete-se o resíduo a partição por acetato de etilo (200 ml) e por ácido IN clorídrico (HC1) (50 ml). Lava-se a camada orgânica com HC1 IN, solução de bicarbonato de sódio saturado, salmoura, seca-se em sulfato de magnésio, filtra-se e evapora-se in vacuo para produzir éster metílico de N-[BOC-L-aspartil(éster β^εηζίϋα^Ι-β-αοΙο-ΙιεχΐΙ-Ε^Ιηηϊη^ C. Dissolve-se o éster metílico de N-[BOC-L-aspartil(éster de β-benzilo)]-β-αο1ο-hexil-L-alanina (2,01 g) em cloreto de metileno (15 ml). Arrefece-se a solução até 0°C e adiciona-se ácido trifluoroacético (5 ml) durante um período de cerca de 1 minuto. Agita-se a solução a 0°C durante duas horas, evapora-se in vacuo e recolhe-se o resíduo em acetato de etilo e lava-se a solução orgânica com solução saturada de bicarbonato de sódio até que as lavagens sejam básicas. Lavou-se a solução orgânica com salmoura, secou-se em sulfato de magnésio, filtrou-se e evaporou-se in vacuo para produzir éster metílico de L-aspartil(éster de β^εηζΐΐο^-β-οίοΐο^βχίΐ-ί^ίβηίη^ D. Usando essencialmente o procedimento de acoplamento do Exemplo 1B, acima, seguido essencialmente pelo procedimento de desprotecção do Exemplo 1C, acima, preparou-se éster metílico de N-etilglicil-L-aspartil(éster de β4>βηζΐ1ο)]-Ε-β-αο1ο- 17 86 030

ΕΡ 0 812 205/PT hexil-L-alanina a partir de éster metílico de L-aspartil(éster de P-benzilo)]-P-ciclo-hexil-L-alanina e de N-BOC-N-etilglicina. Γ. Combinou-se ácido 4-piridinoacético (10 g) e óxido de platina (1,0 g) em ácido acético (100 ml) e agitou-se a mistura em atmosfera de hidrogénio a 50 psi durante cerca de 18 horas. Filtrou-se a mistura e evaporou-se a solução in vacuo e separou-se a/eotropicamente o tolueno do resíduo para produzir ácido 2-(piperidin-4-il)acético. 1·'. Dissolvc-se ácido 2-(piperidin-4-il)acético (11,6 g) em solução aquosa IN de hidróxido de sódio (200 ml) e arrefece-se a solução até 0°C. Adiciona-se gota a gota uma solução de dicarbonato de di-r-butilo (18,0 g) em tetra-hidrofurano (THF) (100 ml) e deixa-se a mistura aquecer até à temperatura ambiente e agitou-se durante cerca de 18 horas. Evapora-sc a mistura in vacuo para remover o THF e recolhe-se o resíduo em água e lava-se com acetato de ctilo. Adiciona-se acetato de etilo à camada aquosa e acidifica-se a mistura com HC1 IN. Separa-se a camada orgânica e extracta-se a camada aquosa com acetato de etilo. Lavam-se as porções orgânicas combinadas com água, salmoura, secam-se em sulfato de magnésio, filtram-se, e evaporam-se in vacuo para produzir ácido N-BOC-2-(pipcridin-4-iI)acctico. G. Dissolve-sc ácido N-BOC-2-(piperidin-4-il)acético (15,8 g) em THF (150 ml) e adiciona-se gota a gota borano/THF 1 M (70 ml). Agita-se a solução à temperatura ambiente durante cerca de 20 horas e adiciona-se gota a gota solução 1 N de hidróxido de sódio (200 ml). Evapora-sc o THF in vacuo e extracta-se o resíduo aquoso com acetato de etilo. Lava-se a solução de acetato de etilo com água, seca-se em sulfato de sódio, filtra-se, e evapora-se in vacuo para produzir N-BOC-2-(piperidin-4-il)etanol. H. Arrefece-se até -78°C uma solução de cloreto de oxalilo (11,8 g) em cloreto de metileno (180 ml) c adiciona-se gota a gota sulfóxido de dimetilo (DMSO) (8,9ml). Agita-se a solução a -78°C durante cerca de 3 minutos e adiciona-se uma solução de N-BOC-2-(piperidin-4-il)etanol (14,3 g) em cloreto de metileno (250 ml) durante um período de cerca de 10 minutos. Agita-se a solução durante cerca de 1 hora e adiciona-se N-metilmorfolina (21,6 g) durante um período de cerca de 15 minutos. Deixa-se a solução aquecer ate à temperatura ambiente e, após cerca de 30 minutos, adiciona-se metil(trifenil-fosforanilideno)acetato (68,6 g). Agita-se a solução à temperatura ambiente durante cerca de 18 horas, evapora-se in vacuo e recolhe-se o resíduo em acetato de etilo. Lava-se a solução de acetato de etilo com água, HC1 a 5%, solução de hipoclorito de sódio a 5%, água, salmoura, seca-se em sulfato de sódio, filtra-se e evapora-se in vacuo para produzir 4-(N-BOC-pipendm-4-il)/ra«5-crotonato de metilo.

I. Dissolve-se 4-(N-BOC-piperidin-4-il)íra«s-crotonato de metilo (11,5 g) em metanol (200 ml) e adiciona-se paládio/carbono a 10% (3 g) e agita-se a mistura em atmosfera de hidrogénio a 50 psi durante 18 horas. Filtra-se a mistura, adiciona-se novo catalisador à solução, e repete-se a hidrogenação. Filtra-se a mistura e evapora-se in vacuo para produzir 4-(N-BOC-piperidin-4-il)butirato de metilo J. Adiciona-se 4-(N-BOC-piperidin-4-il)butirato de metilo (10,1 g) a uma mistura IN de hidróxido de sódio aquoso (lOOml) e metanol (200 ml) e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante cerca de 18 horas. Evapora-se a mistura in vacuo, dilui-se com água, e lava-se com éter. Acidifica-se a porção aquosa com HC1 a 5%, extracta-se com acetato de etilo e lava-se a solução orgânica com água, salmoura, seca-se em sulfato de sódio, filtra-se, e evapora-se in vacuo para produzir ácido 4-(N-BOC-piperidin-4-il)butírico. K. Arrefece-se até 0°C uma solução de ácido 4-(N-BOC-piperidin-4-il)butírico (0,91 g) em cloreto de metileno (50 ml) e adiciona-se cloreto de òis(2-oxo-3-oxazohdinil)fosfínico (BOP-C1) (0,86 g) e trietilamina (0,47 ml). Agita-se a solução a 0°C durante cerca de 10 minutos e adiciona-se éster metílico de N-etilglicil-L-aspartií(éster de p-benzilo)]-L-P-ciclo-hexil-L-alanina (1,52 g) num mínimo de cloreto de metileno seguido da adição gota a gota de trietilamina (0,47 ml) em cloreto de metileno durante um período de cerca de 15 minutos. Agitou-se a mistura a 0°C durante cerca de 1 hora, e à temperatura ambiente durante cerca de 18 horas. Evapora-se a mistura in vacuo e recolhe-se o resíduo em acetato de etilo. Lava-se a solução orgânica com HC1 IN, solução saturada de bicarbonato de sódio, salmoura, seca-se em sulfato de magnésio, filtra-se, evapora-se in vacuo e purifica-se o resíduo por cromatografia instantânea, eluindo com acetato de etilo a 60% em hexanos, para produzir éster metílico de N-[N-[N-(4-(N-BOC-piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil(éster P-benzílico)]-P-ciclo-hexilalanina. L. Dissolve-se éster metílico de N-[N-[N-(4-(N-BOC-piperidin-4-il)butanoíl)-N-etil-glicil]aspartil(éster de p-benzilo)]-P-ciclo-hexilalanina (1,79 g) em metanol (40 ml) e adiciona-se paládio/carbono a 10% (0,25 g). Agita-se a mistura em atmosfera de hidrogénio a 50 psi durante cerca de 18 horas. Filtra-se a mistura através de uma almofada de Celite e evapora-se o filtrado in vacuo para produzir éster metílico de N-[N-[N-(4-(N-BOC-piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-p-ciclo-hexilalanina. Dissolve-se o éster em metanol (20 ml) e adiciona-se solução aquosa IN de hidróxido de sódio (10 ml). Agita-se a mistura à temperatura ambiente durante cerca de 4 horas, dilui-se com água (25 ml), e acidifica-se até pH 2 com HC1 IN. Extracta-se a mistura com acetato de etilo (3x100 ml) e seca-se a solução de acetato de etilo em sulfato de magnésio, filtra-se e

