PT1697370E

PT1697370E - Heterociclos azabicíclicos como moduladores do receptor de canabinóides

Info

Publication number: PT1697370E
Application number: PT04814952T
Authority: PT
Inventors: Amarendra B Mikkilineni; Philip M Sher; Guixue Yu; William R Ewing; Annapurna Pendri; Samuel Gerritz; Bruce A Ellsworth; Gang Wu; Yanting Huang; Chongqing Sun; Natesan Murugesan; Zhengxiang Gu; Ying Wang; Doree Sitkoff; Stephen R Johnson; Ximao Wu
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2003-12-19
Filing date: 2004-12-17
Publication date: 2007-05-31
Also published as: HRP20070241T3; HK1095139A1; WO2005063761A1; AU2004309365A1; IL176107A0; DE602004006165D1; BRPI0417771A; CY1106674T1; IS8502A; RU2006126122A; CA2550435A1; ATE360630T1; EP1697370B1; EP1697370A1; US7378418B2; DE602004006165T2; PL1697370T3; JP2007514768A; US20050143381A1; DK1697370T3

Description

DESCRIÇÃO

"HETEROCICLOS AZABICÍCLICOS COMO MODULADORES DO RECEPTOR DE CANABINÓIDES"

PEDIDO RELACIONADO

Este pedido reivindica prioridade ao Pedido Provisório dos Estados Unidos n° 60/531451, apresentado em 19 de Dezembro de 2003.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO O delta-9-tetra-hidrocanabinol ou Delta-9 THC, o componente activo principal da Cannabis sativa (marijuana), é um membro de uma grande família de compostos lipófilos (í. e., canabinóides) que medeiam efeitos fisiológicos e psicotrópicos incluindo a regulação do apetite, imunossupressão, analgesia, inflamação, emese, anti-nocicepção, sedação e pressão intraocular. Outros membros da família de canabinóides incluem os ligandos endógenos (derivados do ácido araquidónico), anandamida, 2-araquidonilglicerol e éter de 2-araquidonilglicerol. Os canabinóides actuam através da ligação selectiva e activação de receptores de canabinóides acoplados à proteína G. Foram clonados dois tipos de receptores de canabinóide incluindo o CB-1 (L. A. Matsuda, et al., Nature, 346, 561-564 (1990)) e o CB-2 (S. Munro, et al., Nature, 365, 61-65 (1993)). O receptor CB-1 é altamente expresso nos sistemas nervosos central e periférico (M. Glass, et al., Neuroscience, 77, 299-318 (1997)) 1 enquanto o receptor CB-2 é altamente expresso no tecido imune, em particular no baço e amígdalas. 0 receptor CB-2 também é expresso noutras células do sistema imunológico, tal como nas células linfóides (S. Galiegue, et al., Eur J Biochem, 232, 54-61 (1995)) . A activação agonista dos receptores de canabinóides resulta na inibição da acumulação de AMPc, estimulação da actividade MAP-cinase e oclusão dos canais de cálcio.

Existem provas consideráveis que os canabinóides regulam o comportamento alimentar. A estimulação da actividade do CB-1 pela anandamida ou Delta-9 THC resulta num aumento na ingestão de alimentos e ganho de peso em várias espécies incluindo nos humanos (Williams e Kirkham, Psychopharm., 143, 315-317 (1999)). A inactivação genética do CB-1 originou ratinhos hipofágicos e magros em relação a membros normais da mesma ninhada (DiMarzo, et al., Nature, 410, 822-825 (2001)). Estudos publicados com antagonistas de molécula pequena do CB-1 demonstraram uma diminuição na ingestão de alimentos e no peso corporal em ratos (Trillou, et al., Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physíol., R345-R353, (2003)). A administração crónica do antagonista de CB-1 AM-251 durante duas semanas originou uma redução significativa no peso corporal e diminuiu a massa de tecido adiposo (Hildebrandt, et al., Eur. J. Pharm, 462, 125-132 (2003)) . Existem vários estudos que avaliaram o efeito anoréctico do antagonista de CB-1 da Sanofi, SR-141716 (Rowland, et al., Pyschopharm., 159, 111-116 (2001); Colombo, et al., Life Sei., 63, 113-117 (1998)). Existem, pelo menos, dois antagonistas do CB-1 em estudos clínicos para regulação do apetite, SR-141716 da Sanofi e SLV-319 da Solvay. Dados publicados da Fase Ilb mostram que o SR-141716 reduziu, de uma forma dependente com a dose, o peso corporal de indivíduos humanos ao longo de um período de estudo de 16 semanas. Foi 2 também demonstrado que os antagonistas de CB-1 promovem a interrupção do tabagismo. Dados clínicos de Fase II sobre a interrupção do tabagismo foram apresentados em Setembro de 2002 no Encontro de Informação Sanofi-Synthelabo. Estes dados mostraram que 30,2% dos doentes tratados com a dose mais elevada de SR-141716 permaneceram abstinentes do hábito de fumar contra 14,8% para o placebo.

DESCRIÇÃO PORMENORIZADA DA INVENÇÃO

A presente invenção descreve compostos de acordo com a Fórmula I, composições farmacêuticas compreendendo, pelo menos, um composto de acordo com Fórmula I e opcionalmente um ou mais agentes terapêuticos adicionais e utilizações dos compostos de acordo com a Fórmula I tanto isolados como associados a um ou mais agentes terapêuticos adicionais para o fabrico de medicamentos. Os compostos têm a Fórmula geral I

/

N

R6 incluindo todos os sais e estereoisómeros farmaceuticamente aceitáveis, R1, R2, R3, R6, R7 e n são aqui descritos: 3

DEFINIÇÕES

As definições seguintes aplicam-se aos termos como utilizados ao longo desta descrição, a menos que limitados de outro modo, em casos específicos.

Como aqui utilizado, o termo "alquilo" denota cadeias hidrocarboneto lineares ou ramificadas contendo 1 até 20 carbonos, de um modo preferido, 1 até 12 carbonos e, de um modo mais preferido, 1 até 8 carbonos, na cadeia normal, tais como, metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, sec-butilo, iso-butilo, terc-butilo, pentilo, hexilo, iso-hexilo, heptilo, 4,4-dimetilpentilo, octilo, 2,2,4-trimetilpentilo e semelhantes. Além disso, os grupos alquilo, como aqui definidos, podem estar opcionalmente substituídos em qualquer átomo de carbono disponível com um ou mais grupos funcionais habitualmente ligados a essas cadeias, tais como, mas não se limitando a hidroxilo, halo, haloalquilo, mercapto ou tio, ciano, alquiltio, cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, carboxilo, carbalcoílo, carboxamido, carbonilo, alcenilo, alcinilo, nitro, amino, alcoxilo, ariloxilo, arilalquiloxilo, heteroariloxilo, amido, -0C(0)NR8R9, -0C(0)R8, -OPO3H, -OSO3H e semelhantes para formar grupos alquilo, tais como trifluorometilo, 3-hidroxi-hexilo, 2-carboxipropilo, 2-fluoroetilo, carboximetilo, cianobutilo e semelhantes. A menos que indicado de outro modo, o termo "alcenilo" como aqui utilizado, isolado ou como parte de um outro grupo refere-se a cadeias lineares ou ramificadas de 2 até 20 carbonos, de um modo preferido, 2 até 12 carbonos e, de um modo mais preferido, 2 até 8 carbonos com uma ou mais ligações duplas na cadeia normal, tais como vinilo, 2-propenilo, 3-butenilo, 2-butenilo, 4 4-pentenilo, 3-pentenilo, 2-hexenilo, 3-hexenilo, 2-heptenilo, 3-heptenilo, 4-heptenilo, 3-octenilo, 3-nonenilo, 4-decenilo, 3- undecenilo, 4-dodecenilo, 4,8,12-tetradecatrienilo e semelhantes. Além disso, os grupos alcenilo, como aqui definidos, podem estar opcionalmente substituídos em qualquer átomo de carbono disponível com um ou mais grupos funcionais habitualmente ligados a essas cadeias, tais como, mas não se limitando a halo, haloalquilo, alquilo, alcoxilo, alcinilo, arilo, arilalquilo, cicloalquilo, amino, hidroxilo, heteroarilo, ciclo-heteroalquilo, alcanoilamino, alquilamido, arilcarbonilamino, nitro, ciano, tiol, alquiltio e/ou qualquer um dos substituintes alquilo aqui descritos. A menos que indicado de outro modo, o termo "alcinilo" como aqui utilizado, isolado ou como parte de um outro grupo refere-se a cadeias lineares ou ramificadas de 2 até 20 carbonos, de um modo preferido 2 até 12 carbonos e de um modo mais preferido 2 até 8 carbonos com uma ou mais ligações triplas na cadeia normal, tais como 2-propinilo, 3-butinilo, 2-butinilo, 4- pentinilo, 3-pentinilo, 2-hexinilo, 3-hexinilo, 2-heptinilo, 3-heptinilo, 4-heptinilo, 3-octinilo, 3-noninilo, 4-decinilo, 3-undecinilo, 4-dodecinilo e semelhantes. Além disso, os grupos alcinilo, como aqui definidos, podem estar opcionalmente substituídos, em qualquer átomo de carbono disponível, com um ou mais grupos funcionais habitualmente ligados a essas cadeias, tais como, mas não se limitando a halo, haloalquilo, alquilo, alcoxilo, alcenilo, arilo, arilalquilo, cicloalquilo, amino, hidroxilo, heteroarilo, ciclo-heteroalquilo, alcanoilamino, alquilamido, arilcarbonilamino, nitro, ciano, tiol, alquiltio e/ou qualquer um dos substituintes alquilo aqui descritos. 5 A menos que indicado de outro modo, o termo "cicloalquilo" como aqui utilizado, isolado ou como parte de um outro grupo, inclui grupos hidrocarboneto cíclicos saturados ou parcialmente insaturados (contendo uma ou mais ligações duplas) contendo 1 até 3 anéis, ligados ou fundidos, incluindo monocicloalquilo, bicicloalquilo e tricicloalquilo, contendo um total de 3 até 20 carbonos a formar os anéis, de um modo preferido 3 até 10 carbonos a formar o anel e o qual pode estar fundido a 1 ou 2 anéis aromáticos como descrito para arilo, os quais incluem ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo, ciclo-heptilo, ciclooctilo, ciclodecilo e ciclododecilo, ciclo-hexenilo,

Além disso, qualquer cicloalquilo pode estar opcionalmente substituído em quaisquer átomos de carbono disponíveis, com um ou mais grupos seleccionados de hidrogénio, halo, haloalquilo, alquilo, alcoxilo, haloalquiloxilo, hidroxilo, alcenilo, alcinilo, arilo, ariloxilo, heteroarilo, heteroariloxilo, arilalquilo, heteroarilalquilo, alquilamido, alcanoilamino, oxo, acilo, arilcarbonilamino, amino, nitro, ciano, tiol e/ou alquiltio e/ou qualquer um dos substituintes de alquilo. O termo "cicloalquilalquilo" como aqui utilizado, isolado ou como parte de um outro grupo, refere-se a grupos alquilo, como definidos acima, possuindo um substituinte cicloalquilo, em que os referidos grupos "cicloalquilo" e/ou "alquilo" podem estar opcionalmente substituídos como definido acima. 6 A menos que indicado de outro modo, o termo "arilo" como aqui utilizado, isolado ou como parte de um outro grupo, refere-se a grupos aromáticos monociclicos e biciclicos contendo 6 até 10 carbonos na parte de anel (tais como fenilo ou naftilo, incluindo 1-naftilo e 2-naftilo) e podem incluir opcionalmente um até três anéis adicionais fundidos a um anel carbociclico ou um anel heterociclico, por exemplo

Além disso, "arilo", como aqui definido, pode estar opcionalmente substituído com um ou mais grupos funcionais, tais como halo, alquilo, haloalquilo, alcoxilo, haloalcoxilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo, ariloxilo, ariloxialquilo, arilalcoxilo, alcoxicarbonilo, arilcarbonilo, arilalcenilo, aminocarbonilarilo, ariltio, arilsulfinilo, arilazo, heteroarilalquilo, heteroarilalcenilo, heteroaril-heteroarilo, heteroariloxilo, hidroxilo, nitro, ciano, amino, amino substituído, em que o amino inclui 1 ou 2 substituintes (os quais são alquilo, arilo ou qualquer um dos outros compostos arilo mencionados nas definições), tiol, alquiltio, ariltio, 7 heteroariltio, ariltioalquilo, alcoxiariltio, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, alquilaminocarbonilo, arilaminocarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquilcarboniloxilo, arilcarboniloxilo, alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, arilsulfinilo, arilsulfinilalquilo, arilsulfonilamino ou arilsulfonaminocarbonilo e/ou qualquer um dos substituintes de alquilo aqui definidos. A menos que indicado de outro modo, o termo "heteroarilo" como aqui utilizado, isolado ou como parte de um outro grupo refere-se a um anel aromático de 5 ou 6 membros, o qual inclui 1, 2, 3 ou 4 heteroátomos, tais como azoto, oxigénio ou enxofre. Tais anéis podem estar fundidos a um arilo, cicloalquilo, heteroarilo ou heterociclilo e incluem os N-óxidos possíveis, como descritos em Katritzky, A. R. e Rees, C. W., ed. Comprehensive Heterociclic Chemistry: The Structure, Reactions, Synthesis and Uses of Heterociclic Compounds 1984, Pergamon Press, New York, N.Y.; e Katritzky, A. R., Rees, C. W., Scriven, E. F., ed. Comprehensive Heterociclic Chemistry II: A Review of the Literature 1982-1995 1996, Elsevier Science, Inc., Tarrytown, N.Y.; e referências ali citadas. Além disso, "heteroarilo", como aqui definido, pode estar opcionalmente substituído com um ou mais substituintes, tais como os substituintes incluídos acima na definição de "alquilo substituído" e "arilo substituído". Exemplos de grupos heteroarilo incluem os seguintes:

e semelhantes. 0 termo "heteroarilalquilo" como aqui utilizado, isolado ou como parte de um outro grupo, refere-se a grupos alquilo, como definido acima, possuindo um substituinte heteroarilo, em que os referidos grupos heteroarilo e/ou alquilo podem estar opcionalmente substituídos como definido acima. 0 termo "heterociclo", "heterociclilo" ou "anel heterocíclico", como aqui utilizado, representa um sistema monocíclico estável de 4 até 7 membros não substituído ou substituído, o qual pode ser saturado ou insaturado e o qual consiste de átomos de carbono com um até quatro heteroátomos seleccionados de azoto, oxigénio ou enxofre, e em que os heteroátomos de azoto e enxofre podem estar opcionalmente oxidados, e o heteroátomo de azoto pode estar opcionalmente 9 quaternado. 0 anel heterocíclico pode estar ligado em qualquer heteroátomo ou átomo de carbono que resulte na criação de uma estrutura estável. Exemplos de tais grupos heterocíclicos incluem, mas não se limitam a piperidinilo, piperazinilo, oxopiperazinilo, oxopiperidinilo, oxopirrolidinilo, oxoazepinilo, azepinilo, pirrolilo, pirrolidinilo, furanilo, tienilo, pirazolilo, pirazolidinilo, imidazolilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, oxazolilo, oxazolidinilo, isoxazolilo, isoxazolidinilo, morfolinilo, tiazolilo, tiazolidinilo, isotiazolilo, tiadiazolilo, tetra-hidropiranilo, tiamorfolinilo, sulfóxido de tiamorfolinilo, sulfona de tiamorfolinilo, oxadiazolilo e outros heterociclos descritos em Katritzky, A. R. e Rees, C. W., ed. Comprehensive Heterocyclic Chemistry: The Structure, Reactions, Synthesis and Uses of Heterocyclic Compounds 1984, Pergamon Press, New York, N.Y.; e Katritzky, A. R., Rees, C. W., Scriven, E. F., ed. Comprehensive Heterocyclic Chemistry II: A Review of the Literature 1982-1995 1996, Elsevier Science, Inc., Tarrytown, N.Y.; e referências ali citadas. 0 termo "heterocicloalquilo" como aqui utilizado, isolado ou como parte de um outro grupo refere-se a grupos alquilo como definidos acima possuindo um substituinte heterociclilo, em que os referidos grupos heterociclilo e/ou alquilo podem estar opcionalmente substituídos como definido acima.

Os termos "arilalquilo", "arilalcenilo" e "arilalcinilo" como utilizados, isolados ou como parte de um outro grupo referem-se a grupos alquilo, alcenilo e alcinilo, como descritos acima, possuindo um substituinte arilo. Exemplos representativos de arilalquilo incluem, mas não se limitam a benzilo, 10 2-feniletilo, 3-fenilpropilo, fenetilo, benzidrilo e naftilmetilo e semelhantes. 0 termo "alcoxilo", "ariloxilo", "heteroariloxilo" "arilalquiloxilo" ou "heteroarilalquiloxilo", como aqui utilizado, isolado ou como parte de um outro qrupo, inclui um grupo alquilo ou arilo, como definido acima, ligado através de um átomo de oxigénio. 0 termo "halogéneo" ou "halo" como aqui utilizado, isolado ou como parte de um outro grupo, refere-se a cloro, bromo, flúor e iodo, sendo preferidos o bromo, cloro ou flúor. 0 termo "ciano," como aqui utilizado, refere-se a um grupo -CN. 0 termo "metileno," como aqui utilizado, refere-se a um grupo -CH2—. 0 termo "nitro," como aqui utilizado, refere-se a um grupo -no2.

Os compostos de fórmula I podem ser apresentados como sais, os quais também estão dentro do âmbito desta invenção. São preferidos os sais farmaceuticamente aceitáveis (i. e., não tóxicos, fisiologicamente aceitáveis). Se os compostos de fórmula I tiverem, por exemplo, pelo menos um centro básico, eles podem formar sais de adição de ácido. Estes são preparados, por exemplo, com ácidos inorgânicos fortes, tais como ácidos minerais, por exemplo, ácido sulfúrico, ácido fosfórico ou um ácido hidro-hálico, com ácidos carboxilicos orgânicos, tais como ácidos alcanocarboxilicos de 1 até 4 átomos de carbono, por 11 exemplo, ácido acético, os quais estão não substituídos ou substituídos, por exemplo, com halogéneo como ácido cloroacético, tais como ácidos dicarboxílicos saturados ou não saturados, por exemplo ácido oxálico, malónico, succinico, maleico, fumárico, ftálico ou tereftálico, tais como ácidos hidroxicarboxílicos, por exemplo, ascórbico, glicólico, láctico, málico, tartárico ou citrico, tais como aminoácidos, (por exemplo, ácido aspártico ou glutâmico ou lisina ou arginina), ou ácido benzóico, ou com ácidos sulfónicos orgânicos, tais como ácidos alquilo(C1-C4) ou arilsulfónicos os quais estão não substituídos ou substituídos, por exemplo com halogéneo, por exemplo ácido metil- ou p-toluenossulfónico. Também podem ser preparados sais de adição de ácido correspondentes possuindo, se desejado, um centro básico adicional. Os compostos de fórmula I possuindo pelo menos um grupo ácido (por exemplo COOH) também podem formar sais com bases. Os sais adequados com bases são, por exemplo, sais de metais, tais como sais de metais alcalinos ou sais de metais alcalino-terrosos, por exemplo, sais de sódio, potássio ou magnésio, ou sais com amónia ou uma amina orgânica, tais como morfolina, tiomorfolina, piperidina, pirrolidina, a mono, di ou tri-(alquil inferior)amina, por exemplo, etil, terc-butil, dietil, diisopropil, trietil, tributil ou dimetilpropilamina ou uma mono, di ou tri-hidroxi(alquil inferior)amina, por exemplo, mono, di ou trietanolamina. Pode ainda preparar-se os sais internos correspondentes. Também estão incluídos os sais que não são adequados para utilizações farmacêuticas mas que podem ser utilizados, por exemplo, para o isolamento ou purificação de compostos de fórmula I livres ou dos seus sais farmaceuticamente aceitáveis. 12

Os sais preferidos dos compostos de fórmula I que contêm um grupo básico incluem monocloridrato, hidrogenossulfato, metanossulfonato, fosfato, nitrato ou acetato.

Os sais preferidos dos compostos de fórmula I que contêm um grupo ácido incluem os sais de sódio, potássio e magnésio e as aminas orgânicas farmaceuticamente aceitáveis. 0 termo "modulador" refere-se a um composto químico com capacidade para intensificar (e. g., actividade "agonista") ou intensificar parcialmente (e. g., actividade "agonista parcial") ou inibir (e. g., actividade "antagonista" ou "agonista inverso") uma propriedade funcional de actividade ou processo biológico (e. g., actividade enzimática ou ligação ao receptor); em que essa intensificação ou inibição pode ser acidental na ocorrência de um evento específico, tal como activação de um percurso de transdução do sinal, e/ou pode manifestar-se apenas em tipos de células particulares. 0 termo "metabolito bioactivo" como aqui utilizado refere-se a qualquer grupo funcional contido num composto de fórmula I com uma valência incompleta para substituição adicional, em que essa substituição pode, após biotransformação, gerar um composto de fórmula I. Exemplos de tais grupos funcionais de metabolitos bioactivos incluem, mas não se limitam a -OH, -NH ou grupos funcionais em que o hidrogénio pode estar substituído por um grupo funcional tal como, por exemplo, -P03H2, o qual após biotransformação, gera um grupo funcional -OH ou -NH de um composto de fórmula I. 0 termo "ésteres pró-fármacos" como aqui utilizado inclui ésteres e carbonatos preparados fazendo reagir um ou mais 13 hidroxilos de compostos de fórmula I com agentes de acilação substituídos com alquilo, alcoxilo ou arilo utilizando processos conhecidos dos especialistas na técnica para preparar acetatos, pivalatos, metilcarbonatos, benzoatos e semelhantes. Os ésteres pró-fármacos também podem incluir, mas não se limitam a grupos tais como ésteres de fosfato, ésteres de fosfonato, ésteres de fosfonamidato, ésteres de sulfato, ésteres de sulfonato e ésteres de sulfonamidato em que o éster pode estar ainda substituído com grupos que conferem uma vantagem farmacêutica, tal como - mas não se limitando a - solubilidade aquosa ou exposição in vivo favorável ao componente bioactivo de fórmula I. 0 termo "pró-fármaco" como aqui utilizado inclui a funcionalização de compostos de fórmula I bioactivos contendo amina ou hidroxilo para formar derivados substituídos com alquilo, acilo, sulfonilo, fosforilo ou hidrato de carbono. Estes derivados são preparados fazendo reagir compostos de fórmula I com reagentes de alquilação, acilação, sulfonilação, ou fosforilação utilizando processos conhecidos dos especialistas na técnica. A alquilação de aminas de fórmula I pode resultar - mas não se limitar a - derivados que incluam as unidades espaçadoras a outras unidades pró-fármaco, tais como grupos alquiloximetilo, aciloximetilo, fosforiloximetilo ou sulfoniloximetilo. A alquilação de aminas de fórmula I pode resultar na formação de sais de amina quaternários que actuam in vivo para proporcionar o agente bioactivo (i. e., o composto de fórmula I) .

Os pró-fármacos preferidos consistem de um composto de fórmula I em que um hidroxilo pendente está fosforilado para produzir um derivado fosfato. Um tal pró-fármaco também pode 14 incluir um grupo espaçador entre o composto de fórmula I e o grupo fosfato, tal como um grupo metilenoxilo. Os métodos para preparar um tal pró-fármaco a partir de um composto de fórmula I são conhecidos dos especialistas na técnica, e estão listados nas referências abaixo.

Os pró-fármacos preferidos também consistem de um composto de fórmula I em que uma amina pendente, tal como um grupo piridina, está alquilado com um grupo, tal como metilo, para formar um sal iónico de amónio quaternário. Os métodos para preparar um tal pró-fármaco a partir de um composto de fórmula I são conhecidos dos especialistas na técnica, e estão listados nas referências abaixo.

Qualquer composto que pode ser convertido in vivo para proporcionar o agente bioactivo (i. e., o composto de fórmula I) é um pró-fármaco.

Na técnica são bem conhecidas várias formas de pró-fármacos. Uma descrição compreensiva de pró-fármacos e derivados de pró-fármacos é dada em:

The Practice of Medicinal Chemistry, Camille G. Wermuth et al., Cap. 31, (Academic Press, 1996);

Design of Prodrugs, editado por H. Bundgaard, (Elsevier, 1985); A Textbook of Drug Design and Development, P. Krogsgaard-

Larson e H. Bundgaard, ed. Cap. 5, pág. 113-191 (Harwood

Academic Publishers, 1991); 15

Hydrolysis in Drug e Prodrug Metabolism, B. Testa e J. M.

Mayer, (Verlag Helvetica Chimica Acta AG, Zurich, Suíça;

Wiley-VCH, Weinheim, República Federal da Alemanha, 2003);

Ettmayer, P.; Amidon, G. L.; Clement, B.; Testa, B. "Lessons

Learned from Marketed and Investigational Prodrugs" J. Med.

Chem. 2004, 47 (10), 2393-2404;

Davidsen, S. K. et al. "N-(Acyloxyalkyl)piridinium Salts as

Soluble Prodrugs of a Potent Platelet Activating Factor

Antagonist" J. Med. Chem. 1994, 37 (26), 4423-4429.

As referidas referências são aqui incorporadas por referência.

Uma administração de um agente terapêutico da invenção inclui a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz do agente da invenção. O termo "quantidade terapeuticamente eficaz" como aqui utilizado refere-se a uma quantidade de um agente terapêutico para tratar ou prevenir uma patologia tratável pela administração de uma composição da invenção. Essa quantidade é a quantidade suficiente para exibir um efeito terapêutico ou preventivo ou melhorador detectável. O efeito pode incluir, por exemplo, o tratamento ou prevenção das patologias aqui listadas. A quantidade eficaz exacta para um indivíduo dependerá do tamanho e saúde do indivíduo, da natureza e gravidade da patologia a ser tratada, das recomendações do médico assistente e da terapia ou associação de terapias seleccionadas para administração. São contemplados todos os estereoisómeros dos compostos da presente invenção, quer em mistura quer na forma pura ou 16 substancialmente pura. Os compostos da presente invenção podem ter centros assimétricos em qualquer um dos átomos de carbono incluindo qualquer um dos substituintes R. Consequentemente, os compostos de fórmula I podem existir em formas enantioméricas ou diastereoméricas ou em misturas destes. Os processos para preparação podem utilizar racematos, enantiómeros ou diastereómeros como materiais de partida. Quando são preparados produtos diastereoméricos ou enantioméricos, eles podem ser separados por métodos convencionais, por exemplo, técnicas cromatográficas, HPLC quiral ou cristalização fraccionada.

Os compostos de fórmula I da invenção podem ser preparados como se mostra nos esquemas reaccionais seguintes e na descrição destes, assim como em processos relevantes publicados na literatura que possam ser utilizados por um especialista na técnica. Reagentes e processos ilustrativos para estas reacções surgem a seguir e nos Exemplos de trabalho.

ABREVIATURAS

As abreviaturas seguintes são utilizadas nos Esquemas, Exemplos e noutras partes desta descrição:

Ac = acetilo

AcOH = ácido acético

AcOEt = acetato de etilo

Boc = terc-butoxicarbonilo DCM = diclorometano

DlPEA = N,N-diisopropiletilamina DMF = N,N-dimetilformamida 17 EDAC = Cloridrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3- etilcarbodiimida

EtaN = trietilamina

Et20 = éter dietílico HOBt = hidrato de 1-hidroxibenzotriazole HPLC = cromatografia líquida de alta eficiência LAH = hidreto de alumínio-lítio MeOH = metanol MS ou Esp. Massa = espectrometria de massa

NaOH = hidróxido de sódio PG = grupo de protecção t.a. = temperatura ambiente TFA = ácido trifluoroacético THF = tetra-hidrofurano min = minuto(s) h = hora(s) L = litro mL = mililitro μΐϋ = microlitro g = grama mg = miligrama mol = moles mmol = milimole(s) nM = nanomolar

Os compostos da presente invenção podem ser preparados pelos processos ilustrados nos esquemas que se seguem. 18

MÉTODOS DE PREPARAÇÃO

Os compostos da presente invenção podem ser preparados por métodos como os ilustrados nos Esquemas 1 até 9 seguintes. Os solventes, temperaturas, pressões e outras condições reaccionais podem ser prontamente seleccionados por um especialista na matéria. Os materiais de partida estão comercialmente disponíveis ou podem ser facilmente preparados por um especialista na matéria utilizando métodos conhecidos. Para todos os esquemas e compostos descritos abaixo, R1, R2, R3, R6 e R7 são como descritos para um composto de fórmula I.

Segue-se as definições de símbolos utilizados ao longo dos Esquemas 1 até 9: PG grupo de protecção de azoto adequado, ilustrado pelos grupos benzilo, metoximetilo [MOM], benziloximetilo [BOM], 2-(trimetilsilil)etoximetilo [SEM], metoxietoximetilo [MEM] ou t-butilo; EE grupo de saída Sn2 ou Snl ilustrado por halogéneo (Cl, Br, I) e sulfonatos (-0S02-arilo (e. g., -0S02Ph ou -0S02PhCH3) , ou -0S02-alquilo (e. g., -OSO2CH3 ou -OSO2CF3) ) ; MM éster de boronato ou ácido borónico ou trialquilestanano; ou átomo de metal, tais como zinco, magnésio ou lítio como parte de um composto organometálico utilizado como um intermediário para reacções de condensação mediadas por metal de transição. 19 ESQUEMA 1

Os compostos de fórmula II estão comercialmente disponíveis ou disponíveis por meios conhecidos de um especialista na técnica. Os compostos de fórmula III podem ser preparados fazendo reagir compostos de fórmula II com um grupo de protecção apropriado tal como brometo de benzilo. Os grupos de protecção de azoto e métodos para proteger o azoto ilustrativos são semelhantes aos utilizados para proteger amina, tais como os descritos em T. W. Greene e P. G. M. Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, Inc, New York, 1991. Os grupos de protecção de azoto preferidos são os grupos benzilo, 20 terc-butilo, metoximetilo (MOM), metoxietoximetilo (MEM) e 2-(trimetilsilil)etoximetilo (SEM).

Os compostos de fórmula IV podem ser preparados a partir dos compostos de fórmula III via substituição selectiva do grupo de saida (EE) pela base conjugada de um álcool apropriado, RO-M, em que R é alquilo ou benzilo, e M é um metalóide, tais como Li, Na, Mg (halogeneto) e semelhantes, em solventes, tais como dioxano. Reacções semelhantes foram descritas na literatura (Riedl, Z. et al. Tetrahedron, 2002, 5645-5650).

Os compostos de fórmula V podem ser preparados pelas reacções de compostos de fórmula IV com R2 activado, tal como activado por ácidos borónicos, estanho, reagentes de Grignard, Zinco, Cu, etc., se necessário na presença de um catalisador apropriado tal, como Pd(PPh3)4. Os compostos de fórmula V também podem ser preparados a partir de um composto de fórmula IV via substituição do grupo de saida (EE) pela base conjugada de um composto R2-H, em que R2 é como anteriormente definido, utilizando uma base num solvente inerte. As bases ilustrativas incluem carbonato de sódio, carbonato de potássio, carbonato de césio, hidreto de sódio, hidreto de potássio ou alquil-litios.

Os compostos de fórmula VI, em que EE = Cl podem ser preparados fazendo reagir compostos de fórmula V com um agente de cloração tal como POCI3 num solvente inerte, tal como tolueno, a temperatura elevada.

Os compostos de fórmula VII, em que MM é um metal ou um éster de borato, podem ser preparados via litiação de um composto de fórmula VI em que EE é hidrogénio ou um halogéneo (cloro, bromo, iodo), e fazendo reagir o aril-litio resultante 21 com um derivado de borato apropriado ou com reagentes, tal como halogeneto de trialquil-estanho.

Os compostos de fórmula VIII podem ser preparados pelas reacções de compostos de fórmula VI com R1 activado, tal como activado por ácidos borónicos, estanho, reagentes de Grignard, Zinco, Cu, etc., se necessário na presença de um catalisador apropriado tal como Pd(PPh3)4. Os compostos de fórmula VIII também podem ser preparados a partir de um composto de fórmula VI via substituição do grupo de saida (EE) pela base conjugada de um composto R1—H, em que R1 é como anteriormente definido, utilizando uma base num solvente inerte.

Os compostos de fórmula VIII também podem ser preparados por um acoplamento catalisado por paládio ou níquel de um composto de fórmula VII, em que MM é um éster de borato com um R1 apropriadamente activado tal como halogeneto ou mesilato. Quando MM é um átomo de metal, tais como estanho, Zinco, magnésio e lítio, pode realizar-se reacções de acoplamento cruzado semelhantes utilizando R1 activado como halogeneto ou éster de boratos com um catalisador apropriado tal como tetraquis(trifenilfosfina)paládio (0) e diclorobis(trifenilfos-fina)níquel(II).

Os compostos de fórmula IX podem ser preparados removendo o grupo de protecção (PG) no composto VIII em condições ácidas (e. g., TFA para t-butilo ou Boc), básicas (e. g. NaOH para amida), hidrogenação catalítica (para benzilo) ou ácido de Lewis (e. g., AICI3 para benzilo).

Os compostos de fórmula X podem ser preparados fazendo reagir compostos de fórmula IX com um agente de cloração tal 22 como POCI3 num solvente inerte tal como tolueno a temperatura elevada.

Os compostos de fórmula XI podem ser preparados fazendo reagir compostos de fórmula X com hidrazina num solvente inerte tal como piridina a temperatura elevada.

Os compostos de fórmula XII podem ser preparados fazendo reagir compostos de fórmula XI com um agente de carbonilação tal como carbonildiimidazole, fosgénio, trifosgénio ou ureia num solvente inerte tal como tetra-hidrofurano.

Os compostos de fórmula I podem ser preparados fazendo reagir compostos de fórmula XII com R3-X (X é um grupo de saida tal como F, Cl, Br, I, -OMs, -OTos), ou epóxidos a temperatura elevadas. I também podem ser preparados fazendo reagir compostos de fórmula XII com R3-OH em condições de Mitsunobu. 23 ESQUEMA 2

Como ilustrado no Esquema 2, os compostos de fórmula XIII podem ser preparados a partir de compostos de fórmula III via substituição selectiva do grupo de saída (EE) pela base conjugada de um álcool apropriado, RO-M, em que R é alquilo ou benzilo, e M é um metal tal como Li, Na, Mg (halogeneto) e semelhantes em solventes tal como metanol. Estas substituições selectivas, por exemplo quando EE = Cl, foram descritas na literatura. (Riedl, Z. et al. Tetrahedron, 2002, 5645-5650).

Os compostos de fórmula XIV podem ser preparados pelas reacções de compostos de fórmula XIII com R1 activado, tal como 24 activado por ácidos borónicos, estanho, reagentes de Grignard, Zinco, Cu, etc., se necessário na presença de um catalisador apropriado tal como Pd(PPh3)4. Os compostos de fórmula XIV também podem ser preparados a partir de um composto de fórmula XIII via substituição do grupo de saída (EE) pela base conjugada de um composto R1-!!, em que R1 é como anteriormente definido, utilizando uma base num solvente inerte.

Os compostos de fórmula XV em que EE = Cl podem ser preparados fazendo reagir compostos de fórmula XIV com um agente de cloração tal como POCI3 num solvente inerte tal como tolueno a temperatura elevada. Alternativamente, os compostos de fórmula XV, em que EE = Cl, também podem ser preparados pelas reacções de compostos de fórmula III com R1 activado, tal como activado por ácidos borónicos, estanho, reagentes de Grignard, Zinco, Cu, etc., se necessário na presença de um catalisador apropriado tal como Pd(PPh3)4.

Os compostos de fórmula XVI, em que MM é um metal ou um éster de borato, podem ser preparados via litiação de um composto de fórmula XV, em que EE é hidrogénio ou um halogéneo (cloro, bromo, iodo) e fazendo reagir o aril-lítio resultante com um derivado de borato apropriado ou com reagentes tal como halogeneto de trialquil-estanho.

Os compostos de fórmula VIII podem ser preparados pelas reacções de compostos de fórmula XV com R2 activado, tal como activado por ácidos borónicos, estanho, reagentes de Grignard, Zinco, Cu, etc., se necessário na presença de um catalisador apropriado tal como Pd(PPh3)4. Os compostos de fórmula VIII também podem ser preparados a partir de um composto de fórmula XV via substituição do grupo de saída (EE) pela base conjugada 25 de um composto R2-H, em que R2 é como anteriormente definido, utilizando uma base num solvente inerte.

Os compostos de fórmula VIII também podem ser preparados por um acoplamento catalisado por paládio ou níquel de um composto de fórmula XVI, em que MM é um éster de borato com um R2 apropriadamente activado, tais como halogeneto ou mesilato. Quando MM é um átomo de metal, tais como estanho, zinco, magnésio e lítio, pode realizar-se reacções de acoplamento cruzado semelhantes, utilizando R2 activado, tais como halogeneto ou éster de boratos, com um catalisador apropriado, tais como tetraquis(trifenilfosfina)paládio(0) e diclorobis(trifenilfos- fina)níquel(II).

Os compostos de fórmula I podem ser preparados a partir de um composto de fórmula VIII como se descreveu no Esquema 1. 26 ESQUEMA. 3

Como ilustrado no Esquema 3, compostos de fórmula XVII podem ser preparados a partir de um composto de fórmula XIII (do Esquema 2) via substituição do grupo R (R = alquilo) utilizando bases tal como hidróxido de sódio num solvente adequado tal como água. 0 grupo hidroxilo em XVII pode ser activado fazendo reagir com reagentes tal como anidrido de triflurometanossulfónico na presença de uma base adequada tal como trietilamina. Esta unidade activada pode ser selectivamente acoplada com R2 activado, tal como activado por ácidos borónicos, estanho, reagentes de Grignard, zinco, Cu, etc., se necessário na 27 presença de um catalisador apropriado tal como Pd(PPh3)4 para proporcionar compostos XVIII.

Os compostos de fórmula XIX também podem ser preparados por tratamento de compostos de fórmula V com P0C13 a temperatura elevadas.

Os compostos de fórmula XIX podem ser preparados a partir de compostos XVIII numa sequência de dois passos: (a) removendo o grupo de protecção (PG) no composto XVIII em condições ácidas (e. g., TFA para t-butilo ou Boc-), básicas (e. g., NaOH para amida), hidrogenação catalítica (para benzilo) ou ácido de Lewis (e. g.f AICI3 para benzilo), seguido de (b) fazendo reagir o intermediário resultante com um agente de cloração tal como P0C13 num solvente inerte tal como tolueno a temperatura elevada. Em determinados casos, o tratamento directo de XVIII com agentes de cloração tal como POCI3 a temperaturas mais elevadas pode proporcionar compostos de fórmula XIX num passo a partir de XVIII.

Os compostos de fórmula XX podem ser preparados fazendo reagir compostos de fórmula XIX com hidrazina em solventes seleccionados, tal como isobutanol.

Os compostos de fórmula XXI podem ser preparados fazendo reagir compostos de fórmula XX com um agente de carbonilação tal como carbonildiimidazole, fosgénio, trifosgénio ou ureia num solvente inerte tal como tetra-hidrofurano.

Os compostos de fórmula XXII podem ser preparados fazendo reagir compostos de fórmula XXI com R3-X (X é um grupo de saída tal como F, Cl, Br, I, -OMs, -OTos) ou epóxidos a temperaturas 28 elevadas. XXII também podem ser preparados fazendo reagir compostos de fórmula XXI com R3-OH em condições de Mitsunobu.

Os compostos de fórmula I podem ser preparados pelas reacções de compostos de fórmula XXII com R1 activado, tal como activado por ácidos borónicos, estanho, reagentes de Grignard, Zinco, Cu, etc., se necessário na presença de um catalisador apropriado tal como Pd(PPh3)4. Os compostos de fórmula I também podem ser preparados a partir de um composto de fórmula XXII via substituição do grupo de saída (EE) pela base conjugada de um composto R1-!!, em que R1 é como anteriormente definido, utilizando uma base num solvente inerte.

Os compostos de fórmula XXIII, em que MM é um metal ou um éster de borato, podem ser preparados via litiação de um composto de fórmula XXII em que EE é hidrogénio ou um halogéneo (cloro, bromo, iodo), e fazendo reagir o aril-lítio resultante com um derivado de borato apropriado ou com reagentes, tal como halogeneto de trialquil-estanho.

Os compostos de fórmula I também podem ser preparados por um acoplamento catalisado por paládio ou níquel de um composto de fórmula XXIII em que MM é um éster de borato com um R1 activado apropriado, tais como halogeneto ou mesilato. Quando MM é um átomo de metal, tais como estanho, zinco, magnésio e lítio, pode realizar-se reacções de acoplamento cruzado semelhantes utilizando R1 activado, tais como halogeneto ou éster de boratos com um catalisador apropriado, tais como tetraquis(trifenilfosfina)paládio(0) e diclorobis(trifenilfos-fina)níquel(II). 29

Os compostos de fórmula I também podem ser preparados a partir de XXI numa sequência de dois passos: (a) acoplamento cruzado de XXI com um R1 activado, tal como activado por ácidos borónicos, estanho, reagentes de Grignard, Zinco, Cu, etc., se necessário na presença de um catalisador apropriado tal como Pd(PPh3)4 ou substituição de EE em XXI com uma base conjugada de R1-H, para proporcionar compostos XII, seguido de (b) reacção dos compostos de fórmula XII com R3-X (X é um grupo de saida, tais como F, Cl, Br, I, -OMs, -OTos) ou epóxidos a temperatura elevadas. ESQUEMA. 4

30

Como ilustrado no Esquema 4, os compostos de fórmula XXIV podem ser preparados a partir de compostos XV numa sequência de dois passos: (a) remoção do grupo de protecção (PG) no composto XV em condições ácidas (e. g.r TFA para t-butilo ou Boc-) , básicas (e. g., NaOH para amida), hidrogenação catalítica (para benzilo), ou ácido de Lewis (e. g., A1C13 para benzilo), seguida de (b) reacção do intermediário resultante com um agente de cloração tal como POCI3 num solvente inerte, tal como tolueno, a temperatura elevada.

