KR890003838B1

KR890003838B1 - 인데노피리미딘 유도체

Info

Publication number: KR890003838B1
Application number: KR1019870002721A
Authority: KR
Inventors: 스티븐 허쉬 케네드; 데이비드 존스 찰스; 빅터 크럼칼른스 에릭스; 그란트 사운더스 도날드
Original assignee: 일라이 릴리 앤드 캄파니; 메리 앤 터커
Priority date: 1986-03-31
Filing date: 1987-03-25
Publication date: 1989-10-05
Also published as: IL81978A; CA1265140A; ATE78251T1; JPS62238275A; IL81978A0; CN1013673B; IE59762B1; NZ219748A; DK161187D0; HUT43834A; DK165245C; EP0240263B1; PH23398A; ZA872162B; DE3780338T2; DE3780338D1; ES2042552T3; CN87102424A; IE870812L; KR870008857A

Abstract

내용 없음.

Description

인데노피리미딘 유도체

본 발명은 포유동물의 효소 아로마타제를 억제하며, 유방암과 기타의 에스트로젠-의존 질병의 치료 또는 예방에 유용한 다음 일반식(I)의 인데노피리미딘 유도체에 관한 것이다.

상기식에서, Y는 수소, 메틸 하이드록시, 메톡시, 클로로, 플루오로, 또는 -NHCOCH₃이고, R₁은 수소, 클로로, 플루오로, 메톡시, 또는 트리플루오로 메틸이며 ; R₂및 R₃는 각각 독립적으로 수소, 클로로, 플루오로 또는 트리플루오로메틸이다.

에스트로젠은 안드로겐성 스테이드로부터 합성된다. 에스트로젠을 형성하기 위한 생합성 경로에 있어서, 방향족화는 필수적인 단계이다. 일반적으로, 아로마타제 효소를 효과적으로 억제할 수 있다면, 에스트로젠-의존 질병을 편리하게 치료할 수 있다고 생각된다[참조 : Cancer Research, Vol. 42, Suppl.8.especially page 3216S et. seq. (1982)].

아로마타제 억제제로 치료할 수 있는 몇몇 에스트로젠-의존 질병이 존재한다. 이러한 질병은 유방암, 자궁내막증식증, 다낭포성 난소질병, 양성 유방질병 및 유방암이다. 유방암 치료에 있어서 항에스트로젠제의 유익한 효과는 잘 정립되어 있다[참조 : Br.J.Cancer, 25,270(1971)]. 공지의 아로마타제 억제제인 테스톨로락톤과 아미노글루테티미드는 유방암 치료에 있어서 유익한 효과를 나타낸다[Cancer Research, Supra.].

자궁내막증식이란 자궁의 자궁내막의 이상증식으로 발생하는 질병이다. 자궁내막의 성장은 에스트라디올에 의존 하기 때문에, 에스트로젠의 생성을 억제하여 질병의 진행을 정지시켜야 한다.

양성 유방질병(또는 종종 낭양변성섬유종 유방암이라고 한다)은 난소 스테로이드에 의존한다[참조 : Cancer, 49,2534(1982)]. 아로마타제 억제제는 이러한 질병에 시험되지 않으나, 항에스트로젠제는 유익한 것 같다[참조 : Obstet.Gynecol., 54,80(1979)].

다낭포성 난소질병은 여성 불임증의 가장 일반적인 원인중의 하나이다. 이 질병은 스테로이드 신진대사의 이상에서 기인되며, 이 질병의 치료의 주요형태가 항에스트로젠제인 클로미펜이다[참조 : Clin.Endocrinol.,12,177(1980)].

효소 아로마타제를 억제하는 효과 때문에, 일반식(I)의 화합물은 포유동물의 에스트로젠-의존 질병, 특히 유방암의 치료 및 예방에 유용하다.

본 발명에 유용한 바람직한 그룹의 화합물은 (a) Y가 하이드록시 또는 특히 수소이고, (b) R₁은 특히 8-위치에 존재하는 클로로 또는 플루오르이며, (c) R₂및 R₃중의 하나는 수소이고, (d) R₂및 R₃중의 다른 하나는 특히 4'-위치에 존재하는 클로로 또는 플루오로인 일반식(I)의 화합물이다.

본 발명에 따른 바람직한 제형은 본 발명의 바람직한 화합물 하나와 이에 대한 약제학적 담체를 혼합하여 이루어진다.

본 발명의 화합물은 다음의 반응도식에 요약된 바와 같이 당해분야에 공지된 일반적인 과정에 따라 제조할 수 있다.

Y가 수소인 본 발명의 화합물(일반식 III)은 탈수반응에 의해 상응하는 α, α-디페닐-5-피리미딘메탄올(II)로 부터 제조된다. 각종 치환체 R의 정의에 따라 본 반응은 분별결정화 또는 크로마토그래피와 같은 공지의 방법으로 분리할 수 있는 일반식(III)의 둘 또는 그 이상의 상이한 인데노피리미딘을 제공한다.

(II)의 탈수반응은 당해분야에 공지된 특정한 몇몇 일반적인 방법으로 행한다. 예를 들면, 바람직한 방법은 메탄설폰산중의 피리미딘메탄올(II)의 용액을 교반하는 방법이다. 전형적으로, 20 내지 30℃의 온도를 이용하며, 반응은 12 내지 24시간 이내에 종결된다. 반응은 불활성 대기하에서 행하는 것이 바람직하다. 또한, 메탄설폰산 대신에 진항 황산을 사용할 수도 있다.