86 030

ΕΡ Ο 812 205/PT 19 evapora-se in vacuo para produzir N-[N-[N-(4-(N-BOC-piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-P-ciclo-hexilalanina. M. Dissolve-se N-[N-[N-(4-(N-BOC-piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-β-ciclo-hexilalanina (1,39 g) em cloreto de metileno (15 ml) e arrefece-se a solução até 0°C. Adiciona-se ácido trifluoroacético (5 ml) e agita-se a solução a 0°C durante cerca de 2,5 horas. Evapora-se a solução in vacuo e dilui-se o resíduo com água, congela-se, e liofiliza-se. Purifica-se o resíduo por HPLC de fase inversa, eluindo com um gradiente de 40% a 80% de metanol em água, contendo 0,1% de trifluoroacético. Combinam-se as fracções adequadas, e liofilizam-se para produzir N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-P-ciclo-hexilalanina na forma do sal trifluoroacetato. E.M., Calculado: 525, Encontrado: 525; RMN, δ = 4,58-4,48 (m, 1H), 4,35-4,22 (m, 1H), 3,88 (s, 2H), 3,32 (q, 2H), 3,28-3,10 (m, 2H), 2,88-2,60 (m, 4H), 2,33 (t, 2H), 1,85-1,70 (m, 2H), 1,62-1,35 (m, 10H), 1,30-1,06 (m, 5H), 1,04-0,65 (m, 8H).

Usando essencialmente os procedimentos do Exemplo 1 acima, preparam-se os seguintes compostos a partir dos materiais reagentes adequados.

Exemplo 2 Ν-ΓΝ- ΓΝ-14-f p i neri din-4-i 1 Ibutanoí l)-N-etilgli ci 1 lasnartill valina

E.M., Calculado: 471, Encontrado: 471; RMN, δ = 4,15-4,05 (m, 2H), 3,90 (s, 2H), 3,30 (q, 2H), 3,30-3,15 (m, 2H), 2,90-2,60 (m, 4H), 2,33 (t, 2H), 2,05 (q, 1H), 1,85-1,72 (m, 2H), 1,55-1,35 (m, 3H), 1,30-1,08 (m, 4H), 1,02 (t, 3H), 0,70 (d, 6H).

86 030

ΕΡ 0 812 205/PT 20

Exemplo 3 N-rN-ÍN-(4-piperidin-4-ilVN-etilglicinaspartiHfeniIalanina

E.M., Calculado: 519, Encontrado: 519; RMN, δ = 7,20-6,95 (m, 5H), 4,55-4,35 (m, 2H), 3,73 (s, 2H), 3,30-2,40 (m, 10H), 2,25 (t, 2H), 1,75-1,60 (m, 2H), 1,45-1,25 (m, 3H), 1,20-0,97 (m, 4H), 0,92 (t, 3H).

Exemplo 4 N-lN-rN-(4-(pipendin-4-il)butanoílVN-etilglicillaspartill-D-valma

HN

H li

, N I H COOH i^cooh I H ' E.M., Calculado: 471, Encontrado: 471; RMN, δ = 4,10-3,98 (m, 2H), 3,85 (s, 2H), 3,28 (q, 2H), 3,23-3,10 (m, 2H), 2,82-2,58 (m, 4H), 2,28 (t, 2H), 2,02 (q, 1H), 1,80-1,65 (m, 2H), 1,50-1,28 (m, 3H), 1,25-1,00 (m, 4H), 0,95 (t, 3H), 0,78-0,65 (m, 6H).

Exemplo 5 N-rN-íN-('4-(piperidin-4-il')butanoíl-N-etilglicillaspartill-L-a-f2,2-dimeti0prop-3-il- glicina

HN cooh

COOH

86 030

ΕΡ 0 812 205 /PT 21 Ε.Μ., Calculado: 499, Encontrado: 499; RMN, δ = 4,63-4,55 (m, 1H), 4,30-4,20 (m, 1H), 3,88 (s, 2H), 3,33 (q, 2H), 3.30- 3,15 (m, 2H), 2,88-2,60 (m, 4H), 2,35 (t, 2H), 1,85-1,75 (m, 2H), 1,73-1,35 (m, 5H), 1.30- 1,08 (m, 4H), 1,03 (t, 3H), 0,78 (s, 9H).

Exemplo 6 N-fN-[N-t4-íniperídin-4-illbutanoilVN-etilglicillaspartillnorleucina

E.M., Calculado: 485, Encontrado: 485; RMN, δ = 4,58-4,50 (m, 1H), 4,20-4,10 (m, 1H), 3,85 (s, 2H), 3,32 (q, 2H), 3,25-3,10 (m, 2H), 2,85-2,55 (m, 4H), 2,30 (t, 2H), 1,82-1,50 (m, 4H), 1,50-1,30 (m, 3H), 1,28-1,05 (m, 8H), 0,98 (t, 3H), 0,75-0,60 (m, 3H).

Exemplo 7 N-rN-ÍN-(4-('piperídin-4-illbutanoíl)-N-etilglicinaspartill-L-B-naft-1-i1alaniua

E.M., Calculado: 569, Encontrado: 569; RMN, δ = 8,00-7,15 (m, 7H), 4,60-4,45 (m, 2H), 3,71 (s, 2H), 3,65-3,50 (m, 2H), 3,40-2,98 (m, 4H), 2,70-2,42 (m, 411), 2,21 (ΐ, 2H), 1,70 1,45 (m, 2H), 1,40-0,96 (m, 7H), 0,92 (t, 3H).

ΕΡ Ο 812 205 /PT 22 Λ

Exemplo 8 N-rN-ÍN-í4-/piperidin-4-ir)butanoíl')-N-etilglicillaspartill-L-P-naft-2-ilalanina

ΗΝ Ε.Μ., Calculado: 569, Encontrado: 569; RMN, d - 7,65-7,03 (ηι, 7H), 4,60-4,45 (m, 2H), 3,41 (s, 2H), 3,20-3,01 (m, 3H), 3,00-2,71 (m, 311). 2.6S-2.40 (m, 4H), 1,98 (t, 2H), 1,68-1,42 (m, 3H), 1,25-0,85 (m, 6H), 0,71 (t, 3H).

Exemplo 9 Ν-ΓΝ-1Ν-13-( nipcridin-4-i 1 ipropanoíO-N-etilglicillaspartilIvalina

E.M., Calculado: 457, Encontrado: 457; RMN, δ = 4,62 (m, 2H), 3,90 (s, 2H), 3,33 (m, 4H), 2,66 (m, 4H), 2,37 (t, 2H), 2,16 (m, 1H), 2,03 (m, 1H), 1,78 (m, 2H), 1,44 (m, 2H), 1,20 (m, 2H), 1,00 (m, 3H), 0,78 (d, 6H).