Os compostos de fórmula XXV podem ser preparados fazendo reagir compostos de fórmula XXIV com hidrazina em solventes seleccionados, tal como isobutanol.

Os compostos de fórmula XXVI podem ser preparados fazendo reagir compostos de fórmula XXV com um agente de carbonilação, tais como carbonildiimidazole, fosgénio, trifosgénio ou ureia num solvente inerte tal como tetra-hidrofurano.

Os compostos de fórmula I alvos podem ser preparados a partir de compostos de fórmula XXVI seguindo uma sequência de reacções análoga à descrita no Esquema 3 via intermediários XII, XXVII e XXVIII. 31 ESQUEMA. 5

Como ilustrado no Esquema 5, quando R1 e R2 são iguais, os compostos de fórmula VIII podem ser preparados pelas reacções de compostos de fórmula III com R1 e R2 activados, tal como activado por ácidos borónicos, estanho, reagentes de Grignard, zinco, Cu, etc., se necessário na presença de um catalisador apropriado tal como Pd(PPh3)4. Os compostos de fórmula VIII também podem ser preparados a partir de um composto de fórmula III via substituição do grupo de saida (EE) pela base conjugada de um composto R1-!! e R2-H, em que R1 e R2 são como anteriormente definidos, utilizando uma base num solvente inerte.

Os compostos de fórmula I alvos podem ser depois preparados a partir de compostos de fórmula VIII seguindo uma sequência de reacções análoga à descrita no Esquema 1. 32 ESQUEMA. 6 R3 / EE EE N—N Rl u rV rV Ύ T como no Esquema 1 [I ' EE^ f" I R2 R2 I R6 R6 R6 XXIV X I Como ilustrado no Esquema 6, os compostos de fórmula X podem ser preparados pelas reacções de compostos de fórmula XXIV com R2 activado, tal como activado por ácidos borónicos, estanho, reagentes de Grignard, Zinco, Cu, etc., se necessário na presença de um catalisador apropriado tal como Pd(PPh3)4. Os compostos de fórmula I podem ser depois preparados a partir de compostos de fórmula I seguindo uma sequência de reacções análoga à descrita no Esquema 1. 33 ESQUEMA 7 R3 R3

Como ilustrado no Esquema 7, os análogos possuindo determinados subconjuntos de R1 e R2 e R3 arbitrariamente definidos podem ser transformados noutros análogos possuindo determinados outros subconjuntos definidos de R1 e R2 e R3 por manipulação dos grupos funcionais embebidos nestes grupos R. Por exemplo, quando Rla, R2a, R3a são grupos tais como amino, aminoarilo, aminoalquilo ou aminoariloxilo, eles podem ser feitos reagir com ácidos carboxilicos ou cloretos ácidos ou cloretos de sulfonilo, para proporcionar derivados de amida ou sulfonamida. Uma tal manipulação também pode ser realizada por síntese paralela.

Além disso, quando Rla, R2a ou R3a estão substituídos com um grupo activado, tais como um halogéneo ou ácido borónico, pode 34 realizar-se reacções de acoplamento cruzado adicionais catalisadas por metal, para proporcionar conjuntos adicionais de análogos como descritos pela Fórmula I. Uma tal manipulação também pode ser realizada por sintese paralela. ESQUEMA 8

Como ilustrado no Esquema 8, compostos de fórmula I podem ser preparados por sintese paralela utilizando sintese em fase sólida. Por exemplo, os compostos de fórmula XXI podem ser feitos reagir com uma resina ligada a polímero para proporcionar compostos XXIX. Os compostos de fórmula XXX podem ser preparados pelas reacções de compostos de fórmula XXIX com R1 activado, tal como activado por ácidos borónicos, estanho, reagentes de Grignard, Zinco, Cu, etc., se necessário na presença de um 35 catalisador apropriado tal como Pd(PPh3)4. A remoção da resina ligada a polímero proporciona então compostos de fórmula XII. Os compostos de fórmula XII podem ser convertidos nos compostos de fórmula I como se mostra no Esquema 1.

Os compostos de fórmula I alvos também podem ser preparados a partir de compostos de fórmula XXVI seguindo uma sequência de reacções como se descreveu acima. ESQUEMA 9

Os compostos de fórmula XXXIII podem ser submetidos a reacção com um Rê activado, tal como R6-M, em que M é um metalóide tal como Li, Na, Mg(halogeneto) e semelhantes em solventes, tal como THF, para dar compostos de fórmula XXXIV, os quais são reconhecidos como um subconjunto de compostos de fórmula I, em que n é uma ligação simples e R7 é hidrogénio. Um composto de fórmula XXXIV pode ser feito reagir com um oxidante, tal como oxigénio atmosférico ou 2,3-dicloro-5,6-diciano-hidroquinona e semelhantes, para dar compostos de fórmula I, em que n é uma ligação dupla e R7 está ausente. A composto de fórmula XXXIV pode ser feito reagir com um agente de alquilação, tal como um halogeneto de alquilo, ou um grupo de acilação, tais como anidrido acético, cloreto de benzoílo e semelhantes, para 36 dar compostos de fórmula I. Um composto de fórmula XXXIV pode ser feito reagir com um reagente de fosforilação, tais como POCI3 ou C1-P(0) (OEth para dar, após hidrólise, compostos de fórmula I. Exemplos de transformações de aminas em fosfonamidatos podem ser encontrados em: Wang R. et al. J. Med. Chem. 2003, 46 (22), 4799-4802; Guillaume, Η. A. J. Org. Chem. 1989, 54 (24), 5731-5736. Um composto de fórmula XXXIV pode ser feito reagir com um agente de sulfonilação, tal como complexo de piridina-S03 ou Cl-S(0)mR8, para dar compostos de fórmula I. Exemplos de tais transformações podem ser encontradas em Tschamber, T. e Streith, J. Heterocycles 1990, 30 (1), 551-559; Couloigner, E., Cartier, D., Labia, R. Bioorg. Med. Chem. Lett. 1999, 9, 2205-2206; Tschamber, T. et al. Heterocycles 1985, 23 (10), 2589-2601.

Pode utilizar-se síntese paralela na preparação de compostos em que, por exemplo, os intermediários possuam um centro reaccional activado: tais como, mas não se limitando, ao azoto da triazolona, um cloreto de heteroarilo reactivo para química de condensação de Suzuki ou um ácido carboxílico para química de condensação de amida.

EXEMPLOS

Os Exemplos seguintes servem para ilustrar melhor, mas não restringem, algumas das formas de realização preferidas da invenção. 37 Métodos Analíticos de HPLC e HPLC/MS Utilizados na Caracterização de Exemplos A HPLC analítica foi realizada em cromatógrafos líquidos Shimadzu LC10AS. A HPLC/MS analítica foi realizada em cromatógrafos líquidos Shimadzu LC10AS e Espectrómetros de Massa Waters ZMD utilizando os métodos seguintes: A menos que indicado de outro modo, o método A é utilizado na caracterização de intermediários ou compostos finais dos exemplos listados na secção experimental ou nos comprimidos. Método A. Gradiente linear de 0 até 100% de solvente B ao longo de 4 min, mantendo 1 min a 100% de B;

Visualização por UV a 220 nm Coluna: Fenomenex Luna C18 4,6 X 50 mm Caudal: 4 mL/min

Solvente A: 0,2% de ácido fosfórico, 90% de água, 10% de metanol Solvente B: 0,2% de ácido fosfórico, 90% de metanol, 10% de água Método B. Gradiente linear de 0 até 100% de solvente B ao longo de 8 min, mantendo 3 min a 100% de B;

Visualização por UV a 220 nm

Coluna: Fenomenex Luna C18 4,6 x 75 mm ou Zorbax SB C18 4,6 x 75 mm

Caudal: 2,5 mL/min 38

Solvente A: 0,2% de ácido fosfórico, 90% de água, 10% de metanol Solvente B: 0,2% de ácido fosfórico, 90% de metanol, 10% de água Método C. Gradiente linear de 10 até 100% de solvente B ao longo de 4,0 min, mantendo 0,5 a 100% de B;

Visualização por UV a 220 nm Coluna: Xterra MS-C18, 4,6 X 50 mm Caudal: 4 mL/min

Solvente A: 0,1% de ácido trifluoroacético, 90% de água, 10% acetonitrilo

Solvente B: 0,1% de ácido trifluoroacético, 10% de água, 90% acetonitrilo Método D. Gradiente linear de 0 até 100% de solvente B ao longo de 4 min, mantendo 1 min a 100% de B;

Solvente A: 0,1% de ácido trifluoroacético, 90% de água, 10% de metanol

Solvente B: 0,1% de ácido trifluoroacético, 90% de metanol, 10% de água 39 Método E. Gradiente linear de 0 até 100% de solvente B ao longo de 4 min, mantendo 1 min a 100% de B;

Solvente A: NH4OAc 10 mM, 90% de água, 10% de metanol Solvente B: NH4OAc 10 mM, 90% de metanol, 10% de água Método F. Gradiente linear de 1 até 100% de solvente B ao longo de 2,35 min, mantendo 0,5 min a 100% de B;

Visualização por UV a 220 nm Coluna: Xterra MS-C18, 2,1 x 50 mm Caudal: 1,0 mL/min

Solvente A: 0,1% de ácido trifluoroacético, 100% de água Solvente B: 0,1% de ácido trifluoroacético, 100% de acetonitrilo Método G. Gradiente linear de 10 até 100% de solvente B ao longo de 2,0 min, mantendo 0,56 min a 100% de B;

Visualização por UV a 220 mm Coluna: Xterra MS-C18, 4,6 x 50 mm Caudal: 1,0 mL/min

Solvente A: NH4OAc 10 mM, 95% de água, 5% de acetonitrilo Solvente B: NH4OAc 10 mM, 95% de acetonitrilo, 5% de água 40 RMN Utilizado na Caracterização de Exemplos

Os espectros de RMN de ΧΗ foram obtidos com espectrómetros de transformadas de fourier Bruker ou JOEL a operarem às seguintes frequências: RMN de 1H: 400 MHz (Bruker), 400 MHz (JOEL) ou 500 MHz (JOEL); RMN de 13C: 100 MHz (Bruker), 100 MHz (JOEL) ou 125 MHz (JOEL). Os dados espectrais são descritos como desvios químicos (multiplicidade, número de hidrogénios, constantes de acoplamento em Hz) e são indicados em ppm (unidades δ) em relação a um padrão interno (tetrametilsilano = 0 ppm) para os espectros de RMN de 1H, ou são referenciados ao pico do solvente residual (2,49 ppm para o CD2HSOCD3, 3,30 ppm para o CD2HOD, 7,24 ppm para o CHCI3, 39,7 ppm para o CD3SOCD3, 49,0 ppm para 0 CD3OD, 77,0 ppm para o CDCI3) . Todos os espectros de RMN de 13C foram desacoplados em protão. 41 EXEMPLO 1

Preparação de 7,8-bis(4-clorofenil)-[l,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

IA. Preparação de 2-Benzil-4,5-dibromopiridazin-3(2H)-ona o

A uma solução de dibromopiridazinona (50,0 g, 197,0 mmol) em DMF (200 mL) à t.a. adicionou-se K2C03 (32,6 g, 236, 4 mmol). Adicionou-se brometo de benzilo (37,0 g, 216,7 mmol) via uma seringa. Agitou-se a suspensão esverdeada resultante à t.a. durante 6 h até toda a piridazinona ter sido consumida como determinado por HPLC. Verteu-se então a mistura reaccional para um Erlenmeyer contendo água (500 mL) sob agitação. Formou-se um sólido de cor beije. Agitou-se a suspensão durante 15 min à t.a. e filtrou-se em seguida. Lavou-se o sólido abundantemente com água até não ser evidente qualquer cor no filtrado. Secou-se o sólido numa estufa de vácuo a 50 °C, dum dia para o outro. O composto em epígrafe, 2-benzil-4,5-dibromopiridazin-3(2H)-ona, (68,0 g, 196,5 mmol) estava >95 puro, como determinado por HPLC e foi obtido como um sólido. MS: M+H = 343. RMN de 1H (CDCI3, 500 42 ΜΗζ): δ 7,80 (1Η, s) , 7,45 (2Η, d, J=5,0 Hz), 7,29-7,36 (3H, m), 5,31 (2H, s). 1B. Preparação de 2-Benzil-4,5-bis(4-clorofenil)piridazin-3(2H)-ona

A uma suspensão de 2-benzil-4,5-dibromopiridazin-3(2H)-ona (40 g, 116,0 mmol), em tolueno (300 mL) adicionou-se Pd(PPh3)4 (4,0 g, 3,5 mmol) sob uma atmosfera de árgon. Adicionou-se subsequentemente, em porções, ácido 4-clorofenilborónico (40,0 g, 255,2 mmol). Sob agitação vigorosa, adicionou-se Na2C03 (27,0 g, 255,2 mmol) dissolvido em água (50 mL) à suspensão. Borbulhou-se árgon através desta suspensão durante 10 min., antes de se colocar o balão num banho de óleo pré-aquecido a 120 °C. A reacção aqueceu-se a refluxo durante 6 h. Deixou-se então que a reacção arrefecesse até à t.a. e verteu-se para água (500 mL) . Extraiu-se a mistura aquosa com AcOEt (3 x 300 mL) . Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com NaOH (0,5 N, 200 mL) e água (2 x 500 mL) . Filtrou-se a camada orgânica através de um tampão de sílica gel (50 g) num funil de vidro sinterizado para eliminar impurezas escuras. Evaporou-se então os solventes sob pressão reduzida. O xarope espesso resultante continha predominantemente o composto em epígrafe 2-benzil-4,5-bis (4-clorofenil)piridazin-3(2H)-ona o qual podia ser utilizado 43 directamente na reacção seguinte, 1C. MS: M+H = 407. RMN de 2H (CDCI3, 500 MHz) : δ 7,87 (1H, s) , 7,54 (2H, d, J=5,0 Hz) , 7,32- 7,38 (3H, m), 7 ,22- 7,28 (4H, m) , 7,12 (2H, d, J=10,0 Hz) , 7,03 (2Η, d, J=10 Hz), 5,40 (2H, s) . 1C. Preparação de 4,5-bis(4-clorofenil)piridazin-3(2H)-ona

Dissolveu-se a 2-benzil-4,5-bis(4-clorofenil)piridazin-3(2H)-ona em bruto da reacção anterior em tolueno (350 mL) . Adicionou-se então cloreto de aluminio (AICI3, 46,3 g, 348,0 mmol) à solução de tolueno, produzindo uma exotérmica. Colocou-se então a reacção num banho de óleo pré-aquecido a 75 °C durante 3 h. Após este periodo, verteu-se a mistura reaccional para água gelada (1000 mL) e extraiu-se a mistura resultante com AcOEt (3 x 500 mL) . Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com água (500 mL) , filtrou-se em seguida através de um tampão de sílica gel (50 g) para eliminar os sais de alumina residuais. Evaporou-se os solventes orgânicos sob pressão reduzida quase até à secura. Adicionou-se éter dietílico (Et20, 500 mL) sob agitação. Depois de agitar durante 15 min à t.a., adicionou-se subsequentemente hexano (1000 mL) . Recolheu-se o sólido beije resultante por filtração e lavou-se subsequentemente com uma mistura hexano-éter (8:2). O composto em epígrafe, 4,5-bis (4-clorofenil)piridazin-3(2H) -ona, (33,0 g, 44 92%) foi obtido como um sólido. MS: M+H = 317. RMN de 1H (CDCI3, 500 MHz) : δ 11,94 (1H, 1), 7,89 (1H, s), 7,23-7,32 (4H, m) , 7,18 (2H, d, J=10,0 Hz), 7,07 (2H, d, J=10 Hz). 1D. Preparação de 3-Cloro-4,5-bis(4-clorofenil)piridazina

Suspendeu-se 4,5-bis (4-clorofenil)piridazin-3(2H)-ona (16,5 g, 52,2 mmol) em tolueno (50 mL) . À solução resultante adicionou-se piridina (8,3 mL, 104,4 mmol), seguida da adição de POCI3 (14,3 mL, 156,6 mmol). Colocou-se a mistura reaccional num banho de óleo pré-aquecido a 110 °C. Após 4 h, a mistura reaccional arrefeceu-se até à t.a., verteu-se então sobre 500 g gelo para desactivar o excesso de P0C13. Extraiu-se a mistura escura com AcOEt (2 x 300 mL) . Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com água (500 mL) e filtrou-se através de um tampão de sílica gel (50 g). Concentrou-se o filtrado sob pressão reduzida para dar o composto em epígrafe, 3-cloro-4,5-bis(4- clorofenil)piridazina como um sólido colorido pálido (16,0 g, 92%). MS: M+H = 335. RMN de XH (CDC13, 500 MHz): δ 9,24 (1H, s), 7,35 (2H, d, J=10 Hz), 7,26 (2H, d, J=10,0 Hz), 7,08-7,16 (4H, m) . 45 1E. Preparação de 1-(4,5-Bis(4-clorofenil)piridazin-3- il)hidrazina Ck ^ nhnh2 cy, jCr" Cl Dissolveu-se 3-Cloro-4,5-bis(4-clorofenil)piridazina (10,0 g, 30,0 mmol) em piridina (30 mL) e adicionou-se mono-hidrato de hidrazina (4,5 g, 90,0 mmol). Aqueceu-se a mistura reaccional a refluxo durante 3 h e adicionou-se então a água (100 mL) . Recolheu-se o sólido colorido pálido por filtração e lavou-se abundantemente com água. Secou-se o produto numa estufa de vácuo para dar o composto em epigrafe, 1-(4,5-bis(4-clorofenil)piridazin-3-il)hidrazina (9,5 g, 96%). MS: M+H = 331. RMN de "H (DMSO-de, 500 MHz) : δ 8,59(1H, s) , 8,56 (1H, 1), 7,40 (2H, d, J=10 Hz), 7,35 (2H, d, J=10,0 Hz), 7,14-7,16 (4H, m) . 1F. Preparação de 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona o o o A uma solução de carbonildiimidazole (CDI) (1,7 g, 10,5 mmol) em THF (20 mL) adicionou-se 1-(4,5-bis (4- clorofenil)piridazin-3-il)hidrazina (0,7 g, 2,1 mmol). Agitou-se 46 a solução castanha resultante à t.a. durante 15 min. Após este período, verteu-se a solução reaccional para água (50 mL) . Recolheu-se o sólido colorido pálido resultante por filtração. Utilizou-se água para lavar abundantemente o sólido para proporcionar 7,8-bis (4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3—

b]piridazin-3(2H)-ona (0,75 g, 100%). MS (M+H)=357; RMN de 1H

m), 7,35 (2H, d, J=10,0 Hz), 7,27 (2H, d, J=10,0 Hz). EXEMPLO 2

Preparação de 2-(4-Clorobenzil)-7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Cl

Cl A uma solução de 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (0,4 g, 1,1 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1 em DMF (5 mL) adicionou-se K2CO3 (0,46 g, 3,3 mmol) e brometo de 4-clorobenzilo (0,28 g, 1,3 mmol). Aqueceu-se a mistura reaccional a 60 °C durante 20 min. Após este período, adicionou-se água (50 mL) à mistura reaccional e recolheu-se 0 sólido resultante por filtração. O produto final (0,32 g, 60%) foi obtido por purificação utilizando HPLC preparativa de fase inversa. MS (M+H) = 481; RMN de 2H (CDC13) : δ 47 8,18 (1Η, s), 7,25-7,40 (10H, m) , 7,08 (2H, d, J=10,0 Hz), 5,18 (2H, s) . EXEMPLO 3

Preparação de 7,8-Bis(4-clorofenil)-2-((5-(trifluorome-til)piridin-2-il)metil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução de 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (100 mg, 0,28 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1, Ph3P (220 mg, 0,84 mmol) e (5-trifluorometil-piridin-2-il)metanol (50 mg, 0,28 mmol) em THF (2,0 mL) adicionou-se solução de azodicarboxilato de dietilo a 40% em peso (DEAD) em tolueno (0,33 mL, 0,84 mmol) à t.a. sob árgon. Agitou-se a reacção à t.a. durante 30 min. Adicionou-se então água (5,0 mL) e extraiu-se a mistura resultante com AcOEt (3x5 mL). Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com água (2 x 5 mL) seguida de NaCl aguoso saturado (2x5 mL) . Concentrou-se as camadas orgânicas reunidas sob pressão reduzida para se obter o produto em bruto. Este produto em bruto foi purificado utilizando HPLC preparativa de fase inversa para dar o composto em epígrafe 7,8-bis(4-clorofenil)-2-((5-(trifluorometil)piridin-2-il)metil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (69,2 mg, 48 48%) como um sólido amarelo. MS (M+H) = 516; RMN de 1H (CDCI3) : δ 8,83 (1H, s), 8,20 (1H, s), 7,93 (1H, d, J=8,2 Hz), 7,40 (1H, d, J=10,0 Hz), 7,26-7,34 (6H, m) , 7,11 (2H, d, J=10,0 Hz), 5,47 (2H, s) . EXEMPLO 4

Preparação de 7,8-Bis(4-clorofenil)-2-((1-(pirimidin-2-il)piperidin-4-il)metil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

O composto em epígrafe foi preparado utilizando 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (50 mg, 0,14 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1, Ph3P (110 mg, 0,42 mmol) e (1-(pirimidin-2-il)piperdin-4-il-)metanol (28 mg, 0,14 mmol) em THF (1,0 mL) e seguindo o processo descrito no Exemplo 2. O composto em epígrafe, 7,8-bis(4-clorofenil)-2-((1-(pirimidin-2-il)piperidin-4-il)metil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (31 mg, 42%) foi obtido como um pó amarelo. MS M+H = 532; RMN de ΧΗ (CDC13) δ 8,28 (2H, d, J=5,0 Hz), 8,16 (1H, s), 7,28-7,36 (6H, m), 7,11 (2H, d, J=10,0 Hz), 6,44 (1H, t, J=5,0 Hz), 4,75 (2H, d, J=15,0 Hz), 3,96 (2H, d, J=10,0 Hz), 2,85 (2H, m) , 2,20-2,30 (1H, m) , 1,74 (2H, d, J=10,0 Hz), 1,30-1,40 (2H, m). 49 EXEMPLO 5

Preparação de (R)-7,8-bis(4-clorofenil)-2-((5-oxopirrolidin-2-il)metil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

0 composto em epígrafe foi preparado utilizando 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (50 mg, 0,14 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1, Ph3P (110 mg, 0,42 mmol) e (R)-5-(hidroximetil)pirrolidin-2-ona (17 mg, 0,14 mmol) em THF (1,0 mL) e seguindo o processo descrito no Exemplo 2. O composto em epígrafe, (R)-7,8-bis (4-clorofenil)-2-((5-oxopirrolidin-2-il)metil)-[1,2,4]triazolo[4,3— b]piridazin-3 (2H) -ona, (38,5 mg, 85%) foi obtido como um pó amarelo. MS M+H = 454; RMN de (CDC13) δ 8 ,15 (1H, s) , 7,24- 7,36 (6H, m) , 7,09 (2H, d, J=10,0 Hz), 6,59 (1H, s) , 4,17 -4,20 (1H, m) , 4,03-4,10 (2H, m) , 2,25-2,35 (3H, m) , 1, 92' -2,02 (1H, m) . 50 EXEMPLO 6

Preparação de (R)-2-((l-Benzilpirrolidin-2-il)metil)-7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

0 composto em epígrafe foi preparado utilizando 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3 (2H)-ona, (50 mg, 0,14 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1, Ph3P (110 mg, 0,42 mmol) e (S)-l-benzil-2-pirrolidinametanol (27 mg, 0,14 mmol) em THF (1,0 mL) e seguindo o processo descrito no Exemplo 2. O composto em epígrafe, (R)-2-((l-benzilpirrolidin-2-il)metil)-7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (8 mg, 11%) foi obtido como um pó amarelo. MS M+H = 530; RMN de 2H (CDC13) Ô 8,14 (1H, s) , 7,22-7,38 (11H, m), 7,10 (2H, d, J=10,0 Hz), 4,61-4,63 (1H, m) , 3,50-3,56 (2H, q, J=13,2 Hz) , 3,01 (1H, d, J=10,0 Hz), 2,85 (1H, d, J=10,0 Hz) , 2,37-2,42 (1H, t, J=10,7 Hz), 1,99-2,02 (2H, m) , 1,82-1,95 (1H, m), 1,70- 1,80 (2H, m) . 51 EXEMPLO 7

Preparação de 7,8-Bis(4-clorofenil)-2-((6-morfolinopiridin-3-il)metil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

0 composto em epígrafe foi preparado utilizando 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3 —b]piridazin-3(2H)-ona, (50 mg, 0,14 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1, Ph3P (110 mg, 0,42 mmol) e (6-morfolinopiridin-3-il)metanol (29 mg, 0,14 mmol) em THF (1,0 mL) e seguindo o processo descrito no Exemplo 2. O composto em epígrafe, 7,8-bis(4-clorofenil)-2-((6-morfolinopiridin-3-il)metil)-[1,2,4]triazolo[4,3—b]piridazin-3(2H)-ona, (20,5 mg, 11%) foi obtido como um pó amarelo. MS M+H = 533; RMN de 2H (CDC13) 8,26 Ô (1H, d, J=5,0 Hz), 8,15 (1H, s), 7,65 (1H, d, J=5,0 Hz), 7,25-7,36 (6H, m) , 7,09 (2H, d, J=10,0 Hz), 6,60 (1H, d, J=10,0 Hz), 5,10 (2H, s) , 3,80 (4H, t, J=5,0 Hz), 3,50 (4H, t, J=5,0 Hz). 52 EXEMPLO 8

Preparação de 7,8-bis(4-clorofenil)-2-(piridina-N-óxido-4-ilmetil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

0 composto em epígrafe foi preparado utilizando 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (40 mg, 0,11 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1, Ph3P (32 mg, 0,12 mmol) e N-óxido de 4-piridilcarbinol (15 mg, 0,12 mmol) em THF (1,0 mL) e seguindo o processo descrito no Exemplo 2. O composto em epígrafe, 7,8-bis (4-clorofenil)-2-(piridina-N-óxido-4-ilmetil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (14 mg, 27%) foi obtido como um sólido amarelo. MS M+H = 4 64 ; RMN de ΧΗ (CDC13) δ 8,20 (1H, S), 8,15 (2H, d, J=5,0 Hz) , 7,28- 7,36 (6H, m) , 7,25 (2 H, d, J=5,0 Hz) , 7,10 (2H, d, J=5,0 Hz) , 5,16 (2H, s) . 53 EXEMPLO 9

Preparação de 7,8-Bis(4-clorofenil)-2-(2-morfolinoetil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Cl

Cl A 7,8-bis(4-clorofenil)-[l,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin- 3(2H)-ona, (40 mg, 0,11 mmol) , preparada como se descreveu no Exemplo 1, em DMF (1 mL) adicionou-se Cs2CO3(110 mg, 0,33 mmol) e cloridrato de 4-(2-cloroetil)morfolina (31 mg, 0,166 mmol). Agitou-se a mistura reaccional a 70 °C durante 30 min sob árgon. Após este período, diluiu-se a mistura reaccional com água (5 mL) . Extraiu-se a solução resultante com AcOEt (3x5 mL) . Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com água (2x5 mL) e cloreto de sódio aquoso saturado (2x5 mL) . Concentrou-se a camada orgânica. O material em bruto resultante foi purificado por HPLC preparativa para dar o composto em epígrafe, 7,8-bis(4-clorofenil)-2-(2-morfolinoetil)-[1,2,4]triazolo[4,3—b]piridazin-3(2H)-ona (35 mg, 67%) como um sólido amarelo. MS M+H = 470; RMN de ^ (CDC13) δ 8,17 (1H, s) , 7,28-7, 34 (6H, m) , 7,10 (2H, d, J=10,0 Hz), 4,44 (4H, t, J=5,0 Hz), 3,96-4,01 (4H), 3,50 (4H, t, J=5,0 Hz) . 54 EXEMPLO 10

Preparação de 7,8-bis(4-clorofenil)-2-ciclo-hexil- [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

0 composto em epígrafe foi preparado utilizando 7,8-bis (4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (40 mg, 0,11 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1, CS2CO3 (44 mg, 0,135 mmol), bromociclo-hexano (100 mg, 0,61 mmol) em DMF (1 mL) e seguindo o processo descrito no Exemplo 9. O composto em epígrafe, 7,8-bis(4-clorofenil)-2-ciclo-hexil- [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (26 mg, 54%) foi obtido como um produto liofilizado. MS M+H = 439; RMN de XH (CDCI3) δ 8,17 (1H, s), 7,30-7,38 (6H, m) , 7,11 (2H, d, J=5,0

Hz), 4,38-4,41 (1H, m) , 1,75-2,0 (6H, m) , 1, 65-1, 75 (1H, m) , 1,35-1,50 (2H, m), 1,1-1,30 (1H, m). 55 EXEMPLO 11

Preparação de 2,7,8-tris(4-clorofenil)-[l,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Cl

Cl A uma solução de 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (50 mg, 0,14 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1 e ácido 4-clorofenilborónico (44 mg, 0,28 mmol) em piridina (1,5 mL) adicionou-se acetato de cobre (II) (51 mg, 0,28 mmol) seguido de trietilamina (0,04 mL, 0,28 mmol) e peneiros moleculares de 3 Â (100 mg) sob árgon. Agitou-se a mistura reaccional a refluxo durante 6 h. Após este periodo, arrefeceu-se a mistura reaccional até à t.a. e diluiu-se com água (5 mL) . Extraiu-se a mistura resultante com AcOEt (3x5 mL). Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com água (2x5 mL) e NaCl aquoso saturado (2x5 mL). Secou-se a camada orgânica sobre MgS04, filtrou-se e concentrou-se para se obter um produto em bruto. O produto em bruto foi purificado por HPLC preparativa para dar 2, 7,8-tris(4-clorofenil)- [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (5 mg, 8%) como um produto liofilizado amarelo. HPLC: 4,35 min; M+H = 467; RMN de XH (CDC13) δ 8,22 (1H, s), 8,10 (2H, d, J=10,0 Hz), 7,43 (2H, d, J=10,0 Hz), 7,35-7,38 (6H, m) , 7,15 (2H, d, J=10,0 Hz). 56 EXEMPLO 12

Preparação de 7,8-Bis(4-clorofenil)-2-(3-fenilpropil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução de 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (40 mg, 0,11 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1, 3-fenilpropan-l-ol (0,018 mL, 0,13 mmol) e trifenilfosfina (86 mg, 0,32 mmol) em tetra-hidrofurano (2 mL) adicionou-se azodicarboxilato de dietilo (0,15 mL, 0,38 mmol). Após 1 h, concentrou-se a solução. O material em bruto foi purificado por HPLC preparativa para dar o composto em epígrafe, 7,8-bis(4-clorofenil)-2-(3-fenilpropil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (17,9 mg, 34%) como um sólido amarelo. MS M+H = 475; RMN de ΧΗ (CDC13) 8,18 (1H, s), 7,3-7,1 (13H, m), 4,13 (2H) , 2,70 (2H) , 2,21 (2H) . 57 EXEMPLO 13

Preparação de 2-(4-Fluorofenetil)-7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Aqueceu-se uma solução de 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (40 mg, 0,11 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1, brometo de 2— (4 — fluorofenil) etilo (22 mg) e K2C03 (35 mg, 0,25 mmol) em DMF (1 mL) , a 70 °C durante 6 horas. Após este período, arrefeceu-se a mistura reaccional até à t.a. e diluiu-se com acetato de etilo. Lavou-se a mistura resultante com água. Secou-se a camada orgânica sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. O produto em bruto foi purificado utilizando HPLC preparativa de fase inversa para dar o composto em epígrafe, 2-(4-fluorofenetil)-7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (21,2 mg, 40%) como uma espuma amarela. MS M+H = 479; RMN de ^ (CDC13) δ 8,18 (1H), 7,35 (4 H) , 7,26 (4H) , 7,12 (2H) , 6,95 (2H) , 4,29 (2H) , 3,13 (2H) . 58 EXEMPLO 14

Preparação de 7,8-Bis(4-clorofenil)-2-(2-hidroxiciclo-hexil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Aqueceu-se uma solução de 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo [4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (40 mg, 0,11 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1, óxido de ciclo-hexeno (12 mg, 0,12 mmol) e K2C03 (35 mg, 0,25 mmol) em DMF (1 mL) , a 100 °C durante 3 horas. Após este período arrefeceu-se a solução até à t.a. e diluiu-se com acetato de etilo. Lavou-se a solução resultante com água. Secou-se a camada orgânica sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. O produto em bruto foi purificado por HPLC preparativa para dar o composto em epígrafe, 7,8-bis (4-clorofenil)-2-(2-hidroxiciclo-hexil)-[1,2,4]triazolo [4,3 — b]piridazin-3(2H)-(24,1 mg, 48%) como um sólido amarelo. MS M+H = 455; RMN de ΧΗ (CDC13) δ 8,17 (1H) , 7,33 (6H) , 7,08 (2H) , 4,26(1H) , 3,98(1H) , 2,17(1H) , 1,99(1H) , 1,82(3H) , 1,50-1,30 (3H) . 59 EXEMPLO 15

Preparação de 2-((l-Benzilpiperidin-4-il)metil)-7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução de 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (40 mg, 0,11 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1, (l-benzil-4-piperidil)metanol (27 mg 0,13 mmol) e trifenilfosfina (86 mg, 0,32 mmol) em THF (2 mL) adicionou-se azodicarboxilato de dietilo (0,15 mL, 0,38 mmol). Após 1 hora, concentrou-se a mistura reaccional. O material em bruto foi purificado por HPLC preparativa para dar o composto em epígrafe, 2-((l-benzilpiperidin-4-il)metil)-7,8-bis (4- clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (6,1 mg, 10%) como um sólido amarelo. MS M+H = 544; RMN de 1H (CDC13) δ 8,19 (1H), 7,42 (2H), 7,32-7,20 (9H), 7,11(2H), 4,19 (1H), 4,02 (2H) , 3,66 (2H) , 2,63 (2H) , 2,12 (2H) , 1,91(4H). 60 EXEMPLO 16

Preparação de 2- (7,8-Bis(4-clorofenil)-3-oxo- [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-2(3H)-il)-N,4-dimetilpentanamida

Cl

Cl 16Ά Preparação de 2-bromo-N,4-dimetilpentanamida

O

A uma solução de ácido DL-alfa-bromoisocapróico em THF (4 mL) adicionou-se N-metilmorfina (0,18 mL, 1,63 mmol), seguida da adição gota a gota de cloroformato de isobutilo (0,15 mL, 1,16 mmol). Formou-se um precipitado sólido branco. Depois de agitar à t.a. durante 1,5 h, filtrou-se o sólido branco. Adicionou-se metilamina (1 mL, 2N em THF) ao filtrado.

Concentrou-se a mistura reaccional após 0,5 horas. Diluiu-se o material em bruto resultante com acetato de etilo e lavou-se com água. Secou-se a camada orgânica sobre Na2SC>4 e concentrou-se para dar o composto em epígrafe, 2-bromo-N,4-dimetilpentanamida, (0,18 g, 78%) como um óleo. 61

Preparação de 16B. Preparação de 2-(7,8-Bis(4-clorofenil)-3-oxo-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-2(3H)-il)-N,4-dimetilpentanamida

Aqueceu-se a 85 °C durante 1,5 horas uma solução de 7,8 bis (4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H) -ona, (40 mg, 0,11 mmol) , preparada como se descreveu no Exemplo 1, 2-bromo-N,4-dimetilpentanamida (25 mg) e K2C03 (31 mg, 0,22 mmol) em DMF (2 mL). Após este período, arrefeceu-se a mistura reaccional até à t.a. e diluiu-se com acetato de etilo. Lavou-se a solução resultante com água. Secou-se a camada orgânica sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. O produto em bruto foi purificado utilizando HPLC preparativa de fase inversa para dar o composto em epígrafe, 2-(7,8-bis(4-clorofenil)-3-oxo-[1,2,4] triazolo[4,3-b]piridazin-2(3H)-il)-N,4-dimetilpentanamida (28 mg, 40%) como um sólido amarelo. MS M+H = 484; RMN de 1H (CDC13) δ 8,23 (1H), 7,36-7,30 (6H) , 7,12 (2H) , 6,90 (1H) , 5,13 (1H), 2,81 (3H), 2,22(1H), 1,98 (1H), 1,42(1H), 0,93 (6H) . 62 EXEMPLO 17

Preparação de 2-(4-(Trifluorometil)benzil)-7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Aqueceu-se a 90 °C, durante 2 horas, uma solução de 7,8-bis (4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (300 mg, 0,84 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1, brometo de 4-(trifluorometil)benzilo (200 mg, 0,84 mmol) e K2CO3 (290 mg, 2,1 mmol) em DMF (10 mL). Após este período, arrefeceu-se a mistura reaccional até à t.a. e diluiu-se com acetato de etilo. Lavou-se então a solução resultante com água. Secou-se a camada orgânica sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. O material em bruto foi purificado por HPLC preparativa para dar 0 composto em epígrafe, 2-(4-(trifluorometil)benzil)-7,8-bis (4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (120 mg, 28%) como um sólido amarelo. MS M+H = 515; RMN de 1H (CDCI3) δ 8,19 (1H) , 7, 60 (2H) , 7,50(2H), 7, 34 (4H) , 7,28(2H), 7,10(2H), 5,27 (2H) . 63 EXEMPLO 18

Preparação de 2-(2-(4-Clorofenoxi)etil)-7,8-bis(4- clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Aqueceu-se a 70 °C durante 4 horas uma solução de 7,8-bis (4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4, 3-b]piridazin-3(2H)-ona, (30 mg, 0,084 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1, 1-(2-bromoetoxi)-4-clorobenzeno (22 mg, 0,094 mmol) e K2C03 (18

mg, 0,013 mmol) em DMF (1 mL) . Após este período, arrefeceu-se a solução até à t.a. e diluiu-se com acetato de etilo. Lavou-se então a solução resultante com água. Secou-se a camada orgânica sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. O material em bruto foi purificado por HPLC preparativa para dar o composto em epígrafe, 2 - (2 - (4-clorofenoxi)etil)-7,8-bis(4-clorofenil) -[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (25,5 mg, 59%) que foi obtido como um sólido amarelo. MS M+H = 511; RMN de 1H (CDC13) δ 8,19 (1H) , 7,34(4H), 7,28(2H), 7,18(2H), 7,28(2H), 6, 80 (2H) , 4,44 (2H) , 4,36(2H) . 64 EXEMPLO 19

Preparação de 7,8-Bis(4-clorofenil)-2-(2-(fenilamino)etil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Cl

Cl A uma solução de 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2 H)-ona, (50 mg, 0,14 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1, 2-(fenilamino)etanol (19 mg, 0,13 mmol), trifenilfosfina (55 mg, 0,21 mmol) em THF (2 mL) adicionou-se azodicarboxilato de dietilo (0,09 mL, 42% em peso em tolueno, 0,21 mmol). Após 1 h, concentrou-se a mistura reaccional. O material em bruto foi purificado por HPLC preparativa para dar o composto em epígrafe, 7,8-bis(4-clorofenil)-2-(2- (fenilamino)etil)-[1,2,4]triazolo[4,3—b]piridazin-3(2H)-ona (14,4 mg, 23%) como um sólido amarelo. MS M+H = 476; RMN de 1H (CDC13) δ 8,20(1H), 7,41-7,20 (11H), 7,10 (2H), 4,51(2H), 3,91 (2H) . 65 EXEMPLO 20

Preparação de 2-(7,8-Bis(4-clorofenil)-3-oxo-[1,2,4]tria-zolo[4,3-b]piridazin-2(3H)-il)-N-(4-(trifluorometil)fenil)acetamida

Cl

Aqueceu-se a 80 °C durante 1 hora uma solução de 7,8-bis(4-clorofenil)-[ 1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (30 mg, 0,084 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1, 2-cloro-N-(4-(trifluorometil)fenil)acetamida (22 mg, 0,092 mmol), K2C03 (35 mg, 0,25 mmol) em DMF (1 mL) . Após este período, arrefeceu- se a solução até à t.a. e diluiu-se com acetato de etilo. Lavou- se então a solução resultante com água. Secou-se a camada

orgânica sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. O material em bruto foi purificado por HPLC preparativa para dar o composto em epígrafe, 2-(7,8-bis (4-clorofenil)-3-oxo-[1,2,4]triazolo[4,3— b]piridazin-2(3H)-il)-N-(4-(trifluorometil)fenil)acetamida (38 mg, 81%) como um sólido amarelo. MS M+H = 558; RMN de 1H (CDC13) δ 8,26 (1H) , 7, 60 (2H) , 7,38-7,20 (8H) , 7,11(2H), 5,07(2H). 66 EXEMPLO 21

Preparação de 2-(2-Aminoetil)-7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

21A. Preparação de 2-(2-(7,8-Bis(4-clorofenil)-3-oxo-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-2(3H)-il)etil)isoindolina-1,3-diona

Aqueceu-se a 80 °C durante 2,5 horas uma solução de 7,8 bis (4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3—b]piridazin-3(2H)-ona, (290 mg, 0,81 mmol) , preparada como se descreveu no Exemplo 1, N-(2-bromoetil) ftalimida (215 mg, 0,84 mmol) e K2CO3 (337 mg, 2,44 mmol) em DMF (3 mL) . Após este período, arrefeceu-se a mistura reaccional até à t.a. e diluiu-se com acetato de etilo. Lavou-se então a solução resultante com água. Secou-se a camada 67 orgânica sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. 0 material em bruto foi purificado utilizando cromatografia em coluna de silica gel utilizando um sistema automatizado eluindo com uma mistura 1:1 de acetato de etilo:hexano para dar o composto em epígrafe, 2-(2-(7,8-bis(4-clorofenil)-3-oxo-[1,2,4]triazolo [4,3— b]piridazin-2(3H)-il)etil)isoindolina-1,3-diona como um sólido amarelo (290 mg, 68%). MS M+H = 530. 21B. Preparação de 2-(2-Aminoetil)-7,8-bis(4-clorofenil)- [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

nh2

Fez-se reagir 2-(2-(7,8-bis (4-clorofenil)-3-oxo- [1.2.4] triazolo[4,3-b]piridazin-2(3H)-il)etil)isoindolina-1,3- diona (180 mg, 0,34 mmol) com hidrato de hidrazina (0,9 mL, 18,5 mmol) em etanol (10 mL) e agitou-se dum dia para o outro. Após este período, diluiu-se a mistura reaccional com acetato de etilo e lavou-se com NaCl aquoso saturado. Secou-se a camada orgânica sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. O material em bruto foi purificado por HPLC preparativa para dar o composto em epígrafe, 2-(2-aminoetil)-7,8-bis(4-clorofenil)- [1.2.4] triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (22 mg, 13%) como uma espuma amarela. MS M+H = 400; RMN de 1R (CDC13) δ 8,12 (largo, 2H), 7,38-7,15(6H) , 7,05 (2H), 4,45(2H), 3,59 (2H) . 68 EXEMPLO 22

Preparação de (R)-7,8-Bis(4-clorofenil)-2-(2-(3-clorofenil)-2-hidroxietil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Cl

Cl A uma solução, mantida sob agitação, de 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (20 mg, 0,06 mmol) preparada como se descreveu no Exemplo 1, em 0,25 mL de DMF adicionou-se óxido de R-(+)-3-cloroestireno (0,007 mL, 0,06 mmol) e 15 mg de K2C03. Aqueceu-se a solução vermelha resultante até 60 °C durante 19 h e, depois de arrefecer até à t.a., diluiu-se a mistura com 5 mL de acetato de etilo e 5 mL de HC1 1 N. Separou-se as camadas e lavou-se a camada orgânica com 5 mL de NaCl aquoso saturado. Secou-se a camada orgânica sobre MgSCh, filtrou-se e evaporou-se para dar um óleo amarelo. 0 material foi purificado utilizando HPLC de fase inversa para dar o composto em epígrafe, (R)-7,8-bis(4-clorofenil)-2-(2-(3-clorofenil)-2-hidroxietil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (15 mg, 52% de rendimento) como um sólido amarelo.