일반식(III)의 인데노피리미딘은 당해 분야에 공지된 몇몇 특정한 산화공정을 이용하여 일반식(IV)의 카비놀로 전환시킬 수 있다. 예를 들면, 산화반응은 일반식(m)의 화합물을 불활성 대기하에 불활성 용매(예 : 아세톤)중에서 산화제(예 : 과망간산칼륨)로 처리하여 수행할 수 있다.

일반적으로, 반응은 주위온도에서 수행하며, 통상적으로 4 내지 18시간 이내에 종결된다. 유사하게, 산화반응은 디메틸설폭사이드에 인데노피리미딘(III)을 용해시키고, 대략 1몰 당량의 강염기(예 : 수산화나트륨)를 첨가한 다음, 용액을 통해 산소 가스를 발포시켜 수행할 수 있다. 이 반응은 (III)에서 (IV)로 거의 정량적으로 전환하며, 일반적으로 주위온도에서 수행 할 경우에는 2 내지 4시간 이내에 종결된다.

일반식(IV)의 화합물은 카비놀을 아세토니트릴 및 메탄설폰산과 혼합함으로써 일반식(V)의 아세트아미드 유도체로 전환시킬 수 있다. 약 20 내지 30℃의 온도에서, 반응은 통상적으로 12내지 18시간 이내에 종결된다.

또한 클로로 동족체(VI)는 티오닐 클로라이드로 처리한 후, 카비놀(IV)로 부터 제조할 수 있다. 이 반응은 카비놀 및 티오닐 클로라이드를 실온에서 2내지 4시간 동안 교반하여 수행할 수 있다.

유사한 플루오로 화합물(VII)도 또한 비반응성 용매(예 : 디클로로메틴)중에서 디에틸아미노설퍼 트리플루오라이드로 처리한 후, 카비놀(IV)로부터 제조한다. 이반응은 불활성 대기하에 약 0℃에서 진행될 경우, 가장 잘 수행될 수 있다. 이러한 조건하에서 반응은 일반적으로 4 내지 18시간 이내에 종결된다.

Y가 메톡시인 일반식(I)의 화합물은 예를 들면, 실시예29에서 설명한 바와 같이 Y가 클로로인 일반식(I)의 상응하는 화합물을 메탄올중에서 메톡사이드 이온의 공급원(예 : 나트륨 메톡사이드)과 반응시켜 제조할 수 있다.

Y가 메틸인 일반식(I)의 화합물은 실시예 30에서 설명한 바와 같이 Y가 수소인 일반식(I)의 상응하는 화합물을 강염기(예 : 수산화나트륨)의 존재하에 메틸화제(예 : 메틸 요오다이드)와 반응시켜 제조할 수 있다. 기타의 메틸화제(예 : 메틸 설페이트 또는 메틸 설포네이트)도 사용할 수 있다

일반식(II)의 중간체는 공지되어 있다(참조 : 미합중국 특허 제3,818,009호). 이러한 화합물을 제조하는 바람직하고 신규한 방법은 미합중국 특허 제 3,869,456호에 교시되어 있다. 필요한 기타의 중간체는 유사한 방법으로 제조할 수있다. 상기의 전환에 필요한 기타의 시약은 상업적으로 구입할 수 있거나, 당해 분야에 공지된 방법으로 제조할 수 있다.

당해 분야의 숙련가들이 인식할 수 있는 바와같이, 일반식(I)의 화합물은 비대칭 탄소원자를 함유한다. 본 발명은 특별한 이성체에 한정되지 않으며 일반식(I)화합물의 개개 거울상 이성체뿐만 아니라 라세메이트를 포함한다.

따라서, 본 발명은 (a)다음 일반식(II)의 α, α-디페닐-5-피리미딘메탄올을 탈수시켜 Y가 수소인 일반식(I)의 화합물을 수득하거나 ; (b) Y가 수소인 일반식(I)의 화합물을 산화시켜 Y가 하이드록시인 일반식(I)의 상응하는 화합물을 수득하거나 ; (c) Y가 하이드록시인 일반식(I)의 화합물을 아세토니트릴 및 메탄설폰산과 반응시켜 Y가 -NHCOCH₃인 일반식(I)의 상응하는 화합물을 수득하거나 ; (d) Y가 하이드록시인 일반식(I)의 화합물을 티오닐 클로라이드와 반응시켜 Y가 클로로인 일반식(I)의 상응하는 화합물을 수득하거나 ; (e) Y가 하이드록시인 일반식(I)의 화합물을 디메틸아미노설퍼 트리플루오라이드와 반응시켜 Y가 플루오로인 일반식(I)의 상응하는 화합물을 수득하거나 ; (f) Y가 클로로인 일반식(I)의 화합물을 메톡사이드 이온의 공급원과 반응시켜 Y가 메톡시인 일반식(I)의 상응하는 화합물을 수득하거나 ; (g) Y가 수소인 일반식(I)의 화합물을 강염기의 존재하에 메틸화제와 반응시켜 Y가 메틸인 일반식(I)의 상응하는 화합물을 수득함을 특징으로 하여 일반식(I)의 화합물을 제조하는 방법을 제공한다.

상기식에서 R₁, R₂및 R₃는 상기에서 정의한 바와 같다.

또한, 다음 실시예는 본 발명 화합물의 제조방법을 예시한다.

[실시예 1]

8-클로로-5-(4-클로로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘 메탄설폰산 25ml에 α, α-비스(4-클로로페닐)-5-피리미딘메탄올 4.9g이 용해되어 있는 용액을 질소 대기하에 18시간 동안 교반한다. 용액을 중탄산나트륨 용액 속에 부어넣고, 에틸 아세테이트로 추출한다. 유기 추출물을 포화 염화나트륨용액으로 세척하고, 황산마그네슘상에서 건조 시킨 다음, 진공속에서 농축시킨다. 에틸 아세테이트/이소 옥탄으로부터 재결정화하여 융점이 158 내지 163℃인 목적하는 표제 화합물을 1.95g 수득한다.

