PT2997027T

PT2997027T - Novos (ciano-dimetil-metil)-isoxazóis e -[1,3,4]tiadiazóis

Info

Publication number: PT2997027T
Application number: PT147288492T
Authority: PT
Inventors: Riether Doris; Binder Florian; Doods Henri; Georg Mueller Stephan; Rachel Nicholson Janet; Sauer Achim
Original assignee: Centrexion Therapeutics Corp
Priority date: 2013-05-17
Filing date: 2014-05-16
Publication date: 2017-06-02
Also published as: US20240092769A1; US9650370B2; AR096338A1; UA118031C2; US10570125B2; IL242309B; EP2803668A1; PH12015502523A1; KR20160008191A; WO2014184327A1; EP2997027A1; EA031021B1; ES2626396T3; US20160102085A1; HK1222851A1; US20220135554A1; US20200262830A1; MX2015015665A; NZ713614A; AU2014267197A1

Description

DESCRIÇÃO

NOVOS (CIANO—DIMETIL—METIL)—ISOXAZÓIS E -[1,3,4]TIADIAZÓIS CAMPO DA INVENÇÃO A presente invenção refere-se a novos (ciano-dimetil-metil)-isoxazóis- e - [ 1,3,4]tiadiazóis e seu uso como agonistas de recetor canabinoide 2 (agonistas de recetor CB2), composições farmacêuticas que os contêm, e métodos de uso dos mesmos como agentes para o tratamento de distúrbios ou condições mediados pelo recetor CB2.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO W02008014199 e W02008039645 discutem o recetor CB2, e os usos terapêuticos dos compostos agonistas de recetor CB2 aqui divulgados. Evidência de apoio adicional, na qual foi demonstrada a expressão de CB2 em neurónios do gânglio da raiz dorsal em várias espécies (Anand et ai., 2008 Pain 138: 667-680), apareceu recentemente. Verificou-se que a expressão neuronal de CB2 era alterada em condições de dor patológica sugerindo um papel-chave para sinalização neuronal de CB2. Foi sugerido por estudos recentes que CB2 localizado centralmente desempenha um papel no comportamento de dependência (Xi et ai., Nat. Neuroscience 2012, 14, 1160- 1166; Morales & Bond et ai., Nature Med. 2012, 18, 504-505; Aracil-Fernandez et ai.,

Neuropsychopharmacology 2012, 37, 1749-1763) e em outras condições nas quais impulsividade desadaptada desempenha um papel (Navarrete et ai., Br. J. Pharmacol. 2012, 165, 260- 273) . Um papel do CB2 hepático na patogênese de esteato-hepatite e doenças fibróticas do figado também foi sugerido por vários estudos pré-clinicos (Munoz-Luque et ai., JPET 2008, 324, 475-483; Reichenbach et ai., JPET 2012, 340, 629-637, WO201 1009883). Acredita-se que a ativação altamente seletiva do recetor CB2 com um agonista pode oferecer vias de aproveitamento dos efeitos benéficos com evitação dos efeitos adversos observados com agonistas de recetores canabinoides duais CB1/CB2 (ver por exemplo, Expert Opinion on Investigational Drugs 2005, 14, 695-703). É desejável, portanto, prover agonistas de CB2 com atividade para CB1 minimizada. W02010036630, WO2010147792 e W02010077836 divulgam agonistas de recetor CB2 que são estruturalmente mais próximos dos compostos da presente invenção.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO A presente invenção provê novos (Ciano-dimetil-metil)-isoxazóis e -[1,3,4]tiadiazóis, a saber

ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

Compostos da presente invenção são agonistas do recetor CB2. Os compostos divulgados não são somente ativadores potentes do recetor CB2 (ensaio 1), mas também mostram 1) nenhuma ou baixa ativação do recetor CB1 (ensaio 2), e 2) nenhum ou baixo efluxo de MDCK (ensaio 3).

Assim, a presente invenção fornece compostos que mostram uma combinação de potência como agonistas de recetor CB2, alta seletividade contra o recetor CB1, e baixo efluxo de MDCK. É demonstrado que os compostos estruturalmente mais próximos exemplificados em W02010036630, WO2010147792 e W02010077836 não têm este perfil balanceado de propriedades desejáveis. Os compostos da presente invenção são, portanto, menos suscetíveis a causar efeitos secundários mediados por CB1 in vivo e a demonstrar efluxo in vivo em comparação com os compostos mais próximos da técnica anterior, enquanto se espera que sejam eficazes em vários modelos in vivo. Espera-se, portanto, que sejam mais bem tolerados e sejam, assim, potencialmente mais viáveis para uso humano.

DEFINIÇÕES GERAIS

Termos não especificamente definidos neste relatório devem ter os significados que receberiam de um versado na técnica à luz da divulgação e do contexto.

Estereoquímica/solvatos/hidratos A não ser que especificamente indicado neste relatório e nas reivindicações anexas, uma fórmula ou nome químico dados devem abranger tautómeros e todos os isómeros estéreos, ópticos e geométricos (por exemplo, enantiómeros, diastereómeros, E/Z isómeros etc.) e racematos dos mesmos, bem como misturas em diferentes proporções dos enantiómeros separados, misturas de diastereómeros, ou misturas de quaisquer das formas anteriores, onde esses isómeros e enantiómeros existem, bem como sais, incluindo sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos e solvatos dos mesmos como por exemplo hidratos, incluindo solvatos dos compostos livres ou solvatos de um sal do composto

Sais A frase "farmaceuticamente aceitável" é aqui empregada para se referir aos compostos, materiais, composições, e/ou formas de dosagem que são, dentro do âmbito do bom julgamento médico, adequados para uso em contato com os tecidos de seres humanos e animais sem excessiva toxicidade, irritação, resposta alérgica ou outro problema ou complicação e comensuráveis com uma razão benefício/risco razoável.

Neste contexto, "sais farmaceuticamente aceitáveis" referem-se a derivados dos compostos divulgados em que o composto-pai é modificado se transformando em sais ácidos ou básicos. Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não se limitam a, sais ácidos minerais ou orgânicos de resíduos básicos como aminas; sais alcalinos ou orgânicos de resíduos ácidos como ácidos carboxílicos; e similares. Por exemplo, esses sais incluem sais de amónia, L-arginina, betaína, benetamina, benzatina, hidróxido de cálcio, colina, deanol, dietanolamina (2,2'-iminobis(etanol)), dietilomina, 2-(dietilomino)-etanol, 2-aminoetanol, etilenodiamina, N-etil-glucamina, hidrabamina, lH-imidazol, lisina, hidróxido de magnésio, 4-(2-hidroxietil)-morfolina, piperazina, hidróxido de potássio, 1-(2-hidroxietil)-pirrolidina, hidróxido de sódio, trietanolamina (2,2 ' ,2"-nitrilotris(etanol)) , trometamina, hidróxido de zinco, ácido acético, ácido 2,2-di-cloro-acético, ácido adípico, ácido algínico, ácido ascórbico, ácido L-aspártico, ácido benzenossulfónico, ácido benzoico, ácido 2,5-di-hidroxibenzoico, ácido 4-acetamido-benzoico, ácido (+)-canfórico, ácido (+)-canfor-10-sulfónico, ácido carbónico, ácido cinâmico, ácido cítrico, ácido ciclâmico, ácido decanoico, ácido dodecilsulfúrico, ácido etano-1,2-dissulfónico, ácido etanossulfónico, ácido 2-hidróxi-etanossulfónico, ácido etilenodiaminotetra-acético, ácido fórmico, ácido fumárico, ácido galactárico, ácido gentísico, ácido D-gluco-heptónico, ácido D-glucónico, ácido D-glucurónico, ácido glutâmico, ácido glutárico, ácido 2-oxo-glutárico, ácido glicerofosfórico, glicina, ácido glicólico, ácido hexanoico, ácido hipúrico, ácido bromídrico, ácido clorídrico, ácido isobutírico, ácido DL-láctico, ácido lactobiónico, ácido láurico, lisina, ácido maleico, ácido (-)-L-málico, ácido malónico, ácido DL-mandélico, ácido metanossulfónico, ácido galactárico, ácido naftaleno-1,5-dissulfónico, ácido naftaleno-2-sulfónico, ácido l-hidróxi-2-naftoico, ácido nicotínico, ácido nítrico, ácido octanoico, ácido oleico, ácido orótico, ácido oxálico, ácido palmítico, ácido pamoico (ácido embónico) , ácido fosfórico, ácido propiónico, ácido (-)-L-piroglutâmico, ácido salicilico, ácido 4-amino-salicilico, ácido sebácico, ácido esteárico, ácido succinico, ácido sulfúrico, ácido tânico, ácido (+)-L-tartárico, ácido tiociânico, ácido p-toluenossulfónico e ácido undecilênico. Outros sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser formados com cátions de metais como alumínio, cálcio, lítio, magnésio, potássio, sódio, zinco e similares, (ver também Pharmaceutical salts, Berge, S.M. et ai., J. Pharm. Sei., 1977, 66, 1-19).

Os sais farmaceuticamente aceitáveis da presente invenção podem ser sintetizados a partir do composto-pai que contém uma porção básica ou ácida por métodos químicos convencionais. Geralmente, esses sais podem ser preparados reagindo as formas ácida ou básica livre destes compostos com um montante suficiente da base ou ácido apropriados em água ou em um diluente orgânico como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol ou acetonitrila, ou uma mistura dos mesmos.

Sais de outros ácidos que não os mencionados acima que, por exemplo, são úteis para purificar ou isolar os compostos da presente invenção (por exemplo, sais trifluoro acetato) também fazem parte da invenção.