Anal. HRMS Calculado para C25H17CI3N4O2, 510,04, [M+H]+ = 511,0509 observado. RMN de (400 MHz, CDC13) δ 8,01 (s, 1H) , 7,16 (s, 1H) , 7,15-7,05 (m, 9H) , 6,92 (d, 2H, J=8,6 Hz), 5,05-4,95 (m, 1H), 4,13-4,08 (m, 2H), 1,55 (s 1, 1H). 69 EXEMPLO 23

Preparação de 7,8-Bis(4-clorofenil)-2-(2-hidroxi-3- fenilpropil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução, mantida sob agitação, de 7,8-bis (4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (500 mg, 1,4 mmol) , preparada como se descreveu no Exemplo 1, em 7 mL de DMF adicionou-se 2,3-epoxipropilbenzeno (0,18 mL, 1,4 mmol) e 0,39 g de K2CO3. Aqueceu-se a solução vermelha resultante até 85 °C durante 27 h e, depois de arrefecer até à temperatura ambiente, diluiu-se a mistura com 200 mL de acetato de etilo e 200 mL de HC1 1 N. Extraiu-se as camadas e lavou-se a camada orgânica com 200 mL de NaCl aquoso saturado. Secou-se a camada orgânica sobre MgSCh, filtrou-se e evaporou-se até um óleo amarelo. O material foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel utilizando um gradiente de 0-100% de acetato de etilo/hexanos para dar 484 mg ode 7,8-bis(4-clorofenil)-2-(2-hidroxi-3-fenilpropil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3 (2H)-ona racémica como um sólido amarelo contendo 15% de material de partida 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona. A separação dos enantiómeros foi realizada em 200 mg de material utilizando uma coluna Chiracel OD 5 cm x 50 cm 20 mícrones, caudal 50 mL/min isocrático a 65% de heptano/17,5% etanol/17,5% de metanol, detecção monocromática a 220 nm. 70

Recolheu-se a Fracção A a 49 min após injecção para dar 47 mg do enantiómero A da 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2 H)-ona como um sólido amarelo; recolheu-se a Fracção B a 55 min após injecção para dar 45 mg do enantiómero B de 7,8-bis (4-clorofenil)-[l,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona B como um sólido amarelo.

Enantiómero A de 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3 (2H)-ona: Anal. HRMS Calculado para C26H20CI2N4O2, 490.0963, [M+H] 491,1057 observado; RMN de 1H (400 MHz, CDC13) δ 8.18 (s, 1H) , 7,33-7,09 (m, 13H), 5, 05-4,95 (m, 1H), 4,33-4,30 (m, 1H), 4,20 (dd, 1H, J=3,l, 14,5 Hz), 4,06 (dd, 1H, J=7,9, 14.1 Hz) 2,88 (m, 2H).

Enantiómero B de 7, 8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo [4,3-b]piridazin-3 (2H) -ona: Anal. HRMS Calculado para C26H20CI2N4O2, 490.0963, [M+H] 491,1042 observado; RMN de 1R (400 MHz, CDC13) δ 8.18 (s, 1H) , 7,33-7,09 (m, 13H), 5, 05-4, 95 (m, 1H), 4,33-4,30 (m, 1H), 4,20 (dd, 1H, J=3,l, 14,5 Hz), 4,06 (dd, 1H, J=7,9, 14.1 Hz) 2,88 (m, 2H) . 71 EXEMPLO 24

Preparação de 7,8-Bis(4-clorofenil)-2-(1-fenil-lH-tetrazol-5-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução, mantida sob agitação, de 7,8-bis (4- clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (50 mg, 0,14 mmol) , preparada como se descreveu no Exemplo 1, em 0,7 mL de DMF adicionou-se N-fenil-5-clorotetrazole (25 mg, 0,14 mmol) e 19 mg de K2C03. Aqueceu-se a solução vermelha resultante a 80 °C durante 4 dias e, depois de arrefecer até à temperatura ambiente, diluiu-se a mistura com 50 mL de acetato de etilo e 50 mL de HC1 1 N. Extraiu-se as camadas e lavou-se a camada orgânica com 50 mL de NaCl aquoso saturado. Secou-se a camada orgânica sobre MgSCL, filtrou-se e evaporou-se até um sólido laranja. O material foi purificado via cromatografia em coluna de sílica gel seguida de HPLC de fase inversa para dar o composto em epígrafe, 7,8-bis (4-clorofenil)-2-(1-fenil-lH-tetrazol-5-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (7 mg, 10%) de rendimento como um sólido amarelo. LCMS Anal. Calculado para C24H14CI2N8O, 500,07, [M+H] 501 observado; RMN de 1H (400 MHz, CD3CN) δ 8,30 (s, 1H) , 7, 69-7,55 (m, 5H) , 7,39 (dt, 2H, J=2,l, 6,6 Hz), 7,28 (dt, 2H, J=l,9, 8,6 Hz), 7,23 (dt, 2H, J=2,2, 8,6

Hz), 7,06 (dt, 2H, J=2,l, 8,7 Hz). 72 EXEMPLO 25

Preparação de 2-(2-Hidroxibenzil)-7,8-bis(4-clorofenil)- [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

HO

25A. Preparação de Acetato de 2- ((7,8-bis(4-clorofenil)-3-oxo-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-2(3H)-il)metil)fenilo

A uma solução da 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo [4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (800 mg, 2,24 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1, em 30 mL de DMF adicionou-se acetato de 2-(clorometil)fenilo (497 mg, 2,69 mmol), seguido de K2CO3 (619 mg, 4,48 mmol). Aqueceu-se a reacção a 60 °C dum dia para o outro. Após este período, deixou-se que a reacção arrefecesse até à t.a. e diluiu-se então com 250 mL de AcOEt. Lavou-se a 73 solução resultante com NaCl aquoso saturado (100 ml x 3). Secou-se a camada orgânica sobre MgS04, filtrou-se, evaporou-se sob pressão reduzida para proporcionar o composto em epígrafe, acetato de 2-((7, 8-bis(4-clorofenil)-3-oxo-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-2(3H)-il)metil)fenilo, (1,13 g) como um sólido amarelo. 25B. Preparação de 2-(2-Hidroxibenzil)-7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

HO

Vl

Dissolveu-se o acetato de 2-((7,8-bis(4-clorofenil)-3-oxo-[1,2,4]triazolo[4,3 —b]piridazin-2(3H)-il)metil)fenilo, preparado como se descreveu em 25A, (1,13 g), em 25 mL de CH3OH. Adicionou-se uma solução de NaOCH3 (121 mg, 2,24 mmol) numa pequena quantidade de CH3OH (2 mL) à reacção e agitou-se, em seguida, a reacção dum dia para o outro. Após este período, adicionou-se 0,3 mL de ácido acético à reacção. Agitou-se a reacção durante mais 10 min e concentrou-se, então, a solução resultante sob pressão reduzida. O resíduo em bruto foi purificado utilizando cromatografia em coluna de sílica gel, utilizando um sistema automatizado, eluindo com um gradiente de 0% até 60% de AcOEt/hexanos durante 30 min, seguido de 60% de AcOEt/hexanos durante mais 15 min. O composto em epígrafe, 74 2-(2-hidroxibenzil)-7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3 (2H)-ona (818 mg, 79% de rendimento), foi obtido como um sólido amarelo. MS [M+H]+ = 463; RMN de 1H (CDCI3, 400 MHz) δ 8,54 (s, 1H) , 8,14 (s, 1H) , 7,32-7,17 (m, 8H) , 7,04-7,00 (m, 2H), 6,94 (dd, 1H), 6,81 (td, 1H), 5,13 (s, 2H). EXEMPLO 26

Preparação de 7,8-Bis (4-clorofenil)-2-(2-hidroxi-2- metilpropil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução de 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (20 mg, 0,056 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1, em 0,6 mL de DMF adicionou-se óxido de isobutileno (4,0 mg, 0,056 mmol), seguido de K2C03 (15,5 mg, 0,112 mmol). Aqueceu-se a mistura até 85 °C. Depois de agitar dum dia para o outro, deixou-se que a reacção arrefecesse até à t.a. Filtrou-se a mistura reaccional (para eliminar o excesso de K2CO3) . Concentrou-se a solução recolhida sob pressão reduzida. O produto em bruto foi purificado por HPLC de fase inversa para dar o composto em epígrafe, 7,8-bis(4-clorofenil)-2-(2-hidroxi-2-metilpropil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (18,4 mg, 77% de rendimento) como um óleo amarelo. MS [M+H] + : encontrado 429; RMN de 2H (CDC13, 400 MHz) δ 8,28 (s, 1H) , 75 7,39 7,27 (m, 6H) , 7,16-7,12 (m, 2H) , 4,16 (s, 2H) , 4,00 (s, 1H) , 1, 34 (s, 6H). EXEMPLO 27

Preparação de (R)-7,8-Bis(4-clorofenil)-2-(2-hidroxi-hexil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução de 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (20 mg, 0,056 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1, em 0,6 mL de DMF adicionou-se (R) — (+) — 1,2-epoxi-hexano (5,6 mg, 0,056 mmol), seguido de K2CO3 (15,5 mg, 0,112 mmol). Aqueceu-se a mistura a 85 °C. Depois de agitar dum dia para o outro, deixou-se que a reacção arrefecesse até à t.a. Filtrou-se a mistura reaccional para eliminar 0 excesso de K2CO3. Concentrou-se a solução recolhida sob pressão reduzida. O produto em bruto foi purificado utilizando cromatografia em coluna de silica gel utilizando um sistema automatizado, eluindo com um gradiente de (0% até 60% de AcOEt/hexanos durante 30 min seguido de 60% de AcOEt/hexanos a 100% de AcOEt durante 10 min. O composto em epigrafe, (R)-7,8-Bis(4-clorofenil)-2-(2-hidroxi-hexil) -[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (8,3 mg, 32% de rendimento) foi obtido como um óleo amarelo. MS [M+H] + : 76 encontrado 457; RMN de 2Η (CDC13, 400 MHz) δ 8,12 (s, 1H), 7,28-7,19 (m, 6H), 7, 06-7,02 (m, 2H) , 4,13-4,08 (m, 1H) , 4,00-3,90 (m, 2H) , 1,49-1,24 (m, 6H), 0,83 (t, 3H) . EXEMPLO 28

Preparação de 3,4-Bis(4-clorofenil)-6-(2-hidroxi-3- isobutoxipropil)imidazo[1,5-b]piridazin-7(6H)-ona

A uma solução de 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (20 mg, 0,056 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1, em 0,6 mL de DMF adicionou-se éter de glicidilo e isobutilo (7,3 mg, 0,056 mmol), seguido de K2CO3 (15,5 mg, 0,112 mmol). Aqueceu-se a mistura a 85 °C. Depois de agitar dum dia para o outro, deixou-se que a reacção arrefecesse até à t.a. Filtrou-se a mistura reaccional para eliminar o excesso de K2CO3. Concentrou-se a solução recolhida sob pressão reduzida. O produto em bruto foi purificado utilizando HPLC de fase inversa para dar o composto em epigrafe, 3,4-bis(4-clorofenil)-6-(2-hidroxi-3-isobutoxipropil)imidazo [1,5-b]piridazin-7(6H)-ona (17,8 mg, 65% de rendimento) como um sólido amarelo. Com 65% de rendimento. MS [M+H]+: encontrado 487; RMN de (CDCI3, 400 MHz) δ 8,08 (s, 1H) , 7,23-7,15 (m, 6H) , 77 7,00-6, 96 (m, 2H) , 4,20-4,00 (m, 3H) , 3,41 (d, 2H) , 3,11 (d, 2H) , 1,80-1,65 (m, 1H), 0,76 (d, 6H) . EXEMPLO 29

Preparação de 7,8-bis (4-clorofenil)-2-(3-etoxi-2- hidroxipropil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução de 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2 H)-ona, (300 mg, 0,84 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1, em 8 mL de DMF adicionou-se éter de etilo e glicidilo (86 mg, 0,84 mmol), seguido de K2CO3 (232 mg, 1,68 mmol). Aqueceu-se a mistura a 85 °C. Depois de agitar dum dia para o outro, deixou-se que a reacção arrefecesse até à t.a. Diluiu-se a mistura reaccional com AcOEt (200 mL) . Lavou-se a solução resultante com NaCl aquoso saturado (3 x 40 mL) . Secou-se a camada orgânica sobre MgSCt, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. O produto em bruto foi purificado utilizando cromatografia em coluna de sílica gel utilizando um sistema automatizado, eluindo com um gradiente de 0% até 60% de

AcOEt/hexanos durante 30 min seguido de 100% de AcOEt durante 40 min. O composto em epígrafe, 7,8-bis (4-clorofenil)-2-(3-etoxi-2-hidroxipropil)-[1,2,4]triazolo[4,3—b]piridazin-3(2H)-ona, (0,3 g, 78% de rendimento) como um sólido amarelo. MS 78 [Μ+Η]+: encontrado 459; RMN de ΧΗ (CDC13, 400 MHz) δ 8,20 (s, 1H) , 7,34-7,25 (m, 6H) , 7,09 (d, 2H) , 4,29-4,24 (m, 2H) , 4,18-4,13 (m, 1H), 3,57-3,49 (m, 4H) , 1,17 (t, 3H) . EXEMPLO 30

Preparação de 7,8-bis(4-clorofenil)-2-(3-etoxi-2-oxopropil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Adicionou-se o reagente de Dess-Martin (56 mg, 0,131 mmol) a uma solução de 7,8-bis(4-clorofenil)-2-(3-etoxi-2- hidroxipropil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, preparada como se descreveu no Exemplo 29, (50 mg, 0,109 mmol) em 1 mL de CH2C12. Agitou-se a reacção durante 2 h., filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. O material em bruto foi purificado por HPLC de fase inversa para dar o composto em epigrafe, 7,8-bis(4-clorofenil)-2-(3-etoxi-2-oxopropil)- [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (47 mg, 95% de rendimento) como um sólido amarelo. MS [M+H]+: encontrado 457. 79 EXEMPLO 31

Preparação de 7,8-Bis(4-clorofenil)-2-(3-etoxi-2-hidroxi-2-metilpropil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Adicionou-se MeMgBr (0,03 mL, 0,08 mmol, 3,0 M em Et20) a uma solução de 7,8-bis(4-clorofenil)-2-(3-etoxi-2-oxopropil)-[ 1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, preparada como se descreveu no Exemplo 30, (23 mg, 0,05 mmol) a -78 °C Agitou-se a reacção durante 30 min. a -78 °C. Após este período, adicionou-se NH4C1 aquoso saturado (2 mL) à reacção e aqueceu-se a solução resultante até à t.a. Separou-se as camadas e extraiu-se a camada aquosa com AcOEt (3 x 10 mL). Secou-se (MgSCL) as camadas orgânicas reunidas, filtrou-se e concentrou-se. O produto em bruto foi purificado por HPLC de fase inversa para dar o composto em epígrafe, 7, 8-bis(4-clorofenil)-2-(3-etoxi-2-hidroxi-2-metilpropil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (4 mg, 16 % de rendimento) como um óleo amarelo. MS i [M+H]+: encontrado 473; RMN de 2H (CDC1 3, 400 MHz) Ô 8,13 (s, 1H) , 7,29-7,18 (m, 6H), 7,06-7,02 (m, 2H), 4,25 (d, 1H) , 3, 98 (d, 1H) , 3,43 (q, 2H), 3,35 (d, 1H), 3,25 (d, 1H), 1,18 (s, 3H) , 1,07 (t, 3H). 80 EXEMPLO 32

Preparação de 7,8-Bis (4-clorofenil)-2-(3-hidroxi-3- metilbutan-2-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução de 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (300 mg, 0,84 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1, em 0,6 mL de DMF adicionou-se 2,3-epoxi-2-metilbutano (4,8 mg, 0,056 mmol), seguido de K2CO3 (15,5 mg, 0,112 mmol). Aqueceu-se a mistura a 85 °C durante 16 h. Após este periodo, adicionou-se mais 10 mg de K2CO3 e 2,3-epoxi-2-metilbutano (4,8 mg, 0,056 mmol). Deixou-se que a reacção continuasse a agitar a 85 °C durante mais 48 h. Arrefeceu-se a reacção até à t.a. e filtrou-se. Concentrou-se a solução recolhida sob pressão reduzida. O residuo foi purificado por HPLC de fase inversa para dar o composto em epígrafe, 7,8-bis(4-clorofenil)-2-(3-hidroxi-3-metilbutan-2-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3 (2H)-ona, (5 mg, 20% de rendimento) como um óleo amarelo. MS [M+H]+: encontrado 443; RMN de ΧΗ (CDC13, 400 MHz) δ 8,25 (s, 1H) , 7,39-7,27 (m, 6H) , 7,14 (dd, 2H) , 4,55 (q, 1H) , 1,52 (d, 3H), 1,34 (s, 1H), 1,23 (s, 1H). 81 EXEMPLO 33

Preparação de 4-((7,8-bis-(4-clorofenil)-3-oxo- [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-2(3H)-il)metil)benzonitrilo

Aqueceu-se a 75 °C durante 1 h uma solução de 7,8-bis (4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (192 mg, 0,54 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1, K2C03

(90 mg) e a-bromo-p-toluonitrilo (127 mg, 0,645 mmol) em DMF (2 mL). Após este período, concentrou-se a solução sob pressão reduzida. O produto em bruto resultante foi purificado por HPLC de fase inversa para proporcionar o composto em epígrafe, 4-((7,8-bis-(4-clorofenil)-3-oxo-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-2(3H)-il)metil)benzonitrilo (80 mg) como um sólido amarelo. MS M+H = 472; RMN de 1H (CDC13) : δ 8,17 (s, 1H) , 7,63 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 7,49 (d, J=8,3 Hz, 2H) , 7,33 (m, 2H) , 7,25 (m, 2H) , 7,24 (m, 2H), 7, 09 (m, 2H) , 5,25 (2H) . EXEMPLO 34 ATÉ 243

Os Exemplos seguintes foram preparados de acordo com os processos fornecidos para a preparação dos Exemplos 1-33: 82 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 34 3, 53 396 35 3, 64 371 36 Yi K> IÍT^N aXJ 4,06 413 37 4,05 465 38 °ΥΊι rC^ cA^ 4,33 453 39 KA o. r^ XXfr 3, 98 399 40 4,15 511 41 Y, ,-C ^Vf· 3,82 385 42 Vl ^rO 4,06 447 83 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 43 ΎΊ Jó ^ 3, 92 509 44 “η rC^ 4,22 487 45 H,G r~Qt 3,83 4 66 46 ΥιγΛ9 pJU1 3, 35 487 47 3,78 468 48 <, rO» ΛΑ N-Nv ° 3,14 448 49 Q □ & 4,03 491 50 y 4,18 481 51 α ^ /-0-° /C"/1'—' cr^ 4,34 515 52 Xu^“ or^ 4,3 517 84 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 53 4,14 481 54 •nrC^ a 4,27 517 55 ΧΧχ^° 2,78 454 56 4,02 531 57 4,02 465 58 n ·<? 4,2 517 59 F 4,11 501 60 0 Xu,C 2,84 468 61 0 cr"^ 2,93 482 62 H,C—Γ N-CH, γχ rO γχτ crs^ 3, 8 470 85 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 63 3, 93 528 64 4,11 552 65 o Qulral 4,09 554 66 xyíR T r F“t iít^n V c 4,06 513 67 0 0 N-' 1,8 3 f 425 68 σ α ο ο Λ ^ ) 0 1, 65f 411 69 α c0¾^ 1, 93f 439 70 α Δ\'ν_( 1,7f 425 71 0-CH, Υ> Α cr^ 4,29 511 72 co o 554 86 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 73 o o 4,2 497 74 4,17 553 75 3^ 4,01 538 76 4,09 510 77 4,11 524 78 í01· '°β 3,4 567 79 x,f}P 4,04 4 96 80 3, 56e 478 81 o JK) 4,29 723 82 os 4,21 543 87 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 83 YVvO'0 1,74g 499 84 α wN r\ ' o' l,82g 491 85 0 /^ν—ΖΛ-α cr) "<7 ^ 1,779 501 86 γΓΗ>α α 1,8g 479 87 h/v 0 ir 1,869 475 88 ° rvO° F 1,799 501 89 vO-O" Γ (> ργχ 1,89 501 90 Ύ ό wyvo- 1,339 522 91 ^ «=( xk 9 Tryo- Γ <c 1,79g 491 92 Cl o. 9 Τ&ζΤ o n-' 1,77g 467 88 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 93 ci K,c'y0'O-> 0 d fi l,86g 505 94 vO-00 Λ 1,84g 511 95 ° ΓνΟ-0 !Γ> χτ η 1,75g 501 96 B t 1,8 8 g 527[M+2] 97 Vi rC0^’ F F 4,19 531 98 «=/ co o 483 99 3,84 472 100 3,83 472 101 2^' 4,19 515 102 3, 69 452 89 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 103 3, 61 525 104 vs ^ xxj.y 4,32 529 105 vi 4 492 106 °Υ% 4,01d 505 107 ch, aXJ 3,19d 573 108 £j° 3, 66e 504 109 0 CH. <Νλ γ-ί^0^ ^ã' 3, 93 471 110 0 -srs 3,78 490 111 \Λ U~0~i, jy^ 3, 8 491 90 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 112 vs rrO-' 4,33e 573 113 vs ,nrQ α 3, 86e 484[M+2] 114 ov. rOy* XXJ>° 4 513 115 αχλ |'^a=^F αΧΧΐ 4,22 549 116 ^ rrQf V" 3, 45d 504 117 <V*i ihTQi, χχχ>°v ϊ V 3,23d 488 118 p^ 3, 69d 604 119 4,07 457 120 •up Jf 4,36 561 121 2A- 3,16 612 91 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 122 Yi rX° 4,04 477 123 f Quiral gr 4 612 124 α 'ch, 3, 8 559 125 HC^-CH» Quiral “nxC^0 3,85 490 126 . 3, 91 544 127 «γν ,ηΓ^Χ 4,08 507 128 ÇHj Quiral r*. .M. ^0 3, 85 510 129 4,36 598 130 “γ% ,ηΓΟ^ TXX>o 4,18d 461 131 yrC0^ 4,1 477 92 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 132 Ti r\ CT^ 4, 46d 503 133 4,37d 523 134 rQ~r jr 4,12 495 135 λΟ”“ 4,27 556 136 4,23 545 137 ^V-CH Cr'''^ 4,16d 479 138 Yl £p" 4,23 561 139 "VN U<H UUC>° < CH, 4,14 519 140 Ύ~ι 4,34 547 141 Lo 4,01 559 93 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 142 UJ>o cAJ 4,36 559 143 γΝ -ηΓΟΑ HjC—O 3, 94 549 144 VI XXXf>==o Q af 4 626 145 Vi ríP^ 3, 5 526 146 °n t XXX> o y° H)C 3, 61 568 147 Vi Av-V H.C αΛ^ 3,86 610 148 >/ 3,42 574 149 γ~ι riTÍV 4d 519 150 A 3, 98 608 151 /=\0 “Ύ^ ít-l/A-/ ^fcH, 3,76 554 94 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 152 4,01 572 153 4,06 550 154 a/ £T 4,21 495 155 XX 0 ar^ 3,14 576 156 3,16 594 157 jj" 3,84 463 158 /ctj 4,1 477 159 4,1 526 160 3,24 594 161 "XUÍ^ 3, 81 479 95 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 162 rQ** 3,78 463 163 3,36 610 164 4,04 523 165 3, 71c 448 166 9 o\ 4,08 620 167 3,13 520 168 3, 91 522 169 4 516 170 P tu^ ir* 2,93 527 171 X 2“ 3,2 561 96 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 172 /* °ΎΊ kP 3,38 462 173 3, 94 455 174 <^p 4,11 552 175 4,01 552 176 Tiré^ 4,15 505 177 αΥΊ K® r^° 3,82 455 178 4,21 515 179 & ° 4,25 545 180 v cr^ 4,14 531 181 n r<^ XkÃh 4,21 533 97 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 182 ΎΊ rv^ 2,87 448 183 "yv K>0 3,03 513 184 v. „fOO xyi·. 4 532 185 4,28 539 186 ‘ηχί0'ν 3,9 478 187 3,9 500 188 3,4 464 189 H* J* 4 509 190 Tiri^ 3,7 504 191 4,27 599 98 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 192 V) rC^ jO^ 3, 5 449 193 3, 8 484 194 /-0 3, 8 498 195 ‘n/ or-^ 3,43 454 196 v, 3, 6 468 197 y- ««i u~Q 3,88 473 198 ο α 7,86b 477 199 £ co o 511 200 Χυ^·' 4,03 553 201 ^xf" 3,79 4 69 99 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 202 F 3, 93 581 203 > OH 4,05 693 204 P 3, 99 507 205 V, 0 chj 3, 99 487 206 4,15 521 207 y—o °ΎΊ rO™ 0 f 0 3, 94 537 208 0“ 4,16 587[M+2] 209 αΝ^ι rO°H ^qIJ' 2,67 500 210 0' 4 525 211 Vs (s^XJh 3,79 560 100 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 212 -n / ^òòr 3, 91 495 213 3,41 491 214 tf 3,89 552 215 vi A 3, 54 443 216 -rO °n jC“ 3,81 511 217 /CH, Quiral ^ ff V^l N"1; «oh cr^ 3, 62 445 218 /P^j Quiral ^ nT 3, 62 445 219 /-CH, 3,88 473 220 kc ch, Quiral 4,06d 540 221 J xr 4,01d 612 101 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 222 xwí 3, 43d 598 223 h,c Quiral b 3,12d 496 224 P 3, 43d 536 225 -cC or^ 4, lld 540 226 0uiral x$? a·^55^ 3,14 546 227 ,επ, Quiral 3, 47d 518 228 4,27d 521 229 4,2 9e 585 230 ^ Quiral P >f0 3,2 4 d 530 231 V! rPX 4,07d 413 102 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 232 4,12d 491 233 4,16d 491 234 α~0~\ ^Λχ° 4,26d 475 235 »γν λκ 4,34d 489 236 4, 65e 503 237 4, 45e 523 238 P y* 4,25d 539 239 Jdr 4,07° 505 240 4,06d 532 241 4,18d 517 103

EXEMPLO 244

Preparação de 7-(4-Clorofenil)-8-(piridin-4-il)- [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

244A. Preparação de 2-benzil-4,5-dicloropiridazin-3(2H)-ona

Cl Cl

A uma solução de dicloropiridazinona (50,0 g, 303,0 mmol) em DMF (200 mL), adicionou-se K2CO3 (50,3 g, 364,0 mmol) à t.a., sob agitação vigorosa. Adicionou-se brometo de benzilo (40,0 mL, 336,0 mmol) em gotas rápidas via uma seringa. Agitou-se a suspensão resultante a 50 °C, durante 1 h, até toda a 104 piridazinona ter sido consumida como determinado por HPLC. Verteu-se a mistura reaccional, então, para água (400 mL) . Agitou-se a suspensão resultante durante 15 min à t.a. e filtrou-se em seguida. Lavou-se abundantemente o sólido recolhido com água até não ser evidente qualquer cor no filtrado. Secou-se o sólido numa estufa de vácuo a 50 °C dum dia para o outro para dar o composto em epígrafe, 2-benzil-4,5-dicloropiridazin-3(2H)-ona, (73,1 g, 95%) como um sólido amarelo pálido. HPLC: 3,17 min; MS, M+H = 255. 244B. Preparação de 2-Benzil-5-cloro-4-metoxipiridazin-3(2H)-ona

O

A uma solução, mantida sob agitação, de 2-benzil-4,5-dicloropiridazin-3(2H)-ona (73,1 g, 286,6 mmol) em 1,4-dioxano (700 mL) adicionou-se uma solução a 25% em peso de NaOMe em MeOH (72,0 mL, 315 mmol) à t.a. sob árgon ao longo de 15 min. Agitou-se a mistura reaccional escura resultante à t.a. durante 1,5 h. Evaporou-se o solvente e adicionou-se água (500 mL) ao resíduo resultante. Extraiu-se a mistura aquosa com cloreto de metileno (4 x 120 mL) . Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com água (2 x 300 mL) e depois com NaCl aquoso saturado (2 x 150 mL) . Secou-se a camada orgânica sobre MgS04, filtrou-se e concentrou-se para se obter o produto em bruto. Este produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel eluindo com 30% de AcOEt/hexanos para dar o composto em epígrafe, 2-benzil- 105 (56,0 g, 78%) como um óleo MS, M+H = 251. RMN de 7,26-7,34 (5H, m), 5,24 (2H, 5-cloro-4-metoxipiridazin-3 (2H)-ona amarelo pálido. HPLC: 3,19 min; (DMSO-d6, 500 MHz) : δ 8,05 (1H, s) , s) , 4,15 (3H, s) . 244C. Preparação de 2-Benzil-5-(4-clorofenil)-4-metoxipiridazin-3(2H)-ona

A uma solução, mantida sob agitação, de 2-benzil-5-cloro-4-metoxipiridazin-3(2H)-ona (20,0 g, 79,8 mmol) em tolueno (500 mL) adicionou-se Pd(PPh3)4 (5,5 g, 4,76 mmol) sob uma atmosfera de árgon. Adicionou-se subseguentemente ácido 4-clorofenilborónico (18,7 g, 119,6 mmol). Sob agitação vigorosa, adicionou-se Na2CC>3 (33,8 g, 318,9 mmol) pré-dissolvido em água (90 mL) a uma suspensão. Borbulhou-se uma corrente de árgon através desta suspensão durante 10 min. Após este período, colocou-se o balão num banho de óleo pré-aguecido a 120 °C. Agueceu-se a reacção a refluxo durante 3 h. Após este período, arrefeceu-se a reacção até à t.a. Verteu-se a mistura reaccional então para água (200 mL) . Separou-se as camadas e extraiu-se a mistura aquosa com AcOEt (100 mL x 3) . Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com água (2 x 200 mL) seguida de NaCl aquoso saturado (2 x 100 mL). Concentrou-se em seguida a camada orgânica sob pressão reduzida para se obter o produto em bruto. Este produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna de 106 sílica gel eluindo com 8% de AcOEt/hexanos para dar o composto em epígrafe, 2-benzil-5-(4-clorofenil)-4-metoxipiridazin-3(2 H)- ona, (21,5 g , 82%) como um sólido branco. HPLC: 3,79 min; M+H = 327. RMN de XH (CDCI3, 500 MHz): δ 7,76 (1H, s), 7,48 (2 H, d, J=10, 0 Hz), 7,40-7,45 (4H, m), 7,28-7,36 (3H, m) , 5,35 (2H, s) , O 1—1 (3H, s) - 244D. Preparação de 2-Benzil-4-cloro-5-(4- clorofenil)piridazin-3(2H)-ona

Agitou-se a 75 °C durante 4 h uma mistura de 2-benzil-5-(4-clorofenil)-4-metoxipiridazin-3(2H)-ona (13,8 g, 42,23 mmol) e P0C13 (20,0 mL) . Arrefeceu-se a mistura reaccional até à t.a. e concentrou-se sob pressão reduzida. Arrefeceu-se o resíduo num banho de gelo e adicionou-se água (200 mL). Filtrou-se o material não dissolvido e lavou-se com água (3 x 150 mL) . Ao sólido assim obtido adicionou-se MeOH (100 mL) . Submeteu-se a mistura resultante a ultra-sons durante 10 min, e filtrou-se em seguida. Lavou-se o sólido recolhido com MeOH (2 x 50 mL). Secou-se então o sólido numa estufa de vácuo a 50 °C para dar o composto em epígrafe, 2-benzil-4-cloro-5-(4- clorofenil)piridazin-3(2H)-ona, (9,2 g, 66%) como um sólido castanho claro. HPLC: 3,75 min; M+H = 331. RMN de (CDCI3, 500 MHz) : Ô 7,73 (1H, s) , 7,50 (2H, d, J=10,0 Hz), 7,47 (2H, d, 107 J=10,0 Hz), 7,42 (2H, d, J=10,0 Hz), 7, 30-7,38 (3H, m) , 5,39 (2H, s) . 244E. Preparação de 2-Benzil-5-(4-clorofenil)-4-(piridin-4-il)piridazin-3(2H)-ona

A uma solução, mantida sob agitação, de 2-benzil-5- (4-clorofenil)-4-(piridin-4-il)piridazin-3(2H)-ona (7,0 g, 21,14 mmol) em tolueno (140 mL) num balão de fundo redondo adicionou-se Pd(PPh3)4 (1,5 g, 1,3 mmol) sob uma corrente de árgon. Adicionou-se subsequentemente 4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dixoborolan-2-il)piridina (5,63 g, 27,5 mmol). Sob agitação vigorosa, adicionou-se Na2C03 (9,2 g, 86,8 mmol) pré-dissolvido em água (25 mL) à suspensão. Borbulhou-se uma corrente de árgon através da mistura reaccional durante 10 min. Colocou-se então o balão num banho de óleo pré-aquecido a 120 °C. Agitou-se a reacção a refluxo durante 48 h. Após este período, arrefeceu-se a mistura reaccional até à t.a. e verteu-se em seguida para água (100 mL). Separou-se as camadas. Extraiu-se a camada aquosa com AcOEt (3 X 75 mL) . Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com água (2 x 100 mL) seguida de NaCl aquoso saturado (2 x 50 mL) . Concentrou-se a camada orgânica sob pressão reduzida para se obter o produto em bruto. Este produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel eluindo com 40% de AcOEt/hexanos para dar o composto em epígrafe, 2-benzil-5-(4-clorofenil)-4-(piridin-4-il)piridazin-3 (2H)-ona, (7,0 g, 89%) 108

como um sólido branco. HPLC: 2,89 min; M+H = 374. RMN de 1H (CDC13, 500 MHz) : δ 8,50 (2H, d, J=5,0 Hz), 7,86 (1H, s) , 7,52 (2H, d, J=10,0 Hz), 7,28-7,36 (3H, m), 7,24 (2H, d, J=10,0 Hz), 7,09 (2H, d, J=5,0 Hz), 7,00 (2H, J=10,0 Hz), 5,38 (2H, s). 244F. Preparação de 5-(4-Clorofenil)-4-(piridin-4-il)piridazin-3(2H)-ona

NH I N A uma solução de 2-benzil-5-(4-clorofenil)-4-(piridin-4-il)piridazin-3(2H)-ona (7,0 g, 18,73 mmol) em tolueno (50 mL) num balão de fundo redondo adicionou-se AICI3 (7,5 g, 56,25 mmol) sob uma corrente de árgon. Colocou-se o balão num banho de óleo pré-aquecido a 80 °C. Após 2 horas, arrefeceu-se a mistura reaccional até à t.a. e verteu-se em seguida para gelo esmagado (200 g). Recolheu-se 0 precipitado formado por filtração, lavou-se com água (2 x 50 mL) seguido de éter (50 mL) e secou-se numa estufa de vácuo a 40 °C para dar o composto em epígrafe, 5-(4-clorofenil)-4-(piridin-4-il)piridazin-3 (2H)-ona (5,1 g, 96%) como um sólido branco. HPLC: 1,37 min; MS, M+H = 284. 109 244G. Preparação de 3-Cloro-5-(4-clorofenil)-4-(piridin-4-il)piridazina

Agitou-se a 80 °C durante 2 h uma mistura de 5- (4-clorofenil)-4-(piridin-4-il)piridazin-3(2H)-ona (5,1 g, 18,0 mmol) e P0C13 (20 mL) . Arrefeceu-se a mistura reaccional até à t.a. e eliminou-se o POCI3 por evaporador rotativo para se obter uma goma. Arrefeceu-se esta goma num banho de gelo e adicionou-se água (50 mL) . Ajustou-se o pH desta mistura até 6 com NaHC03 aquoso. Extraiu-se a mistura resultante com AcOEt (2 x 75 mL) . Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com água (2 x 50 mL) seguida de NaCl aquoso saturado (2 x 25 mL). Secou-se a camada orgânica sobre MgS04 e filtrou-se através de um tampão de silica gel (20 g) . Após evaporação dos solventes sob pressão reduzida, obteve-se o composto em epígrafe, 3-cloro-5- (4-clorofenil)-4-(piridin-4-il)piridazina, (5,1 g, 94%) como um sólido branco. HPLC: 2,01 min; MS, M+H = 302. RMN de 1H (CDCI3, 500 MHz) : δ 9,08 (1H, s) , 8,56 (2H, d, J=5,0 Hz), 7,21 (2H, d, J=10,0 Hz), 7,09 (2H, d, J=5,0 Hz), 7,01 (2H, J=10,0 Hz). 110 244Η.