Exemplo 10 N-rN-lN-f5-ípiperidin-4-il)pentanoír)-N-etilglicillaspartillvalina

E.M., Calculado: 485, Encontrado: 485;

86 030

ΕΡ 0 812 205 /PT 23 RMN, δ = 4,20-4,05 (m, 2H), 3,92 (s, 2H), 3,33 (m, 2H), 3,28-3,15 (m, 2H), 2,90-2,61 (m, 4H), 2,34 (t, 2H), 2,06 (m, 1H), 1,85-1,70 (m, 2H), 1,55-1,32 (m, 3H), 1,30-1,12 (m, 6H), 1,06 (t, 3H), 0,81 (d, 6H).

Exemplo 11 Éster etílico de N-rN-lN-(4-(piperidin-4-illbutanoílVN-etilglicinaspartill-L-p-ciclo- hcxilalanina

A. Dissolve-se β-ciclo-hexilalanina (1,5 g) em etanol absoluto (75 ml) e arrefece-se a solução até 0°C. Adiciona-se gota a gota cloreto de tionilo (1,1 ml) durante um período de 10-15 minutos, deixa-se aquecer a solução até à temperatura ambiente, e depois agita-se à temperatura ambiente durante cerca de 18 horas. Evapora-se a mistura de reacção in vacuo, separa-se azeotropicamente o tolueno do resíduo duas vezes, recolhe-se o resíduo em acetato de etilo. Lava-se a solução de acetato de etilo com água, hidróxido de sódio IN, água, salmoura, seca-se em sulfato de sódio, filtra-se, e evapora-se in vacuo para produzir éster de etilo e β-ciclo-hexilalanina. B. Usando essencialmente os procedimentos dos Exemplos de 1B a 1M (eliminando a hidrólise de hidróxido de sódio aquoso do passo 1L) origina-se o produto desejado. E.M., Calculado: 553, Encontrado: 553; RMN, δ = 4,4 (1H, m); 4,1 (4H, q); 4,0 (2H, d); 3,2-3,5 (5H, m); 2,7-3,0 (5H, m); 2,4 (2H, t); 2,2 (1H, m); 1,9 (2H, d); 1,4-1,7 (7H, m); 0,7-1,4 (18H, m). 24 86 030

ΕΡ0 812 205/PT

Exemplo 12

Amida de N-rN-fN-f4-/piperídin-4-il)butanoílVN-etilglicillaspartill-L-p-ciclo-hexil-alanina

Λ Dissolvc-sc em THF (100 ml) N-BOC-P-ciclo-hexilalanina (2,0 g) junto com irictilamma (1.03 ml) e arrefece-se a solução até -20°C. Adiciona-se cloroformato de isobutilo (1.0() ml) e agita-se a solução a -20°C durante cerca de 30 minutos. Adiciona-se uma solução saturada de amónia em metanol (20 ml) e deixa-se a solução aquecer até à temperatura ambiente c agita-se à temperatura ambiente durante cerca de 18 horas. Evapora-sc a solução in vacuo e dissolve-se o resíduo em acetato de etilo. Lava-se a solução de acetato de etilo com água, HC1 a 5%, solução saturada de bicarbonato de sódio, água, salmoura, scca-se cm sulfato de sódio, filtra-se e evapora-se in vacuo para produzir amida de N-BOC-p-cicIo-hcxilalanina. B. Dissolve-se amida de N-BOC-P-ciclo-hexilalanina (2,0 g) em acetato de etilo (100 ml) e borbulha-se gás de HC1 através da solução e agita-se a solução à temperatura ambiente durante cerca de 18 horas. Evapora-se a solução in vacuo e separa-se azeotropicamente o tolueno do resíduo duas vezes para produzir amida de β-ciclo-hexilalanina na forma de cloridrato. C. Usando essencialmente os procedimentos do Exemplo 1B até 1M (eliminando a hidrólise de hidróxido de sódio aquoso do Exemplo 1L) origina-se o produto desejado. E.M., Calculado: 524, Encontrado: 524; RMN, δ = 8,4 (1H, d); 8,1 (1H, d); 4,2 (2H, q); 4,1 (1H, s); 3,9 (4H, q); 3,4 (2H, q); 3,3 (4H, d); 2,8-3,0 (6H, m); 2,4 (2H, t); 2,2 (1H, m); 1,8 (4H, d); 1,4-1,7 (7H, m); 0,7-1,3 (10H, m). 25 86 030

ΕΡ 0 812 205/PT

Exemplo 13 N-rN-nSf-(4-(piperidin-4-iDbutanoíiyN-etilelicinaspartin-L-a-ciclo-hexilglicina

A. Arrefece-se até 0°C uma solução de sal cloridrato de éster metílico de a-fenilglicina (1,0 g) em THF (25 ml) e adiciona-se trietilamina (1,38 ml). Adiciona-se a esta mistura uma solução de dicarbonato de di-t-butilo (1,08 g) em THF (25 ml), e deixa-se a mistura aquecer até à temperatura ambiente e agita-se à temperatura ambiente durante cerca de 18 horas. Evapora-se a solução e recolhe-se o resíduo em acetato de etilo (200 ml) e lava-se a solução orgânica com HC1 IN, solução saturada de bicarbonato de sódio, salmoura, seca-se em sulfato de magnésio, filtra-se, e evapora-se in vacuo para produzir éster metílico e N-BOC-cc-fenilglicina. B. Dissolve-se éster metílico e N-BOC-a-fenilglicina (1,2 g) em metanol (50 ml) contendo ácido acético (1 ml). Adiciona-se ródio em alumínio em pó a 5% (0,60 g) e agita-se a mistura em atmosfera de hidrogénio a 50 psi durante cerca de 18 horas. Filtra-se a mistura, evapora-se in vacuo, e recolhe-se o resíduo em acetato de etilo. Lava-se a solução orgânica com água, solução saturada de bicarbonato de sódio, água, salmoura, seca-se em sulfato de magnésio, filtra-se, evapora-se in vacuo para produzir éster de metilo e N-BOC-a-ciclo-hexilglicina. C. Usando essencialmente os procedimentos dos Exemplos 1B-1M, obtém-se o produto desejado. E.M., Calculado: 511, Encontrado: 511; RMN, δ = 4,62-4,55 (1H, m); 4,06 (2H, m); 3,85 (2H, s); 3,30 (2H, q); 3,23-3,10 (2H, m); 2,85-2,55 (4H, m); 2,30 (2H, t); 1,83-1,60 (3H, m); 1,59-1,32 (8H, m); 1,30-0,75 (12H, m).

Exemplo 14 N-fN-rN-í4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglitil1aspartill-L-B-deca-hidronaft-l-il- alanina

A. Agita-se P-(l-naftil)alanina (2,0 g) numa solução saturada de cloreto de hidrogénio/metanol durante cerca de 2 horas à temperatura ambiente. Evapora-se a mistura in vacuo e separa-se azeotropicamente o tolueno do resíduo, duas vezes. Faz-se uma suspensão do resíduo em cloreto de metileno, adiciona-se N-metilmorfolina (1,02 ml) e arrefece-se a mistura até 0“C. Adiciona-se bicarbonato de di-t-butilo (2,02 g) e 4-dimetiIaminopiridina (DMAP) (0,8 g), deixa-se a solução aquecer até à temperatura ambiente, agita-se à temperatura ambiente durante cerca de 2 horas. Lava-se a mistura com HC1 a 5%, água, seca-se em sulfato de sódio, filtra-se, e evapora-se in vacuo para produzir éster metílico de N-BOC-p-( 1 -naftil)alanina. B. Combina-se o éster metílico de N-BOC-P-(l-naftil)alanina (2,0 g) e o ródio em alumina a 5% (1,0 g) em metanol (50 ml) contendo ácido acético (1,0 ml) e agita-se a mistura em atmosfera de hidrogénio a 50 psi durante cerca de 18 horas. Filtra-se a mistura, evapora-se in vacuo, e recolhe-se o resíduo em acetato de etilo. Lava-se a solução orgânica com água, solução de bicarbonato de sódio a 5%, água, salmoura, seca-se em sulfato de sódio, filtra-se, e evapora-se in vacuo para produzir éster metílico de L-p-deca-hidronaft-1 -ilalanina. C. Usando essencialmente os procedimentos dos Exemplos 1B até 1M, obtém-se o produto desejado. E.M., Calculado: 579, Encontrado: 579; RMN, δ = 4,1-4,3 (m, 1H); 3,8-4,1 (m, 2H); 2,6-2,9 (m, 4H); 2,3 (m, 1H); 2,0 (m, 1H); 1,8 (d, 3H); 0,5-1,6 (m, 33H).