ENSAIOS BIOLÓGICOS A atividade biológica de compostos foi determinada pelos seguintes métodos. A. Teste In vitro da potência de CB2: CB2 cAMP (ensaio 1) Células CHO expressando CB2R humano (Euroscreen) foram colocadas em placas a uma densidade de 10 000 células por poço em placas de 384 poços e incubadas de um dia para o outro a 37°C. Após remoção do meio, as células foram tratadas com os compostos em teste diluídos em tampão de estimulação contendo 1 mM IBMX, 0,25% BSA e lOuM Forskolin. O ensaio foi incubado por 30 minutos a 37 °C. Células foram Usadas e a concentração de cAMP foi medida usando kit cAMP DiscoverX-XS, seguindo o protocolo do fabricante. Neste cenário, agonistas reduzirão a produção induzida por forskolin de cAMP enguanto agonistas inversos aumentarão adicionalmente a produção induzida por forskolin de cAMP. EC50 de agonistas foram calculados como a seguir. O montante máximo de cAMP produzido por forskolin em comparação com o nível de cAMP inibido por 1 uM CP559 40 é definido como 100%. O valor EC50 de cada composto em teste foi determinado como a concentração em gue 50% da síntese de cAMP estimulada por forskolin foram inibidos. Dados foram analisados usando um modelo logístico de quatro parâmetros. (Modelo 205 de XLfit 4.0) . B. teste In vitro de potência de CBl: CBl cAMP (ensaio 2) Células CHO expressando CB1R humano (Euroscreen) foram colocadas em placas a uma densidade de 10 000 células por poço em placas de 384 poços e incubadas de um dia para o outro a 37°C. Após remoção do meio, as células foram tratadas com os compostos em teste diluídos em tampão de estimulação contendo 1 mM IBMX, 0,25% BSA e lOuM Forskolin. O ensaio foi incubado por 30 minutos a 37 °C. Células foram lisadas e a concentração de cAMP foi medida usando kit cAMP DiscoverX-XS, seguindo o protocolo do fabricante. Neste cenário, agonistas reduzirão a produção induzida por forskolin de cAMP enquanto agonistas inversos aumentarão adicionalmente a produção induzida por forskolin de cAMP. EC50 de agonistas foram calculados como a seguir. 0 montante máximo de cAMP produzido por forskolin em comparação com o nivel de cAMP inibido por 1 uM CP559 40 é definido como 100%. O valor EC50 de cada composto em teste foi determinado como a concentração em gue 50% da síntese de cAMP estimulada por forskolin foram inibidos. Dados foram analisados usando um modelo logístico de guatro parâmetros. (Modelo 205 de XLfit 4.0). C. Avaliação de efluxo de células de rim canino Madin-Darby transfectadas com o gene MDR1 humano (ensaio MDCK) (ensaio 3)

Coeficientes de permeabilidade aparente (PE) dos compostos através das monocamadas de célula MDCK-MDR1 são medidos (pH 7,4, 37 °C) na direção de transporte apical-para-basal (AB) e basal-para-apical (BA). Permeabilidade AB (PEAB) representa absorção do fármaco do sangue para o cérebro e permeabilidade BA (PEBA) efluxo do fármaco do cérebro de volta para o sangue por meio tanto de permeabilidade passiva quanto por mecanismos de transporte ativo mediados por transportadores de efluxo e de absorção que são expressos nas células MDCK-MDR1, predominantemente pela P-gp MDR1 humana sobre-expressa. Os compostos são alocados às classes de permeabilidade/absorção por comparação das permeabilidades AB com as permeabilidades AB de compostos de referência com permeabilidade in vitro e absorção oral conhecidas no humano. Permeabilidades iguais ou similares nas duas direções de transporte indicam permeação passiva, permeabilidade vetorial aponta para mecanismos de transporte ativo adicionais. PEBA superior a PEAB indica o envolvimento de efluxo ativo mediado por P-gp MDR1. Transporte ativo é saturável dependendo da concentração. Células MDCK-MDR1 (1-2 x IO5 células/1 cm2 área) são semeadas em insertos de filtro (filtros de policarbonato Transwell Costar ou PET, com tamanho de poro de 0,4 pm) e cultivadas (DMEM) por 7 dias. Subsequentemente, a expressão de MDR1 é promovida cultivando as células com 5 mM butirato de sódio em meio completo por 2 dias. Compostos são dissolvidos em solvente apropriado (como DMSO, soluções de estoque 1-20 mM) . Soluções de estoque são diluídas com tampão HTP-4 (128,13 mM NaCI, 5,36 mM KCI, 1 mM MqS04, 1,8 mM CaCI2, 4,17 mM NaHC03, 1,19 mM Na2HP04x 7H20, 0,41 mM NaH2P04xH20, 15 mM HEPES, 20 mM glicose, 0,25 % BSA, pH 7,4) para preparar as soluções de transporte (0, 1 - 300 μΜ composto, DMSO final d 0,5 %) . A solução de transporte (transport solution (TL)) é aplicada ao lado doador apical ou basolateral para medição da permeabilidade A-B ou B-A (3 replicatas de filtro), respectivamente. O lado recetor contém o mesmo tampão do lado doador. Amostras são coletadas no início e no final do experimento do doador e em vários intervalos de tempo por até 2 horas também do lado do recetor para medição de concentração por HPLC-MS/MS ou contagem de cintilação. Volumes de recetor amostrados são substituídos com solução fresca de recetor.

Dados Biológicos

Tabela 1: Dados Biológicos dos compostos da presente invenção em relação aos compostos estruturalmente mais próximos da técnica anterior obtidos nos ensaios 1, 2 e 3.

A Tabela 1 mostra uma comparação direta das propriedades biológicas relevantes dos compostos da presente invenção com aquelas dos compostos mais próximos da técnica anterior divulgados em WO 2010036630, WO 2010147792 e WO 2010077836 quando avaliados nos ensaios 1, 2 e 3. Dados demonstram que os compostos da presente invenção possuem um perfil mais balanceado em termos de potência de CB2, atividade de CB1 e efluxo de MDCK.

MÉTODO DE TRATAMENTO A presente invenção refere-se a compostos que são úteis no tratamento e/ou prevenção de uma doença, distúrbio e/ou condição em que a ativação do recetor canabinoide 2 tem benefício terapêutico, incluindo, mas não limitado a tratamento e/ou prevenção de dor; doenças inflamatórias e/ou condições associadas; e distúrbios psiquiátricos e/ou condições associadas.