C₁₇H₁₀Cl₂N₂에 대한 분석

계산치 : C ; 65.20, H ; 3.22, N ; 8.94(%)

실측치 : C ; 65.03, H ; 3.29, N ; 8.73(%)

[실시예 2 내지 6]

실시예 1의 방법에 따라 상응하는 피리미딘메탄올로부터 다음 화합물을 제조한다.

2. 5-(4-클로로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘(수율 : 73%, 융점 : 140 내지 140.5℃).

C₁₇H₁₁ClN₂에 대한 분석

계산치 : C ; 73.25, H ; 3.98, N ; 10.05(%)

실측치 : C ; 73.29, H ; 3.72, N ; 9.87(%)

3. 8-클로로-5-페닐-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘(수율 : 0.3%, 융점 : 135.5 내지 137℃).

C₁₇H₁₁ClN₂에 대한 분석

계산치 : C ; 73.25, H ; 3.98, N ; 10.05(%)

실측치 : C ; 72.19, H ; 3.81, N ; 9.87(%)

4. 5-(4-클로로페닐)-8-(트리플루오로메틸)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘(수율 : 0.8%, 융점 : 146 내지 148℃).

C₁₇H₁₁F₄N₂에 대한 분석

계산치 : C ; 65.46, H ; 3.05, N ; 8.48(%)

실측치 : C ; 65.18, H ; 3.11, N ; 8.21(%)

5. 8-플루오로-5-[4-(트리플루오로메틸)페닐]-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘(수율 : 33%, 융점 : 169 내지 170℃).

C₁₈H₁₀F₄N₂에 대한 분석

계산치 : C ; 65.46, H ; 3.05, N ; 8.48(%)

실측치 : C ; 65.74, H ; 3.23, N ; 8.48(%)

6. 8-플루오로-5-(4-플루오로페닐)-5-H-인데노[1, 2-d]피리미딘(수율 : 77.7%, 융점 : 172 내지 174℃).

C₁₇H₁₀F₂N₂에 대한 분석

계산치 : C ; 72.85, H ; 3.60, N ; 10.00(%)

실측치 : C ; 73.04, H ; 3.87, N ; 9.96(%)

[실시예 7]

5-페닐-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘

α, α-디페닐-5-피리미딘메탄올 10g을 황산 50ML중에서 대략 18시간 동안 교반한다. 그 용액을 얼음에 부어넣고, 생성된 고체를 여과로 회수하여 목적하는 표제 화합물을 11g수득한다. 디에틸 에테르로부터 재결정화 하여 융점이 148 내지 150℃인 물질을 수득한다.

C₁₇H₁₂N₂에 대한 분석

계산치 : C ; 83.58, H ; 4.95, N ; 11.49(%)

실측치 : C ; 83.33, H ; 5.17, N ; 11.11(%)

[실시예 8 내지 17]

실시예 7의 방법에 따라 상응하는 피리미딘메탄올로 부터 다음 화합물을 제조한다.

8. 5-(2, 4-디클로로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘(수율 : 80%, 융점 : 107 내지 108℃).

9. 5-(3-플루오로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘(수율 : 21%, 융점 : 121℃).

양자 NMR 스펙트럼은 목적하는 생성물의 구조와 일치한다.

10. 5-(2, 5-디클로로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘(융점 : 145℃)

C₁₇H₁₀Cl₂N₂에 대한 분석

계산치 : C ; 65.20, H ; 3.22, N ; 8.94(%)

실측치 : C ; 65.31, H ; 3.22, N ; 9.07(%)

11. 5-(3, 4-디클로로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘(수율 : 42%, 융점 : 151℃).

C₁₇H₁₀Cl₂N₂에 대한 분석

계산치 : C ; 65.20, H ; 3.22, N ; 8.94(%)

실측치 : C ; 65.29, H ; 3.25, N ; 8.66(%)

12. 5-(4-클로로페닐)-7-메톡시-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘(수율 : 58%, 융점 : 164℃).

C₁₈H₁₃ClN₂O에 대한 분석

계산치 : C ; 70.02, H ; 4.24, N ; 9.07(%)

실측치 : C ; 69.85, H ; 4.50, N ; 8.84(%)

13. 5-(4-플루오로페닐)-7-메톡시-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘(수율 : 74%).

C₁₈H₁₃FN₂O에 대한 분석

계산치 : C ; 73.96, H ; 4.48, N ; 9.58(%)

실측치 : C ; 73.70, H ; 4.44, N ; 9.51(%)

14. 5-(2-플루오로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘(수율 : 67%, 융점 : 124 내지 125℃).

C₁₇H₁₁FN₂에 대한 분석

계산치 : C ; 77.83, H ; 4.23, N ; 10.68(%)

실측치 : C ; 77.95, H ; 4.32, N ; 10.82(%)

15. 5-(4-플루오로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘(수율 : 87%, 융점 : 128℃).

양자 NMR 스펙트럼은 목적하는 생성물의 구조와 일치한다.

16. 5-(3-클로로페닐)-8-메톡시-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘(수율 : 2.6%, 융점 : 147℃).

C₁₈H₁₃ClN₂O에 대한 분석

계산치 : C ; 70.02, H ; 4.24, N ; 9.07(%)

실측치 : C ; 69.74, H ; 3.95, N ; 8.85(%)

17. 7-플루오로-5-(2-플루오로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘(융점 : 143 내지 145℃).