Exemplo 15 2-Ciclo-hexil-N-rN-(N-(4-('piperidin-4-il'>butanoíD-N-etilglicil1asDartilletilamina

A. Dissolve-se 2-feniletilamina (2,0 g) em cloreto de metileno e arrefece-se a solução até 0°C. Adiciona-se dicarbonato de di-Abutilo (4,0 g) e DMAP (0,4 g). Deixa-se a solução aquecer até à temperatura ambiente e agita-se à temperatura ambiente durante cerca de 18 horas. Lava-se a solução com HC1 a 5%, água, filtra-se e evapora-se in vacuo para produzir N-BOC-2-feniletilamina. B. Combina-se o N-BOC-2-feniletilamina (3,1 g) e o ródio em alumina a 5% (1,1 g), em metanol (40 ml) contendo ácido acético (1,0 ml). Agita-se a mistura em atmosfera de hidrogénio a 50 psi durante cerca de 20 horas. Filtra-se a mistura, evapora-se in vacuo, e recolhe-se o resíduo em acetato de etilo. Lava-se a solução orgânica com água, solução de bicarbonato de sódio a 5%, água, salmoura, seca-se em sulfato de sódio, filtra-se, e evapora-se in vacuo para produzir N-BOC-2-ciclo-hexiletilamina. C. Usando essencialmente os procedimentos dos Exemplos 1B até 1M (eliminando a hidrólise de hidróxido de sódio aquoso do Exemplo 1L), obtém-se o produto desejado. E.M., Calculado: 481, Encontrado: 481; RMN, δ = 3,9 (s, 2H); 3,35 (d, 4H); 3,25 (d, 4H); 2,6-2,9 (m, 8H), 2,35 (t, 2H); 2,15 (t, 1H); 1,8 (4H, d); 1,4-1,7 (m, 7H), 0,9-1,3 (m, 12H), 0,7 (t, 2H). 28 Só 030

EP 0 812 205/PT

Exemplo 16 N-ΓN-ΓN-(4-lpiperidin-4-il)butanoílyN-etilglicil^aspartiΠ-L-α-(2-ciclo-hexiletil,)- glicina

A. Usando csscncialmente os procedimentos do Exemplo 13A, acima, prepara-se o éster de metilo c N-BOC-a-(2-feniletil)glicina a partir de L-homofenilalanina. B. Usando essencialmente o procedimento do Exemplo 14B acima, prepara-se o éster metílico de N-BOC-a-(2-ciclo-hexiletil)glicina a partir do éster metílico de N-BOC-a-(2-feniletil)glicina. C. Usando essencialmente os procedimentos dos Exemplos 1B a 1M, obtém-se o produto desejado. E.M., Calculado: 539, Encontrado: 539; RMN, δ = 4,60-4,55 (m, 1H); 4,20-4,08 (m, 1H); 3,85 (s, 2H); 3,29 (q, 2H); 3,25-3,12 (m, 2H); 2,84-2,55 (m, 4H); 2,29 (t, 2H); 1,83-1,65 (m, 2H); 1,63-1,32 (m, 10H); 1,28-0,81 (m, 13H), 0,79-0,56 (m, 2H).

Usando essencialmente os procedimentos dos Exemplos acima, preparam-se os seguintes compostos a partir dos materiais reagentes adequados.

86 030 ΕΡ0 812 205/PT 29

Exemplo 17 N-rN-rN-(4-(piperidin-4-inbutanoílVN-etilglicillaspartill-L-B-cis-deca-hidronaft-2- il-alanina

E.M., Calculado. 579, Encontrado: 579; RMN, δ = 4,7 (m. IH); 4,3 (m, 1H); 4,1 (d, 2H), 3,3-3,7 (m, 5H); 2,6-2,8 (m, 5H); 2,5 (t, 2H), 2,3 (t, 1H), 1.9 (d, 2H), 1,3-1,8 (m, 14H); 0,9-1,3 (m, 14H), 0,7-0,8 (m, 3H).

Exemplo 18 3-Adamant-l-ilnronil-N-rN-(4-(niperidin-4-illbutanoíll-N-etilglicillaspartato

E.M., Calculado: 548, Encontrado: 548; RMN (DMSO-d(>), δ = 4,65-4,50 (m, 1H); 4,05-3,85 (m, 4H); 3,35-3,15 (m, 4H), 2,90-2,50 (m, 4H); 2,30 (t, 2H), 2,18 (t, 1H), 1,94 (d, 2H); 1,85-1,35 (m, 20H); 1,32-1,12 (m,4H), 1,10-0,90 (m, 5H).

Exemplo 19 Ácido N-lN-fN-(4-(piperidin-4-iDbutanoílVN-etilglicillasparhll-a-aminociclo-hexanocarboxílico

HN

N

COOH

COOH

86 030

ΕΡ 0 812 205/PT Ε.Μ., Calculado: 497, Encontrado: 497; RMN, δ = 4,60-4,55 (m, 1H); 4,05 (s, 1H); 3,90 (s, 1H); 3,30 (q, 2H); 3,25-3,12 (m, 2H), 2,85-2,55 (m, 4H); 2,35 (t, 1H), 2,11 (t, 1H), 1,90-1,70 (m, 4H); 1,68-1,55 (m, 2H); 1,53-1,32 (m, 6H), 1,30-1,06 (m, 7H); 1,05-1,85 (m, 3H).

Exemplo 20 N-fN-rN-^-tnineridin^-illfíutanoílVN-etilglicillaspartill-p-ciclo-hexil-D-alanma

E.M., Calculado: 525, Encontrado: 525; RMN, δ = 4,60-4,55 (m, 1H); 4,32-4,20 (m, 1H); 4,05 (s, 1H); 3,85 (s, 1H); 3,32 (q, 2H); 3,25-3,12 (m, 2H), 2,85-2,60 (m, 4H); 2,32 (t, 1H), 2,12 (t, 1H), 1,85-1,68 (m, 2H); 1,60-1,32 (m, 10H); 1,28-0,60 (m, 13H).

Exemplo 21 N-rN-rN-f4-('piperidin-4-il)butanoílVN-etilglicil]aspartill-p-deca-hidronaft-l-il- alanina

E.M., Calculado: 579, Encontrado: 579;

86 030

ΕΡ 0 812 205 /PT RMN, δ = 4,1-4,3 (m, 1H); 3,8-4,1 (m, 2H), 3,1-3,4 (m, 4H); 2,6-2,9 (m, 4H); 2,3 (m, 1H), 2,0 (m, 1H), 1,8 (d, 3H); 0,5-1,6 (m, 33H). F.xcmplo 22 F-tilamida dc N-lN-ÍN-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicillaspartill-B-ciclo-hexil-alanina

E.M., Calculado: 552, Encontrado: 552; RMN, δ = 4,55-4,45 (m, 1H); 4,20-4,06 (m, 1H); 4,05-3,85 (m, 2H); 3,40-3,25 (m, 2H); 3,28-3,15 (m, 2H); 3,10-2,90 (m, 2H), 2,88-2,55 (m, 4H); 2,40-2,25 (m, 1H), 2,20-2,05 (m, 1H), 1,85-1,70 (m, 2H); 1,60-1,32 (m, 9H); 1,30-0,62 (m, 17H).