Em vista do seu efeito farmacológico, as substâncias são adequadas para o tratamento de uma doença ou condição selecionada da lista que consiste em (1) dor aguda como, por exemplo, dor de dente, dor peri- e pós-operatória, dor traumática, dor muscular, dor causada por queimaduras, queimadura de sol, neuralgia trigeminal, dor causada por cólica, bem como espasmos do trato gastrointestinal ou útero; entorses; (2) dor visceral como, por exemplo, dor pélvica crónica, dor ginecológica, dor antes e durante a menstruação, dor causada por pancreatite, úlceras pépticas, cistite intersticial, cólica renal, colecistite, prostatite, angina pectoris, dor causada por intestino irritável, dispepsia não ulcerativa e gastrite, prostatite, dor torácica não cardíaca e dor causada por isquemia miocárdica e infarto cardíaco; (3) dor neuropática como dor lombar, dor no quadril, dor na perna, neuralgia não herpética, neuralgia pós-herpética, neuropatia diabética, radiculopatia lumbossacral, dor induzida por dano ao nervo, dor neuropática relacionada à síndrome da imunodeficiência adquirida (acquired immune deficiency syndrome (AIDS)), trauma na cabeça, danos aos nervos causados por toxina e quimioterapia, dor do membro fantasma, esclerose múltipla, avulsões radiculares, mononeuropatia traumática dolorosa, polineuropatia dolorosa, síndrome da dor talâmica, dor pós-acidente vascular cerebral, dano ao sistema nervoso central, dor pós-cirúrgica, síndrome do túnel carpal, neuralgia trigeminal, síndrome dolorosa pós-mastectomia, síndrome dolorosa pós-toracotomia, dor no coto, dor de movimento repetitivo, hiperalgesia e alodinia associadas com dor neuropática , dor induzida por alcoolismo e outros fármacos; (4) dor mediada por recetor inflamatório/de dor relacionada a doenças como por exemplo osteoartrite, artrite reumatoide, artropatia inflamatória, febre reumática, tenossinovite, bursite, tendinite, gota e gota-artrite, artrite traumática, vulvodinia, dano e doenças dos músculos e faseia, artrite juvenil, espondilite, psoríase-artrite, miosite, doença dental, gripe e outras infecções virais como resfriados, lúpus eritematoso sistémico ou dor causada por queimaduras; (5) dor de tumor associada com cânceres como, por exemplo, leucemia linfática ou mieloide, doença de Hodgkin, linfomas não-Hodgkin, linfogranulomatose, linfossarcomas, tumores sólidos malignos e metástases extensas; (6) dores de cabeça de várias origens, como, por exemplo, cefaleia em salvas (cluster headaches), enxaqueca (com ou sem aura) e dores de cabeça de tensão; (7) dor simpateticamente mantida como síndrome dolorosa complexa regional do tipo I e II; (8) condições dolorosas de origem mista, como, por exemplo, dor crónica nas costas, incluindo lumbago, ou fibromialgia, ciática, endometriose, cálculo renal; (9) doenças inflamatórias e/ou edematosas da pele e membranas mucósicas, como, por exemplo, dermatite alérgica e não alérgica, dermatite atópica, psoríase, queimaduras, queimadura de sol, inflamações bacterianas, irritações e inflamações desencadeadas por substâncias químicas ou naturais (plantas, insetos, mordidas de inseto), prurido; inflamação das gengivas, edema pós-trauma causado por queimaduras, angioedema ou uveíte; (10) Doenças vasculares e cardíacas que são relacionadas à inflamação como aterosclerose, incluindo aterosclerose de transplante cardíaco, panarterite nodosa, periarterite nodosa, arterite temporal, granulomatose de Wegener, artrite de células gigantes, dano por reperfusão e eritema nodoso, trombose (por exemplo, trombose venosa profunda, renal, hepática, trombose da veia porta); doença da artéria coronária, aneurisma, rejeição vascular, infarto do miocárdio, embolismo, AVC, trombose incluindo trombose venosa, angina, incluindo angina instável, inflamação da placa coronária, inflamação induzida por bactéria, incluindo inflamação induzida por Chlamydia, inflamação induzida por virus, e inflamação associada com procedimentos cirúrgicos como enxerto vascular, incluindo cirurgia de bypass da artéria coronária, procedimentos de revascularização, incluindo angioplastia, colocação de stent, endarterectomia, ou outros procedimentos invasivos envolvendo artérias, veias e capilares, reestenose de artéria; (11) alterações inflamatórias relacionadas a doenças das vias aéreas e pulmões como asma brónquica, incluindo asma alérgica (atópica e não atópica) bem como broncoespasmo de esforço, asma induzida por agentes ocupacionais, exacerbação virai ou bacteriana de uma asma existente e outras doenças asmáticas não alergicamente induzidas; bronquite crónica e doença pulmonar obstrutiva crónica (chronic obstructive pulmonary disease (COPD)) incluindo enfisema pulmonar, exacerbação viral ou bacteriana de bronquite crónica ou bronquite obstrutiva crónica, sindrome da dificuldade respiratória aguda do adulto (acute adult respiratory distress syndrome (ARDS)), bronquite, inflamação do pulmão, rinite alérgica (sazonal e durante o ano todo), rinite vasomotora e doenças causadas por pó nos pulmões como aluminose, antracose, asbestose, calicose, siderose, silicose, tabacose e bissinose, alveolite alérgica exógena, fibrose pulmonar, bronquiectasia, doenças pulmonares em deficiência de alfa-1- -antitripsina e tosse; (12) doenças inflamatórias do trato gastrointestinal incluindo doença de Crohn e colite ulcerativa, sindrome do intestino irritável, pancreatite; (13) doenças associadas à inflamação de ouvido, nariz, boca e garganta, como gripe e infeções virais/bacterianas como resfriado comum, rinite alérgica (sazonal e perene), faringite, tonsilite, gengivite, laringite, sinusite, e rinite vasomotora, febre, febre do feno, tireoidite, otite, problemas dentários, como dor de dente, problemas perioperatórios e pós-operatórios, neuralgia trigeminal, uveíte; irite, ceratite alérgica, conjuntivite, blefarite, neurite óptica (neuritis nervi optici), coroidite, glaucoma e oftalmia simpática, assim como dor dos mesmos; (14) diabetes mellitus e suas comorbidades/ efeitos/ complicações (como vasculopatia diabética, hipertensão, dislipidemia, neuropatia diabética, cardiomiopatia, retinopatia diabética, doença ocular, nefropatia diabética, doença hepática e sintomas diabéticos de insulite (por exemplo hiperglicemia, diurese, proteinúria e excreção renal aumentada de nitrito e calicreina); e hipotensão ortostática; (15) sepse e chogue séptico após infeções bacterianas ou após trauma; (16) doenças inflamatórias das articulações e do tecido conectivo como doenças vasculares do tecido conectivo, endorses e fraturas, e doenças musculoesgueletais com sintomas inflamatórios como febre reumática aguda, polimialgia reumática, artrite reativa, artrite reumatoide, espondiloartrite, e também osteoartrite, e inflamação do tecido conectivo de outras origens, e colagenoses de todas as origens como lúpus erimatoso sistémico, escleroderma, polimiosite, dermatomiosite, sindrome de Sjogren, doença de Still ou sindrome de Felty; bem como doenças vasculares como panarterite nodosa, poliarterite nodosa, periarterite nodosa, arterite temporal, granulomatose de Wegener, arterite de células gigantes, aterosclerose e eritema nodoso ; (17) doenças e dano ao sistema nervoso central como, por exemplo, edema cerebral e o tratamento e prevenção de doenças psiguiátricas, como depressão, por exemplo, e para o tratamento e prevenção de epilepsia; (18) distúrbios da motilidade ou espasmos de estruturas e órgãos respiratórios, geniturinários, gastrointestinais incluindo biliares ou vasculares; (19) febre pós-operatória; (20) aterosclerose e gueixas relacionadas; (21) doenças do trato geniturinário como, por exemplo, incontinência urinária e gueixas relacionadas, hiperplasia prostática benigna e bexiga hiperativa, nefrite, cistite (cistite intersticial); (22) obesidade mórbida e gueixas relacionadas incluindo apneia do sono, transtornos e complicações alimentares; (23) doenças neurológicas como edema cerebral e angioedema, demência cerebral como, por exemplo doença de Parkinson e Alzheimer, demência senil; esclerose múltipla, epilepsia, epilepsia do lobo temporal, epilepsia resistente a fármaco, AVC, miastenia grave, infeções cerebrais e meningeais como encefalomielite, meningite, HIV bem como esguizofrenia, transtornos delirantes, autismo, distúrbios afetivos e transtornos de tiques, doença de Huntington; (24) impedimentos cognitivos associados com esquizofrenia, doença de Alzheimer e outros distúrbios neurológicos e psiquiátricos. Em relação à doença de Alzheimer, os compostos de fórmula geral (I) podem também ser úteis como agente modificador da doença; (25) doenças relacionadas ao trabalho, como pneumoconiose, incluindo aluminose, antracose, asbestose, calicose, ptilose, siderose, silicose, tabacose e bissinose; (26) vários outros estados de doença e problemas como epilepsia, choque séptico, por exemplo, como agentes anti-hipovolêmicos e/ou anti-hipotensivos, sepse, osteoporose, hiperplasia prostática benigna e bexiga hiperativa, nefrite, prurido, vitiligo, distúrbios de motilidade visceral nas regiões respiratória, genitourinária, gastrointestinal ou vascular, feridas, reações cutâneas alérgicas, sindromes mistas vasculares e não vasculares, choque séptico associado com infeções bacterianas ou com trauma, dano ao sistema nervoso central, dano ao tecido e febre pós-operatória, sindromes associadas com prurido; (27) ansiedade, depressão, epilepsia, impulsividade, problemas em que impulsividade desadaptada desempenha um papel, anorexia nervosa, compulsão alimentar, abuso de drogas (por exemplo, cocaína) , abuso de álcool, abuso de nicotina, transtornos de personalidade limítrofe, deficit de atenção e distúrbios hiperativos e doenças neuro degenerativas como demência, doença de Alzheimer e doença de Parkinson. 0 tratamento de distúrbios afetivos inclui distúrbios bipolares, por exemplo psicoses maníaco-depressivas, estados psicóticos extremos, por exemplo mania e oscilações excessivas de humor para as quais está sendo procurada uma estabilização de comportamento. 0 tratamento de estados de ansiedade inclui ansiedade generalizada, bem como ansiedade social, agorafobia e agueles estados comportamentais caracterizados por retraimento social, por exemplo, sintomas negativos; (28) doenças envolvendo proliferação vascular patológica, por exemplo angiogênese, restenose, proliferação de músculo liso, proliferação de célula endotelial e surgimento de novos vasos sanguíneos ou condições gue exigem a ativação de neovascularização. A doença angiogênica pode, por exemplo, ser degeneração macular relacionada à idade ou proliferação vascular associada com procedimentos cirúrgicos, por exemplo angioplastia e shunts arteriovenosos (AV shunts). Outros usos possíveis são os tratamentos de aterosclerose, neovascularização de placas, cardiomiopatia hipertrófica, angiogênese miocárdica, doença valvular, infarto do miocárdio, vasos colaterais coronários, vasos colaterais cerebrais e angiogênese isguêmica de membro; (29) doenças inflamatórias e fibróticas do fígado incluindo resistência à insulina, esteato-hepatite não alcoólica, cirrose do fígado, carcinoma hepatocelular, cirrose biliar primária, colangite esclerosante primária, doença alcoólica do fígado, dano ao fígado induzido por fármaco, hepatite virai.

De acordo com outra modalidade, os compostos da presente invenção são úteis para o tratamento e /ou prevenção de dor neuropática.

Outro aspeto é o uso de um composto da presente invenção para o tratamento e/ou prevenção de dor. A presente invenção também se refere ao uso dos compostos para o tratamento de dor neuropática associada com uma doença ou problema selecionados na lista que consiste em neuropatia diabética periferal, radiculopatia lumbossacral e neuralgia pós-herpética.

Um outro aspeto da presente invenção é um método para o tratamento e/ou prevenção de uma doença ou problema mencionado acima, método este que inclui a administração de um montante eficaz de um composto da presente invenção a um ser humano. A presente invenção também se refere a um composto da invenção como um medicamento.

Além disso, a presente invenção se refere ao uso dos compostos para o tratamento e/ou prevenção de uma doença, distúrbio ou problema em que a ativação do recetor canabinoide 2 traz um beneficio terapêutico. A faixa de dosagem dos compostos da invenção aplicáveis por dia fica usualmente em 1 a 1000 mg, preferivelmente de 5 a 800 mg, mais preferivelmente de 25 a 500 mg. Cada unidade de dosagem pode conter convenientemente de 1 a 1000 mg, preferivelmente de 25 a 500 mg. O montante farmaceuticamente eficaz ou dosagem terapêutica real dependerá naturalmente de fatores conhecidos pelos versados da técnica como idade e peso do paciente, via de administração e gravidade da doença. Em qualquer caso, a combinação será administrada em dosagens e de maneira que permita um montante farmaceuticamente eficaz ser transferido, com base no problema singular do paciente.

COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS

Preparações adequadas para administração dos compostos da presente invenção ficarão aparentes para aqueles com habilidade comum na técnica e incluem, por exemplo, comprimidos, pílulas, cápsulas, supositórios, pastilhas, trociscos, soluções, xaropes, elixires, saches, injetáveis, inalantes, pós, etc.. 0 teor de composto(s) farmaceuticamente ativo(s) deve ficar na faixa de 0,1 a 95 % em peso, preferivelmente 5,0 a 90 % em peso da composição como um todo.

Comprimidos adequados podem ser obtidos, por exemplo, misturando um ou mais compostos da presente invenção com excipientes conhecidos, por exemplo, diluentes inertes, veículos, desintegrantes, adjuvantes, tensoativos, ligantes e/ou lubrificantes. Os comprimidos podem também consistir em várias camadas.

TERAPIA COMBINADA

Compostos de acordo com a presente invenção podem ser combinados com outras opções de tratamento conhecidas por serem usadas na técnica em relação a um tratamento de quaisquer das indicações de tratamento em foco na presente invenção.

Entre essas opções de tratamento consideradas adequadas para combinação com o tratamento de acordo com a presente invenção estão: fármacos anti-inflamatórios não esteroidais (nonsteroidal antiinflammatory drugs (NSAIDs)) incluindo inibidores de COX-2; - agonistas do recetor de opiáceos; agonistas ou inibidores canabinoides da rota endocanabinoide (Cannabionoid agonists or inhibitors of the endocannabinoid pathway) - agonistas de recetor de somatostatina - bloqueadores de canal de sódio; - bloqueadores de canal de cálcio do tipo N; - moduladores serotonérgicos e noradrenérgicos; - corticosteroides; - antagonistas de recetores de histamina HI, H2, H3 e H4; - inibidores de bomba de protons; antagonistas de leucotrieno e inibidores 5-lipoxigenase; - anestésicos locais; - agonistas e antagonistas de VR1; - agonistas de recetor nicotinico de acetilcolina; - antagonistas do recetor P2X3; - agonistas e antagonistas de NGF ou anticorpos anti- NGF; - antagonistas de NK1 e NK2; - antagonistas de bradicinina B1 - antagonistas de CCR2

- inibidores de iNOS ou nNOS ou eNOS - antagonista de NMDA; - moduladores de canal de potássio; - moduladores de GABA; - antagonistas e moduladores de mGluR; - moduladores serotonérgicos e noradrenérgicos; - fármacos antienxaqueca; - fármacos para dor neuropática como pregabalina ou duloxetina; - fármacos antidiabéticos e insulina.