C₁₇H₁₀F₂N₂에 대한 분석.

계산치 : C ; 72.85, H ; 3.60, N ; 10.00(%)

실측치 : C ; 72.64, H ; 3.90, N ; 9.75(%)

[실시예 18]

8-클로로-5-(4-클로로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘-5-올

아세톤 300ml에 8-클로로-5-(4-클로로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘 11.0g이 용해되어 있는 교반된 용액에 과망간산칼륨 6.32g을 가한다. 과망간산칼륨 6.32g을 2시간에 걸쳐 가하면서 혼합물을 질소 대기하에 교반한다. 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 여과한 다음, 여액을 진공에서 농축한다. 잔사를 에틸 아세테이트 및 포화 염화나트륨 용액의 혼합물중에 취한다. 층을 분리하고, 유기층을 물로 세척한 다음, 황산마그네슘상에서 건조시키고, 이어서 여과한 다음, 진공하에 농축시킨다. 잔사를 처음엔 에틸 아세테이트/이소옥탄으로부터 재결정화한 다음, 이어서 에틸 아세테이트로부터 재결정화하여 융점이 194 내지 195℃인 목적하는 표제 화합물을 3.06g수득한다.

C₁₇H₁₀Cl₂N₂O에 대한 분석

계산치 : C ; 62.03, H ; 3.06, N ; 8.51, Cl : 21.54(%)

실측치 : C ; 62.12, H ; 3.35, N ; 8.39, Cl : 21.58(%)

[실시예 19]

5-페닐-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘-5-올

용액의 표면 아래의 유리 프릿 첨가 튜브를 통해 산소 가스를 도입하여 디메틸설폭시이드 100ml중의 5-(2, 4-디클로로페닐)-5H-인데노[1, 2-d] 피리미딘 14.0g 및 분말 수산화나트륨 2g의 혼합물을 처리한다. 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 빙수에 부어넣은 다음, 염산응 사용하여 pH7로 조정한다. 생성된 고체를 여과하여 회수188℃인 목적하는 표제 화합물을 10g 수득한다.

C₁₇H₁₀Cl₂N₂O에 대한 분석

계산치 : C ; 62.03, H ; 3.06, N ; 8.51(%)

실측치 : C ; 61.73, H ; 3.23, N ; 8.24(%)

[실시예 20 내지 22]

실시예 19의 방법에 따라 상응하는 인데노피리미딘으로부터 다음 화합물을 제조한다.

20. 5-(4-클로로페닐-7-메톡시-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘-5-올(수율 : 78%, 융점 : 84℃).

C₁₈H₁₃ClN₂O₂에 대한 분석

계산치 : C ; 66.57, H ; 4.03, N ; 8.63(%)

실측치 : C ; 66.59, H ; 4.26, N ; 8.43(%)

21. 5-(4-플루오로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘-5-올(수율 : 84.5%, 융점 : 195℃).

C₁₇H₁₁FN₂O에 대한 분석

계산치 : C ; 73.37, H ; 3.98, N ; 10.07(%)

실측치 : C ; 73.14, H ; 4.05, N ; 9.96(%)

22. 8-클로로-5-(2-클로로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘-5-올(수율 : 17%, 용점 : 178 내지 179℃).

C₁₇H₁₀Cl₂N₂O에 대한 분석

계산치 : C ; 62.03, H ; 3.06, N ; 8.51(%)

실측치 : C ; 61.82, H ; 3.00, N ; 8.71(%)

[실시예 23]

N-[8-클로로-5-(4-클로로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘-5-일]아세트아미드

아세토니트릴 15ml 및 메탄설폰사 50ml중의 8-클로로-5-(4-클로로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘-5-올의 혼합물을 대략 18시간동안 교반한다. 반응 혼합물을 과량의 중탄산칼륨용액에 가하고, 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출한다. 유기층을 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고, 황산마그네슘상에서 건조시킨 다음, 진공속에서 농축시킨다. 아세토니트릴/물로부터 재결정화하여 융점이 238 내지 241℃인 목적하는 표제 화합물을 2.53g 수득한다. 두번 더 재결정화 하여 융점이 245 내지 248℃인 물질을 수득한다.

C₁₉H₁₃Cl₂N₃O에 대한 분석

계산치 : C ; 61.64, H ; 3.54, N ; 11.35(%)

실측치 : C ; 61 : 91, H ; 3.71, N ; 11.28(%)

[실시예 24 내지 25]

실시예 23의 방법에 따라 상응하는 인데노피리미딘 -5-올로부터 다음 화합물을 제조한다.

24. N-[5-(4-플루오로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘-5-일]아세트아미드(융점 : 244℃).

C₁₉H₁₄FN₃O에 대한 분석

계산치 : C ; 71.46, H ; 4.42, N ; 13.16(%)

실측치 : C ; 71.67, H ; 4.45, N ; 12.90(%)

25. N-[5-(2, 4-디클로로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘-5-일]아세트아미드(수율 : 62%, 융점 : 290℃).

C₁₉H₁₃Cl₂N₃O에 대한 분석

계산치 : C ; 61.64, H ; 3.54, N ; 11.35(%)

실측치 : C ; 61.82, H ; 3.55, N ; 11.36(%)

[실시예 26]

5-클로로-5-페닐-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘 티오닐 클로라이드 25ml와 벤젠 100ml중에서 5-페닐-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘-5-올 5g을 환류온도에서 교반한다. 증발시켜 용매를 제거하고, 잔사를 벤젠으로 처리한 다음, 여과한다. 디에틸 에테르로부터 고체를 결정화하여 융점이 119 내지 120℃인 목적하는 표제화합물을 3g수득한다.