Preparação de 1-(5-(4-Clorofenil)-4-(piridin-4-il)piridazin-3-il)-hidrazina

Dissolveu-se 3-cloro-5-(4-clorofenil)-4-(piridin-4- il)piridazina (5,1 g, 16,9 mmol) em piridina (20 mL) e adicionou-se mono-hidrato de hidrazina (17,0 mL, 350,5 mmol). Agitou-se a mistura reaccional a refluxo durante 40 min. Após este período, arrefeceu-se a mistura reaccional até à t.a. e concentrou-se então até metade do volume original sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura resultante com água (100 mL) . Recolheu-se o sólido de cor amarela por filtração e lavou-se abundantemente com água. Secou-se o sólido numa estufa de vácuo a 40 °C para dar o composto em epígrafe, 1-(5-(4-clorofenil)-4-(piridin-4-il)piridazin-3-il)hidrazina, (4,4 g, 88%) como um pó amarelo. HPLC: 1,01 min; MS, M+H = 298. 111 2441. Preparação de 7-(4-Clorofenil)-8-(piridin-4-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução de carbonildiimidazole (CDI) (7,25 g, 44,71 mmol) em THF (100 mL) adicionou-se 1-(5-(4-clorofenil)-4-(piridin-4-il)piridazin-3-il)hidrazina (3,8 g, 12,76 mmol) em porções à t.a. sob uma atmosfera de árgon. Aqueceu-se a mistura reaccional a refluxo durante 30 min. Após este período, arrefeceu-se a mistura reaccional até à t.a. e concentrou-se subsequentemente sob pressão reduzida para se obter uma goma à qual se adicionou água (100 mL). Recolheu-se o sólido resultante por filtração, lavou-se com água (2 x 50 mL) seguido de 1:1 (v/v) de hexanos/éter (2 x 50 mL) para dar o composto em epígrafe, 7-(4-clorofenil)-8-(piridin-4-il)-[1,2,4]triazolo [4,Ιό] piridazin-3(2h)-ona (3,75 g, 91%) como um sólido amarelo. HPLC: 1,67 min; MS, M+H = 324; RMN de ΧΗ (DMSO-d6) δ 12,90 (1H, S), 8,59 (2 H, d, J=10,0 Hz) , 8,41 (1H, s), 7,44 (2H, d, J=10,0 Hz) , 7,32 (2H, d, J=5,0 Hz), 7,28 (2H, d, J=5,0 Hz) . 112 EXEMPLO 245

Preparação de 7-(4-Clorofenil)-2-((6-cloropiridin-3-il)metil)-8-(piridin-4-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução de 7-(4-clorofenil)-8-(piridin-4-il)- [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (150 mg, 0,46 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 244, em DMF (3 mL) adicionou-se K2CO3 (80 mg, 0,58 mmol) e 2-cloro-5-(clorometil)piridina (90 mg, 0,556 mmol). Agitou-se a mistura reaccional a 70 °C durante 15 min. Após este período, arrefeceu-se a solução até à t.a. e diluiu-se com água (20 mL) . Recolheu-se 0 sólido resultante por filtração e 0 produto em bruto foi purificado por HPLC de fase inversa para dar o composto em epígrafe, 7-(4-clorofenil)-2-((6-cloropiridin-3-il)metil)-8- (piridin-4-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (110 mg, 52%), como um sólido amarelo. HPLC: 2,61 min; MS, M+H = 449; RMN de (CDCI3) δ 8,62 (2H, d, J=5,0 Hz), 8,43 (1H, d, J=5,0 Hz), 8,19 (1H, s), 7,33 (1H, d, J=5,0 Hz), 7,29- -7,31 (3H, m), 7,20 (2H, s) . (2H, d, J=5,0 Hz), 7,08 (2H, , d, J=10,0 Hz) , 5,17 113 EXEMPLO 246

Preparação de 7-(4-Clorofenil)-2-((6-(dimetilamino)piridin-3-il)metil)-8-(piridin-4-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Cl

Aqueceu-se até refluxo uma mistura de 7-(4-clorofenil)-2-( (6 - (cloro)piridin-3-il)metil)-8-(piridin-4-il)- [1.2.4] triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (30 mg, 0,0667 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 245, e N,N-dimetilamina em água (1,0 mL) . Após 8 h, arrefeceu-se a solução até à t.a. Concentrou-se a mistura reaccional sob pressão reduzida. O residuo foi purificado por HPLC de fase inversa para dar o composto em epígrafe, 7-(4-clorofenil)-2-((6- (dimetilamino)piridin-3-il)metil)-8-(piridin-4-il)- [1.2.4] triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (17,5 mg, 57%) como um sólido amarelo. HPLC: 1,41 min; M+H = 458; RMN de XH (CDC13) δ 8,63 (2H, d, J=5,0 Hz), 8,23 (1H, d, J=5,0 Hz), 8,17 (1H, s) , 7,58 (1H, d, J=10,0 Hz), 7,33 (2H, d, J=10,0 Hz), 7,23 (2H, d, J=5,0 Hz), 7,09 (2H, d, J=10,0 Hz), 6,47 (1H, d, J=10,0 Hz), 5,08 (2H, s), 3,07 (6H, s) . 114 EXEMPLO 247

Preparação de 7-(4-Clorofenil)-8-(piridin-4-il)-2-((6-(trifluorometil)piridin-3-il)metil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Aqueceu-se a 65 °C, durante 40 min uma solução de 7— (4 — clorofenil)-8-(piridin-4-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (1,1 g, 3,4 mmol), preparada como se descreveu no

Exemplo 244, K2CO3 (940 mg, 6,8 mmol) e 5-clorometil-2- trifluorometilpiridina (800 mg, 4,1 mmol) em DMF (8,3 mL) . Após este período, arrefeceu-se a solução até à t.a. Particionou-se a mistura reaccional entre água e AcOEt. Separou-se a camada orgânica, lavou-se com água e NaCl aquoso saturado. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de magnésio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel, eluindo com hexanos/AcOEt para dar o composto em epígrafe, 7-(4-clorofenil)-8-(piridin-4-il)-2-((6-(trifluorometil)piridin-3-il)metil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (1,25 g, 76%) como um sólido amarelo. HPLC: 2,84 min; MS, M+H = 483; RMN de XH (CDC13) δ 8,80 (d, J=l,4 Hz, 1H), 8,65 (Abq, J=l,6, 4,4 Hz, 2H) , 8,23 (s, 1H), 7,96 (m, 1H) , 7,68 (d, J=8,3 Hz, 1H) , 7,34 (m, 2H) , 7,23 (m, 2H) , 7,10 (m, 2H) , 5,31 (2H) . 115 EXEMPLO 248

Preparação de 7-(4-clorofenil)-8-(piridin-4-il)-2-((5-(trifluorometil)piridin-2-il)metil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Cl

Aqueceu-se a 65 °C durante 2 h uma solução de 7-(4-clorofenil)-8-(piridin-4-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]pirida-zin-3(2H)-ona (32,4 mg, 0,1 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 244, K2C03 (56 mg, 0,4 mmol) e cloridrato de 2-clorometil-5-trifluorometilpiridina (37 mg, 0,4 mmol) em DMF (0,4 mL). Utilizando um processo semelhante ao descrito no Exemplo 247, obteve-se o produto em bruto. O produto em bruto foi purificado por HPLC de fase inversa para dar o composto em epígrafe, 7-(4-clorofenil)-8-(piridin-4-il)-2- ( (5- (trifluorometil)piridin-2-il)metil)-[1,2,4]triazolo [4,3— b]piridazin-3 (2H)-ona, (27 mg) como um sólido amarelo. TR de HPLC: 2,78 min; M+H = 483; RMN de ΧΗ (CDC13) : δ 8,82 (s, 1H) , 8,62 (m, 2H), 8,24 (s, 1H) , 7,91 (m, 1H) , 7,38-7,10 (m, 7H) , 5,45 (2H) . 116 EXEMPLO 249

Preparação de 4-((7-(4-Clorofenil)-3-oxo-8-(piridin-4-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-2(3H)-il)metil)benzonitrilo

Cl

Aqueceu-se a 65 °C durante 2,5 h uma solução de 7— (4 — clorofenil)-8-(piridin-4-il)-[1,2,4]triazolo[ 4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (96 mg, 0,3 mmol), preparada como se descreveu no

Exemplo 244, K2CO3 (82 mg, 0,59 mmol) e a-bromo-p-toluonitrilo (70 mg, 0,356 mmol) em DMF (1 mL) . Utilizando um processo semelhante ao descrito no Exemplo 247, obteve-se o produto em bruto. O produto em bruto foi purificado por HPLC de fase inversa para dar o composto em epígrafe, 4-((7-(4-Clorofenil)-3-oxo-8-(piridin-4-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-2(3H)-il) metil) benzonitrilo (27 mg) como um sólido amarelo. TR de HPLC: 2,45 min; M+H = 439; RMN de 2H (CDC13) : δ 8,63 (d, J=6,04 Hz, 2H), 8,21 (s, 1H) , 7,63 (d, J=8,2 Hz, 2H) , 7,49 (d, J=8,2 Hz, 2H) , 7,33 (m, 2H) , 7,21 (m, 2H) , 7,08 (m, 2H) , 5,25 (2H) . 117 EXEMPLO 250

Preparação de 2-(4-(Isoxazol-5-il)benzil)-7-(4-clorofenil)-8-(piridin-4-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

250A. Preparação de 5-(4-(bromometil)fenil)isoxazole

A uma solução de 5-(4-metilfenil)isoxazole (4,0 g, 25,13 mmol) em tetracloreto de carbono (125 mL) , N-bromossuccinimida (4,47 g, 25,13 mmol) e adicionou-se peróxido de benzoilo (0,12 g, 0,50 mmol). Aqueceu-se a mistura resultante a refluxo durante 1 h. Após este período, arrefeceu-se então a mistura reaccional até temperatura ambiente e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado e o resíduo foi purificado por cromatografia sobre sílica gel eluindo com hexanos/AcOEt para dar o composto em epígrafe, 5-(4-(bromometil)fenil)isoxazole, 4,2 g como um sólido esbranquiçado. RMN de 1H (CDC13) : δ 8,30 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,78 (d, J=8,3 Hz, 2H) , 7,50 (d, J=8,3 Hz, 2H) , 6,54 (d, J=l,7 Hz, 1H) , 4,51 (s, 2H) . 118 250b. Preparação de 2-(4-(Isoxazol-5-il)benzil)-7-(4-clorofenil)-8-(piridin-4-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Adicionou-se uma solução de 7-(4-clorofenil)-8-(piridin-4-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3 (2H)-ona (3,0 g, 9,27 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 244, K2CO3 (2,56 g, 18,53 mmol) e 5-(4-(bromometil)fenil)isoxazole (2,65 g, 11,12 mmol), em DMF (23 mL). Aqueceu-se a mistura resultante até 60 °C. Após 2 h, arrefeceu-se a mistura reaccional até à t.a. e partilhou-se entre água e AcOEt. Separou-se a camada orgânica e extraiu-se a camada aquosa com AcOEt (2 x 200 mL) . Secou-se os extractos orgânicos reunidos sobre sulfato de magnésio, filtrou-se e concentrou-se. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel utilizando hexanos/AcOEt 1:10 para dar o composto em epígrafe, 2- (4-(isoxazol-5-il)benzil)-7-(4-clorofenil)-8-(piridin-4-il)-[l,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, como um sólido amarelo claro. TR de HPLC: 2,64 min; MS, M+H = 481; RMN de XH (CDCI3) : δ 8, 62-8,64 (m, 2H) , 8,29 (d, OO i—1 II *~D Hz, 1H), 8,20 (s, r- r- [-- s* \—1 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 7,51 (d, J=8,4 Hz, 2H), 7,33 (d, J=8,4 Hz, 2H), 7,22 (m, 2H) , 7,09 (d, J=8,4 Hz, 2H), 6,51 (d, J=l,6 Hz, 1H), 5,25 (s, 2H). 119 EXEMPLO 251

Preparação de 2-(4-(Isoxazol-3-il)benzil)-7-(4-clorofenil)-8-(piridin-4-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

251A. Preparação de 3-(4-(Bromometil)fenil)isoxazole

Br // %

\=/ N A uma solução de 3- (4-metilfenil)isoxazole (preparado utilizando métodos da literatura) (1,95 g, 12,25 mmol) em tetracloreto de carbono (60 mL), adicionou-se N-bromossuccinimida (2,18 g, 12,25 mmol) e peróxido de benzoilo (0,059 g, 0,245 mmol) e aqueceu-se a mistura a refluxo durante 1 h. Arrefeceu-se então a mistura reaccional até à temperatura ambiente e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado e o residuo foi purificado por cromatografia em coluna de silica gel eluindo com hexanos/AcOEt para dar o composto em epígrafe, 3-(4-(bromometil)fenil)isoxazole, (0,6 g) como um sólido branco. RMN de XH (CDC13) : δ 8,48 (d, J=l,6 Hz, 1H), 7,83 (d, J=8,2 Hz, 2H) , 7,50 (d, J=8,2 Hz, 2H) , 6,67 (d, J=l,6 Hz, 1H) , 4,53 (s, 2H) . 120 251Β. Preparação de 2-(4-(Isoxazol-3-il)benzil)-7-(4-clorofenil)-8-(piridin-4-il)-[1,2, 4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução de 7-(4-clorofenil)-8-(piridin-4-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (0,27 g, 0,834 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 244, em DMF (4 mL), adicionou-se carbonato de potássio (0,23 g, 1,67 mmol) e 3-(4-(bromometil)fenil)isoxazole (0,248 g, 1,04 mmol). Aqueceu-se a mistura resultante até 65 °C. Após 2 h, arrefeceu-se então a mistura reaccional até à t.a. e diluiu-se com AcOEt (200 mL) . Lavou-se então a solução resultante com água e NaCl aquoso saturado. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de magnésio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna eluindo com hexanos/AcOEt para dar o composto em epígrafe, 2-(4-(isoxazol-3-il)benzil)-7-(4-clorofenil)-8-(piridin-4-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, como um sólido amarelo claro. TR de HPLC: 2,60 min; RMN de 1H (CDCls) : Ô 8,64 (d, J=l,l Hz, 1H) , 8, 63 (d, J=1,7 Hz, 1H) , 8,45 (d, J=1,7 Hz, 1H) , 8,20 (s, 1H) , 7,80 (d, J=8,2 Hz, 2H) , 7,50 (d, J=8,2 Hz, 2H) , 7,34 (m, 2H) , 7,23 (m, 2H), 7,10 (m, 2H) , 6 , 65 (d, J=2 ,2 Hz, 1H) , 5,26 (s , 2H) 121 EXEMPLO 252 ATÉ 272

Os Exemplos seguintes foram preparados de acordo com os métodos e processos acima: Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 252 «ys r,rO^F 0*. 3,28 482 253 * r~ N^j M-N ^ 2,94 423 254 3,34 498 255 2,12 492 256 2,64 480 257 2x5 cr^ 2,37 481 258 ^xV-· 2,68 498 259 /=w*N 1, 64 480 122 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 260 2,23 419 261 ,ηγΟ-Ο. kXXN>=° 2,63 481 262 λ ~τΟ- Οχϋ* 1,99 440 263 *Ú- 2,89 454 264 ^ μΟΟ 2,68 481 265 Λ rVy·· 2,29 482 266 K^N ^ΤΟ"8' 3,32 492 267 Γι rCP" JT^"" 2,96 432 268 3,31 4 66 269 T, rC^" Sbá 2,72 444 123 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 270 3,33 515 271 gfO 2,58 499 272 ^ /"O··* Ο^Χ>° 2,73 493 EXEMPLO 273

Preparação de 2-(4-(Trifluorometil)benzil)-7-cloro-8-(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

2-Benzil-5-cloro-4-(4- 273A. Preparação de clorofenil)piridazin-3(2H)-ona

124 A uma mistura de 2-benzil-4,5-dicloropiridazin-3(2 H)-ona (30,6 g, 120 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 244A, ácido 4-clorofenilborónico (20,6 g, 132 mmol) e tetraquis(trifenilfosfina)paládio (5 g, 4,3 mmol) em tolueno (300 mL) sob uma atmosfera de árgon, adicionou-se uma solução aquosa de Na2C03 (2 M, 66 mL, 132 mmol) . Agitou-se a mistura reaccional a 100 °C, sob árgon, durante 16 h. Deixou-se, então, que a reacção arrefecesse até à t.a. e verteu-se subsequentemente para água (200 mL). Extraiu-se a mistura resultante com AcOEt (3 x 150 mL). Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com NaCl aquoso saturado. Secou-se a camada orgânica sobre Na2SC>4, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Dissolveu-se o xarope espesso obtido em MeOH (100 mL) e manteve-se a solução resultante a 0 °C até precipitar um sólido branco. Recolheu-se o sólido por filtração, lavou-se com hexanos e triturou-se em seguida, com AcOEt-hexanos para dar o composto em epígrafe, 2-benzil-5-cloro-4-(4-clorofenil)piridazin-3(2H)-ona (12 g, 30%) como um pó branco. LC/MS (método A, processo geral): TR=3,81 min, (M+H)+=331. 273B. Preparação de 5-Cloro-4-(4-clorofenil)piridazin-3(2H)- ona

A uma solução de 2-benzil-5-cloro-4-(4-clorofenil)piridazin-3(2H)-ona (10,2 g, 30,8 mmol) em tolueno (154 mL) , adicionou-se cloreto de alumínio (10,3 g, 77 mmol). Agitou-se a mistura, a 125 50 °C durante 1 h. Após este período, arrefeceu-se a solução até à t.a. e verteu-se a mistura reaccional para água (200 mL) . Extraiu-se a mistura reaccional com AcOEt (3 x 100 mL). Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com NaCl saturado. Secou-se a camada orgânica (sobre Na2S04), filtrou-se e concentrou-se. Triturou-se o resíduo resultante com AcOEt-hexano para dar o composto em epígrafe, 5-cloro-4-(4-clorofenil)piridazin-3(2H)-ona como um sólido esbranquiçado (6,8 g, 92%). LC/MS (método A): TR=2,91 min, (M+H)+=241; 273C. Preparação de 3,5-Dicloro-4-(4-clorofenil)piridazina

Aqueceu-se a 100 °C durante 1 h uma suspensão de 5-cloro-4-(4-clorofenil)piridazin-3(2H)-ona, (6,8 g, 28,2 mmol) em POCI3 (14 mL) . Após este período, arrefeceu-se a mistura reaccional até à t.a.. Concentrou-se em seguida a mistura reaccional sob pressão reduzida. Partilhou-se o resíduo entre AcOEt e água. Extraiu-se a camada aquosa com AcOEt (2 x 100 mL) . Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com NaHC03 aquoso saturado e NaCl aquoso saturado. Secou-se a camada orgânica (sobre Na2S04) , filtrou-se e concentrou-se para dar o composto em epígrafe, 3,5-dicloro-4-(4-clorofenil)piridazina como um sólido esbranquiçado (6,9 g, 96%). LC/MS (método A): TR=3,20 min, (M+H)+=259. 126 273D. Preparação de 1-(5-Cloro-4-(4-clorofenil)piridazin-3-il)hidrazina

A uma solução de 3,5-dicloro-4-(4-clorofenil)piridazina (2,56 g, 10 mmol) em dioxano (36 mL) à t.a. adicionou-se hidrazina (3,2 mL, 100 mL). Após adição, aqueceu-se a reacção até 70 °C durante 2 h. Depois de arrefecer até à t.a., concentrou-se a reacção sob pressão reduzida. Ao resíduo obtido adicionou-se 2-propanol (80 mL) e eliminou-se o sólido branco resultante por filtração. Concentrou-se o líquido recolhido sob pressão reduzida para dar o composto em epígrafe 1-(5-cloro-4-(4-clorofenil)piridazin-3-il)hidrazina como um sólido esbranquiçado (560 mg, 22%) o qual continha 15% do produto secundário (1-(3-cloro-4-(4-clorofenil)piridazin-5- il)hidrazina). Utilizou-se directamente a mistura no passo seguinte, 273E. LC/MS (método A): TR=1,89 min, (M+H)+=255. 127 2 7 3E. Preparação [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona de 7-Cloro-8-(4-clorofenil)-

A uma solução de 1,1'-carbonildiimidazole (1,78 g, 11 mmol) em THF (10 mL) à t.a. adicionou-se uma suspensão de l-(5-cloro-4-(4-clorofenil)piridazin-3-il)hidrazina (560 mg, 2,19 mmol) em THF (10 mL). Após adição, a reacçâo tornou-se uma solução transparente e agitou-se à t.a. durante 1 h. Verteu-se a mistura reaccional então para água e extraiu-se com AcOEt (3 x 50 mL) . Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com NaCl saturado. Secou-se a camada orgânica (sobre Na2S04) , filtrou-se e concentrou-se. Ao resíduo obtido adicionou-se AcOEt (20 mL) , e recolheu-se o precipitado amarelo resultante por filtração e lavou-se com hexano para dar o composto em epígrafe, 7-cloro-8- (4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3 —b]piridazin-3(2H)-ona como um sólido amarelo (300 mg, 61%). LC/MS (método A): TR=2,86 min, (M+H)+=281. 128 EXEMPLO 274

Preparação de 2-(4-Trifluorometil)benzil)-7-cloro-8-(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução de 7-cloro-8-(4-clorofenil)- [1.2.4] triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (86,4 mg, 0,31 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 273, em DMF (1 mL) à t.a. adicionou-se brometo de 4-trifluorometilbenzilo (112 mg, 0,47 mmol), seguido de K2C03 (86 mg, 0,62 mmol). Aqueceu-se a mistura reaccional a 50 °C durante 1 h. Após este período, arrefeceu-se a mistura reaccional até à t.a. Verteu-se a mistura reaccional para água (30 mL) e extraiu-se a mistura resultante com AcOEt (3 X 20 mL). Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com NaCl saturado. Secou-se a camada orgânica (sobre Na2S04) , filtrou-se e concentrou-se. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel (12 g) eluindo com um gradiente de AcOEt (0-60%) em hexano para dar o composto em epígrafe, 2- (4-trifluorometil)benzil)-7-cloro-8-(4-clorofenil)- [1.2.4] triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona como um sólido amarelo

(100 mg, 74%). HPLC: 99% a 7,76 min (tempo de retenção) (Condições: Zorbax SB C18 (4,6 x 75 mm); Eluído com 0% até 100% de B, 8 min gradiente. (A=90% de H2O-10% de MeOH-0,1% de H3P04 e B=10% de H2O-90% de MeOH-0,1% de H3P04); Caudal a 2,5 mL/min. Detecção UV a 220 nm) . MS (ES) : m/z 439 [M+H]+; RMN de 1H 129 (DMSO-d6, 400 MHz) : δ 5,25 (s, 2H) , 7,49 (d, J=8 Hz, 2H) , 7,65 (S, 4H), 7,70 (d, J=8 Hz, 2H), 8,53 (s, 1H). EXEMPLO 275

Preparação de 2-(4-(Trifluorometil)benzil)-8-(4-clorofenil)-7-fenoxi-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução de 2-(4-(trifluorometil)benzil)-8-(4-clorofenil)-7-cloro-[1,2,4]triazolo[4,3—b]piridazin-3(2H)-ona (17 mg, 0,039 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 274 em DMF (0,5 mL) adicionou-se fenol (7,2 mg, 0,077 mmol), seguido de K2C03 (11 mg, 0,077 mmol). Agitou-se a mistura reaccional à t.a. durante 16 h e diluiu-se em seguida com NaOH aquoso 1 M (3 mL) . Formou-se um precipitado amarelo. Recolheu-se o sólido por filtração e lavou-se abundantemente com H20. O produto em bruto foi purificado por HPLC de fase inversa para dar o composto em epígrafe, 2-(4-trifluorometil)benzil)-8-(4-clorofenil)-7-fenoxi-[1,2,4]triazolo[4,3—b]piridazin-3(2H)-ona (12 mg, 62%) como um sólido amarelo. HPLC: 99% a 8,31 min (tempo de retenção) (Condições: Zorbax SB C18 (4,6 x 75 mm); Eluído com 0% até 100% de B, 8 min gradiente. (A=90% de H2O-10% de MeOH-0,1% de H3PO4 e B=10% de H2O-90% de MeOH-0,1% de H3PO4) ; Caudal a 2,5 130 mL/min. Detecção UV a 220 nm). MS (ES): m/z 497 [M+H]+; RMN de (CDC13, 400 MHz): δ 5,25 (s, 2H) , 6,99 (d, J=8 Hz, 2H), 7,21 (t, J=8 Hz, 1H) , 7,37-7, 44 (m, 4H) , 7,54 (d, J=8 Hz, 2H) , 7,61 (d, J=8 Hz, 2H), 7,79-7,82 (m, 2H), 7,90 (s, 1H). EXEMPLO 276

Preparação de 2-(4-Trifluorometil)benzil)-8-(4-clorofenil)-7-(4-fluorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma mistura de 2-(4-(trifluorometil)benzil)-8-(4-clorofenil)-7-cloro-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (30 mg, 0,068 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 274, ácido 4-fluorofenilborónico (47,6 mg, 0,34 mmol), em tolueno (1 mL), adicionou-se tetraquis(trifenilfosfina)paládio (12 mg, 0,01 mmol) seguido de uma solução de Na2C03 em H20 (2 M, 0,19 mL, 0,38 mmol). Agitou-se a mistura reaccional a 100 °C durante 16 h, e diluiu-se então com água. Extraiu-se a mistura resultante com AcOEt (3x5 mL) . Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com NaCl saturado. Secou-se a camada orgânica (sobre Na2S04) , filtrou-se e concentrou-se. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia sobre sílica gel (12 g) eluindo com um gradiente de AcOEt (0-60%) em hexano para dar o composto em epígrafe, 2-(4-trifluorometil)benzil)-8-(4-clorofenil)-7-(4- 131 fluorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2Η)-ona (27 mg, 79%) como um sólido amarelo. HPLC: 99% a 8,13 min (tempo de retenção) (Condições: Zorbax SB C18 (4,6 x 75 mm); Eluído com 0% até 100% de B, 8 min gradiente. (A=90% de H2O-10% de MeOH-0,1% de H3PO4 e B=10% de H2O-90% de MeOH-0,1% de H3P04) ; Caudal a 2,5 mL/min. Detecção UV a 220 nm). MS (ES): m/z 499 [M+H]+; RMN de 1H (CDCI3, 400 MHz) : δ 5,26 (s, 2H) , 7,03-7,08 (m, 2H) , 7,12-7,18 (m, 2H), 7,25-7,28 (m, 2H), 7,30-7,34 (m, 2H), 7,52 (d, J=8 Hz, 2H), 7,60 (d, J=8 Hz, 2H), 8,19 (s, 1H). EXEMPLO 277

Preparação de 7-Cloro-8-(4-clorofenil)-2-(6- (trifluorometil)piridin-3-il)metil-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Utilizando o processo descrito no Exemplo 274, fez-se reagir 7-cloro-8-(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona preparada como se descreveu no Exemplo 273 com 5-(bromometil)-2-(trifluorometil)piridina para dar o composto em epígrafe, 7-cloro-8-(4-clorofenil)-2-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)metil-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona. 132 EXEMPLO 278

Preparação de 8-(4-Clorofenil)-7-(4-(oxazol-2-il)fenil)-2-((6-(trifluorometil)piridin-3-il)metil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

278A. Preparação de 2-(4-Bromofenil)oxazole

Br 0 2-(4-bromofenil)oxazole foi preparado a partir de 4-cloreto de bromobenzoilo e dimetilacetal de aminoacetaldeido seguindo processos na literatura. 133 278Β. Preparação de dioxaborolan-2-il)fenil)oxazole 2- (4 - (4,4,5,5-Tetrametil-l,3,2-

Fez-se reagir 2-(4-bromofenil)oxazole com bis (pinacolato)diboro seguindo processos na literatura para dar o composto em epígrafe, 2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)oxazole. 278C. Preparação de 8-(4-Clorofenil)-7-(4-(oxazol-2-il)fenil)-2-((6-(trifluorometil)piridin-3-il)metil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Fez-se reagir 7-cloro-8-(4-clorofenil)-2-(6- (trifluorometil)piridin-3-il)metil-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, preparada como se descreveu no Exemplo 277 e 2-(4-(4,4,5, 5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2- il) fenil)oxazole utilizando processos análogos aos descritos no Exemplo 276 para dar o composto em epígrafe, 8-(4-clorofenil)-7- 134 (4-(oxazol-2-il)fenil)-2-((6-(trifluorometil)piridin-3-il)metil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona. HPLC: 99% a 8,42 min (tempo de retenção) (Condições: Zorbax SB C18 (4,6 x 75 mm); Eluído com 0% até 100% de B, 8 min gradiente. (A=90% de H2O-10% de MeOH-0,1% de H3P04 e B=10% de H2O-90% de

MeOH-0,1% de H3P04); Caudal a 2,5 mL/min. Detecção UV a 220 nm) . MS (ES) : m/z 549 [M+H]+; RMN de 1E (CDC13, 400 MHz) : δ 5,32 (s, 2H) , 7,23-7,32 (m, 2H) , 7,40-7,59 (m, 4H) , 7,62-7,78 (m, 4H) , 7, 90-8,05 (m, 2H) , 8,24-8,27 (m, 1H), 8,81 (s, 1H) . EXEMPLO 279

Preparação de 7-(4-Fluorofenil)-8-(piridin-4-il)- [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

279A. Preparação de 2-Benzil-5-cloro-4-(4-piridin-4-il)piridazin-3(2H)-ona

A uma mistura de 2-benzil-4,5-dicloropiridazin-3(2H)-ona (10,8 g, 42 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 244A, 135 4-(4,4,5, 5,-tetrametil-1,3,2-dioxoborolan-2-il)piridina (7,9 g, 38,5 mmol) em tolueno (80 mL) sob uma corrente de árgon, adicionou-se tetraquis(trifenilfosfina)paládio (4,4 g, 3,8 mmol), seguido de uma solução aquosa de Na2C03 (2 M, 21 mL, 42 mmol) . Aqueceu-se a mistura reaccional até 100 °C sob árgon durante 16 h. Depois de arrefecer até à t.a., verteu-se a mistura reaccional para água (200 mL) e extraiu-se com AcOEt (3 x 150 mL) . Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com NaCl aquoso saturado. Secou-se a camada orgânica (sobre Na2S04) , filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel (330 g) eluindo com um gradiente de AcOEt (30-100%) em hexanos para dar o composto em epígrafe, 2-benzil-5-cloro-4-(4-piridin-4-il)piridazin-3 (2H)-ona (3,1 g, 27%) como um sólido amarelo. LC/MS (método A): TR=1,95 min, (M+H)+=298. 279B. Preparação de 2-Benzil-5-(4-fluorofenil)-4-(piridin-4-il)piridazin-3(2H)-ona

O composto em epígrafe foi preparado a partir de 2-benzil-5-cloro-4-(4-piridin-4-il)piridazin-3 (2H)-ona e ácido 4-fluorofenilborónico utilizando processos análogos aos descritos no Exemplo 276. O produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel para dar o composto em epígrafe, 2-benzil-5- (4-fluorofenil)-4-(piridin-4-il)piridazin-3(2H)-ona. LC/MS (método A): TR=2,52 min, (M+H)+=358. 136 279C. Preparação de 5-(4-Fluorofenil)-4-(piridin-4-il)piridazin-3(2H)-ona

A uma solução de 2-benzil-5-(4-fluorofenil)-4-(piridin-4-il)piridazin-3(2H)-ona (1,04 g, 2,91 mmol) em tolueno (15 mL) adicionou-se cloreto de alumínio (970 mg, 7,28 mmol). Agitou-se a reacçâo a 90 °C durante 30 min. Depois de arrefecer até à t.a., verteu-se a mistura reaccional para água (50 mL). Extraiu-se a mistura resultante com AcOEt (3 x 50 mL). Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com NaHC03 aquoso saturado, NaCl aquoso saturado. Secou-se a camada orgânica (sobre Na2S04), filtrou-se e concentrou-se. Triturou-se o resíduo resultante com AcOEt-hexano para dar o composto em epígrafe, 5-(4-fluorofenil)-4-(piridin-4-il)piridazin-3 (2H)-ona como um sólido esbranquiçado (560 mg, 70%). LC/MS (método A): TR=1,25 min, (M+H)+=268. 279D. Preparação de 3-Cloro-5-(4-fluorofenil)4-(piridin-4-il)piridazina

Fez-se reagir 5-(4-fluorofenil)-4-(piridin-4-il)piridazin-3(2H)-ona com P0C13 utilizando processos análogos aos descritos no Exemplo 273C para dar o composto em epígrafe, 3-cloro-5-(4- 137 LC/MS (método A): fluorofenil)4-(piridin-4-il)piridazina. TR = 1,43 min, (M+H)+= 286. 279E. Preparação de 1-(5-(4-fluorofenil)4-(piridin-4-il)piridazin-3-il)hidrazina

A uma solução de 3-cloro-5-(4-fluorofenil)4-(piridin-4-il) piridazina (586 mg, 2,05 mmol) em piridina (3 mL) à t.a. adicionou-se mono-hidrato de hidrazina (0,6 mL) . Após adição, aqueceu-se a reacção até 100 °C durante 3 h. Após este período, arrefeceu-se a mistura reaccional até à t.a.. Concentrou-se a mistura reaccional sob pressão reduzida e diluiu-se o resíduo com água. Extraiu-se então a mistura resultante com AcOEt (3 x 50 mL) . Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com Nacl saturado. Secou-se a camada orgânica (sobre Na2S04) , filtrou-se e concentrou-se. Triturou-se o resíduo resultante com AcOEt-hexano para dar o composto em epígrafe, 1-(5-(4-fluorofenil)4-(piridin-4-il)piridazin-3-il)hidrazina (450 mg, 78%) como um sólido esbranquiçado. LC/MS (método A): TR=1,10 min, (M+H)+=282. 138 279F. Preparação de 7-(4-Fluorofenil)-8-(piridina-4-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução de 1,1'-carbonildiimidazole (1,27 g, 7,86 mmol) em THF (20 mL) adicionou-se uma suspensão de 1-(5-(4-fluorofenil)4-(piridin-4-il)piridazin-3-il)hidrazina (442 mg, 1,57 mmol) em THF (5 mL) . Após a adição, aqueceu-se a mistura reaccional até 66 °C. Após 20 min., arrefeceu-se a mistura reaccional até à t.a. e concentrou-se em seguida a mistura reaccional sob pressão reduzida. Diluiu-se o resíduo com água. Extraiu-se a mistura resultante com AcOEt (3 X 100 mL) . Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com NaCl saturado. Secou-se a camada orgânica (sobre Na2S04), filtrou-se e concentrou-se. Triturou-se o resíduo resultante com AcOEt-hexano para dar o composto em epígrafe, 7-(4-fluorofenil)-8-(piridina-4-il)-[1,2,4] triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (440 mg, 91%) como um sólido amarelo. LC/MS (método A): TR=1,27 min, (M+H)+=308. 139 EXEMPLO 280

Preparação de 2-(4-(Isoxazol-5-il)benzil)-7-(4-fluorofenil)-8-(piridin-4-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

0 composto em epígrafe foi preparado fazendo reagir 7-(4-fluorofenil)-8-(piridina-4-il)-[1,2,4]-triazolo[4,3-b]piri-dazin-3(2H)-ona, preparada como se descreveu no Exemplo 279F, 5-(4-(bromometil)fenil)isoxazole, preparado como se descreveu no Exemplo 250A por processos análogos aos descritos no Exemplo 2 como um sólido amarelo (68%). HPLC: 99% a 5,46 min (tempo de retenção) (Condições: Zorbax SB C18 (4,6 x 75 mm); Eluído com 0% até 100% de B, 8 min gradiente. (A=90% de H2O-10% de MeOH-0,1% de H3PO4 e B=10% de H2O-90% de MeOH-0,1% de H3P04); Caudal a 2,5 mL/min. Detecção UV a 220 nm) . MS (ES) : m/z 465 [M+H]+; RMN de XH (CDCls, 400 MHz) : δ 5,25 (s, 2H) , 6,51 (d, J=0,96 Hz, 11H), 7,01-7,09 (m, 2H) , 7,11-7,18 (m, 2H) , 7,23 (dd, Jl=4,40 Hz, J2=l,76 Hz, 2H), 7,51 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,77 (d, J=8,3 Hz, 2H), 8,21 (s, 1H), 8,28 (d, J=l,76 Hz, 1H), 8,61-8,64 (m, 2H). 140 EXEMPLO 281

Preparação de 2-(4-Isoxazol-3-il)benzil)-7-(4-fluorofenil)-8-(piridin-4-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

0 composto em epígrafe foi preparado fazendo reagir 7-(4-fluorofenil)-8-(piridina-4-il)-[1,2,4]-triazolo [4,3-b]piridazin-3(2 H)-ona, preparada como se descreveu no Exemplo 279F, 3-(4-(bromometil)fenil)isoxazole, preparado como se descreveu no Exemplo 251A por processos análogos aos descritos no Exemplo 2 para dar 2-(4-isoxazol-3-il)benzil)-7-(4-fluorofenil)-8-(piridin-4-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona como um sólido amarelo (59%). HPLC: 99% a 5,33 min (tempo de retenção) (Condições: Zorbax SB C18 (4,6 x 75 mm);

Eluído com 0% até 100% de B, 8 min gradiente. (A=90% de H2O-10% de MeOH-0,1% de H3P04 e B=10% de H2O-90% de MeOH-0,1% de H3P04) ; Caudal a 2,5 mL/min. Detecção UV a 220 nm) . MS (ES) : m/z 465 [M+H]+; RMN de ΧΗ (CDC13, 400 MHz) : δ 5,26 (s, 2H) , 6,65 (S, 1H) , 7,07 (t, J=8,36 Hz, 2H), 7,10-7,18 (m, 2H) , 7,23 (d, J=5,30 Hz, 2H) , 7 51 (d, J=8,36 Hz, 2H) , 7,80 (d, J=7,88 Hz, 2H) , 8,21 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 8,62 (d, J=5,30 Hz, 2H). 141 EXEMPLO 282

Preparação de 7-(4-Metoxifenil)-8-(piridina-4-il)- [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

282A. Preparação de 5-Cloro-4-(piridin-4-il)piridazin-3 (2H)-ona

À suspensão de 2-benzil-5-cloro-4-(4-piridin-4-il)piridazin-3(2H)-ona (3,9 g, 13,1 mmol) preparada como se descreveu no 279A, em tolueno (65 mL) adicionou-se cloreto de alumínio (4,37 g, 32,7 mmol). Agitou-se a mistura a 90 °C durante 1 h. Após este período, arrefeceu-se a mistura reaccional até à t.a. Partilhou-se a mistura reaccional entre AcOEt e NaHC03 aquoso saturado (pH ajustado até 7) . Recolheu-se o precipitado formado por filtração e lavou-se com AcOEt para dar 1,8 g do composto em epígrafe. Extraiu-se a camada aquosa com AcOEt (2 x) e lavou-se as camadas orgânicas reunidas com NaCl aquoso saturado. Secou-se a camada orgânica (sobre Na2S04), filtrou-se e concentrou-se. Triturou-se o resíduo obtido com AcOEt-hexano para dar mais 0,7 g. Em conjunto foi obtido 2,5 g (92%) do composto em 142 epígrafe, 5-cloro-4-(piridin-4-il)piridazin-3(2H) -ona como um sólido esbranquiçado. LC/MS (método A): TR=0,48 min, (M+H)+=208. 282B. Preparação de 3,5-Dicloro-4-(piridin-4-il)piridazina

Aqueceu-se a 120 °C durante 3 h uma suspensão de composto 5-cloro-4-(piridin-4-il)piridazin-3 (2H)-ona (2,5 g, 12 mmol) em POCI3 (20 mL). Após este período, arrefeceu-se a mistura reaccional até à t.a.. Concentrou-se a mistura reaccional sob pressão reduzida. Tratou-se o resíduo obtido com NaHCCb aquoso saturado gelado. Recolheu-se o precipitado formado por filtração e lavou-se com água para dar o composto em epígrafe, 3,5-dicloro-4-(piridin-4-il)piridazina como um sólido esbranquiçado (1,8 g, 67%). LC/MS (método A): TR=0,70 min, (M+H)+=22 6. 143 282C. Preparação de 3-Cloro-5-(4-metoxifenil)-4-piridin-4-il)piridazina

0 composto em epígrafe foi preparado fazendo reagir 3,5-dicloro-4-(piridin-4-il)piridazina com ácido 4-metoxifenilborónico por processos análogos aos descritos no Exemplo 279D para dar 3-cloro-5-(4-metoxifenil)-4-piridin-4-il)piridazina. LC/MS (método A): TR=1,58 min, (M+H)+=298. 282D. Preparação de 1-(5-(4-Metoxifenil)-4-(piridin-4-il)piridazin-3-il)hidrazina

0 composto em epígrafe foi preparado fazendo reagir 3-cloro-5-(4-metoxifenil)-4-piridin-4-il)piridazina com mono-hidrato de hidrazina por processos análogos aos descritos no Exemplo 244H para dar 1-(5-(4-metoxifenil)-4-(piridin-4-il)piridazin-3-il)hidrazina. LC/MS (método A): TR=1,18 min, (M+H)+=294. 144 282Ε. Preparação de 7-(4-Metoxifenil)-8-(piridina-4-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

0 composto em epígrafe foi preparado fazendo reagir 1-(5-(4-metoxifenil)-4- (piridin-4-il)piridazin-3-il)hidrazina com carbonildiimidazole (CDI) por processos análogos aos descritos no Exemplo 279F para dar 7-(4-metoxifenil)-8-(piridina-4-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona. LC/MS (método A): TR=1,37 min, (M+H)+=320. EXEMPLO 283

Preparação de 2-(4-Isoxazol-5-il)benzil)-7-(4-metoxifenil)-8-(piridin-4-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

0 composto em epígrafe foi preparado fazendo reagir 7-(4-metoxifenil)-8-(piridina-4-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, preparada como se descreveu no Exemplo 145 282, 5-(4-(bromometil)fenil)isoxazole, preparado como se descreveu no Exemplo 250A por processos análogos aos descritos no Exemplo 2 para dar um sólido amarelo. HPLC: 99% a 5,53 min (tempo de retenção) (Condições: Zorbax SB C18 (4,6 x 75 mm);

Eluido com 0% até 100% de B, 8 min gradiente. (A=90% de H2O-10% de MeOH-0,1% de H3P04 e B=10% de H2O-90% de MeOH-0,1% de H3P04) ; Caudal a 2,5 mL/min. Detecção UV a 220 nm) . MS (ES) : m/z 477 [M+H]+; RMN de 2H (CDC13, 400 MHz) : δ 3,81 (s, 3H) , 5,25 (s, 2H) , 6,51 (s, 1H), 6,84 (d, J=8,8 Hz, 2H) , 7,07 (d, J=8,8 Hz, 2H) , 7,10=7,30 (m, 2H) , 7,51 (d, J=8,3 Hz, 2H) , 7,77 (d, J=8,3 Hz, 2H), 8,22-8,30 (m, 2H) , 8, 60-8, 70 (m, 2H). EXEMPLO 284 ATÉ 353