No que se segue, serão fornecidos exemplos representativos dessas opções de tratamento: • Fármacos anti-inflamatórios não esteroidais (Nonsteroidal antiinflammatory drugs (NSAIDs)) incluindo inibidores de COX-2: derivados de ácido propiónico (alminoprofeno, benoxaprofeno, ácido buclóxico, carprofeno, fenbufeno, fenoprofeno, flubiprofeno, ibuprofeno, indoprofeno, cetoprofeno, miroprofeno, naproxeno, oxaprozina, pirprofeno, pranoprofeno, suprofeno, ácido tiaprofênico, e tioxaprofeno), derivados de ácido acético (indometacina, acemetacina, alclofenaco, clidanaco, diclofenaco, fenclofenaco, ácido fenclózico, fentiazaco, furofenaco, ibufenaco, isoxepaco, oxepinaco, sulindaco, tiopinaco, tolmetina, zidometacina, e zomepiraco), derivados de ácido fenâmico (ácido meclofenâmico, ácido mefenâmico, e ácido tolfenâmico), derivados de ácido bifenilcarboxilico, oxicams (isoxicam, meloxicam, piroxicam, sudoxicam e tenoxicam), salicilatos (ácido acetil salicilico, sulfassalazina) e as pirazolonas (apazone, benzpiperilona, feprazona, mofebutazona, oxifenbutazona, fenilbutazona), e os coxibes (celecoxibe, valecoxibe, rofecoxibe e etoricoxibe) e similares; • Antivirais como aciclovir, tenovir, pleconaril, peramivir, pocosanol e similares; • Antibióticos como gentamicina, estreptomicina, geldanamicina, doripenem, cefalexina, cefaclor, ceftazichine, cefepima, eritromicina, vancomicina, aztreonam, amoxicilina, bacitracina, enoxacina, mafenida, doxiciclina, cloranfenicol e similares; • agonistas de recetor de opiáceo: morfina, propoxifeno (Darvon), tramadol, buprenorfina e similares; • Glicocorticosteroides como betametasona, budesonida, dexametasona, hidrocortisona, metilprednisolona, prednisolona, prednisona, triancinolona e deflazacorte; fármacos imunossupressores, imunomodulatórios, ou citostáticos incluindo, mas não limitados a hidroxicloroquina, D-penicilamina, sulfassalazina, auranofina, ouro, mercaptopurina, tacrolimo, sirolimo, micofenolato de mofetilo, ciclosporina, leflunomida, metotrexato, azatioprina, ciclofosfamida e acetato de glatirâmer e novantrona, fingolimode (FTY720), minociclina e talidomida e similares;

• anticorpos anti-TNF ou antagonistas de recetor TNF como, mas sem se limitar a Etanercepte, Infliximabe, Adalimumabe (D2E7), CDP 571, e Ro 45-2081 (Lenercepte), ou agentes biológicos direcionados contra alvos como, mas não limitados a CD-4, CTLA-4, LFA-1, IL-6, ICAM-1 , C5 e

Natalizumabe e similares; • antagonistas de recetor IL-1 como, mas não limitados a Kineret; • bloqueadores de canal de sódio: carbamazepina, mexiletina, lamotrigina, tectin, lacosamida e similares; • bloqueadores de canal de cálcio do tipo N: Ziconotida e similares; • moduladores serotonérgicos e noradrenérgicos: paroxetina, duloxetina, clonidina, amitriptilina, citalopram; • antagonistas de recetor de Histamina Hl: bromofeniramina, clorfeniramina, dexclorfeniramina, triprolidina, clemastina, difenidramina, difenilpiralina, tripelenamina, hidroxizina, metdilazina, prometazina, trimeprazina, azatadina, ciproeptadina, antazolina, feniramina pirilamina, astemizol, terfenadina, loratadina, cetirizina, desloratadina, fexofenadina e levocetirizina e similares; • antagonistas de recetor de Histamina H2: cimetidina, famotidina e ranitidina e similares; • antagonistas de recetor de Histamina H3: ciproxifano e similares; • antagonistas de recetor de Histamina H4: tioperamida e similares; • inibidores de bomba de prótons: omeprazol, pantoprazol e esomeprazol e similares; • antagonistas de leucotrieno e inibidores de 5-lipoxigenase: zafirlucaste, mon- telucaste, pranlucaste e zileutona e similares; • anestésicos locais como ambroxol, lidocaina e similares; • moduladores de canal de potássio, como retigabina; • moduladores de GABA: lacosamida, pregabalina, gabapentina e similares; • fármacos antienxaqueca: sumatriptana, zolmitriptana, naratriptana, eletriptana, telcagepant e similares; • anticorpos NGF como RI-724 e similares; • medicação antidiabética: Metformina, SUs, TZDs, agonistas de GLP1, inibidor de DPP4, inibidor de SGLT2, insulina.

Terapia de combinação é também possível com novos princípios para o tratamento da dor. A combinação de compostos é preferivelmente uma combinação sinérgica. Sinergia, descrita, por exemplo por Chou e Talalay, Adv. Enzyme Regul. 22:27-55 (1984), ocorre quando o efeito dos compostos quando administrados em combinação é maior do que o efeito aditivo dos compostos quando administrados sozinhos como agente único. Em geral, um efeito sinérgico pode ser demonstrado mais claramente em concentrações subótimas dos compostos. Sinergia pode ser em termos de citotoxicidade mais baixa, efeito farmacológico aumentado, ou algum outro efeito benéfico da combinação comparado com os componentes individuais.

SEÇÃO EXPERIMENTAL

Lista de abreviações RT temperatura ambiente BOC t-butóxi-carbonila EI-MS espectrometria de massa induzida por elétrons ESI-MS espectrometria de massa com ionização por eletrospray aq. aquoso MS espectro de massa

MeOH metanol

EtOH etanol EE Acetato de etilo DMF N,N-dimetilformamida DCM diclorometano TBME t-butil metil éter THF tetra-hidrofurano

Me-THF metil-tetra-hidrofurano DIPEA N,N-di-isopropilamina HATU hexafluorofosfato de N, N, N', N'-tetrametil-o-(7- azabenzotriazol-l-il)urdnio

Rt tempo de retenção d dia(s) sat. saturado ACN acetonitrila TFA Ácido trifluoroacético Métodos HPLC:

Nome do Método: A

Coluna: Xbridge Cl8, 4,6 x 3 0 mm, 3,5pm

Fornecedor da coluna: Waters

Nome do Método: B

Coluna: Sunfire C18, 2,1 x 30 mm, 2,5μιη

Fornecedor da coluna: Waters

Nome do Método: C

Coluna: Xbridge Cl8, 4,6 x 3 0 mm, 3,5μιη

Fornecedor da coluna: Waters

Nome do Método: D

Coluna: StableBond C18, 4,6 x 30 mm, 3,5gm

Fornecedor da coluna: Agilent

Nome do Método: E

Coluna: Xbridge Cl8, 4,6 x 3 0 mm, 3,5gm

Fornecedor da coluna: Waters

Nome do Método: F

Coluna: Sunfire C18, 3 x 30 mm, 2,5μιη

Fornecedor da coluna: Waters

Nome do Método: G

Coluna: Sunfire C18, 4,6 x 30 mm, 3,5pm

Fornecedor da coluna: Waters

Descrição do aparelho: Agilent 1100 com DAD, autoamostrador Waters e Detector MS

Nome do Método: H

Coluna: Xbridge Cl8, 3,0 x 3 0 mm, 2,5pm

Fornecedor da coluna: Waters

Descrição do aparelho: Waters Acquity com detector DA e MS e autoamostrador CTC

Preparação de intermediários

Intermediário 1: Ácido 2-metil-2-(tetra-hidro-piran-4- sulfonil)-propiónico

Para dados analíticos adicionais: ver W02010036630

Etapa 1: Tetra-hidropiran-4-ol A 75 g (0,75 mol) de tetra-hidropiran-4-ona em THF (150 mL) é adicionada uma suspensão de 28,4 g (0,75 mol) de LÍAIH4 em THF (600 mL) sob atmosfera de nitrogénio mantendo a temperatura abaixo de 30 °C com a ajuda de um banho de gelo. A reação é, então, deixada aquecer até temperatura ambiente e é agitada durante 5 h. A reação é extinta por adição de solução aquosa saturada de NH4CI até cessação da efervescência. O precipitado resultante é removido por filtração através de Celite® e lavado com THF (150 mL) . O filtrado é concentrado em pressão reduzida para formar 71,1 g de tetra-hidropiran-4-ol. Rendimento: 92%.

Etapa 2: Éster tetra-hidropiran-4-ila de ácido tolueno-4- sulfónico A 133 g (1,31 mol) de tetra-hidropiran-4-ol em piridina (1,5 L) são adicionados 373 g (1,95 mol) de cloreto de p-toluenossulfonila em porções a 10 °C. Completada a adição a reação é deixada aquecer até temperatura ambiente e é agitada durante 18 h. A reação é derramada em uma mistura agitada de HC1 aquoso/gelo. O precipitado resultante é isolado por filtração e dissolvido em DCM (1 L) . A camada orgânica é lavada com solução aquosa de HC1 1 Μ (1 L) , seguida por solução aquosa saturada de NaHCCb (1L) e então seca com Na2SC>4. Filtração e concentração do filtrado em pressão reduzida produzem 300 g de éster tetra-hidropiran-4-ila de ácido tolueno-4- sulfónico. Rendimento: 90%; ESI-MS: 257 [M+H]+

Etapa 3: Éster S-(tetra-hidro-piran-4-il)a de ácido tioacético A 300 g (1,175 mol) de éster tetra-hidropiran-4-ila de ácido tolueno-4-sulfónico em DMF (3L) são adicionados 268 g (2,35 mol) de tioacetato de potássio, seguidos por um montante catalítico de Nal (0,12 g, 10 % em mol) em RT. Completada a adição, a reação é aquecida a 50°C por 20 horas. A mistura de reação é particionada entre TBME (3L) e água (3L), a camada aquosa é extraída com TBME (2L), então saturada com NaCI e extraída de novo com TBME (2 x 2 L). Os extratos orgânicos combinados são secos com Na2S04, filtrados e o solvente é removido em pressão reduzida para formar 153 g de éster S-(tetra-hidro-piran-4-ila) de ácido tioacético. Rendimento: 81 %; ESI-MS: 161 [M+H]+