C₁₇H₁₁ClN₂에 대한 분석

계산치 : C ; 73.25, H ; 3.98, N ; 10.05(%)

실측치 : C ; 73.11, H ; 4.12, N ; 9.84(%)

[실시예 27]

5, 8-디클로로-5-(4-클로로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘

실시예 26의 방법에 따라 상응하는 카비놀로부터 융점이 152 내지 153℃인 목적하는 표제 생성물을 제조한다.

C₁₇H₉Cl₃N₂에 대한 분석

계산치 : C ; 58.74, H ; 2.61, N ; 8.06(%)

실측치 : C ; 58.51, H ; 2.81, N ; 8.02(%)

[실시예 28]

8-클로로-5-(4-클로로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘

메틸렌 클로라이드 50ml 중의 8-클로로-5-(4-클로로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘-5-올 3.0g의 혼합물을 질소 대기하에 0℃에서 냉각시킨다. 디에틸아미노설퍼 트리플루오로라이드 대략 2.7g 가한 다음, 반응물을 밤새도록 교반한다. 혼합물을 중탄산칼륨의 냉각 용액에 부어넣고, 에틸 아세테이트로 추출한다. 유기 추출물을 중탄산나트륨 용액 및 염화나트륨 용액으로 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시킨 다음, 진공속에서 농축시킨다. 에틸 아세테이트/이소옥탄으로 부터 결정화하여 융점이 236 내지 237℃인 목적하는 표제 화합물을 2.29g 수득한다.

C₁₉H₁₃Cl₂FN₂에 대한 분석

계산치 : C ; 61.65, H ; 2.74, N ; 8.46(%)

실측치 : C ; 61.88, H ; 2.97, N ; 8.58(%)

[실시예 29]

8-클로로-5-메톡시-5-(4-클로로로페닐)-5H-인데노[1, 2-d-피리미딘-5-올

8-클로로-5-(4-클로로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘-5-올 3g, 티오닐 클로라이드 2.17g 및 톨루엔 1.5ml의 혼합물을 2시간동안 환류시킨다. TLC한 결과, 출발물질이 Rf값이 동일한 5, 8-디클로로-5-(4-클로로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘으로 전환된 것을 나타낸다(실시예 27). 잔여 티오닐 클로라이드와 톨루엔을 혼합물로 부터 증발시킨 다음, 메탄올 25ml중의 나트륨 메톡사이드 0.985g을 가한다. 이 혼합물을 20분 동안 환류시킨다. TLC한 결과, Rf값이 실시예 27의 화합물과 동일한 스포트(sport)와 더 낮은 스포트가 나타난다. 그다음, 반응 혼합물을 얼음에 부어넣고, 메틸 아세테이트로 추출한 다음, 염수로 세척하고, 이어서 황산마그네슘으로 건조시키고, 증발시켜 황색 오일을 수득한다. 구배 용출이 2.5L톨루엔→톨루엔 중의 2.5L 10% EtOAc인 하나의 표준상 컬럼을 사용하여 프레프 500A 크로마토그라피로 염화물 중간체와 목적하는 생성물을 분리한다. 분획 200ml를 수거한다. 분획 14 내지 16을 증발시켜 백색 결정을 195mg수득한 다음, 이 생성물을 EtOAc-이소옥탄으로부터 재결정화하여 IR 및 질량 스펙트럼이 실시예 27의 화합물과 동일한 물질을 90mg 수득한다. 분획 18 내지 21은 표제 화합물을 황색 오일로서 생성한다(1.55g, 수율 : 49.6%).

[실시예 30]

8-클로로-5-메틸-5-(4-클로로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘

8-클로로-5-(4-클로로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘 3.0g, 무수 DMF 25ml 및 메틸 요오다이드 2.72g에 광유중의 수소화나트륨 60% 현탁액 0.421g을 질소 대기하에 실온에서 가한다. 청자색의 빛깔이 즉시 나타난다. 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반한다. TLC(9:1톨루엔 : EtOAc ; 2전개)한 결과, 출발물질의 손실, 약간 더 높은 Rf스포트의 형성, 및 원래 스포트 근처의 다른 스포트를 나타낸다. 반응 혼합물을 얼음속에 부어넣고, 에틸 아세테이트로 추출한다. 에틸 아세테이트 층을 염수로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시킨 다음 증발시켜 갈색 오일을 수득한다. 이를 톨루엔중의 3L 10% EtOAc→톨루엔중의 3L 30% EtOAc의 구배 용출을 이용하여 프레프 500A 크로마토그라피로 정제한다. 분획 200ml를 수거한다. 분획번호 8 내지 11을 증발시켜 24%의 수율로 표제 화합물을 0.76g 수득한다. EtOAc-이소옥탄으로 부터 결정을 수득한다[0.42g(13.4%), 융점 : 147 내지 148℃].

본 발명의 화합물은 포유동물의 효소 아로마타제를 억제하는 특성이 있으므로 유방암과 같은 에스트로젠-의존 질병을 예방하고 치료학적으로 처리하는데 유용하다. 또한, 본 발명의 화합물은 간장의 마이크로좀 효소(예 : 사이토크롬 P-450)의 증가를 보다 적게 유발시키는 것으로 밝혀졌다.