Exemnlo 23 N-[N-rN-(4-(piperidin-4-il'>butanoír)-N-etilglicillasr)artill-B-ciclo-octilalanina

E.M., Calculado: 553, Encontrado: 553; RMN, δ = 4,1-4,3 (m, 1H); 3,8-4,1 (m, 2H), 3,1 -3,4 (m, 4H); 2,6-2,9 (m, 4H); 2,3 (m, 1H), 2,0 (m, 1H), 1,8 (d, 2H); 0,5-1,6 (m,31H).

86 030

ΕΡ 0 812 205 /PT 32

Exemplo 24 N-rN-rN-(4-(piperidin-4-il)butanoíI)-N-etilglicinaspartin-a-ciclo-hexilmetil- etanolamina

E.M., Calculado: 511, Encontrado: 511; RMN, Ô = 4,60-4,45 (m, 1H); 4,10-3,75 (m, 3H); 3,45-3,15 (m, 6H); 2,90-2,60 (m,4H); 2,35 (t, 1H), 2,00-2,08 (m, 1H), 1,88-1,75 (m, 2H); 1,62-1,35 (m, 8H); 1,30-1,08 (m, 7H); 1,10-0,60 (m, 8H).

Exemplo 25

AmidadeN-rN-rN-('4-(piperidin-4-iDbutanoí0-N-etilglicillaspartill-B-ciclo-hexil- metilalanina

E.M., Calculado: 538, Encontrado: 538; RMN, δ = 4,60-4,50 (m, 1H); 4,15-4,00 (m, 1H); 4,00-3,80 (m, 2H); 3,35 (q, 2H); 3,30-3,15 (m, 2H); 2,90-2,62 (m, 4H); 2,35 (t, 1H), 2,15 (t, 1H), 1,88-1,75 (m, 2H); 1,65-1,40 (m, 9H); 1,30-0,88 (m, 14H); 0,85-0,65 (m, 2H).

86 030

ΕΡ 0 812 205/PT 33

Exemplo 26 N-[N-[N-(4-ípiperidin-4-il)butanoír)-N-etilglicil]aspartil]-p-adamant-l-il-alanina

HN E.M., Calculado: 577, Encontrado: 577; RMN, δ = 4,5-4,1 (m, 1H); 4,1-4,2 (m, 1H); 3,8 (d, 2H); 3,2 (q, 2H); 3,1-3,1 (m, 6H); 2,4-2,98 (m, 5H); 2,3 (m, 1H), 2,0 (m, 1H), 1,8 (m, 4H); 1,2-1,7 (m, 16H); 1,0-1,2 (m, 6H); 0,8-1,0 (m, 3H).

Exemplo 27 N-rN-rN-í4-('piperidin-4-ir)butanoíD-N-etilglicillaspaitin-B-íl.2.3.4)-tetra-hidro- naft-5-ilalanina

E.M., Calculado: 573, Encontrado: 573; RMN, δ = 6,9 (d, 4H); 4,7 (m, 1H); 4,3 (m, 1H); 4,1 fd, 2H); 3,3-3,7 (m, 6H); 2,6-3,1 (m, 12H); 2,5 (t, 2H); 2,3 (t, 1H), 1,9 (d, 2H), 1,2-1,8 (m, 16H); 1,1 (t, 2H); 1,0 (t, 2H).

Exemplo 28 N-ÍN-rN-(4-('piperidin-4-il>butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-p-(4-ciclo-hexil~lciclo- hexilalanina

HN

E.M., Calculado: 607, Encontrado: 607; RMN, δ = 4,2-4,3 (m, 1H); 3,9-4,1 (m, 2H); 3,1-3,4 (m, 5H); 2,6-2,9 (m, 5H); 2,3 (m, 1H), 2,0 (m, 1H), 1,8 (d, 3H); 0,9-1,6 (m, 32H); 0,7-0,8 (m, 3H).

Exemplo 29 N-fN-rN-(4-(piperidin-4-il)butanoílVN-etilglicillaspartil1-p-ciclo-heptilalanina

E.M., Calculado: 539, Encontrado: 539; RMN, δ = 4,60-4,55 (m, 1H); 4,35-4,25 (in, 1H), 4,08 (s, 1H); 3,92 (s, 1H); 3,35 (q, 2H); 3,33-3,20 (m, 2H); 2,90-2,60 (m, 4H); 2,35 (t, 1H), 2,18 (t, 1H), 1,90-1,75 (m, 2H); 1,70-1,10 (m, 22H); 1,10-0,85 (m, 3H).

8ό 030

ΕΡ 0 812 205 /PT 35

Exemplo 30

Amida de N-[N-rN-f4-Ípiperidin-4-il)biitano]T)-N-etilglicil]aspartir|-p-ciclo-octil-alanina

E.M., Calculado: 551, Encontrado: 551; RMN, δ = 4,45 (dd, 1H, H-12); 4,18 (m, 1H, H-14); 3,89 (d, 1H, H-ll); 3,69 (d, 1H, H-ll); 3,31 (q, 2H, H-9); 3,18 (dt, 2H, H-la); 2,74 (dt, 2H, H-le) 2,65 (dd, 2H, H-13); 2,25 (t, 2H, H-8), 1,85-1,10 (m, 26H, H-3 a H-7 e H-15 a H-23), 1,06 (t, 3H, H-10).

Exemplo 31 N-rN-fN-(4-(piperidin-4-i0butanoíl)-N-etildicillaspartil1-g-ciclo-hexilpropilglicma

E.M., Calculado: 553, Encontrado: 553; RMN, δ = 4,70-4,60 (m, 1H); 4,30-4,15 (m, 1H); 4,10 (s, 1H); 3,95 (s, 1H); 3,35 (q, 2H); 3,35-3,20 (m, 2H); 2,90-2,60 (m, 4H); 2,40 (t, 1H), 2,15 (t, 1H), 1,90-1,75 (m, 2H); 1,75-1,45 (m, 10H); 1.35-1,15 (m, 6H); 1,12-0,90 (m, 9H); 0,85-0,60 (m, 2H).

86 030

ΕΡ 0 812 205 /PT 36

Exemplo 32 N-rN-rN-(4-(piperidin-4-inbutanoílVN-etilgIicil1aspartin-B-ciclo-octilmetilalanina

E.M., Calculado: 567, Encontrado: 567; RMN, δ - 4,05-4,15 (m, 1H, 14); 3,75-4,00 (m, 2H, 11 & 18); 3,10-3,30 (m,4H, 19 & 26 cq); 2,50-2,80 (m, 4H, 15 & 26 ax); 2,05-2,25 (m, 2H, 21); 0,75-1,75 (m, 31H, 1-10. 20 & 22-25).

Exemplo 33 N-rN-ÍN-(4-(niperidin-4-il)hutanoíl')-N-etilglicinaspartin-p-ciclo-pentilalanina

COOH E.M., Calculado: 511, Encontrado: 511; RMN, δ = 4,7 (m, 1H); 4,3 (m, 1H); 4,1 (d, 2H); 3,3-3,7 (m, 5H); 2,8 (t, 2H); 2,7 (m, 3H); 2,5 (t, 2H), 2,3 (t, 1H), 1,9 (d, 2H); 1,0-1,8 (m, 16H). 37 86 030

ΕΡ 0 812 205/PT

Exemplo 34 Éster etílico e N-rN-IN-(4-(t>iperidin-4-iDbutanoílVN-etilglicil1ast)artil1-B-ciclo-hexilmetilalanina

E.M., Calculado: 567, Encontrado: 567; RMN, δ = 4,30-4,10 (m, 1H); 4,10-3,80 (m, 3H); 3,35 (q, 2H); 3,30-3,15 (m, 2H); 2,90-2,60 (m, 4H); 2,40-2,10 (t, 2H); 1,90-1,70 (m, 2H); 1,65-1,40 (m, 10H); 1,35-0,85 (m, 18H); 0,85-0,60 (m, 2H).