Etapa 4: Éster etilo de ácido 2-metil-2-(tetra-hidro-piran- 4-ilsulfanil)-propiónico

Uma solução de 153 g (0,96 mol) de éster S-(tetra-hidro-piran-4-il) de ácido tioacético em EtOH (3,5 L) é desgaseifiçada com nitrogénio durante 0,5 h e 125 g (2,23 mol) de KOH são adicionados. Então uma solução de 250 mL (1,68 mol) de OC-bromoisobutirato de etilo em EtOH (1L) é adicionada durante 0,5h, durante a qual a temperatura aumenta para 40 °C. A reação é agitada durante 18 h em temperatura ambiente sob uma atmosfera de nitrogénio. A mistura de reação é filtrada, o sólido é lavado com EtOH (0,5 L) e o filtrado é concentrado em pressão reduzida. O material bruto é carregado a seco (dryloaded) em sílica e purificado por cromatografia em coluna rápida e a seco (dry-flash column chromatography) (sílica, eluente: n-heptanos, 2-10% EE) para formar 158 g de éster etilo de ácido 2-metil-2-(tetra-hidro-piran-4-ilsulfanil)-propiónico . Rendimento: 71 %; ESI-MS: 233 [M+H]+

Etapa 5: Éster etilo de ácido 2-metil-2-(tetra-hidro-piran-4-sulfonil)-propiónico A 158 g (0,68 mol) de éster etilo de ácido 2-metil-2-(tetra-hidro-piran-4-ilsulfanil)-propiónico em dioxano/água (4/1, 1,6 L) são adicionados 835 g (1,35 mol) de OXONE® em porções durante 50 min. A mistura de reação é agitada em temperatura ambiente durante 18 h. O sólido é removido por filtração e lavado com dioxano (1 L). Os filtrados combinados são concentrados em pressão reduzida. O resíduo é dissolvido em EE (1,5 L) e lavado com água (1 L) . A camada orgânica é seca com Na2S04, filtrada e o solvente é removido em pressão reduzida para formar 166 g de éster etilo de ácido 2-metil-2- (tetra-hidro-piran-4-sulfonil)- propiónico. Rendimento: 92%; ESI-MS: 265 [M+H]+

Etapa 6: Ácido 2-metil-2-(tetra-hidro-piran-4-sulfonil)-propiónico A 166 g (0,63 mol) de éster etilo de ácido 2-metil-2-(tetra-hidro-piran-4-sulfonil)-propiónico em THF/água (4/1, 1,66 L) são adicionados 505 g (1,26 mol) de péletes de NaOH em porções durante 20 min. A reação é agitada em temperatura ambiente durante 2,5 d. O solvente orgânico é removido em pressão reduzida e o resíduo aquoso é diluído com água (2 L) e lavado com DCM (2 L) . A camada aquosa é acidificada a pH 1-2 com HC1 concentrado e então extraída com DCM (3 x 2 L) . A camada aquosa ácida é adicionalmente saturada com NaCI e extraída de novo com DCM (6 x 2 L). Os extratos orgânicos combinados são concentrados em pressão reduzida para formar 123 g de ácido 2-metil- 2-(tetra-hidro-piran-4-sulfonil)-propiónico . Rendimento: 83%; ESI-MS: 235 [M+H]-

Intermediário 2: Ácido 2-Metil-2-(tetra-hidro-piran-4- ilmetanosulfonil)-propiónico

Para dados analíticos adicionais: ver W02010036630

Etapa 1: (Tetra-hidro-piran-4-il)-metanol A 250 mL de L1AIH4 (solução 2,3 M em THF, 0,58 mol) em THF (200 mL) é adicionada uma solução de 130 mL (0,974 mol) de éster metilo de ácido tetra-hidro-piran-4-carboxílico em THF (900 mL) em atmosfera de nitrogénio. A temperatura é mantida em 40-45 °C com um banho de gelo. Completada a adição, a reação é agitada em temperatura ambiente durante 1,5 h. A reação é resfriada em um banho de gelo e extinta com adição de água (22 mL), solução aq. 15% de NaOH (21 mL) e água (66 mL) . 0 precipitado resultante é removido por filtração através de Celite® e é enxaguado com THF (300 mL). O filtrado é concentrado em pressão reduzida para formar 102,5 g de (tetra-hidro- piran-4-il)-metanol. Rendimento: 91 %

Etapa 2: Síntese de éster tetra-hidro-piran-4-ilmetilo de ácido tolueno-4-sulfónico

Preparado como descrito por adaptação da seguinte referência de literatura: Radziszewski, J.G. et al. J. Am. Chem. Soc. 1993, 115, 8401, A 97 g (810 mmol) de (tetra-hidro-piran-4-il)-metanol em 2-metiltetra-hidrofurano (190 mL) são adicionados 165 mL de solução aquosa a 50 % de NaOH. A esta suspensão agitada é adicionada em gotas com resfriamento uma solução de cloreto de p-tolueno-sulfonila (283 g, 1,46 mol) em 2-metiltetra-hidrofurano (280 mL). A reação é agitada a 30-35 °C durante 18h. A suspensão é derramada em uma mistura de gelo-água (280 mL) e solução aquosa de HCI (37%, 203 mL). Após adição de metilciclo-hexano (1,4 L) e mais gelo-água (0,2 L), a mistura de reação é agitada durante 2 h em um banho de gelo. O precipitado cristalino resultante é isolado por filtração e lavado com metilciclo-hexano (0,5 L) e água (0,5 L). Secagem em pressão reduzida a 40 °C forneceu 216 g de éster tetra-hidro-piran-4-ilmetilo de ácido tolueno-4- sulfónico. Rendimento: 99%; ESI-MS: 271 [M+H]+

Etapa 3: Éster S-(tetra-hidro-piran-4-ilmetilo) de ácido tioacético

Preparado como descrito por adaptação da seguinte referência de literatura: Watson, R.J. et al. Tetrahedron Lett. 2002, 43, 683-685. A 224 g (0,83 mol) de éster tetra-hidro-piran-4-ilmetilo de ácido tolueno-4-sulfónico em metil isobutilcetona (1,6 L) são adicionados 189 g (1,66 mol) de tioacetato de potássio. A suspensão é agitada a 70 °C durante 4,5 h. A mistura de reação é resfriada à RT e água (1,8 L) é adicionada. A camada orgânica é lavada com solução aq. a 10% de K2CO3 (1,8 L) e água (1 L). A camada orgânica é filtrada através de Celite® (20 g) , carvão de madeira ativado (20 g) e Na2SC>4 (20 g) e o filtrado é concentrado em pressão reduzida. O óleo residual é transformado em azeótropo com metilciclo-hexano (200 mL) e n-heptanos (250 mL) para formar 138 g de éster S-(tetra-hidro-piran-4-ilmetilo) de ácido tioacético. Rendimento: 96%; ESI-MS: 175 [M+H]+

Etapa 4: Éster etilo de ácido 2-metil-2-(tetra-hidro-piran-4-ilmetanossulfonil)-propiónico 90 g (516 mmol) de éster S-(tetra-hidro-piran-4-ilmetilo) de ácido tioacético em tolueno (500 mL) em atmosfera de nitrogénio são resfriados em um banho de gelo. Uma solução de etóxido de sódio em EtOH (21 %, 231 mL) é adicionada e a reação agitada durante 50 min. 76 mL (516 mmol) de CC-bromoisobutirato de etilo são adicionados e a reação agitada durante 1 h. À mistura de reação são adicionados ácido acético glacial (8,9 mL) e água (500 mL) . A camada orgânica é separada e lavada com água (500 mL) . Um frasco de fundo redondo com três gargalos é carregado com água (500 mL) , OOXONE® (477 g, 775 mmol) e hidrogenossulfato de tetrabutilamónio (5 g, 15 mmol) e a camada orgânica é adicionada. A mistura de reação é agitada durante 2 d em RT. Os sólidos são removidos por filtração e as camadas do filtrado são separadas. A camada orgânica é lavada com água (2 x 500 mL) . O solvente é removido em pressão reduzida e transformado em azeótropo com tolueno para formar 125 g de éster etilo de ácido 2-metil-2-(tetra-hidropiran-4- ilmetanosulfonil)-propiónico. Rendimento: 87%; ES- MS: 279 [M+H]+

Etapa 5: Ácido 2-Metil-2-(tetra-hidro-piran-4- ilmetanosulfonil)-propiónico A 123 g (0,44 mol) de éster etilo de ácido 2-metil-2-(tetra-hidro-piran-4-ilmetanossulfonil)-propiónico em THF (450 mL) são adicionados 663 mL de solução aquosa 2M de NaOH (1,33 mol). A reação é agitada em temperatura ambiente durante 1 h. À mistura de reação é adicionado TBME (1,25 L) e as camadas são separadas. A camada aquosa é resfriada em um banho de gelo e então acidificada com solução aquosa a 37% de HCI (123 mL). O precipitado resultante é isolado por filtração, lavado com água (200 mL) e seco em pressão reduzida a 50°C para formar 101 g de ácido 2-metil-2-(tetra-hidro-piran-4- ilmetanossulfonil)-propiónico

Rendimento: 91 %; ESI-MS: 251 [M+H]+

Intermediário 3: Síntese de ácido 2-metil-2-[metil-(tetra-hidro-piran-4-ilmetil)-amino]-propiónico

Para dados analíticos adicionais: ver W02010036630

Etapa 1: Tetra-hidro-piran-4-carbaldeido A 5,00 g (43,0 mmol) de (tetra-hidro-piran-il)-metanol em DCM (50 mL) são adicionados 67 mg de 2,2,6,6-tetrametil-1-piperidinilóxi (0,43 mmol), uma solução de 9,04 g (108 mmol) de NaHCCb em água (70 mL) e 512 mg (4,30 mmol) de brometo de potássio a 20 °C. A suspensão é resfriada em um banho de gelo a 4 °C. 23,5 mL de uma solução de hipoclorito de sódio (10-15% de cloro livre; 47,4 mmol) são, então, adicionados em 35 min. A suspensão é agitada durante 30 min a 4-9 °C e mais 45 min para atingir 17°C. 4,80 mL de hipoclorito de sódio (10-15% de cloro livre) são adicionados eml5 min. A reação é agitada durante 16 h em temperatura ambiente. A suspensão é filtrada e as camadas são separadas. A camada aquosa é lavada com 50 mL de DCM, as camadas orgânicas combinadas são lavadas com 50 mL de água. 0 solvente é removido em pressão reduzida para formar 3,00 g de tetra-hidro-piran-4-carbaldeído. Rendimento: 61 %; ESI-MS: 113 [M+H]-