아로마타제를 억제하는 능력은 분리된 래트 난소 마이크로좀 방법[참조 : Brodie et al.in J. Steroid Biochem., 7,787(1976)]의 변형을 이용하여 설명한다. 이 시험 시스템에 있어서, 난소 마이크로좀은 임신한 암말 세럼 고나도트로핀으로 처리된 래트로부터 수득한다. 0.1μM 4-안드로스텐-3.17-디온, 100,000dpm 1.2[3H]-안드로스텐디오, 마이크로좀 및 NADPH 발생 시스템을 함유하는 반응 바이알에 시험 화합물을 가한다. 시험할 억제제의 농도범위는 5 내지 10000nM이다. 이 검정에 있어서, 안드로스텐디온을 방향족화하여 [3H]-H₂O를 생성하고, 샘플을 클로로포름으로 추출하고 수성 상을 목탄으로 처리하여 유리 스테로이드를 제거함으로써 이를 분리한다. 샘플을 엑체 신틸레이션 분광기로 계산하고, 결과를 억제제 없이 배양한 샘플과 비교하여 억제 %를 측정한다. 역가는 기질 (안드로스텐디온)의 농도가 0.1μM 일때 효소 활성의 50%억제(EC₅₀)를 생성하는데 필요한 억제제의 농도(nM)를기준으로 측정한다. 일반식(I)의 특정화합물의 EC₅₀'S를 표 1에 요약한다.

[표 1]

^*기질 농도가 0.1μM일때 아로마타제 활성의 50% 억제를 달성하는데 필요한 화합물 농도(nM)효소 아로마타제를 억제하는 능력 때문에, 본 발명의 화합물은 포유동물의 에스트로젠 합성을 억제할 수 있으므로 에스트로겐-의존 질병(예 : 유방암)의 치료에 유용한 화합물이다. 이러한 시험관내 활성은 다음 시험 시스템에서 설명할 수 있다.

래트에 있어서의 에스트로젠 합성 억제

미숙한 암컷 위스타 래트(45 내지 55g)를 각각 2 내지 8마리의 대조군 및 시험그룹으로 분류한다. 시험 화합물을 옥수수 오일과 함께 7일 동안 매일 섭식 투여한다. 대조군 동물은 시험 화합물이 없는 옥수수 오일만 투여한다. 시험 개시 4일째에 모든 동물을 시험 화합물로 처리하고, 대조군 동물의 반(1/2)에게 옥수수 오일중의 테스토스테론 프로피오네이트 1.0mg을 피하주사한다. 나머지 대조군 동물들은 단지 같은 양의 옥수수 오일을 투여한다. 테스토스테론 프로피오네이트로 처리한 래트에게 염수-에탄올(3 : 1) 50μl중의 [3H]-테스토스테론 100μCi를 시험개시 7일째에 피하주사한다.

2시간 후, 동물을 참수한다. 자궁을 외부의 연결 조직으로부터 잘라내어 분리하고 계량한다. 옥수수 오일로 처리한 동물은 자궁 중량이 적고 비자극성 또는 음성 대조군을 나타낸다. 테스토스테론 프로피오네이트로 처리한 대조군 동물에 있어서, 방향족화에 의해 생성된 에스트로젠을 자궁을 자극하여 중량을 증가시킨다. 방향족화를 억제하는 화합물의 자궁중량은 테스토스테론으로 처리한 대조군으로 자궁중량보다 더 적다.

[3H]-테스토스테론으로 처리한 래트의 난소를 절개하고, 외부조직을 세척한 다음, pH 6.5에서 3.0mMMg Cl₂·6H₂O·320mM슈크로오즈 및 0.25% 트리톤 X-100(폴리에틸렌 글리콜 p-이소옥틸 펜틸 에테르, Rohm and Hass)을 함유하는 1.0mM 인산칼륨 완충액 2.50ml 중에서 균질화한다. 난소 스테로이드를 표지되지 않은 각각의 에스트라디올, 에스트리올 및 에스트론 25 내지 100mcg 및 [¹⁴C]-에스트라디올 약 1000dpm을 가한 9 : 1 톨루엔/에탄올 1.5ml로 추출한다. 샘플을 500xg에서 10분 동안 회전원심 분리시키고, 유기상을 원추형 바이알에 옮긴다. 잔사에 대하여 동일한 방법으로 추가로 2회 추출한다. 합한 유기 추출물을 증발시킨 다음, 박층 크로마트그라피한다.

에탄올 5ml를 잔여 수성 상에 가하여 난소 단백질을 침전시킨다. 4℃에서 밤새도록 배양한 후, 샘플을 1500xg에서 10분 동안 원심분리한다. 상등액을 버리고 펠렛을 0.3N 수산화칼륨에 용해시킨다. 단백질을 브래드포트(Bradford)의 방법[참조 : Analytical Biochemistry, 72,248(1976)]에 따라 측정한다.

상기한 각각의 추출물로부터의 유기 잔사를 9 : 1 디클로로메탄/메탄올에 재용해신킨다. 형광지시약을 함유하는 실리카겔 박층 크로마토그래피 플레이트에 각 샘플용액을 분리한다. 플레이트를 플레이트 탐의 3cm중에서 160 : 38 : 1.5 : 0.5디클로로메탄/에틸 아세테이트/메탄올/아세트산으로 1차 전개한다. 공기중에서 건조시킨 후, 플레이트를 180 : 18 : 1디클로로메단/메탄올/수산화암모늄으로 2차 전개한다. 플레이트를 공기중에서 건조시키고, 254mm UV광하에서 관찰한다.

가시 스포트를 표시하고 플레이트를 라이트(Wright)의 방법[참조 : J.chromatography, 59, 220(1971)]에 따라 프리뮬린(4 : 1아세톤/물의 0.001%)으로 분무하고, 365mm UV광하에서 부가 스테로이드를 확인하다. 진공선에 부착시킨, 글래스 울(glass wool)로 틀어막은 파스퇴르 피펫을 사용하여 플레이트로부터 스포트를 긁어모은다. 디크로로메탄 0.2ml를 첨가한 다음, 메탄올 2.0ml로 각각 2회 세척하여 신틸레이션 바이알속으로 스테로이드를 직접 용출시킨다. 유기용매를 증발시키고, 신틸레이션 유동액(Beckman ReadySolv-NA)10.0ml를 바이알에 가한다. 샘플을 액체 신틸레이션 분광기로 분석하고 [¹⁴C]-스테로이드의 회수를 기준으로 보정한다.