Os Exemplos seguintes foram preparados de acordo com os métodos e processos acima. Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 284 V, j-rOi Xó 8,22b 511 285 9, 01b 537 286 °γθι t(~0-í 7,26b 559 146 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 287 Vl rN.T^-^~FV 7,2b 4 96 288 £Yf· 8,15b 481 289 8,4 6b 495 290 ΎΐτΓ0^ fXjQí h,c„ A A 8,23b 529 291 XLtff^ r\Jj 8,4 lb 565 292 "ΧχΚΑ ✓JU 0 8, lb 539 293 <°Xj" 8,07b 525 294 XkffP^' 0xr 7,53b 567 295 XKxfP^' ^AJ 7,36b 513 296 fs *rO-& JT^° 3, 42e 525 147 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 297 Vi r(Oi XXÍ 0 7, 66b 525 298 xu>° 0 7,44b 540 299 Vi ^-yU 0 7,39b 538 300 8,05b 529 301 Xuí^ Hjff' 8,18b 511 302 ιΓτ^ />vJn^ Cí 8,03b 548 303 Vl r(Oit 7, 68b 506 304 •γ, ryH £xr 6b 483 305 ΎΧ/ί^ 6, 34b 483 306 Λ iX&i j£tr 5,27b 467 148 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 307 ° 5, 02b 472 308 λ -KH' 4,7910 474 309 QrfCK IXí 5, 35b 479 310 °n.r<S^' 6, 93b 482 311 vs r'<hfF zyj° 7, llb 482 312 o qtí ° 7, 6b 490 313 Yl kÀjApA-o 5, 87b 503 314 °xQkP~^ k 5, 99b 531 315 C'Y1 r<S^r ll^N 7,47b 482 316 V» 7,53b 549 149 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 317 ✓Ί «ΟΧν XO ° 3, 43e 448 318 '“O 4,69 529 319 «Vil 4,15 481 320 a 4,13 481 321 V, & 3, 85 482 322 3^ 3,4 440 323 ^ μ-0-Çs 2,62 461 324 U 2,53d 461 325 3^· 4,25 419 326 o, Γν-fV^ yw \—y ch, f 3,29c 533 150 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 327 yg-OX) ò ° F-\-r F 3,27c 562 328 2,77c 486 329 3,13° 521 330 „ "V», yfVCK ç* 2,82c 553 331 y F 3,23c 539 332 rt ^τγ° 3, 34c 488 333 V -,C 3, 96c 488 334 r-O+ 3, 08c 501 335 V:^ 'cHj F 3,29c 533 336 VO-CUO F 3,27° 562 151 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 337 P\ χχχ° 2,77c 486 338 3,13c 521 339 «ff 2,82c 553 340 ff 3,23c 539 341 y^o{F 3, 34c 488 342 3, 96° 488 343 •rV ffY Cs 3,08° 501 344 $c r 3, 65c 538 345 (T* 3, 65c 538 346 P‘ 1 3, llc 476 152 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 347 LJ ^.ca 3, 74c 486 348 v- 3, 36c 526 349 ξψ F 3,15c 533 350 VQ VaJ ^0» p- 2,82c 512 351 o r\-J~\-o XKç " CJL 'a F-f+ F 2,87c 514 352 F 3, 08c 501 353 a. Γ\-Γ\-°> Y\~Í CH» 3,2C 513 153 EXEMPLO 354

Preparação de 8-Cloro-7-(4-cloro-fenil)-2H- [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3-ona

Cl

N"NH

354A. Preparação de 2-Benzil-4-cloro-5-metoxipiridazin-3(2H)-ona

O

A uma solução de 2-benzil-4,5-dicloro-2H-piridazin-3-ona (22,31 g, 87,47 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 244A, em MeOH seco (175 mL) a 0 °C, adicionou-se, gota a gota, uma solução de metóxido de sódio em metanol (25% em peso em MeOH, 25 mL). Aqueceu-se lentamente a mistura até à temperatura ambiente e agitou-se durante 18 h. Diluiu-se a mistura reaccional com cloreto de metileno (200 mL) e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado para proporcionar o composto em epígrafe, 2-benzil-4-cloro-5-metoxipiridazin-3(2H)-ona (22,2 g) o qual estava >95% puro como determinado por HPLC e utilizou-se na reacção seguinte, Exemplo 354B, sem purificação adicional. 154 354Β. Preparação de 2-Benzil-4-cloro-5-hidroxipiridazin-3(2H)-ona

O

À suspensão de 2-benzil-4-cloro-5-metoxipiridazin-3(2H)-ona (22,2 g, 87,47 mmol) em água (150,0 mL), adicionou-se hidróxido de potássio (5,89 g) e aqueceu-se a mistura até refluxo. Após 3 h, arrefeceu-se então a mistura até à temperatura ambiente e adicionou-se ácido clorídrico aquoso 6 N e ajustou-se o pH da solução até 3,0. Filtrou-se o precipitado, lavou-se com água e secou-se sob pressão reduzida para dar o composto em epígrafe, 2-benzil-4-cloro-5-hidroxipiridazin-3(2H)-ona (20,45 g) como um sólido branco. HPLC: 2,40 min. 354C. Preparação de 2-Benzil-4-Cloro-5-(4-clorofenil)-2H-piridazin-3-ona

O

Cl A uma solução de 2-benzil-4-cloro-5-hidroxipiridazin-3(2H)-ona (7,84 g, 33,1 mmol) em cloreto de metileno (110,0 mL) a -10 °C, adicionou-se trietilamina (4,02 g, 39,75 mmol) seguido de anidrido triflurometanossulfónico (10 g, 35,45 mmol). Agitou-se a mistura durante 30 min e verteu-se em seguida para uma 155 solução gelada de ácido clorídrico aquoso 0,5 N (200 mL). Extraiu-se então a mistura com cloreto de metileno (3 x 200 mL) . Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com água e NaCl aquoso saturado. Secou-se a camada orgânica (MgS04) , filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para dar o triflato correspondente (12,91 g) como um óleo rosa. Dissolveu-se este material numa mistura 1:1 de THF (55 μL) e MeOH (55 mL) e desgaseificou-se a solução com árgon. Adicionou-se ácido 4-clorofenilborónico (2,37 g, 15,18 mmol), dicloro-bis(clorodi-terc-butilfosfina)paládio (0,89 g, 1,65 mmol) e carbonato de potássio (13,67 g) e agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante 1,5 h. Diluiu-se então a mistura reaccional com água (200 mL) . Extraiu-se a solução resultante com CH2C12 (2 x 200 mL) . Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com água e NaCl aquoso saturado. Secou-se a camada orgânica (MgSOí) , filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. O resíduo foi depois purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel utilizando hexanos/AcOEt (2:1) para dar o composto em epígrafe, 2-benzil-4-cloro-5-(4-cloro-fenil)-2H-piridazin-3-ona 3,9 g como um sólido branco. HPLC: 3,72 min. 156 354D. Preparação de 4-Cloro-5-(4-clorofenil)-2H-piridazin-3- ona

O

Dissolveu-se 2-benzil-4-Cloro-5-(4-cloro-fenil)-2H- piridazin-3-ona (3,19 g, 9,65 mmol) em tolueno (50 mL) . Adicionou-se então cloreto de aluminio (A1C13, 3,22 g, 24,1 mmol) e aqueceu-se a mistura reaccional a 50 °C. Após 20 min, arrefeceu-se a mistura reaccional até à t.a. e verteu-se, em seguida, para água gelada (200 mL). Extraiu-se a solução resultante com AcOEt (3 x 200 mL). Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com água (500 mL) . Secou-se a camada orgânica (MgS04), filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel, utilizando AcOEt, para dar o composto em epígrafe, 4-cloro-5- (4-clorofenil)-2H-piridazin-3-ona (2,33 g) como um sólido branco. HPLC: 2,74 min. 157 354Ε. Preparação de 3,4-Dicloro-5-(4-clorofenil)-piridazina

Cl

Suspendeu-se 4-cloro-5- (4-clorofenil-2H-piridazin-3-ona (2,33 g, 9,65 mmol) em P0C13 (11 mL) . Colocou-se a mistura reaccional num banho de óleo pré-aquecido a 110 °C durante 1 h. Depois de arrefecer até à t.a., verteu-se a mistura sobre 200 g de gelo para desactivar o excesso de P0C13 e extraiu-se a solução resultante com AcOEt. Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com água. Secou-se a camada orgânica (MgS04), filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para dar o composto em epígrafe, 3,4-dicloro-5-(4-clorofenil)-piridazina (2,6 g) como um sólido amarelo claro. HPLC: 3,26 min. 354F. Preparação de 1-[4-Cloro-5-(4-clorofenil)-piridazin-3-il]-hidrazina

Suspendeu-se 3,4-dicloro-5-(4-clorofenil)-piridazina (6,0 g, 23,1 mmol) em isobutanol (150 mL) a 0 °C e adicionou-se, gota a gota, mono-hidrato de hidrazina (11,1 g) ao longo de 10 min. Aqueceu-se lentamente a mistura reaccional até à t.a. e agitou- 158 se durante 24 h. Arrefeceu-se a mistura num banho de gelo/água durante 15 min e filtrou-se. Lavou-se o sólido branco assim obtido com isopropanol frio e secou-se para dar o composto em epígrafe, 1-[4-cloro-5-(4-cloro-fenil)-piridazin-3-il]-hidrazina, (5,0 g) como um sólido branco. HPLC: 1,65 min. 354G. Preparação de 8-Cloro-7-(4-clorofenil)-2H-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3-ona

N"NH

A uma solução de trifosgénio (30,4 g, 102,4 mmol) em THF (300 mL), adicionou-se 1- [4-cloro-5- (4-cloro-fenil)-piridazin-3-il]-hidrazina (6,52 g, 25,61 mmol) em porções ao longo de 15 min à temperatura ambiente. Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 4 h. Após este período, verteu-se a solução para gelo/água (500 mL) e recolheu-se o sólido amarelo claro resultante por filtração. Lavou-se o sólido com HC1 aquoso 0,5N e água. Secou-se em seguida sob vácuo para dar o composto em epígrafe, 2,81 g de 8-cloro-7-(4-clorofenil)-2H- [1,2,4] triazolo[4,3-b]piridazin-3-ona como um sólido amarelo claro. HPLC: 2,78 min; MS, M+H = 281. 159 EXEMPLO 355

Preparação de 2-(4-(Isoxazol-5-il)benzil)-8-cloro-7-(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução de 8-cloro-7-(4-clorofenil)- [1.2.4] triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (300 mg, 1,07 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 354, em DMF (5 mL) adicionou-se K2CO3 (180 mg, 1,3 mmol) seguido de 5-(4-(bromometil)fenil)isoxazole (305 mg, 1,28 mmol), preparado como se descreveu no Exemplo 250A. Agitou-se a mistura reaccional a 70 °C durante 2 h. Arrefeceu-se a mistura reaccional até à t.a., diluiu-se com água (25 mL) e formou-se um precipitado. Recolheu-se o sólido por filtração. Lavou-se o sólido com água (2 x 25 mL) seguida de hexanos (20 mL) . Secou-se o sólido numa estufa de vácuo a 4 0 °C. O composto em epígrafe 2- (4- (isoxazol-5-il)benzil)-8-cloro-7-(4-clorofenil) - [1.2.4] triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (450 mg, 96%) foi obtido como um sólido amarelo. HPLC: 3,50 min; M+H = 438. 160 EXEMPLO 357

Preparação de 2-(4-(Isoxazol-5-il)benzil)-7-(4-clorofenil)-8-(piridin-3-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução, mantida sob agitação, de 2-(4-(isoxazol-5-il)benzil)-8-cloro-7-(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3— b]piridazin-3(2H)-ona (100 mg, 0,23 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 355, em tolueno (2 mL) num balão de fundo redondo adicionou-se Pd(PPh3)4 (16 mg, 0,014 mmol) sob uma corrente de árgon. Adicionou-se subsequentemente 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dixoborolan-2-il)piridina (61 mg, 0,3 mmol).

Sob agitação vigorosa, adicionou-se Na2C03 (97 mg, 0,91 mmol) pré-dissolvido em água (0,25 mL) à suspensão. Borbulhou-se árgon através desta suspensão durante 10 min antes de se colocar o balão num banho de óleo pré-aquecido a 120 °C. Agitou-se a reacção a refluxo durante 6 dias. Deixou-se então que a reacção arrefecesse até à t.a. e verteu-se para água (10 mL) . Extraiu-se a mistura resultante com AcOEt (3 x 10 mL) . Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com água (2 x 10 mL) seguido de NaCl aquoso saturado (2x5 mL). Concentrou-se a camada orgânica sob pressão reduzida. O produto obtido foi purificado por HPLC de fase inversa para dar o composto em epígrafe, 2-(4-(isoxazol-5-il)benzil)-7-(4-clorofenil)-8-(piridin-3-il)- [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (8,5 mg, 8%) como um 161

sólido amarelo pálido. HPLC: 2,98 min; M+H = 481; RMN de 1H (CDC13) , PPm: 8,61 (1H, d, J=6,05 Hz) , 8,55 (1H, d, J=5,0 Hz) , 8,28 (1H , d, J=2,0 Hz)), 8,19 (1H, s) , 7,76 (2H, d, J=10,0 Hz) , 7,69 (1H , d, J=5,0 Hz), 7,51 (2H, d, J= =10,0 Hz) , 7,31-7,33 (3H, m) , 7,09 (2 H, d, J=5,0 Hz), 6,51 (1H, s) , 5,25 (2H, s) . EXEMPLO 357

Preparação de 2-(4-(Isoxazol-5-il)benzil)-7-(4-clorofenil)-8-fenil-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução, mantida sob agitação, de 2-(4-(isoxazol-5-il)benzil)-8-cloro-7-(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (100 mg, 0,23 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 355 em tolueno (2 mL) num balão de fundo redondo adicionou-se Pd(PPh3)4 (16 mg, 0,014 mmol) borbulhando árgon. Adicionou-se, subsequentemente, ácido fenilborónico (36 mg, 0,3 mmol). Sob agitação vigorosa, adicionou-se Na2C03 (97 mg, 0,91 mmol) pré-dissolvido em água (0,25 mL) à suspensão. Borbulhou-se árgon através desta suspensão durante 10 min antes de se colocar o balão num banho de óleo pré-aquecido a 120 °C. Agitou-se a reacção a refluxo durante 6 dias. Deixou-se então que a reacção arrefecesse até à t.a. Após este período, verteu-se a mistura reaccional para água (10 mL) . Extraiu-se a solução 162 resultante com AcOEt (3 x 10 mL) . Lavou-se as camadas orgânicas reunidas com água (2 x 10 mL) seguido de NaCl aquoso saturado (2x5 mL) . Secou-se a camada orgânica (MgS04) , filtrou-se e concentrou-se para se obter um produto em bruto. Este produto em bruto foi purificado por HPLC de fase inversa para dar o composto em epígrafe, 2-(4-(isoxazol-5-il)benzil)-7- (4-clorofenil)-8-fenil-[1,2,4]triazolo[4,3—b]piridazin-3(2H)-ona, (15,5 mg, 14%) como um sólido amarelo pálido. HPLC: 3,68 min; MS, M+H = 4 80; RMN de 1 H (CDC13) , ppm: 8,31 (1H, d, J=2,0 Hz) , 8,22 (1H, s) , 7,77 (2H, d, J=10,0 Hz), 7,51 (2H, d, J=10,0 Hz) , 7,26-7,42 (7H, m) , 7, 09 (2H, d, J=10,0 Hz) , 6, 54 (1H, d, J=5, 0

Hz) , 5, 29 (2H, s) . EXEMPLO 358

Preparação de 8-Cloro-7-(4-clorofenil)-2-(pirazin-2-ilmetil)-2H-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3-ona

A uma solução de 8-cloro-7-(4-clorofenil)-2H-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3-ona (0,62 g, 2,21 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 354, em DMF (10 mL) à t.a. adicionou-se K2C03 (0,61 g, 4,4 mmol) e 2-(clorometil)pirazina (0,83 g) . Aqueceu-se a mistura reaccional 163 a 50 °C durante 2 h. Após este período, diluiu-se a mistura com AcOEt (150 mL) . Lavou-se a solução resultante com água e NaCl aquoso saturado. Secou-se a camada orgânica (MgS04), filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel eluindo com hexanos:AcOEt 1:2 para proporcionar 0,61 g do composto em epígrafe, 8-cloro-7-(4-clorofenil)-2-(pirazin-2-ilmetil)-2H- [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3-ona como um sólido amarelo. TR de HPLC: 2,86 min; MS, M+H = 373; RMN de ΧΗ (CDC13) : δ 8,64 (d, 1H), 8,54 (m, 2H), 8,11 (s, 1H) , 7,54-7,49 (m, 4H) , 5,48 (s, 2H) . EXEMPLO 359

Preparação de 2-(4-(Trifluorometil)benzil-8-cloro-7-(4-clorofenil)-2H-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3-ona

Cl

A uma solução de 8-cloro-7-(4-clorofenil)-2H- [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3-ona (0,54 g, 1,91 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 354, em DMF (5 mL) à t.a. adicionou-se K2C03 (0,40 g, 2,87 mmol) e brometo de 2-(trifluorometil)benzilo (0,595 g, 2,49 mmol). Aqueceu-se a mistura reaccional a 55 °C durante 4 h. Após este período, diluiu-se a mistura com AcOEt (150 mL). Lavou-se a solução 164 resultante com água e NaCl aquoso saturado. Secou-se a camada orgânica (MgSCh) , filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado por cromatografia sobre sílica gel utilizando hexanos:AcOEt (2:1) para proporcionar 0,74 g do composto em epígrafe, 2-(4-(trifluorometil)benzil-8-cloro-7-(4-cloro-fenil)-2H-[1,2,4]triazolo[4,3—b]piridazin-3-ona como um sólido amarelo. TR de HPLC: 3,84 min; MS, M+H = 439. RMN de ΧΗ (CDC13) : δ 8,08 (s, 1H) , 7,44-7,61 (m, 8H), 5,30 (s, 2H) . EXEMPLO 360

Preparação de 2-(4-(Trifluorometil)benzil-7-(4-cloro-fenil)-8-fenoxi-2H-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3-ona

A uma solução de 2-(4-(trifluorometil)benzil-8-cloro-7-(4-clorofenil)-2H-[1,2,4]triazolo[4,3—b]piridazin-3-ona (16,5 mg, 0,376 mmol) preparada como se descreveu no Exemplo 359, em 0,3 mL de DMF à t.a., carbonato de potássio (19,4 mg, 0,14 mmol) adicionou-se seguido de fenol (13,2 mg, 0,14 mmol). Agitou-se a mistura durante 4 h. Após este período, diluiu-se a mistura reaccional com 5 mL de hidróxido de sódio aquoso 1 N. Recolheu-se o precipitado por filtração e lavou-se com NaOH aquoso 1 N e água. Secou-se o sólido ao composto em epígrafe, 2-(4-(trifluorometil)benzil-7-(4-clorofenil)-8-fenoxi-2H- 165 [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3-ona (15,8 mg) como um sólido amarelo claro. TR de HPLC: 4,02 min; MS, M+H = 497; RMN de 1H (CDC13) : δ 8,21 (s, 1H) , 7,52-6, 97 (m, 13H) , 5,12 (s, 2H) . EXEMPLO 361

Preparação alternativa de 2-(4-(Trifluorometil)benzil)-8-cloro-7-(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

361A. Preparação de 2-Benzil-4,5-dicloropiridazin-3(2H)-ona

O

A uma suspensão, mantida sob agitação, de 4,5-dicloro-3-hidroxipiridazina (33 g, 200 mmol) em DMF (260 mL) à temperatura ambiente sob árgon adicionou-se K2CO3 (55 g, 400 mmol), seguido de brometo de benzilo (41 g, 505,8 mmol). Após 16 h verteu-se a mistura reaccional para um balão contendo água (500 mL) sob agitação. Após 15 min de agitação, recolheu-se 0 produto precipitado por filtração e lavou-se abundantemente com água. Secou-se o sólido numa estufa de vácuo a 50 °C durante 16 h para se obter o composto em epígrafe, 2-benzil-4,5-dicloropiridazin- 166

3(2H)-ona, (49,2 g, 96%) como um sólido esbranquiçado. MS

[M+H]+255; Tempo de retenção de HPLC = 3,02 min. 361B. Preparação de 2-benzil-5-cloro-4-metoxipiridazin-3(2H)-ona

O

A uma solução, mantida sob agitação, de 2-benzil-4,5-dicloropiridazin-3(2H)-ona (22,9 g, 89,8 mmol) em 1,4-dioxano (300 mL) à t.a. sob árgon adicionou-se NaOMe (22,4 mL, solução a 25% em MeOH, 97,9 mmol) ao longo de 10 min através de seringa. Após 2 h, a TLC indicou que a reacção estava concluída. Concentrou-se a mistura reaccional sob pressão reduzida. Adicionou-se uma solução saturada de NaCl (200 mL) e extraiu-se a solução resultante com CH2C12 (2 X 100 mL) . Secou-se (sobre Na2S04) as camadas orgânicas reunidas, concentrou-se sob vácuo e purificou-se por cromatografia em coluna de sílica gel eluindo com CH2C12 para dar o composto em epígrafe, 2-benzil-5-cloro-4-metoxipiridazin-3(2H)-ona (20,3 g, 90%) como um óleo incolor. TLC (CH2C12, Rf = 0,4); MS [M+H]+ 251; Tempo de retenção de HPLC = 2,74 min. 167 de 361C. Preparação metoxipiridazin-3(2H)-ona 2-Benzil-5-(4-clorofenil)-4-

A uma solução de 2-benzil-5-cloro-4-metoxipiridazin-3(2H)-ona (20 g, 80 mmol) e ácido 4-clorofenilborónico (15,6 g, 100 mmol) em tolueno/EtOH (2:1, 600 mL) à t.a. sob árgon adicionou-se (Ph3P)4Pd (1,85 g, 1,8 mmol) e solução aquosa de Na2C03 2 M (160 mL, 320 mmol). Aqueceu-se a suspensão resultante a 90 °C durante 16 h sob agitação. A HPLC/MS indicou que permanecia cerca de 4% de 2-benzil-5-cloro-4-metoxipiridazin-3(2H)-ona. Depois de arrefecer a mistura reaccional até à t.a., extraiu-se a solução com CH2C12 (2 x 150 mL) . Secou-se (sobre Na2S04) as camadas orgânicas reunidas, filtrou-se e concentrou-se sob vácuo. 0 produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (ISCO), eluindo com hexanos/AcOEt, para se obter o composto em epígrafe, 2-Benzil-5-(4-clorofenil)-4-metoxipiridazin-3 (2H)-ona, puro (21,7 g, 83%) como um sólido branco. MS [M+H]+ 327; Tempo de retenção de HPLC = 3,85 min. 168 361D. Preparação de 3,4-dicloro-5-(4-clorofenil)piridazina

Cl

Aqueceu-se num balão selado a 80 °C durante 16 h uma solução, mantida sob agitação, de 2-benzil-5-(4-clorofenil)-4-metoxipiridazin-3(2H)-ona (16,3 g, 50 mmol) em POCI3 (100 mL) . Arrefeceu-se a mistura reaccional até temperatura ambiente e adicionou-se mais P0C13 (50 mL) . Aqueceu-se então a mistura reaccional a 120 °C durante Ide arrefeceu-se em seguida até à temperatura ambiente. Eliminou-se a maior parte do solvente sob vácuo. Adicionou-se, cuidadosamente, gelo (300 g) ao resíduo enquanto se agitava, e extraiu-se a mistura resultante com CH2C12 (250 mL x 2). Secou-se (sobre Na2S04) as fases orgânicas reunidas e concentrou-se sob vácuo. 0 produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (ISCO) eluindo com hexanos/AcOEt/CH2Cl2. O produto desejado (9,6 g) foi obtido como um sólido castanho com uma pureza de 95%. Lavou-se este com metanol (20 mL X 2) e secou-se para se obter o composto em epígrafe puro, 3,4-dicloro-5- (4-clorofenil)piridazina (5,3 g, 41%) como um sólido esbranquiçado. MS [M+H]+ = 259; Tempo de retenção de HPLC = 3,40 min; RMN de 3Η (400 MHz, CDC13) δ 9,00 (s, 1H), 7,47-7,55 (m, 4H) ; RMN de 13C (100 MHz, CDC13) 6 156,4, 150,6, 139,4, 136,7, 135,1, 130,6, 130,3, 129,3. 169 361Ε. Preparação de 1-(4-cloro-5-(4-clorofenil)piridazin-3-il)hidrazina

A uma suspensão, mantida sob agitação, de 3,4-dicloro-5- (4-clorofenil)piridazina (2,58 g, 10 mmol) em 2-BuOH (150 mL) à t.a. adicionou-se hidrazina anidra (4,80 g, 150 mmol). Aqueceu-se a mistura reaccional a 60 °C sob árgon. A análise por HPLC/MS indicou que a reacção estava concluída após 5 h. Arrefeceu-se a mistura reaccional até 0 °C e recolheu-se o produto por filtração. Lavou-se então o sólido com 2-propanol gelado (10 mL X 2) . Depois de secar o sólido sob vácuo à temperatura ambiente durante 16 h, o composto em epígrafe, 1-(4-cloro-5- (4-clorofenil)piridazin-3-il)hidrazina foi obtido numa proporção 1,6:1 com 1-(3-cloro-5-(4-clorofenil)piridazin-4-il)hidrazina indesejada (2,16 g bruta). 1-(4-cloro-5-(4-clorofenil)piridazin-3-il)hidrazina MS [M+H]+ 255; Tempo de retenção de HPLC = 1,63 min. 1-(3-cloro-5-(4-clorofenil)piridazin-4-il)hidrazina MS [M+H]+ 255; Tempo de retenção de HPLC = 1,09 min. 170 361F. Preparação [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona de 8-Cloro-7-(4-clorofenil)-

Arrefeceu-se até 0 °C sob árgon uma solução, mantida sob agitação, de trifosgénio (17,5 g, 59,0 mmol) em THF (150 mL) e adicionou-se uma mistura de 1-(4-cloro-5-(4-clorofenil)piridazin-3-il)hidrazina e 1-(3-cloro-5-(4-clorofenil)piridazin-4-il)hidrazina, como preparadas no Exemplo 361E, (3,0 g bruta) ao longo de 3 min. Deixou-se então que a mistura reaccional aquecesse gradualmente até à t.a. e agitou-se em seguida durante 16 h. Eliminou-se o solvente sob vácuo para reduzir a mistura reaccional até metade do seu volume original, e arrefeceu-se a suspensão resultante num banho de gelo. Adicionou-se água gelada (300 mL), seguido de agitação durante 30 min. Recolheu-se o produto por filtração e lavou-se com HC1 aquoso 0,5 N (20 mL x 2), depois com H20 (20 mL x 2). Depois de secar sob vácuo à temperatura ambiente durante 16 h, o composto em epígrafe, 8-cloro-7-(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (2,1 g) foi obtido como um sólido amarelo. MS [M+H]+ 281; Tempo de retenção de HPLC = 2,71 min. 171 361G. Preparação de 2-(4-(trifluorometil)benzil)-8-cloro-7-(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Cl A uma suspensão, mantida sob agitação, de 8-cloro-7-(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3 (2H)-ona (1,12 g, 4,0 mmol) e brometo de 4-(trifluorometil)benzilo (1,24 g, 5,2 mmol) em DMF (15 mL) à t.a. sob árgon adicionou-se K2C03 (0,83 g, 5,2 mmol). Aqueceu-se a mistura resultante a 55 °C durante 2 h. Após 2 h, A análise por HPLC/MS indicou que a reacção estava concluída. Arrefeceu-se a mistura reaccional até à t.a. e adicionou-se AcOEt (100 mL). Lavou-se a mistura resultante com NaCl saturado (50 mL x 2) . Secou-se a camada orgânica (sobre Na2SC>4), filtrou-se e concentrou-se sob vácuo com co-evaporação do tolueno (10 mL x 2) para se obter um sólido amarelo escuro. Lavou-se este produto em bruto com MeOH (10 mL x 2), secou-se então sob vácuo à temperatura ambiente durante 3 h para se obter o composto em epígrafe, 2—(4— (trifluorometil)benzil)-8-cloro-7-(4-clorofenil) -[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (1,3 g, 74%) como um sólido amarelo. MS [M+H]+ 439; Tempo de retenção de HPLC = 3,92 min; RMN de (400 MHz, CDC13) δ 9,00 (s, 1H) , 7,45-7,61 (m, 8H), 5,32 (s, 211) . 172 EXEMPLO 362

Preparação de 8-Cloro-7-p-tolil-2-((6- (trifluorometil)piridin-3-il)metil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Me 362A. Preparação de 2-Benzil-4-metoxi-5-p-tolilpiridazin-3(2H)-ona

O

A uma solução de 2-benzil-5-cloro-4-metoxipiridazin-3(2H)-ona (20 g, 80 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 361B, e ácido 4-metilfenilborónico (13 g, 96 mmol) em tolueno (300 mL) à t.a. sob árgon adicionou-se (Ph3P)4Pd (1,85 g, 1,8 mmol) e solução aquosa de Na2C03 2 M (160 mL, 320 mmol). Aqueceu-se a suspensão resultante a 100 °C durante 5 h sob agitação. A HPLC/MS indicou que a reacção estava concluída. Depois de arrefecer a mistura reaccional até à temperatura ambiente, extraiu-se com CH2CI2 (200 mL x 2), secou-se então (sobre Na2S04), filtrou-se e concentrou-se sob vácuo. 0 produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (ISCO) 173 eluindo com hexanos/AcOEt para dar o composto em epígrafe, 2-benzil-4-metoxi-5-p-tolilpiridazin-3(2H)-ona, (21,9 g, 89%) como uma espuma branca. MS [M+H]+ 307; Tempo de retenção de HPLC = 3,78 min. 362B. Preparação de 3,4-Dicloro-5-p-tolilpiridazina

Cl

N i N

Aqueceu-se, num balão selado a 120 °C durante 24 h, uma solução, mantida sob agitação, de 2-benzil-4-metoxi-5-p-tolilpiridazin-3(2H)-ona (15,3 g, 50 mmol) em P0C13 (100 mL) . Arrefeceu-se a mistura reaccional até à t.a. e adicionou-se mais POCI3 (50 mL). Aqueceu-se a mistura reaccional novamente a 120 °C durante Ide arrefeceu-se em seguida até à temperatura ambiente. Eliminou-se a maior parte do solvente sob vácuo. Adicionou-se cuidadosamente gelo (200 g) ao residuo enquanto se agitava e extraiu-se a mistura resultante com CH2CI2 (250 mL X 2). Secou-se (sobre Na2S04) as fases orgânicas reunidas e concentrou-se sob vácuo. O produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna de silica gel (ISCO) eluindo com hexanos/AcOEt/CH2Cl2. Obteve-se o produto desejado impuro (10 g) como um sólido castanho. A lavagem com metanol (15 mL X 2), seguida de secagem do sólido proporcionou o composto em epígrafe puro, 3,4-dicloro-5-p-tolilpiridazina, (5,1 g, 43%) como um sólido esbranquiçado. MS [M+H]+ 239; Tempo de retenção de HPLC = 3,34 mm. 174 362C. Preparação de il)hidrazina 1-(4-Cloro-5-p-tolilpiridazin-3-

A uma suspensão, mantida sob agitação, de 3,4-dicloro-5-p-tolilpiridazina (4,5 g, 18,9 mmol) em 2-BuOH (200 mL) à temperatura ambiente adicionou-se hidrazina anidra (9,1 g, 284 mmol). Aqueceu-se a mistura reaccional a 60 °C sob árgon. A análise por HPLC/MS indicou que a reacção estava concluída após 15 h. Arrefeceu-se a mistura reaccional até 0 °C e recolheu-se o produto por filtração e lavou-se novamente com 2-propanol gelado (20 mL x 2) . Depois de secar sob vácuo à temperatura ambiente durante 16 h, obteve-se o composto em epígrafe, 1-(4-cloro-5-p-tolilpiridazin-3-il)hidrazina, numa proporção 2,6:1 com 1-(3-cloro-5-p-tolilpiridazin-4-il)hidrazina indesejada (3,6 g bruta). 1-(4-cloro-5-p-tolilpiridazin-3-il)hidrazina MS [M+H] + 235; Tempo de retenção de HPLC = 1,84 min. 1-(3-cloro-5-p-tolilpiridazin-4-il)hidrazina MS [M+H]+ 235; Tempo de retenção de HPLC =1,35 min. 175 362D. Preparação de 8-Cloro-7-p-tolil-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Arrefeceu-se até 0 °C sob árgon uma solução, mantida sob agitação, de trifosgénio (19,0 g, 64,0 mmol) em THF (200 mL) e adicionou-se a mistura de 1-(4-cloro-5-p-tolilpiridazin-3-il)hidrazina e 1-(3-cloro-5-p-tolilpiridazin-4-il)hidrazina (3,0 g bruta), preparada como se descreveu no Exemplo 362C, ao longo de 3 min. Deixou-se que a mistura reaccional aquece-se gradualmente até à t.a. e agitou-se em seguida durante 16 h. Eliminou-se o solvente sob vácuo para reduzir a mistura reaccional até metade do seu volume original e arrefeceu-se a suspensão resultante num banho de gelo. Adicionou-se água gelada (300 mL) , seguida de agitação durante 1 h. Recolheu-se o produto por filtração e lavou-se com HC1 aquoso 0,1 M (50 mL x 2), depois com H20 (50 mL x 2) . Depois de secar sob vácuo a 50 °C durante 2 d, obteve-se o composto em epígrafe, 8-cloro-7-p-tolil-[1,2,4] triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (2,2 g) como um sólido amarelo. MS [M+H]+ 261; Tempo de retenção de HPLC = 2,75 min; RMN de 2H (400 MHz, THF-d8) δ 11,69 (s, 1H) , 8,10 (s, 1H) , 7,49-7,51 (m, 2H), 7,34-7,35 (m, 2H). 176 362Ε. Preparação de 8-Cloro-7-p-tolil-2-((6- (trifluorometil)piridin-3-il)metil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma suspensão, mantida sob agitação, de 8-cloro-7-p-tolil-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (2,2 g, 8,4 mmol) e 5-(clorometil)-2-(trifluorometil)piridina (2,1 g, 11 mmol) em DMF (15 mL) à temperatura ambiente sob árgon adicionou-se K2C03 (1,74 g, 12,6 mmol). Aqueceu-se a mistura resultante a 55 °C durante 2 h. A análise por HPLC/MS indicou que a reacção estava concluída. Concentrou-se a mistura reaccional sob vácuo com co-evaporação de tolueno (10 mL x 2) para se obter um sólido amarelo escuro. O produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (ISCO) eluindo com hexanos/AcOEt/CH2Cl2. O

produto desejado (2,1 g) foi obtido como um sólido castanho. A lavagem com MeOH (10 mL x 2) e secagem proporcionou o composto em epígrafe puro, 8-cloro-7-p-tolil-2-((6-(trifluorometil)piridin-3-il)metil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2 H)-ona, (1,76 g, 56%) como um sólido amarelo claro. MS [M+H]+ 420; Tempo de retenção de HPLC = 3,53 min; RMN de 1H (400 MHz, CDC13) δ 8,89 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,70 (d, 1H), 7,30-7,50 (m, 4H), 5,36 (s, 2H) , 2,45 (s, 3H) . 177 EXEMPLO 363

Preparação de 2-(4-(Isoxazol-5-il)benzil)-7-(4-clorofenil)-8-(lH-imidazol-l-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

363A. Preparação de 2-(4-(Isoxazol-5-il)benzil)-8-cloro-7-(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona A uma suspensão, mantida sob agitação, de 8-cloro-7- (4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3—b]piridazin-3 (2H)-ona preparada como se descreveu no exemplo 354G, e 5-(4-(bromometil)fenil)isoxazole (122 mg, 0,51 mmol), preparado como se descreveu no Exemplo 250A em DMF (5 mL) à t.a. sob árgon adicionou-se K2CO3 (119 mg, 0,86 mmol). Aqueceu-se a mistura resultante a 50 °C durante 3 h. A análise por HPLC/MS indicou que a reacção estava concluída. Concentrou-se a mistura reaccional sob vácuo com co-evaporação de tolueno (10 mL x 2) para se obter um sólido amarelo escuro. O produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (ISCO) eluindo com hexanos/AcOEt para se obter o composto em epígrafe puro, 2-(4-(isoxazol-5-il)benzil)-8-cloro-7- (4-clorofenil)- [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (149 mg, 79%) como um 178 sólido amarelo. MS [M+H]+ 438; Tempo de retenção de HPLC = 3,55 min. 363B. Preparação de 2-(4-(Isoxazol-5-il)benzil)-7-(4-clorofenil)-8-(lH-imidazol-l-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Aqueceu-se a 100 °C, durante 18 h, uma solução de 2 - (4 - (isoxazol-5-il)benzil)-8-cloro-7-(4-clorofenil)-[1,2,4]tri-azolo[4,3-b]piridazin-3 (2H)-ona (149 mg, 0,34 mmol) e imidazole (69,5 mg, 1,02 mmol) em l-metil-2-pirrolidinona seca (3 mL) . A análise por HPLC/MS indicou uma reacção 90% completa.