Os compostos do âmbito do presente invento inibem a agregação de plaquetas, inibindo a ligação de fibrinogénio a plaquetas activadas e a outras glicoproteínas aderentes envolvidas na agregação de plaquetas e formação de coágulos de sangue e são úteis na prevenção e tratamento de trombose associada a certos estados de doença, como enfartes do miocárdio, apoplexia, doença arterial periférica e coagulação intravascular disseminada em humanos e noutros mamíferos.

Os compostos deste invento podem normalmente ser administrados oral ou parentericamente, no tratamento ou prevenção de trombose associada a estados de doença.

Os compostos deste invento podem ser formulados para a administração em qualquer forma conveniente, e o invento inclui no seu âmbito composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto em conformidade com o invento adaptado à utilização em medicina humana ou veterinária. Essas composições podem ser formuladas de maneira convencional usando um ou mais transportadores ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Transportadores adequados incluem diluentes ou enchimentos, meios aquosos estéreis e vários solventes orgânicos não tóxicos. As composições podem ser formuladas na forma de comprimidos, cápsulas, pastilhas, trociscos, rebuçados duros, pós, suspensões aquosas, ou soluções, soluções injectáveis, elixires, xaropes e outros do género e podem conter um ou mais agentes seleccionados do grupo que inclui agentes edulcorantes, agentes

86 030

ΕΡ 0 812 205 / PT 38 aromatizantes, agentes corantes e agentes conservantes, para proporcionar uma preparação farmaccuticamente aceitável. hsso determinado transportador e as razões de agregação de plaquetas e de composto inibiJor de trombos para transportador são determinados pela solubilidade e propriedades químicas dos compostos, pelo modo de administração em particular e pela prática farmacêutica padrão. Por exemplo, os excipientes como a lactose, o citrato de sódio, o carbonato de cálcio e o fosfato dicálcico e vários desagregantes como amido, ácido algínico e certos silicatos complexos, junto com agentes lubrificantes como o estearato de magnésio, o sulfato de sódio c laurilo e o talco, podem ser usados para produzir comprimidos. Para a forma de capsula, a lactose e polietilenoglicóis de elevado peso molecular estão entre os transportadores farmaccuticamente aceitáveis preferidos. Quando se formulam suspensões aquosas para utilização oral, o transportador pode ser agentes de emulsão ou de suspensão. Podem-se usar diluentes como o etanol, o propilenoglicol, a glicerina e o clorofórmio e suas combinações, assim como outros materiais.

Para administração parentérica, podem-se utilizar soluções ou suspensões desses compostos cm óleo dc sésamo ou de amendoim ou soluções aquosas de propilenoglicol, assim como soluções aquosas estéreis dos sais solúveis farmaceuticamente aceitáveis aqui descritos. As soluções dos sais desses compostos são especialmente adequadas para os fins de injecção intramuscular e subcutânea. As soluções aquosas, incluindo as dos sais dissolvidos cm água destilada pura, são também úteis para os fins de injecção intravenosa, desde que o seu pH seja ajustado de forma apropriada, eles sejam adequadamente tamponados, se tenham tomado isotónicos com salino ou glucose suficiente e esterilizados por aquecimento ou microfiltração. O regime de dosagem na realização do método deste invento é o que assegura uma resposta terapêutica máxima até se obter melhoria e consequentemente o nível mínimo eficaz que provoca alívio. Em geral, a dose oral pode estar entre cerca de 0,1 mg/kg e cerca de 100 mg/kg, de preferência entre cerca de 0,1 mg/kg a cerca de 20 mg/kg, e de maior preferência entre cerca de 1 mg/kg e 20 mg/kg, e a dose i.v. de cerca de 0,1 pg/kg a cerca de 100 pg/kg, de preferência entre cerca de 0,1 pg/kg a 50 pg/kg, estando ciente que, obviamenie, ao seleccionar a dose adequada em qualquer caso específico, deve-se tomar em consideração o peso do paciente, saúde geral, idade, e outros factores que possam influenciar a resposta à droga. Deve-se administrar a droga oralmente de 1 a 4 vezes por dia, de preferência diariamente uma a duas vezes.

86 030

ΕΡ0 812 205/PT 39

Os testes farmacológicos que se seguem avaliam a actividade inibidora dos compostos do presente invento na agregação de plaquetas mediada por fibrinogénio, ligação de fibrinogénio a plaquetas estimuladas por trombina, e inibição de agregação dc plaquetas induzidas por ADP ex-vivo, e os resultados destes testes correlacionam-se com as propriedades inibidoras in-vivo dos compostos do presente invento. O teste de agregação de plaquetas baseia-se no descrito em Blood 66 (4), 946-952 (1985). O teste de ligação de fibrinogénio é essencialmente o de Ruggeri, Z.M. et al, Proc. Natl. Acad. Sei. USA 83, 5708-5712 (1986) e Plow, E.F. et al, Proc. Natl. Acad. Sei. USA 82, 8057-8061 (1985). O teste de inibição de agregação de plaquetas ex-vivo induzida por ADP baseia-se no de Zucker, “Platelet Aggregation Measured by the Photoéiectric Method”, Methods in Enzymology 169, 117-133 (1989).

Teste de agregação de plaquetas

Preparação de plaquetas activadas fixas

Isolam-se as plaquetas de concentrados de plaquetas humanas usando a técnica de filtração em gel como descrito por Marguerie, G.A. et al, J. Biol. Chem. 254, 5357-5363 (1979) e Ruggeri, Z.M. et al., J. Clin. Invest. 72, 1-12 (1983). Faz-se a suspensão das plaquetas a uma concentração de 2xl08 células/ml num tampão modificado de Tyrode sem cálcio contendo cloreto de sódio 127 mM, cloreto de magnésio 2 mM, Na2HPC>4 0,42 mM, NaHC03 11,9 mM, KC1 2,9 mM, glucose 5,5 mM, HEPES 10 mM, a um pH de 7,35 e 0,35% de albumina de soro humano (HSA). Activam-se estas plaquetas lavadas por adição de α-trombina humana a uma concentração final de 2 unidades/ ml, seguida de inibidor de trombina 1-2581 a uma concentração final de 40 μΜ. Adiciona-se paraformaldeído às plaquetas activadas para uma concentração final de 0,50% e incubam-se à temperatura ambiente durante 30 minutos. Recolhem-se então as plaquetas activadas fixas por centrifugação a 650xg durante 15 minutos. Lavam-se quatro vezes as plaquetas com o tampão de Tyrode-HSA a 0,35% acima e toma-se a fazer a sua suspensão para 2 x 108 células/ml no mesmo tampão.

Teste de agregação de plaquetas

Incubam-se as plaquetas activadas fixas com uma dose selectiva do composto a ser testado para a inibição de agregação de plaquetas durante um minuto e inicia-se a agregação adicionando fibrinogénio humano para uma concentração final de 250 pg/ml. Usa-se um aparelho perfilador de agregação de plaquetas Model PAP-4, para registar a agregação de

86 030

ΕΡ 0 812 205/PT 40 plaquetas. Expressa-se o grau de inibição de agregação como percentagem da velocidade de agregação observada na ausência de inibidor. Calcula-se então o IC50, isto é, a quantidade de inibidor necessária para reduzir a velocidade de agregaçao em 50%, para cada composto (ver, por exemplo, Plow, E.F. et al, Proc, Natl. Acad. Sei. USA 82, 8057-8061 (1985)).