Etapa 2: Ácido 2-metil-2-[(tetra-hidro-piran-4-ilmetil)-amino]-propiónico A 0,90 g (8,76 mmol) de 2-amino-2-metil-propiónico em 10 mL de MeOH é adicionado, em temperatura ambiente, 1,00 g (8,76 mmol) de tetra-hidro-piran-4-carbaldeído. Após 25 min, Pd(OH)2 (310 mg, w=20%) é adicionado. A reação é agitada a 50 °C e 2757 kPa de pressão de hidrogénio durante 18 h. 10 mL de acetonitrila e 20 mL de água são adicionados, filtrados através de celite para remover o catalisador e lavados com água. O solvente é removido em pressão reduzida para formar 1,62 g de produto bruto, que é recristalizado a partir de MeOH e água para formar 1,24 g de ácido 2-metil-2-[(tetra-hidro-piran-4-ilmetil)-amino]-propiónico Rendimento: 70%; ESI-MS: 202 [M+H]+

Etapa 3: Ácido 2-Metil-2-[metil-(tetra-hidro-piran-4- ilmetil)-amino]-propiónico 1,00 g (4,97 mmol) de ácido 2-metil-2-[(tetra-hidro-piran-4-ilmetil)-amino]-propiónico é suspenso em 20 mL de EtOH. 350 mg de Pd(OH)2 (0,50 mmol, w=20%) são adicionados, seguidos por 0,74 mL de formaldeido (9,88 mmol; 37% em água). A suspensão é agitada por 24 h a 100°C e 2916 kPa de pressão de hidrogénio. A mistura de reação é filtrada através de celite e lavada com EtOH. O solvente é removido em pressão reduzida para formar 0,90 g de ácido 2-metil-2-[metil-(tetra-hidro-piran-4-ilmetil)-amino]-propiónico Rendimento: 84%; ESI-MS: 216 [M+H]+

Intermediário 4: Sintese de ácido 2-[(1-metanosulfonil-piperidin-4-il)-metil-amino]-2- metil-propiónico

Etapa 1: Éster t-butila de ácido (1 -metanossulfonil-piperidin-4-il)-carbâmico 5,00 g (25,0 mmol) de BOC-4-aminopiperidina são dissolvidos em piridina (19,8 mL) e resfriados em um banho de gelo. 2,13 mL (27,5 mmol) de cloreto de metanossulfonila são adicionados lentamente. A reação é agitada em temperatura ambiente durante 16 h. Após diluição com água, a reação é extraída com DCM. Camadas orgânicas são lavadas com água, secas com MgSCh e filtradas. O solvente é removido em pressão reduzida para formar 6,30 g de éster t-butila de ácido (1-metanossulfonil-piperidin-4-il)-carbâmico.

Rendimento: 91%; ESI-MS: 279 [M+H]+

Etapa 2: 1 -Metanosulfonil-piperidin-4-ilamina 6,30 g (22,63 mmol) de éster t-butila de ácido (1- metanossulfonil-piperidin-4-il)-carbâmico são dissolvidos em DCM (74 mL) e 17,4 mL (226 mmol) de TFA são adicionados. A reação é agitada em temperatura ambiente durante 16 h. O solvente é removido em pressão reduzida. O produto bruto é diluído com dietiléter a 40°C, o precipitado é filtrado, lavado com água e seco. O produto é dissolvido em MeOH, hidrogenocarbonato suportado em polímero (PL-HCO3 MP Resin, Agilent Technologies) é adicionado, e a suspensão é agitada durante alguns minutos. A resina é filtrada e o solvente é removido em pressão reduzida para formar 4,00 g de 1-metanossulfonil-piperidin- 4-ilamina. Rendimento: 99%; ESI-MS: 179 [M+H]+; HPLC (Rt) : 0,26 min (método E)

Etapa 3: Éster etilo de ácido 2-(1-metanossulfonil-piperidin-4-ilamino)-2-metil-propiónico 2,40 g (13,5 mmol) de 1-Metanossulfonil-piperidin-4-ilamina são dissolvidos em DMF (32,8 mL). 5,58 g (40,4 mmol) de K2CO3, 3,06 mL (20,2 mmol) de 2-bromoisobutirato de etilo e 1,12 g (6,73 mmol) de Kl são adicionados em temperatura ambiente. A reação é agitada por 16 h. 2-bromoisobutirato de etilo adicional (3,06 mL) e Kl (112 g) são adicionados e a mistura de reação é agitada durante mais 16 h. Água e solução sat. ag. de K2CO3 são adicionadas, A camada aquosa é extraída com EE. As camadas orgânicas combinadas são secas com MgSCb e filtradas. O solvente é removido em pressão reduzida para formar o produto bruto, que é purificado por cromatografia com sílica gel (eluente: EE/MeOH 95/5) para formar 0,56 g de éster etilo de ácido 2-(1-metanossulfonil-piperidin-4-ilamino)-2-metil-propiónico. Rendimento: 14%; ESI-MS: 293 [M+H]+; HPLC (Rt) : 0,97 min (método E)

Etapa 4: Éster etilo de ácido 2-[(1-metanossulfonil-piperidin-4-il)-metil-amino]-2-metil-propiónico 0,71 g (2,43 mmol) de éster etilo de ácido 2-(l-metanossulfonil-piperidin-4-ilamino)-2-metil-propiónico são dissolvidos em DMF (5,92 mL). 1,51 g (10,9 mmol) de K2CO3 e 227 μΐ (3,64 mmol) de iodeto de metilo são adicionados em temperatura ambiente. A reação é agitada por 2 d. Iodeto de metilo adicional (227 μΐ) é adicionado e agitação é continuada durante 5 h. O solvente é removido em pressão reduzida. O resíduo é dissolvido em EE e é lavado com solução aquosa saturada de NaHCCb e salmoura. Camadas orgânicas são separadas, secas com MgSCg, filtradas e o solvente é removido em pressão reduzida para formar 0,76 g de éster etilo de ácido 2 —[(1 -Metanosulfonil-piperidin-4-il)-metil-amino]-2-metil-propiónico bruto, que é usado sem outra purificação. ESI-MS:307 [M+H]+; HPLC (Rt) : 1,09 min (método E)

Etapa 5: Ácido 2-[(l-Metanosulfonil-piperidin-4-il)-metil-amino]-2-metil-propiónico 0,76 g (2,48 mmol) de éster etilo de ácido 2 —[ (1 — metanossulfonil-piperidin-4-il)-metil-amino]-2-metil-propiónico são dissolvidos em EtOH (14,3 mL) e 3,72 mL (14,9 mmol) de NaOH 4N são adicionados em temperatura ambiente. A reação é refluxada durante 16 h. O solvente é removido em pressão reduzida, o resíduo é diluído com água e neutralizado a pH 7 e liofilizado. O produto é dissolvido em acetona e filtrado. O solvente é removido em pressão reduzida para formar 0,26 g de ácido 2-[(1-metanossulfonil-piperidin-4-il)-metil-amino]-2-metil-propiónico Rendimento: 37%; ESI-MS: 279 [M+H]+; HPLC (Rt) : 0,23 min (método D)

Intermediário 5: Ácido 2-Metil-2-(4,4,4-trifluoro-butano-1-sulfonil)-propiónico

Para dados analíticos adicionais: ver W02010036630

Etapa 1: Éster etilo de ácido 2-acetilsulfanil-2-metil-propiónico A uma solução de α-bromoisobutirato de etilo (62 g, 0,32 mol) em DMF (500 mL) em temperatura ambiente é adicionado tioacetato de potássio (72 g, 0,63 mol). A reação é agitada durante 16 h e então concentrada em pressão reduzida. O resíduo é diluído com uma solução aq.2 M de HCI (500 mL) e extraído com EE (3 x 500 mL) . As frações orgânicas são combinadas, lavadas com salmoura (300 mL), secas com MgSCb, filtradas e concentradas em pressão reduzida. Purificação por cromatografia com sílica eluindo com heptano/DCM provê 44 g de éster etilo de ácido 2-acetilsulfanil-2-metil-propiónico. Rendimento: 73%; ESI-MS: 191 [M+H]+

Etapa 2: Éster etilo de ácido 2-metil-2-(4,4,4-trifluoro-butilsulfanil)-propiónico A uma solução de 149 g (0,785 mol) de éster etilo de ácido 2-acetilsulfanil-2-metil-propiónico em EtOH (1,2 L, desgaseifiçada sob nitrogénio durante 1 h) são adicionados 169,7 g (0,105 mol) de metóxido de sódio, seguidos por uma solução de 150 g (0,785 mol) de 4-bromo-l,1,1-trifluoro-butano. A reação é aquecida a 85 °C durante 3d. O solvente é removido em pressão reduzida. O resíduo é dissolvido em DCM (1L) e lavado com solução aquosa saturada de NaHCCb (2 x 1 L). A camada orgânica é seca com Na2SC>4, filtrada e o filtrado é concentrado em pressão reduzida para formar 171 g de éster etilo de ácido 2-metil-2-(4,4,4-trifluoro-butilsulfanil)-propiónico. Rendimento: 84%; ESI-MS: 259 [M+H]+

Etapa 3: Éster etilo de ácido 2-Metil-2-(4,4,4-trifluoro-butano-l-sulfonil) -propiónico A uma solução de 220 g (0,852 mol) de éster etilo de ácido 2-meti1-2-(4,4,4-trifluoro-butilsulfanil)-propiónico em dioxano/ água (1/1, 4 L) são adicionados 1047 g (1,703 mol) de OXONE® em porções durante 0,5 h em temperatura ambiente. A mistura de reação é agitada em temperatura ambiente durante 18 h. O sólido é removido por filtração e enxaguado com dioxano (0,5 L) . O filtrado é concentrado em pressão reduzida para remover o solvente orgânico. O resíduo aquoso é extraído com DCM (2 x 1 L) . Os extratos orgânicos combinados são lavados com solução aquosa saturada de NaHC03 (2 L) , secos com Na2S04 e filtrados. O filtrado é concentrado em pressão reduzida para formar 226 g de éster etilo de ácido 2-metil-2-(4,4,4-trifluoro-butano-1-sulfonil)-propiónico. Rendimento: 92%; ESI-MS: 291 [M+H]+