Concentrou-se a mistura reaccional sob vácuo com co-evaporação de tolueno (5 mL x 2), para se obter um sólido amarelo escuro. O produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna de silica gel (ISCO) , eluindo com CH2Cl2/AcOEt para se obter o composto em epigrafe puro (87 mg, 55%) como um sólido amarelo. MS [M+H]+ 470; Tempo de retenção de HPLC = 2,59 min; RMN de 1H (400 MHz, CDCla) Ô 8,29 (d, 1H, J=0,5 Hz), 8,18 (s, 1H) , 7,80-7,85 (m, 2H), 7,78 (s, 1H), 7,49 (d, 2H, J=7,0 Hz), 7,43 (d, 2H, J=7,0 Hz), 7,13-7,15 (m, 3H), 6,94 (m, 1H), 6,53 (d, 1H, J=0,5 Hz), 5,27 (s, 2H). 179 EXEMPLO 364

Preparação de 2-(4-(Isoxazol-3-il)benzil)-7-(4-clorofenil)-8-(lH-imidazol-l-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

364A. Preparação de 7-(4-Clorofenil)-8-(lH-imidazol-l-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Aqueceu-se até 100 °C durante 5 h uma solução, mantida sob agitação, de 8-cloro-7-(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (56 mg, 0,20 mmol), preparada como se descreveu no exemplo 361F, e imidazole (100 mg, 1,5 mmol) em l-metil-2-pirrolidinona seca (1 mL). A análise por HPLC/MS indicou que a reacção estava concluída. Reduziu-se a mistura reaccional até metade do seu volume original com uma corrente de árgon enquanto se mantinha aquecida a 100 °C. Depois de arrefecer até à temperatura ambiente, adicionou-se solução aquosa de TFA 0,7 M (3 mL) para baixar o pH até 1. Formou-se um precipitado. 0 sobrenadante e extractos subsequentes do 180 precipitado, obtidos dissolvendo repetidamente em NMP e diluindo com água, foram purificados por HPLC preparativa de fase inversa (C—18, gradiente de Me0H/H20, 0,1% de TFA). Isto proporcionou o produto desejado como o sal de TFA, o qual foi transformado na base livre passando-o, em solução de MeOH/CH2Cl2 1:1, através de uma resina de piperidina PL-PIP de Polimer Laboratories (100 mg, 3,21 mmol/g). A evaporação sob vácuo deu então o composto em epígrafe, 7-(4-clorofenil)-8-(lH-imidazol-l-il)- [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (15 mg, 24%) como um sólido amarelo. MS [M+H]+ 313; Tempo de retenção de HPLC = 1,37 min (C-18, gradiente de Me0H/H20 (contendo 0,1% de TFA)). 364B. Preparação de 2-(4-(Isoxazol-3-il)benzil)-7-(4-clorofenil)-8-(lH-imidazol-l-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Aqueceu-se até 55 °C durante 30 min uma mistura, mantida sob agitação, de 7-(4-clorofenil)-8-(lH-imidazol-l-il)-[1,2,4]triazolo [4,3-b]piridazin-3 (2H)-ona (15 mg, 0,048 mmol), 3-(4-(bromometil)fenil)isoxazole (14 mg, 0,59 mmol) e K2C03 (40 mg, 1,0 mmol) em DMF (0,5 mL) sob árgon. A análise por HPLC/MS indicou que a reacção estava concluída. Depois de arrefecer até à t.a., diluiu-se a mistura reaccional com MeOH (3 mL) e filtrou-se através de algodão. Diluiu-se o filtrado com 181 água (3 mL) , o que provocou alguma precipitação, e acidificou-se até pH 1 com TFA. 0 sobrenadante, e extractos subsequentes do precipitado obtidos por agitação repetida em MeOH e diluição com água, foram purificados por HPLC preparativa de fase inversa (C-18, gradiente de Me0H/H20, 0,1% de TFA). Isto proporcionou o produto desejado como o sal de TFA, o qual foi transformado na base livre passando-o, numa solução em MeOH/CH2Cl2 1:1, através de uma resina de piperidina PL-PIP de Polimer Laboratories (100 mg, 3,21 mmol/g). A evaporação proporcionou então o composto em epígrafe puro (5,6 mg, 25%) como um sólido amarelo. MS [M+H] + 470, [M-H]" 468; Tempo de retenção de HPLC = 2,96 min (C-18, gradiente de Me0H/H20 (NH4OAc 10 mM) ) ; RMN de (500 MHz, CD3OD) δ 8,70 (d, 1H, J=1,6 Hz), 8,43 (s, 1H) , 7,85 (d, 2H, J=8,2 Hz), 7,85 (s, 1H) , 7,53 (d, 2H, J=8,2 Hz), 7,46 (d, 2H, J=8,8 Hz), 7,29 (d, 2H, J=8,8 Hz), 7,15 (t, 1H, J=l,6 Hz), 7,07 (s, 1H) , 6,90 (d, 1H, J=l,6 Hz), 5,30 (s, 2H). EXEMPLO 365

Preparação de 2-(4-(Trifluorometil)benzil)-8-amino-7-(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Aqueceu-se a 120 °C durante 2 h sob árgon uma solução de 2-(4-(trifluorometil)benzil)-8-cloro-7-(4-clorofenil)- 182 [1.2.4] triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (43,8 mg, 0,10 mmol), preparada como se descreveu no exemplo 361 passo G, e KOCN (81 mg, 1,0 mmol) em l-metil-2-pirrolidinona seca (2 mL) . A análise por HPLC/MS indicou que a reacção estava concluída. Concentrou-se a mistura reaccional sob vácuo com co-evaporação de tolueno (5 mL x 2) para se obter um sólido amarelo. O produto em bruto foi purificado por HPLC preparativa de fase inversa (C—18, gradiente de Me0H/H20, 0,1% de TFA) para dar o composto em epígrafe 2-(4-(trifluorometil)benzil)-8-amino-7-(4-clorofenil)- [1.2.4] triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (34 mg, 81%) como um sólido amarelo. MS [M+H]+ 420; Tempo de retenção de HPLC = 3,70 min. EXEMPLO 366

Preparação de 2-(4-(Trifluorometil)benzil)-7-(4-clorofenil)-3-oxo-2,3-di-hidro-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazina-8-carbonitrilo

Aqueceu-se a 120 °C durante 2 h sob árgon uma suspensão de 2-(4-(trifluorometil)benzil)-8-cloro-7-(4-clorofenil)- [1,2,4] triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (43,8 mg, 0,10 mmol), preparada como se descreveu no exemplo 361G, e KCN (33 mg, 0,5 mmol) em l-metil-2-pirrolidinona seca (1 mL) . A análise por 183 HPLC/MS indicou que a reacção estava concluída. Concentrou-se a mistura reaccional sob vácuo com co-evaporação de tolueno (5 mL x 2) para se obter um sólido amarelo. 0 produto em bruto foi purificado por HPLC preparativa de fase inversa (C—18, gradiente de Me0H/H20, 0,1% TFA) para se obter o composto em epígrafe (31 mg, 72%), 2-(4-(trifluorometil)benzil)-7-(4- clorofenil)-3-oxo-2,3-di-hidro-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazina-8-carbonitrilo como um sólido amarelo. MS [M+H]+ 430; Tempo de retenção de HPLC = 3,76 min. EXEMPLO 367

Preparação de 8-(6-Fluoropiridin-3-il)-7-p-tolil-2-((6-(trifluorometil)piridin-3-il)metil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

F

h3c A um recipiente reaccional de microondas contendo uma barra de agitação, adicionou-se catalisador Pd(Ph3P)4 (30 mg, 25 μιηοΐ) , seguido de dioxano anidro (0,5 mL). A esta adicionou-se 8-cloro-7-p-tolil-2 - ( (6 - (trifluorometil)piridin-3-il)metil)-[l,2,4]tri-azolo [4,3-b] piridazin-3 (2H)-ona (20 mg, 47 μιηοΐ), preparada como se descreveu no Exemplo 362, ácido 2-fluoropiridina-5-borónico (28,2 mg, 200 μιηοΐ) , dioxano anidro (0,5 mL) e solução aquosa de 184 Κ3ΡΟ4 2 Μ (0,25 mL) . Purgou-se o recipiente reaccional com azoto, tapou-se e aqueceu-se a 120 °C durante 10 minutos num reactor de microondas. Filtrou-se a mistura reaccional através de um filtro de seringa Whatman 0,45 μπι e 0 produto em bruto foi purificado utilizando HPLC preparativa (Xterra MS-C18, 30 X 50 mm); Eluida com 30% até 100% de B, gradiente de 8 min, (A = água+0,1% de TFA e B = acetonitrilo+0,1% de TFA); Caudal a 30 mL/min. Detecção UV a 220 nm) para dar o composto em epígrafe, 8-(6-fluoropiridin-3-il)-7-p-tolil-2- ( (6- (trifluorometil)piridin-3-il)metil) — [1,2,4] — triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona como um sal de TFA. Refez-se este composto em 2 mL de metanol numa coluna de filtração munida com uma torneira de paragem e adicionou-se resina de carbonato com base de poliestireno, resina MP PL-C03, (100 mg, carga 2.4 mmol/g) . Agitou-se os conteúdos durante 2 h e filtrou-se a solução metanólica e evaporou-se sob pressão reduzida para dar o composto em epígrafe, 8-(6-fluoropiridin-3-il)-7-p-tolil-2-((6-(trifluorometil)piridin-3-il)metil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piri-dazin-3 (2H)-ona na forma de base livre (7,6 mg, 32% de rendimento), como um sólido cristalino amarelo. MS (M+H) = 481; RMN de 2H CDC13: δ 8,8 (1H, s) , 8,21 (1H, s) , 8,23 (1H, s) , 7,95 (1H, d, J=8,2 Hz), 7,79 (lH,m), 7, 66-7,68 (1H, m), 7,03-7,18 (4H, m) , 6,94 (1H, m) , 5,3 (2H, s) . Pureza por HPLC analítica: 99% aos 2,27 min (tempo de retenção), (Xterra MS-C18, 4,6 x 50 mm); Eluida com 30% até 100% de B, gradiente de 4,5 min, (A = água+0,1% de TFA e B = acetonitrilo+0,1% de TFA); Caudal a 2.5 mL/min. Detecção UV a 220 nm. 185 EXEMPLO 368

Preparação de 8-(5-Fluoro-6-metoxipiridin-3-il)-7-p-tolil-2-((6-(trifluorometil)piridin-3-il)metil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A um recipiente reaccional de microondas contendo uma barra de agitação, adicionou-se catalisador Pd(Ph3P)4 (30 mg, 25 μπιοί) , seguido de dioxano anidro (0,5 mL). A esta adicionou-se 8-cloro-7-p-tolil-2 - ( (6 - (trifluorometil)piridin-3-il)metil)-[l,2,4]tri-azolo [ 4,3-b] piridazin-3 (2H) -ona (20 mg, 47 μηποί), preparada como se descreveu no Exemplo 362, ácido 3-fluoro-2-metoxipiridina-5-borónico (34,2 mg, 200 μπιοί) , dioxano anidro (0,5 mL) e solução aquosa de K3PO4 2M (0,25 mL) . Purgou-se o recipiente reaccional com azoto, tapou-se e aqueceu-se a 120 °C durante 10 minutos num reactor de microondas. Filtrou-se a mistura reaccional através de um filtro de seringa de 0,45 μηπ e o produto em bruto foi purificado utilizando HPLC preparativa (Xterra MS-C18, 30 x 50 mm) ; Eluído com 30% até 100% de B, gradiente de 8 min, (A = água+0,1% de TFA e B = acetonitrilo+0,1% de TFA); Caudal a 30 mL/min. Detecção UV a 220 nm) para dar o composto em epigrafe, 8-(5-fluoro-6-metoxipiridin-3-il)-7-p-tolil-2-((6- (trifluorometil)piridin-3-il)metil)-[1,2,4]triazolo [4,3-b]piridazin-3(2H)-ona como um sal de TFA. Refez-se este composto 186 em 2 mL de metanol numa coluna de filtração munida com uma torneira de paragem e adicionou-se resina de carbonato com base de poliestireno, resina MP PL-C03, (100 mg, carga 2,4 mmol/g).

Agitou-se o conteúdo durante 2 h e filtrou-se a solução metanólica e evaporou-se sob pressão reduzida para dar o composto em epigrafe, 8-(5-fluoro-6-metoxipiridin-3-il)-7-p-tolil-2-((6-(trifluorometil)piridin-3-il)metil)-[1,2,4]triazo-lo[4,3-b]piridazin-3 (2H)-ona na forma de base livre (9,6 mg, 38% de rendimento), como um sólido cristalino amarelo. MS (M+H) = 511; RMN de (CD3OD) : : δ 8,67 (1H, s) , 8,25 (1H, s) , 7,97 (1H, d, J=8,2 Hz), 7,82 (lH,s), 7,7 (1H, m), 7,38-7, 40 (1H, m) , 7,09-7,14 (4H, m), 5,3 (2H, s), 3,8 (3H, s). Pureza por HPLC analítica: 99% aos 2,44 min (tempo de retenção), (Xterra MS-C18, 4,6 x 50 mm); Eluída com 30% até 100% de B, gradiente de 4,5 min, (A = água+0,1% de TFA e B = acetonitrilo+0,1% de TFA); Caudal a 2,5 mL/min. Detecção UV a 220 nm. 187 EXEMPLO 369

Preparação de 8-(2-Metoxipirimidin-5-il)-7-p-tolil-2-((6-(trifluorometil)piridin-3-il)metil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

H3C A um recipiente reaccional de microondas contendo uma barra de agitação, adicionou-se catalisador Pd(Ph3P)4 (30 mg, 25 μπιοί) , seguido de dioxano anidro (0,5 mL). A esta adicionou-se 8-cloro-7-p-tolil-2-((6-(trifluorometil)piridin-3-il)metil)- [1.2.4] triazolo [4,3-b] piridazin-3 (2H) -ona (20 mg, 47 μπιοί), preparada como se descreveu no Exemplo 362, ácido 2-metoxipirimidina-5-borónico (28,2 mg, 200 μιηοΐ), dioxano anidro (0,5 mL) e solução aquosa de K3P04 2M (0,25 mL). Purgou-se o recipiente reaccional com azoto, tapou-se e aqueceu-se a 120 °C durante 10 minutos num reactor de microondas. Filtrou-se a mistura reaccional através de um filtro de seringa Whatman 0,4 5 μπι e o produto em bruto foi purificado utilizando HPLC preparativa (Xterra MS-C18, 30 X 50 mm); Eluido com 30% até 100% de B, gradiente de 8 min, (A = água+0,1% de TFA e B = acetonitrilo+0,1% de TFA); Caudal a 30 mL/min. Detecção UV a 220 nm) para dar o composto em epígrafe 8-(2-metoxipirimidin-5-il)-7-p-tolil-2-((6-(trifluorometil)piridin-3-il)metil)- [1.2.4] triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona como um sal de TFA. 188

Refez-se este composto em 2 mL metanol numa coluna de filtração munida com uma torneira de paragem e adicionou-se resina de carbonato com base de poliestireno, resina MP PL-C03, (100 mg, carga 2,4 mmol/g). Agitou-se o conteúdo durante 2 h e filtrou-se a solução metanólica e evaporou-se sob pressão reduzida para dar o composto em epigrafe 8-(2-metoxipirimidin-5-il)-7-p-tolil-2-((6-(trifluorometil)piridin-3-il)metil)-[1,2,4]triazolo [4,3-b]piridazin-3 (2H) -ona na forma de base livre (7,6 mg, 31% de rendimento), como um sólido cristalino amarelo. MS (M+H) = 494. RMN de (CD3OD) : δ 8,79 (1H, s) , 8,39 (1H, s) , 8,07 (1H, d, J=8,2 Hz), 7,84 (1H, s) , 7, 64-7,69 (2H, m) , 7,24 (4H, m) , 5,4 (2H, s), 3,81(3H, s) . Pureza por HPLC analítica: 99% aos 2,13 min (tempo de retenção), (Xterra MS-C18, 4,6 X 50 mm); Eluído com 30% até 100% de B, gradiente de 4,5 min, (A = água+0,1% de TFA e B = acetonitrilo+0,1% de TFA); Caudal a 2,5 mL/min. Detecção UV a 220 nm. EXEMPLO 370

Preparação de 2-(4-(Trifluorometil)benzil)-7-(4-clorofenil)-8-(piridin-3-iloxi)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Cl A 8-cloro-7-(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (20 mg, 47 μιηοΐ), preparada como se descreveu no

Exemplo 361F em 1-metilpirrolidona (1 mL) num frasco adicionou- 189 se 3-hidroxipiridina (9,5 mg, 100 μιηοΐ) e carbonato de potássio anidro (21 mg, 150 μιηοΐ) . Tapou-se o recipiente reaccional e aqueceu-se a 80 °C durante 16 h num aquecedor de serpentina turbo sob agitação. Filtrou-se a mistura reaccional através de um filtro de seringa Whatman 0,4 5 μιη e o produto em bruto é purificado utilizando HPLC preparativa (Xterra MS-C18, 30 x 50 mm) ; Eluido com 10% até 100% de B, gradiente de 8 min, (A = água+0,1% de TFA e B = acetonitrilo+0,1% de TFA); Caudal a 30 mL/min. Detecção UV a 220 nm) para dar o composto em epigrafe 2-(4-(trifluorometil)benzil)-7-(4-clorofenil)-8-(piridin-3-iloxi)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona como um sal de TFA. Refez-se este composto em 2 mL metanol numa coluna de filtração munida com uma torneira de paragem e adicionou-se resina de carbonato com base de poliestireno, resina MP PL-C03, (100 mg, carga 2,4 mmol/g). Agitou-se o conteúdo durante 2 h e filtrou-se a solução metanólica e evaporou-se sob pressão reduzida para dar o composto em epigrafe 2- (4- (trifluorometil)benzil)-7-(4-clorofenil)-8-(piridin-3-iloxi)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona na forma de base livre (5,7 mg, 16% de rendimento), como um sólido cristalino amarelo. MS (M+H) = 498; RMN de (CD3OD) : δ 8,34 (1H, s) , 8,30(1H, s) , 8,29 (1H, s), 7,51-7,53 (3H, m) , 7,37 (2H, m) , 7,31-7,32 (2H, m) , 7,23-7,24 (2H, m) , 7,22 (1H, s) , 5,07 (2H, s) . Pureza por HPLC analítica: 99% aos 2,07 min (tempo de retenção) (Xterra MS-C18, 4,6 x 50 mm); Eluido com 10% até 100% de B, gradiente de 4,5 min, (A = água+0,1% de TFA e B = acetonitrilo+0,1% de TFA);

Caudal a 2,5 mL/min. Detecção UV a 220 nm. 190 EXEMPLO 371

Preparação de 2-(4-(Trifluorometil)benzil)-7-(4-clorofenil)-8-(3-hidroxipirrolidin-l-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução de 2-(4-(trifluorometil)benzil)-8-cloro-7-(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (20 mg, 4 6 μηιοί) , preparada como se descreveu no Exemplo 361, em 1-metilpirrolidona (1 mL) num frasco adicionou-se 3-pirrolidinol (8,7 mg, 100 μιηοΐ) . Tapou-se o recipiente reaccional e aqueceu-se a 80 °C durante 16 h num aquecedor de serpentina turbo sob agitação. Filtrou-se a mistura reaccional através de um filtro de seringa Whatman 0,4 5 μιη e o produto em bruto foi purificado utilizando HPLC preparativa (Xterra MS-C18, 30 x 50 mm); Eluido com 10% até 100% de B, gradiente de 8 min, (A = água+0,1% de TFA e B = acetonitrilo+0,1% de TFA); Caudal a 30 mL/min. Detecção UV a 220 nm) para dar o composto em epígrafe, sal de TFA de 2— (4 — (trifluorometil)benzil)-7-(4-clorofenil)-8-(3-hidroxipirrolidin-l-il) -[ 1 , 2 , 4 ] triazolo [ 4 , 3-b] piridazin-3 (2H) -ona, (18,5 mg, 52% de rendimento), como um sólido cristalino amarelo. MS (M+H) = 498; RMN de (CD3OD): 7,79 (1H, s), 7,7-7,78 (2H,m), 7,58-7,60 (2H, m) , 7,44-7,45 (2H, m) , 7,35-7,37 (2H, m) , 5,36 (2H, s) , 3,73(m, 2H) , 3,55 (m, 1H) , 3,52 (2H,m), 1,88 (2H,m). Pureza por HPLC analítica: 99% aos 2,06 min (tempo de retenção), (Xterra 191 MS-C18 (4,6 x 50 mm); Eluído com 10% até 100% de B, gradiente de 4,5 min, (A = água+0,1% de TFA e B = acetonitrilo+0,1% de TFA); Caudal a 2,5 mL/min. Detecção UV a 220 nm. EXEMPLO 372

Preparação de 2-(4-(Trifluorometil)benzil)-7-(4-clorofenil)-8-(lH-imidazol-l-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução de 2-(4-(trifluorometil)benzil)-8-cloro-7-(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (20 mg, 46 μπιοί), preparada como se descreveu no Exemplo 361, em 1- metilpirrolidona (1 mL) num frasco adicionou-se imidazole (6,8 mg, 100 μπιοί) . Tapou-se o recipiente reaccional e aqueceu-se a 80 °C durante 16 h num aquecedor de serpentina turbo sob agitação. Filtrou-se a mistura reaccional através de um filtro de seringa Whatman 0,45 μπι e o produto em bruto foi purificado utilizando HPLC preparativa (Xterra MS-C18, 30 x 50 mm) ; Eluído com 10% até 100% de B, gradiente de 8 min, (A = água+0,1% de TFA e B = acetonitrilo+0,1% de TFA); Caudal a 30 mL/min. Detecção UV a 220 nm) para dar o composto em epígrafe 2- (4-(trifluorometil)benzil)-7-(4-clorofenil)-8-(lH-imidazol-1-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona como um sal de 192 TFA. Refez-se este composto em 2 mL metanol numa coluna de filtração munida com uma torneira de paragem e adicionou-se resina de carbonato com base de poliestireno, resina MP PL-C03, (100 mg, carga 2,4 mmol/g). Agitou-se o conteúdo durante 2 h e filtrou-se a solução metanólica e evaporou-se sob pressão reduzida para dar o composto em epígrafe 2-(4-(trifluorometil)benzil)-7-(4-clorofenil)-8-(lH-imidazol-1-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona na forma de base livre (18,5 mg, 52% de rendimento), como um sólido cristalino amarelo. MS (M+H) = 471; RMN de 1R (CD3OD):: δ 8,42 (1H, s), 7,83 (1H, s), 7, 65-7, 66 (2H,m) , 7,57 (2H, m) , 7, 45-7,47 (2H, m) , 7,28-7,29 (2H, m) , 7,14 (1H, s) , 7,07 (1H, s) , 5,33 (2H, s) . Pureza por HPLC analítica: 99% aos 2,06 min (tempo de retenção), (Xterra MS-C18, 4,6 x 50 mm); Eluído com 10% até 100% de B, gradiente de 4,5 min, (A = água+0,1% de TFA e B = acetonitrilo+0,1% de TFA); Caudal a 2,5 mL/min. Detecção UV a 220 nm. EXEMPLO 373

Preparação de 2-(4-(Trifluorometil)benzil)-8-(benziloxi)-7-(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução de 2-(4-(trifluorometil)benzil)-8-cloro-7-(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (20 mg, 193 46 μιηοΐ), preparada como se descreveu no Exemplo 361, em 1- metilpirrolidona (1 mL) num frasco adicionou-se álcool benzilico (10,8 mg, 100 μιηοΐ) e solução de t-butóxido de potássio 1 M em THF (100 μΕ). Tapou-se o recipiente reaccional e agitou-se à temperatura ambiente durante 16 h. Desactivou-se a mistura reaccional com 100 \IL de metanol, filtrou-se através de um filtro de seringa Whatman 0,45 μιη e o produto em bruto foi purificado utilizando HPLC preparativa (Xterra MS-C18, 30 X 50 mm) ; Eluido com 10% até 100% de B, gradiente de 8 min, (A = água+0,1% de TFA e B = acetonitrilo+0,1% de TFA); Caudal a 30 mL/min. Detecção UV a 220 nm) para dar o composto em epígrafe 2- (4-(Trifluorometil)benzil)-8-(benziloxi)-7-(4-clorofenil) - [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona. (4,9 mg, 16% de rendimento), como um sólido cristalino amarelo. MS (M+H) = 511; RMN de MeOD: δ 8,25 (1H, s) , 7,60-7,7 (4H, m) , 7,47-7,55 (4H,m), 7,13-7,31 (5H, m) , 5,81 (2H, s) , 5,39 (2H, s) . Pureza por HPLC analítica: 99% aos 2,31 min (tempo de retenção), (Xterra MS-C18, 4,6 X 50 mm); Eluido com 10% até 100% de B, gradiente de 4,5 min, (A = água+0,1% de TFA e B = acetonitrilo+0,1% de TFA); Caudal a 2,5 mL/min. Detecção UV a 220 nm. 194 EXEMPLO 374 ATÉ 468

Os Exemplos seguintes foram preparados de acordo com os métodos e processos acima: Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 374 λ /00^° 3,42 482 375 V/v r-Ç)-4-f 3,72 506 376 γν rK~HF 3, 97 499 377 3, 96 481 378 Q hp Hl o ,1^ 4,15 531 379 XxC^' JX' 4,16 531 380 OC fJJ aXJ 4,14 531 381 3,76 489 195 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 382 cr"^ 2,67 503 383 3,34 503 384 0 or^ 3,45 482 385 ,—L a r\j 4,01 481 386 Ctf p W/ o '„=7 1, 96° 465 387 *j5> 1 I r ""a. 1, 97c 445 388 frtP •'°v 1,45c 432 389 »-O( p v ° ^ O CT3 CJ3 i—1 465 390 ^ .. 1, 97c 465 391 G^cj) 1,72° 456 196 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 392 vQ-O- § b ch, f 1, 69c 532 393 1, 63° 518 394 $í> F 1, 69° 532 395 γ Q-θ'" ó'b f~t~f t 1, 91c 512 396 1,84c 548 397 T «i 1,8° 568 398 0 ò Y 0 2,28° 475 399 γο 1, 64° 438 400 MP HO 1,54° 424 401 fta\ mP 1,89° 444 197 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 402 α /\ -N, 0 1,82c 408 403 ryJ} 2,03° 436 404 fVj_P 1, 64c 424 405 0 CO co 1 -1 425 406 °Xr^} 1, 62c 515 407 1,84° 482 408 tAcH, 1,5° 465 409 "·°α l,33c 437 410 0 Quiral h-^V-h ^kV^T^-CI N 0 \vi=/ V—y O CO co T-1 436 411 5ftf“ oP 'T 2, llc 504 198 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 412 •vft-o rq CH pJ-F 2,0 4 c 504 413 F 1, 61° 511 414 N-s, >"“ Cr 1,88c 555 415 ò n F—pF F 1, 9C 491 416 Yy-fw Í“^F 1,59c 489 417 líl V55 1, 63c 503 418 γγ* A 0 Π Ύ CH, FTF 1,6C 517 419 vY>- A 0 1,57c 517 420 νγο-O 0 p_l—F F 1,53c 500 421 Τγγ \Ç(O'a 0 1,4 9C 497 199 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 422 ό 1 r 7° 497 423 γΌ-ο~α 1, 68c 511 424 3, 06c 462 425 3,2 6 c 526 426 yCH>"‘ ç _ ^ 3,25c 476 427 γρ-(>'"· L,n h,c fXf 3,21° 476 428 0 ^^X^rVen, 3,04° 492 429 F 2,56° 478 430 ζίί OH F—i-F 2,53° 478 431 2,86c 487 200 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 432 2,85c 487 433 2,78c 501 434 y^Ç>^ 2,47° 492 435 γΟ-O"'"· £ 'q 2,86c 547 436 \'Çy~o^01· 6 ^-o p-r'F 1, 92c 561 437 1,88° 491 438 trt'/ 1,8 8 c 491 439 y.ruy™· W” j" 'cHj 2,39c 533 440 vCo^’"™1 1 °V, F-V-f H,c 2,43c 533 441 yCH> γ"Ύ ò >r^ 3,19° 534 201 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 442 γΟ"θ'"1' Hr 0 2,55c 559 443 jC-f nh< 2,19° 505 444 2,27° 519 445 ftf ò^tH» 2,53c 555 446 Yo H.C 2,53c 569 447 \CtQ-01· f F 0 CH, 2,47c 569 448 μ^-F 2,26c 533 449 a Z*8^ iVai· Y'w fJr-F 2,35c 541 450 \Ç^O-"· LA \jsf 2,55c 555 451 ^*F 2,79c 501 202 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 452 *·, .γΗ· Sá 2,65 463 453 γ^Η. L,w FTF 1, 61c 463 454 F / 0 /N=\— u<y.N jj\__l HjC 1,75c 493 455 Yp^O-01' Y Y Ύ 2,36c 493 456 f^Yn »yíp-0'CH“ h/ n=^ 2,3C 493 457 ÍLJn f-4—F 1,83c 493 458 J 0 / H,C 2,56c 523 459 F’lF 1,42c 478 460 YY x *0 F J—‘F \—0 1,74c 548 461 Yftf' H,G 1,4 9C 561 203 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 462 J p 2,21c 524 463 ^-F F 1,85c 452 464 y(>(>H· 2,51° 542 465 ^-F 2,0 9 c 4 66 4 66 γΓΗ^1"' 2,39° 494 467 1, 99c 513 468 Hl/NA, .^ΓΟ^ > 3,7 513 204 EXEMPLO 469

Preparação de 2-(4-(Trifluorometil)benzil)-7,8-bis(4-clorofenil)-6-metil-5,6-di-hidro-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução de 2-(4-(trifluorometil)benzil)-7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (250 mg, 0,485 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 17, em THF (4 mL) a -20 °C adicionou-se brometo de metil-magnésio (0,81 mL, 2,43 mmol, 3,0 M em Et20) . Agitou-se a reacção a -20 °C durante 30 min. A LC-MS mostrou que a reacção estava concluída. À mistura reaccional adicionou-se 20 mL de MeOH para desactivar a reacção. Deixou-se que a reacção aquecesse até à t.a. e evaporou-se o solvente. Diluiu-se o resíduo com AcOEt (100 mL) , lavou-se com H20 (10 mL) e NaCl aquoso saturado (5 mL x 2) .

Secou-se a camada orgânica (MgSCU) , filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel utilizando um sistema automatizado, eluindo com um gradiente de (0% até 80% de AcOEt durante 40 min. e mantido a 80% durante 10 min.) para dar o composto em epígrafe, 2-(4-(Trifluorometil)benzil)-7,8-bis(4-clorofenil)-6-metil-5,6-di-hidro-[1,2,4]triazolo [4,3-b] piridazin-3 (2H)-ona (254 mg), como um sólido beije com 98% de rendimento. Tempo de retenção de HPLC: 4,23 min; MS [M+H]+: 205 encontrado 531. RMN de 2H (CDCI3, 400 MHz) 67,52 (d, 2H), 7,38 (d, 2H), 7,17-7,11 (m, 4H) , 7,05 (dd, 2H) , 6,94 (dd, 2H) , 4,94 (S, 2H), 4,16 (q, 1H), 1,24 (d, 3H). EXEMPLO 470

Preparação de (R)-2-(4-(Trifluorometil)benzil)-7,8-bis(4-clorofenil)-6-metil-5,6-di-hidro-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona e (S)-2-(4-(Trifluorometil)benzil)-7,8-bis(4-clorofenil)-6-metil-5,6-di-hidro-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

Separou-se a (R,S)-2-(4-(trifluorometil)benzil)-7,8-bis(4-clorofenil)-6-metil-5,6-di-hidro-[1,2,4]triazolo [4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, preparada como se descreveu em 466, em estereoisómeros individuais utilizando as seguintes condições de separação por HPLC quiral: OJ quiral 4, 6 X 250 mm; solvente A: heptano e solvente B: 0,1% de DEA em MeOH:EtOH (1:1); isocrático com 15% de B; caudal: 1 mL/min.; volume de injecção: 10 μΕ; comprimento de onda de UV: 254 nm. Isómero A: HPLC: 6,81 min.; MS [M+H]+: encontrado 531. Isómero B: HPLC: 11,45 min.; MS [M+H]+: encontrado 531. 206 EXEMPLO 471

Preparação de 2-(4-(Trifluorometil)benzil)-7,8-bis(4- clorofenil)-6-metil-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona F Cl

Cl A uma solução de 2-(4-(trifluorometil)benzil)-7,8-bis(4-clorofenil)-6-metil-5,6-di-hidro-[1,2,4]triazolo [4,3— b]piridazin-3(2H)-ona (28 mg, 0,053 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 469 em CH2C12 (0,5 mL) à t.a. adicionou-se DDQ (15 mg, 0,064 mmol). Agitou-se a reacção à t.a. durante 1 h. A LC-MS mostrou que a reacção estava concluída. Concentrou-se a mistura reaccional sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado utilizando cromatografia em coluna de sílica gel utilizando um sistema automatizado a eluir com um gradiente de (0% até 80% de AcOEt durante 20 min.) para dar o composto em epígrafe, 2-(4-(trifluorometil)benzil)-7,8-bis(4-clorofenil)-6-metil-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (23 mg, 84% de rendimento) como um sólido amarelo com 84% de rendimento. Tempo de retenção de HPLC: 4,18 min; MS [M+H]+: encontrado 529. RMN de ΧΗ (CDC13, 400 MHz) δ 7,61 (d, 2H), 7,52 (d, 2H), 7,35 (dd, 2H) , 7,27 (dd, 2H), 7,16 (dd, 2H), 7,02 (dd, 2H), 5,28 (s, 2H), 2,29 (s, 3H) . 207 EXEMPLO 472

Preparação de 2-(4-(Trifluorometil)benzil)-5-acetil-7,8-bis(4-clorofenil)-6-metil-5,6-di-hidro-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução de 2-(4-(trifluorometil)benzil)-7,8-bis(4-clorofenil)-6-metil-5,6-di-hidro-[1,2,4]triazolo[4,3— b]piridazin-3 (2H)-ona (8 mg, 0,015 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 469 em CH2CI2 (0,2 mL) à t.a. adicionou-se diisopropiletilamina (5,8 mg, 0,045 mmol), seguida de cloreto de acetilo (2,4 mg, 0,030 mmol). Agitou-se a reacção à t.a. durante 2 h. A LC-MS mostrou que a reacção estava concluída. Evaporou-se o solvente e purificou-se o resíduo utilizando HPLC de fase inversa para dar o composto em epígrafe, 2-(4-(Trifluorometil)benzil)-5-acetil-7,8-bis(4-clorofenil)-6-metil-5,6-di-hidro-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona, (6 mg, 70%) como um sólido branco. Tempo de retenção de HPLC: 4,23 min; MS [M+H]+: encontrado 573. RMN de 1H (CDCI3, 400 MHz) δ 7,65 (d, 2H) , 7,51 (d, 2H) , 7,30-7,22 (m, 4H) , 7,17 (dd, 2H) , 7,06 (dd, 2H), 5,70 (q, 1H) , 5,14-5,11 (m, 2H) , 2,28 (s, 3H) , 1,28 (s, 3H). 208 EXEMPLO 473

Preparação de 2-(4-(Trifluorometil)benzil)-5-benzil-7,8-bis(4-clorofenil)-6-metil-5,6-di-hidro-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução de 2-(4-(trifluorometil)benzil)-7,8-bis(4-clorofenil)-6-metil-5,6-di-hidro-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (15 mg, 0,028 mmol) preparada como se descreveu no Exemplo 469 em DMF (0,5 mL) à t.a. adicionou-se K2C03 (11,6 mg, 0,084 mmol), seguido de brometo de benzilo (9,6 mg, 0,056 mmol). Aqueceu-se a reacção a 80 °C dum dia para o outro. Filtrou-se a reacção. Concentrou-se a solução recolhida sob pressão reduzida. O produto em bruto foi purificado utilizando HPLC de fase inversa para dar o composto em epígrafe, 2-(4-(Trifluorometil)benzil)-5-benzil-7,8-bis (4-clorofenil)-6-metil-5,6-di-hidro-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3 (2H)-ona, (2 mg, 11%) como um sólido branco. Tempo de retenção de HPLC: 4,44 min; MS [M+H]+: encontrado 621. RMN de (CDC13, 400 MHz) δ 7,60 (d, 2H), 7,45 (d, 2H) , 7,33-7,29 (m, 5H) , 7,23-7,13 (m, 4H) , 7,05-7,00 (m, 2H) , 6,87-6,81 (m, 2H) , 5,04 (s, 2H) , 4,26-4,15 (m, 2H), 3,98-3, 93 (q, 1H) , 1,30 (d, 3H) . 209 EXEMPLO 474

Preparação de 7,8-Bis(4-clorofenil)-2-metil- [1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução da 7,8-bis(4-clorofenil)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (100 mg, 0,28 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 1, em DMF (3 mL), à t.a., adicionou-se K2CO3 (116 mg, 0,84 mmol), seguido de iodometano (79 mg, 0,56 mmol). Aqueceu-se a reacção a 60 °C dum dia para o outro. Diluiu-se a reacção com AcOEt (20 mL), lavou-se com NaCl aquoso saturado (20 mL x 3). Secou-se a camada orgânica (MgS04) , filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida, para dar o composto em epígrafe, 7,8-bis(4-clorofenil)-2-metil-[1,2,4]triazolo[4,3- b]piridazin-3 (2H)-ona, (104 mg, 100%) como um óleo amarelo. Tempo de retenção de HPLC: 3,67 min; MS [M+H]+: encontrado 371. 210 EXEMPLO 475

Preparação de 6-Benzil-7,8-bis(4-clorofenil)-2-metil-5,6-di-hidro-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona

A uma solução de 7,8-bis(4-clorofenil)-2-metil-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3(2H)-ona (50 mg, 0,135 mmol), preparada como se descreveu no Exemplo 474, em THF (1 mL) a -20 °C adicionou-se brometo de benzil-magnésio (0,34 mL, 0,675 mmol, 2,0 M em THF) . Agitou-se a reacção a -20 °C durante 30 min. Após este período adicionou-se MeOH (5 mL) para desactivar a reacção. Deixou-se que a reacção aquecesse até à t.a. e concentrou-se a mistura reaccional sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel utilizando um sistema automatizado a eluir com um gradiente de (0% até 80% de AcOEt durante 20 min. e mantido a 80% durante 20 min.) para dar o composto em epígrafe, 6-benzil-7,8-bis(4-clorofenil)-2-metil-5,6-di-hidro-[l,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3 (2H)-ona (29 mg, 46%) como um sólido beije. Tempo de retenção de HPLC: 4,10 min; MS [M+H]+: encontrado 463. RMN de ΧΗ (CDC13, 400 MHz) δ 7,30-6,90 (m, 13H), 4,22 (t, 1H), 3,36 (s, 3H), 2, 90-2,75 (m, 2H) . 211 EXEMPLOS 476 ATÉ 487

Os Exemplos seguintes foram preparados de acordo com os métodos e processos descritos acima: Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 476 4,26 455 477 XlríS 4,12 441 478 4,23 491 479 CH, r{ Xkl30 jcrò xh, 4,35 4 69 480 η Ν'", jOV CT * 3, 73 387 481 0 3, 96 529 482 4,19 453 483 “prC? L.OH 0 3,82 471 212 Número do Exemplo Estrutura Tempo de Retenção por HPLC (min) Espectro de Massa (M+H) Observado 484 4,19 439 485 4,21 489 486 4,24 545 £ 487 XiiC* KXAh JTXX 4,28 497

Os compostos do Conjunto A abaixo, nos quais R1 varia, R2 é 4-clorofenilo, R3 é 2-(trifluorometil)piridin-5-ilmetilo, R6 é hidrogénio, R7 está ausente e n é uma ligação dupla, podem ser preparados por um especialista na técnica pelos métodos descritos acima. Os compostos do Conjunto A destinam-se a ilustrar adicionalmente o âmbito da invenção não sendo, de modo algum, limitativos.

Conjunto A: 213

214

215

216

217

218

CF, CF,

CF, 219

Me

CF,

CF, 220

Como assinalado acima, o Conjunto A consiste de compostos que diferem uns dos outros apenas na identidade de R1 com R2 fixado como 4-clorofenilo. 0 Conjunto A pode ser considerado uma biblioteca unidimensional de compostos ilustrativos. Se se variasse ambos R1 e R2 resultaria uma biblioteca bidimensional de compostos ilustrativos. 0 Conjunto B é a biblioteca bidimensional que consiste de todas as permutações de todas as variantes de R1 representadas no Conjunto A e um conjunto de variantes de R2 listadas abaixo. No Conjunto B, R3 é 2-(trifluorometil)piridin-5-ilmetilo, R6 é hidrogénio, R7 está ausente e n é uma ligação dupla. Os compostos do Conjunto B podem ser preparados por um especialista na técnica pelos métodos descritos acima. Os compostos do Conjunto B destinam-se a ilustrar adicionalmente o âmbito da invenção não sendo, de modo algum, limitativos. 221

Variantes de R2 do Conjunto B:

222

Além disso, como assinalado acima, o Conjunto B é a biblioteca bidimensional que consiste de todas as permutações de todas as variantes de R1 representadas no Conjunto A e um conjunto de variantes de R2 listadas acima com R3 fixado como 2-(trifluorometil)piridin-5-ilmetilo. Se se variasse R1 e R2 e R3 resultaria uma biblioteca tridimensional de compostos ilustrativos. 0 Conjunto C é a biblioteca tridimensional que consiste de todas as permutações de todas as variantes de R1 representadas no Conjunto A, de todas as variantes de R2 listadas acima para o Conjunto B e um conjunto de variantes de R3 listadas abaixo. No conjunto C, R6 é hidrogénio, R7 está ausente e n é uma ligação dupla. Os compostos do Conjunto C podem ser preparados por um especialista na técnica pelos métodos descritos acima. Os 223 compostos do Conjunto C destinam-se a ilustrar adicionalmente o âmbito da invenção não sendo, de modo algum, limitativos.

Variantes de R3 do Conjunto C: ^^CF3 3 ’ > . . λΌ-1** ,/^Q^Me /“O-0" X. X x, x. 5 ’ j xCXN λΌ-™ νΛ-Ο0Η λΛ^"0Η X X X. x

Como uma ilustração adicional do significado do Conjunto C, estão listadas abaixo três estruturas representativas do Conjunto C com explicações de como elas caem dentro do âmbito do Conjunto C acima. Estas estruturas representativas destinam-se a ser ilustrativas não sendo, de modo algum, limitativas. 224

Quando R1 é escolhido do primeiro membro listado do Conjunto A, R2 é escolhido para ser a primeira variante de R2 listada do Conjunto B e R é escolhido para ser a primeira variante de R listada do Conjunto C, obtém-se a estrutura seguinte:

Quando R1 é escolhido do último membro listado do Conjunto A, R2 é escolhido para ser a última variante de R2 listada do Conjunto B e R3 é escolhido para ser a última variante de R3 listada do Conjunto C, obtém-se a estrutura seguinte:

Quando R1 é escolhido de um membro seleccionado aleatoriamente do Conjunto A, R2 é escolhido para ser uma variante de R2 seleccionada aleatoriamente do Conjunto B e R3 é escolhido para ser uma variante de R3 seleccionada aleatoriamente do Conjunto C, obtém-se a estrutura seguinte: 225

NC

Outros compostos ilustrativos não limitativos que podem ser preparados por um especialista na técnica pelos métodos descritos acima são os seguintes:

Cl

Avaliação Biológica

Ensaio de Ligação ao Receptor de Canabinóides

Realizou-se estudos de ligação de radioligando em membranas preparadas a partir de células de Ovário de Hamster Chinês (CHO) que expressam em excesso o CB-1 humano recombinante (células 226 CHO-CB-1) . 0 volume total de ensaio para os estudos de ligação foi de 100 μΐ. Fez-se 5 μς de membranas até um volume final de 95 μΐ com Tampão de Ligação (HEPES 25 mM, NaCl 150 mM, CaCl2 2,5 mM, MgCl2 1 mM, 0,25% de BSA) . Pré-incubou-se as membranas diluídas com um composto ou veículo DMSO. Iniciou-se a reacção de ligação através da adição de 3H-CP-55,940 (120 Ci/mmol) 2 nM no final e prosseguiu-se durante 2,5 horas à temperatura ambiente. Parou-se a reacção de ligação transferindo a reacção para placas GF/B de 96 poços (pré-enxaguadas em polietilenimina a 0,3%) utilizando um Colector de Células Packard. Lavou-se o filtro com 0,25 x PBS, adicionou-se 30 μΐ de MicroScint por poço e quantificou-se a radioetiqueta ligada por contagem de cintilação num Contador de Cintilação Packard TopCount. O ensaio de ligação de radioligando ao CB-2 foi realizado de modo idêntico à excepção de se ter utilizado membranas de células CHO-CB-2.

Para um composto ser considerado um antagonista de CB-1, o composto tem de possuir uma afinidade de ligação ao receptor CB-1 Ki menor do que 13000 nM. Como determinado pelo ensaio descrito acima, os valores de Ki de ligação ao receptor CB-1 dos Exemplos de trabalho 1-63 situam-se na gama de 0,01 nM até 10000 nM.

Ensaio de Actividade Funcional do Receptor de Canabinóides A actividade funcional agonista inversa do CB-1 dos compostos de ensaio foi determinada em células CHO-CB-1 utilizando um ensaio de acumulação de AMPc. Multiplicou-se células CHO-CB-1 em placas de 96 poços até quase à confluência. 227

No dia do ensaio funcional, aspirou-se meio de crescimento e adicionou-se 100 de Tampão de Ensaio (PBS mais HEPES 25 mM/3-isobutil-l-metilxantina 0,1 mM/0,1% de BSA). Adicionou-se compostos ao tampão de Ensaio diluido 1:100 de DMSO a 100% e deixou-se pré-incubar durante 10 minutos antes da adição de 5 μΜ forscolina. Deixou-se que a mistura prosseguisse durante 15 minutos à temperatura ambiente e parou-se pela adição de HC1 0,1 N. A concentração intracelular total de AMPc foi quantificada utilizando o estojo Amersham cAMP SPA.

APLICAÇÕES E ASSOCIAÇÕES

Aplicações

Os compostos da presente invenção são moduladores do receptor de canabinóides e incluem compostos que são, por exemplo, agonistas selectivos, agonistas parciais, agonistas inversos, antagonistas ou antagonistas parciais do receptor de canabinóides. Consequentemente, os compostos da presente invenção pode ser úteis para o tratamento ou prevenção de doenças e distúrbios associados à actividade do receptor de canabinóides acoplado à proteína G. De um modo preferido, os compostos da presente invenção possuem actividade como antagonistas ou agonistas inversos do receptor CB-1 e podem ser utilizados no tratamento of doenças ou distúrbios associados à actividade do receptor CB-1.