Teste de ligação de fibrinogénio

Lavam-se as plaquetas para ficarem sem constituintes de plasma pela técnica de gradiente de densidade de albumina de Walsh, P.N. et al., Br. J. Haematol. 281-296 (1977), na forma modificada por Trapani-Lombardo, V. et al.,J. Clin. Invest. 76, 1950-1958 (1985). Em cada mistura experimental estimulam-se plaquetas no tampão de Tyrode modificado (Ruggeri, Z.M., et al., J. Clin. Invest. 72, 1-12 (1983)) com α-trombina humana a 22-25°C durante 10 minutos (3,125x10'1 plaquetas por litro e trombina a 0,1 unidades NIH/ml). Adiciona-se então hirudina num excesso de 25 vezes (unidade/unidade) durante 5 minutos antes da adição do fibrinogénio marcado por 125I e do composto a testar. Após estas adições, a contagem final de plaquetas na mistura é lxlO11 /litro. Após incubação durante mais 30 minutos a 22-25°C, separam-se os ligandos livres e os ligados, centrifugando 50 μΐ da mistura através de 300 μΐ de sacarose a 20% a 12000xg durante 4 minutos. Separa-se então o pelete de plaquetas do resto da mistura para determinar a radioactividade ligada a plaquetas. Mede-se a ligação não específica em misturas contendo um excesso de ligando não marcado. Quando se analisam as curvas de ligação por análise de Scatchard, a ligação não específica resulta na forma de um parâmetro ajustado a partir da isotérmica de ligação por meio de um programa computarizado (Munson, P.J., Methods Enzymol. 92, 542-576 (1983)). Para determinar a concentração de cada composto inibidor necessário para inibir 50% de ligação de fibrinogénio a plaquetas estimuladas por trombina (IC50), testa-se cada composto a 6 ou mais concentrações com fibrinogénio marcado com l25I mantido a 0,176 pmol/ litro (60 pg/ml). Obtém-se o IC50 representando a ligação de fibrinogénio residual em função do logaritmo das concentrações de composto da amostra.

Inibição de agregação ex-vivo de plaquetas induzidas por ADP

Protocolo experimental

Obtêm-se amostras de sangue de controlo 5-10 minutos antes da administração do composto de teste em cães híbridos pesando de 10 a 20 kg. Administra-se o composto intragastricamente, via entubação aquosa, ou oralmente, via cápsula de gelatina. Obtêm-se então amostras de sangue (5 ml) a intervalos de 30 minutos, durante 3 horas, e a 6, 12 e 24 horas após a dosagem. Obtém-se cada amostra de sangue por venipunctura da veia cefálica e

86 030

ΕΡ 0 812 205 / PT recolhe-se directamente para uma seringa de plástico contendo uma parte de citrato trissódico a 3,8% para nove partes de sangue.

Agregação ex vivo de plaquetas caninas

Centrifugam-se as amostras de sangue a 1000 rpm durante 10 minutos para obter plasma ric.n em plaquetas (PRP). Após a remoção do PRP, centrifuga-se a amostra durante mais 10 minutos a 2000 rpm para obter plasma pobre em plaquetas (PPP). Determina-se a contagem de plaquetas no PRP usando um contador Coulter (Coulter Electronics, Hialeah, FL). Se a concentração de plaquetas no PRP for superior a 300.000 plaquetas/μΐ, então dilui-se o PRP com PPP para ajustar a contagem de plaquetas para 300.000 plaquetas/μΐ. Colocam-se então porções aliquotas de PRP (250 μΐ) em cuvettes de vidro com silicone (7,25x55 mm, Bio/Data Corp, Horsham, PA). Adiciona-se então epineírina (concentração final de 1 μΜ) ao PRP, que se incuba durante um minuto a 37°C. Adiciona-se então ao PRP um estimulador de agregação de plaquetas, ADP a uma concentração final de 10 μΜ. Segue-se a agregação de plaquetas por espectrofotometria utilizando um agregómetro de transmissão de luz (Bio/Data Platelet Aggregation Profiler, Model PAP-4, Bio/Data Corp, Horsham, PA). Para o composto a testar, regista-se a velocidade de variação (declive) da transmitância de luz e a transmitância de luz máxima (agregação máxima) em duplicado. Apresentam-se os dados de agregação de plaquetas como a percentagem de diminuição (média ± SEM) no declive ou agregação máxima quando comparada a dados obtidos do PRP de controlo, que se prepara a partir de amostras de sangue obtidas antes da administração do composto teste.

Os compostos do presente invento exibem actividade marcante nos testes anteriores e são considerados úteis na prevenção e tratamento de trombose associada a certos estados de doença. A actividade antitrombótica no teste ex vivo de agregação de plaquetas caninas é vaticínio dessa actividade em humanos (ver, por exemplo, Catalfamo, J.L., e Dodds, W. Jean, “Isolation of Platelets from Laboratory Animais”, Methods Enzymol. 169, Part A, 27 (1989)). Os resultados dos testes de compostos do presente invento pelos métodos acima são apresentados no quadro abaixo. São também apresentados no quadro resultados de testes comparativos para 4-4-(piperidil)butanoílglicilaspartiltriptofano, ou seja, o composto divulgado na publicação de pedido de patente europeia N° 0479481.

86 030 ΕΡ 0 812 205 /PT

JX* 42

Composto do Exemplo N° Inibição de agregação de plaquetas fixas (IC50 μΜ) Inibição de Agregação ex vivo de plaquetas induzida por ADP Dose (mg/kg) % de inibição de agregação ex vivo de plaquetas após administração oral lh 3_h 6_h 12 h 24 h 2 0,027 10 90 60 <20 3 0,064 10 40 <20 9 0,77 1 0,026 5 100 100 100 88 42 4 0,72 10 90 50 <20 6 0,130 10 80 20 5 0,082 10 100 90 35 11 0,064 5 100 100 60 37 12 0,097 5 100 100 100 98 50 7 0,110 5 30 <20 8 0,068 5 30 <20 15 0,072 5 35 18 14 0,019 5 100 100 100 100 95 13 5 100 100 25 17 0,096 18 0,104 19 3,41 20 1,37 21 0,055 22 0,09 23 0,078 24 0,129 25 0,046 26 0,029 27 0,119 28 0,048 29 0,032 30 0,07 31 0,053 32 0,052 33 0,047 34 0,074 (Composto de 0,047 5 53 <20 EPA ‘481) 43 86 030

ΕΡ 0 812 205 /PT

Um perito na arte verificará facilmente que o presente invento está bem adaptado para realizar os objectivos e obter os fins e vantagens mencionadas, assim como os aí inerentes. Os compostos, composições e métodos aqui descritos sáo apresentados para representar as concretizações preferidas ou pretendem ser exemplos, e não pretendem ser limitações ao âmbito do presente invento.

Lisboa.

Por RHONE-POULENC RORER PHARMACEUTICALS INC - O AGENTE OFICIAL -

Eng.° ANTÓNIO JOÃO DA CUNHA FERREiRÀ Ag. Of. Pr. !nd.