Etapa 4: Ácido 2-Metil-2-(3-metil-butano-l-sulfonil)- propiónico A uma solução de 170 g (0,59 mol) de éster etilo de ácido 2-meti1-2-(4,4,4-trifluoro-butano-1-sulfonil)-propiónico em THF (3,4 L) são adicionados 225,4 g (1,76 mol) de trimetilsilanolato de potássio em porções durante 0,5 h. A reação é agitada em temperatura ambiente durante 18 h. A mistura de reação é acidificada com solução aquosa 2 M de HCI (2 L) a pH 2 e extraída com DCM (2 x 2 L). Os extratos orgânicos combinados são secos (Na2S04) e filtrados. O filtrado é concentrado em pressão reduzida para formar 143 g de ácido 2-metil-2-(3-metil-butano-l-sulfonil)-propiónico . Rendimento: 93%; ESI-MS: 261 [M+H]+

Intermediário 6: 2-(5-Amino[l ,3,4]tiadiazol-2-il)-2-metil-propionitrila

300 mg (3,29 mmol) de tiossemicarbazida e 370 mg (3,27 mmol) de ácido 2-ciano-2- metilpropanoico são dissolvidos em dioxano (10,0 mL) e aquecidos a 90°C. 300 μΐ (3,29 mmol) de POCI3 são adicionados em gotas. A reação é agitada a 90°C durante 1 h, resfriada a temperatura ambiente e diluída com HCI aq.l N e DCM. A camada aquosa é separada, NaOH 4 N aq. é adicionado para atingir pH 8, seguindo-se extração com DCM. A camada orgânica combinada é lavada com salmoura e seca. O solvente é removido em pressão reduzida para formar 180 mg de 2-(5-amino[1,3,4]tiadiazol-2-il)-2-metil-propionitrila. Rendimento: 32%; ESI-MS: 169 [M+H]+; HPLC (Rt) : 0,24 min (método B)

Intermediário 7: 2-(5-Amino-isoxazol-3-il)-2-metil- propionitrila

Etapa 1: 3-Amino-4,4-dimetil-pent-2-endinitrila

Uma solução de t-amilato de potássio em tolueno (25%, 11,8 mL, 23 mmol) é adicionada lentamente a uma solução de 2,2-dimetil-malononitrila (2,0 g, 21 mmol) e acetonitrila (1,2 mL, 23 mmol) em tolueno (20 mL) a 40°C sob argónio. A mistura de reação é agitada a 40 °C durante 2 h e então resfriada a 12 °C. Água (5 mL) é adicionada e a mistura é agitada a 20 °C durante 15 min e a 2°C durante 30 min.

Filtração, lavagem com água fria (10 mL) e secagem sob vácuo fornecem 2,30 g de 3-amino-4,4-dimetil-pent-2-endinitrila. Rendimento: 80%: ESI-MS: 136 [M+H]+; 1H-RMN (DMSO-d6) : 1,5, 4,1, 6,8 ppm.

Etapa 2: 2-(5-amino-isoxazol-3-il)-2-metil-propionitrila A 3-amino-4,4-dimetil-pent-2-endinitrila (10,0 g, 74 mmol) em MeOH (150 mL) é adicionado NH2OH.HCI (10,0 g, 144 mmol). A mistura é agitada a 40 °C durante 7h, concentrada, suspensa em acetato de isopropila (100 mL) e lavada com NaOH aq.4 N (2 x 100 mL) e salmoura (50 mL) . A camada orgânica extraída é concentrada para prover 7,40 g de 2-(5-amino-isoxazol-3-il)-2-metil-propionitrila. Rendimento: 66%; ESI-MS: 152 [M+H ]+; ^-RMN (DMSO-de) : 1,6, 5,1, 6,8 ppm.

Preparação de compostos da presente invenção

Exemplo 7: N-[5-(Ciano-dimetil-metil)-[1,3,4]tiadiazol-2-il]-2-metil-2-[metil- (tetra-hidro-piran-4-ilmetil)-amino]-propionamida

A 270 mg (1,25 mmol) de ácido 2-metil-2-[metil-(tetra-hidro-piran-4-ilmetil)-amino]-propiónico (intermediário 3) em DMF (3 mL) são adicionados 450 μΐ (2,58 mmol) de DIPEA e 480 mg (1,26 mmol) de HATU. Em um segundo frasco 110 mg de hidreto de sódio (60% dispersão em óleo; 2,75 mmol) são adicionados a 215 mg (1,27 mmol) de 2-(5-amino[1,3,4]tiadiazol-2-il)-2-metil-propionitrila (intermediário 6) em DMF (3 mL). Após 10 min esta mistura é adicionada ao ácido ativado. A mistura de reação é agitada por mais 30 min, e, então, filtrada e purificada por HPLC-MS para fornecer 50 mg de N-[5-(ciano-dimetil-metil)-[1,3,4]tiadiazol-2-il]-2-metil-2-[metil-(tetra-hidro-piran-4-ilmetil)-amino]-propionamida.

Rendimento: 11 %; ESI-MS: 366 [M+H]+; HPLC (Rt) : 0,84 min (método AJ^H-RMN (400 MHz, DMSO-de): 0,92-1, 04 (m, 2H) , 1,25 (s, 6H), 1,68-1, 76 (m, 3H) , 1,83 (s, 6H) , 2,09 (d, J=6,53 Hz, 2H), 2,20 (s, 3H), 3,23-3,33 (m, 4H), 3,79 (dd, J= 11,6, 3,5 Hz, 2H), 11,55 (s, 1H) ppm.

Os seguintes exemplos são preparados em analogia ao procedimento acima descrito.

Exemplo 1: N-[3-(Ciano-dimetil-metil)-isoxazol-5-il]-2- metil-2-(4,4,4-trifluoro- butano-l-sulfonil)-propionamida

A 100 mg (0,38 mmol) de ácido 2-metil-2-(4,4,4-trifluoro-butano-l-sulfonil)-propiónico (intermediário 5) em tolueno (4,07 mL) são adicionados 55,3 μΐ (0,76 mmol) de cloreto de tionila e 3,10 μΐ (0,04 mmol) de DMF. A solução é agitada em refluxo por 1 h. Em um segundo frasco 78,7 μΐ (0,46 mmol) de DIPEA são adicionados a 63,4 mg (0,42 mmol) de 2-(5-amino-isoxazol-3-il)-2-metil- propionitrila (intermediário 7) em tolueno (2,03 mL). A mistura é agitada

em RT por 5 min, adicionada, em seguida, ao cloreto ácido e agitação é continuada a RT por 16 h. A mistura de reação é purificada por HPLC-MS para fornecer 78,7 mg de N-[3-(ciano-dimetil-metil)-isoxazol-5-il]-2-meti1-2-(4, 4, 4-trifluoro-butano-l-sulfonil)-propionamida. Rendimento: 52%; ESI-MS: 396 [M+H]+; HPLC (Rt): 1,14 min (método G) ; 1H-RMN (400 MHz, DMSO-de) : 1,68 (s, 6H) , 1,70 (s, 6H) , 1,86-1,91 (m, 2H) , 2, 47-2,52 (m, 2H) , 3,34-3,40 (m, 2H) , 6,57 (s, 1H), 11,64 (s, 1H) ppm.

Exemplo 2: N-[3-(Ciano-dimetil-metil)-isoxazol-5-il]-2- metil-2-(tetra-hidro-piran-4- ilmetanossulfonil)- propionamida

Preparado de acordo com o procedimento do exemplo 1 partindo de 100 mg (0,40 mmol) de ácido 2-metil-2-(tetra-hidro-piran-4-ilmetanossulfonil)-propiónico (intermediário 2) e 66,4 mg (0,44 mmol) de 2-(5-amino-isoxazol-3-il)-2-metil-propionitrila (intermediário 7).

Rendimento: 48%; ESI-MS: 384 [M+H]+; HPLC (Rt) : 0,96 min (método G);1H-RMN (400 MHz, DMSO- de): 1,32-1,42 (m, 2H), 1,67 (s, 6H), 1, 70-1, 76 (m, 2H) , 1,70 (s, 6H) , 2,12-2,24 (m, 1H), 2,48- 2,51 (m, 2H) , 3,19 (d, J= 6,81 Hz, 2H) , 3,26-3,34 (m, 2H), 6,59 (s, 1H), 11,57 (s, 1H) ppm.

Exemplo 6: [3-(ciano-dimetil-metil)-isoxazol-5-il]-amida de ácido (S)-1-(tetra-hidro-piran-4-il)-pirrolidina-2- carboxílico

Etapa 1: Ácido (S)-1-(Tetra-hidro-piran-4-il)-pirrolidina-2-carboxílico A L-prolina (1,00 g; 8,69 mmol) em 1,2-dicloroetano (10 mL)/ ácido acético (1,98 mL; 33,0 mmol)) é adicionada tetra-hidro-piran-4-ona (0,87 g; 8,69 mmol) e Na2SC>4(~10 equivalentes). Após 45 minutos de agitação em um agitador orbital, é adicionada resina Mp-triacetoxiboro-hidreto (4,27 g; 10,42 mmol) . A mistura é agitada a RT de um dia para o outro e filtrada e a resina lavada com DCM. O filtrado combinado é lavado com solução aq. sat. NaHCCb e salmoura, seca (Na2SC>4) , filtrada e concentrada em vácuo. Ácido acético em excesso é removido por destilação azeotrópica sucessiva com tolueno no evaporador rotativo para fornecer ácido (S)-1-(tetra-hidro-piran-4-il)-pirrolidina-2-carboxílico. ESI-MS: 200 [M+H]+.