Assim sendo, os compostos da presente invenção podem ser administrados a mamíferos, de um modo preferido humanos, para o tratamento de uma diversidade de condições e distúrbios, incluindo, mas não se limitando aos distúrbios metabólicos e do 228 comportamento alimentar assim como de condições associadas aos distúrbios metabólicos, (e. g., obesidade, diabetes, arteriosclerose, hipertensão, doença do ovário poliquistico, doença cardiovascular, osteoartrite, distúrbios dermatológicos, hipertensão, resistência à insulina, hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia, colelitiase e distúrbios do sono, patologias hiperlipidémicas, bulimia nervosa e distúrbios alimentares compulsivos) ou distúrbios psiquiátricos, tais como abuso de substâncias, depressão, ansiedade, mania e esquizofrenia. Estes compostos também poderiam ser utilizados para o melhoramento da função cognitiva (e. g., o tratamento de demência, incluindo doença de Alzheimer, perda da memória imediata e distúrbios de défice de atenção); distúrbios neurodegenerativos (e. g., doença de Parkinson, apoplexia cerebral e traumatismo craniocerebral) e hipotensão (e. g., hipotensão hemorrágica e induzida por endotoxinas). Estes compostos também poderiam ser utilizados para o tratamento do catabolismo associado à disfunção pulmonar e dependência de ventilador; tratamento da disfunção cardíaca (e. g., associada à doença valvular, enfarte do miocárdio, hipertrofia cardíaca ou insuficiência cardíaca congestiva); e melhoramento da função pulmonar global; rejeição de transplante; artrite reumatóide; esclerose múltipla; doença inflamatória do intestino; lúpus; doença do enxerto contra o hospedeiro; Doença de hipersensibilidade mediada pelas células T; psoríase; asma; tiroidite de Hashimoto; síndrome de Guillain-Barre; cancro; dermatite de contacto; rinite alérgica; e lesão isquémica ou de reperfusão.

Os compostos úteis no tratamento de distúrbios da apetência ou motivação controlam o desejo para consumir açúcares, hidratos de carbono, álcool ou drogas e duma maneira mais geral controlam 229 o consumo de ingredientes com valor hedónico. Na presente descrição e nas reivindicações, distúrbios da apetência são entendidos como significando: distúrbios associados a uma substância e, em especial, abuso de uma substância e/ou dependência de uma substância, distúrbios do comportamento alimentar, especialmente aqueles com tendência para originar excesso de peso, independentemente da sua origem, por exemplo: bulimia nervosa, apetência para açúcares. Por conseguinte, a presente invenção relaciona-se ainda com a utilização de um antagonista ou agonista inverso do receptor CB-1 para o tratamento de bulimia e obesidade, incluindo obesidade associada à diabetes de tipo II (diabetes não insulino-dependente) ou, duma maneira mais geral, qualquer doença que leve a que o doente ganhe excesso de peso. A obesidade, como aqui descrita, é definida por um indice de massa corporal (kg/m2) de, pelo menos, 26. Ela pode ser devida a qualquer causa, quer genética quer ambiental, incluindo sobrealimentação e bulimia, doença do ovário poliquistico, craniofaringeoma, Síndrome de Prader-Willi, Sindrome de Frohlich, diabetes de Tipo II, deficiência na hormona do crescimento, Sindrome de Turner e outros estados patológicos caracterizados por actividade metabólica reduzida ou consumo de energia reduzido. Como utilizado relativamente às aplicações aqui descritas, o termo "tratar" ou "tratamento" abrange a prevenção, alivio parcial ou cura da doença ou distúrbio. Além disso, espera-se que o tratamento da obesidade evite a progressão de covariantes médicas da obesidade, tais como arteriosclerose, diabetes de Tipo II, doença do ovário poliquistico, doença cardiovascular, osteoartrite, distúrbios dermatológicos, hipertensão, resistência à insulina, hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia, colelitiase e distúrbios do sono. 230

Os compostos na presente invenção também podem ser úteis no tratamento de distúrbios de abuso de substâncias, incluindo dependência ou abuso de substâncias sem dependência fisiológica. As substâncias de abuso incluem álcool, anfetaminas (ou substâncias tipo anfetaminas), cafeína, canábis, cocaína, alucinogénios, substâncias inalantes, nicotina, opióides, fenciclidina (ou compostos tipo fenciclidina), hipnóticos sedativos ou benzodiazepinas, e outras substâncias (ou substâncias desconhecidas) e combinações das anteriores. Os termos "distúrbios de abuso de substâncias" incluem também síndromes de abstinência de droga ou álcool e distúrbios da ansiedade ou do humor induzidos por substâncias com aparecimento durante a abstinência.

Os compostos na presente invenção podem ser úteis no tratamento de enfraquecimento da memória e distúrbios cognitivos. A condição de enfraquecimento da memória manifesta-se pelo enfraquecimento da capacidade para decorar nova informação e/ou a incapacidade para lembrar-se de informação aprendida. 0 enfraquecimento da memória é um sintoma primário de demência e também pode ser um sintoma associado a doenças, tais como doença de Alzheimer, esquizofrenia, doença de Parkinson, doença de Huntington, doença de Pick, doença de Creutzfeld-Jakob, HIV, doença cardiovascular e traumatismo craniano assim como o declínio cognitivo relacionado com a idade. As demências são doenças que incluem perda de memória e enfraquecimento intelectual adicional separado da memória. Os moduladores do receptor de canabinóides também podem ser úteis no tratamento de enfraquecimentos cognitivos relacionados com défices da atenção, tal como distúrbio do défice da atenção. 231

Os compostos na presente invenção também podem ser úteis no tratamento de doenças associadas à disfunção dos sistemas dopaminérgicos cerebrais, tais como doença de Parkinson e distúrbios de abuso de substâncias. A Doença de Parkinson é um distúrbio neurodegenerativo do movimento caracterizado por bradicinesia e tremor.

Como moduladores do receptor de canabinóides, os compostos da presente invenção são ainda úteis para o tratamento e prevenção de doenças e distúrbios respiratórios. As doenças respiratórias para as quais os moduladores do receptor de canabinóides são úteis incluem, mas não se limitam ao distúrbio pulmonar obstrutivo crónico, enfisema, asma e bronquite. Além disso, os moduladores do receptor de canabinóides bloqueiam a activação de células epiteliais pulmonares por espécies tais como agentes alérgicos, citocinas inflamatórias ou tabaco, limitando desse modo a libertação de mucina, citocinas e quimiocinas, ou inibindo selectivamente a activação de células epiteliais pulmonares.

Além disso, os compostos utilizados na presente invenção podem estimular percursos inibidores nas células, particularmente em leucócitos, células epiteliais pulmonares ou ambos, e são assim úteis no tratamento de tais doenças. "Activação de leucócitos" é aqui definida como qualquer um ou todos de proliferação celular, produção de citocinas, expressão da proteína de adesão e produção de mediadores inflamatórios. "Activação de células epiteliais" é aqui definida como a produção de qualquer uma ou de todas de mucinas, citocinas, quimiocinas e expressão da proteína de adesão. 232 A utilização dos compostos da presente invenção para tratar distúrbios associados à activação de leucócitos é ilustrada, mas não se limita a tratar uma gama de distúrbios, tais como: transplantes (tal como transplante de órgãos, transplante agudo, xenotransplante ou rejeição de heteroenxerto ou homoenxerto (como é utilizado no tratamento de queimaduras)); protecção de lesão isquémica ou de reperfusão tal como lesão isquémica ou de reperfusão ocorrida durante o transplante de órgãos, enfarte do miocárdio, acidente vascular cerebral ou outras causas; indução de tolerância ao transplante; artrite (tal como artrite reumatóide, artrite psoriática ou osteoartrite); esclerose múltipla; doenças respiratórias e pulmonares incluindo mas não se limitando a doença pulmonar obstrutiva crónica (COPD), enfisema, bronquite e sindrome de insuficiência respiratória aguda (ARDS); doença inflamatória do intestino, incluindo colite ulcerosa e doença de Crohn; lúpus (lúpus eritematoso sistémico); doença do enxerto contra o hospedeiro; doenças de hipersensibilidade mediadas pelas células T, incluindo hipersensibilidade de contacto, hipersensibilidade de tipo retardado e enteropatia sensível ao glúten (doença celíaca); psoríase; dermatite de contacto (incluindo a devida à hera venenosa); tiroidite de Hashimoto; sindrome de Sjogren; Hipertiroidismo Autoimune, tal como Doença de Grave; doença de Addison (doença autoimune das glândulas supra-renais); doença autoimune poliglandular (também conhecida como sindrome autoimune poliglandular); calvície autoimune; anemia maligna; vitiligo; hipopituitarismo autoimune; sindrome de Guillain-Barre; outras doenças autoimunes; glomerulonefrite; doença do soro; urticária; doenças alérgicas tais como alergias respiratórias (asma, febre dos fenos, rinite alérgica) ou alergias da pele; escleroderma; mucose fungóide; respostas inflamatória e respiratória agudas (tais como sindrome de 233 insuficiência respiratória aguda e lesão de isquemia/reperfusão); dermatomiosite; peladas; dermatite actinica crónica; eczema; doença de Behcet; Pustulose palmoplantar; Pioderma gangrenoso; sindrome de Sezary; dermatite atópica; esclerose sistémica; e morfeia. 0 termo doença "associada à activação de leucócitos" ou "mediada pela activação de leucócitos" como aqui utilizado inclui cada uma das doenças ou distúrbios referenciados acima. Numa forma de realização particular, os compostos da presente invenção são úteis para tratar os distúrbios ilustrativos supramencionados independentemente da sua etiologia. A actividade combinada dos actuais compostos para monócitos, macrófagos, células T, etc. pode ser útil no tratamento de qualquer um dos distúrbios supramencionado.

Os receptores de canabinóides são importantes na regulação das respostas do receptor Fc gama de monócitos e macrófagos. Os compostos da presente invenção inibem a produção de TNF alfa dependente de Fc gama em monócitos/macrófagos humanos. A aptidão para inibir as respostas de monócitos e macrófagos dependentes do receptor Fc gama resulta numa actividade anti-inflamatória adicional para os actuais compostos. Esta actividade é especialmente valiosa, por exemplo, no tratamento de doenças inflamatórias tais como artrite ou doença inflamatória do intestino. Em particular, os actuais compostos são úteis para tratar glomerulonefrite autoimune e outros tipos de glomerulonefrite induzida pela deposição de complexos imunológicos no rim que estimulam respostas do receptor Fc gama que conduzem à deterioração do rim.

Os receptores de canabinóides são expressados nas células epiteliais pulmonares. Estas células são responsáveis pela 234 secreção de mucinas e citocinas/quimiocinas inflamatórias no pulmão e estão assim intrincadamente envolvidos na geração e progressão de doenças respiratórias. Os moduladores do receptor de canabinóides regulam tanto a produção espontânea como a produção estimulada de mucinas e citocinas. Assim, estes compostos são úteis no tratamento de doenças respiratórias e pulmonares incluindo, COPD, ARDS e bronquite.

Além disso, os receptores de canabinóides podem ser expressados nas células epiteliais do intestino e regulam assim a produção de citocina e mucina e podem ser de utilidade clínica no tratamento de doenças inflamatórias relacionadas com o intestino. Os receptores de canabinóides são também expressados em linfócitos, um subgrupo de leucócitos. Deste modo, os moduladores do receptor de canabinóides inibirão a activação, proliferação e diferenciação de células B e T. Assim, estes compostos serão úteis no tratamento de doenças autoimunes que envolvem respostas mediadas por anticorpos ou células tais como esclerose múltipla e lúpus.

Além disso, os receptores de canabinóides regulam a desgranulação induzida pelos receptores de Fc épsilon e quimiocina de mastócitos e basófilos. Estes desempenham funções importantes na asma, rinite alérgica e outras doenças alérgicas. Os receptores de Fc épsilon são estimulados pelos complexos de IgE-antigénio. Os compostos da presente invenção inibem as respostas de desgranulação induzidas pelo Fc épsilon, incluindo a linhagem de células de basófilos, RBL. A capacidade para inibir as respostas de mastócitos e basófilos dependentes do receptor de Fc épsilon resulta numa actividade anti-inflamatória e anti-alérgica adicional para os actuais compostos. Em 235 particular, os actuais compostos são úteis para tratar asma, rinite alérgica e outros casos de doença alérgica.

Associações A presente invenção inclui no seu âmbito composições farmacêuticas compreendendo, como um ingrediente activo, uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um dos compostos de fórmula I, isolado ou combinado com um veiculo ou diluente farmacêutico. Opcionalmente, os compostos da presente invenção podem ser utilizamos sozinhos, associado a outros agentes terapêuticos adequados úteis no tratamento dos distúrbios supramencionados incluindo: agentes antiobesidade; agentes antidiabéticos, supressores do apetite; agentes de redução de colesterol/lípidos, agentes de aumento do HDL, agentes de melhoramento do processo cognitivo, agentes utilizados para tratar a neurodegeneração, agentes utilizados para tratar patologias respiratórias, agentes utilizados para tratar distúrbios do intestino, agentes anti-inflamatórios; agentes ansiolíticos; antidepressivos; agentes anti-hipertensivos; glicósidos cardiotónicos; e agentes antitumorais.

Estes outros agente(s) terapêutico(s) podem ser administrados antes, simultaneamente ou após a administração dos moduladores do receptor de canabinóides de acordo com a invenção.

Os exemplos de agentes antiobesidade adequados para serem utilizados associados aos compostos da presente invenção incluem agonistas do receptor de melanocortina (MC4R), antagonistas do receptor da hormona de concentração da melanina (MCHR), 236 antagonistas do receptor do secretagogo da hormona do crescimento (GHSR), moduladores do receptor de galanina, antagonistas de orexina, agonistas de CCK, agonistas de GLP-1 e outros péptidos derivados de Pré-proglucagon; antagonistas de NPY1 ou NPY5, moduladores de NPY2 e NPY4, agonistas do factor de libertação de corticotropina, moduladores do receptor de histamina-3 (H3), inibidores de aP2, moduladores de PPAR gama, moduladores de PPAR delta, inibidores da acetil-CoA-carboxilase (ACC), inibidores de ΙΙ-β-HSD-l, moduladores do receptor de adinopectina; agonistas de beta 3 adrenérgico, tal como AJ9677 (Takeda/Dainippon), L750355 (Merck), ou CP331648 (Pfizer) ou outros agonistas conhecidos de beta 3 como divulgados nas Patentes U.S. n° 5541204, 5770615, 5491134, 5776983 e 5 488 064, um modulador beta do receptor da tiróide, tal como um ligando do receptor da tiróide como divulgado nos documentos WO 97/21993 (U. Cal SF) , WO 99/00353 (KaroBio) e GB98/284425 (KaroBio), um inibidor da lipase, tal como orlistat ou ATL-962 (Alizyme), agonistas do receptor de serotonina, (e. g., BVT-933 (Biovitrum)), inibidores da recaptação ou agente de libertação da monoamina, tais como fenfluramina, dexfenfluramina, fluvoxamina, fluoxetina, paroxetina, sertralina, clorfentermina, cloforex, clortermina, picilorex, sibutramina, dexanfetamina, fentermina, fenilpropanolamina ou mazindol, agentes anorécticos tais como topiramato (Johnson & Johnson), CNTF (factor ciliar neurotrófico)/Axokine® (Regeneron), BDNF (factor neurotrófico do cérebro), leptina e moduladores do receptor de leptina, ou antagonistas do receptor de canabinóides-1, tal como SR-141716 (Sanofi) ou SLV-319 (Solvay).

Exemplos de agentes antidiabéticos adequados para serem utilizados associados a compostos da presente invenção incluem: secretagogos de insulina ou sensibilizadores de insulina, os 237 quais podem incluir biguanidas, sulfonilureias, inibidores da glucosidase, inibidores da aldose reductase, agonistas de PPAR γ tal como tiazolidinodionas, agonistas de PPAR α (tais como derivados de ácido fibrico), antagonistas ou agonistas de PPAR 6, agonistas duplos de PPAR α/γ, inibidores de ΙΙ-β-HSD-l, inibidores da dipeptidil-peptidase IV (DP4), inibidores de SGLT2, inibidores da glicogénio-fosforilase, e/ou meglitinidas, assim como insulina, e/ou péptido-1 tipo glucagon (GLP-1), agonistas de GLP-1, e/ou um inibidor de PTP-1B (inibidor da proteina tirosina-fosfatase-lB). 0 agente antidiabético pode ser um agente anti-hiperglicémico oral de um modo preferido uma biguanida tal como metformina ou fenformina ou seus sais, de um modo preferido metformina HC1. Quando o agente antidiabético é uma biguanida, os compostos da presente invenção serão utilizados numa proporção em peso relativamente à biguanida na gama de cerca de 0,001:1 até cerca de 10:1, de um modo preferido de cerca de 0,01:1 até cerca de 5:1. O agente antidiabético também pode ser de um modo preferido uma sulfonilureia tal como gliburida (também conhecida como glibenclamida), glimepirida (divulgada na Patente U.S. n° 4 379 785), glipizida, gliclazida ou clorpropamida, outras sulfonilureias conhecidas ou outros agentes anti-hiperglicémicos que actuam no canal dependente de ATP das células beta, sendo preferidas as gliburida e glipizida, as quais podem ser administradas na mesma ou em formas de dosagem oral separadas. O agente antidiabético oral também pode ser um inibidor da glucosidase tal como acarbose (divulgada na Patente U.S. n° 4904769) ou miglitol (divulgada na Patente U.S. n° 4639436), o 238 qual pode ser administrado na mesma ou em formas de dosagem oral separadas.

Os compostos da presente invenção podem ser utilizados associados a um agonista de PPAR γ tal como um agente antidiabético oral de tiazolidinodiona ou outros sensibilizadores de insulina (o qual tem um efeito de sensibilidade à insulina em doente NIDDM) tal como rosiglitazona (SKB), pioglitazona (Takeda), MCC-555 de Mitsubishi (divulgada na Patente U.S. n° 5 594 016), GL-262570 de Glaxo-Welcome, englitazona (CP-68722, Pfizer) ou darglitazona (CP-86325, Pfizer, isaglitazona (MIT/J&J), JTT-501 (JPNT/P&U), L-895645 (Merck), R-119702 (Sankyo/WL), NN-2344 (Dr. Reddy/NN) ou YM-440 (Yamanouchi), de um modo preferido rosiglitazona e pioglitazona.

Os compostos da presente invenção podem ser utilizados com um agonista duplo PPARa/γ tal como MK-767/KRP-297 (Merck/Kyorin; como descrito em, K. Yajima, et ai., Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab., 284: E966-E971 (2003)), AZ-242 (tesaglitazar; Astra-Zeneca; como descrito em B. Ljung, et ai., J. Lipid Res.r 43, 1855-1863 (2002)); muraglitazar; ou os compostos descritos na Patente U.S. n° 6414002.

Os compostos da presente invenção podem ser utilizados associados a agentes anti-hiperlipidémicos ou agentes utilizados para tratar a arteriosclerose. Um exemplo de um agente hipolipidémico seria um inibidor HMG CoA reductase o qual inclui, mas não se limitam a mevastatina e compostos relacionados como divulgados na Patente U.S. n° 3 983 140, lovastatina (mevinolina) e compostos relacionados como divulgados na Patente U.S. n° 4231938, pravastatina e compostos 239 relacionados tais como divulgados na Patente U.S. n° 4346227, simvastatina e compostos relacionados como divulgados nas Patentes U.S. n° 4448784 e 4450171. Outros inibidores da HMG CoA reductase que podem ser aqui utilizados incluem, mas não se limitam a fluvastatina, divulgadas na Patente U.S. n° 5354772, cerivastatina divulgadas nas Patentes U.S. n° 5006530 e 5177080, atorvastatina divulgadas nas Patentes U.S. n° 4681 893, 5273995, 5385929 e 5686104, pitavastatina (Nissan/nisvastatina de Sankyo (NK-104) ou itavastatina) divulgadas na Patente U.S. n° 5011930, rosuvastatina de Shionogi-Astra/Zeneca (visastatina (ZD-4522) ) divulgadas na Patente U.S. n° 5260440, e compostos de estatina relacionados divulgados na Patente U.S. n° 5753675, análogos de pirazole de derivados de mevalonolactona como divulgados na Patente U.S. n° 4613610, análogos de indeno de derivados de mevalonolactona como divulgados no pedido PCT WO 86/03488, 6— [2— (grupo substituinte-pirrol-l-il)-alquil)piran-2-onas e seus derivados como divulgados na Patente U.S. n° 4 47576, SC-45355 de Searle (um derivado do ácido pentanodióico substituído na posição 3) dicloroacetato, análogos de imidazole da mevalonolactona como divulgados no pedido PCT WO 86/07054, derivados do ácido 3-carboxi-2-hidroxi-propano-fosfónico como divulgados na Patente Francesa n° 2596393, pirrole 2,3-dissubstituído, derivados de furano e tiofeno como divulgados no Pedido de Patente Europeia n° 0221025, análogos de naftilo da mevalonolactona como divulgados na Patente U.S. n° 4686237, octa-hidronaftalenos, tais como divulgados na Patente U.S. n° 4499289, análogos ceto da mevinolina (lovastatina) como divulgados no Pedido de Patente Europeia n° 0142146 A2, e derivados de quinolina e piridina divulgados nas Patentes U.S. n° 5 506 219 e 5 691 322. Além disso, os compostos de ácido fosfínico úteis na inibição da HMG CoA reductase adequados para serem aqui utilizados são divulgados na GB 2205837. 240

Os inibidores da esqualeno-sintase adequados para serem aqui utilizados incluem, mas não se limitam aos a-fosfono-sulfonatos divulgados na Patente U.S. n° 5 712 396, aos descritos por Biller, et al., J. Med. Chem., 31, 1869-1871 (1998) incluindo os (fosfinil-metil)fosfonatos isoprenóides, assim como outros inibidores da esqualeno-sintase conhecidos, por exemplo, como divulgado nas Patentes U.S. n° 4 871 721 e 4 924 024 e em Biller, S. A., Neuenschwander, K., Ponpipom, Μ. M., e Poulter, C. D., Current Pharmaceutical Design, 2, 1-40 (1996).

Além disso, outros inibidores da esqualeno-sintase adequados para serem aqui utilizados incluem os pirofosfatos terpenóides descritos por P. Ortiz de Montellano, et al., J. Med. Chem., 20, 243-249 (1977), o análogo A do disfosfato de farnesilo e os análogos de pirofosfato presqualeno (PSQ-PP) como divulgados por Corey e Volante, J. Am. Chem. Soc., 98, 1291-1293 (1976), os fosfinilfosfonatos descritos por McClard, R. W. et al., J. Am. Chem. Soc., 109, 5544 (1987) e os ciclopropanos descritos por Capson, T. L., PhD dissertation, Junho de 1987, Dept. Med. Chem. U of Utah, Resumo, índice, pág. 16, 17, 40-43, 48-51, Resumo.

Outros agentes hipolipidémicos adequados para serem aqui utilizados incluem, mas não se limitam aos derivados de ácido fibrico, tais como fenofibrato, genfibrozil, clofibrato, bezafibrato, ciprofibrato, clinofibrato e semelhantes, probucol, e compostos relacionados como divulgados na Patente U.S. n° 3674836, sendo preferidos os probucol e genfibrozil, sequestrantes de ácidos biliares, tais como colestiramina, colestipol e DEAE-Sephadex (SECHOLEX, POLICEXIDE) e colestagel (Sankyo/Geltex), assim como lipostabil (Rhone-Poulenc), Eisai E-5050 (um derivado de etanolamina N-substituída), imanixil 241 (HOE-402), tetra-hidrolipestatina (THL) , istigmastanilfosforilcolina (SPC, Roche), aminociclodextrina (Tanabe Seiyoku), Ajinomoto AJ-814 (derivado de azuleno), melinamida (Sumitomo), Sandoz 58-035, American Cyanamid CL_277.082 e CL-283.546 (derivados de ureia dissubstituida), ácido nicotinico (niacina), acipimox, acifran, neomicina, ácido p-amino-salicílico, aspirina, derivados de poli(dialilmetilamina), tais como divulgados na Patente U.S. n° 4 759 923, amina quaternária poli(cloreto de dialildimetilamónio) e ionenos, tais como divulgados na Patente U.S. n° 4 027 009, e outros agentes de redução de colesterol no soro conhecidos. O outro agente hipolipidémico pode ser um inibidor da ACAT (o qual também tem actividade anti-aterosclerose) tal como descrito em Drugs of the Future, 24, 9-15 (1999), (Avasimiba); "The ACAT inhibitor, Cl-1011 is effective in the prevention and regression of aortic fatty streak area in hamsters", Nicolosi et al., Atherosclerosis (Shannon, Irei), 137 (1), 77-85 (1998); "The pharmacological profile of FCE 27677: a novel ACAT inhibitor with potent hypolipidemic activity mediated by selective suppression of the hepatic secretion of ApoBlOO-containing lipoprotein", Ghiselli, Giancarlo, Cardiovasc. Drug Rev., 16 (1), 16-30 (1998); "RP 73163: a bioavailable alkylsulphinyl-diphenylimidazole ACAT inhibitor", Smith, C., et al., Bioorg. Med. Chem. Lett, 6 (1), 47-50 (1996); "ACAT inhibitors: physiologic mechanisms for hypolipidemic and anti-atherosclerotic activities in experimental animais", Krause et al., Editor(es): Ruffolo, Robert R., Jr.; Hollinger, Mannfred A., Inflammation: Mediators Pathways, 173-98 (1995), Publisher: CRC, Boca Raton, Fia.; "ACAT inhibitors: potential anti-atherosclerotic agents", Sliskovic et al., Curr. Med. Chem., 1 242 (3), 204-25 (1994); "Inhibitors of acil-CoA:cholesterol O-acyl transferase (ACAT) as hypocholesterolemic agents. 6. The first water-soluble ACAT inhibitor with lipid-regulating activity. Inhibitors of acyl-CoA:cholesterol aciltransferase (ACAT). 7. Development of a series of substituted N-phenyl-N'-[ (1-phenylciclopentyl)-methyl]ureas with enhanced hypocholesterolemic activity", Stout et al., Chemtracts: Org. Chem., 8 (6), 359-62 (1995), ou TS-962 (Taisho Pharmaceutical Co. Ltd), assim como F-1394, CS-505, F-12511, HL-004, K-10085 e YIC-C8-434. O agente hipolipidémico pode ser um regulador positivo da actividade do receptor de LDL tal como MD-700 (Taisho Pharmaceutical Co. Ltd) e LY295427 (Eli Lilly). O agente hipolipidémico pode ser um inibidor da absorção de colesterol, de um modo preferido, SCH48461 (ezetimibe) da Schering-Plough assim como os divulgados em Atherosclerosis 115, 45-63 (1995) e J. Med. Chem. 41, 973 (1998). O outro agente de lípidos ou agente de modulação de lipidos pode ser um inibidor da proteína de transferência de colesterilo (CETP) tal como CP-529.414 da Pfizer assim como os divulgados no documento WO/0038722 e nos documentos EP 818448 (Bayer) e EP 992496, e SC-744 e SC-795 da Pharmacia, assim como CETi-1 e JTT-705. O agente hipolipidémico pode ser um inibidor do cotransportador de Na+/ácido biliar tal como divulgado em Drugs of the Future, 24, 425-430 (1999) . O inibidor da ATP citrato liase que pode ser utilizado na associação da invenção pode incluir, por exemplo, os divulgados na Patente U.S. n° 5447954. 243 0 outro agente de lípidos também inclui um composto fitoestrogénio tal como divulgado no documento WO 00/30665 incluindo proteina de soja isolada, concentrado de proteína de soja ou farinha de soja assim como uma isoflavona tal como genisteína, daidezeína, gliciteína ou equol, ou fitosteróis, fitostanol ou tocotrienol como divulgado no documento WO 2000/015201; um inibidor beta-lactama da absorção do colesterol tal como divulgado no documento EP 675714; um regulador positivo do HDL tal como um agonista de LXR, um agonista de PPAR α e/ou um agonista de FXR; um promotor do catabolismo da LDL tal como divulgado no documento EP 1022272; um inibidor da troca sódio-protão tal como divulgado no documento DE 19622222; um indutor do receptor de LDL ou um glicósido esteroidal tal como divulgado nas Patentes U.S. n° 5 698 527 e GB 2304106; um antioxidante tal como beta-caroteno, ácido ascórbico, α-tocoferol ou retinol como divulgado no documento WO 94/15592 assim como Vitamina C e um agente anti-homocisteína tal como ácido fólico, um folato, Vitamina B6, Vitamina B 12 e Vitamina E; isoniazida como descrita no documento WO 97/35576; um inibidor da absorção de colesterol, um inibidor da HMG-CoA sintase, ou um inibidor da lanosterol-desmetilase como divulgado no documento WO 97/48701; um agonista de PPAR δ para tratar a dislipidemia; ou uma proteína de ligação ao elemento de regulação de esterol-I (SREBP-1) como descrita no documento WO 2000/050574, por exemplo, um esfingolípido, tal como ceramida, ou esfingomielenase neutra (N-SMase) ou um fragmento desta. Os agentes hipolipidémicos preferidos são pravastatina, lovastatina, simvastatina, atorvastatina, fluvastatina, pitavastatina e rosuvastatina, assim como niacina e/ou colestagel. 244

Os compostos da presente invenção podem ser utilizados associados a agentes anti-hipertensivos. Exemplos de agentes anti-hipertensivos adequados para serem utilizados associados aos compostos da presente invenção incluem bloqueadores beta-adrenérgicos, bloqueadores do canal de cálcio (tipo L e/ou tipo T; e. g. diltiazem, verapamil, nifedipina, amlodipina e mibefradil), diuréticos (e. g., clorotiazida, hidroclorotiazida, flumetiazida, hidroflumetiazida, bendroflumetiazida, metilclorotiazida, triclorometiazida, politiazida, benzetiazida, ácido etacrinico, tricrinafeno, clortalidona, furosemida, musolimina, bumetanida, triamtreneno, amilorida, espironolactona), inibidores da renina, inibidores da ACE (e. g., captopril, zofenopril, fosinopril, enalapril, ceranopril, cilazopril, delapril, pentopril, quinapril, ramipril, lisinopril), antagonistas do receptor de AT-1 (e. g., losartan, irbesartan, valsartan), antagonistas do receptor de ET (e. g., sitaxsentan, atersentan e os compostos divulgados nas Patentes U.S. n° 5 612 359 e 6 043 265), antagonista duplo de ET/AII (e. g., compostos divulgados no documento WO 00/01389), inibidores da endopeptidase neutra (NEP), inibidores da vasopepsidase (inibidores duplos de NEP-ACE) (e. g., omapatrilat e gemopatrilat), e nitratos.

Os moduladores do receptor de canabinóides poderiam ser úteis no tratamento de outras doenças associadas à obesidade, incluindo distúrbios do sono. Por conseguinte, os compostos divulgados na presente invenção poderiam ser utilizados associados a agentes terapêuticos para tratar distúrbios do sono. Exemplos de terapias adequadas para o tratamento de distúrbios do sono para serem utilizadas associadas aos compostos da presente invenção incluem análogos de melatonina, antagonistas do receptor de melatonina, agonistas de ML 1 B, 245 moduladores do receptor de GABA; moduladores do receptor de NMDA, moduladores do receptor de histamina-3 (H3), agonistas de dopamina e moduladores do receptor de orexina.

Os moduladores do receptor de canabinóides podem reduzir ou melhorar o abuso de substâncias ou distúrbios de dependência. Por conseguinte, a associação de moduladores do receptor de canabinóides com agentes utilizados para tratar distúrbios de dependência podem reduzir o requisito de dose ou melhorar a eficácia da terapêutica corrente contra o distúrbio de dependência. Exemplos de agentes utilizados para tratar o abuso de substâncias ou distúrbios de dependência são: inibidores selectivos da recaptação de serotonina (SSRI), metadona, buprenorfina, nicotina e bupropion.

Os moduladores do receptor de canabinóides podem reduzir a ansiedade ou depressão; por conseguinte, os compostos divulgados neste pedido podem ser utilizados associados a agentes ansiolíticos ou antidepressivos. Exemplos de agentes ansiolíticos adequados para serem utilizados associados aos compostos da presente invenção incluem benzodiazepinas (e. g., diazepam, lorazepam, oxazepam, alprazolam, clordiazepóxido, clonazepam, clorazepato, halazepam e prazepam), agonistas do receptor de 5HT1A receptor agonistas (e. g., buspirona, flesinoxan, gepirona e ipsapirona) e antagonistas do factor de libertação de corticotropina (CRF).

Exemplos de classes adequadas de antidepressivos para serem utilizadas associadas aos compostos da presente invenção incluem inibidores da recaptação de norepinefrina (aminas terciárias e secundárias tricíclicas), inibidores selectivos da recaptação de serotonina (SSRIs) (fluoxetina, fluvoxamina, paroxetina e 246 sertralina), inibidores da monoamina oxidase (MAOIs) (isocarboxazida, fenelzina, tranilcipromina, selegilina), inibidores reversíveis da monoamina oxidase (RIMAs) (moclobemida) , inibidores da recaptação de serotonina e norepinefrina (SNRIs) (venlafaxina) , antagonistas do receptor do factor de libertação da corticotropina (CRF), antagonista do receptor adrenérgico alfa e antidepressivos atípicos (bupropion, lítio, nefazodona, trazodona e viloxazina). A associação de um fármaco antipsicótico convencional com um antagonista do receptor CB-1 também poderia melhorar a redução de sintomas no tratamento de psicose ou loucura. Além disso, uma tal associação poderia permitir uma redução rápida dos sintomas, reduzindo a necessidade para o tratamento crónico com agentes antipsicóticos. Uma tal associação poderia também reduzir o requisito de dose antipsicótica eficaz, resultando numa probabilidade reduzida de desenvolver a disfunção motora típica do tratamento crónico com antipsicóticos.

Exemplos de agentes antipsicóticos adequados para serem utilizados associados a compostos da presente invenção incluem as classes de fenotiazina (clorpromazina, mesoridazina, tioridazina, acetofenazina, flufenazina, perfenazina e trifluoperazina), tioxantina (clorprotixeno, tiotixeno), dibenzazepinas heterocíclicas (clozapina, olanzepina e aripiprazole), butirofenona (haloperidol), difenilbutilpiperidina (pimozide) e indolone (molindolone) de agentes antipsicóticos. Outros agentes antipsicóticos com valor terapêutico potencial associados aos compostos na presente invenção incluem loxapina, sulpirida e risperidona. 247 A associação dos compostos na presente invenção com fármacos antipsicóticos convencionais também poderia proporcionar um maior efeito terapêutico para o tratamento de distúrbios de esquizofrenia, como se descreveu acima para os distúrbios maníacos. Como aqui utilizado, distúrbios esquizofrénicos incluem esquizofrenia paranoica, desorganizada, catatónica, indiferenciada e residual, distúrbio esquizóide, distúrbio esquizoafectivo, distúrbio delirante, distúrbio psicótico da vontade e distúrbio psicótico não especificado. Exemplos de fármacos antipsicóticos adequados para serem associados aos compostos na presente invenção incluem os antipsicóticos mencionados acima, assim como antagonistas do receptor de dopamina, agonistas do receptor muscarínico, antagonistas do receptor de 5HT2A e antagonistas ou agonistas parciais do receptor de 5HT2A/dopamina (e. g., olanzepina, aripiprazole, risperidona, ziprasidona).

Os compostos divulgados na presente invenção poderiam ser utilizados para melhorar os efeitos de agentes de melhoramento do processo cognitivo, tais como inibidores da acetilcolinesterase (e. g., tacrina), agonistas do receptor muscarínico-1 (e. g., milamelina), agonistas nicotínicos, moduladores do receptor de ácido glutâmico (AMPA e NMDA) e agentes nootrópicos (e. g., piracetam, levetiracetam) . Exemplos de terapias adequadas para o tratamento da doença de Alzheimer e distúrbios cognitivos para serem utilizados associados aos compostos da presente invenção incluem donepezil, tacrina, revastigraína, 5HT6, inibidores da secretase gama, inibidores da secretase beta, bloqueadores do canal SK, bloqueados de Maxi-K e bloqueadores de KCNQ. 248

Os compostos divulgados na presente invenção poderiam ser utilizados para melhorar os efeitos de agentes utilizados no tratamento da doença de Parkinson. Exemplos de agentes utilizados para tratar a doença de Parkinson incluem: levadopa com ou sem um inibidor da COMT, fármacos antiglutamatérgicos (amantadina, riluzole), antagonistas adrenérgicos alfa-2 tais como idazoxan, antagonistas de opiáceos, tal como naltrexona, outros agonistas de dopamina ou moduladores de transportador, tal como ropinirole, ou pramipexole ou factores neurotróficos tal como factor neurotrófico glial (GDNF).

Os compostos divulgados na presente invenção poderiam ser utilizados associados a agentes anti-inflamatórios adequados. Exemplos de agentes anti-inflamatórios adequados para serem utilizados associados aos compostos da presente invenção incluem prednisona, dexametasona, inibidores da ciclooxigenase (i. e., inibidores da COX-1 e/ou COX-2 tais como NSAIDs, aspirina, indometacina, ibuprofeno, piroxicam, Naproxen®, Celebrex®, Vioxx®), agonistas/antagonistas de CTLA4-Ig, antagonistas do ligando da CD40, inibidores de IMPDH, tal como micofenolato (CellCept®), antagonistas da integrina, antagonistas da integrina alfa-4 beta-7, inibidores da adesão celular, antagonistas do interferão gama, ICAM-1, antagonistas do factor de necrose tumoral (TNF) (e. g., infliximab, OR1384, incluindo inibidores do TNF-alfa, tais como tenidap, anticorpos anti-TNF ou do receptor solúvel do TNF tais como etanercept (Enbrel®) , rapamicina (sirolimus ou Rapamune) e leflunomida (Arava)), inibidores da sintese de prostaglandinas, budesonida, clofazimina, CNI-1493, antagonistas de CD4 (e. g., priliximab), inibidores da proteína-cinase activada por mitogénios p38, inibidores da proteína tirosina-cinase (PTK), inibidores de IKK, e terapias para o tratamento da síndrome do intestino irritável 249 (e. g.f controladores da abertura de Zelnorm® e Maxi-K® tais como os divulgados na Patente U.S. n° 6184231 Bl).

Ilustrativos desses outros agentes terapêuticos que podem ser utilizados associados a moduladores do receptor de canabinóides incluem os seguintes: ciclosporinas (e. g., ciclosporina A), anti-receptor de IL-2 (Anti-Tac), anti-CD45RB, anti-CD2, anti-CD3 (OKT-3), anti-CD4, anti-CD80, anti-CD86, anticorpo monoclonal 0KT3, agentes que bloqueiam a interacção entre as CD40 e gp39, tais como anticorpos específicos para a CD40 e/ou gp39 (i. e., CD154), proteínas de fusão construídas de CD40 e gp39 (CD40lg e CD8gp39), inibidores, tais como inibidores da translocação nuclear, da função NF-kapa B, tal como desoxispergualina (DSG), compostos de ouro, agentes antiproliferativos tais como metotrexato, FK506 (tacrolimus, Prograf) , micofenolato mofetil, fármacos citotóxicos tais como azatiprina e ciclofosfamida, anticitocinas tais como anti-IL-4 ou proteínas de fusão do receptor de IL-4 e inibidores da PDE 4 tal como Ariflo, e os inibidores de PTK divulgados nos seguintes pedidos de patente U.S., aqui incorporados por referência na sua totalidade: N° de Série 09/097 338, apresentado em 15 de Junho de 1998; N° de Série 09/094 797, apresentado em 15 de Junho de 1998; N° de Série 09/173 413, apresentado em 15 de Outubro de 1998; e N° de Série 09/262 525, apresentado em 4 de Março de 1999. Ver também os documentos seguintes e referências ali citadas e aqui incorporados por referência: Hollenbaugh, D., et al., "Cleavable CD40lg Fusion Proteins and the Binding to Sgp39", J. Immunol. Methods (Países Baixos), 188 (1), pág. 1-7 (15 de Dezembro de 1995); Hollenbaugh, D., et al., "The Human T Cell Antigen Gp39, A Member of the TNF Gene Family, is a Ligand for the CD40 Receptor: Expression of a Soluble Form of Gp39 with B Cell Co-Stimulatory Activity", EMBO J (Inglaterra), 11 (12), 250 pág. 4313-4321 (Dezembro de 1992); e Moreland, L. W. et al.f "Treatment of Rheumatoid Arthritis with a Recombinant Human Tumor Necrosis Factor Receptor (P75)-Fc Fusion Protein" New England J. of Medicine, 337 (3), pág. 141-147 (1997).

Os outros agentes terapêuticos anteriores, quando utilizados associados aos compostos da presente invenção, podem ser utilizados, por exemplo, nas quantidades indicadas no Physicians' Desk Reference (PDR) ou como determinado de outro modo pelo especialista na matéria.

Os compostos de fórmula (I) da invenção podem ser administrados por via oral ou parentérica, tal como por via subcutânea ou intravenosa, assim como por aplicação nasal, por via rectal ou sublingual a várias espécies de mamíferos que se saiba estarem afectados por tais doenças, e. g., humanos, numa quantidade eficaz de até 1 grama, de um modo preferido até 200 mg, de um modo mais preferido até 100 mg num regime dividido em uma, duas ou quatro doses diárias.

Os compostos da fórmula (I) podem ser administrados para qualquer das utilizações aqui descritas por quaisquer meios adequados, por exemplo, por via oral, tal como na forma de comprimidos, cápsulas, granulados ou pós; por via sublingual; bucal; parentérica, tal como por injecção subcutânea, intravenosa, intramuscular ou intrasternal ou técnicas de infusão (e. g., como soluções ou suspensões aquosas ou não aquosas estéreis injectáveis); por via nasal, incluindo administração nas membranas nasais, tal como por inalação de formulação para pulverização; por via tópica, tal como na forma de um creme ou pomada; ou por via rectal tal como na forma de supositórios; em formulações unitárias de dosagem contendo 251 veículos ou diluentes não tóxicos, farmaceuticamente aceitáveis. Os actuais compostos podem, por exemplo, ser administrados numa forma adequada para libertação imediata ou libertação prolongada. A libertação imediata ou libertação prolongada pode ser conseguida através da utilização de composições farmacêuticas adequadas compreendendo os actuais compostos, ou, em particular no caso de libertação prolongada, através da utilização de dispositivos tais como implantes subcutâneos ou bombas osmóticas. Os actuais compostos também podem ser administrados por lipossomas.