표2에서, 자궁의 중량값을 계산치 %=100(DT-UC)/(SC-UC)에 따라 각각 약물로 처리한 것의 중량(DT), 비자극 옥수수 오일 억제군의 중량(UC), 및 자극 옥수수 오일 억제군(SC)으로 표시한다. 에스트로젠에 대한 값은 테스토스테론으로 처리한 억제군 동물에 대하여 측정한 %값으로 기록한다.

[표2]

^*mg/kg×7일

^**%=100(DT-UC)/(SC-UC) : 명세서 참조

^***테스토스테론으로 처리한 대조군의 %

+대조군으로부터의 유의차 p＜0.05

DMBA 유도된 유방 종양 억제

유방 종양은 50 내지 60일된 암컷 스프라그-다울리종 래트에게 7,12-디메틴벤즈-[a]안트라센(DMBA)20mg을 인공적으로 섭식투여함으로써 생성된다. DMBA 투여후 약 6주가 지나면, 주간격으로 유선의 종양 출현을 촉진한다. 종양이 한번 또는 그 이상 나타나서 측정할 수 있을 때, 그 동물을 시험용으로 선택한다. 평균적으로 한 그룹의 종양이 다른 그룹의 종양보다 현저히 큰 래드로 시작하지 않도록 처리군과 대조군에서 종양의 각종 크기를 균일하게 분산시킨다. 각 대조군 및 시험그룹은 5 내지 8마리의 동물을 포함한다. 각 시험 화합물을 옥수수 오일과 함께 매회 1회씩 섭식 투여한다. 매번 실험은 종양이 대조군 래트의 한 그룹을 포함하며, 인공적으로 옥수수 오일 비히클을 섭식투여 한다. 실험 시작시에 종양을 측정하며, 일반적으로 종양의 면적은 대략 15 내지 100mm²이다. 각 종양의 면적은 가장 짧고 가장 긴 종양의 직경의 곱하여 산출한다. 동물의 치료 및 측정을 4 내지 6주 동안 계속하고 매번 종양의 최종 면적을 측정한다. 개개 용량 수준에 각각의 화합물(및 대조군)에 대하여 평균 종양면적의 변화를 측정한다. 듀네트(Dunnett)의 t-시험을 이용하여 평균 변화의 중요성을 분석한다. 시험결과는 표3에 기재한다.

[표3]

항-종양활성

^*매일 섭식투여 mg/kg

+대조군의 유의차, P＜0.05

본 발명의 효과를 보다 충분히 설명하기 위하여, 다음의 제형 실시예를 제공한다. 다음 실시예는 단지 예시적인 것이며, 본 발명의 영역을 한정하고자 하는 것은 아니다.

[실시예 31]

다음의 성분들을 사용하여 경질 젤라틴 캡슐을 제조한다 :

캡슐당

8-클로로-5-(4-클로로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘 250mg

건조 전분 200mg

스테아르산 마그네슘 10mg

총 460mg

상기의 성분들을 혼합하여 460mg의 경질 젤라틴 캡슐에 채운다.

[실시예 32]

약제 20mg을 각각 함유하는 캡슐을 다음과 같이 제조한다 :

캡슐당

8-플푸오로-5-[4-(트리플루오로메틸)페틸]-5H-인데노[1,2-d]피리미딘

20mg

전분 89mg

미세결정성 셀룰로오즈 89mg

스테아르산 마그네슘 2mg

총 200mg

활성 성분, 셀룰로오즈, 전분 및 스테아르산 마그네슘을 섞고, 45호 메쉬 U.S.체로 체질한 다음 ,200mg의 경질 젤라틴 캡슐에 채운다.

[실시예 33]

활성 성분을 각각 100mg 함유하는 캡슐을 다음과 같이 제조한다 :

캡슐당

5-페닐-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘 100mg

폴리옥시에틸렌소르비탄 50mg

모노올레이트

옥수수 분말 250mg

상기의 성분을 완전히 혼합한 다음, 빈 젤라틴 캡슐속에 채운다.

[실시예 34]

활성성분 10mg을 각각 함유하는 정제를 다음과 같이 제조한다 :

캡슐당

8-클로로-5-(4-클로로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘-5-올 10mg

전분 45mg

미세결정성 셀룰로오즈 35mg

폴리비닐피롤리돈 4mg

(수중 10% 용액)

나트륨 카복시메틸 전분 4.5mg

스테아르산 마그네슘 0.5mg

활석 1mg

총 100mg

활성성분, 전분 및 셀룰로오즈를 45호 메쉬 U.S. 체로 체질한 다음, 완전히 혼합한다. 생성된 분말과 폴리 비닐피롤리돈 용액을 혼합한 다음 14호 메쉬 U.S. 체로 체질한다. 이렇게 제조한 과립을 50 내지 60℃에서 건조시킨 다음, 18호 메쉬 U.S.체로 체질한다. 나트륨 카복시메틸 전분, 스테아르산 마크네슘 및 활석을 60호 메쉬 U.S.체로 체질한 다음, 과립에 가하고, 이어서 혼합하고, 정제기에서 압축하여 각각 100mg의 정제를 수득한다.