Etapa 2: 3-[1,l-dimetil-2-(tetra-hidro-piran-2-ilóxi)- etil]-isoxazol-5-il)-amida de ácido (S)-1-(tetra-hidro-piran-4-il)-pirrolidina-2-carboxílico A 1,20 g (6,02 mmol) de ácido (S)-1-(tetra-hidro-piran-4-il)-pirrolidina-2-carboxílico em DMF (50 mL) são adicionados 3,67 mL (21,1 mmol) de di-isopropil-etil-amina e 3,44 g (9,03 mmol) de HATU. A solução é agitada a RT por 1 h. Em um segundo frasco, a 1,45 g (6,02 mmol) de 3 —[1,1 — dimetil-2-(tetra-hidro-piran-2-ilóxi)-etil]-isoxazol-5-ilamina (intermediário 7a) em DMF (25 mL) são adicionados 602 mg de hidreto de sódio (60% dispersão em óleo; 15,1 mmol) com resfriamento por um banho de gelo. Esta solução é, então, adicionada ao ácido ativado e agitação é continuada por 48 h. A mistura de reação é purificada por HPLC-MS para fornecer 0,51 g de (3-[1,l-dimetil-2-(tetra-hidro-piran-2-ilóxi)-etil]-isoxazol-5-il)-amida de ácido (S)-l-(tetra-hidro-piran-4-il)-pirrolidina-2- carboxilico. Rendimento: 20%; ESI-MS: 422 [M+H]+; HPLC (Rt) : 1,55 min (método C)

Etapa 3: [3-(2-hidróxi-l,1-dimetil-etil)-isoxazol-5-il]- amida de ácido (S)-1-(tetra-hidro-piran-4-il)-pirrolidina-2-carboxílico

A 400 mg (0,95 mmol) de (3—[1,1— dimetil-2-(tetra-hidro-piran-2-ilóxi)-etil]-isoxazol-5-il)-amida de ácido (S)-l-(tetra-hidro-piran-4-il)-pirrolidina-2-carboxílico em EtOH (6,00 mL) são adicionados 119 mg (0,47 mmol) piridínio-p-toluenossulf onato. A reação é agitada a 75°C por 28 h. A mistura de reação é purificada por HPLC-MS para fornecer 240 mg de [3-(2-hidróxi-l,1 -dimetil-etil)-isoxazol-5-il]-amida de ácido (S)-1-(tetra-hidro-piran-4-il)-pirrolidina-2-carboxílico. Rendimento: 75%; ESI-MS: 338 [M+H]+; HPLC (Rt) : 0,82 min (método D)

Etapa 4: [3-(1,l-dimetil-2-oxo- etil)-isoxazol-5-il]-amida de ácido (S)-1-(tetra-hidro-piran-4-il)-pirrolidina-2-carboxílico A 180 mg (0,53 mmol) de [3-(2- hidróxi-1,1 -dimetil-etil) -isoxazol-5-il]-amida de ácido (S)-1-(tetra-hidro-piran-4-il)-pirrolidina-2-carboxílico em DCM (1,74 mL) são adicionados 317 mg (0,75 mmol) de (1,1,l-triacetdxi-l,1-di-hidro-1,2-benziodoxol-3(1H)-ona (periodinano de Dess-Martin) . A mistura de reação é agitada a RT por 1 h, diluída com solução aq. sat. de NaHCCç e agitada por mais 30 min. As camadas são separadas; a camada orgânica é lavada com salmoura e seca com Na2S04. O solvente é removido em pressão reduzida, o resíduo é purificado por cromatografia com sílica gel (eluente: EE) para fornecer 93.0 mg de [3-(1,1-dimetil-2-oxo-etil)-isoxazol-5-il]-amida de ácido (S)-1-(tetra-hidro-piran-4-il)-pirrolidina-2-carboxílico. Rendimento: 52%; ESI-MS: 336 [M+H]+; HPLC (Rt): 1,12 min (método E)

Etapa 5: [3-(2-hidróxi-imino-l,1-dimetil-etil)-isoxazol-5-il]-amida de ácido (S)-1-(tetra-hidro-piran-4-il)-pirrolidina-2-carboxílico A 90,0 mg (0,27 mmol) de [3-(1,1-dimetil-2-oxo-etil)-isoxazol-5-il]-amida de ácido (S)-1-(tetra-hidro-piran-4-il)-pirrolidina-2-carboxílico em MeOH (3,00 mL) são adicionados 22,4 mg (0,32 mmol) de cloridrato de hidroxilamina e 58,5 μΐ (0,72 mmol) de piridina. A reação é agitada a 60 °C por 3 h. O solvente é removido em pressão reduzida e o resíduo é purificado por HPLC-MS para fornecer 79.0 mg de [3-(2-hidróxi-imino-l,1-dimetil-etil)-isoxazol-5 — i1]-amida de ácido (S)-1-(tetra-hidro-piran-4-il)-pirrolidina-2-carboxílico. Rendimento: 84%; ESI-MS: 351 [M+H]+; HPLC (Rt) : 1,04 min (método E)

Etapa 6: [3-(ciano-dimetil-metil)-isoxazol-5-il]-amida de ácido (S)-1-(Tetra-hidro-piran-4-il)-pirrolidina-2-carboxílico 79.0 mg (0,23 mmol) de [3-(2-hidróxi-imino-l,1-dimetil-etil)-isoxazol-5-il]-amida de ácido (S)-l - (tetra-hidro-piran-4-il)-pirrolidina-2-carboxílico são adicionados a 1.00 mL de anidrido trifluoroacético e agitados a 100°C por 3 h. O solvente é removido em pressão reduzida. O resíduo é purificado por HPLC-MS para fornecer 32,6 mg de [3-(ciano-dimetil-metil)-isoxazol-5-il]-amida de ácido (S)-1-(tetra-hidro-piran-4-il)-pirrolidina-2-carboxílico. Rendimento: 44%; ESI-MS: 333 [M+H]+; HPLC (Rt) : 0,66 min (método Ρ);^-NMR (400 MHz, DMSO-de): 1,31-1,53 (m, 2H) , 1,57-1,65 (m, 1H) , 1,69 (s, 6H), 1,69-1,81 (m, 4H) , 2,01-2,14 (m, 1H) , 2,50-2,66 (m, 2H) , 3,08-3,14 (m, 1H) , 3,20-3,32 (m, 2H) , 3,47-3,52 (m, 1H) , 3,77-3,88 (m, 2H) , 6,46 (s, 1H) , 9,70 (s, 1H) ppm.

Exemplo 3: N-[3-(Ciano-dimetil-metil)-isoxazol-5-il]-2-(tetra-hidro-piran-4-sulfonil)- propionamida

A 3,43 g (14,6 mmol) de ácido 2-Metil-2-(tetra-hidro-piran-4-sulfonil)-propiónico (intermediário 1) em 38 mL de tolueno e 17 μΐ de piridina a 90 °C são adicionados 2,60 g (21,8 mmol) de SOCI2 em gotas durante 20 min e agitação é continuada por 2 h a 90 °C. O solvente é evaporado em pressão reduzida e o resíduo é coevaporado duas vezes com

tolueno (16 mL cada) para fornecer o cloreto ácido bruto. A 2,00 g de 2-(5-Amino-isoxazol-3-il)-2-metil-propionitrila (13,2 mmol, intermediário 7) em 14 mL de tolueno são adicionados 3,80 mL (21,8 mmol) de DIPEA. A esta mistura a 60 °C é adicionada em gotas uma mistura do cloreto ácido em 16 mL de tolueno em 10 min e a agitação é continuada de um dia para o outro a 50 °C. Após adição de água (24 mL), a mistura é aguecida a 70 °C por 2 h e, então, deixada esfriar até RT. O precipitado é filtrado, lavado com água (2x8 mL) e seco a 50°C para fornecer 3,43 g de N-[3-(Ciano-dimetil-metil)-isoxazol-5-il]-2-(tetra-hidro-piran-4-sulfonil)-propionamida.

Rendimento: 70%; ESI-MS: 370 [M+H]+; HPLC (Rt) : 0,89 min (método FJ^H-RMN (400 MHz, DMSO-de): 1,62-1, 72 (m, 2H) , 1,69 (s, 6H), 1,70 (s, 6H), 1, 80-1, 87 (m, 2H) , 3,30-3,42 (m, 3H), 3,86- 3, 93 (m, 2H) , 6,57 (s, 1H) , 11,57 (s, 1H) ppm.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Composto selecionado do grupo que consiste em

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

1. Composto selecionado do grupo que consiste em

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

3. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é

4. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

4. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

5. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, para uso como um medicamento.

6. Composição farmacêutica, que compreende pelo menos um composto de acordo a reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em mistura com um adjuvante, diluente e/ou veiculo farmaceuticamente aceitável.

7. Processo de acordo com a reivindicação 2, em mistura com um adjuvante, diluente e/ou veiculo farmaceuticamente aceitável.

8. Composição farmacêutica compreendendo um composto de acordo com a reivindicação 3 em mistura com um adjuvante, diluente e/ou veiculo farmaceuticamente aceitável.

9. Composição farmacêutica compreendendo um composto de acordo com a reivindicação 4 em mistura com um adjuvante, diluente e/ou veiculo farmaceuticamente aceitável.

10. Processo de acordo com a reivindicação 1 ou um seu sal farmaceuticamente aceitável para utilização no tratamento ou prevenção da dor.

11. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 2 a 4, para utilização no tratamento da dor.

12. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 2 a 4 para utilização na prevenção da dor.

13. Composto para utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 10-12, caracterizado por a dor ser dor neuropática.

14. Composto para utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 10-12, caracterizado por a dor ser selecionada a partir do grupo constituído por dor neuropática periférica, dor associada a neuropatia periférica diabética, dor associada a radiculopatia lombo-sacral e dor associada a doença pós-herpética neuralgia.

15. Composto para utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 10-12, caracterizado por a dor ser neuralgia do trigêmeo, síndrome da dor regional complexa Tipo I ou síndrome da dor regional complexa Tipo II.

16. Composto para utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 10-12, caracterizado por a dor ser dor lombar, dor de quadril ou dor de perna.

17. Composto para utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 10-12, caracterizado por a dor ser dor neuropática relacionada com a síndroma de imunodeficiência adquirida (SIDA).

18. Composto para utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 10-12, caracterizado por a dor ser dor crónica nas costas ou fibromialgia.

19. Composto para utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 10-12, caracterizado por a dor ser a dor tumoral, a dor devida à síndrome do túnel do carpo, a dor devida ao intestino irritável, a dor devida à osteoartrite ou a dor devida à neuropatia diabética.

20. Composto de acordo com uma ou mais das reivindicações 2 a 4 para utilização no tratamento da síndrome do intestino irritável, osteoartrite ou neuropatia diabética.

21. Composto para utilização de acordo com a reivindicação 13, em que a dor neuropática é dor pós-acidente vascular cerebral, dor devido a lesão do sistema nervoso cerebral ou dor devido a esclerose múltipla. RESUMO NOVOS (CIANO—DIMETIL—METIL)—ISOXAZÓIS E -[1,3,4]TIADIAZÓIS A presente invenção refere-se a novos compostos (ciano-dimetil-metil)-isoxazóis e -[1,3,4]tiadiazóis e uso dos mesmos como agonistas de recetor canabinoide CB2, composições farmacêuticas compreendendo os mesmos ou um sal farmaceuticamente aceitável em mistura com um adjuvante, diluente e/ou veiculo farmaceuticamente aceitável, e seu uso para o tratamento de distúrbios ou condições mediados pelo recetor CB2. REIVINDICAÇÕES

21. Composto para utilização de acordo com a reivindicação 13, em que a dor neuropática é dor pós-acidente vascular cerebral, dor devido a lesão do sistema nervoso cerebral ou dor devido a esclerose múltipla.