Rua das Flores, 74-4.° 1200-195 LISBOA

Claims (19)

1. 86 030 ΕΡ 0 812 205/PT 1/6 REIVINDICAÇÕES 1. Composto da fórmula

   onde:

   A é -H, amidino, ou amidino substituído; B é alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquil-alquilo, arilo, aralquilo, alquilarilo, ou alquilaralquilo; Zc

   r E F onde: E é -H ou forma, combinado com F, um anel azacicloalcano de 4, 5, 6 ou 7 membros,

   F é a cadeia lateral do carbono a de um α-aminoácido que ocorre naturalmente, -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo, arilo substituído, aralquilo, aralquilo substituído, heterociclilo, heterociclilo substituído, heterociclilalquilo, heterocicliloalquilo substituído, ou forma, combinado com E, um anel azacicloalcano de 4, 5, 6 ou 7 membros, G é alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo, arilo substituído, aralquilo, aralquilo substituído, heterociclilo, heterociclilo substituído, heterociclilalquilo, heterociclilalquilo substituído, OR1, ou NR^2, onde R1 e R2 são independentemente H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo, aralquilo, alquilarilo, ou alquilaralquilo, e r é Oou 1; R é H-, alquilo, arilo, ou aralquilo; méde 1 a 5; n é de 0 a 6; e

   86 030 ΕΡ 0 812 205/PT 2/6 p é de 1 a 4; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
2. 2. Composto de acordo com a reivindicação 1 onde F é -H, alquilo, hidroximetilo, l-lndro\ietilo. mcrcaplometilo, 2-metiltioetilo, carboximetilo, 2-carboxietilo, 4-aminobutilo, 3-yuanidinopropilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquil-alquilo. urilo, arilo substituído, aralquilo, aralquilo substituído, heterociclilo, heterociclilo substituído, heterociclilalquilo, heterociclilalquilo substituído, ou forma, combinado com E, um anel a/actcloalcano de 4, 5, 6 ou 7 membros, desde que o heterociclilalquilo seja outro que não mdol-3-ilmetilo.
3. 3. Composto de acordo com a reivindicação 2 onde F é -H, alquilo, hidroximetilo, l-hidroxictilo. mcrcaptometilo, 2-metiltioetilo, carboximetilo, 2-carboxietilo, 4-aminobutilo, 3-guanidinopropilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquil-alquilo. arilo. arilo substituído, aralquilo, aralquilo substituído, ou forma, combinado com E, um anel azacicloalcano de 4, 5, 6 ou 7 membros.
4. 4. Composto dc acordo com a reivindicação 3 onde F é -H, alquilo, hidroximetilo, 1-hidroxictilo, mcrcaptometilo, 2-metiltioetilo, carboximetilo, 2-carboxietilo, 4-aminobutilo, 3-guanidinopropilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilal-quilo, ou forma, combinado com E, um anel azacicloalcano de 4, 5, 6 ou 7 membros.
5. 5. Composto de acordo com a reivindicação 4 onde B é alquilo, cicloalquilo, ciclo-alquilalquilo, alquilcicloalquilo ou alquilcicloalquilalquilo.
6. Composto da fórmula A / {ÇHj

   O O II O II C-NH-CH-C-NH-ÇH-C-L CH2COOH J onde: A é -H ou amidino, B é alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo, aralquilo, alquilarilo, ou alquilaralquilo,

   J é -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquil-alquilo, arilo, arilo substituído, aralquilo, aralquilo substituído, L é OR1, ou NR^2, onde R1 e R2 são independentemente -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquiloalquilo, arilo, aralquilo, alquilarilo, ou alquilaralquilo, m é de 1 a 5, n é de 2 a 6, e p é 1 ou 2; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
7. 7. Composto de acordo com a reivindicação 6 onde Aé-H, B é alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquil- alquilo, J é -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, ou alquilciclo-alquilalquilo, m é 3, e n é 3 ou 4.
8. 8. Composto de acordo com a reivindicação 7 onde Aé-H, B é alquilo, J é alquilo, cicloalquilo, ou cicloalquilalquilo, R1 e R2 são independentemente -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, m é 3, n é 3 ou 4. p é 1.
9. 9. Composto de acordo com a reivindicação 7 que é N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]valina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-D-valina, N-[N-[N-(3-(piperidin-4-il)propanoíl)-N-etilglicil]aspartil]valina, N-[N-[N-(5-(piperidin-4-il)pentanoíl)-N-etilglicil]aspartil]valina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-L-a-ciclo-hexilglicina,

   86 030 ΕΡ 0 812 205 /PT 4/6 N-[N-[N-(4-(pipendm-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-P-ciclo-hexilalanina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]norleucina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-L-a-(2,2-dimetil)prop-3-il- glicina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-L-p-cis-deca-hidronaft-2- il-alanina, Ácido N-[N [N (4 (piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglir.il]aspartil]-a-aminocÍclo-hexano-carboxílico, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-P-ciclo-hexil-D-alanina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-p-deca-hidronafl-l-il- alanina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-P-ciclo-octilmetilalanina, N - [N- [N-(4-(piperi din-4-i l)butanoí l)-N-etilglicil]aspartil]- β-adamant-1 -ilalanina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-p-(4-ciclo-hexil)ciclo-hexilalanina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-p-ciclo-heptilalanina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-a-ciclo-hexilpropilglicina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-p-ciclo-octilmetilalanina, N-[N-[N-(4-(pipcridin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-P-ciclo-pentilalanina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-L-p-deca-hidronaft-T-ilalanina, ou N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-L-a-(2-ciclo-hexiletil)- glicina, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
10. 10. Composto de acordo com a reivindicação 7 que é N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]fenilalanina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-P-(l,2,3,4)-tetra-hidronaft- 5-ilalanina, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-L-P-naft-l-ilalanina, ou N-[N-[N-(4-(pipciidin-4-il)butanoíl)-N-ctilglicil]aspartiI]-L-p naft-2-ilalanina, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
11. 11. Composto de acordo com a reivindicação 7 que é

    86 030 ΕΡ 0 812 205/PT 5/6 Amida de N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-L-p-ciclo-hexil-alanina, Amida de N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]^-ciclo-octil-alanina, Amida de N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-P-ciclo-hexil-metilalanina, e Etilamida dc N-[N [N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-3-ciclo-hexil-alanina, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
12. 12. Composto de acordo com a reivindicação 6 que é Éster etílico de N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-L-p-ciclo- hexilalanina, Éster etílico de N-[N~[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-p-ciclo- hexilmetilalanina, ou 3-Adamant-l-ilpropil-N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartato, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
13. 13. Composto de acordo com a reivindicação 1 que é 2-Ciclo-hexil-N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]etilamina, ou N-[N-[N-(4-(piperidin-4-il)butanoíl)-N-etilglicil]aspartil]-a-ciclo-hexilmetil-etanolamina, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
14. 14. Composição farmacêutica que compreende uma quantidade antitrombótica eficaz de um composto de acordo com a reivindicação 1 e um transportador farmaceuticamente aceitável.
15. 15. Composição farmacêutica que compreende uma quantidade antitrombótica eficaz de um composto de acordo com a reivindicação 6 e um transportador farmaceuticamente aceitável.
16. 16. Utilização de uma quantidade eficaz do ponto de vista terapêutico de um composto de acordo com a reivindicação 1 para a preparação de uma droga para a prevenção ou tratamento de trombose num mamífero a necessitar dessa terapia. 86 030 ΕΡ 0 812 205/PT 6/6
17. 17. Utilização de uma quantidade eficaz do ponto de vista terapêutico de um composto de acordo com a reivindicação 6 para a preparação de uma droga para a prevenção ou tratamento de trombose num mamífero a necessitar dessa terapia.
18. 18. Utilização de uma quantidade eficaz do ponto de vista terapêutico de um compor,to de acordo com a reivindicação 13 para a preparação de uma droga para a prevenção ou tratamento de trombose num mamífero a necessitar dessa terapia.
19. 19. Utilização de uma quantidade eficaz do ponto de vista terapêutico de um composio dc acordo com a reivindicação 14 para a preparação de uma droga para a prevenção ou tratamento de trombose num mamífero a necessitar dessa terapia. Lisboa, Por RHONE-POULENC RORER PHARMACEUTICALS INC - O AGENTE OFICIAL -

    Ag. Of. Pr. índ. Rua das Ftores, 74- 4.® 1200-195 LISBOA