[실시예 35]

하기 성분을 사용하여 정제 제형을 제조한다 :

정제당

N-[5-(4-플루오로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘-5-일]아세트아미드 250mg

미세결정성 셀룰로오즈 400mg

훈증 이산화규소 10mg

스테아르산 5mg

총 665mg

성분들은 섞은 다음, 압축시켜 665mg의 정제를 제조한다.

[실시예 36]

활성성분 25mg을 각각 함유하는 좌제를 다음과 같이 제조한다 :

좌약당

5,8-디플루오르-5-(2-클로로-4-플루오로페닐)-5H-인데노[1,2-d]피리미딘 25mg

포화 지방산 글리세라이드 2,000mg

활성성분을 60호 메쉬 U.S. 체로

체질하고, 포화 지방산 글리세라이드중에서 현탁시킨 다음, 최소의 필요열을 사용하여 용융시킨다.

혼합물을 공칭 2g 용량의 좌제 몰드에 부어넣은 다음, 냉각시킨다.

[실시예 37]

5ml 당 각각 5mg의 약제를 함유하는 현탁액을 다음과 같이 제조한다 :

현탁액 5ml당

5-(4-트리플루오로메틸페닐)-8-(트리플루오로메틸)-5H-인데노[1,2d]피리미딘 5 mg

나트륨 카복시메틸 셀룰로오즈 50mg

시럽 1.25ml

벤조산 용액 0.10ml

향미제 q.v.

색소 q.v.

정제수 5ml

약제를 45호 메쉬 U.S.체로 체질한 다음, 나트륨 카복시메틸셀룰로오즈 및 시럽과 혼합하여 부드러운 반죽을 만든다. 교반하면서 벤조산 용액, 향미제 및 색소를 약간의 물로 희석시키고, 가한다. 충분한 물을 더하여 원하는 부피를 생성한다.

[실시에 38]

다음 성분을 함유하는 에어로졸 용액을 제조한다.

중량%

5-(4-클로로페닐)-8-메톡시-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘-5-올 0.25

에탄올 29.75

프로펠란트 22

(클로로디플루오로메탄) 70

활성 화합물을 에탄올과 혼합하고, 혼합물을 프로펠란트 22의 일부에 가한 다음, -30℃로 냉각시키고, 이어서 충진장치로 옮긴다. 이때 원하는 양을 스텐레스 스틸 콘테이너에 공급한 다음, 잔여량의 프로펠란트로 더 희석시킨다. 이어서 밸브 단위를 콘테이너에 고정시킨다.

Claims

일반식 (I)의 화합물 :

상기식에서, Y는 수소, 메틸, 하이드록시, 메톡시, 클로로, 플루오로, 또는 -NHCOCH₃이고 : R₁은 수소, 클로로, 플루오르, 메톡시, 또는 트리플루오로메틸이며 : R₂및 R₃은 각각 독립적으로 수소, 클로로, 플루오로, 또는 트리플루오로메틸이다.
제1항에 있어서, Y가 수소 또는 하이드록시인 화합물.
제2항에 있어서, R₂및 R₃중의 하나가 4'-위치에 존재하는 클로로 또는 플루오로인 화합물.
제3항에 있어서, R₁이 8-위치에 존재하는 클로로 또는 플루오로인 화합물.
제4항에 있어서, 8-클로로-5-(4-클로로페닐)-5H-인데노[1, 2-d]피리미딘인 화합물.
제1항 내지 제6항중의 어느 하나에서 청구된 화합물과 이에 대해 적합한 약제학적 담체, 희석제 또는 부형제와의 배합물로 이루어짐을 특징으로 하는 약제학적 제형.
a) 일반식(II)의
,
-디페닐-5-피리미딘메탄올을 탈수시켜 Y가 수소인 일반식(I)의 화합물을 수득하거니 ; b) Y가 수소인 일반식(I)의 화합물을 산화시켜 Y가 하이드록시인 일반식(I)의 상응하는 화합물을 수득하거나 ; c) Y가 하이드록시인 일반식(I)의 화합물을 아세토니트릴 및 메탄설폰산과 반응시켜 Y가 -NHCOCH₃인 일반식 (I)의 상응하는 화합물을 수득하거나 ; d)Y가 하이드록시인 일반식(I)의 화합물을 티오닐 클로라이드와 반응시켜 Y가 크로로인 일반식(I)의 상응하는 화합물을 수득하거나 ; e) Y가 하이드록시인 일반식(I)의 화합물을 디에틸마이노설퍼 트리플루오라이드와 반응시켜 Y가 플루오로인 일반식(I)의 상응하는 화합물을 수득하거나 ; f)Y가 클로로인 일반식(I)의 화합물을 메톡사이드 이온의 공급원과 반응시켜 Y가 메톡시인 일반식(I)의 상응하는 화합물을 수득하거나 ; g)Y가 수소인 일반식(I)의 화합물을 강염기의 존재하에서 메틸화제와 반응시켜 Y가 메틸인 일반식(I)의 상응하는 화합물을 수득함을 특징으로 하여, 일반식(I)의 화합물을 제조하는 방법.

상기식에서, Y는 수소, 메틸, 하이드록시, 메톡시, 클로로, 플루오로, 또는 -NHCOCH₃이고 ; R₁은 수소, 클로로, 플루오로, 메톡시, 또는 트리플루오로 메틸이며 ; R₂및 R₃는 각각 독립적으로 수소, 클로로, 플루오로, 또는 트리플루오로메틸이다.
제7항의 방법으로 제조된 일반식(I)의 화합물.
포유동물의 에스트로젠-의존성 질병을 치료하는 약제로서 사용하기 위한 제1항 내지 제6항중의 어느한 항에 따르는 화합물.