As composições ilustrativas para administração oral incluem suspensões as quais podem conter, por exemplo, celulose microcristalina para conferir volume, ácido algínico ou alginato de sódio como um agente de suspensão, metilcelulose como um intensificador da viscosidade, e edulcorantes ou aromatizantes tais como os conhecidos na técnica; e comprimidos de libertação imediata que podem conter, por exemplo, celulose microcristalina, fosfato dicálcico, amido, estearato de magnésio e/ou lactose e/ou outros excipientes, aglutinantes, enchimentos, desintegrantes, diluentes e lubrificantes, tais como os conhecidos na técnica. Os compostos de fórmula I também podem ser administrados através da cavidade oral por administração sublingual e/ou bucal. Os comprimidos moldados, comprimidos prensados ou comprimidos liofilizados são formas ilustrativas que podem ser utilizadas. As composições ilustrativas incluem aquelas que formulam o(s) actual(ais) composto(s) com diluentes de dissolução rápida, tais como manitol, lactose, sacarose e/ou ciclodextrinas. Também podem estar incluídos nessas formulações excipientes de elevado peso molecular, tais como celuloses (avicel) ou polietileno glicóis (PEG). Estas formulações também podem incluir um excipiente para ajudar à adesão à mucosa tal 252 como hidroxipropilcelulose (HPC), hidroxilpropilmetilcelulose (HPMC), carboximetilcelulose de sódio (SCMC), copolímero de anidrido maleico (e. g., Gantrez), e agentes para controlar a libertação tal como copolímero poliacrílico (e. g. Carbopol 934). Também se pode adicionar lubrificantes, deslizantes, aromatizantes, corantes e estabilizantes para facilidade de fabrico e utilização.

As composições ilustrativas para administração por aerossol ou inalação nasal incluem soluções em soro fisiológico as quais podem conter, por exemplo, álcool benzílico ou outros conservantes adequados, promotores da absorção para melhorar a biodisponibilidade e/ou outros agentes de solubilização ou dispersão, tais como os conhecidos na técnica.

As composições ilustrativas para administração parentérica incluem soluções ou suspensões injectáveis as quais podem conter, por exemplo, diluentes ou solventes não tóxicos, parentericamente aceitáveis adequados, tais como manitol, 1,3-butanodiol, água, solução de Ringer, uma solução isotónica de cloreto de sódio ou outros agentes de dispersão ou de suspensão e humectantes adequados, incluindo mono- ou diglicéridos sintéticos, e ácidos gordos, incluindo ácido oleico, ou Cremaphor.

As composições ilustrativas para administração rectal incluem supositórios os quais podem conter, por exemplo, um excipiente não irritante adequado, tal como manteiga de cacau, ésteres de glicérido sintéticos ou polietilenoglicóis, os quais são sólidos às temperaturas normais, mas liquefazem-se e/ou dissolvem-se na cavidade rectal para libertar o fármaco. 253

As composições ilustrativas para administração tópica incluem um veiculo tópico tal como Plastibase (óleo mineral gelificado com polietileno) .

Entender-se-á que o nivel de dose especifico e a frequência de dosagem para qualquer indivíduo particular podem ser diferentes e dependerão de uma diversidade de factores incluindo a actividade do composto específico utilizado, da estabilidade metabólica e do período de acção desse composto, da espécie, idade, peso corporal, estado de saúde geral, género e dieta do indivíduo, do modo e momento de administração, velocidade de excreção, associação de fármaco e gravidade do estado particular.

Entender-se-á que apesar de esta invenção ter sido aqui descrita em termos de formas de realização específicas fornecidas em pormenor, estas formas de realização são apresentadas a título de ilustração dos princípios gerais da invenção, e a invenção não está limitada necessariamente às mesmas.

Lisboa, 8 de Maio de 2007 254

Claims

REIVINDICAÇÕES 1. Composto de fórmula I R3 /

incluindo os sais e estereoisómeros farmaceuticamente aceitáveis, em que: n é uma ligação simples ou uma ligação dupla; R1 é seleccionado do grupo consistindo de halogéneo, ciano, alquilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, ariloxilo, heteroariloxilo, -NR8R9, -C02R8, -CONR8R9, -0R8, -NR8COR9, -NR8CONR8R9, -NR8C02R9, -OCONR8R9, -NR8S(0)mR9, -NR8S (0)mNR8R9, -NR8S (0)m0R9 e -OS (0)mNR8R9; R2 é seleccionado do grupo consistindo de halogéneo, ciano, alquilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, 1 ariloxilo, heteroariloxilo, -NR8R9, -CO2R8, -CONR8R9, -0R8, -NR8COR9, -nr8conr8r9, -nr8co2r9, -OCONR8R9, -NR8S (0) mR9, -NR8S (0)mNR8R9, -NR8S (0)m0R9 e -OS (0)mNR8R9; R3 é seleccionado do grupo consistindo de alquilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilalquilo, arilalquilo e heteroarilalquilo; R6 é seleccionado do grupo consistindo de H, alquilo, cicloalquilo, heterociclilo, cicloalquilalquilo, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo e heteroarilalquilo, em que o grupo R6 tem uma massa molecular menor do que 200 unidades de massa atómica; R7 está ausente quando n é uma ligação dupla; R7 é seleccionado do grupo consistindo de H, alquilo, cicloalquilo, heterociclilo, cicloalquilalquilo, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo, heteroarilalquilo, -COR8, -CO2R8, -CONR8R9 e -S(0)mR8 quando n é uma ligação simples; R8 e R9 são, independentemente, seleccionados do grupo consistindo de H, alquilo, arilo, arilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, heterocicloalquilo, heteroarilo e heteroarilalquilo; R8 e R9 tomados em conjunto podem formar opcionalmente um anel heterociclilo de 4, 5, 6 ou 7 membros ou um anel heteroarilo de 5 ou 6 membros; e m é um número inteiro de 1 ou 2. 2
2. Composto de acordo com a Reivindicação 1, em que: R1 é seleccionado do grupo consistindo de alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, ariloxilo, heteroariloxilo, -0R8 e -NR8R9; R2 é seleccionado do grupo consistindo de alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, ariloxilo, heteroariloxilo, -0R8 e -NR8R9; R3 é seleccionado do grupo consistindo de alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilalquilo, arilalquilo e heteroarilalquilo; R6 é seleccionado do grupo consistindo de H, alquilo, cicloalquilo, heterociclilo, cicloalquilalquilo, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo e heteroarilalquilo, em que o grupo R6 tem uma massa molecular menor do que 200 unidades de massa atómica; R7 está ausente; R8 e R9 são, independentemente, seleccionados do grupo consistindo de H, alquilo, arilo, arilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, heterocicloalquilo, heteroarilo e heteroarilalquilo; 3 R8 e R9, tomados em conjunto podem formar opcionalmente um anel heterociclilo de 5, 6 ou 7 membros ou um anel heteroarilo de 5 ou 6 membros; e n é uma ligação dupla.
3. Composto de acordo com a Reivindicação 2, em que: R6 é seleccionado do grupo consistindo de H, alquilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo e heteroarilalquilo, em que o grupo R6 tem uma massa molecular menor do que 200 unidades de massa atómica.
4. Composto de acordo com a Reivindicação 3, em que: R2 é seleccionado do grupo consistindo de alquilo, cicloalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, ariloxilo, heteroariloxilo, -OR8 e -NR8R9.
5. Composto de acordo com a Reivindicação 4, em que: R1 é seleccionado do grupo consistindo de alquilo, cicloalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, ariloxilo, heteroariloxilo, -OR8 e -NR8R9. 4
6. Composto de acordo com a Reivindicação 5, em que: R3 é seleccionado do grupo consistindo de alquilo, cicloalquilo, heterociclilalquilo, arilalquilo e heteroarilalquilo.
7. Composto de acordo com a Reivindicação 1, em que: R1 é seleccionado do grupo consistindo de arilo, heteroarilo, ariloxilo, heteroariloxilo, -0R8 e -NR8R9; R2 é seleccionado do grupo consistindo de heteroarilo, ariloxilo, heteroariloxilo, -0R8 e -NR8R9; R3 é seleccionado do grupo consistindo de alquilo, heterociclilalquilo, arilalquilo e heteroarilalquilo; R6 é seleccionado do grupo consistindo de H, alquilo e heterociclilo, em que o grupo R6 tem uma massa molecular menor do que 200 unidades de massa atómica; R8 e R9 são, independentemente, seleccionados do grupo consistindo de H, alquilo, arilo, arilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, heterocicloalquilo, heteroarilo e heteroarilalquilo; R8 e R9, tomados em conjunto, podem formar opcionalmente um anel heterociclilo de 5, 6 ou 7 membros ou um anel heteroarilo de 5 ou 6 membros; e n é uma ligação dupla. 5 Composto de acordo com a Reivindicação 7, em que: Rê é seleccionado do grupo consistindo de H, metilo, etilo e isopropilo.
9. Composto de acordo com a Reivindicação 8, em que: R2 é seleccionado do grupo consistindo de arilo e heteroarilo em que o grupo arilo ou heteroarilo está, opcionalmente substituído, com o grupo consistindo de H, alquilo, haloalquilo, halogéneo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -0R8, -C02R8, CONR8R9, -S02R8 e -S02NR8R9.
10. Composto de acordo com a Reivindicação 9, em que: R1 é seleccionado do grupo consistindo de heterociclilo, arilo, heteroarilo, ariloxilo, heteroariloxilo, -OR8 e -NR8R9 em que o grupo heterociclilo, arilo, heteroarilo, ariloxilo ou heteroariloxilo está, opcionalmente, substituído com o grupo consistindo de H, ciano, haloalquilo, alquilo, halogéneo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -OR8, -C02R8, CONR8R9, -S02R8 e -S02NR8R9.
11. Composto de acordo com a Reivindicação 10, em que: R3 é seleccionado do grupo consistindo de alquilo, arilalquilo, heteroarilalquilo e heterociclilalquilo, em que o grupo arilalquilo, heteroarilalquilo ou hetericicloalquilo está, opcionalmente, substituído com o grupo consistindo de hidrogénio, ciano, haloalquilo, alquilo, cicloalquilo, halogéneo, hidroxilo, amino, -OR8, 6 -NR8 NR9, -SO2R8, -S02NR8R9, heteroarilo, heterociclilo e arilo.
12. Composto de acordo com a Reivindicação 1, em que: R1 é seleccionado do grupo consistindo de alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, ariloxilo, heteroariloxilo, -0R8 e -NR8R9; R2 é seleccionado do grupo consistindo de alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, ariloxilo, heteroariloxilo, -0R8 e -NR8R9; R3 é seleccionado do grupo consistindo de alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilalquilo, arilalquilo e heteroarilalquilo; R6 é seleccionado do grupo consistindo de H, alquilo, cicloalquilo, heterociclilo, cicloalquilalquilo, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo e heteroarilalquilo, em que o grupo R6 tem uma massa molecular menor do que 200 unidades de massa atómica; R7 é seleccionado do grupo consistindo de H, alquilo, cicloalquilo, heterociclilo, cicloalquilalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilalquilo, -CONR8R9, -C02R8, -COR8 e -S02R8; 7 8 9 R e R são, independentemente, seleccionados do grupo consistindo de H, alquilo, arilo, arilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, heterocicloalquilo, heteroarilo e heteroarilalquilo; R e R , tomados em conjunto, podem formar opcionalmente um anel heterociclilo de 5, 6 ou 7 membros ou um anel heteroarilo de 5 ou 6 membros; e n é uma ligação simples.
13. Composto de acordo com a Reivindicação 12, em que; R6 é seleccionado do grupo consistindo de H, alquilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo e heteroarilalquilo, em que o grupo R6 tem uma massa molecular menor do que 200 unidades de massa atómica.
14. Composto de acordo com a Reivindicação 13, em que; R7 é seleccionado do grupo consistindo de H, alquilo, -COR8, -C02R8, -CONR8R9 e -S02R8.
15. Composto de acordo com a Reivindicação 14, em que: R2 é seleccionado do grupo consistindo de alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, e heterociclilalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, ariloxilo, heteroariloxilo, -OR8 -NR8R9. 8
16. Composto de acordo com a Reivindicação 15, em que: R1 é seleccionado do grupo consistindo de alquilo, cicloalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, ariloxilo, heteroariloxilo, -0R8 e -NR8R9.
17. Composto de acordo com a Reivindicação 16, em que: R3 é seleccionado do grupo consistindo de alquilo, cicloalquilo, heterociclilalquilo, arilalquilo e heteroarilalquilo.
18. Composto de acordo com a Reivindicação 1, em que: R1 é seleccionado do grupo consistindo de arilo, heteroarilo, ariloxilo, heteroariloxilo, -0R8 e -NR8R9; R2 é seleccionado do grupo consistindo de arilo, heteroarilo, ariloxilo, heteroariloxilo, -0R8 e -NR8R9; R3 é seleccionado do grupo consistindo de alquilo, heterociclilalquilo, arilalquilo e heteroarilalquilo; R6 é seleccionado do grupo consistindo de H, alquilo, arilalquilo e heteroarilalquilo, em que o grupo R6 tem uma massa molecular menor do que 200 unidades de massa atómica; R7 é seleccionado do grupo consistindo de H, -COR8, -C02R8, -CONR8R9 e -S02R8; 9 R8 e R9 são, independentemente, seleccionados do grupo consistindo de H, alquilo, arilo, arilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, heterocicloalquilo, heteroarilo e heteroarilalquilo; R8 e R9, tomados em conjunto, podem formar opcionalmente um anel heterociclilo de 5, 6 ou 7 membros ou um anel heteroarilo de 5 ou 6 membros; e n é uma ligação simples.
19. Composto da Reivindicação 1 seleccionado de: 10

11

12

13

14

15

16

17

18

19
20. Composto da Reivindicação 1 seleccionado de:

CH3 CH, CN

20

21

22
21. Composto da Reivindicação 1 seleccionado de;

23

24
22. Composição farmacêutica, compreendendo: pelo menos, um composto de acordo com Fórmula I R3 /

25 incluindo os sais e estereoisómeros farmaceuticamente aceitáveis, em que: n é uma ligação simples ou ligação dupla; R1 é seleccionado do grupo consistindo de halogéneo, ciano, alquilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, ariloxilo, heteroariloxilo, -NR8R9, -C02R8, -CONR8R9, -0R8, -NR8COR9, -nr8conr8r9, -nr8co2r9, -OCONR8R9, NR8S (0)mR9, -NR8S (0)mNR8R9, -NR8S (0)m0R9 e -OS (0)mNR8R9; R2 é seleccionado do grupo consistindo de halogéneo, ciano, alquilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, ariloxilo, heteroariloxilo, -NR8R9, -C02R8, -CONR8R9, -0R8, -NR8COR9, -nr8conr8r9, -nr8co2r9, -OCONR8R9, -NR8S (0)mR9, -NR8S (0)mNR8R9, -NR8S (0) m0R9 e -OS (0) mNR8R9; R3 é seleccionado do grupo consistindo de alquilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, heterociclilalquilo, arilalquilo e heteroarilalquilo; R6 é seleccionado do grupo consistindo de H, alquilo, cicloalquilo, heterociclilo, cicloalquilalquilo, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo e heteroarilalquilo, em que o grupo R6 tem uma massa molecular menor do que 200 unidades de massa atómica; 26 R7 está ausente quando n é uma ligação dupla; R7 é seleccionado do grupo consistindo de H, alquilo, cicloalquilo, heterociclilo, cicloalquilalquilo, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo, heteroarilalquilo, -COR8, -C02R8, -CONR8R9 e -S(0)mR8 quando n é uma ligação simples; R8 e R9 são, independentemente, seleccionados do grupo consistindo de H, alquilo, arilo, arilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, heterocicloalquilo, heteroarilo e heteroarilalquilo; R8 e R9, tomados em conjunto, podem formar opcionalmente um anel heterociclilo de 4, 5, 6 ou 7 membros ou um anel heteroarilo de 5 ou 6 membros; e m é um número inteiro de 1 ou 2; e pelo menos um diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável.
23. Composição farmacêutica de acordo com a Reivindicação 22, compreendendo ainda: pelo menos, um outro agente terapêutico. 27
24. Utilização de um composto de acordo com fórmula I: R3 /

incluindo os sais e estereoisómeros farmaceuticamente aceitáveis, em que: n é uma ligação simples ou uma ligação dupla; R1 é seleccionado do grupo consistindo de halogéneo, ciano, alquilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, ariloxilo, heteroariloxilo, -NR8R9, -CO2R8, -CONR8R9, -0R8, -NR8COR9, -NR8CONR8R9, -NR8C02R9, -OCONR8R9, -NR8S(0)mR9, -NR8S (0)mNR8R9, -NR8S (0)m0R9 e -OS (0)mNR8R9; R2 é seleccionado do grupo consistindo de halogéneo, ciano, alquilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, ariloxilo, heteroariloxilo, -NR8R9, -C02R8, -CONR8R9, -0R8, -NR8COR9, -NR8CONR8R9, -NR8C02R9, -OCONR8R9, -NR8S (0)mR9, -NR8S (0)mNR8R9, -NR8S (0)m0R9 e -OS (0)mNR8R9; 28 R3 é seleccionado do grupo consistindo de alquilo, alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, heterociclilalquilo, arilalquilo e heteroarilalquilo; R6 é seleccionado do grupo consistindo de H, alquilo, cicloalquilo, heterociclilo, cicloalquilalquilo, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo e heteroarilalquilo, em que o grupo R6 tem uma massa molecular menor do que 200 unidades de massa atómica; R7 está ausente quando n é uma ligação dupla; R7 é seleccionado do grupo consistindo de H, alquilo, cicloalquilo, heterociclilo, cicloalquilalquilo, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo, heteroarilalquilo, -COR8, -C02R8, -CONR8R9 e -S(0)mR8 quando n é uma ligação simples; R8 e R9 são, independentemente, seleccionados do grupo consistindo de H, alquilo, arilo, arilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, heterocicloalquilo, heteroarilo e heteroarilalquilo; R e R , tomados em conjunto, podem formar opcionalmente um anel heterociclilo de 4, 5, 6 ou 7 membros ou um anel heteroarilo de 5 ou 6 membros; e m é um número inteiro de 1 ou 2, para o fabrico de um medicamento para ser utilizado no tratamento de uma doença ou distúrbio mediado pelo receptor de canabinóides. 29
25. Associação farmacêutica compreendendo uma composição farmacêutica da Reivindicação 22 e um agente terapêutico seleccionado de agentes antiobesidade; supressores do apetite; agentes antidiabéticos; agentes anti-hiperlipidémicos; agentes hipolipidémicos; agente hipocolesterolémicos; agentes de modulação de lípidos; agentes de redução do colesterol; agentes de redução de lípidos; agentes de aumento de HDL, agentes anti-hipertensivos; agentes utilizados para tratar distúrbios do sono; agentes utilizados para tratar distúrbios de abuso de substâncias e de dependência; agentes ansiolíticos; antidepressivos; agentes antipsicóticos; agentes de melhoramento do processo cognitivo; agentes utilizados para tratar distúrbios cognitivos; agentes utilizados para tratar a doença de Alzheimer; agentes utilizados para tratar a doença de Parkinson; agentes anti-inflamatórios; agentes utilizados para tratar a neurodegeneração; agentes utilizados para tratar a arteriosclerose; agentes utilizados para tratar patologias respiratórias; agentes utilizados para tratar distúrbios do intestino; glicósidos cardiotónicos; e agentes antitumorais.
26. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que o outro agente terapêutico pode ser administrado antes, simultaneamente ou após a administração da composição farmacêutica da Reivindicação 22.
27. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que o agente antiobesidade é seleccionado de agonistas do receptor de melanocortina (MC4R); antagonistas do receptor da hormona de concentração da melanina (MCHR); antagonistas do receptor do secretagogo da hormona do crescimento 30 (GHSR); moduladores do receptor de galanina; antagonistas de orexina; agonistas de CCK; agonistas de GLP-1 e outros péptidos derivados de Pré-proglucagon; antagonistas de NPYl ou NPY5; moduladores de NPY2 e NPY4; agonistas do factor de libertação de corticotropina; moduladores do receptor de histamina-3 (H3); inibidores de aP2; moduladores de PPAR gama; moduladores de PPAR delta; inibidores da acetil-CoA carboxilase (ACC); inibidores de ΙΙ-β-HSD-l; moduladores do receptor de adiponectina; agonistas adrenérgicos beta 3, incluindo AJ9677, L750355 e CP331648 ou outros agonistas beta 3 conhecidos; modulador beta do receptor da tiróide; inibidores da lipase, incluindo orlistat e ATL-962; agonistas do receptor de serotonina, incluindo BVT-933; inibidores ou agentes de libertação da recaptação de monoamina, incluindo fenfluramina, dexfenfluramina, fluvoxamina, fluoxetina, paroxetina, sertralina, clorfentermina, cloforex, clortermina, picilorex, sibutramina, dexanfetamina, fentermina, fenilpropanolamina e mazindol; agentes anorécticos, incluindo topiramato; factor ciliar neurotrófico, incluindo Axokine; factor neurotrófico do cérebro; moduladores de leptina e do receptor de leptina e outros antagonistas do receptor de canabinóides-1, incluindo SR-141716 e SLV-319.
28. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que o agente antidiabético é seleccionado de secretagogos de insulina; sensibilizadores de insulina; agentes anti-hiperglicémicos; biguanidas; sulfonilureias; inibidores da glucosidase; inibidores da aldose-reductase; agonistas de PPAR γ incluindo tiazolidinodionas; agonistas de PPAR a, incluindo derivados do ácido fíbrico; antagonistas ou 31 agonistas de PPAR δ; agonistas duplos de PPAR α/γ; inibidores de ΙΙ-β-HSD-l; inibidores da dipeptidil-peptidase IV; inibidores de SGLT2; inibidores da glicogénio-fosforilase; meglitinidas; insulina; péptido-1 de tipo glucagon; agonistas do péptido-1 de tipo glucagon; e inibidores da proteína tirosina fosfatase-lB.
29. Associação farmacêutica da Reivindicação 28, em que o agente antidiabético é um agente anti-hiperglicémico oral seleccionado de biguanidas, metformina, fenformina, metformina HC1 e outros sais destes.
30. Associação farmacêutica da Reivindicação 29, em que o outro agente terapêutico é uma biguanida e o composto da reivindicação 1 será administrado numa proporção em peso relativamente à biguanida na gama de cerca de 0,001:1 até cerca de 10:1.
31. Associação farmacêutica da Reivindicação 28, em que as sulfonilureias são seleccionadas de gliburida, glibenclamida, glimepirida, glipizida, gliclazida, clorpropamida, outras sulfonilureias ou outros agentes anti-hiperglicémicos conhecidos que actuam no canal dependente de ATP das células beta. 32. Associação farmacêutica da Reivindicação 31, em que a associação do composto da Reivindicação 1 e da sulfonilureia é administrada na mesma ou em formas de dosagem oral separadas. 32
33. Associação farmacêutica da Reivindicação 28, em que o inibidor da glucosidase é seleccionado de acarbose e miglitol.
34. Associação farmacêutica da Reivindicação 33, em que a associação do composto da Reivindicação 1 e o inibidor da glucosidase é administrada na mesma ou em formas de dosagem oral separadas.
35. Associação farmacêutica da Reivindicação 28, em que o agonista de PPAR γ é um agente antidiabético oral de tiazolidinodiona.
36. Associação farmacêutica da Reivindicação 28, em que o sensibilizador de insulina é seleccionado de rosiglitazona, pioglitazona, MCC-555, GL-262570, englitazona, darglitazona, isaglitazona; JTT-501, L-895645, R-119702, NN-2344, e YM-440.
37. Associação farmacêutica da Reivindicação 28, em que os agonistas duplos de PPARcc/γ são seleccionados de MK-767/KRP-297, tesaglitazar e muraglitazar.
38. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que o agente hipolipidémico é um inibidor da HMG CoA reductase seleccionado de mevastatina; compostos relacionados com a mevastatina; lovastatina; mevinolina; compostos relacionados com a lovastatina e a mevinolina; pravastatina e compostos relacionados com a pravastatina; simvastatina e compostos relacionados com a simvastatina; fluvastatina; cerivastatina; atorvastatina; pitavastatina; nisvastatina; 33 compostos visastatina; itavastatina; rosuvastatina; relacionados com a rosuvastatina e a visastatina; análogos de pirazole de derivados da mevalonolactona; análogos de indeno de derivados da mevalonolactona; 6-[2-(grupo substituinte-pirrol-l-il)-alquil)piran-2-onas e seus derivados; SC-45355; derivado do ácido pentanodióico substituído na posição 3; dicloroacetato; análogos de imidazole da mevalonolactona; derivados do ácido 3-carboxi-2-hidroxi-propano-fosfónico; pirroles 2,3-dissubstituídos, derivados de furano e tiofeno; análogos de naftilo da mevalonolactona; octa-hidronaftalenos; análogos ceto da lovastatina e mevinolina; derivados de quinolina e piridina; e compostos de ácido fosfínico.
39. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que o agente hipolipidémico é um inibidor da esqualeno-sintase seleccionado de α-fosfono-sulfonatos; (fosfinil- metil)fosfonatos isoprenóides; pirofosfatos terpenóides; análogo A do difosfato de farnesilo e análogos de pirofosfato de presqualeno; fosfinilfosfonatos; e ciclopropanos.
40. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que o agente hipolipidémico é um derivado de ácido fíbrico seleccionado de fenofibrato; gemfibrozil; clofibrato; bezafibrato; ciprofibrato; clinofibrato; probucol; e compostos relacionados com o probucol.
41. Associação farmacêutica da Reivindicação 25 em que o agente hipolipidémico é um sequestrante de ácidos biliares seleccionado de colestiramina; colestipol; DEAE-Sephadex; Secholex; Policexida; colestagel; lipostabil; E-5050; 34 derivados de etanolamina N-substituída; imanixil; tetra-hidrolipestatina; istigmastanilfosforilcolina; aminociclodextrina; AJ-814; derivados de azuleno; melinamida; 58-035; CL-277.082; CL-283.546; derivados de ureia dissubstituída; ácido nicotinico; niacina; acipimox; acifrano; neomicina; ácido p-aminossalicilico; aspirina; derivados de poli(dialilmetilamina); amina quaternária poli(cloreto de dialildimetilamónio); ionenos; e outros agentes conhecidos de redução do colesterol no soro.
42. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que o agente hipolipidémico é um inibidor da acil CoA:colesterol O-acil transferase seleccionado de N-fenil-N'-[ (1-fenilciclopentil)metil]ureias substituídas; TS-962; F-1394; CS-505; F-12511; HL-004; K-10085; e YIC-C8-434.
43. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que o agente hipolipidémico é um regulador positivo da actividade do receptor de LDL incluindo MD-700.
44. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que o agente hipolipidémico é um inibidor da absorção de colesterol incluindo ezetimibe.
45. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que o agente de modulação de lípidos é um inibidor da proteína de transferência de colesterilo seleccionado de CP-529.414; SC-744; SC-795; CETi-1; e JTT-705.
46. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que o agente hipolipidémico é um inibidor do cotransportador de Na+/ácido biliar ileal. 35
47. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que o agente hipolipidémico é um inibidor da citrato-liase.
48. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que os agentes de modulação de lipidos são seleccionados de um composto fitoestrogénio seleccionado de proteína de soja isolada, concapresentado de proteína de soja, farinha de soja, isoflavona, genisteína, daidzeína, gliciteína ou equol, ou fitosteróis, fitostanol e tocotrienol; um inibidor beta-lactama da absorção do colesterol; um regulador positivo de HDL seleccionado de um agonista de LXR, um agonista de PPAR α e um agonista de FXR; um promotor do catabolismo da LDL; um inibidor da troca sódio-protão; um indutor do receptor de LDL; glicósido esteroidal; um antioxidante seleccionado de beta-caroteno, ácido ascórbico, α-tocoferol, retinol, Vitamina C, agente anti-homocisteína, ácido fólico, um folato, Vitamina B6, Vitamina B12 e Vitamina E; isoniazida; um inibidor da absorção de colesterol; um inibidor da HMG-CoA sintase; um inibidor da lanosterol-desmetilase; um agonista de PPAR δ para tratar a dislipidemia; uma proteína de ligação ao elemento de regulação de esterol-I seleccionada de um esfingolípido, ceramida, esfingomielenase neutra ou fragmento destes.
49. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que o agente hipolipidémico é seleccionado de pravastatina; lovastatina; simvastatina; atorvastatina; fluvastatina; pitavastatina; rosuvastatina; niacina e colestagel. 36
50. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que os agentes anti-hipertensivos são seleccionados de bloqueadores beta-adrenérgicos; bloqueadores do canal de tipo L seleccionados de diltiazem, verapamil, nifedipina, amlodipina e mibefradil; bloqueadores do canal de cálcio de tipo T seleccionados de diltiazem, verapamil, nifedipina, amlodipina e mibefradil; diuréticos seleccionados de clorotiazida, hidroclorotiazida, flumetiazida, hidroflumetiazida, bendroflumetiazida, metilclorotiazida, triclorometiazida, politiazida, benzetiazida, ácido etacrinico tricrinafeno, clortalidona, furosemida, musolimina, bumetanida, triamtreneno, amilorida e espironolactona; inibidores da renina; inibidores da ACE seleccionados de captopril, zofenopril, fosinopril, enalapril, ceranopril, cilazopril, delapril, pentopril, quinapril, ramipril e lisinopril; antagonistas do receptor de AT-1 seleccionados de losartan, irbesartan e valsartan; antagonistas do receptor de ET seleccionados de sitaxsentan e atrsentan; antagonistas duplos de ET/AII; inibidores da endopeptidase neutra; inibidores da vasopepsidase e inibidores duplos NEP-ACE seleccionados de omapatrilat e gemopatrilat; e nitratos.
51. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que o agente utilizado para tratar distúrbios do sono é seleccionado de análogos da melatonina; antagonistas do receptor de melatonina; agonistas de ML 1 B; moduladores do receptor de GABA; moduladores do receptor de NMDA; moduladores do receptor de histamina-3 (H3); agonista de dopamina e moduladores do receptor de orexina. 37
52. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que o agente utilizado para tratar distúrbios de abuso de substâncias e de dependência é seleccionado de inibidores selectivos da recaptação de serotonina; metadona; buprenorfina; nicotina; e bupropion.
53. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que o agente ansiolitico é seleccionado de benzodiazepinas seleccionadas de diazepam, lorazepam, oxazepam, alprazolam, clordiazepóxido, clonazepam, clorazepato, halazepam e prazepam; agonista do receptor de 5HT1A seleccionados de buspirona, flesinoxano, gepirona e ipsapirona; e antagonistas do factor de libertação de corticotropina.
54. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que o agente antidepressivo é seleccionado de inibidores da recaptação de norepinefrina seleccionados de aminas terciárias e secundárias tricíclicas; inibidores selectivos da recaptação de serotonina seleccionados de fluoxetina, fluvoxamina, paroxetina e sertralina; inibidores da monoamina oxidase seleccionados de isocarboxazida, fenelzina, tranilcipromina e selegilina; inibidores reversíveis da monoamina oxidase incluindo moclobemida; inibidores da recaptação de serotonina e norepinefrina incluindo venlafaxina; antagonista do receptor do factor de libertação de corticotropina; antagonistas do receptor alfa-adrenérgico; e antidepressivos atípicos seleccionados de bupropion, lítio, nefazodona, trazodona e viloxazina.
55. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que o agente antipsicótico é seleccionado de fenotiazina seleccionada de clorpromazina, mesoridazina, tioridazina, 38 acetofenazina, flufenazina, perfenazina e trifluoperazina; tioxantina seleccionada de clorprotixeno e tiotixeno; dibenzazepina heterocíclica seleccionada de clozapina, olanzepina e aripiprazole; butirofenona, incluindo haloperidol; difenilbutilpiperidina, incluindo pimozida; classes indolona e molindolona de agentes antipsicóticos; loxapina; sulpirida; risperidona; antagonistas do receptor de dopamina; agonistas do receptor muscarínico; antagonistas do receptor de 5HT2A, antagonistas e agonistas parciais do receptor de 5HT2A/dopamina seleccionados de olanzepina, aripiprazole, risperidona e ziprasidona.
56. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que o agente de melhoramento do processo cognitivo é seleccionado de inibidores da acetilcolinesterase, incluindo tacrina; agonistas do receptor muscarínico-1, incluindo milamelina; agonistas nicotinicos; moduladores do receptor de ácido glutâmico; e agentes nootrópicos seleccionados de piracetam e levetiracetam.
57. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que o agente utilizado para tratar a doença de Alzheimer e o agente utilizado para tratar distúrbios cognitivos são seleccionados de donepezil; tacrina; revastigraína; 5HT6; inibidores da gama secretase; inibidores da beta secretase; bloqueadores do canal SK; bloqueadores de Maxi-K; e bloqueadores de KCNQ.
58. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que o agente utilizado para tratar a doença de Parkinson é seleccionado de levadopa com ou sem um inibidor da COMT; fármacos antiglutamatérgicos seleccionados de amantadina e 39 riluzole; antagonistas alfa-2 adrenérgicos incluindo idazoxano; antagonistas de opiáceos incluindo naltrexona; outros agonistas de dopamina e moduladores do transportador incluindo ropinirole; e pramipexole ou factores neurotróficos incluindo o factor neurotrófico glial.
59. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que o agente anti-inflamatório é seleccionado de prednisona; dexametasona; inibidores da ciclooxigenase incluindo inibidores da COX-1 e da COX-2 seleccionados de NSAID, aspirina, indometacina, ibuprofeno, piroxicam, Naproxeno, Celebrex e Vioxx; agonistas e antagonistas de CTLA4-Ig; antagonistas do ligando de CD40; inibidores de IMPDH incluindo micofenolato; antagonistas da integrina; antagonistas da alfa-4 beta-7 integrina; inibidores da adesão celular; antagonistas do interferão gama; ICAM-1; antagonistas do factor de necrose tumoral seleccionados de infliximabe, OR1384, inibidores de TNF-alfa incluindo tenidap, anticorpos anti-TNF ou receptores solúveis de TNF incluindo etanorcept; rapamicina seleccionada de sirolimus e Rapamune; eflunomida; inibidores da síntese de prostaglandinas; budesonida; clofazimina; CNI-1493; antagonistas de CD4 incluindo priliximabe; inibidores da proteína-cinase activada por mitogénio p38; inibidores da proteína tirosina cinase; inibidores de IKK; e agentes para o tratamento da síndrome do intestino irritável seleccionados de Zelnorm e controladores da abertura de Maxi-K.
60. Associação farmacêutica da Reivindicação 25, em que o outro agente terapêutico é seleccionado de ciclosporinas; ciclosporina A; anti-receptor de IL-2; anti-CD45RB; anti- 40 CD2; anti-CD3 (OKT-3); anti-CD4; anti-CD80; anti-CD86; anticorpo monoclonal 0KT3; agentes bloqueadores da interacção entre as CD40 e gp39; anticorpos específicos para a CD40 e/ou gp39; CD154; proteínas de fusão construídas a partir de CD40 e gp39; CD40lg; CD8gp39; inibidores da translocação nuclear da função NF-kappa B; desoxispergualina; compostos de ouro; agentes antiproliferativos seleccionados de metotrexato, FK506, tacrolimus, Prograf e micofenolato de mofetilo; fármacos citotóxicos seleccionados de azatiprina e ciclofosfamida; anticitocinas seleccionadas de anti-IL-4 ou proteínas de fusão do receptor de IL-4; inibidores da PDE 4 incluindo Ariflo e inibidores da PTK.
61. Utilização de acordo com a Reivindicação 24, em que as doenças ou os distúrbios estão associados à actividade do receptor CB-1.
62. Utilização de acordo com a Reivindicação 61, em que as doenças ou os distúrbios são bulimia, obesidade ou qualquer doença que resulte num ganho de excesso de peso pelo doente.
63. Utilização de acordo com a Reivindicação 61, em que as doenças ou os distúrbios são distúrbios metabólicos, distúrbios do comportamento alimentar e distúrbios da apetência, incluindo tratamento dos estados associados a outros distúrbios, tais como obesidade, diabetes, arteriosclerose, hipertensão, doença do ovário poliquístico, doença cardiovascular, osteoartrite, distúrbios dermatológicos, hipertensão, resistência à insulina, hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia, 41 colelitíase e distúrbios do sono, patologias hiperlipidémicas, bulimia nervosa e distúrbios alimentares compulsivos.
64. Utilização de acordo com a Reivindicação 61, em que as doenças ou os distúrbios são obesidade devido a causas genéticas ou ambientais, incluindo sobrealimentação e bulimia, doença do ovário poliquistico, craniofaringeoma, Sindrome de Prader-Willi, Sindrome de Frohlich, diabetes de Tipo II, deficiência na hormona do crescimento, Sindrome de Turner e outros estados patológicos caracterizados por actividade metabólica reduzida ou consumo de energia reduzido.
65. Utilização de acordo com a Reivindicação 61, em que as doenças ou os distúrbios são distúrbios psiquiátricos seleccionados de abuso de substâncias, distúrbios de dependência, depressão, ansiedade, loucura e esquizofrenia.
66. Utilização de um composto como definido na Reivindicação 24 para o fabrico de um medicamento para ser utilizado no melhoramento da função cognitiva e do enfraquecimento da memória, incluindo o tratamento de doenças seleccionadas de demência, doença de Alzheimer, perda da memória imediata e distúrbios de défice de atenção; distúrbios neurodegenerativos, doença de Parkinson, apoplexia cerebral e traumatismo craniocerebral; hipotensão, hipotensão hemorrágica e induzida por endotoxinas; doença de Parkinson; doença de Huntington; doença de Pick; doença de Creutzfeld-Jakob; traumatismo craniano; e declínio cognitivo relacionado com a idade. 42
67. Utilização de um composto como definido na Reivindicação 24 para o fabrico de um medicamento para ser utilizado no tratamento de doenças associadas à disfunção do sistema dopaminérgico cerebral incluindo doença de Parkinson e distúrbios de abuso de substâncias.
68. Utilização de um composto como definido na Reivindicação 24 para o fabrico de um medicamento para ser utilizado no tratamento de doenças seleccionadas de catabolismo relacionado com a disfunção pulmonar e dependência de ventilador; disfunção cardíaca, doença valvular, enfarte do miocárdio, hipertrofia cardiaca ou insuficiência cardiaca congestiva; rejeição de transplante; artrite reumatóide; esclerose múltipla; doença inflamatória do intestino; lúpus; doença do enxerto contra o hospedeiro; doença de hipersensibilidade mediada pelas células T; psoríase; asma; tiroidite de Hashimoto; sindrome de Guillain-Barre; cancro; dermatite de contacto; rinite alérgica; e lesão isquémica ou de reperfusão.
69. Utilização de um composto como definido na Reivindicação 24 para o fabrico de um medicamento para ser utilizado no tratamento de distúrbios de abuso ou dependência de substâncias nos quais as substâncias de abuso ou dependência incluem álcool, anfetaminas, substâncias tipo anfetaminas, cafeína, canabis, cocaína, alucinogénios, substâncias inalantes, nicotina, opióides, fenciclidina, compostos de tipo fenciclidina, hipnóticos sedativos, benzodiazepinas, outras substâncias conhecidas ou desconhecidas, ou combinações das substâncias de abuso. 43
70. Utilização de acordo com a Reivindicação 69, em que o abuso ou dependência de substâncias pode ocorrer sem dependência fisiológica.
71. Utilização de um composto como definido na Reivindicação 24 para o fabrico de um medicamento para ser utilizado no tratamento de sindromes da abstinência de droga ou álcool e ansiedade ou distúrbio do humor induzido por substâncias com aparecimento durante a abstinência.
72. Utilização de um composto como definido na Reivindicação 24 para o fabrico de um medicamento para ser utilizado no tratamento de distúrbios associados à activação de leucócitos incluindo rejeição devida ao transplante de órgãos, transplante agudo, xenotransplante, heteroenxerto e homoenxerto; protecção da lesão isquémica ou de reperfusão tal como lesão isquémica ou de reperfusão ocorrida no decurso do transplante de órgãos, enfarte do miocárdio, acidente vascular cerebral ou outras causas; indução de tolerância ao transplante; artrite reumatóide, artrite psoriática e osteoartrite; esclerose múltipla; doença pulmonar obstrutiva crónica (COPD), enfisema, bronquite e sindrome de insuficiência respiratória aguda (ARDS); doença inflamatória do intestino, colite ulcerosa e doença de Crohn; lúpus eritematoso sistémico; doença do enxerto contra o hospedeiro; doenças de hipersensibilidade mediadas pelas células T, incluindo hipersensibilidade de contacto, hipersensibilidade de tipo retardado, enteropatia sensível ao glúten e doença celíaca; psoríase; dermatite de contacto; tiroidite de Hashimoto; sindrome de Sjogren; hipertiroidismo autoimune, tal como Doença de Grave; doença de Addison; doença ou sindrome autoimune poliglandular; 44 calvície autoimune; anemia maligna; vitiligo; hipopituitarismo autoimune; síndrome de Guillain-Barre; outras doenças autoimunes; glomerulonefrite; doença do soro; urticária; asma, febre dos fenos, rinite alérgica e alergias da pele; escleroderma; mucose fungóide; respostas inflamatória e respiratória agudas, incluindo síndrome de insuficiência respiratória aguda e lesão de isquemia/reperfusão; dermatomiosite; peladas; dermatite actinica crónica; eczema; doença de Behcet; Pustulose palmoplantar; Pioderma gangrenoso; síndrome de Sezary; dermatite atópica; esclerose sistémica; e morfeia.
73. Utilização de um composto como definido na Reivindicação 24 para o fabrico de um medicamento para ser utilizado no tratamento de doenças inflamatórias, incluindo artrite, doença inflamatória do intestino e glomerulonefrite autoimune.
74. Composto como definido na Reivindicação 24 para ser utilizado em terapia. Lisboa, 8 de Maio de 2007 45